分離法
本発明は、目的放射性標識化合物を不純物から分離する方法、かかる方法を実施する装置及びかかる装置で使用する着脱式カセットに関する。本発明の分離法を含む方法で得られた目的放射性標識化合物を使用する方法も提供される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、目的放射性標識化合物を不純物から分離する方法、かかる方法を実施するための装置及びかかる装置で使用するための着脱式カセットに関する。本発明の分離法を含む方法で得られた目的放射性標識化合物の使用する方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
放射性標識化合物は医用画像に用途を有しており、18Ｆ放射性標識化合物の場合は陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）に用途を有する。
【０００３】
現在特に関心のもたれている放射性標識化合物は放射性標識チミジンであり、特に腫瘍学の分野でのＰＥＴイメージングのための３′−デオキシ−３′−［18Ｆ］フルオロチミジン（18ＦＬＴ）である。
【０００４】
18ＦＬＴは、スキーム１に示す通り、５′−Ｏ−（４′，４′−ジメトキシトリチル）チミジンから、18Ｆを用いた３′位での求核置換（立体化学の反転を伴う）によって合成することができる。
【０００５】
【化１】
このフッ素化の際に、ＯＨ-と18Ｆ-との競争反応のため脱離生成物ｄ４Ｔが高い収率で生成することが多く、この反応における主要不純物である。ｄ４Ｔは18ＦＬＴよりも格段に高い速度で形成される傾向があり、１００〜１００００：１のｄ４Ｔ：18ＦＬＴ比で存在することがある。18ＦＬＴとｄ４Ｔとの分離は厄介な問題である。
【０００６】
２種類の化合物の高速液体クロマトグラフィー分離は様々な固定相を用いて実施できるが、ＨＰＬＣは費用がかかり、複雑で、病院のような臨床環境では好ましい精製法とはいえない。
【０００７】
ＨＰＬＣ法は時間がかかることもあり、半減期の短い放射性核種（18Ｆの半減期は約１１０分である。）を使用する際には特に問題となる。もう一つの重大な問題は、ＨＰＬＣが、放射性標識化合物の調製と精製を簡単にする市販の合成モジュールとの使用に役立たないことである。
【０００８】
国際公開第２００５／０２５５１９号には、18ＦＬＴの自動合成方法及び自動合成装置が記載されており、分離はＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｃ−１８固相抽出（ＳＰＥ；solid phase extraction）カラムを用いて実施される。
【０００９】
国際公開第２００６／１３３７３２号にも、［18Ｆ］−ＦＬＴの製造方法が記載されており、分離はＯａｓｉｓ（商標）ＨＬＢ ＳＰＥカラムを用いて実施される。
【００１０】
残念なことに、［18Ｆ］−ＦＬＴの製造に用いるため従前報告されたＳＰＥ法は、十分な分離をもたらさないので、臨床用途には必ずしも適していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】国際公開第２００５／０２５５１９号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００６／１３３７３２号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、比較的簡単で、ＨＰＬＣよりも費用がかからず、分離性に優れ、特に臨床環境での使用に適した分離方法を提供することによって、上述の問題に対処することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
そこで、本発明は、第１の態様では、目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離する方法であって、
目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを含む混合物を準備する段階、
高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムに混合物を流して、目的放射性標識化合物を吸着させ、１種以上の不純物を吸着させる段階、
第１の溶出液を用いて１種以上の不純物を溶出させる段階、及び
第２の溶出液を用いて目的放射性標識化合物を溶出させる段階
を含む方法を提供する。
【００１４】
「不純物」という用語は、通常の意味、つまり、化学的又は放射化学的プロセスに由来する不純物と解される。
【００１５】
本発明の第１の態様に係る方法は、１種以上の不純物から、目的放射性標識化合物を、比較的簡単、経済的、堅実（ロバスト）かつ迅速に分離できるという利点がある。また、目的放射性標識化合物と不純物が固相抽出カラムに異なる親和性で吸着されるので、良好な分離が可能であるという利点もある。第１及び第２の溶出液を用いて不純物及び目的物を別々に溶出するので、分離プロセスのきめ細かな制御が可能となる。
【００１６】
好ましくは、目的放射性標識化合物は放射性標識チミジン又はチミジン誘導体である。さらに好ましくは、目的放射性標識化合物は放射性標識３′−デオキシ−３′−チミジン又はその誘導体である。
【００１７】
放射性標識チミジン又はその誘導体は、ＰＥＴ及び単光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）に有用な放射性標識化合物であり、腫瘍学を始めとする様々な領域に用途を有するので、好適である。
【００１８】
目的放射性標識化合物は、様々な放射性核種で放射性標識することができる。本発明で特に適しているのは、ＳＰＥＣＴイメージングに適したγ線放出型放射性ハロゲン又はＰＥＴイメージングに適した陽電子放射性核種である。γ線放出型放射性ハロゲンの例として、123Ｉ、131Ｉ及び77Ｂｒが挙げられるが、123Ｉが好ましい。ＰＥＴイメージングに適した放射性核種としては、11Ｃ、18Ｆ、75Ｂｒ、76Ｂｒ及び124Ｉが挙げられるが、11Ｃ及び18Ｆが好ましく、18Ｆが最も好ましい。かかる放射性標識化合物を得るための各種方法は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｗｉｌｅｙ；２００３：Ｗｅｌｃｈ ａｎｄ Ｒｅｄｖａｎｌｙ，Ｅｄｓ．）に記載されている。
【００１９】
本発明の好ましい目的放射性標識化合物は、18Ｆ−標識ＦＬＴ（３′−デオキシ−３′−［18Ｆ］フルオロチミジン）である。18Ｆ−標識ＦＬＴは、Ｈａｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ（１９８６ Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．；２７；２３５）に記載された方法で得ることができる。
【００２０】
ＦＬＴの製造プロセスでは、副反応のため不純物が生じることがある。不純物としては、特にチミジン又はチミジン誘導体がある。特に問題とされる不純物は、２′，３′−ジデヒドロ−３′−デオキシチミジンである。
【００２１】
本発明の第１の態様に係る方法は、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムを用いて実施される。表面改質吸着剤は、吸着剤粒子の表面（通常は細孔の内部表面を含む）に化学官能基を導入することによって改質された担体（シリカ又はポリマーなど）を含む吸着剤である。吸着剤の表面改質には、担体の種類にもある程度依存するが、多種多様な化学基を使用し得る。高分子表面改質吸着剤は、担体吸着剤を性質（特に表面積、空隙率及び粒径）の種々異なる数多くのポリマーから選択することができて、ある吸着剤で様々な選択性（例えば、疎水性、親水性、π−π相互作用）と広いｐＨ域（１〜１４）での優れた安定性をもたらすので、特に有利である。
【００２２】
高分子表面改質吸着剤の場合、高分子表面改質吸着剤は好ましくは表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）からなる。これが好ましいのは、ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）は広範な粒径、表面積及び空隙率で入手でき、各種化学基の導入によって比較的簡単に表面改質できるからである。ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）の表面改質法の一つは、国際公開第０３／０６４４７８Ａに記載されており、ベースポリマー表面の残存遊離ビニル基のラジカル開始表面グラフト改質によるものである。
【００２３】
好ましい高分子表面改質吸着剤は、ピロリドン又はピペリドン誘導体、さらに好ましくは２−ピロリドン又は２−ピペリドン誘導体で表面改質される。これが好ましいのは、かかる表面改質ポリマー吸着剤は、２種類の溶出液を用いた目的放射性標識化合物と不純物との優れた分離（特に放射性標識チミジン又はチミジン誘導体に対して）をもたらすからである。
【００２４】
固相抽出カラムは、一般に、分離すべき混合物の体積を考慮に入れた適当な大きさのものであればよい。ただし、臨床環境では、固相抽出カラムは一般に１〜１０ｍｌ（ｃｍ3）、通常２〜８ｃｍ3又は３〜６ｃｍ3の有効容積を有する。
【００２５】
固相抽出カラムには、通常、目的放射性標識化合物と不純物との良好な分離が確保される十分な高分子表面改質吸着剤が充填される。一般に、固相抽出カラムには、固相抽出カラムの有効容積を基準にして、１０ｍｇ／ｃｍ3〜２００ｍｇ／ｃｍ3の表面改質吸着剤が充填される。好ましくは、固相抽出カラムには、２０ｍｇ／ｃｍ3〜１４５ｍｇ／ｃｍ3、さらに好ましくは５０〜１００ｍｇ／ｃｍ3、最も好ましくは５０〜約９０ｍｇ／ｃｍ3が充填される。固相抽出カラムの典型的な好ましい充填量は、３ｃｍ3のカラムに対して６０ｍｇ（２０ｍｇ／ｃｍ3に相当）から６ｃｍ3のカラムに対して８５０ｍｇ（約１４２ｍｇ／ｃｍ3に相当）であろう。
【００２６】
吸着剤量は、カラムにロードされる試料の量にも影響を与える。この量は一般に吸着剤量の５〜１０％である。
【００２７】
好ましくは、第１及び／又は第２の溶出液はアセトニトリル、アルカノール及び水から選択される１種以上の溶媒を含む。好ましいアルカノールはエタノールを含む。
【００２８】
一般に、第１及び第２の溶出液は各々、アセトニトリル又はエタノールのいずれかと水とを含むが、２つの系における水中のアセトニトリル又はエタノールの割合が異なる。これは、不純物又は目的放射性標識化合物のどちらを溶出するかを水中のアセトニトリル又はエタノールの割合の変更に応じて左右できるので、不純物又は目的放射性標識化合物のいずれかを溶出させるためのカラムへの溶出液の供給が簡単になるという利点がある。また、水とアセトニトリル又はエタノールとの比の微調整によって、分離プロセスの細かな制御が可能になるという利点もある。通例、不純物ではなく目的化合物を溶出させるには、アセトニトリル又はエタノールの割合を高くする必要がある。水中のアセトニトリル又はエタノールの典型的な割合は、（不純物の溶出のための）３〜５％から（目的化合物の溶出のための）１２〜２０％までである。
【００２９】
エタノールは、得られた溶液を患者に直接注射できるので（７％ｖ／ｖ以下に希釈されている場合）、好ましい溶媒である。注射前の追加の溶媒交換段階は必要ない。
【００３０】
本発明の利点の１つは、固相抽出カラムによる分離を達成するのに、比較的低い圧力を使用できることである。典型的な圧力は大気圧付近であるが、必要に応じて、高い圧力（例えば約８００ｋＰａ（８ｂａｒ）以下）を使用してもよい。
【００３１】
一般に、本発明の第１態様では、溶出は、第１又は第２の溶出液を０．５〜２０ｍｌ／分の流速で固相抽出カラムに流すことを含む。さらに好ましくは０．５〜１５ｍｌ／分、１．０〜５．０ｍｌ／分、最も好ましくは１．０〜３．０ｍｌ／分の流速を使用できる。流速が低い方が概して良好な分離をもたらす。
【００３２】
固相抽出カラムを本発明の方法に使用する前に、「コンディショニング」する必要がある。これは単に有機溶媒での初期洗浄を要し、有機溶媒は通常はプロセスの残りの部分で使用される溶媒である。
【００３３】
本発明の方法は、固相抽出カラムの吸着剤を乾燥させる乾燥段階（おそらくは分離すべき試料をカラムにロードした後で溶出する前の乾燥段階）を始めとする数多くの追加段階を含んでいてもよい。分離プロセスに追加してもよいその他の段階は、固相抽出カラムを洗浄するためのフラッシュ段階又は洗浄段階であり、一般に分離手順の適当な段階で実施し得る。
【００３４】
本発明の分離法は、不純物からの目的放射性標識化合物の効率的な分離ができるので、非常に有益である。典型的には、第１の溶出液を用いた不純物の溶出で得られる１以上の画分は、合計で目的放射性標識化合物の１０％未満、さらに好ましくは目的放射性標識化合物の５％以下、最も好ましくは目的放射性標識化合物の２％以下しか含まない。
【００３５】
さらに、本方法は、一般に、第２の溶出液を用いた目的放射性標識化合物の溶出で、目的化合物の純度が９０％を超える１以上の画分が得られるという利点がある。さらに好ましくは、第２の溶出液は、目的化合物の純度が９４、９５又は９６％を超える１以上の画分をもたらす。
【００３６】
第２の態様では、本発明は、本発明の第１態様の分離方法を含む目的放射性標識化合物の合成方法を提供する。
【００３７】
目的放射性標識化合物並びに分離方法の好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態は、本発明の第１態様で記載した通りである。
【００３８】
特に好ましい実施形態では、目的放射性標識化合物の合成方法は自動化される。例えば、米国特許第６１７２２０７号には、複数のストップコックマニホールドと使い捨て滅菌シリンジを用いて［18Ｆ］−ＦＤＧを合成する方法が記載されている。これはＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社から市販のＴＲＡＣＥＲｌａｂ（登録商標）ＭＸFDG装置に相当する。
【００３９】
本発明は、第３の態様では、目的放射性標識化合物の自動合成装置であって、合成が、目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離することを含んでおり、当該装置が、
目的放射性標識化合物を吸着させるとともに１種以上の不純物を吸着させるための固相抽出カラムであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムと、
不純物を溶出させるために、第１の溶出液をカラムに供給する手段と、
目的放射性標識化合物を溶出させるために、第２の溶出液をカラムに供給する手段と
を備える装置を提供する。
【００４０】
本発明の第３の態様の特徴は、本発明の第１の態様に関する特徴と概ね同じ（適宜修正して）である。
【００４１】
本発明の第４の態様では、本発明は、目的放射性標識化合物の自動合成装置で使用する着脱式カセットであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムを備えた着脱式カセットを提供する。かかる着脱式カセットは、適当に適合化した自動合成装置（ＴＲＡＣＥＲｌａｂ（登録商標）など）に装着できるように設計される。着脱式カセットは、分離の費用効率、能率及び速度を向上させるという多大な利点をもたらす。また、セットアップ時間が最小限に短縮され、セットアップも簡単になるが、この二点はいずれも、特に臨床環境（病院など）で極めて重要である。着脱式カセットは、概して、本発明の前述の態様に関して記載した特徴を適宜修正して有している。
【００４２】
着脱式カセットは、固相抽出カラムとは別に、前駆体化合物を収容する容器、不要な放射性イオンを除去するためのカラム、及び反応混合物を蒸発させて必要に応じて生成物を製剤化できるように接続されている適当な容器を含んでいてもよい。合成に必要な試薬、溶媒その他の消耗品も、放射能濃度、体積、送達時間などに関する顧客の必要性を満足するように自動合成器を運転することのできるソフトウェアが入ったコンパクトディスクと一緒に梱包してもよい。簡便には、運転間の汚染の危険性を最小限とし、無菌・品質を保証するため、着脱式カセットの構成要素はすべて使い捨てである。
【００４３】
目的放射性標識化合物の自動合成のための着脱式カセットは、以下の（ｉ）〜（ｖ）を備えていてもよい。
（ｉ）前駆体化合物を含む容器、
（ｉｉ）所望放射性核種の原料を含む容器を溶出する手段、
（ｉｉｉ）過剰の放射性核種を除去するためのイオン交換カートリッジ、
（ｉｖ）得られる目的放射性標識化合物を脱保護するためのカートリッジ、及び
（ｖ）目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離するためのカートリッジであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムを含むカートリッジ。
【００４４】
本発明の第５の態様では、本発明は、以下の段階（ｉ）〜（ｉｖ）を含む画像形成方法を提供する。
（ｉ）本発明の第１の態様のプロセスを含む方法で得られた目的放射性標識化合物の検出可能な量を投与しておいた被験体を準備する段階、
（ｉｉ）目的放射性標識化合物を被験体の生体内に分布させる段階、
（ｉｉｉ）目的放射性標識化合物から放出された信号をインビボイメージング法で検出する段階、及び
（ｉｖ）信号の位置及び／又は量を表す画像を生成させる段階。
【００４５】
本発明の第５の態様の方法は、検出可能な量の目的放射性標識化合物を投与しておいた被検体を「準備」することで開始される。この方法の最終目的は画像を得ることであるので、被験体への目的放射性標識化合物の投与は、画像の生成を容易にするために必要な準備段階であると理解することができる。
【００４６】
本発明の「被験体」は好ましくは哺乳類であり、最も好ましくは、哺乳類の無傷生体である。特に好ましい実施形態では、本発明の被験体はヒトである。
【００４７】
本発明の方法の「検出」段階では、放射性核種から放出された信号を、ＳＰＥＣＴ及びＰＥＴ検出器のような、その信号を検知できる検出器で検出する。
【００４８】
本発明の方法の「生成」段階はコンピュータによって実施され、取得した信号データに再構成アルゴリズムを適用してデータセットを得る。このデータセットを操作して、被験体内の関心領域（ＡＯＩ；area of interest）を示す画像を生成させる。
【００４９】
分離法及び目的放射性標識化合物の好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態は、本発明の第１態様で記載した通りである。
【００５０】
第６の態様では、本発明は、以下の段階（ｉ）〜（ｉｉｉ）を含む診断方法を提供する。
（ｉ）本発明の第１態様のプロセスを含む方法で得られた目的放射性標識化合物を被験体に投与する準備段階、
（ｉｉ）本発明の第５態様の画像形成方法の段階（ｉ）〜（ｉｖ）、及び
（ｉｉｉ）画像形成方法の段階（ｉｖ）で生成した画像を評価して、病態を診断する段階。
【００５１】
分離法及び目的放射性標識化合物の好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態は、本発明の第１態様で記載した通りである。
【００５２】
本発明を図面を参照して説明する。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】共重合吸着剤（ＯＡＳＩＳ ＨＬＢ）を用いた粗ＦＬＴの溶出を溶出液（水中５％エタノール）の体積の関数として示すグラフである。
【図２】図１の吸着剤を用いた粗ＦＬＴの溶出を溶出液（水中７％エタノール）の体積の関数として示すグラフである。
【図３】表面改質吸着剤（Ｓｔｒａｔａ（商標）Ｘ）を用いた粗ＦＬＴの溶出を溶出液（水中７％エタノール）の体積の関数として示すグラフである。
【実施例】
【００５４】
本発明を次の非限定的な実施例で例示する。
【００５５】
実施例１〜３
実施例１〜３では、モデル化合物19ＦＬＴとｄ４Ｔの分離を固相抽出カラムを用いて検討した。19ＦＬＴは、放射性核種18Ｆに代えて、天然に豊富に存在する19Ｆでフッ素化した。
【００５６】
ＳＰＥ分離後の画分はＨＰＬＣで分析した（Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）５μｍカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製）、４．６×２５０ｍｍ Ａ）０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、Ｂ）０．１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ。均一濃度９％Ｂで１５分、流速１ｍｌ／分。）。
【００５７】
一般的手順は次の通りであった。
１．カラム活性化：１×６ｍｌ ＭｅＣＮ
２．カラム洗浄：１×６ｍｌ Ｈ2Ｏ
３．試料添加：ｄ４Ｔ：19ＦＬＴ比１００：１
４．不純物の溶出：例えば４×６ｍｌ ２％ＭｅＣＮ
５．目的物の溶出：例えば１×６ｍｌ １２％ＭｅＣＮ
６．最終洗浄：１×６ｍｌ １００％ＭｅＣＮ、
或いは
１．カラム活性化：１×６ｍｌ ＥｔＯＨ
２．カラム洗浄：１×６ｍｌ Ｈ2Ｏ
３．試料添加：ｄ４Ｔ：19ＦＬＴ比１００：１
４．不純物の溶出：例えば５×６ｍｌ ５％ＥｔＯＨと例えば１×６ｍｌ ８％ＥｔＯＨ
５．目的物の溶出：１×６ｍｌ ２０％ＥｔＯＨ（７％ＥｔＯＨの注入体積１７ｍｌ）
６．最終洗浄：１００％ＥｔＯＨ。
【００５８】
使用した吸着剤は、Ｎ−結合２−ピペリドン基で改質した表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）であり、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社からＳｔｒａｔａ（商標）Ｘという商品名で入手できる。実施例１〜３におけるカラムサイズは６ｍ１／５００ｍｇ吸着剤、温度は周囲温度、圧力は大気圧であった。
【００５９】
カラムのコンディショニングは、各例において試料の添加前に実施した。例えば、実施例１では、１×６ｍｌのアセトニトリルの添加後に、１×６ｍｌの水を添加した。
【００６０】
実施例１
１．試料の添加
ｄ４Ｔ（６ｍｇ）、19ＦＬＴ（０．０６０ｍｇ）を３００μｌの水に溶解した。２７０μｌをＳｔｒａｔａ（商標）Ｘカラムに添加した。
【００６１】
２．カラムの洗浄
ｉ）４×６ｍｌの２％アセトニトリルを用いてｄ４Ｔを洗い流した。微量の19ＦＬＴが最終洗浄画分中に観察された。厳密な定量は実施しなかった。
【００６２】
３．溶出
１×６ｍｌの１２％アセトニトリルを用いて19ＦＬＴを溶出させた。ＨＰＬＣ純度は９６％であった。
【００６３】
４．対照
カラムを１００％アセトニトリルで洗浄して、画分をＨＬＰＣで分析した。ｄ４Ｔも19ＦＬＴも検出されなかった。
【００６４】
実施例２
ｄ４Ｔ（１０ｍｇ）をＨ2Ｏ（２００μｌ）に溶解し、１ｍｇ／ｍｌの19ＦＬＴ溶液１００μｌを加えた。３０μｌをＨＰＬＣ分析用に採取した。残る２７０μｌをカラムに添加した。カラムを活性化し（ＭｅＣＮ）、水で洗浄した。以下の手順を用いた。
【００６５】
５×６ｍｌ ５％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
２×６ｍｌ ８％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
ｌ×６ｍｌ ２０％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ。
【００６６】
実験は成功し、19ＦＬＴの純度（２０％ＥｔＯＨ画分中）は９６．５％であった。８％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏのいずれの画分でも検出し得る19ＦＬＴな破過は認められなかった。
【００６７】
実施例３
ｄ４Ｔ（１０ｍｇ）をＨ2Ｏ（２００μｌ）に溶解した。19ＦＬＴ（１００μｌの１ｍｇ／ｍｌＨ2Ｏ溶液）を加えた。３０μｌをＨＰＬＣ分析用に採取した。２７０μｌをＳｔｒａｔａ（商標）Ｘ（５００ｍｇ／６ｍｌ）カラムに添加した。カラムをＭｅＣＮで活性化し、Ｈ2Ｏで洗浄してから試料を添加した。
【００６８】
手順：５×６ｍｌ ６％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
２×６ｍｌ ８％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
１×６ｍｌ ２０％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
１×６ｍｌ １００％ＥｔＯＨ。
【００６９】
試料はＨＰＬＣを用いて分析した。
【００７０】
２０％ＥｔＯＨ画分における19ＦＬＴの純度は９６．４％であった。ただし、画分７も若干の19ＦＬＴを含んでおり、画分７と８の合計で19ＦＬＴの純度は９６％となった。
【００７１】
実施例４
２種類の異なる吸着剤を用いてＦＬＴと不純物の分離を検討した。
【００７２】
試験１
市販の合成装置で得た粗18ＦＬＴ（崩壊）生成物をいずれの事例でも２ｍｇの19ＦＬＴと混合して分析物の合計体積を１０ｍｌとした。分析物の試料を吸着剤Ｏａｓｉｓ ＨＬＢ（Ｗａｔｅｒｓ社製）を含むＳＰＥカートリッジで吸着させた。Ｏａｓｉｓ ＨＬＢは、所定の比のＮ−ビニルピロリドンとジビニルベンゼンモノマーの共重合吸着剤である。
【００７３】
カートリッジを乾燥し、次いで流速５ｍｌ／分の水中５％エタノールで溶出させた。１０ｍｌ画分を回収した。結果を図１に示すが、ＦＬＴと２種類の不純物との分離がよくなかったことが分かる。
【００７４】
試験２
溶出液として水中７％エタノールを使用した点を除いて、試験１を繰り返した。結果を図２に示すが、この場合も分離がよくなかったことが分かる。
【００７５】
試験３
使用した吸着剤がＳｔｒａｔａ（商標）Ｘ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製）であった点を除いて、試験２を繰り返した。Ｓｔｒａｔａ（商標）Ｘは、２−ピペリドンで表面改質した表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）コポリマーである。結果を図３に示すが、良好な分離であったことが分かる。
【００７６】
実施例４は、ＦＬＴと不純物の分離に吸着剤及び溶出液が重要であることを示している。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、目的放射性標識化合物を不純物から分離する方法、かかる方法を実施するための装置及びかかる装置で使用するための着脱式カセットに関する。本発明の分離法を含む方法で得られた目的放射性標識化合物の使用する方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
放射性標識化合物は医用画像に用途を有しており、18Ｆ放射性標識化合物の場合は陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）に用途を有する。
【０００３】
現在特に関心のもたれている放射性標識化合物は放射性標識チミジンであり、特に腫瘍学の分野でのＰＥＴイメージングのための３′−デオキシ−３′−［18Ｆ］フルオロチミジン（18ＦＬＴ）である。
【０００４】
18ＦＬＴは、スキーム１に示す通り、５′−Ｏ−（４′，４′−ジメトキシトリチル）チミジンから、18Ｆを用いた３′位での求核置換（立体化学の反転を伴う）によって合成することができる。
【０００５】
【化１】
このフッ素化の際に、ＯＨ-と18Ｆ-との競争反応のため脱離生成物ｄ４Ｔが高い収率で生成することが多く、この反応における主要不純物である。ｄ４Ｔは18ＦＬＴよりも格段に高い速度で形成される傾向があり、１００〜１００００：１のｄ４Ｔ：18ＦＬＴ比で存在することがある。18ＦＬＴとｄ４Ｔとの分離は厄介な問題である。
【０００６】
２種類の化合物の高速液体クロマトグラフィー分離は様々な固定相を用いて実施できるが、ＨＰＬＣは費用がかかり、複雑で、病院のような臨床環境では好ましい精製法とはいえない。
【０００７】
ＨＰＬＣ法は時間がかかることもあり、半減期の短い放射性核種（18Ｆの半減期は約１１０分である。）を使用する際には特に問題となる。もう一つの重大な問題は、ＨＰＬＣが、放射性標識化合物の調製と精製を簡単にする市販の合成モジュールとの使用に役立たないことである。
【０００８】
国際公開第２００５／０２５５１９号には、18ＦＬＴの自動合成方法及び自動合成装置が記載されており、分離はＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｃ−１８固相抽出（ＳＰＥ；solid phase extraction）カラムを用いて実施される。
【０００９】
国際公開第２００６／１３３７３２号にも、［18Ｆ］−ＦＬＴの製造方法が記載されており、分離はＯａｓｉｓ（商標）ＨＬＢ ＳＰＥカラムを用いて実施される。
【００１０】
残念なことに、［18Ｆ］−ＦＬＴの製造に用いるため従前報告されたＳＰＥ法は、十分な分離をもたらさないので、臨床用途には必ずしも適していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】国際公開第２００５／０２５５１９号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００６／１３３７３２号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、比較的簡単で、ＨＰＬＣよりも費用がかからず、分離性に優れ、特に臨床環境での使用に適した分離方法を提供することによって、上述の問題に対処することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
そこで、本発明は、第１の態様では、目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離する方法であって、
目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを含む混合物を準備する段階、
高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムに混合物を流して、目的放射性標識化合物を吸着させ、１種以上の不純物を吸着させる段階、
第１の溶出液を用いて１種以上の不純物を溶出させる段階、及び
第２の溶出液を用いて目的放射性標識化合物を溶出させる段階
を含む方法を提供する。
【００１４】
「不純物」という用語は、通常の意味、つまり、化学的又は放射化学的プロセスに由来する不純物と解される。
【００１５】
本発明の第１の態様に係る方法は、１種以上の不純物から、目的放射性標識化合物を、比較的簡単、経済的、堅実（ロバスト）かつ迅速に分離できるという利点がある。また、目的放射性標識化合物と不純物が固相抽出カラムに異なる親和性で吸着されるので、良好な分離が可能であるという利点もある。第１及び第２の溶出液を用いて不純物及び目的物を別々に溶出するので、分離プロセスのきめ細かな制御が可能となる。
【００１６】
好ましくは、目的放射性標識化合物は放射性標識チミジン又はチミジン誘導体である。さらに好ましくは、目的放射性標識化合物は放射性標識３′−デオキシ−３′−チミジン又はその誘導体である。
【００１７】
放射性標識チミジン又はその誘導体は、ＰＥＴ及び単光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）に有用な放射性標識化合物であり、腫瘍学を始めとする様々な領域に用途を有するので、好適である。
【００１８】
目的放射性標識化合物は、様々な放射性核種で放射性標識することができる。本発明で特に適しているのは、ＳＰＥＣＴイメージングに適したγ線放出型放射性ハロゲン又はＰＥＴイメージングに適した陽電子放射性核種である。γ線放出型放射性ハロゲンの例として、123Ｉ、131Ｉ及び77Ｂｒが挙げられるが、123Ｉが好ましい。ＰＥＴイメージングに適した放射性核種としては、11Ｃ、18Ｆ、75Ｂｒ、76Ｂｒ及び124Ｉが挙げられるが、11Ｃ及び18Ｆが好ましく、18Ｆが最も好ましい。かかる放射性標識化合物を得るための各種方法は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｗｉｌｅｙ；２００３：Ｗｅｌｃｈ ａｎｄ Ｒｅｄｖａｎｌｙ，Ｅｄｓ．）に記載されている。
【００１９】
本発明の好ましい目的放射性標識化合物は、18Ｆ−標識ＦＬＴ（３′−デオキシ−３′−［18Ｆ］フルオロチミジン）である。18Ｆ−標識ＦＬＴは、Ｈａｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ（１９８６ Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．；２７；２３５）に記載された方法で得ることができる。
【００２０】
ＦＬＴの製造プロセスでは、副反応のため不純物が生じることがある。不純物としては、特にチミジン又はチミジン誘導体がある。特に問題とされる不純物は、２′，３′−ジデヒドロ−３′−デオキシチミジンである。
【００２１】
本発明の第１の態様に係る方法は、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムを用いて実施される。表面改質吸着剤は、吸着剤粒子の表面（通常は細孔の内部表面を含む）に化学官能基を導入することによって改質された担体（シリカ又はポリマーなど）を含む吸着剤である。吸着剤の表面改質には、担体の種類にもある程度依存するが、多種多様な化学基を使用し得る。高分子表面改質吸着剤は、担体吸着剤を性質（特に表面積、空隙率及び粒径）の種々異なる数多くのポリマーから選択することができて、ある吸着剤で様々な選択性（例えば、疎水性、親水性、π−π相互作用）と広いｐＨ域（１〜１４）での優れた安定性をもたらすので、特に有利である。
【００２２】
高分子表面改質吸着剤の場合、高分子表面改質吸着剤は好ましくは表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）からなる。これが好ましいのは、ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）は広範な粒径、表面積及び空隙率で入手でき、各種化学基の導入によって比較的簡単に表面改質できるからである。ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）の表面改質法の一つは、国際公開第０３／０６４４７８Ａに記載されており、ベースポリマー表面の残存遊離ビニル基のラジカル開始表面グラフト改質によるものである。
【００２３】
好ましい高分子表面改質吸着剤は、ピロリドン又はピペリドン誘導体、さらに好ましくは２−ピロリドン又は２−ピペリドン誘導体で表面改質される。これが好ましいのは、かかる表面改質ポリマー吸着剤は、２種類の溶出液を用いた目的放射性標識化合物と不純物との優れた分離（特に放射性標識チミジン又はチミジン誘導体に対して）をもたらすからである。
【００２４】
固相抽出カラムは、一般に、分離すべき混合物の体積を考慮に入れた適当な大きさのものであればよい。ただし、臨床環境では、固相抽出カラムは一般に１〜１０ｍｌ（ｃｍ3）、通常２〜８ｃｍ3又は３〜６ｃｍ3の有効容積を有する。
【００２５】
固相抽出カラムには、通常、目的放射性標識化合物と不純物との良好な分離が確保される十分な高分子表面改質吸着剤が充填される。一般に、固相抽出カラムには、固相抽出カラムの有効容積を基準にして、１０ｍｇ／ｃｍ3〜２００ｍｇ／ｃｍ3の表面改質吸着剤が充填される。好ましくは、固相抽出カラムには、２０ｍｇ／ｃｍ3〜１４５ｍｇ／ｃｍ3、さらに好ましくは５０〜１００ｍｇ／ｃｍ3、最も好ましくは５０〜約９０ｍｇ／ｃｍ3が充填される。固相抽出カラムの典型的な好ましい充填量は、３ｃｍ3のカラムに対して６０ｍｇ（２０ｍｇ／ｃｍ3に相当）から６ｃｍ3のカラムに対して８５０ｍｇ（約１４２ｍｇ／ｃｍ3に相当）であろう。
【００２６】
吸着剤量は、カラムにロードされる試料の量にも影響を与える。この量は一般に吸着剤量の５〜１０％である。
【００２７】
好ましくは、第１及び／又は第２の溶出液はアセトニトリル、アルカノール及び水から選択される１種以上の溶媒を含む。好ましいアルカノールはエタノールを含む。
【００２８】
一般に、第１及び第２の溶出液は各々、アセトニトリル又はエタノールのいずれかと水とを含むが、２つの系における水中のアセトニトリル又はエタノールの割合が異なる。これは、不純物又は目的放射性標識化合物のどちらを溶出するかを水中のアセトニトリル又はエタノールの割合の変更に応じて左右できるので、不純物又は目的放射性標識化合物のいずれかを溶出させるためのカラムへの溶出液の供給が簡単になるという利点がある。また、水とアセトニトリル又はエタノールとの比の微調整によって、分離プロセスの細かな制御が可能になるという利点もある。通例、不純物ではなく目的化合物を溶出させるには、アセトニトリル又はエタノールの割合を高くする必要がある。水中のアセトニトリル又はエタノールの典型的な割合は、（不純物の溶出のための）３〜５％から（目的化合物の溶出のための）１２〜２０％までである。
【００２９】
エタノールは、得られた溶液を患者に直接注射できるので（７％ｖ／ｖ以下に希釈されている場合）、好ましい溶媒である。注射前の追加の溶媒交換段階は必要ない。
【００３０】
本発明の利点の１つは、固相抽出カラムによる分離を達成するのに、比較的低い圧力を使用できることである。典型的な圧力は大気圧付近であるが、必要に応じて、高い圧力（例えば約８００ｋＰａ（８ｂａｒ）以下）を使用してもよい。
【００３１】
一般に、本発明の第１態様では、溶出は、第１又は第２の溶出液を０．５〜２０ｍｌ／分の流速で固相抽出カラムに流すことを含む。さらに好ましくは０．５〜１５ｍｌ／分、１．０〜５．０ｍｌ／分、最も好ましくは１．０〜３．０ｍｌ／分の流速を使用できる。流速が低い方が概して良好な分離をもたらす。
【００３２】
固相抽出カラムを本発明の方法に使用する前に、「コンディショニング」する必要がある。これは単に有機溶媒での初期洗浄を要し、有機溶媒は通常はプロセスの残りの部分で使用される溶媒である。
【００３３】
本発明の方法は、固相抽出カラムの吸着剤を乾燥させる乾燥段階（おそらくは分離すべき試料をカラムにロードした後で溶出する前の乾燥段階）を始めとする数多くの追加段階を含んでいてもよい。分離プロセスに追加してもよいその他の段階は、固相抽出カラムを洗浄するためのフラッシュ段階又は洗浄段階であり、一般に分離手順の適当な段階で実施し得る。
【００３４】
本発明の分離法は、不純物からの目的放射性標識化合物の効率的な分離ができるので、非常に有益である。典型的には、第１の溶出液を用いた不純物の溶出で得られる１以上の画分は、合計で目的放射性標識化合物の１０％未満、さらに好ましくは目的放射性標識化合物の５％以下、最も好ましくは目的放射性標識化合物の２％以下しか含まない。
【００３５】
さらに、本方法は、一般に、第２の溶出液を用いた目的放射性標識化合物の溶出で、目的化合物の純度が９０％を超える１以上の画分が得られるという利点がある。さらに好ましくは、第２の溶出液は、目的化合物の純度が９４、９５又は９６％を超える１以上の画分をもたらす。
【００３６】
第２の態様では、本発明は、本発明の第１態様の分離方法を含む目的放射性標識化合物の合成方法を提供する。
【００３７】
目的放射性標識化合物並びに分離方法の好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態は、本発明の第１態様で記載した通りである。
【００３８】
特に好ましい実施形態では、目的放射性標識化合物の合成方法は自動化される。例えば、米国特許第６１７２２０７号には、複数のストップコックマニホールドと使い捨て滅菌シリンジを用いて［18Ｆ］−ＦＤＧを合成する方法が記載されている。これはＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社から市販のＴＲＡＣＥＲｌａｂ（登録商標）ＭＸFDG装置に相当する。
【００３９】
本発明は、第３の態様では、目的放射性標識化合物の自動合成装置であって、合成が、目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離することを含んでおり、当該装置が、
目的放射性標識化合物を吸着させるとともに１種以上の不純物を吸着させるための固相抽出カラムであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムと、
不純物を溶出させるために、第１の溶出液をカラムに供給する手段と、
目的放射性標識化合物を溶出させるために、第２の溶出液をカラムに供給する手段と
を備える装置を提供する。
【００４０】
本発明の第３の態様の特徴は、本発明の第１の態様に関する特徴と概ね同じ（適宜修正して）である。
【００４１】
本発明の第４の態様では、本発明は、目的放射性標識化合物の自動合成装置で使用する着脱式カセットであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムを備えた着脱式カセットを提供する。かかる着脱式カセットは、適当に適合化した自動合成装置（ＴＲＡＣＥＲｌａｂ（登録商標）など）に装着できるように設計される。着脱式カセットは、分離の費用効率、能率及び速度を向上させるという多大な利点をもたらす。また、セットアップ時間が最小限に短縮され、セットアップも簡単になるが、この二点はいずれも、特に臨床環境（病院など）で極めて重要である。着脱式カセットは、概して、本発明の前述の態様に関して記載した特徴を適宜修正して有している。
【００４２】
着脱式カセットは、固相抽出カラムとは別に、前駆体化合物を収容する容器、不要な放射性イオンを除去するためのカラム、及び反応混合物を蒸発させて必要に応じて生成物を製剤化できるように接続されている適当な容器を含んでいてもよい。合成に必要な試薬、溶媒その他の消耗品も、放射能濃度、体積、送達時間などに関する顧客の必要性を満足するように自動合成器を運転することのできるソフトウェアが入ったコンパクトディスクと一緒に梱包してもよい。簡便には、運転間の汚染の危険性を最小限とし、無菌・品質を保証するため、着脱式カセットの構成要素はすべて使い捨てである。
【００４３】
目的放射性標識化合物の自動合成のための着脱式カセットは、以下の（ｉ）〜（ｖ）を備えていてもよい。
（ｉ）前駆体化合物を含む容器、
（ｉｉ）所望放射性核種の原料を含む容器を溶出する手段、
（ｉｉｉ）過剰の放射性核種を除去するためのイオン交換カートリッジ、
（ｉｖ）得られる目的放射性標識化合物を脱保護するためのカートリッジ、及び
（ｖ）目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離するためのカートリッジであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムを含むカートリッジ。
【００４４】
本発明の第５の態様では、本発明は、以下の段階（ｉ）〜（ｉｖ）を含む画像形成方法を提供する。
（ｉ）本発明の第１の態様のプロセスを含む方法で得られた目的放射性標識化合物の検出可能な量を投与しておいた被験体を準備する段階、
（ｉｉ）目的放射性標識化合物を被験体の生体内に分布させる段階、
（ｉｉｉ）目的放射性標識化合物から放出された信号をインビボイメージング法で検出する段階、及び
（ｉｖ）信号の位置及び／又は量を表す画像を生成させる段階。
【００４５】
本発明の第５の態様の方法は、検出可能な量の目的放射性標識化合物を投与しておいた被検体を「準備」することで開始される。この方法の最終目的は画像を得ることであるので、被験体への目的放射性標識化合物の投与は、画像の生成を容易にするために必要な準備段階であると理解することができる。
【００４６】
本発明の「被験体」は好ましくは哺乳類であり、最も好ましくは、哺乳類の無傷生体である。特に好ましい実施形態では、本発明の被験体はヒトである。
【００４７】
本発明の方法の「検出」段階では、放射性核種から放出された信号を、ＳＰＥＣＴ及びＰＥＴ検出器のような、その信号を検知できる検出器で検出する。
【００４８】
本発明の方法の「生成」段階はコンピュータによって実施され、取得した信号データに再構成アルゴリズムを適用してデータセットを得る。このデータセットを操作して、被験体内の関心領域（ＡＯＩ；area of interest）を示す画像を生成させる。
【００４９】
分離法及び目的放射性標識化合物の好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態は、本発明の第１態様で記載した通りである。
【００５０】
第６の態様では、本発明は、以下の段階（ｉ）〜（ｉｉｉ）を含む診断方法を提供する。
（ｉ）本発明の第１態様のプロセスを含む方法で得られた目的放射性標識化合物を被験体に投与する準備段階、
（ｉｉ）本発明の第５態様の画像形成方法の段階（ｉ）〜（ｉｖ）、及び
（ｉｉｉ）画像形成方法の段階（ｉｖ）で生成した画像を評価して、病態を診断する段階。
【００５１】
分離法及び目的放射性標識化合物の好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態は、本発明の第１態様で記載した通りである。
【００５２】
本発明を図面を参照して説明する。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】共重合吸着剤（ＯＡＳＩＳ ＨＬＢ）を用いた粗ＦＬＴの溶出を溶出液（水中５％エタノール）の体積の関数として示すグラフである。
【図２】図１の吸着剤を用いた粗ＦＬＴの溶出を溶出液（水中７％エタノール）の体積の関数として示すグラフである。
【図３】表面改質吸着剤（Ｓｔｒａｔａ（商標）Ｘ）を用いた粗ＦＬＴの溶出を溶出液（水中７％エタノール）の体積の関数として示すグラフである。
【実施例】
【００５４】
本発明を次の非限定的な実施例で例示する。
【００５５】
実施例１〜３
実施例１〜３では、モデル化合物19ＦＬＴとｄ４Ｔの分離を固相抽出カラムを用いて検討した。19ＦＬＴは、放射性核種18Ｆに代えて、天然に豊富に存在する19Ｆでフッ素化した。
【００５６】
ＳＰＥ分離後の画分はＨＰＬＣで分析した（Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）５μｍカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製）、４．６×２５０ｍｍ Ａ）０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、Ｂ）０．１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ。均一濃度９％Ｂで１５分、流速１ｍｌ／分。）。
【００５７】
一般的手順は次の通りであった。
１．カラム活性化：１×６ｍｌ ＭｅＣＮ
２．カラム洗浄：１×６ｍｌ Ｈ2Ｏ
３．試料添加：ｄ４Ｔ：19ＦＬＴ比１００：１
４．不純物の溶出：例えば４×６ｍｌ ２％ＭｅＣＮ
５．目的物の溶出：例えば１×６ｍｌ １２％ＭｅＣＮ
６．最終洗浄：１×６ｍｌ １００％ＭｅＣＮ、
或いは
１．カラム活性化：１×６ｍｌ ＥｔＯＨ
２．カラム洗浄：１×６ｍｌ Ｈ2Ｏ
３．試料添加：ｄ４Ｔ：19ＦＬＴ比１００：１
４．不純物の溶出：例えば５×６ｍｌ ５％ＥｔＯＨと例えば１×６ｍｌ ８％ＥｔＯＨ
５．目的物の溶出：１×６ｍｌ ２０％ＥｔＯＨ（７％ＥｔＯＨの注入体積１７ｍｌ）
６．最終洗浄：１００％ＥｔＯＨ。
【００５８】
使用した吸着剤は、Ｎ−結合２−ピペリドン基で改質した表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）であり、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社からＳｔｒａｔａ（商標）Ｘという商品名で入手できる。実施例１〜３におけるカラムサイズは６ｍ１／５００ｍｇ吸着剤、温度は周囲温度、圧力は大気圧であった。
【００５９】
カラムのコンディショニングは、各例において試料の添加前に実施した。例えば、実施例１では、１×６ｍｌのアセトニトリルの添加後に、１×６ｍｌの水を添加した。
【００６０】
実施例１
１．試料の添加
ｄ４Ｔ（６ｍｇ）、19ＦＬＴ（０．０６０ｍｇ）を３００μｌの水に溶解した。２７０μｌをＳｔｒａｔａ（商標）Ｘカラムに添加した。
【００６１】
２．カラムの洗浄
ｉ）４×６ｍｌの２％アセトニトリルを用いてｄ４Ｔを洗い流した。微量の19ＦＬＴが最終洗浄画分中に観察された。厳密な定量は実施しなかった。
【００６２】
３．溶出
１×６ｍｌの１２％アセトニトリルを用いて19ＦＬＴを溶出させた。ＨＰＬＣ純度は９６％であった。
【００６３】
４．対照
カラムを１００％アセトニトリルで洗浄して、画分をＨＬＰＣで分析した。ｄ４Ｔも19ＦＬＴも検出されなかった。
【００６４】
実施例２
ｄ４Ｔ（１０ｍｇ）をＨ2Ｏ（２００μｌ）に溶解し、１ｍｇ／ｍｌの19ＦＬＴ溶液１００μｌを加えた。３０μｌをＨＰＬＣ分析用に採取した。残る２７０μｌをカラムに添加した。カラムを活性化し（ＭｅＣＮ）、水で洗浄した。以下の手順を用いた。
【００６５】
５×６ｍｌ ５％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
２×６ｍｌ ８％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
ｌ×６ｍｌ ２０％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ。
【００６６】
実験は成功し、19ＦＬＴの純度（２０％ＥｔＯＨ画分中）は９６．５％であった。８％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏのいずれの画分でも検出し得る19ＦＬＴな破過は認められなかった。
【００６７】
実施例３
ｄ４Ｔ（１０ｍｇ）をＨ2Ｏ（２００μｌ）に溶解した。19ＦＬＴ（１００μｌの１ｍｇ／ｍｌＨ2Ｏ溶液）を加えた。３０μｌをＨＰＬＣ分析用に採取した。２７０μｌをＳｔｒａｔａ（商標）Ｘ（５００ｍｇ／６ｍｌ）カラムに添加した。カラムをＭｅＣＮで活性化し、Ｈ2Ｏで洗浄してから試料を添加した。
【００６８】
手順：５×６ｍｌ ６％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
２×６ｍｌ ８％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
１×６ｍｌ ２０％ＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ
１×６ｍｌ １００％ＥｔＯＨ。
【００６９】
試料はＨＰＬＣを用いて分析した。
【００７０】
２０％ＥｔＯＨ画分における19ＦＬＴの純度は９６．４％であった。ただし、画分７も若干の19ＦＬＴを含んでおり、画分７と８の合計で19ＦＬＴの純度は９６％となった。
【００７１】
実施例４
２種類の異なる吸着剤を用いてＦＬＴと不純物の分離を検討した。
【００７２】
試験１
市販の合成装置で得た粗18ＦＬＴ（崩壊）生成物をいずれの事例でも２ｍｇの19ＦＬＴと混合して分析物の合計体積を１０ｍｌとした。分析物の試料を吸着剤Ｏａｓｉｓ ＨＬＢ（Ｗａｔｅｒｓ社製）を含むＳＰＥカートリッジで吸着させた。Ｏａｓｉｓ ＨＬＢは、所定の比のＮ−ビニルピロリドンとジビニルベンゼンモノマーの共重合吸着剤である。
【００７３】
カートリッジを乾燥し、次いで流速５ｍｌ／分の水中５％エタノールで溶出させた。１０ｍｌ画分を回収した。結果を図１に示すが、ＦＬＴと２種類の不純物との分離がよくなかったことが分かる。
【００７４】
試験２
溶出液として水中７％エタノールを使用した点を除いて、試験１を繰り返した。結果を図２に示すが、この場合も分離がよくなかったことが分かる。
【００７５】
試験３
使用した吸着剤がＳｔｒａｔａ（商標）Ｘ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製）であった点を除いて、試験２を繰り返した。Ｓｔｒａｔａ（商標）Ｘは、２−ピペリドンで表面改質した表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）コポリマーである。結果を図３に示すが、良好な分離であったことが分かる。
【００７６】
実施例４は、ＦＬＴと不純物の分離に吸着剤及び溶出液が重要であることを示している。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離する方法であって、
目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを含む混合物を準備する段階、
高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムに混合物を流して、目的放射性標識化合物を吸着させ、１種以上の不純物を吸着させる段階、
第１の溶出液を用いて１種以上の不純物を溶出させる段階、及び
第２の溶出液を用いて目的放射性標識化合物を溶出させる段階
を含む方法。
【請求項２】
前記目的放射性標識化合物が放射性標識チミジン又はチミジン誘導体である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記目的放射性標識化合物が放射性標識３′−デオキシ−３′−チミジン又はその誘導体である、請求項１又は請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記目的放射性標識化合物が18Ｆで放射性標識されている、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
前記目的放射性標識化合物が３′−デオキシ−３′−［18Ｆ］フルオロチミジンである、請求項２乃至請求項４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
前記１種以上の不純物がチミジン又はチミジン誘導体である、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
前記不純物が２′，３′−ジデヒドロ−３′−デオキシチミジンである、請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記高分子表面改質吸着剤が表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）を含む、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
前記吸着剤がピロリドン又はピペリドン誘導体で表面改質されている、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記ピロリドン又はピペリドン誘導体が２−ピロリドン又は２−ピペリドン誘導体である、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記固相抽出カラムの有効容積が２〜８ｃｍ3である、請求項１乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記固相抽出カラムに、該固相抽出カラムの有効容積を基準にして、２０ｍｇ／ｃｍ3〜１４０ｍｇ／ｃｍ3の高分子表面改質吸着剤が充填されている、請求項１乃至請求項１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
第１及び／又は第２の溶出液が、アセトニトリル、アルカノール及び水から選択される１種以上の溶媒を含む、請求項１乃至請求項１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
前記アルカノールがエタノールを含む、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
第１及び第２の溶出液の各々が、アセトニトリル又はエタノールのいずれかと水とを含み、２つの系でアセトニトリル又はエタノールの割合が異なる、請求項１乃至請求項１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
溶出段階が、固相抽出カラムに第１又は第２の溶出液を０．５〜２０ｍｌ／分の流速で流すことを含む、請求項１乃至請求項１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
前記混合物をカラムに流す前に、固相抽出カラムをコンディショニングする段階をさらに含む、請求項１乃至請求項１６のいずれか１項記載の方法。
【請求項１８】
１回以上の固相抽出カラム洗浄段階をさらに含む、請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１９】
第１の溶出液を用いて不純物を溶出させる段階で、目的放射性標識化合物を合計１０％未満しか含まない１以上の画分を生じる、請求項１乃至請求項１８のいずれか１項記載の方法。
【請求項２０】
第２の溶出液を用いて目的放射性標識化合物を溶出させる段階が、目的化合物の純度が９０％を超える１以上の画分を生じる、請求項１乃至請求項１９のいずれか１項記載の方法。
【請求項２１】
請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法を含む、目的放射性標識化合物の合成方法。
【請求項２２】
自動化された請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
目的放射性標識化合物の自動合成装置であって、合成が、目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離することを含んでおり、当該装置が、
目的放射性標識化合物を吸着させるとともに１種以上の不純物を吸着させるための固相抽出カラムであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムと、
不純物を溶出させるために、第１の溶出液をカラムに供給する手段と、
目的放射性標識化合物を溶出させるために、第２の溶出液をカラムに供給する手段と
を備える装置。
【請求項２４】
前記高分子表面改質吸着剤が表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）を含む、請求項２３記載の装置。
【請求項２５】
前記吸着剤がピロリドン又はピペリドン誘導体で表面改質されている、請求項２３又は請求項２４のいずれか１項記載の装置。
【請求項２６】
前記ピロリドン又はピペリドン誘導体が２−ピロリドン又は２−ピペリドン誘導体である、請求項２５記載の装置。
【請求項２７】
前記固相抽出カラムの有効容積が２〜８ｃｍ3である、請求項２３乃至請求項２６のいずれか１項記載の装置。
【請求項２８】
前記固相抽出カラムに、固相抽出カラムの有効容積を基準にして、２０ｍｇ／ｃｍ3〜１４０ｍｇ／ｃｍ3の表面改質吸着剤が充填されている、請求項２３乃至請求項２７のいずれか１項記載の装置。
【請求項２９】
請求項２３乃至請求項２８のいずれか１項記載の装置で使用するための着脱式カセットであって、前記固相抽出カラムを含むカセット。
【請求項３０】
画像形成方法であって、
（ｉ）請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法を含む方法で得られた目的放射性標識化合物の検出可能な量を投与しておいた被験体を準備する段階、
（ｉｉ）目的放射性標識化合物を被験体の生体内に分布させる段階、
（ｉｉｉ）目的放射性標識化合物から放出された信号をインビボイメージング法で検出する段階、及び
（ｉｖ）信号の位置及び／又は量を表す画像を生成させる段階
を含む、画像形成方法。
【請求項３１】
診断方法であって、
（ｉ）請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法を含む方法で得られた目的放射性標識化合物を被験体に投与する準備段階、
（ｉｉ）本発明の第５態様の画像形成方法の段階（ｉ）〜（ｉｖ）、及び
（ｉｉｉ）画像形成方法の段階（ｉｖ）で生成した画像を評価して、病態を診断する段階
を含む診断方法。
【請求項３２】
前記画像をＰＥＴ又はＳＰＥＣＴを用いて生成させる、請求項３０又は請求項３１記載の方法。
【請求項１】
目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離する方法であって、
目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを含む混合物を準備する段階、
高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムに混合物を流して、目的放射性標識化合物を吸着させ、１種以上の不純物を吸着させる段階、
第１の溶出液を用いて１種以上の不純物を溶出させる段階、及び
第２の溶出液を用いて目的放射性標識化合物を溶出させる段階
を含む方法。
【請求項２】
前記目的放射性標識化合物が放射性標識チミジン又はチミジン誘導体である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記目的放射性標識化合物が放射性標識３′−デオキシ−３′−チミジン又はその誘導体である、請求項１又は請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記目的放射性標識化合物が18Ｆで放射性標識されている、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
前記目的放射性標識化合物が３′−デオキシ−３′−［18Ｆ］フルオロチミジンである、請求項２乃至請求項４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
前記１種以上の不純物がチミジン又はチミジン誘導体である、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
前記不純物が２′，３′−ジデヒドロ−３′−デオキシチミジンである、請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記高分子表面改質吸着剤が表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）を含む、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
前記吸着剤がピロリドン又はピペリドン誘導体で表面改質されている、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記ピロリドン又はピペリドン誘導体が２−ピロリドン又は２−ピペリドン誘導体である、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記固相抽出カラムの有効容積が２〜８ｃｍ3である、請求項１乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記固相抽出カラムに、該固相抽出カラムの有効容積を基準にして、２０ｍｇ／ｃｍ3〜１４０ｍｇ／ｃｍ3の高分子表面改質吸着剤が充填されている、請求項１乃至請求項１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
第１及び／又は第２の溶出液が、アセトニトリル、アルカノール及び水から選択される１種以上の溶媒を含む、請求項１乃至請求項１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
前記アルカノールがエタノールを含む、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
第１及び第２の溶出液の各々が、アセトニトリル又はエタノールのいずれかと水とを含み、２つの系でアセトニトリル又はエタノールの割合が異なる、請求項１乃至請求項１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
溶出段階が、固相抽出カラムに第１又は第２の溶出液を０．５〜２０ｍｌ／分の流速で流すことを含む、請求項１乃至請求項１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
前記混合物をカラムに流す前に、固相抽出カラムをコンディショニングする段階をさらに含む、請求項１乃至請求項１６のいずれか１項記載の方法。
【請求項１８】
１回以上の固相抽出カラム洗浄段階をさらに含む、請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１９】
第１の溶出液を用いて不純物を溶出させる段階で、目的放射性標識化合物を合計１０％未満しか含まない１以上の画分を生じる、請求項１乃至請求項１８のいずれか１項記載の方法。
【請求項２０】
第２の溶出液を用いて目的放射性標識化合物を溶出させる段階が、目的化合物の純度が９０％を超える１以上の画分を生じる、請求項１乃至請求項１９のいずれか１項記載の方法。
【請求項２１】
請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法を含む、目的放射性標識化合物の合成方法。
【請求項２２】
自動化された請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
目的放射性標識化合物の自動合成装置であって、合成が、目的放射性標識化合物と１種以上の不純物とを分離することを含んでおり、当該装置が、
目的放射性標識化合物を吸着させるとともに１種以上の不純物を吸着させるための固相抽出カラムであって、高分子表面改質吸着剤を含む固相抽出カラムと、
不純物を溶出させるために、第１の溶出液をカラムに供給する手段と、
目的放射性標識化合物を溶出させるために、第２の溶出液をカラムに供給する手段と
を備える装置。
【請求項２４】
前記高分子表面改質吸着剤が表面改質ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）を含む、請求項２３記載の装置。
【請求項２５】
前記吸着剤がピロリドン又はピペリドン誘導体で表面改質されている、請求項２３又は請求項２４のいずれか１項記載の装置。
【請求項２６】
前記ピロリドン又はピペリドン誘導体が２−ピロリドン又は２−ピペリドン誘導体である、請求項２５記載の装置。
【請求項２７】
前記固相抽出カラムの有効容積が２〜８ｃｍ3である、請求項２３乃至請求項２６のいずれか１項記載の装置。
【請求項２８】
前記固相抽出カラムに、固相抽出カラムの有効容積を基準にして、２０ｍｇ／ｃｍ3〜１４０ｍｇ／ｃｍ3の表面改質吸着剤が充填されている、請求項２３乃至請求項２７のいずれか１項記載の装置。
【請求項２９】
請求項２３乃至請求項２８のいずれか１項記載の装置で使用するための着脱式カセットであって、前記固相抽出カラムを含むカセット。
【請求項３０】
画像形成方法であって、
（ｉ）請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法を含む方法で得られた目的放射性標識化合物の検出可能な量を投与しておいた被験体を準備する段階、
（ｉｉ）目的放射性標識化合物を被験体の生体内に分布させる段階、
（ｉｉｉ）目的放射性標識化合物から放出された信号をインビボイメージング法で検出する段階、及び
（ｉｖ）信号の位置及び／又は量を表す画像を生成させる段階
を含む、画像形成方法。
【請求項３１】
診断方法であって、
（ｉ）請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法を含む方法で得られた目的放射性標識化合物を被験体に投与する準備段階、
（ｉｉ）本発明の第５態様の画像形成方法の段階（ｉ）〜（ｉｖ）、及び
（ｉｉｉ）画像形成方法の段階（ｉｖ）で生成した画像を評価して、病態を診断する段階
を含む診断方法。
【請求項３２】
前記画像をＰＥＴ又はＳＰＥＣＴを用いて生成させる、請求項３０又は請求項３１記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公表番号】特表２０１０−５２５９３１（Ｐ２０１０−５２５９３１Ａ）
【公表日】平成２２年７月２９日（２０１０．７．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５５２２７３（Ｐ２００９−５５２２７３）
【出願日】平成２０年３月７日（２００８．３．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００８／０００７７７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１１０７５７
【国際公開日】平成２０年９月１８日（２００８．９．１８）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年７月２９日（２０１０．７．２９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年３月７日（２００８．３．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００８／０００７７７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１１０７５７
【国際公開日】平成２０年９月１８日（２００８．９．１８）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
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