弾性線維形成促進剤
【課題】藻類または植物の抽出物の生理活性を見出し、新たな用途に供すること。
【解決手段】藻類または植物の抽出物、特に紅藻類、緑藻類、または特定の植物の抽出物を有効成分として含有する弾性線維形成促進剤を調製する。このような抽出物は、好適には、カギケノリ科、アオサ目など。または、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群より選択される植物のうち、少なくとも１種またはその組み合わせから得られる。
【解決手段】藻類または植物の抽出物、特に紅藻類、緑藻類、または特定の植物の抽出物を有効成分として含有する弾性線維形成促進剤を調製する。このような抽出物は、好適には、カギケノリ科、アオサ目など。または、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群より選択される植物のうち、少なくとも１種またはその組み合わせから得られる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
藻類や植物を抽出したエキスの使用は、最近の天然志向の高まりにより、石油系合成成分に代わるとして好まれる傾向にある。そして、天然物の抽出物は、その様々な生理活性が研究され、応用されている。
【０００３】
褐藻類、紅藻類、緑藻類などの藻類の抽出成分には、藻類特有の有効成分である、粘質多糖類、ミネラル、ビタミン等が豊富に含まれている。粘質多糖には、アルギン酸、カラギーナン、寒天などがあり、食物繊維としての作用や特定の生理活性があることが知られている。
【０００４】
例えば、紅藻類のマクリに、エラスターゼ阻害作用が見出されたことが報告されている他（特許文献１）、褐藻類および紅藻類由来の多糖類に、組織・細胞の障害を予防し及び／又は修復する機能があることが示されている（特許文献２）。
【０００５】
さらには、褐藻類、紅藻類、および緑藻類などから得られる海藻抽出物が、美白効果を有し、肌に対してシミ、ソバカスを軽減し、乾燥肌や湿疹・肌荒れの改善、更に、肌にツヤ・張りも与えることができることも示されている（特許文献３）。
【０００６】
また、特に紅藻類のカギケノリ科のアスパラゴプシス アルマタの抽出物は、細胞賦活、抗炎症作用、抗菌作用の３種の機能を有すること（特許文献４）、真皮線維芽細胞におけるコラーゲン産生促進作用があることが知られている（特許文献５および６）。
【０００７】
一方、植物エキスにも、各種ビタミン類、ミネラル類、糖類、油脂成分等が含まれ、各種の生理活性が知られている。その例としては、センブリ抽出物、チンピ抽出物、アーモンド抽出物、ニンジン抽出物、エンドウ抽出物、ユキノシタ抽出物、クワ抽出物等に含まれる、メラニン産生抑制作用、抗炎症作用、抗アレルギー作用、抗酸化作用等の生理活性（特許文献７）、ハマウツボ科の植物から抽出されたエラスターゼ阻害剤（特許文献８）などが挙げられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００９−０４６４２８号公報
【特許文献２】特開２００８−２７３９１９号公報
【特許文献３】特開２００１−１３９４１９号公報
【特許文献４】特開２００９−１９６９６９号公報
【特許文献５】特開平１０−３３０２８０号公報
【特許文献６】特開平１０−３３０２８１号公報
【特許文献７】特開２００２−２９３７４７号公報
【特許文献８】特開２００９−２６３２７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
これまで解明されていない藻類または植物の抽出物の新たな生理活性を見出し、適合する用途を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは前記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、藻類または植物の抽出物に弾性線維形成促進能があることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
即ち本発明は、藻類または植物の抽出物を有効成分として含有する弾性線維形成促進剤、に関する。
【００１２】
上記藻類は、紅藻類および／または緑藻類であることが好ましい。
【００１３】
上記弾性線維形成促進剤において、上記紅藻類は、アクロカエティウム目、チノリモ目 、ウシケノリ目、ウミゾウメン目、エリスロペルティス目、オオイシソウ目、カクレイト目、サンゴモ目、ダルス目、テングサ目、ロドゴルゴン目、ベニマダラ目、カギノリ目、カギケノリ目、カワモズク目、 スギノリ目、オゴノリ目、マサゴシバリ目、イタニグサ目 およびイギス目に属する藻類からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１４】
上記弾性線維形成促進剤において、上記紅藻類は、ミリン科、スギノリ科、ムカデノリ科、テングサ科、カギケノリ科、およびカギノリ科からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１５】
上記弾性線維形成促進剤において、上記紅藻類は、キリンサイ、スギノリ、コトジツノマタ、ヒヂリメン、テングサ、およびアスパラゴプシスからなる群より選択される少なくとも1種であり得る。
【００１６】
上記弾性線維形成促進剤において、上記緑藻類が、オオヒゲマワリ目、ヨコワミドロ目、サヤミドロ目、ケトフォラ目、ケトペルティス目、ヒビミドロ目、アオサ目、シオグサ目、モツレグサ目、クロレラ目、ミクロタムニオン目、トレボウクシア目、カワノリ目、マミエラ目、モノマスティクス目、ドリコマスティクス目、ミドリゲ目、イワヅタ目、スミレモ目、ウミイカダモ目、ミル目、ハネモ目、クロロデンドロン目、ドリコマスティクス目、ネフロセルミス目およびカサノリ目からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１７】
上記弾性線維形成促進剤において、上記緑藻類が、アオサ目アオサ科のヒメアオノリ、ホソヒメアオノリからなる群より選択される少なくとも1種であり得る。
【００１８】
上記弾性線維形成促進剤において、植物エキスに見出されるが、特には、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群に属する植物からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１９】
本発明はまた、上記いずれかの弾性線維形成促進剤を含有する、弾性線維形成促進用組成物、に関する。
【００２０】
上記弾性線維形成促進用組成物は、化粧料であり得る。
【００２１】
上記弾性線維形成促進用組成物は、食品であり得る。
【発明の効果】
【００２２】
本発明により、藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤が提供される。さらには、このような弾性線維形成促進剤を含有する弾性線維形成用組成物であって、化粧料あるいは食品が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】培養細胞を用いたインビトロでの評価において、種類の異なる紅藻類の抽出物 または緑藻類の抽出物を含有する弾性線維形成促進剤の効果を、コントロール（上左端）と比較して、蛍光発色によって示した写真である。
【図２】図１の写真におけるそれぞれのサンプルの蛍光量を数量化したグラフである。
【図３】植物のアセンヤクエキスを含有する弾性線維形成促進剤の効果（右）を、コントロール（左）と比較して、蛍光発色によって示した写真である。
【図４】図３の写真におけるそれぞれのサンプルの蛍光量を数量化したグラフである。
【図５】培養細胞を用いたインビトロでの評価において、種類の異なる藻類の抽出物または植物の抽出物を含有する弾性線維形成促進剤の効果を、コントロールと比較して、蛍光発色の量を数量化したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
肌、血管、肺などの特定の臓器、靱帯などにおける弾力向上又は維持は、細胞だけでなく、細胞外マトリクスを合わせた組織構成によって保たれている。細胞は、伸縮など外部強度に弱いため、細胞の回りに細胞外マトリックスを形成して、組織の形状を保っている。細胞外マトリクスとしては、コラーゲン線維、グリコサミノグリカン（ヒアルロン酸、ケラタン硫酸、へパラン硫酸、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸など）、弾性線維（エラスチン線維）などがある。コラーゲン線維やグリコサミノグリカンは外部強度に対して伸び縮みができないが、弾性線維は引き延ばしても元に戻る特性、すなわち弾性を有しており、伸び縮みの機能が必須である動脈，肺、皮膚の組織には弾性線維は重要な因子である。弾性線維は、ミクロフィブリルという線維の周りにエラスチンが沈着・架橋してできると考えられている。
【００２５】
弾性線維のターンオーバーは非常に遅いため、加齢等によって弾性線維が劣化・断裂した結果、または炎症細胞から分泌されるプロテアーゼ等の外的要因によって弾性線維が劣化・断裂した結果、皮膚のたるみ、動脈硬化、肺が無理に引き延ばされたことに起因する肺気腫などが発生する。動脈においては、弾性線維は太い動脈の質量の半分程度を占めており、脈圧（収縮期圧−拡張期圧）を吸収している。弾性線維の機能が低下すると、動脈は硬い管となって脈圧が上昇する。脈圧の上昇は心疾患の予後を悪化させることがわかっている。
【００２６】
弾性線維の再生が所望される状態又は疾患は、肺気腫、血管損傷、皮膚弛緩症、創傷、弾性線維劣化（例えば、加齢又は紫外線により引き起こされるもの、皮膚のたるみ）、肌荒れ、動脈硬化、大動脈瘤、加齢黄斑変性症、会陰ヘルニア、肛門ヘルニア、脳底動脈瘤、消化管運動障害、褥瘡などがあり、本願発明の弾性線維形成促進剤によって、弾性線維の伸び縮みの機能が必須である疾患または状態の改善や予防が可能となる。
【００２７】
本発明でいう弾性線維形成促進能とは、ミクロフィブリルの周りにエラスチンが沈着・架橋する工程が促進される能力をいい、その程度は問わず、処置を施さない場合と比較して、エラスチンの沈着がある程度でも促進されている状況であればよい。
【００２８】
本発明においては、このような弾性線維を形成することを促進する作用が、藻類または植物の抽出物に見出された。藻類または植物からの抽出物は、1種を単独または2種以上を組み合わせて使用しても良い。このような藻類または植物としては、限定されず、また、抽出物とは、有効成分の弾性線維形成促進作用が損なわれない限り、藻類または植物からの水可溶性成分、酸可溶性成分、アルカリ可溶性成分、有機溶媒可溶性成分などをいう。
【００２９】
本発明においては、このような弾性線維を形成することを促進する作用を有する成分としては、藻類の抽出物から抽出されるのもあれば特に限定はない。例えば、紅藻類の抽出物中に含まれるカラギーナン、ケイ素が含まれていてもよい。
【００３０】
カラギーナンは、カラギナン、カラゲナン、カラゲニンとも呼ばれ、主としてイバラノリ科、ミリン科、スギノリ科の紅藻類の海藻から抽出して得られる多糖類で、イオタ、カッパならびにラムダの三種類に大別される。イオタタイプカラギーナンは流動性のある粘性を持ち、弾力のある弱いゲルを形成し、カッパタイプカラギーナンは硬く脆いゲルを形成し、ラムダタイプカラギーナンは冷水可溶にて粘調な水溶液となり、ゲル化能力はない。本発明で用いるカラギーナンは、イオタタイプ、ラムダタイプ、あるいはカッパタイプのいずれのカラギーナンでも好適に使用できる。本発明において、カラギーナンを用いる場合には、紅藻類等から抽出した粗抽出物そのままでも、更にそれを精製処理したものでも良く、合成によって得られたものでも良い。ここでカラギーナンの抽出法も前記海藻類抽出物の調製方法と同様でよい。カラギーナンの主な成分は、直鎖含硫黄多糖類の一種で、D-ガラクトース（もしくは 3,6-アンヒドロ-D-ガラクトース）と硫酸から構成される陰イオン性高分子化合物である。
【００３１】
ある態様においては、本発明の弾性線維形成促進剤は、例えば藻類に豊富に含まれるケイ素などのミネラルを有効成分の１つとして含有する。ケイ素は、骨、関節、血管、皮膚、毛髪、歯、爪などに多く含まれ、生命維持に不可欠な必須微量元素である。人体の組織内に存在するコラーゲンを強くする役割も有し、さらに、骨の形成の初期段階で、カルシウムのコラーゲン沈着を助け、骨を強くする作用も有する。ケイ素が減少すると、骨や爪がもろくなったり、血管に脂肪がつきやすくなるとの報告もある。
【００３２】
本発明でいう藻類は、特には、紅藻類または緑藻類をいい、これらの紅藻類または緑藻類の抽出物は、紅藻類または緑藻類から、通常の方法で抽出されるエキスをいう。ここで、紅藻類とは、例えば、アクロカエティウム目、チノリモ目、エリスロペルティス目、オオイシソウ目、ダルス目、ロドゴルゴン目、カギノリ目、カワモズク目、イタニグサ目、ウシケノリ目（ウシケノリ、フノリノウシゲ）、ウミゾウメン目（カモガシラノリ、ヒラガラガラ、フサノリ、ヒラフサノリ、ニセフサノリ、ガラガラ、ベニモヅク、ウミゾウメン）、カクレイト目（ムカデノリ）、サンゴモ目（エゾシコロ、モカサ、オオシコロ）、テングサ目（ユイキリ、シマテングサ、マクサ、オニクサ、オオブサ、オバクサ、ヒラクサ）、ベニマダラ目（ベニマダラ）、カギケノリ目（カギケノリ、タマイタダキ）、スギノリ目（イソダンツウ、ナミイワタケ、アカバ、ミチガエソウ、ハナフノリ、フクロフノリ、カイノリ、シキンノリ、スギノリ、コトジツノマタ、オオバツノマタ、ツノマタ、イボツノマタ、アカバギンナンソウ、イトフノリ、ヒロハノカクレイト、キントキ、フシキントキ、ムカデノリ、ニクムカデ、ウツロムカデ、ヒトツマツ、カタノリ、ナガキントキ、タンバノリ、フダラク、ヒラムカデ、ヒラキントキ、スジムカデ、オオバキントキ、ヒヂリメン、ツルツル、マツノリ、キョウノヒモ、マタボウ、コメノリ、ツノムカデ、トサカマツ、イバラノリ、コヒモイバラ、ホシガタイバラ、スジイバラノリ、カヅノイバラ、カギイバラノリ、サイダイバラ、タチイバラ、ヒロハノトサカモドキ、ホソバノトサカモドキ、ウスギヌ、イカノアシ、エツキイワノカワ、キジノオ、サイミ、オキツノリ、ハリガネ、ハスジグサ、マキユカリ、ユカリ、ホソバナミノハナ、ナミノハナ、アツバノリ、ベニスナゴ、トサカノリ、ミリン）、オゴノリ目（シラモ、ミゾオゴノリ、ベニオゴノリ、フシクレノリ、カバノリ、オゴノリ、マサゴシバリ目（ワツナギソウ、イソマツ、カイメンソウ、タオヤギソウ、フシツナギ、コスジフシツナギ、フクロツナギ 、ニセイバラノリ、マサゴシバリ）、イギス目（フトイギス、エゴノリ、トゲイギス、ハネイギス、イギス、ハリイギス、ケイギス、カザシグサ、キヌイトカザシグサ、ニクサエダ、サエダ、ベニヒバ、ナガウブゲグサ、ランゲリア、ヤレウスバノリ、スジウスバノリ、カギウスバノリ、タチウスベニ、ハスジギヌ、トゲノリ、ツクシホウズキ、ベンテンモ、ユナ、ヤナギノリ、マクリ、ケハネグサ、クロソゾ、ニッポンソゾ、ウラソゾ、ミツデソゾ、パピラソゾ、ハネソゾ、マギレソゾ、コブソゾ、ジャバラノリ、フジマツモ、ショウジョウケノリ、イソムラサキ、コザネモ）に属する藻類をいう。
【００３３】
このうち、本発明で特に好適に用いることができるのは、ミリン科、スギノリ科、ムカデノリ科、テングサ科、カギケノリ科、カギノリ科に属するものであり、代表的には、ミリン科はミリン、キリンサイ、オオキリンサイ、オカムラキリンサイ、カタメンキリンサイ、トゲキリンサイ、ビャクシンキリンサイ、スギノリ科はスギノリ、コトジツノマタ、ムカデノリ科はヒヂリメン、テングサ科はテングサ、カギケノリ科はアスパラゴプシスアルマタが挙げられる。
【００３４】
緑藻類とは、オオヒゲマワリ目、ヨコワミドロ目、サヤミドロ目、ケトフォラ目、ケトペルティス目、クロレラ目、ミクロタムニオン目、トレボウクシア目、カワノリ目、マミエラ目、モノマスティクス目、ドリコマスティクス目、スミレモ目、ウミイカダモ目、クロロデンドロン目、ドリコマスティクス目、ネフロセルミス目、ヒビミドロ目 （シワランソウモドキ、ランソウモドキ）、アオサ目（ナガアオサ、ボタンアオサ、リボンアオサ、ボウアオノリ、ウスバアオノリ、アナアオサ、アミアオサ、ヤブレグサ）、シオグサ目（ウキオリソウ、タルガタジュズモ、ホソジュズモ、ウスイロジュズモ、フトジュズモ、カイゴロモ、オオシオグサ、カタシオグサ、アサミドリシオグサ、チャシオグサ）、モツレグサ目（シリオミドロ）、ミドリゲ目（アオモグサ、マガタマモ、キッコウグサ、タマバロニア、タマゴバロニア、オオバロニア）、イワヅタ目（ヘライワヅタ、フジノハヅタ、フサイワヅタ、クサビガタハウチワ、イトゲノマユハキ、マユハキモ、ヒメイチョウ）、ミル目（ナンバンハイミル、ヒゲミル、ネザシミル、サキブトミル、ナガミル、ミル、モツレミル、ヒラミル、タマミル、コブシミル、クロミル）、ハネモ目（カタハノハネモ、オオハネモ、ナンカイハネモ）、カサノリ目（ミズタマ、フデノホ、リュウキュウガサ、カサノリ、イソスギナ）などに属する藻類をいう。特に限定はされないが、アオサ目アオサ科ヒメアオノリ属のヒメアオノリ、ホソヒメアオノリ、が代表的に示される。
【００３５】
本発明における弾性線維形成促進作用は、植物エキスに見出されるが、特には、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群に属する植物より選択される少なくとも１種の植物のエキスであることが好ましい。また、特に、マツ科トウヒ属のトウヒ、ミカン科ミカン属のビターオレンジ、タデ科のアイ、アカネ科のアセンヤク、ノウゼンカズラ科のタベブイアインペチギノサ、シソ科のオウゴン、マメ科のカンゾウ、およびクロウメモドキ科のナツメからなる群より選択される少なくとも１種の植物のエキスであることが好ましい。ここで、これらの植物の部位は特に限定はされないが、例えば、ビターオレンジは果皮、アイは葉、カンゾウは根およびナツメは果実の部位からの抽出物が特に好ましく用いられる。
【００３６】
本発明の藻類または植物の抽出物が有している、優れた弾性線維形成促進能とは、ミクロフィブリルの周りにエラスチンが沈着・架橋する工程が促進される能力をいい、その程度は問わず、なんらの処置を施さない場合と比較して、エラスチンの沈着が促進されている状況であればよい。
【００３７】
以下に、本発明の内容を詳細に説明する。
【００３８】
藻類または植物の抽出物は、天然物からの粗抽出液として用いても、また、粗抽出液から分離精製したものを用いてもよい。
【００３９】
藻類または植物の抽出物を得る方法としては、特に限定されず、通常の抽出法が採用される。粗抽出液は、例えば全藻または植物の全体あるいはそれらの特定の部位を裁断機・スライサー・カッター・ピーラーなどで細断したものを、水、熱水あるいは有機溶媒を単独あるいは組み合わせて得られる溶媒を用いて抽出することにより得ることができる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等のアルコール類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類、アセトン等のケトン類、ホルムアルデヒド、ジメチルスルホキシドなどを挙げることができる。
【００４０】
また、溶媒は、室温又は常温の溶媒を用いることもできるが、加熱溶媒や熱溶媒（溶媒を沸点付近に加熱したもの）を用いることもできる。
【００４１】
さらに、酸、アルカリの条件下で抽出する事もできる。酸としては、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、又は、酢酸、クエン酸、シュウ酸、コハク酸、ギ酸、プロピオン酸などの有機酸が挙げられる。アルカリとしては、アルカリ無機塩が好ましく用いられ、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等を例示できる。
【００４２】
また、凍結乾燥粉末化法、高圧法や超高圧法を利用する事も可能である。
【００４３】
粗抽出物の抽出条件の一例を挙げる。抽出溶媒が有機溶媒の場合、溶媒の沸点以下であればよく抽出温度は特に制限はないが、好ましくは１〜１００℃、より好ましくは２０〜１００℃の範囲で、１〜２４時間、好ましくは１時間〜１０時間撹拌しながら行う。また、抽出溶媒が水の場合、抽出時の温度は特に限定されないが、加圧熱水による抽出方法を利用する場合もあるため、約０〜２００℃が好ましく、約２０〜１３０℃がより好ましい。また、反応時間も特に限定するものではないが、好ましくは数秒間〜数日間に設定すれば良く、更に好ましくはい３０分〜６時間に設定すれば良い。
【００４４】
反応温度及び反応時間は、溶媒の種類と濃度により適宜選択すれば良い。
【００４５】
このように抽出されたものであれば、弾性線維形成能を有する成分を十分に抽出することができる。
【００４６】
得られた抽出物を遠心分離してその上清を、抽出液として得る。かかる抽出液に水可溶性、酸性可溶性、アルカリ可溶性、あるいは有機溶媒可溶性の多糖画分が含まれる。
【００４７】
粗抽出物から藻類または植物の抽出物を分離精製する方法としては、例えば、塩化セチルピリジニウムなどの４級アンモニウム塩を添加し、藻類または植物の抽出物を沈殿させ、アルコール溶液で洗浄する方法やＤＥＡＥセルロースなどの陰イオン交換樹脂などを用いたクロマトグラフィーを用いる方法もある。
【００４８】
このように抽出、精製した藻類または植物の抽出物溶液は、そのまま用いることもできる他、稀釈液で希釈したり、濃縮してエキスとして用いることもでき、さらには、凍結乾燥などにより乾燥粉末物としたり、ペースト状に調製して用いることもできる。
【００４９】
本発明では、このように抽出、精製した藻類または植物の抽出物として、そのままの状態で用いることもできるが、有機溶媒が含まれている場合には減圧蒸留等により有機溶媒を除去することが好ましい。また、本発明において、この抽出液は、液状のものを使用してもよいが、必要に応じて、減圧乾燥、凍結乾燥、噴霧乾燥等の乾燥処理を行って液体分を低減又は除去することにより、濃縮液状、半固形状、固形状、又は粉末状にしたものを使用してもよい。
【００５０】
本発明における藻類または植物の抽出物としては、市販品を用いることもできる。例えば、紅藻類の抽出物としては、アスパラゴプシスアルマタ（Asparagopsis armata）の若芽からの細胞抽出物であるPHYKOSIL 2000（EXSYMOL MONAKO製）、アスパラゴプシスアルマタ（Asparagopsis armata）の抽出物であるAsparcid P（EXSYMOL MONAKO製）、トチャカの抽出物であるGELALG（Biotech Marine社製）、ゲリジウムカーチラギネウム（Gelidium cartilagineum）の抽出物であるRHODYSTEROL S/B DICAPRILAT（Biotech Marine社製）、スサビノリの抽出物であるIPF-100K、アルゲフィルター（いづれも一丸ファルコス社製）、緑藻類の抽出物としては、アオサ科のヒメアオノリ（Blidingia minima）からの抽出物であるSAVE MARINE（Biotech Marine社）、植物エキスとしては、ビターオレンジ果皮エキスとマツ科のトウヒエキスを配合したトウヒリキッドＢ（一丸ファルコス株式会社）、タデ科ののアイ葉エキスである藍ルーロス（株式会社林原生物化学研究所）、アカネ科のアセンヤク抽出物であるファルコレックスアセンヤクＢ（一丸ファルコス株式会社）、シソ科のオウゴン、マメ科のカンゾウ根、およびクロウメモドキ科のナツメ果実エキスを配合したプランテージ（ホワイト）（丸善株式会社）などが例示されるがこれに限定はされない。
【００５１】
本発明の藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤は、弾性線維の再生が所望される状態又は疾患、例えば、肺気腫、肺線維症、血管損傷、皮膚弛緩症、創傷、弾性線維劣化（例えば、加齢又は紫外線により引き起こされるもの）、皮膚硬化症、肌荒れ、動脈硬化、大動脈瘤、加齢黄斑変性症、会陰ヘルニア、肛門ヘルニア、脳底動脈瘤、消化管運動障害、褥瘡などの予防、治療又は改善に有用である他、皮膚のたるみやしわの予防や改善といった美容目的のためにも有用である。また、本発明の弾性線維形成促進剤は、弾性線維の再生能を有する細胞の培養用試薬などとしても有用である。さらに、人工皮膚、皮膚モデル、人工血管などの人工組織の作製に役立つ。さらに、十分解明されているとはいえない弾性線維自体の研究への応用も考えられ、非常に広い範囲で有用である。
【００５２】
本発明の弾性線維形成剤は、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品などとして幅広く利用可能な任意の製剤または組成物の形態で提供され得るが、好ましくは、機能性食品または化粧品として利用可能な製剤または組成物である。
【００５３】
本発明の弾性線維活性促進剤を含む組成物が、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品のいずれの形態を取る場合でも、藻類または植物の抽出物の含有量は、乾燥重量に換算して、例えば約０．０００００１〜９９重量％とすればよく、より好ましくは約０．００００１〜３０重量％、更に好ましくは約０．０００１〜１０重量％、特に好ましくは０．００１〜５重量％である。上記範囲であれば、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品の使用で十分な弾性線維形成作用がみられ皮膚の伸縮性の改善または予防効果が得られる。
【００５４】
本発明を医薬品または健康食品の用途に用いる場合の藻類または植物の抽出物の投与量は、成人１日当り、乾燥重量にして、０．０００１〜１０ｇ／ｋｇ、より好ましくは、０．００１〜５０００ｍｇ／ｋｇとすることができる。上記範囲であれば、弾性線維の伸び縮みの機能を必須とする疾患または状態の改善や予防が可能となる。
【００５５】
内服用形態
【００５６】
本発明の有効成分である藻類または植物の抽出物は、薬学的に許容される担体と配合し、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤などの固形製剤;またはシロップ剤、注射剤などの液状製剤として経口または非経口的に投与することもできる。これらの製剤は、常法の添加剤を含んでいても良い。薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤；液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などとして配合される。また必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの製剤添加物を用いることもできる。
【００５７】
賦形剤の好適な例としては、例えばＤ−ソルビトール、マンニトール、キシリトールなどの糖アルコール、ブドウ糖、白糖、乳糖、果糖などの糖類、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、リン酸水素カルシウム、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、デキストリン、β−シクロデキストリン、軽質無水ケイ酸、酸化チタン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、タルク、カオリンなどが挙げられる。
【００５８】
結合剤の好適な例としては、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのセルロース誘導体、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、アクリル酸系高分子、ゼラチン、アラビアゴム、プルラン、アルファー化デンプン、カンテン、トラガント、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸プロピレングリコールエステルなどが挙げられる。
【００５９】
崩壊剤の好適な例としては、例えばデンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルスターチ、部分アルファー化デンプンなどが挙げられる。溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油などが挙げられる。
【００６０】
滑沢剤の好適な例としては、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸ポリオキシル、セタノール、タルク、硬化油、ショ糖脂肪酸エステル、ジメチルポリシロキサン、ミツロウ、サラシミツロウなどが挙げられる。
【００６１】
溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。懸濁化剤の好適な例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤;例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子などが挙げられる。
【００６２】
等張化剤の好適な例としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトールなどが挙げられる。緩衝剤の好適な例としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。無痛化剤の好適な例としては、例えばベンジルアルコールなどが挙げられる。防腐剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。抗酸化剤の好適な例としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸などが挙げられる。
【００６３】
本発明の液状製剤または固形製剤を製造する方法としては、藻類または植物の抽出物を製剤原料と混合して液状製剤または固形製剤を製造する工程を含むものであれば特に限定はなく、公知の方法を使用することができる。
【００６４】
固形製剤調製例：
例えば、藻類または植物の抽出物と製剤原料を含む製剤組成物を練合し、スクリーンを通過させることで成型する押出造粒物を、粉砕し、整粒する方法、前記製剤組成物に練合水を加えバーチカルグラニュレーターによって成型する攪拌造粒の後に、コーミルを用いて粉砕・篩過する方法、及び前記製剤組成物をローラーコンパクターで圧縮した後、ロールグラニュレーターで粉砕し篩過する方法、撹拌造粒の後に、流動層乾燥する方法が例示される。
【００６５】
また、例えば、直打により製造する場合には、藻類または植物の抽出物と製剤原料を含む製剤組成物を混合した後、直接、打錠機に投入して打錠すればよい。
【００６６】
皮膚外用剤形態
【００６７】
本発明の藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤は、化粧料又は医薬部外品の外用剤形態として公知の形態を採ることができる。このような形態として、例えば、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、リニメント剤、ローション剤、エアゾール剤、パウダー剤、パップ剤、不織布等のシートに薬液を含浸させたシート剤、リップスティックのようなスティック剤などが挙げられる。中でも、好ましくは、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、ローション剤、ゲル剤の形態で用いられる。かかる形態とすることにより、弾性線維形成効果を十分に発揮することができる。皮膚外用剤には、藻類または植物の抽出物に加えて、本発明の効果を損なわない範囲で、外皮用剤(化粧料、医薬部外品、医薬品）に添加される公知の添加剤、例えば、界面活性剤、油分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、保存剤（防腐剤）、酸化防止剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、分散剤、香料、着色剤、色素、パール光沢付与剤、血行促進成分、保湿成分、紫外線吸収成分、紫外線散乱成分、洗浄成分、抗菌成分、収斂成分、ビタミン類、アミノ酸類、老化防止成分、抗炎症成分、美白成分、角質柔軟成分、細胞賦活化成分、水等を配合することができる。添加剤は、１種を単独で、又は２種以上を組み合わせて使用できる。
【００６８】
また、化粧料組成物の具体的な用途は特に限定されず、化粧水、乳液、クリーム、美容液、日焼け止め用化粧料、パック、ハンドクリーム、ボディローション、ボディークリームのような基礎化粧料；洗顔料、メイク落とし、ボディーシャンプー、シャンプー、リンスのような洗浄用化粧料；ファンデーション、化粧下地、リップクリーム、口紅、チークカラーのようなメークアップ化粧料；入浴剤などが挙げられる。
【００６９】
基剤又は担体としては、流動パラフィン、スクワラン、ゲル化炭化水素（プラスチベースなど）、オゾケライト、α−オレフィンオリゴマー、軽質流動パラフィンのような炭化水素；メチルポリシロキサン、架橋型メチルポリシロキサン、高重合メチルポリシロキサン、環状シリコーン、アルキル変性シリコーン、架橋型アルキル変性シリコーン、アミノ変性シリコーン、ポリエーテル変性シリコーン、ポリグリセリン変性シリコーン、架橋型ポリエーテル変性シリコーン、架橋型アルキルポリエーテル変性シリコーン、シリコーン・アルキル鎖共変性ポリエーテル変性シリコーン、シリコーン・アルキル鎖共変性ポリグリセリン変性シリコーン、ポリエーテル変性分岐シリコーン、ポリグリセリン変性分岐シリコーン、アクリルシリコン、フェニル変性シリコーン、シリコーンレジンのようなシリコーン油；エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースのようなセルロース誘導体；ポリビニルピロリドン；カラギーナン；ポリビニルブチラート；ポリエチレングリコール；ジオキサン；ブチレングリコールアジピン酸ポリエステル；ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、パルミチン酸セチル、イソノナン酸イソノニル、テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリットのようなエステル類；デキストリン、マルトデキストリンのような多糖類；エタノール、イソプロパノールのような低級アルコール；エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノプロピルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノプロピルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノプロピルエーテル、ジプロピレングリコールモノエチルエーテル、ジプロピレングリコールモノプロピルエーテルのようなグリコールエーテル；ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、グリセリン、イソプレングリコールなどの多価アルコール；水などの水系基剤などが挙げられる。
【００７０】
基剤又は担体は、１種を単独で、又は２種以上を組み合わせて使用できる。
【００７１】
酸化防止剤としては、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、ソルビン酸、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、エリソルビン酸、Ｌ−システイン塩酸塩などが挙げられる。
【００７２】
界面活性剤としては、例えば、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ペンタ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン、テトラ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタンのようなソルビタン脂肪酸エステル類；モノステアリン酸プロピレングリコールのようなプロピレングリコール脂肪酸エステル類；ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油４０（ＨＣＯ−４０）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０（ＨＣＯ−５０）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０（ＨＣＯ−６０）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油８０などの硬化ヒマシ油誘導体；モノラウリル酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン（ポリソルベート２０）、モノステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン（ポリソルベート６０）、モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン（ポリソルベート８０）、イソステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンのようなポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類；ポリオキシエチレンモノヤシ油脂肪酸グリセリル；グリセリンアルキルエーテル；アルキルグルコシド；ポリオキシエチレンセチルエーテルのようなポリオキシアルキレンアルキルエーテル；ステアリルアミン、オレイルアミンのようなアミン類；ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体、ラウリルＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコン、ＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコンのようなシリコーン系界面活性剤などが挙げられる。
【００７３】
増粘剤としては、例えば、グアーガム、ローカストビーンガム、カラギーナン、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸メタクリル酸アルキル共重合体、ポリエチレングリコール、ベントナイト、（アクリル酸ヒドロキシエチル／アクリロイルジメチルタウリンＮａ）コポリマー、（アクリロイルジメチルタウリンアンモニウム／ビニルピロリドン）コポリマーなどが挙げられる。
【００７４】
保存剤としては、安息香酸、安息香酸ナトリウム、デヒドロ酢酸、デヒドロ酢酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸イソブチル、パラオキシ安息香酸イソプロピル、パラオキシ安息香酸ブチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ベンジル、パラオキシ安息香酸メチル、フェノキシエタノールなどが挙げられる。
【００７５】
ｐＨ調整剤としては、無機酸（塩酸、硫酸など）、有機酸（乳酸、乳酸ナトリウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム、コハク酸、コハク酸ナトリウムなど）、無機塩基（水酸化カリウム、水酸化ナトリウムなど）、有機塩基（トリエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、トリイソプロパノールアミンなど）などが挙げられる。
キレート剤としては、ＥＤＴＡ・２ナトリウム塩、ＥＤＴＡ・カルシウム・２ナトリウム塩などが挙げられる。
【００７６】
安定化剤としては、ポリアクリル酸ナトリウム、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソールなどが挙げられる。
【００７７】
添加剤は１種を単独で又は２種以上を組み合わせて使用できる。
【００７８】
本発明の外用組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、その他の有効成分を含むことができる。有効成分の具体例としては、例えば、保湿成分、抗炎症成分、抗菌成分、ビタミン類、ペプチド又はその誘導体、アミノ酸又はその誘導体、細胞賦活化成分、老化防止成分、血行促進成分などが挙げられる。
【００７９】
保湿成分としては、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ジグリセリントレハロースのような多価アルコール；ヒアルロン酸ナトリウム、ヘパリン類似物質、コンドロイチン硫酸ナトリウム、コラーゲン、エラスチン、ケラチン、キチン、キトサンのような高分子化合物；グリシン、アスパラギン酸、アルギニンのようなアミノ酸；乳酸ナトリウム、尿素、ピロリドンカルボン酸ナトリウムのような天然保湿因子；セラミド、コレステロール、リン脂質のような脂質；カミツレエキス、ハマメリスエキス、チャエキス、シソエキスのような植物抽出エキスなどが挙げられる。
【００８０】
抗菌成分としては、クロルヘキシジン、サリチル酸、塩化ベンザルコニウム、アクリノール、エタノール、塩化ベンゼトニウム、クレゾール、グルコン酸及びその誘導体、ポピドンヨード、ヨウ化カリウム、ヨウ素、イソプロピルメチルフェノール、トリクロカルバン、トリクロサン、感光素101号、感光素201号、パラベン、フェノキシエタノール、１，２-ペンタンジオール、塩酸アルキルジアミノグリシン等が挙げられる。
【００８１】
ビタミン類としては、ｄｌ−α−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロールカルシウム等のビタミンＥ類；リボフラビン、フラビンモノヌクレオチド、フラビンアデニンジヌクレオチド、リボフラビン酪酸エステル、リボフラビンテトラ酪酸エステル、リボフラビン５’−リン酸エステルナトリウム、リボフラビンテトラニコチン酸エステル等のビタミンＢ２類；ニコチン酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸ベンジル、ニコチン酸メチル、ニコチン酸β−ブトキシエチル、ニコチン酸１−（４−メチルフェニル）エチル等のニコチン酸類；アスコルビゲン−Ａ、アスコルビン酸ステアリン酸エステル、アスコルビン酸パルミチン酸エステル、ジパルミチン酸Ｌ−アスコルビルなどのビタミンＣ類；メチルヘスペリジン、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロールなどのビタミンＤ類；フィロキノン、ファルノキノン等のビタミンＫ類、γ−オリザノール、ジベンゾイルチアミン、ジベンゾイルチアミン塩酸塩；チアミン塩酸塩、チアミンセチル塩酸塩、チアミンチオシアン酸塩、チアミンラウリル塩酸塩、チアミン硝酸塩、チアミンモノリン酸塩、チアミンリジン塩、チアミントリリン酸塩、チアミンモノリン酸エステルリン酸塩、チアミンモノリン酸エステル、チアミンジリン酸エステル、チアミンジリン酸エステル塩酸塩、チアミントリリン酸エステル、チアミントリリン酸エステルモノリン酸塩等のビタミンＢ１類；塩酸ピリドキシン、酢酸ピリドキシン、塩酸ピリドキサール、５’−リン酸ピリドキサール、塩酸ピリドキサミン等のビタミンＢ６類；シアノコバラミン、ヒドロキソコバラミン、デオキシアデノシルコバラミン等のビタミンＢ１２類；葉酸、プテロイルグルタミン酸等の葉酸類；ニコチン酸、ニコチン酸アミドなどのニコチン酸類；パントテン酸、パントテン酸カルシウム、パントテニルアルコール（パンテノール）、Ｄ−パンテサイン、Ｄ−パンテチン、補酵素Ａ、パントテニルエチルエーテル等のパントテン酸類；ビオチン、ビオチシン等のビオチン類；アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、デヒドロアスコルビン酸、アスコルビン酸リン酸エステルナトリウム、アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム等のアスコルビン酸誘導体であるビタミンＣ類；カルニチン、フェルラ酸、α−リポ酸、オロット酸等のビタミン様作用因子などが挙げられる。
【００８２】
ペプチド又はその誘導体としては、ケラチン分解ペプチド、加水分解ケラチン、コラーゲン、魚由来コラーゲン、アテロコラーゲン、ゼラチン、エラスチン、エラスチン分解ペプチド、コラーゲン分解ペプチド、加水分解コラーゲン、塩化ヒドロキシプロピルアンモニウム加水分解コラーゲン、エラスチン分解ペプチド、コンキオリン分解ペプチド、加水分解コンキオリン、シルク蛋白分解ペプチド、加水分解シルク、ラウロイル加水分解シルクナトリウム、大豆蛋白分解ペプチド、加水分解大豆蛋白、小麦蛋白、小麦蛋白分解ペプチド、加水分解小麦蛋白、カゼイン分解ペプチド、アシル化ペプチド（パルミトイルオリゴペプチド、パルミトイルペンタペプチド、パルミトイルテトラペプチド等）などが挙げられる。
【００８３】
アミノ酸又はその誘導体としては、ベタイン（トリメチルグリシン）、プロリン、ヒドロキシプロリン、アルギニン、リジン、セリン、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、β−アラニン、スレオニン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、メチオニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、ヒスチジン、タウリン、γ−アミノ酪酸、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、カルニチン、カルノシン、クレアチン等が挙げられる。
【００８４】
本発明の弾性線維形成促進剤は、植込錠及びマイクロカプセルに封入された送達システムなどの徐放性製剤として用いることもできる。この徐放性製剤は、体内から速やかに除去されることを防止できるような、薬剤的に受容可能な公知の担体を用いて調製し得る。具体的には、例えば、エチレンビニル酢酸塩、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸などの生物分解性または生物適合性ポリマーを用いることができる。これらのポリマーは公知であり、常法に基づき、当業者によって容易に調製することができる。あるいは、薬剤的に受容可能な他の担体として、リポソームの懸濁液なども使用することができる。上記リポソームは特に限定されず、ホスファチジルコリン、コレステロール及びＰＥＧ誘導ホスファチジルエタノール（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物などが挙げられる。これは、使用に適したサイズになるように、適当なポアサイズのフィルターを通して調製した後、逆相蒸発法によって精製して得られる。
【００８５】
食品
【００８６】
本発明の藻類または植物の抽出物を含有する弾性線維形成促進剤は、食品または機能性食品に含有させて提供され得る。このような食品または機能性食品としては、米飯；そば、うどん、はるさめ、中華麺、即席麺、カップ麺を含む各種の麺類；清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、スポーツ飲料等の飲料；カレールー、シチュー、各種スープ類；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；飴、クッキー、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、その他の焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、はんぺん、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、ドレッシング、味噌、醤油、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、ふりかけ、漬物；その他種々の形態の健康・栄養補助食品などが例示される。
【００８７】
さらには、本発明の弾性線維形成剤を含有するサプリメント（散在、顆粒剤、ソフトカプセル、ハードカプセル、錠剤、チュアブル錠、速崩錠、シロップ、液剤等）を調製してもよい。
【００８８】
また、ペットなどの動物用の餌に対して本発明の弾性線維形成剤を含有させることもできる。
【００８９】
食品には、必要に応じて、添加物が加えられる。このような添加物としては、例えばブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、マンニット、デキストリン、クエン酸、クエン酸ソーダ、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＣ、ビタミンＢ類、ビタミンＥ、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、界面活性剤、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
【００９０】
本発明の弾性線維形成促進剤を用いて、人工弾性線維をインビトロで作成すること、弾性線維の研究への応用に用いることも可能である。本発明の弾性線維形成促進剤を用いて、インビトロで弾性線維を形成させ、人工弾性線維の培養用試薬、人工皮膚、皮膚モデル、人工血管などの人工組織の作製に用いることもできる。このようなインビトロでの研究や実施への応用に用いる場合、藻類または植物の抽出物をそのままの形で用いることも好ましい。
【００９１】
本発明の弾性線維形成促進剤は、さらに、ＤＡＮＣＥ発現増強因子（ＤＡＮＣＥ誘導因子）を含んでいてもよい。ＤＡＮＣＥ発現増強因子を用いることができ、例えば、ナンテンカズラエキス、シカクマメエキス、フィチン酸及びその生理学的に許容される塩、並びにＬ−ヒドロキシプロリン及びその生理学的に許容される塩等のＤＡＮＣＥ発現増強因子；ＤＡＮＣＥ発現ベクター、またはＤＡＮＣＥ誘導因子発現ベクターなどが挙げられる。
【実施例】
【００９２】
次に、試験例、実施例等により本発明を具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００９３】
〔製造例１〕（通常の紅藻類抽出物の抽出）
紅藻類の抽出物は、市販のPHYＫOSIL 2000 (EXSYMOL MONAKO製、カギケノリ科紅藻の抽出物）をそのまま用いた。試験例１で示す培養液を利用して添加後の最終濃度が培養液全体の０．００１重量％になるように調製した。
【００９４】
〔製造例２〕（通常の紅藻類抽出物の抽出）
紅藻類の抽出物として、市販品Asparcid P（EXSYMOL MONAKO製、カギケノリ科紅藻の抽出物；アスパラゴシプシアルマタ（asparagopsis armata））をそのまま用いた。試験例１で示す培養液を利用して添加後の最終濃度が０．００１重量％になるように調製した。
【００９５】
〔製造例３〕（通常の緑藻類抽出物の抽出）
緑藻類の抽出物として、市販品ＳＡＶＥ ＭＡＲＩＮＥ（Biotech Marine社、緑藻抽出物；アオサ目ヒメアオノリ属のヒメアオノリ）をそのまま用いた。試験例１で示す培養液を利用して添加後の最終濃度が０．００１重量％になるように調製した。
【００９６】
〔製造例４〕（藻類および植物の抽出物）
表１に示す市販の製品を使って、同様に、弾性線維形成能を測定するために、各種の抽出物を調製した。
【表１】
【００９７】
〔試験例１〕（弾性線維形成促進の評価試験）
無血清下での実験
２４ウエルプレートの底にＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅ Ｃｏｖｅｒ Ｇｌａｓｓ（Ｆｉｓｈｅｒｂｒａｎｄから購入）を置き、その上に皮膚線維芽細胞を１ウエルあたり７．５×１０4個播種し、継代用培地（ＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから購入）、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ、ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅから購入）、２ｍＭのグルタミン、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬのペニシリン、１００ｇ／ｍＬのストレプトマイシン）にて３７℃、５％ＣＯ2で培養した。さらに、血清を含まない弾性線維形成培地、すなわち、ＤＭＥＭ／Ｆ１２、２ｍＭのグルタミン、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬのペニシリン、１００ｇ／ｍＬのストレプトマイシンを用い、ヒト線維芽細胞を１ウエルあたり７．５×１０4個播種し、この無血清培地に、製造例１から４までの調製物をそれぞれ、培養物全体の０．００１重量％になるように加えて、あるいは加えないで、３７℃、５％ＣＯ2で4週間培養した。4週間の培養後、弾性線維の蛍光免疫染色を行なった。詳細には、１ｍＬのＰＢＳを用いて３回洗浄した後、１００％メタノールを用い、−２０℃で２０分間固定した。更にＰＢＳを用いて洗浄した後、２％ＢＳＡを含むＰＢＳを用い、室温で1時間ブロッキングした後、１次抗体として抗エラスチンポリクローナル抗体（Ｅｌａｓｔｉｎ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｏｍｐａｎｙから購入）を用い、２次抗体としてＡｌｅｘａ４８８−抗ウサギＩｇＧ抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから購入）を用いた。１次抗体と室温で１時間以上インキュベートした後、ＰＢＳで洗浄し、上記の２次抗体と室温で１時間インキュベートした。ＰＢＳで洗浄した後、４％パラホルムアルデヒドを用いて室温で１０分間固定し、再びＰＢＳで洗浄した後、Hoechst33258(Dojindoから購入)を用いて室温で5分間反応させ、再びPBSで洗浄した後、Aqua Poly/Mount(Poluscienceから購入)にてスライドガラス上にサンプルをマウントした。観察は蛍光顕微鏡IX71（Olympus）を用いて行った。その結果を図１〜図５に示す。
【００９８】
図1および図３は、弾性線維であるエラスチンを蛍光染色したものである。本蛍光染色法ではエラスチンに加えて細胞質も同時に染色されるためコントロールでは斑点状の蛍光発色が認められるが、これは細胞質を染色したものでありエラスチンを染色したものではない。一方、紅藻類の抽出または緑藻類の抽出物では、コントロール同様に細胞質は斑点状に染色されるが、写真全面に著明な線維状の蛍光染色が確認された。このことから紅藻類の抽出または緑藻類の抽出物には、著明な弾性線維、すなわちエラスチン線維形成促進効果が確認された。紅藻類の抽出、緑藻類の抽出物およびコントロールの細胞数に変化がないことは確認済みである。
【００９９】
さらに、蛍光量を数値化する為に、Image J(数値化に用いた画像ソフト)を用いた。その結果を図２、図４、および図５に示す。
【０１００】
製造例１で得た抽出物および製造例２で得た抽出物は、優れた弾性線維形成促進作用を有していることが示された。また、製造例３で得た抽出物を用いた場合、製造例１および２ほどの線維形成は見られなかったものの、コントロールと比較して、明らかにエラスチン沈着が進んでいることが見られる。このことは弾性線維（エラスチン線維）形成が促進している事を示している。
【０１０１】
〔組成物調製例１〕
化粧料組成物
以下の化粧料組成物の実施例中の数値の単位は「重量％」である。
【０１０２】
【表２】
【０１０３】
【表３】
【０１０４】
[組成物調製例２]
内服組成物
以下の食品組成物の処方例において、藻類または植物の抽出物の重量は乾燥重量である。
食品組成物の全処方において、藻類または植物の抽出物としては、エタノール抽出物が好ましい。
【０１０５】
【表４】
【０１０６】
この飲料は、１日３回の食事毎に１本摂取される。
【０１０７】
【表５】
【０１０８】
この錠剤は、１日３回の食事毎に３錠摂取される。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
藻類や植物を抽出したエキスの使用は、最近の天然志向の高まりにより、石油系合成成分に代わるとして好まれる傾向にある。そして、天然物の抽出物は、その様々な生理活性が研究され、応用されている。
【０００３】
褐藻類、紅藻類、緑藻類などの藻類の抽出成分には、藻類特有の有効成分である、粘質多糖類、ミネラル、ビタミン等が豊富に含まれている。粘質多糖には、アルギン酸、カラギーナン、寒天などがあり、食物繊維としての作用や特定の生理活性があることが知られている。
【０００４】
例えば、紅藻類のマクリに、エラスターゼ阻害作用が見出されたことが報告されている他（特許文献１）、褐藻類および紅藻類由来の多糖類に、組織・細胞の障害を予防し及び／又は修復する機能があることが示されている（特許文献２）。
【０００５】
さらには、褐藻類、紅藻類、および緑藻類などから得られる海藻抽出物が、美白効果を有し、肌に対してシミ、ソバカスを軽減し、乾燥肌や湿疹・肌荒れの改善、更に、肌にツヤ・張りも与えることができることも示されている（特許文献３）。
【０００６】
また、特に紅藻類のカギケノリ科のアスパラゴプシス アルマタの抽出物は、細胞賦活、抗炎症作用、抗菌作用の３種の機能を有すること（特許文献４）、真皮線維芽細胞におけるコラーゲン産生促進作用があることが知られている（特許文献５および６）。
【０００７】
一方、植物エキスにも、各種ビタミン類、ミネラル類、糖類、油脂成分等が含まれ、各種の生理活性が知られている。その例としては、センブリ抽出物、チンピ抽出物、アーモンド抽出物、ニンジン抽出物、エンドウ抽出物、ユキノシタ抽出物、クワ抽出物等に含まれる、メラニン産生抑制作用、抗炎症作用、抗アレルギー作用、抗酸化作用等の生理活性（特許文献７）、ハマウツボ科の植物から抽出されたエラスターゼ阻害剤（特許文献８）などが挙げられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００９−０４６４２８号公報
【特許文献２】特開２００８−２７３９１９号公報
【特許文献３】特開２００１−１３９４１９号公報
【特許文献４】特開２００９−１９６９６９号公報
【特許文献５】特開平１０−３３０２８０号公報
【特許文献６】特開平１０−３３０２８１号公報
【特許文献７】特開２００２−２９３７４７号公報
【特許文献８】特開２００９−２６３２７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
これまで解明されていない藻類または植物の抽出物の新たな生理活性を見出し、適合する用途を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは前記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、藻類または植物の抽出物に弾性線維形成促進能があることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
即ち本発明は、藻類または植物の抽出物を有効成分として含有する弾性線維形成促進剤、に関する。
【００１２】
上記藻類は、紅藻類および／または緑藻類であることが好ましい。
【００１３】
上記弾性線維形成促進剤において、上記紅藻類は、アクロカエティウム目、チノリモ目 、ウシケノリ目、ウミゾウメン目、エリスロペルティス目、オオイシソウ目、カクレイト目、サンゴモ目、ダルス目、テングサ目、ロドゴルゴン目、ベニマダラ目、カギノリ目、カギケノリ目、カワモズク目、 スギノリ目、オゴノリ目、マサゴシバリ目、イタニグサ目 およびイギス目に属する藻類からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１４】
上記弾性線維形成促進剤において、上記紅藻類は、ミリン科、スギノリ科、ムカデノリ科、テングサ科、カギケノリ科、およびカギノリ科からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１５】
上記弾性線維形成促進剤において、上記紅藻類は、キリンサイ、スギノリ、コトジツノマタ、ヒヂリメン、テングサ、およびアスパラゴプシスからなる群より選択される少なくとも1種であり得る。
【００１６】
上記弾性線維形成促進剤において、上記緑藻類が、オオヒゲマワリ目、ヨコワミドロ目、サヤミドロ目、ケトフォラ目、ケトペルティス目、ヒビミドロ目、アオサ目、シオグサ目、モツレグサ目、クロレラ目、ミクロタムニオン目、トレボウクシア目、カワノリ目、マミエラ目、モノマスティクス目、ドリコマスティクス目、ミドリゲ目、イワヅタ目、スミレモ目、ウミイカダモ目、ミル目、ハネモ目、クロロデンドロン目、ドリコマスティクス目、ネフロセルミス目およびカサノリ目からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１７】
上記弾性線維形成促進剤において、上記緑藻類が、アオサ目アオサ科のヒメアオノリ、ホソヒメアオノリからなる群より選択される少なくとも1種であり得る。
【００１８】
上記弾性線維形成促進剤において、植物エキスに見出されるが、特には、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群に属する植物からなる群より選択される少なくとも１種であり得る。
【００１９】
本発明はまた、上記いずれかの弾性線維形成促進剤を含有する、弾性線維形成促進用組成物、に関する。
【００２０】
上記弾性線維形成促進用組成物は、化粧料であり得る。
【００２１】
上記弾性線維形成促進用組成物は、食品であり得る。
【発明の効果】
【００２２】
本発明により、藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤が提供される。さらには、このような弾性線維形成促進剤を含有する弾性線維形成用組成物であって、化粧料あるいは食品が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】培養細胞を用いたインビトロでの評価において、種類の異なる紅藻類の抽出物 または緑藻類の抽出物を含有する弾性線維形成促進剤の効果を、コントロール（上左端）と比較して、蛍光発色によって示した写真である。
【図２】図１の写真におけるそれぞれのサンプルの蛍光量を数量化したグラフである。
【図３】植物のアセンヤクエキスを含有する弾性線維形成促進剤の効果（右）を、コントロール（左）と比較して、蛍光発色によって示した写真である。
【図４】図３の写真におけるそれぞれのサンプルの蛍光量を数量化したグラフである。
【図５】培養細胞を用いたインビトロでの評価において、種類の異なる藻類の抽出物または植物の抽出物を含有する弾性線維形成促進剤の効果を、コントロールと比較して、蛍光発色の量を数量化したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
肌、血管、肺などの特定の臓器、靱帯などにおける弾力向上又は維持は、細胞だけでなく、細胞外マトリクスを合わせた組織構成によって保たれている。細胞は、伸縮など外部強度に弱いため、細胞の回りに細胞外マトリックスを形成して、組織の形状を保っている。細胞外マトリクスとしては、コラーゲン線維、グリコサミノグリカン（ヒアルロン酸、ケラタン硫酸、へパラン硫酸、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸など）、弾性線維（エラスチン線維）などがある。コラーゲン線維やグリコサミノグリカンは外部強度に対して伸び縮みができないが、弾性線維は引き延ばしても元に戻る特性、すなわち弾性を有しており、伸び縮みの機能が必須である動脈，肺、皮膚の組織には弾性線維は重要な因子である。弾性線維は、ミクロフィブリルという線維の周りにエラスチンが沈着・架橋してできると考えられている。
【００２５】
弾性線維のターンオーバーは非常に遅いため、加齢等によって弾性線維が劣化・断裂した結果、または炎症細胞から分泌されるプロテアーゼ等の外的要因によって弾性線維が劣化・断裂した結果、皮膚のたるみ、動脈硬化、肺が無理に引き延ばされたことに起因する肺気腫などが発生する。動脈においては、弾性線維は太い動脈の質量の半分程度を占めており、脈圧（収縮期圧−拡張期圧）を吸収している。弾性線維の機能が低下すると、動脈は硬い管となって脈圧が上昇する。脈圧の上昇は心疾患の予後を悪化させることがわかっている。
【００２６】
弾性線維の再生が所望される状態又は疾患は、肺気腫、血管損傷、皮膚弛緩症、創傷、弾性線維劣化（例えば、加齢又は紫外線により引き起こされるもの、皮膚のたるみ）、肌荒れ、動脈硬化、大動脈瘤、加齢黄斑変性症、会陰ヘルニア、肛門ヘルニア、脳底動脈瘤、消化管運動障害、褥瘡などがあり、本願発明の弾性線維形成促進剤によって、弾性線維の伸び縮みの機能が必須である疾患または状態の改善や予防が可能となる。
【００２７】
本発明でいう弾性線維形成促進能とは、ミクロフィブリルの周りにエラスチンが沈着・架橋する工程が促進される能力をいい、その程度は問わず、処置を施さない場合と比較して、エラスチンの沈着がある程度でも促進されている状況であればよい。
【００２８】
本発明においては、このような弾性線維を形成することを促進する作用が、藻類または植物の抽出物に見出された。藻類または植物からの抽出物は、1種を単独または2種以上を組み合わせて使用しても良い。このような藻類または植物としては、限定されず、また、抽出物とは、有効成分の弾性線維形成促進作用が損なわれない限り、藻類または植物からの水可溶性成分、酸可溶性成分、アルカリ可溶性成分、有機溶媒可溶性成分などをいう。
【００２９】
本発明においては、このような弾性線維を形成することを促進する作用を有する成分としては、藻類の抽出物から抽出されるのもあれば特に限定はない。例えば、紅藻類の抽出物中に含まれるカラギーナン、ケイ素が含まれていてもよい。
【００３０】
カラギーナンは、カラギナン、カラゲナン、カラゲニンとも呼ばれ、主としてイバラノリ科、ミリン科、スギノリ科の紅藻類の海藻から抽出して得られる多糖類で、イオタ、カッパならびにラムダの三種類に大別される。イオタタイプカラギーナンは流動性のある粘性を持ち、弾力のある弱いゲルを形成し、カッパタイプカラギーナンは硬く脆いゲルを形成し、ラムダタイプカラギーナンは冷水可溶にて粘調な水溶液となり、ゲル化能力はない。本発明で用いるカラギーナンは、イオタタイプ、ラムダタイプ、あるいはカッパタイプのいずれのカラギーナンでも好適に使用できる。本発明において、カラギーナンを用いる場合には、紅藻類等から抽出した粗抽出物そのままでも、更にそれを精製処理したものでも良く、合成によって得られたものでも良い。ここでカラギーナンの抽出法も前記海藻類抽出物の調製方法と同様でよい。カラギーナンの主な成分は、直鎖含硫黄多糖類の一種で、D-ガラクトース（もしくは 3,6-アンヒドロ-D-ガラクトース）と硫酸から構成される陰イオン性高分子化合物である。
【００３１】
ある態様においては、本発明の弾性線維形成促進剤は、例えば藻類に豊富に含まれるケイ素などのミネラルを有効成分の１つとして含有する。ケイ素は、骨、関節、血管、皮膚、毛髪、歯、爪などに多く含まれ、生命維持に不可欠な必須微量元素である。人体の組織内に存在するコラーゲンを強くする役割も有し、さらに、骨の形成の初期段階で、カルシウムのコラーゲン沈着を助け、骨を強くする作用も有する。ケイ素が減少すると、骨や爪がもろくなったり、血管に脂肪がつきやすくなるとの報告もある。
【００３２】
本発明でいう藻類は、特には、紅藻類または緑藻類をいい、これらの紅藻類または緑藻類の抽出物は、紅藻類または緑藻類から、通常の方法で抽出されるエキスをいう。ここで、紅藻類とは、例えば、アクロカエティウム目、チノリモ目、エリスロペルティス目、オオイシソウ目、ダルス目、ロドゴルゴン目、カギノリ目、カワモズク目、イタニグサ目、ウシケノリ目（ウシケノリ、フノリノウシゲ）、ウミゾウメン目（カモガシラノリ、ヒラガラガラ、フサノリ、ヒラフサノリ、ニセフサノリ、ガラガラ、ベニモヅク、ウミゾウメン）、カクレイト目（ムカデノリ）、サンゴモ目（エゾシコロ、モカサ、オオシコロ）、テングサ目（ユイキリ、シマテングサ、マクサ、オニクサ、オオブサ、オバクサ、ヒラクサ）、ベニマダラ目（ベニマダラ）、カギケノリ目（カギケノリ、タマイタダキ）、スギノリ目（イソダンツウ、ナミイワタケ、アカバ、ミチガエソウ、ハナフノリ、フクロフノリ、カイノリ、シキンノリ、スギノリ、コトジツノマタ、オオバツノマタ、ツノマタ、イボツノマタ、アカバギンナンソウ、イトフノリ、ヒロハノカクレイト、キントキ、フシキントキ、ムカデノリ、ニクムカデ、ウツロムカデ、ヒトツマツ、カタノリ、ナガキントキ、タンバノリ、フダラク、ヒラムカデ、ヒラキントキ、スジムカデ、オオバキントキ、ヒヂリメン、ツルツル、マツノリ、キョウノヒモ、マタボウ、コメノリ、ツノムカデ、トサカマツ、イバラノリ、コヒモイバラ、ホシガタイバラ、スジイバラノリ、カヅノイバラ、カギイバラノリ、サイダイバラ、タチイバラ、ヒロハノトサカモドキ、ホソバノトサカモドキ、ウスギヌ、イカノアシ、エツキイワノカワ、キジノオ、サイミ、オキツノリ、ハリガネ、ハスジグサ、マキユカリ、ユカリ、ホソバナミノハナ、ナミノハナ、アツバノリ、ベニスナゴ、トサカノリ、ミリン）、オゴノリ目（シラモ、ミゾオゴノリ、ベニオゴノリ、フシクレノリ、カバノリ、オゴノリ、マサゴシバリ目（ワツナギソウ、イソマツ、カイメンソウ、タオヤギソウ、フシツナギ、コスジフシツナギ、フクロツナギ 、ニセイバラノリ、マサゴシバリ）、イギス目（フトイギス、エゴノリ、トゲイギス、ハネイギス、イギス、ハリイギス、ケイギス、カザシグサ、キヌイトカザシグサ、ニクサエダ、サエダ、ベニヒバ、ナガウブゲグサ、ランゲリア、ヤレウスバノリ、スジウスバノリ、カギウスバノリ、タチウスベニ、ハスジギヌ、トゲノリ、ツクシホウズキ、ベンテンモ、ユナ、ヤナギノリ、マクリ、ケハネグサ、クロソゾ、ニッポンソゾ、ウラソゾ、ミツデソゾ、パピラソゾ、ハネソゾ、マギレソゾ、コブソゾ、ジャバラノリ、フジマツモ、ショウジョウケノリ、イソムラサキ、コザネモ）に属する藻類をいう。
【００３３】
このうち、本発明で特に好適に用いることができるのは、ミリン科、スギノリ科、ムカデノリ科、テングサ科、カギケノリ科、カギノリ科に属するものであり、代表的には、ミリン科はミリン、キリンサイ、オオキリンサイ、オカムラキリンサイ、カタメンキリンサイ、トゲキリンサイ、ビャクシンキリンサイ、スギノリ科はスギノリ、コトジツノマタ、ムカデノリ科はヒヂリメン、テングサ科はテングサ、カギケノリ科はアスパラゴプシスアルマタが挙げられる。
【００３４】
緑藻類とは、オオヒゲマワリ目、ヨコワミドロ目、サヤミドロ目、ケトフォラ目、ケトペルティス目、クロレラ目、ミクロタムニオン目、トレボウクシア目、カワノリ目、マミエラ目、モノマスティクス目、ドリコマスティクス目、スミレモ目、ウミイカダモ目、クロロデンドロン目、ドリコマスティクス目、ネフロセルミス目、ヒビミドロ目 （シワランソウモドキ、ランソウモドキ）、アオサ目（ナガアオサ、ボタンアオサ、リボンアオサ、ボウアオノリ、ウスバアオノリ、アナアオサ、アミアオサ、ヤブレグサ）、シオグサ目（ウキオリソウ、タルガタジュズモ、ホソジュズモ、ウスイロジュズモ、フトジュズモ、カイゴロモ、オオシオグサ、カタシオグサ、アサミドリシオグサ、チャシオグサ）、モツレグサ目（シリオミドロ）、ミドリゲ目（アオモグサ、マガタマモ、キッコウグサ、タマバロニア、タマゴバロニア、オオバロニア）、イワヅタ目（ヘライワヅタ、フジノハヅタ、フサイワヅタ、クサビガタハウチワ、イトゲノマユハキ、マユハキモ、ヒメイチョウ）、ミル目（ナンバンハイミル、ヒゲミル、ネザシミル、サキブトミル、ナガミル、ミル、モツレミル、ヒラミル、タマミル、コブシミル、クロミル）、ハネモ目（カタハノハネモ、オオハネモ、ナンカイハネモ）、カサノリ目（ミズタマ、フデノホ、リュウキュウガサ、カサノリ、イソスギナ）などに属する藻類をいう。特に限定はされないが、アオサ目アオサ科ヒメアオノリ属のヒメアオノリ、ホソヒメアオノリ、が代表的に示される。
【００３５】
本発明における弾性線維形成促進作用は、植物エキスに見出されるが、特には、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群に属する植物より選択される少なくとも１種の植物のエキスであることが好ましい。また、特に、マツ科トウヒ属のトウヒ、ミカン科ミカン属のビターオレンジ、タデ科のアイ、アカネ科のアセンヤク、ノウゼンカズラ科のタベブイアインペチギノサ、シソ科のオウゴン、マメ科のカンゾウ、およびクロウメモドキ科のナツメからなる群より選択される少なくとも１種の植物のエキスであることが好ましい。ここで、これらの植物の部位は特に限定はされないが、例えば、ビターオレンジは果皮、アイは葉、カンゾウは根およびナツメは果実の部位からの抽出物が特に好ましく用いられる。
【００３６】
本発明の藻類または植物の抽出物が有している、優れた弾性線維形成促進能とは、ミクロフィブリルの周りにエラスチンが沈着・架橋する工程が促進される能力をいい、その程度は問わず、なんらの処置を施さない場合と比較して、エラスチンの沈着が促進されている状況であればよい。
【００３７】
以下に、本発明の内容を詳細に説明する。
【００３８】
藻類または植物の抽出物は、天然物からの粗抽出液として用いても、また、粗抽出液から分離精製したものを用いてもよい。
【００３９】
藻類または植物の抽出物を得る方法としては、特に限定されず、通常の抽出法が採用される。粗抽出液は、例えば全藻または植物の全体あるいはそれらの特定の部位を裁断機・スライサー・カッター・ピーラーなどで細断したものを、水、熱水あるいは有機溶媒を単独あるいは組み合わせて得られる溶媒を用いて抽出することにより得ることができる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等のアルコール類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類、アセトン等のケトン類、ホルムアルデヒド、ジメチルスルホキシドなどを挙げることができる。
【００４０】
また、溶媒は、室温又は常温の溶媒を用いることもできるが、加熱溶媒や熱溶媒（溶媒を沸点付近に加熱したもの）を用いることもできる。
【００４１】
さらに、酸、アルカリの条件下で抽出する事もできる。酸としては、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、又は、酢酸、クエン酸、シュウ酸、コハク酸、ギ酸、プロピオン酸などの有機酸が挙げられる。アルカリとしては、アルカリ無機塩が好ましく用いられ、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等を例示できる。
【００４２】
また、凍結乾燥粉末化法、高圧法や超高圧法を利用する事も可能である。
【００４３】
粗抽出物の抽出条件の一例を挙げる。抽出溶媒が有機溶媒の場合、溶媒の沸点以下であればよく抽出温度は特に制限はないが、好ましくは１〜１００℃、より好ましくは２０〜１００℃の範囲で、１〜２４時間、好ましくは１時間〜１０時間撹拌しながら行う。また、抽出溶媒が水の場合、抽出時の温度は特に限定されないが、加圧熱水による抽出方法を利用する場合もあるため、約０〜２００℃が好ましく、約２０〜１３０℃がより好ましい。また、反応時間も特に限定するものではないが、好ましくは数秒間〜数日間に設定すれば良く、更に好ましくはい３０分〜６時間に設定すれば良い。
【００４４】
反応温度及び反応時間は、溶媒の種類と濃度により適宜選択すれば良い。
【００４５】
このように抽出されたものであれば、弾性線維形成能を有する成分を十分に抽出することができる。
【００４６】
得られた抽出物を遠心分離してその上清を、抽出液として得る。かかる抽出液に水可溶性、酸性可溶性、アルカリ可溶性、あるいは有機溶媒可溶性の多糖画分が含まれる。
【００４７】
粗抽出物から藻類または植物の抽出物を分離精製する方法としては、例えば、塩化セチルピリジニウムなどの４級アンモニウム塩を添加し、藻類または植物の抽出物を沈殿させ、アルコール溶液で洗浄する方法やＤＥＡＥセルロースなどの陰イオン交換樹脂などを用いたクロマトグラフィーを用いる方法もある。
【００４８】
このように抽出、精製した藻類または植物の抽出物溶液は、そのまま用いることもできる他、稀釈液で希釈したり、濃縮してエキスとして用いることもでき、さらには、凍結乾燥などにより乾燥粉末物としたり、ペースト状に調製して用いることもできる。
【００４９】
本発明では、このように抽出、精製した藻類または植物の抽出物として、そのままの状態で用いることもできるが、有機溶媒が含まれている場合には減圧蒸留等により有機溶媒を除去することが好ましい。また、本発明において、この抽出液は、液状のものを使用してもよいが、必要に応じて、減圧乾燥、凍結乾燥、噴霧乾燥等の乾燥処理を行って液体分を低減又は除去することにより、濃縮液状、半固形状、固形状、又は粉末状にしたものを使用してもよい。
【００５０】
本発明における藻類または植物の抽出物としては、市販品を用いることもできる。例えば、紅藻類の抽出物としては、アスパラゴプシスアルマタ（Asparagopsis armata）の若芽からの細胞抽出物であるPHYKOSIL 2000（EXSYMOL MONAKO製）、アスパラゴプシスアルマタ（Asparagopsis armata）の抽出物であるAsparcid P（EXSYMOL MONAKO製）、トチャカの抽出物であるGELALG（Biotech Marine社製）、ゲリジウムカーチラギネウム（Gelidium cartilagineum）の抽出物であるRHODYSTEROL S/B DICAPRILAT（Biotech Marine社製）、スサビノリの抽出物であるIPF-100K、アルゲフィルター（いづれも一丸ファルコス社製）、緑藻類の抽出物としては、アオサ科のヒメアオノリ（Blidingia minima）からの抽出物であるSAVE MARINE（Biotech Marine社）、植物エキスとしては、ビターオレンジ果皮エキスとマツ科のトウヒエキスを配合したトウヒリキッドＢ（一丸ファルコス株式会社）、タデ科ののアイ葉エキスである藍ルーロス（株式会社林原生物化学研究所）、アカネ科のアセンヤク抽出物であるファルコレックスアセンヤクＢ（一丸ファルコス株式会社）、シソ科のオウゴン、マメ科のカンゾウ根、およびクロウメモドキ科のナツメ果実エキスを配合したプランテージ（ホワイト）（丸善株式会社）などが例示されるがこれに限定はされない。
【００５１】
本発明の藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤は、弾性線維の再生が所望される状態又は疾患、例えば、肺気腫、肺線維症、血管損傷、皮膚弛緩症、創傷、弾性線維劣化（例えば、加齢又は紫外線により引き起こされるもの）、皮膚硬化症、肌荒れ、動脈硬化、大動脈瘤、加齢黄斑変性症、会陰ヘルニア、肛門ヘルニア、脳底動脈瘤、消化管運動障害、褥瘡などの予防、治療又は改善に有用である他、皮膚のたるみやしわの予防や改善といった美容目的のためにも有用である。また、本発明の弾性線維形成促進剤は、弾性線維の再生能を有する細胞の培養用試薬などとしても有用である。さらに、人工皮膚、皮膚モデル、人工血管などの人工組織の作製に役立つ。さらに、十分解明されているとはいえない弾性線維自体の研究への応用も考えられ、非常に広い範囲で有用である。
【００５２】
本発明の弾性線維形成剤は、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品などとして幅広く利用可能な任意の製剤または組成物の形態で提供され得るが、好ましくは、機能性食品または化粧品として利用可能な製剤または組成物である。
【００５３】
本発明の弾性線維活性促進剤を含む組成物が、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品のいずれの形態を取る場合でも、藻類または植物の抽出物の含有量は、乾燥重量に換算して、例えば約０．０００００１〜９９重量％とすればよく、より好ましくは約０．００００１〜３０重量％、更に好ましくは約０．０００１〜１０重量％、特に好ましくは０．００１〜５重量％である。上記範囲であれば、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品の使用で十分な弾性線維形成作用がみられ皮膚の伸縮性の改善または予防効果が得られる。
【００５４】
本発明を医薬品または健康食品の用途に用いる場合の藻類または植物の抽出物の投与量は、成人１日当り、乾燥重量にして、０．０００１〜１０ｇ／ｋｇ、より好ましくは、０．００１〜５０００ｍｇ／ｋｇとすることができる。上記範囲であれば、弾性線維の伸び縮みの機能を必須とする疾患または状態の改善や予防が可能となる。
【００５５】
内服用形態
【００５６】
本発明の有効成分である藻類または植物の抽出物は、薬学的に許容される担体と配合し、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤などの固形製剤;またはシロップ剤、注射剤などの液状製剤として経口または非経口的に投与することもできる。これらの製剤は、常法の添加剤を含んでいても良い。薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤；液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などとして配合される。また必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの製剤添加物を用いることもできる。
【００５７】
賦形剤の好適な例としては、例えばＤ−ソルビトール、マンニトール、キシリトールなどの糖アルコール、ブドウ糖、白糖、乳糖、果糖などの糖類、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、リン酸水素カルシウム、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、デキストリン、β−シクロデキストリン、軽質無水ケイ酸、酸化チタン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、タルク、カオリンなどが挙げられる。
【００５８】
結合剤の好適な例としては、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのセルロース誘導体、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、アクリル酸系高分子、ゼラチン、アラビアゴム、プルラン、アルファー化デンプン、カンテン、トラガント、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸プロピレングリコールエステルなどが挙げられる。
【００５９】
崩壊剤の好適な例としては、例えばデンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルスターチ、部分アルファー化デンプンなどが挙げられる。溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油などが挙げられる。
【００６０】
滑沢剤の好適な例としては、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸ポリオキシル、セタノール、タルク、硬化油、ショ糖脂肪酸エステル、ジメチルポリシロキサン、ミツロウ、サラシミツロウなどが挙げられる。
【００６１】
溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。懸濁化剤の好適な例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤;例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子などが挙げられる。
【００６２】
等張化剤の好適な例としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトールなどが挙げられる。緩衝剤の好適な例としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。無痛化剤の好適な例としては、例えばベンジルアルコールなどが挙げられる。防腐剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。抗酸化剤の好適な例としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸などが挙げられる。
【００６３】
本発明の液状製剤または固形製剤を製造する方法としては、藻類または植物の抽出物を製剤原料と混合して液状製剤または固形製剤を製造する工程を含むものであれば特に限定はなく、公知の方法を使用することができる。
【００６４】
固形製剤調製例：
例えば、藻類または植物の抽出物と製剤原料を含む製剤組成物を練合し、スクリーンを通過させることで成型する押出造粒物を、粉砕し、整粒する方法、前記製剤組成物に練合水を加えバーチカルグラニュレーターによって成型する攪拌造粒の後に、コーミルを用いて粉砕・篩過する方法、及び前記製剤組成物をローラーコンパクターで圧縮した後、ロールグラニュレーターで粉砕し篩過する方法、撹拌造粒の後に、流動層乾燥する方法が例示される。
【００６５】
また、例えば、直打により製造する場合には、藻類または植物の抽出物と製剤原料を含む製剤組成物を混合した後、直接、打錠機に投入して打錠すればよい。
【００６６】
皮膚外用剤形態
【００６７】
本発明の藻類または植物の抽出物を有効成分とする弾性線維形成促進剤は、化粧料又は医薬部外品の外用剤形態として公知の形態を採ることができる。このような形態として、例えば、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、リニメント剤、ローション剤、エアゾール剤、パウダー剤、パップ剤、不織布等のシートに薬液を含浸させたシート剤、リップスティックのようなスティック剤などが挙げられる。中でも、好ましくは、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、ローション剤、ゲル剤の形態で用いられる。かかる形態とすることにより、弾性線維形成効果を十分に発揮することができる。皮膚外用剤には、藻類または植物の抽出物に加えて、本発明の効果を損なわない範囲で、外皮用剤(化粧料、医薬部外品、医薬品）に添加される公知の添加剤、例えば、界面活性剤、油分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、保存剤（防腐剤）、酸化防止剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、分散剤、香料、着色剤、色素、パール光沢付与剤、血行促進成分、保湿成分、紫外線吸収成分、紫外線散乱成分、洗浄成分、抗菌成分、収斂成分、ビタミン類、アミノ酸類、老化防止成分、抗炎症成分、美白成分、角質柔軟成分、細胞賦活化成分、水等を配合することができる。添加剤は、１種を単独で、又は２種以上を組み合わせて使用できる。
【００６８】
また、化粧料組成物の具体的な用途は特に限定されず、化粧水、乳液、クリーム、美容液、日焼け止め用化粧料、パック、ハンドクリーム、ボディローション、ボディークリームのような基礎化粧料；洗顔料、メイク落とし、ボディーシャンプー、シャンプー、リンスのような洗浄用化粧料；ファンデーション、化粧下地、リップクリーム、口紅、チークカラーのようなメークアップ化粧料；入浴剤などが挙げられる。
【００６９】
基剤又は担体としては、流動パラフィン、スクワラン、ゲル化炭化水素（プラスチベースなど）、オゾケライト、α−オレフィンオリゴマー、軽質流動パラフィンのような炭化水素；メチルポリシロキサン、架橋型メチルポリシロキサン、高重合メチルポリシロキサン、環状シリコーン、アルキル変性シリコーン、架橋型アルキル変性シリコーン、アミノ変性シリコーン、ポリエーテル変性シリコーン、ポリグリセリン変性シリコーン、架橋型ポリエーテル変性シリコーン、架橋型アルキルポリエーテル変性シリコーン、シリコーン・アルキル鎖共変性ポリエーテル変性シリコーン、シリコーン・アルキル鎖共変性ポリグリセリン変性シリコーン、ポリエーテル変性分岐シリコーン、ポリグリセリン変性分岐シリコーン、アクリルシリコン、フェニル変性シリコーン、シリコーンレジンのようなシリコーン油；エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースのようなセルロース誘導体；ポリビニルピロリドン；カラギーナン；ポリビニルブチラート；ポリエチレングリコール；ジオキサン；ブチレングリコールアジピン酸ポリエステル；ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、パルミチン酸セチル、イソノナン酸イソノニル、テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリットのようなエステル類；デキストリン、マルトデキストリンのような多糖類；エタノール、イソプロパノールのような低級アルコール；エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノプロピルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノプロピルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノプロピルエーテル、ジプロピレングリコールモノエチルエーテル、ジプロピレングリコールモノプロピルエーテルのようなグリコールエーテル；ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、グリセリン、イソプレングリコールなどの多価アルコール；水などの水系基剤などが挙げられる。
【００７０】
基剤又は担体は、１種を単独で、又は２種以上を組み合わせて使用できる。
【００７１】
酸化防止剤としては、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、ソルビン酸、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、エリソルビン酸、Ｌ−システイン塩酸塩などが挙げられる。
【００７２】
界面活性剤としては、例えば、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ペンタ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン、テトラ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタンのようなソルビタン脂肪酸エステル類；モノステアリン酸プロピレングリコールのようなプロピレングリコール脂肪酸エステル類；ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油４０（ＨＣＯ−４０）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０（ＨＣＯ−５０）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０（ＨＣＯ−６０）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油８０などの硬化ヒマシ油誘導体；モノラウリル酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン（ポリソルベート２０）、モノステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン（ポリソルベート６０）、モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン（ポリソルベート８０）、イソステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンのようなポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類；ポリオキシエチレンモノヤシ油脂肪酸グリセリル；グリセリンアルキルエーテル；アルキルグルコシド；ポリオキシエチレンセチルエーテルのようなポリオキシアルキレンアルキルエーテル；ステアリルアミン、オレイルアミンのようなアミン類；ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体、ラウリルＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコン、ＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコンのようなシリコーン系界面活性剤などが挙げられる。
【００７３】
増粘剤としては、例えば、グアーガム、ローカストビーンガム、カラギーナン、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸メタクリル酸アルキル共重合体、ポリエチレングリコール、ベントナイト、（アクリル酸ヒドロキシエチル／アクリロイルジメチルタウリンＮａ）コポリマー、（アクリロイルジメチルタウリンアンモニウム／ビニルピロリドン）コポリマーなどが挙げられる。
【００７４】
保存剤としては、安息香酸、安息香酸ナトリウム、デヒドロ酢酸、デヒドロ酢酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸イソブチル、パラオキシ安息香酸イソプロピル、パラオキシ安息香酸ブチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ベンジル、パラオキシ安息香酸メチル、フェノキシエタノールなどが挙げられる。
【００７５】
ｐＨ調整剤としては、無機酸（塩酸、硫酸など）、有機酸（乳酸、乳酸ナトリウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム、コハク酸、コハク酸ナトリウムなど）、無機塩基（水酸化カリウム、水酸化ナトリウムなど）、有機塩基（トリエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、トリイソプロパノールアミンなど）などが挙げられる。
キレート剤としては、ＥＤＴＡ・２ナトリウム塩、ＥＤＴＡ・カルシウム・２ナトリウム塩などが挙げられる。
【００７６】
安定化剤としては、ポリアクリル酸ナトリウム、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソールなどが挙げられる。
【００７７】
添加剤は１種を単独で又は２種以上を組み合わせて使用できる。
【００７８】
本発明の外用組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、その他の有効成分を含むことができる。有効成分の具体例としては、例えば、保湿成分、抗炎症成分、抗菌成分、ビタミン類、ペプチド又はその誘導体、アミノ酸又はその誘導体、細胞賦活化成分、老化防止成分、血行促進成分などが挙げられる。
【００７９】
保湿成分としては、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ジグリセリントレハロースのような多価アルコール；ヒアルロン酸ナトリウム、ヘパリン類似物質、コンドロイチン硫酸ナトリウム、コラーゲン、エラスチン、ケラチン、キチン、キトサンのような高分子化合物；グリシン、アスパラギン酸、アルギニンのようなアミノ酸；乳酸ナトリウム、尿素、ピロリドンカルボン酸ナトリウムのような天然保湿因子；セラミド、コレステロール、リン脂質のような脂質；カミツレエキス、ハマメリスエキス、チャエキス、シソエキスのような植物抽出エキスなどが挙げられる。
【００８０】
抗菌成分としては、クロルヘキシジン、サリチル酸、塩化ベンザルコニウム、アクリノール、エタノール、塩化ベンゼトニウム、クレゾール、グルコン酸及びその誘導体、ポピドンヨード、ヨウ化カリウム、ヨウ素、イソプロピルメチルフェノール、トリクロカルバン、トリクロサン、感光素101号、感光素201号、パラベン、フェノキシエタノール、１，２-ペンタンジオール、塩酸アルキルジアミノグリシン等が挙げられる。
【００８１】
ビタミン類としては、ｄｌ−α−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロールカルシウム等のビタミンＥ類；リボフラビン、フラビンモノヌクレオチド、フラビンアデニンジヌクレオチド、リボフラビン酪酸エステル、リボフラビンテトラ酪酸エステル、リボフラビン５’−リン酸エステルナトリウム、リボフラビンテトラニコチン酸エステル等のビタミンＢ２類；ニコチン酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸ベンジル、ニコチン酸メチル、ニコチン酸β−ブトキシエチル、ニコチン酸１−（４−メチルフェニル）エチル等のニコチン酸類；アスコルビゲン−Ａ、アスコルビン酸ステアリン酸エステル、アスコルビン酸パルミチン酸エステル、ジパルミチン酸Ｌ−アスコルビルなどのビタミンＣ類；メチルヘスペリジン、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロールなどのビタミンＤ類；フィロキノン、ファルノキノン等のビタミンＫ類、γ−オリザノール、ジベンゾイルチアミン、ジベンゾイルチアミン塩酸塩；チアミン塩酸塩、チアミンセチル塩酸塩、チアミンチオシアン酸塩、チアミンラウリル塩酸塩、チアミン硝酸塩、チアミンモノリン酸塩、チアミンリジン塩、チアミントリリン酸塩、チアミンモノリン酸エステルリン酸塩、チアミンモノリン酸エステル、チアミンジリン酸エステル、チアミンジリン酸エステル塩酸塩、チアミントリリン酸エステル、チアミントリリン酸エステルモノリン酸塩等のビタミンＢ１類；塩酸ピリドキシン、酢酸ピリドキシン、塩酸ピリドキサール、５’−リン酸ピリドキサール、塩酸ピリドキサミン等のビタミンＢ６類；シアノコバラミン、ヒドロキソコバラミン、デオキシアデノシルコバラミン等のビタミンＢ１２類；葉酸、プテロイルグルタミン酸等の葉酸類；ニコチン酸、ニコチン酸アミドなどのニコチン酸類；パントテン酸、パントテン酸カルシウム、パントテニルアルコール（パンテノール）、Ｄ−パンテサイン、Ｄ−パンテチン、補酵素Ａ、パントテニルエチルエーテル等のパントテン酸類；ビオチン、ビオチシン等のビオチン類；アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、デヒドロアスコルビン酸、アスコルビン酸リン酸エステルナトリウム、アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム等のアスコルビン酸誘導体であるビタミンＣ類；カルニチン、フェルラ酸、α−リポ酸、オロット酸等のビタミン様作用因子などが挙げられる。
【００８２】
ペプチド又はその誘導体としては、ケラチン分解ペプチド、加水分解ケラチン、コラーゲン、魚由来コラーゲン、アテロコラーゲン、ゼラチン、エラスチン、エラスチン分解ペプチド、コラーゲン分解ペプチド、加水分解コラーゲン、塩化ヒドロキシプロピルアンモニウム加水分解コラーゲン、エラスチン分解ペプチド、コンキオリン分解ペプチド、加水分解コンキオリン、シルク蛋白分解ペプチド、加水分解シルク、ラウロイル加水分解シルクナトリウム、大豆蛋白分解ペプチド、加水分解大豆蛋白、小麦蛋白、小麦蛋白分解ペプチド、加水分解小麦蛋白、カゼイン分解ペプチド、アシル化ペプチド（パルミトイルオリゴペプチド、パルミトイルペンタペプチド、パルミトイルテトラペプチド等）などが挙げられる。
【００８３】
アミノ酸又はその誘導体としては、ベタイン（トリメチルグリシン）、プロリン、ヒドロキシプロリン、アルギニン、リジン、セリン、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、β−アラニン、スレオニン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、メチオニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、ヒスチジン、タウリン、γ−アミノ酪酸、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、カルニチン、カルノシン、クレアチン等が挙げられる。
【００８４】
本発明の弾性線維形成促進剤は、植込錠及びマイクロカプセルに封入された送達システムなどの徐放性製剤として用いることもできる。この徐放性製剤は、体内から速やかに除去されることを防止できるような、薬剤的に受容可能な公知の担体を用いて調製し得る。具体的には、例えば、エチレンビニル酢酸塩、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸などの生物分解性または生物適合性ポリマーを用いることができる。これらのポリマーは公知であり、常法に基づき、当業者によって容易に調製することができる。あるいは、薬剤的に受容可能な他の担体として、リポソームの懸濁液なども使用することができる。上記リポソームは特に限定されず、ホスファチジルコリン、コレステロール及びＰＥＧ誘導ホスファチジルエタノール（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物などが挙げられる。これは、使用に適したサイズになるように、適当なポアサイズのフィルターを通して調製した後、逆相蒸発法によって精製して得られる。
【００８５】
食品
【００８６】
本発明の藻類または植物の抽出物を含有する弾性線維形成促進剤は、食品または機能性食品に含有させて提供され得る。このような食品または機能性食品としては、米飯；そば、うどん、はるさめ、中華麺、即席麺、カップ麺を含む各種の麺類；清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、スポーツ飲料等の飲料；カレールー、シチュー、各種スープ類；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；飴、クッキー、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、その他の焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、はんぺん、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、ドレッシング、味噌、醤油、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、ふりかけ、漬物；その他種々の形態の健康・栄養補助食品などが例示される。
【００８７】
さらには、本発明の弾性線維形成剤を含有するサプリメント（散在、顆粒剤、ソフトカプセル、ハードカプセル、錠剤、チュアブル錠、速崩錠、シロップ、液剤等）を調製してもよい。
【００８８】
また、ペットなどの動物用の餌に対して本発明の弾性線維形成剤を含有させることもできる。
【００８９】
食品には、必要に応じて、添加物が加えられる。このような添加物としては、例えばブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、マンニット、デキストリン、クエン酸、クエン酸ソーダ、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＣ、ビタミンＢ類、ビタミンＥ、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、界面活性剤、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
【００９０】
本発明の弾性線維形成促進剤を用いて、人工弾性線維をインビトロで作成すること、弾性線維の研究への応用に用いることも可能である。本発明の弾性線維形成促進剤を用いて、インビトロで弾性線維を形成させ、人工弾性線維の培養用試薬、人工皮膚、皮膚モデル、人工血管などの人工組織の作製に用いることもできる。このようなインビトロでの研究や実施への応用に用いる場合、藻類または植物の抽出物をそのままの形で用いることも好ましい。
【００９１】
本発明の弾性線維形成促進剤は、さらに、ＤＡＮＣＥ発現増強因子（ＤＡＮＣＥ誘導因子）を含んでいてもよい。ＤＡＮＣＥ発現増強因子を用いることができ、例えば、ナンテンカズラエキス、シカクマメエキス、フィチン酸及びその生理学的に許容される塩、並びにＬ−ヒドロキシプロリン及びその生理学的に許容される塩等のＤＡＮＣＥ発現増強因子；ＤＡＮＣＥ発現ベクター、またはＤＡＮＣＥ誘導因子発現ベクターなどが挙げられる。
【実施例】
【００９２】
次に、試験例、実施例等により本発明を具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００９３】
〔製造例１〕（通常の紅藻類抽出物の抽出）
紅藻類の抽出物は、市販のPHYＫOSIL 2000 (EXSYMOL MONAKO製、カギケノリ科紅藻の抽出物）をそのまま用いた。試験例１で示す培養液を利用して添加後の最終濃度が培養液全体の０．００１重量％になるように調製した。
【００９４】
〔製造例２〕（通常の紅藻類抽出物の抽出）
紅藻類の抽出物として、市販品Asparcid P（EXSYMOL MONAKO製、カギケノリ科紅藻の抽出物；アスパラゴシプシアルマタ（asparagopsis armata））をそのまま用いた。試験例１で示す培養液を利用して添加後の最終濃度が０．００１重量％になるように調製した。
【００９５】
〔製造例３〕（通常の緑藻類抽出物の抽出）
緑藻類の抽出物として、市販品ＳＡＶＥ ＭＡＲＩＮＥ（Biotech Marine社、緑藻抽出物；アオサ目ヒメアオノリ属のヒメアオノリ）をそのまま用いた。試験例１で示す培養液を利用して添加後の最終濃度が０．００１重量％になるように調製した。
【００９６】
〔製造例４〕（藻類および植物の抽出物）
表１に示す市販の製品を使って、同様に、弾性線維形成能を測定するために、各種の抽出物を調製した。
【表１】
【００９７】
〔試験例１〕（弾性線維形成促進の評価試験）
無血清下での実験
２４ウエルプレートの底にＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅ Ｃｏｖｅｒ Ｇｌａｓｓ（Ｆｉｓｈｅｒｂｒａｎｄから購入）を置き、その上に皮膚線維芽細胞を１ウエルあたり７．５×１０4個播種し、継代用培地（ＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから購入）、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ、ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅから購入）、２ｍＭのグルタミン、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬのペニシリン、１００ｇ／ｍＬのストレプトマイシン）にて３７℃、５％ＣＯ2で培養した。さらに、血清を含まない弾性線維形成培地、すなわち、ＤＭＥＭ／Ｆ１２、２ｍＭのグルタミン、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬのペニシリン、１００ｇ／ｍＬのストレプトマイシンを用い、ヒト線維芽細胞を１ウエルあたり７．５×１０4個播種し、この無血清培地に、製造例１から４までの調製物をそれぞれ、培養物全体の０．００１重量％になるように加えて、あるいは加えないで、３７℃、５％ＣＯ2で4週間培養した。4週間の培養後、弾性線維の蛍光免疫染色を行なった。詳細には、１ｍＬのＰＢＳを用いて３回洗浄した後、１００％メタノールを用い、−２０℃で２０分間固定した。更にＰＢＳを用いて洗浄した後、２％ＢＳＡを含むＰＢＳを用い、室温で1時間ブロッキングした後、１次抗体として抗エラスチンポリクローナル抗体（Ｅｌａｓｔｉｎ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｏｍｐａｎｙから購入）を用い、２次抗体としてＡｌｅｘａ４８８−抗ウサギＩｇＧ抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから購入）を用いた。１次抗体と室温で１時間以上インキュベートした後、ＰＢＳで洗浄し、上記の２次抗体と室温で１時間インキュベートした。ＰＢＳで洗浄した後、４％パラホルムアルデヒドを用いて室温で１０分間固定し、再びＰＢＳで洗浄した後、Hoechst33258(Dojindoから購入)を用いて室温で5分間反応させ、再びPBSで洗浄した後、Aqua Poly/Mount(Poluscienceから購入)にてスライドガラス上にサンプルをマウントした。観察は蛍光顕微鏡IX71（Olympus）を用いて行った。その結果を図１〜図５に示す。
【００９８】
図1および図３は、弾性線維であるエラスチンを蛍光染色したものである。本蛍光染色法ではエラスチンに加えて細胞質も同時に染色されるためコントロールでは斑点状の蛍光発色が認められるが、これは細胞質を染色したものでありエラスチンを染色したものではない。一方、紅藻類の抽出または緑藻類の抽出物では、コントロール同様に細胞質は斑点状に染色されるが、写真全面に著明な線維状の蛍光染色が確認された。このことから紅藻類の抽出または緑藻類の抽出物には、著明な弾性線維、すなわちエラスチン線維形成促進効果が確認された。紅藻類の抽出、緑藻類の抽出物およびコントロールの細胞数に変化がないことは確認済みである。
【００９９】
さらに、蛍光量を数値化する為に、Image J(数値化に用いた画像ソフト)を用いた。その結果を図２、図４、および図５に示す。
【０１００】
製造例１で得た抽出物および製造例２で得た抽出物は、優れた弾性線維形成促進作用を有していることが示された。また、製造例３で得た抽出物を用いた場合、製造例１および２ほどの線維形成は見られなかったものの、コントロールと比較して、明らかにエラスチン沈着が進んでいることが見られる。このことは弾性線維（エラスチン線維）形成が促進している事を示している。
【０１０１】
〔組成物調製例１〕
化粧料組成物
以下の化粧料組成物の実施例中の数値の単位は「重量％」である。
【０１０２】
【表２】
【０１０３】
【表３】
【０１０４】
[組成物調製例２]
内服組成物
以下の食品組成物の処方例において、藻類または植物の抽出物の重量は乾燥重量である。
食品組成物の全処方において、藻類または植物の抽出物としては、エタノール抽出物が好ましい。
【０１０５】
【表４】
【０１０６】
この飲料は、１日３回の食事毎に１本摂取される。
【０１０７】
【表５】
【０１０８】
この錠剤は、１日３回の食事毎に３錠摂取される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
藻類および／または植物の抽出物を有効成分として含有する弾性線維形成促進剤。
【請求項２】
前記藻類が、紅藻類または緑藻類である、請求項１記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項３】
前記紅藻類が、アクロカエティウム目、チノリモ目、ウシケノリ目、ウミゾウメン目、エリスロペルティス目、オオイシソウ目、カクレイト目、サンゴモ目、ダルス目、テングサ目、ロドゴルゴン目、ベニマダラ目、カギノリ目、カギケノリ目、カワモズク目、スギノリ目、オゴノリ目、マサゴシバリ目、イタニグサ目、およびイギス目に属する紅藻類からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１または２のいずれかに記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項４】
前記紅藻類が、ミリン科、スギノリ科、ムカデノリ科、テングサ科、カギケノリ科、およびカギノリ科からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項３記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項５】
前記紅藻類が、キリンサイ、スギノリ、コトジツノマタ、ヒヂリメン、テングサ、およびアスパラゴプシスからなる群より選択される少なくとも1種である、請求項４記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項６】
前記緑藻類が、オオヒゲマワリ目、ヨコワミドロ目、サヤミドロ目、ケトフォラ目、ケトペルティス目、ヒビミドロ目、アオサ目、シオグサ目、モツレグサ目、クロレラ目、ミクロタムニオン目、トレボウクシア目、カワノリ目、マミエラ目、モノマスティクス目、ドリコマスティクス目、ミドリゲ目、イワヅタ目、スミレモ目、ウミイカダモ目、ミル目、ハネモ目、クロロデンドロン目、ドリコマスティクス目、ネフロセルミス目およびカサノリ目からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１または２記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項７】
前記緑藻類が、ヒメアオノリまたはホソヒメアオノリである、請求項６記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項８】
前記植物が、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群より選択される少なくとも１種の植物である、請求項１記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項記載の弾性線維形成促進剤を含有する、弾性線維形成促進用組成物。
【請求項１０】
化粧料である、請求項９記載の弾性線維形成促進用組成物。
【請求項１１】
食品である、請求項９記載の弾性線維形成促進用組成物。
【請求項１】
藻類および／または植物の抽出物を有効成分として含有する弾性線維形成促進剤。
【請求項２】
前記藻類が、紅藻類または緑藻類である、請求項１記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項３】
前記紅藻類が、アクロカエティウム目、チノリモ目、ウシケノリ目、ウミゾウメン目、エリスロペルティス目、オオイシソウ目、カクレイト目、サンゴモ目、ダルス目、テングサ目、ロドゴルゴン目、ベニマダラ目、カギノリ目、カギケノリ目、カワモズク目、スギノリ目、オゴノリ目、マサゴシバリ目、イタニグサ目、およびイギス目に属する紅藻類からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１または２のいずれかに記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項４】
前記紅藻類が、ミリン科、スギノリ科、ムカデノリ科、テングサ科、カギケノリ科、およびカギノリ科からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項３記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項５】
前記紅藻類が、キリンサイ、スギノリ、コトジツノマタ、ヒヂリメン、テングサ、およびアスパラゴプシスからなる群より選択される少なくとも1種である、請求項４記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項６】
前記緑藻類が、オオヒゲマワリ目、ヨコワミドロ目、サヤミドロ目、ケトフォラ目、ケトペルティス目、ヒビミドロ目、アオサ目、シオグサ目、モツレグサ目、クロレラ目、ミクロタムニオン目、トレボウクシア目、カワノリ目、マミエラ目、モノマスティクス目、ドリコマスティクス目、ミドリゲ目、イワヅタ目、スミレモ目、ウミイカダモ目、ミル目、ハネモ目、クロロデンドロン目、ドリコマスティクス目、ネフロセルミス目およびカサノリ目からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１または２記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項７】
前記緑藻類が、ヒメアオノリまたはホソヒメアオノリである、請求項６記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項８】
前記植物が、マツ科、ミカン科、タデ科、アカネ科、ノウゼンカズラ科、シソ科、マメ科およびクロウメモドキ科からなる群より選択される少なくとも１種の植物である、請求項１記載の弾性線維形成促進剤。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項記載の弾性線維形成促進剤を含有する、弾性線維形成促進用組成物。
【請求項１０】
化粧料である、請求項９記載の弾性線維形成促進用組成物。
【請求項１１】
食品である、請求項９記載の弾性線維形成促進用組成物。
【図１】
【図３】
【図５】
【図２】
【図４】
【図３】
【図５】
【図２】
【図４】
【公開番号】特開２０１３−３５８０７（Ｐ２０１３−３５８０７Ａ）
【公開日】平成２５年２月２１日（２０１３．２．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１７５１３４（Ｐ２０１１−１７５１３４）
【出願日】平成２３年８月１０日（２０１１．８．１０）
【出願人】（０００１１５９９１）ロート製薬株式会社 (366)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年２月２１日（２０１３．２．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年８月１０日（２０１１．８．１０）
【出願人】（０００１１５９９１）ロート製薬株式会社 (366)
【Ｆターム（参考）】
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