糖脂質誘導体の製造方法
【課題】抗腫瘍活性や免疫賦活作用を有し、グルコシダーゼ代謝、酸・塩基に安定で、且つ室温で長期保存できる下記式（ｅ）で示される糖脂質誘導体の製造方法の提供。
【解決手段】下記式（ｄ）化合物を接触還元して式（ｅ）の糖脂質誘導体を得る製法。
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基、Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖、Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖、Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−、ｂは１〜５の整数である。）
【解決手段】下記式（ｄ）化合物を接触還元して式（ｅ）の糖脂質誘導体を得る製法。
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基、Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖、Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖、Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−、ｂは１〜５の整数である。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍剤及び免疫賦活剤として有用な新規糖脂質誘導体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖脂質は細胞の分化、増殖、神経細胞の成長等に重要な役割を担っている（非特許文献１、非特許文献２）。また、α−ガラクトシルセラミドは強力な抗腫瘍活性や免疫賦活活性を有することが報告されている(非特許文献３、非特許文献４）。更に、α−ガラクトシルセラミドは、β−ガラクトシルセラミドに比べ、その抗腫瘍活性や免疫賦活活性が強力であることが報告されている（非特許文献５、非特許文献６）。
【０００３】
しかし、ガラクトシルセラミドを医薬として体内投与するとリソゾーム等に存在するガラクトシダーゼなどの酵素により、グルコシド結合が加水分解されることが予想される（非特許文献７）。グルコシダーゼ代謝に安定な糖誘導体として、グルコシド結合の酸素を炭素に変換したＣ−配糖体が知られている。（非特許文献８、非特許文献９及び非特許文献１０）更に、グルコシド結合の酸素原子を硫黄原子に置換したＳ−配糖体（非特許文献１１、非特許文献１２）や、グルコシド結合の酸素原子を窒素原子に置換したＮ−配糖体（非特許文献１３）も知られている。
【０００４】
現在までに、ガラクトシルセラミドのグルコシド結合の酸素を炭素に変換した、Ｃ−配糖体合成としては、β−Ｃ−ガラクトシルセラミド（β−体）の合成が報告されているのみである（非特許文献１４）。しかしながら、α−Ｃ−ガラクトシルセラミド（α−体）の合成は報告がない。α−Ｃ、Ｎ、Ｓ−グルコシド結合を有するα−体である糖脂質誘導体合成は、α−ガラクトシダーゼにより分解されるα−Ｏ−ガラクトシドよりも有用性が期待される。すなわち、強力な抗腫瘍活性や免疫賦活作用を有し、更にグルコシダーゼ代謝、酸・塩基に安定で、且つ室温で長期保存できる等である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Hakomori et al.,Annu.Rev.Biochem.1981,50,733〜764.
【非特許文献２】Morita,Glycosphingolipids.1985,59〜82, Elsevier Science Publishing Co., New York.
【非特許文献３】Morita et al.,J.Med.Chem.1991,38,2176.
【非特許文献４】Kawano et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1998,95,5690.
【非特許文献５】Kawano et al.,Sience.1997, 278,1626〜1629.
【非特許文献６】Sakai et al.,J.Med.Chem.1999,42,1836〜1841.
【非特許文献７】Chen et al.,Biochem.Biophys.Acta.1993,1170,53〜61.
【非特許文献８】Linhardt et al.,Tetrahedron.1998,54,9913〜9959.
【非特許文献９】Levy et al.,「The Chemistry of C-Glycosides.」Pergamon: Oxford,1995.
【非特許文献１０】Postema et al.,「C-Glycoside Synthesis. 」CRC Press:Boca Raton,1995.
【非特許文献１１】Rahman et al.,In Studies in Natural Products Chemistry. Elsevier:New York,1991;vol.8,pp315〜357.
【非特許文献１２】Defaye et al.,J.Carbohydr.Chem.(UK)1998,30,159〜166.
【非特許文献１３】Stunkel et al.,Prog.Leukocyte Biol.1989,9,575〜579.
【非特許文献１４】Dondoni et al.,J.Org.Chem.1991,64,5557〜5564.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、強力な抗腫瘍活性や、免疫賦活作用を有し、グルコシダーゼ代謝、酸・塩基に安定で、且つ室温で長期保存できるα−Ｃ−グルコシド結合を有する糖脂質誘導体、すなわち、既知化合物に比べ高い抗腫瘍活性や免疫賦活作用を有し、且つ室温で長期保存することができ、更に長時間作用持続型の新規糖脂質誘導体の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、新規糖脂質誘導体について抗腫瘍剤、免疫賦活剤の創製を目的に研究を行った結果、一般式（ｅ）で示される新規誘導体が優れた抗腫瘍作用、免疫賦活作用を有することを見出し、そして、その製造方法として、本発明の製造方法を完成させた。
本発明は一般式（ｄ）：
【０００８】
【化１】
【０００９】
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基を表す。Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−を表す。ｂは１〜５の整数である。）
で示される化合物を接触還元することを特徴とする次式の一般式（ｅ）：
【００１０】
【化２】
【００１１】
（式中、Ｒ０、Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物の製造方法である。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の製造法方法で得られた一般式（ｅ）で示される新規糖脂質誘導体は、高い抗腫瘍活性や免疫賦活作用を有し、グルコシダーゼ代謝、酸・塩基に安定で、且つ室温で長期保存できる。そして、悪性腫瘍の予防、治療剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下に本発明に関する化合物を例示する。また、それ等の化学構造式と分析値を表１〜３に示す。
（１）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物１）
（２）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−１’−（Ｅ／Ｚ）−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物２）
（３）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ペンタコサン スルホニルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物３）
（４）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（ヘキサコサノイルアミノ）−（Ｅ／Ｚ）−ヘニコス−３’−エニル α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物４）
（５）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（テトラコサノイルアミノ）−（Ｅ／Ｚ）−ヘニコス−３’−エニル α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物５）
（６）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（ヘキサコサノイルアミノ）−ヘニコサン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物６）
（７）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（テトラコサノイルアミノ）−ヘニコサン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物７）
（８）（２’Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−３’，４’−ジヒドロキシ−２’−Ｎ−（ヘキサコサノイルアミノ）−オクタデカン−１’−チオ−イル−α−Ｓ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物８）
（９）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−（６−Ｏ−スルホン酸）−ガラクトピラノシド（化合物９）
（１０）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−（６−Ｏ−メチレン カルボン酸）−ガラクトピラノシド（化合物１０）
（１１）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクツロン酸（化合物１１）
【００１４】
【表１】
【００１５】
【表２】
【００１６】
【表３】
【００１７】
以下に本発明の製造方法の例を説明する。各符号は前記と同じである。
一般式（ｄ）で示される化合物は、例えば、次のようにして製造する。
一般式（ａ）：
【００１８】
【化３】
【００１９】
［式中、Ｒ１は−Ｏ−Ｒ４、−Ｏ−Ｓｉ(Ｒ４)３又は−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４を、Ｒ５は−Ｏ−Ｒ４、−Ｏ−Ｓｉ(Ｒ４)３、−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４、−ＮＡｃ２又は−ＮＨＡｃを、Ｒ３は−ＰＰｈ３＋Ｉ−又は−ＰＯ−(Ｏ−Ｒ４)２を表す。但し、Ｒ４は低級アルキル基又はフェニル誘導体である。ｂは１〜５の整数である。］
で示される化合物と、次式の一般式（ｂ）：
【００２０】
【化４】
【００２１】
［式中、Ｒ２は−Ｏ−Ｒ４、−Ｏ−Ｓｉ(Ｒ４)３又は−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４（但し、Ｒ４は前記と同じ）を表す。Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−を表す。］
で示される化合物を塩基の存在下でウィテッヒ反応を行い、次式の一般式（ｃ）：
【００２２】
【化５】
【００２３】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物となし、次いでこの一般式（ｃ）で示される化合物の脱保護基を行い一般式（ｄ）：
【００２４】
【化６】
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基を表す。Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物となす。
（Ａ）セラミド部の合成
Ｉ．セラミド前駆体（Ａ-１）はＤ−Galactoseを出発原料としてSchmidtらの方法（Liebigs Ann.1995,755〜764）により得られる。
化合物（Ａ-１）の一級水酸基をトリチル化、続いて二級水酸基をベンジル化して化合物（Ａ-２）とする。
【００２５】
【化７】
【００２６】
（式中、Ｗ1は炭素数８〜１６の炭化水素鎖であり、不飽和部を含む場合もある。）
化合物（Ａ-２）のアジド基を接触還元又はトリフェニルホスフィンと水により、還元してアミノ化合物（Ａ-３）とし、
【００２７】
【化８】
【００２８】
生じたアミノ基を塩基存在下、アミド化又はスルホニル化することにより、各々化合物（Ａ-４）、（Ａ-５）を得る。また、（Ａ-３）を縮合剤（例えば、１−〔３−（ジメチルアミノ）プロピル〕−３−エチルカルボジイミドハイドロクロライド等）の存在下でアミド化することにより化合物（Ａ-４）を得ることもできる。
【００２９】
【化９】
【００３０】
化合物（Ａ-４）、（Ａ-５）に酸を作用させ、トリチル基を脱保護して化合物（Ａ-６）、（Ａ-７）とし、生じた一級水酸基を酸化（例えばスワン酸化（J.Org.Chem.1978,43,2482）等）することでアルデヒド化合物（Ａ-８）或いは（Ａ-９）を得る。
【００３１】
【化１０】
【００３２】
II．化合物（Ａ-２）に酸を作用させ、トリチル基を脱保護した後、アジド基を還元（例えばＰＰｈ3／Ｈ2Ｏ等）することで化合物（Ａ-１０）を得る。化合物（Ａ-１０）のアミノ基をＢｏｃ基で保護し、次いで一級水酸基を酸化（例えばスワン酸化（J.Org.Chem.1978,43,2482.等）することでアルデヒド化合物（Ａ-１１）を得る。
【００３３】
【化１１】
【００３４】
III．化合物（Ａ-１２）の一級水酸基をメタンスルホニル化又はブロム化し、化合物（Ａ-１３）を得る。
【００３５】
【化１２】
【００３６】
（Ｂ）糖部の合成
文献既知のα−ガラクトシルシアノ体（Ｂ-１）をLopexら（J.Carbohydr.Chem.1987,6,273〜279.）の製法によりシアノ基を還元してアルコール化合物（Ｂ-２）を得る。但し、化合物（Ｂ-２）の合成はこの方法に限らない。
【００３７】
【化１３】
【００３８】
化合物（Ｂ-２）の一級水酸基をトルエンスルホニル化、続いてヨウ素化を行い、化合物（Ｂ-３）とした後、トリフェニルホスフィンと反応させ化合物（Ｂ-４）を得た。
【００３９】
【化１４】
【００４０】
化合物（Ｂ-４）に塩基（例えばブチルリチウム、フッ化カリウム等）を作用させ、化合物（Ｂ-５）を得た。
【００４１】
【化１５】
【００４２】
（Ｃ）糖部とセラミド部とのカップリング反応
Ｉ．（Ａ）で得られたセラミド化合物（Ａ-８）と（Ａ-９）を（Ｂ）で得られた化合物（Ｂ-５）とウィテッヒ反応させ、化合物（Ｃ-１）又は（Ｃ-２）とした後、液体アンモニア中、ナトリウムを作用させ化合物（Ｃ-３）又は（Ｃ-４）とする。さらに続いて接触還元し、化合物（Ｃ-５）又は（Ｃ-６）とするか、もしくは化合物（Ｃ-１）或いは（Ｃ-２）を直接接触還元し、化合物（Ｃ-５）又は（Ｃ-６）を得る。
【００４３】
【化１６】
【００４４】
【化１７】
【００４５】
II．（Ａ）で得られたセラミド化合物（Ａ-１１）と、（Ｂ）で得られた化合物（Ｂ-５）をウィテッヒ反応させ化合物（Ｃ-７）とした後、液体アンモニア中、ナトリウムを作用させ化合物（Ｃ-８）をとする。更に続いて接触還元し、化合物（Ｃ-９）とするか、もしくは化合物（Ｃ-７）を直接接触還元し、化合物（Ｃ-９）を得る。
【００４６】
【化１８】
【００４７】
化合物（Ｃ-８）又は（Ｃ-９）に酸を作用させ脱保護基し、化合物（Ｃ-１０）或いは（Ｃ-１１）とした後、アミノ基を塩基存在下でアミド化、又はスルホニル化して化合物（Ｃ-３）又は（Ｃ-４）或いは（Ｃ-５）又は（Ｃ-６）とする。
【００４８】
【化１９】
【００４９】
【化２０】
【００５０】
III．（Ａ）で得られたセラミド化合物（Ａ-１３）と、糖誘導体（Ｃ-１２）或いは（Ｃ-１３）とを例えばＣｓ2ＣＯ3のような塩基の存在下で、グルコシデーション反応させ、化合物（Ｃ-１４）或いは（Ｃ-１５）とする。
【００５１】
【化２１】
【００５２】
化合物（Ｃ-１４）或いは（Ｃ-１５）を脱保護基し化合物（Ｃ-１６）或いは（Ｃ-１７）とした後、アミノ基を塩基存在下でアミド化、又はスルホニル化して（Ｃ-１８）、（Ｃ-１９）或いは（Ｃ-２０）、（Ｃ-２１）とした後、場合により（Ｃ-１８）或いは（Ｃ-１９）は酸化を行い、（Ｃ-２２）或いは（Ｃ-２３）とする。
【００５３】
【化２２】
【００５４】
【化２３】
【００５５】
（Ｄ）糖部の一級水酸基の修飾
Ｉ．一般式（ｅ）で示される化合物において、糖部の一級水酸基を、−ＣＨ2ＯＳＯ3Ｈにすることができる。そのときには、化合物（Ｄ-１）に対し、ピリジン溶液中、ＳＯ3・Ｐｙを作用させ、化合物（Ｄ-２）とする。
【００５６】
【化２４】
【００５７】
II．一般式（ｅ）で示される化合物において、糖部の一級水酸基を、−ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ2Ｈにすることができる。そのときには、化合物（Ｄ-１）に対し、ＮａＯＨ存在下ＢｒＣＨ2ＣＯ2Ｈを作用させ化合物（Ｄ-３）とする。
【００５８】
【化２５】
【００５９】
III．一般式（ｅ）で示される化合物において、糖部の一級水酸基を、−ＣＯ2Ｈにすることができる。そのときには、化合物（Ｄ-１）の一級水酸基を酸化剤（例えばＴＥＭＰＯ＝２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ、フリーラジカル等）によりカルボン酸へ酸化することで化合物（Ｄ-４）とする。
【００６０】
【化２６】
【００６１】
本発明の一般式（ｅ）で示される化合物又はその薬理学的に許容し得る塩は、１種又は２種以上を有効成分として、ヒト又は哺乳動物に投与することができる。また、本発明の化合物は、そのままで或いは公知の製剤技術により、注射剤、粉剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、トローチ、ドライシロップ、リポゾーム製剤などに製剤化されることができる。具体的な本発明化合物の投与量、投与回数は患者の症状、年齢、体重等により適量が決定されなければならない。
【００６２】
（試験例）
以下に抗腫瘍活性、免疫賦活活性についての薬理試験例を挙げる。
１．リンパ球混合培養反応
ＢＡＬＢ／ｃマウスの脾臓より取り出した脾臓細胞を１０％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０培養液を用いて各々２×１０6個／ｍＬに調整した。９６穴プレートを用い上記両細胞浮遊液各１００μＬ／ｗｅｌｌ及びサンプル（１０μＬ／ｗｅｌｌ）を加え、３日間３７℃，５％ＣＯ2の条件下で培養を行った後、３Ｈ−チミジン（３Ｈ−ＴｄＲ）０．５μＣｉ／ｗｅｌｌを加えた。そして６時間後に細胞のハーベストを行い、液体シンチレーションカウンターにより3Ｈ−ＴｄＲの取り込みを測定した。すなわち、マウス脾臓リンパ球ＤＮＡ合成を測定した。その結果を次表に示す。
【００６３】
【表４】
【００６４】
２．Ｂ１６マウスメラノーマ細胞肺転移抑制作用
７週令のＣ５７ＢＬ／６マウスに経代培養したＢ１６マウスメラノーマ細胞（５×１０５ｃｅｌｌｓ）を尾静脈から注射した。翌日、各種濃度に調製した化合物溶液を尾静脈から注射し、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞注射１４日後に麻酔下にて肺を摘出した。肺に形成された結節数を計測し、化合物を投与しない対照と比較して、転移抑制作用を評価した。その結果を次表に示す。
【００６５】
【表５】
【００６６】
〔実施例〕
以下、実施例及び参考例により、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
参考例１
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１５）の製造例
【００６７】
【化２７】
【００６８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１，３，４−オクタデカントリオール４９１ｍｇをピリジン１５ｍＬに溶解し、トリフェニルメチルクロライド４３９ｍｇ、ジメチルアミノピリジン５ｍｇを加え、７０℃で８時間撹拌する。反応液に酢酸エチルを加えて希釈し、酢酸エチル層を水洗い、飽和炭酸ナトリウム、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製して（化合物１５）４２１ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 609 [(M+Na+H)+].
IR (neat、cm~1) : 3412、2908、2848、1449、1215、1071.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、3H、J=7.32、6.35Hz)、1.24〜1.56(m、26H)、1.81(d、1H、J=5.37Hz)、2.35(d、1H、J=5.37Hz)、3.40〜3.66(m、5H)、7.23〜7.48(m、15).
参考例２
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１６）の製造例
【００６９】
【化２８】
【００７０】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１５）５８６ｍｇをジメチルホルムアミド５ｍＬに溶解し、０℃で撹拌する。そこへ水酸化ナトリウム１０５ｍｇを加え、室温で４０分間撹拌する。次にベンジルブロミド０．２５ｍＬを滴下し、室温で１８時間撹拌する。反応液を氷水にあけ、酢酸エチルで抽出する。抽出液を水洗い、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３０：１）で精製して（化合物１６）を５７４ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 783 [(M++Ｈ2Ｏ+H+-1)+].
IR (neat、cm~1) : 2914、2848、 1449、1086、1029、744.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、3H、J=7.32、6.35Hz)、1.23〜1.54(m、26H)、3.34〜3.76(m、5H)、4.41〜4.58(m、4H)、7.07〜7.45(m、25H).
参考例３
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１７）の製造例
【００７１】
【化２９】
【００７２】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１６）１５３ｍｇをテトラヒドロフラン３ｍＬに溶解し、０℃で撹拌し、そこへリチウムアルミニウムハイドロライド１１ｍｇを加え３０分間撹拌し、室温まで昇温し２時間撹拌する。反応液に氷水を加え、セライトろ過する。ろ液を酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、（化合物１７）１０４ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 739 [(M++H+1)+].
IR (neat、cm~1) : 3052、3022、2914、1737、1449.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、3H、J=6.83、6.89Hz)、1.24〜1.63(m、(ＣＨ2)13)、3.13〜3.14(m、2H)、3.46〜3.66(m、3H)、4.39〜4.67(m、4H)、7.10〜7.42(m、25H).
参考例４
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（ヘキサコサノイルアミノ）−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１８）の製造例
【００７３】
【化３０】
【００７４】
セロチン酸５６ｍｇをジメチルホルムアミド４ｍＬに溶解し、そこへ１−ハイドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾールモノハイドレイト２１ｍｇ，Ｎ−エチルモルホリン０．０２ｍＬ，１−〔３−（ジメチルアミノ）プロピル〕−３−エチルカルボジイミドハイドロクロライド２７ｍｇを加え室温で１時間撹拌する。そこへ（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−アミノ−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１７）１０４ｍｇ加え、室温で４時間撹拌した後、６０℃にて２時間撹拌する。反応液に酢酸エチルを加えて希釈し、５％塩酸、水洗い、５％水酸化ナトリウム、水洗い、飽和塩化アンモニウム、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製して、（化合物１８）１３５ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 1157 [(M+K+H)+].
IR (neat、cm~1) : 3022、2902、2848、1656、1494、1452.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、6H、J=6.83、6.84Hz)、1.24〜1.57(m、72H)、1.92(t、2H、J=7.81、7.33Hz)、3.29(dd、1H)、4.28(m、1H)、3.46〜3.49(m、2H)、3.83(dd、1H、J=6.84、2.93Hz)、4.99〜4.80(abq+S、4H、J=11.71、11.72Hz)、5.58(d、1H、J=8.79Hz)、7.20〜7.38(m、25H).
参考例５
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（ペンタコサンスルホンアミド）−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１９）の製造例
【００７５】
【化３１】
【００７６】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１７）５１４ｍｇをＣＨ2Ｃｌ2（６ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却してトリエチルアミン０．１５ｍＬとペンタコサニルスルホニルクロリド３１４ｍｇを加えて室温に戻し、１２時間撹拌する。反応液に水を加えてクロロホルム抽出（５０ｍＬ×２）して芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製して（化合物１９）５３０ｍｇを無色油状物として得る。
IR (neat、cm~1) : 3274、2908、1452、1323、1215、1140、1068、753.
1H-NMR (CDCl3):0.88(6H、t、CH3)、1.18〜1.65(72H、m、ＣＨ2)、2.80(2H、m、ＣＨ2)、3.42(2H、d、ＣＨ2)、3.62(1H、m、CH)、3.79〜3.80(2H、m、CH)、4.41〜4.71(5H、m、ベンジル位、NH)、7.22〜7.39(25H、m、芳香環）.
参考例６
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物２０）の製造例
【００７７】
【化３２】
【００７８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（ヘキサコサノイルアミノ）１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１８）１１７ｍｇをメタノール１．５ｍＬに溶解し、トルエンスルホン酸１０ｍｇを加え室温で３時間撹拌する。反応液に酢酸エチルを加えて希釈し飽和重槽水に注ぐ。有機層を分取し、水洗い、乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製して（化合物２０）５８ｍｇを無色結晶として得る。融点６７−６８℃
Mass (ESI) m/z : 877 [(M+H+1)+].
IR (neat、cm~1) : 3460、2908.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、6H、J=6.84,6.35Hz)、1.25〜1.69(m、72H)、1.97〜2.02(m、2H)、3.05〜3.07(m、1H)、3.59〜3.62(m、2H)、3.68〜3.72(m、2H)、3.98〜4.01(m、1H)、4.14〜4.16(m、1H)、4.45〜4.72(abq、2H、J=11.71、11.23Hz)、4.64(abq、2H、J=11.23、11.24Hz)、6.04(d=1H、J=8.31Hz)、7.28〜7.39(m、10H).
参考例７
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジベンジルオキシ−オクタデカナール（化合物２１）の製造例
【００７９】
【化３３】
【００８０】
オキザリッククロライド０．４５ｍＬを塩化メチレン３ｍＬに溶解し、−７８℃で冷却する。次にジメチルスルホキシド０．１５ｍＬを加え、２０分間撹拌する。そこへ（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物２０）２６３ｍｇの塩化メチレン溶液２ｍＬを滴下し、１時間撹拌する。次に−７８℃でトリエチルアミン０．４２ｍＬを滴下し、室温まで昇温させ、室温で３０分間撹拌する。反応液を氷水中にあけ、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水洗い、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製して（化合物２１）１８９ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 875 [(M+H+1)+].
IR (neat、cm~1) : 3382、2902、1710、1499、1048、741.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、6H、J=6.83,6.35Hz)、1.25〜1.71(m、72H)、1.99〜2.02(m、2H)、3.60(q、1H)、3.92(dd、H、J=5.37、2.44Hz)、4.49〜4.61(2abq、4H)、4.93(dd、1H、J=7.32、2.44Hz)、6.04(d、1H、J＝7.32Hz)、7.26〜7.36(m、10H)、9.66(S、1H).
参考例８
（化合物２２）の製造例
【００８１】
【化３４】
【００８２】
（化合物１６）１．４８ｇの塩化メチレン／水（２：１）溶液１２ｍＬに、ｐ−トルエンスルホン酸３８０ｍｇを加え、室温で１６時間撹拌する。反応液を酢酸エチル３０ｍＬにて抽出、水洗、脱水、芒硝にて乾燥後、減圧濃縮する。残渣をテトラヒドロフラン／水（５：１）１５ｍＬに溶解し、トリフェニンホスフィン７００ｍｇを加え、加熱還流２時間行う。反応液を減圧濃縮し残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）にて精製し（化合物２２）を５２０ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 497 [M+].
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、t、J=11.8Hz)、1.18〜1.36(24H、m)、1.42〜1.73(2H、m)、3.40〜3.65(5H、m)、4.27〜4.70(4H、m)、7.21〜7.38(10H、m).
参考例９
（化合物２３）の製造例
【００８３】
【化３５】
【００８４】
（化合物２２）１．０ｇのテトラヒドロフラン溶液１０ｍＬに、氷冷撹拌下トリエチルアミン０．３３ｍＬ、ジ−ｔ−ブチルジカルボネート）０．５５ｍＬを加え、４時間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル３０ｍＬにて抽出、水洗、脱水、芒硝にて乾燥後、減圧濃縮する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し（化合物２３）を９６０ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 585 [(M+H)+].
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、m)、1.26〜1.30(24H、m)、1.43(9H、s)、1.64〜1.70(2H、m)、2.80(1H、bs)、3.64〜4.05(5H、m)、4.53〜4.75(4H、m)、5.10(1H、m)、7.27〜7.38(10H、m).
参考例１０
（化合物２４）の製造例
【００８５】
【化３６】
【００８６】
ジメチルスルホキシド０．７７ｍＬの塩化メチレン溶液１０ｍＬに−７８℃撹拌下、２Ｍオキザリルクロリドの塩化メチレン溶液４．０ｍＬを滴下する。１５分間撹拌した後、（化合物２３）１．１７ｇの塩化メチレン溶液１０ｍＬを滴下し、３０分間撹拌する。これにトリエチルアミン２．１ｍＬを滴下し、室温まで昇温する。反応液を氷水中にあけ、酢酸エチル３０ｍＬにて抽出、水洗、脱水、芒硝にて乾燥後、減圧濃縮を行い、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１）にて精製し（化合物２４）を６８０ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 583 [M+].
1H-NMR (CDCl3):0.87(3H、m)、1.27〜1.31(24H、m)、1.44(9H、s)、3.64〜4.08(5H、m)、4.55〜4.72(4H、m)、7.27〜7.40(10H、m)、9.83(1H、s).
参考例１１
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ベンジルオキシ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−メタンスルホニルオキシ−オクタデカン（化合物２５）の製造例
【００８７】
【化３７】
【００８８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ベンジルオキシ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−オクタデカントリオール（化合物２３）１００ｍＬをピリジン２ｍＬに溶解し、室温にてメタンスルホニルクロリド１５μＬを加えて３時間撹拌する。酢酸エチル５０ｍＬで希釈し、飽和硫酸銅水溶液で２回洗浄して、芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮してシリカゲリカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、（化合物２５）１０８ｍｇを無色油状物として得る。
Mass (ESI) m/z : 676 [M+H]+.
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、t、)、1.26〜1.68(35H、m)、2.88(3H、S)、3.59(1H、m)3.67(1H、m)、4.05(1H、m、)4.43(2H、m)、4.51〜4.82(5H、m)、7.29〜7.36(10H、m).
参考例１２
α−（２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシル）メチルホスホニウムヨーダイドの製造例（化合物Ｂ−４）
【００８９】
【化３８】
【００９０】
α−２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシルメタノール（Ｂ−２）５．２ｇ４Ａモレキュラーシーブス１０ｇのベンゼン溶液１２０ｍＬにトリフェニルホスフィン３．７ｇ、イミダゾール１．９ｇ、ヨウ素３．６ｇを加え、室温にて１時間撹拌する。反応液にエーテル１５０ｍＬを加えろ過、ろ液を減圧濃縮、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）にて精製し、α−（２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシル）メチルヨーダイド２．７ｇを得る。これとトリフェニルホスフィン１．５７ｇのアセトニトリル溶液２０ｍＬを１８時間加熱還流する。反応液を減圧濃縮、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）にて精製し、（化合物Ｂ−４）２．７ｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 944 [M+Ｈ2Ｏ].
IR (neat、cm~1) : 3004、2914、1584、1452、1357、1215、1026、915.
1H-NMR (CDCl3):3.30(1H、t、J=8.2Hz)、3.42(1H、dd、J=8.2、2.8Hz)、3.97〜4.83(15H、m)、7.17〜7.86(35H、m).
実施例１
（イ）化合物２６の製造例
【００９１】
【化３９】
【００９２】
α−（２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシル）メチルホスホニウムヨーダイド（Ｂ−４）５２０ｍｇのテトラヒドロフラン：ヘキサメチルホスホリックトリアミド（２：１）溶液３０ｍＬに、４Ａモレキュラーシーブス５００ｍｇを加え、−４０℃で撹拌下、ｎ−ＢｕＬｉヘキサン溶液０．３５ｍＬを滴下し、３０分間撹拌する。これに（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジベンジルオキシ−オクタデカナール（化合物２１）４９０ｍｇのテトヒドロフラン溶液４．０ｍＬを滴下し、−１０℃まで昇温する。反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液中にあけ、酢酸エチル３０ｍＬ×２回抽出する。水洗い、脱水乾燥後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）にて精製し、（化合物２６）１１０ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 1397 [M++1].
1H-NMR (CDCl3):0.89(6H、t、J=7.2Hz)、1.10〜1.82(76H、m)、1.58〜1.65(2H、m)、3.40(1H、dd、J=4.8、8.2Hz)、3.52〜3.64(2H、m)、3.88(1H、dd、J=4.6、10.2Hz)、3.80〜5.10(14H、m)、6.09(1H、d、J=8.8Hz)、6.63(2H、m)、7.11〜7.36(30H、m).
（ロ）化合物１の製造例
【００９３】
【化４０】
【００９４】
（化合物２６）１１０ｍｇのエタノール溶液１０ｍＬに、２０％水酸化パラジウム２０ｍｇ、４−メチルシクロヘキセン１．０ｍＬを加え、水素気流下６時間加熱還流を行う。反応液をろ過し、ろ液を減圧濃縮、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１）にて精製し、（化合物１：（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’，−ヒドロキシノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトジラノシド）２．１ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 855 [M+-H].
実施例２
（イ）化合物５の製造例
【００９５】
【化４１】
【００９６】
５０ｍＬのナス型フラスコに液体アンモニアを取り、（−７８℃冷却）そこへ（化合物２７）（１００ｍｇ／Ｅｔｈｅｒ２ｍＬ）５ｍＬ入れる。次にＮａを加え、青色になるまで加え、そのまま１時間−７８℃で撹拌する。塩化アンモニウムの粉末を加え、室温で放置する。ＴＨＦ３０ｍＬを加えろ過し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝１０：１）で精製し、（化合物５）を３５ｍｇ（収率５４．３％）得る。融点＝４４−４６℃
IR (neat、cm~1) : 3400、2930、2860、1638、1100.
（ロ）化合物７の製造例
【００９７】
【化４２】
【００９８】
５０ｍＬのナス型フラスコに（化合物５）２５ｍｇ、ＴＨＦ２ｍＬ、５％パラジウム−炭素１ｍｇで水素気流下、室温で４０分撹拌する。反応液をろ過し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝１０：１）で精製して（化合物７）１０ｍｇ（収率４０％）を白色結晶として得る。融点＝１４２−１４４℃
Mass (ESI) m/z : 855 [M+-2].
IR (neat、cm~1) : 3352、2902、1593、1467、1206.
参考例１３
化合物２８の製造例
【００９９】
【化４３】
【０１００】
２，３，４，６−テトラ−０−アセチル−１−チオ−α−Ｄ−ガラクトピラノース（Ｃ−７）７０ｍｇをＤＭＦ５ｍＬに溶解し、室温で炭酸セシウム６３ｍｇとメタンスルホニル体（化合物２５）１０８ｍｇを加えて８０℃にて３時間撹拌する。酢酸エチル５０ｍＬで希釈し、水で洗浄（２回）して、芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、（化合物２８）２８ｍｇを無色油状物として得る。
Mass (ESI) m/z : 944 [M+H]+.
IR (neat、cm~1) : 3370、2914、1746、1497、1368、1224、1164、1053、750.
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、t)、1.26〜1.64(35H、m、ＣＨ2)、1.99〜2.09(12H、m)、2.88〜3.12(2H、m)、3.56〜5.67(15H、m)、7.26〜7.36(10H、m).
参考例１４
化合物２９の製造例
【０１０１】
【化４４】
【０１０２】
（化合物２８）２８ｍｇをＴＨＦ２ｍＬに溶解し、１０％塩酸水溶液１ｍＬを加えた後、５％パラジウム−炭素２０ｍｇを加えて水素気流下、室温で６時間撹拌する。触媒をセライトろ過にてろ別した後、ＴＨＦで洗浄し、ろ液を芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮して（化合物２９）１６ｍｇを淡黄色油状物として得た。
得られた化合物をそのまま次の反応に用いた。
参考例１５
化合物８の製造例
【０１０３】
【化４５】
【０１０４】
（化合物２９）１６ｍｇをＴＨＦ２ｍＬに溶解し室温で１０％水酸化カリウム水溶液１ｍＬを加えて１時間撹拌する。反応液を０℃に冷却した後、酸クロリド（化合物３０）０．４ｍＬを加えて１５分撹拌する。ＴＨＦ１０ｍＬで希釈し、芒硝で脱水した後、ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１）で精製し、（化合物８）７ｍｇを無色結晶で得た。
Mass (ESI) m/z : 875[M+H]+.
参考例１６
化合物９の製造例
【０１０５】
【化４６】
【０１０６】
（化合物１）１４ｍｇのピリジン溶液０．５ｍＬに三酸化イオウピリジン錯体７．６ｍｇを加え、室温で１６時間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残渣をカラム（水：メタノール＝９８：２）にて精製し、（化合物９）を８ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 925[M+H]
参考例１７
化合物１０の製造例
【０１０７】
【化４７】
【０１０８】
（化合物１）１．６ｍｇのテトラヒドロフラン溶液１．０ｍＬに氷冷撹拌下水素化ナトリウム１ｍｇを加え、室温にて３０分間撹拌する。これにブロモ酢酸１ｍｇを加え、６０℃まで加湿し、４時間撹拌する。反応液に飽和塩化アンモニア水２００ｍＬを加え、反応液を減圧濃縮する。残渣をショートカラムにて精製し、（化合物１０）を０．８ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 914[M+H].
参考例１８
【０１０９】
【化４８】
【０１１０】
（化合物１）４．５ｍｇのアセトニトリル溶液１ｍＬに氷冷撹拌下、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシラジカル（ＴＥＭＰＯ），次亜塩素酸ナトリウム、臭化カリウムを加え、室温で２時間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、ショートカラムにて精製し、化合物１１を２．８ｍｇ得た。
Mass (ESI) m/z : 869[M+H]+.
1H-NMR (CDCl3):0.90(6H,m),1.19〜1.42(76H,m),1.58(4H,m),1.70(2H,m),3.48〜4.33(8H,m)
【０１１１】
参考例１９
（化合物２）は実施例３に従い、合成することができる。
実施例３
（化合物３）は、参考例５、６、７及び実施例１に従い、合成することができる。
実施例４
（化合物６）は、実施例１に従い、合成することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍剤及び免疫賦活剤として有用な新規糖脂質誘導体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖脂質は細胞の分化、増殖、神経細胞の成長等に重要な役割を担っている（非特許文献１、非特許文献２）。また、α−ガラクトシルセラミドは強力な抗腫瘍活性や免疫賦活活性を有することが報告されている(非特許文献３、非特許文献４）。更に、α−ガラクトシルセラミドは、β−ガラクトシルセラミドに比べ、その抗腫瘍活性や免疫賦活活性が強力であることが報告されている（非特許文献５、非特許文献６）。
【０００３】
しかし、ガラクトシルセラミドを医薬として体内投与するとリソゾーム等に存在するガラクトシダーゼなどの酵素により、グルコシド結合が加水分解されることが予想される（非特許文献７）。グルコシダーゼ代謝に安定な糖誘導体として、グルコシド結合の酸素を炭素に変換したＣ−配糖体が知られている。（非特許文献８、非特許文献９及び非特許文献１０）更に、グルコシド結合の酸素原子を硫黄原子に置換したＳ−配糖体（非特許文献１１、非特許文献１２）や、グルコシド結合の酸素原子を窒素原子に置換したＮ−配糖体（非特許文献１３）も知られている。
【０００４】
現在までに、ガラクトシルセラミドのグルコシド結合の酸素を炭素に変換した、Ｃ−配糖体合成としては、β−Ｃ−ガラクトシルセラミド（β−体）の合成が報告されているのみである（非特許文献１４）。しかしながら、α−Ｃ−ガラクトシルセラミド（α−体）の合成は報告がない。α−Ｃ、Ｎ、Ｓ−グルコシド結合を有するα−体である糖脂質誘導体合成は、α−ガラクトシダーゼにより分解されるα−Ｏ−ガラクトシドよりも有用性が期待される。すなわち、強力な抗腫瘍活性や免疫賦活作用を有し、更にグルコシダーゼ代謝、酸・塩基に安定で、且つ室温で長期保存できる等である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Hakomori et al.,Annu.Rev.Biochem.1981,50,733〜764.
【非特許文献２】Morita,Glycosphingolipids.1985,59〜82, Elsevier Science Publishing Co., New York.
【非特許文献３】Morita et al.,J.Med.Chem.1991,38,2176.
【非特許文献４】Kawano et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1998,95,5690.
【非特許文献５】Kawano et al.,Sience.1997, 278,1626〜1629.
【非特許文献６】Sakai et al.,J.Med.Chem.1999,42,1836〜1841.
【非特許文献７】Chen et al.,Biochem.Biophys.Acta.1993,1170,53〜61.
【非特許文献８】Linhardt et al.,Tetrahedron.1998,54,9913〜9959.
【非特許文献９】Levy et al.,「The Chemistry of C-Glycosides.」Pergamon: Oxford,1995.
【非特許文献１０】Postema et al.,「C-Glycoside Synthesis. 」CRC Press:Boca Raton,1995.
【非特許文献１１】Rahman et al.,In Studies in Natural Products Chemistry. Elsevier:New York,1991;vol.8,pp315〜357.
【非特許文献１２】Defaye et al.,J.Carbohydr.Chem.(UK)1998,30,159〜166.
【非特許文献１３】Stunkel et al.,Prog.Leukocyte Biol.1989,9,575〜579.
【非特許文献１４】Dondoni et al.,J.Org.Chem.1991,64,5557〜5564.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、強力な抗腫瘍活性や、免疫賦活作用を有し、グルコシダーゼ代謝、酸・塩基に安定で、且つ室温で長期保存できるα−Ｃ−グルコシド結合を有する糖脂質誘導体、すなわち、既知化合物に比べ高い抗腫瘍活性や免疫賦活作用を有し、且つ室温で長期保存することができ、更に長時間作用持続型の新規糖脂質誘導体の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、新規糖脂質誘導体について抗腫瘍剤、免疫賦活剤の創製を目的に研究を行った結果、一般式（ｅ）で示される新規誘導体が優れた抗腫瘍作用、免疫賦活作用を有することを見出し、そして、その製造方法として、本発明の製造方法を完成させた。
本発明は一般式（ｄ）：
【０００８】
【化１】
【０００９】
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基を表す。Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−を表す。ｂは１〜５の整数である。）
で示される化合物を接触還元することを特徴とする次式の一般式（ｅ）：
【００１０】
【化２】
【００１１】
（式中、Ｒ０、Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物の製造方法である。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の製造法方法で得られた一般式（ｅ）で示される新規糖脂質誘導体は、高い抗腫瘍活性や免疫賦活作用を有し、グルコシダーゼ代謝、酸・塩基に安定で、且つ室温で長期保存できる。そして、悪性腫瘍の予防、治療剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下に本発明に関する化合物を例示する。また、それ等の化学構造式と分析値を表１〜３に示す。
（１）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物１）
（２）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−１’−（Ｅ／Ｚ）−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物２）
（３）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ペンタコサン スルホニルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物３）
（４）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（ヘキサコサノイルアミノ）−（Ｅ／Ｚ）−ヘニコス−３’−エニル α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物４）
（５）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（テトラコサノイルアミノ）−（Ｅ／Ｚ）−ヘニコス−３’−エニル α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物５）
（６）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（ヘキサコサノイルアミノ）−ヘニコサン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物６）
（７）（５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−６’，７’−ジヒドロキシ−５’−Ｎ−（テトラコサノイルアミノ）−ヘニコサン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物７）
（８）（２’Ｓ，３’Ｓ，４’Ｒ）−３’，４’−ジヒドロキシ−２’−Ｎ−（ヘキサコサノイルアミノ）−オクタデカン−１’−チオ−イル−α−Ｓ−Ｄ−ガラクトピラノシド（化合物８）
（９）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−（６−Ｏ−スルホン酸）−ガラクトピラノシド（化合物９）
（１０）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−（６−Ｏ−メチレン カルボン酸）−ガラクトピラノシド（化合物１０）
（１１）（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’−ジヒドロキシ−ノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクツロン酸（化合物１１）
【００１４】
【表１】
【００１５】
【表２】
【００１６】
【表３】
【００１７】
以下に本発明の製造方法の例を説明する。各符号は前記と同じである。
一般式（ｄ）で示される化合物は、例えば、次のようにして製造する。
一般式（ａ）：
【００１８】
【化３】
【００１９】
［式中、Ｒ１は−Ｏ−Ｒ４、−Ｏ−Ｓｉ(Ｒ４)３又は−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４を、Ｒ５は−Ｏ−Ｒ４、−Ｏ−Ｓｉ(Ｒ４)３、−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４、−ＮＡｃ２又は−ＮＨＡｃを、Ｒ３は−ＰＰｈ３＋Ｉ−又は−ＰＯ−(Ｏ−Ｒ４)２を表す。但し、Ｒ４は低級アルキル基又はフェニル誘導体である。ｂは１〜５の整数である。］
で示される化合物と、次式の一般式（ｂ）：
【００２０】
【化４】
【００２１】
［式中、Ｒ２は−Ｏ−Ｒ４、−Ｏ−Ｓｉ(Ｒ４)３又は−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４（但し、Ｒ４は前記と同じ）を表す。Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−を表す。］
で示される化合物を塩基の存在下でウィテッヒ反応を行い、次式の一般式（ｃ）：
【００２２】
【化５】
【００２３】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物となし、次いでこの一般式（ｃ）で示される化合物の脱保護基を行い一般式（ｄ）：
【００２４】
【化６】
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基を表す。Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物となす。
（Ａ）セラミド部の合成
Ｉ．セラミド前駆体（Ａ-１）はＤ−Galactoseを出発原料としてSchmidtらの方法（Liebigs Ann.1995,755〜764）により得られる。
化合物（Ａ-１）の一級水酸基をトリチル化、続いて二級水酸基をベンジル化して化合物（Ａ-２）とする。
【００２５】
【化７】
【００２６】
（式中、Ｗ1は炭素数８〜１６の炭化水素鎖であり、不飽和部を含む場合もある。）
化合物（Ａ-２）のアジド基を接触還元又はトリフェニルホスフィンと水により、還元してアミノ化合物（Ａ-３）とし、
【００２７】
【化８】
【００２８】
生じたアミノ基を塩基存在下、アミド化又はスルホニル化することにより、各々化合物（Ａ-４）、（Ａ-５）を得る。また、（Ａ-３）を縮合剤（例えば、１−〔３−（ジメチルアミノ）プロピル〕−３−エチルカルボジイミドハイドロクロライド等）の存在下でアミド化することにより化合物（Ａ-４）を得ることもできる。
【００２９】
【化９】
【００３０】
化合物（Ａ-４）、（Ａ-５）に酸を作用させ、トリチル基を脱保護して化合物（Ａ-６）、（Ａ-７）とし、生じた一級水酸基を酸化（例えばスワン酸化（J.Org.Chem.1978,43,2482）等）することでアルデヒド化合物（Ａ-８）或いは（Ａ-９）を得る。
【００３１】
【化１０】
【００３２】
II．化合物（Ａ-２）に酸を作用させ、トリチル基を脱保護した後、アジド基を還元（例えばＰＰｈ3／Ｈ2Ｏ等）することで化合物（Ａ-１０）を得る。化合物（Ａ-１０）のアミノ基をＢｏｃ基で保護し、次いで一級水酸基を酸化（例えばスワン酸化（J.Org.Chem.1978,43,2482.等）することでアルデヒド化合物（Ａ-１１）を得る。
【００３３】
【化１１】
【００３４】
III．化合物（Ａ-１２）の一級水酸基をメタンスルホニル化又はブロム化し、化合物（Ａ-１３）を得る。
【００３５】
【化１２】
【００３６】
（Ｂ）糖部の合成
文献既知のα−ガラクトシルシアノ体（Ｂ-１）をLopexら（J.Carbohydr.Chem.1987,6,273〜279.）の製法によりシアノ基を還元してアルコール化合物（Ｂ-２）を得る。但し、化合物（Ｂ-２）の合成はこの方法に限らない。
【００３７】
【化１３】
【００３８】
化合物（Ｂ-２）の一級水酸基をトルエンスルホニル化、続いてヨウ素化を行い、化合物（Ｂ-３）とした後、トリフェニルホスフィンと反応させ化合物（Ｂ-４）を得た。
【００３９】
【化１４】
【００４０】
化合物（Ｂ-４）に塩基（例えばブチルリチウム、フッ化カリウム等）を作用させ、化合物（Ｂ-５）を得た。
【００４１】
【化１５】
【００４２】
（Ｃ）糖部とセラミド部とのカップリング反応
Ｉ．（Ａ）で得られたセラミド化合物（Ａ-８）と（Ａ-９）を（Ｂ）で得られた化合物（Ｂ-５）とウィテッヒ反応させ、化合物（Ｃ-１）又は（Ｃ-２）とした後、液体アンモニア中、ナトリウムを作用させ化合物（Ｃ-３）又は（Ｃ-４）とする。さらに続いて接触還元し、化合物（Ｃ-５）又は（Ｃ-６）とするか、もしくは化合物（Ｃ-１）或いは（Ｃ-２）を直接接触還元し、化合物（Ｃ-５）又は（Ｃ-６）を得る。
【００４３】
【化１６】
【００４４】
【化１７】
【００４５】
II．（Ａ）で得られたセラミド化合物（Ａ-１１）と、（Ｂ）で得られた化合物（Ｂ-５）をウィテッヒ反応させ化合物（Ｃ-７）とした後、液体アンモニア中、ナトリウムを作用させ化合物（Ｃ-８）をとする。更に続いて接触還元し、化合物（Ｃ-９）とするか、もしくは化合物（Ｃ-７）を直接接触還元し、化合物（Ｃ-９）を得る。
【００４６】
【化１８】
【００４７】
化合物（Ｃ-８）又は（Ｃ-９）に酸を作用させ脱保護基し、化合物（Ｃ-１０）或いは（Ｃ-１１）とした後、アミノ基を塩基存在下でアミド化、又はスルホニル化して化合物（Ｃ-３）又は（Ｃ-４）或いは（Ｃ-５）又は（Ｃ-６）とする。
【００４８】
【化１９】
【００４９】
【化２０】
【００５０】
III．（Ａ）で得られたセラミド化合物（Ａ-１３）と、糖誘導体（Ｃ-１２）或いは（Ｃ-１３）とを例えばＣｓ2ＣＯ3のような塩基の存在下で、グルコシデーション反応させ、化合物（Ｃ-１４）或いは（Ｃ-１５）とする。
【００５１】
【化２１】
【００５２】
化合物（Ｃ-１４）或いは（Ｃ-１５）を脱保護基し化合物（Ｃ-１６）或いは（Ｃ-１７）とした後、アミノ基を塩基存在下でアミド化、又はスルホニル化して（Ｃ-１８）、（Ｃ-１９）或いは（Ｃ-２０）、（Ｃ-２１）とした後、場合により（Ｃ-１８）或いは（Ｃ-１９）は酸化を行い、（Ｃ-２２）或いは（Ｃ-２３）とする。
【００５３】
【化２２】
【００５４】
【化２３】
【００５５】
（Ｄ）糖部の一級水酸基の修飾
Ｉ．一般式（ｅ）で示される化合物において、糖部の一級水酸基を、−ＣＨ2ＯＳＯ3Ｈにすることができる。そのときには、化合物（Ｄ-１）に対し、ピリジン溶液中、ＳＯ3・Ｐｙを作用させ、化合物（Ｄ-２）とする。
【００５６】
【化２４】
【００５７】
II．一般式（ｅ）で示される化合物において、糖部の一級水酸基を、−ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ2Ｈにすることができる。そのときには、化合物（Ｄ-１）に対し、ＮａＯＨ存在下ＢｒＣＨ2ＣＯ2Ｈを作用させ化合物（Ｄ-３）とする。
【００５８】
【化２５】
【００５９】
III．一般式（ｅ）で示される化合物において、糖部の一級水酸基を、−ＣＯ2Ｈにすることができる。そのときには、化合物（Ｄ-１）の一級水酸基を酸化剤（例えばＴＥＭＰＯ＝２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ、フリーラジカル等）によりカルボン酸へ酸化することで化合物（Ｄ-４）とする。
【００６０】
【化２６】
【００６１】
本発明の一般式（ｅ）で示される化合物又はその薬理学的に許容し得る塩は、１種又は２種以上を有効成分として、ヒト又は哺乳動物に投与することができる。また、本発明の化合物は、そのままで或いは公知の製剤技術により、注射剤、粉剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、トローチ、ドライシロップ、リポゾーム製剤などに製剤化されることができる。具体的な本発明化合物の投与量、投与回数は患者の症状、年齢、体重等により適量が決定されなければならない。
【００６２】
（試験例）
以下に抗腫瘍活性、免疫賦活活性についての薬理試験例を挙げる。
１．リンパ球混合培養反応
ＢＡＬＢ／ｃマウスの脾臓より取り出した脾臓細胞を１０％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０培養液を用いて各々２×１０6個／ｍＬに調整した。９６穴プレートを用い上記両細胞浮遊液各１００μＬ／ｗｅｌｌ及びサンプル（１０μＬ／ｗｅｌｌ）を加え、３日間３７℃，５％ＣＯ2の条件下で培養を行った後、３Ｈ−チミジン（３Ｈ−ＴｄＲ）０．５μＣｉ／ｗｅｌｌを加えた。そして６時間後に細胞のハーベストを行い、液体シンチレーションカウンターにより3Ｈ−ＴｄＲの取り込みを測定した。すなわち、マウス脾臓リンパ球ＤＮＡ合成を測定した。その結果を次表に示す。
【００６３】
【表４】
【００６４】
２．Ｂ１６マウスメラノーマ細胞肺転移抑制作用
７週令のＣ５７ＢＬ／６マウスに経代培養したＢ１６マウスメラノーマ細胞（５×１０５ｃｅｌｌｓ）を尾静脈から注射した。翌日、各種濃度に調製した化合物溶液を尾静脈から注射し、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞注射１４日後に麻酔下にて肺を摘出した。肺に形成された結節数を計測し、化合物を投与しない対照と比較して、転移抑制作用を評価した。その結果を次表に示す。
【００６５】
【表５】
【００６６】
〔実施例〕
以下、実施例及び参考例により、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
参考例１
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１５）の製造例
【００６７】
【化２７】
【００６８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１，３，４−オクタデカントリオール４９１ｍｇをピリジン１５ｍＬに溶解し、トリフェニルメチルクロライド４３９ｍｇ、ジメチルアミノピリジン５ｍｇを加え、７０℃で８時間撹拌する。反応液に酢酸エチルを加えて希釈し、酢酸エチル層を水洗い、飽和炭酸ナトリウム、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製して（化合物１５）４２１ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 609 [(M+Na+H)+].
IR (neat、cm~1) : 3412、2908、2848、1449、1215、1071.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、3H、J=7.32、6.35Hz)、1.24〜1.56(m、26H)、1.81(d、1H、J=5.37Hz)、2.35(d、1H、J=5.37Hz)、3.40〜3.66(m、5H)、7.23〜7.48(m、15).
参考例２
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１６）の製造例
【００６９】
【化２８】
【００７０】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１５）５８６ｍｇをジメチルホルムアミド５ｍＬに溶解し、０℃で撹拌する。そこへ水酸化ナトリウム１０５ｍｇを加え、室温で４０分間撹拌する。次にベンジルブロミド０．２５ｍＬを滴下し、室温で１８時間撹拌する。反応液を氷水にあけ、酢酸エチルで抽出する。抽出液を水洗い、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３０：１）で精製して（化合物１６）を５７４ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 783 [(M++Ｈ2Ｏ+H+-1)+].
IR (neat、cm~1) : 2914、2848、 1449、1086、1029、744.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、3H、J=7.32、6.35Hz)、1.23〜1.54(m、26H)、3.34〜3.76(m、5H)、4.41〜4.58(m、4H)、7.07〜7.45(m、25H).
参考例３
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１７）の製造例
【００７１】
【化２９】
【００７２】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１６）１５３ｍｇをテトラヒドロフラン３ｍＬに溶解し、０℃で撹拌し、そこへリチウムアルミニウムハイドロライド１１ｍｇを加え３０分間撹拌し、室温まで昇温し２時間撹拌する。反応液に氷水を加え、セライトろ過する。ろ液を酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、（化合物１７）１０４ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 739 [(M++H+1)+].
IR (neat、cm~1) : 3052、3022、2914、1737、1449.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、3H、J=6.83、6.89Hz)、1.24〜1.63(m、(ＣＨ2)13)、3.13〜3.14(m、2H)、3.46〜3.66(m、3H)、4.39〜4.67(m、4H)、7.10〜7.42(m、25H).
参考例４
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（ヘキサコサノイルアミノ）−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１８）の製造例
【００７３】
【化３０】
【００７４】
セロチン酸５６ｍｇをジメチルホルムアミド４ｍＬに溶解し、そこへ１−ハイドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾールモノハイドレイト２１ｍｇ，Ｎ−エチルモルホリン０．０２ｍＬ，１−〔３−（ジメチルアミノ）プロピル〕−３−エチルカルボジイミドハイドロクロライド２７ｍｇを加え室温で１時間撹拌する。そこへ（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−アミノ−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１７）１０４ｍｇ加え、室温で４時間撹拌した後、６０℃にて２時間撹拌する。反応液に酢酸エチルを加えて希釈し、５％塩酸、水洗い、５％水酸化ナトリウム、水洗い、飽和塩化アンモニウム、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製して、（化合物１８）１３５ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 1157 [(M+K+H)+].
IR (neat、cm~1) : 3022、2902、2848、1656、1494、1452.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、6H、J=6.83、6.84Hz)、1.24〜1.57(m、72H)、1.92(t、2H、J=7.81、7.33Hz)、3.29(dd、1H)、4.28(m、1H)、3.46〜3.49(m、2H)、3.83(dd、1H、J=6.84、2.93Hz)、4.99〜4.80(abq+S、4H、J=11.71、11.72Hz)、5.58(d、1H、J=8.79Hz)、7.20〜7.38(m、25H).
参考例５
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（ペンタコサンスルホンアミド）−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１９）の製造例
【００７５】
【化３１】
【００７６】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１７）５１４ｍｇをＣＨ2Ｃｌ2（６ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却してトリエチルアミン０．１５ｍＬとペンタコサニルスルホニルクロリド３１４ｍｇを加えて室温に戻し、１２時間撹拌する。反応液に水を加えてクロロホルム抽出（５０ｍＬ×２）して芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製して（化合物１９）５３０ｍｇを無色油状物として得る。
IR (neat、cm~1) : 3274、2908、1452、1323、1215、1140、1068、753.
1H-NMR (CDCl3):0.88(6H、t、CH3)、1.18〜1.65(72H、m、ＣＨ2)、2.80(2H、m、ＣＨ2)、3.42(2H、d、ＣＨ2)、3.62(1H、m、CH)、3.79〜3.80(2H、m、CH)、4.41〜4.71(5H、m、ベンジル位、NH)、7.22〜7.39(25H、m、芳香環）.
参考例６
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物２０）の製造例
【００７７】
【化３２】
【００７８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（ヘキサコサノイルアミノ）１−Ｏ−トリフェニルメチル−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物１８）１１７ｍｇをメタノール１．５ｍＬに溶解し、トルエンスルホン酸１０ｍｇを加え室温で３時間撹拌する。反応液に酢酸エチルを加えて希釈し飽和重槽水に注ぐ。有機層を分取し、水洗い、乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製して（化合物２０）５８ｍｇを無色結晶として得る。融点６７−６８℃
Mass (ESI) m/z : 877 [(M+H+1)+].
IR (neat、cm~1) : 3460、2908.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、6H、J=6.84,6.35Hz)、1.25〜1.69(m、72H)、1.97〜2.02(m、2H)、3.05〜3.07(m、1H)、3.59〜3.62(m、2H)、3.68〜3.72(m、2H)、3.98〜4.01(m、1H)、4.14〜4.16(m、1H)、4.45〜4.72(abq、2H、J=11.71、11.23Hz)、4.64(abq、2H、J=11.23、11.24Hz)、6.04(d=1H、J=8.31Hz)、7.28〜7.39(m、10H).
参考例７
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジベンジルオキシ−オクタデカナール（化合物２１）の製造例
【００７９】
【化３３】
【００８０】
オキザリッククロライド０．４５ｍＬを塩化メチレン３ｍＬに溶解し、−７８℃で冷却する。次にジメチルスルホキシド０．１５ｍＬを加え、２０分間撹拌する。そこへ（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物２０）２６３ｍｇの塩化メチレン溶液２ｍＬを滴下し、１時間撹拌する。次に−７８℃でトリエチルアミン０．４２ｍＬを滴下し、室温まで昇温させ、室温で３０分間撹拌する。反応液を氷水中にあけ、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水洗い、飽和食塩水で洗い、芒硝で乾燥後、溶媒を留去する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製して（化合物２１）１８９ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 875 [(M+H+1)+].
IR (neat、cm~1) : 3382、2902、1710、1499、1048、741.
1H-NMR (CDCl3):0.88(t、6H、J=6.83,6.35Hz)、1.25〜1.71(m、72H)、1.99〜2.02(m、2H)、3.60(q、1H)、3.92(dd、H、J=5.37、2.44Hz)、4.49〜4.61(2abq、4H)、4.93(dd、1H、J=7.32、2.44Hz)、6.04(d、1H、J＝7.32Hz)、7.26〜7.36(m、10H)、9.66(S、1H).
参考例８
（化合物２２）の製造例
【００８１】
【化３４】
【００８２】
（化合物１６）１．４８ｇの塩化メチレン／水（２：１）溶液１２ｍＬに、ｐ−トルエンスルホン酸３８０ｍｇを加え、室温で１６時間撹拌する。反応液を酢酸エチル３０ｍＬにて抽出、水洗、脱水、芒硝にて乾燥後、減圧濃縮する。残渣をテトラヒドロフラン／水（５：１）１５ｍＬに溶解し、トリフェニンホスフィン７００ｍｇを加え、加熱還流２時間行う。反応液を減圧濃縮し残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）にて精製し（化合物２２）を５２０ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 497 [M+].
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、t、J=11.8Hz)、1.18〜1.36(24H、m)、1.42〜1.73(2H、m)、3.40〜3.65(5H、m)、4.27〜4.70(4H、m)、7.21〜7.38(10H、m).
参考例９
（化合物２３）の製造例
【００８３】
【化３５】
【００８４】
（化合物２２）１．０ｇのテトラヒドロフラン溶液１０ｍＬに、氷冷撹拌下トリエチルアミン０．３３ｍＬ、ジ−ｔ−ブチルジカルボネート）０．５５ｍＬを加え、４時間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル３０ｍＬにて抽出、水洗、脱水、芒硝にて乾燥後、減圧濃縮する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し（化合物２３）を９６０ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 585 [(M+H)+].
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、m)、1.26〜1.30(24H、m)、1.43(9H、s)、1.64〜1.70(2H、m)、2.80(1H、bs)、3.64〜4.05(5H、m)、4.53〜4.75(4H、m)、5.10(1H、m)、7.27〜7.38(10H、m).
参考例１０
（化合物２４）の製造例
【００８５】
【化３６】
【００８６】
ジメチルスルホキシド０．７７ｍＬの塩化メチレン溶液１０ｍＬに−７８℃撹拌下、２Ｍオキザリルクロリドの塩化メチレン溶液４．０ｍＬを滴下する。１５分間撹拌した後、（化合物２３）１．１７ｇの塩化メチレン溶液１０ｍＬを滴下し、３０分間撹拌する。これにトリエチルアミン２．１ｍＬを滴下し、室温まで昇温する。反応液を氷水中にあけ、酢酸エチル３０ｍＬにて抽出、水洗、脱水、芒硝にて乾燥後、減圧濃縮を行い、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１）にて精製し（化合物２４）を６８０ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 583 [M+].
1H-NMR (CDCl3):0.87(3H、m)、1.27〜1.31(24H、m)、1.44(9H、s)、3.64〜4.08(5H、m)、4.55〜4.72(4H、m)、7.27〜7.40(10H、m)、9.83(1H、s).
参考例１１
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ベンジルオキシ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−メタンスルホニルオキシ−オクタデカン（化合物２５）の製造例
【００８７】
【化３７】
【００８８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ベンジルオキシ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−オクタデカントリオール（化合物２３）１００ｍＬをピリジン２ｍＬに溶解し、室温にてメタンスルホニルクロリド１５μＬを加えて３時間撹拌する。酢酸エチル５０ｍＬで希釈し、飽和硫酸銅水溶液で２回洗浄して、芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮してシリカゲリカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、（化合物２５）１０８ｍｇを無色油状物として得る。
Mass (ESI) m/z : 676 [M+H]+.
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、t、)、1.26〜1.68(35H、m)、2.88(3H、S)、3.59(1H、m)3.67(1H、m)、4.05(1H、m、)4.43(2H、m)、4.51〜4.82(5H、m)、7.29〜7.36(10H、m).
参考例１２
α−（２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシル）メチルホスホニウムヨーダイドの製造例（化合物Ｂ−４）
【００８９】
【化３８】
【００９０】
α−２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシルメタノール（Ｂ−２）５．２ｇ４Ａモレキュラーシーブス１０ｇのベンゼン溶液１２０ｍＬにトリフェニルホスフィン３．７ｇ、イミダゾール１．９ｇ、ヨウ素３．６ｇを加え、室温にて１時間撹拌する。反応液にエーテル１５０ｍＬを加えろ過、ろ液を減圧濃縮、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）にて精製し、α−（２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシル）メチルヨーダイド２．７ｇを得る。これとトリフェニルホスフィン１．５７ｇのアセトニトリル溶液２０ｍＬを１８時間加熱還流する。反応液を減圧濃縮、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）にて精製し、（化合物Ｂ−４）２．７ｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 944 [M+Ｈ2Ｏ].
IR (neat、cm~1) : 3004、2914、1584、1452、1357、1215、1026、915.
1H-NMR (CDCl3):3.30(1H、t、J=8.2Hz)、3.42(1H、dd、J=8.2、2.8Hz)、3.97〜4.83(15H、m)、7.17〜7.86(35H、m).
実施例１
（イ）化合物２６の製造例
【００９１】
【化３９】
【００９２】
α−（２，３，４，６−テトラベンジルガラクトピラノシル）メチルホスホニウムヨーダイド（Ｂ−４）５２０ｍｇのテトラヒドロフラン：ヘキサメチルホスホリックトリアミド（２：１）溶液３０ｍＬに、４Ａモレキュラーシーブス５００ｍｇを加え、−４０℃で撹拌下、ｎ−ＢｕＬｉヘキサン溶液０．３５ｍＬを滴下し、３０分間撹拌する。これに（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−ヘキサコサノイルアミノ−３，４−ジベンジルオキシ−オクタデカナール（化合物２１）４９０ｍｇのテトヒドロフラン溶液４．０ｍＬを滴下し、−１０℃まで昇温する。反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液中にあけ、酢酸エチル３０ｍＬ×２回抽出する。水洗い、脱水乾燥後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）にて精製し、（化合物２６）１１０ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 1397 [M++1].
1H-NMR (CDCl3):0.89(6H、t、J=7.2Hz)、1.10〜1.82(76H、m)、1.58〜1.65(2H、m)、3.40(1H、dd、J=4.8、8.2Hz)、3.52〜3.64(2H、m)、3.88(1H、dd、J=4.6、10.2Hz)、3.80〜5.10(14H、m)、6.09(1H、d、J=8.8Hz)、6.63(2H、m)、7.11〜7.36(30H、m).
（ロ）化合物１の製造例
【００９３】
【化４０】
【００９４】
（化合物２６）１１０ｍｇのエタノール溶液１０ｍＬに、２０％水酸化パラジウム２０ｍｇ、４−メチルシクロヘキセン１．０ｍＬを加え、水素気流下６時間加熱還流を行う。反応液をろ過し、ろ液を減圧濃縮、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１）にて精製し、（化合物１：（３’Ｓ，４’Ｓ，５’Ｒ）−３’−Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ−４’，５’，−ヒドロキシノナデカン−α−Ｃ−Ｄ−ガラクトジラノシド）２．１ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 855 [M+-H].
実施例２
（イ）化合物５の製造例
【００９５】
【化４１】
【００９６】
５０ｍＬのナス型フラスコに液体アンモニアを取り、（−７８℃冷却）そこへ（化合物２７）（１００ｍｇ／Ｅｔｈｅｒ２ｍＬ）５ｍＬ入れる。次にＮａを加え、青色になるまで加え、そのまま１時間−７８℃で撹拌する。塩化アンモニウムの粉末を加え、室温で放置する。ＴＨＦ３０ｍＬを加えろ過し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝１０：１）で精製し、（化合物５）を３５ｍｇ（収率５４．３％）得る。融点＝４４−４６℃
IR (neat、cm~1) : 3400、2930、2860、1638、1100.
（ロ）化合物７の製造例
【００９７】
【化４２】
【００９８】
５０ｍＬのナス型フラスコに（化合物５）２５ｍｇ、ＴＨＦ２ｍＬ、５％パラジウム−炭素１ｍｇで水素気流下、室温で４０分撹拌する。反応液をろ過し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝１０：１）で精製して（化合物７）１０ｍｇ（収率４０％）を白色結晶として得る。融点＝１４２−１４４℃
Mass (ESI) m/z : 855 [M+-2].
IR (neat、cm~1) : 3352、2902、1593、1467、1206.
参考例１３
化合物２８の製造例
【００９９】
【化４３】
【０１００】
２，３，４，６−テトラ−０−アセチル−１−チオ−α−Ｄ−ガラクトピラノース（Ｃ−７）７０ｍｇをＤＭＦ５ｍＬに溶解し、室温で炭酸セシウム６３ｍｇとメタンスルホニル体（化合物２５）１０８ｍｇを加えて８０℃にて３時間撹拌する。酢酸エチル５０ｍＬで希釈し、水で洗浄（２回）して、芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、（化合物２８）２８ｍｇを無色油状物として得る。
Mass (ESI) m/z : 944 [M+H]+.
IR (neat、cm~1) : 3370、2914、1746、1497、1368、1224、1164、1053、750.
1H-NMR (CDCl3):0.88(3H、t)、1.26〜1.64(35H、m、ＣＨ2)、1.99〜2.09(12H、m)、2.88〜3.12(2H、m)、3.56〜5.67(15H、m)、7.26〜7.36(10H、m).
参考例１４
化合物２９の製造例
【０１０１】
【化４４】
【０１０２】
（化合物２８）２８ｍｇをＴＨＦ２ｍＬに溶解し、１０％塩酸水溶液１ｍＬを加えた後、５％パラジウム−炭素２０ｍｇを加えて水素気流下、室温で６時間撹拌する。触媒をセライトろ過にてろ別した後、ＴＨＦで洗浄し、ろ液を芒硝で脱水する。ろ過し、濃縮して（化合物２９）１６ｍｇを淡黄色油状物として得た。
得られた化合物をそのまま次の反応に用いた。
参考例１５
化合物８の製造例
【０１０３】
【化４５】
【０１０４】
（化合物２９）１６ｍｇをＴＨＦ２ｍＬに溶解し室温で１０％水酸化カリウム水溶液１ｍＬを加えて１時間撹拌する。反応液を０℃に冷却した後、酸クロリド（化合物３０）０．４ｍＬを加えて１５分撹拌する。ＴＨＦ１０ｍＬで希釈し、芒硝で脱水した後、ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１）で精製し、（化合物８）７ｍｇを無色結晶で得た。
Mass (ESI) m/z : 875[M+H]+.
参考例１６
化合物９の製造例
【０１０５】
【化４６】
【０１０６】
（化合物１）１４ｍｇのピリジン溶液０．５ｍＬに三酸化イオウピリジン錯体７．６ｍｇを加え、室温で１６時間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残渣をカラム（水：メタノール＝９８：２）にて精製し、（化合物９）を８ｍｇ得る。
Mass (ESI) m/z : 925[M+H]
参考例１７
化合物１０の製造例
【０１０７】
【化４７】
【０１０８】
（化合物１）１．６ｍｇのテトラヒドロフラン溶液１．０ｍＬに氷冷撹拌下水素化ナトリウム１ｍｇを加え、室温にて３０分間撹拌する。これにブロモ酢酸１ｍｇを加え、６０℃まで加湿し、４時間撹拌する。反応液に飽和塩化アンモニア水２００ｍＬを加え、反応液を減圧濃縮する。残渣をショートカラムにて精製し、（化合物１０）を０．８ｍｇを得る。
Mass (ESI) m/z : 914[M+H].
参考例１８
【０１０９】
【化４８】
【０１１０】
（化合物１）４．５ｍｇのアセトニトリル溶液１ｍＬに氷冷撹拌下、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシラジカル（ＴＥＭＰＯ），次亜塩素酸ナトリウム、臭化カリウムを加え、室温で２時間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、ショートカラムにて精製し、化合物１１を２．８ｍｇ得た。
Mass (ESI) m/z : 869[M+H]+.
1H-NMR (CDCl3):0.90(6H,m),1.19〜1.42(76H,m),1.58(4H,m),1.70(2H,m),3.48〜4.33(8H,m)
【０１１１】
参考例１９
（化合物２）は実施例３に従い、合成することができる。
実施例３
（化合物３）は、参考例５、６、７及び実施例１に従い、合成することができる。
実施例４
（化合物６）は、実施例１に従い、合成することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（ｄ）：
【化１】
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基を表す。Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−を表す。ｂは１〜５の整数である。）
で示される化合物を接触還元することを特徴とする次式の一般式（ｅ）：
【化２】
（式中、Ｒ０、Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物の製造方法。
【請求項１】
一般式（ｄ）：
【化１】
（式中、Ｒ０は−ＯＨ、−ＮＨ２又は−ＮＨＡｃ基を表す。Ｗは炭素数９〜１７の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｘは炭素数１１〜２５の飽和又は不飽和炭化水素鎖であり、更に水酸基を含む場合もある。Ｚは−ＣＯ−又は−ＳＯ２−を表す。ｂは１〜５の整数である。）
で示される化合物を接触還元することを特徴とする次式の一般式（ｅ）：
【化２】
（式中、Ｒ０、Ｘ、Ｚ、Ｗ、ｂは前記と同じである。）
で示される化合物の製造方法。
【公開番号】特開２０１０−１２９１（Ｐ２０１０−１２９１Ａ）
【公開日】平成２２年１月７日（２０１０．１．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１５９９８５（Ｐ２００９−１５９９８５）
【出願日】平成２１年７月６日（２００９．７．６）
【分割の表示】特願２０００−１７５３２０（Ｐ２０００−１７５３２０）の分割
【原出願日】平成１２年６月１２日（２０００．６．１２）
【出願人】（５９２０８６３１８）壽製薬株式会社 (24)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１月７日（２０１０．１．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年７月６日（２００９．７．６）
【分割の表示】特願２０００−１７５３２０（Ｐ２０００−１７５３２０）の分割
【原出願日】平成１２年６月１２日（２０００．６．１２）
【出願人】（５９２０８６３１８）壽製薬株式会社 (24)
【Ｆターム（参考）】
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