血液分析装置および血液分析方法
【課題】試薬価格において、ユーザーに負担がかからない白血球の分類及びヘモグロビン濃度を測定できる血液分析装置及び血液分析方法を提供する。
【解決手段】血液分析装置は、血液試料と標識物質を含まない溶血剤とから、標識物質を含まない測定試料を調製する試料調製部と、測定試料から蛍光情報と少なくとも２種類の散乱光情報とを生成する光情報生成部と、蛍光情報と２種類の散乱光情報とに基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに第１分類する制御部とを備える。
【解決手段】血液分析装置は、血液試料と標識物質を含まない溶血剤とから、標識物質を含まない測定試料を調製する試料調製部と、測定試料から蛍光情報と少なくとも２種類の散乱光情報とを生成する光情報生成部と、蛍光情報と２種類の散乱光情報とに基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに第１分類する制御部とを備える。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液分析装置および血液分析方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、白血球分類を行う血液分析装置が知られている。このような血液分析装置は、たとえば、特開２００３−８３９６０号公報および特開２００５−２５７４５０号公報に開示されている。
【０００３】
上記特開２００３−８３９６０号公報に記載の血液分析装置は、血液試料と試薬とから調製された測定試料中の白血球を検出する電気抵抗式検出部を備え、電気抵抗式検出部による検出結果に基づいて測定試料中の白血球を３つに分類するように構成されている。
【０００４】
上記特開２００５−２５７４５０号公報に記載の血液分析装置は、血液試料と試薬とから測定試料を調製する試料調製部と、前方散乱光、側方散乱光および蛍光を検出する光学系検出部とを備え、光学系検出部による検出結果に基づいて測定試料中の白血球を４つに分類するように構成されている。また、この光学系検出部では、蛍光標識された白血球の蛍光を検出している。
【０００５】
しかしながら、上記特開２００３−８３９６０号公報の血液分析装置では、測定試料中の白血球を４つ以上に分類することができないという問題点がある。
【０００６】
また、上記特開２００５−２５７４５０号公報の血液分析装置では、血液試料中の白血球を４つに分類することが可能である一方、測定試料中の白血球に対して蛍光標識を行う必要があるので、標識物質を含む高価な試薬を用いる必要があるという不都合がある。このため、白血球を４つ以上に分類可能で、かつ、標識物質を含む試薬を用いる必要がない血液分析装置が望まれる。
【０００７】
また、従来、白血球を分類し、ヘモグロビン濃度を取得する血液分析装置が知られている。このような血液分析装置は、たとえば、特開２００６−２９２７３８号公報に開示されている。
【０００８】
上記特開２００６−２９２７３８号公報に記載の血液分析装置は、血液試料および白血球分類用試薬を含む測定試料を用いて、前方散乱光、側方散乱光および蛍光を測定し、測定試料中の白血球を４つに分類するように構成されている。また、この血液分析装置は、血液試料、および、白血球分類用試薬とは組成が異なる専用のヘモグロビン測定用試薬を含む測定試料を用いて、透過光を検出し、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するように構成されている。
【０００９】
しかしながら、上記特開２００６−２９２７３８号公報の血液分析装置では、白血球分類用試薬を用いて白血球を分類し、白血球分類用試薬とは組成が異なる専用のヘモグロビン測定用試薬を用いてヘモグロビン濃度を取得するので、白血球の分類およびヘモグロビン濃度の取得を行うために組成の異なる２種類の試薬を別々に開発する必要があり、その結果、試薬の価格が高騰し、ユーザに負担がかかるという問題点がある。
【発明の概要】
【００１０】
この発明の第１の局面による血液分析装置は、血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、血液試料および溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製する試料調製部と、第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成する第１光情報生成部と、第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成する第２光情報生成部と、第１光情報生成部により生成された蛍光情報と２種類の散乱光情報とに基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに第１分類し、第２光情報生成部により生成された透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得する制御部とを備える。
【００１１】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第２測定試料から、試料の電気情報を生成する電気情報生成部をさらに備え、制御部は、電気情報生成部により生成された電気情報に基づいて、第２測定試料中の白血球を少なくともリンパ球とリンパ球以外の集団とに第２分類するとともに、第１分類および第２分類の分類結果に基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球との５つに分類するように構成されている。
【００１２】
この場合、好ましくは、試料調製部は、血液試料から第３測定試料をさらに調製し、電気情報生成部は、第３測定試料から、試料の電気情報を生成し、制御部は、電気情報生成部により第３測定試料から生成された電気情報に基づいて、第３測定試料中の赤血球数および血小板数を算出するように構成されている。
【００１３】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第２測定試料における溶血剤の希釈倍率は、第１測定試料における溶血剤の希釈倍率と異なる。
【００１４】
この場合、好ましくは、第２測定試料における溶血剤の希釈倍率は、第１測定試料における溶血剤の希釈倍率よりも小さい。
【００１５】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、試料調製部は、血液試料、所定の試薬容器に収容された溶血剤、および、所定量の希釈液を混合することにより第１測定試料を調製し、血液試料、所定の試薬容器に収容された溶血剤、および、所定量よりも少ない量の希釈液とを混合することにより第２測定試料を調製するように構成されている。
【００１６】
この場合、好ましくは、試料調製部は、希釈液と血液試料とを混合した状態で、溶血剤を混合することにより第２測定試料を調製するように構成されている。
【００１７】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、試料調製部は、少なくとも血液試料、および、第１測定試料に用いられる溶血剤が収容された第１試薬容器とは異なる第２試薬容器に収容された溶血剤を混合することにより第２測定試料を調製するように構成されている。
【００１８】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、溶血剤は、カチオン性界面活性剤を含む。
【００１９】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第１光情報生成部は、蛍光情報として、少なくとも、測定試料中の好酸球の自家蛍光の強度に応じた蛍光情報を生成するように構成されている。
【００２０】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第１光情報生成部は、光源と、光源から測定試料に光が照射されることにより生じる蛍光を受光し、受光強度に応じた蛍光情報を生成する蛍光受光部と、光源から測定試料に光が照射されることにより生じる散乱光を受光し、受光強度に応じた散乱光情報を生成する散乱光受光部とを含む。
【００２１】
上記第１光情報生成部が蛍光受光部と散乱光受光部とを含む構成において、好ましくは、散乱光受光部は、測定試料に光が照射されることにより光源から照射された光の進行方向に沿って生じる前方散乱光を受光し、受光強度に応じた前方散乱光情報を、散乱光情報のうちの第１情報として生成する第１受光部と、測定試料に光が照射されることにより光源から照射された光の進行方向に略垂直な方向に沿って生じる側方散乱光を受光し、受光強度に応じた側方散乱光情報を、散乱光情報のうちの第２情報として生成する第２受光部とを有する。
【００２２】
この場合、好ましくは、制御部は、前方散乱光情報と蛍光情報とに基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも好酸球と好酸球以外の集団とに分類するように構成されている。
【００２３】
上記第１光情報生成部が蛍光受光部と散乱光受光部とを含む構成において、好ましくは、光源は、３５０ｎｍ以上５００ｎｍ以下の波長を有する光を照射するように構成されている。
【００２４】
上記光源が所定範囲内の波長を有する光を照射する構成において、好ましくは、光源は、青紫色半導体レーザ素子を有する。
【００２５】
この発明の第２の局面による血液分析方法は、血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、血液試料および溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製するステップと、第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成するステップと、第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成するステップと、第１測定試料から生成された蛍光情報と２種類の散乱光情報とに基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、第２測定試料から生成された透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを備える。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】本発明の一実施形態による血液分析装置の概略構成を示す正面図である。
【図２】図１に示した一実施形態による血液分析装置の構成を示すブロック図である。
【図３】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットを示す斜視図である。
【図４】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットの内部構造を示す斜視図である。
【図５】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットの内部構造を示す側面図である。
【図６】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたフローセルの構成を模式的に示す斜視図である。
【図７】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたＷＢＣ分類測定部の構成を示す概略図である。
【図８】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたＤＣ測定部の構成を模式的に示す斜視図である。
【図９】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたＨＧＢ測定部の構成を模式的に示す斜視図である。
【図１０】図１に示した一実施形態による血液分析装置に用いられる溶血剤の組成を示す図である。
【図１１】図１に示した一実施形態による血液分析装置に用いられるマラリア検出用の染色液の組成を示す図である。
【図１２】図１に示した一実施形態による血液分析装置における試料分析処理を示すフローチャートである。
【図１３】図１に示した一実施形態による血液分析装置に用いられる第３測定試料および第２測定試料の作成工程を説明するための図である。
【図１４】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成される白血球の粒度分布図である。
【図１５】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成される白血球分類用のスキャッタグラムである。
【図１６】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成される白血球分類用のスキャッタグラムである。
【図１７】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成されるマラリア分類用のスキャッタグラムである。
【図１８】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図１９】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２０】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２１】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２２】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、図１０に示した溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２３】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、図１０に示した溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２４】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示すヘモグロビンについての相関図である。
【図２５】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示すリンパ球と好塩基球との集団についての相関図である。
【図２６】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示す単球についての相関図である。
【図２７】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示す好中球についての相関図である。
【図２８】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示す好酸球についての相関図である。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下、本発明の実施形態を図面に基づいて説明する。
【００２８】
まず、図１〜図１１を参照して、本発明の一実施形態による血液分析装置１の構成について説明する。
【００２９】
本実施形態による血液分析装置１は、図１に示すように、血液検査に使用される装置であり、測定ユニット２と、データ処理ユニット３とによって主として構成されている。また、血液分析装置１は、たとえば、病院または病理検査施設などの医療機関の施設内に設置されている。また、血液分析装置１では、測定ユニット２により血液試料中に含まれる成分について所定の測定を行い、この測定データをデータ処理ユニット３で受信して分析処理を行っている。そして、測定ユニット２とデータ処理ユニット３とは、互いにデータ通信可能なように、データ伝送ケーブル３ａにより接続されている。なお、測定ユニット２とデータ処理ユニット３とは、データ伝送ケーブル３ａにより直接接続される構成であってもよいし、たとえば、電話回線を使用した専用回線、ＬＡＮまたはインターネットなどの通信ネットワークを介して接続されていてもよい。
【００３０】
測定ユニット２は、図２に示すように、試料供給部４と、ＷＢＣ分類測定部５と、ＤＣ測定部６と、ＨＧＢ測定部７と、制御部８と、通信部９とを含んでいる。また、図３に示すように、測定ユニット２の正面右下部分には、血液試料を収容した採血管２０をセット可能に構成された採血管セット部２ａが設けられている。この採血管セット部２ａは、その近傍に設けられたボタンスイッチ２ｂをユーザが押下することにより、手前方向に迫り出すように構成されている。ユーザは、採血管セット部２ａが迫り出した状態で採血管２０をセットすることが可能である。そして、採血管２０をセットした後、ユーザが再度ボタンスイッチ２ｂを押下することにより、採血管セット部２ａは測定ユニット２の内部に戻されるように構成されている。
【００３１】
測定ユニット２の内部には、図４および図５に示すように、測定試料を吸引するピペット２１、および、血液試料と試薬とを混合調製するためのチャンバ２２、２３（図５参照）などが設けられている。ピペット２１は、上下方向に延びた管状に形成されており、その先端は鋭く尖っている。また、ピペット２１は、図示しないシリンジポンプに連結されており、このシリンジポンプの動作によって液体を所定量だけ吸引するとともに、吐出することが可能なように構成されている。また、ピペット２１は、移動機構に接続されており、上下方向および前後方向にそれぞれ移動可能に構成されている。また、ピペット２１は、採血管２０を密閉するゴム製のキャップ２０ａに、鋭利な先端を穿刺することにより、採血管２０に収容された血液試料を吸引するように構成されている。また、ピペット２１は、血液試料を吸引した後、移動機構により所定の位置まで移動され、チャンバ２２および２３内に血液試料を供給するように構成されている。
【００３２】
試料供給部４は、チャンバ２２および２３、複数の電磁弁、ダイヤフラムポンプなどを有する流体ユニットである。チャンバ２２は、赤血球、血小板の測定、およびヘモグロビン濃度の測定に用いられる測定試料を調製するために設けられている。また、チャンバ２３は、白血球の測定に用いられる測定試料を調製するために設けられている。また、試料供給部４により構成される流体ユニットには、試薬容器が接続されている。具体的には、希釈液を収容するための希釈液容器２４、溶血剤１００を収容するための溶血剤容器２５およびマラリア検出用の測定試料に用いられる染色液を収容するための染色液容器２６が流体ユニットに接続されている。これにより、希釈液および溶血剤１００をチャンバ２２に供給することが可能であるとともに、希釈液、溶血剤１００および染色液をチャンバ２３に供給することが可能である。
【００３３】
ＷＢＣ分類測定部５は、光学式のフローサイトメータであり、半導体レーザ光を用いたフローサイトメトリー法により、白血球分類検出およびマラリア検出を行うために設けられている。また、ＷＢＣ分類測定部５は、測定試料の液流を形成するフローセル５１（図６参照）を有している。フローセル５１は、透光性を有する石英、ガラス、合成樹脂などの材料によって管状に構成されており、その内部が測定試料およびシース液（希釈液）が通流する流路となっている。このフローセル５１には、内部空間が他の部分よりも細く絞り込まれたオリフィス５１ａが設けられている。また、オリフィス５１ａの入口付近は二重管構造となっており、その内側管部分は試料ノズル５１ｂとなっている。また、試料ノズル５１ｂの外側の空間はシース液（希釈液）が通流する流路５１ｃであり、シース液（希釈液）は、流路５１ｃを通流し、オリフィス５１ａに導入される。このようにフローセル５１に供給されたシース液（希釈液）は、試料ノズル５１ｂから吐出された測定試料を取り囲むように流れる。そして、オリフィス５１ａによって測定試料の流れが細く絞り込まれ、測定試料に含まれる白血球、赤血球などの粒子がシース液（希釈液）に取り囲まれて１つずつオリフィス５１ａを通過する。
【００３４】
また、ＷＢＣ分類測定部５には、半導体レーザ光源５２が、フローセル５１のオリフィス５１ａへ向けてレーザ光を出射するように配置されている。この半導体レーザ光源５２は、青紫色半導体レーザ素子５２ａを有し、波長が約４０５ｎｍの青紫色レーザ光を出射することが可能なように構成されている。半導体レーザ光源５２に青紫色半導体レーザ素子５２ａを設けることによって、容易に、短波長（約４０５ｎｍ）の光を測定試料に照射することが可能となる。また、半導体レーザ光源５２とフローセル５１との間には、複数のレンズからなる照射レンズ系５３が配置されている。この照射レンズ系５３によって、半導体レーザ光源５２から出射された平行ビームがビームスポットに集束されるようになっている。また、半導体レーザ光源５２から直線的に延びた光軸上には、フローセル５１を挟んで照射レンズ系５３に対向するように、ビームストッパ５４ａが設けられており、ビームストッパ５４ａは、半導体レーザ光源５２からの直接光を遮光するように構成されている。
【００３５】
また、ビームストッパ５４ａのさらに光軸下流側には、フォトダイオード５４が配置されている。フォトダイオード５４は、フローセル５１を流れる測定試料により生じるレーザ光の散乱光を受光するように構成されている。具体的には、半導体レーザ光源５２から直線的に延びた光軸に沿って進行する光のうち、半導体レーザ光源５２の直接光はビームストッパ５４ａによって遮断されるので、フォトダイオード５４は、概ね光軸方向に沿って進行する散乱光（以下、前方散乱光という）のみを受光するように構成されている。また、フォトダイオード５４は、フローセル５１から発せられた前方散乱光を光電変換し、これによって生じた電気信号（以下、前方散乱光信号という）をアンプ５４ｂに伝達するように構成されている。そして、アンプ５４ｂは、伝達された前方散乱光信号を増幅し、制御部８に出力するように構成されている。
【００３６】
また、フローセル５１の側方であって、半導体レーザ光源５２からフォトダイオード５４へ直線的に延びる光軸に対して直交する方向には、側方集光レンズ５５が配置されており、この側方集光レンズ５５は、フローセル５１内を通過する血球にレーザ光を照射したときに発生する側方光（前記光軸に対して交差する方向へ出射される光）を集光するように構成されている。側方集光レンズ５５の下流側にはダイクロイックミラー５６が設けられており、ダイクロイックミラー５６は、側方集光レンズ５５から送られる信号光を散乱光成分と蛍光成分とに分けるように構成されている。ダイクロイックミラー５６の側方（側方集光レンズ５５とダイクロイックミラー５６とを結ぶ光軸方向に交差する方向）には、側方散乱光受光用のフォトダイオード５７が設けられており、ダイクロイックミラー５６の光軸下流側には、光学フィルタ５８ａおよびアバランシェフォトダイオード５８が設けられている。また、フォトダイオード５７は、ダイクロイックミラー５６で分けられた側方散乱光成分を光電変換し、これによって生じた電気信号（以下、側方散乱光信号という）をアンプ５７ａに伝達するように構成されている。そして、アンプ５７ａは、伝達された側方散乱光信号を増幅し、制御部８に出力するように構成されている。
【００３７】
また、アバランシェフォトダイオード５８は、光学フィルタ５８ａにより波長選択された後の側方蛍光成分を光電変換し、これによって生じた電気信号（側方蛍光信号）をアンプ５８ｂに伝達するように構成されている。そして、アンプ５８ｂは、伝達された側方蛍光信号を増幅し、制御部８に出力するように構成されている。
【００３８】
ＤＣ測定部６は、シースフローＤＣ検出法により、赤血球数（ＲＢＣ）および血小板数（ＰＬＴ）を測定することが可能なように構成されている。また、ＤＣ測定部６は、赤血球パルス波高値検出法により、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）を算出するための測定データも得ることが可能に構成されている。さらに、ＤＣ測定部６は、リンパ球比率を算出するための白血球数（ＷＢＣ）検出にも用いられる。このようにＤＣ測定部６を、赤血球数および血小板数の測定と、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）を算出するための測定データの取得と、リンパ球比率を算出するための白血球数（ＷＢＣ）検出とに共通に用いることによって、これらの項目を測定するために別々の測定部を設ける必要がない。また、ＤＣ測定部６は、フローセルを有しており、このフローセルにチャンバ２２から測定試料が移送されるようになっている。たとえば、赤血球数および血小板数の測定を行う場合には、図８に示すように、チャンバ２２において血液試料と希釈液とが混合調製された測定試料が、シース液（希釈液）とともに試料供給部４からフローセルに移送される。そして、フローセル内では、測定試料がシース液（希釈液）によって取り囲まれた状態の液流が形成される。
【００３９】
ＨＧＢ測定部７は、メトヘモグロビン法により、血色素量（ＨＧＢ）を測定するように構成されている。ＨＧＢ測定部７は、図９に示すように、希釈試料を収容するセルを有しており、このセルにチャンバ２２から測定試料が移送されるようになっている。そして、ＨＧＢ測定部７は、波長が約５５５ｎｍの光を照射する発光ダイオードを有しており、上記セル中の測定試料に発光ダイオードからの光を照射することによって、その吸光度を測定するように構成されている。なお、ヘモグロビンの測定を行う場合には、チャンバ２２において、血液試料、希釈液および溶血剤１００が混合され測定試料が調製される。
【００４０】
制御部８は、ＣＰＵ、ＲＯＭ、ＲＡＭなどから構成されており、測定ユニット２の各部の動作制御を行うように構成されている。
【００４１】
通信部９は、たとえば、ＲＳ−２３２Ｃインタフェース、ＵＳＢインタフェース、Ｅｔｈｅｒｎｅｔ（登録商標）インタフェースであり、データ処理ユニット３との間でデータの送受信を行うことが可能なように構成されている。
【００４２】
データ処理ユニット３は、図２に示すように、ＣＰＵ３１、ＲＯＭ３２、ＲＡＭ３３、ハードディスク３４、通信インタフェース３５、キーボードおよびマウスなどの入力部３６、およびディスプレイ装置３７を備えるコンピュータによって構成されている。データ処理ユニット３のハードディスク３４には、オペレーティングシステムと、測定ユニット２から受信した測定データを分析処理するためのアプリケーションプログラムがインストールされている。
【００４３】
ここで、本実施形態では、データ処理ユニット３のＣＰＵ３１は、このアプリケーションプログラムを実行することにより、測定データを分析処理し、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、血色素量（ＨＧＢ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）、平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）、血小板数（ＰＬＴ）を算出するように構成されている。さらに、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号、側方散乱光信号、側方蛍光信号を用いてスキャッタグラムを作成して、白血球を好中球（Ｎｅｕｔ）、リンパ球、単球（Ｍｏｎｏ）、好酸球（ＥＯ）、好塩基球（ＢＡＳＯ）の５つに分類するように構成されている。
【００４４】
通信インタフェース３５は、たとえば、ＲＳ−２３２Ｃインタフェース、ＵＳＢインタフェース、Ｅｔｈｅｒｎｅｔ（登録商標）インタフェースであり、測定ユニット２との間でデータの送受信を行うことが可能に構成されている。
【００４５】
また、本実施形態における溶血剤１００は、図１０に示すように、カチオン性界面活性剤（ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド；３４．１ｍＭ、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド；１．７ｍＭ）を含み、かつ、標識物質を含んでいない。標識物質とは、測定対象となる細胞に選択的に付与され、測定のための標識となる物質であり、たとえば、測定対象の細胞の核酸を染色する蛍光色素が該当する。また、この溶血剤１００は、血液中のヘモグロビンをメトヘモグロビンへと転化する性質を有している。また、後述するように、各測定に用いられる各測定試料は、それぞれ、溶血剤１００の希釈倍率、および、血液試料の希釈倍率が異なっている。このようにカチオン性界面活性剤を用いることによって、組成が異なる２種類以上の溶血剤を用いることなく希釈倍率を変えるだけで、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することが可能である。また、染色液は、図１１に示す化学式の構造を有する蛍光色素（たとえば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社のヘキスト３４５８０）と、図１１に示すノニオン界面活性剤群のうちの１つとを含有している。この蛍光色素は、半導体レーザ光源５２ａから出射される青紫色レーザ光（波長が約４０５ｎｍ）により励起可能である。
【００４６】
次に、図１２〜図１７を参照して、本発明の一実施形態による血液分析装置１における試料分析処理について説明する。
【００４７】
まず、血液分析装置１が起動されると、アプリケーションプログラムなどの初期化が行われた後、ステップＳ１において、データ処理ユニット３のＣＰＵ３１により、ユーザからの測定開始指示があったか否かが判断され、指示があるまでこの判断が繰り返される。そして、測定開始指示があった場合には、ステップＳ２において、データ処理ユニット３から測定ユニット２に測定開始指示信号が送信される。
【００４８】
そして、ステップＳ２１において、測定ユニット２の制御部８により、測定開始指示信号が受信されたか否かが判断され、受信するまでこの判断が繰り返される。測定ユニット２が測定開始指示信号を受信すると、ステップＳ２２において、ピペット２１により、採血管セット部２ａにセットされた採血管２０から血液試料が吸引される。
【００４９】
そして、ステップＳ２３において、試料供給部４により、ＲＢＣ／ＰＬＴ測定試料（以下、第３測定試料という）が調製される。具体的には、図１３に示すように、希釈液容器２４から所定量（たとえば、２．０ｍＬ）の希釈液、および、ピペット２１により採血管２０から吸引された所定量（たとえば、６μＬ）の血液試料がチャンバ２２に供給され、攪拌される。これにより、所定量（たとえば、２．０ｍＬ）の第３測定試料が調製される。その後、ステップＳ２４において、チャンバ２２内の第３測定試料の一部（たとえば、１ｍＬ）が、シース液（希釈液）とともにＤＣ測定部６に移送されるとともに、ＤＣ測定部６により、第３測定試料のＲＢＣおよびＰＬＴ検出が行われる。
【００５０】
次に、ステップＳ２５において、試料供給部４により、ＷＢＣ（ＤＣ検出用）・ＨＧＢ測定試料（以下、第２測定試料という）が調製される。具体的には、図１３に示すように、所定量（たとえば、１ｍＬ）の第３測定試料が残存するチャンバ２２に、溶血剤容器２５から所定量（たとえば、０．５ｍＬ）の溶血剤１００が供給され、攪拌される。すなわち、チャンバ２２において血液試料と希釈液とが混合された後、溶血剤１００が混合されて第２測定試料が調製される。これにより、溶血剤は希釈液により希釈された状態で血液試料に混合されるので、血液試料が所望の濃度よりも高い濃度の溶血剤と混合されるのを抑制することが可能である。このように溶血剤１００が３倍に希釈（溶血剤／希釈液＝１／２）され、血液試料が５００倍に希釈された第２測定試料が調製される。また、これにより、赤血球が溶血されるとともに、ヘモグロビンがメトヘモグロビンへと転化される。また、第２測定試料における溶血剤１００の希釈倍率（３倍）を、後述する第１測定試料における溶血剤１００の希釈倍率（２５倍）よりも小さくすることによって、測定試料中の赤血球を確実に溶血することができるので、精度よくヘモグロビン濃度を取得することが可能となる。その後、ステップＳ２６において、チャンバ２２内の第２測定試料がＤＣ測定部６に移送されて、第２測定試料のＷＢＣ測定が行われる。また、ステップＳ２７において、第２測定試料がＨＧＢ測定部７に移送されて、第２測定試料のＨＧＢ検出が行われる。
【００５１】
そして、ステップＳ２８において、試料供給部４により、ＷＢＣ（分類用）測定試料（以下、第１測定試料という）が調製される。具体的には、上記した第２測定試料に含まれるのと同じ溶血剤１００が２５倍に希釈（溶血剤／希釈液＝１／２４）された所定量（たとえば、１ｍＬ）の希釈溶血剤、および、採血管２０から吸引された所定量（たとえば、１０μＬ）の血液試料がチャンバ２３に供給され、攪拌される。これにより、血液試料が１００倍に希釈された第１測定試料が調製される。また、これにより、溶血剤容器２５に収容された共通の溶血剤１００を用いて、第１測定試料および第２測定試料を調製することが可能となる。その後、ステップＳ２９において、チャンバ２３内の第１測定試料が、シース液（希釈液）とともにＷＢＣ分類測定部５に移送されるとともに、ＷＢＣ分類測定部５により、第１測定試料のＷＢＣ検出が行われる。
【００５２】
次に、ステップＳ３０において、試料供給部４により、マラリア測定試料（以下、第４測定試料という）が調製される。具体的には、溶血剤１００が９倍希釈（溶血剤／希釈液＝１／８）された所定量（たとえば、１ｍＬ）の希釈溶血剤、採血管２０から吸引された所定量（たとえば、１０μＬ）の血液試料、および、染色液容器２６から所定量（たとえば、１０μＬ）の染色液がチャンバ２３に供給され、攪拌される。これにより、血液試料が１００倍に希釈された第４測定試料が調製される。その後、ステップＳ３１において、チャンバ２３内の第４測定試料が、シース液（希釈液）とともにＷＢＣ分類測定部５に移送されるとともに、ＷＢＣ分類測定部５により、第４測定試料のマラリア検出が行われる。そして、ステップＳ３２において、各検出部において測定された測定データが、測定ユニット２からデータ処理ユニット３に送信される。
【００５３】
データ処理ユニット３では、ステップＳ３において、測定ユニット２が送信した測定データが受信されたか否かが判断され、受信するまでこの判断が繰り返される。そして、測定データを受信すると、ステップＳ４において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２６で測定されたＷＢＣ検出による測定データに基づいて、白血球数（ＷＢＣ）が算出される。また、ステップＳ５において、ＣＰＵ３１により、ＷＢＣ検出による測定データに基づいて、図１４に示すように、白血球の粒度分布図が作成され、白血球数（ＷＢＣ）に対するリンパ球比率が算出される。なお、リンパ球は、粒度分布図において、左から１つ目の山（集団）として現れる。
【００５４】
次に、ステップＳ６において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２９で測定されたＷＢＣ分類検出による測定データに基づいて、白血球がリンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）の３つに分類される。具体的には、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号および側方散乱光信号を用いて、図１５に示すように、スキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムから、リンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）のそれぞれの白血球数（ＷＢＣ）に対する比率を算出する。ここで、図２２には、実際に被験者から採取した血液試料を、本実施形態における溶血剤１００（図１０参照）を用いて測定し、その結果得られた前方散乱光信号および側方散乱光信号によるスキャッタグラムを示す。図２２に示すように、実際の測定結果においても、スキャッタグラム上で、白血球をリンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）の３つに分類することが可能であることが分かる。
【００５５】
そして、ステップＳ７において、ＣＰＵ３１により、ＷＢＣ分類検出による測定データに基づいて、白血球が好酸球および好酸球以外の集団の２つに分類される。具体的には、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号および側方蛍光信号を用いて、図１６に示すように、スキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムから、白血球数（ＷＢＣ）に対する好酸球比率を算出する。この側方蛍光信号は、半導体レーザ光源５２から出射された青紫色レーザ光（波長が約４０５ｎｍ）により励起された白血球の自家蛍光に基づくものであり、好酸球は、白血球の好酸球以外の集団よりも強い蛍光強度を有している。このように本実施形態では、標識物質を用いることなく、白血球を好酸球と好酸球以外の集団とに分類することが可能である。なお、ＣＰＵ３１は、側方散乱光信号および側方蛍光信号によるスキャッタグラムから、白血球数（ＷＢＣ）に対する好酸球比率を算出することも可能である。ここで、図２３には、実際に被験者から採取した血液試料を、本実施形態における溶血剤１００（図１０参照）を用いて測定し、その結果得られた前方散乱光信号および側方蛍光信号によるスキャッタグラムを示す。図２３に示すように、実際の測定結果においても、スキャッタグラム上で、好酸球と好酸球以外の集団とに分類することが可能であることが分かる。
【００５６】
その後、ステップＳ８において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ６で算出された顆粒球（好中球と好酸球との集団）比率から、ステップＳ７で算出された好酸球比率を差し引くことによって、白血球数（ＷＢＣ）に対する好中球比率が算出される。これにより、白血球がリンパ球と好塩基球との集団、単球、好中球および好酸球の４つに分類される。そして、ステップＳ９において、ＣＰＵ３１により、リンパ球と好塩基球との集団の比率から、ステップＳ５で算出されたリンパ球比率を差し引くことによって、白血球数（ＷＢＣ）に対する好塩基球比率が算出される。これにより、白血球がリンパ球、好塩基球、単球、好中球および好酸球の５つに分類される。
【００５７】
そして、ステップＳ１０において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ３１で測定されたマラリア検出による測定データに基づいて、マラリア原虫感染赤血球がマラリア原虫感染赤血球以外の集団から分類される。具体的には、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号および側方蛍光信号を用いて、図１７に示すように、スキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムから、マラリア原虫感染赤血球をマラリア原虫感染赤血球以外の集団から分類する。これにより、マラリア感染の有無を判断することが可能となる。
【００５８】
次に、ステップＳ１１において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２４で測定されたＲＢＣ／ＰＬＴ検出による測定データに基づいて、赤血球数（ＲＢＣ）、血小板数（ＰＬＴ）およびヘマトクリット値（ＨＣＴ）が算出される。
【００５９】
ここで、本実施形態では、ステップＳ１２において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２７で測定されたＨＧＢ検出による測定データに基づいて、血色素量（ＨＧＢ）が算出される。すなわち、ＳＬＳヘモグロビン法を用いたＨＧＢ検出により得られた吸光度に基づいて、ヘモグロビン濃度が算出される。
【００６０】
その後、ステップＳ１３において、上記のように算出された赤血球数（ＲＢＣ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）および血色素量（ＨＧＢ）から、ＣＰＵ３１により、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）および平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）が算出される。各値の算出式をそれぞれ以下の式（１）〜（３）に示す。
【００６１】
ＭＣＶ＝（ＨＣＴ／ＲＢＣ）×１０００・・・・・（１）
上記式（１）において、ＭＣＶは平均赤血球容積（ｆＬ）、ＨＣＴはヘマトクリット値（％）、ＲＢＣは赤血球数（×１０４／μＬ）をそれぞれ表す。
【００６２】
ＭＣＨ＝（ＨＧＢ／ＲＢＣ）×１０００・・・・・（２）
上記式（２）において、ＭＣＨは平均赤血球血色素量（ｐｇ）、ＨＧＢは血色素量（ｇ／ｄＬ）、ＲＢＣは赤血球数（×１０４／μＬ）をそれぞれ表す。
【００６３】
ＭＣＨＣ＝（ＨＧＢ／ＨＣＴ）×１００・・・・・（３）
上記式（３）において、ＭＣＨＣは平均赤血球血色素濃度（ｇ／ｄＬ）、ＨＧＢは血色素量（ｇ／ｄＬ）、ＨＣＴはヘマトクリット値（％）をそれぞれ表す。
【００６４】
そして、ステップＳ１４において、上記のように算出された、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、血色素量（ＨＧＢ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）、平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）、血小板数（ＰＬＴ）の算出結果がディスプレイ装置３７に出力される。さらに、白血球数（ＷＢＣ）に対する好中球比率、リンパ球比率、単球比率、好酸球比率および好塩基球比率がディスプレイ装置３７に出力されるとともに、マラリア検出の結果も出力される。なお、白血球数（ＷＢＣ）に対する各血球比率に加えて、白血球数（ＷＢＣ）および各血球比率に基づいて算出された好中球数、リンパ球数、単球数、好酸球数および好塩基球数が出力される。
【００６５】
その後、ステップＳ１５において、ユーザからのシャットダウン指示の有無が判断され、指示がない場合には、ステップＳ１に移行される。シャットダウン指示があった場合には、血液分析装置１における試料分析処理のデータ処理ユニット３の動作が終了される。また、測定ユニット２側では、ステップＳ３２で測定データをデータ処理ユニット３に送信した後、ステップＳ３３において、ユーザからのシャットダウン指示があったか否かが判断され、指示がない場合には、ステップＳ２１に移行される。シャットダウン指示があった場合には、血液分析装置１における試料分析処理の測定ユニット２の動作が終了される。
【００６６】
本実施形態では、上記のように、血液試料と標識物質を含まない溶血剤１００とから調製された測定試料から、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を生成するＷＢＣ分類測定部５を設けることによって、測定試料に対して標識を行うことなく、測定試料中の好酸球の自家蛍光を利用して、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を得ることができる。また、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、測定試料中の白血球を、単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するＣＰＵ３１を設けることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。これにより、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００６７】
また、本実施形態では、シースフローＤＣ検出法により血球測定を行うＤＣ測定部６を設け、ＣＰＵ３１を、ＤＣ測定部６による測定データに基づいて、測定試料中の白血球をリンパ球とリンパ球以外の集団とに分類するとともに、この分類結果と側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号とに基づく分類結果とから、白血球をリンパ球、好塩基球、単球、好中球および好酸球の５つに分類するように構成することによって、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いながら、測定試料中の白血球を５つに分類することができる。
【００６８】
また、本実施形態による血液分析方法では、上記のように、標識物質を含まない測定試料から、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を生成するステップを設けることによって、測定試料に対して標識を行うことなく、測定試料中の好酸球の自家蛍光を利用して、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を得ることができる。また、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、測定試料中の白血球を、単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するステップを設けることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。これにより、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００６９】
また、本実施形態による溶血剤１００を用いる血液分析方法に、標識物質を含まない測定試料から、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を生成するステップを設けることによって、測定試料に対して標識を行うことなく、測定試料中の好酸球の自家蛍光を利用して、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を得ることができる。また、当該溶血剤１００を用いる血液分析方法に、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、測定試料中の白血球を、単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するステップを設けることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。このように、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて、測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００７０】
また、本実施形態による標識物質を含まない溶血剤１００を、上記のように、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を用いて白血球を単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するために用いることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。すなわち、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて、測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００７１】
また、本実施形態では、上記のように、ＷＢＣ分類測定部５により血液試料および溶血剤１００を含む第１測定試料から生成された側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類し、ＨＧＢ測定部７により血液試料および前記溶血剤１００と同じ溶血剤１００を含む第２測定試料から測定された吸光度に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するＣＰＵ３１とを設けることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７２】
また、本実施形態では、ＤＣ測定部６により得られた測定データに基づいて、第２測定試料中の白血球をリンパ球とリンパ球以外の集団とに分類するとともに、この分類結果と上記した白血球の４分類の分類結果とに基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球との５つに分類するようにＣＰＵ３１を構成することによって、ＤＣ測定部６により、ヘモグロビン濃度を取得するために用いる測定試料と同じ第２測定試料を用いて、白血球をリンパ球とリンパ球以外の集団とに分類することができるので、組成の異なる測定試料を別途調製することなく、白血球を５つに分類することができる。
【００７３】
また、本実施形態による血液分析方法では、上記のように、ＷＢＣ分類測定部５により血液試料および溶血剤１００を含む第１測定試料から生成された側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、ＨＧＢ測定部７により血液試料および前記溶血剤１００と同じ溶血剤１００を含む第２測定試料から測定された吸光度に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを設けることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７４】
また、本実施形態による溶血剤を、上記のように、ＷＢＣ分類測定部５により血液試料および溶血剤１００を含む第１測定試料から生成された側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、ＨＧＢ測定部７により血液試料および前記溶血剤１００と同じ溶血剤１００を含む第２測定試料から測定された吸光度に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを備える血液分析方法に用いることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７５】
また、本実施形態による溶血剤を、上記のように、カチオン性界面活性剤を含み、ヘモグロビン濃度を測定するために用いるとともに、白血球を少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球とに分類するために用いることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７６】
（実施例）
次に、図２４〜図２８を参照して、上記実施形態に記載の方法により得られた測定結果と、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関についての検証結果について説明する。上記実施形態に記載の方法による測定と多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００による測定とは、複数の血液試料について、同じ検体について行った。なお、図２４〜図２８は、それぞれ、ヘモグロビン、リンパ球と好塩基球との集団、単球、好中球、および好酸球の測定結果の相関図を示している。また、図２４〜図２８では、それぞれ、縦軸に上記実施形態に記載の方法により得られた測定結果を、横軸に多項目自動血球分析装置ＸＥ−２１００により得られた測定結果を示している。これらの図に示すように、相関係数ｒは、ヘモグロビンについては０．９９２、リンパ球と好塩基球との集団については０．９６８、単球については０．７９６、好中球については０．９４６、および、好酸球については０．８９２であり、いずれも高い相関を示す結果となった。
【００７７】
なお、今回開示された実施形態は、全ての点で例示であって制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は、上記した実施形態の説明ではなく特許請求の範囲によって示され、さらに特許請求の範囲と均等の意味および範囲内での全ての変更が含まれる。
【００７８】
たとえば、上記実施形態では、ＷＢＣ検出、ＨＧＢ検出、ＷＢＣ分類検出およびマラリア検出のために用いられる溶血剤を１つの溶血剤容器に収容する例を示したが、第１〜第４の局面による発明はこれに限らず、各検出用にそれぞれ別々の溶血剤を用意し、各溶血剤をそれぞれ別々の溶血剤容器に収容するようにしてもよい。この際、各検出に用いられる溶血剤は異なる種類の溶血剤であってもよい。また、各溶血剤容器に収容する溶血剤を、それぞれ予め所定の希釈倍率に希釈していてもよい。
【００７９】
また、上記実施形態では、光源の一例として、青紫色半導体レーザ素子を有する半導体レーザ光源を示したが、本発明はこれに限らず、青色半導体レーザ素子またはアルゴンレーザ素子など、青紫色半導体レーザ素子以外のレーザ素子を有する光源であってもよい。
【００８０】
また、上記実施形態では、光源の一例として、波長が約４０５ｎｍの青紫色レーザ光を出射する半導体レーザ光源を示したが、第１〜第４の局面による発明はこれに限らず、３５０ｎｍ以上５００ｎｍ以下の波長を有する光を出射する光源であれば、半導体レーザ光源以外の他の光源であってもよい。このように構成すれば、好酸球の自家蛍光に基づく蛍光情報を取得可能な短波長域の光を測定試料に照射することができる。
【００８１】
また、上記実施形態では、試料分析処理において、早いものからＲＢＣ／ＰＬＴ検出、ＷＢＣ検出、ＨＧＢ検出、ＷＢＣ分類検出およびマラリア検出の順序で各検出処理を行う例を示したが、本発明はこれに限らず、試料分析処理において、上記以外の順序で各検出処理を行ってもよい。また、試料分析処理における、白血球分類処理、マラリア分類処理、赤血球数・血小板数算出処理、および、血色素量算出処理の順序も適宜変更可能である。
【００８２】
また、上記実施形態では、ＷＢＣ検出、ＨＧＢ検出、ＷＢＣ分類検出およびマラリア検出に共通に用いられる溶血剤を収容する１つの、試薬容器としての溶血剤容器を試料供給部に接続する例を示したが、第５〜第８の局面による発明はこれに限らず、各検出に用いる溶血剤をそれぞれ別々に収容するように４つの溶血剤容器を試料供給部に接続してもよいし、上記４つの検出のうち、いずれかに用いる溶血剤を共通の溶血剤容器に収容し、２つまたは３つの溶血剤容器を試料供給部に接続してもよい。また、５つ以上の溶血剤容器を試料供給部に接続してもよい。この際、各溶血剤容器に収容する溶血剤を、それぞれ予め所定の希釈倍率に希釈しておけば、各検出に用いる測定試料を調製する際に、溶血剤を所望の希釈倍率に希釈するための工程を別途設ける必要がない。
【００８３】
また、上記実施形態では、溶血剤の一例として、標識物質を含まない溶血剤を示したが、第５〜第８の局面による発明はこれに限らず、溶血剤が標識物質を含んでいてもよい。
【００８４】
また、上記実施形態では、第２光情報生成部の一例として、透過光情報としての吸光度を測定するＨＧＢ測定部を示したが、本発明はこれに限らず、散乱光情報を生成するＨＧＢ測定部であってもよい。この場合、データ処理ユニットのＣＰＵは、ＨＧＢ測定部により生成された散乱光情報に基づいてヘモグロビン濃度を取得する。
【００８５】
また、上記実施形態では、溶血剤の一例として、アルキルトリメチルアンモニウム塩であって、アルキル基の炭素数が１２以上１８以下であるカチオン性界面活性剤（ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド；３４．１ｍＭ、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド；１．７ｍＭ）を含む溶血剤を示したが、本発明はこれに限らず、カチオン性界面活性剤（上記実施形態では、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライドとステアリルトリメチルアンモニウムクロライドの合計）のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が、０．６２ｍＭ以上２．１５ｍＭ以下であれば、上記以外の濃度のカチオン性界面活性剤を含む溶血剤であってもよい。なお、上記実施形態では、溶血剤を２５倍希釈して測定試料を調製しているので、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭになるときのカチオン性界面活性剤の溶血剤における濃度は１５．５ｍＭであり、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭになるときのカチオン性界面活性剤の溶血剤における濃度は５３．７５ｍＭである。また、上記の溶血剤に代えて、アルキル基の炭素数が８以上１０以下であるカチオン性界面活性剤を用いれば、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭ以上であっても測定可能である。
【００８６】
ここで、本発明の一実施形態による血液分析装置において、溶血剤におけるカチオン性界面活性剤の濃度を変動させた場合の実験結果について説明する。実験では、溶血剤におけるカチオン性界面活性剤の濃度が微量ずつ異なる複数の実験結果を得たが、ここでは、代表して、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭである溶血剤を用いた場合、および、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭである溶血剤を用いた場合の２つの実験結果について説明する。
【００８７】
図１８および図２０に示すように、スキャッタグラム上で、白血球をリンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）の３つに分類することが可能である。また、図１９および図２１に示すように、スキャッタグラム上で、好酸球と好酸球以外の集団とに分類することが可能である。また、これらの分類結果から白血球を、リンパ球と好塩基球との集団、単球、好中球および好酸球の４つに分類することが可能である。したがって、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭ以上２．１５ｍＭ以下の範囲においては、白血球を４分類することが可能であると考えられる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液分析装置および血液分析方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、白血球分類を行う血液分析装置が知られている。このような血液分析装置は、たとえば、特開２００３−８３９６０号公報および特開２００５−２５７４５０号公報に開示されている。
【０００３】
上記特開２００３−８３９６０号公報に記載の血液分析装置は、血液試料と試薬とから調製された測定試料中の白血球を検出する電気抵抗式検出部を備え、電気抵抗式検出部による検出結果に基づいて測定試料中の白血球を３つに分類するように構成されている。
【０００４】
上記特開２００５−２５７４５０号公報に記載の血液分析装置は、血液試料と試薬とから測定試料を調製する試料調製部と、前方散乱光、側方散乱光および蛍光を検出する光学系検出部とを備え、光学系検出部による検出結果に基づいて測定試料中の白血球を４つに分類するように構成されている。また、この光学系検出部では、蛍光標識された白血球の蛍光を検出している。
【０００５】
しかしながら、上記特開２００３−８３９６０号公報の血液分析装置では、測定試料中の白血球を４つ以上に分類することができないという問題点がある。
【０００６】
また、上記特開２００５−２５７４５０号公報の血液分析装置では、血液試料中の白血球を４つに分類することが可能である一方、測定試料中の白血球に対して蛍光標識を行う必要があるので、標識物質を含む高価な試薬を用いる必要があるという不都合がある。このため、白血球を４つ以上に分類可能で、かつ、標識物質を含む試薬を用いる必要がない血液分析装置が望まれる。
【０００７】
また、従来、白血球を分類し、ヘモグロビン濃度を取得する血液分析装置が知られている。このような血液分析装置は、たとえば、特開２００６−２９２７３８号公報に開示されている。
【０００８】
上記特開２００６−２９２７３８号公報に記載の血液分析装置は、血液試料および白血球分類用試薬を含む測定試料を用いて、前方散乱光、側方散乱光および蛍光を測定し、測定試料中の白血球を４つに分類するように構成されている。また、この血液分析装置は、血液試料、および、白血球分類用試薬とは組成が異なる専用のヘモグロビン測定用試薬を含む測定試料を用いて、透過光を検出し、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するように構成されている。
【０００９】
しかしながら、上記特開２００６−２９２７３８号公報の血液分析装置では、白血球分類用試薬を用いて白血球を分類し、白血球分類用試薬とは組成が異なる専用のヘモグロビン測定用試薬を用いてヘモグロビン濃度を取得するので、白血球の分類およびヘモグロビン濃度の取得を行うために組成の異なる２種類の試薬を別々に開発する必要があり、その結果、試薬の価格が高騰し、ユーザに負担がかかるという問題点がある。
【発明の概要】
【００１０】
この発明の第１の局面による血液分析装置は、血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、血液試料および溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製する試料調製部と、第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成する第１光情報生成部と、第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成する第２光情報生成部と、第１光情報生成部により生成された蛍光情報と２種類の散乱光情報とに基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに第１分類し、第２光情報生成部により生成された透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得する制御部とを備える。
【００１１】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第２測定試料から、試料の電気情報を生成する電気情報生成部をさらに備え、制御部は、電気情報生成部により生成された電気情報に基づいて、第２測定試料中の白血球を少なくともリンパ球とリンパ球以外の集団とに第２分類するとともに、第１分類および第２分類の分類結果に基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球との５つに分類するように構成されている。
【００１２】
この場合、好ましくは、試料調製部は、血液試料から第３測定試料をさらに調製し、電気情報生成部は、第３測定試料から、試料の電気情報を生成し、制御部は、電気情報生成部により第３測定試料から生成された電気情報に基づいて、第３測定試料中の赤血球数および血小板数を算出するように構成されている。
【００１３】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第２測定試料における溶血剤の希釈倍率は、第１測定試料における溶血剤の希釈倍率と異なる。
【００１４】
この場合、好ましくは、第２測定試料における溶血剤の希釈倍率は、第１測定試料における溶血剤の希釈倍率よりも小さい。
【００１５】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、試料調製部は、血液試料、所定の試薬容器に収容された溶血剤、および、所定量の希釈液を混合することにより第１測定試料を調製し、血液試料、所定の試薬容器に収容された溶血剤、および、所定量よりも少ない量の希釈液とを混合することにより第２測定試料を調製するように構成されている。
【００１６】
この場合、好ましくは、試料調製部は、希釈液と血液試料とを混合した状態で、溶血剤を混合することにより第２測定試料を調製するように構成されている。
【００１７】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、試料調製部は、少なくとも血液試料、および、第１測定試料に用いられる溶血剤が収容された第１試薬容器とは異なる第２試薬容器に収容された溶血剤を混合することにより第２測定試料を調製するように構成されている。
【００１８】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、溶血剤は、カチオン性界面活性剤を含む。
【００１９】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第１光情報生成部は、蛍光情報として、少なくとも、測定試料中の好酸球の自家蛍光の強度に応じた蛍光情報を生成するように構成されている。
【００２０】
上記第１の局面による血液分析装置において、好ましくは、第１光情報生成部は、光源と、光源から測定試料に光が照射されることにより生じる蛍光を受光し、受光強度に応じた蛍光情報を生成する蛍光受光部と、光源から測定試料に光が照射されることにより生じる散乱光を受光し、受光強度に応じた散乱光情報を生成する散乱光受光部とを含む。
【００２１】
上記第１光情報生成部が蛍光受光部と散乱光受光部とを含む構成において、好ましくは、散乱光受光部は、測定試料に光が照射されることにより光源から照射された光の進行方向に沿って生じる前方散乱光を受光し、受光強度に応じた前方散乱光情報を、散乱光情報のうちの第１情報として生成する第１受光部と、測定試料に光が照射されることにより光源から照射された光の進行方向に略垂直な方向に沿って生じる側方散乱光を受光し、受光強度に応じた側方散乱光情報を、散乱光情報のうちの第２情報として生成する第２受光部とを有する。
【００２２】
この場合、好ましくは、制御部は、前方散乱光情報と蛍光情報とに基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも好酸球と好酸球以外の集団とに分類するように構成されている。
【００２３】
上記第１光情報生成部が蛍光受光部と散乱光受光部とを含む構成において、好ましくは、光源は、３５０ｎｍ以上５００ｎｍ以下の波長を有する光を照射するように構成されている。
【００２４】
上記光源が所定範囲内の波長を有する光を照射する構成において、好ましくは、光源は、青紫色半導体レーザ素子を有する。
【００２５】
この発明の第２の局面による血液分析方法は、血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、血液試料および溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製するステップと、第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成するステップと、第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成するステップと、第１測定試料から生成された蛍光情報と２種類の散乱光情報とに基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、第２測定試料から生成された透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを備える。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】本発明の一実施形態による血液分析装置の概略構成を示す正面図である。
【図２】図１に示した一実施形態による血液分析装置の構成を示すブロック図である。
【図３】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットを示す斜視図である。
【図４】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットの内部構造を示す斜視図である。
【図５】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットの内部構造を示す側面図である。
【図６】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたフローセルの構成を模式的に示す斜視図である。
【図７】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたＷＢＣ分類測定部の構成を示す概略図である。
【図８】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたＤＣ測定部の構成を模式的に示す斜視図である。
【図９】図１に示した一実施形態による血液分析装置の測定ユニットに設けられたＨＧＢ測定部の構成を模式的に示す斜視図である。
【図１０】図１に示した一実施形態による血液分析装置に用いられる溶血剤の組成を示す図である。
【図１１】図１に示した一実施形態による血液分析装置に用いられるマラリア検出用の染色液の組成を示す図である。
【図１２】図１に示した一実施形態による血液分析装置における試料分析処理を示すフローチャートである。
【図１３】図１に示した一実施形態による血液分析装置に用いられる第３測定試料および第２測定試料の作成工程を説明するための図である。
【図１４】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成される白血球の粒度分布図である。
【図１５】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成される白血球分類用のスキャッタグラムである。
【図１６】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成される白血球分類用のスキャッタグラムである。
【図１７】図１に示した一実施形態による血液分析装置において作成されるマラリア分類用のスキャッタグラムである。
【図１８】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図１９】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２０】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２１】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭである溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２２】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、図１０に示した溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２３】図１に示した一実施形態による血液分析装置において、図１０に示した溶血剤を用いた場合の実験結果を示した図である。
【図２４】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示すヘモグロビンについての相関図である。
【図２５】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示すリンパ球と好塩基球との集団についての相関図である。
【図２６】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示す単球についての相関図である。
【図２７】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示す好中球についての相関図である。
【図２８】複数の血液試料について、後述の実施形態に記載の方法（試薬は、後述の実施形態に記載の試薬と同様のものを使用した）により得られた測定結果と、同じ検体について、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関を示す好酸球についての相関図である。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下、本発明の実施形態を図面に基づいて説明する。
【００２８】
まず、図１〜図１１を参照して、本発明の一実施形態による血液分析装置１の構成について説明する。
【００２９】
本実施形態による血液分析装置１は、図１に示すように、血液検査に使用される装置であり、測定ユニット２と、データ処理ユニット３とによって主として構成されている。また、血液分析装置１は、たとえば、病院または病理検査施設などの医療機関の施設内に設置されている。また、血液分析装置１では、測定ユニット２により血液試料中に含まれる成分について所定の測定を行い、この測定データをデータ処理ユニット３で受信して分析処理を行っている。そして、測定ユニット２とデータ処理ユニット３とは、互いにデータ通信可能なように、データ伝送ケーブル３ａにより接続されている。なお、測定ユニット２とデータ処理ユニット３とは、データ伝送ケーブル３ａにより直接接続される構成であってもよいし、たとえば、電話回線を使用した専用回線、ＬＡＮまたはインターネットなどの通信ネットワークを介して接続されていてもよい。
【００３０】
測定ユニット２は、図２に示すように、試料供給部４と、ＷＢＣ分類測定部５と、ＤＣ測定部６と、ＨＧＢ測定部７と、制御部８と、通信部９とを含んでいる。また、図３に示すように、測定ユニット２の正面右下部分には、血液試料を収容した採血管２０をセット可能に構成された採血管セット部２ａが設けられている。この採血管セット部２ａは、その近傍に設けられたボタンスイッチ２ｂをユーザが押下することにより、手前方向に迫り出すように構成されている。ユーザは、採血管セット部２ａが迫り出した状態で採血管２０をセットすることが可能である。そして、採血管２０をセットした後、ユーザが再度ボタンスイッチ２ｂを押下することにより、採血管セット部２ａは測定ユニット２の内部に戻されるように構成されている。
【００３１】
測定ユニット２の内部には、図４および図５に示すように、測定試料を吸引するピペット２１、および、血液試料と試薬とを混合調製するためのチャンバ２２、２３（図５参照）などが設けられている。ピペット２１は、上下方向に延びた管状に形成されており、その先端は鋭く尖っている。また、ピペット２１は、図示しないシリンジポンプに連結されており、このシリンジポンプの動作によって液体を所定量だけ吸引するとともに、吐出することが可能なように構成されている。また、ピペット２１は、移動機構に接続されており、上下方向および前後方向にそれぞれ移動可能に構成されている。また、ピペット２１は、採血管２０を密閉するゴム製のキャップ２０ａに、鋭利な先端を穿刺することにより、採血管２０に収容された血液試料を吸引するように構成されている。また、ピペット２１は、血液試料を吸引した後、移動機構により所定の位置まで移動され、チャンバ２２および２３内に血液試料を供給するように構成されている。
【００３２】
試料供給部４は、チャンバ２２および２３、複数の電磁弁、ダイヤフラムポンプなどを有する流体ユニットである。チャンバ２２は、赤血球、血小板の測定、およびヘモグロビン濃度の測定に用いられる測定試料を調製するために設けられている。また、チャンバ２３は、白血球の測定に用いられる測定試料を調製するために設けられている。また、試料供給部４により構成される流体ユニットには、試薬容器が接続されている。具体的には、希釈液を収容するための希釈液容器２４、溶血剤１００を収容するための溶血剤容器２５およびマラリア検出用の測定試料に用いられる染色液を収容するための染色液容器２６が流体ユニットに接続されている。これにより、希釈液および溶血剤１００をチャンバ２２に供給することが可能であるとともに、希釈液、溶血剤１００および染色液をチャンバ２３に供給することが可能である。
【００３３】
ＷＢＣ分類測定部５は、光学式のフローサイトメータであり、半導体レーザ光を用いたフローサイトメトリー法により、白血球分類検出およびマラリア検出を行うために設けられている。また、ＷＢＣ分類測定部５は、測定試料の液流を形成するフローセル５１（図６参照）を有している。フローセル５１は、透光性を有する石英、ガラス、合成樹脂などの材料によって管状に構成されており、その内部が測定試料およびシース液（希釈液）が通流する流路となっている。このフローセル５１には、内部空間が他の部分よりも細く絞り込まれたオリフィス５１ａが設けられている。また、オリフィス５１ａの入口付近は二重管構造となっており、その内側管部分は試料ノズル５１ｂとなっている。また、試料ノズル５１ｂの外側の空間はシース液（希釈液）が通流する流路５１ｃであり、シース液（希釈液）は、流路５１ｃを通流し、オリフィス５１ａに導入される。このようにフローセル５１に供給されたシース液（希釈液）は、試料ノズル５１ｂから吐出された測定試料を取り囲むように流れる。そして、オリフィス５１ａによって測定試料の流れが細く絞り込まれ、測定試料に含まれる白血球、赤血球などの粒子がシース液（希釈液）に取り囲まれて１つずつオリフィス５１ａを通過する。
【００３４】
また、ＷＢＣ分類測定部５には、半導体レーザ光源５２が、フローセル５１のオリフィス５１ａへ向けてレーザ光を出射するように配置されている。この半導体レーザ光源５２は、青紫色半導体レーザ素子５２ａを有し、波長が約４０５ｎｍの青紫色レーザ光を出射することが可能なように構成されている。半導体レーザ光源５２に青紫色半導体レーザ素子５２ａを設けることによって、容易に、短波長（約４０５ｎｍ）の光を測定試料に照射することが可能となる。また、半導体レーザ光源５２とフローセル５１との間には、複数のレンズからなる照射レンズ系５３が配置されている。この照射レンズ系５３によって、半導体レーザ光源５２から出射された平行ビームがビームスポットに集束されるようになっている。また、半導体レーザ光源５２から直線的に延びた光軸上には、フローセル５１を挟んで照射レンズ系５３に対向するように、ビームストッパ５４ａが設けられており、ビームストッパ５４ａは、半導体レーザ光源５２からの直接光を遮光するように構成されている。
【００３５】
また、ビームストッパ５４ａのさらに光軸下流側には、フォトダイオード５４が配置されている。フォトダイオード５４は、フローセル５１を流れる測定試料により生じるレーザ光の散乱光を受光するように構成されている。具体的には、半導体レーザ光源５２から直線的に延びた光軸に沿って進行する光のうち、半導体レーザ光源５２の直接光はビームストッパ５４ａによって遮断されるので、フォトダイオード５４は、概ね光軸方向に沿って進行する散乱光（以下、前方散乱光という）のみを受光するように構成されている。また、フォトダイオード５４は、フローセル５１から発せられた前方散乱光を光電変換し、これによって生じた電気信号（以下、前方散乱光信号という）をアンプ５４ｂに伝達するように構成されている。そして、アンプ５４ｂは、伝達された前方散乱光信号を増幅し、制御部８に出力するように構成されている。
【００３６】
また、フローセル５１の側方であって、半導体レーザ光源５２からフォトダイオード５４へ直線的に延びる光軸に対して直交する方向には、側方集光レンズ５５が配置されており、この側方集光レンズ５５は、フローセル５１内を通過する血球にレーザ光を照射したときに発生する側方光（前記光軸に対して交差する方向へ出射される光）を集光するように構成されている。側方集光レンズ５５の下流側にはダイクロイックミラー５６が設けられており、ダイクロイックミラー５６は、側方集光レンズ５５から送られる信号光を散乱光成分と蛍光成分とに分けるように構成されている。ダイクロイックミラー５６の側方（側方集光レンズ５５とダイクロイックミラー５６とを結ぶ光軸方向に交差する方向）には、側方散乱光受光用のフォトダイオード５７が設けられており、ダイクロイックミラー５６の光軸下流側には、光学フィルタ５８ａおよびアバランシェフォトダイオード５８が設けられている。また、フォトダイオード５７は、ダイクロイックミラー５６で分けられた側方散乱光成分を光電変換し、これによって生じた電気信号（以下、側方散乱光信号という）をアンプ５７ａに伝達するように構成されている。そして、アンプ５７ａは、伝達された側方散乱光信号を増幅し、制御部８に出力するように構成されている。
【００３７】
また、アバランシェフォトダイオード５８は、光学フィルタ５８ａにより波長選択された後の側方蛍光成分を光電変換し、これによって生じた電気信号（側方蛍光信号）をアンプ５８ｂに伝達するように構成されている。そして、アンプ５８ｂは、伝達された側方蛍光信号を増幅し、制御部８に出力するように構成されている。
【００３８】
ＤＣ測定部６は、シースフローＤＣ検出法により、赤血球数（ＲＢＣ）および血小板数（ＰＬＴ）を測定することが可能なように構成されている。また、ＤＣ測定部６は、赤血球パルス波高値検出法により、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）を算出するための測定データも得ることが可能に構成されている。さらに、ＤＣ測定部６は、リンパ球比率を算出するための白血球数（ＷＢＣ）検出にも用いられる。このようにＤＣ測定部６を、赤血球数および血小板数の測定と、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）を算出するための測定データの取得と、リンパ球比率を算出するための白血球数（ＷＢＣ）検出とに共通に用いることによって、これらの項目を測定するために別々の測定部を設ける必要がない。また、ＤＣ測定部６は、フローセルを有しており、このフローセルにチャンバ２２から測定試料が移送されるようになっている。たとえば、赤血球数および血小板数の測定を行う場合には、図８に示すように、チャンバ２２において血液試料と希釈液とが混合調製された測定試料が、シース液（希釈液）とともに試料供給部４からフローセルに移送される。そして、フローセル内では、測定試料がシース液（希釈液）によって取り囲まれた状態の液流が形成される。
【００３９】
ＨＧＢ測定部７は、メトヘモグロビン法により、血色素量（ＨＧＢ）を測定するように構成されている。ＨＧＢ測定部７は、図９に示すように、希釈試料を収容するセルを有しており、このセルにチャンバ２２から測定試料が移送されるようになっている。そして、ＨＧＢ測定部７は、波長が約５５５ｎｍの光を照射する発光ダイオードを有しており、上記セル中の測定試料に発光ダイオードからの光を照射することによって、その吸光度を測定するように構成されている。なお、ヘモグロビンの測定を行う場合には、チャンバ２２において、血液試料、希釈液および溶血剤１００が混合され測定試料が調製される。
【００４０】
制御部８は、ＣＰＵ、ＲＯＭ、ＲＡＭなどから構成されており、測定ユニット２の各部の動作制御を行うように構成されている。
【００４１】
通信部９は、たとえば、ＲＳ−２３２Ｃインタフェース、ＵＳＢインタフェース、Ｅｔｈｅｒｎｅｔ（登録商標）インタフェースであり、データ処理ユニット３との間でデータの送受信を行うことが可能なように構成されている。
【００４２】
データ処理ユニット３は、図２に示すように、ＣＰＵ３１、ＲＯＭ３２、ＲＡＭ３３、ハードディスク３４、通信インタフェース３５、キーボードおよびマウスなどの入力部３６、およびディスプレイ装置３７を備えるコンピュータによって構成されている。データ処理ユニット３のハードディスク３４には、オペレーティングシステムと、測定ユニット２から受信した測定データを分析処理するためのアプリケーションプログラムがインストールされている。
【００４３】
ここで、本実施形態では、データ処理ユニット３のＣＰＵ３１は、このアプリケーションプログラムを実行することにより、測定データを分析処理し、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、血色素量（ＨＧＢ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）、平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）、血小板数（ＰＬＴ）を算出するように構成されている。さらに、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号、側方散乱光信号、側方蛍光信号を用いてスキャッタグラムを作成して、白血球を好中球（Ｎｅｕｔ）、リンパ球、単球（Ｍｏｎｏ）、好酸球（ＥＯ）、好塩基球（ＢＡＳＯ）の５つに分類するように構成されている。
【００４４】
通信インタフェース３５は、たとえば、ＲＳ−２３２Ｃインタフェース、ＵＳＢインタフェース、Ｅｔｈｅｒｎｅｔ（登録商標）インタフェースであり、測定ユニット２との間でデータの送受信を行うことが可能に構成されている。
【００４５】
また、本実施形態における溶血剤１００は、図１０に示すように、カチオン性界面活性剤（ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド；３４．１ｍＭ、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド；１．７ｍＭ）を含み、かつ、標識物質を含んでいない。標識物質とは、測定対象となる細胞に選択的に付与され、測定のための標識となる物質であり、たとえば、測定対象の細胞の核酸を染色する蛍光色素が該当する。また、この溶血剤１００は、血液中のヘモグロビンをメトヘモグロビンへと転化する性質を有している。また、後述するように、各測定に用いられる各測定試料は、それぞれ、溶血剤１００の希釈倍率、および、血液試料の希釈倍率が異なっている。このようにカチオン性界面活性剤を用いることによって、組成が異なる２種類以上の溶血剤を用いることなく希釈倍率を変えるだけで、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することが可能である。また、染色液は、図１１に示す化学式の構造を有する蛍光色素（たとえば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社のヘキスト３４５８０）と、図１１に示すノニオン界面活性剤群のうちの１つとを含有している。この蛍光色素は、半導体レーザ光源５２ａから出射される青紫色レーザ光（波長が約４０５ｎｍ）により励起可能である。
【００４６】
次に、図１２〜図１７を参照して、本発明の一実施形態による血液分析装置１における試料分析処理について説明する。
【００４７】
まず、血液分析装置１が起動されると、アプリケーションプログラムなどの初期化が行われた後、ステップＳ１において、データ処理ユニット３のＣＰＵ３１により、ユーザからの測定開始指示があったか否かが判断され、指示があるまでこの判断が繰り返される。そして、測定開始指示があった場合には、ステップＳ２において、データ処理ユニット３から測定ユニット２に測定開始指示信号が送信される。
【００４８】
そして、ステップＳ２１において、測定ユニット２の制御部８により、測定開始指示信号が受信されたか否かが判断され、受信するまでこの判断が繰り返される。測定ユニット２が測定開始指示信号を受信すると、ステップＳ２２において、ピペット２１により、採血管セット部２ａにセットされた採血管２０から血液試料が吸引される。
【００４９】
そして、ステップＳ２３において、試料供給部４により、ＲＢＣ／ＰＬＴ測定試料（以下、第３測定試料という）が調製される。具体的には、図１３に示すように、希釈液容器２４から所定量（たとえば、２．０ｍＬ）の希釈液、および、ピペット２１により採血管２０から吸引された所定量（たとえば、６μＬ）の血液試料がチャンバ２２に供給され、攪拌される。これにより、所定量（たとえば、２．０ｍＬ）の第３測定試料が調製される。その後、ステップＳ２４において、チャンバ２２内の第３測定試料の一部（たとえば、１ｍＬ）が、シース液（希釈液）とともにＤＣ測定部６に移送されるとともに、ＤＣ測定部６により、第３測定試料のＲＢＣおよびＰＬＴ検出が行われる。
【００５０】
次に、ステップＳ２５において、試料供給部４により、ＷＢＣ（ＤＣ検出用）・ＨＧＢ測定試料（以下、第２測定試料という）が調製される。具体的には、図１３に示すように、所定量（たとえば、１ｍＬ）の第３測定試料が残存するチャンバ２２に、溶血剤容器２５から所定量（たとえば、０．５ｍＬ）の溶血剤１００が供給され、攪拌される。すなわち、チャンバ２２において血液試料と希釈液とが混合された後、溶血剤１００が混合されて第２測定試料が調製される。これにより、溶血剤は希釈液により希釈された状態で血液試料に混合されるので、血液試料が所望の濃度よりも高い濃度の溶血剤と混合されるのを抑制することが可能である。このように溶血剤１００が３倍に希釈（溶血剤／希釈液＝１／２）され、血液試料が５００倍に希釈された第２測定試料が調製される。また、これにより、赤血球が溶血されるとともに、ヘモグロビンがメトヘモグロビンへと転化される。また、第２測定試料における溶血剤１００の希釈倍率（３倍）を、後述する第１測定試料における溶血剤１００の希釈倍率（２５倍）よりも小さくすることによって、測定試料中の赤血球を確実に溶血することができるので、精度よくヘモグロビン濃度を取得することが可能となる。その後、ステップＳ２６において、チャンバ２２内の第２測定試料がＤＣ測定部６に移送されて、第２測定試料のＷＢＣ測定が行われる。また、ステップＳ２７において、第２測定試料がＨＧＢ測定部７に移送されて、第２測定試料のＨＧＢ検出が行われる。
【００５１】
そして、ステップＳ２８において、試料供給部４により、ＷＢＣ（分類用）測定試料（以下、第１測定試料という）が調製される。具体的には、上記した第２測定試料に含まれるのと同じ溶血剤１００が２５倍に希釈（溶血剤／希釈液＝１／２４）された所定量（たとえば、１ｍＬ）の希釈溶血剤、および、採血管２０から吸引された所定量（たとえば、１０μＬ）の血液試料がチャンバ２３に供給され、攪拌される。これにより、血液試料が１００倍に希釈された第１測定試料が調製される。また、これにより、溶血剤容器２５に収容された共通の溶血剤１００を用いて、第１測定試料および第２測定試料を調製することが可能となる。その後、ステップＳ２９において、チャンバ２３内の第１測定試料が、シース液（希釈液）とともにＷＢＣ分類測定部５に移送されるとともに、ＷＢＣ分類測定部５により、第１測定試料のＷＢＣ検出が行われる。
【００５２】
次に、ステップＳ３０において、試料供給部４により、マラリア測定試料（以下、第４測定試料という）が調製される。具体的には、溶血剤１００が９倍希釈（溶血剤／希釈液＝１／８）された所定量（たとえば、１ｍＬ）の希釈溶血剤、採血管２０から吸引された所定量（たとえば、１０μＬ）の血液試料、および、染色液容器２６から所定量（たとえば、１０μＬ）の染色液がチャンバ２３に供給され、攪拌される。これにより、血液試料が１００倍に希釈された第４測定試料が調製される。その後、ステップＳ３１において、チャンバ２３内の第４測定試料が、シース液（希釈液）とともにＷＢＣ分類測定部５に移送されるとともに、ＷＢＣ分類測定部５により、第４測定試料のマラリア検出が行われる。そして、ステップＳ３２において、各検出部において測定された測定データが、測定ユニット２からデータ処理ユニット３に送信される。
【００５３】
データ処理ユニット３では、ステップＳ３において、測定ユニット２が送信した測定データが受信されたか否かが判断され、受信するまでこの判断が繰り返される。そして、測定データを受信すると、ステップＳ４において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２６で測定されたＷＢＣ検出による測定データに基づいて、白血球数（ＷＢＣ）が算出される。また、ステップＳ５において、ＣＰＵ３１により、ＷＢＣ検出による測定データに基づいて、図１４に示すように、白血球の粒度分布図が作成され、白血球数（ＷＢＣ）に対するリンパ球比率が算出される。なお、リンパ球は、粒度分布図において、左から１つ目の山（集団）として現れる。
【００５４】
次に、ステップＳ６において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２９で測定されたＷＢＣ分類検出による測定データに基づいて、白血球がリンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）の３つに分類される。具体的には、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号および側方散乱光信号を用いて、図１５に示すように、スキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムから、リンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）のそれぞれの白血球数（ＷＢＣ）に対する比率を算出する。ここで、図２２には、実際に被験者から採取した血液試料を、本実施形態における溶血剤１００（図１０参照）を用いて測定し、その結果得られた前方散乱光信号および側方散乱光信号によるスキャッタグラムを示す。図２２に示すように、実際の測定結果においても、スキャッタグラム上で、白血球をリンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）の３つに分類することが可能であることが分かる。
【００５５】
そして、ステップＳ７において、ＣＰＵ３１により、ＷＢＣ分類検出による測定データに基づいて、白血球が好酸球および好酸球以外の集団の２つに分類される。具体的には、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号および側方蛍光信号を用いて、図１６に示すように、スキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムから、白血球数（ＷＢＣ）に対する好酸球比率を算出する。この側方蛍光信号は、半導体レーザ光源５２から出射された青紫色レーザ光（波長が約４０５ｎｍ）により励起された白血球の自家蛍光に基づくものであり、好酸球は、白血球の好酸球以外の集団よりも強い蛍光強度を有している。このように本実施形態では、標識物質を用いることなく、白血球を好酸球と好酸球以外の集団とに分類することが可能である。なお、ＣＰＵ３１は、側方散乱光信号および側方蛍光信号によるスキャッタグラムから、白血球数（ＷＢＣ）に対する好酸球比率を算出することも可能である。ここで、図２３には、実際に被験者から採取した血液試料を、本実施形態における溶血剤１００（図１０参照）を用いて測定し、その結果得られた前方散乱光信号および側方蛍光信号によるスキャッタグラムを示す。図２３に示すように、実際の測定結果においても、スキャッタグラム上で、好酸球と好酸球以外の集団とに分類することが可能であることが分かる。
【００５６】
その後、ステップＳ８において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ６で算出された顆粒球（好中球と好酸球との集団）比率から、ステップＳ７で算出された好酸球比率を差し引くことによって、白血球数（ＷＢＣ）に対する好中球比率が算出される。これにより、白血球がリンパ球と好塩基球との集団、単球、好中球および好酸球の４つに分類される。そして、ステップＳ９において、ＣＰＵ３１により、リンパ球と好塩基球との集団の比率から、ステップＳ５で算出されたリンパ球比率を差し引くことによって、白血球数（ＷＢＣ）に対する好塩基球比率が算出される。これにより、白血球がリンパ球、好塩基球、単球、好中球および好酸球の５つに分類される。
【００５７】
そして、ステップＳ１０において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ３１で測定されたマラリア検出による測定データに基づいて、マラリア原虫感染赤血球がマラリア原虫感染赤血球以外の集団から分類される。具体的には、ＣＰＵ３１は、前方散乱光信号および側方蛍光信号を用いて、図１７に示すように、スキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムから、マラリア原虫感染赤血球をマラリア原虫感染赤血球以外の集団から分類する。これにより、マラリア感染の有無を判断することが可能となる。
【００５８】
次に、ステップＳ１１において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２４で測定されたＲＢＣ／ＰＬＴ検出による測定データに基づいて、赤血球数（ＲＢＣ）、血小板数（ＰＬＴ）およびヘマトクリット値（ＨＣＴ）が算出される。
【００５９】
ここで、本実施形態では、ステップＳ１２において、ＣＰＵ３１により、ステップＳ２７で測定されたＨＧＢ検出による測定データに基づいて、血色素量（ＨＧＢ）が算出される。すなわち、ＳＬＳヘモグロビン法を用いたＨＧＢ検出により得られた吸光度に基づいて、ヘモグロビン濃度が算出される。
【００６０】
その後、ステップＳ１３において、上記のように算出された赤血球数（ＲＢＣ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）および血色素量（ＨＧＢ）から、ＣＰＵ３１により、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）および平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）が算出される。各値の算出式をそれぞれ以下の式（１）〜（３）に示す。
【００６１】
ＭＣＶ＝（ＨＣＴ／ＲＢＣ）×１０００・・・・・（１）
上記式（１）において、ＭＣＶは平均赤血球容積（ｆＬ）、ＨＣＴはヘマトクリット値（％）、ＲＢＣは赤血球数（×１０４／μＬ）をそれぞれ表す。
【００６２】
ＭＣＨ＝（ＨＧＢ／ＲＢＣ）×１０００・・・・・（２）
上記式（２）において、ＭＣＨは平均赤血球血色素量（ｐｇ）、ＨＧＢは血色素量（ｇ／ｄＬ）、ＲＢＣは赤血球数（×１０４／μＬ）をそれぞれ表す。
【００６３】
ＭＣＨＣ＝（ＨＧＢ／ＨＣＴ）×１００・・・・・（３）
上記式（３）において、ＭＣＨＣは平均赤血球血色素濃度（ｇ／ｄＬ）、ＨＧＢは血色素量（ｇ／ｄＬ）、ＨＣＴはヘマトクリット値（％）をそれぞれ表す。
【００６４】
そして、ステップＳ１４において、上記のように算出された、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、血色素量（ＨＧＢ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）、平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）、血小板数（ＰＬＴ）の算出結果がディスプレイ装置３７に出力される。さらに、白血球数（ＷＢＣ）に対する好中球比率、リンパ球比率、単球比率、好酸球比率および好塩基球比率がディスプレイ装置３７に出力されるとともに、マラリア検出の結果も出力される。なお、白血球数（ＷＢＣ）に対する各血球比率に加えて、白血球数（ＷＢＣ）および各血球比率に基づいて算出された好中球数、リンパ球数、単球数、好酸球数および好塩基球数が出力される。
【００６５】
その後、ステップＳ１５において、ユーザからのシャットダウン指示の有無が判断され、指示がない場合には、ステップＳ１に移行される。シャットダウン指示があった場合には、血液分析装置１における試料分析処理のデータ処理ユニット３の動作が終了される。また、測定ユニット２側では、ステップＳ３２で測定データをデータ処理ユニット３に送信した後、ステップＳ３３において、ユーザからのシャットダウン指示があったか否かが判断され、指示がない場合には、ステップＳ２１に移行される。シャットダウン指示があった場合には、血液分析装置１における試料分析処理の測定ユニット２の動作が終了される。
【００６６】
本実施形態では、上記のように、血液試料と標識物質を含まない溶血剤１００とから調製された測定試料から、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を生成するＷＢＣ分類測定部５を設けることによって、測定試料に対して標識を行うことなく、測定試料中の好酸球の自家蛍光を利用して、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を得ることができる。また、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、測定試料中の白血球を、単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するＣＰＵ３１を設けることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。これにより、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００６７】
また、本実施形態では、シースフローＤＣ検出法により血球測定を行うＤＣ測定部６を設け、ＣＰＵ３１を、ＤＣ測定部６による測定データに基づいて、測定試料中の白血球をリンパ球とリンパ球以外の集団とに分類するとともに、この分類結果と側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号とに基づく分類結果とから、白血球をリンパ球、好塩基球、単球、好中球および好酸球の５つに分類するように構成することによって、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いながら、測定試料中の白血球を５つに分類することができる。
【００６８】
また、本実施形態による血液分析方法では、上記のように、標識物質を含まない測定試料から、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を生成するステップを設けることによって、測定試料に対して標識を行うことなく、測定試料中の好酸球の自家蛍光を利用して、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を得ることができる。また、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、測定試料中の白血球を、単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するステップを設けることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。これにより、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００６９】
また、本実施形態による溶血剤１００を用いる血液分析方法に、標識物質を含まない測定試料から、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を生成するステップを設けることによって、測定試料に対して標識を行うことなく、測定試料中の好酸球の自家蛍光を利用して、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を得ることができる。また、当該溶血剤１００を用いる血液分析方法に、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、測定試料中の白血球を、単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するステップを設けることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。このように、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて、測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００７０】
また、本実施形態による標識物質を含まない溶血剤１００を、上記のように、側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号を用いて白血球を単球、好中球、好酸球、および、リンパ球と好塩基球との集団の４つに分類するために用いることによって、標識物質を用いることなく白血球を４つに分類することができるので、溶血剤１００に標識物質を含める必要がない。すなわち、標識物質を含まない簡易な組成の溶血剤１００を用いて、測定試料中の白血球を４つに分類することができる。
【００７１】
また、本実施形態では、上記のように、ＷＢＣ分類測定部５により血液試料および溶血剤１００を含む第１測定試料から生成された側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類し、ＨＧＢ測定部７により血液試料および前記溶血剤１００と同じ溶血剤１００を含む第２測定試料から測定された吸光度に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するＣＰＵ３１とを設けることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７２】
また、本実施形態では、ＤＣ測定部６により得られた測定データに基づいて、第２測定試料中の白血球をリンパ球とリンパ球以外の集団とに分類するとともに、この分類結果と上記した白血球の４分類の分類結果とに基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球との５つに分類するようにＣＰＵ３１を構成することによって、ＤＣ測定部６により、ヘモグロビン濃度を取得するために用いる測定試料と同じ第２測定試料を用いて、白血球をリンパ球とリンパ球以外の集団とに分類することができるので、組成の異なる測定試料を別途調製することなく、白血球を５つに分類することができる。
【００７３】
また、本実施形態による血液分析方法では、上記のように、ＷＢＣ分類測定部５により血液試料および溶血剤１００を含む第１測定試料から生成された側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、ＨＧＢ測定部７により血液試料および前記溶血剤１００と同じ溶血剤１００を含む第２測定試料から測定された吸光度に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを設けることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７４】
また、本実施形態による溶血剤を、上記のように、ＷＢＣ分類測定部５により血液試料および溶血剤１００を含む第１測定試料から生成された側方蛍光信号、前方散乱光信号および側方散乱光信号に基づいて、第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、ＨＧＢ測定部７により血液試料および前記溶血剤１００と同じ溶血剤１００を含む第２測定試料から測定された吸光度に基づいて、第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを備える血液分析方法に用いることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７５】
また、本実施形態による溶血剤を、上記のように、カチオン性界面活性剤を含み、ヘモグロビン濃度を測定するために用いるとともに、白血球を少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球とに分類するために用いることによって、白血球を４つに分類するための溶血剤とヘモグロビン濃度を取得するための溶血剤とを共通化することができるので、白血球分類およびヘモグロビン濃度取得を行うために組成の異なる２種類以上の溶血剤（試薬）を開発する必要がない。これにより、試薬の開発に起因するユーザへの負担を軽減しながら、測定試料中の白血球を４つに分類し、かつ、測定試料中のヘモグロビン濃度を取得することができる。
【００７６】
（実施例）
次に、図２４〜図２８を参照して、上記実施形態に記載の方法により得られた測定結果と、多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００（シスメックス株式会社）により得られた測定結果との相関についての検証結果について説明する。上記実施形態に記載の方法による測定と多項目自動血液分析装置ＸＥ−２１００による測定とは、複数の血液試料について、同じ検体について行った。なお、図２４〜図２８は、それぞれ、ヘモグロビン、リンパ球と好塩基球との集団、単球、好中球、および好酸球の測定結果の相関図を示している。また、図２４〜図２８では、それぞれ、縦軸に上記実施形態に記載の方法により得られた測定結果を、横軸に多項目自動血球分析装置ＸＥ−２１００により得られた測定結果を示している。これらの図に示すように、相関係数ｒは、ヘモグロビンについては０．９９２、リンパ球と好塩基球との集団については０．９６８、単球については０．７９６、好中球については０．９４６、および、好酸球については０．８９２であり、いずれも高い相関を示す結果となった。
【００７７】
なお、今回開示された実施形態は、全ての点で例示であって制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は、上記した実施形態の説明ではなく特許請求の範囲によって示され、さらに特許請求の範囲と均等の意味および範囲内での全ての変更が含まれる。
【００７８】
たとえば、上記実施形態では、ＷＢＣ検出、ＨＧＢ検出、ＷＢＣ分類検出およびマラリア検出のために用いられる溶血剤を１つの溶血剤容器に収容する例を示したが、第１〜第４の局面による発明はこれに限らず、各検出用にそれぞれ別々の溶血剤を用意し、各溶血剤をそれぞれ別々の溶血剤容器に収容するようにしてもよい。この際、各検出に用いられる溶血剤は異なる種類の溶血剤であってもよい。また、各溶血剤容器に収容する溶血剤を、それぞれ予め所定の希釈倍率に希釈していてもよい。
【００７９】
また、上記実施形態では、光源の一例として、青紫色半導体レーザ素子を有する半導体レーザ光源を示したが、本発明はこれに限らず、青色半導体レーザ素子またはアルゴンレーザ素子など、青紫色半導体レーザ素子以外のレーザ素子を有する光源であってもよい。
【００８０】
また、上記実施形態では、光源の一例として、波長が約４０５ｎｍの青紫色レーザ光を出射する半導体レーザ光源を示したが、第１〜第４の局面による発明はこれに限らず、３５０ｎｍ以上５００ｎｍ以下の波長を有する光を出射する光源であれば、半導体レーザ光源以外の他の光源であってもよい。このように構成すれば、好酸球の自家蛍光に基づく蛍光情報を取得可能な短波長域の光を測定試料に照射することができる。
【００８１】
また、上記実施形態では、試料分析処理において、早いものからＲＢＣ／ＰＬＴ検出、ＷＢＣ検出、ＨＧＢ検出、ＷＢＣ分類検出およびマラリア検出の順序で各検出処理を行う例を示したが、本発明はこれに限らず、試料分析処理において、上記以外の順序で各検出処理を行ってもよい。また、試料分析処理における、白血球分類処理、マラリア分類処理、赤血球数・血小板数算出処理、および、血色素量算出処理の順序も適宜変更可能である。
【００８２】
また、上記実施形態では、ＷＢＣ検出、ＨＧＢ検出、ＷＢＣ分類検出およびマラリア検出に共通に用いられる溶血剤を収容する１つの、試薬容器としての溶血剤容器を試料供給部に接続する例を示したが、第５〜第８の局面による発明はこれに限らず、各検出に用いる溶血剤をそれぞれ別々に収容するように４つの溶血剤容器を試料供給部に接続してもよいし、上記４つの検出のうち、いずれかに用いる溶血剤を共通の溶血剤容器に収容し、２つまたは３つの溶血剤容器を試料供給部に接続してもよい。また、５つ以上の溶血剤容器を試料供給部に接続してもよい。この際、各溶血剤容器に収容する溶血剤を、それぞれ予め所定の希釈倍率に希釈しておけば、各検出に用いる測定試料を調製する際に、溶血剤を所望の希釈倍率に希釈するための工程を別途設ける必要がない。
【００８３】
また、上記実施形態では、溶血剤の一例として、標識物質を含まない溶血剤を示したが、第５〜第８の局面による発明はこれに限らず、溶血剤が標識物質を含んでいてもよい。
【００８４】
また、上記実施形態では、第２光情報生成部の一例として、透過光情報としての吸光度を測定するＨＧＢ測定部を示したが、本発明はこれに限らず、散乱光情報を生成するＨＧＢ測定部であってもよい。この場合、データ処理ユニットのＣＰＵは、ＨＧＢ測定部により生成された散乱光情報に基づいてヘモグロビン濃度を取得する。
【００８５】
また、上記実施形態では、溶血剤の一例として、アルキルトリメチルアンモニウム塩であって、アルキル基の炭素数が１２以上１８以下であるカチオン性界面活性剤（ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド；３４．１ｍＭ、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド；１．７ｍＭ）を含む溶血剤を示したが、本発明はこれに限らず、カチオン性界面活性剤（上記実施形態では、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライドとステアリルトリメチルアンモニウムクロライドの合計）のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が、０．６２ｍＭ以上２．１５ｍＭ以下であれば、上記以外の濃度のカチオン性界面活性剤を含む溶血剤であってもよい。なお、上記実施形態では、溶血剤を２５倍希釈して測定試料を調製しているので、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭになるときのカチオン性界面活性剤の溶血剤における濃度は１５．５ｍＭであり、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭになるときのカチオン性界面活性剤の溶血剤における濃度は５３．７５ｍＭである。また、上記の溶血剤に代えて、アルキル基の炭素数が８以上１０以下であるカチオン性界面活性剤を用いれば、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭ以上であっても測定可能である。
【００８６】
ここで、本発明の一実施形態による血液分析装置において、溶血剤におけるカチオン性界面活性剤の濃度を変動させた場合の実験結果について説明する。実験では、溶血剤におけるカチオン性界面活性剤の濃度が微量ずつ異なる複数の実験結果を得たが、ここでは、代表して、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が２．１５ｍＭである溶血剤を用いた場合、および、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭである溶血剤を用いた場合の２つの実験結果について説明する。
【００８７】
図１８および図２０に示すように、スキャッタグラム上で、白血球をリンパ球と好塩基球との集団、単球および顆粒球（好中球と好酸球との集団）の３つに分類することが可能である。また、図１９および図２１に示すように、スキャッタグラム上で、好酸球と好酸球以外の集団とに分類することが可能である。また、これらの分類結果から白血球を、リンパ球と好塩基球との集団、単球、好中球および好酸球の４つに分類することが可能である。したがって、カチオン性界面活性剤のＷＢＣ（分類用）測定試料における濃度が０．６２ｍＭ以上２．１５ｍＭ以下の範囲においては、白血球を４分類することが可能であると考えられる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、前記血液試料および前記溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製する試料調製部と、
前記第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成する第１光情報生成部と、
前記第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成する第２光情報生成部と、
前記第１光情報生成部により生成された前記蛍光情報と前記２種類の散乱光情報とに基づいて、前記第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに第１分類し、前記第２光情報生成部により生成された前記透過光情報または前記散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、前記第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得する制御部とを備える、血液分析装置。
【請求項２】
前記第２測定試料から、試料の電気情報を生成する電気情報生成部をさらに備え、
前記制御部は、前記電気情報生成部により生成された電気情報に基づいて、前記第２測定試料中の白血球を少なくともリンパ球とリンパ球以外の集団とに第２分類するとともに、前記第１分類および前記第２分類の分類結果に基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球との５つに分類するように構成されている、請求項１に記載の血液分析装置。
【請求項３】
前記試料調製部は、前記血液試料から第３測定試料をさらに調製し、
前記電気情報生成部は、前記第３測定試料から、試料の電気情報を生成し、
前記制御部は、前記電気情報生成部により前記第３測定試料から生成された電気情報に基づいて、前記第３測定試料中の赤血球数および血小板数を算出するように構成されている、請求項２に記載の血液分析装置。
【請求項４】
前記第２測定試料における前記溶血剤の希釈倍率は、前記第１測定試料における前記溶血剤の希釈倍率と異なる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項５】
前記第２測定試料における前記溶血剤の希釈倍率は、前記第１測定試料における前記溶血剤の希釈倍率よりも小さい、請求項４に記載の血液分析装置。
【請求項６】
前記試料調製部は、前記血液試料、所定の試薬容器に収容された前記溶血剤、および、所定量の希釈液を混合することにより前記第１測定試料を調製し、前記血液試料、前記所定の試薬容器に収容された前記溶血剤、および、前記所定量よりも少ない量の前記希釈液とを混合することにより前記第２測定試料を調製するように構成されている、請求項１〜５のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項７】
前記試料調製部は、前記希釈液と前記血液試料とを混合した状態で、前記溶血剤を混合することにより前記第２測定試料を調製するように構成されている、請求項６に記載の血液分析装置。
【請求項８】
前記試料調製部は、少なくとも前記血液試料、および、前記第１測定試料に用いられる前記溶血剤が収容された第１試薬容器とは異なる第２試薬容器に収容された前記溶血剤を混合することにより前記第２測定試料を調製するように構成されている、請求項１〜７のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項９】
前記溶血剤は、カチオン性界面活性剤を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１０】
前記第１光情報生成部は、前記蛍光情報として、少なくとも、前記測定試料中の好酸球の自家蛍光の強度に応じた蛍光情報を生成するように構成されている、請求項１〜９のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１１】
前記第１光情報生成部は、光源と、前記光源から前記測定試料に光が照射されることにより生じる蛍光を受光し、受光強度に応じた前記蛍光情報を生成する蛍光受光部と、前記光源から前記測定試料に光が照射されることにより生じる散乱光を受光し、受光強度に応じた前記散乱光情報を生成する散乱光受光部とを含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１２】
前記散乱光受光部は、前記測定試料に光が照射されることにより前記光源から照射された光の進行方向に沿って生じる前方散乱光を受光し、受光強度に応じた前方散乱光情報を、前記散乱光情報のうちの第１情報として生成する第１受光部と、前記測定試料に光が照射されることにより前記光源から照射された光の進行方向に略垂直な方向に沿って生じる側方散乱光を受光し、受光強度に応じた側方散乱光情報を、前記散乱光情報のうちの第２情報として生成する第２受光部とを有する、請求項１１に記載の血液分析装置。
【請求項１３】
前記制御部は、前記前方散乱光情報と前記蛍光情報とに基づいて、前記測定試料中の白血球を、少なくとも好酸球と好酸球以外の集団とに分類するように構成されている、請求項１２に記載の血液分析装置。
【請求項１４】
前記光源は、３５０ｎｍ以上５００ｎｍ以下の波長を有する光を照射するように構成されている、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１５】
前記光源は、青紫色半導体レーザ素子を有する、請求項１４に記載の血液分析装置。
【請求項１６】
血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、前記血液試料および前記溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製するステップと、
前記第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成するステップと、
前記第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成するステップと、
前記第１測定試料から生成された前記蛍光情報と前記２種類の散乱光情報とに基づいて、前記第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、
前記第２測定試料から生成された前記透過光情報または前記散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、前記第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを備える、血液分析方法。
【請求項１】
血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、前記血液試料および前記溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製する試料調製部と、
前記第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成する第１光情報生成部と、
前記第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成する第２光情報生成部と、
前記第１光情報生成部により生成された前記蛍光情報と前記２種類の散乱光情報とに基づいて、前記第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに第１分類し、前記第２光情報生成部により生成された前記透過光情報または前記散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、前記第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得する制御部とを備える、血液分析装置。
【請求項２】
前記第２測定試料から、試料の電気情報を生成する電気情報生成部をさらに備え、
前記制御部は、前記電気情報生成部により生成された電気情報に基づいて、前記第２測定試料中の白血球を少なくともリンパ球とリンパ球以外の集団とに第２分類するとともに、前記第１分類および前記第２分類の分類結果に基づいて、測定試料中の白血球を、少なくとも、リンパ球と、好塩基球と、単球と、好中球と、好酸球との５つに分類するように構成されている、請求項１に記載の血液分析装置。
【請求項３】
前記試料調製部は、前記血液試料から第３測定試料をさらに調製し、
前記電気情報生成部は、前記第３測定試料から、試料の電気情報を生成し、
前記制御部は、前記電気情報生成部により前記第３測定試料から生成された電気情報に基づいて、前記第３測定試料中の赤血球数および血小板数を算出するように構成されている、請求項２に記載の血液分析装置。
【請求項４】
前記第２測定試料における前記溶血剤の希釈倍率は、前記第１測定試料における前記溶血剤の希釈倍率と異なる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項５】
前記第２測定試料における前記溶血剤の希釈倍率は、前記第１測定試料における前記溶血剤の希釈倍率よりも小さい、請求項４に記載の血液分析装置。
【請求項６】
前記試料調製部は、前記血液試料、所定の試薬容器に収容された前記溶血剤、および、所定量の希釈液を混合することにより前記第１測定試料を調製し、前記血液試料、前記所定の試薬容器に収容された前記溶血剤、および、前記所定量よりも少ない量の前記希釈液とを混合することにより前記第２測定試料を調製するように構成されている、請求項１〜５のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項７】
前記試料調製部は、前記希釈液と前記血液試料とを混合した状態で、前記溶血剤を混合することにより前記第２測定試料を調製するように構成されている、請求項６に記載の血液分析装置。
【請求項８】
前記試料調製部は、少なくとも前記血液試料、および、前記第１測定試料に用いられる前記溶血剤が収容された第１試薬容器とは異なる第２試薬容器に収容された前記溶血剤を混合することにより前記第２測定試料を調製するように構成されている、請求項１〜７のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項９】
前記溶血剤は、カチオン性界面活性剤を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１０】
前記第１光情報生成部は、前記蛍光情報として、少なくとも、前記測定試料中の好酸球の自家蛍光の強度に応じた蛍光情報を生成するように構成されている、請求項１〜９のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１１】
前記第１光情報生成部は、光源と、前記光源から前記測定試料に光が照射されることにより生じる蛍光を受光し、受光強度に応じた前記蛍光情報を生成する蛍光受光部と、前記光源から前記測定試料に光が照射されることにより生じる散乱光を受光し、受光強度に応じた前記散乱光情報を生成する散乱光受光部とを含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１２】
前記散乱光受光部は、前記測定試料に光が照射されることにより前記光源から照射された光の進行方向に沿って生じる前方散乱光を受光し、受光強度に応じた前方散乱光情報を、前記散乱光情報のうちの第１情報として生成する第１受光部と、前記測定試料に光が照射されることにより前記光源から照射された光の進行方向に略垂直な方向に沿って生じる側方散乱光を受光し、受光強度に応じた側方散乱光情報を、前記散乱光情報のうちの第２情報として生成する第２受光部とを有する、請求項１１に記載の血液分析装置。
【請求項１３】
前記制御部は、前記前方散乱光情報と前記蛍光情報とに基づいて、前記測定試料中の白血球を、少なくとも好酸球と好酸球以外の集団とに分類するように構成されている、請求項１２に記載の血液分析装置。
【請求項１４】
前記光源は、３５０ｎｍ以上５００ｎｍ以下の波長を有する光を照射するように構成されている、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の血液分析装置。
【請求項１５】
前記光源は、青紫色半導体レーザ素子を有する、請求項１４に記載の血液分析装置。
【請求項１６】
血液試料および溶血剤を含む第１測定試料と、前記血液試料および前記溶血剤と同じ溶血剤を含む第２測定試料とを調製するステップと、
前記第１測定試料から、蛍光情報と、少なくとも２種類の散乱光情報とを生成するステップと、
前記第２測定試料から、透過光情報または散乱光情報の少なくとも一方を生成するステップと、
前記第１測定試料から生成された前記蛍光情報と前記２種類の散乱光情報とに基づいて、前記第１測定試料中の白血球を、少なくとも、単球と、好中球と、好酸球と、他の集団との４つに分類するステップと、
前記第２測定試料から生成された前記透過光情報または前記散乱光情報の少なくとも一方に基づいて、前記第２測定試料中のヘモグロビン濃度を取得するステップとを備える、血液分析方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【公開番号】特開２０１２−１６８１９２（Ｐ２０１２−１６８１９２Ａ）
【公開日】平成２４年９月６日（２０１２．９．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−９７８６３（Ｐ２０１２−９７８６３）
【出願日】平成２４年４月２３日（２０１２．４．２３）
【分割の表示】特願２０１０−５１１０５２（Ｐ２０１０−５１１０５２）の分割
【原出願日】平成２１年４月２８日（２００９．４．２８）
【出願人】（３９００１４９６０）シスメックス株式会社 (810)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年９月６日（２０１２．９．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２４年４月２３日（２０１２．４．２３）
【分割の表示】特願２０１０−５１１０５２（Ｐ２０１０−５１１０５２）の分割
【原出願日】平成２１年４月２８日（２００９．４．２８）
【出願人】（３９００１４９６０）シスメックス株式会社 (810)
【Ｆターム（参考）】
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