α１，６−フコシルトランスフェラーゼの機能を抑制するＲＮＡを用いた抗体組成物の製造法
細胞を用いて抗体組成物を製造する方法において、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制するＲＮＡを導入した細胞を用いることを特徴とする、抗体組成物を製造する方法、該製造方法で用いられる該ＲＮＡ、該ＲＮＡに対応するＤＮＡおよび該ＲＮＡまたはＤＮＡを導入したまたは発現させた細胞、該細胞の作製方法および該酵素を抑制する方法を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を用いて抗体組成物を製造する方法において、以下の（ａ）または（ｂ）から選ばれるＲＮＡおよびその相補ＲＮＡで構成される二本鎖ＲＮＡを細胞内に導入させた細胞を用いる抗体組成物の製造方法；
（ａ）配列番号９〜３０で表される塩基配列からなるＲＮＡ；
（ｂ）配列番号９〜３０で表される塩基配列において、１または数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなり、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する活性を有するＲＮＡ。
【請求項２】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素が、α１，６−フコース転移酵素である、請求の範囲１に記載の方法。
【請求項３】
α１，６−フコース転移酵素が、以下の（ａ）〜（ｈ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求の範囲２に記載の方法。
（ａ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号２で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｃ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｄ）配列番号４で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｅ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｆ）配列番号２で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｇ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｈ）配列番号４で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項４】
α１，６−フコース転移酵素が、以下の（ａ）〜（ｌ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求の範囲２に記載の方法。
（ａ）配列番号５で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号６で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｃ）配列番号７で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｄ）配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｅ）配列番号５で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｆ）配列番号６で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｇ）配列番号７で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｈ）配列番号８で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｉ）配列番号５で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｊ）配列番号６で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｋ）配列番号７で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｌ）配列番号８で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質。
【請求項５】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制するＲＮＡを導入した細胞が、Ｎ−グリコシド結合糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位とフコースの１位がα結合した糖鎖構造を認識するレクチンに耐性を有する細胞である、請求の範囲１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれるレクチンのいずれか１つに耐性である、請求の範囲５に記載の方法。
（ａ）レンズマメレクチン；
（ｂ）エンドウマメレクチン；
（ｃ）ソラマメレクチン；
（ｄ）ヒイロチャワンタケレクチン。
【請求項７】
細胞が、酵母、動物細胞、昆虫細胞および植物細胞からなる群から選ばれる細胞である、請求の範囲１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
細胞が、下記の（ａ）〜（ｉ）からなる群から選ばれる細胞である、請求の範囲１〜７のいずれか１項に記載の方法。
（ａ）チャイニーズハムスター卵巣組織由来ＣＨＯ細胞；
（ｂ）ラットミエローマ細胞株ＹＢ２／３ＨＬ．Ｐ２．Ｇ１１．１６Ａｇ．２０細胞；
（ｃ）マウスミエローマ細胞株ＮＳ０細胞；
（ｄ）マウスミエローマ細胞株ＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞；
（ｅ）シリアンハムスター腎臓組織由来ＢＨＫ細胞；
（ｆ）抗体を産生するハイブリドーマ細胞；
（ｇ）ヒト白血病細胞株ナマルバ細胞；
（ｈ）胚性幹細胞；
（ｉ）受精卵細胞。
【請求項９】
細胞が、抗体分子をコードする遺伝子を導入した形質転換体である、請求の範囲１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
抗体分子が、以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれる分子である、請求の範囲９に記載の方法。
（ａ）ヒト抗体；
（ｂ）ヒト化抗体；
（ｃ）（ａ）または（ｂ）のＦｃ領域を含む抗体断片；
ｄ）（ａ）または（ｂ）のＦｃ領域を有する融合蛋白質。
【請求項１１】
抗体分子のクラスがＩｇＧである、請求の範囲９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
以下の（ａ）または（ｂ）から選ばれるＲＮＡおよびその相補ＲＮＡで構成される二本鎖ＲＮＡを細胞内に導入していない親株細胞が生産する抗体組成物の抗体依存性細胞傷害活性より、高い抗体依存性細胞傷害活性を有する抗体組成物を製造する、請求の範囲１〜１１のいずれか１項に記載の方法；
（ａ）配列番号９〜３０で表される塩基配列からなるＲＮＡ；
（ｂ）配列番号９〜３０で表される塩基配列において、１または数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなり、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する活性を有するＲＮＡ。
【請求項１３】
高い抗体依存性細胞傷害活性を有する抗体組成物が、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖の割合が、親株細胞が生産する抗体組成物よりも高いことを特徴とする、請求の範囲１２に記載の方法。
【請求項１４】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が、該糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合していない糖鎖である、請求の範囲１３に記載の方法。
【請求項１５】
高い抗体依存性細胞傷害活性を有する抗体組成物が、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖の割合が２０％以上である抗体組成物である、請求の範囲１２〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
抗体依存性細胞傷害活性が高い抗体組成物が、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖である抗体組成物である、請求の範囲１２〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
請求の範囲１〜１６のいずれか１項に記載の方法で用いられる、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制するＲＮＡを導入した細胞。
【請求項１８】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素がα１，６−フコース転移酵素である請求の範囲１７に記載の細胞。
【請求項１９】
配列番号９〜３０のいずれかで表される塩基配列からなる群のＲＮＡから選ばれるＲＮＡを導入または発現させた細胞。
【請求項２０】
以下の（ａ）または（ｂ）から選ばれるＲＮＡおよびその相補ＲＮＡで構成される二本鎖ＲＮＡ；
（ａ）配列番号９〜３０で表される塩基配列からなるＲＮＡ；
（ｂ）配列番号９〜３０で表される塩基配列において、１または数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなり、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する活性を有するＲＮＡ。
【請求項２１】
請求の範囲２０に記載のＲＮＡに対応するＤＮＡおよび該ＤＮＡの相補ＤＮＡ。
【請求項２２】
請求の範囲２０に記載のＲＮＡに対応するＤＮＡおよび該ＤＮＡの相補ＤＮＡをベクターに組み込んで得られる組換え体ＤＮＡ。
【請求項２３】
請求の範囲２０に記載の二本鎖ＲＮＡを発現させることを特徴とする、請求の範囲２２に記載の組換え体ＤＮＡ。
【請求項２４】
請求の範囲２２または２３に記載の組換え体ＤＮＡを細胞に導入して得られる形質転換体。
【請求項２５】
請求の範囲２０に記載の二本鎖ＲＮＡを細胞内に導入または発現させることを特徴とする、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位とフコースの１位がα結合した糖鎖構造を認識するレクチンに耐性を有する細胞を作製する方法。
【請求項２６】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位とフコースの１位がα結合した糖鎖構造を認識するレクチンに耐性が、少なくとも、以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれるレクチンの一つに耐性である、請求の範囲２５に記載の方法。
（ａ）レンズマメレクチン；
（ｂ）エンドウマメレクチン；
（ｃ）ソラマメレクチン；
（ｄ）ヒイロチャワンタケレクチン。
【請求項２７】
配列番号９〜３０のいずれかで表される塩基配列からなる群のＲＮＡから選ばれるＲＮＡを用いて、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する方法。
【請求項２８】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素がα１，６−フコース転移酵素である請求の範囲２７に記載の方法。
【請求項１】
細胞を用いて抗体組成物を製造する方法において、以下の（ａ）または（ｂ）から選ばれるＲＮＡおよびその相補ＲＮＡで構成される二本鎖ＲＮＡを細胞内に導入させた細胞を用いる抗体組成物の製造方法；
（ａ）配列番号９〜３０で表される塩基配列からなるＲＮＡ；
（ｂ）配列番号９〜３０で表される塩基配列において、１または数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなり、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する活性を有するＲＮＡ。
【請求項２】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素が、α１，６−フコース転移酵素である、請求の範囲１に記載の方法。
【請求項３】
α１，６−フコース転移酵素が、以下の（ａ）〜（ｈ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求の範囲２に記載の方法。
（ａ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号２で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｃ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｄ）配列番号４で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｅ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｆ）配列番号２で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｇ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｈ）配列番号４で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項４】
α１，６−フコース転移酵素が、以下の（ａ）〜（ｌ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求の範囲２に記載の方法。
（ａ）配列番号５で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号６で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｃ）配列番号７で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｄ）配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｅ）配列番号５で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｆ）配列番号６で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｇ）配列番号７で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｈ）配列番号８で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｉ）配列番号５で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｊ）配列番号６で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｋ）配列番号７で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質；
（ｌ）配列番号８で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコース転移酵素活性を有する蛋白質。
【請求項５】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制するＲＮＡを導入した細胞が、Ｎ−グリコシド結合糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位とフコースの１位がα結合した糖鎖構造を認識するレクチンに耐性を有する細胞である、請求の範囲１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれるレクチンのいずれか１つに耐性である、請求の範囲５に記載の方法。
（ａ）レンズマメレクチン；
（ｂ）エンドウマメレクチン；
（ｃ）ソラマメレクチン；
（ｄ）ヒイロチャワンタケレクチン。
【請求項７】
細胞が、酵母、動物細胞、昆虫細胞および植物細胞からなる群から選ばれる細胞である、請求の範囲１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
細胞が、下記の（ａ）〜（ｉ）からなる群から選ばれる細胞である、請求の範囲１〜７のいずれか１項に記載の方法。
（ａ）チャイニーズハムスター卵巣組織由来ＣＨＯ細胞；
（ｂ）ラットミエローマ細胞株ＹＢ２／３ＨＬ．Ｐ２．Ｇ１１．１６Ａｇ．２０細胞；
（ｃ）マウスミエローマ細胞株ＮＳ０細胞；
（ｄ）マウスミエローマ細胞株ＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞；
（ｅ）シリアンハムスター腎臓組織由来ＢＨＫ細胞；
（ｆ）抗体を産生するハイブリドーマ細胞；
（ｇ）ヒト白血病細胞株ナマルバ細胞；
（ｈ）胚性幹細胞；
（ｉ）受精卵細胞。
【請求項９】
細胞が、抗体分子をコードする遺伝子を導入した形質転換体である、請求の範囲１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
抗体分子が、以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれる分子である、請求の範囲９に記載の方法。
（ａ）ヒト抗体；
（ｂ）ヒト化抗体；
（ｃ）（ａ）または（ｂ）のＦｃ領域を含む抗体断片；
ｄ）（ａ）または（ｂ）のＦｃ領域を有する融合蛋白質。
【請求項１１】
抗体分子のクラスがＩｇＧである、請求の範囲９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
以下の（ａ）または（ｂ）から選ばれるＲＮＡおよびその相補ＲＮＡで構成される二本鎖ＲＮＡを細胞内に導入していない親株細胞が生産する抗体組成物の抗体依存性細胞傷害活性より、高い抗体依存性細胞傷害活性を有する抗体組成物を製造する、請求の範囲１〜１１のいずれか１項に記載の方法；
（ａ）配列番号９〜３０で表される塩基配列からなるＲＮＡ；
（ｂ）配列番号９〜３０で表される塩基配列において、１または数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなり、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する活性を有するＲＮＡ。
【請求項１３】
高い抗体依存性細胞傷害活性を有する抗体組成物が、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖の割合が、親株細胞が生産する抗体組成物よりも高いことを特徴とする、請求の範囲１２に記載の方法。
【請求項１４】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が、該糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合していない糖鎖である、請求の範囲１３に記載の方法。
【請求項１５】
高い抗体依存性細胞傷害活性を有する抗体組成物が、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖の割合が２０％以上である抗体組成物である、請求の範囲１２〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
抗体依存性細胞傷害活性が高い抗体組成物が、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖である抗体組成物である、請求の範囲１２〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
請求の範囲１〜１６のいずれか１項に記載の方法で用いられる、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制するＲＮＡを導入した細胞。
【請求項１８】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素がα１，６−フコース転移酵素である請求の範囲１７に記載の細胞。
【請求項１９】
配列番号９〜３０のいずれかで表される塩基配列からなる群のＲＮＡから選ばれるＲＮＡを導入または発現させた細胞。
【請求項２０】
以下の（ａ）または（ｂ）から選ばれるＲＮＡおよびその相補ＲＮＡで構成される二本鎖ＲＮＡ；
（ａ）配列番号９〜３０で表される塩基配列からなるＲＮＡ；
（ｂ）配列番号９〜３０で表される塩基配列において、１または数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなり、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する活性を有するＲＮＡ。
【請求項２１】
請求の範囲２０に記載のＲＮＡに対応するＤＮＡおよび該ＤＮＡの相補ＤＮＡ。
【請求項２２】
請求の範囲２０に記載のＲＮＡに対応するＤＮＡおよび該ＤＮＡの相補ＤＮＡをベクターに組み込んで得られる組換え体ＤＮＡ。
【請求項２３】
請求の範囲２０に記載の二本鎖ＲＮＡを発現させることを特徴とする、請求の範囲２２に記載の組換え体ＤＮＡ。
【請求項２４】
請求の範囲２２または２３に記載の組換え体ＤＮＡを細胞に導入して得られる形質転換体。
【請求項２５】
請求の範囲２０に記載の二本鎖ＲＮＡを細胞内に導入または発現させることを特徴とする、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位とフコースの１位がα結合した糖鎖構造を認識するレクチンに耐性を有する細胞を作製する方法。
【請求項２６】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位とフコースの１位がα結合した糖鎖構造を認識するレクチンに耐性が、少なくとも、以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれるレクチンの一つに耐性である、請求の範囲２５に記載の方法。
（ａ）レンズマメレクチン；
（ｂ）エンドウマメレクチン；
（ｃ）ソラマメレクチン；
（ｄ）ヒイロチャワンタケレクチン。
【請求項２７】
配列番号９〜３０のいずれかで表される塩基配列からなる群のＲＮＡから選ばれるＲＮＡを用いて、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素の機能を抑制する方法。
【請求項２８】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素がα１，６−フコース転移酵素である請求の範囲２７に記載の方法。
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３５７７８
【国際公開日】平成１７年４月２１日（２００５．４．２１）
【発行日】平成１８年１２月２１日（２００６．１２．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５１４６６８（Ｐ２００５−５１４６６８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１５３１６
【国際出願日】平成１６年１０月８日（２００４．１０．８）
【出願人】（０００００１０２９）協和醗酵工業株式会社 (276)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１７年４月２１日（２００５．４．２１）
【発行日】平成１８年１２月２１日（２００６．１２．２１）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１５３１６
【国際出願日】平成１６年１０月８日（２００４．１０．８）
【出願人】（０００００１０２９）協和醗酵工業株式会社 (276)
【Ｆターム（参考）】
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