きのこの人工栽培方法
【課題】従来の方法よりも安価な材料を使用して、多くの収量を得ることのできるきのこの菌床人工栽培方法及び子実体の製造方法を提供すること。
【解決手段】Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、及びＬｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）からなる群より選択されるリオフィラム ウルマリウム新菌株を培養基に接種し、当該新菌株の子実体を形成させることを特徴とするリオフィラム ウルマリウムの菌床人工栽培方法、ならびに当該新菌株の子実体を菌床人工栽培する工程を含むことを特徴とするリオフィラム ウルマリウムの子実体の製造方法。
【解決手段】Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、及びＬｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）からなる群より選択されるリオフィラム ウルマリウム新菌株を培養基に接種し、当該新菌株の子実体を形成させることを特徴とするリオフィラム ウルマリウムの菌床人工栽培方法、ならびに当該新菌株の子実体を菌床人工栽培する工程を含むことを特徴とするリオフィラム ウルマリウムの子実体の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、きのこの人工栽培方法に関し、更に詳しくは収量及び品質の優れたものを得ることができる、きのこの人工栽培用培養基及び該培養基を用いたきのこの人工栽培方法、並びに良好な子実体形成能を有するきのこ菌株及び該菌株を用いるきのこの人工栽培方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、シイタケ、エノキタケ、ヒラタケ、ナメコ、マイタケ、リオフィラム ウルマリウム、ハタケシメジ等の食用きのこは、人工栽培方法が発達してきている。人工栽培方法は大きく分類して原木人工栽培方法と菌床人工栽培方法があり、前者はコナラ、ブナ、クヌギ等の原木をホダ木として使用する栽培方法であり、後者はオガクズ、コーンコブ等を培地間隙の保持と保水のための培地支持体用基材とし、これに米糠、小麦フスマ、コーンブラン等の栄養源としての基材を混合して調製した培地をビン、袋、箱などの容器に充填した固形培養基を用いる栽培方法である。
菌床人工栽培方法において、これらの基材を使用した培地では、安価な材料を選択すると十分な収量が得られないことが多い。例えば、最も安価な基材として、オガクズと米糠のみを使用し、リオフィラム ウルマリウムを８５０ｍｌビンで人工栽培した場合の収量は７０ｇ前後であり、安価ではあるが、満足できるものではなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開第０１／７６６１４号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、きのこの人工栽培において従来の方法よりも安価な材料を使用して、多くの収量を得ることのできるきのこの培養基及び該培養基を使用した人工栽培方法を提供し、特に該培養基で良好な子実体形成能を有する菌株を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明を概説すれば、本発明は以下の各発明を包含する。
（１）１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有することを特徴とするきのこの人工栽培用培養基。
（２）上記（１）項に記載のきのこの人工栽培用培養基を使用することを特徴とするきのこの人工栽培方法。
（３）１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で人工栽培したときに、良好な子実体形成能を有することを特徴とするリオフィラム ウルマリウム菌株。
（４）Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、Ｌｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）、又はこれらの変異株から選択される菌株であることを特徴とするリオフィラム ウルマリウム新菌株。
（５）上記（３）又は（４）項に記載の菌株を用いることを特徴とするきのこの人工栽培方法。
（６）人工栽培方法が、セリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基を用いる方法であることを特徴とする（５）項に記載のきのこの人工栽培方法。
（７）上記（１）項に記載のきのこの人工栽培用培養基を使用してきのこを栽培する工程を包含することを特徴とするきのこの製造方法。
（８）きのこが（３）又は（４）項に記載されるリオフィラム ウルマリウム菌株である、（７）項に記載の製造方法。
本明細書において、基材とはきのこの人工栽培用培養基を構成する要素の中で水以外の構成要素のことをいい、例えば培地支持体や栄養源のことをいう。
【０００６】
本発明者らは、前記の目的を達成するため、種々の材料を基材として使用した結果、安価で多くの収量を得ることのできる基材源として、セリ科植物を見出した。更に各種条件で鋭意検討した結果、セリ科植物由来の植物を基材として単独で使用するより、２種類以上の基材から構成されるきのこの人工栽培用培養基において、１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材と、当該セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の１種類以上の基材とを使用することによってより多くの収量が得られることを見出した。また、当該培養基を用いたきのこの人工栽培では栽培日数が短く、機能性成分に富むきのこを得ることができる。
更に、本発明者らは交配育種を行い、得られた交配株の中からセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で人工栽培したときに、特に良好な子実体形成能を有するリオフィラム ウルマリウム新菌株を見出し、本発明を完成させた。
【発明の効果】
【０００７】
本発明により、きのこの人工栽培において、本発明のきのこの人工栽培用培養基を使用することによって、より多くの収量のきのこを得ることが可能になった。
また、セリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で良好な子実体形成能を有するリオフィラム ウルマリウム新菌株が提供され、高品質のリオフィラム ウルマリウムを得ることが可能になった。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明を具体的に説明する。
本発明のきのこの人工栽培用培養基は２種類以上の基材から構成され、１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材と、当該セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の１種類以上の基材とから構成される。本発明で使用されるセリ科植物とは被子植物類セリ目セリ科に属する植物であり、セリ、ミツバ、アシタバ、シシウド、ニンジン、セロリ等が例示される。これらの植物としては、その植物体全体を用いることができ、またその一部として、特に限定はないが、葉、茎、根又は根茎を使用することもできる。更に、本発明で用いることができるセリ科植物は新鮮物でも乾燥物でもよい。
本発明において、セリ科植物由来の処理物としては、細断、成形、加工、圧搾、搾汁等により得られる上記セリ科植物の処理物が例示され、これらの処理により分別された一部分を使用してもよい。また、これらの処理により得られるそれぞれの処理物を混合して使用しても良い。その処理物としては入手可能なあらゆる形状のものが使用できる。この中でも、成形時に生じる成形屑、加工時に生じる加工屑、搾汁時に生じる搾汁粕等は、通常は廃棄されるものであるため通常安価で入手でき、培養基のコストを低く抑えられることから、これら成形屑、加工屑、搾汁粕等を使用することが好ましい。
また、本発明に使用されるセリ科植物由来の処理物としては、特に限定はないが、栽培されるきのこの生育を妨げないものが特に好適に使用される。
【０００９】
本発明において、セリ科植物としては、特に好適にはアシタバが使用できる。
アシタバはセリ科の大型多年生草本であり、その根、茎、葉に多種多様のカルコン類やクマリン類等の機能性成分を含むことが知られている。アシタバのもつ生理作用としては、高血圧予防作用、抗潰瘍作用、胃酸分泌抑制作用、抗癌作用、癌予防効果等が知られており、更に上記のカルコン類は神経栄養因子産生増強作用を示すことが知られており、アルツハイマー症や痴呆症等の神経性疾患の治療又は予防への効果が期待されている（国際公開第０１／７６６１４号パンフレット）。本発明においては、このような機能性食品素材であるアシタバをきのこの人工栽培用培養基材として使用することにより、これらの機能性成分を含有するきのこを得ることができる。
【００１０】
本発明において、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材としては、上記のセリ科植物全体若しくはその一部から由来の処理物以外のものであれば特に限定はなく、通常のきのこの人工栽培に用いられる基材であれば好適に用いることができる。
この中でも吸水性の高い素材が特に好適であり、この例として、針葉樹オガクズ、広葉樹オガクズ、チップダスト、コーンコブ、綿実殻、バガス、アルファルファ、ビートパルプ、モミガラ、チモシー、オカラ、マメカワ、シリカゲル、多糖類ゲル、高吸水ポリマー、きのこ原木栽培後の廃ホダ木、きのこ菌床人工栽培後の廃菌床等を挙げることができる。また、吸水性の高い基材であれば上記以外の材料も好適である。
更に、本発明の培養基は、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材として、吸水性の良否にかかわらず、栄養源、ｐＨ調整剤、菌糸生長促進剤、増収剤等を添加してもよい。
これらはきのこの人工栽培に用いることができるものであれば特に限定はなく、栄養源の例としては米糠、小麦フスマ、コーンブラン、ホミニーフィード、バンサイ、オカラ、マメカワ等を挙げることができる。また、ｐＨ調整剤、菌糸成長促進剤、及び増収剤の一例として、それぞれ、炭酸カルシウム、クエン酸、及びメタケイ酸アルミン酸マグネシウムを挙げることができる。
本発明においては、これらのセリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材は１種のみを使用してもよいし、２種以上を混合して使用してもよい。また、高吸水性の基材とその他の基材を混合して使用してもよい。
【００１１】
本発明において、セリ科植物由来の処理物からなる基材と、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材との使用比率は、特に限定はないが、乾燥重量比でセリ科植物由来の処理物からなる基材１に対して、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材は望ましくは０．０５〜４０、更に望ましくは０．２〜２０がよい。
【００１２】
本発明を実施するためのきのこの人工栽培法としては、袋、ビン、箱等を容器として用いる人工栽培方法が挙げられ、栽培の形態としては温度、湿度等を人工的に制御した空調施設栽培（周年栽培）、屋外の林地、畑地等に設置又は埋設する自然栽培等を挙げることができるが、本発明はこれらの人工栽培方法や栽培の形態に何ら制約されるものではない。一例としてビンを容器として用いる空調施設栽培を例として説明すると、培地調製、ビン詰め、殺菌、接種、培養、発生の各工程からなる。
培地調製とは１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材と、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材を混合してかくはんし、水分調整して培養基を製造する工程であり、培養基の水分含量は５０〜８５％、好ましくは６０〜７５％がよい。
ビン詰めとは培養基をビンに詰める工程であり、容量が２００〜１２００ｍｌ、好ましくは５００〜１０００ｍｌの耐熱性広ロビンに培養基を入れ、中央に穴を空け、打栓する工程をいう。ビンに入れる培養基の量はビンの容量、形状によって異なるが、例えばポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕を使用した場合、乾燥重量で１００〜３００ｇ、好ましくは１５０〜２５０ｇがよい。
殺菌とは培養基中の微生物を死滅させる行程であれば良く、通常常圧殺菌では９８℃で４〜１２時間、高圧殺菌では１０１〜１２５℃で３０〜９０分間行われる。
接種とは殺菌後放冷した培養基に固体種菌又は液体種菌５〜５０ｍｌを植え付ける工程である。
培養とはきのこの菌糸を生育、まん延、更に必要に応じて熟成後子実体発生基を得る工程であり、通常接種済みの培養基を１８〜２８℃、湿度４０〜８０％において行う。この工程はきのこの種類又は菌株により適宜選択すればよいが、通常２０〜１２０日間行われる。
発生とは子実体発生基を子実体形成に適当な条件に置いて子実体を発生させる工程であり、通常子実体形成を促進するために、菌掻き、加水、加湿、光照射等を行う。これらは常法に従って行えばよい。
以上、人工栽培方法についてビン栽培を例として詳細に述べたが、本発明は上記方法にのみ制約を受けるものではない。
【００１３】
本発明におけるきのこの種類及び菌株については特に限定されるものではないが、きのこの種類としてはシイタケ、エノキタケ、ヒラタケ、ナメコ、マイタケ、リオフィラム ウルマリウム、ハタケシメジ等を挙げることができる。きのこの菌株としては市販の菌株でも、野生の子実体よりの組織分離株でも、選抜、交配、細胞融合、遺伝子組換え等の方法により育種した株でもよい。例えば、リオフィラム ウルマリウム菌株であるリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、後述する新菌株であるリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株を使用することができる。なお、リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９はＬｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｋ−０２５９と表示され、平成４年６月２日（寄託日）より独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターにＦＥＲＭ Ｐ−１２９８１として寄託されている。また、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株は、それぞれＬｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１７２、Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１７３、Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１７４、及びＬｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１８１と表示され、ブダペスト条約の下、日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６（郵便番号３０５−８５６６）独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに平成１４年（２００２年）４月２５日（原寄託日）にそれぞれ受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４、ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５、ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６、ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７として寄託されている。
【００１４】
一般にきのこにおいては同じ種に属する菌株であっても、菌株間で特性が大きく異なることが知られている。本発明者らはリオフィラム ウルマリウムにおいても公知菌株より、１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で良好な子実体形成能を有する菌株が存在するはずであるとの考えに立ち、鋭意育種検討を続けた。その結果、従来より用いられている人工栽培方法により良好な子実体形成能を有し、特に１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で人工栽培したときに、良好な子実体形成能を有するリオフィラム ウルマリウム新菌株を見出した。
【００１５】
以下、本発明におけるリオフィラム ウルマリウム新菌株について詳しく説明する。新菌株は交配育種により得た。交配育種は常法により以下のごとく行った。
本発明者らが保有するリオフィラム ウルマリウム菌株を針葉樹オガクズと米糠を混合した培養基を用いて子実体を発生させ、得られた子実体から胞子を回収し、発芽させて一核菌糸を計５０株単離し、総当たり交配により約１０００株の交配株を得た。
この約１０００株についてアシタバ青汁の搾汁粕を含有する培養基を用いて人工栽培試験を行い、良好な子実体形成能を有する株４株を選抜し、リオフィラム ウルマリウム Ｌu１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株と命名した。
【００１６】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４１ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は３７ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２５ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４２ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４７ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２３ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４２ｍｍ。菌糸は白色密で気菌糸を多量に生じる。マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は１９ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変、褐変半径は３２ｍｍ。２０日目では中程度の化育、コロニー径は３８ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地（グルコース２％、ポリペプトン０．２％、酵母エキス０．２、ＫＨ2ＰＯ4０．５％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．５％、寒天２％）に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（１０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地（ＰＧＹ寒天培地から寒天を除いたもの）６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００１７】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７３株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４５ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４３ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２３ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄・気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４３ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は５２ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２１ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４０ｍｍ。菌糸は白色、密で気菌糸を多量に生じる。マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は２２ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変、褐変半径は３０ｍｍ。２０日目では中程度の生育、コロニー径は３６ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（1０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００１８】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７４株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４３ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４１ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２５ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４５ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
1０日目で旺盛な生育、コロニー径は５０ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は１９ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４２ｍｍ。菌糸は白色、密で気菌糸を多量に生じて、マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は２０ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変・褐変半径は３７ｍｍ。２０日目では中程度の生育、コロニー径は３８ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（１０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００１９】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１８１株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４５ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４０ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２７ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４６ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４８ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２０ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
1０日目で旺盛な生育、コロニー径は４４ｍｍ。菌糸は白色、密で気菌糸を多量に生じる。マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は１７ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変、褐変半径は３２ｍｍ。２０日目では中程度の生育、コロニー径は３６ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（１０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００２０】
次に、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株と他のリオフィラム ウルマリウム菌株との異同判定として、両菌糸が持つ性因子が異なれば、その菌糸は互いに異なる菌糸であるという菌類分類学的事実に基づき、性因子の異同を寒天培地上における対峙培養によって調べた。
供試した菌株としてリオフィラム ウルマリウム ＩＦＯ９６３７株、ＩＦＯ３０５２５株、ＩＦＯ３０７７５株、リオフィラム ウルマリウム Ｍ−８１７１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４１５）、及びリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株（ＦＥＲＭＰ−１２９８１）を用いた。ここでリオフィラム ウルマリウム Ｍ−８１７１株、及びリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株はかつて本発明者らによって育種されたリオフィラム ウルマリウム菌株である。
これらの各菌株の二核菌糸を ＰＧＹ寒天培地で増殖させ、３ｍｍ×３ｍｍ×３ｍｍのブロックとして切り出し、それぞれをＰＧＹ寒天平板培地の中央部に、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株の２核菌糸ブロック（３ｍｍ×３ｍｍ×３ｍｍ）と対峙して約２cｍ間隔で植菌し、２５℃、１４日間培養後、両コロニー境界部に帯線が生じるか否かを判定した。帯線を生じた場合を＋、生じなかった場合を−として、この結果を表１に示す。
【００２１】
【表１】
【００２２】
表１に示すように、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−1８１株はそれぞれ他の菌株との対峙培養ですべて帯線を生じた。このことからリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株は新しい菌株であることは明白である。
また、上記に示した本発明の新菌株であるリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株は、菌床人工栽培において短い培養日数、例えば４０日〜７０日程度の培養日数でも良好な子実体形成能を有するという特徴をも有しており、特に好適にはセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で培養日数が短く、人工栽培に適した菌株である。
【００２３】
以上説明したように本発明の新菌株として、例えばリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株が挙げられるが、前記菌株と同様にセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で良好な子実体形成能を有する菌株はすべて本発明に属するものである。
【実施例】
【００２４】
以下に本発明を実施例により更に具体的に説明するが、本発明は、以下の実施例の範囲のみに限定されるものではない。
【００２５】
実施例１
アシタバ搾汁粕（アシタバ青汁の絞り粕）及びコーンコブ〔タカラ物産（株）製〕を乾燥重量でそれぞれ６５ｇずつ、よく混合して水分含有率６８％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にきのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、及びＩＦＯ３０５２５株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に５０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍlを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下でＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１０日間、ＩＦＯ９６３７株は１３日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１２日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が７５ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１０５ｇ、ＩＦＯ９６３７株が７６ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００２６】
比較例１
コーンコブを使用せず、アシタバ搾汁粕のみを1３０ｇ用いる点と子実体原基形成にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１１日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、子実体を得るまでに更にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１３日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間培養を続けた点を除いては実施例１と同様に行って子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が５５ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が４５ｇ、ＩＦＯ９６３７株が３４ｇであり、アシタバ搾汁粕単独より、アシタバ搾汁粕とコーンコブを用いた培養基の方が優れていた。また、栽培日数もアシタバ搾汁粕とコーンコブを用いた方が短かった。
【００２７】
実施例２
アシタバ搾汁粕、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕、及び米糠を乾燥重量で、それぞれ４６ｇ、４６ｇ、及び７４ｇをよく混合して水分含有率６８％となるように調製し、これを用いる以外は実施例１と同様にして子実体を得た。
得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が８７ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１４９ｇ、ＩＦＯ９６３７株が９７ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００２８】
比較例２
アシタバ搾汁粕を使用せず、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕９２ｇとコメヌカ７４ｇのみを用いる点と子実体原基形成にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１１日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、子実体を得るまでに更にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１３日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間培養を続けた点を除いては実施例２と同様に行って子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が７１ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が７２ｇ、ＩＦＯ９６３７株が７３ｇであり、アシタバ搾汁粕を用いた培養基の方が優れていた。
【００２９】
実施例３
アシタバ搾汁粕及びコーンコブ〔タカラ物産（株）製〕を乾燥重量でそれぞれ６５ｇずつ、並びにメタケイ酸アルミン酸マグネシウム〔商品名：ノイシリンＦＨ１、富士化学工業（株）製〕を新鮮重量で２．５ｇをよく混合して水分含有率６８％となるように調製し、きのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株のみを用いる以外は実施例１と同様にして子実体を得た。得られた子実体の収量は１２９ｇであり、高品質なものであった。
【００３０】
比較例３
アシタバ搾汁粕の代わりに針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕を用いる点を除いては実施例３と同様に行って子実体を得た。得られた子実体の収量は９５ｇであり、アシタバ搾汁粕を用いた培養基の方が優れていた。
【００３１】
実施例４
アシタバ搾汁粕及びコーンコブ〔タカラ物産（株）製〕を乾燥重量でそれぞれ６５ｇずつ、並びにメタケイ酸アルミン酸マグネシウム〔商品名：ノイシリンＦＨ１、富士化学工業（株）製〕を新鮮重量で２．５ｇをよく混合して水分含有率６８％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基に本発明のリオフィラム ウルマリウム新菌株としてリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８1株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に４０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍｌを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１３日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１４０ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１３８ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１３３ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１３２ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００３２】
比較例４
リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株を用いる点と、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後更に５０日培養し子実体発生基を得た点を除いては実施例４と同様にして子実体を得た。得られた子実体の収量は１２９ｇであり、品質は良好であった。アシタバ搾汁粕を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株より収量が優れ、短い培養日数で栽培が可能であった。
【００３３】
比較例５
リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株、ＩＦＯ９６３７株、及びＩＦＯ３０５２５株を用いる点と、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後更に４０日培養し子実体発生基を得た点を除いては実施例４と同様にして、Ｋ−０２５９株以外は子実体をえた。Ｋ−０２５９株は子実体を得られなかった。得られた子実体の収量はＩＦＯ３０５２５株が７８ｇ、ＩＦＯ９６３７株が７１ｇであり、品質は良好であった。アシタバ搾汁粕を用いた培養基で、同じ培養日数とした場合は、Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株、ＩＦＯ９６３７株、及びＩＦＯ３０５２５株より収量が優れていた。
【００３４】
実施例５
針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕５２ｇ、広葉樹オガクズ〔（有）トモエ物産製〕６９ｇ、及び米糠８６ｇを乾燥重量で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にリオフィラム ウルマリウム菌株としてリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に４０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍｌを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１４日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１１５ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１２６ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１１５ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１１５ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００３５】
比較例６
リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株を用いる点と、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後更に５０日培養し子実体発生基を得た点を除いては実施例５と同様にして子実体を得た。得られた子実体の収量は１０８ｇであり、品質は良好であった。針葉樹オガクズ、広葉樹オガクズ及び米糠を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株より収量が優れ、短い培養日数で栽培が可能であった。
【００３６】
実施例６
ニンジン搾汁粕（ニンジン根茎の絞り粕）５２ｇ、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕５２ｇ、及び米糠８４ｇを乾燥重量で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にきのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に５０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍlを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１３日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１５日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量は９２ｇであり、高品質なものであった。
【００３７】
比較例７
針葉樹オガクズとコメヌカを使用せず、ニンジン搾汁滓のみを1９２ｇ用いる点を除いては実施例６と同様の条件で栽培を行ったが、子実体は得られなかった。ニンジン搾汁粕単独より、ニンジン搾汁滓、針葉樹オガクズ、及び米糠を用いた培養基の方が優れていた。
【００３８】
実施例７
ニンジン搾汁粕（ニンジン根茎の絞り粕）３０ｇ、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕７０ｇ、及び米糠８１ｇを乾燥重量で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にきのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に４０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍlを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下でＬｕ１−１７２株は１２日間、Ｌｕ１−１７３株は１１日間、Ｌｕ１−１７４とＬｕ１−１８１株は１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＬｕ１−１７２株は１４日間、Ｌｕ１−１７３株は１３日間、Ｌｕ１−１７４株は１１日間、Ｌｕ１−１８１株は１２日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１８１ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１８９ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１７３ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１５９ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００３９】
比較例８
リオフィラム ウルマリウムＫ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株を使用する点と、菌掻き後に１５℃、湿度９０％以上の条件下でＫ−０２５９株とＩＦＯ９６３７株は１２日間、ＩＦＯ３０５２５株は１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＫ−０２５９株は１５日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、ＩＦＯ３０５２５株は１２日間培養を続けて子実体を得る点を除いては実施例７と同様に行って、子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が１０７ｇ、ＩＦＯ９６３７株が１００ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１５３ｇで、品質は良好であった。ニンジン搾汁粕を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株より収量が優れていた。
【００４０】
実施例８
ニンジン搾汁粕（ニンジン根茎の絞り粕）２７ｇ、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕２７ｇ、コーンコブ〔タカラ物産（株）製〕２７ｇ、米糠５４ｇ、マメカワ１８ｇ、フスマ１８ｇを乾燥重量で用いる点と、菌掻き後に１５℃、湿度９０％以上の条件下でＬｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、及びＬｕ１−１７４株は１２日間、Ｌｕ１−１８１株は１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＬｕ１−１７２株とＬｕ１−１７４株は１３日間、Ｌｕ１−１７３株は１４日間、Ｌｕ１−１８１株は１２日間培養を続けて子実体を得る点を除いては実施例７と同様に行って、子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１８２ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１９４ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１８３ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１７９ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００４１】
比較例９
リオフィラム ウルマリウムＫ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株を使用する点と、菌掻き後に１５℃、湿度９０％以上の条件下でＫ−０２５９株は１５日間、ＩＦＯ９６３７株は１２日間、ＩＦＯ３０５２５株は１１日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＫ−０２５９株は１５日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、ＩＦＯ３０５２５株は１２日間培養を続けて子実体を得る点を除いては実施例８と同様に行って、子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が９５ｇ、ＩＦＯ９６３７株が１３６ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１７３ｇで、品質は良好であった。ニンジン搾汁粕を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株より収量が優れていた。
【００４２】
実施例９
アシタバ搾汁粕、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕、コーンコブ〔タカラ物産（株）製〕、及び米糠を乾燥重量で表２の配合で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にリオフィラム ウルマリウム菌株としてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に５５日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍｌを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１４日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１４日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量は表２の通りであり、それぞれ高品質なものであった。
【００４３】
【表２】
【００４４】
比較例１０
アシタバ搾汁滓１３０ｇのみを使用した点以外は、実施例９と同様に行ない、子実体を得た。得られた子実体の収量は４８ｇであり、アシタバ搾汁滓とセリ科植物由来の処理物からなる基材以外の混合比率が、１：０．２〜２０の範囲でアシタバ搾汁滓単独よりも良好であった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、きのこの人工栽培方法に関し、更に詳しくは収量及び品質の優れたものを得ることができる、きのこの人工栽培用培養基及び該培養基を用いたきのこの人工栽培方法、並びに良好な子実体形成能を有するきのこ菌株及び該菌株を用いるきのこの人工栽培方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、シイタケ、エノキタケ、ヒラタケ、ナメコ、マイタケ、リオフィラム ウルマリウム、ハタケシメジ等の食用きのこは、人工栽培方法が発達してきている。人工栽培方法は大きく分類して原木人工栽培方法と菌床人工栽培方法があり、前者はコナラ、ブナ、クヌギ等の原木をホダ木として使用する栽培方法であり、後者はオガクズ、コーンコブ等を培地間隙の保持と保水のための培地支持体用基材とし、これに米糠、小麦フスマ、コーンブラン等の栄養源としての基材を混合して調製した培地をビン、袋、箱などの容器に充填した固形培養基を用いる栽培方法である。
菌床人工栽培方法において、これらの基材を使用した培地では、安価な材料を選択すると十分な収量が得られないことが多い。例えば、最も安価な基材として、オガクズと米糠のみを使用し、リオフィラム ウルマリウムを８５０ｍｌビンで人工栽培した場合の収量は７０ｇ前後であり、安価ではあるが、満足できるものではなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開第０１／７６６１４号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、きのこの人工栽培において従来の方法よりも安価な材料を使用して、多くの収量を得ることのできるきのこの培養基及び該培養基を使用した人工栽培方法を提供し、特に該培養基で良好な子実体形成能を有する菌株を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明を概説すれば、本発明は以下の各発明を包含する。
（１）１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有することを特徴とするきのこの人工栽培用培養基。
（２）上記（１）項に記載のきのこの人工栽培用培養基を使用することを特徴とするきのこの人工栽培方法。
（３）１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で人工栽培したときに、良好な子実体形成能を有することを特徴とするリオフィラム ウルマリウム菌株。
（４）Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、Ｌｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）、又はこれらの変異株から選択される菌株であることを特徴とするリオフィラム ウルマリウム新菌株。
（５）上記（３）又は（４）項に記載の菌株を用いることを特徴とするきのこの人工栽培方法。
（６）人工栽培方法が、セリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基を用いる方法であることを特徴とする（５）項に記載のきのこの人工栽培方法。
（７）上記（１）項に記載のきのこの人工栽培用培養基を使用してきのこを栽培する工程を包含することを特徴とするきのこの製造方法。
（８）きのこが（３）又は（４）項に記載されるリオフィラム ウルマリウム菌株である、（７）項に記載の製造方法。
本明細書において、基材とはきのこの人工栽培用培養基を構成する要素の中で水以外の構成要素のことをいい、例えば培地支持体や栄養源のことをいう。
【０００６】
本発明者らは、前記の目的を達成するため、種々の材料を基材として使用した結果、安価で多くの収量を得ることのできる基材源として、セリ科植物を見出した。更に各種条件で鋭意検討した結果、セリ科植物由来の植物を基材として単独で使用するより、２種類以上の基材から構成されるきのこの人工栽培用培養基において、１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材と、当該セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の１種類以上の基材とを使用することによってより多くの収量が得られることを見出した。また、当該培養基を用いたきのこの人工栽培では栽培日数が短く、機能性成分に富むきのこを得ることができる。
更に、本発明者らは交配育種を行い、得られた交配株の中からセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で人工栽培したときに、特に良好な子実体形成能を有するリオフィラム ウルマリウム新菌株を見出し、本発明を完成させた。
【発明の効果】
【０００７】
本発明により、きのこの人工栽培において、本発明のきのこの人工栽培用培養基を使用することによって、より多くの収量のきのこを得ることが可能になった。
また、セリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で良好な子実体形成能を有するリオフィラム ウルマリウム新菌株が提供され、高品質のリオフィラム ウルマリウムを得ることが可能になった。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明を具体的に説明する。
本発明のきのこの人工栽培用培養基は２種類以上の基材から構成され、１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材と、当該セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の１種類以上の基材とから構成される。本発明で使用されるセリ科植物とは被子植物類セリ目セリ科に属する植物であり、セリ、ミツバ、アシタバ、シシウド、ニンジン、セロリ等が例示される。これらの植物としては、その植物体全体を用いることができ、またその一部として、特に限定はないが、葉、茎、根又は根茎を使用することもできる。更に、本発明で用いることができるセリ科植物は新鮮物でも乾燥物でもよい。
本発明において、セリ科植物由来の処理物としては、細断、成形、加工、圧搾、搾汁等により得られる上記セリ科植物の処理物が例示され、これらの処理により分別された一部分を使用してもよい。また、これらの処理により得られるそれぞれの処理物を混合して使用しても良い。その処理物としては入手可能なあらゆる形状のものが使用できる。この中でも、成形時に生じる成形屑、加工時に生じる加工屑、搾汁時に生じる搾汁粕等は、通常は廃棄されるものであるため通常安価で入手でき、培養基のコストを低く抑えられることから、これら成形屑、加工屑、搾汁粕等を使用することが好ましい。
また、本発明に使用されるセリ科植物由来の処理物としては、特に限定はないが、栽培されるきのこの生育を妨げないものが特に好適に使用される。
【０００９】
本発明において、セリ科植物としては、特に好適にはアシタバが使用できる。
アシタバはセリ科の大型多年生草本であり、その根、茎、葉に多種多様のカルコン類やクマリン類等の機能性成分を含むことが知られている。アシタバのもつ生理作用としては、高血圧予防作用、抗潰瘍作用、胃酸分泌抑制作用、抗癌作用、癌予防効果等が知られており、更に上記のカルコン類は神経栄養因子産生増強作用を示すことが知られており、アルツハイマー症や痴呆症等の神経性疾患の治療又は予防への効果が期待されている（国際公開第０１／７６６１４号パンフレット）。本発明においては、このような機能性食品素材であるアシタバをきのこの人工栽培用培養基材として使用することにより、これらの機能性成分を含有するきのこを得ることができる。
【００１０】
本発明において、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材としては、上記のセリ科植物全体若しくはその一部から由来の処理物以外のものであれば特に限定はなく、通常のきのこの人工栽培に用いられる基材であれば好適に用いることができる。
この中でも吸水性の高い素材が特に好適であり、この例として、針葉樹オガクズ、広葉樹オガクズ、チップダスト、コーンコブ、綿実殻、バガス、アルファルファ、ビートパルプ、モミガラ、チモシー、オカラ、マメカワ、シリカゲル、多糖類ゲル、高吸水ポリマー、きのこ原木栽培後の廃ホダ木、きのこ菌床人工栽培後の廃菌床等を挙げることができる。また、吸水性の高い基材であれば上記以外の材料も好適である。
更に、本発明の培養基は、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材として、吸水性の良否にかかわらず、栄養源、ｐＨ調整剤、菌糸生長促進剤、増収剤等を添加してもよい。
これらはきのこの人工栽培に用いることができるものであれば特に限定はなく、栄養源の例としては米糠、小麦フスマ、コーンブラン、ホミニーフィード、バンサイ、オカラ、マメカワ等を挙げることができる。また、ｐＨ調整剤、菌糸成長促進剤、及び増収剤の一例として、それぞれ、炭酸カルシウム、クエン酸、及びメタケイ酸アルミン酸マグネシウムを挙げることができる。
本発明においては、これらのセリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材は１種のみを使用してもよいし、２種以上を混合して使用してもよい。また、高吸水性の基材とその他の基材を混合して使用してもよい。
【００１１】
本発明において、セリ科植物由来の処理物からなる基材と、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材との使用比率は、特に限定はないが、乾燥重量比でセリ科植物由来の処理物からなる基材１に対して、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材は望ましくは０．０５〜４０、更に望ましくは０．２〜２０がよい。
【００１２】
本発明を実施するためのきのこの人工栽培法としては、袋、ビン、箱等を容器として用いる人工栽培方法が挙げられ、栽培の形態としては温度、湿度等を人工的に制御した空調施設栽培（周年栽培）、屋外の林地、畑地等に設置又は埋設する自然栽培等を挙げることができるが、本発明はこれらの人工栽培方法や栽培の形態に何ら制約されるものではない。一例としてビンを容器として用いる空調施設栽培を例として説明すると、培地調製、ビン詰め、殺菌、接種、培養、発生の各工程からなる。
培地調製とは１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材と、セリ科植物由来の処理物からなる基材以外の基材を混合してかくはんし、水分調整して培養基を製造する工程であり、培養基の水分含量は５０〜８５％、好ましくは６０〜７５％がよい。
ビン詰めとは培養基をビンに詰める工程であり、容量が２００〜１２００ｍｌ、好ましくは５００〜１０００ｍｌの耐熱性広ロビンに培養基を入れ、中央に穴を空け、打栓する工程をいう。ビンに入れる培養基の量はビンの容量、形状によって異なるが、例えばポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕を使用した場合、乾燥重量で１００〜３００ｇ、好ましくは１５０〜２５０ｇがよい。
殺菌とは培養基中の微生物を死滅させる行程であれば良く、通常常圧殺菌では９８℃で４〜１２時間、高圧殺菌では１０１〜１２５℃で３０〜９０分間行われる。
接種とは殺菌後放冷した培養基に固体種菌又は液体種菌５〜５０ｍｌを植え付ける工程である。
培養とはきのこの菌糸を生育、まん延、更に必要に応じて熟成後子実体発生基を得る工程であり、通常接種済みの培養基を１８〜２８℃、湿度４０〜８０％において行う。この工程はきのこの種類又は菌株により適宜選択すればよいが、通常２０〜１２０日間行われる。
発生とは子実体発生基を子実体形成に適当な条件に置いて子実体を発生させる工程であり、通常子実体形成を促進するために、菌掻き、加水、加湿、光照射等を行う。これらは常法に従って行えばよい。
以上、人工栽培方法についてビン栽培を例として詳細に述べたが、本発明は上記方法にのみ制約を受けるものではない。
【００１３】
本発明におけるきのこの種類及び菌株については特に限定されるものではないが、きのこの種類としてはシイタケ、エノキタケ、ヒラタケ、ナメコ、マイタケ、リオフィラム ウルマリウム、ハタケシメジ等を挙げることができる。きのこの菌株としては市販の菌株でも、野生の子実体よりの組織分離株でも、選抜、交配、細胞融合、遺伝子組換え等の方法により育種した株でもよい。例えば、リオフィラム ウルマリウム菌株であるリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、後述する新菌株であるリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株を使用することができる。なお、リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９はＬｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｋ−０２５９と表示され、平成４年６月２日（寄託日）より独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターにＦＥＲＭ Ｐ−１２９８１として寄託されている。また、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株は、それぞれＬｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１７２、Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１７３、Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１７４、及びＬｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｕｌｍａｒｉｕｍ Ｌｕ１−１８１と表示され、ブダペスト条約の下、日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６（郵便番号３０５−８５６６）独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに平成１４年（２００２年）４月２５日（原寄託日）にそれぞれ受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４、ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５、ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６、ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７として寄託されている。
【００１４】
一般にきのこにおいては同じ種に属する菌株であっても、菌株間で特性が大きく異なることが知られている。本発明者らはリオフィラム ウルマリウムにおいても公知菌株より、１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で良好な子実体形成能を有する菌株が存在するはずであるとの考えに立ち、鋭意育種検討を続けた。その結果、従来より用いられている人工栽培方法により良好な子実体形成能を有し、特に１種類以上のセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で人工栽培したときに、良好な子実体形成能を有するリオフィラム ウルマリウム新菌株を見出した。
【００１５】
以下、本発明におけるリオフィラム ウルマリウム新菌株について詳しく説明する。新菌株は交配育種により得た。交配育種は常法により以下のごとく行った。
本発明者らが保有するリオフィラム ウルマリウム菌株を針葉樹オガクズと米糠を混合した培養基を用いて子実体を発生させ、得られた子実体から胞子を回収し、発芽させて一核菌糸を計５０株単離し、総当たり交配により約１０００株の交配株を得た。
この約１０００株についてアシタバ青汁の搾汁粕を含有する培養基を用いて人工栽培試験を行い、良好な子実体形成能を有する株４株を選抜し、リオフィラム ウルマリウム Ｌu１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株と命名した。
【００１６】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４１ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は３７ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２５ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４２ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４７ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２３ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４２ｍｍ。菌糸は白色密で気菌糸を多量に生じる。マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は１９ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変、褐変半径は３２ｍｍ。２０日目では中程度の化育、コロニー径は３８ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地（グルコース２％、ポリペプトン０．２％、酵母エキス０．２、ＫＨ2ＰＯ4０．５％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．５％、寒天２％）に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（１０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地（ＰＧＹ寒天培地から寒天を除いたもの）６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００１７】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７３株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４５ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４３ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２３ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄・気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４３ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は５２ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２１ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４０ｍｍ。菌糸は白色、密で気菌糸を多量に生じる。マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は２２ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変、褐変半径は３０ｍｍ。２０日目では中程度の生育、コロニー径は３６ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（1０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００１８】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７４株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４３ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４１ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２５ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４５ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
1０日目で旺盛な生育、コロニー径は５０ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は１９ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４２ｍｍ。菌糸は白色、密で気菌糸を多量に生じて、マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は２０ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変・褐変半径は３７ｍｍ。２０日目では中程度の生育、コロニー径は３８ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（１０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００１９】
次にリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１８１株の諸性質を示す。
（１）麦芽エキス寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４５ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体に密な菌糸を生じる。菌糸は白色。
（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２５℃）での生育状態
７日目で旺盛な生育で、コロニー径は４０ｍｍ。白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。２０日目には表面全体を気菌糸が覆い、コロニー中央部付近がやや黄色、他は白色となる。
（３）ツアペック・ドックス寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２７ｍｍ。菌糸は樹状に伸長し、極めて希薄、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育。菌糸は樹状で白色、希薄である。
（４）サブロー寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４６ｍｍ。白色で綿状の密な菌糸、気菌糸やや多い。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育し、気菌糸極めて多く、菌糸は綿状で白色である。
（５）オートミール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で旺盛な生育、コロニー径は４８ｍｍ。菌糸はよく分枝して伸び、気菌糸は少ない。２０日目でシャーレ全体に菌糸が生育、綿状の気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（６）合成ムコール寒天培地（２５℃）での生育状態
１０日目で小程度の生育、コロニー径は２０ｍｍ。菌糸は白色で直線状に伸び、放射繊維状のコロニーを形成する。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色。
（７）ＹｐＳｓ寒天培地（２５℃）での生育状態
1０日目で旺盛な生育、コロニー径は４４ｍｍ。菌糸は白色、密で気菌糸を多量に生じる。マット状に生育。２０日目で菌糸はシャーレ全体に生育し、気菌糸を多量に生じる。菌糸は白色であるが、培地は黄色に変化する。
（８）フェノールオキシダーゼ検定用培地（２５℃）での生育状態
０．５％没食子酸添加バレイショ・ブドウ糖寒天培地を使用。１０日目小程度の生育、コロニー径は１７ｍｍ。菌糸は白色で短くマット状、気菌糸は少ない。培地は褐変、褐変半径は３２ｍｍ。２０日目では中程度の生育、コロニー径は３６ｍｍ、培地全体が褐変。種菌の新旧により著しく生育速度に差（約２倍）が生じる。
（９）最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１２日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃、３５℃ではほとんど生育しなかった。
（１０）最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地６０ｍｌずつを１００ｍｌ容の三角フラスコに分注して殺菌し、酸又はアルカリで各ｐＨに調整後に直径６ｍｍの円盤状種菌を接種し、２５℃で１５日間静置培養後、菌体の乾燥重量を測定したところ、最適生育ｐＨは７〜８であった。また、本菌株の生育可能なｐＨ範囲は、ｐＨ３．５〜１０であった。
【００２０】
次に、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株と他のリオフィラム ウルマリウム菌株との異同判定として、両菌糸が持つ性因子が異なれば、その菌糸は互いに異なる菌糸であるという菌類分類学的事実に基づき、性因子の異同を寒天培地上における対峙培養によって調べた。
供試した菌株としてリオフィラム ウルマリウム ＩＦＯ９６３７株、ＩＦＯ３０５２５株、ＩＦＯ３０７７５株、リオフィラム ウルマリウム Ｍ−８１７１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４１５）、及びリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株（ＦＥＲＭＰ−１２９８１）を用いた。ここでリオフィラム ウルマリウム Ｍ−８１７１株、及びリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株はかつて本発明者らによって育種されたリオフィラム ウルマリウム菌株である。
これらの各菌株の二核菌糸を ＰＧＹ寒天培地で増殖させ、３ｍｍ×３ｍｍ×３ｍｍのブロックとして切り出し、それぞれをＰＧＹ寒天平板培地の中央部に、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株の２核菌糸ブロック（３ｍｍ×３ｍｍ×３ｍｍ）と対峙して約２cｍ間隔で植菌し、２５℃、１４日間培養後、両コロニー境界部に帯線が生じるか否かを判定した。帯線を生じた場合を＋、生じなかった場合を−として、この結果を表１に示す。
【００２１】
【表１】
【００２２】
表１に示すように、リオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−1８１株はそれぞれ他の菌株との対峙培養ですべて帯線を生じた。このことからリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株は新しい菌株であることは明白である。
また、上記に示した本発明の新菌株であるリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株は、菌床人工栽培において短い培養日数、例えば４０日〜７０日程度の培養日数でも良好な子実体形成能を有するという特徴をも有しており、特に好適にはセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で培養日数が短く、人工栽培に適した菌株である。
【００２３】
以上説明したように本発明の新菌株として、例えばリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、Ｌｕ１−１７４株、及びＬｕ１−１８１株が挙げられるが、前記菌株と同様にセリ科植物由来の処理物からなる基材を含有する培養基で良好な子実体形成能を有する菌株はすべて本発明に属するものである。
【実施例】
【００２４】
以下に本発明を実施例により更に具体的に説明するが、本発明は、以下の実施例の範囲のみに限定されるものではない。
【００２５】
実施例１
アシタバ搾汁粕（アシタバ青汁の絞り粕）及びコーンコブ〔タカラ物産（株）製〕を乾燥重量でそれぞれ６５ｇずつ、よく混合して水分含有率６８％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にきのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、及びＩＦＯ３０５２５株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に５０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍlを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下でＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１０日間、ＩＦＯ９６３７株は１３日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１２日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が７５ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１０５ｇ、ＩＦＯ９６３７株が７６ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００２６】
比較例１
コーンコブを使用せず、アシタバ搾汁粕のみを1３０ｇ用いる点と子実体原基形成にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１１日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、子実体を得るまでに更にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１３日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間培養を続けた点を除いては実施例１と同様に行って子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が５５ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が４５ｇ、ＩＦＯ９６３７株が３４ｇであり、アシタバ搾汁粕単独より、アシタバ搾汁粕とコーンコブを用いた培養基の方が優れていた。また、栽培日数もアシタバ搾汁粕とコーンコブを用いた方が短かった。
【００２７】
実施例２
アシタバ搾汁粕、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕、及び米糠を乾燥重量で、それぞれ４６ｇ、４６ｇ、及び７４ｇをよく混合して水分含有率６８％となるように調製し、これを用いる以外は実施例１と同様にして子実体を得た。
得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が８７ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１４９ｇ、ＩＦＯ９６３７株が９７ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００２８】
比較例２
アシタバ搾汁粕を使用せず、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕９２ｇとコメヌカ７４ｇのみを用いる点と子実体原基形成にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１１日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、子実体を得るまでに更にＫ−０２５９株とＩＦＯ３０５２５株は１３日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間培養を続けた点を除いては実施例２と同様に行って子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が７１ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が７２ｇ、ＩＦＯ９６３７株が７３ｇであり、アシタバ搾汁粕を用いた培養基の方が優れていた。
【００２９】
実施例３
アシタバ搾汁粕及びコーンコブ〔タカラ物産（株）製〕を乾燥重量でそれぞれ６５ｇずつ、並びにメタケイ酸アルミン酸マグネシウム〔商品名：ノイシリンＦＨ１、富士化学工業（株）製〕を新鮮重量で２．５ｇをよく混合して水分含有率６８％となるように調製し、きのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株のみを用いる以外は実施例１と同様にして子実体を得た。得られた子実体の収量は１２９ｇであり、高品質なものであった。
【００３０】
比較例３
アシタバ搾汁粕の代わりに針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕を用いる点を除いては実施例３と同様に行って子実体を得た。得られた子実体の収量は９５ｇであり、アシタバ搾汁粕を用いた培養基の方が優れていた。
【００３１】
実施例４
アシタバ搾汁粕及びコーンコブ〔タカラ物産（株）製〕を乾燥重量でそれぞれ６５ｇずつ、並びにメタケイ酸アルミン酸マグネシウム〔商品名：ノイシリンＦＨ１、富士化学工業（株）製〕を新鮮重量で２．５ｇをよく混合して水分含有率６８％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基に本発明のリオフィラム ウルマリウム新菌株としてリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８1株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に４０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍｌを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１３日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１４０ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１３８ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１３３ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１３２ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００３２】
比較例４
リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株を用いる点と、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後更に５０日培養し子実体発生基を得た点を除いては実施例４と同様にして子実体を得た。得られた子実体の収量は１２９ｇであり、品質は良好であった。アシタバ搾汁粕を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株より収量が優れ、短い培養日数で栽培が可能であった。
【００３３】
比較例５
リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株、ＩＦＯ９６３７株、及びＩＦＯ３０５２５株を用いる点と、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後更に４０日培養し子実体発生基を得た点を除いては実施例４と同様にして、Ｋ−０２５９株以外は子実体をえた。Ｋ−０２５９株は子実体を得られなかった。得られた子実体の収量はＩＦＯ３０５２５株が７８ｇ、ＩＦＯ９６３７株が７１ｇであり、品質は良好であった。アシタバ搾汁粕を用いた培養基で、同じ培養日数とした場合は、Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株、ＩＦＯ９６３７株、及びＩＦＯ３０５２５株より収量が優れていた。
【００３４】
実施例５
針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕５２ｇ、広葉樹オガクズ〔（有）トモエ物産製〕６９ｇ、及び米糠８６ｇを乾燥重量で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にリオフィラム ウルマリウム菌株としてリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に４０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍｌを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１４日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１１５ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１２６ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１１５ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１１５ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００３５】
比較例６
リオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株を用いる点と、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後更に５０日培養し子実体発生基を得た点を除いては実施例５と同様にして子実体を得た。得られた子実体の収量は１０８ｇであり、品質は良好であった。針葉樹オガクズ、広葉樹オガクズ及び米糠を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株より収量が優れ、短い培養日数で栽培が可能であった。
【００３６】
実施例６
ニンジン搾汁粕（ニンジン根茎の絞り粕）５２ｇ、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕５２ｇ、及び米糠８４ｇを乾燥重量で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にきのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に５０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍlを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１３日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１５日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量は９２ｇであり、高品質なものであった。
【００３７】
比較例７
針葉樹オガクズとコメヌカを使用せず、ニンジン搾汁滓のみを1９２ｇ用いる点を除いては実施例６と同様の条件で栽培を行ったが、子実体は得られなかった。ニンジン搾汁粕単独より、ニンジン搾汁滓、針葉樹オガクズ、及び米糠を用いた培養基の方が優れていた。
【００３８】
実施例７
ニンジン搾汁粕（ニンジン根茎の絞り粕）３０ｇ、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕７０ｇ、及び米糠８１ｇを乾燥重量で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にきのことしてリオフィラム ウルマリウム Ｌｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に４０日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍlを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下でＬｕ１−１７２株は１２日間、Ｌｕ１−１７３株は１１日間、Ｌｕ１−１７４とＬｕ１−１８１株は１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＬｕ１−１７２株は１４日間、Ｌｕ１−１７３株は１３日間、Ｌｕ１−１７４株は１１日間、Ｌｕ１−１８１株は１２日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１８１ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１８９ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１７３ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１５９ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００３９】
比較例８
リオフィラム ウルマリウムＫ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株を使用する点と、菌掻き後に１５℃、湿度９０％以上の条件下でＫ−０２５９株とＩＦＯ９６３７株は１２日間、ＩＦＯ３０５２５株は１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＫ−０２５９株は１５日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、ＩＦＯ３０５２５株は１２日間培養を続けて子実体を得る点を除いては実施例７と同様に行って、子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が１０７ｇ、ＩＦＯ９６３７株が１００ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１５３ｇで、品質は良好であった。ニンジン搾汁粕を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株より収量が優れていた。
【００４０】
実施例８
ニンジン搾汁粕（ニンジン根茎の絞り粕）２７ｇ、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕２７ｇ、コーンコブ〔タカラ物産（株）製〕２７ｇ、米糠５４ｇ、マメカワ１８ｇ、フスマ１８ｇを乾燥重量で用いる点と、菌掻き後に１５℃、湿度９０％以上の条件下でＬｕ１−１７２株、Ｌｕ１−１７３株、及びＬｕ１−１７４株は１２日間、Ｌｕ１−１８１株は１０日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＬｕ１−１７２株とＬｕ１−１７４株は１３日間、Ｌｕ１−１７３株は１４日間、Ｌｕ１−１８１株は１２日間培養を続けて子実体を得る点を除いては実施例７と同様に行って、子実体を得た。得られた子実体の収量はＬｕ１−１７２株が１８２ｇ、Ｌｕ１−１７３株が１９４ｇ、Ｌｕ１−１７４株が１８３ｇ、Ｌｕ１−１８１株が１７９ｇであり、それぞれ高品質なものであった。
【００４１】
比較例９
リオフィラム ウルマリウムＫ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株を使用する点と、菌掻き後に１５℃、湿度９０％以上の条件下でＫ−０２５９株は１５日間、ＩＦＯ９６３７株は１２日間、ＩＦＯ３０５２５株は１１日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して、更にＫ−０２５９株は１５日間、ＩＦＯ９６３７株は１４日間、ＩＦＯ３０５２５株は１２日間培養を続けて子実体を得る点を除いては実施例８と同様に行って、子実体を得た。得られた子実体の収量はＫ−０２５９株が９５ｇ、ＩＦＯ９６３７株が１３６ｇ、ＩＦＯ３０５２５株が１７３ｇで、品質は良好であった。ニンジン搾汁粕を用いた培養基ではＬｕ１−１７２、Ｌｕ１−１７３、Ｌｕ１−１７４、及びＬｕ１−１８１株の方がリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９、ＩＦＯ９６３７、ＩＦＯ３０５２５株より収量が優れていた。
【００４２】
実施例９
アシタバ搾汁粕、針葉樹オガクズ〔（有）唐澤商運製〕、コーンコブ〔タカラ物産（株）製〕、及び米糠を乾燥重量で表２の配合で計量し、よく混合して水分含有率６５％となるように調製し、これをポリプロピレン製８５０ｍｌビン〔商品名：ブロービンＳ−８５０、信越農材（株）製〕に詰めてビン口中央より下方に向かい直径１ｃｍの穴をあけた後、キャップで打栓した。これを１２０℃、６０分間高圧殺菌して培養基を調製した。該培養基にリオフィラム ウルマリウム菌株としてリオフィラム ウルマリウム Ｋ−０２５９株の固体種菌を接種し、２５℃の条件下で３０日培養して培養菌糸を得た後、更に５５日培養して子実体発生基を得た。該子実体発生基の上部菌糸層１ｃｍを中央部を残して除去し（菌掻き）、水道水２０ｍｌを加えて充分に吸水させた後、余剰の水を除いて１５℃、湿度９０％以上の条件下で１４日間培養して子実体原基を形成させ、光を照射して更に１４日間培養を続けて子実体を得た。得られた子実体の収量は表２の通りであり、それぞれ高品質なものであった。
【００４３】
【表２】
【００４４】
比較例１０
アシタバ搾汁滓１３０ｇのみを使用した点以外は、実施例９と同様に行ない、子実体を得た。得られた子実体の収量は４８ｇであり、アシタバ搾汁滓とセリ科植物由来の処理物からなる基材以外の混合比率が、１：０．２〜２０の範囲でアシタバ搾汁滓単独よりも良好であった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、及びＬｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）からなる群より選択されるリオフィラム ウルマリウム新菌株を培養基に接種し、当該新菌株の子実体を形成させることを特徴とする、リオフィラム ウルマリウムの菌床人工栽培方法。
【請求項２】
Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、及びＬｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）からなる群より選択されるリオフィラム ウルマリウム新菌株を培養基に接種し、当該新菌株の子実体を菌床人工栽培する工程を含むことを特徴とする、リオフィラム ウルマリウムの子実体の製造方法。
【請求項１】
Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、及びＬｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）からなる群より選択されるリオフィラム ウルマリウム新菌株を培養基に接種し、当該新菌株の子実体を形成させることを特徴とする、リオフィラム ウルマリウムの菌床人工栽培方法。
【請求項２】
Ｌｕ１−１７２（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５４）、Ｌｕ１−１７３（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５５）、Ｌｕ１−１７４（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５６）、及びＬｕ１−１８１（ＦＥＲＭ ＢＰ−８３５７）からなる群より選択されるリオフィラム ウルマリウム新菌株を培養基に接種し、当該新菌株の子実体を菌床人工栽培する工程を含むことを特徴とする、リオフィラム ウルマリウムの子実体の製造方法。
【公開番号】特開２０１１−１５２１５０（Ｐ２０１１−１５２１５０Ａ）
【公開日】平成２３年８月１１日（２０１１．８．１１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１０９６１９（Ｐ２０１１−１０９６１９）
【出願日】平成２３年５月１６日（２０１１．５．１６）
【分割の表示】特願２００７−２６０３２３（Ｐ２００７−２６０３２３）の分割
【原出願日】平成１５年５月６日（２００３．５．６）
【出願人】（３０２０１９２４５）タカラバイオ株式会社 (115)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年８月１１日（２０１１．８．１１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年５月１６日（２０１１．５．１６）
【分割の表示】特願２００７−２６０３２３（Ｐ２００７−２６０３２３）の分割
【原出願日】平成１５年５月６日（２００３．５．６）
【出願人】（３０２０１９２４５）タカラバイオ株式会社 (115)
【Ｆターム（参考）】
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