アガリクス・ブラゼイ・ムリルから効率良く抗腫瘍物質の高い成分を製造する方法
【課題】アガリクス・ブラゼイ・ムリルを原料とし、これに含有される抗腫瘍活性の高い成分を効率良く抽出する製造方法を開発し産業上、有用に利用出来る機能を有する食品を提供することを目的とする
【解決手段】アガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性の高い成分を効率良く抽出する方法について、鋭意研究した結果、アガリクス・ブラゼイ・ムリルにペプチダーゼ・プロテアーゼを加えて酵素処理して抽出することにより、抗腫瘍活性の高い成分を高収率で得ることが出来ることを見出し、本発明を完成するに至った。
【解決手段】アガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性の高い成分を効率良く抽出する方法について、鋭意研究した結果、アガリクス・ブラゼイ・ムリルにペプチダーゼ・プロテアーゼを加えて酵素処理して抽出することにより、抗腫瘍活性の高い成分を高収率で得ることが出来ることを見出し、本発明を完成するに至った。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍活性の高いアガリクス・ブラゼイ・ムリルから効率良く抗腫瘍物質の高い成分を製造する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルはブラジル原産の担子菌類のキノコであり、多くの多糖類、蛋白質を含み、抗腫瘍活性成分を含むことから、健康食品として多大な注目と期待が寄せられている。
【０００３】
アガリクス・ブラゼイ・ムリル含まれる抗腫瘍活性成分についての文献も多く見られ、抗腫瘍活性成分について報告されている。
【０００４】
近年、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを原料として、多くの製品が市販されている。例えばアガリクス・ブラゼイ・ムリルに含まれるβ−グルカンを多量に含有する物質を主成分とする食品も開発され、またアガリクス・ブラゼイ・ムリルにヘミセルラーゼを加えて酵素分解することで得られた物質を主成分とする製品も市販されている。
【０００５】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルに含まれる抗腫瘍性物質の多くは、多糖類と蛋白質であるが、従来の方法は水等の適当な溶媒を用いて、加熱あるいは加圧加熱等の条件下で抽出される方法が用いられてきた。しかしながらこれら従来の方法ではアガリクス・ブラゼイ・ムリルに含まれる抗腫瘍物質を有効に抽出できないという欠点があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００１−１２８６４１
【特許文献２】特開平１０−２８７５８４
【特許文献３】特開平１１−３２７２３
【特許文献４】特開昭６４−６７１９４
【特許文献５】特開昭６１−４７５１９
【特許文献６】特開２００１−１１２４３８
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
かかる現状に鑑み、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを原料とし、これに含有される抗腫瘍活性の高い成分を効率良く抽出する製造方法を開発し産業上、有用に利用出来る機能を有する食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、前記課題を解決するため、アガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性の高い成分を効率良く抽出する方法について、鋭意研究した結果、アガリクス・ブラゼイ・ムリルにペプチダーゼ・プロテアーゼを加えて酵素処理して抽出することにより、抗腫瘍活性の高い成分を高収率で得ることが出来ることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを粉砕し、水を加え加熱後酵素処理をして抽出することを特徴とし、抗腫瘍活性の高い物質を抽出する方法を提供するものである。抽出方法は８０〜１００℃の熱水で５分以上一次加熱し、冷却後酵素処理を行い、更に８０℃〜１００℃で５分以上加熱し、冷却後個液分離を行い、抽出エキスを得る。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性を有する食品が提供される。
【発明を実地するための最良の形態】
【００１１】
本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性物質の抽出方法について、詳しく述べる。原料のアガリクス・ブラゼイ・ムリルはハラタケ科ハラタケ属に属するキノコであり、正式にはアガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ Ｂｌａｚｅｉ Ｍｕｒｒｉｌｌ）である。
【００１２】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルは子実体あるいは菌糸体が使用される。子実体は生のままあるいは乾燥したものいずれも使用出来るが、好ましくは乾燥した子実体がよい。菌糸体は生のままあるいは乾燥したものいずれも使用できるが、乾燥したものが好ましい。本発明をより効果的に実地するには乾燥子実体が好ましい。
【００１３】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルを物理的処理で粉砕する。粉砕手段としては、ハンマーミル、オリエント粉砕機、ワーリングブレンダー等による粉砕機器が使用される。この場合粉砕した粒子サイズは０．１ｍｍ〜２０ｍｍ程度である。粉砕された原料に水を加え８０℃〜１００℃に加熱される。加熱時間は５分以上であるが、好ましくは２〜５時間程度である。
【００１４】
加熱後５０℃以下に冷却し、酵素反応を行う。酵素はペプチダーゼ・プロテアーゼが使用出来る。
【００１５】
ペプチダーゼ・プロテアーゼは蛋白分解能を有するペプチダーゼ・プロテアーゼであれば、本発明に使用出来る。例えば、ウマミザイムＧ，精製パパイン、ビオプラーゼＳＰ−４ＦＧ等が使用出来る。
５０℃以下に冷却されたアガリクス・ブラゼイ・ムリル液にプロテアーゼをアガリクス・ブラゼイ・ムリルの原料に対して０．０１〜１０重量％を添加し、２０〜６０℃で１０分〜１５時間、好ましくは２〜５時間程度攪拌しながら反応を行う。
【００１６】
酵素処理が終了したアガリクス・ブラゼイ・ムリル液は９０℃以上で１０分〜２時間加熱し酵素を失活させる。その後固液分離を行い、抽出液を得る。この抽出液をスプレードライ、フリーズドライあるいは減圧濃縮等の処理をして、アガリクス・ブラゼイ・ムリルの抽出物を得ることが出来る。
【００１７】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを酵素処理して抽出することにより、抗腫瘍活性が高い抽出液が提供される。この抽出液はそのまま所望の目的のために使用しても差し支えないし、また粉末化して使用しても差し支えない。
【００１８】
本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物は所定の方法で加工することで、レトルト、粉末、錠剤あるいは顆粒等の形態として機能性食品とすることが出来る。
【実施例】
【００１９】
以下、本発明を実施例によりさらに詳しく説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【実施例】
【００２０】
実施例１
アガリクス・ブラゼイ・ムリルの乾燥子実体１ｋｇをオリエント粉砕機で粒子径を１０ｍｍ以下に粉砕する。粉砕された原料はステンレスの釜に移され、水２０Ｌを加える。９０℃に加熱し、１時間抽出する。５０℃以下に冷却し、精製パパイン２０ｇを加え、２時間酵素反応を行う。反応終了後９０℃、３０分加熱し酵素を失活させる。５０℃以下に冷却し１００メッシュの網を用いて濾別する。濾別された液体を噴霧乾燥機にて粉化を行う。本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物４５０ｇを得た。
【００２１】
比較例１
アガリクス・ブラゼイ・ムリルの乾燥子実体１ｋｇをオリエント粉砕機で粒子径を１０ｍｍ以下に粉砕する。粉砕された原料はステンレスの釜に移され、水２０Ｌを加える。９０℃に加熱し、１時間抽出する。５０℃以下に冷却し、更に９０℃、３０分加熱を行う。５０℃以下に冷却し１００メッシュの網を用いて濾別する。濾別された液体を噴霧乾燥機にて粉化を行う。本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物３９５ｇを得た。
【００２２】
上記実施例および比較例で実施したアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物の抗腫瘍活性を以下に述べる方法で評価した。
【００２３】
検体５０ｍｇに水１ｍｌを加え攪拌した懸濁液（５０ｍｇ／ｍｌ）を試験原液とした。試験原液を培地で希釈し、検体濃度を１．２５ｍｇ／ｍｌ，３１３μｇ／ｍｌ及び７８μｇ／ｍｌとして試験を行った。濃度はすべて細胞上清中の濃度として示した。
マウス白血病細胞Ｐ３８８（ヒューマンサイエンス振興財団）細胞の数を、生細胞由来の酸化還元酵素により生成するホルマザン色素の量として測定した。検体を共存させたときの色素生成量から、未処理対照の生成量に対する相対値（増殖率）を求め、細胞増殖抑制作用を評価した。
【００２４】
評価結果を下記に示す。
【表−１】
【表−２】
【００２５】
表１および表２より実施例１の方が抗腫瘍活性が強いことが分かる。
【００２６】
たんぱく質の分子量分布を表３に示す。
【表３】
【００２７】
表３より実施例１の分子量は３０，０００以下の分子量が多いことが分かる。
【発明の効果】
【００２８】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを原料とし抗腫瘍活性の強い抽出物を得ることが出来る。このことから優れた抗腫瘍活性を有する食品を提供することが出来、消費者に対して健康に寄与できるものである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍活性の高いアガリクス・ブラゼイ・ムリルから効率良く抗腫瘍物質の高い成分を製造する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルはブラジル原産の担子菌類のキノコであり、多くの多糖類、蛋白質を含み、抗腫瘍活性成分を含むことから、健康食品として多大な注目と期待が寄せられている。
【０００３】
アガリクス・ブラゼイ・ムリル含まれる抗腫瘍活性成分についての文献も多く見られ、抗腫瘍活性成分について報告されている。
【０００４】
近年、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを原料として、多くの製品が市販されている。例えばアガリクス・ブラゼイ・ムリルに含まれるβ−グルカンを多量に含有する物質を主成分とする食品も開発され、またアガリクス・ブラゼイ・ムリルにヘミセルラーゼを加えて酵素分解することで得られた物質を主成分とする製品も市販されている。
【０００５】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルに含まれる抗腫瘍性物質の多くは、多糖類と蛋白質であるが、従来の方法は水等の適当な溶媒を用いて、加熱あるいは加圧加熱等の条件下で抽出される方法が用いられてきた。しかしながらこれら従来の方法ではアガリクス・ブラゼイ・ムリルに含まれる抗腫瘍物質を有効に抽出できないという欠点があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００１−１２８６４１
【特許文献２】特開平１０−２８７５８４
【特許文献３】特開平１１−３２７２３
【特許文献４】特開昭６４−６７１９４
【特許文献５】特開昭６１−４７５１９
【特許文献６】特開２００１−１１２４３８
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
かかる現状に鑑み、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを原料とし、これに含有される抗腫瘍活性の高い成分を効率良く抽出する製造方法を開発し産業上、有用に利用出来る機能を有する食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、前記課題を解決するため、アガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性の高い成分を効率良く抽出する方法について、鋭意研究した結果、アガリクス・ブラゼイ・ムリルにペプチダーゼ・プロテアーゼを加えて酵素処理して抽出することにより、抗腫瘍活性の高い成分を高収率で得ることが出来ることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを粉砕し、水を加え加熱後酵素処理をして抽出することを特徴とし、抗腫瘍活性の高い物質を抽出する方法を提供するものである。抽出方法は８０〜１００℃の熱水で５分以上一次加熱し、冷却後酵素処理を行い、更に８０℃〜１００℃で５分以上加熱し、冷却後個液分離を行い、抽出エキスを得る。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性を有する食品が提供される。
【発明を実地するための最良の形態】
【００１１】
本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリルから抗腫瘍活性物質の抽出方法について、詳しく述べる。原料のアガリクス・ブラゼイ・ムリルはハラタケ科ハラタケ属に属するキノコであり、正式にはアガリクス・ブラゼイ・ムリル（Ａｇａｒｉｃｕｓ Ｂｌａｚｅｉ Ｍｕｒｒｉｌｌ）である。
【００１２】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルは子実体あるいは菌糸体が使用される。子実体は生のままあるいは乾燥したものいずれも使用出来るが、好ましくは乾燥した子実体がよい。菌糸体は生のままあるいは乾燥したものいずれも使用できるが、乾燥したものが好ましい。本発明をより効果的に実地するには乾燥子実体が好ましい。
【００１３】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルを物理的処理で粉砕する。粉砕手段としては、ハンマーミル、オリエント粉砕機、ワーリングブレンダー等による粉砕機器が使用される。この場合粉砕した粒子サイズは０．１ｍｍ〜２０ｍｍ程度である。粉砕された原料に水を加え８０℃〜１００℃に加熱される。加熱時間は５分以上であるが、好ましくは２〜５時間程度である。
【００１４】
加熱後５０℃以下に冷却し、酵素反応を行う。酵素はペプチダーゼ・プロテアーゼが使用出来る。
【００１５】
ペプチダーゼ・プロテアーゼは蛋白分解能を有するペプチダーゼ・プロテアーゼであれば、本発明に使用出来る。例えば、ウマミザイムＧ，精製パパイン、ビオプラーゼＳＰ−４ＦＧ等が使用出来る。
５０℃以下に冷却されたアガリクス・ブラゼイ・ムリル液にプロテアーゼをアガリクス・ブラゼイ・ムリルの原料に対して０．０１〜１０重量％を添加し、２０〜６０℃で１０分〜１５時間、好ましくは２〜５時間程度攪拌しながら反応を行う。
【００１６】
酵素処理が終了したアガリクス・ブラゼイ・ムリル液は９０℃以上で１０分〜２時間加熱し酵素を失活させる。その後固液分離を行い、抽出液を得る。この抽出液をスプレードライ、フリーズドライあるいは減圧濃縮等の処理をして、アガリクス・ブラゼイ・ムリルの抽出物を得ることが出来る。
【００１７】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを酵素処理して抽出することにより、抗腫瘍活性が高い抽出液が提供される。この抽出液はそのまま所望の目的のために使用しても差し支えないし、また粉末化して使用しても差し支えない。
【００１８】
本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物は所定の方法で加工することで、レトルト、粉末、錠剤あるいは顆粒等の形態として機能性食品とすることが出来る。
【実施例】
【００１９】
以下、本発明を実施例によりさらに詳しく説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【実施例】
【００２０】
実施例１
アガリクス・ブラゼイ・ムリルの乾燥子実体１ｋｇをオリエント粉砕機で粒子径を１０ｍｍ以下に粉砕する。粉砕された原料はステンレスの釜に移され、水２０Ｌを加える。９０℃に加熱し、１時間抽出する。５０℃以下に冷却し、精製パパイン２０ｇを加え、２時間酵素反応を行う。反応終了後９０℃、３０分加熱し酵素を失活させる。５０℃以下に冷却し１００メッシュの網を用いて濾別する。濾別された液体を噴霧乾燥機にて粉化を行う。本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物４５０ｇを得た。
【００２１】
比較例１
アガリクス・ブラゼイ・ムリルの乾燥子実体１ｋｇをオリエント粉砕機で粒子径を１０ｍｍ以下に粉砕する。粉砕された原料はステンレスの釜に移され、水２０Ｌを加える。９０℃に加熱し、１時間抽出する。５０℃以下に冷却し、更に９０℃、３０分加熱を行う。５０℃以下に冷却し１００メッシュの網を用いて濾別する。濾別された液体を噴霧乾燥機にて粉化を行う。本発明のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物３９５ｇを得た。
【００２２】
上記実施例および比較例で実施したアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物の抗腫瘍活性を以下に述べる方法で評価した。
【００２３】
検体５０ｍｇに水１ｍｌを加え攪拌した懸濁液（５０ｍｇ／ｍｌ）を試験原液とした。試験原液を培地で希釈し、検体濃度を１．２５ｍｇ／ｍｌ，３１３μｇ／ｍｌ及び７８μｇ／ｍｌとして試験を行った。濃度はすべて細胞上清中の濃度として示した。
マウス白血病細胞Ｐ３８８（ヒューマンサイエンス振興財団）細胞の数を、生細胞由来の酸化還元酵素により生成するホルマザン色素の量として測定した。検体を共存させたときの色素生成量から、未処理対照の生成量に対する相対値（増殖率）を求め、細胞増殖抑制作用を評価した。
【００２４】
評価結果を下記に示す。
【表−１】
【表−２】
【００２５】
表１および表２より実施例１の方が抗腫瘍活性が強いことが分かる。
【００２６】
たんぱく質の分子量分布を表３に示す。
【表３】
【００２７】
表３より実施例１の分子量は３０，０００以下の分子量が多いことが分かる。
【発明の効果】
【００２８】
本発明によれば、アガリクス・ブラゼイ・ムリルを原料とし抗腫瘍活性の強い抽出物を得ることが出来る。このことから優れた抗腫瘍活性を有する食品を提供することが出来、消費者に対して健康に寄与できるものである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルに、ペプチダーゼ・プロテアーゼを加え酵素処理をして抽出することを特徴とする抗腫瘍活性の高いアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物の製造方法。
【請求項２】
分子量３万以下の低分子たんぱく質に富むアガリクス抽出物であることを特徴とする請求項１に記載のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物の製造方法。
【請求項１】
アガリクス・ブラゼイ・ムリルに、ペプチダーゼ・プロテアーゼを加え酵素処理をして抽出することを特徴とする抗腫瘍活性の高いアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物の製造方法。
【請求項２】
分子量３万以下の低分子たんぱく質に富むアガリクス抽出物であることを特徴とする請求項１に記載のアガリクス・ブラゼイ・ムリル抽出物の製造方法。
【公開番号】特開２０１３−１１６（Ｐ２０１３−１１６Ａ）
【公開日】平成２５年１月７日（２０１３．１．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１４３５０９（Ｐ２０１１−１４３５０９）
【出願日】平成２３年６月１３日（２０１１．６．１３）
【出願人】（３０７０２７６３６）ヤマノ株式会社 (3)
【出願人】（５９５１０８５８３）株式会社アトラスワールド (1)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年１月７日（２０１３．１．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年６月１３日（２０１１．６．１３）
【出願人】（３０７０２７６３６）ヤマノ株式会社 (3)
【出願人】（５９５１０８５８３）株式会社アトラスワールド (1)
【Ｆターム（参考）】
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