アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物並びにそれを利用したエストロゲン受容体分解誘導剤及び乳癌、子宮頚癌又は卵巣癌の予防及び治療剤
【課題】新規な作用機序により乳癌等の癌細胞に発現するエストロゲン受容体を特異的に分解して細胞死を誘導するアポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物を提供する。
【解決手段】下記一般式
【化１】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とする、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物である。
【解決手段】下記一般式
【化１】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とする、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）リガンド−エストロゲン受容体（ＥＲ）リガンドハイブリッド化合物に関する。詳しくは、乳癌等の癌細胞に発現するＥＲを特異的に分解して、細胞死を誘導するＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
多くの乳癌の患者の組織において、ＥＲの発現上昇が認められ（例えば、非特許文献１参照）、これらの癌細胞はエストロゲン依存性の増殖を示すことが報告されている（例えば、非特許文献２及び３参照）。抗エストロゲン薬として頻用されるタモキシフェンは、乳癌組織等のＥＲに対してエストロゲンと競合的に結合し、ＥＲ依存性の遺伝子発現を抑制することで、細胞の増殖を抑制して、抗腫瘍効果を発揮する（例えば、非特許文献４および５参照）。しかし、タモキシフェンは、子宮癌組織においてエストロゲンと同様にＥＲに対するアゴニストとして作用し、子宮内膜癌のリスクを増大させることが知られている（例えば、非特許文献６および７参照）。さらに、タモキシフェンは、ＥＲとの結合を介してＡｋｔ等の細胞内シグナルカスケードを起動し、がん細胞のアポトーシスを阻害することが報告されている（例えば、非特許文献８及び９参照）。
【０００３】
一方、先に本発明者らは、タンパク質分解機構のユビキチン−プロテアソーム系を利用して、標的タンパク質を選択的に分解するプロテインノックダウン法を開発した（非特許文献１０〜１３参照）。即ち、生体内のタンパク質は、それを認識するユビキチンリガーゼ（Ｅ３）によってポリユビキチン化され、プロテアソームによって分解されるが、ユビキチンリガーゼ活性を持つｃＩＡＰ１のリガンドと標的タンパク質のリガンドを連結させた分子を用いることにより、ｃＩＡＰ１と標的タンパク質の人口複合体を形成させ、生体内のタンパク質分解機構と同様にして標的タンパク質をユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導するものである。本発明者らは、当該プロテインノックダウン法を用いて、実際にウベニメクスとオールトランスレチノイン酸を結合したハイブリッド化合物を合成して、当該ハイブリッド化合物が、レチノイン酸に結合するタンパク質、ＣＲＡＢＰ（ｃｅｌｌｕｌａｒ ｒｅｔｉｏｎｉｃ ａｃｉｄ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔａｉｎ）をユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導することを実証した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Frederik Holst, et al., "Estrogen receptor alpha (ESR1) gene amplification is ferquent in breast cancer", Nat Genet, 2007, 39, 655-660
【非特許文献２】S. F. Doisneau, et al., "Estrogen and antiestrogen regulation of cell cycle progression in breast cancer cells", Endocrine-Related Cancer, 2003, 10, 179-186
【非特許文献３】James S. Foster, et al., "Multifaceted Regulation of Cell Cycle Progression by Estrogen: Regulation of Cdk Inhibitors and Cdc25A Independent of Cyclin D1-Cdk4 Function", Mol. Cell. Biol., 2001, 21, 794-810
【非特許文献４】Bonnie J. Deroo, et al., "Estrogen receptors and human disease", J. Clin. Invest., 2006, 116(3), 561-570
【非特許文献５】Early Breast Cancer Trialists' Collaborative Group, "Tamoxifen for early breast cancer: an overview of the randomised trials", Lancet, 1998, 351, 1451-1467
【非特許文献６】Leslie Bernstein, et al., "Tamoxifen Therapy for Breast Cancer and Endometrial Cancer Risk", J. Natl. Cancer Inst., 1999, 91, 1654-1662
【非特許文献７】Yongfeng Shang, et al., "Molecular Determinants for the Tissue Specificity of SERMs", Science, 2002, 295, 2465-2468
【非特許文献８】Grazia Arpino, et al., "Crosstalk between the Estrogen Receptor and the HER Tyrosine Kinase Recoptor Family: Molecular Mechanism and Clinical Implications for Endocrine Therapy Resistance", Endocr. Rev., 2008, 29, 217-233
【非特許文献９】Sheng-Li Lin, et al., "ER-α36, a Variant of ER-α, Promotes Tomxifen Agonist Action in Endometrial Cancer Cells via the MAPK/ERK and PI3K/Akt Pathways", PLoS One, 2010, 5, e9013
【非特許文献１０】Keiko Sekine, et al., "Small Molecules Destabilize cIAP1 by Activating Auto-ubiquitylation", J. Biol. Chem., 2008, 283, 8961-8968
【非特許文献１１】Yukihiro Itoh, et al., "Protein Knockdown Using Methyl Bestatin -Ligand Hybrid Molecules: Design and Synthesis of Inducers of Ubiquitination-Mediated Degradation of Cellular Retinoic Acid-Binding Proteins", J. Am. Chem. Soc., 2010, 132, 5820-5826
【非特許文献１２】Keiichiro Okuhira, et al., "Specific degradation of CRABL-II via cIAP1-mediated ubiquitylation induced by hybrid molecules that crosslink cIAP1 and the target protein", FEBS Letters, 2011, 585, 1147-1152
【非特許文献１３】Yukihiro Itoh, et al., "Development of target protein-selective degradation inducer for protein knockdown", Bioorg. Med. Chem., 2011, 19, 3229-3241
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は上記従来技術の有する問題点に鑑みなされたものであり、その目的とするところは、新規な作用機序により乳癌等の癌細胞に発現するＥＲを特異的に分解して細胞死を誘導するＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物並びにそれを利用したＥＲ分解誘導剤及び乳癌、子宮頚癌又は卵巣癌の予防及び治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の上記目的は、下記の手段によって達成される。
【０００７】
（１）すなわち、本発明は、下記一般式
【化１】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とする、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物である。
【０００８】
（２）本発明はまた、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、（１）に記載のハイブリッド化合物である。
【０００９】
（３）本発明はまた、前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、（１）又は（２）に記載のハイブリッド化合物である。
【００１０】
（４）本発明はまた、前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、（１）〜（３）のいずれか１つに記載のハイブリッド化合物である。
【００１１】
（５）本発明はまた、前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式、
【化２】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、（１）〜（４）のいずれか１つに記載のハイブリッド化合物である。
【００１２】
（６）本発明はまた、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、（１）〜（５）のいずれか１つに記載のハイブリッド化合物である。
【００１３】
（７）また、本発明は、下記一般式
【化３】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されるアポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物又はその生理学的に許容される塩を有効成分とする、エストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１４】
（８）本発明はまた、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、（７）に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１５】
（９）本発明はまた、前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、（７）又は（８）に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１６】
（１０）本発明はまた、前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、（７）〜（９）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１７】
（１１）本発明はまた、前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式
【化４】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、（７）〜（１０）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１８】
（１２）本発明はまた、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物は、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、（７）〜（１１）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１９】
（１３）更に、本発明は、（７）〜（１２）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤を含む乳癌、子宮頚癌又は卵巣癌の予防及び治療剤である。
【発明の効果】
【００２０】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、ＩＡＰに特異的に結合するＩＡＰリガンドとＥＲに特異的に結合するＥＲリガンドとがリンカーを介して結合された構造を有するので、細胞内でユビキチンリガーゼ活性を有するｃＩＡＰ１とＥＲとを架橋し、ＥＲを特異的にユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導する。従って、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を乳癌、子宮頚癌、卵巣癌等の患者に投与すれば、癌組織におけるＥＲの発現そのものを減少させ、癌細胞を自滅に導くことができ、ＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤として極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のＥＲ分解誘導活性の評価結果を示す図である。
【図２】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のアポトーシス促進活性の評価結果を示す図である。
【図３】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のアポトーシス促進活性の評価結果を示す図である。
【図４】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のＥＲ分解誘導活性の評価結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下に、本発明の実施の形態を詳細に説明する。
【００２３】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、
【００２４】
下記一般式（Ｉ）
【化５】
（式中、Ｘは、ＩＡＰに特異的に結合するＩＡＰリガンドを表し、Ｙは、ＥＲに特異的に結合するＥＲリガンドを表し、Ｚは、前記ＩＡＰリガンド及び前記ＥＲリガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とするものである。
【００２５】
上記一般式（Ｉ）において、ＸのＩＡＰリガンドとしては、ＩＡＰに特異的に結合する化合物から誘導される１価の基であれば特に限定されるものではない。係るＩＡＰに特異的に結合する化合物の具体例としては、ウベニメクス（（２Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイルアミノ］−４−メチルペンタン酸）、ＭＶ−１（（Ｒ）−２−（（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパナミド］アセチル｝ピロリジン−２−カルボキサミド）−３，３−ジフェニルプロパン酸）若しくはＡＥＧ４０５９９（（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−３，３−ジメチル−１−オキソ−１−｛（Ｒ）−２−［（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−フェネチルアセトアミド）メチル］ピロリジン−１−イル｝ブタン−２−イル）−２−（メチルアミノ）プロパナミド）又はこれらの誘導体が挙げられ、これらの中ではウベニメクスが特に好適に利用される。
【００２６】
また、ＹのＥＲリガンドとしては、ＥＲに特異的に結合する化合物から誘導される１価の基であれば特に限定されるものではない。係るＥＲに特異的に結合する化合物の具体例としては、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニル−１−ブテニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン）、ラロキシフェン（［６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル］［４−（２−ピペリジン−１−イルエトキシ）フェニル］メタノン）、トレミフェン（２−［４−〔（Ｚ）−４−クロロ−１，２−ジフェニル−１−ブテニル〕フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン）、フルベストラント（７α−［９−［（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルスルフィニル）］ノニル］エストラ−１（１０），２，４−トリエン−３，１７β−ジオール）、ＩＣＩ１８２７８０（フルオロペンチルスルフィニル）ノニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール）等のエストロゲン受容体阻害剤又はこれらの誘導体が挙げられ、これらの中ではタモキシフェンが特に好適に利用される。
【００２７】
更に、Ｚの低分子鎖状リンカーとしては、前記ＩＡＰリガンド及び前記ＥＲリガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する２価の基であれば特に限定されるものではない。係る低分子鎖状リンカーの具体例としては、下記一般式（II）
【化６】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示される２価の基が挙げられる。一般式（II)において、炭素数２〜１０のアルキレン基の具体例としては、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基、プロピレン基、エチルエチレン基、メチルトリメチレン基等が挙げられる。また、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基としては、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール等が挙げられる。更に、炭素数３〜１０のアミド基としては、アルキルアミド、アルキルスルホニルアミド等が挙げられる。
【００２８】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の具体例としては、下記式（III）
【化７】
で示される（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、下記式（IV）
【化８】
で示される（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、下記式（Ｖ）
【化９】
で示される７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、下記式（VI）
【化１０】
で示される（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド、下記式（VII）
【化１１】
で示される（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミド等が挙げられる。
【００２９】
次に、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の製造方法を、ＩＡＰリガンドがウベニメクス、ＥＲリガンドがタモキシフェンの場合を例にして説明する。即ち、下記反応式（VIII）
【化１２】
に示すように、ＥＲリガンド（タモキシフェン）のアミノ基とリンカーのカルボキシル基とを既知の方法で縮合反応させ、ＩＡＰリガンドのアミノ基上にリンカーを導入する。次いで、得られた反応生成物のリンカーのアミノ基とＩＡＰリガンド（ウベニメクス）の１位の水酸基とを既知の方法で縮合反応させ、目的のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を得る。なお、逆の順序で、先にＩＡＰリガンドにリンカーを縮合させ、次にＩＡＰリガンドと縮合させてもよい。
【００３０】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、ＩＡＰに特異的に結合するＩＡＰリガンドとＥＲに特異的に結合するＥＲリガンドとがリンカーを介して結合された構造を有する。従って、細胞内でユビキチンリガーゼ活性を有するｃＩＡＰ１とＥＲとを架橋し、ＥＲを特異的にユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導する。故に、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を乳癌、子宮頚癌、卵巣癌等の患者に投与すれば、癌組織におけるＥＲの発現そのものを減少させ、癌細胞を自滅に導くことができ、ＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤として極めて有用である。
【００３１】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物をＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤とする場合、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を単体で、または錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤、カプセル剤等として患者に経口投与できる。また、注射剤として静脈内、筋肉内、皮内、皮下、腹腔内、動脈内、脊髄腔内等に投与できる。さらに、座薬として直腸内に投与しても良いし、ペレットによる埋め込みも可能である。点眼剤、点鼻剤、噴霧剤、吸入剤等として直接患部およびその周辺部位に局所的に投与することもできるし、軟膏、クリーム、粉状もしくは液状塗布剤、貼付剤等の外用剤として経皮的に投与しても良い。上述したうち、好ましい製剤形態や投与形態等は、患者の年齢、性別、体質、症状、処置時期等に応じて、医師によって適宜選択される。
【００３２】
本剤を錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤等の固形製剤とする場合には、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を、常法に従って適当な添加剤、例えば、乳糖、ショ糖、マンニット、トウモロコシデンプン、合成もしくは天然ガム、結晶セルロース等の賦形剤、デンプン、セルロース誘導体、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボシキメチルセルーロースカルシウム、カルボシキメチルセルーロースナトリウム、デンプン、コーンスターチ、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム等の滑沢剤、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム等の充填剤または希釈剤等と適宜混合して製造することができる。錠剤等は、必要に応じて適当な被覆用基剤を用いて、糖衣、ゼラチン、腸溶被覆、フイルムコーティング等を施しても良い。
【００３３】
本剤を注射剤、点眼剤、点鼻剤、吸入剤、噴霧剤、ローション剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の液状製剤とする場合には、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を、精製水、リン酸緩衝液等の適当な緩衝液、生理的食塩水、リンゲル溶液、ロック溶液等の生理的塩類溶液、カカオバター、ゴマ油、オリーブ油等の植物油、鉱油、高級アルコール、高級脂肪酸、エタノール等の有機溶媒等に溶解して、必要に応じてコレステロール等の乳化剤、アラビアゴム等の懸濁剤、分散助剤、浸潤剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油系、ポリエチレングリコール系等の界面活性剤、リン酸ナトリウム等の溶解補助剤、糖、糖アルコール、アルブミン等の安定化剤、パラベン等の保存剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖、グリセリン等の等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、吸着防止剤、保湿剤、酸化防止剤、着色剤、甘味料、フレーバー、芳香物質等を適宜添加することにより、滅菌された水溶液、非水溶液、懸濁液、リポソームまたはエマルジョン等として調整できる。この際、注射剤は、生理学的なｐＨ、好ましくは６〜８の範囲内のｐＨを有することが好ましい。
【００３４】
本剤を、ローション剤、クリーム剤、軟膏等の半固形製剤とするには、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、パラフィン、蝋、硬膏剤、樹脂、プラスチック、グリコール類、高級アルコール、グリセリン、水、乳化剤、懸濁化剤等と適宜混和することにより製造することができる。
【００３５】
本発明のＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤に含まれる前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の含有量は、投与形態、重篤度や目的とする投与量などによって様々であるが、一般的には、製剤の全重量に対して０．１〜９０重量％、好ましくは５〜５０重量％である。
【００３６】
また、本発明のＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤の投与量は、患者の年齢、体重及び症状、目的とする投与形態や方法、治療効果、および処置期間等によって異なり、正確な量は医師により決定されるものであるが、通常、成人に対し１日当り前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の投与量換算で、経口投与の場合は１０〜１０００ｍｇを、静脈内投与の場合は５〜５００ｍｇを、１回または数回に分けて投与する。
【００３７】
次に、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物について、実施例を示して更に詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【実施例１】
【００３８】
【化１３】
【００３９】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルカルバメートの合成
【００４０】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で３時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルカルバメートが収率８８％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０６−７．２４（ｍ，７Ｈ），６．７１−６．８３（ｍ，４Ｈ），６．４７−６．５０（ｍ，２Ｈ），５．３３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），３．９５（ｍ，１Ｈ），３．３８−３．７６（ｍ，５Ｈ），３．０２−３．３９（ｍ，３Ｈ），２．４４−２．９５（ｍ，４Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），１．２４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ５６７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００４１】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートの合成
【００４２】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートが収率８２％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．００−７．５２（ｍ，１５Ｈ），６．６７−６．８３（ｍ，４Ｈ），６．４５−６．４９（ｍ，２Ｈ），５．６０（ｂｒｓ，１Ｈ），５．２２（ｍ，１Ｈ），４．４０（ｍ，１Ｈ），３．８８−４．１３（ｍ，４Ｈ），３．４３−３．７０（ｍ，４Ｈ），２．８７−３．０７（ｍ，５Ｈ），２．４１−２．５０（ｍ，４Ｈ），１．５６−１．６２（ｍ，２Ｈ），１．２４−１．３６（ｍ，１０Ｈ），０．８７−０．９４（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８５７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００４３】
工程３：（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩の合成
【００４４】
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で２４時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．００−７．３４（ｍ，１２Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ），６．７４−６．７６（ｍ，２Ｈ），６．６３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５４（ｍ，１Ｈ），６．３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２９（ｍ，１Ｈ），４．０９−４．１２（ｍ，２Ｈ），３．９４（ｍ，１Ｈ），３．４０−３．７９（ｍ，５Ｈ），２．９０−３．１２（ｍ，５Ｈ），２．４４−２．８０（ｍ，４Ｈ），１．５９−１．６６（ｍ，３Ｈ），０．８８−０．９３（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ７５７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例２】
【００４５】
【化１４】
【００４６】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルカルバメートの合成
【００４７】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ペンタン酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で２４時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルカルバメートが収率９０％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．４０−７．１０（ｍ，７Ｈ），６．６７−６．８５（ｍ，４Ｈ），６．４９−６．５１（ｍ，２Ｈ），４．７６（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．６０−３．７６（ｍ，２Ｈ），２．９４−３．１５（ｍ，５Ｈ），２．２６−２．５２（ｍ，４Ｈ），１．４８−１．６７（ｍ，５Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），０．９２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ５９５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００４８】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートの合成
【００４９】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートが収率８６％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０５−７．２７（ｍ，１０Ｈ），６．６７−６．８５（ｍ，６Ｈ），６．４７−６．５１（ｍ，２Ｈ），５．７７（ｂｒｓ，１Ｈ），５．０７（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｍ，１Ｈ），４．１２−４．１８（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｍ，１Ｈ），３．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），３．５９（ｂｒｓ，１Ｈ），３．３１（ｍ，１Ｈ），２．９０−３．１４（ｍ，５Ｈ），２．１７−２．５０（ｍ，４Ｈ），１．３６−１．８０（ｍ，２１Ｈ），０．９２−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８８５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００５０】
工程３：（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩の合成
【００５１】
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で２４時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．３０−７．３５（ｍ，６Ｈ），７．０９−７．３１（ｍ，５Ｈ），７．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｍ，１Ｈ），６．７４−６．７６（ｍ，２Ｈ），６．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５２（ｍ，１Ｈ），６．３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｍ，１Ｈ），３．７７−４．１７（ｍ，３Ｈ），３．３０−３．８０（ｍ，３Ｈ），２．９０−３．１７（ｍ，７Ｈ），２．３２−２．４７（ｍ，４Ｈ），１．５２−１．８６（ｍ，７Ｈ），０．９０−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ７８５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例３】
【００５２】
【化１５】
【００５３】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル７−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソへプチルカルバメートの合成
【００５４】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ヘプタン酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル７−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソへプチルカルバメートが収率７６％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０４−７．１７（ｍ，７Ｈ），６．７０−６．８６（ｍ，４Ｈ），６．４８−６．５２（ｍ，２Ｈ），４．６０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．７５（ｍ，２Ｈ），２．９５−３．１５（ｍ，５Ｈ），２．２３−２．５０（ｍ，４Ｈ），１．４２−１．６３（ｍ，１８Ｈ），０．９４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ６２３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００５５】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートの合成
【００５６】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル７−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソへプチルカルバメート（０．３ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．４ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．４ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．４ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートが収率７７％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０３−７．３６（ｍ，１２Ｈ），６．６６−６．８３（ｍ，５Ｈ），６．４６−６．４９（ｍ，２Ｈ），５．８９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４８（ｍ，１Ｈ），３．９７−４．１１（ｍ，３Ｈ），３．５６−３．７２（ｍ，２Ｈ），２．９１−３．２２（ｍ，６Ｈ），２．４４−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．０７−２．２０（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．６３（ｍ，２４Ｈ），０．８７−０．９３（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ９１４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００５７】
工程３：７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−４−メチルペンタナミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタナミド塩酸塩の合成
【００５８】
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で１２時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−４−メチルペンタナミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝６．９１−７．３５（ｍ，１３Ｈ），６．４０−６．７６（ｍ，５Ｈ），３．９８−４．３４（ｍ，４Ｈ），３．６６−３．８３（ｍ，３Ｈ），２．９１−３．１８（ｍ，７Ｈ），２．３０−２．４７（ｍ，４Ｈ），１．２８−１．８４（ｍ，１１Ｈ），０．８９−０．９９（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８１３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例４】
【００５９】
【化１６】
【００６０】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−｛２−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチルカルバメートの合成
【００６１】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、２−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エトキシ］酢酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−｛２−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチルカルバメートが収率８７％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０２−７．３１（ｍ，７Ｈ），６．７６−６．８３（ｍ，４Ｈ），６．４３−６．５６（ｍ，２Ｈ），５．０８（ｂｒｓ，１Ｈ），３．９８−４．４０（ｍ，４Ｈ），３．５７−３．８０（ｍ，４Ｈ），３．３１−３．４１（ｍ，３Ｈ），２．８２−３．１２（ｍ，３Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ５９７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００６２】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１４Ｓ，１５Ｒ）−１４−ヒドロキシ−１−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝−１１−イソブチル−３−メチル−４，１０，１３−トリオキソ−１６−フェニル−６−オキサ−３，９，１２−トリアザヘキサデカン−１５−イルカルバメートの合成
【００６３】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−｛２−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１時間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：メタノール＝２０：１）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１４Ｓ，１５Ｒ）−１４−ヒドロキシ−１−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝−１１−イソブチル−３−メチル−４，１０，１３−トリオキソ−１６−フェニル−６−オキサ−３，９，１２−トリアザヘキサデカン−１５−イルカルバメートが収率７１％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．７６（ｍ，１Ｈ），６．９５−７．２６（ｍ，１３Ｈ），６．６６−６．８２（ｍ，４Ｈ），６．４５−６．４８（ｍ，２Ｈ），５．６７（ｍ，１Ｈ），５．１３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｍ，１Ｈ），３．９５−４．４３（ｍ，７Ｈ），３．２６−３．７０（ｍ，６Ｈ），２．８４−３．０４（ｍ，５Ｈ），２．４６−２．７３（ｍ，２Ｈ），１．２８−１．８８（ｍ，１２Ｈ），０．９２−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８８７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００６４】
工程３：（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタナミド塩酸塩の合成
【００６５】
ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１４Ｓ，１５Ｒ）−１４−ヒドロキシ−１−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝−１１−イソブチル−３−メチル−４，１０，１３−トリオキソ−１６−フェニル−６−オキサ−３，９，１２−トリアザヘキサデカン−１５−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で２４時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．２５−７．３８（ｍ，７Ｈ），６．９１−７．１６（ｍ，６Ｈ），６．７５−６．７７（ｍ，２Ｈ），６．５５−６．６３（ｍ，２Ｈ），６．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．９２−４．３７（ｍ，６Ｈ），３．５１−３．８３（ｍ，５Ｈ），３．３６−３．４０（ｍ，２Ｈ），２．９２−３．１３（ｍ，５Ｈ），２．４３−２．５４（ｍ，２Ｈ），１．５９−１．８４（ｍ，３Ｈ），０．９０−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ７８７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例５】
【００６６】
【化１７】
【００６７】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（Ｒ）−２−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ｝−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバメートの合成
【００６８】
窒素雰囲気下、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１時間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｒ）−２−［（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−｛（Ｓ）−２−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ］プロパナミド｝−２−シクロヘキシルアセチル）ピロリジン−２−カルボキサミド］−３，３−ジフェニルプロパン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：メタノール＝５０：１）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（Ｒ）−２−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ｝−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバメートが収率３３％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０５−７．３０（ｍ，１７Ｈ），６．７０−６．８４（ｍ，４Ｈ），６．３１−６．５２（ｍ，３Ｈ），６．００（ｂｒｓ，１Ｈ），５．２０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．６２−４．７６（ｍ，２Ｈ），４．３９−４．４１（ｍ，２Ｈ），３．６２−４．１４（ｍ，５Ｈ），２．７７−３．３１（ｍ，９Ｈ），２．２４−２．５４（ｍ，４Ｈ），０．９１−１．９５（ｍ，４０Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ １１６８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００６９】
工程２：（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパナミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩の合成
【００７０】
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（Ｒ）−２−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ｝−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバメート（０．１ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．０５ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で１２時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパナミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．００−７．４４（ｍ，１７Ｈ），６．４１−６．９２（ｍ，６Ｈ），５．１２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９５−４．４７（ｍ，５Ｈ），３．３０−３．８７（ｍ，５Ｈ），２．６５−３．１８（ｍ，６Ｈ），２．１４−２．５０（ｍ，４Ｈ），０．９０−１．９８（ｍ，３１Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ １０６８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例６】
【００７１】
実施例３で得られたＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のＥＲ分解誘導活性及びアポトーシス促進活性を評価した。
【００７２】
乳癌細胞株ＭＣＦ−７は１０％ＦＢＳ／ＲＰＭＩ＋６０μｇ／ｍｌ ｋａｎａｍｙｃｉｎで培養した。細胞を播種して、翌日化合物を添加し、６時間後に細胞の写真を撮影した。ＥＲを含む各種タンパク質発現量の評価については、化合物反応後の細胞を１％ＳＤＳ、０．１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７）及び１０％Ｇｌｙｃｅｒｏｌで溶解して熱処理したのち、ＢＣＡ法によりタンパク質定量を行い、１０μｇ相当をＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離した。ＰＶＤＦ膜にトランスファーし、それぞれ対応する抗体と二次抗体を用いてタンパク質を検出した（図１及び図４）。アポトーシスの評価については、化合物反応後、位相差顕微鏡で細胞を観察し（図２）、及びＡｎｎｅｘｉｎＶ−ＦＩＴＣを含むバッファーと細胞を室温で５分間インキュベートし、細胞をメタノール固定して蛍光顕微鏡によりＡｎｎｅｘｉｎＶの細胞への結合を観察した（図３）。
【００７３】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、ＥＲを発現した乳癌細胞株ＭＣＦ−７において、ＥＲα及びＥＲβの分解を誘導し（図１）、アポトーシスによる細胞死を促進した（図２及び図３）。ＥＲを発現しない細胞Ｕ２ＯＳにおいては、細胞死の誘導はほとんど見られなかった。プロテアソーム阻害剤ＭＧ１３２を処理することで本発明化合物によるＥＲの分解は阻害され（図１）、細胞死は抑制された（図２）。タモキシフェン刺激において観察されるＡｋｔ，Ｅｒｋの活性化が、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）の刺激においては抑制されていた（図４）。本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物によるＥＲの分解により、これらの抗アポトーシス性シグナルが阻害され、細胞死を促進していることが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００７４】
上述したように、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、細胞内でユビキチンリガーゼ活性を有するｃＩＡＰ１とＥＲとを架橋し、ＥＲを特異的にユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導する。従って、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物をＥＲ分解誘導剤又は乳癌、子宮頚癌、卵巣癌等の予防及び治療剤として利用した場合極めて有用である。
【技術分野】
【０００１】
本発明はアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）リガンド−エストロゲン受容体（ＥＲ）リガンドハイブリッド化合物に関する。詳しくは、乳癌等の癌細胞に発現するＥＲを特異的に分解して、細胞死を誘導するＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
多くの乳癌の患者の組織において、ＥＲの発現上昇が認められ（例えば、非特許文献１参照）、これらの癌細胞はエストロゲン依存性の増殖を示すことが報告されている（例えば、非特許文献２及び３参照）。抗エストロゲン薬として頻用されるタモキシフェンは、乳癌組織等のＥＲに対してエストロゲンと競合的に結合し、ＥＲ依存性の遺伝子発現を抑制することで、細胞の増殖を抑制して、抗腫瘍効果を発揮する（例えば、非特許文献４および５参照）。しかし、タモキシフェンは、子宮癌組織においてエストロゲンと同様にＥＲに対するアゴニストとして作用し、子宮内膜癌のリスクを増大させることが知られている（例えば、非特許文献６および７参照）。さらに、タモキシフェンは、ＥＲとの結合を介してＡｋｔ等の細胞内シグナルカスケードを起動し、がん細胞のアポトーシスを阻害することが報告されている（例えば、非特許文献８及び９参照）。
【０００３】
一方、先に本発明者らは、タンパク質分解機構のユビキチン−プロテアソーム系を利用して、標的タンパク質を選択的に分解するプロテインノックダウン法を開発した（非特許文献１０〜１３参照）。即ち、生体内のタンパク質は、それを認識するユビキチンリガーゼ（Ｅ３）によってポリユビキチン化され、プロテアソームによって分解されるが、ユビキチンリガーゼ活性を持つｃＩＡＰ１のリガンドと標的タンパク質のリガンドを連結させた分子を用いることにより、ｃＩＡＰ１と標的タンパク質の人口複合体を形成させ、生体内のタンパク質分解機構と同様にして標的タンパク質をユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導するものである。本発明者らは、当該プロテインノックダウン法を用いて、実際にウベニメクスとオールトランスレチノイン酸を結合したハイブリッド化合物を合成して、当該ハイブリッド化合物が、レチノイン酸に結合するタンパク質、ＣＲＡＢＰ（ｃｅｌｌｕｌａｒ ｒｅｔｉｏｎｉｃ ａｃｉｄ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔａｉｎ）をユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導することを実証した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Frederik Holst, et al., "Estrogen receptor alpha (ESR1) gene amplification is ferquent in breast cancer", Nat Genet, 2007, 39, 655-660
【非特許文献２】S. F. Doisneau, et al., "Estrogen and antiestrogen regulation of cell cycle progression in breast cancer cells", Endocrine-Related Cancer, 2003, 10, 179-186
【非特許文献３】James S. Foster, et al., "Multifaceted Regulation of Cell Cycle Progression by Estrogen: Regulation of Cdk Inhibitors and Cdc25A Independent of Cyclin D1-Cdk4 Function", Mol. Cell. Biol., 2001, 21, 794-810
【非特許文献４】Bonnie J. Deroo, et al., "Estrogen receptors and human disease", J. Clin. Invest., 2006, 116(3), 561-570
【非特許文献５】Early Breast Cancer Trialists' Collaborative Group, "Tamoxifen for early breast cancer: an overview of the randomised trials", Lancet, 1998, 351, 1451-1467
【非特許文献６】Leslie Bernstein, et al., "Tamoxifen Therapy for Breast Cancer and Endometrial Cancer Risk", J. Natl. Cancer Inst., 1999, 91, 1654-1662
【非特許文献７】Yongfeng Shang, et al., "Molecular Determinants for the Tissue Specificity of SERMs", Science, 2002, 295, 2465-2468
【非特許文献８】Grazia Arpino, et al., "Crosstalk between the Estrogen Receptor and the HER Tyrosine Kinase Recoptor Family: Molecular Mechanism and Clinical Implications for Endocrine Therapy Resistance", Endocr. Rev., 2008, 29, 217-233
【非特許文献９】Sheng-Li Lin, et al., "ER-α36, a Variant of ER-α, Promotes Tomxifen Agonist Action in Endometrial Cancer Cells via the MAPK/ERK and PI3K/Akt Pathways", PLoS One, 2010, 5, e9013
【非特許文献１０】Keiko Sekine, et al., "Small Molecules Destabilize cIAP1 by Activating Auto-ubiquitylation", J. Biol. Chem., 2008, 283, 8961-8968
【非特許文献１１】Yukihiro Itoh, et al., "Protein Knockdown Using Methyl Bestatin -Ligand Hybrid Molecules: Design and Synthesis of Inducers of Ubiquitination-Mediated Degradation of Cellular Retinoic Acid-Binding Proteins", J. Am. Chem. Soc., 2010, 132, 5820-5826
【非特許文献１２】Keiichiro Okuhira, et al., "Specific degradation of CRABL-II via cIAP1-mediated ubiquitylation induced by hybrid molecules that crosslink cIAP1 and the target protein", FEBS Letters, 2011, 585, 1147-1152
【非特許文献１３】Yukihiro Itoh, et al., "Development of target protein-selective degradation inducer for protein knockdown", Bioorg. Med. Chem., 2011, 19, 3229-3241
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は上記従来技術の有する問題点に鑑みなされたものであり、その目的とするところは、新規な作用機序により乳癌等の癌細胞に発現するＥＲを特異的に分解して細胞死を誘導するＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物並びにそれを利用したＥＲ分解誘導剤及び乳癌、子宮頚癌又は卵巣癌の予防及び治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の上記目的は、下記の手段によって達成される。
【０００７】
（１）すなわち、本発明は、下記一般式
【化１】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とする、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物である。
【０００８】
（２）本発明はまた、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、（１）に記載のハイブリッド化合物である。
【０００９】
（３）本発明はまた、前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、（１）又は（２）に記載のハイブリッド化合物である。
【００１０】
（４）本発明はまた、前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、（１）〜（３）のいずれか１つに記載のハイブリッド化合物である。
【００１１】
（５）本発明はまた、前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式、
【化２】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、（１）〜（４）のいずれか１つに記載のハイブリッド化合物である。
【００１２】
（６）本発明はまた、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、（１）〜（５）のいずれか１つに記載のハイブリッド化合物である。
【００１３】
（７）また、本発明は、下記一般式
【化３】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されるアポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物又はその生理学的に許容される塩を有効成分とする、エストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１４】
（８）本発明はまた、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、（７）に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１５】
（９）本発明はまた、前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、（７）又は（８）に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１６】
（１０）本発明はまた、前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、（７）〜（９）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１７】
（１１）本発明はまた、前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式
【化４】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、（７）〜（１０）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１８】
（１２）本発明はまた、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物は、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、（７）〜（１１）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤である。
【００１９】
（１３）更に、本発明は、（７）〜（１２）のいずれか１つに記載のエストロゲン受容体分解誘導剤を含む乳癌、子宮頚癌又は卵巣癌の予防及び治療剤である。
【発明の効果】
【００２０】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、ＩＡＰに特異的に結合するＩＡＰリガンドとＥＲに特異的に結合するＥＲリガンドとがリンカーを介して結合された構造を有するので、細胞内でユビキチンリガーゼ活性を有するｃＩＡＰ１とＥＲとを架橋し、ＥＲを特異的にユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導する。従って、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を乳癌、子宮頚癌、卵巣癌等の患者に投与すれば、癌組織におけるＥＲの発現そのものを減少させ、癌細胞を自滅に導くことができ、ＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤として極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のＥＲ分解誘導活性の評価結果を示す図である。
【図２】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のアポトーシス促進活性の評価結果を示す図である。
【図３】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のアポトーシス促進活性の評価結果を示す図である。
【図４】本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のＥＲ分解誘導活性の評価結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下に、本発明の実施の形態を詳細に説明する。
【００２３】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、
【００２４】
下記一般式（Ｉ）
【化５】
（式中、Ｘは、ＩＡＰに特異的に結合するＩＡＰリガンドを表し、Ｙは、ＥＲに特異的に結合するＥＲリガンドを表し、Ｚは、前記ＩＡＰリガンド及び前記ＥＲリガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とするものである。
【００２５】
上記一般式（Ｉ）において、ＸのＩＡＰリガンドとしては、ＩＡＰに特異的に結合する化合物から誘導される１価の基であれば特に限定されるものではない。係るＩＡＰに特異的に結合する化合物の具体例としては、ウベニメクス（（２Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイルアミノ］−４−メチルペンタン酸）、ＭＶ−１（（Ｒ）−２−（（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパナミド］アセチル｝ピロリジン−２−カルボキサミド）−３，３−ジフェニルプロパン酸）若しくはＡＥＧ４０５９９（（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−３，３−ジメチル−１−オキソ−１−｛（Ｒ）−２−［（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−フェネチルアセトアミド）メチル］ピロリジン−１−イル｝ブタン−２−イル）−２−（メチルアミノ）プロパナミド）又はこれらの誘導体が挙げられ、これらの中ではウベニメクスが特に好適に利用される。
【００２６】
また、ＹのＥＲリガンドとしては、ＥＲに特異的に結合する化合物から誘導される１価の基であれば特に限定されるものではない。係るＥＲに特異的に結合する化合物の具体例としては、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニル−１−ブテニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン）、ラロキシフェン（［６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル］［４−（２−ピペリジン−１−イルエトキシ）フェニル］メタノン）、トレミフェン（２−［４−〔（Ｚ）−４−クロロ−１，２−ジフェニル−１−ブテニル〕フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン）、フルベストラント（７α−［９−［（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルスルフィニル）］ノニル］エストラ−１（１０），２，４−トリエン−３，１７β−ジオール）、ＩＣＩ１８２７８０（フルオロペンチルスルフィニル）ノニル］エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール）等のエストロゲン受容体阻害剤又はこれらの誘導体が挙げられ、これらの中ではタモキシフェンが特に好適に利用される。
【００２７】
更に、Ｚの低分子鎖状リンカーとしては、前記ＩＡＰリガンド及び前記ＥＲリガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する２価の基であれば特に限定されるものではない。係る低分子鎖状リンカーの具体例としては、下記一般式（II）
【化６】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示される２価の基が挙げられる。一般式（II)において、炭素数２〜１０のアルキレン基の具体例としては、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基、プロピレン基、エチルエチレン基、メチルトリメチレン基等が挙げられる。また、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基としては、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール等が挙げられる。更に、炭素数３〜１０のアミド基としては、アルキルアミド、アルキルスルホニルアミド等が挙げられる。
【００２８】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の具体例としては、下記式（III）
【化７】
で示される（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、下記式（IV）
【化８】
で示される（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、下記式（Ｖ）
【化９】
で示される７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、下記式（VI）
【化１０】
で示される（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド、下記式（VII）
【化１１】
で示される（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミド等が挙げられる。
【００２９】
次に、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の製造方法を、ＩＡＰリガンドがウベニメクス、ＥＲリガンドがタモキシフェンの場合を例にして説明する。即ち、下記反応式（VIII）
【化１２】
に示すように、ＥＲリガンド（タモキシフェン）のアミノ基とリンカーのカルボキシル基とを既知の方法で縮合反応させ、ＩＡＰリガンドのアミノ基上にリンカーを導入する。次いで、得られた反応生成物のリンカーのアミノ基とＩＡＰリガンド（ウベニメクス）の１位の水酸基とを既知の方法で縮合反応させ、目的のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を得る。なお、逆の順序で、先にＩＡＰリガンドにリンカーを縮合させ、次にＩＡＰリガンドと縮合させてもよい。
【００３０】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、ＩＡＰに特異的に結合するＩＡＰリガンドとＥＲに特異的に結合するＥＲリガンドとがリンカーを介して結合された構造を有する。従って、細胞内でユビキチンリガーゼ活性を有するｃＩＡＰ１とＥＲとを架橋し、ＥＲを特異的にユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導する。故に、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を乳癌、子宮頚癌、卵巣癌等の患者に投与すれば、癌組織におけるＥＲの発現そのものを減少させ、癌細胞を自滅に導くことができ、ＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤として極めて有用である。
【００３１】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物をＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤とする場合、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を単体で、または錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤、カプセル剤等として患者に経口投与できる。また、注射剤として静脈内、筋肉内、皮内、皮下、腹腔内、動脈内、脊髄腔内等に投与できる。さらに、座薬として直腸内に投与しても良いし、ペレットによる埋め込みも可能である。点眼剤、点鼻剤、噴霧剤、吸入剤等として直接患部およびその周辺部位に局所的に投与することもできるし、軟膏、クリーム、粉状もしくは液状塗布剤、貼付剤等の外用剤として経皮的に投与しても良い。上述したうち、好ましい製剤形態や投与形態等は、患者の年齢、性別、体質、症状、処置時期等に応じて、医師によって適宜選択される。
【００３２】
本剤を錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤等の固形製剤とする場合には、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を、常法に従って適当な添加剤、例えば、乳糖、ショ糖、マンニット、トウモロコシデンプン、合成もしくは天然ガム、結晶セルロース等の賦形剤、デンプン、セルロース誘導体、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボシキメチルセルーロースカルシウム、カルボシキメチルセルーロースナトリウム、デンプン、コーンスターチ、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム等の滑沢剤、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム等の充填剤または希釈剤等と適宜混合して製造することができる。錠剤等は、必要に応じて適当な被覆用基剤を用いて、糖衣、ゼラチン、腸溶被覆、フイルムコーティング等を施しても良い。
【００３３】
本剤を注射剤、点眼剤、点鼻剤、吸入剤、噴霧剤、ローション剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の液状製剤とする場合には、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を、精製水、リン酸緩衝液等の適当な緩衝液、生理的食塩水、リンゲル溶液、ロック溶液等の生理的塩類溶液、カカオバター、ゴマ油、オリーブ油等の植物油、鉱油、高級アルコール、高級脂肪酸、エタノール等の有機溶媒等に溶解して、必要に応じてコレステロール等の乳化剤、アラビアゴム等の懸濁剤、分散助剤、浸潤剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油系、ポリエチレングリコール系等の界面活性剤、リン酸ナトリウム等の溶解補助剤、糖、糖アルコール、アルブミン等の安定化剤、パラベン等の保存剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖、グリセリン等の等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、吸着防止剤、保湿剤、酸化防止剤、着色剤、甘味料、フレーバー、芳香物質等を適宜添加することにより、滅菌された水溶液、非水溶液、懸濁液、リポソームまたはエマルジョン等として調整できる。この際、注射剤は、生理学的なｐＨ、好ましくは６〜８の範囲内のｐＨを有することが好ましい。
【００３４】
本剤を、ローション剤、クリーム剤、軟膏等の半固形製剤とするには、前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物を脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、パラフィン、蝋、硬膏剤、樹脂、プラスチック、グリコール類、高級アルコール、グリセリン、水、乳化剤、懸濁化剤等と適宜混和することにより製造することができる。
【００３５】
本発明のＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤に含まれる前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の含有量は、投与形態、重篤度や目的とする投与量などによって様々であるが、一般的には、製剤の全重量に対して０．１〜９０重量％、好ましくは５〜５０重量％である。
【００３６】
また、本発明のＥＲ分解誘導剤又は乳癌等の予防及び治療剤の投与量は、患者の年齢、体重及び症状、目的とする投与形態や方法、治療効果、および処置期間等によって異なり、正確な量は医師により決定されるものであるが、通常、成人に対し１日当り前記ＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物の投与量換算で、経口投与の場合は１０〜１０００ｍｇを、静脈内投与の場合は５〜５００ｍｇを、１回または数回に分けて投与する。
【００３７】
次に、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物について、実施例を示して更に詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【実施例１】
【００３８】
【化１３】
【００３９】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルカルバメートの合成
【００４０】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で３時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルカルバメートが収率８８％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０６−７．２４（ｍ，７Ｈ），６．７１−６．８３（ｍ，４Ｈ），６．４７−６．５０（ｍ，２Ｈ），５．３３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），３．９５（ｍ，１Ｈ），３．３８−３．７６（ｍ，５Ｈ），３．０２−３．３９（ｍ，３Ｈ），２．４４−２．９５（ｍ，４Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），１．２４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ５６７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００４１】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートの合成
【００４２】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートが収率８２％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．００−７．５２（ｍ，１５Ｈ），６．６７−６．８３（ｍ，４Ｈ），６．４５−６．４９（ｍ，２Ｈ），５．６０（ｂｒｓ，１Ｈ），５．２２（ｍ，１Ｈ），４．４０（ｍ，１Ｈ），３．８８−４．１３（ｍ，４Ｈ），３．４３−３．７０（ｍ，４Ｈ），２．８７−３．０７（ｍ，５Ｈ），２．４１−２．５０（ｍ，４Ｈ），１．５６−１．６２（ｍ，２Ｈ），１．２４−１．３６（ｍ，１０Ｈ），０．８７−０．９４（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８５７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００４３】
工程３：（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩の合成
【００４４】
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で２４時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オキソプロピル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．００−７．３４（ｍ，１２Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ），６．７４−６．７６（ｍ，２Ｈ），６．６３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５４（ｍ，１Ｈ），６．３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２９（ｍ，１Ｈ），４．０９−４．１２（ｍ，２Ｈ），３．９４（ｍ，１Ｈ），３．４０−３．７９（ｍ，５Ｈ），２．９０−３．１２（ｍ，５Ｈ），２．４４−２．８０（ｍ，４Ｈ），１．５９−１．６６（ｍ，３Ｈ），０．８８−０．９３（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ７５７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例２】
【００４５】
【化１４】
【００４６】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルカルバメートの合成
【００４７】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ペンタン酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で２４時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルカルバメートが収率９０％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．４０−７．１０（ｍ，７Ｈ），６．６７−６．８５（ｍ，４Ｈ），６．４９−６．５１（ｍ，２Ｈ），４．７６（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．６０−３．７６（ｍ，２Ｈ），２．９４−３．１５（ｍ，５Ｈ），２．２６−２．５２（ｍ，４Ｈ），１．４８−１．６７（ｍ，５Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），０．９２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ５９５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００４８】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートの合成
【００４９】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートが収率８６％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０５−７．２７（ｍ，１０Ｈ），６．６７−６．８５（ｍ，６Ｈ），６．４７−６．５１（ｍ，２Ｈ），５．７７（ｂｒｓ，１Ｈ），５．０７（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｍ，１Ｈ），４．１２−４．１８（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｍ，１Ｈ），３．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），３．５９（ｂｒｓ，１Ｈ），３．３１（ｍ，１Ｈ），２．９０−３．１４（ｍ，５Ｈ），２．１７−２．５０（ｍ，４Ｈ），１．３６−１．８０（ｍ，２１Ｈ），０．９２−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８８５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００５０】
工程３：（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩の合成
【００５１】
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で２４時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オキソペンチル｝−４−メチルペンタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．３０−７．３５（ｍ，６Ｈ），７．０９−７．３１（ｍ，５Ｈ），７．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｍ，１Ｈ），６．７４−６．７６（ｍ，２Ｈ），６．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５２（ｍ，１Ｈ），６．３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｍ，１Ｈ），３．７７−４．１７（ｍ，３Ｈ），３．３０−３．８０（ｍ，３Ｈ），２．９０−３．１７（ｍ，７Ｈ），２．３２−２．４７（ｍ，４Ｈ），１．５２−１．８６（ｍ，７Ｈ），０．９０−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ７８５［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例３】
【００５２】
【化１５】
【００５３】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル７−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソへプチルカルバメートの合成
【００５４】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、７−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ヘプタン酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル７−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソへプチルカルバメートが収率７６％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０４−７．１７（ｍ，７Ｈ），６．７０−６．８６（ｍ，４Ｈ），６．４８−６．５２（ｍ，２Ｈ），４．６０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．７５（ｍ，２Ｈ），２．９５−３．１５（ｍ，５Ｈ），２．２３−２．５０（ｍ，４Ｈ），１．４２−１．６３（ｍ，１８Ｈ），０．９４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ６２３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００５５】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートの合成
【００５６】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル７−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソへプチルカルバメート（０．３ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．４ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．４ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．４ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメートが収率７７％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０３−７．３６（ｍ，１２Ｈ），６．６６−６．８３（ｍ，５Ｈ），６．４６−６．４９（ｍ，２Ｈ），５．８９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４８（ｍ，１Ｈ），３．９７−４．１１（ｍ，３Ｈ），３．５６−３．７２（ｍ，２Ｈ），２．９１−３．２２（ｍ，６Ｈ），２．４４−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．０７−２．２０（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．６３（ｍ，２４Ｈ），０．８７−０．９３（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ９１４［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００５７】
工程３：７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−４−メチルペンタナミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタナミド塩酸塩の合成
【００５８】
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で１２時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−４−メチルペンタナミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝６．９１−７．３５（ｍ，１３Ｈ），６．４０−６．７６（ｍ，５Ｈ），３．９８−４．３４（ｍ，４Ｈ），３．６６−３．８３（ｍ，３Ｈ），２．９１−３．１８（ｍ，７Ｈ），２．３０−２．４７（ｍ，４Ｈ），１．２８−１．８４（ｍ，１１Ｈ），０．８９−０．９９（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８１３［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例４】
【００５９】
【化１６】
【００６０】
工程１：（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−｛２−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチルカルバメートの合成
【００６１】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−エンドキシフェン（０．５ｍｍｏｌ）、２−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エトキシ］酢酸（０．６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）にて精製すると、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−｛２−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチルカルバメートが収率８７％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０２−７．３１（ｍ，７Ｈ），６．７６−６．８３（ｍ，４Ｈ），６．４３−６．５６（ｍ，２Ｈ），５．０８（ｂｒｓ，１Ｈ），３．９８−４．４０（ｍ，４Ｈ），３．５７−３．８０（ｍ，４Ｈ），３．３１−３．４１（ｍ，３Ｈ），２．８２−３．１２（ｍ，３Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ５９７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００６２】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１４Ｓ，１５Ｒ）−１４−ヒドロキシ−１−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝−１１−イソブチル−３−メチル−４，１０，１３−トリオキソ−１６−フェニル−６−オキサ−３，９，１２−トリアザヘキサデカン−１５−イルカルバメートの合成
【００６３】
窒素雰囲気下、（Ｅ／Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−｛２−［（２−｛４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１時間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド）−４−メチルペンタン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：メタノール＝２０：１）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１４Ｓ，１５Ｒ）−１４−ヒドロキシ−１−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝−１１−イソブチル−３−メチル−４，１０，１３−トリオキソ−１６−フェニル−６−オキサ−３，９，１２−トリアザヘキサデカン−１５−イルカルバメートが収率７１％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．７６（ｍ，１Ｈ），６．９５−７．２６（ｍ，１３Ｈ），６．６６−６．８２（ｍ，４Ｈ），６．４５−６．４８（ｍ，２Ｈ），５．６７（ｍ，１Ｈ），５．１３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｍ，１Ｈ），３．９５−４．４３（ｍ，７Ｈ），３．２６−３．７０（ｍ，６Ｈ），２．８４−３．０４（ｍ，５Ｈ），２．４６−２．７３（ｍ，２Ｈ），１．２８−１．８８（ｍ，１２Ｈ），０．９２−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ８８７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００６４】
工程３：（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタナミド塩酸塩の合成
【００６５】
ｔｅｒｔ−ブチル（１１Ｓ，１４Ｓ，１５Ｒ）−１４−ヒドロキシ−１−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝−１１−イソブチル−３−メチル−４，１０，１３−トリオキソ−１６−フェニル−６−オキサ−３，９，１２−トリアザヘキサデカン−１５−イルカルバメート（０．２ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．１ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で２４時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタナミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オキソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタナミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．２５−７．３８（ｍ，７Ｈ），６．９１−７．１６（ｍ，６Ｈ），６．７５−６．７７（ｍ，２Ｈ），６．５５−６．６３（ｍ，２Ｈ），６．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．９２−４．３７（ｍ，６Ｈ），３．５１−３．８３（ｍ，５Ｈ），３．３６−３．４０（ｍ，２Ｈ），２．９２−３．１３（ｍ，５Ｈ），２．４３−２．５４（ｍ，２Ｈ），１．５９−１．８４（ｍ，３Ｈ），０．９０−０．９８（ｍ，９Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ ７８７［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例５】
【００６６】
【化１７】
【００６７】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（Ｒ）−２−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ｝−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバメートの合成
【００６８】
窒素雰囲気下、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）−４−オキソ−１−フェニルブタン−２−イルカルバメート（０．４ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温で１時間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、（Ｒ）−２−［（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−｛（Ｓ）−２−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ］プロパナミド｝−２−シクロヘキシルアセチル）ピロリジン−２−カルボキサミド］−３，３−ジフェニルプロパン酸（０．５ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ，０．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（ＤＩＰＥＡ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応後、飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えクロロホルム（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥後、減圧濃縮し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル：メタノール＝５０：１）にて精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（Ｒ）−２−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ｝−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバメートが収率３３％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ＝７．０５−７．３０（ｍ，１７Ｈ），６．７０−６．８４（ｍ，４Ｈ），６．３１−６．５２（ｍ，３Ｈ），６．００（ｂｒｓ，１Ｈ），５．２０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．６２−４．７６（ｍ，２Ｈ），４．３９−４．４１（ｍ，２Ｈ），３．６２−４．１４（ｍ，５Ｈ），２．７７−３．３１（ｍ，９Ｈ），２．２４−２．５４（ｍ，４Ｈ），０．９１−１．９５（ｍ，４０Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ １１６８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【００６９】
工程２：（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパナミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩の合成
【００７０】
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−１−｛（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（Ｒ）−２−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ｝−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバメート（０．１ｍｍｏｌ）、および６Ｍ塩酸（０．０５ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。室温で１２時間撹拌した後、反応液を濃縮することで、（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパナミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オキソヘプチルアミノ｝−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩が収率９９％で得られた。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．００−７．４４（ｍ，１７Ｈ），６．４１−６．９２（ｍ，６Ｈ），５．１２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９５−４．４７（ｍ，５Ｈ），３．３０−３．８７（ｍ，５Ｈ），２．６５−３．１８（ｍ，６Ｈ），２．１４−２．５０（ｍ，４Ｈ），０．９０−１．９８（ｍ，３１Ｈ）
［ＥＳＩ（＋）−ＭＳ］：ｍ／ｚ １０６８［Ｍ＋Ｎａ］＋
【実施例６】
【００７１】
実施例３で得られたＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物のＥＲ分解誘導活性及びアポトーシス促進活性を評価した。
【００７２】
乳癌細胞株ＭＣＦ−７は１０％ＦＢＳ／ＲＰＭＩ＋６０μｇ／ｍｌ ｋａｎａｍｙｃｉｎで培養した。細胞を播種して、翌日化合物を添加し、６時間後に細胞の写真を撮影した。ＥＲを含む各種タンパク質発現量の評価については、化合物反応後の細胞を１％ＳＤＳ、０．１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７）及び１０％Ｇｌｙｃｅｒｏｌで溶解して熱処理したのち、ＢＣＡ法によりタンパク質定量を行い、１０μｇ相当をＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離した。ＰＶＤＦ膜にトランスファーし、それぞれ対応する抗体と二次抗体を用いてタンパク質を検出した（図１及び図４）。アポトーシスの評価については、化合物反応後、位相差顕微鏡で細胞を観察し（図２）、及びＡｎｎｅｘｉｎＶ−ＦＩＴＣを含むバッファーと細胞を室温で５分間インキュベートし、細胞をメタノール固定して蛍光顕微鏡によりＡｎｎｅｘｉｎＶの細胞への結合を観察した（図３）。
【００７３】
本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、ＥＲを発現した乳癌細胞株ＭＣＦ−７において、ＥＲα及びＥＲβの分解を誘導し（図１）、アポトーシスによる細胞死を促進した（図２及び図３）。ＥＲを発現しない細胞Ｕ２ＯＳにおいては、細胞死の誘導はほとんど見られなかった。プロテアソーム阻害剤ＭＧ１３２を処理することで本発明化合物によるＥＲの分解は阻害され（図１）、細胞死は抑制された（図２）。タモキシフェン刺激において観察されるＡｋｔ，Ｅｒｋの活性化が、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）の刺激においては抑制されていた（図４）。本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物によるＥＲの分解により、これらの抗アポトーシス性シグナルが阻害され、細胞死を促進していることが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００７４】
上述したように、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物は、細胞内でユビキチンリガーゼ活性を有するｃＩＡＰ１とＥＲとを架橋し、ＥＲを特異的にユビキチン化してプロテアソームによる分解を誘導する。従って、本発明のＩＡＰリガンド−ＥＲリガンドハイブリッド化合物をＥＲ分解誘導剤又は乳癌、子宮頚癌、卵巣癌等の予防及び治療剤として利用した場合極めて有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式
【化１８】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とする、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物。
【請求項２】
前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、請求項１に記載のハイブリッド化合物。
【請求項３】
前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、請求項１又は２に記載のハイブリッド化合物。
【請求項４】
前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、請求項１〜３のいずれか１項に記載のハイブリッド化合物。
【請求項５】
前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式
【化１９】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載のハイブリッド化合物。
【請求項６】
（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のハイブリッド化合物。
【請求項７】
下記一般式
【化２０】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されるアポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物又はその生理学的に許容される塩を有効成分とする、エストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項８】
前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、請求項７に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項９】
前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、請求項７又は８に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１０】
前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、請求項７〜９のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１１】
前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式
【化２１】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、請求項７〜１０のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１２】
アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物は、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、請求項７〜１１のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１３】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤を含む乳癌、子宮頚癌又は卵巣癌の予防及び治療剤
【請求項１】
下記一般式
【化１８】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されることを特徴とする、アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物。
【請求項２】
前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、請求項１に記載のハイブリッド化合物。
【請求項３】
前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、請求項１又は２に記載のハイブリッド化合物。
【請求項４】
前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、請求項１〜３のいずれか１項に記載のハイブリッド化合物。
【請求項５】
前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式
【化１９】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載のハイブリッド化合物。
【請求項６】
（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のハイブリッド化合物。
【請求項７】
下記一般式
【化２０】
（式中、Ｘは、アポトーシス阻害タンパク質に特異的に結合するアポトーシス阻害タンパク質リガンドを表し、Ｙは、エストロゲン受容体に特異的に結合するエストロゲン受容体リガンドを表し、Ｚは、前記アポトーシス阻害タンパク質リガンド及び前記エストロゲン受容体リガンドの前記特異的結合性を阻害せずに両者を結合する低分子鎖状リンカーを表す）で示されるアポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物又はその生理学的に許容される塩を有効成分とする、エストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項８】
前記アポトーシス阻害タンパク質リガンドは、ウベニメクス、ＭＶ−１若しくはＡＥＧ４０５９９又はこれらの誘導体からなる群より選択される化合物から誘導される１価の基である、請求項７に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項９】
前記エストロゲン受容体リガンドは、エストロゲン受容体阻害剤から誘導される１価の基である、請求項７又は８に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１０】
前記エストロゲン受容体阻害剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、フルベストラント若しくはＩＣＩ１８２７８０又はこれらの誘導体である、請求項７〜９のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１１】
前記低分子鎖状リンカーは、下記一般式
【化２１】
（式中、Ｒは、それぞれ置換基を有してもよい、炭素数２〜１０のアルキレン基、炭素数２〜１０のモノエーテル基若しくはポリエーテル基又は炭素数３〜１０のアミド基を表す）で示されることを特徴とする、請求項７〜１０のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１２】
アポトーシス阻害タンパク質リガンド−エストロゲン受容体リガンドハイブリッド化合物は、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛３−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−３−オクソプロビル｝−４−メチルペンタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−｛５−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−５−オクソペンチル｝−４−メチルペンタンアミド、７−｛（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−４−メチルペンタンアミド｝−Ｎ−（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）−Ｎ−メチルヘプタンアミド、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタンアミド］−Ｎ−（２−｛２−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−２−オクソエトキシ｝エチル）−４−メチルペンタンアミド又は（Ｒ）−１−｛（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（Ｓ）−２−（メチルアミノ）プロパンアミド］アセチル｝−Ｎ−（（Ｓ）−１−｛７−［（２−｛４−［（Ｅ／Ｚ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニルブト−１−エニル］フェノキシ｝エチル）（メチル）アミノ］−７−オクソヘプチルアミノ｝−１−オクソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イル）ピロリジン−２−カルボアミドである、請求項７〜１１のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤。
【請求項１３】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載のエストロゲン受容体分解誘導剤を含む乳癌、子宮頚癌又は卵巣癌の予防及び治療剤
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２０１３−５６８３７（Ｐ２０１３−５６８３７Ａ）
【公開日】平成２５年３月２８日（２０１３．３．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１９５０８１（Ｐ２０１１−１９５０８１）
【出願日】平成２３年９月７日（２０１１．９．７）
【出願人】（８０３００００５６）財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 (341)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年３月２８日（２０１３．３．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年９月７日（２０１１．９．７）
【出願人】（８０３００００５６）財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 (341)
【Ｆターム（参考）】
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