アムラ（別名フィランタスエンブリカ）抽出物の経口投与による日光に誘発される（ｓｕｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ）損傷からの皮膚の保護方法
本発明は日焼け防止に関し、さらに詳しくはアムラ（Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）（別名フィランタスエンブリカ）植物抽出物の経口投与による皮膚の日焼け防止の方法、およびその目的のための適当な投与形態に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は日焼け防止に関し、さらに詳しくは、アムラ（Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）（別名フィランタスエンブリカ（Ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ ｅｍｂｌｉｃａ））植物の抽出物の経口投与による皮膚の日焼け防止の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚やその他の様々なヒト組織の主な細胞外基質成分は、密接に関係しているが、遺伝的には区別されるタンパク質のスーパーファミリーであるコラーゲンである。遺伝的に区別されるコラーゲン型はそれぞれ、皮膚内の区画配置の中で重要な機能的役割を果たしている。
【０００３】
皮膚の外因性の老化には、皮膚への多くの環境的侵襲の蓄積の結果である諸変化が含まれる。これらの侵襲のうちで最も重要なのは、明らかに長時間の日光曝露である。コラーゲンの量と構造、皮膚の弾力性および伸展性の変化は、光で損傷を受けた皮膚においては助長される。最近の研究によれば、皮膚のコラーゲンの減少は、外因性の光損傷を受けた皮膚の方が内因性の老化した皮膚よりも大きいことが示唆されている。
【０００４】
光化学作用によって損傷を受けた皮膚（太陽光線の化学作用によって損傷を受けた皮膚）においては、鉄含有量が非常に増加するため、高度反応性酸素種（ＲＯＳ：ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ）の産生が促され、引き続く組織損傷および長期的な結果として皮膚の癌や早期老化等がもたらされる。この病的分解に関与するＵＶ誘導性遺伝子にはいくつかのプロテアーゼ類があり、その中でもマトリクス分解性メタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）はコラーゲンなどの結合組織化合物の分解に寄与し、それによってしわの形成、弾力の喪失を引き起こし、皮膚癌の侵入および転移を促進する。ＵＶ曝露による細胞レベルでの鉄貯蔵タンパク質からの鉄の放出は、酸化的ストレスの主要な原因とみなされている。
【０００５】
日光曝露は皮膚の早期老化を引き起こす。皮膚の早期老化はスジ、しわ、シミ、ソバカス、乾燥および皮膚の色調ムラとして現れる。光老化はまたコラーゲンを破壊し、そのため皮膚の弾力性および堅固さが低下する。これらの兆候は皮膚が損傷していることを示し、気になることであるが、個人の容貌をも衰えさせ、多くの場合、実際よりもずっと年取ったように見える。光老化の大部分は顔、首、胸、手、腕の皮膚など毎日露出されていて、したがって目に見える皮膚で起こるので、これはそれ自体、特に女性には悩ましいこととなる可能性がある。クリーム、ローションおよび化粧品は問題点を覆い隠すことを試みることはできるが光老化によって引き起こされた損傷を逆戻りさせることはできない。本当に必要なのは、内部から皮膚を養い、活気を与えることによって、日光の皮膚損傷作用を保護し、逆戻りさせるのを助ける製品である。現在までのところ、本願発明に至るまではそのような製品は存在しない。
【０００６】
紫外線（ＵＶＲ）で誘発された炎症反応はＵＶＲ依存性のＲＯＳの増加やＵＶＲ依存性の皮膚の酸化損傷の大部分を説明するのに提起された有力な機序の１つである。加えて、炎症反応を促進し、レドックス調節された転写因子ＮＦ−kＢは、ヒトの皮膚の中でＵＶＲによって開始されるシグナル伝達の間に標的とされる主要な分子の１つとして同定されている。その結果、ＵＶＲは、５’隣接領域に核因子−kＢ（ＮＦ−kＢ）結合部位を含む、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１α（ＩＬ−１α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）などの広範な炎症反応促進遺伝子の発現を刺激する。
【０００７】
炎症反応は、ＲＯＳ濃度の上昇を介してＵＶＲによって誘起される酸化的ストレスおよび皮膚における損傷に重大な役割を演じるので、抗炎症性を有する抗酸化剤はＵＶＲの損傷作用を和らげると考えられている。
【０００８】
例えば、Ｇｈｏｓａｌ，Ｓ．は、米国特許第６，１２４，２６８号において、アムラ植物の抽出によって得た天然抗酸化剤ブレンド物について記載しており、それはスプレーローション、水性ゲル、またはクリームとして適用すれば日射遮蔽剤としてユーザの皮膚に対して使用することができる。この特許は記載抽出物の抗酸化剤としての特性を生かすために、例えばビタミンとの経口投与可能な組成物についても記載しているが、そういった組成物が日射による損傷から皮膚を防御できるとの示唆はない。一方、Ｌｏｒｅｎｚ，Ｒ．は、米国特許第６，４３３，０２５号においてアスタキサンチンの経口投与によって日光皮膚炎を遅延または防止する方法を開示している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、本発明の目的は、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物組成物の経口投与による、ＵＶＲ誘起の紅斑に対して皮膚の日焼けを防止する方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
ここで見いだされたことは、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)植物の抽出物をベースとする抗酸化剤組成物は、ユーザによる経口摂取によって、有効な皮膚の日焼け防止を提供しうるということである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明における抗酸化剤組成物は、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物、例えば米国特許第６，１２４，２１８号のもの、および好ましくは低分子量（＜１０００）の加水分解可能なタンニン類、エンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ａ、エンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ｂ、ペダンクラーギン（Ｐｅｄｕｎｃｕｌａｇｉｎ）およびペニグルコニン（Ｐｕｎｉｇｌｕｃｏｎｉｎ）を適切には４０％を越えて、好ましくは５０〜８０％（ｗ／ｗ）含み、総フラボノイドを１重量％未満、好ましくは０．６％未満の低濃度しか含まない標準抽出物である。この標準抽出物はＧｈｏｓａｌによって記載された抽出物とは異なる。標準抽出物中のこの総フラボノイド濃度では組成物の好ましい優雅なオフホワイト乃至黄色の色を損なうことはない。これに対して、市販の競合製品は非常に高濃度の総フラボノイドを有しており、かなり暗い色を示す。また、フラボノイド類であるルチン（３’，４’，５’，７−テトラヒドロキシ−フラボン−３−０−ラムノグルコシド）の本発明の標準抽出物中の望ましい濃度は１．０％未満であり、０．０１％未満が好ましく、０．００１〜０．０１％の値が特に好ましい。最も好ましい成分濃度は全乾燥抽出物の重量百分率で以下の通りである：
【００１２】
【表１】
【００１３】
標準組成物におけるこれらの好ましい値からの百分率の平均偏差は以下のようになる可能性がある。
【００１４】
【表２】
【００１５】
本発明の好ましい抗酸化剤組成物はアセトニトリル／水／リン酸（２０／８０／１）、または他の溶媒組成の溶媒系を用いて、逆相カラムクロマトグラフィーまたはＨＰＬＣで総フラボノイドを除去することによって得ることができる。その際フラボノイドは、低分子量のタンニン類よりも先に溶離してくる。また、産地を選択することによって、フィランタスエンブリカの実の抽出物は、総フラボノイド濃度が実質的に低濃度（＜１．０％）となる可能性がある。さらに特に、東インドのある地域から１１月〜２月に集めた中程度の大きさの実は、水抽出および乾燥後、総フラボノイド含量が所望の低い粉末として好ましい抗酸化剤組成物を得ることができることが観察されている。したがって、抽出物の総フラボノイド含量を分析し、所望の総フラボノイド含量の低い抽出物を選択することにより、所望の標準抽出物を再現性のあるやり方で調製することが可能である。
【００１６】
本発明の明細書においては、「フラボノイド類」という用語にはＵＶスペクトルデータにより分析したとき３５０ｎｍに極大を示す化合物のファミリーを含む。フラボノイド類の例には、フラボノール類およびフラボン類が含まれるが、それらには限らない。そのような化学種には上述のルチンがある。
【００１７】
本発明の好ましい実施形態においては、フィランタスエンブリカの実質的に水溶性の（９５重量％以上）抽出物はポリマー状タンニンを５重量％未満しか含まず、実質的に黒いものを含まず、分子量１，０００未満の生体活性のある、低分子量で加水分解可能なタンニンが高濃度例えば７５重量％以上であるようなものが使用される。この抽出物はオリゴマーおよびポリマーのタンニンを除去する方法によって得ることができる。適当な方法には以下の段階が含まれる。１）植物からの元の抽出物から、あるいはその抽出物を処理した後（例えば乾燥段階の後）に得られる粉末化組成物の懸濁によって得られる、フィランタスエンブリカの抽出物を準備する、２）必要な場合、例えば濾過助剤を使用する濾過によって水溶性成分から、黒い小粒および／またはその前駆体および／またはポリマー状タンニンを物理的に分離する、３）所望であれば、得られたアムラの組成物を豊富に含む水溶液を濃縮して、例えば乾燥粉末にする。
【００１８】
本発明の抗酸化剤組成物は、皮膚防御の独特の４つの特徴を提供するという点で真に革新的である。
【００１９】
・ 酸化促進活性を有しない。
【００２０】
・ コラゲナーゼおよびストロメリシン−１活性を阻害する。
【００２１】
・ 鉄および銅のキレート化活性。
【００２２】
酸化促進活性を有しない：酸化作用を調節する、すなわち減ずるために、その皮膚に対する有害な影響を阻止するとはいわないまでも、皮膚を光損傷から守る目的で、多様な抗酸化剤を使用することが可能である。一般的に抗酸化剤を使用することが勧められる場合、これらの化合物は抗酸化剤として機能するだけでなく、特に鉄および銅のような遷移金属の存在下では、（本質的には）酸化促進作用も有しているということは、しばしば無視されてきた。紫外線が当たると鉄貯蔵タンパク質であるフェリチンから鉄が遊離することが、主要な酸化的ストレスの原因であるとされている。その結果、潜在的に有害な遊離の鉄が細胞内に放出されると、光による過酸化の損傷効果を明らかに悪化させ、紫外線に曝された後の皮膚の可逆的損傷にも退行的損傷にも中心的な重要性を持っていると考えられる。ヒトの表皮の鉄含量は日光に曝されたエリアでは曝されない部位よりも３倍も多いということが分かっている。鉄はフェントン（Ｆｅｎｔｏｎ）反応と呼ばれる、反応性酸素化学種との一連の反応によりその毒性を発揮し、生体分子に対して結果として、損傷をもたらす毒性の強いヒドロキシルラジカルを発生させる。ビタミンＣ、ビタミンＥ、プロアントシアニジン類（マツおよびブドウより）、超酸化物不均化酵素およびグルタチオン等の周知の抗酸化剤が酸化促進活性を示すのに対して、本発明の抗酸化剤は、遷移金属に誘起される酸化促進活性をまったく持たない。
【００２３】
コラゲナーゼ活性の阻害：本発明の抗酸化剤は、コラーゲンを消化し、したがってコラーゲンを分解するコラゲナーゼ活性（コラゲナーゼはＭＭＰの一種である）を阻害するという点で特異である。ＵＶ曝露は、老化の目に見える兆候に寄与するコラゲナーゼ酵素の発現を増大させる傾向がある。本発明の抗酸化剤はこの酵素活性を阻止することができ、コラーゲンの破壊を減少させる。文献データによれば、既存のコラーゲンを保護する方が、コラーゲンの産生を活性化するよりも重要である（ＥＦ ＢｅｒｎｓｔｅｉｎおよびＪ Ｕｉｔｔａ、Ｃｌｉｎｉｃｓ ｉｎ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ、１４、１４３〜１５１、１９９６）。
【００２４】
ストロメリシン−１活性の阻害：ストロメリシン−１は細胞外基質の様々なプロテオグリカン成分やフィブロネクチンおよびラミニンを分解する際、コラゲナーゼよりもはるかに広い基質特異性を有する。ＵＶ曝露は、老化の目に見える兆候に寄与するストロメリシン−１酵素の発現を増大させる傾向がある。本発明の抗酸化剤はこの酵素活性を阻止することができ、それによって細胞外基質タンパク質の破壊を減少させる。
【００２５】
鉄および銅のキレート化活性：鉄はすべての生細胞にとって主要な成長因子である。体内の鉄の大部分は血流中にある。しかし、その循環の中に入る鉄がすべてヘモグロビンによって運ばれているわけではない。鉄が「遊離の鉄」と呼ばれているタンパク質に結合しない状態で血流中で循環すると、大規模破壊をもたらし、酸化的ストレスを促進することがある。脂肪組織内で起こる鉄によって引き起こされる酸化は脂質過酸化と呼ばれる。例えば、脳および神経系のニューロン（神経細胞）はミエリン（ｍｙｅｌｉｎ）と呼ばれる脂肪に裏打ちされており、非結合鉄濃度が高すぎると非常に破壊されやすい。
【００２６】
本発明の抗酸化剤は非常に効率的な鉄および銅のキレート化剤である。鉄および銅は、早期老化や皮膚への光損傷を引き起こすコラーゲンの破壊およびフリーラジカル損傷において主要な役割を果たすものである。鉄の還元電位をＨ2Ｏ2との反応が起こらない程度に変更するか、あるいはＨ2Ｏ2が結合するのに使われる鉄の部位をブロックすると、遷移金属によって引き起こされる酸化を止める解決策となるかもしれない。これら２つの原理は皮膚の手入れ用の抗酸化機能を持ったキレート化剤の設計上重要である。本発明の抗酸化剤は理想的な抗酸化剤の特質をすべて有しているが、Ｆｅ3+およびＣｕ2+に対する卓越したキレート化特性を有するため、遷移金属によって引き起こされる酸化促進活性を有しておらず、そのため、皮膚が紫外線に曝されたときに最も著しく、ヒドロキシルラジカルの発生および皮膚に対する有害な影響を排除する。
【００２７】
カスケード効果：本発明の抗酸化剤は、特異な「カスケード効果」を示す抗酸化剤の非常に小さなグループの１つである。このカスケード効果は、活性を長期間にわたって保てるように活性形態を連続的に再循環させることにより、フリーラジカル除去活性を強めている。大部分の抗酸化剤は活性な役割から不活性な役割に移行するのに対して、本発明の抗酸化剤は多段階の抗酸化化合物のカスケードを使用しており、その結果として全体として特異な抗酸化能力の延長がもたらされている。
【００２８】
本発明のさらなる実施形態は、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物を含むことを特徴とする経口投与に適した投与形態である。
【００２９】
前記投与形態は、経口投与等に適した賦形剤を含むのが好ましい。この投与形態は錠剤またはカプセルまたはエリキシル剤または懸濁剤またはドリンク剤とすることができる。
【００３０】
前記投与形態は皮膚の光損傷の徴候を遅らせ、防御し、逆行させることのできる他の成分を含んでいてもよい。
【００３１】
栄養補助剤は意図する用途によって変わる多くの形態をとる。追加のビタミン、ミネラルまたは他の食品群の入った飲食物を供給するのに、液剤、丸薬または錠剤および菓子バーの形態が使用されてきた。タンパク質補充剤は粉末、錠剤および自立固体構造など、いくつかの形態で商業的に手に入る。粉末は普通、他の食品に振りかけたり、他の食品と混合し、最も典型的には水またはミルクなどの液体と混合する。補充剤がより口当たりよく、液体中に容易に分散できるように普通、香味剤および他の添加剤が使用される。自立固体構造は商業的には普通菓子バー、例えば「キャンディ」バーとして入手できる。粉末品と同様に、食感や口当たりをよくするために、通常、香味料および他の添加剤が含まれている。
【００３２】
多くのタイプの労働や運動に必要とされる種類の身体活動は、ある種の栄養素を高レベルで消費する必要があるので、その様な活動を行う人たちの身体に大きな要求を突きつける。さらに、汗には高レベルの鉄および銅が存在するので、皮膚に対してはるかに大きな酸化的ストレスを、そしてその結果として光老化およびしわの形成を引き起こす。
したがって、本発明の好ましい一実施形態においては、投与形態は栄養補助剤であり、液剤、粉末剤、丸薬または錠剤および菓子バーの形態が好ましく、焼いた可食性の高タンパク質製品が特に好ましい。特に好ましい一投与形態にはａ）少なくとも０．１％のアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、ｂ）高タンパク質成分の混合物、ｃ）小麦粉、ｄ）膨張剤、ｅ）甘味料、およびｆ）水が含まれる。さらなる投与形態は、リンゴ、バナナ、サクランボ、シナモン、クランベリー、ブドウ、甘露、ハチミツ、キウィ、レモン、ライム、オレンジ、モモ、ペパーミント、パイナップル、ラズベリー、タンジェリン、スイカ、セイヨウミザクラなどを含む水溶性の天然抽出物または人工抽出物からなる群から選択され、全体で前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含まれる、前記栄養組成物に特徴的な味を与える香味成分、および／または青、緑、オレンジ、赤、紫、および黄色の水溶性の天然色素または人工色素、酸化鉄色素、青、ピンク、赤、紫のウルトラマリン顔料等で構成される群から選択され、全体で前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含まれる、前記栄養組成物に独特の色を与える着色料成分を含んでいてもよい。
【実施例】
【００３３】
これ以上手を煩わさなくても、当業者であれば、これまでの説明を使用して、本発明を完全に使用することができると考えられる。したがって、以下の好ましい具体的実施形態は、単に説明のためのものであって、本開示の残りの部分をなんであれ制限するものではないとみなすべきである。
【００３４】
これまでおよび以下の実施例において、温度はすべて補正なしの摂氏温度であり、部および百分率は別途記載のない限りすべて重量である。
実施例１
新鮮なアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の実（５ｋｇ）の果肉を細かく取りだし、食塩（１％重量／重量）を含む水（２リットル）と混ぜ合わせた。その混合物を約１２時間室温に放置した。次いで混合物を冷所（１０℃）に３日間貯蔵した。その後、薄い布で濾過し、濾液を噴霧乾燥した。噴霧乾燥したブレンド物中の抗酸化剤画分は、高圧薄層クロマトグラフィー（ＨＰＴＬＣ）による測定で、果肉に対して約０．１ｇ／１００ｇであった。ブレンド物中にはいくらかの遊離の没色子酸（１．８ｇ／１００ｇ果肉）、単糖類、澱粉（グルコース、ラムノース、ガラクトースなど）（１２ｇ／１００ｇ果肉）も存在した。
【００３５】
以下の例は必ずしも実施されたものではなく、本発明を説明するものである。
実施例２
抽出物の錠剤およびカプセル剤
【００３６】
【表３】
【００３７】
注：抽出物を澱粉ペーストと共に粒状にし、流動性の粉末にする。４以外のすべての成分をブレンダー中で、２５分間ブレンドする。４を篩い入れてさらに５分間ブレンドする。７／１６インチの標準凹型治具を使用し、圧縮して錠剤にする。また、ブレンドした物質を適当なカプセルに詰めることもできる。
実施例３
抽出物錠剤およびカプセル剤
【００３８】
【表４】
【００３９】
６以外の全成分をブレンダー中で２０分間ブレンドする。６を篩い入れ、さらに５分間ブレンドする。７／１６インチの標準凹型治具を使用し、圧縮して錠剤にする。
実施例４
抽出物シラップ
【００４０】
【表５】
【００４１】
実施例５
抽出物飲料
【００４２】
【表６】
【００４３】
実施例６
抽出物シリアル
【００４４】
【表７】
【００４５】
実施例７
抽出物栄養バー
【００４６】
【表８】
【００４７】
実施例８
本発明の抽出物の金属キレート化能力
スーパーオキシドアニオンラジカルと過酸化水素とから鉄に触媒されたヒドロキシルラジカル生成が起こるためには、空のまたは水などの容易に解離できるリガンドに占められた少なくとも１つの鉄の配位座が利用できることが必要である。この水との配位はアジドアニオン（Ｎ3-）などのより強い配位子で完全に置き換えることができる。この原理はＦｅ3+抗酸化剤錯体においてある配位座が空位であるかどうかをＵＶスペクトロメトリー法で測定するのに応用される（Ｅ．Ｇｒａｆら「鉄触媒によるヒドロキシルラジカルの生成、遊離鉄配位座のための厳格な要求」Ｊ．Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．１９８４ ２５９：３６２０〜３６２４．；Ａ．Ｅ．Ｍａｒｔｅｌｌら．Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃａｔａｌｙｓｉｓ、ＩＸ（Ａ．Ｆａｒａｋａｓ、編）、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ、３１９、１９５７）。試験したすべてのＦｅ3+キレートのうち、本発明の抽出物だけが配位領域に水がない（すなわち、その錯体は完全にかつ安定に飽和しており、オキソフェリルラジカルの形成を経る酸化促進活性を持つことができない）。ほかの抗酸化剤／キレート化剤はすべて、それによってオキソフェリルラジカルを形成することのできる異種の配位座を示し、特に低濃度で酸化促進効果を明らかに持つ。本発明の抽出物は、最も有効な鉄のキレート化剤であり、ラジカルによって引き起こされる酸化的ストレスによる損傷を防ぎ、遷移金属イオンを失わせるはずである。
【００４８】
この結果は下記表３に記した。
【００４９】
【表９】
【００５０】
【表１０】
【００５１】
実施例９
経口投与によりＵＶに誘起される紅斑を変化させる本発明の抽出物組成物の評価および比較のためのテストプロトコール(test protocol)の観察
具体的には、この抽出物栄養補助剤は１〜５００ｍｇ／日の量を８週間経口投与した後、最低紅斑照射量（ＭＥＤ）となるのに必要なＵＶ照射量を増大させるはずである。紅斑は目視評価の専門家が評価する。本抽出物の補助食品の皮膚を白くする能力を評価するために、使用前のベースライン皮膚、４週間使用後および８週間使用後に、ミノルタクロマメータで測定を実施する。
【００５２】
１．組入基準
ａ．皮膚タイプＩＩ〜ＩＩＩ（下記）の３６人の健常人男女被験者を試験用に選択する。
【００５３】
皮膚タイプ 日光皮膚炎および日焼け歴
Ｉ 常に容易に日光皮膚炎を起こす；日焼けしない（感受性が高い）
ＩＩ 常に容易に日光皮膚炎を起こす；わずかに日焼けする（感受性が高い）
ＩＩＩ 中程度に日光皮膚炎を起こす：徐々に日焼けする（正常）
ＩＶ 最小限度の日光皮膚炎を起こす；いつもよく日焼けする（正常）
Ｖ まれに日光皮膚炎を起こす；過度に日焼けする（感受性が低い）
ＶＩ 日光皮膚炎を起こす；深く色づく（感受性が低い）
ｂ．年齢１８〜６０才
ｃ．試験物質による皮膚反応と紛らわしいような、目に見える皮膚疾患がないこと。
【００５４】
２．除外基準
ａ．日光に対する異常な反応の経験を持つ被験者および日光に対する異常な反応を起こす可能性のある投薬を受けている被験者は試験から除外する。
【００５５】
ｂ．現在日光皮膚炎、日焼け、試験結果の評価を妨げる可能性のある皮膚の色ムラまたは目に見える皮膚疾患のある被験者は試験から除外する。
【００５６】
ｃ．妊娠中または授乳中の女性は除外する。
【００５７】
ｄ．定期的にＵＶＡ日光ベッドを使用している被験者。
【００５８】
ｅ．紅斑性狼瘡または皮膚癌の既往歴のある被験者。
【００５９】
ｆ．試験開始前２週間以内に何らかのビタミン補助剤を摂取した被験者。
【００６０】
３．光源
キセノンアーク太陽光シミュレータ（１５０ｗ）を紫外線照射源として使用する。（ソーラーライト社（Ｓｏｌａｒ Ｌｉｇｈｔ Ｃｏｍｐａｎｙ）、フィラデルフィア、ペンシルバニア州）。この装置は、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．５３、１９２（１９６９）に詳細に説明されているが、自然太陽光のスペクトル出力と同等の紫外線領域におけるスペクトル出力を有する。波長範囲２９０〜４００ｎｍの基本的なＵＶ−ＡおよびＵＶ−Ｂ波長スペクトルを提供するためにＷＧ−３２０フィルタおよびＵＧ−１１フィルタを使用する。
【００６１】
試験期間の前後にＵＶ強度計（ＵＶＢ検出器付き、Ｍｏｄｅｌ ＰＭＡ２１００、ソーラーライト社、フィラデルフィア、ペンシルバニア州）でランプの出力を測定する。
【００６２】
４．方法論
本試験は、無作為に選択され、各１８人の被験者からなる２グループに分けられた３６人の志願者による、無作為化対照試験で実施する。１８人を経口投与群に、１８人を対照群に割り当てる。
【００６３】
５．ベースライン
試験開始の１週間前と、試験の初日に再び、被験者は実験室に行き、ＭＥＤ値を測定し、これら２つの値の平均をベースラインＭＥＤ値とする。
【００６４】
最低紅斑照射量（ＭＥＤ：Ｍｉｎｉｍａｌ Ｅｒｙｔｈｅｍａｌ Ｄｏｓｅ）
ＭＥＤは、未処理の皮膚に認知できる最低限の紅斑を生じるのに十分な紫外線照射時間または量と定義される。各被験者のＭＥＤは、各回の曝露時間が前回の曝露時間より２５％増えるように累進的に増やして、等比数列的な紫外線曝露によって決定する。
【００６５】
照射１６〜２４時間後に、その部位の紅斑を以下の評点システムにより評価する。
【００６６】
０ 陰性、目に見える反応なし
０．５ 最低限の紅斑
１ 明確な紅斑
２ 中等度の紅斑
３ 重度の紅斑
ＭＥＤの視覚評価に加えて、ミノルタクロマメータを使用してベースライン皮膚の測定を実施する。試験期間中に色の変化があればＬ*ａ*ｂ*表色系を使用して評価する。測定は３回繰り返して行い、平均値をデータとして採用する。
【００６７】
処置群の被験者には、８週間にわたって１日２回、本発明の抽出物組成物を２錠経口服用するよう指示する。被験者には、日光に当たらないように、そして遵守を記録する日記をつけるように指示する。
【００６８】
第２週
被験者はＭＥＤ値を測定するために実験室にもどる。被験者はベースラインＭＥＤに隣接する位置に上述のように照射を受ける。照射１６〜２４時間後に上記の評価システムを使用してＭＥＤを評価する。
【００６９】
第４週
被験者はＭＥＤ値を測定するために実験室にもどる。被験者はベースラインＭＥＤに隣接する位置に上述のように照射を受ける。上述のように、ベースライン皮膚のミノルタクロマメータによる測定を行う。
【００７０】
照射１６〜２４時間後に上記の評価システムを使用してＭＥＤを評価する。
【００７１】
第８週
被験者はＭＥＤ値を測定するために実験室にもどる。被験者はベースラインＭＥＤに隣接する位置に上述のように照射を受ける。上述のように、ベースライン皮膚のミノルタクロマメータによる測定を行う。
【００７２】
照射１６〜２４時間後に上記の評価システムを使用してＭＥＤを評価する。
【００７３】
試験の終わりに、試験前後のＭＥＤおよびクロマメータの読みを比較し何らかの有意な変化が観察されるか否か決定する。
実施例１０
本発明の抽出物組成物の経口投与によりＵＶ誘起の皮膚損傷の変化の評価のためのバイオマーカとしてのストロメリシン−１の観察
１．ヒト志願者の日光曝露前後の血清中のストロメリシン−１の濃度（プラセボ、陰性対照）
２．日光曝露後に本発明の抗酸化剤（１〜４週間まで５０〜５００ｍｇ／日）の処置を受けたヒト志願者の血清中のストロメリシン−１のレベル
試験の終わりに、試験前後のストロメリシン−１濃度を比較、分析して何らかの有意な変化が観察されるか否か調べる。
実施例１１
本発明の抽出物組成物の経口投与によるＵＶ皮膚損傷の変化の評価のためのバイオマーカとしてのランゲルハンス細胞（ＬＣ）の観察
日光またはＵＶ照射に曝すとヒトの皮膚中のＬＣに著しい大きな変化が生じる。ＬＣ計数値はＵＶ照射量の関数として低下する。ＬＣは樹状形状を失い、混乱する。ＬＣは抗原提示能を失う。これら２つの変数はＡＴＰアーゼ染色技術で検知し、追跡することができる（ＫＷｏｌｆｆおよびＧ．Ｓｔｉｂｇｌ、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ：Ｄｅｒｍａｔｏｌ、８０、１７ｓ〜２１ｓ、１９８３）。
【００７４】
１．ヒト志願者の日光曝露前の皮膚中ＬＣレベル（プラセボ、陰性対照）
２．本発明の抗酸化剤の経口投与（１〜４週間、５０〜５００ｍｇ／日）を受けたヒト志願者の日光曝露後の皮膚中のＬＣのレベル
調査の終わりに、調査前後のＬＣレベルについて何らかの有意な変化が観察されるか否か比較する。
実施例１２
本発明抽出物組成物の経口投与による、ＵＶ皮膚損傷の変化の評価のバイオマーカとしての脂質過酸化物の観察
日光またはＵＶ照射に曝露すると酸化的ストレスおよびヒトの皮膚中の脂質過酸化物レベルの有意な変化が生じる。脂質過酸化物レベルをＰ．Ｐｕｇｌｉｅｓｅの、化粧品の臨床安全性および評価試験（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ）Ｖｏｌ１、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ、２９５〜３０９、１９９０中の抗老化剤の評価に記載された手順により検出し、追跡できる。
【００７５】
１．日光曝露前のヒト志願者の皮膚中の脂質過酸化物レベル（プラセボ、陰性対照）
２．本発明の抗酸化剤の経口投与（１〜２カ月間、１〜２回／日、５０〜５００ｍｇ／日）を受けたヒト志願者の日光曝露後の皮膚中の脂質過酸化物のレベル
調査の終わりに、調査前後の脂質過酸化物レベルに何らかの有意な変化が観察されるか否か比較決定する。
【００７６】
上記のプロトコールの結果は、ＵＶ照射曝露に対する皮膚のコントロールまたは保護に対する本発明の抽出物組成物の経口投与の有効性を科学的に証明するものと考えられる。
【００７７】
しかし、この保護の有効性は広範で高い日焼け防止指数を有する日焼け防止剤を使用するのと同等ではないが、本発明の補助食品は基礎的な保護を増大し、それによって紫外線による皮膚の損傷に対する防御を増大するのに使用できる。本発明は、局所的に適用する通常の日焼け防止剤、特にアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、特に標準抽出物を含む日焼け防止剤の使用により補うことができる。したがって、本発明の一態様は、ある人の皮膚に局所用日焼け防止剤を施し、日光への曝露前および／または曝露中に、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、好ましくは標準抽出物を含む組成物を摂取するという投薬計画を提供する。好ましい投薬計画は抽出物を含む組成物を日光曝露の前の、例えば日光曝露の少なくとも１週間前、または少なくとも２〜３日前に経口投与することを含む。観測された投与量は日光曝露による皮膚損傷を改善するのに十分な量、例えば１日に標準抽出物１〜５００、好ましくは２〜２００ｍｇである。
【００７８】
ビタミンＥ、リポ酸、カロテノイド類、ルテイン、メラトニンなどの１種または複数の疎水性抗酸化剤を、本発明の抗酸化剤とブレンドしても、一般的にまたは具体的に記載した前記の実施例で使用した本発明の操作条件で、前記実施例を同様に成功裏に繰り返すことが可能である。
【００７９】
前記実施例は一般的にまたは具体的に記載した反応剤および／または本発明の操作条件を前記実施例において使用したものと置き換えても成功裏に繰り返すことが可能である。
【００８０】
２０００年９月２６日の米国特許第６，１２４，２６８号、２００２年４月１１日付の同時係属出願第１０／１２０，１５６号および２００２年７月１５日付仮出願第６０／３９５，６１２を含めるがそれに限定されることなく、上記および下記に引用した特許出願、特許および出版物の開示はすべて全体として参照として本明細書に組み込まれる。
【産業上の利用可能性】
【００８１】
当業者であれば、上述の説明から本発明の本質的特性を容易に確かめることができ、その精神および範囲からはずれることなく、様々な用途および状況に適応させるために本発明の様々な変更および修正を行うことができよう。
【技術分野】
【０００１】
本発明は日焼け防止に関し、さらに詳しくは、アムラ（Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）（別名フィランタスエンブリカ（Ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ ｅｍｂｌｉｃａ））植物の抽出物の経口投与による皮膚の日焼け防止の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚やその他の様々なヒト組織の主な細胞外基質成分は、密接に関係しているが、遺伝的には区別されるタンパク質のスーパーファミリーであるコラーゲンである。遺伝的に区別されるコラーゲン型はそれぞれ、皮膚内の区画配置の中で重要な機能的役割を果たしている。
【０００３】
皮膚の外因性の老化には、皮膚への多くの環境的侵襲の蓄積の結果である諸変化が含まれる。これらの侵襲のうちで最も重要なのは、明らかに長時間の日光曝露である。コラーゲンの量と構造、皮膚の弾力性および伸展性の変化は、光で損傷を受けた皮膚においては助長される。最近の研究によれば、皮膚のコラーゲンの減少は、外因性の光損傷を受けた皮膚の方が内因性の老化した皮膚よりも大きいことが示唆されている。
【０００４】
光化学作用によって損傷を受けた皮膚（太陽光線の化学作用によって損傷を受けた皮膚）においては、鉄含有量が非常に増加するため、高度反応性酸素種（ＲＯＳ：ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ）の産生が促され、引き続く組織損傷および長期的な結果として皮膚の癌や早期老化等がもたらされる。この病的分解に関与するＵＶ誘導性遺伝子にはいくつかのプロテアーゼ類があり、その中でもマトリクス分解性メタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）はコラーゲンなどの結合組織化合物の分解に寄与し、それによってしわの形成、弾力の喪失を引き起こし、皮膚癌の侵入および転移を促進する。ＵＶ曝露による細胞レベルでの鉄貯蔵タンパク質からの鉄の放出は、酸化的ストレスの主要な原因とみなされている。
【０００５】
日光曝露は皮膚の早期老化を引き起こす。皮膚の早期老化はスジ、しわ、シミ、ソバカス、乾燥および皮膚の色調ムラとして現れる。光老化はまたコラーゲンを破壊し、そのため皮膚の弾力性および堅固さが低下する。これらの兆候は皮膚が損傷していることを示し、気になることであるが、個人の容貌をも衰えさせ、多くの場合、実際よりもずっと年取ったように見える。光老化の大部分は顔、首、胸、手、腕の皮膚など毎日露出されていて、したがって目に見える皮膚で起こるので、これはそれ自体、特に女性には悩ましいこととなる可能性がある。クリーム、ローションおよび化粧品は問題点を覆い隠すことを試みることはできるが光老化によって引き起こされた損傷を逆戻りさせることはできない。本当に必要なのは、内部から皮膚を養い、活気を与えることによって、日光の皮膚損傷作用を保護し、逆戻りさせるのを助ける製品である。現在までのところ、本願発明に至るまではそのような製品は存在しない。
【０００６】
紫外線（ＵＶＲ）で誘発された炎症反応はＵＶＲ依存性のＲＯＳの増加やＵＶＲ依存性の皮膚の酸化損傷の大部分を説明するのに提起された有力な機序の１つである。加えて、炎症反応を促進し、レドックス調節された転写因子ＮＦ−kＢは、ヒトの皮膚の中でＵＶＲによって開始されるシグナル伝達の間に標的とされる主要な分子の１つとして同定されている。その結果、ＵＶＲは、５’隣接領域に核因子−kＢ（ＮＦ−kＢ）結合部位を含む、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１α（ＩＬ−１α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）などの広範な炎症反応促進遺伝子の発現を刺激する。
【０００７】
炎症反応は、ＲＯＳ濃度の上昇を介してＵＶＲによって誘起される酸化的ストレスおよび皮膚における損傷に重大な役割を演じるので、抗炎症性を有する抗酸化剤はＵＶＲの損傷作用を和らげると考えられている。
【０００８】
例えば、Ｇｈｏｓａｌ，Ｓ．は、米国特許第６，１２４，２６８号において、アムラ植物の抽出によって得た天然抗酸化剤ブレンド物について記載しており、それはスプレーローション、水性ゲル、またはクリームとして適用すれば日射遮蔽剤としてユーザの皮膚に対して使用することができる。この特許は記載抽出物の抗酸化剤としての特性を生かすために、例えばビタミンとの経口投与可能な組成物についても記載しているが、そういった組成物が日射による損傷から皮膚を防御できるとの示唆はない。一方、Ｌｏｒｅｎｚ，Ｒ．は、米国特許第６，４３３，０２５号においてアスタキサンチンの経口投与によって日光皮膚炎を遅延または防止する方法を開示している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、本発明の目的は、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物組成物の経口投与による、ＵＶＲ誘起の紅斑に対して皮膚の日焼けを防止する方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
ここで見いだされたことは、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)植物の抽出物をベースとする抗酸化剤組成物は、ユーザによる経口摂取によって、有効な皮膚の日焼け防止を提供しうるということである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明における抗酸化剤組成物は、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物、例えば米国特許第６，１２４，２１８号のもの、および好ましくは低分子量（＜１０００）の加水分解可能なタンニン類、エンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ａ、エンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ｂ、ペダンクラーギン（Ｐｅｄｕｎｃｕｌａｇｉｎ）およびペニグルコニン（Ｐｕｎｉｇｌｕｃｏｎｉｎ）を適切には４０％を越えて、好ましくは５０〜８０％（ｗ／ｗ）含み、総フラボノイドを１重量％未満、好ましくは０．６％未満の低濃度しか含まない標準抽出物である。この標準抽出物はＧｈｏｓａｌによって記載された抽出物とは異なる。標準抽出物中のこの総フラボノイド濃度では組成物の好ましい優雅なオフホワイト乃至黄色の色を損なうことはない。これに対して、市販の競合製品は非常に高濃度の総フラボノイドを有しており、かなり暗い色を示す。また、フラボノイド類であるルチン（３’，４’，５’，７−テトラヒドロキシ−フラボン−３−０−ラムノグルコシド）の本発明の標準抽出物中の望ましい濃度は１．０％未満であり、０．０１％未満が好ましく、０．００１〜０．０１％の値が特に好ましい。最も好ましい成分濃度は全乾燥抽出物の重量百分率で以下の通りである：
【００１２】
【表１】
【００１３】
標準組成物におけるこれらの好ましい値からの百分率の平均偏差は以下のようになる可能性がある。
【００１４】
【表２】
【００１５】
本発明の好ましい抗酸化剤組成物はアセトニトリル／水／リン酸（２０／８０／１）、または他の溶媒組成の溶媒系を用いて、逆相カラムクロマトグラフィーまたはＨＰＬＣで総フラボノイドを除去することによって得ることができる。その際フラボノイドは、低分子量のタンニン類よりも先に溶離してくる。また、産地を選択することによって、フィランタスエンブリカの実の抽出物は、総フラボノイド濃度が実質的に低濃度（＜１．０％）となる可能性がある。さらに特に、東インドのある地域から１１月〜２月に集めた中程度の大きさの実は、水抽出および乾燥後、総フラボノイド含量が所望の低い粉末として好ましい抗酸化剤組成物を得ることができることが観察されている。したがって、抽出物の総フラボノイド含量を分析し、所望の総フラボノイド含量の低い抽出物を選択することにより、所望の標準抽出物を再現性のあるやり方で調製することが可能である。
【００１６】
本発明の明細書においては、「フラボノイド類」という用語にはＵＶスペクトルデータにより分析したとき３５０ｎｍに極大を示す化合物のファミリーを含む。フラボノイド類の例には、フラボノール類およびフラボン類が含まれるが、それらには限らない。そのような化学種には上述のルチンがある。
【００１７】
本発明の好ましい実施形態においては、フィランタスエンブリカの実質的に水溶性の（９５重量％以上）抽出物はポリマー状タンニンを５重量％未満しか含まず、実質的に黒いものを含まず、分子量１，０００未満の生体活性のある、低分子量で加水分解可能なタンニンが高濃度例えば７５重量％以上であるようなものが使用される。この抽出物はオリゴマーおよびポリマーのタンニンを除去する方法によって得ることができる。適当な方法には以下の段階が含まれる。１）植物からの元の抽出物から、あるいはその抽出物を処理した後（例えば乾燥段階の後）に得られる粉末化組成物の懸濁によって得られる、フィランタスエンブリカの抽出物を準備する、２）必要な場合、例えば濾過助剤を使用する濾過によって水溶性成分から、黒い小粒および／またはその前駆体および／またはポリマー状タンニンを物理的に分離する、３）所望であれば、得られたアムラの組成物を豊富に含む水溶液を濃縮して、例えば乾燥粉末にする。
【００１８】
本発明の抗酸化剤組成物は、皮膚防御の独特の４つの特徴を提供するという点で真に革新的である。
【００１９】
・ 酸化促進活性を有しない。
【００２０】
・ コラゲナーゼおよびストロメリシン−１活性を阻害する。
【００２１】
・ 鉄および銅のキレート化活性。
【００２２】
酸化促進活性を有しない：酸化作用を調節する、すなわち減ずるために、その皮膚に対する有害な影響を阻止するとはいわないまでも、皮膚を光損傷から守る目的で、多様な抗酸化剤を使用することが可能である。一般的に抗酸化剤を使用することが勧められる場合、これらの化合物は抗酸化剤として機能するだけでなく、特に鉄および銅のような遷移金属の存在下では、（本質的には）酸化促進作用も有しているということは、しばしば無視されてきた。紫外線が当たると鉄貯蔵タンパク質であるフェリチンから鉄が遊離することが、主要な酸化的ストレスの原因であるとされている。その結果、潜在的に有害な遊離の鉄が細胞内に放出されると、光による過酸化の損傷効果を明らかに悪化させ、紫外線に曝された後の皮膚の可逆的損傷にも退行的損傷にも中心的な重要性を持っていると考えられる。ヒトの表皮の鉄含量は日光に曝されたエリアでは曝されない部位よりも３倍も多いということが分かっている。鉄はフェントン（Ｆｅｎｔｏｎ）反応と呼ばれる、反応性酸素化学種との一連の反応によりその毒性を発揮し、生体分子に対して結果として、損傷をもたらす毒性の強いヒドロキシルラジカルを発生させる。ビタミンＣ、ビタミンＥ、プロアントシアニジン類（マツおよびブドウより）、超酸化物不均化酵素およびグルタチオン等の周知の抗酸化剤が酸化促進活性を示すのに対して、本発明の抗酸化剤は、遷移金属に誘起される酸化促進活性をまったく持たない。
【００２３】
コラゲナーゼ活性の阻害：本発明の抗酸化剤は、コラーゲンを消化し、したがってコラーゲンを分解するコラゲナーゼ活性（コラゲナーゼはＭＭＰの一種である）を阻害するという点で特異である。ＵＶ曝露は、老化の目に見える兆候に寄与するコラゲナーゼ酵素の発現を増大させる傾向がある。本発明の抗酸化剤はこの酵素活性を阻止することができ、コラーゲンの破壊を減少させる。文献データによれば、既存のコラーゲンを保護する方が、コラーゲンの産生を活性化するよりも重要である（ＥＦ ＢｅｒｎｓｔｅｉｎおよびＪ Ｕｉｔｔａ、Ｃｌｉｎｉｃｓ ｉｎ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ、１４、１４３〜１５１、１９９６）。
【００２４】
ストロメリシン−１活性の阻害：ストロメリシン−１は細胞外基質の様々なプロテオグリカン成分やフィブロネクチンおよびラミニンを分解する際、コラゲナーゼよりもはるかに広い基質特異性を有する。ＵＶ曝露は、老化の目に見える兆候に寄与するストロメリシン−１酵素の発現を増大させる傾向がある。本発明の抗酸化剤はこの酵素活性を阻止することができ、それによって細胞外基質タンパク質の破壊を減少させる。
【００２５】
鉄および銅のキレート化活性：鉄はすべての生細胞にとって主要な成長因子である。体内の鉄の大部分は血流中にある。しかし、その循環の中に入る鉄がすべてヘモグロビンによって運ばれているわけではない。鉄が「遊離の鉄」と呼ばれているタンパク質に結合しない状態で血流中で循環すると、大規模破壊をもたらし、酸化的ストレスを促進することがある。脂肪組織内で起こる鉄によって引き起こされる酸化は脂質過酸化と呼ばれる。例えば、脳および神経系のニューロン（神経細胞）はミエリン（ｍｙｅｌｉｎ）と呼ばれる脂肪に裏打ちされており、非結合鉄濃度が高すぎると非常に破壊されやすい。
【００２６】
本発明の抗酸化剤は非常に効率的な鉄および銅のキレート化剤である。鉄および銅は、早期老化や皮膚への光損傷を引き起こすコラーゲンの破壊およびフリーラジカル損傷において主要な役割を果たすものである。鉄の還元電位をＨ2Ｏ2との反応が起こらない程度に変更するか、あるいはＨ2Ｏ2が結合するのに使われる鉄の部位をブロックすると、遷移金属によって引き起こされる酸化を止める解決策となるかもしれない。これら２つの原理は皮膚の手入れ用の抗酸化機能を持ったキレート化剤の設計上重要である。本発明の抗酸化剤は理想的な抗酸化剤の特質をすべて有しているが、Ｆｅ3+およびＣｕ2+に対する卓越したキレート化特性を有するため、遷移金属によって引き起こされる酸化促進活性を有しておらず、そのため、皮膚が紫外線に曝されたときに最も著しく、ヒドロキシルラジカルの発生および皮膚に対する有害な影響を排除する。
【００２７】
カスケード効果：本発明の抗酸化剤は、特異な「カスケード効果」を示す抗酸化剤の非常に小さなグループの１つである。このカスケード効果は、活性を長期間にわたって保てるように活性形態を連続的に再循環させることにより、フリーラジカル除去活性を強めている。大部分の抗酸化剤は活性な役割から不活性な役割に移行するのに対して、本発明の抗酸化剤は多段階の抗酸化化合物のカスケードを使用しており、その結果として全体として特異な抗酸化能力の延長がもたらされている。
【００２８】
本発明のさらなる実施形態は、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物を含むことを特徴とする経口投与に適した投与形態である。
【００２９】
前記投与形態は、経口投与等に適した賦形剤を含むのが好ましい。この投与形態は錠剤またはカプセルまたはエリキシル剤または懸濁剤またはドリンク剤とすることができる。
【００３０】
前記投与形態は皮膚の光損傷の徴候を遅らせ、防御し、逆行させることのできる他の成分を含んでいてもよい。
【００３１】
栄養補助剤は意図する用途によって変わる多くの形態をとる。追加のビタミン、ミネラルまたは他の食品群の入った飲食物を供給するのに、液剤、丸薬または錠剤および菓子バーの形態が使用されてきた。タンパク質補充剤は粉末、錠剤および自立固体構造など、いくつかの形態で商業的に手に入る。粉末は普通、他の食品に振りかけたり、他の食品と混合し、最も典型的には水またはミルクなどの液体と混合する。補充剤がより口当たりよく、液体中に容易に分散できるように普通、香味剤および他の添加剤が使用される。自立固体構造は商業的には普通菓子バー、例えば「キャンディ」バーとして入手できる。粉末品と同様に、食感や口当たりをよくするために、通常、香味料および他の添加剤が含まれている。
【００３２】
多くのタイプの労働や運動に必要とされる種類の身体活動は、ある種の栄養素を高レベルで消費する必要があるので、その様な活動を行う人たちの身体に大きな要求を突きつける。さらに、汗には高レベルの鉄および銅が存在するので、皮膚に対してはるかに大きな酸化的ストレスを、そしてその結果として光老化およびしわの形成を引き起こす。
したがって、本発明の好ましい一実施形態においては、投与形態は栄養補助剤であり、液剤、粉末剤、丸薬または錠剤および菓子バーの形態が好ましく、焼いた可食性の高タンパク質製品が特に好ましい。特に好ましい一投与形態にはａ）少なくとも０．１％のアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、ｂ）高タンパク質成分の混合物、ｃ）小麦粉、ｄ）膨張剤、ｅ）甘味料、およびｆ）水が含まれる。さらなる投与形態は、リンゴ、バナナ、サクランボ、シナモン、クランベリー、ブドウ、甘露、ハチミツ、キウィ、レモン、ライム、オレンジ、モモ、ペパーミント、パイナップル、ラズベリー、タンジェリン、スイカ、セイヨウミザクラなどを含む水溶性の天然抽出物または人工抽出物からなる群から選択され、全体で前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含まれる、前記栄養組成物に特徴的な味を与える香味成分、および／または青、緑、オレンジ、赤、紫、および黄色の水溶性の天然色素または人工色素、酸化鉄色素、青、ピンク、赤、紫のウルトラマリン顔料等で構成される群から選択され、全体で前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含まれる、前記栄養組成物に独特の色を与える着色料成分を含んでいてもよい。
【実施例】
【００３３】
これ以上手を煩わさなくても、当業者であれば、これまでの説明を使用して、本発明を完全に使用することができると考えられる。したがって、以下の好ましい具体的実施形態は、単に説明のためのものであって、本開示の残りの部分をなんであれ制限するものではないとみなすべきである。
【００３４】
これまでおよび以下の実施例において、温度はすべて補正なしの摂氏温度であり、部および百分率は別途記載のない限りすべて重量である。
実施例１
新鮮なアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の実（５ｋｇ）の果肉を細かく取りだし、食塩（１％重量／重量）を含む水（２リットル）と混ぜ合わせた。その混合物を約１２時間室温に放置した。次いで混合物を冷所（１０℃）に３日間貯蔵した。その後、薄い布で濾過し、濾液を噴霧乾燥した。噴霧乾燥したブレンド物中の抗酸化剤画分は、高圧薄層クロマトグラフィー（ＨＰＴＬＣ）による測定で、果肉に対して約０．１ｇ／１００ｇであった。ブレンド物中にはいくらかの遊離の没色子酸（１．８ｇ／１００ｇ果肉）、単糖類、澱粉（グルコース、ラムノース、ガラクトースなど）（１２ｇ／１００ｇ果肉）も存在した。
【００３５】
以下の例は必ずしも実施されたものではなく、本発明を説明するものである。
実施例２
抽出物の錠剤およびカプセル剤
【００３６】
【表３】
【００３７】
注：抽出物を澱粉ペーストと共に粒状にし、流動性の粉末にする。４以外のすべての成分をブレンダー中で、２５分間ブレンドする。４を篩い入れてさらに５分間ブレンドする。７／１６インチの標準凹型治具を使用し、圧縮して錠剤にする。また、ブレンドした物質を適当なカプセルに詰めることもできる。
実施例３
抽出物錠剤およびカプセル剤
【００３８】
【表４】
【００３９】
６以外の全成分をブレンダー中で２０分間ブレンドする。６を篩い入れ、さらに５分間ブレンドする。７／１６インチの標準凹型治具を使用し、圧縮して錠剤にする。
実施例４
抽出物シラップ
【００４０】
【表５】
【００４１】
実施例５
抽出物飲料
【００４２】
【表６】
【００４３】
実施例６
抽出物シリアル
【００４４】
【表７】
【００４５】
実施例７
抽出物栄養バー
【００４６】
【表８】
【００４７】
実施例８
本発明の抽出物の金属キレート化能力
スーパーオキシドアニオンラジカルと過酸化水素とから鉄に触媒されたヒドロキシルラジカル生成が起こるためには、空のまたは水などの容易に解離できるリガンドに占められた少なくとも１つの鉄の配位座が利用できることが必要である。この水との配位はアジドアニオン（Ｎ3-）などのより強い配位子で完全に置き換えることができる。この原理はＦｅ3+抗酸化剤錯体においてある配位座が空位であるかどうかをＵＶスペクトロメトリー法で測定するのに応用される（Ｅ．Ｇｒａｆら「鉄触媒によるヒドロキシルラジカルの生成、遊離鉄配位座のための厳格な要求」Ｊ．Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．１９８４ ２５９：３６２０〜３６２４．；Ａ．Ｅ．Ｍａｒｔｅｌｌら．Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃａｔａｌｙｓｉｓ、ＩＸ（Ａ．Ｆａｒａｋａｓ、編）、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ、３１９、１９５７）。試験したすべてのＦｅ3+キレートのうち、本発明の抽出物だけが配位領域に水がない（すなわち、その錯体は完全にかつ安定に飽和しており、オキソフェリルラジカルの形成を経る酸化促進活性を持つことができない）。ほかの抗酸化剤／キレート化剤はすべて、それによってオキソフェリルラジカルを形成することのできる異種の配位座を示し、特に低濃度で酸化促進効果を明らかに持つ。本発明の抽出物は、最も有効な鉄のキレート化剤であり、ラジカルによって引き起こされる酸化的ストレスによる損傷を防ぎ、遷移金属イオンを失わせるはずである。
【００４８】
この結果は下記表３に記した。
【００４９】
【表９】
【００５０】
【表１０】
【００５１】
実施例９
経口投与によりＵＶに誘起される紅斑を変化させる本発明の抽出物組成物の評価および比較のためのテストプロトコール(test protocol)の観察
具体的には、この抽出物栄養補助剤は１〜５００ｍｇ／日の量を８週間経口投与した後、最低紅斑照射量（ＭＥＤ）となるのに必要なＵＶ照射量を増大させるはずである。紅斑は目視評価の専門家が評価する。本抽出物の補助食品の皮膚を白くする能力を評価するために、使用前のベースライン皮膚、４週間使用後および８週間使用後に、ミノルタクロマメータで測定を実施する。
【００５２】
１．組入基準
ａ．皮膚タイプＩＩ〜ＩＩＩ（下記）の３６人の健常人男女被験者を試験用に選択する。
【００５３】
皮膚タイプ 日光皮膚炎および日焼け歴
Ｉ 常に容易に日光皮膚炎を起こす；日焼けしない（感受性が高い）
ＩＩ 常に容易に日光皮膚炎を起こす；わずかに日焼けする（感受性が高い）
ＩＩＩ 中程度に日光皮膚炎を起こす：徐々に日焼けする（正常）
ＩＶ 最小限度の日光皮膚炎を起こす；いつもよく日焼けする（正常）
Ｖ まれに日光皮膚炎を起こす；過度に日焼けする（感受性が低い）
ＶＩ 日光皮膚炎を起こす；深く色づく（感受性が低い）
ｂ．年齢１８〜６０才
ｃ．試験物質による皮膚反応と紛らわしいような、目に見える皮膚疾患がないこと。
【００５４】
２．除外基準
ａ．日光に対する異常な反応の経験を持つ被験者および日光に対する異常な反応を起こす可能性のある投薬を受けている被験者は試験から除外する。
【００５５】
ｂ．現在日光皮膚炎、日焼け、試験結果の評価を妨げる可能性のある皮膚の色ムラまたは目に見える皮膚疾患のある被験者は試験から除外する。
【００５６】
ｃ．妊娠中または授乳中の女性は除外する。
【００５７】
ｄ．定期的にＵＶＡ日光ベッドを使用している被験者。
【００５８】
ｅ．紅斑性狼瘡または皮膚癌の既往歴のある被験者。
【００５９】
ｆ．試験開始前２週間以内に何らかのビタミン補助剤を摂取した被験者。
【００６０】
３．光源
キセノンアーク太陽光シミュレータ（１５０ｗ）を紫外線照射源として使用する。（ソーラーライト社（Ｓｏｌａｒ Ｌｉｇｈｔ Ｃｏｍｐａｎｙ）、フィラデルフィア、ペンシルバニア州）。この装置は、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．５３、１９２（１９６９）に詳細に説明されているが、自然太陽光のスペクトル出力と同等の紫外線領域におけるスペクトル出力を有する。波長範囲２９０〜４００ｎｍの基本的なＵＶ−ＡおよびＵＶ−Ｂ波長スペクトルを提供するためにＷＧ−３２０フィルタおよびＵＧ−１１フィルタを使用する。
【００６１】
試験期間の前後にＵＶ強度計（ＵＶＢ検出器付き、Ｍｏｄｅｌ ＰＭＡ２１００、ソーラーライト社、フィラデルフィア、ペンシルバニア州）でランプの出力を測定する。
【００６２】
４．方法論
本試験は、無作為に選択され、各１８人の被験者からなる２グループに分けられた３６人の志願者による、無作為化対照試験で実施する。１８人を経口投与群に、１８人を対照群に割り当てる。
【００６３】
５．ベースライン
試験開始の１週間前と、試験の初日に再び、被験者は実験室に行き、ＭＥＤ値を測定し、これら２つの値の平均をベースラインＭＥＤ値とする。
【００６４】
最低紅斑照射量（ＭＥＤ：Ｍｉｎｉｍａｌ Ｅｒｙｔｈｅｍａｌ Ｄｏｓｅ）
ＭＥＤは、未処理の皮膚に認知できる最低限の紅斑を生じるのに十分な紫外線照射時間または量と定義される。各被験者のＭＥＤは、各回の曝露時間が前回の曝露時間より２５％増えるように累進的に増やして、等比数列的な紫外線曝露によって決定する。
【００６５】
照射１６〜２４時間後に、その部位の紅斑を以下の評点システムにより評価する。
【００６６】
０ 陰性、目に見える反応なし
０．５ 最低限の紅斑
１ 明確な紅斑
２ 中等度の紅斑
３ 重度の紅斑
ＭＥＤの視覚評価に加えて、ミノルタクロマメータを使用してベースライン皮膚の測定を実施する。試験期間中に色の変化があればＬ*ａ*ｂ*表色系を使用して評価する。測定は３回繰り返して行い、平均値をデータとして採用する。
【００６７】
処置群の被験者には、８週間にわたって１日２回、本発明の抽出物組成物を２錠経口服用するよう指示する。被験者には、日光に当たらないように、そして遵守を記録する日記をつけるように指示する。
【００６８】
第２週
被験者はＭＥＤ値を測定するために実験室にもどる。被験者はベースラインＭＥＤに隣接する位置に上述のように照射を受ける。照射１６〜２４時間後に上記の評価システムを使用してＭＥＤを評価する。
【００６９】
第４週
被験者はＭＥＤ値を測定するために実験室にもどる。被験者はベースラインＭＥＤに隣接する位置に上述のように照射を受ける。上述のように、ベースライン皮膚のミノルタクロマメータによる測定を行う。
【００７０】
照射１６〜２４時間後に上記の評価システムを使用してＭＥＤを評価する。
【００７１】
第８週
被験者はＭＥＤ値を測定するために実験室にもどる。被験者はベースラインＭＥＤに隣接する位置に上述のように照射を受ける。上述のように、ベースライン皮膚のミノルタクロマメータによる測定を行う。
【００７２】
照射１６〜２４時間後に上記の評価システムを使用してＭＥＤを評価する。
【００７３】
試験の終わりに、試験前後のＭＥＤおよびクロマメータの読みを比較し何らかの有意な変化が観察されるか否か決定する。
実施例１０
本発明の抽出物組成物の経口投与によりＵＶ誘起の皮膚損傷の変化の評価のためのバイオマーカとしてのストロメリシン−１の観察
１．ヒト志願者の日光曝露前後の血清中のストロメリシン−１の濃度（プラセボ、陰性対照）
２．日光曝露後に本発明の抗酸化剤（１〜４週間まで５０〜５００ｍｇ／日）の処置を受けたヒト志願者の血清中のストロメリシン−１のレベル
試験の終わりに、試験前後のストロメリシン−１濃度を比較、分析して何らかの有意な変化が観察されるか否か調べる。
実施例１１
本発明の抽出物組成物の経口投与によるＵＶ皮膚損傷の変化の評価のためのバイオマーカとしてのランゲルハンス細胞（ＬＣ）の観察
日光またはＵＶ照射に曝すとヒトの皮膚中のＬＣに著しい大きな変化が生じる。ＬＣ計数値はＵＶ照射量の関数として低下する。ＬＣは樹状形状を失い、混乱する。ＬＣは抗原提示能を失う。これら２つの変数はＡＴＰアーゼ染色技術で検知し、追跡することができる（ＫＷｏｌｆｆおよびＧ．Ｓｔｉｂｇｌ、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ：Ｄｅｒｍａｔｏｌ、８０、１７ｓ〜２１ｓ、１９８３）。
【００７４】
１．ヒト志願者の日光曝露前の皮膚中ＬＣレベル（プラセボ、陰性対照）
２．本発明の抗酸化剤の経口投与（１〜４週間、５０〜５００ｍｇ／日）を受けたヒト志願者の日光曝露後の皮膚中のＬＣのレベル
調査の終わりに、調査前後のＬＣレベルについて何らかの有意な変化が観察されるか否か比較する。
実施例１２
本発明抽出物組成物の経口投与による、ＵＶ皮膚損傷の変化の評価のバイオマーカとしての脂質過酸化物の観察
日光またはＵＶ照射に曝露すると酸化的ストレスおよびヒトの皮膚中の脂質過酸化物レベルの有意な変化が生じる。脂質過酸化物レベルをＰ．Ｐｕｇｌｉｅｓｅの、化粧品の臨床安全性および評価試験（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ）Ｖｏｌ１、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ、２９５〜３０９、１９９０中の抗老化剤の評価に記載された手順により検出し、追跡できる。
【００７５】
１．日光曝露前のヒト志願者の皮膚中の脂質過酸化物レベル（プラセボ、陰性対照）
２．本発明の抗酸化剤の経口投与（１〜２カ月間、１〜２回／日、５０〜５００ｍｇ／日）を受けたヒト志願者の日光曝露後の皮膚中の脂質過酸化物のレベル
調査の終わりに、調査前後の脂質過酸化物レベルに何らかの有意な変化が観察されるか否か比較決定する。
【００７６】
上記のプロトコールの結果は、ＵＶ照射曝露に対する皮膚のコントロールまたは保護に対する本発明の抽出物組成物の経口投与の有効性を科学的に証明するものと考えられる。
【００７７】
しかし、この保護の有効性は広範で高い日焼け防止指数を有する日焼け防止剤を使用するのと同等ではないが、本発明の補助食品は基礎的な保護を増大し、それによって紫外線による皮膚の損傷に対する防御を増大するのに使用できる。本発明は、局所的に適用する通常の日焼け防止剤、特にアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、特に標準抽出物を含む日焼け防止剤の使用により補うことができる。したがって、本発明の一態様は、ある人の皮膚に局所用日焼け防止剤を施し、日光への曝露前および／または曝露中に、アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、好ましくは標準抽出物を含む組成物を摂取するという投薬計画を提供する。好ましい投薬計画は抽出物を含む組成物を日光曝露の前の、例えば日光曝露の少なくとも１週間前、または少なくとも２〜３日前に経口投与することを含む。観測された投与量は日光曝露による皮膚損傷を改善するのに十分な量、例えば１日に標準抽出物１〜５００、好ましくは２〜２００ｍｇである。
【００７８】
ビタミンＥ、リポ酸、カロテノイド類、ルテイン、メラトニンなどの１種または複数の疎水性抗酸化剤を、本発明の抗酸化剤とブレンドしても、一般的にまたは具体的に記載した前記の実施例で使用した本発明の操作条件で、前記実施例を同様に成功裏に繰り返すことが可能である。
【００７９】
前記実施例は一般的にまたは具体的に記載した反応剤および／または本発明の操作条件を前記実施例において使用したものと置き換えても成功裏に繰り返すことが可能である。
【００８０】
２０００年９月２６日の米国特許第６，１２４，２６８号、２００２年４月１１日付の同時係属出願第１０／１２０，１５６号および２００２年７月１５日付仮出願第６０／３９５，６１２を含めるがそれに限定されることなく、上記および下記に引用した特許出願、特許および出版物の開示はすべて全体として参照として本明細書に組み込まれる。
【産業上の利用可能性】
【００８１】
当業者であれば、上述の説明から本発明の本質的特性を容易に確かめることができ、その精神および範囲からはずれることなく、様々な用途および状況に適応させるために本発明の様々な変更および修正を行うことができよう。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚の光損傷の徴候の遅延、防止および／または改善のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物の非治療的使用。
【請求項２】
皮膚の光損傷の徴候の予防および／または治療に適した薬剤の製造のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物の使用。
【請求項３】
アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物を含むことを特徴とする経口投与に適した投与形態。
【請求項４】
経口投与に適した賦形剤を含む請求項３に記載の投与形態。
【請求項５】
投与形態が錠剤またはカプセルまたはエリキシル剤または懸濁剤またはドリンク剤である請求項３に記載の投与形態。
【請求項６】
投与形態が皮膚の光損傷の徴候を遅延、防止、および改善させることができる他の成分を含む請求項３乃至５のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項７】
前記抽出物がエンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ａ、エンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ｂ、ペンダンクラーギン（Ｐｅｎｄｕｎｃｕｌａｇｉｎ）およびペニグルコニン（Ｐｕｎｉｇｌｕｃｏｎｉｎ）を好ましくは抽出物の４０重量％を越える量で含む請求項３乃至６のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項８】
総フラボノイドが抽出物の１重量％未満の量であり、かつ好ましくはフラボノイド類のルチン化学種が０．０００１〜０．０１％の量しか存在しない、請求項３乃至７のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項９】
前記抽出物が標準抽出物である、請求項３乃至８のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１０】
投与形態が栄養補助剤、好ましくは液剤、粉末剤、丸薬剤または錠剤および菓子バー、特に好ましくは焼いた可食性高タンパク質製品である請求項３乃至９のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１１】
ａ）少なくとも０．１％のアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、ｂ）高タンパク質成分混合物、ｃ）小麦粉、ｄ）膨張剤、ｅ）甘味料、およびｆ）水を含む、請求項１０に記載の投与形態。
【請求項１２】
リンゴ、バナナ、サクランボ、シナモン、クランベリー、ブドウ、甘露、ハチミツ、キウィ、レモン、ライム、オレンジ、モモ、ペパーミント、パイナップル、ラズベリー、タンジェリン、スイカ、セイヨウミザクラおよびその均等物を含む水溶性の天然または人工抽出物からなる群から選択される、前記栄養組成物に特徴的な味を付与するための香味成分を前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含む、請求項１０または１１のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１３】
青、緑、オレンジ、赤、紫、および黄色の水溶性の天然または人工色素；酸化鉄色素、青、ピンク、赤、および紫のウルトラマリン顔料；およびそれらの均等物等で構成される群から選択された、前記栄養組成物に特徴的な色を付与する着色成分を、全体で前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含む、請求項１０から１２のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１４】
前記抽出物の有効投与量が、１日当たり前記抽出物約１〜５００ｍｇの範囲、好ましくは１日当たり前記抽出物約２〜２００ｍｇの範囲である、請求項１または２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１５】
前記の有効投与量の投与を日光曝露前、曝露中または曝露後、好ましくは日光曝露の２〜３日前、特に好ましくは日光曝露の１週間前に開始する、請求項１、２、または１４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１６】
日光曝露中に、日焼け防止剤をヒト対象の皮膚に局所的に投与する、請求項１、２、１４または１５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１７】
ＵＶが誘発する（ＵＶ−ｉｎｄｕｃｅｄ）金属基質タンパク質活性（ＭＭＰ−活性）の低下または阻害、好ましくはＵＶが誘発する（ＵＶ−ｉｎｄｕｃｅｄ）コラゲナーゼ活性の低下または阻害のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物の使用。
【請求項１８】
ＵＶが誘発する（ＵＶ−ｉｎｄｕｃｅｄ）ストロメリシン−１活性の低下または阻害のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物の使用。
【請求項１】
皮膚の光損傷の徴候の遅延、防止および／または改善のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物の非治療的使用。
【請求項２】
皮膚の光損傷の徴候の予防および／または治療に適した薬剤の製造のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物の使用。
【請求項３】
アムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物を含むことを特徴とする経口投与に適した投与形態。
【請求項４】
経口投与に適した賦形剤を含む請求項３に記載の投与形態。
【請求項５】
投与形態が錠剤またはカプセルまたはエリキシル剤または懸濁剤またはドリンク剤である請求項３に記載の投与形態。
【請求項６】
投与形態が皮膚の光損傷の徴候を遅延、防止、および改善させることができる他の成分を含む請求項３乃至５のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項７】
前記抽出物がエンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ａ、エンブリカニン（Ｅｍｂｌｉｃａｎｉｎ）Ｂ、ペンダンクラーギン（Ｐｅｎｄｕｎｃｕｌａｇｉｎ）およびペニグルコニン（Ｐｕｎｉｇｌｕｃｏｎｉｎ）を好ましくは抽出物の４０重量％を越える量で含む請求項３乃至６のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項８】
総フラボノイドが抽出物の１重量％未満の量であり、かつ好ましくはフラボノイド類のルチン化学種が０．０００１〜０．０１％の量しか存在しない、請求項３乃至７のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項９】
前記抽出物が標準抽出物である、請求項３乃至８のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１０】
投与形態が栄養補助剤、好ましくは液剤、粉末剤、丸薬剤または錠剤および菓子バー、特に好ましくは焼いた可食性高タンパク質製品である請求項３乃至９のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１１】
ａ）少なくとも０．１％のアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物、ｂ）高タンパク質成分混合物、ｃ）小麦粉、ｄ）膨張剤、ｅ）甘味料、およびｆ）水を含む、請求項１０に記載の投与形態。
【請求項１２】
リンゴ、バナナ、サクランボ、シナモン、クランベリー、ブドウ、甘露、ハチミツ、キウィ、レモン、ライム、オレンジ、モモ、ペパーミント、パイナップル、ラズベリー、タンジェリン、スイカ、セイヨウミザクラおよびその均等物を含む水溶性の天然または人工抽出物からなる群から選択される、前記栄養組成物に特徴的な味を付与するための香味成分を前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含む、請求項１０または１１のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１３】
青、緑、オレンジ、赤、紫、および黄色の水溶性の天然または人工色素；酸化鉄色素、青、ピンク、赤、および紫のウルトラマリン顔料；およびそれらの均等物等で構成される群から選択された、前記栄養組成物に特徴的な色を付与する着色成分を、全体で前記乾燥組成物の０．１０重量％〜２．０重量％の範囲で含む、請求項１０から１２のいずれか一項に記載の投与形態。
【請求項１４】
前記抽出物の有効投与量が、１日当たり前記抽出物約１〜５００ｍｇの範囲、好ましくは１日当たり前記抽出物約２〜２００ｍｇの範囲である、請求項１または２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１５】
前記の有効投与量の投与を日光曝露前、曝露中または曝露後、好ましくは日光曝露の２〜３日前、特に好ましくは日光曝露の１週間前に開始する、請求項１、２、または１４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１６】
日光曝露中に、日焼け防止剤をヒト対象の皮膚に局所的に投与する、請求項１、２、１４または１５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１７】
ＵＶが誘発する（ＵＶ−ｉｎｄｕｃｅｄ）金属基質タンパク質活性（ＭＭＰ−活性）の低下または阻害、好ましくはＵＶが誘発する（ＵＶ−ｉｎｄｕｃｅｄ）コラゲナーゼ活性の低下または阻害のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)抽出物の使用。
【請求項１８】
ＵＶが誘発する（ＵＶ−ｉｎｄｕｃｅｄ）ストロメリシン−１活性の低下または阻害のためのアムラ(Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ)の抽出物の使用。
【公表番号】特表２００６−５１２３１０（Ｐ２００６−５１２３１０Ａ）
【公表日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５４８７７４（Ｐ２００４−５４８７７４）
【出願日】平成１５年１０月２４日（２００３．１０．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００３／０１１８４７
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０４１２３１
【国際公開日】平成１６年５月２１日（２００４．５．２１）
【出願人】（５９１０３２５９６）メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング (1,043)
【氏名又は名称原語表記】Ｍｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ
【住所又は居所原語表記】Ｆｒａｎｋｆｕｒｔｅｒ Ｓｔｒ． ２５０，Ｄ−６４２９３ Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｆｅｄｅｒａｌ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｇｅｒｍａｎｙ
【出願人】（５０４２７２２１３）ナトリオン、 インコーポレイテッド (3)
【氏名又は名称原語表記】ＮＡＴＲＥＯＮ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年１０月２４日（２００３．１０．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００３／０１１８４７
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０４１２３１
【国際公開日】平成１６年５月２１日（２００４．５．２１）
【出願人】（５９１０３２５９６）メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング (1,043)
【氏名又は名称原語表記】Ｍｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ
【住所又は居所原語表記】Ｆｒａｎｋｆｕｒｔｅｒ Ｓｔｒ． ２５０，Ｄ−６４２９３ Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｆｅｄｅｒａｌ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｇｅｒｍａｎｙ
【出願人】（５０４２７２２１３）ナトリオン、 インコーポレイテッド (3)
【氏名又は名称原語表記】ＮＡＴＲＥＯＮ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
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