アルツハイマー病の治療のためのＮ−アルキルフェニルカルボキサミドβ−セクレターゼ阻害剤
本発明は、β−セクレターゼ酵素の阻害剤であり、また、β−分泌酵素が関与する疾患、例えば、アルツハイマー病の治療と防止に有用な化合物を対象とする。本発明はまた、これらの化合物を含む医薬組成物、ならびに、β−分泌酵素が関与するこのような疾患の治療におけるこれらの化合物および組成物の使用を対象とする。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
アルツハイマー病は、細胞外プラークおよび細胞内の神経原線維錯綜としての、脳におけるアミロイドの異常な沈着により特徴付けられる。アミロイドの蓄積の速度は、生成、凝集および脳からの放出の速度の組合せである。アミロイドプラークの主な構成成分は、はるかに大きい前駆体タンパク質のタンパク質分解生成物である４ｋＤアミロイドタンパク質（βＡ４、また、Ａβ、β−タンパク質およびβＡＰとも呼ばれる）であることが一般に受け入れられている。アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰまたはＡβＰＰ）は、大きな細胞外ドメイン、膜貫通領域および短い細胞質尾部をもつ受容体の様な構造をしている。Ａβドメインは、ＡＰＰの細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインの双方の一部を含んでいるので、その放出は、そのＮＨ２−およびＣＯＯＨ−末端を生成する、別個の２つのタンパク質分解事象が存在することを意味する。膜からＡＰＰを放出し、ＡＰＰの可溶性ＣＯＯＨ−末端形（ＡＰＰｓ）を生成する、少なくとも２つの分泌機構が存在する。膜からＡＰＰとそのフラグメントを放出させるプロテアーゼは、「セクレターゼ」と命名されている。Ａβタンパク質の内側で切断してα−ＡＰＰｓを放出し、Ａβそのものの放出を不可能にする想定されるα−セクレターゼにより、ほとんどのＡＰＰｓは放出される。ＡＰＰｓの少量の部分は、β−セクレターゼにより放出され、これは、ＡβのＮＨ２−末端側を切断し、全Ａβドメインを含むＣＯＯＨ−末端フラグメント（ＣＴＦ）を生成する。
【０００２】
このように、β−セクレターゼ、またはβ−サイトアミロイド前駆体タンパク質切断酵素（「ＢＡＣＥ」）の活性により、ＡＰＰの異常切断、Ａβの生成、そして、アルツハイマー病の特徴である、脳におけるβアミロイドプラークの蓄積に至る（Ｒ．Ｎ．Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．、ｖｏｌ．５９、Ｓｅｐ ２００２、ｐｐ．１３６７−１３６８；Ｈ．Ｆｕｋｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．、ｖｏｌ．５９、Ｓｅｐ ２００２、ｐｐ．１３８１−１３８９；Ｊ．Ｔ．Ｈｕｓｅ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、ｖｏｌ ２７７、Ｎｏ．１８、ｉｓｓｕｅ ｏｆ Ｍａｙ ３、２００２、ｐｐ．１６２７８−１６２８４；Ｋ．Ｃ．Ｃｈｅｎ ａｎｄ Ｗ．Ｊ．Ｈｏｗｅ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ、ｖｏｌ．２９２、ｐｐ ７０２−７０８、２００２を参照）。したがって、β−セクレターゼ、またはＢＡＣＥを抑制できる治療剤はアルツハイマー病の治療に役立つ。
【０００３】
本発明の化合物は、β−セクレターゼ、またはＢＡＣＥの活性を抑制して、不溶性Ａβの形成を防ぎ、またＡβの産出を阻むことにより、アルツハイマー病を治療するのに役立つ。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、β−セクレターゼ酵素およびＢＡＣＥの阻害剤であり、β−セクレターゼ酵素が関与するアルツハイマー病などの疾患の治療に有用な化合物を対象とする。また、本発明は、これらの化合物を含む医薬組成物、ならびに、β−セクレターゼ酵素が関与するこのような疾患の予防または治療におけるこれらの化合物および組成物の使用も対象とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は式Ｉの化合物：
【０００６】
【化８】
[式中、
Ｒ１は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＯＲ５もしくは−Ｓ（Ｏ）２−Ｃ１〜６アルキルにより置換されている。）、
（２）水素、
（３）フェニル、および
（４）ベンジル
から選択され；
Ｒ２は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐ−、
（式中、Ｒ４は、以下からなる群：
（ａ）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｂ）フェニル、および
（ｃ）ベンジル
から独立に選択される。）
（３）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐＮ（Ｒ５）−、
（式中、Ｒ５は、以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｃ）−Ｃ３〜６シクロアルキル（非置換であるか、またはメチルにより置換されている。）、
（ｄ）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（ｅ）ベンジル
から独立に選択される。）
（４）−ＣＮ、
（５）−Ｃ１〜６アルキル−ＣＮ、
（６）ハロゲン、
（７）次の式：
【０００７】
【化９】
（式中、Ｒ８ａおよびＲ８ｂは以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−ＣＮ、
（ｃ）ハロ、
（ｄ）−Ｃ１〜６アルキル、
（ｅ）−Ｏ−Ｒ５、
（ｆ）−Ｓ−Ｒ５、
（ｇ）−ＣＯ２Ｒ５、および
（ｈ）テトラゾリル
から独立に選択される。）
（８）次の式：
【０００８】
【化１０】
（式中、ｎは、１、２、３もしくは４である。）
から選択され；
Ｒ３は、以下からなる群：
【０００９】
【化１１】
から選択され；
Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、およびＲ６ｃは、以下からなる群：
（１）水素、
（２）ハロゲン、
（３）−ＯＲ５、
（４）−ＳＲ５、および
（５）−Ｃ１〜６アルキル
から独立に選択され；
Ｒ７は、結合、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｏ−、−Ｓ−、および、−ＮＨ−からなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＣＮもしくは１〜４個のハロにより置換されている。）、
（３）−Ｃ３〜６シクロアルキル、
（４）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（５）ベンジル
から独立に選択されるか、あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、一緒になって、ピロリジンもしくはピペリジン環（非置換であるか、またはベンジル、−ＯＲ５もしくは１〜４個のハロにより置換されている。）を形成していてもよく；
ｍは、独立に、０、１、もしくは２であり；
ｐは、独立に、０、１、もしくは２である。]
および薬学的に許容されるそれらの塩に関する。
【００１０】
本発明の一実施形態は、Ｒ１がＣ１〜６アルキルである化合物を含む。
【００１１】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１がメチルである化合物を含む。
【００１２】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１がエチルである化合物を含む。
【００１３】
本発明の別の実施形態は、Ｒ２が、
Ｒ４−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ５−
[式中、Ｒ４は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル、
（２）フェニル、および
（３）ベンジル
から選択され；
Ｒ５は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル、
（２）フェニル、
（３）ベンジル、および
（４）水素
から選択される。]
である化合物を含む。
【００１４】
本発明の別の実施形態は、Ｒ３が、次の式：
【００１５】
【化１２】
（式中、Ｒ５はメチルであり、Ｒ６ａはＨもしくはＦであり、Ｒ６ｂおよびＲ６ｃは水素である。）
である化合物を含む。
【００１６】
本発明の別の実施形態は、Ｒ３が次の式：
【００１７】
【化１３】
である化合物を含む。
【００１８】
本発明の別の実施形態は、Ｒ９が水素である化合物を含む。
【００１９】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１０がＣ１〜６アルキルである化合物を含む。
【００２０】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１０がイソ−ブチルである化合物を含む。
【００２１】
本発明の別の実施形態は、後の実施例の表題の化合物と薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物を含む。
【００２２】
本発明の化合物は、少なくとも１つの不斉中心をもつ。さらなる不斉中心が、分子上の様々な置換基の性質に応じて存在し得る。不斉中心をもつ化合物は、エナンチオマー（光学異性体）、ジアステレオマー（配置異性体）または双方を生じ、混合物において、および純粋なもしくは部分的に精製された化合物としてのすべての可能なエナンチオマーおよびジアステレオマーは、本発明の範囲内に含まれると想定されている。本発明は、これらの化合物のこのような異性体の形態のすべてを包含するものである。
【００２３】
１つのエナンチオマーまたはジアステレオマーに富む化合物の独立した合成、あるいはクロマトグラフィーによるそれらの分離は、当技術分野において知られているように、本明細書において開示されている方法の適切な変更により達成され得る。それらの絶対立体化学は、結晶性生成物、あるいは、必要であれば、絶対配置が知られている不斉中心を含む試薬を用いて誘導された結晶性中間体のＸ線結晶構造解析により決定され得る。
【００２４】
望まれる場合には、化合物のラセミ混合体を分離して個々のエナンチオマーに単離することができる。当技術分野においてよく知られている方法、例えば、化合物のラセミ混合体にエナンチオマーとして純粋な化合物をカップリングしてジアステレオマー混合物とし、その後、個々のジアステレオマーを標準的な方法（例えば、分別結晶もしくはクロマトグラフィー）により分離することにより、この分離を実施することができる。カップリング反応は、エナンチオマーとして純粋な酸または塩基を用いる、塩の生成であることが多い。この場合には、ジアステレオマー誘導体は、付加されたキラルな残基の開裂により、純粋なエナンチオマーへ変換され得る。化合物のラセミ混合体はまた、当技術分野においてよく知られている、キラルな固定相を利用するクロマトグラフィー法によっても直接分離され得る。
【００２５】
あるいは、当技術分野においてよく知られている方法により、化合物のエナンチオマーを、知られている配置の光学的に純粋な出発物質または試薬を用いる立体選択的合成により得ることができる。
【００２６】
本発明の化合物は、スキーム１において概略が示されている方法により調製される。
【００２７】
【化１４】
【００２８】
スキーム１を参照すると、Ｎ−Ｂｏｃで保護されたアミノ酸（１−Ａ）が、ＢＯＰ試薬のようなカップリング剤およびアミン塩基の存在下で、第１級または第２級アミンと反応して、Ｎ−保護アミノアミド（１−Ｂ）を与える。Ｂｏｃ基は、酢酸エチル中のＨＣｌガスのような酸性条件の下で除去される。得られるアミノ酸アミド塩（１−Ｃ）は、メタノール中の水素化シアノホウ素ナトリウムのような還元剤を用いて、ｂｏｃで保護されたフェニルアラニンアルデヒドにより還元的アミノ化を受ける。生成物（１−Ｄ）は、ｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去するために、ＨＣｌガスやトリフルオロ酢酸などの強酸で処理されて、中間体ジアミン塩（１−Ｅ）を与える。化合物１−Ｅは、ＢＯＰ試薬およびトリアルキルアミン塩基のような標準的なアミドカップリング法により安息香酸誘導体とカップリングされて、最終化合物（Ｉ）を与える。
【００２９】
【化１５】
【００３０】
スキーム２は、阻害剤（Ｉ）の別の合成方法を例示している。Ｂｏｃ−Ｐｈｅが標準的な方法により還元されて、対応するアルコール（２−Ｂ）を与える。得られるアルコールは、塩化メタンスルホニルとトリエチルアミンのようなアミン塩基による処理により、アジド置換のために活性化される。アジドの生成は、２−Ｃのメシレートを、ＤＭＦのような非プロトン性極性溶剤中、高温で過剰のアジ化ナトリウムと反応させることにより起こる。生成物（２−Ｄ）は、ｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去するために、ＨＣｌガスのような強酸により処理されて、２−Ｅのアミノアジド塩を与える。２−Ｅのアミンと安息香酸誘導体との標準的なアミドカップリングは２−Ｆを与える。アジド官能基がホスフィン試薬により還元されて２−Ｇを与え、次に、それが、適切な置換ブロモ酢酸エステルと炭酸カリウムのような塩基によりアルキル化される。次に、２−Ｈのエステルは、水酸化リチウムのような塩基によりけん化されて、対応するカルボン酸を与える。２−Ｉの化合物は、ＢＯＰ試薬とトリアルキルアミン塩基のような標準的なアミドカップリング法により安息香酸誘導体とカップリングされて、最終化合物Ｉを与える。
【００３１】
多様な安息香酸類がスキーム１および２に適用でき、Ｒ２がスルホンアミド、スルホン、アミド、ニトリル、アルキルニトリル、ハロゲン、フェニル、およびシアノシクロアルキルである例が含まれる。スキーム１および２における安息香酸のＲ３は、通常、カルボキシアミノベンジル基、置換オレフィン、ＯもしくはＮアルキルシクロプロピル、またはアルキルエーテル、アルキルチオエーテル、あるいは第２級アミンである。
【００３２】
「実質的に純粋な」という用語は、当技術分野において知られている分析法により分析して、分離された材料が少なくとも９０％の純度、好ましくは９５％の純度、より一層好ましくは９９％の純度であることを意味する。「薬学的に許容される塩」という用語は、無機もしくは有機の塩基または無機もしくは有機の酸を含めて、薬学的に許容される毒性のない塩基または酸から調製される塩を表す。無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガンの塩、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などが含まれる。特に好ましいのは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウムの塩である。固体状の塩は２つ以上の結晶構造において存在することがあり、また水和物の形でも存在し得る。薬学的に許容される毒性のない有機塩基から誘導される塩には、第１級、第２級、および第３級アミン、天然に産する置換アミンを含めての置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩が含まれる。本発明の化合物が塩基性である場合、塩は、無機および有機の酸を含めて、薬学的に許容される毒性のない酸から調製され得る。このような酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが含まれる。特に好ましいのは、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、フマル酸、および酒石酸である。
【００３３】
本発明は、β−セクレターゼ酵素の活性、またはβ−サイトアミロイド前駆体タンパク質開裂酵素（「ＢＡＣＥ」）の活性の阻害剤として、このような抑制を必要としている患者もしくは被験者（例えば哺乳動物）に、本明細書において開示される化合物を使用することを対象とし、この使用は有効量の前記化合物の投与を含む。「β−セクレターゼ酵素」、「β−サイトアミロイド前駆体タンパク質開裂酵素」、および「ＢＡＣＥ」という用語は、本明細書においては交換可能であるとして使用されている。ヒト以外に、様々な他の哺乳動物を、本発明の方法により治療することができる。
【００３４】
さらに、本発明は、本発明の化合物と薬剤担体または希釈剤を合わせることを含む、ヒトおよび動物におけるβ−セクレターゼ酵素活性を阻害するための治療薬もしくは組成物の製造方法を対象とする。
【００３５】
本発明の化合物は、アルツハイマー病、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰとも呼ばれる）の異常な開裂により仲介される他の疾患、ならびに、β−セクレターゼの抑制により治療もしくは防止され得る他の病状の危険を治療、防止、改善、制御、および低減するのに有用である。このような病状には、軽度認知障害、２１トリソミー（ダウン症候群）、脳アミロイドアンギオパチー、変性痴呆、アミロイドーシスを伴う遺伝性大脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、クロイツフェルトヤコブ病、プリオン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、頭部外傷、卒中、ダウン症候群、膵炎、封入体筋炎、他の末梢アミロイドーシス、糖尿病およびアテローム性動脈硬化症が含まれる。
【００３６】
本発明の化合物が投与される被験者または患者としては、通常、β−セクレターゼ酵素活性の抑制が望まれるヒトの男性もしくは女性があるが、β−セクレターゼ酵素活性の抑制もしくは前記障害の治療が望まれる他の哺乳動物、例えば、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ウシ、ウマ、ヒツジ、ウサギ、モンキー、チンパンジーまたは他の類人猿もしくは霊長類もまた含まれる。
【００３７】
本発明の化合物は、薬剤を一緒にする組合せがいずれかの薬剤単独よりも安全で効果的である場合、本発明の化合物が有用である疾患もしくは病状の危険の治療、防止、制御、改善、または低減において１種または複数の他の薬剤と組み合わせて使用され得る。さらに、本発明の化合物を、本発明の化合物の副作用または毒性の危険性を治療、防止、制御、改善、もしくは低減する１種または複数の薬剤と組み合わせて使用してもよい。このような他の薬剤は、本発明の化合物と同時に、または逐次的に、それらに対して通常使用されている経路によって、またそのような量において投与され得る。こうして、本発明の医薬組成物には、本発明の化合物以外に、１種または複数の他の活性成分を含むものが含まれる。この組合せは、単位投薬形態の組合せ製品の一部として、あるいは、１種または複数の追加の薬剤が、治療投薬計画の一部として別の投薬形態で投与されるキットもしくは治療プロトコルとして投与され得る。
【００３８】
単位投薬量またはキットの形態のいずれかにおける、本発明の化合物と他の薬剤との組合せの例には、抗アルツハイマー薬、例えば、他のβ−セクレターゼ阻害剤もしくはγ−セクレターゼ阻害剤：ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤；ＮＳＡＩＤ（イブプロフェンが含まれる）；ビタミンＥ；抗アミロイド抗体；ＣＢ−１受容体アンタゴニストもしくはＣＢ−１受容体インバースアゴニスト；デオキシサイクリンおよびリファンピンのような抗生物質；Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニスト、例えばメマンチン；コリンエステラーゼ阻害剤、例えばガランタミン、リバスチグミン、ドネペジルおよびタクリン；あるいは、本発明の化合物の効果、安全性、便益を増すか、または望ましくない副作用または毒性を低減する受容体もしくは酵素に影響を及ぼす他の薬剤；との組合せが含まれる。組合せの前記リストは、単なる例示であり、いかなる仕方においても限定しようとするものではない。
【００３９】
本明細書では、「組成物」という用語は、所定の量または比率において指定された成分を含む製品、ならびに、指定された量の指定された成分の組合せから直接的もしくは間接的に得られる製品を包含すると想定されている。医薬組成物に関連するこの用語は、１種または複数の活性成分と不活性成分を含む任意選択の担体とを含む製品、ならびに、２種以上の成分の組合せ、複合化もしくは凝集により、直接的または間接的に得られる製品を包含すると想定されている。一般に、医薬組成物は、活性成分と、液体担体もしくは細かく分割された固体担体またはこれらの両方とを、均一で密接に結合した状態にし、次いで、必要であれば、その生成物を所望の製剤に成形することにより調製される。医薬組成物においては、対象活性化合物は、疾患の進行または状態に所望の効果を生じるのに十分な量で含まれる。
【００４０】
経口使用のための医薬組成物は、医薬組成物の製造技術分野に知られている任意の方法により調製され、また、このような組成物は、医薬品として洗練された口に合う調合剤を提供するために、甘味剤、芳香剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される１種または複数の作用剤を含み得る。錠剤は、錠剤の製造に適する、毒性のない薬学的に許容される賦形剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）との混合物中に活性成分を含む。これらの添加剤は、例えば、不活性希釈剤、顆粒化剤および崩壊剤、結合剤ならびに滑剤であり得る。錠剤は、被覆されていなくても、あるいは、それらは、消化管における崩壊と吸収を遅らせるために、知られている方法で被覆されることによって、より長期間に渡り作用を持続させてもよい。
【００４１】
経口使用の組成物はまた、活性成分が不活性固体希釈剤と混合されたハードゼラチンカプセル、あるいは、活性成分が水もしくはオイル媒体と混合されたソフトゼラチンカプセルとしても提供され得る。
【００４２】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適する添加剤との混合物中に活性物質を含む。このような添加剤には、懸濁剤と分散剤または湿潤剤が含まれる。水性懸濁液はまた、保存剤、着色剤、芳香剤、および甘味剤の１種または複数を含み得る。
【００４３】
油性懸濁液は、植物油もしくはミネラルオイル中に活性成分を懸濁させることにより処方され得る。油性懸濁液は増粘剤を含んでいてもよい。甘味剤および芳香剤は、口に合う経口調合剤を提供するために添加され得る。これらの組成物は、酸化防止剤を添加することにより保存され得る。
【００４４】
水の添加による水性懸濁液の調製に適する分散性粉末および顆粒は、分散剤もしくは湿潤剤、懸濁剤および１種または複数の保存剤との混合物中に活性成分が含まれる。さらなる添加剤、例えば、甘味剤、芳香剤および着色剤が存在してもよい。
【００４５】
本発明の医薬組成物はまた、水中油エマルジョンの形態であってもよく、これらは、甘味剤および芳香剤のような添加剤もまた含み得る。
【００４６】
本発明の医薬組成物はまた、滅菌された水性もしくは油性の注射可能な懸濁液の形態（これは、知られている技術により処方され得る）であってもよく、あるいは、薬剤の直腸内投与のための座薬の形態において投与されてもよい。
【００４７】
本発明の組成物はまた、その分野の熟練者に知られている吸引装置によって吸引により、あるいは、経皮パッチによって経皮的に投与されてもよい。
【００４８】
「薬学的に許容される」により、担体、希釈剤または添加剤が他の処方成分に適合しており、また、その受容者に有害であってはならないことを意味する。
【００４９】
化合物「の投与」または「を投与する」という用語は、個人の身体に、治療に役立つ形態と治療に役立つ量として導入され得る形態（これらに限定されないが、経口投薬形態、例えば、錠剤、カプセル、シロップ、懸濁液など；注射可能な投薬形態、例えば、ＩＶ、ＩＭ、またはＩＰなど；経皮投薬形態、クリーム、ゼリー、粉末、またはパッチが含まれる；口腔投薬形態；吸引用の粉末、スプレー、懸濁液など；直腸座薬；が含まれる）において、治療を必要としているその個人に本発明の化合物を提供することを意味すると理解されるべきである。
【００５０】
「有効量」もしくは「治療に有効な量」という用語は、研究者、獣医、医者または他の臨床医により得ようとされている、組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を引き出す、本発明の主題の化合物の量を意味する。本明細書では、「治療」という用語は、前記の病状の治療と防止の両方を、あるいは、特に、このような疾患もしくは障害に罹りやすい患者における、前記病状の予防的治療を表す。
【００５１】
本明細書では、「治療」または「治療する」という用語は、本発明の化合物の投与を意味し、（１）病気に罹った動物の病理もしくは症候を経験している、もしくは示している動物における疾患を抑制すること（すなわち、病理および／または症候のさらなる進行を止めること）、あるいは、（２）病気に罹った動物の病理もしくは症候を経験している、もしくは示している動物における疾患を改善すること（すなわち、病理および／または症候を反転させること）を含む。「制御する」という用語は、防止、治療、根絶、改善すること、あるいはそうでなければ、制御されている病状の激しさを低減することを含む。
【００５２】
本発明の化合物を含む組成物は、単位投薬形態において都合よく提供され、調剤技術分野においてよく知られている方法により調製され得る。「単位投薬形態」という用語は、活性および不活性成分のすべてが適切な系に一体化され、その結果、患者もしくは患者に薬剤を投与する人は、１回の総投薬量がそれに含まれている１つの容器またはパッケージを開けばよく、２つ以上の容器またはパッケージからの成分を一緒に混合する必要がない、単一投薬を意味すると考えられている。単位投薬形態の典型的な例は、経口投与のための錠剤またはカプセル、注射のための単一投薬のバイアル、あるいは、直腸投与のための座薬である。この単位投薬形態の列挙はいかなる仕方においても限定ではなく、単に、単位投薬形態の調剤技術分野における典型的な例を与えようとするものである。
【００５３】
本発明の化合物を含む組成物は、２種以上の成分（これらは活性または不活性成分、担体、希釈剤などであり得る）が、患者または患者に薬剤を投与する人による実際の投薬形態の調製のための説明書と共に提供される、キットとして都合よく提供され得る。このようなキットは、必要なすべての物質と成分をそれに含めて提供されてもよいし、あるいはそれらは患者または患者に薬剤を投与する人により別に得られなければならない物質または成分を使用するか、もしくは製造するための説明書を含んでいてもよい。
【００５４】
本発明の化合物が指示されるアルツハイマー病または他の疾患の危険を治療、防止、制御、改善、または低減する際には、本発明の化合物が、毎日１回の投薬として、または１日に２から６回の分割投薬として、あるいは徐放性の形態として好ましくは与えられ、動物の体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約１００ｍｇの毎日の投薬で投与される場合に、通常満足な結果が得られる。１日当たりの総投薬量は、体重１ｋｇ当たり、約１．０ｍｇから約２０００ｍｇ、好ましくは、約０．１ｍｇから約２０ｍｇである。７０ｋｇの成人の場合には、１日の総投薬量は、通常、約７ｍｇから約１，４００ｍｇであろう。この投薬計画は、最適な治療効果が得られるように調節され得る。本発明の化合物は、１日当たり、１から４回、好ましくは、１日当たり１または２回の投薬計画で投与され得る。
【００５５】
本発明の化合物、あるいは薬学的に許容されるそれらの塩の具体的な投与での投薬量は、１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、３０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、３００ｍｇおよび５００ｍｇである。本発明の医薬組成物は、約０．５ｍｇから１０００ｍｇの活性成分を含み、より好ましくは、約０．５ｍｇから５００ｍｇの活性成分、あるいは、０．５ｍｇから２５０ｍｇの活性成分、あるいは１ｍｇから１００ｍｇの活性成分を含む処方として提供され得る。
【００５６】
しかし、特定の患者に対する具体的な投薬のレベルと頻度は変わり、用いられる特定の化合物の活性、その化合物の代謝安定性および作用の長さ、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与の方式および時間、排泄速度、薬剤の組合せ、特定の病状の激しさ、ならびに治療の受容者を含めて、様々な要素に依存するであろうことは理解されよう。
【００５７】
β−セクレターゼ酵素活性の阻害剤としての本発明による化合物の有用性は、当技術分野において知られている方法により実証され得る。酵素の阻害は次の様にして求められる。
【００５８】
ＦＲＥＴアッセイ：均一終点蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）アッセイが、基質（［ＴＡＭＲＡ−５−ＣＯ−ＥＥＩＳＥＶＮＬＤＡＥＦ−ＮＨＱＳＹ］ＱＦＲＥＴ）と共に用いられ、この基質がＢＡＣＥ１により開裂されてＴＡＭＲＡから蛍光を放出する。基質のＫｍは基質の溶解性の限界のために決められない。典型的な反応では、１００μｌの全反応容積において、約３０ｎＭの酵素、１．２５μＭの基質、およびバッファ（５０ｍＭのＮａＯＡｃ、ｐＨ４．５、０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、０．２％のＣＨＡＰＳ、１５ｍＭのＥＤＴＡおよび１ｍＭのデフェロキサミン）が含まれる。反応は３０分間進行し、ＴＡＭＲＡフラグメントの遊離が、励起波長５３０ｎｍと放出波長５８０ｎｍを用いて、９６ウェルプレート用ＬＪＬ Ａｎａｌｙｓｔ ＡＤにおいて測定される。これらの条件の下で、基質の１０％未満がＢＡＣＥ１により処理される。これらの研究において使用された酵素は、バキュロウィルス発現系において製造された可溶性（膜貫通ドメインと細胞質伸張部は除かれている）ヒトタンパク質であった。化合物の阻害効力を測定するために、阻害剤のＤＭＳＯ溶液（４種の濃度の阻害剤が調製された：１ｍＭ、１００μＭ、１０μＭ、１μＭ）が反応混合物に含められた（最終のＤＭＳＯ濃度は０．８％であった）。すべての実験は前記の標準的反応条件を用いて室温で実施された。化合物のＩＣ５０を求めるために、拮抗式、Ｖ０／Ｖｉ＝１＋［Ｉ］／［ＩＣ５０］を用いて、化合物の阻害効力を予測した。通常、解離定数を再現する際の誤差は２倍未満である。
【００５９】
ＨＰＬＣアッセイ：均一終点ＨＰＬＣアッセイが、基質（クマリン−ＣＯ−ＲＥＶＮＦＥＶＥＦＲ）と共に用いられ、この基質は、ＢＡＣＥ１により開裂されて、クマロンと結合したＮ−末端フラグメントを放出する。基質のＫｍは、１００μＭを超え、基質の溶解性の限界のために求めることができない。典型的な反応では、１００μｌの全反応容積において、約２ｎＭの酵素、１．０μＭの基質、およびバッファ（５０ｍＭのＮａＯＡｃ、ｐＨ４．５、０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、０．２％のＣＨＡＰＳ、１５ｍＭのＥＤＴＡおよび１ｍＭのデフェロキサミン）が含まれる。反応は３０分間進行し、反応は、２５μＬのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（１Ｍ、ｐＨ８．０）の添加により停止される。得られた反応混合物が、ＨＰＬＣに保持され、生成物が、５分の直線勾配を用いて基質から分離された。これらの条件の下で、１０％未満の基質がＢＡＣＥ１により処理される。これらの研究において使用された酵素は、バキュロウィルス発現系において製造された可溶性（膜貫通ドメインと細胞質伸張部は除かれている）ヒトタンパク質であった。化合物の阻害効力を測定するために、阻害剤のＤＭＳＯ溶液（１２種の濃度の阻害剤が調製され、濃度範囲はＦＲＥＴにより予測される効力に応じて決められた）が反応混合物に含められた（最終のＤＭＳＯの濃度は１０％である）。すべての実験は前記の標準的反応条件を用いて室温で実施された。化合物のＩＣ５０を求めるために、４つのパラメータの式が、カーブフィッティングに用いられる。通常、解離定数を再現する際の誤差は２倍未満である。
【００６０】
特に、以下の実施例の化合物が、通常、約１ｎＭから１μＭのＩＣ５０をもち、前記アッセイにおいてβ−セクレターゼ酵素を阻害する活性をもっていた。このような結果は、β−セクレターゼ酵素活性阻害剤としての使用におけるこれらの化合物の固有の活性を示している。
【００６１】
本発明の化合物を調製するいくつかの方法が、以下のスキームと実施例において示される。出発物質は、当技術分野において知られている手順により、あるいは、本明細書に示されるようにして製造される。以下の実施例は、本発明がより完全に理解されるように提供される。これらの実施例は例示のためであって、いかなる仕方においても本発明を限定していると解釈されるべきでない。
【００６２】
中間体Ｉ
【００６３】
【化１６】
【００６４】
ステップＡ：５０ｍＬのＤＣＭに２．０ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ酪酸を含む溶液に、７３０ｍｇ（１０．０ｍｍｏｌ）のイソブチルアミン、４．４２ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および４．２ｍＬ（２４．０ｍｍｏｌ）のヒューニッヒ塩基を加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、その後、それを１０％のクエン酸（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）および塩水（ｂｒｉｎｅ、１０ｍＬ）で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、クロマトグラフィー（１：１のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけて、２．４ｇの所望のアミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ δ６．１１（ｂｓ，１Ｈ）、４．９６（ｂｓ，１Ｈ）、３．９７（ｍ，１Ｈ）、３．０８（ｍ，２Ｈ）、１．８８（ｍ，１Ｈ）、１．８０（ｍ，１Ｈ）、１．６６（ｍ，１Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、０．９５（ｍ，９Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２５９．２７
【００６５】
ステップＢ：１．５８ｇ（６．１０ｍｍｏｌ）のＡのＢｏｃアミドを含む０℃の溶液を、４０ｍＬのＥｔＯＡｃと４ｍｌのＭｅＯＨに溶かし、１０分間ＨＣｌガスにより飽和させた。反応混合物を１時間攪拌し、次に、半固体まで濃縮した。残留物を５０ｍＬのエーテルに微細分散（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ）させ、極めて吸湿性の強い固体として１．１０ｇのアミンＨＣｌ塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ３．７８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．１８（ｍ，２Ｈ）、１．８５（ｍ，３Ｈ）、１．０１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８７（ｄ，６Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝１５９．３１
【００６６】
ステップＣ：５ｍＬのＭｅＯＨに２００ｍｇ（０．７６ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＣＨＯを含む溶液に、７４６ｍｇ（３．８１ｍｍｏｌ、５当量）のＢのアミンおよび４７．０ｍｇ（０．７６ｍｍｏｌ）のＮａＢＨ３ＣＮを加えた。得られた溶液を室温で１６時間攪拌した。溶剤を除去し、残留物を２５ｍＬのＤＣＭに溶かし、ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）と塩水（１０ｍＬ）で洗った。溶剤の蒸発とクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）の後、２４５ｍｇの所望の生成物が残り、それを次の反応にそのまま用いた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．４〜７．１（ｍ，５Ｈ）、４．８４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．１１（ｂｓ，１Ｈ）、３．６０（ｂｓ，１Ｈ）、３．１１（ｍ，４Ｈ）、２．８２（ｍ，４Ｈ）、１．８１（ｍ，４Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）、０．９９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，６Ｈ）。
【００６７】
ステップＤ：ステップＣによる２０１ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）のＢｏｃアミンを含む０℃の溶液を２５ｍＬのＥｔＯＡｃに溶かし、５分間ＨＣｌガスにより飽和させた。反応混合物を１時間攪拌し、濃縮し、エーテルに微細分散させて、白色固体として１８５ｍｇの化合物Ｉを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．４４〜７．１５（ｍ，５Ｈ）、３．８３（ｍ，１Ｈ）、３．３３（ｍ，１Ｈ）、３．１８（ｍ，１Ｈ）、３．０６（ｍ，４Ｈ）、２．００（ｍ，２Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、１．０１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，６Ｈ）。
【００６８】
中間体ＩＩ
【００６９】
【化１７】
【００７０】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ吉草酸に置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．５５（ｂｔ，１Ｈ）、７．４１〜７．２６（ｍ，５Ｈ）、３．９２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．７７（ｄｄ，２Ｈ）、３．３０（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．０８（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．０３〜２．９５（ｍ，４Ｈ）、１．８８（ｍ，２Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、１．４１（ｍ，２Ｈ）、０．９４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）、０．９０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）
【００７１】
中間体ＩＩＩ
【００７２】
【化１８】
【００７３】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−メチオニンスルホンに置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４２（ｂｓ，１Ｈ）、７．４４〜７．２５（ｍ，５Ｈ）、４．０２（ｍ，１Ｈ）、３．８３（ｍ，１Ｈ）、３．３８〜３．０５（ｍ，７Ｈ）、３．００（ｓ，３Ｈ）、２．３９（ｂｄ，２Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ）。
【００７４】
中間体ＩＶ
【００７５】
【化１９】
【００７６】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−アラニンに置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４１（ｂｔ，１Ｈ）、７．４１〜７．２６（ｍ，５Ｈ）、４．０２（ｍ，１Ｈ）、３．８１（ｍ，２Ｈ）、３．４０〜３．００（ｍ，５Ｈ）１．８０（ｍ，２Ｈ）、１．６１（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）、０．９７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）
【００７７】
中間体Ｖ
【００７８】
【化２０】
【００７９】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−ホモセリンに置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．３７〜７．２７（ｍ，５Ｈ）、４．１３（ｍ，１Ｈ）、３．９９（ｍ，１Ｈ）、３．８６〜３．７５（ｍ，２Ｈ）、３．３８〜３．２５（ｍ，２Ｈ）、３．０３（ｍ，２Ｈ）、２．８９（ｍ １Ｈ）、２．７６（ｄ，１＝７．１４Ｈｚ，２Ｈ）、２．１４（ｍ，１Ｈ）、１．９９（ｍ，１Ｈ）、１．０１（ｄ，Ｊ＝６．６８Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３０８．１
【実施例１】
【００８０】
【化２１】
【００８１】
ステップＡ：１００ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２／ピリジン（３：１）中の５−アミノイソフタル酸ジメチル（５．０ｇ、２３．９０ｍｍｏｌ）のスラリを０℃で攪拌し、塩化メタンスルホニル（１．８５ｍＬ、２３．９０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４時間攪拌した。溶剤を真空で除去し、酢酸エチル（１００ｍＬ）を加えると沈殿が生成した。その生成物を濾過により捕集して、５．１４ｇのスルホンアミドを白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）δ８．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０２（ｓ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，６Ｈ）、３．０２（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ［Ｍ−ＯＣＨ３］＋＝２５６．１６
【００８２】
ステップＢ：１０ｍＬのＤＭＦ中の水素化ナトリウム（０１５３ｇ、３．８３ｍｍｏｌ、６０％のオイル分散体）の溶液に、ステップＡによるスルホンアミド（１．０ｇ、３．４８ｍｍｏｌ）を、その後、ヨウ化メチル（０．４３ｍＬ、６．９７ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）により反応を止め、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発させて、１．０３ｇのＮ−メチルスルホンアミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）δ８．４０（ｓ，１Ｈ）、８．１９（ｓ，２Ｈ）、３．９１（ｓ，６Ｈ）、３．３４（ｓ，３Ｈ）、３．０１（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝３０２．１５
【００８３】
ステップＣ：ステップＢによるジエステル（１．０３ｇ、３．３８ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１）に溶かし、０℃に冷却した。１ＮのＮａＯＨ（３．３８ｍＬ、３．３８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８時間かけて室温まで上げた。溶液を１ＮのＨＣｌ（３０ｍＬ）により酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。シリカゲルで精製（１％のＨＯＡｃを含む５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）して７９５ｍｇ（８２％）の１価の酸を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）δ８．３０（ｓ，１Ｈ）、８．１０（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．２７（ｓ，３Ｈ）、２．９４（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２８８．１６
【００８４】
ステップＤ：５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２に、１３３ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）のステップＣによる１価の酸、ＢＯＰ試薬（０．２３５ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（＋）−４−フルオロ−メチルベンジルアミン（７６ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（０．２４ｍＬ、１．３９ｍｍｏｌ）を含む溶液を雰囲気温度で１時間攪拌した。溶剤の蒸発と、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（９０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により、７１ｍｇのベンジルアミドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４０９．２７
【００８５】
ステップＥ：１０ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１）中、１７９ｍｇ（０．４３８ｍｍｏｌ）のステップＤによるベンジルアミドに、２ＮのＮａＯＨ（０．６６ｍＬ、１．３２ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を５０℃に１時間加熱した。冷却後、１ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）を加えることにより溶液を酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、１７３ｇの所望のカルボン酸を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２２（ｔ，１Ｈ）、８．１１（ｍ，１Ｈ）、８．０６（ｍ，１Ｈ）、７．３４（ｍ，５Ｈ）、６．４７（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．３３（ｍ，１Ｈ）、３．３７（ｓ，３Ｈ）、２．８７（ｓ，３Ｈ）、１．６４（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３９５．２
【００８６】
ステップＦ：５ｍＬのＤＣＭに３９．５ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のステップＥによるカルボン酸を含む溶液に、中間体アミン二塩酸ＩＶ（３５．７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、４４．２ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および０．０７６ｍＬ（０．４４ｍｍｏｌ）のジイソプロピルエチルアミンを加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、次に、２×１ｍＬのＨＣｌ（１Ｎ）、２×１ｍＬの水、および１ｍＬの塩水で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、逆相クロマトグラフィーにかけて、５７．７ｍｇの所望の生成物を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ９．０３（ｄ，Ｊ＝７．６９Ｈｚ，１Ｈ）、８．９０（ｂｓ，１Ｈ）、８．６１（ｄ，Ｊ＝８．４２Ｈｚ，１Ｈ）、８．４５（ｍ，１Ｈ）、８．２３（ｓ，１Ｈ）、８．０３（ｓ，１Ｈ）、７．９２（ｓ，１Ｈ）、７．４４（ｍ，２Ｈ）、７．２９〜７．１４（ｍ，７Ｈ）、５．１９（ｍ，１Ｈ）、４．５１（ｂｓ，１Ｈ）、３．８６（ｍ，１Ｈ）、３．３０（ｓ，３Ｈ）、３．１０（ｂｓ，１Ｈ）、３．００（ｓ，３Ｈ）、２．９９〜２．８７（ｍ，４Ｈ）、１．６８（ｍ，１Ｈ）、１．５０（ｄ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ，３Ｈ）、１．４０（ｄ，Ｊ＝６．７７Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝６５４．２８。
【実施例２】
【００８７】
【化２２】
【００８８】
ステップＡ：１００ｍＬのＭｅＯＨ中の３−アミノ−５−ニトロ安息香酸（３．６０ｇ、１９．７８ｍｍｏｌ）に、塩化チオニル（２．５９ｇ、２１．７６ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を６５℃に１２時間加熱した。真空で濃縮し、４．５７ｇのメチルエステル塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．６２（ｓ，１Ｈ）、８．２８（ｓ，１Ｈ）、８．１９（ｓ，１Ｈ）、３．９９（ｓ，３Ｈ）。
【００８９】
ステップＢ：１００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２／ピリジン（３：１）中、３．５３ｇ（１８ｍｍｏｌ）のステップＡによるアミノエステルの溶液に、塩化メタンスルホニル（２．０７ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を雰囲気温度で１時間攪拌し、その後、溶剤を蒸発させた。ガム状の残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で溶解し、１ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）で酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して３．９７のスルホンアミドをオフホワイトの固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４６（ｓ，１Ｈ）、８．３０（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｓ，１Ｈ）、３．９７（ｓ，３Ｈ）、３．０９（ｓ，３Ｈ）。
【００９０】
ステップＣ：水素化ナトリウム（０．２６ｇ、６．５５ｍｍｏｌ、６０％のオイル分散体）を１０ｍＬのＤＭＦに懸濁させ、それに、１．５ｇ（５．４５ｍｍｏｌ）のステップＢによるスルホンアミド（１０ｍＬのＤＭＦ中）を、その後、０．９３ｇ（６．５５ｍＬ）のヨウ化メチルを加えた。この溶液を雰囲気温度で３時間攪拌した。反応をＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）で止め、ＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して１．４３ｇのＮ−メチルスルホンアミドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ−Ｈ２Ｏ）＝２７２．２
【００９１】
ステップＤ：ＨＯＡｃ（２ｍＬ）を含む５０ｍＬのＥｔＯＨ中、ステップＣによるニトロスルホンアミド（２．７ｇ、ｍｍｏｌ）および０．１５ｇの１０％Ｐｄ／Ｃの溶液を、水素ガスバルーンを付けて室温で１２時間攪拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドを通して濾過し、濃縮し、シリカゲルで精製（１００％ＥｔＯＡｃ）して２．０５ｇの所望のアニリンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．２９（ｓ，１Ｈ）、７．２６（ｓ，１Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．２７（ｓｍ ３Ｈ）、２．８９（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２５８．２
【００９２】
ステップＥ：１２．５ｍＬのアセトニトリルに０．３２ｇ（１．３ｍｍｏｌ）のステップＤによるアニリン、０．３３ｇ（２．５ｍｍｏｌ）の１−ブロモ−２−ブチン、および０．３５ｇ（２．５ｍｍｏｌ）のＫ２ＣＯ３を含む溶液を４時間加熱還流した。反応混合物を冷却し、６０ｍＬのＨ２Ｏで希釈した。混合物をＥｔＯＡｃ（３×６０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて塩水（６０ｍＬ）で洗い、次に、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。溶剤を真空で除去し、シリカゲルクロマトグラフィー（２０％〜５０％ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）により精製し、１６０．０ｍｇのアルキニルアニリンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１１．２
【００９３】
ステップＦ：３ｍＬのＭｅＯＨに８３ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）のステップＥによるアルキニルアニリンを含む溶液を、触媒量のリンドラー触媒で処理し、水素雰囲気下に室温で１０分間攪拌した。シリカゲルを詰めたものを通して反応物を濾過し、真空で溶剤を除去した。逆相ＨＰＬＣにより精製し、３８ｍｇのＺ−アルケニルアニリンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１３．２
【００９４】
ステップＧ：２．５ｍＬのＥｔＯＡｃに３８ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）のステップＦによるＺ−アルケニルアニリンを含む０℃の溶液を、５８ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）の新たに調製されたジアゾメタンおよび触媒量の酢酸パラジウムで処理し、０℃で１５分間攪拌した。シリカゲルを詰めたものを通して反応物を濾過した。溶剤を蒸発させて、３４．０ｍｇのメチルシクロプロピルメチルアニリンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３２７．２
【００９５】
ステップＨ：５ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１）中、３４ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のステップＧによるメチルシクロプロピルメチルアニリンに、２ＮのＮａＯＨ（０．１５ｍＬ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を５０℃に１時間加熱した。冷却した後、１ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）を添加することにより溶液を酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、０．０２０ｇの所望のカルボン酸を得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１３．２
【００９６】
ステップＩ：５ｍＬのＤＣＭに、３１．３ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のステップＨによるカルボン酸、３７．６ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）の中間体ジアミンＩＩ、４４．４ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および０．０７６ｍＬ（０．４４ｍｍｏｌ）のヒューニッヒ塩基を含む溶液を、室温で１時間攪拌した。溶剤を蒸発させ、残留物を逆相クロマトグラフィーにより精製して、３５ｍｇの表題の化合物を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．３２〜６．９８（ｍ，８Ｈ）、４．５９（ｍ，１Ｈ）、４．１４〜４．０７（ｍ，１Ｈ）、３．８４（ｍ １Ｈ）、３．３６（ｓ，３Ｈ）、３．３３（ｍ，２Ｈ）、３．３１（ｓ，３Ｈ）、３．２４〜３．０７（ｍ，２Ｈ）、３．０１（ｍ，２Ｈ）、２．９２（ｍ，３Ｈ）、２．０３（ｍ，２Ｈ）、１．８７〜１．６３（ｍ，４Ｈ）、１．２５（ｍ，１Ｈ）、１．０７（ｍ，２Ｈ）、０．９７（ｍ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）、０．８３〜０．７６（ｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝６００．３２
【実施例３】
【００９７】
【化２３】
【００９８】
ステップＡ：０℃のトリフリック酸（１００ｍＬ）中の３−ニトロ安息香酸エステル（３５．３ｇ、１９５ｍｍｏｌ）に、ＮＩＳ（４３．８ｇ、１９５ｍｍｏｌ）を１０回に分けて加えた。氷浴を取り除き、４８時間攪拌する。反応は通常、５０％完了するまで進める。この時点で、さらにＮＩＳを加えてもよく、あるいは、０℃に冷却し、注意しながら水を滴下して加えて止める。混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で３回抽出し、合わせた抽出物を１０％のＮａＨＣＯ３溶液で、次に、水で洗った。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、シリカゲルで精製（へキサン中１０％のＥｔＯＡｃ）して２４．１ｇを得た。
【００９９】
ステップＢ：ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中の塩化スズ（８８．６ｇ、３９２ｍｍｏｌ）を還流し、１：１のＴＨＦ：ＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中のステップＡによるニトロ安息香酸エステル（２４．１ｇ、７８．４ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を３０分間還流し、次に、０℃に冷却した。得られた溶液をＮａ２ＣＯ３水溶液によりｐＨ８〜９の塩基性にした。水性層をＥｔＯＡｃ（７００ｍＬ）で３回抽出し、合わせた抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３で、次に、塩水で洗った。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、２１．７ｇの粗アニリンを得て、それをさらに精製することなく用いた。
【０１００】
ステップＣ：３：１のＣＨ２Ｃｌ２：ピリジン（７５ｍＬ）中の、ステップＢによるアニリン（２１．７ｇ、７８．３ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、塩化メタンスルホニル（６．３６ｍＬ、８２．２ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後に氷浴を取り除き、溶液を室温で一夜攪拌した。反応混合物を数回、１ＮのＨＣｌで抽出した。有機相を乾燥し、濃縮し、クロマトグラフィー（１：１のＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）にかけて、２５．２ｇの所望のスルホンアミドを白色固体として得た。
【０１０１】
ステップＤ：０℃のＤＭＦ（７５ｍＬ）中のステップＣによるスルホンアミド（２３．６ｇ、６６．５ｍｍｏｌ）を、６０％のＮａＨ（２．９２ｇ、７３．１ｍｍｏｌ）で処理した。この溶液を３０分間攪拌し、その後、ＭｅＩ（４．５５ｍＬ、７３．１ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴を取り除き、溶液を室温で１２時間攪拌した。反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で止め、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で３回抽出した。有機物を合わせて、水（５×５０ｍＬ）で洗い、乾燥し、濃縮して、２５．３ｇの所望のメチル化アニリドを得て、それをさらに精製することなく使用した。
【０１０２】
ステップＥ：トランス−２−メチルシクロプロパンメタノール（７．０ｇ、８１ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（２２５ｍＬ）中のＰＣＣ（２８ｇ、１３０ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この溶液は黒くなり、それを室温で３時間攪拌した。反応混合物をエーテル（２５０ｍＬ）で希釈し、デカンテーションした。Ｆｌｏｒｉｓｉｌを４インチ詰めたものを通してこの液体溶液を濾過し、Ｖｉｇｒｅｕｘカラムを通して蒸留することにより溶剤を除去して、１０ｇの所望のアルデヒドを得た。
【０１０３】
ステップＦ：ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中のＰＰｈ３（１２．４ｇ、４７．５ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ＣＢｒ４（７．８８ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１０分間攪拌し、次に、ステップＥによるカルボキシアルデヒド（１．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）で処理した。この溶液を０℃で３０分間、次に、室温で１時間攪拌した。ヘキサンを加え、固体を濾過し、濾液を濃縮して、４．４ｇの二臭化物を得た。
【０１０４】
ステップＧ：−７８℃のシクロヘキサン（６０ｍＬ）中のステップＦによる二臭化物（１５．４ｇ、６４．１ｍｍｏｌ）を、シクロヘキサン中２．０Ｍのｎ−ＢｕＬｉ（６４．１ｍＬ，１２８ｍｍｏｌ）で処理した。得られた反応混合物を、−７８℃で１時間攪拌し、次に、室温まで温め、２時間攪拌した。反応を水で止め、シクロヘキサン（３×２５ｍＬ）で抽出した。生成物を蒸留することにより精製した（ｂｐ＝６９〜７２Ｃ）。
【０１０５】
ステップＨ：１００ｍＬの三口丸底フラスコに、ＩｎＣｌ３（０．８２９ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を入れ、ヒートガンを用いて真空下に２分間乾燥した。ＴＨＦ（１６ｍＬ）を窒素の下で加え、−７８℃の氷浴にフラスコを浸漬した。次に、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（１２．４ｍＬ、ヘキサン中１Ｍ）を滴下して加え、得られた溶液を−７８℃で３０分間攪拌した。この時間の後に、ステップＧによるアセチレン（１０．４ｍｍｏｌ）を、次に、１．０ＭのＥｔ３Ｂ（１．６ｍＬ、ヘキサン中１Ｍ）を加えた。この反応混合物を、−７８℃で２．５時間攪拌し、次に、室温まで温めた。ＤＭＩ（１２ｍＬ）およびステップＤによるヨウ化アリール（１．４７ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を、次に、パラジウムトリフリルホスフィン錯体［ＴＨＦ（６ｍＬ）中で、Ｐｄ２（ＤＢＡ）３ＣＨＣｌ３（２０ｍｇ）とトリフリルホスフィン（２８ｍｇ）から調製した］を加えた。得られた反応混合物を６０℃で２時間加熱し、水で止め、エーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて乾燥し、濃縮し、生成物をキラルＯＪカラム（６０：４０ ヘキサンｗ／０．１％ＴＦＡ：ＥｔＯＨ）で精製した。第１ピークを集めて、２７６ｍｇの所望のジアステレオマーを得た。
【０１０６】
ステップＩ：１０ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ：水（３：１：１）中、２７６ｍｇ（０．８５３ｍｍｏｌ）のステップＨによるエステルに、２ＮのＮａＯＨ（０．６４ｍＬ、１．２８ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を室温で２時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、２ＮのＨＣｌ（１０ｍＬ）で酸性にし、ＣＨＣｌ３（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせてＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して、２５３ｍｇの所望のカルボン酸を得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１０．１２
【０１０７】
ステップＪ：３ｍＬのＤＣＭに、８．０ｍｇ（０．０２６ｍｍｏｌ）のステップＩによるカルボン酸、１０．６ｍｇ（０．０３１ｍｍｏｌ）の中間体ジアミンＩＶ、１１．４ｍｇ（０．０２６ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および０．０２６ｍＬ（０．１１ｍｍｏｌ）のヒューニッヒ塩基を含む溶液を、室温で１時間攪拌した。溶剤を蒸発させ、残留物を逆相クロマトグラフィーで精製して、１７．６ｍｇの表題の化合物を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５７．９５（ｂｄ，Ｈ）、７．６２〜７．５７（ｍ，３Ｈ）、７３３〜７．２２（ｍ，４Ｈ）、６．７４（ｓ，１Ｈ）、６．２１（ｄ，１Ｈ）、５．１５（ｄｔ，１Ｈ）、４．６６（ｍ，１Ｈ）、３．９６（ｂｄ，１Ｈ）、３．４８〜３．３９（ｍ，４Ｈ）、３．０９〜２．９５（ｍ，５Ｈ）、２．８６（ｓ，１Ｈ）、１．５６〜１．４４（ｍ，５Ｈ）、１．（ｍ，２Ｈ）、１．１２〜１．１１（ｄ，３Ｈ）、０．９２〜０．８４（ｎ，７Ｈ）、０．６６〜０．６２（ｍ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５６９．２
【０１０８】
以下の化合物を、適切な出発物質と試薬を用いて、前記実施例の表題の化合物と同様にして調製した。
【０１０９】
【表１】
【０１１０】
本発明が、その特定の実施形態を参照して説明され例示されたが、当業者ならば、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、手順およびプロトコルに関する様々な適応、変更、修正、置換、削除、または付加がなされ得ることを理解するであろう。したがって、本発明は特許請求の範囲により定められ、このような特許請求の範囲は可能な限り広く解釈されるものとする。
【背景技術】
【０００１】
アルツハイマー病は、細胞外プラークおよび細胞内の神経原線維錯綜としての、脳におけるアミロイドの異常な沈着により特徴付けられる。アミロイドの蓄積の速度は、生成、凝集および脳からの放出の速度の組合せである。アミロイドプラークの主な構成成分は、はるかに大きい前駆体タンパク質のタンパク質分解生成物である４ｋＤアミロイドタンパク質（βＡ４、また、Ａβ、β−タンパク質およびβＡＰとも呼ばれる）であることが一般に受け入れられている。アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰまたはＡβＰＰ）は、大きな細胞外ドメイン、膜貫通領域および短い細胞質尾部をもつ受容体の様な構造をしている。Ａβドメインは、ＡＰＰの細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインの双方の一部を含んでいるので、その放出は、そのＮＨ２−およびＣＯＯＨ−末端を生成する、別個の２つのタンパク質分解事象が存在することを意味する。膜からＡＰＰを放出し、ＡＰＰの可溶性ＣＯＯＨ−末端形（ＡＰＰｓ）を生成する、少なくとも２つの分泌機構が存在する。膜からＡＰＰとそのフラグメントを放出させるプロテアーゼは、「セクレターゼ」と命名されている。Ａβタンパク質の内側で切断してα−ＡＰＰｓを放出し、Ａβそのものの放出を不可能にする想定されるα−セクレターゼにより、ほとんどのＡＰＰｓは放出される。ＡＰＰｓの少量の部分は、β−セクレターゼにより放出され、これは、ＡβのＮＨ２−末端側を切断し、全Ａβドメインを含むＣＯＯＨ−末端フラグメント（ＣＴＦ）を生成する。
【０００２】
このように、β−セクレターゼ、またはβ−サイトアミロイド前駆体タンパク質切断酵素（「ＢＡＣＥ」）の活性により、ＡＰＰの異常切断、Ａβの生成、そして、アルツハイマー病の特徴である、脳におけるβアミロイドプラークの蓄積に至る（Ｒ．Ｎ．Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．、ｖｏｌ．５９、Ｓｅｐ ２００２、ｐｐ．１３６７−１３６８；Ｈ．Ｆｕｋｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．、ｖｏｌ．５９、Ｓｅｐ ２００２、ｐｐ．１３８１−１３８９；Ｊ．Ｔ．Ｈｕｓｅ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、ｖｏｌ ２７７、Ｎｏ．１８、ｉｓｓｕｅ ｏｆ Ｍａｙ ３、２００２、ｐｐ．１６２７８−１６２８４；Ｋ．Ｃ．Ｃｈｅｎ ａｎｄ Ｗ．Ｊ．Ｈｏｗｅ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ、ｖｏｌ．２９２、ｐｐ ７０２−７０８、２００２を参照）。したがって、β−セクレターゼ、またはＢＡＣＥを抑制できる治療剤はアルツハイマー病の治療に役立つ。
【０００３】
本発明の化合物は、β−セクレターゼ、またはＢＡＣＥの活性を抑制して、不溶性Ａβの形成を防ぎ、またＡβの産出を阻むことにより、アルツハイマー病を治療するのに役立つ。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、β−セクレターゼ酵素およびＢＡＣＥの阻害剤であり、β−セクレターゼ酵素が関与するアルツハイマー病などの疾患の治療に有用な化合物を対象とする。また、本発明は、これらの化合物を含む医薬組成物、ならびに、β−セクレターゼ酵素が関与するこのような疾患の予防または治療におけるこれらの化合物および組成物の使用も対象とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は式Ｉの化合物：
【０００６】
【化８】
[式中、
Ｒ１は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＯＲ５もしくは−Ｓ（Ｏ）２−Ｃ１〜６アルキルにより置換されている。）、
（２）水素、
（３）フェニル、および
（４）ベンジル
から選択され；
Ｒ２は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐ−、
（式中、Ｒ４は、以下からなる群：
（ａ）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｂ）フェニル、および
（ｃ）ベンジル
から独立に選択される。）
（３）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐＮ（Ｒ５）−、
（式中、Ｒ５は、以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｃ）−Ｃ３〜６シクロアルキル（非置換であるか、またはメチルにより置換されている。）、
（ｄ）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（ｅ）ベンジル
から独立に選択される。）
（４）−ＣＮ、
（５）−Ｃ１〜６アルキル−ＣＮ、
（６）ハロゲン、
（７）次の式：
【０００７】
【化９】
（式中、Ｒ８ａおよびＲ８ｂは以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−ＣＮ、
（ｃ）ハロ、
（ｄ）−Ｃ１〜６アルキル、
（ｅ）−Ｏ−Ｒ５、
（ｆ）−Ｓ−Ｒ５、
（ｇ）−ＣＯ２Ｒ５、および
（ｈ）テトラゾリル
から独立に選択される。）
（８）次の式：
【０００８】
【化１０】
（式中、ｎは、１、２、３もしくは４である。）
から選択され；
Ｒ３は、以下からなる群：
【０００９】
【化１１】
から選択され；
Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、およびＲ６ｃは、以下からなる群：
（１）水素、
（２）ハロゲン、
（３）−ＯＲ５、
（４）−ＳＲ５、および
（５）−Ｃ１〜６アルキル
から独立に選択され；
Ｒ７は、結合、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｏ−、−Ｓ−、および、−ＮＨ−からなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＣＮもしくは１〜４個のハロにより置換されている。）、
（３）−Ｃ３〜６シクロアルキル、
（４）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（５）ベンジル
から独立に選択されるか、あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、一緒になって、ピロリジンもしくはピペリジン環（非置換であるか、またはベンジル、−ＯＲ５もしくは１〜４個のハロにより置換されている。）を形成していてもよく；
ｍは、独立に、０、１、もしくは２であり；
ｐは、独立に、０、１、もしくは２である。]
および薬学的に許容されるそれらの塩に関する。
【００１０】
本発明の一実施形態は、Ｒ１がＣ１〜６アルキルである化合物を含む。
【００１１】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１がメチルである化合物を含む。
【００１２】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１がエチルである化合物を含む。
【００１３】
本発明の別の実施形態は、Ｒ２が、
Ｒ４−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ５−
[式中、Ｒ４は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル、
（２）フェニル、および
（３）ベンジル
から選択され；
Ｒ５は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル、
（２）フェニル、
（３）ベンジル、および
（４）水素
から選択される。]
である化合物を含む。
【００１４】
本発明の別の実施形態は、Ｒ３が、次の式：
【００１５】
【化１２】
（式中、Ｒ５はメチルであり、Ｒ６ａはＨもしくはＦであり、Ｒ６ｂおよびＲ６ｃは水素である。）
である化合物を含む。
【００１６】
本発明の別の実施形態は、Ｒ３が次の式：
【００１７】
【化１３】
である化合物を含む。
【００１８】
本発明の別の実施形態は、Ｒ９が水素である化合物を含む。
【００１９】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１０がＣ１〜６アルキルである化合物を含む。
【００２０】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１０がイソ−ブチルである化合物を含む。
【００２１】
本発明の別の実施形態は、後の実施例の表題の化合物と薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物を含む。
【００２２】
本発明の化合物は、少なくとも１つの不斉中心をもつ。さらなる不斉中心が、分子上の様々な置換基の性質に応じて存在し得る。不斉中心をもつ化合物は、エナンチオマー（光学異性体）、ジアステレオマー（配置異性体）または双方を生じ、混合物において、および純粋なもしくは部分的に精製された化合物としてのすべての可能なエナンチオマーおよびジアステレオマーは、本発明の範囲内に含まれると想定されている。本発明は、これらの化合物のこのような異性体の形態のすべてを包含するものである。
【００２３】
１つのエナンチオマーまたはジアステレオマーに富む化合物の独立した合成、あるいはクロマトグラフィーによるそれらの分離は、当技術分野において知られているように、本明細書において開示されている方法の適切な変更により達成され得る。それらの絶対立体化学は、結晶性生成物、あるいは、必要であれば、絶対配置が知られている不斉中心を含む試薬を用いて誘導された結晶性中間体のＸ線結晶構造解析により決定され得る。
【００２４】
望まれる場合には、化合物のラセミ混合体を分離して個々のエナンチオマーに単離することができる。当技術分野においてよく知られている方法、例えば、化合物のラセミ混合体にエナンチオマーとして純粋な化合物をカップリングしてジアステレオマー混合物とし、その後、個々のジアステレオマーを標準的な方法（例えば、分別結晶もしくはクロマトグラフィー）により分離することにより、この分離を実施することができる。カップリング反応は、エナンチオマーとして純粋な酸または塩基を用いる、塩の生成であることが多い。この場合には、ジアステレオマー誘導体は、付加されたキラルな残基の開裂により、純粋なエナンチオマーへ変換され得る。化合物のラセミ混合体はまた、当技術分野においてよく知られている、キラルな固定相を利用するクロマトグラフィー法によっても直接分離され得る。
【００２５】
あるいは、当技術分野においてよく知られている方法により、化合物のエナンチオマーを、知られている配置の光学的に純粋な出発物質または試薬を用いる立体選択的合成により得ることができる。
【００２６】
本発明の化合物は、スキーム１において概略が示されている方法により調製される。
【００２７】
【化１４】
【００２８】
スキーム１を参照すると、Ｎ−Ｂｏｃで保護されたアミノ酸（１−Ａ）が、ＢＯＰ試薬のようなカップリング剤およびアミン塩基の存在下で、第１級または第２級アミンと反応して、Ｎ−保護アミノアミド（１−Ｂ）を与える。Ｂｏｃ基は、酢酸エチル中のＨＣｌガスのような酸性条件の下で除去される。得られるアミノ酸アミド塩（１−Ｃ）は、メタノール中の水素化シアノホウ素ナトリウムのような還元剤を用いて、ｂｏｃで保護されたフェニルアラニンアルデヒドにより還元的アミノ化を受ける。生成物（１−Ｄ）は、ｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去するために、ＨＣｌガスやトリフルオロ酢酸などの強酸で処理されて、中間体ジアミン塩（１−Ｅ）を与える。化合物１−Ｅは、ＢＯＰ試薬およびトリアルキルアミン塩基のような標準的なアミドカップリング法により安息香酸誘導体とカップリングされて、最終化合物（Ｉ）を与える。
【００２９】
【化１５】
【００３０】
スキーム２は、阻害剤（Ｉ）の別の合成方法を例示している。Ｂｏｃ−Ｐｈｅが標準的な方法により還元されて、対応するアルコール（２−Ｂ）を与える。得られるアルコールは、塩化メタンスルホニルとトリエチルアミンのようなアミン塩基による処理により、アジド置換のために活性化される。アジドの生成は、２−Ｃのメシレートを、ＤＭＦのような非プロトン性極性溶剤中、高温で過剰のアジ化ナトリウムと反応させることにより起こる。生成物（２−Ｄ）は、ｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去するために、ＨＣｌガスのような強酸により処理されて、２−Ｅのアミノアジド塩を与える。２−Ｅのアミンと安息香酸誘導体との標準的なアミドカップリングは２−Ｆを与える。アジド官能基がホスフィン試薬により還元されて２−Ｇを与え、次に、それが、適切な置換ブロモ酢酸エステルと炭酸カリウムのような塩基によりアルキル化される。次に、２−Ｈのエステルは、水酸化リチウムのような塩基によりけん化されて、対応するカルボン酸を与える。２−Ｉの化合物は、ＢＯＰ試薬とトリアルキルアミン塩基のような標準的なアミドカップリング法により安息香酸誘導体とカップリングされて、最終化合物Ｉを与える。
【００３１】
多様な安息香酸類がスキーム１および２に適用でき、Ｒ２がスルホンアミド、スルホン、アミド、ニトリル、アルキルニトリル、ハロゲン、フェニル、およびシアノシクロアルキルである例が含まれる。スキーム１および２における安息香酸のＲ３は、通常、カルボキシアミノベンジル基、置換オレフィン、ＯもしくはＮアルキルシクロプロピル、またはアルキルエーテル、アルキルチオエーテル、あるいは第２級アミンである。
【００３２】
「実質的に純粋な」という用語は、当技術分野において知られている分析法により分析して、分離された材料が少なくとも９０％の純度、好ましくは９５％の純度、より一層好ましくは９９％の純度であることを意味する。「薬学的に許容される塩」という用語は、無機もしくは有機の塩基または無機もしくは有機の酸を含めて、薬学的に許容される毒性のない塩基または酸から調製される塩を表す。無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガンの塩、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などが含まれる。特に好ましいのは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウムの塩である。固体状の塩は２つ以上の結晶構造において存在することがあり、また水和物の形でも存在し得る。薬学的に許容される毒性のない有機塩基から誘導される塩には、第１級、第２級、および第３級アミン、天然に産する置換アミンを含めての置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩が含まれる。本発明の化合物が塩基性である場合、塩は、無機および有機の酸を含めて、薬学的に許容される毒性のない酸から調製され得る。このような酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが含まれる。特に好ましいのは、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、フマル酸、および酒石酸である。
【００３３】
本発明は、β−セクレターゼ酵素の活性、またはβ−サイトアミロイド前駆体タンパク質開裂酵素（「ＢＡＣＥ」）の活性の阻害剤として、このような抑制を必要としている患者もしくは被験者（例えば哺乳動物）に、本明細書において開示される化合物を使用することを対象とし、この使用は有効量の前記化合物の投与を含む。「β−セクレターゼ酵素」、「β−サイトアミロイド前駆体タンパク質開裂酵素」、および「ＢＡＣＥ」という用語は、本明細書においては交換可能であるとして使用されている。ヒト以外に、様々な他の哺乳動物を、本発明の方法により治療することができる。
【００３４】
さらに、本発明は、本発明の化合物と薬剤担体または希釈剤を合わせることを含む、ヒトおよび動物におけるβ−セクレターゼ酵素活性を阻害するための治療薬もしくは組成物の製造方法を対象とする。
【００３５】
本発明の化合物は、アルツハイマー病、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰとも呼ばれる）の異常な開裂により仲介される他の疾患、ならびに、β−セクレターゼの抑制により治療もしくは防止され得る他の病状の危険を治療、防止、改善、制御、および低減するのに有用である。このような病状には、軽度認知障害、２１トリソミー（ダウン症候群）、脳アミロイドアンギオパチー、変性痴呆、アミロイドーシスを伴う遺伝性大脳出血−オランダ型（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、クロイツフェルトヤコブ病、プリオン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、頭部外傷、卒中、ダウン症候群、膵炎、封入体筋炎、他の末梢アミロイドーシス、糖尿病およびアテローム性動脈硬化症が含まれる。
【００３６】
本発明の化合物が投与される被験者または患者としては、通常、β−セクレターゼ酵素活性の抑制が望まれるヒトの男性もしくは女性があるが、β−セクレターゼ酵素活性の抑制もしくは前記障害の治療が望まれる他の哺乳動物、例えば、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ウシ、ウマ、ヒツジ、ウサギ、モンキー、チンパンジーまたは他の類人猿もしくは霊長類もまた含まれる。
【００３７】
本発明の化合物は、薬剤を一緒にする組合せがいずれかの薬剤単独よりも安全で効果的である場合、本発明の化合物が有用である疾患もしくは病状の危険の治療、防止、制御、改善、または低減において１種または複数の他の薬剤と組み合わせて使用され得る。さらに、本発明の化合物を、本発明の化合物の副作用または毒性の危険性を治療、防止、制御、改善、もしくは低減する１種または複数の薬剤と組み合わせて使用してもよい。このような他の薬剤は、本発明の化合物と同時に、または逐次的に、それらに対して通常使用されている経路によって、またそのような量において投与され得る。こうして、本発明の医薬組成物には、本発明の化合物以外に、１種または複数の他の活性成分を含むものが含まれる。この組合せは、単位投薬形態の組合せ製品の一部として、あるいは、１種または複数の追加の薬剤が、治療投薬計画の一部として別の投薬形態で投与されるキットもしくは治療プロトコルとして投与され得る。
【００３８】
単位投薬量またはキットの形態のいずれかにおける、本発明の化合物と他の薬剤との組合せの例には、抗アルツハイマー薬、例えば、他のβ−セクレターゼ阻害剤もしくはγ−セクレターゼ阻害剤：ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤；ＮＳＡＩＤ（イブプロフェンが含まれる）；ビタミンＥ；抗アミロイド抗体；ＣＢ−１受容体アンタゴニストもしくはＣＢ−１受容体インバースアゴニスト；デオキシサイクリンおよびリファンピンのような抗生物質；Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニスト、例えばメマンチン；コリンエステラーゼ阻害剤、例えばガランタミン、リバスチグミン、ドネペジルおよびタクリン；あるいは、本発明の化合物の効果、安全性、便益を増すか、または望ましくない副作用または毒性を低減する受容体もしくは酵素に影響を及ぼす他の薬剤；との組合せが含まれる。組合せの前記リストは、単なる例示であり、いかなる仕方においても限定しようとするものではない。
【００３９】
本明細書では、「組成物」という用語は、所定の量または比率において指定された成分を含む製品、ならびに、指定された量の指定された成分の組合せから直接的もしくは間接的に得られる製品を包含すると想定されている。医薬組成物に関連するこの用語は、１種または複数の活性成分と不活性成分を含む任意選択の担体とを含む製品、ならびに、２種以上の成分の組合せ、複合化もしくは凝集により、直接的または間接的に得られる製品を包含すると想定されている。一般に、医薬組成物は、活性成分と、液体担体もしくは細かく分割された固体担体またはこれらの両方とを、均一で密接に結合した状態にし、次いで、必要であれば、その生成物を所望の製剤に成形することにより調製される。医薬組成物においては、対象活性化合物は、疾患の進行または状態に所望の効果を生じるのに十分な量で含まれる。
【００４０】
経口使用のための医薬組成物は、医薬組成物の製造技術分野に知られている任意の方法により調製され、また、このような組成物は、医薬品として洗練された口に合う調合剤を提供するために、甘味剤、芳香剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される１種または複数の作用剤を含み得る。錠剤は、錠剤の製造に適する、毒性のない薬学的に許容される賦形剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）との混合物中に活性成分を含む。これらの添加剤は、例えば、不活性希釈剤、顆粒化剤および崩壊剤、結合剤ならびに滑剤であり得る。錠剤は、被覆されていなくても、あるいは、それらは、消化管における崩壊と吸収を遅らせるために、知られている方法で被覆されることによって、より長期間に渡り作用を持続させてもよい。
【００４１】
経口使用の組成物はまた、活性成分が不活性固体希釈剤と混合されたハードゼラチンカプセル、あるいは、活性成分が水もしくはオイル媒体と混合されたソフトゼラチンカプセルとしても提供され得る。
【００４２】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適する添加剤との混合物中に活性物質を含む。このような添加剤には、懸濁剤と分散剤または湿潤剤が含まれる。水性懸濁液はまた、保存剤、着色剤、芳香剤、および甘味剤の１種または複数を含み得る。
【００４３】
油性懸濁液は、植物油もしくはミネラルオイル中に活性成分を懸濁させることにより処方され得る。油性懸濁液は増粘剤を含んでいてもよい。甘味剤および芳香剤は、口に合う経口調合剤を提供するために添加され得る。これらの組成物は、酸化防止剤を添加することにより保存され得る。
【００４４】
水の添加による水性懸濁液の調製に適する分散性粉末および顆粒は、分散剤もしくは湿潤剤、懸濁剤および１種または複数の保存剤との混合物中に活性成分が含まれる。さらなる添加剤、例えば、甘味剤、芳香剤および着色剤が存在してもよい。
【００４５】
本発明の医薬組成物はまた、水中油エマルジョンの形態であってもよく、これらは、甘味剤および芳香剤のような添加剤もまた含み得る。
【００４６】
本発明の医薬組成物はまた、滅菌された水性もしくは油性の注射可能な懸濁液の形態（これは、知られている技術により処方され得る）であってもよく、あるいは、薬剤の直腸内投与のための座薬の形態において投与されてもよい。
【００４７】
本発明の組成物はまた、その分野の熟練者に知られている吸引装置によって吸引により、あるいは、経皮パッチによって経皮的に投与されてもよい。
【００４８】
「薬学的に許容される」により、担体、希釈剤または添加剤が他の処方成分に適合しており、また、その受容者に有害であってはならないことを意味する。
【００４９】
化合物「の投与」または「を投与する」という用語は、個人の身体に、治療に役立つ形態と治療に役立つ量として導入され得る形態（これらに限定されないが、経口投薬形態、例えば、錠剤、カプセル、シロップ、懸濁液など；注射可能な投薬形態、例えば、ＩＶ、ＩＭ、またはＩＰなど；経皮投薬形態、クリーム、ゼリー、粉末、またはパッチが含まれる；口腔投薬形態；吸引用の粉末、スプレー、懸濁液など；直腸座薬；が含まれる）において、治療を必要としているその個人に本発明の化合物を提供することを意味すると理解されるべきである。
【００５０】
「有効量」もしくは「治療に有効な量」という用語は、研究者、獣医、医者または他の臨床医により得ようとされている、組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を引き出す、本発明の主題の化合物の量を意味する。本明細書では、「治療」という用語は、前記の病状の治療と防止の両方を、あるいは、特に、このような疾患もしくは障害に罹りやすい患者における、前記病状の予防的治療を表す。
【００５１】
本明細書では、「治療」または「治療する」という用語は、本発明の化合物の投与を意味し、（１）病気に罹った動物の病理もしくは症候を経験している、もしくは示している動物における疾患を抑制すること（すなわち、病理および／または症候のさらなる進行を止めること）、あるいは、（２）病気に罹った動物の病理もしくは症候を経験している、もしくは示している動物における疾患を改善すること（すなわち、病理および／または症候を反転させること）を含む。「制御する」という用語は、防止、治療、根絶、改善すること、あるいはそうでなければ、制御されている病状の激しさを低減することを含む。
【００５２】
本発明の化合物を含む組成物は、単位投薬形態において都合よく提供され、調剤技術分野においてよく知られている方法により調製され得る。「単位投薬形態」という用語は、活性および不活性成分のすべてが適切な系に一体化され、その結果、患者もしくは患者に薬剤を投与する人は、１回の総投薬量がそれに含まれている１つの容器またはパッケージを開けばよく、２つ以上の容器またはパッケージからの成分を一緒に混合する必要がない、単一投薬を意味すると考えられている。単位投薬形態の典型的な例は、経口投与のための錠剤またはカプセル、注射のための単一投薬のバイアル、あるいは、直腸投与のための座薬である。この単位投薬形態の列挙はいかなる仕方においても限定ではなく、単に、単位投薬形態の調剤技術分野における典型的な例を与えようとするものである。
【００５３】
本発明の化合物を含む組成物は、２種以上の成分（これらは活性または不活性成分、担体、希釈剤などであり得る）が、患者または患者に薬剤を投与する人による実際の投薬形態の調製のための説明書と共に提供される、キットとして都合よく提供され得る。このようなキットは、必要なすべての物質と成分をそれに含めて提供されてもよいし、あるいはそれらは患者または患者に薬剤を投与する人により別に得られなければならない物質または成分を使用するか、もしくは製造するための説明書を含んでいてもよい。
【００５４】
本発明の化合物が指示されるアルツハイマー病または他の疾患の危険を治療、防止、制御、改善、または低減する際には、本発明の化合物が、毎日１回の投薬として、または１日に２から６回の分割投薬として、あるいは徐放性の形態として好ましくは与えられ、動物の体重１ｋｇ当たり、約０．１ｍｇから約１００ｍｇの毎日の投薬で投与される場合に、通常満足な結果が得られる。１日当たりの総投薬量は、体重１ｋｇ当たり、約１．０ｍｇから約２０００ｍｇ、好ましくは、約０．１ｍｇから約２０ｍｇである。７０ｋｇの成人の場合には、１日の総投薬量は、通常、約７ｍｇから約１，４００ｍｇであろう。この投薬計画は、最適な治療効果が得られるように調節され得る。本発明の化合物は、１日当たり、１から４回、好ましくは、１日当たり１または２回の投薬計画で投与され得る。
【００５５】
本発明の化合物、あるいは薬学的に許容されるそれらの塩の具体的な投与での投薬量は、１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、３０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、３００ｍｇおよび５００ｍｇである。本発明の医薬組成物は、約０．５ｍｇから１０００ｍｇの活性成分を含み、より好ましくは、約０．５ｍｇから５００ｍｇの活性成分、あるいは、０．５ｍｇから２５０ｍｇの活性成分、あるいは１ｍｇから１００ｍｇの活性成分を含む処方として提供され得る。
【００５６】
しかし、特定の患者に対する具体的な投薬のレベルと頻度は変わり、用いられる特定の化合物の活性、その化合物の代謝安定性および作用の長さ、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与の方式および時間、排泄速度、薬剤の組合せ、特定の病状の激しさ、ならびに治療の受容者を含めて、様々な要素に依存するであろうことは理解されよう。
【００５７】
β−セクレターゼ酵素活性の阻害剤としての本発明による化合物の有用性は、当技術分野において知られている方法により実証され得る。酵素の阻害は次の様にして求められる。
【００５８】
ＦＲＥＴアッセイ：均一終点蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）アッセイが、基質（［ＴＡＭＲＡ−５−ＣＯ−ＥＥＩＳＥＶＮＬＤＡＥＦ−ＮＨＱＳＹ］ＱＦＲＥＴ）と共に用いられ、この基質がＢＡＣＥ１により開裂されてＴＡＭＲＡから蛍光を放出する。基質のＫｍは基質の溶解性の限界のために決められない。典型的な反応では、１００μｌの全反応容積において、約３０ｎＭの酵素、１．２５μＭの基質、およびバッファ（５０ｍＭのＮａＯＡｃ、ｐＨ４．５、０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、０．２％のＣＨＡＰＳ、１５ｍＭのＥＤＴＡおよび１ｍＭのデフェロキサミン）が含まれる。反応は３０分間進行し、ＴＡＭＲＡフラグメントの遊離が、励起波長５３０ｎｍと放出波長５８０ｎｍを用いて、９６ウェルプレート用ＬＪＬ Ａｎａｌｙｓｔ ＡＤにおいて測定される。これらの条件の下で、基質の１０％未満がＢＡＣＥ１により処理される。これらの研究において使用された酵素は、バキュロウィルス発現系において製造された可溶性（膜貫通ドメインと細胞質伸張部は除かれている）ヒトタンパク質であった。化合物の阻害効力を測定するために、阻害剤のＤＭＳＯ溶液（４種の濃度の阻害剤が調製された：１ｍＭ、１００μＭ、１０μＭ、１μＭ）が反応混合物に含められた（最終のＤＭＳＯ濃度は０．８％であった）。すべての実験は前記の標準的反応条件を用いて室温で実施された。化合物のＩＣ５０を求めるために、拮抗式、Ｖ０／Ｖｉ＝１＋［Ｉ］／［ＩＣ５０］を用いて、化合物の阻害効力を予測した。通常、解離定数を再現する際の誤差は２倍未満である。
【００５９】
ＨＰＬＣアッセイ：均一終点ＨＰＬＣアッセイが、基質（クマリン−ＣＯ−ＲＥＶＮＦＥＶＥＦＲ）と共に用いられ、この基質は、ＢＡＣＥ１により開裂されて、クマロンと結合したＮ−末端フラグメントを放出する。基質のＫｍは、１００μＭを超え、基質の溶解性の限界のために求めることができない。典型的な反応では、１００μｌの全反応容積において、約２ｎＭの酵素、１．０μＭの基質、およびバッファ（５０ｍＭのＮａＯＡｃ、ｐＨ４．５、０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、０．２％のＣＨＡＰＳ、１５ｍＭのＥＤＴＡおよび１ｍＭのデフェロキサミン）が含まれる。反応は３０分間進行し、反応は、２５μＬのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（１Ｍ、ｐＨ８．０）の添加により停止される。得られた反応混合物が、ＨＰＬＣに保持され、生成物が、５分の直線勾配を用いて基質から分離された。これらの条件の下で、１０％未満の基質がＢＡＣＥ１により処理される。これらの研究において使用された酵素は、バキュロウィルス発現系において製造された可溶性（膜貫通ドメインと細胞質伸張部は除かれている）ヒトタンパク質であった。化合物の阻害効力を測定するために、阻害剤のＤＭＳＯ溶液（１２種の濃度の阻害剤が調製され、濃度範囲はＦＲＥＴにより予測される効力に応じて決められた）が反応混合物に含められた（最終のＤＭＳＯの濃度は１０％である）。すべての実験は前記の標準的反応条件を用いて室温で実施された。化合物のＩＣ５０を求めるために、４つのパラメータの式が、カーブフィッティングに用いられる。通常、解離定数を再現する際の誤差は２倍未満である。
【００６０】
特に、以下の実施例の化合物が、通常、約１ｎＭから１μＭのＩＣ５０をもち、前記アッセイにおいてβ−セクレターゼ酵素を阻害する活性をもっていた。このような結果は、β−セクレターゼ酵素活性阻害剤としての使用におけるこれらの化合物の固有の活性を示している。
【００６１】
本発明の化合物を調製するいくつかの方法が、以下のスキームと実施例において示される。出発物質は、当技術分野において知られている手順により、あるいは、本明細書に示されるようにして製造される。以下の実施例は、本発明がより完全に理解されるように提供される。これらの実施例は例示のためであって、いかなる仕方においても本発明を限定していると解釈されるべきでない。
【００６２】
中間体Ｉ
【００６３】
【化１６】
【００６４】
ステップＡ：５０ｍＬのＤＣＭに２．０ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ酪酸を含む溶液に、７３０ｍｇ（１０．０ｍｍｏｌ）のイソブチルアミン、４．４２ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および４．２ｍＬ（２４．０ｍｍｏｌ）のヒューニッヒ塩基を加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、その後、それを１０％のクエン酸（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）および塩水（ｂｒｉｎｅ、１０ｍＬ）で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、クロマトグラフィー（１：１のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけて、２．４ｇの所望のアミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ δ６．１１（ｂｓ，１Ｈ）、４．９６（ｂｓ，１Ｈ）、３．９７（ｍ，１Ｈ）、３．０８（ｍ，２Ｈ）、１．８８（ｍ，１Ｈ）、１．８０（ｍ，１Ｈ）、１．６６（ｍ，１Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、０．９５（ｍ，９Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２５９．２７
【００６５】
ステップＢ：１．５８ｇ（６．１０ｍｍｏｌ）のＡのＢｏｃアミドを含む０℃の溶液を、４０ｍＬのＥｔＯＡｃと４ｍｌのＭｅＯＨに溶かし、１０分間ＨＣｌガスにより飽和させた。反応混合物を１時間攪拌し、次に、半固体まで濃縮した。残留物を５０ｍＬのエーテルに微細分散（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ）させ、極めて吸湿性の強い固体として１．１０ｇのアミンＨＣｌ塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ３．７８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．１８（ｍ，２Ｈ）、１．８５（ｍ，３Ｈ）、１．０１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８７（ｄ，６Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝１５９．３１
【００６６】
ステップＣ：５ｍＬのＭｅＯＨに２００ｍｇ（０．７６ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＣＨＯを含む溶液に、７４６ｍｇ（３．８１ｍｍｏｌ、５当量）のＢのアミンおよび４７．０ｍｇ（０．７６ｍｍｏｌ）のＮａＢＨ３ＣＮを加えた。得られた溶液を室温で１６時間攪拌した。溶剤を除去し、残留物を２５ｍＬのＤＣＭに溶かし、ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）と塩水（１０ｍＬ）で洗った。溶剤の蒸発とクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）の後、２４５ｍｇの所望の生成物が残り、それを次の反応にそのまま用いた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．４〜７．１（ｍ，５Ｈ）、４．８４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．１１（ｂｓ，１Ｈ）、３．６０（ｂｓ，１Ｈ）、３．１１（ｍ，４Ｈ）、２．８２（ｍ，４Ｈ）、１．８１（ｍ，４Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）、０．９９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，６Ｈ）。
【００６７】
ステップＤ：ステップＣによる２０１ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）のＢｏｃアミンを含む０℃の溶液を２５ｍＬのＥｔＯＡｃに溶かし、５分間ＨＣｌガスにより飽和させた。反応混合物を１時間攪拌し、濃縮し、エーテルに微細分散させて、白色固体として１８５ｍｇの化合物Ｉを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．４４〜７．１５（ｍ，５Ｈ）、３．８３（ｍ，１Ｈ）、３．３３（ｍ，１Ｈ）、３．１８（ｍ，１Ｈ）、３．０６（ｍ，４Ｈ）、２．００（ｍ，２Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、１．０１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，６Ｈ）。
【００６８】
中間体ＩＩ
【００６９】
【化１７】
【００７０】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ吉草酸に置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．５５（ｂｔ，１Ｈ）、７．４１〜７．２６（ｍ，５Ｈ）、３．９２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．７７（ｄｄ，２Ｈ）、３．３０（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．０８（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．０３〜２．９５（ｍ，４Ｈ）、１．８８（ｍ，２Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、１．４１（ｍ，２Ｈ）、０．９４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）、０．９０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）
【００７１】
中間体ＩＩＩ
【００７２】
【化１８】
【００７３】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−メチオニンスルホンに置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４２（ｂｓ，１Ｈ）、７．４４〜７．２５（ｍ，５Ｈ）、４．０２（ｍ，１Ｈ）、３．８３（ｍ，１Ｈ）、３．３８〜３．０５（ｍ，７Ｈ）、３．００（ｓ，３Ｈ）、２．３９（ｂｄ，２Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ）。
【００７４】
中間体ＩＶ
【００７５】
【化１９】
【００７６】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−アラニンに置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４１（ｂｔ，１Ｈ）、７．４１〜７．２６（ｍ，５Ｈ）、４．０２（ｍ，１Ｈ）、３．８１（ｍ，２Ｈ）、３．４０〜３．００（ｍ，５Ｈ）１．８０（ｍ，２Ｈ）、１．６１（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）、０．９７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）
【００７７】
中間体Ｖ
【００７８】
【化２０】
【００７９】
中間体Ｉと同様にして調製されたが、ステップＡにおけるアミンとして、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−ホモセリンに置き換えた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．３７〜７．２７（ｍ，５Ｈ）、４．１３（ｍ，１Ｈ）、３．９９（ｍ，１Ｈ）、３．８６〜３．７５（ｍ，２Ｈ）、３．３８〜３．２５（ｍ，２Ｈ）、３．０３（ｍ，２Ｈ）、２．８９（ｍ １Ｈ）、２．７６（ｄ，１＝７．１４Ｈｚ，２Ｈ）、２．１４（ｍ，１Ｈ）、１．９９（ｍ，１Ｈ）、１．０１（ｄ，Ｊ＝６．６８Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３０８．１
【実施例１】
【００８０】
【化２１】
【００８１】
ステップＡ：１００ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２／ピリジン（３：１）中の５−アミノイソフタル酸ジメチル（５．０ｇ、２３．９０ｍｍｏｌ）のスラリを０℃で攪拌し、塩化メタンスルホニル（１．８５ｍＬ、２３．９０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４時間攪拌した。溶剤を真空で除去し、酢酸エチル（１００ｍＬ）を加えると沈殿が生成した。その生成物を濾過により捕集して、５．１４ｇのスルホンアミドを白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）δ８．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０２（ｓ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，６Ｈ）、３．０２（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ［Ｍ−ＯＣＨ３］＋＝２５６．１６
【００８２】
ステップＢ：１０ｍＬのＤＭＦ中の水素化ナトリウム（０１５３ｇ、３．８３ｍｍｏｌ、６０％のオイル分散体）の溶液に、ステップＡによるスルホンアミド（１．０ｇ、３．４８ｍｍｏｌ）を、その後、ヨウ化メチル（０．４３ｍＬ、６．９７ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）により反応を止め、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発させて、１．０３ｇのＮ−メチルスルホンアミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）δ８．４０（ｓ，１Ｈ）、８．１９（ｓ，２Ｈ）、３．９１（ｓ，６Ｈ）、３．３４（ｓ，３Ｈ）、３．０１（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝３０２．１５
【００８３】
ステップＣ：ステップＢによるジエステル（１．０３ｇ、３．３８ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１）に溶かし、０℃に冷却した。１ＮのＮａＯＨ（３．３８ｍＬ、３．３８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８時間かけて室温まで上げた。溶液を１ＮのＨＣｌ（３０ｍＬ）により酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、塩水で洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。シリカゲルで精製（１％のＨＯＡｃを含む５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）して７９５ｍｇ（８２％）の１価の酸を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）δ８．３０（ｓ，１Ｈ）、８．１０（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．２７（ｓ，３Ｈ）、２．９４（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２８８．１６
【００８４】
ステップＤ：５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２に、１３３ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）のステップＣによる１価の酸、ＢＯＰ試薬（０．２３５ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（＋）−４−フルオロ−メチルベンジルアミン（７６ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（０．２４ｍＬ、１．３９ｍｍｏｌ）を含む溶液を雰囲気温度で１時間攪拌した。溶剤の蒸発と、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（９０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により、７１ｍｇのベンジルアミドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４０９．２７
【００８５】
ステップＥ：１０ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１）中、１７９ｍｇ（０．４３８ｍｍｏｌ）のステップＤによるベンジルアミドに、２ＮのＮａＯＨ（０．６６ｍＬ、１．３２ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を５０℃に１時間加熱した。冷却後、１ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）を加えることにより溶液を酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、１７３ｇの所望のカルボン酸を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２２（ｔ，１Ｈ）、８．１１（ｍ，１Ｈ）、８．０６（ｍ，１Ｈ）、７．３４（ｍ，５Ｈ）、６．４７（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．３３（ｍ，１Ｈ）、３．３７（ｓ，３Ｈ）、２．８７（ｓ，３Ｈ）、１．６４（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３９５．２
【００８６】
ステップＦ：５ｍＬのＤＣＭに３９．５ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のステップＥによるカルボン酸を含む溶液に、中間体アミン二塩酸ＩＶ（３５．７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、４４．２ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および０．０７６ｍＬ（０．４４ｍｍｏｌ）のジイソプロピルエチルアミンを加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、次に、２×１ｍＬのＨＣｌ（１Ｎ）、２×１ｍＬの水、および１ｍＬの塩水で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、逆相クロマトグラフィーにかけて、５７．７ｍｇの所望の生成物を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ９．０３（ｄ，Ｊ＝７．６９Ｈｚ，１Ｈ）、８．９０（ｂｓ，１Ｈ）、８．６１（ｄ，Ｊ＝８．４２Ｈｚ，１Ｈ）、８．４５（ｍ，１Ｈ）、８．２３（ｓ，１Ｈ）、８．０３（ｓ，１Ｈ）、７．９２（ｓ，１Ｈ）、７．４４（ｍ，２Ｈ）、７．２９〜７．１４（ｍ，７Ｈ）、５．１９（ｍ，１Ｈ）、４．５１（ｂｓ，１Ｈ）、３．８６（ｍ，１Ｈ）、３．３０（ｓ，３Ｈ）、３．１０（ｂｓ，１Ｈ）、３．００（ｓ，３Ｈ）、２．９９〜２．８７（ｍ，４Ｈ）、１．６８（ｍ，１Ｈ）、１．５０（ｄ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ，３Ｈ）、１．４０（ｄ，Ｊ＝６．７７Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝６５４．２８。
【実施例２】
【００８７】
【化２２】
【００８８】
ステップＡ：１００ｍＬのＭｅＯＨ中の３−アミノ−５−ニトロ安息香酸（３．６０ｇ、１９．７８ｍｍｏｌ）に、塩化チオニル（２．５９ｇ、２１．７６ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を６５℃に１２時間加熱した。真空で濃縮し、４．５７ｇのメチルエステル塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．６２（ｓ，１Ｈ）、８．２８（ｓ，１Ｈ）、８．１９（ｓ，１Ｈ）、３．９９（ｓ，３Ｈ）。
【００８９】
ステップＢ：１００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２／ピリジン（３：１）中、３．５３ｇ（１８ｍｍｏｌ）のステップＡによるアミノエステルの溶液に、塩化メタンスルホニル（２．０７ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を雰囲気温度で１時間攪拌し、その後、溶剤を蒸発させた。ガム状の残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で溶解し、１ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）で酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して３．９７のスルホンアミドをオフホワイトの固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．４６（ｓ，１Ｈ）、８．３０（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｓ，１Ｈ）、３．９７（ｓ，３Ｈ）、３．０９（ｓ，３Ｈ）。
【００９０】
ステップＣ：水素化ナトリウム（０．２６ｇ、６．５５ｍｍｏｌ、６０％のオイル分散体）を１０ｍＬのＤＭＦに懸濁させ、それに、１．５ｇ（５．４５ｍｍｏｌ）のステップＢによるスルホンアミド（１０ｍＬのＤＭＦ中）を、その後、０．９３ｇ（６．５５ｍＬ）のヨウ化メチルを加えた。この溶液を雰囲気温度で３時間攪拌した。反応をＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）で止め、ＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して１．４３ｇのＮ−メチルスルホンアミドを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ−Ｈ２Ｏ）＝２７２．２
【００９１】
ステップＤ：ＨＯＡｃ（２ｍＬ）を含む５０ｍＬのＥｔＯＨ中、ステップＣによるニトロスルホンアミド（２．７ｇ、ｍｍｏｌ）および０．１５ｇの１０％Ｐｄ／Ｃの溶液を、水素ガスバルーンを付けて室温で１２時間攪拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドを通して濾過し、濃縮し、シリカゲルで精製（１００％ＥｔＯＡｃ）して２．０５ｇの所望のアニリンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．２９（ｓ，１Ｈ）、７．２６（ｓ，１Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．２７（ｓｍ ３Ｈ）、２．８９（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２５８．２
【００９２】
ステップＥ：１２．５ｍＬのアセトニトリルに０．３２ｇ（１．３ｍｍｏｌ）のステップＤによるアニリン、０．３３ｇ（２．５ｍｍｏｌ）の１−ブロモ−２−ブチン、および０．３５ｇ（２．５ｍｍｏｌ）のＫ２ＣＯ３を含む溶液を４時間加熱還流した。反応混合物を冷却し、６０ｍＬのＨ２Ｏで希釈した。混合物をＥｔＯＡｃ（３×６０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせて塩水（６０ｍＬ）で洗い、次に、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。溶剤を真空で除去し、シリカゲルクロマトグラフィー（２０％〜５０％ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）により精製し、１６０．０ｍｇのアルキニルアニリンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１１．２
【００９３】
ステップＦ：３ｍＬのＭｅＯＨに８３ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）のステップＥによるアルキニルアニリンを含む溶液を、触媒量のリンドラー触媒で処理し、水素雰囲気下に室温で１０分間攪拌した。シリカゲルを詰めたものを通して反応物を濾過し、真空で溶剤を除去した。逆相ＨＰＬＣにより精製し、３８ｍｇのＺ−アルケニルアニリンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１３．２
【００９４】
ステップＧ：２．５ｍＬのＥｔＯＡｃに３８ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）のステップＦによるＺ−アルケニルアニリンを含む０℃の溶液を、５８ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）の新たに調製されたジアゾメタンおよび触媒量の酢酸パラジウムで処理し、０℃で１５分間攪拌した。シリカゲルを詰めたものを通して反応物を濾過した。溶剤を蒸発させて、３４．０ｍｇのメチルシクロプロピルメチルアニリンを得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３２７．２
【００９５】
ステップＨ：５ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１）中、３４ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のステップＧによるメチルシクロプロピルメチルアニリンに、２ＮのＮａＯＨ（０．１５ｍＬ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を５０℃に１時間加熱した。冷却した後、１ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）を添加することにより溶液を酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、０．０２０ｇの所望のカルボン酸を得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１３．２
【００９６】
ステップＩ：５ｍＬのＤＣＭに、３１．３ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のステップＨによるカルボン酸、３７．６ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）の中間体ジアミンＩＩ、４４．４ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および０．０７６ｍＬ（０．４４ｍｍｏｌ）のヒューニッヒ塩基を含む溶液を、室温で１時間攪拌した。溶剤を蒸発させ、残留物を逆相クロマトグラフィーにより精製して、３５ｍｇの表題の化合物を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．３２〜６．９８（ｍ，８Ｈ）、４．５９（ｍ，１Ｈ）、４．１４〜４．０７（ｍ，１Ｈ）、３．８４（ｍ １Ｈ）、３．３６（ｓ，３Ｈ）、３．３３（ｍ，２Ｈ）、３．３１（ｓ，３Ｈ）、３．２４〜３．０７（ｍ，２Ｈ）、３．０１（ｍ，２Ｈ）、２．９２（ｍ，３Ｈ）、２．０３（ｍ，２Ｈ）、１．８７〜１．６３（ｍ，４Ｈ）、１．２５（ｍ，１Ｈ）、１．０７（ｍ，２Ｈ）、０．９７（ｍ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）、０．８３〜０．７６（ｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝６００．３２
【実施例３】
【００９７】
【化２３】
【００９８】
ステップＡ：０℃のトリフリック酸（１００ｍＬ）中の３−ニトロ安息香酸エステル（３５．３ｇ、１９５ｍｍｏｌ）に、ＮＩＳ（４３．８ｇ、１９５ｍｍｏｌ）を１０回に分けて加えた。氷浴を取り除き、４８時間攪拌する。反応は通常、５０％完了するまで進める。この時点で、さらにＮＩＳを加えてもよく、あるいは、０℃に冷却し、注意しながら水を滴下して加えて止める。混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で３回抽出し、合わせた抽出物を１０％のＮａＨＣＯ３溶液で、次に、水で洗った。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、シリカゲルで精製（へキサン中１０％のＥｔＯＡｃ）して２４．１ｇを得た。
【００９９】
ステップＢ：ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中の塩化スズ（８８．６ｇ、３９２ｍｍｏｌ）を還流し、１：１のＴＨＦ：ＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中のステップＡによるニトロ安息香酸エステル（２４．１ｇ、７８．４ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を３０分間還流し、次に、０℃に冷却した。得られた溶液をＮａ２ＣＯ３水溶液によりｐＨ８〜９の塩基性にした。水性層をＥｔＯＡｃ（７００ｍＬ）で３回抽出し、合わせた抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３で、次に、塩水で洗った。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、２１．７ｇの粗アニリンを得て、それをさらに精製することなく用いた。
【０１００】
ステップＣ：３：１のＣＨ２Ｃｌ２：ピリジン（７５ｍＬ）中の、ステップＢによるアニリン（２１．７ｇ、７８．３ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、塩化メタンスルホニル（６．３６ｍＬ、８２．２ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後に氷浴を取り除き、溶液を室温で一夜攪拌した。反応混合物を数回、１ＮのＨＣｌで抽出した。有機相を乾燥し、濃縮し、クロマトグラフィー（１：１のＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）にかけて、２５．２ｇの所望のスルホンアミドを白色固体として得た。
【０１０１】
ステップＤ：０℃のＤＭＦ（７５ｍＬ）中のステップＣによるスルホンアミド（２３．６ｇ、６６．５ｍｍｏｌ）を、６０％のＮａＨ（２．９２ｇ、７３．１ｍｍｏｌ）で処理した。この溶液を３０分間攪拌し、その後、ＭｅＩ（４．５５ｍＬ、７３．１ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴を取り除き、溶液を室温で１２時間攪拌した。反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で止め、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で３回抽出した。有機物を合わせて、水（５×５０ｍＬ）で洗い、乾燥し、濃縮して、２５．３ｇの所望のメチル化アニリドを得て、それをさらに精製することなく使用した。
【０１０２】
ステップＥ：トランス−２−メチルシクロプロパンメタノール（７．０ｇ、８１ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（２２５ｍＬ）中のＰＣＣ（２８ｇ、１３０ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この溶液は黒くなり、それを室温で３時間攪拌した。反応混合物をエーテル（２５０ｍＬ）で希釈し、デカンテーションした。Ｆｌｏｒｉｓｉｌを４インチ詰めたものを通してこの液体溶液を濾過し、Ｖｉｇｒｅｕｘカラムを通して蒸留することにより溶剤を除去して、１０ｇの所望のアルデヒドを得た。
【０１０３】
ステップＦ：ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中のＰＰｈ３（１２．４ｇ、４７．５ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ＣＢｒ４（７．８８ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１０分間攪拌し、次に、ステップＥによるカルボキシアルデヒド（１．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）で処理した。この溶液を０℃で３０分間、次に、室温で１時間攪拌した。ヘキサンを加え、固体を濾過し、濾液を濃縮して、４．４ｇの二臭化物を得た。
【０１０４】
ステップＧ：−７８℃のシクロヘキサン（６０ｍＬ）中のステップＦによる二臭化物（１５．４ｇ、６４．１ｍｍｏｌ）を、シクロヘキサン中２．０Ｍのｎ−ＢｕＬｉ（６４．１ｍＬ，１２８ｍｍｏｌ）で処理した。得られた反応混合物を、−７８℃で１時間攪拌し、次に、室温まで温め、２時間攪拌した。反応を水で止め、シクロヘキサン（３×２５ｍＬ）で抽出した。生成物を蒸留することにより精製した（ｂｐ＝６９〜７２Ｃ）。
【０１０５】
ステップＨ：１００ｍＬの三口丸底フラスコに、ＩｎＣｌ３（０．８２９ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を入れ、ヒートガンを用いて真空下に２分間乾燥した。ＴＨＦ（１６ｍＬ）を窒素の下で加え、−７８℃の氷浴にフラスコを浸漬した。次に、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（１２．４ｍＬ、ヘキサン中１Ｍ）を滴下して加え、得られた溶液を−７８℃で３０分間攪拌した。この時間の後に、ステップＧによるアセチレン（１０．４ｍｍｏｌ）を、次に、１．０ＭのＥｔ３Ｂ（１．６ｍＬ、ヘキサン中１Ｍ）を加えた。この反応混合物を、−７８℃で２．５時間攪拌し、次に、室温まで温めた。ＤＭＩ（１２ｍＬ）およびステップＤによるヨウ化アリール（１．４７ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を、次に、パラジウムトリフリルホスフィン錯体［ＴＨＦ（６ｍＬ）中で、Ｐｄ２（ＤＢＡ）３ＣＨＣｌ３（２０ｍｇ）とトリフリルホスフィン（２８ｍｇ）から調製した］を加えた。得られた反応混合物を６０℃で２時間加熱し、水で止め、エーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせて乾燥し、濃縮し、生成物をキラルＯＪカラム（６０：４０ ヘキサンｗ／０．１％ＴＦＡ：ＥｔＯＨ）で精製した。第１ピークを集めて、２７６ｍｇの所望のジアステレオマーを得た。
【０１０６】
ステップＩ：１０ｍＬのＴＨＦ：ＭｅＯＨ：水（３：１：１）中、２７６ｍｇ（０．８５３ｍｍｏｌ）のステップＨによるエステルに、２ＮのＮａＯＨ（０．６４ｍＬ、１．２８ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を室温で２時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、２ＮのＨＣｌ（１０ｍＬ）で酸性にし、ＣＨＣｌ３（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせてＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して、２５３ｍｇの所望のカルボン酸を得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３１０．１２
【０１０７】
ステップＪ：３ｍＬのＤＣＭに、８．０ｍｇ（０．０２６ｍｍｏｌ）のステップＩによるカルボン酸、１０．６ｍｇ（０．０３１ｍｍｏｌ）の中間体ジアミンＩＶ、１１．４ｍｇ（０．０２６ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬および０．０２６ｍＬ（０．１１ｍｍｏｌ）のヒューニッヒ塩基を含む溶液を、室温で１時間攪拌した。溶剤を蒸発させ、残留物を逆相クロマトグラフィーで精製して、１７．６ｍｇの表題の化合物を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５７．９５（ｂｄ，Ｈ）、７．６２〜７．５７（ｍ，３Ｈ）、７３３〜７．２２（ｍ，４Ｈ）、６．７４（ｓ，１Ｈ）、６．２１（ｄ，１Ｈ）、５．１５（ｄｔ，１Ｈ）、４．６６（ｍ，１Ｈ）、３．９６（ｂｄ，１Ｈ）、３．４８〜３．３９（ｍ，４Ｈ）、３．０９〜２．９５（ｍ，５Ｈ）、２．８６（ｓ，１Ｈ）、１．５６〜１．４４（ｍ，５Ｈ）、１．（ｍ，２Ｈ）、１．１２〜１．１１（ｄ，３Ｈ）、０．９２〜０．８４（ｎ，７Ｈ）、０．６６〜０．６２（ｍ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５６９．２
【０１０８】
以下の化合物を、適切な出発物質と試薬を用いて、前記実施例の表題の化合物と同様にして調製した。
【０１０９】
【表１】
【０１１０】
本発明が、その特定の実施形態を参照して説明され例示されたが、当業者ならば、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、手順およびプロトコルに関する様々な適応、変更、修正、置換、削除、または付加がなされ得ることを理解するであろう。したがって、本発明は特許請求の範囲により定められ、このような特許請求の範囲は可能な限り広く解釈されるものとする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩。
【化１】
[式中、
Ｒ１は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＯＲ５もしくは−Ｓ（Ｏ）２−Ｃ１〜６アルキルにより置換されている。）、
（２）水素、
（３）フェニル、および
（４）ベンジル
から選択され；
Ｒ２は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐ−、
（式中、Ｒ４は、以下からなる群：
（ａ）−Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｂ）フェニル、および
（ｃ）ベンジル
から独立に選択される。）
（３）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐＮ（Ｒ５）−、
（式中、Ｒ５は、以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｃ）−Ｃ３〜６シクロアルキル（非置換であるか、またはメチルにより置換されている。）、
（ｄ）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（ｅ）ベンジル
から独立に選択される。）
（４）−ＣＮ、
（５）−Ｃ１〜６アルキル−ＣＮ、
（６）ハロゲン、
（７）次の式：
【化２】
（式中、Ｒ８ａおよびＲ８ｂは以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−ＣＮ、
（ｃ）ハロ、
（ｄ）−Ｃ１〜６アルキル、
（ｅ）−Ｏ−Ｒ５、
（ｆ）−Ｓ−Ｒ５、
（ｇ）−ＣＯ２Ｒ５、および
（ｈ）テトラゾリル
から独立に選択される。）
（８）次の式：
【化３】
（式中、ｎは、１、２、３もしくは４である。）
から選択され；
Ｒ３は、以下からなる群：
【化４】
から選択され；
Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、およびＲ６ｃは、以下からなる群：
（１）水素、
（２）ハロゲン、
（３）−ＯＲ５、
（４）−ＳＲ５、および
（５）−Ｃ１〜６アルキル
から独立に選択され；
Ｒ７は、結合、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｏ−、−Ｓ−、および、−ＮＨ−からなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＣＮもしくは１〜４個のハロにより置換されている。）、
（３）−Ｃ３〜６シクロアルキル、
（４）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（５）ベンジル
から独立に選択されるか、あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、一緒になって、ピロリジンもしくはピペリジン環（非置換であるか、またはベンジル、−ＯＲ５もしくは１〜４個のハロにより置換されている。）を形成していてもよく；
ｍは、独立に、０、１、もしくは２であり；
ｐは、独立に、０、１、もしくは２である。]
【請求項２】
Ｒ１がＣ１〜６アルキルである請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がメチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がエチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、Ｒ４−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ５−
（式中、Ｒ４、以下からなる群：
（４）Ｃ１〜６アルキル、
（５）フェニル、および
（６）ベンジル
から選択され；
Ｒ５は、以下からなる群：
（５）Ｃ１〜６アルキル、
（６）フェニル、
（７）ベンジル、および
（８）水素
から選択される。）
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３が、次の式：
【化５】
（式中、Ｒ５はメチルであり、Ｒ６ａはＨもしくはＦであり、Ｒ６ｂおよびＲ６ｃは水素である。）
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が、次の式：
【化６】
である請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ９が水素である請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１０がＣ１〜６アルキルである請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１０がイソ−ブチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
以下からなる群：
【化７】
から選択される化合物および薬学的に許容されるそれらの塩。
【請求項１２】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１３】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩を、それを必要としている哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物におけるβ−セクレターゼ活性の抑制方法。
【請求項１４】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩の患者への投与を含む、患者におけるアルツハイマー病の治療方法。
【請求項１５】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩の患者への投与を含む、患者におけるアルツハイマー病の危険を防止、制御、改善、または低減する方法。
【請求項１】
式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩。
【化１】
[式中、
Ｒ１は、以下からなる群：
（１）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＯＲ５もしくは−Ｓ（Ｏ）２−Ｃ１〜６アルキルにより置換されている。）、
（２）水素、
（３）フェニル、および
（４）ベンジル
から選択され；
Ｒ２は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐ−、
（式中、Ｒ４は、以下からなる群：
（ａ）−Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｂ）フェニル、および
（ｃ）ベンジル
から独立に選択される。）
（３）Ｒ４−Ｓ（Ｏ）ｐＮ（Ｒ５）−、
（式中、Ｒ５は、以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または１〜６個のフルオロにより置換されている。）、
（ｃ）−Ｃ３〜６シクロアルキル（非置換であるか、またはメチルにより置換されている。）、
（ｄ）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（ｅ）ベンジル
から独立に選択される。）
（４）−ＣＮ、
（５）−Ｃ１〜６アルキル−ＣＮ、
（６）ハロゲン、
（７）次の式：
【化２】
（式中、Ｒ８ａおよびＲ８ｂは以下からなる群：
（ａ）水素、
（ｂ）−ＣＮ、
（ｃ）ハロ、
（ｄ）−Ｃ１〜６アルキル、
（ｅ）−Ｏ−Ｒ５、
（ｆ）−Ｓ−Ｒ５、
（ｇ）−ＣＯ２Ｒ５、および
（ｈ）テトラゾリル
から独立に選択される。）
（８）次の式：
【化３】
（式中、ｎは、１、２、３もしくは４である。）
から選択され；
Ｒ３は、以下からなる群：
【化４】
から選択され；
Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、およびＲ６ｃは、以下からなる群：
（１）水素、
（２）ハロゲン、
（３）−ＯＲ５、
（４）−ＳＲ５、および
（５）−Ｃ１〜６アルキル
から独立に選択され；
Ｒ７は、結合、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｏ−、−Ｓ−、および、−ＮＨ−からなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、以下からなる群：
（１）水素、
（２）Ｃ１〜６アルキル（非置換であるか、または−ＣＮもしくは１〜４個のハロにより置換されている。）、
（３）−Ｃ３〜６シクロアルキル、
（４）フェニル（非置換であるか、またはハロもしくはメトキシにより置換されている。）、および
（５）ベンジル
から独立に選択されるか、あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、一緒になって、ピロリジンもしくはピペリジン環（非置換であるか、またはベンジル、−ＯＲ５もしくは１〜４個のハロにより置換されている。）を形成していてもよく；
ｍは、独立に、０、１、もしくは２であり；
ｐは、独立に、０、１、もしくは２である。]
【請求項２】
Ｒ１がＣ１〜６アルキルである請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がメチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がエチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、Ｒ４−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ５−
（式中、Ｒ４、以下からなる群：
（４）Ｃ１〜６アルキル、
（５）フェニル、および
（６）ベンジル
から選択され；
Ｒ５は、以下からなる群：
（５）Ｃ１〜６アルキル、
（６）フェニル、
（７）ベンジル、および
（８）水素
から選択される。）
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３が、次の式：
【化５】
（式中、Ｒ５はメチルであり、Ｒ６ａはＨもしくはＦであり、Ｒ６ｂおよびＲ６ｃは水素である。）
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が、次の式：
【化６】
である請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ９が水素である請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１０がＣ１〜６アルキルである請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１０がイソ−ブチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
以下からなる群：
【化７】
から選択される化合物および薬学的に許容されるそれらの塩。
【請求項１２】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１３】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩を、それを必要としている哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物におけるβ−セクレターゼ活性の抑制方法。
【請求項１４】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩の患者への投与を含む、患者におけるアルツハイマー病の治療方法。
【請求項１５】
治療に有効な量の請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩の患者への投与を含む、患者におけるアルツハイマー病の危険を防止、制御、改善、または低減する方法。
【公表番号】特表２００７−５１６２０７（Ｐ２００７−５１６２０７Ａ）
【公表日】平成１９年６月２１日（２００７．６．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１８６７８（Ｐ２００６−５１８６７８）
【出願日】平成１６年６月２５日（２００４．６．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２０２３４
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００４８０２
【国際公開日】平成１７年１月２０日（２００５．１．２０）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド (924)
【氏名又は名称原語表記】ＭＥＲＣＫ ＆ ＣＯＭＰＡＮＹ ＩＮＣＯＰＯＲＡＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年６月２１日（２００７．６．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年６月２５日（２００４．６．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２０２３４
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００４８０２
【国際公開日】平成１７年１月２０日（２００５．１．２０）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド (924)
【氏名又は名称原語表記】ＭＥＲＣＫ ＆ ＣＯＭＰＡＮＹ ＩＮＣＯＰＯＲＡＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
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