アルファ‐アミラーゼ及びプロテアーゼを含む洗浄組成物及び方法
本明細書は、バシルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）アルファ‐アミラーゼ及びプロテアーゼを含む組成物及び方法を開示する。組成物及び方法は、特に冷水洗浄に用いると効果的である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
洗浄組成物であって、
（ａ）配列番号２で示すアミノ酸配列に少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列を有するアルファ‐アミラーゼ、及び
（ｂ）プロテアーゼ
を含み、
ここで、前記組成物が、アルファ‐アミラーゼが無い又はプロテアーゼが無い対応する組成物にみられるものより高い洗浄レベルを提供する洗浄組成物。
【請求項２】
少なくとも一つの追加酵素がサブチリシンであることを特徴する請求項１に記載の洗浄組成物。
【請求項３】
少なくとも一つの追加酵素がサブチリシンＢＰＮ′又はその変異体であることを特徴する請求項２に記載の洗浄組成物。
【請求項４】
少なくとも一つの追加酵素がサブチリシンＢＰＮ′のＹ２１７Ｌ変異体であることを特徴する請求項３に記載の洗浄組成物。
【請求項５】
さらに、少なくとも一つの界面活性剤を含むことを特徴する請求項１から４のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項６】
さらに、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ペルヒドロラーゼ、ペクチン酸リアーゼ及びペルオキシダーゼからなる群から選択される追加酵素の少なくとも一つを含むことを特徴する請求項１から５のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項７】
前記アルファ‐アミラーゼが、ＢＡＳＥ、ＡＣＥ、ＡＣＥ−Ｑ及びＡＣＥ−ＱＫからなる群から選択される親アルファ‐アミラーゼに由来するものであることを特徴する請求項１から６のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項８】
前記アルファ‐アミラーゼが、アミラーゼ活性を有する変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態、及び１、２、３、４、５、７、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２５、２６、２８、２９、３０、３２、３５、３６、３７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５９、６０、７０、７１、７２、７３、７５、７８、８３、８７、９０、９１、９３、９４、９５、１０４、１０５、１０７、１０８、１１０、１１２、１１３、１１６、１１８、１２５、１２６、１２８、１２９、１３０、１３１、１３４、１３６、１３８、１４２、１４４、１４７、１４９、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６１、１６２、１６５、１６６、１６８、１６９、１７０、１７２、１７４、１７７、１７８、１８２、１８３、１８５、１８９、１９２、１９５、１９７、２０１、２０２、２０３、２０７、２１０、２１４、２１７、２２１、２２８、２３４、２３６、２３７、２４６、２５０、２５４、２５５、２５７、２６４、２６７、２６９、２７０、２７２、２７５、２７９、２８３、２８４、２９８、３０１、３０３、３０５、３０６、３１０、３１１、３１４、３１８、３１９、３２０、３２２、３２３、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４４、３５９、３７４、３７５、３７６、３７７、３７９、３８１、３８２、３９３、３９４、３９９、４０１、４０７、４０８、４１９、４３３、４３６、４３８、４４４、４４７、４４８、４５１、４５３、４５９、４６５、４７０、４７５、４７６、４８３、及び４８４からなる群から選択される一以上の位置での置換を含む変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態であり、
ここで、前記位置が、配列番号２で示すアミノ酸配列中のアミノ酸残基に対応し、及び
前記一以上の位置での自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、安定性の測定で性能指標＞１．０、及び活性の測定で性能指標＞１．０を有するアルファ‐アミラーゼ変異体を生成することを特徴する請求項１から７のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項９】
前記変異体アルファ‐アミラーゼが、７、２９、３５、５３、６０、７２、８７、１０８、１１６、１２６、１２８、１２９、１３０、１３１、１３４、１３６、１３８、１４２、１５６、１６１、１６５、１７８、１８２、１８５、１８９、１９２、１９５、１９７、２０２、２１０、２１４、２１７、２２１、２３４、２４６、２６９、３０３、３１０、３３７、３４０、３７４、４０１、及び４３８からなる群から選択される一以上の位置での置換を含み、
ここで、自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、活性の測定で性能指標＞１．５及び安定性の測定で性能指標＞１．０を有するアルファ‐アミラーゼ変異体を生成することを特徴する請求項８に記載の洗浄組成物。
【請求項１０】
前記変異体アルファ‐アミラーゼが、２、７、２２、２５、２８、３０、３７、７０、７５、８３、８７、９１、９３、１０８、１２８、１６０、１６５、１７８、１８２、１８３、２１７、２６９、２７０、２７９、２８３、２９８、３０５、３０６、３１０、３２０、３７４、３７５、３７６、４０７、４１９、４７５、及び４７６からなる群から選択される一以上の位置での置換を含み、
ここで、自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、安定性の測定で性能指標＞１．５及び活性の測定で性能指標＞１．０を有するアルファ‐アミラーゼ変異体を生成することを特徴する請求項８に記載の洗浄組成物。
【請求項１１】
前記変異体アルファ‐アミラーゼが、８３、１２５、１２８、１３１、１６０、１７８、１８２、１８３、１８５、１８９、２７９、３０５、３１９、３２０、３７９、４０７、４３３、４５３、４７５、４７６、及び４８３からなる群から選択される一以上の位置での置換を含むことを特徴する請求項８に記載の洗浄組成物。
【請求項１２】
前記アルファ‐アミラーゼが、８３、１２５、１２８、１３１、１６０、１７８、１８２、１８３、１８５、１８９、２７９、３０５、３１９、３２０、３７９、４０７、４３３、４５３、４７５、４７６、及び４８３からなる群から選択される一以上の位置での置換を含む変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態であり、
ここで、前記位置が、配列番号２で示すアミノ酸配列中のアミノ酸残基に対応し、及び
前記置換が、改善された洗浄性能、改善された洗剤安定性、改善された熱安定性、及び改善されたタンパク質発現からなる群から選択される少なくとも一つの有益な効果を提供することを特徴とする請求項１から７のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１３】
前記アルファ‐アミラーゼが、５、３２、８３、９５、１５４、２１４、２２１、２２８、３２２、４０１、４０７、４１９、４４４、４４７、４５９、４７０、４８３、及び４８４からなる群から選択される一以上の位置での置換を含む変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態であり、
ここで、前記位置が、配列番号２で示すアミノ酸配列中のアミノ酸残基に対応し、及び
自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、ｐＨ８．０での活性、ｐＨ１０での活性、１６℃での活性、及び３２℃での活性に関して、０．５以上の性能指標値、及び洗剤中の安定性及び熱安定性に関して０．５以上の性能指標値を有することを特徴とする請求項１から７のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１４】
さらに、前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列に対応する２４３位にて置換を含むことを特徴とする請求項８から１３のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１５】
さらに、前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列に対応する１８０位及び／又は１８１位にて欠失を含むことを特徴とする請求項８から１３のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１６】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、及び配列番号１４からなる群から選択されるアミノ酸配列に少なくとも７５％同一であるアミノ酸配列を有する親アルファ‐アミラーゼに由来するものであることを特徴とする請求項１から１５のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１７】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列と少なくとも７５％配列同一性を有することを特徴とする請求項１から１６のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１８】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列と少なくとも８０％配列同一性を有することを特徴とする請求項１から１７のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１９】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列と少なくとも９０％配列同一性を有することを特徴とする請求項１から１８のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２０】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列に対応する１２８、１７８、１８２、１８５、及び１８９からなる群から選択される一以上の位置での置換を含み、ここで、前記置換が改善された洗浄性能又は改善された洗剤安定性を提供することを特徴とする請求項１から１９のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２１】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、
（ａ）１２５位の位置でのアラニン、
１２８位の位置でのシステイン、
１３１位の位置でのイソロイシン、
１６５位の位置でのイソロイシン、
１７８位の位置でのロイシン、
１８２位の位置でのグリシン、
２０２位の位置でのチロシン、
３０５位の位置でのアルギニン、
３１９位の位置でのトレオニン、又は
４７５位の位置でのアルギニン、
（ｂ）置換Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ、及び
Ｓ１２５Ａ、Ｔ１３１Ｉ、Ｔ１６５Ｉ、Ｆ２０２Ｙ、及びＤ３１９Ｔからなる群から選択される少なくとも一つの追加置換、又は
（ｃ）置換
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｆ２０２Ｙ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｄ３１９Ｔ＋Ｇ４７５Ｋ、
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ、又は
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｔ１３１Ｉ＋Ｔ１６５Ｉ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ
を含み、
ここで、任意に、前記変異体が２４３位の位置での置換及び／又は１８０位及び／又は１８１位の位置での欠失をさらに含み、
前記位置が配列番号２で示すアミノ酸配列に対応することを特徴とする請求項１から２０のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２２】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、４７５位の位置での置換を含むことを特徴とする請求項１から２１のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２３】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、２４３位の位置での置換及び／又は１８０位及び／又は１８１位の位置での欠失を含むことを特徴とする請求項１から２２のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２４】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、２４３位の位置での置換及び／又は１８０位及び／又は１８１位の位置での欠失を含むことを特徴とする請求項１から２３のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２５】
洗浄組成物が、約２５℃未満の温度にて測定して、前記アルファ‐アミラーゼが無い又は前記プロテアーゼが無い対応する組成物について観察されるものより高い洗浄レベルを提供することを特徴とする請求項１から２４のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２６】
洗浄組成物が、約２０℃未満の温度にて測定して、前記アルファ‐アミラーゼが無い又は前記プロテアーゼが無い対応する組成物について観察されるものより高い洗浄レベルを提供することを特徴とする請求項１から２５のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２７】
前記アルファ‐アミラーゼ及びプロテアーゼが共に調合されることを特徴とする請求項１から２６のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２８】
布地又は硬い表面を請求項１から２７のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物と接触させることを特徴とする布地又は硬い表面を洗浄する方法。
【請求項２９】
方法が約２５℃未満の温度にて実施されることを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
方法が約２０℃未満の温度にて実施されることを特徴とする請求項２９に記載の方法。
【請求項１】
洗浄組成物であって、
（ａ）配列番号２で示すアミノ酸配列に少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列を有するアルファ‐アミラーゼ、及び
（ｂ）プロテアーゼ
を含み、
ここで、前記組成物が、アルファ‐アミラーゼが無い又はプロテアーゼが無い対応する組成物にみられるものより高い洗浄レベルを提供する洗浄組成物。
【請求項２】
少なくとも一つの追加酵素がサブチリシンであることを特徴する請求項１に記載の洗浄組成物。
【請求項３】
少なくとも一つの追加酵素がサブチリシンＢＰＮ′又はその変異体であることを特徴する請求項２に記載の洗浄組成物。
【請求項４】
少なくとも一つの追加酵素がサブチリシンＢＰＮ′のＹ２１７Ｌ変異体であることを特徴する請求項３に記載の洗浄組成物。
【請求項５】
さらに、少なくとも一つの界面活性剤を含むことを特徴する請求項１から４のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項６】
さらに、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ペルヒドロラーゼ、ペクチン酸リアーゼ及びペルオキシダーゼからなる群から選択される追加酵素の少なくとも一つを含むことを特徴する請求項１から５のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項７】
前記アルファ‐アミラーゼが、ＢＡＳＥ、ＡＣＥ、ＡＣＥ−Ｑ及びＡＣＥ−ＱＫからなる群から選択される親アルファ‐アミラーゼに由来するものであることを特徴する請求項１から６のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項８】
前記アルファ‐アミラーゼが、アミラーゼ活性を有する変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態、及び１、２、３、４、５、７、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２５、２６、２８、２９、３０、３２、３５、３６、３７、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５９、６０、７０、７１、７２、７３、７５、７８、８３、８７、９０、９１、９３、９４、９５、１０４、１０５、１０７、１０８、１１０、１１２、１１３、１１６、１１８、１２５、１２６、１２８、１２９、１３０、１３１、１３４、１３６、１３８、１４２、１４４、１４７、１４９、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６１、１６２、１６５、１６６、１６８、１６９、１７０、１７２、１７４、１７７、１７８、１８２、１８３、１８５、１８９、１９２、１９５、１９７、２０１、２０２、２０３、２０７、２１０、２１４、２１７、２２１、２２８、２３４、２３６、２３７、２４６、２５０、２５４、２５５、２５７、２６４、２６７、２６９、２７０、２７２、２７５、２７９、２８３、２８４、２９８、３０１、３０３、３０５、３０６、３１０、３１１、３１４、３１８、３１９、３２０、３２２、３２３、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４４、３５９、３７４、３７５、３７６、３７７、３７９、３８１、３８２、３９３、３９４、３９９、４０１、４０７、４０８、４１９、４３３、４３６、４３８、４４４、４４７、４４８、４５１、４５３、４５９、４６５、４７０、４７５、４７６、４８３、及び４８４からなる群から選択される一以上の位置での置換を含む変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態であり、
ここで、前記位置が、配列番号２で示すアミノ酸配列中のアミノ酸残基に対応し、及び
前記一以上の位置での自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、安定性の測定で性能指標＞１．０、及び活性の測定で性能指標＞１．０を有するアルファ‐アミラーゼ変異体を生成することを特徴する請求項１から７のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項９】
前記変異体アルファ‐アミラーゼが、７、２９、３５、５３、６０、７２、８７、１０８、１１６、１２６、１２８、１２９、１３０、１３１、１３４、１３６、１３８、１４２、１５６、１６１、１６５、１７８、１８２、１８５、１８９、１９２、１９５、１９７、２０２、２１０、２１４、２１７、２２１、２３４、２４６、２６９、３０３、３１０、３３７、３４０、３７４、４０１、及び４３８からなる群から選択される一以上の位置での置換を含み、
ここで、自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、活性の測定で性能指標＞１．５及び安定性の測定で性能指標＞１．０を有するアルファ‐アミラーゼ変異体を生成することを特徴する請求項８に記載の洗浄組成物。
【請求項１０】
前記変異体アルファ‐アミラーゼが、２、７、２２、２５、２８、３０、３７、７０、７５、８３、８７、９１、９３、１０８、１２８、１６０、１６５、１７８、１８２、１８３、２１７、２６９、２７０、２７９、２８３、２９８、３０５、３０６、３１０、３２０、３７４、３７５、３７６、４０７、４１９、４７５、及び４７６からなる群から選択される一以上の位置での置換を含み、
ここで、自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、安定性の測定で性能指標＞１．５及び活性の測定で性能指標＞１．０を有するアルファ‐アミラーゼ変異体を生成することを特徴する請求項８に記載の洗浄組成物。
【請求項１１】
前記変異体アルファ‐アミラーゼが、８３、１２５、１２８、１３１、１６０、１７８、１８２、１８３、１８５、１８９、２７９、３０５、３１９、３２０、３７９、４０７、４３３、４５３、４７５、４７６、及び４８３からなる群から選択される一以上の位置での置換を含むことを特徴する請求項８に記載の洗浄組成物。
【請求項１２】
前記アルファ‐アミラーゼが、８３、１２５、１２８、１３１、１６０、１７８、１８２、１８３、１８５、１８９、２７９、３０５、３１９、３２０、３７９、４０７、４３３、４５３、４７５、４７６、及び４８３からなる群から選択される一以上の位置での置換を含む変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態であり、
ここで、前記位置が、配列番号２で示すアミノ酸配列中のアミノ酸残基に対応し、及び
前記置換が、改善された洗浄性能、改善された洗剤安定性、改善された熱安定性、及び改善されたタンパク質発現からなる群から選択される少なくとも一つの有益な効果を提供することを特徴とする請求項１から７のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１３】
前記アルファ‐アミラーゼが、５、３２、８３、９５、１５４、２１４、２２１、２２８、３２２、４０１、４０７、４１９、４４４、４４７、４５９、４７０、４８３、及び４８４からなる群から選択される一以上の位置での置換を含む変異体アルファ‐アミラーゼの成熟形態であり、
ここで、前記位置が、配列番号２で示すアミノ酸配列中のアミノ酸残基に対応し、及び
自然に発生するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換が、ｐＨ８．０での活性、ｐＨ１０での活性、１６℃での活性、及び３２℃での活性に関して、０．５以上の性能指標値、及び洗剤中の安定性及び熱安定性に関して０．５以上の性能指標値を有することを特徴とする請求項１から７のいずれか１つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１４】
さらに、前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列に対応する２４３位にて置換を含むことを特徴とする請求項８から１３のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１５】
さらに、前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列に対応する１８０位及び／又は１８１位にて欠失を含むことを特徴とする請求項８から１３のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１６】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、及び配列番号１４からなる群から選択されるアミノ酸配列に少なくとも７５％同一であるアミノ酸配列を有する親アルファ‐アミラーゼに由来するものであることを特徴とする請求項１から１５のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１７】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列と少なくとも７５％配列同一性を有することを特徴とする請求項１から１６のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１８】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列と少なくとも８０％配列同一性を有することを特徴とする請求項１から１７のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項１９】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列と少なくとも９０％配列同一性を有することを特徴とする請求項１から１８のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２０】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、配列番号２で示すアミノ酸配列に対応する１２８、１７８、１８２、１８５、及び１８９からなる群から選択される一以上の位置での置換を含み、ここで、前記置換が改善された洗浄性能又は改善された洗剤安定性を提供することを特徴とする請求項１から１９のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２１】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、
（ａ）１２５位の位置でのアラニン、
１２８位の位置でのシステイン、
１３１位の位置でのイソロイシン、
１６５位の位置でのイソロイシン、
１７８位の位置でのロイシン、
１８２位の位置でのグリシン、
２０２位の位置でのチロシン、
３０５位の位置でのアルギニン、
３１９位の位置でのトレオニン、又は
４７５位の位置でのアルギニン、
（ｂ）置換Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ、及び
Ｓ１２５Ａ、Ｔ１３１Ｉ、Ｔ１６５Ｉ、Ｆ２０２Ｙ、及びＤ３１９Ｔからなる群から選択される少なくとも一つの追加置換、又は
（ｃ）置換
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｆ２０２Ｙ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｄ３１９Ｔ＋Ｇ４７５Ｋ、
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ、又は
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｔ１３１Ｉ＋Ｔ１６５Ｉ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ
を含み、
ここで、任意に、前記変異体が２４３位の位置での置換及び／又は１８０位及び／又は１８１位の位置での欠失をさらに含み、
前記位置が配列番号２で示すアミノ酸配列に対応することを特徴とする請求項１から２０のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２２】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、４７５位の位置での置換を含むことを特徴とする請求項１から２１のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２３】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、２４３位の位置での置換及び／又は１８０位及び／又は１８１位の位置での欠失を含むことを特徴とする請求項１から２２のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２４】
前記アルファ‐アミラーゼ変異体が、２４３位の位置での置換及び／又は１８０位及び／又は１８１位の位置での欠失を含むことを特徴とする請求項１から２３のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２５】
洗浄組成物が、約２５℃未満の温度にて測定して、前記アルファ‐アミラーゼが無い又は前記プロテアーゼが無い対応する組成物について観察されるものより高い洗浄レベルを提供することを特徴とする請求項１から２４のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２６】
洗浄組成物が、約２０℃未満の温度にて測定して、前記アルファ‐アミラーゼが無い又は前記プロテアーゼが無い対応する組成物について観察されるものより高い洗浄レベルを提供することを特徴とする請求項１から２５のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２７】
前記アルファ‐アミラーゼ及びプロテアーゼが共に調合されることを特徴とする請求項１から２６のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物。
【請求項２８】
布地又は硬い表面を請求項１から２７のいずれか一つの請求項に記載の洗浄組成物と接触させることを特徴とする布地又は硬い表面を洗浄する方法。
【請求項２９】
方法が約２５℃未満の温度にて実施されることを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
方法が約２０℃未満の温度にて実施されることを特徴とする請求項２９に記載の方法。
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図８】
【図９】
【図１０】
【公表番号】特表２０１２−５２２８７５（Ｐ２０１２−５２２８７５Ａ）
【公表日】平成２４年９月２７日（２０１２．９．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５０３７１３（Ｐ２０１２−５０３７１３）
【出願日】平成２２年４月１日（２０１０．４．１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２９６６６
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１１５０２８
【国際公開日】平成２２年１０月７日（２０１０．１０．７）
【出願人】（５０９２４０４７９）ダニスコ・ユーエス・インク (81)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年９月２７日（２０１２．９．２７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年４月１日（２０１０．４．１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２９６６６
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１１５０２８
【国際公開日】平成２２年１０月７日（２０１０．１０．７）
【出願人】（５０９２４０４７９）ダニスコ・ユーエス・インク (81)
【Ｆターム（参考）】
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