本発明は、アンチセンス抗ウイルス化合物、ならびにそれらの化合物を用いて、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ科のウイルスの増殖の阻害およびウイルス感染の処置をもたらす方法に関する。その化合物は、哺乳動物におけるインフルエンザウイルス感染の処置において特に有用である。本発明の実施形態は、別の態様において、一本鎖で分節型のマイナスセンスゲノムを有し、かつＯｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ科から選択される、感染しているインフルエンザウイルスの哺乳動物宿主細胞内での複製を阻害する抗ウイルス化合物を含む。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離された抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドであって、
ａ）ヌクレアーゼ抵抗性骨格；
ｂ）１２〜４０ヌクレオチド塩基、ならびに
ｃ）ｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのマイナスセンスウイルスＲＮＡセグメントの５’または３’末端の２５塩基
ｉｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのプラスセンスｃＲＮＡの５’または３’末端の末端の３０塩基
ｉｉｉ）インフルエンザウイルスのｍＲＮＡのＡＵＧ開始コドンの周辺の４５塩基、および
ｉｖ）選択的スプライシングに供されるインフルエンザｍＲＮＡのスプライス供与部位またはスプライス受容部位の周辺の５０塩基
から選択される標的領域にハイブリダイズする少なくとも１０塩基長の標的化配列
を含む、単離された抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項２】
前記オリゴヌクレオチドが、ウイルス標的領域とヘテロ二重鎖構造を形成する能力により特徴付けられ、ここで、前記ヘテロ二重鎖構造が：
ａ）前記ウイルスのプラスセンス鎖またはマイナスセンス鎖および前記オリゴヌクレオチド化合物から構成され、そして
ｂ）少なくとも４５℃の解離Ｔｍにより特徴付けられる、
請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３】
前記オリゴヌクレオチドが、
ｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのＭ１またはＭ２領域のマイナスセンスウイルスＲＮＡセグメントの５’または３’末端の２５塩基、
ｉｉ）インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢおよびインフルエンザウイルスＣのＭ１またはＭ２領域のプラスセンスｃＲＮＡの５’または３’末端の末端の３０塩基
ｉｉｉ）インフルエンザのＭ１またはＭ２ ｍＲＮＡのＡＵＧ開始コドンの周辺の４５塩基、および
ｉｖ）インフルエンザＭ１またはＭ２ ＲＮＡのスプライス供与部位またはスプライス受容部位の周辺の５０塩基
から選択される標的領域と相補的な少なくとも１０塩基を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４】
前記オリゴヌクレオチドが、１つのサブユニットのモルホリノ窒素を隣接サブユニットの５’環外炭素に結合する非荷電のリン（ＩＩＩ）含有サブユニット間結合によって連結されたモルホリノサブユニットを含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５】
前記モルホリノサブユニットが、以下の構造：
【化１６】

に従うホスホロジアミデート結合によって結合されており、
ここで、Ｙ_１＝Ｏであり、Ｚ＝Ｏであり、Ｐｊは、塩基特異的な水素結合によってポリヌクレオチド中の塩基に結合するのに有効なプリンまたはピリミジン塩基対形成部分であり、そしてＸは、アルキル、アルコキシ、チオアルコキシまたはアルキルアミノである、
請求項４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項６】
Ｘ＝ＮＲ_２であり、各Ｒは、独立して水素またはメチルであり、正に帯電した結合の場合、Ｘは、１−ピペラジンである、請求項５に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項７】
少なくとも２つかつサブユニット間結合の総数の半数以下が、正に帯電している、請求項６に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項８】
前記モルホリノオリゴマーが、配列番号１３に示されるような正に帯電したサブユニット間結合を含む、請求項６に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項９】
前記ウイルス標的領域が、配列番号１〜１１のうちのいずれか１つ以上を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１０】
前記ウイルス標的領域が、配列番号２または４を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１１】
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１２〜４７のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１２】
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１２または１３を含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１３】
前記オリゴヌクレオチドが、ペプチド核酸（ＰＮＡ）である、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１４】
配列番号４８〜６２のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、請求項１３に記載のＰＮＡオリゴヌクレオチド。
【請求項１５】
配列番号４８〜６２のうちの１つ以上から本質的になる、請求項１４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１６】
１つ以上のロックト核酸（ＬＮＡ）サブユニットを含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１７】
ＬＮＡサブユニットから本質的になる、請求項１６に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１８】
配列番号６３〜１１４のうちのいずれか１つ以上の少なくとも１０個連続した塩基を含む、請求項１６に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１９】
配列番号６３〜１１４のうちの１つ以上から本質的になる、請求項１８に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２０】
前記オリゴヌクレオチドが、宿主細胞内への前記化合物の取り込みを増大させるアルギニンリッチポリペプチドに結合体化されている、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２１】
前記アルギニンリッチポリペプチドが、配列番号１１５〜１２８からなる群から選択される、請求項２０に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項２２】
インフルエンザウイルスの複製を減少させる方法であって、前記方法は、インフルエンザウイルスに感染した細胞を、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドと接触させる工程を包含する、方法。
【請求項２３】
前記細胞が、被験体内の細胞であり、前記方法が、前記被験体に前記アンチセンスオリゴヌクレオチドを投与する工程を包含する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記被験体が、二次的細菌感染を有し、細菌用抗生物質を、前記抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドと別個に、またはそれと同時に併用して投与する工程をさらに包含する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記二次的細菌感染が、連鎖球菌性肺炎への感染である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記抗生物質が、ベータ−ラクタムである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記抗生物質が、ペニシリン、アモキシシリン、セファロスポリン、クロラムフェニコールおよびクリンダマイシンから選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記抗ウイルス性アンチセンスオリゴヌクレオチドと別個に、またはそれと同時に併用して、ＣＤ２００またはＣＤ２００レセプターをコードするＲＮＡ分子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与する工程をさらに包含する、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび薬学的に許容され得るキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項３０】
細菌用抗生物質をさらに含む、請求項２９に記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
ＣＤ２００またはＣＤ２００レセプターをコードするＲＮＡ分子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項２９に記載の薬学的組成物。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図１Ｅ】

【図１Ｆ】

【図１Ｇ】

【図２−１】

【図２−２】

【図３】

【図４】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図７Ｅ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図８Ｃ】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１１】

【公表番号】特表２０１３−５１０５８４（Ｐ２０１３−５１０５８４Ａ）
【公表日】平成２５年３月２８日（２０１３．３．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５３９０３８（Ｐ２０１２−５３９０３８）
【出願日】平成２２年１１月１２日（２０１０．１１．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５６６１３
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０６０３２０
【国際公開日】平成２３年５月１９日（２０１１．５．１９）
【出願人】（５０１２３７０３９）サレプタ　セラピューティクス，　インコーポレイテッド (9)
【Ｆターム（参考）】