インターロイキン６に対する結合性メンバー
インターロイキン6（IL-6）と結合しかつその生物学的効果を中和する結合性メンバー、例えばヒト抗体分子を提供する。医療処置での、例えばIL-6と関連した炎症性疾患および腫瘍を治療するための、IL-6に対する結合性メンバーの使用を提供する。
Notice: Undefined index: DEJ in /mnt/www/gzt_disp.php on line 298
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバーであって、表面プラズモン共鳴によって定められる30 pM以下のKDでヒトIL-6と結合する、結合性メンバー。
【請求項２】
KDが10 pM以下である、請求項１に記載の結合性メンバー。
【請求項３】
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバーであって、ヒトIL-6と残基Phe102および／またはSer204（該残基ナンバリングは配列番号１６１の完全長ヒトIL-6アミノ酸配列にしたがって定められる）で結合する、結合性メンバー。
【請求項４】
ヒトIL-6と残基Arg207で結合する、請求項３に記載の結合性メンバー。
【請求項５】
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバーであって、0.6 pMヒトIL-1βおよび2.4 nM可溶性ヒトIL-6Rαで刺激されたヒト滑膜線維芽細胞からのVEGF放出の阻害についてのアッセイにおいて1 nM未満のIC50を有する、結合性メンバー。
【請求項６】
カニクイザルIL-6と結合する結合性メンバーであり、該カニクイザルIL-6が、支持体上に固定された結合性メンバーに対する標識ヒトIL-6の結合の阻害に関する時間分解蛍光アッセイにおいて、非標識ヒトIL-6のIC50と10倍未満の差のあるIC50を有し、該アッセイでは、標識ヒトIL-6が、該結合性メンバーとのその相互作用のKdの2倍と等しい終濃度である、請求項１〜５のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項７】
20 pMヒトIL-6に応答したTF-1細胞の増殖の阻害に関するアッセイにおいて100 pM未満のIC50を有する、請求項１〜６のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項８】
CDRセット：HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含み、該CDRセットが、CDRセット
［該セット中：
HCDR1は配列番号３のアミノ酸配列を有し；
HCDR2は配列番号４のアミノ酸配列を有し；
HCDR3は配列番号１１５のアミノ酸配列を有し；
LCDR1は配列番号８のアミノ酸配列を有し；
LCDR2は配列番号９のアミノ酸配列を有し；および
LCDR3は配列番号１２０のアミノ酸配列を有する］
からの22個以下のアミノ酸変化を有し、かつ
20 pMヒトIL-6に応答したTF-1細胞の増殖の阻害に関するアッセイにおいて100 pM未満のIC50を有する、
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバー。
【請求項９】
CDRセット：HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含み、該CDRセットが、CDRセット
［該セット中：
HCDR1は配列番号３のアミノ酸配列を有し；
HCDR2は配列番号４のアミノ酸配列を有し；
HCDR3は配列番号１１５のアミノ酸配列を有し；
LCDR1は配列番号８のアミノ酸配列を有し；
LCDR2は配列番号９のアミノ酸配列を有し；および
LCDR3は配列番号１２０のアミノ酸配列を有する］
からの22個以下のアミノ酸変化を有する、
請求項１〜７のいずれかに記載の、ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバー。
【請求項１０】
CDRセット
［該セット中：
HCDR1は配列番号３のアミノ酸配列を有し；
HCDR2は配列番号４のアミノ酸配列を有し；
HCDR3は配列番号１１５のアミノ酸配列を有し；
LCDR1は配列番号８のアミノ酸配列を有し；
LCDR2は配列番号９のアミノ酸配列を有し；および
LCDR3は配列番号１２０のアミノ酸配列を有する］
からの20個以下の置換を有するCDRセットを含み、かつ
場合により、配列番号１１５と比べてHCDR3の長さを増大させる1残基の挿入を有し、かつ／または配列番号１２０と比べてLCDR3の長さを増大させる1残基の挿入を有する、
請求項８または請求項９に記載の結合性メンバー。
【請求項１１】
Kabat残基35がIle、ThrまたはValであるHCDR1を含む、請求項８〜１０のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１２】
HCDR1が配列番号３である、請求項１１に記載の結合性メンバー。
【請求項１３】
Kabat残基64がLysまたはArgであるHCDR2を含む、請求項８〜１２のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１４】
HCDR2が配列番号４のアミノ酸配列を有する、請求項１３に記載の結合性メンバー。
【請求項１５】
HCDR3中のKabat残基95がTrpであり、かつ／またはHCDR3中のKabat残基101がAspである、請求項８〜１４のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれかに記載の結合性メンバーであって、
Kabat残基96がAlaまたはGluであり；
Kabat残基97がAsp、GluまたはAsnであり；
Kabat残基98がAsp、Gly、GluまたはHisであり；
Kabat残基99がHis、GlyまたはThrであり；
Kabat残基100がPro、Tyr、Asn、Arg、TrpまたはAlaであり；
Kabat残基100AがPro、Tyr、Ala、Arg、Thr、Gly、Asn、ProまたはSerであり；
Kabat残基100BがTrp、Tyr、His、Gln、ProまたはThrであり；
Kabat残基100CがIle、Ala、Val、His、TyrまたはLeuであり；および
Kabat残基102がLeu、Val、His、MetまたはIleである、HCDR3を含む、
結合性メンバー。
【請求項１７】
HCDR3が配列番号１１５のアミノ酸配列を有する、請求項１６に記載の結合性メンバー。
【請求項１８】
LCDR1中のKabat残基34がAlaまたはThrである、請求項８〜１７のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１９】
LCDR1が配列番号８である、請求項１８に記載の結合性メンバー。
【請求項２０】
LCDR2が配列番号９である、請求項８〜１９のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれかに記載の結合性メンバーであって、
Kabat残基89がGln、MetまたはAlaであり；
Kabat残基90がGln、Asn、SerまたはAlaであり；
Kabat残基91がSer、Asn、Gly、AlaまたはHisであり；
Kabat残基92がTrp、Tyr、Ser、LysまたはPheであり；
Kabat残基93がLeu、Ser、Lys、ArgまたはAlaであり；
Kabat残基94がGly、Thr、AlaまたはProであり；
Kabat残基96がGlyまたはTrpであり；および
Kabat残基97がSerまたはThrである、LCDR3を含む、
結合性メンバー。
【請求項２２】
配列番号１２０のアミノ酸配列を有するLCDR3を含む、請求項２１に記載の結合性メンバー。
【請求項２３】
抗体2、3、4、5、7、8、10、14、16、17、18、19、21、22または23のいずれかの抗体のHCDR3、LCDR3および／またはCDRセットを含む、ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバー。
【請求項２４】
CDRセット：HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2およびLCDR3
［ここで：
HCDR1は配列番号３であり；
HCDR2は配列番号４であり；
HCDR3は配列番号１１５であり；
LCDR1は配列番号８であり；
LCDR2は配列番号９であり；および
LCDR3は配列番号８０である］
を含む、請求項１〜２３のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２５】
抗体VHドメインおよび抗体VLドメインを含み、ここで該抗体分子は該CDRセットを含み、VHドメインはHCDR1、HCDR2、HCDR3およびフレームワークを含み、かつVLドメインはLCDR1、LCDR2、LCDR3およびフレームワークを含む、請求項１〜２４のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２６】
抗体分子が抗体定常領域を含む、請求項２５に記載の結合性メンバー。
【請求項２７】
抗体分子がIgG1である、請求項２６に記載の結合性メンバー。
【請求項２８】
VHおよび／またはVLドメインのフレームワーク領域がヒト生殖細胞系列遺伝子セグメント配列へと生殖細胞系列化されている、請求項２５〜２７のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２９】
抗体VHドメインが、ヒト生殖細胞系列フレームワークVh3_DP-86_(3-66)へと生殖細胞系列化されたフレームワーク領域を含む、請求項２８に記載の結合性メンバー。
【請求項３０】
VHドメインがフレームワーク領域FR1、FR2、FR3およびFR4を含み、FR1が配列番号１６７、FR2が配列番号１６８、FR3が配列番号１６９およびFR4が配列番号１７０のアミノ酸配列を有する、請求項２９に記載の結合性メンバー。
【請求項３１】
抗体VHドメインが配列番号１１２に示されるVHドメインアミノ酸配列を有する、請求項３０に記載の結合性メンバー。
【請求項３２】
抗体VLドメインが、ヒト生殖細胞系列フレームワークVk1_L12へと生殖細胞系列化されたフレームワーク領域を含む、請求項２８〜３１のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項３３】
VLドメインがフレームワーク領域FR1、FR2、FR3およびFR4を含み、FR1が配列番号１７１、FR2が配列番号１７２、FR3が配列番号１７３およびFR4が配列番号１７４のアミノ酸配列を有する、請求項３２に記載の結合性メンバー。
【請求項３４】
抗体VLドメインが配列番号１１７に示されるVLドメインアミノ酸配列を有する、請求項３３に記載の結合性メンバー。
【請求項３５】
配列番号１１２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１１７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離された抗体分子。
【請求項３６】
IL-6と結合する単離された抗体分子であって、配列番号１１２に対して少なくとも90％同一のVHドメインアミノ酸配列および配列番号１１７に対して少なくとも90％同一のVLドメインアミノ酸配列を含む、抗体分子。
【請求項３７】
IgGである、請求項３５または請求項３６に記載の抗体分子。
【請求項３８】
IgGがIgG1である、請求項３７に記載の抗体分子。
【請求項３９】
請求項２５〜３８のいずれかに記載の抗体分子の単離されたVHドメイン。
【請求項４０】
請求項２５〜３８のいずれかに記載の抗体分子の単離されたVLドメイン。
【請求項４１】
請求項１〜３４のいずれかに記載の単離された結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子、および製薬的に許容される賦形剤を含む組成物。
【請求項４２】
療法によるヒトまたは動物体の治療方法において使用するための、請求項１〜３４のいずれかに記載の単離された結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子を含む、組成物。
【請求項４３】
IL-6と関連した疾患の治療に使用するための、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】
IL-6と関連した疾患を治療するための医薬を製造するための、請求項１〜３４のいずれかに記載の単離された結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子の、使用。
【請求項４５】
疾患が炎症性疾患および／または自己免疫疾患である、請求項４３に記載の組成物または請求項４４に記載の使用。
【請求項４６】
疾患が、関節リウマチ、骨関節炎、悪液質、慢性閉塞性肺疾患、若年性特発性関節炎、喘息、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患、クローン病またはアテローム性動脈硬化症である、請求項４５に記載の組成物または使用。
【請求項４７】
疾患が関節リウマチである、請求項４５に記載の組成物または使用。
【請求項４８】
疾患が腫瘍および／または癌である、請求項４３に記載の組成物または請求項４４に記載の使用。
【請求項４９】
個体におけるIL-6と関連した疾患の治療方法であって、請求項１〜３４のいずれかに記載の結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子を、個体に投与するステップを含む、方法。
【請求項５０】
疾患が炎症性疾患および／または自己免疫疾患である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
疾患が、関節リウマチ、骨関節炎、悪液質、慢性閉塞性肺疾患、若年性特発性関節炎、喘息、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患、クローン病またはアテローム性動脈硬化症である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
疾患が関節リウマチである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
疾患が腫瘍および／または癌である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５４】
請求項１〜３４のいずれかに記載の結合性メンバー、請求項３９に記載のVHドメイン、請求項４０に記載のVLドメイン、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子をコードする、ヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項５５】
請求項５４に記載の核酸でin vitroで形質転換された宿主細胞。
【請求項５６】
結合性メンバー、抗体分子または抗体VHもしくはVLドメインの製造方法であって、結合性メンバー、抗体分子または抗体VHもしくはVLドメインの製造のための条件下で請求項５５に記載の宿主細胞を培養するステップを含む、方法。
【請求項５７】
結合性メンバー、抗体分子、VHドメインまたはVLドメインを単離および／または精製するステップをさらに含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
結合性メンバー、抗体分子、VHドメインまたはVLドメインを製剤化して少なくとも1種の追加の成分を含む組成物とするステップをさらに含む、請求項５６または請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
IL-6に対する抗体抗原結合ドメインの製造方法であって、以下のステップ：
HCDR1、HCDR2およびHCDR3を含む親VHドメインのアミノ酸配列中の1個以上のアミノ酸の付加、欠失、置換または挿入によって、親VHドメインのアミノ酸配列変異体であるVHドメインを提供し、ここで該親VHドメインHCDR1、HCDR2およびHCDR3は表7に示されるHCDRセットであり、かつ場合により、そのように得られたVHドメインを1つ以上のVLドメインと組み合わせて1つ以上のVH/VLの組み合わせを提供するステップ；および
親VHドメインのアミノ酸配列変異体である該VHドメインまたは該VH/VLの組み合わせもしくは複数の該組み合わせを試験して、IL-6に対する抗体抗原結合ドメインを同定するステップ
を含む、方法。
【請求項６０】
該1つ以上のVLドメインを、LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含む親VLドメインのアミノ酸配列中の1個以上のアミノ酸の付加、欠失、置換または挿入によって提供し、ここで親VLドメインLCDR1、LCDR2およびLCDR3は表7に示されるVL CDRセットであり、各々が親VLドメインのアミノ酸配列変異体である1つ以上のVLドメインを作製する、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
親VHドメインのアミノ酸配列変異体である該VHドメインをCDR突然変異誘発によって提供する、請求項５９または請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
IgG、scFvまたはFab抗体分子の構成要素として抗体抗原結合ドメインを製造するステップをさらに含む、請求項５９〜６１のいずれかに記載の方法。
【請求項６３】
IL-6と結合する結合性メンバーの製造方法であって、以下のステップ：
VHドメインをコードする出発核酸または各々がVHドメインをコードする出発核酸レパートリーを提供し、ここで該VHドメインまたは複数のVHドメインは、置換対象のHCDR1、HCDR2および／またはHCDR3を含むか、またはHCDR1、HCDR2および／またはHCDR3コード領域を欠いている、ステップ；
該出発核酸または出発核酸レパートリーを、表7に示されるHCDR1、HCDR2、および／またはHCDR3をコードするかまたは表7に示されるHCDR1、HCDR2、および／またはHCDR3のアミノ酸配列の突然変異によって生成されたドナー核酸または複数のドナー核酸と組み合わせて、該ドナー核酸または複数のドナー核酸が出発核酸または出発核酸レパートリーのCDR1、CDR2および／またはCDR3領域に挿入されるようにして、VHドメインをコードする核酸の生成物レパートリーを提供するステップ；
該生成物レパートリーの核酸を発現させて、生成物VHドメインを作製するステップ；
場合により、該生成物VHドメインを1つ以上のVLドメインと組み合わせるステップ；
IL-6に対する結合性メンバーを選択し、ここで該結合性メンバーは生成物VHドメインおよび場合によりVLドメインを含む、ステップ；および
該結合性メンバーまたはそれをコードする核酸を回収するステップ
を含む、方法。
【請求項６４】
ドナー核酸が該HCDR1および／またはHCDR2の突然変異によって生成される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
ドナー核酸がHCDR3の突然変異によって生成される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
ドナー核酸を核酸のランダム突然変異によって提供するステップを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６７】
回収された結合性メンバー内に含まれる生成物VHドメインを抗体定常領域に連結させるステップをさらに含む、請求項５９〜６６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
生成物VHドメインおよびVLドメインを含むIgG、scFvまたはFab抗体分子を提供するステップを含む、請求項５９〜６７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６９】
IL-6と結合する抗体抗原結合ドメインまたは結合性メンバーを、IL-6を中和する能力について試験するステップをさらに含む、請求項５９〜６８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７０】
IL-6と結合しかつそれを中和する抗体分子を含む結合性メンバーを得る、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
抗体分子がscFvである、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
抗体分子がIgGである、請求項７０に記載の方法。
【請求項７３】
抗体分子組成物を製造するための方法であって、請求項５６〜７２のいずれかに記載の方法を使用して抗体分子を得るステップ、および抗体分子を製剤化して少なくとも1種の追加の成分を含む組成物とするステップを含む、方法。
【請求項１】
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバーであって、表面プラズモン共鳴によって定められる30 pM以下のKDでヒトIL-6と結合する、結合性メンバー。
【請求項２】
KDが10 pM以下である、請求項１に記載の結合性メンバー。
【請求項３】
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバーであって、ヒトIL-6と残基Phe102および／またはSer204（該残基ナンバリングは配列番号１６１の完全長ヒトIL-6アミノ酸配列にしたがって定められる）で結合する、結合性メンバー。
【請求項４】
ヒトIL-6と残基Arg207で結合する、請求項３に記載の結合性メンバー。
【請求項５】
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバーであって、0.6 pMヒトIL-1βおよび2.4 nM可溶性ヒトIL-6Rαで刺激されたヒト滑膜線維芽細胞からのVEGF放出の阻害についてのアッセイにおいて1 nM未満のIC50を有する、結合性メンバー。
【請求項６】
カニクイザルIL-6と結合する結合性メンバーであり、該カニクイザルIL-6が、支持体上に固定された結合性メンバーに対する標識ヒトIL-6の結合の阻害に関する時間分解蛍光アッセイにおいて、非標識ヒトIL-6のIC50と10倍未満の差のあるIC50を有し、該アッセイでは、標識ヒトIL-6が、該結合性メンバーとのその相互作用のKdの2倍と等しい終濃度である、請求項１〜５のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項７】
20 pMヒトIL-6に応答したTF-1細胞の増殖の阻害に関するアッセイにおいて100 pM未満のIC50を有する、請求項１〜６のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項８】
CDRセット：HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含み、該CDRセットが、CDRセット
［該セット中：
HCDR1は配列番号３のアミノ酸配列を有し；
HCDR2は配列番号４のアミノ酸配列を有し；
HCDR3は配列番号１１５のアミノ酸配列を有し；
LCDR1は配列番号８のアミノ酸配列を有し；
LCDR2は配列番号９のアミノ酸配列を有し；および
LCDR3は配列番号１２０のアミノ酸配列を有する］
からの22個以下のアミノ酸変化を有し、かつ
20 pMヒトIL-6に応答したTF-1細胞の増殖の阻害に関するアッセイにおいて100 pM未満のIC50を有する、
ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバー。
【請求項９】
CDRセット：HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含み、該CDRセットが、CDRセット
［該セット中：
HCDR1は配列番号３のアミノ酸配列を有し；
HCDR2は配列番号４のアミノ酸配列を有し；
HCDR3は配列番号１１５のアミノ酸配列を有し；
LCDR1は配列番号８のアミノ酸配列を有し；
LCDR2は配列番号９のアミノ酸配列を有し；および
LCDR3は配列番号１２０のアミノ酸配列を有する］
からの22個以下のアミノ酸変化を有する、
請求項１〜７のいずれかに記載の、ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバー。
【請求項１０】
CDRセット
［該セット中：
HCDR1は配列番号３のアミノ酸配列を有し；
HCDR2は配列番号４のアミノ酸配列を有し；
HCDR3は配列番号１１５のアミノ酸配列を有し；
LCDR1は配列番号８のアミノ酸配列を有し；
LCDR2は配列番号９のアミノ酸配列を有し；および
LCDR3は配列番号１２０のアミノ酸配列を有する］
からの20個以下の置換を有するCDRセットを含み、かつ
場合により、配列番号１１５と比べてHCDR3の長さを増大させる1残基の挿入を有し、かつ／または配列番号１２０と比べてLCDR3の長さを増大させる1残基の挿入を有する、
請求項８または請求項９に記載の結合性メンバー。
【請求項１１】
Kabat残基35がIle、ThrまたはValであるHCDR1を含む、請求項８〜１０のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１２】
HCDR1が配列番号３である、請求項１１に記載の結合性メンバー。
【請求項１３】
Kabat残基64がLysまたはArgであるHCDR2を含む、請求項８〜１２のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１４】
HCDR2が配列番号４のアミノ酸配列を有する、請求項１３に記載の結合性メンバー。
【請求項１５】
HCDR3中のKabat残基95がTrpであり、かつ／またはHCDR3中のKabat残基101がAspである、請求項８〜１４のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれかに記載の結合性メンバーであって、
Kabat残基96がAlaまたはGluであり；
Kabat残基97がAsp、GluまたはAsnであり；
Kabat残基98がAsp、Gly、GluまたはHisであり；
Kabat残基99がHis、GlyまたはThrであり；
Kabat残基100がPro、Tyr、Asn、Arg、TrpまたはAlaであり；
Kabat残基100AがPro、Tyr、Ala、Arg、Thr、Gly、Asn、ProまたはSerであり；
Kabat残基100BがTrp、Tyr、His、Gln、ProまたはThrであり；
Kabat残基100CがIle、Ala、Val、His、TyrまたはLeuであり；および
Kabat残基102がLeu、Val、His、MetまたはIleである、HCDR3を含む、
結合性メンバー。
【請求項１７】
HCDR3が配列番号１１５のアミノ酸配列を有する、請求項１６に記載の結合性メンバー。
【請求項１８】
LCDR1中のKabat残基34がAlaまたはThrである、請求項８〜１７のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項１９】
LCDR1が配列番号８である、請求項１８に記載の結合性メンバー。
【請求項２０】
LCDR2が配列番号９である、請求項８〜１９のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれかに記載の結合性メンバーであって、
Kabat残基89がGln、MetまたはAlaであり；
Kabat残基90がGln、Asn、SerまたはAlaであり；
Kabat残基91がSer、Asn、Gly、AlaまたはHisであり；
Kabat残基92がTrp、Tyr、Ser、LysまたはPheであり；
Kabat残基93がLeu、Ser、Lys、ArgまたはAlaであり；
Kabat残基94がGly、Thr、AlaまたはProであり；
Kabat残基96がGlyまたはTrpであり；および
Kabat残基97がSerまたはThrである、LCDR3を含む、
結合性メンバー。
【請求項２２】
配列番号１２０のアミノ酸配列を有するLCDR3を含む、請求項２１に記載の結合性メンバー。
【請求項２３】
抗体2、3、4、5、7、8、10、14、16、17、18、19、21、22または23のいずれかの抗体のHCDR3、LCDR3および／またはCDRセットを含む、ヒトIL-6に対する単離された結合性メンバー。
【請求項２４】
CDRセット：HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2およびLCDR3
［ここで：
HCDR1は配列番号３であり；
HCDR2は配列番号４であり；
HCDR3は配列番号１１５であり；
LCDR1は配列番号８であり；
LCDR2は配列番号９であり；および
LCDR3は配列番号８０である］
を含む、請求項１〜２３のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２５】
抗体VHドメインおよび抗体VLドメインを含み、ここで該抗体分子は該CDRセットを含み、VHドメインはHCDR1、HCDR2、HCDR3およびフレームワークを含み、かつVLドメインはLCDR1、LCDR2、LCDR3およびフレームワークを含む、請求項１〜２４のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２６】
抗体分子が抗体定常領域を含む、請求項２５に記載の結合性メンバー。
【請求項２７】
抗体分子がIgG1である、請求項２６に記載の結合性メンバー。
【請求項２８】
VHおよび／またはVLドメインのフレームワーク領域がヒト生殖細胞系列遺伝子セグメント配列へと生殖細胞系列化されている、請求項２５〜２７のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項２９】
抗体VHドメインが、ヒト生殖細胞系列フレームワークVh3_DP-86_(3-66)へと生殖細胞系列化されたフレームワーク領域を含む、請求項２８に記載の結合性メンバー。
【請求項３０】
VHドメインがフレームワーク領域FR1、FR2、FR3およびFR4を含み、FR1が配列番号１６７、FR2が配列番号１６８、FR3が配列番号１６９およびFR4が配列番号１７０のアミノ酸配列を有する、請求項２９に記載の結合性メンバー。
【請求項３１】
抗体VHドメインが配列番号１１２に示されるVHドメインアミノ酸配列を有する、請求項３０に記載の結合性メンバー。
【請求項３２】
抗体VLドメインが、ヒト生殖細胞系列フレームワークVk1_L12へと生殖細胞系列化されたフレームワーク領域を含む、請求項２８〜３１のいずれかに記載の結合性メンバー。
【請求項３３】
VLドメインがフレームワーク領域FR1、FR2、FR3およびFR4を含み、FR1が配列番号１７１、FR2が配列番号１７２、FR3が配列番号１７３およびFR4が配列番号１７４のアミノ酸配列を有する、請求項３２に記載の結合性メンバー。
【請求項３４】
抗体VLドメインが配列番号１１７に示されるVLドメインアミノ酸配列を有する、請求項３３に記載の結合性メンバー。
【請求項３５】
配列番号１１２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１１７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離された抗体分子。
【請求項３６】
IL-6と結合する単離された抗体分子であって、配列番号１１２に対して少なくとも90％同一のVHドメインアミノ酸配列および配列番号１１７に対して少なくとも90％同一のVLドメインアミノ酸配列を含む、抗体分子。
【請求項３７】
IgGである、請求項３５または請求項３６に記載の抗体分子。
【請求項３８】
IgGがIgG1である、請求項３７に記載の抗体分子。
【請求項３９】
請求項２５〜３８のいずれかに記載の抗体分子の単離されたVHドメイン。
【請求項４０】
請求項２５〜３８のいずれかに記載の抗体分子の単離されたVLドメイン。
【請求項４１】
請求項１〜３４のいずれかに記載の単離された結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子、および製薬的に許容される賦形剤を含む組成物。
【請求項４２】
療法によるヒトまたは動物体の治療方法において使用するための、請求項１〜３４のいずれかに記載の単離された結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子を含む、組成物。
【請求項４３】
IL-6と関連した疾患の治療に使用するための、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】
IL-6と関連した疾患を治療するための医薬を製造するための、請求項１〜３４のいずれかに記載の単離された結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子の、使用。
【請求項４５】
疾患が炎症性疾患および／または自己免疫疾患である、請求項４３に記載の組成物または請求項４４に記載の使用。
【請求項４６】
疾患が、関節リウマチ、骨関節炎、悪液質、慢性閉塞性肺疾患、若年性特発性関節炎、喘息、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患、クローン病またはアテローム性動脈硬化症である、請求項４５に記載の組成物または使用。
【請求項４７】
疾患が関節リウマチである、請求項４５に記載の組成物または使用。
【請求項４８】
疾患が腫瘍および／または癌である、請求項４３に記載の組成物または請求項４４に記載の使用。
【請求項４９】
個体におけるIL-6と関連した疾患の治療方法であって、請求項１〜３４のいずれかに記載の結合性メンバー、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子を、個体に投与するステップを含む、方法。
【請求項５０】
疾患が炎症性疾患および／または自己免疫疾患である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
疾患が、関節リウマチ、骨関節炎、悪液質、慢性閉塞性肺疾患、若年性特発性関節炎、喘息、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患、クローン病またはアテローム性動脈硬化症である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
疾患が関節リウマチである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
疾患が腫瘍および／または癌である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５４】
請求項１〜３４のいずれかに記載の結合性メンバー、請求項３９に記載のVHドメイン、請求項４０に記載のVLドメイン、または請求項３５〜３８のいずれかに記載の抗体分子をコードする、ヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項５５】
請求項５４に記載の核酸でin vitroで形質転換された宿主細胞。
【請求項５６】
結合性メンバー、抗体分子または抗体VHもしくはVLドメインの製造方法であって、結合性メンバー、抗体分子または抗体VHもしくはVLドメインの製造のための条件下で請求項５５に記載の宿主細胞を培養するステップを含む、方法。
【請求項５７】
結合性メンバー、抗体分子、VHドメインまたはVLドメインを単離および／または精製するステップをさらに含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
結合性メンバー、抗体分子、VHドメインまたはVLドメインを製剤化して少なくとも1種の追加の成分を含む組成物とするステップをさらに含む、請求項５６または請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
IL-6に対する抗体抗原結合ドメインの製造方法であって、以下のステップ：
HCDR1、HCDR2およびHCDR3を含む親VHドメインのアミノ酸配列中の1個以上のアミノ酸の付加、欠失、置換または挿入によって、親VHドメインのアミノ酸配列変異体であるVHドメインを提供し、ここで該親VHドメインHCDR1、HCDR2およびHCDR3は表7に示されるHCDRセットであり、かつ場合により、そのように得られたVHドメインを1つ以上のVLドメインと組み合わせて1つ以上のVH/VLの組み合わせを提供するステップ；および
親VHドメインのアミノ酸配列変異体である該VHドメインまたは該VH/VLの組み合わせもしくは複数の該組み合わせを試験して、IL-6に対する抗体抗原結合ドメインを同定するステップ
を含む、方法。
【請求項６０】
該1つ以上のVLドメインを、LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含む親VLドメインのアミノ酸配列中の1個以上のアミノ酸の付加、欠失、置換または挿入によって提供し、ここで親VLドメインLCDR1、LCDR2およびLCDR3は表7に示されるVL CDRセットであり、各々が親VLドメインのアミノ酸配列変異体である1つ以上のVLドメインを作製する、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
親VHドメインのアミノ酸配列変異体である該VHドメインをCDR突然変異誘発によって提供する、請求項５９または請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
IgG、scFvまたはFab抗体分子の構成要素として抗体抗原結合ドメインを製造するステップをさらに含む、請求項５９〜６１のいずれかに記載の方法。
【請求項６３】
IL-6と結合する結合性メンバーの製造方法であって、以下のステップ：
VHドメインをコードする出発核酸または各々がVHドメインをコードする出発核酸レパートリーを提供し、ここで該VHドメインまたは複数のVHドメインは、置換対象のHCDR1、HCDR2および／またはHCDR3を含むか、またはHCDR1、HCDR2および／またはHCDR3コード領域を欠いている、ステップ；
該出発核酸または出発核酸レパートリーを、表7に示されるHCDR1、HCDR2、および／またはHCDR3をコードするかまたは表7に示されるHCDR1、HCDR2、および／またはHCDR3のアミノ酸配列の突然変異によって生成されたドナー核酸または複数のドナー核酸と組み合わせて、該ドナー核酸または複数のドナー核酸が出発核酸または出発核酸レパートリーのCDR1、CDR2および／またはCDR3領域に挿入されるようにして、VHドメインをコードする核酸の生成物レパートリーを提供するステップ；
該生成物レパートリーの核酸を発現させて、生成物VHドメインを作製するステップ；
場合により、該生成物VHドメインを1つ以上のVLドメインと組み合わせるステップ；
IL-6に対する結合性メンバーを選択し、ここで該結合性メンバーは生成物VHドメインおよび場合によりVLドメインを含む、ステップ；および
該結合性メンバーまたはそれをコードする核酸を回収するステップ
を含む、方法。
【請求項６４】
ドナー核酸が該HCDR1および／またはHCDR2の突然変異によって生成される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
ドナー核酸がHCDR3の突然変異によって生成される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
ドナー核酸を核酸のランダム突然変異によって提供するステップを含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６７】
回収された結合性メンバー内に含まれる生成物VHドメインを抗体定常領域に連結させるステップをさらに含む、請求項５９〜６６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
生成物VHドメインおよびVLドメインを含むIgG、scFvまたはFab抗体分子を提供するステップを含む、請求項５９〜６７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６９】
IL-6と結合する抗体抗原結合ドメインまたは結合性メンバーを、IL-6を中和する能力について試験するステップをさらに含む、請求項５９〜６８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７０】
IL-6と結合しかつそれを中和する抗体分子を含む結合性メンバーを得る、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
抗体分子がscFvである、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
抗体分子がIgGである、請求項７０に記載の方法。
【請求項７３】
抗体分子組成物を製造するための方法であって、請求項５６〜７２のいずれかに記載の方法を使用して抗体分子を得るステップ、および抗体分子を製剤化して少なくとも1種の追加の成分を含む組成物とするステップを含む、方法。
【図１】
【公表番号】特表２０１０−５１０７９５（Ｐ２０１０−５１０７９５Ａ）
【公表日】平成２２年４月８日（２０１０．４．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５３８７７４（Ｐ２００９−５３８７７４）
【出願日】平成１９年１１月２８日（２００７．１１．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００７／００４５２７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０６５３７８
【国際公開日】平成２０年６月５日（２００８．６．５）
【出願人】（３０００２２６４１）アストラゼネカ アクチボラグ (581)
【出願人】（５０６０４２２６５）メディミューン リミテッド (11)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年４月８日（２０１０．４．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１１月２８日（２００７．１１．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００７／００４５２７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０６５３７８
【国際公開日】平成２０年６月５日（２００８．６．５）
【出願人】（３０００２２６４１）アストラゼネカ アクチボラグ (581)
【出願人】（５０６０４２２６５）メディミューン リミテッド (11)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]