ガリウム−６８を得る方法及びその使用、並びにＳＡＩＦ法を実施する装置
【課題】 ６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから６８Ｇａを得る方法、及び得られた６８Ｇａを使用して６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法の提供。さらに、６８Ｇａを得るために使用できるキット、及び６８Ｇａ放射標識錯体の製造に使用できるキットを提供する。
【解決手段】 ６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得る。対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体の使用は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの精製及び濃縮に特に適している。溶出液中に存在する６８Ｇｅの量ばかりでなく擬似担体の量も削減する。
【解決手段】 ６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得る。対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体の使用は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの精製及び濃縮に特に適している。溶出液中に存在する６８Ｇｅの量ばかりでなく擬似担体の量も削減する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから６８Ｇａを得る方法及び得られた６８Ｇａを使用して６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法に関する。本発明は、さらに、６８Ｇａを得るのに使用できるキット、及び６８Ｇａ放射標識錯体の製造に使用できるキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＥＴ撮像は、陽電子を放出する放射性トレーサー分子を用いる断層撮影核撮像技術である。陽電子が電子と出会うと、両方とも消滅し、その結果としてガンマ線の形のエネルギーが放出され、それがＰＥＴスキャナにより検出される。人体により用いられる天然物質をトレーサー分子として用いることにより、ＰＥＴは人体の構造についての情報だけでなく、人体又はその特定領域の生理学的機能についての情報もまた提供する。一般的なトレーサー分子は、例えば、２−フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（ＦＤＧ）であり、これは天然グルコースに似ており、１８Ｆ原子が付加されている。前記陽電子放出フッ素により生成するガンマ線はＰＥＴスキャナにより検出され、人体の特定領域又は組織（例えば、脳又は心臓）におけるＦＤＧの代謝を示す。トレーサー分子の選択は、何がスキャンされようとしているかに応じて決まる。一般に、関心のある領域に集まる、或いは、特定のタイプの組織（例えば複数のガン細胞）により選択的に取り込まれるトレーサーが選ばれる。スキャンは、放射性トレーサー分子が関心のある生化学的過程に入るある時間間隔の後に得られる動的な一連のもの、或いは、静的な画像からなる。スキャナはトレーサー分子の空間的及び時間的分布を検出する。ＰＥＴはまた、放射性トレーサー分子の局所的濃度を測定できる定量的撮像法でもある。
【０００３】
ＰＥＴトレーサーに一般に使用される放射性核種は、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、１３Ｎ又は７６Ｂｒである。最近、二官能性キレート剤と放射性金属を含む放射標識金属錯体に基づく新しいＰＥＴトレーサーが作り出された。二官能性キレート剤は、金属イオンに配位し、患者の身体の目標部位に結合することになるターゲティングベクターに結合しているキレート剤である。このようなターゲティングベクターは、人体の特定領域又は特定の疾患に恐らく関係する特定の受容体に結合するペプチドであってもよい。ターゲティングベクターはまた、例えば活性化された癌遺伝子に特異性な、従って腫瘍部位を目標とするオリゴヌクレオチドであってもよい。このような錯体の利点は、二官能性キレート剤が、例えば、６８Ｇａ、２１３Ｂｉ又は８６Ｙのような、様々な放射性金属で標識できることである。従って、特別な性質を持つ放射標識錯体を、特定の用途に「合わせて作る」ことができる。
【０００４】
ＰＥＴ撮像におけるトレーサー分子として使用されるＧａ放射標識金属錯体の製造では、６８Ｇａが特に興味深い。６８Ｇａは、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られ、これはサイクロトロンを必要としないことを意味する。６８Ｇａは、８９％まで２．９２ＭｅＶの陽電子放出により崩壊し、その６８分の半減期は、余計な放射線は無しに、多くの生化学的過程をｉｎ ｖｉｖｏで追跡するのに十分である。＋ＩＩＩのその酸化状態により、６８Ｇａは、様々なタイプのキレート剤と安定な錯体を形成し、６８Ｇａトレーサーは、脳、腎臓、骨、血液プール、肺及び腫瘍の撮像に用いられている。
【０００５】
しかしながら、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られた６８Ｇａを、ＰＥＴトレーサー分子として使用する６８Ｇａ標識金属錯体のために使用するのは、問題を引き起こす可能性がある。６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａ溶出液は、６８Ｇｅをしばしば含有し、そのことが、６８Ｇａ溶出液から生成する６８Ｇａ標識金属錯体の低い放射性核種純度を引き起こす。その上、その溶出液は、また、いわゆる擬似担体、すなわち、Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋及びＩｎ３＋のような他の金属陽イオンも含有し、それがその後の錯体形成反応において６８Ｇａ３＋と競合し、結局は比放射能を低下する。さらなる不都合は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａ溶出液が、低い、すなわち、ピコモルからナノモルの範囲の６８Ｇａ濃度を有することである。その結果、その後の６８Ｇａ放射標識反応におけるキレート剤の量を、反応を起こすために高くしなければならず、そのことが同様に低い比放射能をもたらす。多量のキレート剤は、二官能性キレート剤すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーが生成するとき、患者が、好ましくない多量のこれらトレーサーを受け入れることになるので特に問題である。
【０００６】
Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｔ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られた４．５ＮのＨＣｌ６８Ｇａ溶出液を、その溶出液中に存在する６８Ｇｅの量を減少させるために処理するためのＢｉｏ−Ｒａｄ ＡＧ １×８陰イオン交換体の使用について記載している。そのイオン交換体を溶出するために４ｍＬの水を使用した。この方法の不利点は、陰イオン交換体から６８Ｇａの溶出に必要な水の量が高いことである。二官能性キレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの製造にこの溶出液を使用するには、その溶出液は、例えば蒸発によってさらに濃縮する必要があり、それが、同様に、この放射性核種の短い半減期に起因する６８Ｇａ放射能の減少をもたらす。
【非特許文献１】Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
６８Ｇａが、６８Ｇａ放射標識金属錯体の製造、特に、高い比放射能を有する二官能性キレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの製造に使用することができるそのような６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから６８Ｇａを得る方法が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
今回、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体の使用が、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの精製及び濃縮に特に適していることが判明した。
【０００９】
溶出液中に存在する６８Ｇｅの量ばかりでなく擬似担体の量も削減することができた。その上、６８ＧＡ３＋の濃度を、最高でナノモルからマイクロモルの水準まで増加することができた。それ故、その後の錯体形成反応において、キレート剤の量を削減することが可能であり、それによって比放射能が大幅に増加した。この結果は、二官能性キレート剤すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの生成に対して重要であり、それは、比放射能の増加により、患者に使用される上記トレーサーの量の削減が可能となるためである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明は、従って、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、前記陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得る方法を提供する。
【００１１】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターは当該技術分野で公知であり、例えば、Ｃ．Ｌｏｃ’ｈ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２１，１９８０，１７１−１７３、又は、Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６を参照。６８Ｇｅを、例えばＧａ２（ＳＯ４）３を２０ＭｅＶの陽子で照射することにより、シクロトロンによる生産により得ることができる。それはまた、例えば、６８Ｇｅの０．５Ｍ ＨＣｌ溶液として市販されてもいる。一般に、６８Ｇｅは有機樹脂、或いは、二酸化スズ、二酸化アルミニウム又は二酸化チタンのような無機金属酸化物からなるカラムに充填されている。６８Ｇａは、ＨＣｌ水溶液により６８ＧａＣｌ３を生成しカラムから溶出する。従って、６８Ｇａは、６８Ｇａ３＋の形をしており、それは、例えば、６８Ｇａ標識ＰＥＴトレーサーを製造するための６８Ｇａ標識錯体の合成に使用することができる。
【００１２】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターに適するカラムは、二酸化アルミニウム、二酸化チタン又は二酸化スズのような無機酸化物、或いは、フェノール性水酸基（米国特許第４２６４４６８号）又はピロガロール（Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６）を含む樹脂のような有機樹脂からなる。好ましい実施形態において、二酸化チタンを含むカラムを備える６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターが、本発明による方法において使用される。
【００１３】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターカラムから６８Ｇａを溶出させるのに用いられるＨＣｌ水溶液の濃度は、カラムの材料に応じて決まる。適切には、６８Ｇａの溶出には、０．０５〜５Ｍ ＨＣｌが使用される。好ましい実施形態において、溶出液は、二酸化チタンを含むカラムを備える６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られ、６８Ｇａは、０．０５〜０．１Ｍ ＨＣｌ、好ましくは約０．１Ｍ ＨＣｌを用いて溶出する。
【００１４】
本発明による方法の好ましい実施形態において、ＨＣＯ３−を対イオンとして含む強陰イオン交換体、好ましくは、ＨＣＯ３−を対イオンとして含む強陰イオン交換体が用いられる。さらに好ましい実施形態において、この陰イオン交換体は、第四級アミン官能基を備える。別の好ましい実施形態において、この陰イオン交換体は、ポリスチレン−ジビニルベンゼン系の強陰イオン交換樹脂である。特に好ましい実施形態において、本発明による方法において用いられる陰イオン交換体は、対イオンとしてのＨＣＯ３−、第四級アミン官能基を備える強陰イオン交換樹脂であり、この樹脂はポリスチレン−ジビニルベンゼン系である。
【００１５】
適切には、本発明による方法において、陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出させるために水が用いられる。
【００１６】
本発明による方法で得られた６８Ｇａは、６８Ｇａ放射標識錯体を生成させるため、好ましくは二官能性キレート剤すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの生成に好ましく使用される。
【００１７】
従って、本発明のもう１つの態様は、
ａ）６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、前記陰イオン交換体から６８Ｇａ３＋を溶出することによって６８Ｇａを得ること、及び
ｂ）その６８Ｇａをキレート剤と反応させることにより６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法である。
【００１８】
本発明の方法において使用するための好ましいキレート剤は、生理的に許容できる形で６８Ｇａを与えるものである。さらに好ましいキレート剤は、放射標識錯体を用いる診断調査のために必要な時間安定である６８Ｇａとの錯体を形成するものである。
【００１９】
適切なキレート剤は、例えば、ＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＯＡ３、ＤＯＴＡ、ＨＰ−ＤＯＡ３、ＴＭＴ又はＤＰＤＰのようなポリアミノポリ酸キレート剤である。これらのキレート剤は、放射線医薬品及び放射線診断薬ではよく知られている。それらの使用と合成は、例えば、米国特許第４６４７４４７号、同５３６２４７５号、同５５３４２４１号、同５３５８７０４号、同５１９８２０８号、同４９６３３４４号、欧州特許出願公開第２３０８９３号、同第１３０９３４号、同第６０６６８３号、同第４３８２０６号、同第４３４３４５号、国際公開第９７／０００８７号、同第９６／４０２７４号、同第９６／３０３７７号、同第９６／２８４２０号、同第９６／１６６７８号、同第９６／１１０２３号、同第９５／３２７４１号、同第９５／２７７０５号、同第９５／２６７５４号、同第９５／２８９６７号、同第９５／２８３９２号、同第９５／２４２２５号、同第９５／１７９２０号、同第９５／１５３１９号、同第９５／０９８４８号、同第９４／２７６４４号、同第９４／２２３６８号、同第９４／０８６２４号、同第９３／１６３７５号、同第９３／０６８６８号、同第９２／１１２３２号、同第９２／０９８８４号、同第９２／０８７０７号、同第９１／１５４６７号、同第９１／１０６６９号、同第９１／１０６４５号、同第９１／０７１９１号、同第９１／０５７６２号、同第９０／１２０５０号、同第９０／０３８０４号、同第８９／０００５２号、同第８９／００５５７号、同第８８／０１１７８号、同第８６／０２８４１号及び同第８６／０２００５号に記載されている。
【００２０】
適切なキレート剤には、大環状キレート剤、例えば、ポルフィリン様分子、及び、Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．３７（５），１９９８，９５６−９６３に記載されるペンタアザマクロ環状化合物、フタロシアニン、クラウンエーテル、例えば、セプルクレート（ｓｅｐｕｌｃｈｒａｔｅ）、クリプテートなどのような窒素クラウンエーテル、ヘミン（プロトポルフィリンＩＸ塩化物）、ヘム、並びに、平面正方対称をもつキレート剤が含まれる。
【００２１】
本発明の方法においては、好ましくは、大環状キレート剤が用いられる。好ましい実施形態において、これらの大環状キレート剤は、ポリアザ及びポリオキソ大環状化合物におけるように、酸素及び／又は窒素のような少なくとも１個の硬い（ｈａｒｄ）ドナー原子を含んでいる。好ましいポリアザ大環状キレート剤の例には、ＤＯＴＡ、ＴＲＩＴＡ、ＴＥＴＡ及びＨＥＴＡが含まれ、ＤＯＴＡが特に好ましい。
【００２２】
特に好ましい大環状キレート剤は、Ｇａ３＋への配位には必要不可欠ではないので、他の分子、例えばターゲティングベクターをそのキレート剤に結合するのに用い得る、カルボキシル基又はアミン基のような官能基を備えている。官能基を含むこのような大環状キレート剤の例は、ＤＯＴＡ、ＴＲＩＴＡ又はＨＥＴＡである。
【００２３】
さらに好ましい実施形態において、本発明による方法においては、二官能性キレート剤が用いられる。本発明における「二官能性キレート剤」は、ターゲティングベクターに結合しているキレート剤である。本発明による方法において有用な二官能性キレート剤に適するターゲティングベクターは、前記ターゲティングベクターを備える６８Ｇａ放射標識錯体が患者の体に投与された時に、その患者の体の目標部位に結合する化学的又は生物学的部分である。本発明による方法において有用な二官能性キレート剤に適するターゲティングベクターは、タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、抗体又は抗体断片のようなポリペプチド、糖ポリペプチド、リポポリペプチド、ＲＤＧ結合ペプチドのようなペプチド、糖ペプチド、リポペプチド、炭水化物、核酸、例えばＤＮＡ、ＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチドのようなオリゴヌクレオチド、或いは、前記の化合物の一部、断片、誘導体又は複合体、或いは、比較的小さな有機分子、特に２０００Ｄａ未満の小さな有機分子のような関心を引く他の化合物である。
【００２４】
特に好ましい実施形態において、本発明による方法においては、大環状二官能性キレート剤が用いられる。好ましい大環状二官能性キレート剤には、ターゲティングベクターに、好ましくは、タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、ポリペプチド、糖ポリペプチド、リポポリペプチド、ペプチド、糖ペプチド、リポペプチド、炭水化物、核酸、オリゴヌクレオチド、或いは、前記の化合物の一部、断片、誘導体又は複合体、並びに、小さな有機分子からなる群から選択されるターゲティングベクターに、特に好ましくは、ペプチド及びオリゴヌクレオチドからなる群から選択されるターゲティングベクターに結合したＤＯＴＡ、ＴＲＩＴＡ又はＨＥＴＡが含まれる。
【００２５】
ターゲティングベクターをキレート剤に、リンカー基又はスペーサー分子を介して結合させることができる。リンカー基の例は、ジスルフィド、エステル又はアミドであり、スペーサー分子の例は、鎖状分子、例えば、リシン又はヘキシルアミン或いは短いペプチド系スペーサーである。好ましい実施形態において、放射標識ガリウム錯体のターゲティングベクターとキレート剤部分の間の結合は、ターゲティングベクターが体の中のその目標と、放射標識ガリウム錯体の存在により遮断されたり阻害されたりすることなく、相互作用し得るようなものである。
【００２６】
本発明の好ましい態様は、
ｃ）６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、前記陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得ること、及び
ｄ）反応を、マイクロ波活性化を使用して行い、その６８Ｇａをキレート剤と反応させることにより、６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法である。
【００２７】
マイクロ波活性化の使用は、６８Ｇａキレート剤の錯体形成の効率及び再現性を大幅に改善することが見出された。マイクロ波活性化によって、化学反応時間を大幅に短縮することができた。すなわち、反応は２分以内に完了する。１０分の反応時間の短縮は６８Ｇａ放射能の約１０％を節約するのでこれは明らかな改善である。その上、マイクロ波活性化は、また、より少ない副反応及び増大した選択性による放射化学的収率の増加も引き起こす。
【００２８】
マイクロ波活性化を行うには、マイクロ波オーブン、好ましくは単一モードマイクロ波オーブンを使用するのが適切である。適切には、マイクロ波による活性化は、８０〜１２０Ｗ、好ましくは、９０〜１１０Ｗ、特に好ましくは１００Ｗで実施される。適切なマイクロ波による活性化時間は、２０秒〜２分、好ましくは、３０秒〜９０秒、特に好ましくは、４５秒〜６０秒の範囲である。
【００２９】
反応の温度制御は、例えば、ペプチド又はタンパク質をターゲティングベクターとして含む二官能性キレート剤のような高温に弱いキレート剤が本発明による方法において用いられる場合に、望ましい。マイクロ波による活性化の継続時間は、反応混合物の温度のために、キレート剤及び／又はターゲティングベクターが分解することのないように、調節するべきである。本発明による方法において使用されるキレート剤が、ペプチド又はタンパク質を含んでいる場合、短時間、高温にする方が、より長時間、より低温にするより、一般に好ましい。
【００３０】
反応が進行する間、マイクロ波による活性化を、連続的に、或いは、マイクロ波による活性化を何回か、実施してもよい。
【００３１】
本発明のもう１つの態様は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから６８Ｇａを得るためのキットであって、それは、ジェネレーターカラム及び対イオンとしてＨＣＯ３−を含んだ陰イオン交換体を含む第２のカラムを含む。
【００３２】
好ましい実施形態において、そのキットは、カラムを連結する手段をさらに含み、且つ／又はジェネレーターカラムから６８Ｇａを溶出するためのＨＣｌ水溶液及び／又は陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出するための水を含む。ＨＣｌ及び水は無菌気密容器中にある。
【００３３】
もう１つの好ましい実施形態において、本発明によるそのキットは、キレート剤、好ましくは二官能性キレート剤、すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤をさらに含む。
【実施例】
【００３４】
実施例１
二酸化チタンカラムによる６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから、０．１ＭのＨＣｌ（５〜６ｍＬ）を使用して６８Ｇａを溶出した。その溶出液を、ＨＣｌによって酸性化し、対イオンとしてのＨＣＯ３−及び第四級アミン官能基を含むポリスチレン−ジビニルベンゼン系強塩基性の陰イオン交換樹脂（ＳＰＥカートリッジＣｈｒｏｍａｆｉｘ ３０−ＰＳ−ＨＣＯ３、Ｍａｃｈａｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ、ドイツ）を含有するカートリッジにかけた。９９％を超える６８Ｇａ放射能がその樹脂に保持され、次いで２００μｌのＨ２Ｏで溶出した。
【００３５】
比較例１ａ
実施例１で得た溶出液を、対イオンとしてのＣｌ−及び第四級アミン官能基を含む強塩基性の陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ ＳＰＥＣ、５０ｍｇ、１ｍＬ、Ｉｓｏｌｕｔｅ、英国、及びＳＡＸ ＳＰＥＣ、１５ｍｇ、３ｍＬ、ＮＴＫ ｋｅｍｉ、米国）を含有するカートリッジにかけた。両方のイオン交換体とも、６８Ｇａ放射能の保持をなんら示さなかった。
【００３６】
比較例１ｂ
比較例１ａにおいて使用したカートリッジのＣｌ−対イオンをＯＨ−対イオンと交換して、例１ａの記載と同様にこの比較例を行った。６８Ｇａ放射能の保持は、１０〜２０％であった。
【００３７】
実施例２
ＤＯＴＡ−Ｄ−Ｐｈｅ１−Ｔｙｒ３−オクトレオチド（ＤＯＴＡ−ＴＯＣ）の６８Ｇａ放射標識の比較研究
本発明の方法により得た６８Ｇａ及びさらなる陰イオン交換処理をしないで６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得た６８Ｇａを、ＤＯＴＡ−Ｄ−Ｐｈｅ１−Ｔｙｒ３−オクトレオチド（ＤＯＴＡ−ＴＯＣ）の６８Ｇａ放射標識に使用した。
【００３８】
２ａ）ＤＯＴＡ−ＴＯＣの６８Ｇａ放射標識
酢酸ナトリウムを６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液に（３６ｍｇを１ｍＬに）加え、約５．５のｐＨに調整し、その混合物をよくかき混ぜた。ＤＯＴＡ−ＴＯＣ（２０ｎｍｏｌ）を加え、その混合物を９６℃で２５分間加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、Ｃ−１８ ＳＰＥカラム（ＨｙｐｅｒＳＥＰ Ｓ Ｃ１８）にかけ、それを次に２ｍＬの水で洗浄し、生成物をエタノール：水＝５０：５０（１ｍＬ）により溶出した。
【００３９】
反応混合物及び生成物は、Ｖｙｄａｃ ＲＰカラム及びＦａｓｔ Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ（高速脱塩）ＨＲ １０／１０ ＦＰＬＣゲルろ過カラムを使用するＨＰＬＣによって分析した。比放射能（ペプチドの単位質量当たりの放射能の量）は、１．５ＭＢｑ／ｎｍｏｌであった。ポジティブモードのスキャニングを使用して［Ｍ＋２Ｈ］２＋を検出するＦｉｓｏｎｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ、マンチェスター、英国）により、エレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７１１．２６で検出され、真正Ｇａ−ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７４６．０で検出された（計算値ｍ／ｚ＝７４６．５）。
【００４０】
２ｂ）実施例１で得た６８Ｇａを使用するＤＯＴＡ−ＴＯＣの６８Ｇａ放射標識
実施例で得た２００μｌの６８Ｇａに酢酸ナトリウムを加えて約５．５のｐＨに調整した。錯体形成反応を、１０ｎｍｏｌのＤＯＴＡＴＯＣを使用して実施例２ａ）に記載したようにして行った。
【００４１】
反応混合物及び生成物は、Ｖｙｄａｃ ＲＰカラム及びＦａｓｔ Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ（高速脱塩）ＨＲ １０／１０ ＦＰＬＣゲルろ過カラムを使用するＨＰＬＣによって分析した。比放射能は、５ＭＢｑ／ｎｍｏｌであった。ポジティブモードのスキャニングを使用して［Ｍ＋２Ｈ］２＋を検出するＦｉｓｏｎｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ、マンチェスター、英国）により、エレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７１１．２６で検出され、真正Ｇａ−ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７４６．０で検出された（計算値ｍ／ｚ＝７４６．５）。
【００４２】
２ｃ）結果
本発明の方法で得た６８Ｇａを使用すると、放射標識錯体の合成に必要なＤＯＴＡＴＯＣの量が減し、従って、３倍を超える比放射能を増加させることが可能であった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから６８Ｇａを得る方法及び得られた６８Ｇａを使用して６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法に関する。本発明は、さらに、６８Ｇａを得るのに使用できるキット、及び６８Ｇａ放射標識錯体の製造に使用できるキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＥＴ撮像は、陽電子を放出する放射性トレーサー分子を用いる断層撮影核撮像技術である。陽電子が電子と出会うと、両方とも消滅し、その結果としてガンマ線の形のエネルギーが放出され、それがＰＥＴスキャナにより検出される。人体により用いられる天然物質をトレーサー分子として用いることにより、ＰＥＴは人体の構造についての情報だけでなく、人体又はその特定領域の生理学的機能についての情報もまた提供する。一般的なトレーサー分子は、例えば、２−フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（ＦＤＧ）であり、これは天然グルコースに似ており、１８Ｆ原子が付加されている。前記陽電子放出フッ素により生成するガンマ線はＰＥＴスキャナにより検出され、人体の特定領域又は組織（例えば、脳又は心臓）におけるＦＤＧの代謝を示す。トレーサー分子の選択は、何がスキャンされようとしているかに応じて決まる。一般に、関心のある領域に集まる、或いは、特定のタイプの組織（例えば複数のガン細胞）により選択的に取り込まれるトレーサーが選ばれる。スキャンは、放射性トレーサー分子が関心のある生化学的過程に入るある時間間隔の後に得られる動的な一連のもの、或いは、静的な画像からなる。スキャナはトレーサー分子の空間的及び時間的分布を検出する。ＰＥＴはまた、放射性トレーサー分子の局所的濃度を測定できる定量的撮像法でもある。
【０００３】
ＰＥＴトレーサーに一般に使用される放射性核種は、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、１３Ｎ又は７６Ｂｒである。最近、二官能性キレート剤と放射性金属を含む放射標識金属錯体に基づく新しいＰＥＴトレーサーが作り出された。二官能性キレート剤は、金属イオンに配位し、患者の身体の目標部位に結合することになるターゲティングベクターに結合しているキレート剤である。このようなターゲティングベクターは、人体の特定領域又は特定の疾患に恐らく関係する特定の受容体に結合するペプチドであってもよい。ターゲティングベクターはまた、例えば活性化された癌遺伝子に特異性な、従って腫瘍部位を目標とするオリゴヌクレオチドであってもよい。このような錯体の利点は、二官能性キレート剤が、例えば、６８Ｇａ、２１３Ｂｉ又は８６Ｙのような、様々な放射性金属で標識できることである。従って、特別な性質を持つ放射標識錯体を、特定の用途に「合わせて作る」ことができる。
【０００４】
ＰＥＴ撮像におけるトレーサー分子として使用されるＧａ放射標識金属錯体の製造では、６８Ｇａが特に興味深い。６８Ｇａは、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られ、これはサイクロトロンを必要としないことを意味する。６８Ｇａは、８９％まで２．９２ＭｅＶの陽電子放出により崩壊し、その６８分の半減期は、余計な放射線は無しに、多くの生化学的過程をｉｎ ｖｉｖｏで追跡するのに十分である。＋ＩＩＩのその酸化状態により、６８Ｇａは、様々なタイプのキレート剤と安定な錯体を形成し、６８Ｇａトレーサーは、脳、腎臓、骨、血液プール、肺及び腫瘍の撮像に用いられている。
【０００５】
しかしながら、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られた６８Ｇａを、ＰＥＴトレーサー分子として使用する６８Ｇａ標識金属錯体のために使用するのは、問題を引き起こす可能性がある。６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａ溶出液は、６８Ｇｅをしばしば含有し、そのことが、６８Ｇａ溶出液から生成する６８Ｇａ標識金属錯体の低い放射性核種純度を引き起こす。その上、その溶出液は、また、いわゆる擬似担体、すなわち、Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋及びＩｎ３＋のような他の金属陽イオンも含有し、それがその後の錯体形成反応において６８Ｇａ３＋と競合し、結局は比放射能を低下する。さらなる不都合は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａ溶出液が、低い、すなわち、ピコモルからナノモルの範囲の６８Ｇａ濃度を有することである。その結果、その後の６８Ｇａ放射標識反応におけるキレート剤の量を、反応を起こすために高くしなければならず、そのことが同様に低い比放射能をもたらす。多量のキレート剤は、二官能性キレート剤すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーが生成するとき、患者が、好ましくない多量のこれらトレーサーを受け入れることになるので特に問題である。
【０００６】
Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｔ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られた４．５ＮのＨＣｌ６８Ｇａ溶出液を、その溶出液中に存在する６８Ｇｅの量を減少させるために処理するためのＢｉｏ−Ｒａｄ ＡＧ １×８陰イオン交換体の使用について記載している。そのイオン交換体を溶出するために４ｍＬの水を使用した。この方法の不利点は、陰イオン交換体から６８Ｇａの溶出に必要な水の量が高いことである。二官能性キレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの製造にこの溶出液を使用するには、その溶出液は、例えば蒸発によってさらに濃縮する必要があり、それが、同様に、この放射性核種の短い半減期に起因する６８Ｇａ放射能の減少をもたらす。
【非特許文献１】Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
６８Ｇａが、６８Ｇａ放射標識金属錯体の製造、特に、高い比放射能を有する二官能性キレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの製造に使用することができるそのような６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから６８Ｇａを得る方法が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
今回、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体の使用が、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの精製及び濃縮に特に適していることが判明した。
【０００９】
溶出液中に存在する６８Ｇｅの量ばかりでなく擬似担体の量も削減することができた。その上、６８ＧＡ３＋の濃度を、最高でナノモルからマイクロモルの水準まで増加することができた。それ故、その後の錯体形成反応において、キレート剤の量を削減することが可能であり、それによって比放射能が大幅に増加した。この結果は、二官能性キレート剤すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの生成に対して重要であり、それは、比放射能の増加により、患者に使用される上記トレーサーの量の削減が可能となるためである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明は、従って、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、前記陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得る方法を提供する。
【００１１】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターは当該技術分野で公知であり、例えば、Ｃ．Ｌｏｃ’ｈ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２１，１９８０，１７１−１７３、又は、Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６を参照。６８Ｇｅを、例えばＧａ２（ＳＯ４）３を２０ＭｅＶの陽子で照射することにより、シクロトロンによる生産により得ることができる。それはまた、例えば、６８Ｇｅの０．５Ｍ ＨＣｌ溶液として市販されてもいる。一般に、６８Ｇｅは有機樹脂、或いは、二酸化スズ、二酸化アルミニウム又は二酸化チタンのような無機金属酸化物からなるカラムに充填されている。６８Ｇａは、ＨＣｌ水溶液により６８ＧａＣｌ３を生成しカラムから溶出する。従って、６８Ｇａは、６８Ｇａ３＋の形をしており、それは、例えば、６８Ｇａ標識ＰＥＴトレーサーを製造するための６８Ｇａ標識錯体の合成に使用することができる。
【００１２】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターに適するカラムは、二酸化アルミニウム、二酸化チタン又は二酸化スズのような無機酸化物、或いは、フェノール性水酸基（米国特許第４２６４４６８号）又はピロガロール（Ｊ．Ｓｃｈｕｈｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ３２，１９８１，３１−３６）を含む樹脂のような有機樹脂からなる。好ましい実施形態において、二酸化チタンを含むカラムを備える６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターが、本発明による方法において使用される。
【００１３】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターカラムから６８Ｇａを溶出させるのに用いられるＨＣｌ水溶液の濃度は、カラムの材料に応じて決まる。適切には、６８Ｇａの溶出には、０．０５〜５Ｍ ＨＣｌが使用される。好ましい実施形態において、溶出液は、二酸化チタンを含むカラムを備える６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得られ、６８Ｇａは、０．０５〜０．１Ｍ ＨＣｌ、好ましくは約０．１Ｍ ＨＣｌを用いて溶出する。
【００１４】
本発明による方法の好ましい実施形態において、ＨＣＯ３−を対イオンとして含む強陰イオン交換体、好ましくは、ＨＣＯ３−を対イオンとして含む強陰イオン交換体が用いられる。さらに好ましい実施形態において、この陰イオン交換体は、第四級アミン官能基を備える。別の好ましい実施形態において、この陰イオン交換体は、ポリスチレン−ジビニルベンゼン系の強陰イオン交換樹脂である。特に好ましい実施形態において、本発明による方法において用いられる陰イオン交換体は、対イオンとしてのＨＣＯ３−、第四級アミン官能基を備える強陰イオン交換樹脂であり、この樹脂はポリスチレン−ジビニルベンゼン系である。
【００１５】
適切には、本発明による方法において、陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出させるために水が用いられる。
【００１６】
本発明による方法で得られた６８Ｇａは、６８Ｇａ放射標識錯体を生成させるため、好ましくは二官能性キレート剤すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤を含む６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーの生成に好ましく使用される。
【００１７】
従って、本発明のもう１つの態様は、
ａ）６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、前記陰イオン交換体から６８Ｇａ３＋を溶出することによって６８Ｇａを得ること、及び
ｂ）その６８Ｇａをキレート剤と反応させることにより６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法である。
【００１８】
本発明の方法において使用するための好ましいキレート剤は、生理的に許容できる形で６８Ｇａを与えるものである。さらに好ましいキレート剤は、放射標識錯体を用いる診断調査のために必要な時間安定である６８Ｇａとの錯体を形成するものである。
【００１９】
適切なキレート剤は、例えば、ＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＯＡ３、ＤＯＴＡ、ＨＰ−ＤＯＡ３、ＴＭＴ又はＤＰＤＰのようなポリアミノポリ酸キレート剤である。これらのキレート剤は、放射線医薬品及び放射線診断薬ではよく知られている。それらの使用と合成は、例えば、米国特許第４６４７４４７号、同５３６２４７５号、同５５３４２４１号、同５３５８７０４号、同５１９８２０８号、同４９６３３４４号、欧州特許出願公開第２３０８９３号、同第１３０９３４号、同第６０６６８３号、同第４３８２０６号、同第４３４３４５号、国際公開第９７／０００８７号、同第９６／４０２７４号、同第９６／３０３７７号、同第９６／２８４２０号、同第９６／１６６７８号、同第９６／１１０２３号、同第９５／３２７４１号、同第９５／２７７０５号、同第９５／２６７５４号、同第９５／２８９６７号、同第９５／２８３９２号、同第９５／２４２２５号、同第９５／１７９２０号、同第９５／１５３１９号、同第９５／０９８４８号、同第９４／２７６４４号、同第９４／２２３６８号、同第９４／０８６２４号、同第９３／１６３７５号、同第９３／０６８６８号、同第９２／１１２３２号、同第９２／０９８８４号、同第９２／０８７０７号、同第９１／１５４６７号、同第９１／１０６６９号、同第９１／１０６４５号、同第９１／０７１９１号、同第９１／０５７６２号、同第９０／１２０５０号、同第９０／０３８０４号、同第８９／０００５２号、同第８９／００５５７号、同第８８／０１１７８号、同第８６／０２８４１号及び同第８６／０２００５号に記載されている。
【００２０】
適切なキレート剤には、大環状キレート剤、例えば、ポルフィリン様分子、及び、Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．３７（５），１９９８，９５６−９６３に記載されるペンタアザマクロ環状化合物、フタロシアニン、クラウンエーテル、例えば、セプルクレート（ｓｅｐｕｌｃｈｒａｔｅ）、クリプテートなどのような窒素クラウンエーテル、ヘミン（プロトポルフィリンＩＸ塩化物）、ヘム、並びに、平面正方対称をもつキレート剤が含まれる。
【００２１】
本発明の方法においては、好ましくは、大環状キレート剤が用いられる。好ましい実施形態において、これらの大環状キレート剤は、ポリアザ及びポリオキソ大環状化合物におけるように、酸素及び／又は窒素のような少なくとも１個の硬い（ｈａｒｄ）ドナー原子を含んでいる。好ましいポリアザ大環状キレート剤の例には、ＤＯＴＡ、ＴＲＩＴＡ、ＴＥＴＡ及びＨＥＴＡが含まれ、ＤＯＴＡが特に好ましい。
【００２２】
特に好ましい大環状キレート剤は、Ｇａ３＋への配位には必要不可欠ではないので、他の分子、例えばターゲティングベクターをそのキレート剤に結合するのに用い得る、カルボキシル基又はアミン基のような官能基を備えている。官能基を含むこのような大環状キレート剤の例は、ＤＯＴＡ、ＴＲＩＴＡ又はＨＥＴＡである。
【００２３】
さらに好ましい実施形態において、本発明による方法においては、二官能性キレート剤が用いられる。本発明における「二官能性キレート剤」は、ターゲティングベクターに結合しているキレート剤である。本発明による方法において有用な二官能性キレート剤に適するターゲティングベクターは、前記ターゲティングベクターを備える６８Ｇａ放射標識錯体が患者の体に投与された時に、その患者の体の目標部位に結合する化学的又は生物学的部分である。本発明による方法において有用な二官能性キレート剤に適するターゲティングベクターは、タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、抗体又は抗体断片のようなポリペプチド、糖ポリペプチド、リポポリペプチド、ＲＤＧ結合ペプチドのようなペプチド、糖ペプチド、リポペプチド、炭水化物、核酸、例えばＤＮＡ、ＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチドのようなオリゴヌクレオチド、或いは、前記の化合物の一部、断片、誘導体又は複合体、或いは、比較的小さな有機分子、特に２０００Ｄａ未満の小さな有機分子のような関心を引く他の化合物である。
【００２４】
特に好ましい実施形態において、本発明による方法においては、大環状二官能性キレート剤が用いられる。好ましい大環状二官能性キレート剤には、ターゲティングベクターに、好ましくは、タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、ポリペプチド、糖ポリペプチド、リポポリペプチド、ペプチド、糖ペプチド、リポペプチド、炭水化物、核酸、オリゴヌクレオチド、或いは、前記の化合物の一部、断片、誘導体又は複合体、並びに、小さな有機分子からなる群から選択されるターゲティングベクターに、特に好ましくは、ペプチド及びオリゴヌクレオチドからなる群から選択されるターゲティングベクターに結合したＤＯＴＡ、ＴＲＩＴＡ又はＨＥＴＡが含まれる。
【００２５】
ターゲティングベクターをキレート剤に、リンカー基又はスペーサー分子を介して結合させることができる。リンカー基の例は、ジスルフィド、エステル又はアミドであり、スペーサー分子の例は、鎖状分子、例えば、リシン又はヘキシルアミン或いは短いペプチド系スペーサーである。好ましい実施形態において、放射標識ガリウム錯体のターゲティングベクターとキレート剤部分の間の結合は、ターゲティングベクターが体の中のその目標と、放射標識ガリウム錯体の存在により遮断されたり阻害されたりすることなく、相互作用し得るようなものである。
【００２６】
本発明の好ましい態様は、
ｃ）６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、前記陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得ること、及び
ｄ）反応を、マイクロ波活性化を使用して行い、その６８Ｇａをキレート剤と反応させることにより、６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法である。
【００２７】
マイクロ波活性化の使用は、６８Ｇａキレート剤の錯体形成の効率及び再現性を大幅に改善することが見出された。マイクロ波活性化によって、化学反応時間を大幅に短縮することができた。すなわち、反応は２分以内に完了する。１０分の反応時間の短縮は６８Ｇａ放射能の約１０％を節約するのでこれは明らかな改善である。その上、マイクロ波活性化は、また、より少ない副反応及び増大した選択性による放射化学的収率の増加も引き起こす。
【００２８】
マイクロ波活性化を行うには、マイクロ波オーブン、好ましくは単一モードマイクロ波オーブンを使用するのが適切である。適切には、マイクロ波による活性化は、８０〜１２０Ｗ、好ましくは、９０〜１１０Ｗ、特に好ましくは１００Ｗで実施される。適切なマイクロ波による活性化時間は、２０秒〜２分、好ましくは、３０秒〜９０秒、特に好ましくは、４５秒〜６０秒の範囲である。
【００２９】
反応の温度制御は、例えば、ペプチド又はタンパク質をターゲティングベクターとして含む二官能性キレート剤のような高温に弱いキレート剤が本発明による方法において用いられる場合に、望ましい。マイクロ波による活性化の継続時間は、反応混合物の温度のために、キレート剤及び／又はターゲティングベクターが分解することのないように、調節するべきである。本発明による方法において使用されるキレート剤が、ペプチド又はタンパク質を含んでいる場合、短時間、高温にする方が、より長時間、より低温にするより、一般に好ましい。
【００３０】
反応が進行する間、マイクロ波による活性化を、連続的に、或いは、マイクロ波による活性化を何回か、実施してもよい。
【００３１】
本発明のもう１つの態様は、６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから６８Ｇａを得るためのキットであって、それは、ジェネレーターカラム及び対イオンとしてＨＣＯ３−を含んだ陰イオン交換体を含む第２のカラムを含む。
【００３２】
好ましい実施形態において、そのキットは、カラムを連結する手段をさらに含み、且つ／又はジェネレーターカラムから６８Ｇａを溶出するためのＨＣｌ水溶液及び／又は陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出するための水を含む。ＨＣｌ及び水は無菌気密容器中にある。
【００３３】
もう１つの好ましい実施形態において、本発明によるそのキットは、キレート剤、好ましくは二官能性キレート剤、すなわちターゲティングベクターと結合したキレート剤をさらに含む。
【実施例】
【００３４】
実施例１
二酸化チタンカラムによる６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから、０．１ＭのＨＣｌ（５〜６ｍＬ）を使用して６８Ｇａを溶出した。その溶出液を、ＨＣｌによって酸性化し、対イオンとしてのＨＣＯ３−及び第四級アミン官能基を含むポリスチレン−ジビニルベンゼン系強塩基性の陰イオン交換樹脂（ＳＰＥカートリッジＣｈｒｏｍａｆｉｘ ３０−ＰＳ−ＨＣＯ３、Ｍａｃｈａｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ、ドイツ）を含有するカートリッジにかけた。９９％を超える６８Ｇａ放射能がその樹脂に保持され、次いで２００μｌのＨ２Ｏで溶出した。
【００３５】
比較例１ａ
実施例１で得た溶出液を、対イオンとしてのＣｌ−及び第四級アミン官能基を含む強塩基性の陰イオン交換樹脂（ＳＡＸ ＳＰＥＣ、５０ｍｇ、１ｍＬ、Ｉｓｏｌｕｔｅ、英国、及びＳＡＸ ＳＰＥＣ、１５ｍｇ、３ｍＬ、ＮＴＫ ｋｅｍｉ、米国）を含有するカートリッジにかけた。両方のイオン交換体とも、６８Ｇａ放射能の保持をなんら示さなかった。
【００３６】
比較例１ｂ
比較例１ａにおいて使用したカートリッジのＣｌ−対イオンをＯＨ−対イオンと交換して、例１ａの記載と同様にこの比較例を行った。６８Ｇａ放射能の保持は、１０〜２０％であった。
【００３７】
実施例２
ＤＯＴＡ−Ｄ−Ｐｈｅ１−Ｔｙｒ３−オクトレオチド（ＤＯＴＡ−ＴＯＣ）の６８Ｇａ放射標識の比較研究
本発明の方法により得た６８Ｇａ及びさらなる陰イオン交換処理をしないで６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターから得た６８Ｇａを、ＤＯＴＡ−Ｄ−Ｐｈｅ１−Ｔｙｒ３−オクトレオチド（ＤＯＴＡ−ＴＯＣ）の６８Ｇａ放射標識に使用した。
【００３８】
２ａ）ＤＯＴＡ−ＴＯＣの６８Ｇａ放射標識
酢酸ナトリウムを６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液に（３６ｍｇを１ｍＬに）加え、約５．５のｐＨに調整し、その混合物をよくかき混ぜた。ＤＯＴＡ−ＴＯＣ（２０ｎｍｏｌ）を加え、その混合物を９６℃で２５分間加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、Ｃ−１８ ＳＰＥカラム（ＨｙｐｅｒＳＥＰ Ｓ Ｃ１８）にかけ、それを次に２ｍＬの水で洗浄し、生成物をエタノール：水＝５０：５０（１ｍＬ）により溶出した。
【００３９】
反応混合物及び生成物は、Ｖｙｄａｃ ＲＰカラム及びＦａｓｔ Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ（高速脱塩）ＨＲ １０／１０ ＦＰＬＣゲルろ過カラムを使用するＨＰＬＣによって分析した。比放射能（ペプチドの単位質量当たりの放射能の量）は、１．５ＭＢｑ／ｎｍｏｌであった。ポジティブモードのスキャニングを使用して［Ｍ＋２Ｈ］２＋を検出するＦｉｓｏｎｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ、マンチェスター、英国）により、エレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７１１．２６で検出され、真正Ｇａ−ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７４６．０で検出された（計算値ｍ／ｚ＝７４６．５）。
【００４０】
２ｂ）実施例１で得た６８Ｇａを使用するＤＯＴＡ−ＴＯＣの６８Ｇａ放射標識
実施例で得た２００μｌの６８Ｇａに酢酸ナトリウムを加えて約５．５のｐＨに調整した。錯体形成反応を、１０ｎｍｏｌのＤＯＴＡＴＯＣを使用して実施例２ａ）に記載したようにして行った。
【００４１】
反応混合物及び生成物は、Ｖｙｄａｃ ＲＰカラム及びＦａｓｔ Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ（高速脱塩）ＨＲ １０／１０ ＦＰＬＣゲルろ過カラムを使用するＨＰＬＣによって分析した。比放射能は、５ＭＢｑ／ｎｍｏｌであった。ポジティブモードのスキャニングを使用して［Ｍ＋２Ｈ］２＋を検出するＦｉｓｏｎｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ、マンチェスター、英国）により、エレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７１１．２６で検出され、真正Ｇａ−ＤＯＴＡＴＯＣは、ｍ／ｚ＝７４６．０で検出された（計算値ｍ／ｚ＝７４６．５）。
【００４２】
２ｃ）結果
本発明の方法で得た６８Ｇａを使用すると、放射標識錯体の合成に必要なＤＯＴＡＴＯＣの量が減し、従って、３倍を超える比放射能を増加させることが可能であった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得る方法。
【請求項２】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターが二酸化チタンを含んでなるカラムを備える、請求項１記載の方法。
【請求項３】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの溶出に０．０５〜５ＭのＨＣｌを使用する、請求項１記載の方法。
【請求項４】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの溶出に０．０５〜０．１ＭのＨＣｌを使用する、請求項２記載の方法。
【請求項５】
前記陰イオン交換体から６８Ｇａの溶出に水を使用する、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
前記陰イオン交換体が第四級アミン官能基を含む強陰イオン交換体である、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
前記陰イオン交換体がポリスチレン−ジビニルベンゼン系強陰イオン交換樹脂である、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法で得た６８Ｇａをキレート剤と反応させることによって６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法。
【請求項９】
前記キレート剤が大環状キレート剤である、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記キレート剤が硬いドナー原子、好ましくはＯ及びＮを含む、請求項８又は請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記キレート剤が二官能性キレート剤である、請求項８乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記キレート剤が、タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、ポリペプチド、糖ポリペプチド、リポポリペプチド、ペプチド、糖ペプチド、リポペプチド、炭水化物、核酸、オリゴヌクレオチド又はこれらの化合物の一部、断片、誘導体若しくは複合体、及び小さな有機分子からなる群から選択されるターゲティングベクターを含む二官能性キレート剤である、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
前記反応をマイクロ波活性化を用いて実施する、請求項８乃至請求項１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーを製造するための、請求項８乃至請求項１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの調製用キットであって、ジェネレーターカラムと、対イオンとしてＨＣＯ３−を含んでなる陰イオン交換体を含む第２のカラムとを備えるキット。
【請求項１６】
前記カラム同士を直列に連結する手段をさらに備える、請求項１５記載のキット。
【請求項１７】
ジェネレーターカラムから６８Ｇａを溶出するためのＨＣｌ水溶液及び／又は陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出するための水をさらに備えており、好ましくはＨＣｌ及び水が無菌気密容器中にある、請求項１５又は請求項１６記載のキット。
【請求項１８】
キレート剤、好ましくは二官能性キレート剤をさらに備える、請求項１５乃至請求項１７のいずれか１項記載のキット。
【請求項１９】
６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーを製造するための請求項１８記載のキットの使用。
【請求項１】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの溶出液を、対イオンとしてＨＣＯ３−を含む陰イオン交換体と接触させ、陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出することによって６８Ｇａを得る方法。
【請求項２】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターが二酸化チタンを含んでなるカラムを備える、請求項１記載の方法。
【請求項３】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの溶出に０．０５〜５ＭのＨＣｌを使用する、請求項１記載の方法。
【請求項４】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの溶出に０．０５〜０．１ＭのＨＣｌを使用する、請求項２記載の方法。
【請求項５】
前記陰イオン交換体から６８Ｇａの溶出に水を使用する、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
前記陰イオン交換体が第四級アミン官能基を含む強陰イオン交換体である、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
前記陰イオン交換体がポリスチレン−ジビニルベンゼン系強陰イオン交換樹脂である、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法で得た６８Ｇａをキレート剤と反応させることによって６８Ｇａ放射標識錯体を製造する方法。
【請求項９】
前記キレート剤が大環状キレート剤である、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記キレート剤が硬いドナー原子、好ましくはＯ及びＮを含む、請求項８又は請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記キレート剤が二官能性キレート剤である、請求項８乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記キレート剤が、タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、ポリペプチド、糖ポリペプチド、リポポリペプチド、ペプチド、糖ペプチド、リポペプチド、炭水化物、核酸、オリゴヌクレオチド又はこれらの化合物の一部、断片、誘導体若しくは複合体、及び小さな有機分子からなる群から選択されるターゲティングベクターを含む二官能性キレート剤である、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
前記反応をマイクロ波活性化を用いて実施する、請求項８乃至請求項１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーを製造するための、請求項８乃至請求項１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターからの６８Ｇａの調製用キットであって、ジェネレーターカラムと、対イオンとしてＨＣＯ３−を含んでなる陰イオン交換体を含む第２のカラムとを備えるキット。
【請求項１６】
前記カラム同士を直列に連結する手段をさらに備える、請求項１５記載のキット。
【請求項１７】
ジェネレーターカラムから６８Ｇａを溶出するためのＨＣｌ水溶液及び／又は陰イオン交換体から６８Ｇａを溶出するための水をさらに備えており、好ましくはＨＣｌ及び水が無菌気密容器中にある、請求項１５又は請求項１６記載のキット。
【請求項１８】
キレート剤、好ましくは二官能性キレート剤をさらに備える、請求項１５乃至請求項１７のいずれか１項記載のキット。
【請求項１９】
６８Ｇａ放射標識ＰＥＴトレーサーを製造するための請求項１８記載のキットの使用。
【公表番号】特表２００６−５２６７６４（Ｐ２００６−５２６７６４Ａ）
【公表日】平成１８年１１月２４日（２００６．１１．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０６１０５（Ｐ２００６−５０６１０５）
【出願日】平成１６年４月８日（２００４．４．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００１５４８
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８９５１７
【国際公開日】平成１６年１０月２１日（２００４．１０．２１）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年１１月２４日（２００６．１１．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年４月８日（２００４．４．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００１５４８
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８９５１７
【国際公開日】平成１６年１０月２１日（２００４．１０．２１）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
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