ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合する抗体組成物
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合し、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する遺伝子組み換え抗体分子からなる組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖である抗体組成物、該抗体組成物を生産する形質転換体、該抗体組成物の製造方法および該抗体組成物を含有する医薬を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合し、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する遺伝子組換え抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖である抗体組成物。
【請求項２】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が、該糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合していない糖鎖である、請求項１に記載の抗体組成物。
【請求項３】
ガングリオシドＧＤ３発現細胞に特異的に結合する請求項１または２に記載の抗体組成物。
【請求項４】
ガングリオシドＧＤ３発現細胞に対し細胞傷害活性を示す請求項３のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項５】
ガングリオシドＧＤ３発現細胞に対し、非ヒト動物由来ハイブリドーマが生産するモノクローナル抗体よりも高い細胞傷害活性を示す請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項６】
細胞傷害活性が抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性である請求項４または５に記載の抗体組成物。
【請求項７】
細胞傷害活性が補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性である請求項４または５に記載の抗体組成物。
【請求項８】
それぞれ配列番号１４、１５および１６で示されるアミノ酸配列からなる抗体分子重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項９】
それぞれ配列番号１７、ｌ８および１９で示されるアミノ酸配列からなる抗体分子軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１０】
それぞれ配列番号１４、１５および１６で示されるアミノ酸配列からなる抗体分子重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３、およびそれぞれ配列番号１７、１８およびｌ９で示されるアミノ酸配列からなる抗体軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１１】
遺伝子組換え抗体がヒト型キメラ抗体またはヒト型ＣＤＲ移植抗体である請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１２】
ヒト型キメラ抗体がガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、請求項１１に記載の抗体組成物。
【請求項１３】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２０で示されるアミノ酸配列を含む請求項１２に記載の抗体組成物。
【請求項１４】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２１で示されるアミノ酸配列を含む請求項１２または１３に記載の抗体組成物。
【請求項１５】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２０で示されるアミノ酸配列を含み、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２１で示されるアミノ酸配列を含む請求項１２〜１４のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１６】
ヒト型ＣＤＲ移植抗体がガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、請求項１１に記載の抗体組成物。
【請求項１７】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）とヒト抗体のＨ鎖Ｖ領域およびＬ鎖Ｖ領域のフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項１６に記載の抗体組成物。
【請求項１８】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）とヒト抗体のＨ鎖Ｖ領域およびＬ鎖Ｖ領域のフレームワーク領域（ＦＲ）、ならびにヒト抗体のＨ鎖定常領域（Ｃ領域）およびＬ鎖Ｃ領域を含む、請求項１６または１７に記載の抗体組成物。
【請求項１９】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２で示されるアミノ酸配列、または配列番号２２で示されるアミノ酸配列の１０番目のＧｌｙ、１１番目のＬｅｕ、２０番目のＬｅｕ、２８番目のＴｈｒ、８４番目のＡｓｎ、９１番目のＴｈｒ、９５番目のＴｙｒ、９７番目のＡｌａおよび１１５番目のＶａｌから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２０】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２３で示されるアミノ酸配列、または配列番号２３で示されるアミノ酸配列の４９番目のＴｙｒ、６５番目のＳｅｒおよび７１番目のＰｈｅから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２１】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２４で示されるアミノ酸配列、または配列番号２４で示されるアミノ酸配列の７番目のＳｅｒ、８番目のＰｒｏ、１２番目のＳｅｒ、４１番目のＧｌｙ、４４番目のＰｒｏ、７２番目のＴｈｒ、７７番目のＳｅｒ、８３番目のＰｈｅおよび８７番目のＴｙｒから選ばれる少なくとも１つ以上のアミノ酸残基が置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２２】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２で示されるアミノ酸配列、または配列番号２２で示されるアミノ酸配列の１０番目のＧｌｙ、１１番目のＬｅｕ、２０番目のＬｅｕ、２８番目のＴｈｒ、８４番目のＡｓｎ、９１番目のＴｈｒ、９５番目のＴｙｒ、９７番目のＡｌａおよび１１５番目のＶａｌから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２３で示されるアミノ酸配列、または配列番号２３で示されるアミノ酸配列の４９番目のＴｙｒ、６５番目のＳｅｒおよび７１番目のＰｈｅから選ばれる少なくとも１つ以上のアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜２０のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２３】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２で示されるアミノ酸配列、または配列番号２２で示されるアミノ酸配列の１０番目のＧｌｙ、１１番目のＬｅｕ、２０番目のＬｅｕ、２８番目のＴｈｒ、８４番目のＡｓｎ、９１番目のＴｈｒ、９５番目のＴｙｒ、９７番目のＡｌａおよび１１５番目のＶａｌから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２４で示されるアミノ酸配列、または配列番号２４で示されるアミノ酸配列の７番目のＳｅｒ、８番目のＰｒｏ、１２番目のＳｅｒ、４１番目のＧｌｙ、４４番目のＰｒｏ、７２番目のＴｈｒ、７７番目のＳｅｒ、８３番目のＰｈｅおよび８７番目のＴｙｒから選ばれる少なくとも１つ以上のアミノ酸残基が置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１９または２１のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２４】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２または２５で示されるアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１９、２２または２３のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２５】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２３、２４、２６または２７で示されるアミノ酸配列を含む請求項１６〜１８、２０〜２３のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２６】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２または２５で示されるアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２３、２４、２６または２７で示されるアミノ酸配列を含む請求項１６〜２５のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２７】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が配列番号２４、２６または２７で示されるアミノ酸配列を含む請求項１６〜１８のいずれかｌ項に記載の抗体組成物。
【請求項２８】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合する抗体分子をコードするＤＮＡを宿主細胞に導入して得られる、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の抗体組成物を生産する形質転換体。
【請求項２９】
宿主細胞が、細胞内糖ヌクレオチドＧＤＰ−フコースの合成に関与する酵素、またはＮ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素を欠活するようにゲノムが改変された細胞である、請求項２８に記載の形質転換体。
【請求項３０】
宿主細胞が、細胞内糖ヌクレオチドＧＤＰ−フコースの合成に関与する酵素、またはＮ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素のゲノム上の対立遺伝子のすべてがノックアウトされた細胞である、請求項２８に記載の形質転換体。
【請求項３１】
細胞内糖ヌクレオチドＧＤＰ−フコースの合成に関与する酵素が、ＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ（ＧＭＤ）またはＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ（Ｆｘ）がら選ばれる酵素である、請求項２９または３０に記載の形質転換体。
【請求項３２】
ＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼが、以下の（ａ）および（ｂ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項３３】
ＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼが、以下の（ａ）〜（ｃ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号２で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号２で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ活性を有する蛋白質；
（ｃ）配列番号２で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ活性を有する蛋白質。
【請求項３４】
ＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼが、以下の（ａ）および（ｂ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項３５】
ＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼが、以下の（ａ）〜（ｃ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号４で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号４で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｃ）配列番号４で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ活性を有する蛋白質。
【請求項３６】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素がα１，６−フコシルトランスフェラーゼである請求項２９または３０に記載の形質転換体。
【請求項３７】
α１，６−フコシルトランスフェラーゼが、以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求項３６に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号５で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号６で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｃ）配列番号５で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｄ）配列番号６で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項３８】
α１，６−フコシルトランスフェラーゼが、以下の（ａ）〜（ｆ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求項３６に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号７で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｃ）配列番号７で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｄ）配列番号８で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｅ）配列番号７で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｆ）配列番号８で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質。
【請求項３９】
形質転換体がＦＥＲＭ ＢＰ−８４７１である請求項３８に記載の形質転換体。
【請求項４０】
宿主細胞が、下記の（ａ）〜（ｉ）からなる群から選ばれる細胞である請求項２８〜３９のいずれか１項に記載の形質転換体。
（ａ）チャイニーズハムスター卵巣組織由来ＣＨＯ細胞；
（ｂ）ラットミエローマ細胞株ＹＢ２／３ＨＬ．Ｐ２．Ｇ１１．１６Ａｇ．２０細胞；
（ｃ）マウスミエローマ細胞株ＮＳＯ細胞；
（ｄ）マウスミエローマ細胞株ＳＰ２／０−Ａｇｌ４細胞；
（ｅ）シリアンハムスター腎臓組織由来ＢＨＫ細胞；
（ｆ）抗体を産生するハイブリドーマ細胞；
（ｇ）ヒト白血病細胞株ナマルバ細胞；
（ｈ）胚性幹細胞；
（ｉ）受精卵細胞。
【請求項４１】
請求項２８〜４０のいずれか１項に記載の形質転換体を培地に培養し、培養物中に抗体組成物を生成蓄積させ、該抗体組成物を採取し、精製する、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の抗体組成物の製造方法。
【請求項４２】
請求項４１に記載の製造方法により得られる、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項４３】
請求項１〜２７および４２いずれか１項に記載の抗体組成物を有効成分として含有する医薬。
【請求項４４】
請求項１〜２７および４２のいずれか１項に記載の抗体組成物を有効成分として含有するガングリオシドＧＤ３関連疾患の治療薬。
【請求項４５】
ガングリオシドＧＤ３関連疾患が、癌疾患である請求項４４に記載の治療薬。
【請求項４６】
請求項１〜２７および４２のいずれか１項に記載の抗体組成物を患者に投与することを特徴とするガングリオシドＧＤ３関連疾患の治療方法。
【請求項４７】
ガングリオシドＧＤ３関連疾患の治療薬の製造のための、請求項１〜２７および４２のいずれか１項に記載の抗体組成物の使用。
【請求項１】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合し、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖をＦｃ領域に有する遺伝子組換え抗体分子からなる抗体組成物であって、Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が該糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンにフコースが結合していない糖鎖である抗体組成物。
【請求項２】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖が、該糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合していない糖鎖である、請求項１に記載の抗体組成物。
【請求項３】
ガングリオシドＧＤ３発現細胞に特異的に結合する請求項１または２に記載の抗体組成物。
【請求項４】
ガングリオシドＧＤ３発現細胞に対し細胞傷害活性を示す請求項３のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項５】
ガングリオシドＧＤ３発現細胞に対し、非ヒト動物由来ハイブリドーマが生産するモノクローナル抗体よりも高い細胞傷害活性を示す請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項６】
細胞傷害活性が抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性である請求項４または５に記載の抗体組成物。
【請求項７】
細胞傷害活性が補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性である請求項４または５に記載の抗体組成物。
【請求項８】
それぞれ配列番号１４、１５および１６で示されるアミノ酸配列からなる抗体分子重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項９】
それぞれ配列番号１７、ｌ８および１９で示されるアミノ酸配列からなる抗体分子軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１０】
それぞれ配列番号１４、１５および１６で示されるアミノ酸配列からなる抗体分子重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３、およびそれぞれ配列番号１７、１８およびｌ９で示されるアミノ酸配列からなる抗体軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１１】
遺伝子組換え抗体がヒト型キメラ抗体またはヒト型ＣＤＲ移植抗体である請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１２】
ヒト型キメラ抗体がガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、請求項１１に記載の抗体組成物。
【請求項１３】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２０で示されるアミノ酸配列を含む請求項１２に記載の抗体組成物。
【請求項１４】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２１で示されるアミノ酸配列を含む請求項１２または１３に記載の抗体組成物。
【請求項１５】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２０で示されるアミノ酸配列を含み、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２１で示されるアミノ酸配列を含む請求項１２〜１４のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項１６】
ヒト型ＣＤＲ移植抗体がガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、請求項１１に記載の抗体組成物。
【請求項１７】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）とヒト抗体のＨ鎖Ｖ領域およびＬ鎖Ｖ領域のフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、請求項１６に記載の抗体組成物。
【請求項１８】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合するモノクローナル抗体の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）および軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）とヒト抗体のＨ鎖Ｖ領域およびＬ鎖Ｖ領域のフレームワーク領域（ＦＲ）、ならびにヒト抗体のＨ鎖定常領域（Ｃ領域）およびＬ鎖Ｃ領域を含む、請求項１６または１７に記載の抗体組成物。
【請求項１９】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２で示されるアミノ酸配列、または配列番号２２で示されるアミノ酸配列の１０番目のＧｌｙ、１１番目のＬｅｕ、２０番目のＬｅｕ、２８番目のＴｈｒ、８４番目のＡｓｎ、９１番目のＴｈｒ、９５番目のＴｙｒ、９７番目のＡｌａおよび１１５番目のＶａｌから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２０】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２３で示されるアミノ酸配列、または配列番号２３で示されるアミノ酸配列の４９番目のＴｙｒ、６５番目のＳｅｒおよび７１番目のＰｈｅから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２１】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２４で示されるアミノ酸配列、または配列番号２４で示されるアミノ酸配列の７番目のＳｅｒ、８番目のＰｒｏ、１２番目のＳｅｒ、４１番目のＧｌｙ、４４番目のＰｒｏ、７２番目のＴｈｒ、７７番目のＳｅｒ、８３番目のＰｈｅおよび８７番目のＴｙｒから選ばれる少なくとも１つ以上のアミノ酸残基が置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２２】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２で示されるアミノ酸配列、または配列番号２２で示されるアミノ酸配列の１０番目のＧｌｙ、１１番目のＬｅｕ、２０番目のＬｅｕ、２８番目のＴｈｒ、８４番目のＡｓｎ、９１番目のＴｈｒ、９５番目のＴｙｒ、９７番目のＡｌａおよび１１５番目のＶａｌから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２３で示されるアミノ酸配列、または配列番号２３で示されるアミノ酸配列の４９番目のＴｙｒ、６５番目のＳｅｒおよび７１番目のＰｈｅから選ばれる少なくとも１つ以上のアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜２０のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２３】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２で示されるアミノ酸配列、または配列番号２２で示されるアミノ酸配列の１０番目のＧｌｙ、１１番目のＬｅｕ、２０番目のＬｅｕ、２８番目のＴｈｒ、８４番目のＡｓｎ、９１番目のＴｈｒ、９５番目のＴｙｒ、９７番目のＡｌａおよび１１５番目のＶａｌから選ばれる少なくとも１つのアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２４で示されるアミノ酸配列、または配列番号２４で示されるアミノ酸配列の７番目のＳｅｒ、８番目のＰｒｏ、１２番目のＳｅｒ、４１番目のＧｌｙ、４４番目のＰｒｏ、７２番目のＴｈｒ、７７番目のＳｅｒ、８３番目のＰｈｅおよび８７番目のＴｙｒから選ばれる少なくとも１つ以上のアミノ酸残基が置換されたアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１９または２１のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２４】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２または２５で示されるアミノ酸配列を含む、請求項１６〜１９、２２または２３のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２５】
抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２３、２４、２６または２７で示されるアミノ酸配列を含む請求項１６〜１８、２０〜２３のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２６】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２２または２５で示されるアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が、配列番号２３、２４、２６または２７で示されるアミノ酸配列を含む請求項１６〜２５のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項２７】
抗体分子の重鎖（Ｈ鎖）可変領域（Ｖ領域）が、配列番号２５で示されるアミノ酸配列を含み、かつ、抗体分子の軽鎖（Ｌ鎖）Ｖ領域が配列番号２４、２６または２７で示されるアミノ酸配列を含む請求項１６〜１８のいずれかｌ項に記載の抗体組成物。
【請求項２８】
ガングリオシドＧＤ３に特異的に結合する抗体分子をコードするＤＮＡを宿主細胞に導入して得られる、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の抗体組成物を生産する形質転換体。
【請求項２９】
宿主細胞が、細胞内糖ヌクレオチドＧＤＰ−フコースの合成に関与する酵素、またはＮ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素を欠活するようにゲノムが改変された細胞である、請求項２８に記載の形質転換体。
【請求項３０】
宿主細胞が、細胞内糖ヌクレオチドＧＤＰ−フコースの合成に関与する酵素、またはＮ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素のゲノム上の対立遺伝子のすべてがノックアウトされた細胞である、請求項２８に記載の形質転換体。
【請求項３１】
細胞内糖ヌクレオチドＧＤＰ−フコースの合成に関与する酵素が、ＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ（ＧＭＤ）またはＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ（Ｆｘ）がら選ばれる酵素である、請求項２９または３０に記載の形質転換体。
【請求項３２】
ＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼが、以下の（ａ）および（ｂ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号１で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項３３】
ＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼが、以下の（ａ）〜（ｃ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号２で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号２で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ活性を有する蛋白質；
（ｃ）配列番号２で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−マンノース４，６−デヒドラターゼ活性を有する蛋白質。
【請求項３４】
ＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼが、以下の（ａ）および（ｂ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号３で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項３５】
ＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼが、以下の（ａ）〜（ｃ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求項３１に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号４で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号４で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｃ）配列番号４で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつＧＤＰ−４−ケト−６−デオキシ−Ｄ−マンノース−３，５−エピメラーゼ活性を有する蛋白質。
【請求項３６】
Ｎ−グリコシド結合複合型糖鎖還元末端のＮ−アセチルグルコサミンの６位にフコースの１位がα結合する糖鎖修飾に関与する酵素がα１，６−フコシルトランスフェラーゼである請求項２９または３０に記載の形質転換体。
【請求項３７】
α１，６−フコシルトランスフェラーゼが、以下の（ａ）〜（ｄ）からなる群から選ばれるＤＮＡがコードする蛋白質である、請求項３６に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号５で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｂ）配列番号６で表される塩基配列からなるＤＮＡ；
（ｃ）配列番号５で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ；
（ｄ）配列番号６で表される塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質をコードするＤＮＡ。
【請求項３８】
α１，６−フコシルトランスフェラーゼが、以下の（ａ）〜（ｆ）からなる群から選ばれる蛋白質である、請求項３６に記載の形質転換体。
（ａ）配列番号７で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｂ）配列番号８で表されるアミノ酸配列からなる蛋白質；
（ｃ）配列番号７で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｄ）配列番号８で表されるアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が欠失、置換、挿入および／または付加されたアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｅ）配列番号７で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質；
（ｆ）配列番号８で表されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつα１，６−フコシルトランスフェラーゼ活性を有する蛋白質。
【請求項３９】
形質転換体がＦＥＲＭ ＢＰ−８４７１である請求項３８に記載の形質転換体。
【請求項４０】
宿主細胞が、下記の（ａ）〜（ｉ）からなる群から選ばれる細胞である請求項２８〜３９のいずれか１項に記載の形質転換体。
（ａ）チャイニーズハムスター卵巣組織由来ＣＨＯ細胞；
（ｂ）ラットミエローマ細胞株ＹＢ２／３ＨＬ．Ｐ２．Ｇ１１．１６Ａｇ．２０細胞；
（ｃ）マウスミエローマ細胞株ＮＳＯ細胞；
（ｄ）マウスミエローマ細胞株ＳＰ２／０−Ａｇｌ４細胞；
（ｅ）シリアンハムスター腎臓組織由来ＢＨＫ細胞；
（ｆ）抗体を産生するハイブリドーマ細胞；
（ｇ）ヒト白血病細胞株ナマルバ細胞；
（ｈ）胚性幹細胞；
（ｉ）受精卵細胞。
【請求項４１】
請求項２８〜４０のいずれか１項に記載の形質転換体を培地に培養し、培養物中に抗体組成物を生成蓄積させ、該抗体組成物を採取し、精製する、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の抗体組成物の製造方法。
【請求項４２】
請求項４１に記載の製造方法により得られる、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の抗体組成物。
【請求項４３】
請求項１〜２７および４２いずれか１項に記載の抗体組成物を有効成分として含有する医薬。
【請求項４４】
請求項１〜２７および４２のいずれか１項に記載の抗体組成物を有効成分として含有するガングリオシドＧＤ３関連疾患の治療薬。
【請求項４５】
ガングリオシドＧＤ３関連疾患が、癌疾患である請求項４４に記載の治療薬。
【請求項４６】
請求項１〜２７および４２のいずれか１項に記載の抗体組成物を患者に投与することを特徴とするガングリオシドＧＤ３関連疾患の治療方法。
【請求項４７】
ガングリオシドＧＤ３関連疾患の治療薬の製造のための、請求項１〜２７および４２のいずれか１項に記載の抗体組成物の使用。
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３５５７７
【国際公開日】平成１７年４月２１日（２００５．４．２１）
【発行日】平成１９年１１月２２日（２００７．１１．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５１４６６６（Ｐ２００５−５１４６６６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１５３１４
【国際出願日】平成１６年１０月８日（２００４．１０．８）
【出願人】（０００００１０２９）協和醗酵工業株式会社 (276)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１７年４月２１日（２００５．４．２１）
【発行日】平成１９年１１月２２日（２００７．１１．２２）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１５３１４
【国際出願日】平成１６年１０月８日（２００４．１０．８）
【出願人】（０００００１０２９）協和醗酵工業株式会社 (276)
【Ｆターム（参考）】
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