本発明は、キメラＲＳＶ−Ｆポリペプチド、およびレンチウイルスＧａｇまたはアルファレトロウイルスＧａｇに基づく、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に関する。本発明はまた、このようなキメラＶＬＰを作製し、用いる方法も包含する。ある実施形態では、キメラＶＬＰのＧＡＧポリペプチドが、ＨＩＶ ＧＡＧポリペプチドまたはＡＬＶ ＧＡＧポリペプチドを含む。好ましい実施形態では、キメラＶＬＰが、レンチウイルスＧａｇポリペプチドまたはアルファレトロウイルスＧａｇポリペプチド、および呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドを含む。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
レンチウイルスＧａｇポリペプチドまたはアルファレトロウイルスＧａｇポリペプチドと、呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドとを含む、キメラウイルス様粒子。
【請求項２】
前記Ｇａｇポリペプチドが、サル免疫不全ウイルスまたはヒト免疫不全ウイルスに由来する、請求項１に記載のウイルス様粒子。
【請求項３】
前記Ｇａｇポリペプチドが、トリ白血病ウイルスまたはラウス肉腫ウイルスに由来する、請求項１に記載のウイルス様粒子。
【請求項４】
哺乳動物型グリコシル化をさらに含む、請求項１から３のいずれか一項に記載のウイルス様粒子。
【請求項５】
前記ウイルス様粒子と混合されたアジュバントをさらに含む、請求項１から４のいずれか一項に記載のウイルス様粒子。
【請求項６】
前記ウイルス様粒子の外部に前記アジュバントが配置される、請求項５に記載のウイルス様粒子。
【請求項７】
前記ウイルス様粒子の内部に前記アジュバントが配置される、請求項５に記載のウイルス様粒子。
【請求項８】
前記アジュバントが、前記呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドに共有結合して、共有結合を形成する、請求項５から７のいずれか一項に記載のウイルス様粒子。
【請求項９】
抗ＲＳＶ−Ｆ中和抗体が、前記呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドに結合する、請求項１から８のいずれか一項に記載のウイルス様粒子。
【請求項１０】
前記抗ＲＳＶ−Ｆ中和抗体が、パリビズマブである、請求項９に記載のウイルス様粒子。
【請求項１１】
さらなるＶＬＰ会合抗原をさらに含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載のウイルス様粒子。
【請求項１２】
第２の抗原に連結された、さらなるＶＬＰ会合ポリペプチドをさらに含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載のウイルス様粒子。
【請求項１３】
キメラウイルス様粒子を生成させる方法であって、
（ａ）レンチウイルスＧａｇポリペプチドまたはアルファレトロウイルスＧａｇポリペプチド、および呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドを発現する、１または複数の発現ベクターを併せて用意するステップと、
（ｂ）前記１または複数の発現ベクターを、培地中の真核細胞内に導入するステップと、
（ｃ）前記Ｇａｇポリペプチドおよび前記呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドを発現させて、前記キメラウイルス様粒子を生成させるステップと
を含む方法。
【請求項１４】
前記真核細胞が、酵母細胞、哺乳動物細胞、または昆虫細胞である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記真核細胞が、哺乳動物細胞である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記Ｇａｇポリペプチドが、サル免疫不全ウイルスまたはヒト免疫不全ウイルスに由来する、請求項１３から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記Ｇａｇポリペプチドが、トリ白血病ウイルスまたはラウス肉腫ウイルスに由来する、請求項１３から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記真核細胞が培養されている前記培地から、前記ウイルス様粒子を回収するステップをさらに含む、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記発現ベクターが、ウイルスベクターである、請求項１３から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ウイルスベクターが、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、およびレトロウイルスからなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ウイルスベクターがヘルパー細胞内で増殖される場合、前記呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドの発現を下方制御するか、または前記真核細胞内で前記呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドの発現を上方制御する、転写制御因子を、前記ウイルスベクターがさらに包含する、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記転写制御因子が、ｔｅｔレプレッサーまたはメタロチオネイン誘導性エンハンサーである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記真核細胞が、ＢＨＫ細胞、ＶＥＲＯ細胞、ＨＴ１０８０細胞、ＭＲＣ−５細胞、ＷＩ ３８細胞、ＭＤＣＫ細胞、ＭＤＢＫ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、２９３Ｔ細胞、ＲＤ細胞、ＣＯＳ−７細胞、ＣＨＯ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（ＴＭ）細胞、ジャーカット細胞、ＨＵＴ細胞、ＳＵＰＴ細胞、Ｃ８１６６細胞、ＭＯＬＴ４／クローン８細胞、ＭＴ−２細胞、ＭＴ−４細胞、Ｈ９細胞、ＰＭ１細胞、ＣＥＭ細胞、骨髄腫細胞、ＳＢ２０細胞、ＬｔＫ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＷＩ−３８細胞、Ｌ２細胞、ＣＭＴ−９３細胞、およびＣＥＭＸ１７４細胞からなる群から選択される、請求項１３から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
さらなるＶＬＰ会合抗原をさらに含む、請求項１３から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
第２の抗原に連結された、さらなるＶＬＰ会合ポリペプチドをさらに含む、請求項１３から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
抗ＲＳＶ−Ｆ中和抗体が、発現した前記呼吸器合胞体ウイルスＦポリペプチドに結合する、請求項１３から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記抗ＲＳＶ−Ｆ中和抗体が、パリビズマブである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
呼吸器合胞体ウイルス感染を治療または予防する方法であって、対象に、免疫原性量の、請求項１から１０のいずれか一項に記載のウイルス様粒子、または請求項１３から２７のいずれか一項に記載の方法により生成させたウイルス様粒子を投与するステップを含む方法。
【請求項２９】
前記投与するステップが、前記対象において防御的免疫反応を誘導する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記投与するステップが、皮下送達（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、経皮送達、皮内送達、皮下送達（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、筋肉内送達、経口（ｐｅｒｏｒａｌ）送達、経口（ｏｒａｌ）送達、鼻腔内送達、頬送達、舌下送達、腹腔内送達、膣内送達、肛門送達、および頭蓋内送達からなる群から選択される、請求項２８から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
免疫原性量の、請求項１から１１のいずれか一項に記載のウイルス様粒子、または請求項１３から２７のいずれか一項に記載の方法により生成させたウイルス様粒子を含む医薬組成物。
【請求項３２】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
呼吸器合胞体ウイルス感染に対する防御を提供する方法であって、対象に、免疫原性量の、請求項１から１１のいずれか一項に記載のウイルス様粒子、または請求項１３から２７のいずれか一項に記載の方法により生成させたウイルス様粒子を投与するステップを含む方法。
【請求項３４】
前記投与するステップが、皮下送達（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、経皮送達、皮内送達、皮下送達（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、筋肉内送達、経口（ｐｅｒｏｒａｌ）送達、経口（ｏｒａｌ）送達、鼻腔内送達、頬送達、舌下送達、腹腔内送達、膣内送達、肛門送達、および頭蓋内送達からなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８ａ】

【図３８ｂ】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【公表番号】特表２０１３−５１００９１（Ｐ２０１３−５１００９１Ａ）
【公表日】平成２５年３月２１日（２０１３．３．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５３７２１８（Ｐ２０１２−５３７２１８）
【出願日】平成２２年１１月３日（２０１０．１１．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５５３３４
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０５６８９９
【国際公開日】平成２３年５月１２日（２０１１．５．１２）
【出願人】（５０９０２４１９０）リゴサイト　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド (6)
【氏名又は名称原語表記】ＬＩＧＯＣＹＴＥ　ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ，ＩＮＣ．
【住所又は居所原語表記】２１５５　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｄｒｉｖｅ，Ｂｏｚｅｍａｎ，ＭＴ　５９７１８−６８３１，Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ
【Ｆターム（参考）】