本発明は、薬物動態特性の向上された薬理活性を有する修飾クプレドキシン由来ペプチド及びこの薬理活性に関連する種々の症状に罹患している哺乳動物を処置するためのその使用方法を提供する。クプレドキシン由来ペプチドの修飾体には、ペプチドの血漿半減期を延長し、薬理活性の比活性を増大させ、免疫原性を低下させ、ペプチドの生体内変換を低減させる、アミノ酸配列バリアント及び構造誘導体が含まれる。修飾クプレドキシン由来ペプチドは、癌、不適切な血管形成に関連する症状、ウイルス感染及び細菌感染、特にＨＩＶ及びマラリア、エフリンシグナル伝達に関連する症状について哺乳動物を処置する方法及び診断化合物等のカーゴ化合物を癌細胞に送達する方法に使用することができる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
修飾残基を有するクプレドキシン又はクプレドキシンの切断型を含む単離されたペプチドであって、野生型クプレドキシンの少なくとも１つの薬理活性を有する、単離されたペプチド。
【請求項２】
前記野生型クプレドキシンの薬理活性が、（１）哺乳動物の癌細胞に移入すること、（２）哺乳動物の非癌細胞に移入しないこと、（３）哺乳動物の前悪性細胞に移入すること、（４）哺乳動物の癌細胞を死滅させること、（５）哺乳動物の前悪性細胞を死滅させること、（６）哺乳動物の癌細胞の成長を抑制すること、（７）ＨＩＶ−１感染を抑制すること、（８）マラリア感染赤血球の寄生虫血症を抑制すること、（９）エフリンシグナル伝達系に干渉すること、及び（１０）血管形成を阻害することからなる群の１又は複数から選択される、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３】
野生型クプレドキシンと比較して少なくとも１つの向上された薬物動態特性を有する、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４】
前記修飾残基が、環化された２個以上の残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項５】
前記残基が酵素的環化によって環化されている、請求項４に記載の単離されたペプチド。
【請求項６】
前記環化残基がチオエーテルを含む、請求項４に記載の単離されたペプチド。
【請求項７】
前記環化残基がラクタムブリッジを含む、請求項４に記載の単離されたペプチド。
【請求項８】
前記チオエーテルが、デヒドロアラニン残基及びデヒドロブチリン残基へのシステイン残基の付加によって形成される、請求項６に記載の単離されたペプチド。
【請求項９】
前記デヒドロアラニン残基及びデヒドロブチリン残基が、それぞれセリン及びスレオニンの脱水に由来する、請求項８に記載の単離されたペプチド。
【請求項１０】
前記少なくとも１つの向上された薬物動態特性が、（１）患者の体内で生体内変換を受けにくいこと、（２）患者の体からよりゆっくりと排泄されること、（３）三次構造の安定性向上、及び（４）より長い血漿半減期からなる群の１又は複数から選択される、請求項３に記載の単離されたペプチド。
【請求項１１】
前記クプレドキシンが、緑膿菌、フォルミジウム・ラミノスム、ウルバ・ペルツシス、鉄酸化細菌、アクロモバクター・サイクロクラステス、シュードモナス・シリンゲ、髄膜炎菌、腸炎ビブリオ、気管支敗血症菌、百日咳菌、クロロフレクサス・アウランティアカス、及び淋菌からなる群から選択される生物に由来する、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項１２】
前記クプレドキシンが、アズリン、プラストシアニン、ラスチシアニン、シュードアズリン、オーラシアニン、ステラシアニン、キュウリ塩基性タンパク質、及びアズリン様タンパク質からなる群から選択される、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項１３】
前記クプレドキシンが配列番号１〜１２からなる群から選択される、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項１４】
配列番号１３〜４７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項１５】
配列番号１〜１２からなる群から選択される配列に対して少なくとも９０％の同一性を有する、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項１６】
より加水分解されにくい、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項１７】
前記修飾残基が、アスパラギン又はセリン以外のアミノ酸残基で置換されたクプレドキシン中の１又は複数のアスパラギン残基又はセリン残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項１８】
前記アスパラギン残基又はセリン残基がグルタミン酸残基又はスレオニン残基で置換されている、請求項１７に記載の単離されたペプチド。
【請求項１９】
より脱アミド化されにくい、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２０】
前記修飾残基が、グリシン以外のアミノ酸残基で置換されたクプレドキシン由来ペプチドの１又は複数のグリシン残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２１】
前記１又は複数のグリシン残基がスレオニン残基又はアラニン残基で置換されている、請求項２０に記載の単離されたペプチド。
【請求項２２】
緑膿菌アズリン（配列番号１）の残基５８又は６３に相当する前記クプレドキシン由来ペプチド中の１又は複数のグリシン残基が置換されている、請求項２１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２３】
より酸化されにくい、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２４】
前記修飾残基が、別のアミノ酸残基で置換された前記クプレドキシン由来ペプチド中の１又は複数のメチオニン残基又はシステイン残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２５】
ジケトピペラジン及びピログルタミン酸をより形成しにくい、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２６】
前記修飾残基が、グリシン以外のアミノ酸残基で置換された前記クプレドキシンのＮ末端から１、２、又は３位のグリシン残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２７】
前記修飾残基が、プロリン以外のアミノ酸残基で置換された前記クプレドキシンのＮ末端から３位以内のプロリン残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２８】
前記修飾残基が、アスパラギン以外のアミノ酸残基で置換された前記クプレドキシンのＮ末端のアスパラギン残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項２９】
よりラセミ化されにくい、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３０】
前記修飾残基が、アミノ酸残基のＤ−異性体で置換された前記クプレドキシンの１又は複数のアミノ酸残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３１】
前記クプレドキシンの前記アミノ酸残基のそれぞれが、前記アミノ酸残基のＤ−異性体で置換されている、請求項３０に記載の単離されたペプチド。
【請求項３２】
前記クプレドキシンが配列番号４５を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３３】
より分解されにくい、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３４】
前記修飾残基が前記クプレドキシンのＮ末端のアセチル化を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３５】
前記修飾残基が前記クプレドキシンのＣ末端のアミド化を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３６】
前記修飾残基が三次構造の安定性を向上させる、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項３７】
前記修飾残基が少なくとも１つのα−ヘリックスの安定性を向上させる、請求項３６に記載の単離されたペプチド。
【請求項３８】
前記修飾残基がラクタムブリッジを含む、請求項３６に記載の単離されたペプチド。
【請求項３９】
前記修飾残基が非天然アミノ酸を含む、請求項３６に記載の単離されたペプチド。
【請求項４０】
前記修飾残基がα−アミノ−イソ酪酸を含む、請求項３６に記載の単離されたペプチド。
【請求項４１】
グリシン、プロリン、セリン、アスパラギン酸、アラニン、スレオニン、バリン、グルタミン、アスパラギン、システイン、ヒスチジン、リジン、及びアルギニンからなる群から選択される前記クプレドキシン由来ペプチドの少なくとも１つのアミノ酸残基が、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、グルタミン酸、チロシン、トリプトファン、メチオニン、及びα−アミノ−イソ酪酸からなる群から選択されるアミノ酸残基で置換されている、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４２】
配列番号３４〜４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４３】
前記クプレドキシンの２つ以上のリジン残基が、ｉ（ｉ＋４）のスペーシングでε−（３，５−ジニトロベンゾイル）−リジン残基で置換されている、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４４】
前記クプレドキシンが、配列番号１を含み、前記修飾残基が、配列番号１の残基５３〜５６、５８〜６４、及び６８〜７０からなる群から選択される１又は複数におけるものである、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４５】
前記修飾残基が、天然アミノ酸に対応するオレフィン含有テザーを有するα，α−二置換非天然アミノ酸で置換された前記クプレドキシン中の１又は複数対の天然アミノ酸残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４６】
前記クプレドキシンが、配列番号１を含み、前記修飾残基が、配列番号１の残基５３〜５６、５８〜６４、及び６８〜７０からなる群から選択される１又は複数におけるものである、請求項４５に記載の単離されたペプチド。
【請求項４７】
前記修飾残基が、カテプシンＢにより切断可能な結合によりＰｅｐ４２（配列番号３５０５）に融合した残基を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４８】
前記修飾残基が光学活性アミノ酸を含む、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項４９】
請求項１に記載の単離されたペプチド及び薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物。
【請求項５０】
治療有効量の請求項１に記載の単離されたペプチドを哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項５１】
前記哺乳動物がヒトである、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
クプレドキシンの１又は複数のアミノ酸残基の修飾であって、野生型クプレドキシンの少なくとも１つの薬理活性を保持する修飾
を含む、クプレドキシンの薬物動態特性を向上させる方法。
【請求項５３】
前記修飾が、１又は複数の残基の環化を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記修飾が、前記クプレドキシン中の天然アミノ酸の非天然アミノ酸による置換を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５５】
前記修飾が、前記クプレドキシンのαヘリックス含量を増加させることを含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５６】
前記修飾が、前記クプレドキシンにラクタムブリッジを付加することを含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５７】
前記修飾が、酵素による翻訳系を用いた非天然アミノ酸の付加を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５８】
前記クプレドキシンが、配列番号１３又は配列番号１３の切断型を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５９】
前記クプレドキシンが、配列番号１又は配列番号１の切断型からなる、請求項５２に記載の方法。
【請求項６０】
ナノ粒子にコンジュゲートしている、請求項１に記載の単離されたペプチド。
【請求項６１】
前記ナノ粒子が貴金属である、請求項６０に記載の単離されたペプチド。
【請求項６２】
前記貴金属が金である、請求項６１に記載の単離されたペプチド。
【請求項６３】
電子移動経路を介してナノ粒子にコンジュゲートしている、請求項６０に記載の単離されたペプチド。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１０Ｃ】

【図１０Ｄ】

【図１１】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１２Ｄ】

【図１２Ｅ】

【図１２Ｆ】

【図１２Ｇ】

【図１２Ｈ】

【図１３】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１４Ｃ】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１６】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１Ａ】

【図３１Ｂ】

【図３２】

【図３３Ａ】

【図３３Ｂ】

【図３４Ａ】

【図３４Ｂ】

【図３５】

【図３６Ａ】

【図３６Ｂ】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１Ａ】

【図４１Ｂ】

【図４１Ｃ】

【図４１Ｄ】

【図４２】

【図４３Ａ】

【図４３Ｂ】

【図４３Ｃ】

【図４４Ａ】

【図４４Ｂ】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８】

【図４９】

【公表番号】特表２０１２−５１８６４７（Ｐ２０１２−５１８６４７Ａ）
【公表日】平成２４年８月１６日（２０１２．８．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５５１２５５（Ｐ２０１１−５５１２５５）
【出願日】平成２２年２月１９日（２０１０．２．１９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２４７７８
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０９６６８１
【国際公開日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．フロッピー
【出願人】（５１１１４８７５４）シーディージー　セラピューティクス，インコーポレイテッド (5)
【Ｆターム（参考）】