グリシン捕捉性アンタゴニストを用いる拒絶性および認知性精神分裂病症候群の処置
【課題】精神病と精神分裂病の症候群の処置のための方法の提供。
【解決手段】ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストをヒトに投与することを含む、ヒトにおけるＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達促進法。
【解決手段】ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストをヒトに投与することを含む、ヒトにおけるＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達促進法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は１９９５年１２月７日に出願された仮出願６０／００８,３６１号の利益を権利請求する。
本発明は、グリシン捕捉性アンタゴニストを用いる拒絶性および認知性精神分裂病症候群の処置に関する。
【背景技術】
【０００２】
過去３０年間にわたり、ドーパミン仮説は精神分裂病の主要な神経化学モデルとなっている。ドーパミン仮説は、アンフェタミン様のドーパミン放出薬が精神分裂病に非常に類似した精神異常状態を誘発するという知見およびドーパミンレセプターのブロック剤（例えば、クロルプロマジン、ハロペリドール等）が精神分裂病の臨床的処置において有用であるという知見に基づくものである。ドーパミン仮説は、精神分裂病症候群が脳のドーパミン作用性症候群の機能高進を主として脳の中間縁と中間皮質領域において伝達するということを仮定する。しかしながら、この仮説は発見的な価値はあるが、精神分裂病の臨床的処置への適用にはいくつかの制約がある。
【０００３】
第一に、アンフェタミン精神病は従命自動性精神分裂病症候群（例えば、機能高進、幻覚等）に対してのみ的確なモデルとなる。これに対して、アンフェタミンの投与によっては、精神分裂病においてみられる症状に類似する機能障害または拒絶性症候群（例えば、鈍感感情、情緒的自閉症等）は進行しない。ドーパミンのブロック剤を用いる最適な処置にもかかわらず、精神分裂病患者の２０〜５０％が顕著な拒絶性（negative）症候と思考障害を示し続けるということは、新たな処置が必要なことを示す。第二に、大部分の精神分裂病患者においては、ドーパミン作用性神経伝達の明白な障害はみられない。従って、ドーパミン作用性機能高進が存在する範囲ではこの仮説は他の神経伝達系におけるより基本的な障害に対しては二次的なものとなるかもしれない。症候を調整しながら抗ドーパミン作用性処置をおこなうことによってはその根底を成す精神病理学に対処することはできない。
【０００４】
新しい処置法を開発する潜在的な方向性は１９５０年代の末期になってフェンシクリジン（ＰＣＰ; エンジェルダスト）の開発によって与えられるようになった。ＰＣＰは最初は一般的な麻酔薬として開発されたものである。最初の臨床的試験においては、ＰＣＰと類縁薬剤（例えば、ケタミン）が精神分裂病と非常に類似した精神病性症候群を誘発することが見出された。アンフェタミン精神病とは対照的に、ＰＣＰ精神病は拒絶性および従命自動性精神分裂病症候群に包含される。さらに、ＰＣＰは精神分裂病にみられるタイプの機能障害を再度もたらすという特徴がある。ＰＣＰで誘発される精神病の根底を成すメカニズムは１９７９年に脳のＰＣＰレセプターに関する知見が最初に得られるまでほとんど未解決であった。
【０００５】
１９８０年代の初期におけるその後の研究により、ＰＣＰレセプターがＮ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）型のグルタメートレセプターに関連するイオン通路内に位置する結合部位を構成することおよびＰＣＰとその類縁薬剤がＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達をブロックすることによって精神病発現薬的効果をもたらすことが明らかにされた。これら知見に基づいて次のことが提案された（非特許文献１４および５参照）。即ち、ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達の内因性機能障害または調節障害は精神分裂病の病因に著しく寄与し、特に、抗神経弛緩薬的な拒絶性および認知性症候群の発現をもたらす。さらに、ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進する薬剤を投与することは精神分裂病の抗神経弛緩薬的な徴候と症候の処置に有効であるという可能性も提案された。
【０００６】
１９８７年にグリシン結合部位が発見される以前においては、その後で本発明者によっておこなわれた投与量と同様に多量のグリシンをげっ歯類動物に投与することによってＰＣＰにより誘発される行動様式とは反対の効果がもたらされることが判明したが（非特許文献１３参照）、このことは行動アッセイがＮＭＤＡ促進剤の抗精神病効果を敏感に反映することを示すものである。
【０００７】
ＮＭＤＡレセプターは皮質における主要な興奮神経伝達物質として作用するグルタメートによって主として活性化される。しかしながら、外因性グルタメートは次の理由から効果的に投与することができない。即ち、（１）グルタメートは血液脳関門を通過できず、また、（２）グルタメートはＮＭＤＡレセプター以外のいくつかのタイプのレセプターを活性化し、さらに（３）血液脳関門を通過するグルタメート類似体による活性化は皮質ニューロンを過度に興奮させてニューロンの変性（興奮毒性）をもたらす。ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進させる別の可能性のある試みは１９８７年にグリシンがＮＭＤＡレセプターコンプレックスにおけるアロステリックモジュレーター（allosteric modulator）として作用という知見が得られたことによってなされた（非特許文献７参照）。
【０００８】
この知見に基づいて、外因性投与グリシンがＮＭＤＡレセプター仲介増強作用を選択的に促進するので、顕著な抗神経弛緩薬症候学的病状を示す精神分裂病患者の治療に臨床的改良がもたらされた。グリシンの使用には次の制約があった。即ち、（１）外因性投与グリシンがどの程度までＣＮＳを透過するのか不明であり、また、（２）ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達のグリシンによる調節が生体内において生理学的にどの程度まで関連性があるのか不明であり、さらに（３）ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を実際にどの程度まで促進して臨床的改良をもたらすか不明であった。
【０００９】
１９８７年にグリシン結合部位が発見された後、いくつかの小規模な臨床的試みがなされて有用な臨床的効果が提案されたが、標準的な統計的試みによってその効力は証明されなかった。１９８８年にワジリは９ケ月にわたるオープン試験において１１人の精神分裂病患者にグリシンを５〜２５g／日投与した場合の結果を発表した（非特許文献１２参照）。この結果によれば１１人のうちの４人の患者においては改善が認められたが、この結果についての統計的分析または対照群のデータは得られていない。１９９０年にコスタらは５週間にわたるオープン試験において６人の患者にグリシンを１５g／日投与した結果を発表した（非特許文献２参照）。
【００１０】
この結果によれば、簡易精神医学評価基準（ＢＰＲＳ）によって評価した症候の減少が３０％以上の従命自動性（positive）応答を示したのは２人の患者であった。しかしながら、全体的な統計学的分析はおこなわれておらず、また、これらの発表されたデータに基づく分析によっても統計学的に有意な効果は得られていないことが判明している（t＝１.８９、p＝０.１２）。二重盲検法により１８人の患者にグリシンまたはプラセボを１５g／日の割合で投与するその後の研究（非特許文献１９参照）によれば、臨床グローバルインプレッション（ＣＧＩ）において有意な改善がみられたが、ＢＰＲＳまたは拒絶性症候の評価のために特別に開発された基準である拒絶性症候用スケージュール（ＳＡＮＳ）においては有意な改善効果はみられなかった。
【００１１】
これらの研究者はグリシンの効力を証明するためにはより多量のグリシンを投与することが必要であると結論づけているが、これを追跡する研究はおこなっていない。１９８９年にロッセら（非特許文献１１参照）は４日〜８週間のオープン試験において慢性の精神分裂病患者にグリシンを１０.８g／日の割合で投与したが全体的な臨床的効力はみられなかった。これらの研究者は、該治療法はグリシンのＣＮＳ透過能が低いことによって制約されると結論づけている。１９９４年までグリシンの投与量を２５g／日よりも多くする臨床的研究はおこなわれておらず、また、グリシンを高投与量で使用することの実用性については明らかにされていなかった。
【００１２】
高投与量のグリシンを用いる最初の研究は１９８９年の８月に開始され、これには本発明者による研究も含まれる。この研究においては、抗精神弛緩薬的症候を示す１４人の慢性精神分裂病患者に二重盲プラセボ制御法によってグリシンを０．４ｇ／ｋｇ／日（約３０ｇ／日）の割合で投与し、従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）によって従命自動性および拒絶性症候をモニターした。この研究により、グリシンを高投与量で投与しても十分に許容されることが明らかになった。
【００１３】
さらに、グリシンを投与した患者の場合には拒絶性症候において著しい改善がみられたが、プラセボを投与した患者の場合には類似の改善効果はみられなかったという興味のある予備的結果が得られた。しかしながら、この研究においては、グリシン投与群とプラセボ投与群の間に有意な差異がみられなかったという未解決な点が残されていた。この研究の結果はジャビットらによって１９９４年８月に発表された（非特許文献６参照）。
【００１４】
本発明者らは同時係属中の特許出願において、グリシンの過剰投与（＞３０ｇ／日）による処置がＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達の促進並びに精神病に関連する病気および薬物中毒に関連する精神病、特に精神分裂病の処置に有効であることを明らかにした。このことは最近おこなった２つの研究によって立証された。ライダーマンらによる第１の研究においては（非特許文献９参照）、ブロンクス精神病センターにおいてグリシンを前記のような過剰量（３０ｇ／日）投与した研究に関与した５人の精神分裂病患者にグリシンを６０ｇ／日の割合で投与した再挑戦処置をおこなった。グリシンの濃度は、ＳＡＮＳとＰＡＮＳＳによって評価する従命自動性および拒絶性症候と共にモニターした。グリシンを６０ｇ／日の割合で投与する処置により血清中のグリシンの濃度は６．３倍に増加した。
【００１５】
血清中のグリシン濃度のこのような増加は１９９５年にドゥソウザらによって明らかにされており（非特許文献３参照）、該増加はＣＮＳグリシン濃度の約２倍となる。従って、従来の研究において用いられた過剰投与（即ち、＞３０ｇ／日）はＣＮＳグリシン濃度に著しい影響をもたらすためには必要である。グリシンを６０ｇ／日で投与する処理中においては顕著な副作用は認められなかった。従って、この研究は高投与量グリシンによる臨床的処置の実用性に関する最初の証左である。さらに、少数の患者の場合にはＳＡＮＳ拒絶性症候に関して著しい改善効果がみられ（＜０．０５）、また、ＰＡＮＳＳに関しても著しい改善傾向がみられたことはグリシンを過剰に投与することの潜在的な効力を示すものである。
【００１６】
最近、おこなわれた第２の研究によれば、抗精神弛緩薬的な拒絶性症候の処置においてグリシンを６０ｇ／日の割合で投与することの有効性に関してより明確な証左が得られた。この研究は先のブロンクス精神病センターの精神分裂病研究員であるウリ・ヘレスコ−レビー博士と本発明者がイスラエルのサラー・ヘルツォグ病院において本発明者によって開発されたプロトコルに従って共同しておこなった。患者は二重盲クロスオーバー法によりグリシンまたはプラセボを６０ｇ／日の割合で投与することによって処置した。最初の１１人の患者から得られた結果を分析した。
【００１７】
これらの結果によれば、精神分裂病患者におけるＰＡＮＳＳ拒絶性症候に関しては、グリシン処置段階中の方がプラセボ処置段階中よりも著しい低減効果がみられることが明らかになった。従って、この研究は高投与量グリシン処置の効力に関する二重盲プラセボ制御の最初の証左を提供するものである。精神病理学と認知性機能を含む精神分裂病症候学のその他の点においても著しい改善がみられた。処置したいずれの患者にも著しい副作用はみられなかった。
【００１８】
グリシンを経口投与することによる処置が精神分裂病に関して有意な臨床的利点を有するという思想は先行文献において議論されているが、高投与量グリシンによる処置が安全で、実用的で、しかも有効であるという明確な証左は前述の最近おこなわれた２つの研究（ＢＰＣとイスラエルにおける研究）によって初めて明らかにされた。
【００１９】
精神分裂病患者の５０％までが神経弛緩薬を投与するその後の処置においても著しい拒絶性および認知性症候を示した。新しく開発された薬剤、例えば、クロザピンおよびリスペリドンは標準的な神経弛緩薬に比べてある程度改善された効力を示す。しかしながら、この種の薬剤の開発にもかかわらず、著しい数の精神分裂病患者が長期の入院生活を余儀なくさせられている。グリシンを３０ｇ／日またはそれよりも多く投与することによるこれらの患者の処置は著しい臨床的改善効果をもたらすので、利用可能なその他の薬剤投与法により現在のところ目標とされていない臨床的要請に応えることが可能である。
【００２０】
グリシンまたはグリシン前駆体として投与さたときに全ＣＮＳグリシン濃度の増加をもたらす薬剤もしくはＮＭＤＡレセプターコンプレックスのグリシン部位においてグリシンと置換する薬剤（例えば、グリシナミド、スレオニンおよびＤ−セリン）を精神病患者、例えば、精神分裂病患者に３０ｇ／日よりも高い割合で経口投与することによって、従命自動性症候もしくは興奮に影響を及ぼすことなく拒絶性症候、うつ病および認知性機能障害に著しい改善効果をもたらすことが判明した。
【００２１】
これらの研究において用いたグリシンの投与量（０．８ｇ／ｋｇ／日もしくは約６０ｇ／日）は従来のいずれの研究において用いられた投与量よりも実質的に高い量である。さらに、グリシンを０．８ｇ／ｋｇ／日の割合で投与することによってもたらされる血清中のグリシン濃度はＣＮＳグリシン濃度の著しい増加に関係していることが知られている濃度の範囲内である。同時係属している上記の特許出願においてクレームされている発明によるグリシンの投与量は０．４〜２．０ｇ／ｋｇ／日である。前駆体は脳中の細胞外のグリシン濃度の等価な増大をもたらすのに十分な量投与する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２２】
【非特許文献１】アンドリーセンＮ．、Br. J. Psychiatry、第１５５巻（増補７）、第４９頁〜第５２頁（１９８９年）：「拒絶性症候の評価基準（ＳＡＮＳ）；概念的および理論的基礎」
【非特許文献２】コスタＪ．、カレドＥ．、スラメックＪ．、バニーＷ．Jr.、ポトキンＳ．Ｇ．、J.Clin．Psychopharmacol．、第１０巻、第７１頁〜第７２頁（１９９０年）: 「長患いの難治精神分裂病における神経弛緩薬の補助薬としてのグリシンのオープン試験」
【非特許文献３】ドゥソウザＤ．Ｃ．、モリセイＫ．、アビ−サープＤ．、ダモンＤ．、ギルＲ．、ベンネットＡ．、クライスタルＪ．Ｈ．、Schiz．Res.、第１５巻、第１４７頁（１９９５年）：「健康なヒトにおけるＣＳＦアミノ酸、血漿ホルモンおよび行動に対する静脈投与グリシンと経口投与Ｄ−シクロセリンの効果：精神分裂病のためのインプリケーション」
【非特許文献４】ハリハランＭ．、ナガＳ．、バンノールトＴ．、Ｊ．Chromatogr.、第６２１巻、第１５頁〜第２２頁（１９９３年）：「フェニルイソチオシアネートを用いるプレカラム誘導体化を伴う紫外吸収検出を含む高性能液体クロマトグラフィーによる血漿アミノ酸分析の開発に関する系統的アプローチ」
【非特許文献５】ジャビットＤ．Ｃ．、ズキンＳ．Ｒ．、Am．Ｊ．Psychiatry、第１４８巻、第１３０１頁〜第１３０８頁（１９９１年）：「精神分裂病のフェンシクリジンモデルにおける最近の進歩」
【非特許文献６】ジャビットＤ．Ｃ．、ジルベルマンＩ．、ズキンＳ．Ｒ．、ヘレスコ−レビーＵ．、リンデンマイヤーＪ．Ｐ．、Am. J. Psychiatry、第１５１巻、第１２３４頁〜第１２３６頁（１９９４年）：「精神分裂病の拒絶性症候のグリシンによる改善」
【非特許文献７】ジョンソンＪ．Ｗ．、アッシャーＰ．、Nature、第３２５巻、第５２９頁〜第５３１頁（１９８７年）：「グリシンはマウスの培養脳ニューロンにおけるＮＭＤＡ応答を促進する」
【非特許文献８】ケイＳ．Ｒ．、フィズバインＡ．、オプラーＬ．Ａ．、Schiz. Bull.、第１３巻、第２６１頁〜第２７６頁（１９８７年）: 「精神分裂病に関する従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）」
【非特許文献９】ライダーマンＥ．、ジルベルマンＩ．、ズキンＳ．Ｒ．、クーパーＴ．Ｂ．、ジャビットＤ．Ｃ．、Biol. Psychiatry、第３９巻、第２１３頁〜第２１５頁（１９９６年） ：「精神分裂病における拒絶性症候と血漿濃度に対する経口高投与量グリシンについての予備的研究」
【非特許文献１０】ポトキンＳ．Ｇ．、コスタＪ．、ロイＳ．、スラメクＪ．、ジンＹ．、グラセカラムＢ．、「精神分裂病の処置におけるグリシン: 新規な抗精神病薬に関する理論と予備的結果」、メルツァーＨ．Ｙ．編（ニューヨーク、ラベンプレス発行、１９９２年）、第１７９頁〜第１８８頁
【非特許文献１１】ロッセＲ．Ｂ．、テウトＳ．Ｋ．、バネー−シュバルツＭ．、ライフトンＭ．、スカルセラＥ．、コーヘンＣ．Ｇ．、ドイチュＳ．Ｉ．、Clin. Neuropharmacol.、第１２巻、第４１６頁〜第４２４頁（１９８９年）: 「精神分裂病における常套の神経弛緩薬処置に対するグリシン補助治療; オープンラベル予備研究」
【非特許文献１２】バジリＲ．、Biol. Psychiatry、第２３巻、第２１０頁〜第２１１頁（レター）（１９８８年）: 「精神分裂病のグリシン治療」
【非特許文献１３】トスＥ．、ヴァイスＢ．、バネーシュバルツＭ．、ラジャＡ．、「マウスにおける３−メルカプトプロピオン酸もしくはフェンシクリジンによって誘発される行動変化に対するグリシン誘導体の効果」第１１巻、第１頁〜第８頁（１９８６年）
【非特許文献１４】ジャビットＤ．Ｃ．、Hillside Jounal of Clinical Psychiatry、第９巻、第１２頁〜第３５頁（１９８７年）: 「拒絶性精神分裂病症候学と精神分裂病のＰＣＰモデル」
【非特許文献１５】グアステラＪ．、ブレカＮ．、ヴァイグマンＣ．、レスターＨ．Ａ．、ディビッドソンＮ．、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、第８９巻、第７１８９頁〜第７１９３頁（１９９２年）: 「ラットの脳の高親和性グリシン輸送体のクローニング、発現および局在」
【非特許文献１６】ジャッソンＤ．Ｍ．、ジョハンソンＣ．、リンドグレンＬ．Ｍ．、ベングツソンＡ．、Pharmacol. Biochem. Behav.、第４８巻、第４６５頁〜第４７１頁（１９９４年）: 「ドーパミンレセプターアンタゴニストはラットにおけるアンフェタミン誘発およびフェンシクリジン誘発運動刺激を阻害する」
【非特許文献１７】リウＱ．Ｒ．、ロペソ−コルクエラＢ．、マンジヤンＳ．、ネルソンＨ．、ネルソンＮ．、J. Biol. Chem.、第２６８巻、第２２８０２頁〜第２２８０８頁（１９９３年）: 「新規な構造的特徴を有する骨髄と脳に特異的なグリシン輸送体のクローニングと発現」
【非特許文献１８】スミスＫ．Ｅ．、ボーデンＬ．Ａ．、ハルチグＰ．Ｒ．、ブランケクＴ．、ヴァイスハンクＲ．Ｌ．、Neuron、第８巻、第９２７頁〜第９３５頁（１９９２年）: 「グリシン輸送体のクローニングと発現はＮＭＤＡレセプターとの共局在化をもたらす」
【非特許文献１９】タニイＹ．、ニシカワＴ．、ハシモトＡ．、タカハシＫ．、J. Pharmacol. Exp. Ther.、第２６９巻、第１０４０頁〜第１０４８頁（１９９４年）:「アラニンとセリンの鏡像体によるフェンシクリジン誘発機能高進の立体選択的拮抗作用」
【非特許文献２０】トスＥ．、ラジャＡ．、Neurochem.Res.、第１１巻、第３９３頁〜第４００頁（１９８６年）: 「マウスにおけるフェンシクリジン誘発機能高進のグリシンによる拮抗作用」
【非特許文献２１】ザフラＦ．、アラゴンＣ．、オリヴァレスＬ．、ダンボルトＮ．Ｃ．、ギメネツＣ．、ストルム−マチセンＪ．、J.Neurosci.、第１５巻、第３９５２頁〜第３９６９頁（１９９５年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
グリシンおよび／または前駆体の使用における制約は次の通りである。即ち、（１）これらは多量に投与しなければならず、また、（２）外因的に投与されるグリシンが脳内の臨界部位におけるグリシン濃度を増加させる限度を制限できるシステムが脳内に存在する。
本発明が解決しようとする課題は、新規なＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進させる方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
この出願においては、グリシン捕捉（uptake）アンタゴニスト（グリシン再捕捉アンタゴニストおよび／またはグリシン輸送インヒビターとしても知られている）を用いてＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進させる方法が開示される。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】図１は、従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）［ケイらによる文献８（１９８７年）参照］によって測定した血清グリシン濃度（スキャッタープロット）および拒絶性症候（バープロット）に対するグリシンの経口投与（０８ｇ／ｋｇ／日）の効果を示す。この測定法は鈍感な情動、感情もしくは虚脱およびスタディー＃１からの抽象的思考障害のような測定項目が含まれる。全ての統計量は対両側t−検定（paired two tailed t-test）を用いて処理した[＊p＜０.１対ベースライン（０週）、＊＊p＜０.０５対ベースライン、＊＊＊p＜０.０１対ベースライン]。
【図２】図２Ａ〜図２Ｄは、グリシンとプラセボを用いる二重盲補助処置中のスタディー＃２からの３−ファクターおよび全ＰＡＮＳＳ変化評点を示す（＊p＜０.０５、＊＊p＜０.０１、＊＊＊p＜０.００１）。
【図３】図３Ａ〜図３Ｄは、第１処置腕中にグリシンを投与された７人の患者についてのグリシンを用いる二重盲補助処置中およびその後のプラセボ期間中における３−ファクターおよび全ＰＡＮＳＳ評点を示す。
【図４】図４Ａ〜図４Ｅは、グリシンとプラセボを用いる二重盲補助処置中のスタディー＃２からの５−ファクターＰＡＮＳＳ変化評点を示す（＊p＜０.０５、＊＊p＜０.０１、＊＊＊＜p＜０.００１）。
【図５】図５は、ＰＣＰで誘発される機能高進に対するグリシンの効果を示す。雄のＢＡＬＢ／ｃマウスを３０分の時点でグリシン（０．８ｇ／ｋｇ）またはプラセボを用いて前処理した（第１矢印）。ＰＣＰ（５ｍｇ／ｋｇ sc.）を５０分の時点で投与し（第２矢印）、次いでげっ歯動物用自動化活動チャンバーを用いて歩行数をモニターした。グリシンを用いて前処理したマウスの場合にはＰＣＰ誘発機能高進が約２５％低減した。
【図６】図６は、ＰＣＰ誘発機能高進に対するグリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）の効果を示す。雄のＢＡＬＢ／ｃマウスをＧＤＡ（０．１ｇ／ｋｇ）またはプラセボを用いて３０分の時点で処理した（第１矢印）。ＰＣＰ（５ｍｇ／ｋｇ i.p.）を５０分の時点で投与し（第２矢印）、次いでげっ歯動物用自動化活動チャンバーを用いて歩行数をモニターした。ＧＤＡの投与による前処理によってＰＣＰ誘発機能高進は約５０％低減した（グリシンの場合にみられた効果と同じパターンである）。
【図７】図７は、図示した数の実験におけるＰＣＰ誘発機能高進に対するグリシンとＧＤＡの効果を示す。ＧＤＡの投与（０．０５ｇ／ｋｇ）によって、グリシンを０．８ｇ／ｋｇ投与した場合と同じ程度の活動抑制度がみられた。ＧＤＡの投与（０．１ｇ／ｋｇ）は約２倍有効であった。＊p＜０.０５対ＰＣＰのみ（ＣＴＬ）。＊＊＊p＜０.００１対ＣＴＬ。
【図８】図８は、ＰＣＰ誘発機能高進に対する数種のＧＤＡ類似化合物の効果を示す。これらの化合物の効能の順位はグリシルトリスカデシルアミド（ＧＴＡ）＞グリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）＞グリシルウンデシルアミド（ＧＵＡ）であった。
【図９】図９は、げっ歯動物におけるＰＣＰ誘発機能高進に対する抑制効能と脳ホモジェネート中における［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制効能の関係を示す。ＰＣＰ誘発機能高進の抑制効能（ＰＣＰのみの場合の％）の順位は［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制効能の順位と同様であった。
【図１０】図１０は、Ｐ2シナプトソームへの［3Ｈ］グリシン捕捉およびＧＤＡと既知のグリシン捕捉アンタゴニストであるサルコシンによる抑制の経時変化を示す。図示する点は各々について３回おこなった３つの別々の実験の平均値±s.e.m.を示す。
【図１１】図１１は、図示するグリシン誘導体による［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制を示す。図示する点は各々について３回おこなった３つの別々の実験の平均値±s.e.m.を示す。
【図１２】図１２は、グリシルヘキシルアミド（ＧＨＡ）またはＧＤＡによる［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制を示す。１５０ｍｇ／ｋｇまでの投与量ではＰＣＰで誘発される機能高進の拮抗においては効果のないことが知られているＧＨＡは［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制に関して非常に低い効能を示した。
【図１３】図１３は、ＰＣＰもしくはアンフェタミンで誘発される機能高進に対するＧＤＡ（０．０５ｇ／ｋｇ）による相対抑制を示す。ＧＤＡはＰＣＰで誘発される機能高進に対して著しい拮抗作用を示すが（＊＊＊ｐ＝０．００１）、アンフェタミンで誘発される機能高進に対して著しい影響をもたらさなかった。ＰＣＰとアンフェタミンの不存在下では全活性は＜５００カウントであった。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
脳内のグリシン濃度はＮＭＤＡレセプターの近傍におけるグリシンを低濃度に維持するグリシン輸送体（ＡＫＡ捕捉もしくは再捕捉ポンプ）の作用によって調節される（非特許文献１５よび１８参照）。従って、グリシン捕捉の妨害は、必然的にその全脳もしくは正味の細胞外濃度を増加させることなくＮＭＤＡレセプターの近傍におけるグリシン濃度を増加させる。出願人によって脳のホモジュネート中のグリシン捕捉の有効なアンタゴニストであることが最近明らかにされた化合物であるグリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）を用いた研究が最近おこなわれた｛ジャビットおよびフルシアンテによる研究報文（印刷中）｝。
【００２７】
これらの研究においては、げっ歯動物におけるＰＣＰ誘発による機能高進に対するＧＤＡの効果、グリシンの効果を受けやすいことが明らかにされたアッセイ系（文献２０参照）およびＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するその他の薬剤（非特許文献１９参照）について検討されている。グリシン（図５）およびＧＤＡ（図６）は類似の活性挙動を示し、基本活性に影響を及ぼすことなくＰＣＰ誘発による機能高進を抑制する。しかしながら、ＧＤＡはグリシンよりも著しく高い活性を示す。即ち、ＧＤＡは０．０５ｇ／ｋｇの投与量でＰＣＰ誘発による機能高進を、グリシンを０．８ｇ／ｋｇ、投与した場合と同じ程度まで抑制する（グリシンの投与量は臨床的試験において用いられている投与量である）。その他のＧＤＡに類似する薬剤もＰＣＰ誘発による機能高進を抑制し（図８）、その抑制能はグリシン捕捉の阻害能に比例する（図９）。
【００２８】
これらの知見はグリシン捕捉アンタゴニストが精神分裂病のＰＣＰ精神病様症候（例えば、拒絶性および認知性症候）の処置においてグリシンよりも同等もしくはそれ以上の効果をもたらすということを示す。本発明のこの態様においては、生体外でのグリシン捕捉阻害およびげっ歯動物におけるＰＣＰ誘発による機能高進抑制に有効な投与量でグリシン捕捉アンタゴニストを投与してヒトの患者を処置する。脳内には２種のグリシン捕捉系が存在する。即ち、脊髄、脳幹、間脳および網膜において高濃度で発現すると共に嗅球および脳半球に低濃度で発現するＧＬＹＴ１輸送体並びに脊髄、脳幹および小脳に制限されるＧＬＹＴ２輸送体である（非特許文献２１参照）。さらに、ＧＬＹＴ１輸送体は部分的にはディファレンシャル・スプライシング（differential splicing）によって生ずる多重イソホルム（multiple isoform）中にも存在する（非特許文献１７参照）。本発明のこの態様には、ＧＬＹＴ１もしくはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉のインヒビター（該輸送体のいずれかのイソホルムのインヒビターを含む）が包含される。
【００２９】
本発明のその他の態様においては、次に例示するような他の精神医学的症状と関連する精神病が処置される: 薬物（例えば、フェンサイクリジン、ケタミンおよびその他の解離性麻酔薬、アンフェタミンおよびその他の精神興奮剤並びにコカイン）によって誘発される精神病、情動障害と関係する精神病、一時的な精神的ストレスによる精神病、情動分裂性精神病、精神病ＮＯＳ、「精神分裂病スペクトル」障害、例えば分裂質もしくは分裂型性格障害、または精神病と関連する病気（例えば、重度のうつ病、躁うつ病的障害、アルツハイマー病および外傷後ストレス症）。
【００３０】
本発明のさらに別の態様においては、グリシン捕捉アンタゴニストが非経口投与される。
【００３１】
本発明のその他の目的は以下の発明の詳細な説明によって当業者には明らかとなる。
【００３２】
投与は液体状もしくは固体状配合物または注射液（例えば、静脈内注射液）としておこなってもよい（この場合、常套の製剤用キャリヤーを用いてもよい）。適当な製剤には錠剤、カプセル、経口液および非経口注射液が含まれる。錠剤とカプセルの調製には常套の希釈剤および賦形剤等、例えば、常套のカプセルや錠剤の調製に利用されているラクトース等を用いてもよい。経口液として投与する場合には、風味のよい希釈剤を用いて飲みやすい配合物を調製してもよい。
【００３３】
本発明に係る化合物は全体的もしくは部分的にグリシン捕捉を阻害するのに十分な量で投与される。グリシンは０.４g／kg／日以上、例えば、０.５g／kg／日もしくはそれ以上の割合で１回〜数回、好ましくは精神分裂病患者の処置において０.８g／kg／日の割合で３回にわけて投与する。グリシン捕捉のアンタゴニストの投与量はグリシンに匹敵するＰＣＰ誘発機能高進に対する抑制活性によっておおまかに決定することができる。ＮＭＤＡレセプター仲介伝達の促進を評価するための簡便なアッセイは以下に説明するスタディー＃３で用いたげっ歯動物アッセイである。
【００３４】
現在のところＧＤＡは約０．０２５ｇ／ｋｇ／日〜０．５０ｇ／ｋｇ／日の割合で投与すればよいと考えられており、その他の化合物の投与量はＧＤＡに関連して決定される。グリシン捕捉アンタゴニストは精神病関連疾患の唯一の処置剤として投与するか、あるいは、次のような抗精神病薬の効能を補助するために使用する: 常套の抗精神病薬、例えば、ハロペリドール[ハルドール（商標）]、フルフェナジン[プロリキシン（商標）]、クロルプロマジン[ソラジン（商標）]およびチオリダジン[メラリル（商標）]、異型性抗精神病薬、例えばクロザピン[クロザリル（商標）]およびリスペリドン[リスペリダール（商標）]、抗精神病薬投与による副作用調整用薬剤並びに精神分裂病のような病気や疾患における症状を調整するために一般的に使用されているその他の薬剤。
【００３５】
本明細書に記載のような投与量を採用する場合には、グリシン捕捉アンタゴニストは精神分裂病の症候、特に拒絶性症候および認知性機能障害に対して臨床的に有用な効果をもたらす。拒絶性症候に対するグリシン捕捉アンタゴニストの有用な効果は精神分裂病のいずれかのその他の側面、例えば従動自動性症候または興奮に関する悪化がないときにみられる。本発明の１つの態様においては、グリシン捕捉アンタゴニストの投与は、従来の投薬法によっては十分に応答がみられない症候を調整するために不定期間にわたって続行される。
【００３６】
本発明においては前記の障害や疾患の処置のために生物学的に許容されるグリシン捕捉アンタゴニストが用いられる。グリシン捕捉インヒビターとしてはグリシルアルキルアミド、例えばグリシルドデシルアミドが挙げられ、また、スタディー＃３で用いた他のインヒビターとしてはグリシンアルキルエステルが挙げられる。サルコシンのようなその他のグリシン捕捉アンタゴニストは既知である。本発明の技術的思想を理解する当業者は薬学的に許容されるいずれかのグリシン捕捉アンタゴニストを採用することができる。
【００３７】
以下の実施例は精神分裂病の処置におけるグリシンおよびグリシン捕捉アンタゴニストの有効性を例示的に説明するものである。
【実施例１】
【００３８】
スタディー＃１（ライダーマンらの前記文献参照）
方法：この研究はブロンクス（ニューヨーク）にあるブロンクス・精神病センターにおいておこなわれた。インフォームド・コンセントを得た後でこの研究に参加してあらかじめ二重盲検法においてグリシンを０．４ｇ／ｋｇ／日の割合で投与された５人の精神分裂病患者（ＤＳＭ−ＩＶ）を採用した。患者の平均年令は４５．０±７．６才であり、慢性的な平均病歴は２４．２±５．９年であった。いずれの患者も重度の病状を示した（ＣＧ１＞４）。すべての患者には試験の少なくとも４週間前から抗精神病薬（クロザピン２、リペリドン２およびハロペリドール１）を投与した。
【００３９】
神経弛緩薬療法と平行してグリシンを１０ｇ／日（約０．１４ｇ／ｋｇ／日）の割合で経口投与し、３日目にはその投与量を０．２ｇ／ｋｇ／日（約１４ｇ／日）に増加させた。グリシンの投与量は２日ごとに０．２ｇ／ｋｇ／日ずつ増加させて０．８ｇ／ｋｇ／日とし、この投与量を８週間の残存期間にわたって継続した。従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）［ケイらの非特許文献８（１９８７年）参照］および拒絶性症候の評価基準（ＳＡＮＳ）［アンドレーゼンの非特許文献１（１９８９年）参照］を用いて隔週ごとの評価をおこなった。
【００４０】
錐体外路系評価基準（ＥＲＳ）および異常無意識行動基準（ＡＩＭＳ）を用いて運動性（motoric）副作用を評価した。全ての評価は、先のグリシン処置研究の結果を知らせない一人の個人によっておこなった。グリシンおよび神経弛緩薬（ハロベリドールおよびクロザピン）の血中濃度は隔週ごとに測定した。血漿グリシンは血漿アミノ酸用液体クロマトグラフィー法（内部基準としてＯ−メチルセリンを用いてグリシン測定用に調整した分析法）[ハリハンらの非特許文献４（１９９３年）]によって測定した。
【００４１】
本明細書に示す値は平均値±標準偏差である。処置の効果は両側検定対t−試験によって決定した。
結果：グリシンの経口投与による処置によってグリシンの血中濃度は著しく増加し（６.３倍）、この値は２〜６週にわたって安定に維持された（図１参照）。６〜８週にかけては統計的に意義のある程度ではないが、グリシンの血中濃度に明らかな低下がみられた。８週間の試験期間中には不都合な効果、例えば衰弱、嘔気および鎮静はみられなかった。ＳＡＮＳを用いたときには拒絶性症候において著しい改善効果がみられた（ベースライン：７５.８±７.２、試験後: ７２.２±８.６、t＝２.７９、p＝０.０４９）。一方、ＰＡＮＳＳを用いたときには拒絶性症候において改善傾向がみられた（ベースライン：３１.０±２.３、試験後: ２７.４±３.２、t＝２.２１、p＝０.０９２）。５人のうちの２人の患者においては拒絶性症候において２０％以上の低減効果がみられた。処置応答と全患者のグリシン濃度または個々の患者のグリシン濃度の経時変化との間には著しい関連性はみられなかった。
【００４２】
この研究に参加した患者のうち、最も高い処置応答を示した患者は、先の二重盲処置においてグリシンを０．４ｇ／ｋｇ／日の割合で投与したときに最も高い応答を示した患者であった［ジャビットらの前記の文献（１９９４年）参照］。即ち、この研究において測定された全ＰＡＮＳＳ評価点の変化と先の研究において測定された評価点との間には著しい関連性がみられた（r＝０.８２、p＝０.０４５）。先の研究の場合のように、この研究においてもＰＡＮＳＳ従命自動性症候（t＝１.６８、df＝４、p＝０.１７）または一般的精神病理学的評価（t＝０.７２、df＝４、p＝０.５）においては著しい変化はみられなかった。グリシン処理中の症候に関して錐体外路系においては著しい低減効果がみられたが（t＝４.８１、df＝４、p＝０.００９）、運動障害においてはこのような効果はみられなかった（t＝０.９１、df＝４、p＝０.４）。しかしながら、錐体外路系症候の改善と臨床的応答との間には関連性はみられなかった。グリシン処置によって血清中の神経弛緩薬の濃度は著しい影響を受けなかった。
【実施例２】
【００４３】
スタディー＃２（ヘレスコ−レービらの前記文献参照）
方法：被験者としてはサラー・ヘルツォグ記念病院の研究病棟（エルサレム、イスラエル）の入院患者を採用した。これらの患者はＤＳＭ−ＩＩＩ−Ｒ（米国精神医学協会、１９８７年）の精神分裂病と診断されていた。さらに、これらの患者は従来の神経弛緩薬に対する応答が弱いために抗療性があるとみなされていた。試験を開始する前に、少なくとも３カ月間にわたって常套の神経弛緩薬またはクロザピンを臨床的に最適な投与量でこれらの患者に定期的に経口投与した。付加的なＤＳＭ−ＩＩＩ−Ｒ診断を受けた精神分裂病患者の場合には付加的な向精神薬もしくは併用薬を投与するか、または神経学的症状を解消させた。１２人の患者をこの研究においては採用した。全ての患者からはこの研究に参加することについて書面によるインフォームド・コンセントを得た。また、この研究は病院の審査委員会の認可を受けた。
【００４４】
−２週から０週までの２週間にわたるベースライン評価期間の経過後、二重盲条件下において患者を無作為に指定してグリシン粉末またはプラセボ溶液を６週間（０週〜６週）にわたって投与した。薬剤の投与は二重盲条件下でおこなった。グリシン粉末は水に溶解させて投与した。プラセボ溶液としてはグルコースを用いた。次いで各々の患者には２週間の洗い出し処置に付した後、別の薬剤を６週間（８週〜１４週）投与した。グリシンの投与は４ｇ／日の投与量から開始し、４ｇ／日ずつ増加させて１日あたり投与量を０．８ｇ／ｋｇ（体重）とした。グリシンは１日ふたり３回に分けて投与した。この研究で用いた他の薬剤は、錐体外路系症候の処置の場合にはトリヘキシフェニジル（２〜５ｍｇ／日）であり、不眠症もしくは激越の処置の場合は抱水クロラール［２５０〜７５０ｍｇ／日（ＰＲＮ基準）］である。抗パーキンソン薬を必要とする患者にはトリヘキシフェニジルを定期的に投与した。
【００４５】
症候および錐体外路系の副作用は、ＰＡＮＳＳ、錐体外路系症候用シンプソン−アングス基準（ＳＡＳ）および異常無意識行動基準（ＡＩＭＳ）を用いて−２週から隔週ごとに評価した。研究過程のいずれかの時点において神経弛緩薬の投与量の増加を必要とする患者は研究からはずして適当な処置を施した。この決定は臨床的評価に基づいておこなったが、これはＰＡＮＳＳ評価点が少なくとも３０％増加することに対応した。
【００４６】
身体的な症状の訴えと状態は毎日モニターした。血液学的検査、血液化学的検査、肝臓と腎臓の機能検査および計量は隔週ごとにおこなった。血漿中のグリシン濃度を測定するための血液試料はベースラインの時点および研究の６週と１４週の終わりに採取した。採血は朝食前とその日の第１回目の投薬前におこなった。血漿中のグリシン濃度はパーキン・エルマー・ピッケリング社製のアミノ酸アナライザーを用いて測定した（リチウムｐＨ勾配およびニンヒドリンを用いるポストカラム誘導体化法を用いた）。定量はＵＶ検出器（５７０ｎｍ）を用いておこなった。計算はノルロイシン内部基準に基づいておこなった。両側検定による統計的解析はＳＰＳＳ／ＰＣコンピュータープログラムを用いておこなった。
【００４７】
結果：１２人の患者のうち１１人が最後まで研究に参加した。１人の患者はプラセボ処置の４週目で研究からはずれた。実験を完遂した患者のうちの７人に、研究の第一段階において無作為にグリシンを投与し、残りの４人の患者には無作為にプラセボを投与した。全ての患者は二重盲処置前の２週間における従命自動性および拒絶性症候に変化を示さず、安定した前処置ベースラインを示した（表１参照）。最初の二重盲処置段階でグリシンを投与した患者とプラセボを投与した患者との間には前処置ベースラインには差はみられなかった。
【００４８】
グリシンとプラセボに対する処置応答を評価するために、ｒｍＡＮＯＶＡを全患者についておこなった[種々の条件下での同一患者の従属変数ファクター：処置段階（グリシン／プラセボ）および処置週（０、２、４または６）]。経時的相互作用効果による有意な処置に反映されるように、拒絶性症候と一般的な精神病理学的症状に関しては処置法の違いによって極めて著しい相違がみられた（この場合、従命自動性症候の対応する悪化はみられなかった）（表２参照）。しかしながら、一般的な精神病理学的症状と全ＰＡＮＳＳ評価点における変化が拒絶性症候の評価点における変化に対して共変するときには、著しい処置効果もしくは経時的処置効果はみられなかったが、このことは、一般的な精神病理学的症状における変化は拒絶性症候の変化に対して二次的であることを示す。全ＰＡＮＳＳ評価点に対するグリシンの著しい効果もみられた。
【００４９】
一般的な精神病理学的効果の場合のように、全ＰＡＮＳＳ評価点の変化は拒絶性症候の変化に対しては著しい共変を示さなかった。処置の順序が全体的結果に影響を及ぼした可能性を評価するために、処置段階と処置週による拒絶性症候のｒｍＡＮＯＶＡを処置の順序に対して共変させた。経時効果による処置の有意性はＦ（３,８）＝４２.６（p＜０.０００１）であり、このことは全体的効果は処置の順序によって著しい影響を受けなかったことを示す。
【００５０】
症候変化の評価点の分析により次のことが明らかになった。拒絶性症候の著しい低減効果がグリシンの処置段階の２週にみられ、この効果は６週後のグリシン処置の終了まで漸増した（図２参照）。６週における拒絶性症候の平均低減率は３６.２±７.３％であった（プレグリシン処置のときの値: t＝０.２２、df＝１０、p＜０.０００１）。一般的な精神病理学的症状の低減効果はグリシン処置の４週後に最初にみられるようになり、この効果はその後漸増した。一般的な精神病理学的症状の平均低減率は２３.５±１０.５％であった（t＝７.４１、df＝１０、p＜０.０００１）。従命自動性症候に関してはグリシン処置群において小さな低減効果がみられた（１２.６±１８.３％）。この効果はプレグリシン処置のときの値（t＝２.２９、df＝１０、p＜０.０５）に比べると著しく大きいが、グリシン処置の６週の最後における従命自動性症候の変化はプラセボ処置の６週後の変化に比べては著しく大きくはなかった（図２参照）。
【００５１】
１１人のうちの８人の患者においては、グリシン処置中のＰＡＮＳＳ拒絶性症候の低減率は３０％もしくはそれ以上であり、また、ＰＡＮＳＳの全評価点の低減率は２５％もしくはそれ以上であった。プラセボ処置段階においてはいずれのタイプの症候に関しても低減効果はみられず、また、プラセボ処置段階の４週においては一般的な精神病理学的症状に関して小さいが有意な増加効果がみられた。
【００５２】
最初の二重盲条件下で１１人のうちの７人の患者にグリシンを投与したので、その後のプラセボ処置段階を通して症候の改善効果が維持される程度を評価することができた（図３参照）。いずれの研究段階においてもこれらの７人の患者の場合には従命自動性症候に変化はみられなかったが、拒絶性症候に関してはグリシン処置段階中に著しい改善効果がみられ[Ｆ（３,４）＝４５.７、p＝０.００１]、この効果はその後も安定に維持され、しかも、その後のプラセボ処置段階においても著しい悪化はみられなかった[Ｆ（３,４）＝１.８６、p＝０.２８]。同様に、一般的な精神病理学的症候に関してもグリシン処置段階中に著しい改善効果がみられ[Ｆ（３,４）＝１９.２、p＜０.０１]、この効果はその後も安定に維持され[Ｆ（３,４）＝２.５２、p＝０.２０]、このことはグリシン処置中にみられる改善効果が研究期間のその後の８週間においても維持されることを示す。
【実施例３】
【００５３】
ＰＡＮＳＳの５因子分析法
ＰＡＮＳＳの伝統的分析法においては、症候は従命自動性症候、拒絶性症候および一般的症候に分類されるが、５因子または７因子を組み込む別の分析法が提案されている。５因子モデルによれば症候は従命自動性のもの、拒絶性のもの、認知性のもの、うつ病性のもの、および興奮性のものに分類される。従命自動性および拒絶性症候以外の精神分裂病の程度に及ぼすグリシンの影響度を測定するために、５因子成分を用いてデータの二次分析をおこなった（図４参照）。３因子分析の場合のように、ＰＡＮＳＳ従命自動性症候に関してはグリシンまたはプラセボ処置中においては著しい低減効果はみられなかったが、プラセボ処置期間ではなくてグリシン処置期間においては著しく漸進的な改善効果がみられた[経時処置Ｆ（３,８）＝１９.５、p＜０.０００１]。しかしながら、５因子分析法によれば、うつ症候[Ｆ（３,８）＝７.２３、p＜０.０２]および認知性症候[Ｆ（３,８）＝４.７４、p＜０.０５]に対しても著しい低減効果がみられた。うつ症候[Ｆ（３,５）＝２.１３、p＝０.２２]に対しても著しい認知性症候[Ｆ（３,５）＝０.８９、p＝０.５１]における改善効果は拒絶性症候における変化に対する共変によって維持されなかった。
【００５４】
これに対して、拒絶性症候に対するグリシンの効果は認知性障害またはうつ症候における変化に対する共変によって有意に維持された[Ｆ（３,５）＝６.８、p＝０.０３２]。この低減率は拒絶性症候の場合が最も大きく（プレグリシン濃度に対して４１.０±１５.４％、p＜０.０００１）、次いでうつ症候（２３.０±１７.９％、p＝０.００２）および認知性障害（１５.２±１３.５％、p＝０.００４）の順であった。興奮症候（１１.９±２６.３％、p＝０.１７）および従命自動性症候（９.４±２０.５％、p＝０.１６）の低減率に関しては、統計的有意性はみられなかった。
【００５５】
【表１】
【００５６】
【表２】
【実施例４】
【００５７】
スタディー＃３（ジャビットおよびフルシアンテによる前記文献参照）
グリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）は１９８６年の非特許文献２０に最初に報告されたグリシン誘導体である。当時、この化合物はＰＣＰ誘発機能高進の転換に関してはグリシンよりも著しく高い効能をもたらすことが示された。さらに、ＧＤＡの投与によって脳内の全グリシン濃度は増加しないことが示され、このことはＧＤＡがグリシンの前駆体として作用しなかったことを示す。当時、ＰＣＰ誘発機能高進に対するＧＤＡ誘発抑制機構は仮定されていなかった。
【００５８】
この研究は、ＰＣＰ誘発機能高進をＧＤＡが脳内でのグリシン再捕捉を阻害することによって抑制し、ＮＭＤＡレセプターの隣接部におけるグリシン濃度を増加させる可能性を検討するためにおこなった。この仮定はＧＤＡが脳内の全グリシン濃度を増加させることなくＰＣＰ誘発機能高進を抑制するという知見に基づくものであるが、先行文献からは明らかでない。
【００５９】
グリシン捕捉を研究するために、スプレーグ−ドウリーの成長ラットの皮質からシナプトソームのＰ2フラクションを調製し、該フラクションを人造ＣＳＦに懸濁させた。１００ｎＭの［3Ｈ］グリシンの捕捉を特定のリガンドの存在下において２５℃で所定時間にわたって測定した。インキュベーションは減圧濾過によって終了させた。グリシンの捕捉はインキュベーションの少なくとも最初の１０分間にわたっては直線的に増加した（図１０参照）。３０分後にはプラトーに達し、３０〜６０分間での捕捉結合の著しい増加はみられなかった。速度論的な結合パラメーターは非線形回帰分析によって決定した。全ての捕捉曲線は一次であった。平均のｔ1/2値は９．７±０．７分であった。冷グリシンによる［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制に対するＩＣ50値は７８．７±３７．８μＭであった。特有の［3Ｈ］グリシン捕捉は添加したＮａ+／Ｃｌ-の消失により終了した。
【００６０】
抑制試験は０．１〜１０ｍＭのＧＤＡの不存在下または存在下でのインキュベーションを５分間おこなうことによって実施した（図１１参照）。次のいくつかの比較化合物を用いる試験もおこなった：（１）サルコシン（高い効能を有する既知のグリシン捕捉アンタゴニスト）および（２）皮質のグリシン捕捉部位に対して低い親和性を示すことが知られているグリシンエチルエステル（ＧＥＥ）とグリシンメチルエステル（ＧＭＥ）（文献１８参照）。グリシン捕捉の抑制能の順位は次の通りである：グリシン＞サルコシン＞ＧＤＡ＞ＧＥＥ＞ＧＭＥ。グリシン前駆体として作用するグリシンアミドとＤ−セリンのＩＣ50は＞１０ｍＭであった。ＧＤＡとサルコシンの効果は３０分間のインキュベーション期間を通じて有意に維持された。
【００６１】
１ｍＭの濃度のＧＤＡおよびサルコシンは［3Ｈ］グリシン捕捉の最大濃度を著しく（ｐ＜０．０５）低減させ、これらの低減率はそれぞれ２９±７％および７２±３％であった（図１１参照）。５ｍＭのＧＤＡによる［3Ｈ］グリシン捕捉の低減率は５１±１３．３％であった。グリシン捕捉の速度定数に対するこれらの薬剤の効果は著しくはなかった。なお、ＧＤＡ（７．９±２．９ｍｉｎ-1）とサルコシン（６．３±１．９ｍｉｎ-1）が存在するときのｔ1/2値はベースライン条件下の場合よりも幾分小さかった。行動研究におけるＧＤＡの有効濃度を約０．３ｍｍｏｌ／ｋｇと仮定するならば、これらの研究は、ＧＤＡが行動研究において得られる濃度と同程度の濃度においてグリシン捕捉アンタゴニストとして作用することを証明するものである。
【００６２】
ＮＭＤＡレセプターのグリシン部位におけるＧＤＡの潜在的な直接アゴニスト様効果はＮＭＤＡレセプター活性の機能プローブとしてＰＣＰレセプター結合を用いることによって排除された。このアッセイにおいては、グリシン様薬剤はＮＭＤＡアゴニスト［ＧＬＵ（グルタメートの略語）］の不存在下ではなくて存在下においては［3Ｈ］ＭＫ−８０１（メルク社製）の結合性を促進する。アッセイはラットの皮質と海馬から調製して５ｍＭのＴＲＩＳ−酢酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）中において１ｍＭの［3Ｈ］ＭＫ−８０１と特定のリガンドの存在下で１５分間インキュベートした粗製シナプス膜を用いておこなった。
【００６３】
インキュベーションはワットマンＧＦ／Ｂフィルターを用いる減圧濾過によって終了させた。非特異的結合性は１０μＭのＭＫ−８０１の存在下で測定した。ＧＬＵのみを用いるインキュベーションによって結合性は対照条件に比べて９倍増加した［ジャビットおよびフルシアンテの報文（印刷中）］。ＧＬＵとグリシンを用いるインキュベーションによって結合性は対照条件に比べて著しく増加し（２２倍）、ＧＬＵのみを用いるインキュベーションの場合に比べても２．５倍増加した。ＧＬＵとＧＤＡの共存下での結合性はＧＬＵのみの存在下での結合性に匹敵し得るものであった。
【００６４】
ＧＤＡによるグリシン捕捉アンタゴニストの特異性はＧＡＢＡ（γ−アミノ酪酸）とＧＬＵの捕捉に対するグリシン、ＧＣＡおよびＧＤＡの効果を評価することによって調べた。方法は、［3Ｈ］グリシンの代わりに１０ｎＭの［3Ｈ］ＧＡＢＡまたはＬ−［3Ｈ］ＧＬＵを使用する以外はグリシン捕捉アッセイの場合と同様である。ＧＬＵ捕捉アッセイおよびＧＡＢＡ捕捉アッセイに対してはＬ−トランス−ピロリジン−２，４−ジカルボン酸（Ｌ−ＰＤＣ）およびニペコチン酸を活性対照としてそれぞれ使用した。ＧＤＡは［3Ｈ］グリシン捕捉に対するその効果とは対照的に［3Ｈ］ＧＬＵと［3Ｈ］ＧＡＢＡの捕捉を著しく増加させた。脳内のグリシン輸送体の活性化によってシナプス前のＧＬＵとＧＡＢＡの放出がもたらされると仮定すると、ＧＬＵとＧＡＢＡの捕捉はグリシン再捕捉抑制の生体外での予想された結果となる［ジャビットおよびフルシアンテの報文（印刷中）］。
【００６５】
その後の研究により、げっ歯動物における（１）グリシン捕捉の抑制および（２）ＰＣＰ誘発機能高進の拮抗に関する数種のＧＤＡ様化合物の効能の順位について検討がされた。この研究のために、グリシルトリスカデシルアミド（ＧＴＡ）、グリシルウンデシルアミド（ＧＵＡ）およびグリシルヘキシルアミド（ＧＨＡ）を含む数種類の付加的な化合物を合成した。これらの化合物は、１２個の炭素原子を有するＧＤＡとは対照的に、アミドに結合した炭素原子数がそれぞれ１３、１１および６であるグリシンアミド誘導体である。
【００６６】
ＧＴＡはＰＣＰ誘発機能高進の抑制およびグリシン捕捉の抑制に関してＧＤＡの場合よりも高い効果を示した（図８および図９参照）。ＧＵＡは療法のアッセイにおいてより低い効果を示した。最近になって合成されたＧＨＡはグリシン捕捉の抑制に関してＧＤＡの場合に比べて約１／２０の効果しか示さなかった（図１２参照）。従来は、この化合物を０．１５ｇ／ｋｇまで投与することによってはＰＣＰ誘発機能高進の阻害に関しては効果がないとされていた（非特許文献２０参照）。
【００６７】
最近の実験においても、アンフェタミン誘発機能高進に対するＧＤＡの効果は対照条件の場合と同様であった。主としてドーパミンレセプターを阻害することによって臨床的効果をもたらす現在入手し得る抗精神病薬はげっ歯動物におけるＰＣＰ誘発機能高進を転換させるかもしれない。しかしながら、これらの薬剤はアンフェタミンによって誘発される機能高進の場合よりもＰＣＰ誘発機能高進の阻害に関する効果は低い（非特許文献１６参照）。従って、この研究においてはアンフェタミン誘発機能高進に対するＧＤＡの効果を評価した。ＰＣＰ誘発機能高進を著しく（ｔ＝３．３０、ｐ＝０．００１）抑制した投与量（０．０５ｇ／ｋｇ）のＧＤＡはアンフェタミンによって誘発された機能高進を著しく抑制しなかった（ｔ＝０．５９、ＮＳ）（図１３参照）。
【００６８】
グリシンがアンフェタミン誘発機能高進を抑制しないことが従来から知られている（このデータは示さない）。従って、この知見は、ＧＤＡが現在入手し得る抗精神病薬の場合とは異なる機構によってＰＣＰ誘発機能高進を抑制するという技術的思想を支持する。
【００６９】
要するに、この実施例はＧＤＡがグリシン捕捉を抑制することおよび投与量が０．０５ｇ／ｋｇのＧＤＡがＰＣＰ誘発機能高進を投与量が０．８ｇ／ｋｇのグリシンの場合と同程度まで抑制することを例証するものである。なお、この投与量のＧＤＡは選択された脳小室内のグリシン濃度を増加させるかもしれないが、脳内の全グリシン濃度は増加させないことが知られている。グリシン捕捉を阻害するのに有効な投与量のＧＤＡはＮＭＤＡレセプターと結合せず、また、他のアミノ酸捕捉神経伝達を抑制しない。ＧＤＡ類似化合物は皮質のグリシン捕捉の阻害能に比例してＰＣＰ誘発機能高進を抑制する。また、ＰＣＰ誘発機能高進の阻害に対して比較的有効でないことが知られているＧＤＡ類似化合物（グリシルヘキシルアミド）もグリシン捕捉の阻害に対して比較的有効でない。ＰＣＰ誘発機能高進の阻害に有効な投与量のＧＤＡはアンフェタミン誘発機能高進も阻害しない。
【００７０】
これらの知見は、グリシン捕捉を阻害する薬剤が脳のＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を行動に関連して著しく促進することに関して最初の証左を与えるものである。グリシンをげっ歯動物におけるＰＣＰ誘発機能高進を抑制する投与量と同じ量で投与すると精神分裂病の症候に顕著な改善がもたらされるという最近の臨床的知見を仮定するならば、本発明によれば、脳のグリシン捕捉を抑制するＧＤＡおよびその他の化合物が精神分裂病およびその他の精神病の処置に有効であるという知見が得られる。
【００７１】
以上の説明により、精神分裂病の症候の処置における本発明の有効性は明らかである。
【００７２】
当業者であれば現在知られているか、または将来発見される化学的構造を有するその他の天然に存在するか、または合成されるグリシン捕捉アンタゴニストを選択使用することによって抗精神病薬的効果を得ることができる。
【００７３】
また、本発明の種々の変形態様は当業者には明らかなところである。
【産業上の利用可能性】
【００７４】
本発明によれば、精神病と精神分裂病の症候群で患う患者へグリシン捕捉アンタゴニストを投与することによって、該患者を効果的に治療することができる。
【技術分野】
【０００１】
この出願は１９９５年１２月７日に出願された仮出願６０／００８,３６１号の利益を権利請求する。
本発明は、グリシン捕捉性アンタゴニストを用いる拒絶性および認知性精神分裂病症候群の処置に関する。
【背景技術】
【０００２】
過去３０年間にわたり、ドーパミン仮説は精神分裂病の主要な神経化学モデルとなっている。ドーパミン仮説は、アンフェタミン様のドーパミン放出薬が精神分裂病に非常に類似した精神異常状態を誘発するという知見およびドーパミンレセプターのブロック剤（例えば、クロルプロマジン、ハロペリドール等）が精神分裂病の臨床的処置において有用であるという知見に基づくものである。ドーパミン仮説は、精神分裂病症候群が脳のドーパミン作用性症候群の機能高進を主として脳の中間縁と中間皮質領域において伝達するということを仮定する。しかしながら、この仮説は発見的な価値はあるが、精神分裂病の臨床的処置への適用にはいくつかの制約がある。
【０００３】
第一に、アンフェタミン精神病は従命自動性精神分裂病症候群（例えば、機能高進、幻覚等）に対してのみ的確なモデルとなる。これに対して、アンフェタミンの投与によっては、精神分裂病においてみられる症状に類似する機能障害または拒絶性症候群（例えば、鈍感感情、情緒的自閉症等）は進行しない。ドーパミンのブロック剤を用いる最適な処置にもかかわらず、精神分裂病患者の２０〜５０％が顕著な拒絶性（negative）症候と思考障害を示し続けるということは、新たな処置が必要なことを示す。第二に、大部分の精神分裂病患者においては、ドーパミン作用性神経伝達の明白な障害はみられない。従って、ドーパミン作用性機能高進が存在する範囲ではこの仮説は他の神経伝達系におけるより基本的な障害に対しては二次的なものとなるかもしれない。症候を調整しながら抗ドーパミン作用性処置をおこなうことによってはその根底を成す精神病理学に対処することはできない。
【０００４】
新しい処置法を開発する潜在的な方向性は１９５０年代の末期になってフェンシクリジン（ＰＣＰ; エンジェルダスト）の開発によって与えられるようになった。ＰＣＰは最初は一般的な麻酔薬として開発されたものである。最初の臨床的試験においては、ＰＣＰと類縁薬剤（例えば、ケタミン）が精神分裂病と非常に類似した精神病性症候群を誘発することが見出された。アンフェタミン精神病とは対照的に、ＰＣＰ精神病は拒絶性および従命自動性精神分裂病症候群に包含される。さらに、ＰＣＰは精神分裂病にみられるタイプの機能障害を再度もたらすという特徴がある。ＰＣＰで誘発される精神病の根底を成すメカニズムは１９７９年に脳のＰＣＰレセプターに関する知見が最初に得られるまでほとんど未解決であった。
【０００５】
１９８０年代の初期におけるその後の研究により、ＰＣＰレセプターがＮ−メチル−Ｄ−アスパルテート（ＮＭＤＡ）型のグルタメートレセプターに関連するイオン通路内に位置する結合部位を構成することおよびＰＣＰとその類縁薬剤がＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達をブロックすることによって精神病発現薬的効果をもたらすことが明らかにされた。これら知見に基づいて次のことが提案された（非特許文献１４および５参照）。即ち、ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達の内因性機能障害または調節障害は精神分裂病の病因に著しく寄与し、特に、抗神経弛緩薬的な拒絶性および認知性症候群の発現をもたらす。さらに、ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進する薬剤を投与することは精神分裂病の抗神経弛緩薬的な徴候と症候の処置に有効であるという可能性も提案された。
【０００６】
１９８７年にグリシン結合部位が発見される以前においては、その後で本発明者によっておこなわれた投与量と同様に多量のグリシンをげっ歯類動物に投与することによってＰＣＰにより誘発される行動様式とは反対の効果がもたらされることが判明したが（非特許文献１３参照）、このことは行動アッセイがＮＭＤＡ促進剤の抗精神病効果を敏感に反映することを示すものである。
【０００７】
ＮＭＤＡレセプターは皮質における主要な興奮神経伝達物質として作用するグルタメートによって主として活性化される。しかしながら、外因性グルタメートは次の理由から効果的に投与することができない。即ち、（１）グルタメートは血液脳関門を通過できず、また、（２）グルタメートはＮＭＤＡレセプター以外のいくつかのタイプのレセプターを活性化し、さらに（３）血液脳関門を通過するグルタメート類似体による活性化は皮質ニューロンを過度に興奮させてニューロンの変性（興奮毒性）をもたらす。ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進させる別の可能性のある試みは１９８７年にグリシンがＮＭＤＡレセプターコンプレックスにおけるアロステリックモジュレーター（allosteric modulator）として作用という知見が得られたことによってなされた（非特許文献７参照）。
【０００８】
この知見に基づいて、外因性投与グリシンがＮＭＤＡレセプター仲介増強作用を選択的に促進するので、顕著な抗神経弛緩薬症候学的病状を示す精神分裂病患者の治療に臨床的改良がもたらされた。グリシンの使用には次の制約があった。即ち、（１）外因性投与グリシンがどの程度までＣＮＳを透過するのか不明であり、また、（２）ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達のグリシンによる調節が生体内において生理学的にどの程度まで関連性があるのか不明であり、さらに（３）ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を実際にどの程度まで促進して臨床的改良をもたらすか不明であった。
【０００９】
１９８７年にグリシン結合部位が発見された後、いくつかの小規模な臨床的試みがなされて有用な臨床的効果が提案されたが、標準的な統計的試みによってその効力は証明されなかった。１９８８年にワジリは９ケ月にわたるオープン試験において１１人の精神分裂病患者にグリシンを５〜２５g／日投与した場合の結果を発表した（非特許文献１２参照）。この結果によれば１１人のうちの４人の患者においては改善が認められたが、この結果についての統計的分析または対照群のデータは得られていない。１９９０年にコスタらは５週間にわたるオープン試験において６人の患者にグリシンを１５g／日投与した結果を発表した（非特許文献２参照）。
【００１０】
この結果によれば、簡易精神医学評価基準（ＢＰＲＳ）によって評価した症候の減少が３０％以上の従命自動性（positive）応答を示したのは２人の患者であった。しかしながら、全体的な統計学的分析はおこなわれておらず、また、これらの発表されたデータに基づく分析によっても統計学的に有意な効果は得られていないことが判明している（t＝１.８９、p＝０.１２）。二重盲検法により１８人の患者にグリシンまたはプラセボを１５g／日の割合で投与するその後の研究（非特許文献１９参照）によれば、臨床グローバルインプレッション（ＣＧＩ）において有意な改善がみられたが、ＢＰＲＳまたは拒絶性症候の評価のために特別に開発された基準である拒絶性症候用スケージュール（ＳＡＮＳ）においては有意な改善効果はみられなかった。
【００１１】
これらの研究者はグリシンの効力を証明するためにはより多量のグリシンを投与することが必要であると結論づけているが、これを追跡する研究はおこなっていない。１９８９年にロッセら（非特許文献１１参照）は４日〜８週間のオープン試験において慢性の精神分裂病患者にグリシンを１０.８g／日の割合で投与したが全体的な臨床的効力はみられなかった。これらの研究者は、該治療法はグリシンのＣＮＳ透過能が低いことによって制約されると結論づけている。１９９４年までグリシンの投与量を２５g／日よりも多くする臨床的研究はおこなわれておらず、また、グリシンを高投与量で使用することの実用性については明らかにされていなかった。
【００１２】
高投与量のグリシンを用いる最初の研究は１９８９年の８月に開始され、これには本発明者による研究も含まれる。この研究においては、抗精神弛緩薬的症候を示す１４人の慢性精神分裂病患者に二重盲プラセボ制御法によってグリシンを０．４ｇ／ｋｇ／日（約３０ｇ／日）の割合で投与し、従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）によって従命自動性および拒絶性症候をモニターした。この研究により、グリシンを高投与量で投与しても十分に許容されることが明らかになった。
【００１３】
さらに、グリシンを投与した患者の場合には拒絶性症候において著しい改善がみられたが、プラセボを投与した患者の場合には類似の改善効果はみられなかったという興味のある予備的結果が得られた。しかしながら、この研究においては、グリシン投与群とプラセボ投与群の間に有意な差異がみられなかったという未解決な点が残されていた。この研究の結果はジャビットらによって１９９４年８月に発表された（非特許文献６参照）。
【００１４】
本発明者らは同時係属中の特許出願において、グリシンの過剰投与（＞３０ｇ／日）による処置がＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達の促進並びに精神病に関連する病気および薬物中毒に関連する精神病、特に精神分裂病の処置に有効であることを明らかにした。このことは最近おこなった２つの研究によって立証された。ライダーマンらによる第１の研究においては（非特許文献９参照）、ブロンクス精神病センターにおいてグリシンを前記のような過剰量（３０ｇ／日）投与した研究に関与した５人の精神分裂病患者にグリシンを６０ｇ／日の割合で投与した再挑戦処置をおこなった。グリシンの濃度は、ＳＡＮＳとＰＡＮＳＳによって評価する従命自動性および拒絶性症候と共にモニターした。グリシンを６０ｇ／日の割合で投与する処置により血清中のグリシンの濃度は６．３倍に増加した。
【００１５】
血清中のグリシン濃度のこのような増加は１９９５年にドゥソウザらによって明らかにされており（非特許文献３参照）、該増加はＣＮＳグリシン濃度の約２倍となる。従って、従来の研究において用いられた過剰投与（即ち、＞３０ｇ／日）はＣＮＳグリシン濃度に著しい影響をもたらすためには必要である。グリシンを６０ｇ／日で投与する処理中においては顕著な副作用は認められなかった。従って、この研究は高投与量グリシンによる臨床的処置の実用性に関する最初の証左である。さらに、少数の患者の場合にはＳＡＮＳ拒絶性症候に関して著しい改善効果がみられ（＜０．０５）、また、ＰＡＮＳＳに関しても著しい改善傾向がみられたことはグリシンを過剰に投与することの潜在的な効力を示すものである。
【００１６】
最近、おこなわれた第２の研究によれば、抗精神弛緩薬的な拒絶性症候の処置においてグリシンを６０ｇ／日の割合で投与することの有効性に関してより明確な証左が得られた。この研究は先のブロンクス精神病センターの精神分裂病研究員であるウリ・ヘレスコ−レビー博士と本発明者がイスラエルのサラー・ヘルツォグ病院において本発明者によって開発されたプロトコルに従って共同しておこなった。患者は二重盲クロスオーバー法によりグリシンまたはプラセボを６０ｇ／日の割合で投与することによって処置した。最初の１１人の患者から得られた結果を分析した。
【００１７】
これらの結果によれば、精神分裂病患者におけるＰＡＮＳＳ拒絶性症候に関しては、グリシン処置段階中の方がプラセボ処置段階中よりも著しい低減効果がみられることが明らかになった。従って、この研究は高投与量グリシン処置の効力に関する二重盲プラセボ制御の最初の証左を提供するものである。精神病理学と認知性機能を含む精神分裂病症候学のその他の点においても著しい改善がみられた。処置したいずれの患者にも著しい副作用はみられなかった。
【００１８】
グリシンを経口投与することによる処置が精神分裂病に関して有意な臨床的利点を有するという思想は先行文献において議論されているが、高投与量グリシンによる処置が安全で、実用的で、しかも有効であるという明確な証左は前述の最近おこなわれた２つの研究（ＢＰＣとイスラエルにおける研究）によって初めて明らかにされた。
【００１９】
精神分裂病患者の５０％までが神経弛緩薬を投与するその後の処置においても著しい拒絶性および認知性症候を示した。新しく開発された薬剤、例えば、クロザピンおよびリスペリドンは標準的な神経弛緩薬に比べてある程度改善された効力を示す。しかしながら、この種の薬剤の開発にもかかわらず、著しい数の精神分裂病患者が長期の入院生活を余儀なくさせられている。グリシンを３０ｇ／日またはそれよりも多く投与することによるこれらの患者の処置は著しい臨床的改善効果をもたらすので、利用可能なその他の薬剤投与法により現在のところ目標とされていない臨床的要請に応えることが可能である。
【００２０】
グリシンまたはグリシン前駆体として投与さたときに全ＣＮＳグリシン濃度の増加をもたらす薬剤もしくはＮＭＤＡレセプターコンプレックスのグリシン部位においてグリシンと置換する薬剤（例えば、グリシナミド、スレオニンおよびＤ−セリン）を精神病患者、例えば、精神分裂病患者に３０ｇ／日よりも高い割合で経口投与することによって、従命自動性症候もしくは興奮に影響を及ぼすことなく拒絶性症候、うつ病および認知性機能障害に著しい改善効果をもたらすことが判明した。
【００２１】
これらの研究において用いたグリシンの投与量（０．８ｇ／ｋｇ／日もしくは約６０ｇ／日）は従来のいずれの研究において用いられた投与量よりも実質的に高い量である。さらに、グリシンを０．８ｇ／ｋｇ／日の割合で投与することによってもたらされる血清中のグリシン濃度はＣＮＳグリシン濃度の著しい増加に関係していることが知られている濃度の範囲内である。同時係属している上記の特許出願においてクレームされている発明によるグリシンの投与量は０．４〜２．０ｇ／ｋｇ／日である。前駆体は脳中の細胞外のグリシン濃度の等価な増大をもたらすのに十分な量投与する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２２】
【非特許文献１】アンドリーセンＮ．、Br. J. Psychiatry、第１５５巻（増補７）、第４９頁〜第５２頁（１９８９年）：「拒絶性症候の評価基準（ＳＡＮＳ）；概念的および理論的基礎」
【非特許文献２】コスタＪ．、カレドＥ．、スラメックＪ．、バニーＷ．Jr.、ポトキンＳ．Ｇ．、J.Clin．Psychopharmacol．、第１０巻、第７１頁〜第７２頁（１９９０年）: 「長患いの難治精神分裂病における神経弛緩薬の補助薬としてのグリシンのオープン試験」
【非特許文献３】ドゥソウザＤ．Ｃ．、モリセイＫ．、アビ−サープＤ．、ダモンＤ．、ギルＲ．、ベンネットＡ．、クライスタルＪ．Ｈ．、Schiz．Res.、第１５巻、第１４７頁（１９９５年）：「健康なヒトにおけるＣＳＦアミノ酸、血漿ホルモンおよび行動に対する静脈投与グリシンと経口投与Ｄ−シクロセリンの効果：精神分裂病のためのインプリケーション」
【非特許文献４】ハリハランＭ．、ナガＳ．、バンノールトＴ．、Ｊ．Chromatogr.、第６２１巻、第１５頁〜第２２頁（１９９３年）：「フェニルイソチオシアネートを用いるプレカラム誘導体化を伴う紫外吸収検出を含む高性能液体クロマトグラフィーによる血漿アミノ酸分析の開発に関する系統的アプローチ」
【非特許文献５】ジャビットＤ．Ｃ．、ズキンＳ．Ｒ．、Am．Ｊ．Psychiatry、第１４８巻、第１３０１頁〜第１３０８頁（１９９１年）：「精神分裂病のフェンシクリジンモデルにおける最近の進歩」
【非特許文献６】ジャビットＤ．Ｃ．、ジルベルマンＩ．、ズキンＳ．Ｒ．、ヘレスコ−レビーＵ．、リンデンマイヤーＪ．Ｐ．、Am. J. Psychiatry、第１５１巻、第１２３４頁〜第１２３６頁（１９９４年）：「精神分裂病の拒絶性症候のグリシンによる改善」
【非特許文献７】ジョンソンＪ．Ｗ．、アッシャーＰ．、Nature、第３２５巻、第５２９頁〜第５３１頁（１９８７年）：「グリシンはマウスの培養脳ニューロンにおけるＮＭＤＡ応答を促進する」
【非特許文献８】ケイＳ．Ｒ．、フィズバインＡ．、オプラーＬ．Ａ．、Schiz. Bull.、第１３巻、第２６１頁〜第２７６頁（１９８７年）: 「精神分裂病に関する従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）」
【非特許文献９】ライダーマンＥ．、ジルベルマンＩ．、ズキンＳ．Ｒ．、クーパーＴ．Ｂ．、ジャビットＤ．Ｃ．、Biol. Psychiatry、第３９巻、第２１３頁〜第２１５頁（１９９６年） ：「精神分裂病における拒絶性症候と血漿濃度に対する経口高投与量グリシンについての予備的研究」
【非特許文献１０】ポトキンＳ．Ｇ．、コスタＪ．、ロイＳ．、スラメクＪ．、ジンＹ．、グラセカラムＢ．、「精神分裂病の処置におけるグリシン: 新規な抗精神病薬に関する理論と予備的結果」、メルツァーＨ．Ｙ．編（ニューヨーク、ラベンプレス発行、１９９２年）、第１７９頁〜第１８８頁
【非特許文献１１】ロッセＲ．Ｂ．、テウトＳ．Ｋ．、バネー−シュバルツＭ．、ライフトンＭ．、スカルセラＥ．、コーヘンＣ．Ｇ．、ドイチュＳ．Ｉ．、Clin. Neuropharmacol.、第１２巻、第４１６頁〜第４２４頁（１９８９年）: 「精神分裂病における常套の神経弛緩薬処置に対するグリシン補助治療; オープンラベル予備研究」
【非特許文献１２】バジリＲ．、Biol. Psychiatry、第２３巻、第２１０頁〜第２１１頁（レター）（１９８８年）: 「精神分裂病のグリシン治療」
【非特許文献１３】トスＥ．、ヴァイスＢ．、バネーシュバルツＭ．、ラジャＡ．、「マウスにおける３−メルカプトプロピオン酸もしくはフェンシクリジンによって誘発される行動変化に対するグリシン誘導体の効果」第１１巻、第１頁〜第８頁（１９８６年）
【非特許文献１４】ジャビットＤ．Ｃ．、Hillside Jounal of Clinical Psychiatry、第９巻、第１２頁〜第３５頁（１９８７年）: 「拒絶性精神分裂病症候学と精神分裂病のＰＣＰモデル」
【非特許文献１５】グアステラＪ．、ブレカＮ．、ヴァイグマンＣ．、レスターＨ．Ａ．、ディビッドソンＮ．、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、第８９巻、第７１８９頁〜第７１９３頁（１９９２年）: 「ラットの脳の高親和性グリシン輸送体のクローニング、発現および局在」
【非特許文献１６】ジャッソンＤ．Ｍ．、ジョハンソンＣ．、リンドグレンＬ．Ｍ．、ベングツソンＡ．、Pharmacol. Biochem. Behav.、第４８巻、第４６５頁〜第４７１頁（１９９４年）: 「ドーパミンレセプターアンタゴニストはラットにおけるアンフェタミン誘発およびフェンシクリジン誘発運動刺激を阻害する」
【非特許文献１７】リウＱ．Ｒ．、ロペソ−コルクエラＢ．、マンジヤンＳ．、ネルソンＨ．、ネルソンＮ．、J. Biol. Chem.、第２６８巻、第２２８０２頁〜第２２８０８頁（１９９３年）: 「新規な構造的特徴を有する骨髄と脳に特異的なグリシン輸送体のクローニングと発現」
【非特許文献１８】スミスＫ．Ｅ．、ボーデンＬ．Ａ．、ハルチグＰ．Ｒ．、ブランケクＴ．、ヴァイスハンクＲ．Ｌ．、Neuron、第８巻、第９２７頁〜第９３５頁（１９９２年）: 「グリシン輸送体のクローニングと発現はＮＭＤＡレセプターとの共局在化をもたらす」
【非特許文献１９】タニイＹ．、ニシカワＴ．、ハシモトＡ．、タカハシＫ．、J. Pharmacol. Exp. Ther.、第２６９巻、第１０４０頁〜第１０４８頁（１９９４年）:「アラニンとセリンの鏡像体によるフェンシクリジン誘発機能高進の立体選択的拮抗作用」
【非特許文献２０】トスＥ．、ラジャＡ．、Neurochem.Res.、第１１巻、第３９３頁〜第４００頁（１９８６年）: 「マウスにおけるフェンシクリジン誘発機能高進のグリシンによる拮抗作用」
【非特許文献２１】ザフラＦ．、アラゴンＣ．、オリヴァレスＬ．、ダンボルトＮ．Ｃ．、ギメネツＣ．、ストルム−マチセンＪ．、J.Neurosci.、第１５巻、第３９５２頁〜第３９６９頁（１９９５年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
グリシンおよび／または前駆体の使用における制約は次の通りである。即ち、（１）これらは多量に投与しなければならず、また、（２）外因的に投与されるグリシンが脳内の臨界部位におけるグリシン濃度を増加させる限度を制限できるシステムが脳内に存在する。
本発明が解決しようとする課題は、新規なＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進させる方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
この出願においては、グリシン捕捉（uptake）アンタゴニスト（グリシン再捕捉アンタゴニストおよび／またはグリシン輸送インヒビターとしても知られている）を用いてＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進させる方法が開示される。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】図１は、従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）［ケイらによる文献８（１９８７年）参照］によって測定した血清グリシン濃度（スキャッタープロット）および拒絶性症候（バープロット）に対するグリシンの経口投与（０８ｇ／ｋｇ／日）の効果を示す。この測定法は鈍感な情動、感情もしくは虚脱およびスタディー＃１からの抽象的思考障害のような測定項目が含まれる。全ての統計量は対両側t−検定（paired two tailed t-test）を用いて処理した[＊p＜０.１対ベースライン（０週）、＊＊p＜０.０５対ベースライン、＊＊＊p＜０.０１対ベースライン]。
【図２】図２Ａ〜図２Ｄは、グリシンとプラセボを用いる二重盲補助処置中のスタディー＃２からの３−ファクターおよび全ＰＡＮＳＳ変化評点を示す（＊p＜０.０５、＊＊p＜０.０１、＊＊＊p＜０.００１）。
【図３】図３Ａ〜図３Ｄは、第１処置腕中にグリシンを投与された７人の患者についてのグリシンを用いる二重盲補助処置中およびその後のプラセボ期間中における３−ファクターおよび全ＰＡＮＳＳ評点を示す。
【図４】図４Ａ〜図４Ｅは、グリシンとプラセボを用いる二重盲補助処置中のスタディー＃２からの５−ファクターＰＡＮＳＳ変化評点を示す（＊p＜０.０５、＊＊p＜０.０１、＊＊＊＜p＜０.００１）。
【図５】図５は、ＰＣＰで誘発される機能高進に対するグリシンの効果を示す。雄のＢＡＬＢ／ｃマウスを３０分の時点でグリシン（０．８ｇ／ｋｇ）またはプラセボを用いて前処理した（第１矢印）。ＰＣＰ（５ｍｇ／ｋｇ sc.）を５０分の時点で投与し（第２矢印）、次いでげっ歯動物用自動化活動チャンバーを用いて歩行数をモニターした。グリシンを用いて前処理したマウスの場合にはＰＣＰ誘発機能高進が約２５％低減した。
【図６】図６は、ＰＣＰ誘発機能高進に対するグリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）の効果を示す。雄のＢＡＬＢ／ｃマウスをＧＤＡ（０．１ｇ／ｋｇ）またはプラセボを用いて３０分の時点で処理した（第１矢印）。ＰＣＰ（５ｍｇ／ｋｇ i.p.）を５０分の時点で投与し（第２矢印）、次いでげっ歯動物用自動化活動チャンバーを用いて歩行数をモニターした。ＧＤＡの投与による前処理によってＰＣＰ誘発機能高進は約５０％低減した（グリシンの場合にみられた効果と同じパターンである）。
【図７】図７は、図示した数の実験におけるＰＣＰ誘発機能高進に対するグリシンとＧＤＡの効果を示す。ＧＤＡの投与（０．０５ｇ／ｋｇ）によって、グリシンを０．８ｇ／ｋｇ投与した場合と同じ程度の活動抑制度がみられた。ＧＤＡの投与（０．１ｇ／ｋｇ）は約２倍有効であった。＊p＜０.０５対ＰＣＰのみ（ＣＴＬ）。＊＊＊p＜０.００１対ＣＴＬ。
【図８】図８は、ＰＣＰ誘発機能高進に対する数種のＧＤＡ類似化合物の効果を示す。これらの化合物の効能の順位はグリシルトリスカデシルアミド（ＧＴＡ）＞グリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）＞グリシルウンデシルアミド（ＧＵＡ）であった。
【図９】図９は、げっ歯動物におけるＰＣＰ誘発機能高進に対する抑制効能と脳ホモジェネート中における［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制効能の関係を示す。ＰＣＰ誘発機能高進の抑制効能（ＰＣＰのみの場合の％）の順位は［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制効能の順位と同様であった。
【図１０】図１０は、Ｐ2シナプトソームへの［3Ｈ］グリシン捕捉およびＧＤＡと既知のグリシン捕捉アンタゴニストであるサルコシンによる抑制の経時変化を示す。図示する点は各々について３回おこなった３つの別々の実験の平均値±s.e.m.を示す。
【図１１】図１１は、図示するグリシン誘導体による［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制を示す。図示する点は各々について３回おこなった３つの別々の実験の平均値±s.e.m.を示す。
【図１２】図１２は、グリシルヘキシルアミド（ＧＨＡ）またはＧＤＡによる［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制を示す。１５０ｍｇ／ｋｇまでの投与量ではＰＣＰで誘発される機能高進の拮抗においては効果のないことが知られているＧＨＡは［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制に関して非常に低い効能を示した。
【図１３】図１３は、ＰＣＰもしくはアンフェタミンで誘発される機能高進に対するＧＤＡ（０．０５ｇ／ｋｇ）による相対抑制を示す。ＧＤＡはＰＣＰで誘発される機能高進に対して著しい拮抗作用を示すが（＊＊＊ｐ＝０．００１）、アンフェタミンで誘発される機能高進に対して著しい影響をもたらさなかった。ＰＣＰとアンフェタミンの不存在下では全活性は＜５００カウントであった。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
脳内のグリシン濃度はＮＭＤＡレセプターの近傍におけるグリシンを低濃度に維持するグリシン輸送体（ＡＫＡ捕捉もしくは再捕捉ポンプ）の作用によって調節される（非特許文献１５よび１８参照）。従って、グリシン捕捉の妨害は、必然的にその全脳もしくは正味の細胞外濃度を増加させることなくＮＭＤＡレセプターの近傍におけるグリシン濃度を増加させる。出願人によって脳のホモジュネート中のグリシン捕捉の有効なアンタゴニストであることが最近明らかにされた化合物であるグリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）を用いた研究が最近おこなわれた｛ジャビットおよびフルシアンテによる研究報文（印刷中）｝。
【００２７】
これらの研究においては、げっ歯動物におけるＰＣＰ誘発による機能高進に対するＧＤＡの効果、グリシンの効果を受けやすいことが明らかにされたアッセイ系（文献２０参照）およびＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するその他の薬剤（非特許文献１９参照）について検討されている。グリシン（図５）およびＧＤＡ（図６）は類似の活性挙動を示し、基本活性に影響を及ぼすことなくＰＣＰ誘発による機能高進を抑制する。しかしながら、ＧＤＡはグリシンよりも著しく高い活性を示す。即ち、ＧＤＡは０．０５ｇ／ｋｇの投与量でＰＣＰ誘発による機能高進を、グリシンを０．８ｇ／ｋｇ、投与した場合と同じ程度まで抑制する（グリシンの投与量は臨床的試験において用いられている投与量である）。その他のＧＤＡに類似する薬剤もＰＣＰ誘発による機能高進を抑制し（図８）、その抑制能はグリシン捕捉の阻害能に比例する（図９）。
【００２８】
これらの知見はグリシン捕捉アンタゴニストが精神分裂病のＰＣＰ精神病様症候（例えば、拒絶性および認知性症候）の処置においてグリシンよりも同等もしくはそれ以上の効果をもたらすということを示す。本発明のこの態様においては、生体外でのグリシン捕捉阻害およびげっ歯動物におけるＰＣＰ誘発による機能高進抑制に有効な投与量でグリシン捕捉アンタゴニストを投与してヒトの患者を処置する。脳内には２種のグリシン捕捉系が存在する。即ち、脊髄、脳幹、間脳および網膜において高濃度で発現すると共に嗅球および脳半球に低濃度で発現するＧＬＹＴ１輸送体並びに脊髄、脳幹および小脳に制限されるＧＬＹＴ２輸送体である（非特許文献２１参照）。さらに、ＧＬＹＴ１輸送体は部分的にはディファレンシャル・スプライシング（differential splicing）によって生ずる多重イソホルム（multiple isoform）中にも存在する（非特許文献１７参照）。本発明のこの態様には、ＧＬＹＴ１もしくはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉のインヒビター（該輸送体のいずれかのイソホルムのインヒビターを含む）が包含される。
【００２９】
本発明のその他の態様においては、次に例示するような他の精神医学的症状と関連する精神病が処置される: 薬物（例えば、フェンサイクリジン、ケタミンおよびその他の解離性麻酔薬、アンフェタミンおよびその他の精神興奮剤並びにコカイン）によって誘発される精神病、情動障害と関係する精神病、一時的な精神的ストレスによる精神病、情動分裂性精神病、精神病ＮＯＳ、「精神分裂病スペクトル」障害、例えば分裂質もしくは分裂型性格障害、または精神病と関連する病気（例えば、重度のうつ病、躁うつ病的障害、アルツハイマー病および外傷後ストレス症）。
【００３０】
本発明のさらに別の態様においては、グリシン捕捉アンタゴニストが非経口投与される。
【００３１】
本発明のその他の目的は以下の発明の詳細な説明によって当業者には明らかとなる。
【００３２】
投与は液体状もしくは固体状配合物または注射液（例えば、静脈内注射液）としておこなってもよい（この場合、常套の製剤用キャリヤーを用いてもよい）。適当な製剤には錠剤、カプセル、経口液および非経口注射液が含まれる。錠剤とカプセルの調製には常套の希釈剤および賦形剤等、例えば、常套のカプセルや錠剤の調製に利用されているラクトース等を用いてもよい。経口液として投与する場合には、風味のよい希釈剤を用いて飲みやすい配合物を調製してもよい。
【００３３】
本発明に係る化合物は全体的もしくは部分的にグリシン捕捉を阻害するのに十分な量で投与される。グリシンは０.４g／kg／日以上、例えば、０.５g／kg／日もしくはそれ以上の割合で１回〜数回、好ましくは精神分裂病患者の処置において０.８g／kg／日の割合で３回にわけて投与する。グリシン捕捉のアンタゴニストの投与量はグリシンに匹敵するＰＣＰ誘発機能高進に対する抑制活性によっておおまかに決定することができる。ＮＭＤＡレセプター仲介伝達の促進を評価するための簡便なアッセイは以下に説明するスタディー＃３で用いたげっ歯動物アッセイである。
【００３４】
現在のところＧＤＡは約０．０２５ｇ／ｋｇ／日〜０．５０ｇ／ｋｇ／日の割合で投与すればよいと考えられており、その他の化合物の投与量はＧＤＡに関連して決定される。グリシン捕捉アンタゴニストは精神病関連疾患の唯一の処置剤として投与するか、あるいは、次のような抗精神病薬の効能を補助するために使用する: 常套の抗精神病薬、例えば、ハロペリドール[ハルドール（商標）]、フルフェナジン[プロリキシン（商標）]、クロルプロマジン[ソラジン（商標）]およびチオリダジン[メラリル（商標）]、異型性抗精神病薬、例えばクロザピン[クロザリル（商標）]およびリスペリドン[リスペリダール（商標）]、抗精神病薬投与による副作用調整用薬剤並びに精神分裂病のような病気や疾患における症状を調整するために一般的に使用されているその他の薬剤。
【００３５】
本明細書に記載のような投与量を採用する場合には、グリシン捕捉アンタゴニストは精神分裂病の症候、特に拒絶性症候および認知性機能障害に対して臨床的に有用な効果をもたらす。拒絶性症候に対するグリシン捕捉アンタゴニストの有用な効果は精神分裂病のいずれかのその他の側面、例えば従動自動性症候または興奮に関する悪化がないときにみられる。本発明の１つの態様においては、グリシン捕捉アンタゴニストの投与は、従来の投薬法によっては十分に応答がみられない症候を調整するために不定期間にわたって続行される。
【００３６】
本発明においては前記の障害や疾患の処置のために生物学的に許容されるグリシン捕捉アンタゴニストが用いられる。グリシン捕捉インヒビターとしてはグリシルアルキルアミド、例えばグリシルドデシルアミドが挙げられ、また、スタディー＃３で用いた他のインヒビターとしてはグリシンアルキルエステルが挙げられる。サルコシンのようなその他のグリシン捕捉アンタゴニストは既知である。本発明の技術的思想を理解する当業者は薬学的に許容されるいずれかのグリシン捕捉アンタゴニストを採用することができる。
【００３７】
以下の実施例は精神分裂病の処置におけるグリシンおよびグリシン捕捉アンタゴニストの有効性を例示的に説明するものである。
【実施例１】
【００３８】
スタディー＃１（ライダーマンらの前記文献参照）
方法：この研究はブロンクス（ニューヨーク）にあるブロンクス・精神病センターにおいておこなわれた。インフォームド・コンセントを得た後でこの研究に参加してあらかじめ二重盲検法においてグリシンを０．４ｇ／ｋｇ／日の割合で投与された５人の精神分裂病患者（ＤＳＭ−ＩＶ）を採用した。患者の平均年令は４５．０±７．６才であり、慢性的な平均病歴は２４．２±５．９年であった。いずれの患者も重度の病状を示した（ＣＧ１＞４）。すべての患者には試験の少なくとも４週間前から抗精神病薬（クロザピン２、リペリドン２およびハロペリドール１）を投与した。
【００３９】
神経弛緩薬療法と平行してグリシンを１０ｇ／日（約０．１４ｇ／ｋｇ／日）の割合で経口投与し、３日目にはその投与量を０．２ｇ／ｋｇ／日（約１４ｇ／日）に増加させた。グリシンの投与量は２日ごとに０．２ｇ／ｋｇ／日ずつ増加させて０．８ｇ／ｋｇ／日とし、この投与量を８週間の残存期間にわたって継続した。従命自動性および拒絶性症候基準（ＰＡＮＳＳ）［ケイらの非特許文献８（１９８７年）参照］および拒絶性症候の評価基準（ＳＡＮＳ）［アンドレーゼンの非特許文献１（１９８９年）参照］を用いて隔週ごとの評価をおこなった。
【００４０】
錐体外路系評価基準（ＥＲＳ）および異常無意識行動基準（ＡＩＭＳ）を用いて運動性（motoric）副作用を評価した。全ての評価は、先のグリシン処置研究の結果を知らせない一人の個人によっておこなった。グリシンおよび神経弛緩薬（ハロベリドールおよびクロザピン）の血中濃度は隔週ごとに測定した。血漿グリシンは血漿アミノ酸用液体クロマトグラフィー法（内部基準としてＯ−メチルセリンを用いてグリシン測定用に調整した分析法）[ハリハンらの非特許文献４（１９９３年）]によって測定した。
【００４１】
本明細書に示す値は平均値±標準偏差である。処置の効果は両側検定対t−試験によって決定した。
結果：グリシンの経口投与による処置によってグリシンの血中濃度は著しく増加し（６.３倍）、この値は２〜６週にわたって安定に維持された（図１参照）。６〜８週にかけては統計的に意義のある程度ではないが、グリシンの血中濃度に明らかな低下がみられた。８週間の試験期間中には不都合な効果、例えば衰弱、嘔気および鎮静はみられなかった。ＳＡＮＳを用いたときには拒絶性症候において著しい改善効果がみられた（ベースライン：７５.８±７.２、試験後: ７２.２±８.６、t＝２.７９、p＝０.０４９）。一方、ＰＡＮＳＳを用いたときには拒絶性症候において改善傾向がみられた（ベースライン：３１.０±２.３、試験後: ２７.４±３.２、t＝２.２１、p＝０.０９２）。５人のうちの２人の患者においては拒絶性症候において２０％以上の低減効果がみられた。処置応答と全患者のグリシン濃度または個々の患者のグリシン濃度の経時変化との間には著しい関連性はみられなかった。
【００４２】
この研究に参加した患者のうち、最も高い処置応答を示した患者は、先の二重盲処置においてグリシンを０．４ｇ／ｋｇ／日の割合で投与したときに最も高い応答を示した患者であった［ジャビットらの前記の文献（１９９４年）参照］。即ち、この研究において測定された全ＰＡＮＳＳ評価点の変化と先の研究において測定された評価点との間には著しい関連性がみられた（r＝０.８２、p＝０.０４５）。先の研究の場合のように、この研究においてもＰＡＮＳＳ従命自動性症候（t＝１.６８、df＝４、p＝０.１７）または一般的精神病理学的評価（t＝０.７２、df＝４、p＝０.５）においては著しい変化はみられなかった。グリシン処理中の症候に関して錐体外路系においては著しい低減効果がみられたが（t＝４.８１、df＝４、p＝０.００９）、運動障害においてはこのような効果はみられなかった（t＝０.９１、df＝４、p＝０.４）。しかしながら、錐体外路系症候の改善と臨床的応答との間には関連性はみられなかった。グリシン処置によって血清中の神経弛緩薬の濃度は著しい影響を受けなかった。
【実施例２】
【００４３】
スタディー＃２（ヘレスコ−レービらの前記文献参照）
方法：被験者としてはサラー・ヘルツォグ記念病院の研究病棟（エルサレム、イスラエル）の入院患者を採用した。これらの患者はＤＳＭ−ＩＩＩ−Ｒ（米国精神医学協会、１９８７年）の精神分裂病と診断されていた。さらに、これらの患者は従来の神経弛緩薬に対する応答が弱いために抗療性があるとみなされていた。試験を開始する前に、少なくとも３カ月間にわたって常套の神経弛緩薬またはクロザピンを臨床的に最適な投与量でこれらの患者に定期的に経口投与した。付加的なＤＳＭ−ＩＩＩ−Ｒ診断を受けた精神分裂病患者の場合には付加的な向精神薬もしくは併用薬を投与するか、または神経学的症状を解消させた。１２人の患者をこの研究においては採用した。全ての患者からはこの研究に参加することについて書面によるインフォームド・コンセントを得た。また、この研究は病院の審査委員会の認可を受けた。
【００４４】
−２週から０週までの２週間にわたるベースライン評価期間の経過後、二重盲条件下において患者を無作為に指定してグリシン粉末またはプラセボ溶液を６週間（０週〜６週）にわたって投与した。薬剤の投与は二重盲条件下でおこなった。グリシン粉末は水に溶解させて投与した。プラセボ溶液としてはグルコースを用いた。次いで各々の患者には２週間の洗い出し処置に付した後、別の薬剤を６週間（８週〜１４週）投与した。グリシンの投与は４ｇ／日の投与量から開始し、４ｇ／日ずつ増加させて１日あたり投与量を０．８ｇ／ｋｇ（体重）とした。グリシンは１日ふたり３回に分けて投与した。この研究で用いた他の薬剤は、錐体外路系症候の処置の場合にはトリヘキシフェニジル（２〜５ｍｇ／日）であり、不眠症もしくは激越の処置の場合は抱水クロラール［２５０〜７５０ｍｇ／日（ＰＲＮ基準）］である。抗パーキンソン薬を必要とする患者にはトリヘキシフェニジルを定期的に投与した。
【００４５】
症候および錐体外路系の副作用は、ＰＡＮＳＳ、錐体外路系症候用シンプソン−アングス基準（ＳＡＳ）および異常無意識行動基準（ＡＩＭＳ）を用いて−２週から隔週ごとに評価した。研究過程のいずれかの時点において神経弛緩薬の投与量の増加を必要とする患者は研究からはずして適当な処置を施した。この決定は臨床的評価に基づいておこなったが、これはＰＡＮＳＳ評価点が少なくとも３０％増加することに対応した。
【００４６】
身体的な症状の訴えと状態は毎日モニターした。血液学的検査、血液化学的検査、肝臓と腎臓の機能検査および計量は隔週ごとにおこなった。血漿中のグリシン濃度を測定するための血液試料はベースラインの時点および研究の６週と１４週の終わりに採取した。採血は朝食前とその日の第１回目の投薬前におこなった。血漿中のグリシン濃度はパーキン・エルマー・ピッケリング社製のアミノ酸アナライザーを用いて測定した（リチウムｐＨ勾配およびニンヒドリンを用いるポストカラム誘導体化法を用いた）。定量はＵＶ検出器（５７０ｎｍ）を用いておこなった。計算はノルロイシン内部基準に基づいておこなった。両側検定による統計的解析はＳＰＳＳ／ＰＣコンピュータープログラムを用いておこなった。
【００４７】
結果：１２人の患者のうち１１人が最後まで研究に参加した。１人の患者はプラセボ処置の４週目で研究からはずれた。実験を完遂した患者のうちの７人に、研究の第一段階において無作為にグリシンを投与し、残りの４人の患者には無作為にプラセボを投与した。全ての患者は二重盲処置前の２週間における従命自動性および拒絶性症候に変化を示さず、安定した前処置ベースラインを示した（表１参照）。最初の二重盲処置段階でグリシンを投与した患者とプラセボを投与した患者との間には前処置ベースラインには差はみられなかった。
【００４８】
グリシンとプラセボに対する処置応答を評価するために、ｒｍＡＮＯＶＡを全患者についておこなった[種々の条件下での同一患者の従属変数ファクター：処置段階（グリシン／プラセボ）および処置週（０、２、４または６）]。経時的相互作用効果による有意な処置に反映されるように、拒絶性症候と一般的な精神病理学的症状に関しては処置法の違いによって極めて著しい相違がみられた（この場合、従命自動性症候の対応する悪化はみられなかった）（表２参照）。しかしながら、一般的な精神病理学的症状と全ＰＡＮＳＳ評価点における変化が拒絶性症候の評価点における変化に対して共変するときには、著しい処置効果もしくは経時的処置効果はみられなかったが、このことは、一般的な精神病理学的症状における変化は拒絶性症候の変化に対して二次的であることを示す。全ＰＡＮＳＳ評価点に対するグリシンの著しい効果もみられた。
【００４９】
一般的な精神病理学的効果の場合のように、全ＰＡＮＳＳ評価点の変化は拒絶性症候の変化に対しては著しい共変を示さなかった。処置の順序が全体的結果に影響を及ぼした可能性を評価するために、処置段階と処置週による拒絶性症候のｒｍＡＮＯＶＡを処置の順序に対して共変させた。経時効果による処置の有意性はＦ（３,８）＝４２.６（p＜０.０００１）であり、このことは全体的効果は処置の順序によって著しい影響を受けなかったことを示す。
【００５０】
症候変化の評価点の分析により次のことが明らかになった。拒絶性症候の著しい低減効果がグリシンの処置段階の２週にみられ、この効果は６週後のグリシン処置の終了まで漸増した（図２参照）。６週における拒絶性症候の平均低減率は３６.２±７.３％であった（プレグリシン処置のときの値: t＝０.２２、df＝１０、p＜０.０００１）。一般的な精神病理学的症状の低減効果はグリシン処置の４週後に最初にみられるようになり、この効果はその後漸増した。一般的な精神病理学的症状の平均低減率は２３.５±１０.５％であった（t＝７.４１、df＝１０、p＜０.０００１）。従命自動性症候に関してはグリシン処置群において小さな低減効果がみられた（１２.６±１８.３％）。この効果はプレグリシン処置のときの値（t＝２.２９、df＝１０、p＜０.０５）に比べると著しく大きいが、グリシン処置の６週の最後における従命自動性症候の変化はプラセボ処置の６週後の変化に比べては著しく大きくはなかった（図２参照）。
【００５１】
１１人のうちの８人の患者においては、グリシン処置中のＰＡＮＳＳ拒絶性症候の低減率は３０％もしくはそれ以上であり、また、ＰＡＮＳＳの全評価点の低減率は２５％もしくはそれ以上であった。プラセボ処置段階においてはいずれのタイプの症候に関しても低減効果はみられず、また、プラセボ処置段階の４週においては一般的な精神病理学的症状に関して小さいが有意な増加効果がみられた。
【００５２】
最初の二重盲条件下で１１人のうちの７人の患者にグリシンを投与したので、その後のプラセボ処置段階を通して症候の改善効果が維持される程度を評価することができた（図３参照）。いずれの研究段階においてもこれらの７人の患者の場合には従命自動性症候に変化はみられなかったが、拒絶性症候に関してはグリシン処置段階中に著しい改善効果がみられ[Ｆ（３,４）＝４５.７、p＝０.００１]、この効果はその後も安定に維持され、しかも、その後のプラセボ処置段階においても著しい悪化はみられなかった[Ｆ（３,４）＝１.８６、p＝０.２８]。同様に、一般的な精神病理学的症候に関してもグリシン処置段階中に著しい改善効果がみられ[Ｆ（３,４）＝１９.２、p＜０.０１]、この効果はその後も安定に維持され[Ｆ（３,４）＝２.５２、p＝０.２０]、このことはグリシン処置中にみられる改善効果が研究期間のその後の８週間においても維持されることを示す。
【実施例３】
【００５３】
ＰＡＮＳＳの５因子分析法
ＰＡＮＳＳの伝統的分析法においては、症候は従命自動性症候、拒絶性症候および一般的症候に分類されるが、５因子または７因子を組み込む別の分析法が提案されている。５因子モデルによれば症候は従命自動性のもの、拒絶性のもの、認知性のもの、うつ病性のもの、および興奮性のものに分類される。従命自動性および拒絶性症候以外の精神分裂病の程度に及ぼすグリシンの影響度を測定するために、５因子成分を用いてデータの二次分析をおこなった（図４参照）。３因子分析の場合のように、ＰＡＮＳＳ従命自動性症候に関してはグリシンまたはプラセボ処置中においては著しい低減効果はみられなかったが、プラセボ処置期間ではなくてグリシン処置期間においては著しく漸進的な改善効果がみられた[経時処置Ｆ（３,８）＝１９.５、p＜０.０００１]。しかしながら、５因子分析法によれば、うつ症候[Ｆ（３,８）＝７.２３、p＜０.０２]および認知性症候[Ｆ（３,８）＝４.７４、p＜０.０５]に対しても著しい低減効果がみられた。うつ症候[Ｆ（３,５）＝２.１３、p＝０.２２]に対しても著しい認知性症候[Ｆ（３,５）＝０.８９、p＝０.５１]における改善効果は拒絶性症候における変化に対する共変によって維持されなかった。
【００５４】
これに対して、拒絶性症候に対するグリシンの効果は認知性障害またはうつ症候における変化に対する共変によって有意に維持された[Ｆ（３,５）＝６.８、p＝０.０３２]。この低減率は拒絶性症候の場合が最も大きく（プレグリシン濃度に対して４１.０±１５.４％、p＜０.０００１）、次いでうつ症候（２３.０±１７.９％、p＝０.００２）および認知性障害（１５.２±１３.５％、p＝０.００４）の順であった。興奮症候（１１.９±２６.３％、p＝０.１７）および従命自動性症候（９.４±２０.５％、p＝０.１６）の低減率に関しては、統計的有意性はみられなかった。
【００５５】
【表１】
【００５６】
【表２】
【実施例４】
【００５７】
スタディー＃３（ジャビットおよびフルシアンテによる前記文献参照）
グリシルドデシルアミド（ＧＤＡ）は１９８６年の非特許文献２０に最初に報告されたグリシン誘導体である。当時、この化合物はＰＣＰ誘発機能高進の転換に関してはグリシンよりも著しく高い効能をもたらすことが示された。さらに、ＧＤＡの投与によって脳内の全グリシン濃度は増加しないことが示され、このことはＧＤＡがグリシンの前駆体として作用しなかったことを示す。当時、ＰＣＰ誘発機能高進に対するＧＤＡ誘発抑制機構は仮定されていなかった。
【００５８】
この研究は、ＰＣＰ誘発機能高進をＧＤＡが脳内でのグリシン再捕捉を阻害することによって抑制し、ＮＭＤＡレセプターの隣接部におけるグリシン濃度を増加させる可能性を検討するためにおこなった。この仮定はＧＤＡが脳内の全グリシン濃度を増加させることなくＰＣＰ誘発機能高進を抑制するという知見に基づくものであるが、先行文献からは明らかでない。
【００５９】
グリシン捕捉を研究するために、スプレーグ−ドウリーの成長ラットの皮質からシナプトソームのＰ2フラクションを調製し、該フラクションを人造ＣＳＦに懸濁させた。１００ｎＭの［3Ｈ］グリシンの捕捉を特定のリガンドの存在下において２５℃で所定時間にわたって測定した。インキュベーションは減圧濾過によって終了させた。グリシンの捕捉はインキュベーションの少なくとも最初の１０分間にわたっては直線的に増加した（図１０参照）。３０分後にはプラトーに達し、３０〜６０分間での捕捉結合の著しい増加はみられなかった。速度論的な結合パラメーターは非線形回帰分析によって決定した。全ての捕捉曲線は一次であった。平均のｔ1/2値は９．７±０．７分であった。冷グリシンによる［3Ｈ］グリシン捕捉の抑制に対するＩＣ50値は７８．７±３７．８μＭであった。特有の［3Ｈ］グリシン捕捉は添加したＮａ+／Ｃｌ-の消失により終了した。
【００６０】
抑制試験は０．１〜１０ｍＭのＧＤＡの不存在下または存在下でのインキュベーションを５分間おこなうことによって実施した（図１１参照）。次のいくつかの比較化合物を用いる試験もおこなった：（１）サルコシン（高い効能を有する既知のグリシン捕捉アンタゴニスト）および（２）皮質のグリシン捕捉部位に対して低い親和性を示すことが知られているグリシンエチルエステル（ＧＥＥ）とグリシンメチルエステル（ＧＭＥ）（文献１８参照）。グリシン捕捉の抑制能の順位は次の通りである：グリシン＞サルコシン＞ＧＤＡ＞ＧＥＥ＞ＧＭＥ。グリシン前駆体として作用するグリシンアミドとＤ−セリンのＩＣ50は＞１０ｍＭであった。ＧＤＡとサルコシンの効果は３０分間のインキュベーション期間を通じて有意に維持された。
【００６１】
１ｍＭの濃度のＧＤＡおよびサルコシンは［3Ｈ］グリシン捕捉の最大濃度を著しく（ｐ＜０．０５）低減させ、これらの低減率はそれぞれ２９±７％および７２±３％であった（図１１参照）。５ｍＭのＧＤＡによる［3Ｈ］グリシン捕捉の低減率は５１±１３．３％であった。グリシン捕捉の速度定数に対するこれらの薬剤の効果は著しくはなかった。なお、ＧＤＡ（７．９±２．９ｍｉｎ-1）とサルコシン（６．３±１．９ｍｉｎ-1）が存在するときのｔ1/2値はベースライン条件下の場合よりも幾分小さかった。行動研究におけるＧＤＡの有効濃度を約０．３ｍｍｏｌ／ｋｇと仮定するならば、これらの研究は、ＧＤＡが行動研究において得られる濃度と同程度の濃度においてグリシン捕捉アンタゴニストとして作用することを証明するものである。
【００６２】
ＮＭＤＡレセプターのグリシン部位におけるＧＤＡの潜在的な直接アゴニスト様効果はＮＭＤＡレセプター活性の機能プローブとしてＰＣＰレセプター結合を用いることによって排除された。このアッセイにおいては、グリシン様薬剤はＮＭＤＡアゴニスト［ＧＬＵ（グルタメートの略語）］の不存在下ではなくて存在下においては［3Ｈ］ＭＫ−８０１（メルク社製）の結合性を促進する。アッセイはラットの皮質と海馬から調製して５ｍＭのＴＲＩＳ−酢酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）中において１ｍＭの［3Ｈ］ＭＫ−８０１と特定のリガンドの存在下で１５分間インキュベートした粗製シナプス膜を用いておこなった。
【００６３】
インキュベーションはワットマンＧＦ／Ｂフィルターを用いる減圧濾過によって終了させた。非特異的結合性は１０μＭのＭＫ−８０１の存在下で測定した。ＧＬＵのみを用いるインキュベーションによって結合性は対照条件に比べて９倍増加した［ジャビットおよびフルシアンテの報文（印刷中）］。ＧＬＵとグリシンを用いるインキュベーションによって結合性は対照条件に比べて著しく増加し（２２倍）、ＧＬＵのみを用いるインキュベーションの場合に比べても２．５倍増加した。ＧＬＵとＧＤＡの共存下での結合性はＧＬＵのみの存在下での結合性に匹敵し得るものであった。
【００６４】
ＧＤＡによるグリシン捕捉アンタゴニストの特異性はＧＡＢＡ（γ−アミノ酪酸）とＧＬＵの捕捉に対するグリシン、ＧＣＡおよびＧＤＡの効果を評価することによって調べた。方法は、［3Ｈ］グリシンの代わりに１０ｎＭの［3Ｈ］ＧＡＢＡまたはＬ−［3Ｈ］ＧＬＵを使用する以外はグリシン捕捉アッセイの場合と同様である。ＧＬＵ捕捉アッセイおよびＧＡＢＡ捕捉アッセイに対してはＬ−トランス−ピロリジン−２，４−ジカルボン酸（Ｌ−ＰＤＣ）およびニペコチン酸を活性対照としてそれぞれ使用した。ＧＤＡは［3Ｈ］グリシン捕捉に対するその効果とは対照的に［3Ｈ］ＧＬＵと［3Ｈ］ＧＡＢＡの捕捉を著しく増加させた。脳内のグリシン輸送体の活性化によってシナプス前のＧＬＵとＧＡＢＡの放出がもたらされると仮定すると、ＧＬＵとＧＡＢＡの捕捉はグリシン再捕捉抑制の生体外での予想された結果となる［ジャビットおよびフルシアンテの報文（印刷中）］。
【００６５】
その後の研究により、げっ歯動物における（１）グリシン捕捉の抑制および（２）ＰＣＰ誘発機能高進の拮抗に関する数種のＧＤＡ様化合物の効能の順位について検討がされた。この研究のために、グリシルトリスカデシルアミド（ＧＴＡ）、グリシルウンデシルアミド（ＧＵＡ）およびグリシルヘキシルアミド（ＧＨＡ）を含む数種類の付加的な化合物を合成した。これらの化合物は、１２個の炭素原子を有するＧＤＡとは対照的に、アミドに結合した炭素原子数がそれぞれ１３、１１および６であるグリシンアミド誘導体である。
【００６６】
ＧＴＡはＰＣＰ誘発機能高進の抑制およびグリシン捕捉の抑制に関してＧＤＡの場合よりも高い効果を示した（図８および図９参照）。ＧＵＡは療法のアッセイにおいてより低い効果を示した。最近になって合成されたＧＨＡはグリシン捕捉の抑制に関してＧＤＡの場合に比べて約１／２０の効果しか示さなかった（図１２参照）。従来は、この化合物を０．１５ｇ／ｋｇまで投与することによってはＰＣＰ誘発機能高進の阻害に関しては効果がないとされていた（非特許文献２０参照）。
【００６７】
最近の実験においても、アンフェタミン誘発機能高進に対するＧＤＡの効果は対照条件の場合と同様であった。主としてドーパミンレセプターを阻害することによって臨床的効果をもたらす現在入手し得る抗精神病薬はげっ歯動物におけるＰＣＰ誘発機能高進を転換させるかもしれない。しかしながら、これらの薬剤はアンフェタミンによって誘発される機能高進の場合よりもＰＣＰ誘発機能高進の阻害に関する効果は低い（非特許文献１６参照）。従って、この研究においてはアンフェタミン誘発機能高進に対するＧＤＡの効果を評価した。ＰＣＰ誘発機能高進を著しく（ｔ＝３．３０、ｐ＝０．００１）抑制した投与量（０．０５ｇ／ｋｇ）のＧＤＡはアンフェタミンによって誘発された機能高進を著しく抑制しなかった（ｔ＝０．５９、ＮＳ）（図１３参照）。
【００６８】
グリシンがアンフェタミン誘発機能高進を抑制しないことが従来から知られている（このデータは示さない）。従って、この知見は、ＧＤＡが現在入手し得る抗精神病薬の場合とは異なる機構によってＰＣＰ誘発機能高進を抑制するという技術的思想を支持する。
【００６９】
要するに、この実施例はＧＤＡがグリシン捕捉を抑制することおよび投与量が０．０５ｇ／ｋｇのＧＤＡがＰＣＰ誘発機能高進を投与量が０．８ｇ／ｋｇのグリシンの場合と同程度まで抑制することを例証するものである。なお、この投与量のＧＤＡは選択された脳小室内のグリシン濃度を増加させるかもしれないが、脳内の全グリシン濃度は増加させないことが知られている。グリシン捕捉を阻害するのに有効な投与量のＧＤＡはＮＭＤＡレセプターと結合せず、また、他のアミノ酸捕捉神経伝達を抑制しない。ＧＤＡ類似化合物は皮質のグリシン捕捉の阻害能に比例してＰＣＰ誘発機能高進を抑制する。また、ＰＣＰ誘発機能高進の阻害に対して比較的有効でないことが知られているＧＤＡ類似化合物（グリシルヘキシルアミド）もグリシン捕捉の阻害に対して比較的有効でない。ＰＣＰ誘発機能高進の阻害に有効な投与量のＧＤＡはアンフェタミン誘発機能高進も阻害しない。
【００７０】
これらの知見は、グリシン捕捉を阻害する薬剤が脳のＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を行動に関連して著しく促進することに関して最初の証左を与えるものである。グリシンをげっ歯動物におけるＰＣＰ誘発機能高進を抑制する投与量と同じ量で投与すると精神分裂病の症候に顕著な改善がもたらされるという最近の臨床的知見を仮定するならば、本発明によれば、脳のグリシン捕捉を抑制するＧＤＡおよびその他の化合物が精神分裂病およびその他の精神病の処置に有効であるという知見が得られる。
【００７１】
以上の説明により、精神分裂病の症候の処置における本発明の有効性は明らかである。
【００７２】
当業者であれば現在知られているか、または将来発見される化学的構造を有するその他の天然に存在するか、または合成されるグリシン捕捉アンタゴニストを選択使用することによって抗精神病薬的効果を得ることができる。
【００７３】
また、本発明の種々の変形態様は当業者には明らかなところである。
【産業上の利用可能性】
【００７４】
本発明によれば、精神病と精神分裂病の症候群で患う患者へグリシン捕捉アンタゴニストを投与することによって、該患者を効果的に治療することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストをヒトに投与することを含む、ヒトにおけるＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達促進法。
【請求項２】
精神病で患うヒトの患者に、ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストを該患者に投与することを含む該患者の処置法。
【請求項３】
精神病が病気と関連する請求項２記載の方法。
【請求項４】
病気が重度のうつ病、躁うつ病、アルツハイマー病または外傷後ストレス症である請求項２記載の方法。
【請求項５】
精神病が薬物中毒と関連する請求項２記載の方法。
【請求項６】
薬物が解離性麻酔薬または精神刺激薬である請求項５記載の方法。
【請求項７】
精神分裂病で患うヒトの患者にＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストを投与することを含む精神分裂病の処置法。
【請求項８】
抗精神病薬も患者に投与する請求項７記載の方法。
【請求項９】
抗精神病薬が神経弛緩薬である請求項８記載の方法。
【請求項１０】
ＧＬＹＴ１またはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉が抑制される請求項１記載の方法。
【請求項１１】
ＧＬＹＴ１またはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉が抑制される請求項２記載の方法。
【請求項１２】
ＧＬＹＴ１またはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉が抑制される請求項７記載の方法。
【請求項１】
ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストをヒトに投与することを含む、ヒトにおけるＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達促進法。
【請求項２】
精神病で患うヒトの患者に、ＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストを該患者に投与することを含む該患者の処置法。
【請求項３】
精神病が病気と関連する請求項２記載の方法。
【請求項４】
病気が重度のうつ病、躁うつ病、アルツハイマー病または外傷後ストレス症である請求項２記載の方法。
【請求項５】
精神病が薬物中毒と関連する請求項２記載の方法。
【請求項６】
薬物が解離性麻酔薬または精神刺激薬である請求項５記載の方法。
【請求項７】
精神分裂病で患うヒトの患者にＮＭＤＡレセプター仲介神経伝達を促進するのに十分な量のグリシン捕捉アンタゴニストを投与することを含む精神分裂病の処置法。
【請求項８】
抗精神病薬も患者に投与する請求項７記載の方法。
【請求項９】
抗精神病薬が神経弛緩薬である請求項８記載の方法。
【請求項１０】
ＧＬＹＴ１またはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉が抑制される請求項１記載の方法。
【請求項１１】
ＧＬＹＴ１またはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉が抑制される請求項２記載の方法。
【請求項１２】
ＧＬＹＴ１またはＧＬＹＴ２仲介グリシン捕捉が抑制される請求項７記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【公開番号】特開２０１３−５６９１８（Ｐ２０１３−５６９１８Ａ）
【公開日】平成２５年３月２８日（２０１３．３．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−２５１２３３（Ｐ２０１２−２５１２３３）
【出願日】平成２４年１１月１５日（２０１２．１１．１５）
【分割の表示】特願２００９−６６５３４（Ｐ２００９−６６５３４）の分割
【原出願日】平成８年１２月５日（１９９６．１２．５）
【出願人】（５０９０４４６３７）
【氏名又は名称原語表記】Ｄａｎｉｅｌ Ｃ． ＪＡＶＩＴＴ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年３月２８日（２０１３．３．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２４年１１月１５日（２０１２．１１．１５）
【分割の表示】特願２００９−６６５３４（Ｐ２００９−６６５３４）の分割
【原出願日】平成８年１２月５日（１９９６．１２．５）
【出願人】（５０９０４４６３７）
【氏名又は名称原語表記】Ｄａｎｉｅｌ Ｃ． ＪＡＶＩＴＴ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]