グルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体、それを含有する医薬組成物およびその製造中間体
【課題】優れたヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有し、糖尿病、肥満症等の予防又は治療剤として有用なグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体の製造中間体を提供する。
【解決手段】一般式
（Ｒ１１は水素原子又はヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ１２は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、ヒドロキシ低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルコキシ基、ヒドロキシ低級アルキルチオ基等である）で表されるベンジルフェノール誘導体をその製造中間体としてグルコピラノシルオキシベンゼン誘導体を容易に製造する。
【解決手段】一般式
（Ｒ１１は水素原子又はヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ１２は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、ヒドロキシ低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルコキシ基、ヒドロキシ低級アルキルチオ基等である）で表されるベンジルフェノール誘導体をその製造中間体としてグルコピラノシルオキシベンゼン誘導体を容易に製造する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品として有用なグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、それを含有する医薬組成物およびその製造中間体に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は食生活の変化や運動不足を背景とした生活習慣病の一つである。それ故、糖尿病患者には食事療法や運動療法が実施されているが、充分なコントロールや継続的実施が困難な場合、薬物療法が併用されている。現在、糖尿病治療剤としては、ビグアナイド薬、スルホニルウレア薬やインスリン抵抗性改善薬などが使用されている。しかしながら、ビグアナイド薬には乳酸アシドーシス、スルホニルウレア薬には低血糖、インスリン抵抗性改善薬には浮腫などの副作用が認められることがある上、肥満化を促進させることが懸念されている。そのため、このような問題を解消すべく新しい作用機序による糖尿病治療剤の開発が嘱望されている。
【０００３】
近年、腎臓において過剰な糖の再吸収を阻害することで尿糖の排泄を促進させて血糖値を低下させる、新しいタイプの糖尿病治療薬の研究開発が推進されている（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏｌ．７９，ｐｐ．１５１０−１５１５（１９８７））。また、腎臓の近位尿細管のＳ１領域にＳＧＬＴ２（ナトリウム依存性グルコース輸送体２）が存在し、このＳＧＬＴ２が糸球体ろ過された糖の再吸収に主として関与していることが報告されている（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏｌ．９３，ｐｐ．３９７−４０４（１９９４））。それ故、ヒトＳＧＬＴ２を阻害することにより腎臓での過剰な糖の再吸収を抑制し、尿から過剰な糖を排泄させて血糖値を正常化することができる。従って、強力なヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有し、新しい作用機序による糖尿病治療薬の早期開発が待望される。しかも、このような尿糖排泄促進剤は過剰な血糖を尿から排泄するため、体内での糖の蓄積が減少することから、肥満化の防止効果も期待できる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明者らは、ヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有する化合物を見出すべく鋭意検討した結果、下記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体が、下記の如く優れたヒトＳＧＬＴ２阻害活性を示すという知見を得、本発明を成すに至った。
本発明は、ヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有し、腎臓での糖の再吸収を抑制し過剰な糖を尿中に排泄させることにより血糖低下作用を発揮する、下記のグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、それを含有する医薬組成物およびその製造中間体を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
即ち、本発明は、一般式
【化１】
（式中のＲ1 は水素原子またはヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ2 は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、ヒドロキシ低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルコキシ基、ヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基である）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩に関するものである。
【０００６】
本発明は、前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物に関するものである。
【０００７】
本発明は、前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩を投与することによる高血糖に起因する疾患の予防又は治療方法。
【０００８】
また、本発明は、高血糖に起因する疾患の予防又は治療用の製剤を製造するための、前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用に関するものである。
【０００９】
更には、本発明は、一般式
【化２】
（式中のＲ11は水素原子または保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ12は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基、保護基を有するヒドロキシ低級アルコキシ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基であり、但し、Ｒ11が水素原子である場合はＲ12がメチル基、エチル基、イソプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基またはメトキシ基ではない）で表されるベンジルフェノール誘導体またはその塩に関するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体は、優れたヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有している。本発明により糖尿病、糖尿病性合併症、肥満症などの予防または治療剤を提供することができる。また、本発明の前記一般式（ＩＩ）で表される化合物は、前記一般式（Ｉ）で表される化合物を製造する際の中間体として重要であり、この化合物を経由することにより本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物を容易に製造することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明において、低級アルキル基とは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のアルキル基をいい、低級アルコキシ基とは、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のアルコキシ基をいい、低級アルキルチオ基とは、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基、イソプロピルチオ基、ブチルチオ基、イソブチルチオ基、ｓｅｃ−ブチルチオ基、ｔｅｒｔ−ブチルチオ基、ペンチルチオ基、イソペンチルチオ基、ネオペンチルチオ基、ｔｅｒｔ−ペンチルチオ基、ヘキシルチオ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のアルキルチオ基をいう。ヒドロキシ低級アルキル基とは、ヒドロキシメチル基、２−ヒドロキシエチル基、１−ヒドロキシエチル基、３−ヒドロキシプロピル基、２−ヒドロキシプロピル基、１−ヒドロキシプロピル基、２−ヒドロキシ−１−メチルエチル基、４−ヒドロキシブチル基、３−ヒドロキシブチル基、２−ヒドロキシブチル基、１−ヒドロキシブチル基、５−ヒドロキシペンチル基、４−ヒドロキシペンチル基、３−ヒドロキシペンチル基、２−ヒドロキシペンチル基、１−ヒドロキシペンチル基、６−ヒドロキシヘキシル基、５−ヒドロキシヘキシル基、４−ヒドロキシヘキシル基、３−ヒドロキシヘキシル基、２−ヒドロキシヘキシル基、１−ヒドロキシヘキシル基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のヒドロキシアルキル基をいい、ヒドロキシ低級アルコキシ基とは、２−ヒドロキシエトキシ基、３−ヒドロキシプロポキシ基、２−ヒドロキシプロポキシ基、２−ヒドロキシ−１−メチルエトキシ基、４−ヒドロキシブトキシ基、３−ヒドロキシブトキシ基、２−ヒドロキシブトキシ基、５−ヒドロキシペンチルオキシ基、４−ヒドロキシペンチルオキシ基、３−ヒドロキシペンチルオキシ基、２−ヒドロキシペンチルオキシ基、６−ヒドロキシヘキシルオキシ基、５−ヒドロキシヘキシルオキシ基、４−ヒドロキシヘキシルオキシ基、３−ヒドロキシヘキシルオキシ基、２−ヒドロキシヘキシルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のヒドロキシアルコキシ基をいい、ヒドロキシ低級アルキルチオ基とは、ヒドロキシメチルチオ基、２−ヒドロキシエチルチオ基、１−ヒドロキシエチルチオ基、３−ヒドロキシプロピルチオ基、２−ヒドロキシプロピルチオ基、１−ヒドロキシプロピルチオ基、２−ヒドロキシ−１−メチルエチルチオ基、４−ヒドロキシブチルチオ基、３−ヒドロキシブチルチオ基、２−ヒドロキシブチルチオ基、１−ヒドロキシブチルチオ基、５−ヒドロキシペンチルチオ基、４−ヒドロキシペンチルチオ基、３−ヒドロキシペンチルチオ基、２−ヒドロキシペンチルチオ基、１−ヒドロキシペンチルチオ基、６−ヒドロキシヘキシルチオ基、５−ヒドロキシヘキシルチオ基、４−ヒドロキシヘキシルチオ基、３−ヒドロキシヘキシルチオ基、２−ヒドロキシヘキシルチオ基、１−ヒドロキシヘキシルチオ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のヒドロキシアルキルチオ基をいう。低級アルコキシ低級アルキル基とは、上記低級アルキル基でＯ−アルキル化された上記ヒドロキシ低級アルキル基をいい、低級アルコキシ低級アルコキシ基とは、上記低級アルキル基でＯ−アルキル化された上記ヒドロキシ低級アルコキシ基をいい、低級アルコキシ低級アルキルチオ基とは、上記低級アルキル基でＯ−アルキル化された上記ヒドロキシ低級アルキルチオ基をいう。
【００１２】
水酸基の保護基とは、ベンジル基、メトキシメチル基、アセチル基等の一般的な有機合成反応において用いられる水酸基の保護基をいう。
【００１３】
置換基Ｒ1においては、好ましくは水素原子または炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基であり、置換基Ｒ2においては、好ましくは低級アルキル基、低級アルコキシ基またはヒドロキシ低級アルキル基であり、更に好ましくは炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１〜３のアルコキシ基または炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基である。
【００１４】
前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物は、例えば、本発明の一般式（ＩＩ）で表されるベンジルフェノール誘導体を用いて、以下の方法に従い製造することができる。
【化３】
（式中のＲ11は水素原子または保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ12は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基、保護基を有するヒドロキシ低級アルコキシ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基であり、Ｘはトリクロロアセトイミドイルオキシ基、アセトキシ基、臭素原子、フッ素原子等の脱離基であり、Ｒ1 およびＲ2 は前記と同じ意味をもつ）
【００１５】
工程１
前記一般式（ＩＩ）で表されるベンジルフェノール誘導体またはその塩を２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１−Ｏ−トリクロロアセトイミドイル−α−Ｄ−グルコピラノース、１，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシルブロミド、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシルフルオリド等の前記一般式（ＩＩＩ）で表される糖供与体を用いて、不活性溶媒中、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体、トリフルオロメタンスルホン酸銀、塩化第二すず、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルなどの活性化剤の存在下に配糖化させることにより前記一般式（ＩＶ）で表される配糖体を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、塩化メチレン、トルエン、アセトニトリル、ニトロメタン、酢酸エチル、ジエチルエーテル、クロロホルム、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常−３０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。
【００１６】
工程２
前記一般式（ＩＶ）で表される配糖体をアルカリ加水分解させて水酸基の保護基を除去することにより本発明の化合物（Ｉ）を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、それらの混合溶媒などを挙げることができ、塩基性物質としては、例えば、水酸化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどを使用することができる。処理温度は通常０℃〜還流温度であり、処理時間は使用する原料物質や溶媒、処理温度などにより異なるが、通常３０分間〜６時間である。尚、水酸基の保護基の種類に応じて処理方法を常法に従い適宜変更または追加して実施することもできる。
【００１７】
前記製造方法において出発物質として用いられる本発明の前記一般式（ＩＩ）で表される化合物およびその塩は、例えば、以下の方法に従い製造することができる。
【化４】
（式中のＭは水素原子または水酸基の保護基であり、Ｒ4 は水素原子、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基または低級アルコキシカルボニル基であり、ＹおよびＺはどちらか一方がＭｇＢｒ、ＭｇＣｌ、ＭｇＩまたはリチウム原子であり、他方がホルミル基であり、Ｒ11およびＲ12は前記と同じ意味をもつ）
【００１８】
工程Ａ
前記一般式（Ｖ）で表されるベンズアルデヒド誘導体と前記一般式（ＶＩ）で表されるグリニャール試薬またはリチウム試薬若しくは前記一般式（Ｖ）で表されるグリニャール試薬またはリチウム試薬と前記一般式（ＶＩ）で表されるベンズアルデヒド誘導体を、不活性溶媒中、縮合させることにより前記一般式（ＶＩＩ）で表される化合物を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常−７８℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。
【００１９】
工程Ｂ
前記一般式（ＶＩＩ）で表される化合物を、不活性溶媒中、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬を用いて酸化することにより前記一般式（ＶＩＩＩ）で表される化合物を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１時間〜１日間である。
【００２０】
工程Ｃ
前記一般式（ＶＩＩＩ）で表される化合物の保護基Ｍを常法に従い除去した後、（１）不活性溶媒中、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等の塩基の存在下、クロロギ酸メチルと縮合し、（２）得られた炭酸エステル誘導体を水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤を用いて還元することにより、本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物を製造することができる。反応（１）において、用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、アセトニトリル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常３０分間〜１日間である。反応（２）において、用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフランと水との混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１時間〜１日間である。尚、Ｒ4 が低級アルコキシカルボニル基である場合は、不活性溶媒中、水素化リチウムアルミニウム等の還元剤を用いてヒドロキシメチル基に還元した後、常法に従い水酸基を保護することにより本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物に誘導することができる。還元時に用いられる溶媒としては、例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。また、本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物は、常法に従いナトリウム塩、カリウム塩等の塩に変換することができる。
【００２１】
工程Ｄ
前記一般式（ＶＩＩ）で表される化合物を、不活性溶媒中、塩酸等の酸の存在下または非存在下、パラジウム炭素粉末等のパラジウム系触媒を用いて接触還元した後、必要に応じて保護基を常法に従い除去や導入することにより本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物を製造することができる。接触還元において用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、酢酸、イソプロパノール、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常３０分間〜１日間である。尚、Ｒ4 が低級アルコキシカルボニル基である場合は、不活性溶媒中、水素化リチウムアルミニウム等の還元剤を用いてヒドロキシメチル基に還元した後、常法に従い水酸基を保護することにより本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物に誘導することができる。還元時に用いられる溶媒としては、例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。また、本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物は、常法に従いナトリウム塩、カリウム塩等の塩に変換することができる。
【００２２】
前記製造方法において得られる本発明の化合物は、慣用の分離手段である分別再結晶法、クロマトグラフィーを用いた精製法、溶媒抽出法、固相抽出法等により単離精製することができる。
【００２３】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体は、常法により、その薬理学的に許容される塩とすることができる。このような塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等の無機塩基との塩を挙げることができる。
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物には、水和物やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００２４】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物およびその薬理学的に許容される塩は、優れたヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有しており、糖尿病、糖尿病性合併症、肥満症などの予防または治療剤として非常に有用である。例えば、下記のヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用測定試験において、本発明の化合物は強力なヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を発揮した。
【００２５】
本発明の医薬品組成物を実際の治療に用いる場合、用法に応じ種々の剤型のものが使用される。このような剤型としては例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、液剤、軟膏剤、坐剤、貼付剤などを挙げることができ、経口または非経口的に投与される。
【００２６】
これらの医薬品組成物は、その剤型に応じ調剤学上使用される手法により適当な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤などの医薬品添加物と適宜混合または希釈・溶解し、常法に従い調剤することにより製造することができる。
【００２７】
本発明の医薬品組成物を実際の治療に用いる場合、その有効成分である前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩の投与量は患者の年齢、性別、体重、疾患および治療の程度等により適宜決定されるが、経口投与の場合成人１日当たり概ね０．１〜１０００ｍｇの範囲で、非経口投与の場合は、成人１日当たり概ね０．０１〜３００ｍｇの範囲で、一回または数回に分けて適宜投与することができる。
【実施例】
【００２８】
本発明の内容を以下の参考例、実施例および試験例でさらに詳細に説明するが、本発明はその内容に限定されるものではない。
【００２９】
参考例１
４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼン
水素化ナトリウム（６０％、０．９７ｇ）、３−（４−ブロモフェニル）−１−プロパノール（１．０ｇ）及びベンジルブロミド（０．６９ｍＬ）のベンゼン（２４ｍＬ）懸濁液を、加熱還流下７時間撹拌した。室温に冷却後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を水（４０ｍＬ）、飽和食塩水（４０ｍＬ）にて洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）にて精製し、４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼン（１．４ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.85-2.00 (2H, m), 2.60-2.75 (2H, m), 3.47 (2H, t, J=6.2Hz), 4.50 (2H, s), 7.00-7.10 (2H, m), 7.20-7.45 (7H, m)
【００３０】
参考例２
４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチル
アルゴン雰囲気下１−ブロモ−４−エチルベンゼン（０．４１ｍＬ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液に、−７８℃にて１．４５ｍｏｌ／Ｌのｔｅｒｔ−ブチルリチウムｎ−ペンタン溶液（２．３ｍＬ）を加えた。−７８℃にて１０分間撹拌後、反応混合物に４−ホルミル−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．１８ｇ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下４５分間撹拌後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液および水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１)で精製し、ジフェニルメタノール体（０．２７ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．２７ｇ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、濃塩酸（０．０８ｍＬ）および１０％パラジウムカーボン粉末（５４ｍｇ）を加えた。水素雰囲気下室温にて１８時間撹拌した後、触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１)で精製し、４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．２０ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.22 (3H, t, J=7.6Hz), 2.62 (2H, q, J=7.6Hz), 3.89 (3H, s), 4.00 (2H, s), 5.01 (1H, s), 7.05-7.25 (5H, m), 7.47 (1H, d, J=1.6Hz), 7.56 (1H, dd,J=1.6, 7.8Hz)
【００３１】
参考例３
３−ヒドロキシ−４−（４−プロポキシベンジル)安息香酸メチル
アルゴン雰囲気下１−アリルオキシ−４−ブロモベンゼン（３．１ｇ）のテトラヒドロフラン（７０ｍＬ）溶液に、−７８℃にて１．４５ｍｏｌ／Ｌのｔｅｒｔ−ブチルリチウムｎ−ペンタン溶液（１１ｍＬ）を加えた。−７８℃にて５分間撹拌後、反応混合物に４−ホルミル−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．８９ｇ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下３０分間撹拌後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液および水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１)で精製し、ジフェニルメタノール体（０．９９ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．９９ｇ）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウムカーボン粉末（０．３０ｇ）を加えた。水素雰囲気下室温にて２４時間撹拌した後、触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製し、３−ヒドロキシ−４−（４−プロポキシベンジル)安息香酸メチル（０．５０ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.02 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 3.80-3.95 (5H, m), 3.97 (2H, s), 4.99 (1H, s), 6.75-6.90 (2H, m), 7.05-7.20 (3H, m), 7.47 (1H, d, J=1.5Hz), 7.56 (1H, dd, J=1.5, 7.8Hz)
【００３２】
参考例４
３−ヒドロキシ−４−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕安息香酸メチル
アルゴン雰囲気下２−（４−ブロモフェニル)エチルアルコール（１．７ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）溶液に、−７８℃にて１．４５ｍｏｌ／Ｌのｔｅｒｔ−ブチルリチウムｎ−ペンタン溶液（１２．６ｍＬ）を加えた。−７８℃にて１０分間撹拌後、反応混合物に４−ホルミル−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．５０ｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下３０分間撹拌後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液および水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１／３）で精製し、ジフェニルメタノール体（０．２８ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．２８ｇ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウムカーボン粉末（０．１４ｇ）を加えた。水素雰囲気下室温にて１４時間撹拌した後、触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、３−ヒドロキシ−４−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕安息香酸メチル（０．２６ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.37 (1H, t, J=5.9Hz), 2.84 (2H, t, J=6.5Hz), 3.75-3.95 (5H, m), 4.01 (2H, s), 5.10 (1H, s), 7.05-7.25 (5H, m), 7.47 (1H, d, J=1.6Hz), 7.56 (1H, dd, J=1.6, 7.8Hz)
【００３３】
参考例５
２−（４−イソブチルベンジル）フェノール
２−ベンジルオキシブロモベンゼン（０．２０ｇ）、金属マグネシウム（０．０２６ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）よりグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬を４−イソブチルベンズアルデヒド（０．１６ｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に加え、室温にて３０分間撹拌した。反応混合物をアミノプロピルシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：テトラヒドロフラン）で精製し、ジフェニルメタノール体（０．２３ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体をエタノール（３ｍＬ）及び濃塩酸（０．１ｍＬ）に溶解し、触媒量の１０％パラジウムカーボン粉末を加え、水素雰囲気下室温にて一晩撹拌した。触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／ヘキサン＝１／１）にて精製し２−（４−イソブチルベンジル）フェノール（０．１０ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
0.89 (6H, d, J=6.6Hz), 1.75-1.90 (1H, m), 2.43 (2H, d, J=7.2Hz), 3.97 (2H, s), 4.66 (1H, s), 6.75-6.85 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20 (6H, m)
【００３４】
参考例６
２−（４−イソプロポキシベンジル）フェノール
４−イソブチルベンズアルデヒドの代わりに４−イソプロポキシベンズアルデヒドを用いて、参考例５と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.31 (6H, d, J=6.1Hz), 3.93 (2H, s), 4.50 (1H, heptet, J=6.1Hz), 4.72 (1H, s), 6.75-6.85 (3H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (4H, m)
【００３５】
参考例７
２−（４−エトキシベンジル）フェノール
４−エトキシブロモベンゼン（１．５ｇ）、金属マグネシウム（０．１９ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）からグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬溶液に２−ベンジルオキシベンズアルデヒド（１．１ｇ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液を滴下し、室温で３０分間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にて精製し、ジフェニルメタノール体（１．７ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（１．７ｇ）をエタノール（２５ｍＬ）に溶解し、濃塩酸（０．４２ｍＬ）及び触媒量の１０％パラジウムカーボン粉末を加え、水素雰囲気下、室温で１８時間撹拌した。触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチル（１００ｍＬ）を加え、飽和重曹水（３０ｍＬ）及び飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝８／１）にて精製し、２−（４−エトキシベンジル）フェノール（０．８５ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.39 (3H, t, J=7.1Hz), 3.93 (2H, s), 4.00 (2H, q, J=7.1Hz), 4.72 (1H, s), 6.75-6.85 (3H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (4H, m)
【００３６】
参考例８
２−〔４−（３−ベンゾイルオキシプロピル）ベンジル〕フェノール
４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼン（３．２ｇ）、金属マグネシウム（０．２５ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（１０．５ｍＬ）よりグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬溶液に２−（メトキシメトキシ）ベンズアルデヒド（１．１ｇ）のテトラヒドロフラン（２４ｍＬ）溶液を加え６５℃で２５分間撹拌した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にて精製し、ジフェニルメタノール体（２．５ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（２．５ｇ）をエタノール（４２ｍＬ）に溶解し、触媒量の１０％パラジウムカーボン粉末を加え、水素雰囲気下、室温で７．５時間撹拌した。触媒をろ去し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／２）にて精製し、フェニルプロパノール体（１．６ｇ）を得た。得られたフェニルプロパノール体（１．６ｇ）を塩化メチレン（２９ｍＬ）に溶解し、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（０．０６９ｇ）、トリエチルアミン（１．０ｍＬ）及びベンゾイルクロリド（０．７９ｍＬ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（１００ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）を加え有機層を分取した。抽出液を飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）にて精製し、エステル体（２．２ｇ）を得た。得られたエステル体（２．２ｇ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．２１ｇ）及びメタノール（２８ｍＬ）の混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にて精製し、２−〔４−（３−ベンゾイルオキシプロピル）ベンジル〕フェノール（１．８ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
2.00-2.15 (2H, m), 2.70-2.80 (2H, m), 3.96(2H, s), 4.33 (2H, t, J=6.5Hz), 4.74 (1H, brs), 6.75-6.85 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (6H, m), 7.35-7.50 (2H, m), 7.50-7.65 (1H, m), 8.00-8.10 (2H, m)
【００３７】
参考例９
２−〔４−（２−ベンゾイルオキシエチル）ベンジル〕フェノール
４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼンの代わりに４−（２−ベンジルオキシエチル）ブロモベンゼンを用いて、参考例８と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
3.04 (2H, t, J=7.1Hz), 3.98 (2H, s), 4.51 (2H, t, J=7.1Hz), 4.66 (1H, s), 6.75-6.85 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.25 (6H, m), 7.35-7.50 (2H, m), 7.50-7.60 (1H, m), 7.95-8.05 (2H, m)
【００３８】
参考例１０
５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル)フェノール
水素化リチウムアルミニウム（９５ｍｇ）のジエチルエーテル（１０ｍＬ）懸濁液に、４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．２７ｇ）のジエチルエーテル（５ｍＬ）溶液を氷冷下加えた。４５分間加熱還流した後、氷冷下水（０．１ｍＬ）、１５％水酸化ナトリウム水溶液（０．１ｍＬ）、水（０．３ｍＬ）の順に反応混合物に加えた。室温にて５分間撹拌後、混合物を０．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸中にあけ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、還元体（０．２２ｇ）を得た。得られた還元体（０．２２ｇ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解し、酢酸ビニル（２ｍＬ）およびビス(ジブチル塩化すず)オキシド（２４ｍｇ）を加え、３０℃にて１９時間撹拌した。反応混合物を直接シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製し、５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル)フェノール（０．２１ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.21 (3H, t, J=7.6Hz), 2.09 (3H, s), 2.61 (2H, q, J=7.6Hz), 3.95 (2H, s), 4.74 (1H, s), 5.03 (2H, s), 6.80 (1H, d, J=1.3Hz), 6.80-6.90 (1H, m),7.05-7.20 (5H, m)
【００３９】
参考例１１
５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル)フェノール
４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチルの代わりに３−ヒドロキシ−４−（４−プロポキシベンジル）安息香酸メチルを用いて、参考例１０と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.02 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 2.09 (3H, s), 3.88 (2H, t, J=6.6Hz), 3.91 (2H, s), 5.02 (2H, s), 5.28 (1H, s), 6.70-6.90 (4H, m), 7.00-7.20 (3H, m)
【００４０】
参考例１２
２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェノール
４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチルの代わりに３−ヒドロキシ−４−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕安息香酸メチルを用いて、参考例１０と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
2.03 (3H, s), 2.09 (3H, s), 2.90 (2H, t, J=7.1Hz), 3.96 (2H, s), 4.25 (2H, t, J=7.1Hz), 4.82 (1H, s), 5.03 (2H, s), 6.80 (1H, d, J=1.5Hz), 6.87(1H, dd, J=1.5, 7.7Hz), 7.05-7.20 (5H, m)
【００４１】
参考例１３
２−（４−エチルチオベンジル）フェノール
１−ブロモ−４−（エチルチオ）ベンゼン（１．１ｇ）、金属マグネシウム（０．１２ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（５ｍＬ）よりグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬溶液に２−（メトキシメトキシ）ベンズアルデヒド（０．５６ｇ）のテトラヒドロフラン（１２ｍＬ）溶液を加え、６５℃で１０分間撹拌した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（８０ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）にて精製し、ジフェニルメタノール体（０．９１ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．９０ｇ）を塩化メチレン（１５ｍＬ）に溶解し、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（１，１，１−トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズイオドキソール−３（１Ｈ）−オン）（１．５ｇ）を加え、２５℃にて２６時間撹拌した。反応混合物にジエチルエーテル（７５ｍＬ）及び１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）を加え激しく撹拌後、有機層を分取した。有機層を１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）、水（３０ｍＬ×３回）及び飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１５／１〜９／１）にて精製し、ケトン体（０．８２ｇ）を得た。得られたケトン体（０．８１ｇ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．１０ｇ）及びメタノール（１４ｍＬ）の混合物を６０℃で４時間撹拌した。室温に冷却後、反応混合物を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１５／１）にて精製し、脱保護体（０．６９ｇ）を得た。得られた脱保護体（０．６８ｇ）をテトラヒドロフラン（１１ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．４１ｍＬ）及びクロロギ酸メチル（０．２２ｍＬ）を加え、２５℃で１時間撹拌した。さらにトリエチルアミン（０．１１ｍＬ）及びクロロギ酸メチル（０．０６１ｍＬ）を加え、３０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン（１４ｍＬ）及び水（７ｍＬ）に溶解し、水素化ホウ素ナトリウム（０．４０ｇ）を加え、２５℃で７時間撹拌した。１ｍｏｌ／Ｌの塩酸（１５ｍＬ）を滴下し、酢酸エチル（７５ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）、飽和重曹水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝８／１）にて精製し、２−（４−エチルチオベンジル）フェノール（０．６２ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.29 (3H, t, J=7.3Hz), 2.90 (2H, q, J=7.3Hz), 3.96 (2H, s), 4.62 (1H, s), 6.75-6.80 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (4H, m), 7.20-7.30 (2H, m)
【００４２】
参考例１４
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノール（４６ｍｇ）と２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１−Ｏ−トリクロロアセトイミドイル−α−Ｄ−グルコピラノース（０．１３ｇ）の塩化メチレン（２ｍＬ）溶液に、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（０．０３３ｍＬ）を加え室温にて１時間撹拌した。反応混合物をアミノプロピルシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン）にて精製し、２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（０．１１ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.91 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 3.77 (3H, s), 3.80-3.95 (3H, m), 4.17 (1H, dd, J=2.5, 12.2Hz), 4.29 (1H, dd, J=5.5, 12.2Hz), 5.11 (1H, d, J=7.5Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.75-6.85 (2H, m), 6.95-7.10 (5H, m), 7.10-7.25 (1H, m)
【００４３】
参考例１５
２−（４−メチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−メチルベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.89 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.30 (3H, s), 3.80-3.95 (3H, m), 4.17 (1H, dd, J=2.5, 12.3Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.5, 12.3Hz), 5.11 (1H, d, J=7.5Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.90-7.20 (8H, m)
【００４４】
参考例１６
２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−エチルベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.20 (3H, t, J=7.6Hz), 1.87 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 2.60 (2H, q, J=7.6Hz), 3.80-4.00 (3H, m), 4.18 (1H, dd, J=2.3, 12.2Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.4, 12.2Hz), 5.11 (1H, d, J=7.5Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.90-7.25 (8H, m)
【００４５】
参考例１７
２−（４−イソブチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−イソブチルベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
0.88 (6H, d, J=6.6Hz), 1.75-1.90 (1H, m), 1.87 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 2.42 (2H, d, J=7.2Hz), 3.80-3.95 (3H, m), 4.18 (1H, dd, J=2.4, 12.3Hz), 4.29 (1H, dd, J=5.5, 12.3Hz), 5.11 (1H, d, J=7.6Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.90-7.25 (8H, m)
【００４６】
参考例１８
２−（４−エトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−エトキシベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.39 (3H, t, J=7.0Hz), 1.91 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 3.80-3.95 (3H, m), 3.99 (2H, q, J=7.0Hz), 4.18 (1H, dd, J=2.5, 12.3Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.6, 12.3Hz), 5.10 (1H, d, J=7.7Hz), 5.15-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.75-6.85 (2H, m), 6.95-7.10 (5H, m), 7.10-7.20 (1H, m)
【００４７】
参考例１９
２−（４−イソプロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−イソプロポキシベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.30 (6H, d, J=6.0Hz), 1.90 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 3.80-3.90 (3H, m), 4.18 (1H, dd, J=2.3, 12.3Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.5, 12.3Hz), 4.48 (1H, heptet, J=6.0Hz), 5.10 (1H, d, J=7.7Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.70-6.85 (2H, m), 6.90-7.10 (5H, m), 7.10-7.20 (1H, m)
【００４８】
参考例２０
５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル)フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.20 (3H, t, J=7.6Hz), 1.88 (3H, s), 2.02 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.09 (3H, s), 2.60 (2H, q, J=7.6Hz), 3.80-3.95 (3H, m), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 12.3Hz), 4.27 (1H, dd, J=5.3, 12.3Hz), 5.00-5.10 (2H, m), 5.13 (1H, d, J=7.4Hz), 5.15-5.40 (3H, m), 6.95-7.15 (7H, m)
【００４９】
参考例２１
５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル)フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.01 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 1.92 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.09 (3H, s), 3.80-3.95 (5H, m), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 12.3Hz), 4.27 (1H, dd, J=5.3, 12.3Hz), 5.00-5.10 (2H, m), 5.12 (1H, d, J=7.4Hz), 5.15-5.40 (3H, m), 6.75-6.85 (2H, m), 6.95-7.10 (5H, m)
【００５０】
参考例２２
２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.89 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.09 (3H, s), 2.88 (2H, t, J=7.1Hz), 3.85-3.95 (3H, m), 4.15-4.35 (4H, m), 5.00-5.10 (2H, m), 5.13 (1H, d, J=7.5Hz), 5.15-5.40 (3H, m), 6.95-7.15(7H, m)
【００５１】
実施例１
２−（４−メトキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（０．１１ｇ）のメタノール（４ｍＬ）溶液に、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．１２ｍＬ）を加え、室温にて３０分間撹拌した。溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／メタノール＝１０／１）で精製し、２−（４−メトキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（６５ｍｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.1, 12.1Hz), 3.73 (3H, s), 3.80-4.00 (2H, m), 4.03 (1H, d, J=15.1Hz), 4.91 (1H, d, J=7.4Hz), 6.75-6.85 (2H,m), 6.85-6.95 (1H, m), 6.95-7.10 (1H, m), 7.10-7.20 (4H, m)
【００５２】
実施例２
２−（４−メチルベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−メチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
2.27 (3H, s), 3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.2, 12.0Hz), 3.80-3.90 (1H, m), 3.94 (1H, d, J=15.0Hz), 4.05 (1H, d, J=15.0Hz), 4.85-4.95 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 6.95-7.20 (7H, m)
【００５３】
実施例３
２−（４−エチルベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.15-1.25 (3H, m), 2.50-2.65 (2H, m), 3.35-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (1H,m), 3.80-4.00 (2H, m), 4.06 (1H, d, J=14.9Hz), 4.85-5.00 (1H, m), 6.85-7.00 (1H, m), 7.00-7.20 (7H, m)
【００５４】
実施例４
２−（４−イソブチルベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−イソブチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
0.80-0.95 (6H, m), 1.70-1.90 (1H, m), 2.41 (2H, d, J=7.1Hz), 3.30-3.55 (4H, m), 3.60-3.75 (1H, m), 3.80-3.95 (1H, m), 3.95 (1H, d, J=15.0Hz), 4.06 (1H, d, J=15.0Hz), 4.85-4.95 (1H, m), 6.80-7.20 (8H, m)
【００５５】
実施例５
２−（４−エトキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−エトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.35 (3H, t, J=6.8Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.60-3.75 (1H, m), 3.80-4.10 (5H, m), 4.90 (1H, d, J=7.1Hz), 6.70-6.85 (2H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20 (5H, m)
【００５６】
実施例６
２−（４−イソプロポキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−イソプロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.27 (6H, d, J=6.0Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.4, 12.1Hz),3.88 (1H, dd, J=2.0, 12.1Hz), 3.91 (1H, d, J=15.0Hz), 4.02 (1H, d, J=15.0Hz), 4.51 (1H, heptet, J=6.0Hz), 4.91 (1H, d, J=7.7Hz), 6.70-6.85 (2H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.10 (1H, m), 7.10-7.20 (4H, m)
【００５７】
実施例７
５−ヒドロキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.02 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 3.30-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (1H, m), 3.80-3.95 (4H, m), 4.00 (1H, d, J=15.0Hz), 4.54 (2H, s), 4.93 (1H, d, J=7.4Hz), 6.70-6.85 (2H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.02 (1H, d, J=7.7Hz), 7.05-7.20 (3H, m)
【００５８】
実施例８
２−（４−エチルベンジル）−５−ヒドロキシメチルフェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.19 (3H, t, J=7.6Hz), 2.57 (2H, q, J=7.6Hz), 3.30-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (1H, m), 3.85-4.00 (2H, m), 4.04 (1H, d, J=15.0Hz), 4.54 (2H, s), 4.93 (1H, d, J=7.4Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.02 (1H, d, J=7.7Hz), 7.06 (2H,d, J=8.1Hz), 7.10-7.20 (3H, m)
【００５９】
実施例９
２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕−５−ヒドロキシメチルフェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
2.76 (2H, t, J=7.1Hz), 3.30-3.55 (4H, m), 3.60-3.75 (3H, m), 3.85-4.00 (2H, m), 4.05 (1H, d, J=14.6Hz), 4.54 (2H, s), 4.92 (1H, d, J=7.2Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.03 (1H, d, J=7.9Hz), 7.09 (2H, d, J=7.8Hz), 7.10-7.20(3H, m)
【００６０】
実施例１０
２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−〔４−（２−ベンゾイルオキシエチル）ベンジル〕フェノール（０．４９ｇ）及び１，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１．７ｇ）のトルエン（５．２ｍＬ）及び塩化メチレン（２．２ｍＬ）溶液に、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（０．５６ｍＬ）を加え、２５℃で８時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７０ｍＬ）と飽和重曹水（２５ｍＬ）を加え、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をメタノール（５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．１４ｍＬ）を加え、２５℃で１２．５時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７５ｍＬ）と水（２０ｍＬ）を加え、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をメタノール（７．５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．０８５ｍＬ）を加え、２５℃で５時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／メタノール＝４／１）にて精製した。溶媒を減圧下留去し、残渣にジエチルエーテルを加えて、析出物をろ取した。得られた固体をジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥し、２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（０．４７ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
2.76 (2H, t, J=7.1Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (3H, m), 3.88 (1H, dd, J=1.8, 11.8Hz), 3.95 (1H, d, J=15.2Hz), 4.07 (1H, d, J=15.2Hz), 4.90(1H, d, J=7.4Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20 (7H, m)
【００６１】
実施例１１
２−〔４−（３−ヒドロキシプロピル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−〔４−（２−ベンゾイルオキシエチル）ベンジル〕フェノールの代わりに２−〔４−（３−ベンゾイルオキシプロピル）ベンジル〕フェノールを用いて、実施例１０と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.70-1.85 (2H, m), 2.55-2.65 (2H, m), 3.30-3.60 (6H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.2, 11.9Hz), 3.88 (1H, dd, J=2.0, 11.9Hz), 3.95 (1H, d, J=15.1Hz), 4.06 (1H, d, J=15.1Hz), 4.90 (1H, d, J=7.3Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20(7H, m)
【００６２】
実施例１２
２−（４−エチルチオベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−エチルチオベンジル）フェノール（０．５１ｇ）及び１，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（２．４ｇ）のトルエン（６．３ｍＬ）及び塩化メチレン（２．７ｍＬ）溶液に、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（０．７８ｍＬ）を加え、室温で９時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７０ｍＬ）と飽和重曹水（２５ｍＬ）を加え有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をメタノール（１０．５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．０８ｍＬ）を加え、２５℃で１８時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７５ｍＬ）と水（２０ｍＬ）を加え、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／メタノール＝１０／１）にて精製した。溶媒を減圧下留去し、残渣にジエチルエーテルを加えて、析出物をろ取した。得られた無色の固体をジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥し、２−（４−エチルチオベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（０．５１ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.24 (3H, t, J=7.3Hz), 2.88 (2H, q, J=7.3Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.0, 12.2Hz), 3.88 (1H, dd, J=2.0, 12.2Hz), 3.95 (1H, d, J=15.1Hz), 4.08 (1H, d, J=15.1Hz), 4.91 (1H, d, J=7.3Hz), 6.85-7.00 (1H, m), 7.00-7.10 (1H, m), 7.10-7.30 (6H, m)
【００６３】
試験例１
ヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用確認試験
１）ヒトＳＧＬＴ２発現プラスミドベクターの作製
ＳＵＰＥＲＳＣＲＩＰＴ Ｐｒｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）を用いて、ヒト腎臓由来のｔｏｔａｌ ＲＮＡ（Ｏｒｉ ｇｅｎｅ製）をオリゴｄＴをプライマーとして逆転写し、ＰＣＲ増幅用ｃＤＮＡライブラリーを作製した。上記ヒト腎ｃＤＮＡライブラリーを鋳型として、配列番号１及び２で示される下記のオリゴヌクレオチド０７０２Ｆ及び０７１２Ｒをプライマーに用い、Ｐｆｕ ＤＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製）を用いたＰＣＲ反応によりヒトＳＧＬＴ２をコードするＤＮＡ断片を増幅した。増幅されたＤＮＡ断片をクローニング用ベクターｐＣＲ−Ｂｌｕｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）にこのキットの標準法に従いライゲーションした。常法により大腸菌ＨＢ１０１コンピテントセル（東洋紡（株）製）に導入した後、形質転換株をカナマイシン５０μｇ／ｍＬを含むＬＢ寒天培地で選択した。この形質転換株の１つからプラスミドＤＮＡを抽出精製し、配列番号３及び４で示される下記のオリゴヌクレオチド、０７１４Ｆおよび０７１５Ｒをプライマーとして用い、Ｐｆｕ ＤＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製）を用いたＰＣＲ反応によりヒトＳＧＬＴ２をコードするＤＮＡ断片を増幅した。増幅されたＤＮＡ断片を制限酵素ＸｈｏＩ及びＨｉｎｄＩＩＩで消化した後、Ｗｉｚａｒｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ製）により精製した。この精製したＤＮＡ断片を融合化蛋白質発現用ベクターｐｃＤＮＡ３．１（−）Ｍｙｃ／Ｈｉｓ−Ａ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）の対応する制限酵素部位に組み込んだ。常法により大腸菌ＨＢ１０１コンピテントセル（東洋紡（株）製）に導入した後、形質転換株をアンピシリン１００μｇ／ｍＬを含むＬＢ寒天培地で選択した。この形質転換株からプラスミドＤＮＡを抽出精製し、ベクターｐｃＤＮＡ３．１（−）Ｍｙｃ／Ｈｉｓ−Ａのマルチクローニング部位に挿入されたＤＮＡ断片の塩基配列を調べた。Ｗｅｌｌｓらにより報告されたヒトＳＧＬＴ２（Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，Ｖｏｌ．２６３，ｐｐ．４５９−４６５（１９９２））に対し、このクローンは１塩基の置換（４３３番目のイソロイシンをコードするＡＴＣがＧＴＣに置換）を有していた。この結果４３３番目の残基のイソロイシンがバリンに置換したクローンを得た。このカルボキシ末端側最終残基のアラニンの次から配列番号５で示されるペプチドを融合化したヒトＳＧＬＴ２を発現するプラスミドベクターをＫＬ２９とした。
配列番号１ ＡＴＧＧＡＧＧＡＧＣＡＣＡＣＡＧＡＧＧＣ
配列番号２ ＧＧＣＡＴＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＧＡ
配列番号３ ＡＡＣＣＴＣＧＡＧＡＴＧＧＡＧＧＡＧＣＡＣＡＣＡＧＡＧＧＣ
配列番号４ ＡＡＣＡＡＧＣＴＴＧＧＣＡＴＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＧＡ
配列番号５ ＫＬＧＰＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬＮＳＡＶＤＨＨＨＨＨＨ
【００６４】
２）ヒトＳＧＬＴ２一過性発現細胞の調製
ヒトＳＧＬＴ２発現プラスミドＫＬ２９を電気穿孔法によりＣＯＳ−７細胞（ＲＩＫＥＮ ＣＥＬＬ ＢＡＮＫ ＲＣＢ０５３９）に導入した。電気穿孔法はジーンパルサーＩＩ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用い、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ Ｉ培地（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）５００μＬに対しＣＯＳ−７細胞２×１０6 個とＫＬ２９ ２０μｇを含む０．４ｃｍキュベット内で０．２９０ｋＶ、９７５μＦの条件下行った。遺伝子導入後、細胞を遠心分離により回収し細胞１キュベット分に対し１ｍＬのＯＰＴＩ−ＭＥＭ Ｉ培地を加え懸濁した。この細胞懸濁液を９６ウェルプレートの１ウェルあたり１２５μＬずつ分注した。３７℃、５％ＣＯ2 の条件下一晩培養した後、１０％ウシ胎仔血清（三光純薬（株）製）、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬペニシリンＧナトリウム（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）、１００μｇ／ｍＬ硫酸ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）を含むＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）を１ウェルあたり１２５μＬずつ加えた。翌日まで培養しメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド取り込み阻害活性の測定に供した。
【００６５】
３）メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド取り込み阻害活性の測定
ヒトＳＧＬＴ２一過性発現ＣＯＳ−７細胞の培地を除去し、１ウェルあたり前処置用緩衝液（１４０ｍＭ塩化コリン、２ｍＭ塩化カリウム、１ｍＭ塩化カルシウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、１０ｍＭ２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸、５ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを含む緩衝液ｐＨ７．４）を２００μＬ加え、３７℃で１０分間静置した。前処置用緩衝液を除去し、再度同一緩衝液を２００μＬ加え、３７℃で１０分間静置した。試験化合物を含む取り込み用緩衝液（１４０ｍＭ塩化ナトリウム、２ｍＭ塩化カリウム、１ｍＭ塩化カルシウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、５ｍＭメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド、１０ｍＭ２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸、５ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを含む緩衝液ｐＨ７．４）５２５μＬに７μＬのメチル−α−Ｄ−（Ｕ−１４Ｃ）グルコピラノシド（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ製）を加え混合し、取り込み用緩衝液とした。対照群に試験化合物を含まない取り込み用緩衝液を調製した。また試験化合物およびナトリウム非存在下の基礎取り込み測定用に塩化ナトリウムに替えて１４０ｍＭの塩化コリンを含む基礎取り込み用緩衝液を同様に調製した。前処置用緩衝液を除去し、取り込み用緩衝液を１ウェルあたり７５μＬずつ加え３７℃で２時間静置した。取り込み用緩衝液を除去し、洗浄用緩衝液（１４０ｍＭ塩化コリン、２ｍＭ塩化カリウム、１ｍＭ塩化カルシウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、１０ｍＭメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド、１０ｍＭ２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸、５ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを含む緩衝液ｐＨ７．４）を１ウェルあたり２００μＬずつ加えすぐに除去した。この洗浄操作をさらに２回行い、０．２Ｎ水酸化ナトリウムを１ウェルあたり７５μＬずつ加え細胞を可溶化した。可溶化液をピコプレート（Ｐａｃｋａｒｄ製）に移し、１５０μＬのマイクロシンチ４０（Ｐａｃｋａｒｄ製）を加えマイクロプレートシンチレーションカウンター トップカウント（Ｐａｃｋａｒｄ製）にて放射活性を計測した。対照群の取り込み量から基礎取り込み量を差し引いた値を１００％とし、取り込み量の５０％阻害する濃度（ＩＣ50値）を濃度−阻害曲線から最小二乗法により算出した。その結果は以下の表１の通りである。
【００６６】
【表１】
【００６７】
試験例２
尿糖排泄促進作用確認試験
実験動物として一晩絶食したＳＤ系ラット（ＳＬＣ、雄性７週齢、１８０〜２４０ｇ）を用いた。試験化合物１０ｍｇはエタノール３００μＬに懸濁または溶解させ、ポリエチレングリコール４００ １．２ｍＬおよび生理食塩水１．５ｍＬを加えて溶解し、３．３ｍｇ／ｍＬ溶液とした。この溶解液３００μＬを希釈溶液２．７ｍＬ（生理食塩水：ポリエチレングリコール４００：エタノール＝５：４：１）に溶解し、０．３３（ｍｇ／ｍＬ）の濃度の溶解液を調製した。ラットの体重を測定し、試験化合物溶液を３ｍＬ／ｋｇの用量（１ｍｇ／ｋｇ）で尾静脈内投与した。対照群用に生理食塩水：ポリエチレングリコール４００：エタノール＝５：４：１のみを３ｍＬ／ｋｇの用量で尾静脈内投与した。尾静脈内投与直後に２００ｇ／Ｌグルコース水溶液を１０ｍＬ／ｋｇの用量（２ｇ／ｋｇ）で経口投与した。尾静脈内投与は２６Ｇ注射針および１ｍＬシリンジを用いて行った。経口投与はラット用ゾンデおよび２．５ｍＬシリンジを用いて行った。１群あたりの頭数は２又は３頭とした。グルコース投与終了後から代謝ケージにて採尿を行った。採尿時間はグルコース投与後２４時間とした。採尿終了後、尿量を記録し、尿中に含まれるグルコース濃度を測定した。グルコース濃度は臨床検査用キット：グルコースＢテストワコー（和光純薬（株）製）にて定量した。尿量、尿中グルコース濃度および体重から２４時間での体重２００ｇ当たりの尿糖排泄量を求めた。その結果は以下の表２の通りである。
【００６８】
【表２】
【００６９】
試験例３
急性毒性試験
雄性５週齢ＩＣＲ系マウス（日本クレア製，２９〜３４ｇ，１群５例）に４時間絶食後、２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（実施例１０記載の化合物）に生理食塩水：ポリエチレングリコール４００：エタノール＝５：４：１を加えて調製した懸濁液（６６６ｍｇ／ｍＬ）を３ｍＬ／ｋｇ（２０００ｍｇ／ｋｇ）の用量で皮下投与した。投与２４時間後、死亡例は認められなかった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品として有用なグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、それを含有する医薬組成物およびその製造中間体に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は食生活の変化や運動不足を背景とした生活習慣病の一つである。それ故、糖尿病患者には食事療法や運動療法が実施されているが、充分なコントロールや継続的実施が困難な場合、薬物療法が併用されている。現在、糖尿病治療剤としては、ビグアナイド薬、スルホニルウレア薬やインスリン抵抗性改善薬などが使用されている。しかしながら、ビグアナイド薬には乳酸アシドーシス、スルホニルウレア薬には低血糖、インスリン抵抗性改善薬には浮腫などの副作用が認められることがある上、肥満化を促進させることが懸念されている。そのため、このような問題を解消すべく新しい作用機序による糖尿病治療剤の開発が嘱望されている。
【０００３】
近年、腎臓において過剰な糖の再吸収を阻害することで尿糖の排泄を促進させて血糖値を低下させる、新しいタイプの糖尿病治療薬の研究開発が推進されている（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏｌ．７９，ｐｐ．１５１０−１５１５（１９８７））。また、腎臓の近位尿細管のＳ１領域にＳＧＬＴ２（ナトリウム依存性グルコース輸送体２）が存在し、このＳＧＬＴ２が糸球体ろ過された糖の再吸収に主として関与していることが報告されている（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏｌ．９３，ｐｐ．３９７−４０４（１９９４））。それ故、ヒトＳＧＬＴ２を阻害することにより腎臓での過剰な糖の再吸収を抑制し、尿から過剰な糖を排泄させて血糖値を正常化することができる。従って、強力なヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有し、新しい作用機序による糖尿病治療薬の早期開発が待望される。しかも、このような尿糖排泄促進剤は過剰な血糖を尿から排泄するため、体内での糖の蓄積が減少することから、肥満化の防止効果も期待できる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明者らは、ヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有する化合物を見出すべく鋭意検討した結果、下記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体が、下記の如く優れたヒトＳＧＬＴ２阻害活性を示すという知見を得、本発明を成すに至った。
本発明は、ヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有し、腎臓での糖の再吸収を抑制し過剰な糖を尿中に排泄させることにより血糖低下作用を発揮する、下記のグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、それを含有する医薬組成物およびその製造中間体を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
即ち、本発明は、一般式
【化１】
（式中のＲ1 は水素原子またはヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ2 は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、ヒドロキシ低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルコキシ基、ヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基である）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩に関するものである。
【０００６】
本発明は、前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物に関するものである。
【０００７】
本発明は、前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩を投与することによる高血糖に起因する疾患の予防又は治療方法。
【０００８】
また、本発明は、高血糖に起因する疾患の予防又は治療用の製剤を製造するための、前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用に関するものである。
【０００９】
更には、本発明は、一般式
【化２】
（式中のＲ11は水素原子または保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ12は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基、保護基を有するヒドロキシ低級アルコキシ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基であり、但し、Ｒ11が水素原子である場合はＲ12がメチル基、エチル基、イソプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基またはメトキシ基ではない）で表されるベンジルフェノール誘導体またはその塩に関するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体は、優れたヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有している。本発明により糖尿病、糖尿病性合併症、肥満症などの予防または治療剤を提供することができる。また、本発明の前記一般式（ＩＩ）で表される化合物は、前記一般式（Ｉ）で表される化合物を製造する際の中間体として重要であり、この化合物を経由することにより本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物を容易に製造することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明において、低級アルキル基とは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のアルキル基をいい、低級アルコキシ基とは、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のアルコキシ基をいい、低級アルキルチオ基とは、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基、イソプロピルチオ基、ブチルチオ基、イソブチルチオ基、ｓｅｃ−ブチルチオ基、ｔｅｒｔ−ブチルチオ基、ペンチルチオ基、イソペンチルチオ基、ネオペンチルチオ基、ｔｅｒｔ−ペンチルチオ基、ヘキシルチオ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のアルキルチオ基をいう。ヒドロキシ低級アルキル基とは、ヒドロキシメチル基、２−ヒドロキシエチル基、１−ヒドロキシエチル基、３−ヒドロキシプロピル基、２−ヒドロキシプロピル基、１−ヒドロキシプロピル基、２−ヒドロキシ−１−メチルエチル基、４−ヒドロキシブチル基、３−ヒドロキシブチル基、２−ヒドロキシブチル基、１−ヒドロキシブチル基、５−ヒドロキシペンチル基、４−ヒドロキシペンチル基、３−ヒドロキシペンチル基、２−ヒドロキシペンチル基、１−ヒドロキシペンチル基、６−ヒドロキシヘキシル基、５−ヒドロキシヘキシル基、４−ヒドロキシヘキシル基、３−ヒドロキシヘキシル基、２−ヒドロキシヘキシル基、１−ヒドロキシヘキシル基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のヒドロキシアルキル基をいい、ヒドロキシ低級アルコキシ基とは、２−ヒドロキシエトキシ基、３−ヒドロキシプロポキシ基、２−ヒドロキシプロポキシ基、２−ヒドロキシ−１−メチルエトキシ基、４−ヒドロキシブトキシ基、３−ヒドロキシブトキシ基、２−ヒドロキシブトキシ基、５−ヒドロキシペンチルオキシ基、４−ヒドロキシペンチルオキシ基、３−ヒドロキシペンチルオキシ基、２−ヒドロキシペンチルオキシ基、６−ヒドロキシヘキシルオキシ基、５−ヒドロキシヘキシルオキシ基、４−ヒドロキシヘキシルオキシ基、３−ヒドロキシヘキシルオキシ基、２−ヒドロキシヘキシルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のヒドロキシアルコキシ基をいい、ヒドロキシ低級アルキルチオ基とは、ヒドロキシメチルチオ基、２−ヒドロキシエチルチオ基、１−ヒドロキシエチルチオ基、３−ヒドロキシプロピルチオ基、２−ヒドロキシプロピルチオ基、１−ヒドロキシプロピルチオ基、２−ヒドロキシ−１−メチルエチルチオ基、４−ヒドロキシブチルチオ基、３−ヒドロキシブチルチオ基、２−ヒドロキシブチルチオ基、１−ヒドロキシブチルチオ基、５−ヒドロキシペンチルチオ基、４−ヒドロキシペンチルチオ基、３−ヒドロキシペンチルチオ基、２−ヒドロキシペンチルチオ基、１−ヒドロキシペンチルチオ基、６−ヒドロキシヘキシルチオ基、５−ヒドロキシヘキシルチオ基、４−ヒドロキシヘキシルチオ基、３−ヒドロキシヘキシルチオ基、２−ヒドロキシヘキシルチオ基、１−ヒドロキシヘキシルチオ基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のヒドロキシアルキルチオ基をいう。低級アルコキシ低級アルキル基とは、上記低級アルキル基でＯ−アルキル化された上記ヒドロキシ低級アルキル基をいい、低級アルコキシ低級アルコキシ基とは、上記低級アルキル基でＯ−アルキル化された上記ヒドロキシ低級アルコキシ基をいい、低級アルコキシ低級アルキルチオ基とは、上記低級アルキル基でＯ−アルキル化された上記ヒドロキシ低級アルキルチオ基をいう。
【００１２】
水酸基の保護基とは、ベンジル基、メトキシメチル基、アセチル基等の一般的な有機合成反応において用いられる水酸基の保護基をいう。
【００１３】
置換基Ｒ1においては、好ましくは水素原子または炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基であり、置換基Ｒ2においては、好ましくは低級アルキル基、低級アルコキシ基またはヒドロキシ低級アルキル基であり、更に好ましくは炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１〜３のアルコキシ基または炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基である。
【００１４】
前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物は、例えば、本発明の一般式（ＩＩ）で表されるベンジルフェノール誘導体を用いて、以下の方法に従い製造することができる。
【化３】
（式中のＲ11は水素原子または保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ12は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基、保護基を有するヒドロキシ低級アルコキシ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基であり、Ｘはトリクロロアセトイミドイルオキシ基、アセトキシ基、臭素原子、フッ素原子等の脱離基であり、Ｒ1 およびＲ2 は前記と同じ意味をもつ）
【００１５】
工程１
前記一般式（ＩＩ）で表されるベンジルフェノール誘導体またはその塩を２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１−Ｏ−トリクロロアセトイミドイル−α−Ｄ−グルコピラノース、１，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシルブロミド、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシルフルオリド等の前記一般式（ＩＩＩ）で表される糖供与体を用いて、不活性溶媒中、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体、トリフルオロメタンスルホン酸銀、塩化第二すず、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルなどの活性化剤の存在下に配糖化させることにより前記一般式（ＩＶ）で表される配糖体を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、塩化メチレン、トルエン、アセトニトリル、ニトロメタン、酢酸エチル、ジエチルエーテル、クロロホルム、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常−３０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。
【００１６】
工程２
前記一般式（ＩＶ）で表される配糖体をアルカリ加水分解させて水酸基の保護基を除去することにより本発明の化合物（Ｉ）を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、それらの混合溶媒などを挙げることができ、塩基性物質としては、例えば、水酸化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどを使用することができる。処理温度は通常０℃〜還流温度であり、処理時間は使用する原料物質や溶媒、処理温度などにより異なるが、通常３０分間〜６時間である。尚、水酸基の保護基の種類に応じて処理方法を常法に従い適宜変更または追加して実施することもできる。
【００１７】
前記製造方法において出発物質として用いられる本発明の前記一般式（ＩＩ）で表される化合物およびその塩は、例えば、以下の方法に従い製造することができる。
【化４】
（式中のＭは水素原子または水酸基の保護基であり、Ｒ4 は水素原子、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基または低級アルコキシカルボニル基であり、ＹおよびＺはどちらか一方がＭｇＢｒ、ＭｇＣｌ、ＭｇＩまたはリチウム原子であり、他方がホルミル基であり、Ｒ11およびＲ12は前記と同じ意味をもつ）
【００１８】
工程Ａ
前記一般式（Ｖ）で表されるベンズアルデヒド誘導体と前記一般式（ＶＩ）で表されるグリニャール試薬またはリチウム試薬若しくは前記一般式（Ｖ）で表されるグリニャール試薬またはリチウム試薬と前記一般式（ＶＩ）で表されるベンズアルデヒド誘導体を、不活性溶媒中、縮合させることにより前記一般式（ＶＩＩ）で表される化合物を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常−７８℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。
【００１９】
工程Ｂ
前記一般式（ＶＩＩ）で表される化合物を、不活性溶媒中、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬を用いて酸化することにより前記一般式（ＶＩＩＩ）で表される化合物を製造することができる。用いられる溶媒としては、例えば、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１時間〜１日間である。
【００２０】
工程Ｃ
前記一般式（ＶＩＩＩ）で表される化合物の保護基Ｍを常法に従い除去した後、（１）不活性溶媒中、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等の塩基の存在下、クロロギ酸メチルと縮合し、（２）得られた炭酸エステル誘導体を水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤を用いて還元することにより、本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物を製造することができる。反応（１）において、用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、アセトニトリル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常３０分間〜１日間である。反応（２）において、用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフランと水との混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１時間〜１日間である。尚、Ｒ4 が低級アルコキシカルボニル基である場合は、不活性溶媒中、水素化リチウムアルミニウム等の還元剤を用いてヒドロキシメチル基に還元した後、常法に従い水酸基を保護することにより本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物に誘導することができる。還元時に用いられる溶媒としては、例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。また、本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物は、常法に従いナトリウム塩、カリウム塩等の塩に変換することができる。
【００２１】
工程Ｄ
前記一般式（ＶＩＩ）で表される化合物を、不活性溶媒中、塩酸等の酸の存在下または非存在下、パラジウム炭素粉末等のパラジウム系触媒を用いて接触還元した後、必要に応じて保護基を常法に従い除去や導入することにより本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物を製造することができる。接触還元において用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、酢酸、イソプロパノール、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常３０分間〜１日間である。尚、Ｒ4 が低級アルコキシカルボニル基である場合は、不活性溶媒中、水素化リチウムアルミニウム等の還元剤を用いてヒドロキシメチル基に還元した後、常法に従い水酸基を保護することにより本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物に誘導することができる。還元時に用いられる溶媒としては、例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、それらの混合溶媒などを挙げることができ、反応温度は通常０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１０分間〜１日間である。また、本発明の前記一般式（ＩＩ）の化合物は、常法に従いナトリウム塩、カリウム塩等の塩に変換することができる。
【００２２】
前記製造方法において得られる本発明の化合物は、慣用の分離手段である分別再結晶法、クロマトグラフィーを用いた精製法、溶媒抽出法、固相抽出法等により単離精製することができる。
【００２３】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるグルコピラノシルオキシベンジルベンゼン誘導体は、常法により、その薬理学的に許容される塩とすることができる。このような塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等の無機塩基との塩を挙げることができる。
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物には、水和物やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００２４】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物およびその薬理学的に許容される塩は、優れたヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を有しており、糖尿病、糖尿病性合併症、肥満症などの予防または治療剤として非常に有用である。例えば、下記のヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用測定試験において、本発明の化合物は強力なヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用を発揮した。
【００２５】
本発明の医薬品組成物を実際の治療に用いる場合、用法に応じ種々の剤型のものが使用される。このような剤型としては例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、液剤、軟膏剤、坐剤、貼付剤などを挙げることができ、経口または非経口的に投与される。
【００２６】
これらの医薬品組成物は、その剤型に応じ調剤学上使用される手法により適当な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤などの医薬品添加物と適宜混合または希釈・溶解し、常法に従い調剤することにより製造することができる。
【００２７】
本発明の医薬品組成物を実際の治療に用いる場合、その有効成分である前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩の投与量は患者の年齢、性別、体重、疾患および治療の程度等により適宜決定されるが、経口投与の場合成人１日当たり概ね０．１〜１０００ｍｇの範囲で、非経口投与の場合は、成人１日当たり概ね０．０１〜３００ｍｇの範囲で、一回または数回に分けて適宜投与することができる。
【実施例】
【００２８】
本発明の内容を以下の参考例、実施例および試験例でさらに詳細に説明するが、本発明はその内容に限定されるものではない。
【００２９】
参考例１
４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼン
水素化ナトリウム（６０％、０．９７ｇ）、３−（４−ブロモフェニル）−１−プロパノール（１．０ｇ）及びベンジルブロミド（０．６９ｍＬ）のベンゼン（２４ｍＬ）懸濁液を、加熱還流下７時間撹拌した。室温に冷却後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を水（４０ｍＬ）、飽和食塩水（４０ｍＬ）にて洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）にて精製し、４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼン（１．４ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.85-2.00 (2H, m), 2.60-2.75 (2H, m), 3.47 (2H, t, J=6.2Hz), 4.50 (2H, s), 7.00-7.10 (2H, m), 7.20-7.45 (7H, m)
【００３０】
参考例２
４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチル
アルゴン雰囲気下１−ブロモ−４−エチルベンゼン（０．４１ｍＬ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液に、−７８℃にて１．４５ｍｏｌ／Ｌのｔｅｒｔ−ブチルリチウムｎ−ペンタン溶液（２．３ｍＬ）を加えた。−７８℃にて１０分間撹拌後、反応混合物に４−ホルミル−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．１８ｇ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下４５分間撹拌後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液および水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１)で精製し、ジフェニルメタノール体（０．２７ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．２７ｇ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、濃塩酸（０．０８ｍＬ）および１０％パラジウムカーボン粉末（５４ｍｇ）を加えた。水素雰囲気下室温にて１８時間撹拌した後、触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１)で精製し、４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．２０ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.22 (3H, t, J=7.6Hz), 2.62 (2H, q, J=7.6Hz), 3.89 (3H, s), 4.00 (2H, s), 5.01 (1H, s), 7.05-7.25 (5H, m), 7.47 (1H, d, J=1.6Hz), 7.56 (1H, dd,J=1.6, 7.8Hz)
【００３１】
参考例３
３−ヒドロキシ−４−（４−プロポキシベンジル)安息香酸メチル
アルゴン雰囲気下１−アリルオキシ−４−ブロモベンゼン（３．１ｇ）のテトラヒドロフラン（７０ｍＬ）溶液に、−７８℃にて１．４５ｍｏｌ／Ｌのｔｅｒｔ−ブチルリチウムｎ−ペンタン溶液（１１ｍＬ）を加えた。−７８℃にて５分間撹拌後、反応混合物に４−ホルミル−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．８９ｇ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下３０分間撹拌後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液および水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１)で精製し、ジフェニルメタノール体（０．９９ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．９９ｇ）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウムカーボン粉末（０．３０ｇ）を加えた。水素雰囲気下室温にて２４時間撹拌した後、触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製し、３−ヒドロキシ−４−（４−プロポキシベンジル)安息香酸メチル（０．５０ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.02 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 3.80-3.95 (5H, m), 3.97 (2H, s), 4.99 (1H, s), 6.75-6.90 (2H, m), 7.05-7.20 (3H, m), 7.47 (1H, d, J=1.5Hz), 7.56 (1H, dd, J=1.5, 7.8Hz)
【００３２】
参考例４
３−ヒドロキシ−４−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕安息香酸メチル
アルゴン雰囲気下２−（４−ブロモフェニル)エチルアルコール（１．７ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）溶液に、−７８℃にて１．４５ｍｏｌ／Ｌのｔｅｒｔ−ブチルリチウムｎ−ペンタン溶液（１２．６ｍＬ）を加えた。−７８℃にて１０分間撹拌後、反応混合物に４−ホルミル−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．５０ｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下３０分間撹拌後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液および水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１／３）で精製し、ジフェニルメタノール体（０．２８ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．２８ｇ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウムカーボン粉末（０．１４ｇ）を加えた。水素雰囲気下室温にて１４時間撹拌した後、触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、３−ヒドロキシ−４−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕安息香酸メチル（０．２６ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.37 (1H, t, J=5.9Hz), 2.84 (2H, t, J=6.5Hz), 3.75-3.95 (5H, m), 4.01 (2H, s), 5.10 (1H, s), 7.05-7.25 (5H, m), 7.47 (1H, d, J=1.6Hz), 7.56 (1H, dd, J=1.6, 7.8Hz)
【００３３】
参考例５
２−（４−イソブチルベンジル）フェノール
２−ベンジルオキシブロモベンゼン（０．２０ｇ）、金属マグネシウム（０．０２６ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）よりグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬を４−イソブチルベンズアルデヒド（０．１６ｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に加え、室温にて３０分間撹拌した。反応混合物をアミノプロピルシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：テトラヒドロフラン）で精製し、ジフェニルメタノール体（０．２３ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体をエタノール（３ｍＬ）及び濃塩酸（０．１ｍＬ）に溶解し、触媒量の１０％パラジウムカーボン粉末を加え、水素雰囲気下室温にて一晩撹拌した。触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／ヘキサン＝１／１）にて精製し２−（４−イソブチルベンジル）フェノール（０．１０ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
0.89 (6H, d, J=6.6Hz), 1.75-1.90 (1H, m), 2.43 (2H, d, J=7.2Hz), 3.97 (2H, s), 4.66 (1H, s), 6.75-6.85 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20 (6H, m)
【００３４】
参考例６
２−（４−イソプロポキシベンジル）フェノール
４−イソブチルベンズアルデヒドの代わりに４−イソプロポキシベンズアルデヒドを用いて、参考例５と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.31 (6H, d, J=6.1Hz), 3.93 (2H, s), 4.50 (1H, heptet, J=6.1Hz), 4.72 (1H, s), 6.75-6.85 (3H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (4H, m)
【００３５】
参考例７
２−（４−エトキシベンジル）フェノール
４−エトキシブロモベンゼン（１．５ｇ）、金属マグネシウム（０．１９ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）からグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬溶液に２−ベンジルオキシベンズアルデヒド（１．１ｇ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液を滴下し、室温で３０分間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にて精製し、ジフェニルメタノール体（１．７ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（１．７ｇ）をエタノール（２５ｍＬ）に溶解し、濃塩酸（０．４２ｍＬ）及び触媒量の１０％パラジウムカーボン粉末を加え、水素雰囲気下、室温で１８時間撹拌した。触媒をろ去し、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチル（１００ｍＬ）を加え、飽和重曹水（３０ｍＬ）及び飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝８／１）にて精製し、２−（４−エトキシベンジル）フェノール（０．８５ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.39 (3H, t, J=7.1Hz), 3.93 (2H, s), 4.00 (2H, q, J=7.1Hz), 4.72 (1H, s), 6.75-6.85 (3H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (4H, m)
【００３６】
参考例８
２−〔４−（３−ベンゾイルオキシプロピル）ベンジル〕フェノール
４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼン（３．２ｇ）、金属マグネシウム（０．２５ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（１０．５ｍＬ）よりグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬溶液に２−（メトキシメトキシ）ベンズアルデヒド（１．１ｇ）のテトラヒドロフラン（２４ｍＬ）溶液を加え６５℃で２５分間撹拌した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にて精製し、ジフェニルメタノール体（２．５ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（２．５ｇ）をエタノール（４２ｍＬ）に溶解し、触媒量の１０％パラジウムカーボン粉末を加え、水素雰囲気下、室温で７．５時間撹拌した。触媒をろ去し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／２）にて精製し、フェニルプロパノール体（１．６ｇ）を得た。得られたフェニルプロパノール体（１．６ｇ）を塩化メチレン（２９ｍＬ）に溶解し、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（０．０６９ｇ）、トリエチルアミン（１．０ｍＬ）及びベンゾイルクロリド（０．７９ｍＬ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（１００ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）を加え有機層を分取した。抽出液を飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）にて精製し、エステル体（２．２ｇ）を得た。得られたエステル体（２．２ｇ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．２１ｇ）及びメタノール（２８ｍＬ）の混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にて精製し、２−〔４−（３−ベンゾイルオキシプロピル）ベンジル〕フェノール（１．８ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
2.00-2.15 (2H, m), 2.70-2.80 (2H, m), 3.96(2H, s), 4.33 (2H, t, J=6.5Hz), 4.74 (1H, brs), 6.75-6.85 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (6H, m), 7.35-7.50 (2H, m), 7.50-7.65 (1H, m), 8.00-8.10 (2H, m)
【００３７】
参考例９
２−〔４−（２−ベンゾイルオキシエチル）ベンジル〕フェノール
４−（３−ベンジルオキシプロピル）ブロモベンゼンの代わりに４−（２−ベンジルオキシエチル）ブロモベンゼンを用いて、参考例８と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
3.04 (2H, t, J=7.1Hz), 3.98 (2H, s), 4.51 (2H, t, J=7.1Hz), 4.66 (1H, s), 6.75-6.85 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.25 (6H, m), 7.35-7.50 (2H, m), 7.50-7.60 (1H, m), 7.95-8.05 (2H, m)
【００３８】
参考例１０
５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル)フェノール
水素化リチウムアルミニウム（９５ｍｇ）のジエチルエーテル（１０ｍＬ）懸濁液に、４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチル（０．２７ｇ）のジエチルエーテル（５ｍＬ）溶液を氷冷下加えた。４５分間加熱還流した後、氷冷下水（０．１ｍＬ）、１５％水酸化ナトリウム水溶液（０．１ｍＬ）、水（０．３ｍＬ）の順に反応混合物に加えた。室温にて５分間撹拌後、混合物を０．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸中にあけ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、還元体（０．２２ｇ）を得た。得られた還元体（０．２２ｇ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解し、酢酸ビニル（２ｍＬ）およびビス(ジブチル塩化すず)オキシド（２４ｍｇ）を加え、３０℃にて１９時間撹拌した。反応混合物を直接シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製し、５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル)フェノール（０．２１ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.21 (3H, t, J=7.6Hz), 2.09 (3H, s), 2.61 (2H, q, J=7.6Hz), 3.95 (2H, s), 4.74 (1H, s), 5.03 (2H, s), 6.80 (1H, d, J=1.3Hz), 6.80-6.90 (1H, m),7.05-7.20 (5H, m)
【００３９】
参考例１１
５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル)フェノール
４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチルの代わりに３−ヒドロキシ−４−（４−プロポキシベンジル）安息香酸メチルを用いて、参考例１０と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.02 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 2.09 (3H, s), 3.88 (2H, t, J=6.6Hz), 3.91 (2H, s), 5.02 (2H, s), 5.28 (1H, s), 6.70-6.90 (4H, m), 7.00-7.20 (3H, m)
【００４０】
参考例１２
２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェノール
４−（４−エチルベンジル）−３−ヒドロキシ安息香酸メチルの代わりに３−ヒドロキシ−４−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕安息香酸メチルを用いて、参考例１０と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
2.03 (3H, s), 2.09 (3H, s), 2.90 (2H, t, J=7.1Hz), 3.96 (2H, s), 4.25 (2H, t, J=7.1Hz), 4.82 (1H, s), 5.03 (2H, s), 6.80 (1H, d, J=1.5Hz), 6.87(1H, dd, J=1.5, 7.7Hz), 7.05-7.20 (5H, m)
【００４１】
参考例１３
２−（４−エチルチオベンジル）フェノール
１−ブロモ−４−（エチルチオ）ベンゼン（１．１ｇ）、金属マグネシウム（０．１２ｇ）、触媒量のヨウ素及びテトラヒドロフラン（５ｍＬ）よりグリニャール試薬を調製した。得られたグリニャール試薬溶液に２−（メトキシメトキシ）ベンズアルデヒド（０．５６ｇ）のテトラヒドロフラン（１２ｍＬ）溶液を加え、６５℃で１０分間撹拌した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（８０ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）にて精製し、ジフェニルメタノール体（０．９１ｇ）を得た。得られたジフェニルメタノール体（０．９０ｇ）を塩化メチレン（１５ｍＬ）に溶解し、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（１，１，１−トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズイオドキソール−３（１Ｈ）−オン）（１．５ｇ）を加え、２５℃にて２６時間撹拌した。反応混合物にジエチルエーテル（７５ｍＬ）及び１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）を加え激しく撹拌後、有機層を分取した。有機層を１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）、水（３０ｍＬ×３回）及び飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１５／１〜９／１）にて精製し、ケトン体（０．８２ｇ）を得た。得られたケトン体（０．８１ｇ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．１０ｇ）及びメタノール（１４ｍＬ）の混合物を６０℃で４時間撹拌した。室温に冷却後、反応混合物を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１５／１）にて精製し、脱保護体（０．６９ｇ）を得た。得られた脱保護体（０．６８ｇ）をテトラヒドロフラン（１１ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．４１ｍＬ）及びクロロギ酸メチル（０．２２ｍＬ）を加え、２５℃で１時間撹拌した。さらにトリエチルアミン（０．１１ｍＬ）及びクロロギ酸メチル（０．０６１ｍＬ）を加え、３０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン（１４ｍＬ）及び水（７ｍＬ）に溶解し、水素化ホウ素ナトリウム（０．４０ｇ）を加え、２５℃で７時間撹拌した。１ｍｏｌ／Ｌの塩酸（１５ｍＬ）を滴下し、酢酸エチル（７５ｍＬ）で抽出した。抽出液を水（２０ｍＬ）、飽和重曹水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝８／１）にて精製し、２−（４−エチルチオベンジル）フェノール（０．６２ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.29 (3H, t, J=7.3Hz), 2.90 (2H, q, J=7.3Hz), 3.96 (2H, s), 4.62 (1H, s), 6.75-6.80 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.05-7.20 (4H, m), 7.20-7.30 (2H, m)
【００４２】
参考例１４
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノール（４６ｍｇ）と２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−１−Ｏ−トリクロロアセトイミドイル−α−Ｄ−グルコピラノース（０．１３ｇ）の塩化メチレン（２ｍＬ）溶液に、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（０．０３３ｍＬ）を加え室温にて１時間撹拌した。反応混合物をアミノプロピルシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン）にて精製し、２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（０．１１ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.91 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 3.77 (3H, s), 3.80-3.95 (3H, m), 4.17 (1H, dd, J=2.5, 12.2Hz), 4.29 (1H, dd, J=5.5, 12.2Hz), 5.11 (1H, d, J=7.5Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.75-6.85 (2H, m), 6.95-7.10 (5H, m), 7.10-7.25 (1H, m)
【００４３】
参考例１５
２−（４−メチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−メチルベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.89 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.30 (3H, s), 3.80-3.95 (3H, m), 4.17 (1H, dd, J=2.5, 12.3Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.5, 12.3Hz), 5.11 (1H, d, J=7.5Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.90-7.20 (8H, m)
【００４４】
参考例１６
２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−エチルベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.20 (3H, t, J=7.6Hz), 1.87 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 2.60 (2H, q, J=7.6Hz), 3.80-4.00 (3H, m), 4.18 (1H, dd, J=2.3, 12.2Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.4, 12.2Hz), 5.11 (1H, d, J=7.5Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.90-7.25 (8H, m)
【００４５】
参考例１７
２−（４−イソブチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−イソブチルベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
0.88 (6H, d, J=6.6Hz), 1.75-1.90 (1H, m), 1.87 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 2.42 (2H, d, J=7.2Hz), 3.80-3.95 (3H, m), 4.18 (1H, dd, J=2.4, 12.3Hz), 4.29 (1H, dd, J=5.5, 12.3Hz), 5.11 (1H, d, J=7.6Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.90-7.25 (8H, m)
【００４６】
参考例１８
２−（４−エトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−エトキシベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.39 (3H, t, J=7.0Hz), 1.91 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 3.80-3.95 (3H, m), 3.99 (2H, q, J=7.0Hz), 4.18 (1H, dd, J=2.5, 12.3Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.6, 12.3Hz), 5.10 (1H, d, J=7.7Hz), 5.15-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.75-6.85 (2H, m), 6.95-7.10 (5H, m), 7.10-7.20 (1H, m)
【００４７】
参考例１９
２−（４−イソプロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−（４−イソプロポキシベンジル）フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.30 (6H, d, J=6.0Hz), 1.90 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.08 (3H, s), 3.80-3.90 (3H, m), 4.18 (1H, dd, J=2.3, 12.3Hz), 4.28 (1H, dd, J=5.5, 12.3Hz), 4.48 (1H, heptet, J=6.0Hz), 5.10 (1H, d, J=7.7Hz), 5.10-5.25 (1H, m), 5.25-5.40 (2H, m), 6.70-6.85 (2H, m), 6.90-7.10 (5H, m), 7.10-7.20 (1H, m)
【００４８】
参考例２０
５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル)フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.20 (3H, t, J=7.6Hz), 1.88 (3H, s), 2.02 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.09 (3H, s), 2.60 (2H, q, J=7.6Hz), 3.80-3.95 (3H, m), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 12.3Hz), 4.27 (1H, dd, J=5.3, 12.3Hz), 5.00-5.10 (2H, m), 5.13 (1H, d, J=7.4Hz), 5.15-5.40 (3H, m), 6.95-7.15 (7H, m)
【００４９】
参考例２１
５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル)フェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.01 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 1.92 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.09 (3H, s), 3.80-3.95 (5H, m), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 12.3Hz), 4.27 (1H, dd, J=5.3, 12.3Hz), 5.00-5.10 (2H, m), 5.12 (1H, d, J=7.4Hz), 5.15-5.40 (3H, m), 6.75-6.85 (2H, m), 6.95-7.10 (5H, m)
【００５０】
参考例２２
２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェノールの代わりに２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェノールを用いて、参考例１４と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ｐｐｍ：
1.89 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.09 (3H, s), 2.88 (2H, t, J=7.1Hz), 3.85-3.95 (3H, m), 4.15-4.35 (4H, m), 5.00-5.10 (2H, m), 5.13 (1H, d, J=7.5Hz), 5.15-5.40 (3H, m), 6.95-7.15(7H, m)
【００５１】
実施例１
２−（４−メトキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（０．１１ｇ）のメタノール（４ｍＬ）溶液に、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．１２ｍＬ）を加え、室温にて３０分間撹拌した。溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／メタノール＝１０／１）で精製し、２−（４−メトキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（６５ｍｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.1, 12.1Hz), 3.73 (3H, s), 3.80-4.00 (2H, m), 4.03 (1H, d, J=15.1Hz), 4.91 (1H, d, J=7.4Hz), 6.75-6.85 (2H,m), 6.85-6.95 (1H, m), 6.95-7.10 (1H, m), 7.10-7.20 (4H, m)
【００５２】
実施例２
２−（４−メチルベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−メチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
2.27 (3H, s), 3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.2, 12.0Hz), 3.80-3.90 (1H, m), 3.94 (1H, d, J=15.0Hz), 4.05 (1H, d, J=15.0Hz), 4.85-4.95 (1H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 6.95-7.20 (7H, m)
【００５３】
実施例３
２−（４−エチルベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.15-1.25 (3H, m), 2.50-2.65 (2H, m), 3.35-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (1H,m), 3.80-4.00 (2H, m), 4.06 (1H, d, J=14.9Hz), 4.85-5.00 (1H, m), 6.85-7.00 (1H, m), 7.00-7.20 (7H, m)
【００５４】
実施例４
２−（４−イソブチルベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−イソブチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
0.80-0.95 (6H, m), 1.70-1.90 (1H, m), 2.41 (2H, d, J=7.1Hz), 3.30-3.55 (4H, m), 3.60-3.75 (1H, m), 3.80-3.95 (1H, m), 3.95 (1H, d, J=15.0Hz), 4.06 (1H, d, J=15.0Hz), 4.85-4.95 (1H, m), 6.80-7.20 (8H, m)
【００５５】
実施例５
２−（４−エトキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−エトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.35 (3H, t, J=6.8Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.60-3.75 (1H, m), 3.80-4.10 (5H, m), 4.90 (1H, d, J=7.1Hz), 6.70-6.85 (2H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20 (5H, m)
【００５６】
実施例６
２−（４−イソプロポキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−（４−イソプロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.27 (6H, d, J=6.0Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.4, 12.1Hz),3.88 (1H, dd, J=2.0, 12.1Hz), 3.91 (1H, d, J=15.0Hz), 4.02 (1H, d, J=15.0Hz), 4.51 (1H, heptet, J=6.0Hz), 4.91 (1H, d, J=7.7Hz), 6.70-6.85 (2H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.10 (1H, m), 7.10-7.20 (4H, m)
【００５７】
実施例７
５−ヒドロキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−プロポキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.02 (3H, t, J=7.4Hz), 1.70-1.85 (2H, m), 3.30-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (1H, m), 3.80-3.95 (4H, m), 4.00 (1H, d, J=15.0Hz), 4.54 (2H, s), 4.93 (1H, d, J=7.4Hz), 6.70-6.85 (2H, m), 6.85-6.95 (1H, m), 7.02 (1H, d, J=7.7Hz), 7.05-7.20 (3H, m)
【００５８】
実施例８
２−（４−エチルベンジル）−５−ヒドロキシメチルフェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに５−アセトキシメチル−２−（４−エチルベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.19 (3H, t, J=7.6Hz), 2.57 (2H, q, J=7.6Hz), 3.30-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (1H, m), 3.85-4.00 (2H, m), 4.04 (1H, d, J=15.0Hz), 4.54 (2H, s), 4.93 (1H, d, J=7.4Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.02 (1H, d, J=7.7Hz), 7.06 (2H,d, J=8.1Hz), 7.10-7.20 (3H, m)
【００５９】
実施例９
２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕−５−ヒドロキシメチルフェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−メトキシベンジル）フェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドの代わりに２−〔４−（２−アセトキシエチル）ベンジル〕−５−アセトキシメチルフェニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを用いて、実施例１と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
2.76 (2H, t, J=7.1Hz), 3.30-3.55 (4H, m), 3.60-3.75 (3H, m), 3.85-4.00 (2H, m), 4.05 (1H, d, J=14.6Hz), 4.54 (2H, s), 4.92 (1H, d, J=7.2Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.03 (1H, d, J=7.9Hz), 7.09 (2H, d, J=7.8Hz), 7.10-7.20(3H, m)
【００６０】
実施例１０
２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−〔４−（２−ベンゾイルオキシエチル）ベンジル〕フェノール（０．４９ｇ）及び１，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１．７ｇ）のトルエン（５．２ｍＬ）及び塩化メチレン（２．２ｍＬ）溶液に、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（０．５６ｍＬ）を加え、２５℃で８時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７０ｍＬ）と飽和重曹水（２５ｍＬ）を加え、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をメタノール（５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．１４ｍＬ）を加え、２５℃で１２．５時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７５ｍＬ）と水（２０ｍＬ）を加え、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をメタノール（７．５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．０８５ｍＬ）を加え、２５℃で５時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／メタノール＝４／１）にて精製した。溶媒を減圧下留去し、残渣にジエチルエーテルを加えて、析出物をろ取した。得られた固体をジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥し、２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（０．４７ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
2.76 (2H, t, J=7.1Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.65-3.75 (3H, m), 3.88 (1H, dd, J=1.8, 11.8Hz), 3.95 (1H, d, J=15.2Hz), 4.07 (1H, d, J=15.2Hz), 4.90(1H, d, J=7.4Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20 (7H, m)
【００６１】
実施例１１
２−〔４−（３−ヒドロキシプロピル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−〔４−（２−ベンゾイルオキシエチル）ベンジル〕フェノールの代わりに２−〔４−（３−ベンゾイルオキシプロピル）ベンジル〕フェノールを用いて、実施例１０と同様の方法で標記化合物を合成した。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.70-1.85 (2H, m), 2.55-2.65 (2H, m), 3.30-3.60 (6H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.2, 11.9Hz), 3.88 (1H, dd, J=2.0, 11.9Hz), 3.95 (1H, d, J=15.1Hz), 4.06 (1H, d, J=15.1Hz), 4.90 (1H, d, J=7.3Hz), 6.85-6.95 (1H, m), 7.00-7.20(7H, m)
【００６２】
実施例１２
２−（４−エチルチオベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド
２−（４−エチルチオベンジル）フェノール（０．５１ｇ）及び１，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（２．４ｇ）のトルエン（６．３ｍＬ）及び塩化メチレン（２．７ｍＬ）溶液に、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（０．７８ｍＬ）を加え、室温で９時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７０ｍＬ）と飽和重曹水（２５ｍＬ）を加え有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をメタノール（１０．５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液、０．０８ｍＬ）を加え、２５℃で１８時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（７５ｍＬ）と水（２０ｍＬ）を加え、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／メタノール＝１０／１）にて精製した。溶媒を減圧下留去し、残渣にジエチルエーテルを加えて、析出物をろ取した。得られた無色の固体をジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥し、２−（４−エチルチオベンジル）フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（０．５１ｇ）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ ｐｐｍ：
1.24 (3H, t, J=7.3Hz), 2.88 (2H, q, J=7.3Hz), 3.35-3.55 (4H, m), 3.69 (1H, dd, J=5.0, 12.2Hz), 3.88 (1H, dd, J=2.0, 12.2Hz), 3.95 (1H, d, J=15.1Hz), 4.08 (1H, d, J=15.1Hz), 4.91 (1H, d, J=7.3Hz), 6.85-7.00 (1H, m), 7.00-7.10 (1H, m), 7.10-7.30 (6H, m)
【００６３】
試験例１
ヒトＳＧＬＴ２活性阻害作用確認試験
１）ヒトＳＧＬＴ２発現プラスミドベクターの作製
ＳＵＰＥＲＳＣＲＩＰＴ Ｐｒｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）を用いて、ヒト腎臓由来のｔｏｔａｌ ＲＮＡ（Ｏｒｉ ｇｅｎｅ製）をオリゴｄＴをプライマーとして逆転写し、ＰＣＲ増幅用ｃＤＮＡライブラリーを作製した。上記ヒト腎ｃＤＮＡライブラリーを鋳型として、配列番号１及び２で示される下記のオリゴヌクレオチド０７０２Ｆ及び０７１２Ｒをプライマーに用い、Ｐｆｕ ＤＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製）を用いたＰＣＲ反応によりヒトＳＧＬＴ２をコードするＤＮＡ断片を増幅した。増幅されたＤＮＡ断片をクローニング用ベクターｐＣＲ−Ｂｌｕｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）にこのキットの標準法に従いライゲーションした。常法により大腸菌ＨＢ１０１コンピテントセル（東洋紡（株）製）に導入した後、形質転換株をカナマイシン５０μｇ／ｍＬを含むＬＢ寒天培地で選択した。この形質転換株の１つからプラスミドＤＮＡを抽出精製し、配列番号３及び４で示される下記のオリゴヌクレオチド、０７１４Ｆおよび０７１５Ｒをプライマーとして用い、Ｐｆｕ ＤＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製）を用いたＰＣＲ反応によりヒトＳＧＬＴ２をコードするＤＮＡ断片を増幅した。増幅されたＤＮＡ断片を制限酵素ＸｈｏＩ及びＨｉｎｄＩＩＩで消化した後、Ｗｉｚａｒｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ製）により精製した。この精製したＤＮＡ断片を融合化蛋白質発現用ベクターｐｃＤＮＡ３．１（−）Ｍｙｃ／Ｈｉｓ−Ａ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）の対応する制限酵素部位に組み込んだ。常法により大腸菌ＨＢ１０１コンピテントセル（東洋紡（株）製）に導入した後、形質転換株をアンピシリン１００μｇ／ｍＬを含むＬＢ寒天培地で選択した。この形質転換株からプラスミドＤＮＡを抽出精製し、ベクターｐｃＤＮＡ３．１（−）Ｍｙｃ／Ｈｉｓ−Ａのマルチクローニング部位に挿入されたＤＮＡ断片の塩基配列を調べた。Ｗｅｌｌｓらにより報告されたヒトＳＧＬＴ２（Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，Ｖｏｌ．２６３，ｐｐ．４５９−４６５（１９９２））に対し、このクローンは１塩基の置換（４３３番目のイソロイシンをコードするＡＴＣがＧＴＣに置換）を有していた。この結果４３３番目の残基のイソロイシンがバリンに置換したクローンを得た。このカルボキシ末端側最終残基のアラニンの次から配列番号５で示されるペプチドを融合化したヒトＳＧＬＴ２を発現するプラスミドベクターをＫＬ２９とした。
配列番号１ ＡＴＧＧＡＧＧＡＧＣＡＣＡＣＡＧＡＧＧＣ
配列番号２ ＧＧＣＡＴＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＧＡ
配列番号３ ＡＡＣＣＴＣＧＡＧＡＴＧＧＡＧＧＡＧＣＡＣＡＣＡＧＡＧＧＣ
配列番号４ ＡＡＣＡＡＧＣＴＴＧＧＣＡＴＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＧＡ
配列番号５ ＫＬＧＰＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬＮＳＡＶＤＨＨＨＨＨＨ
【００６４】
２）ヒトＳＧＬＴ２一過性発現細胞の調製
ヒトＳＧＬＴ２発現プラスミドＫＬ２９を電気穿孔法によりＣＯＳ−７細胞（ＲＩＫＥＮ ＣＥＬＬ ＢＡＮＫ ＲＣＢ０５３９）に導入した。電気穿孔法はジーンパルサーＩＩ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）を用い、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ Ｉ培地（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）５００μＬに対しＣＯＳ−７細胞２×１０6 個とＫＬ２９ ２０μｇを含む０．４ｃｍキュベット内で０．２９０ｋＶ、９７５μＦの条件下行った。遺伝子導入後、細胞を遠心分離により回収し細胞１キュベット分に対し１ｍＬのＯＰＴＩ−ＭＥＭ Ｉ培地を加え懸濁した。この細胞懸濁液を９６ウェルプレートの１ウェルあたり１２５μＬずつ分注した。３７℃、５％ＣＯ2 の条件下一晩培養した後、１０％ウシ胎仔血清（三光純薬（株）製）、１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬペニシリンＧナトリウム（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）、１００μｇ／ｍＬ硫酸ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）を含むＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ：ＬＩＦＥ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ製）を１ウェルあたり１２５μＬずつ加えた。翌日まで培養しメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド取り込み阻害活性の測定に供した。
【００６５】
３）メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド取り込み阻害活性の測定
ヒトＳＧＬＴ２一過性発現ＣＯＳ−７細胞の培地を除去し、１ウェルあたり前処置用緩衝液（１４０ｍＭ塩化コリン、２ｍＭ塩化カリウム、１ｍＭ塩化カルシウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、１０ｍＭ２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸、５ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを含む緩衝液ｐＨ７．４）を２００μＬ加え、３７℃で１０分間静置した。前処置用緩衝液を除去し、再度同一緩衝液を２００μＬ加え、３７℃で１０分間静置した。試験化合物を含む取り込み用緩衝液（１４０ｍＭ塩化ナトリウム、２ｍＭ塩化カリウム、１ｍＭ塩化カルシウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、５ｍＭメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド、１０ｍＭ２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸、５ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを含む緩衝液ｐＨ７．４）５２５μＬに７μＬのメチル−α−Ｄ−（Ｕ−１４Ｃ）グルコピラノシド（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ製）を加え混合し、取り込み用緩衝液とした。対照群に試験化合物を含まない取り込み用緩衝液を調製した。また試験化合物およびナトリウム非存在下の基礎取り込み測定用に塩化ナトリウムに替えて１４０ｍＭの塩化コリンを含む基礎取り込み用緩衝液を同様に調製した。前処置用緩衝液を除去し、取り込み用緩衝液を１ウェルあたり７５μＬずつ加え３７℃で２時間静置した。取り込み用緩衝液を除去し、洗浄用緩衝液（１４０ｍＭ塩化コリン、２ｍＭ塩化カリウム、１ｍＭ塩化カルシウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、１０ｍＭメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド、１０ｍＭ２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸、５ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを含む緩衝液ｐＨ７．４）を１ウェルあたり２００μＬずつ加えすぐに除去した。この洗浄操作をさらに２回行い、０．２Ｎ水酸化ナトリウムを１ウェルあたり７５μＬずつ加え細胞を可溶化した。可溶化液をピコプレート（Ｐａｃｋａｒｄ製）に移し、１５０μＬのマイクロシンチ４０（Ｐａｃｋａｒｄ製）を加えマイクロプレートシンチレーションカウンター トップカウント（Ｐａｃｋａｒｄ製）にて放射活性を計測した。対照群の取り込み量から基礎取り込み量を差し引いた値を１００％とし、取り込み量の５０％阻害する濃度（ＩＣ50値）を濃度−阻害曲線から最小二乗法により算出した。その結果は以下の表１の通りである。
【００６６】
【表１】
【００６７】
試験例２
尿糖排泄促進作用確認試験
実験動物として一晩絶食したＳＤ系ラット（ＳＬＣ、雄性７週齢、１８０〜２４０ｇ）を用いた。試験化合物１０ｍｇはエタノール３００μＬに懸濁または溶解させ、ポリエチレングリコール４００ １．２ｍＬおよび生理食塩水１．５ｍＬを加えて溶解し、３．３ｍｇ／ｍＬ溶液とした。この溶解液３００μＬを希釈溶液２．７ｍＬ（生理食塩水：ポリエチレングリコール４００：エタノール＝５：４：１）に溶解し、０．３３（ｍｇ／ｍＬ）の濃度の溶解液を調製した。ラットの体重を測定し、試験化合物溶液を３ｍＬ／ｋｇの用量（１ｍｇ／ｋｇ）で尾静脈内投与した。対照群用に生理食塩水：ポリエチレングリコール４００：エタノール＝５：４：１のみを３ｍＬ／ｋｇの用量で尾静脈内投与した。尾静脈内投与直後に２００ｇ／Ｌグルコース水溶液を１０ｍＬ／ｋｇの用量（２ｇ／ｋｇ）で経口投与した。尾静脈内投与は２６Ｇ注射針および１ｍＬシリンジを用いて行った。経口投与はラット用ゾンデおよび２．５ｍＬシリンジを用いて行った。１群あたりの頭数は２又は３頭とした。グルコース投与終了後から代謝ケージにて採尿を行った。採尿時間はグルコース投与後２４時間とした。採尿終了後、尿量を記録し、尿中に含まれるグルコース濃度を測定した。グルコース濃度は臨床検査用キット：グルコースＢテストワコー（和光純薬（株）製）にて定量した。尿量、尿中グルコース濃度および体重から２４時間での体重２００ｇ当たりの尿糖排泄量を求めた。その結果は以下の表２の通りである。
【００６８】
【表２】
【００６９】
試験例３
急性毒性試験
雄性５週齢ＩＣＲ系マウス（日本クレア製，２９〜３４ｇ，１群５例）に４時間絶食後、２−〔４−（２−ヒドロキシエチル）ベンジル〕フェニル β−Ｄ−グルコピラノシド（実施例１０記載の化合物）に生理食塩水：ポリエチレングリコール４００：エタノール＝５：４：１を加えて調製した懸濁液（６６６ｍｇ／ｍＬ）を３ｍＬ／ｋｇ（２０００ｍｇ／ｋｇ）の用量で皮下投与した。投与２４時間後、死亡例は認められなかった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式
【化１】
（式中のＲ11は水素原子または保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ12は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基、保護基を有するヒドロキシ低級アルコキシ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基であり、但し、Ｒ11が水素原子である場合はＲ12がメチル基、エチル基、イソプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基またはメトキシ基ではない）で表されるベンジルフェノール誘導体またはその塩。
【請求項１】
一般式
【化１】
（式中のＲ11は水素原子または保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基であり、Ｒ12は低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキル基、保護基を有するヒドロキシ低級アルコキシ基、保護基を有するヒドロキシ低級アルキルチオ基、低級アルコキシ低級アルキル基、低級アルコキシ低級アルコキシ基または低級アルコキシ低級アルキルチオ基であり、但し、Ｒ11が水素原子である場合はＲ12がメチル基、エチル基、イソプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基またはメトキシ基ではない）で表されるベンジルフェノール誘導体またはその塩。
【公開番号】特開２００６−１４３７３５（Ｐ２００６−１４３７３５Ａ）
【公開日】平成１８年６月８日（２００６．６．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−３４１０８９（Ｐ２００５−３４１０８９）
【出願日】平成１７年１１月２５日（２００５．１１．２５）
【分割の表示】特願２００１−５６７７５０（Ｐ２００１−５６７７５０）の分割
【原出願日】平成１３年３月１５日（２００１．３．１５）
【出願人】（０００１０４５６０）キッセイ薬品工業株式会社 (78)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年６月８日（２００６．６．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１１月２５日（２００５．１１．２５）
【分割の表示】特願２００１−５６７７５０（Ｐ２００１−５６７７５０）の分割
【原出願日】平成１３年３月１５日（２００１．３．１５）
【出願人】（０００１０４５６０）キッセイ薬品工業株式会社 (78)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]