コラゲナーゼ活性阻害剤
【課題】新規なコラゲナーゼ活性阻害剤、および該コラゲナーゼ阻害剤を含有する化粧品の提供。
【解決手段】従来、効果を有することが知られていなかった、茶花抽出物を含有するコラゲナーゼ活性阻害剤、および該コラゲナーゼ阻害剤を含有する化粧品。該茶花とは、ツバキ科ツバキ属に属する茶の花部であり、花弁の他、雌しべ、雄しべ、がく片、花軸、苞葉、つぼみ等を含んでもよいものである。該コラゲナーゼ活性阻害剤を用いることによって、コラーゲンの分解を抑制し、皮膚の老化を防止する効果のある化粧品、食品などを得ることができる。
【解決手段】従来、効果を有することが知られていなかった、茶花抽出物を含有するコラゲナーゼ活性阻害剤、および該コラゲナーゼ阻害剤を含有する化粧品。該茶花とは、ツバキ科ツバキ属に属する茶の花部であり、花弁の他、雌しべ、雄しべ、がく片、花軸、苞葉、つぼみ等を含んでもよいものである。該コラゲナーゼ活性阻害剤を用いることによって、コラーゲンの分解を抑制し、皮膚の老化を防止する効果のある化粧品、食品などを得ることができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、茶花抽出物を含有することを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンは皮膚の主成分であり、弾力性のある繊維状のタンパク質である。コラーゲン産生量が正常ならば、しみやくすみのない滑らかな肌となり、弾力のある血管が形成され動脈硬化などが起こりにくくなる。しかしながら、コラーゲンは、体内でコラゲナーゼの作用により分解してしまう。そのため、コラーゲンの分解を抑制し、皮膚の老化を防止するコラゲナーゼ活性阻害剤となり得る種々の物質が研究されている。
【０００３】
現在までに、コラゲナーゼ活性阻害剤の代表的なものとして、コーヒー酸またはその塩（特許文献１）、グアバの葉（特許文献２）、ハマメリス抽出物（特許文献３）、コケモモ、シラカバ、ハマスゲ、ボダイジュ、緑茶（特許文献４）、シモツケソウ、ヤドリギ、ホホバ葉、蓮葉、レッドクローバー（特許文献５）、松樹皮抽出物（特許文献６）、ケール（特許文献７）、カムカム種子の抽出物（特許文献８）、アセロラ種子の抽出物（特許文献９）などが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平５−１１７１４５号公報
【特許文献２】特開平７−２９１８７３号公報
【特許文献３】特開平８−２８３１３３号公報
【特許文献４】特開２００３−１２５３１号公報
【特許文献５】特開２００３−４８８４６号公報
【特許文献６】特開２００３−２３８４２６号公報
【特許文献７】特開２００３−２３８４２６号公報
【特許文献８】特許第３６３５０８１号公報
【特許文献９】特開２００７−３１４５５２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、コラゲナーゼ活性阻害剤に用いられる新規な素材を提供することを目的とするものである。具体的には、従来、その効果を有することが知られていなかった、茶花抽出物を含有することを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで、本発明者らは種々の物質について検討した結果、コラゲナーゼ活性阻害効果を有することが知られていなかった茶花抽出物が、その効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、茶花抽出物を含有することを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤に関する。さらには、前記コラゲナーゼ活性阻害剤を含有することを特徴とする化粧品に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明に関する茶花抽出物を含有することを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤を用いると、コラーゲンの分解を抑制し、皮膚の老化を防止する効果のある化粧品、食品などを得ることができる。本発明の形態に関しては特に限定されるものではなく、茶花抽出物をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明の実施形態について説明する。なお、本発明は、下記の実施形態に限定して解釈すべきではなく、特許請求の範囲における記載の範囲内で種々の変更が可能である。
【００１０】
本発明で使用する茶花とは、ツバキ科ツバキ属に属する茶 (Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、別名Ｔｈｅａ
ｓｉｎｅｎｓｉｓ )の花部であり、花弁の他、雌しべ、雄しべ、がく片、花軸、苞葉、つぼみ等を含んでもよい。茶は、中国、日本、スリランカなど広く自生または栽培されている常緑樹であるが、本発明で使用する茶花に用いる茶の産地は特段に制限されるものではない。
【００１１】
本発明で使用する茶花抽出物は、茶の花部より抽出することができるが、その抽出方法については、コラゲナーゼ活性阻害剤としての効果が得られる限り特段の制限はなく、通常の化粧品原料などの製造において使用可能な抽出方法、抽出溶媒、製造助剤などの添加を行うことができる。また、搾汁により搾汁液を回収する方法であってもよい。また、得られた抽出液を常法により乾燥して使用することができる。乾燥方法としては賦型剤を添加しスプレードライなどにより乾燥する方法であってもよい。また、茶花抽出物はエキスでもエキスの乾燥粉末でも良く、特段に制限されるものではない。
【００１２】
本発明の茶花抽出物はそのまま、または通常用いられる種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。必要に応じて、当業者が通常用いる基剤および添加剤を添加することができる。
【００１３】
化粧品類として本発明で使用する茶花抽出物は、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤などの種々の形態に加工され得る。また、化粧品、医薬品、医薬部外品などとして利用される。具体的には、化粧水、化粧クリーム、乳液、クリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリーム、シャンプー、ヘアリンス、トリートメント、ボディシャンプー、洗顔剤、石鹸、ファンデーション、スプレーなどとして利用できる。
【００１４】
食品として本発明で使用する茶花抽出物は、種々の成分（例えば賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料）と混合して利用できる。具体的には、栄養補助剤として、ローヤルゼリー、ビタミン類、プロテイン、キトサン、レシチンなどが配合され、さらに糖液や調味料を加え、味を整えることができる。そしてこれらは、必要に応じて、ハードカプセル、ソフトカプセルのようなカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤、または粉末状、顆粒状、飴状などの形状に成形され得る。そしてこれらは、その形状または好みに応じて、そのまま食されても良いし、水、湯、牛乳、豆乳、茶、ジュースなどに溶いて飲んでも良い。
【００１５】
本発明のコラゲナーゼ活性阻害剤に含まれる茶花抽出物の配合量としては、乾燥重量として０．００００１〜５０質量％が好ましく、０．００１〜２０質量％がさらに好ましいが、用いる剤型、使用対象等の様々の条件に応じて、広範囲でその配合量を適宜設定できる。
【実施例】
【００１６】
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明がこの実施例により制限されないことは言うまでもない。
【００１７】
（茶花抽出物の製造方法）
茶花抽出物は、茶の花部１０ｇに５０％の含水１，３−ブチレングリコール溶媒１５０ｍｌを加え、６０℃で１時間以上加熱して抽出し、濾過して得たエキス１００ｇを用いた。
【００１８】
（実施例１：コラゲナーゼ活性阻害の測定）
Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ）（−）を用いて茶花抽出物を調製し、サンプル溶液とした。コラゲナーゼＢ（ロッシュ製：Ｃａｔ
Ｎｏ．１０８８ ８０７）を０．１％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）含有ＰＢＳ（−）を用いて１０μｇ／ｍｌとなるように調製し、酵素溶液とした。DMSOで溶解した蛍光基質（ペプチド研究所製：Ｃｏｄｅ
３１６３ｖ）を０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を用いて５μＭとなるように調製し、蛍光基質溶液とした。
【００１９】
被験溶液の調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートにサンプル溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２０】
被験溶液ｂｌａｎｋの調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートにサンプル溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、酵素溶液の代わりに０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２１】
対照溶液の調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートにＰＢＳ（−）を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加を行った。その後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２２】
対照溶液ｂｌａｎｋの調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートに０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２３】
コラゲナーゼ活性阻害の測定は次の式から求められる阻害率で表した。
阻害率（％）＝１００−［（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）］× １００
Ａ：被験溶液の４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｂ：被験溶液ｂｌａｎｋの４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｃ：対照溶液の４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｄ：対照溶液ｂｌａｎｋの４０５ｎｍにおける蛍光強度。
【００２４】
【表１】
【００２５】
以上の結果より、茶花抽出物がコラゲナーゼ活性阻害を示すことが明らかとなった。
【００２６】
（化粧品の製造例）
前記茶花抽出物を用いて、常法により以下の化粧品を調製した。
配合量（質量％）
茶花抽出物 ０．０２
エタノール １０．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 １．０
パラオキシ安息香酸メチル ０．１
ジプロピレングリコール ５．０
１，３−ブチレングリコール １０．０
精製水 残量
【産業上の利用可能性】
【００２７】
本発明者らは茶花抽出物がコラゲナーゼ活性阻害を有することを見出し、本発明を完成させた。本発明に記載のコラゲナーゼ活性阻害剤は、茶花抽出物をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、茶花抽出物を含有することを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンは皮膚の主成分であり、弾力性のある繊維状のタンパク質である。コラーゲン産生量が正常ならば、しみやくすみのない滑らかな肌となり、弾力のある血管が形成され動脈硬化などが起こりにくくなる。しかしながら、コラーゲンは、体内でコラゲナーゼの作用により分解してしまう。そのため、コラーゲンの分解を抑制し、皮膚の老化を防止するコラゲナーゼ活性阻害剤となり得る種々の物質が研究されている。
【０００３】
現在までに、コラゲナーゼ活性阻害剤の代表的なものとして、コーヒー酸またはその塩（特許文献１）、グアバの葉（特許文献２）、ハマメリス抽出物（特許文献３）、コケモモ、シラカバ、ハマスゲ、ボダイジュ、緑茶（特許文献４）、シモツケソウ、ヤドリギ、ホホバ葉、蓮葉、レッドクローバー（特許文献５）、松樹皮抽出物（特許文献６）、ケール（特許文献７）、カムカム種子の抽出物（特許文献８）、アセロラ種子の抽出物（特許文献９）などが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平５−１１７１４５号公報
【特許文献２】特開平７−２９１８７３号公報
【特許文献３】特開平８−２８３１３３号公報
【特許文献４】特開２００３−１２５３１号公報
【特許文献５】特開２００３−４８８４６号公報
【特許文献６】特開２００３−２３８４２６号公報
【特許文献７】特開２００３−２３８４２６号公報
【特許文献８】特許第３６３５０８１号公報
【特許文献９】特開２００７−３１４５５２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、コラゲナーゼ活性阻害剤に用いられる新規な素材を提供することを目的とするものである。具体的には、従来、その効果を有することが知られていなかった、茶花抽出物を含有することを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで、本発明者らは種々の物質について検討した結果、コラゲナーゼ活性阻害効果を有することが知られていなかった茶花抽出物が、その効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、茶花抽出物を含有することを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤に関する。さらには、前記コラゲナーゼ活性阻害剤を含有することを特徴とする化粧品に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明に関する茶花抽出物を含有することを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤を用いると、コラーゲンの分解を抑制し、皮膚の老化を防止する効果のある化粧品、食品などを得ることができる。本発明の形態に関しては特に限定されるものではなく、茶花抽出物をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明の実施形態について説明する。なお、本発明は、下記の実施形態に限定して解釈すべきではなく、特許請求の範囲における記載の範囲内で種々の変更が可能である。
【００１０】
本発明で使用する茶花とは、ツバキ科ツバキ属に属する茶 (Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、別名Ｔｈｅａ
ｓｉｎｅｎｓｉｓ )の花部であり、花弁の他、雌しべ、雄しべ、がく片、花軸、苞葉、つぼみ等を含んでもよい。茶は、中国、日本、スリランカなど広く自生または栽培されている常緑樹であるが、本発明で使用する茶花に用いる茶の産地は特段に制限されるものではない。
【００１１】
本発明で使用する茶花抽出物は、茶の花部より抽出することができるが、その抽出方法については、コラゲナーゼ活性阻害剤としての効果が得られる限り特段の制限はなく、通常の化粧品原料などの製造において使用可能な抽出方法、抽出溶媒、製造助剤などの添加を行うことができる。また、搾汁により搾汁液を回収する方法であってもよい。また、得られた抽出液を常法により乾燥して使用することができる。乾燥方法としては賦型剤を添加しスプレードライなどにより乾燥する方法であってもよい。また、茶花抽出物はエキスでもエキスの乾燥粉末でも良く、特段に制限されるものではない。
【００１２】
本発明の茶花抽出物はそのまま、または通常用いられる種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。必要に応じて、当業者が通常用いる基剤および添加剤を添加することができる。
【００１３】
化粧品類として本発明で使用する茶花抽出物は、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤などの種々の形態に加工され得る。また、化粧品、医薬品、医薬部外品などとして利用される。具体的には、化粧水、化粧クリーム、乳液、クリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリーム、シャンプー、ヘアリンス、トリートメント、ボディシャンプー、洗顔剤、石鹸、ファンデーション、スプレーなどとして利用できる。
【００１４】
食品として本発明で使用する茶花抽出物は、種々の成分（例えば賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料）と混合して利用できる。具体的には、栄養補助剤として、ローヤルゼリー、ビタミン類、プロテイン、キトサン、レシチンなどが配合され、さらに糖液や調味料を加え、味を整えることができる。そしてこれらは、必要に応じて、ハードカプセル、ソフトカプセルのようなカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤、または粉末状、顆粒状、飴状などの形状に成形され得る。そしてこれらは、その形状または好みに応じて、そのまま食されても良いし、水、湯、牛乳、豆乳、茶、ジュースなどに溶いて飲んでも良い。
【００１５】
本発明のコラゲナーゼ活性阻害剤に含まれる茶花抽出物の配合量としては、乾燥重量として０．００００１〜５０質量％が好ましく、０．００１〜２０質量％がさらに好ましいが、用いる剤型、使用対象等の様々の条件に応じて、広範囲でその配合量を適宜設定できる。
【実施例】
【００１６】
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明がこの実施例により制限されないことは言うまでもない。
【００１７】
（茶花抽出物の製造方法）
茶花抽出物は、茶の花部１０ｇに５０％の含水１，３−ブチレングリコール溶媒１５０ｍｌを加え、６０℃で１時間以上加熱して抽出し、濾過して得たエキス１００ｇを用いた。
【００１８】
（実施例１：コラゲナーゼ活性阻害の測定）
Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ）（−）を用いて茶花抽出物を調製し、サンプル溶液とした。コラゲナーゼＢ（ロッシュ製：Ｃａｔ
Ｎｏ．１０８８ ８０７）を０．１％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）含有ＰＢＳ（−）を用いて１０μｇ／ｍｌとなるように調製し、酵素溶液とした。DMSOで溶解した蛍光基質（ペプチド研究所製：Ｃｏｄｅ
３１６３ｖ）を０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を用いて５μＭとなるように調製し、蛍光基質溶液とした。
【００１９】
被験溶液の調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートにサンプル溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２０】
被験溶液ｂｌａｎｋの調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートにサンプル溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、酵素溶液の代わりに０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２１】
対照溶液の調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートにＰＢＳ（−）を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加を行った。その後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２２】
対照溶液ｂｌａｎｋの調製は次のようにして行った。９６ウェルブラックプレートに０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ（−）を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０ｎｍで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２３】
コラゲナーゼ活性阻害の測定は次の式から求められる阻害率で表した。
阻害率（％）＝１００−［（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）］× １００
Ａ：被験溶液の４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｂ：被験溶液ｂｌａｎｋの４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｃ：対照溶液の４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｄ：対照溶液ｂｌａｎｋの４０５ｎｍにおける蛍光強度。
【００２４】
【表１】
【００２５】
以上の結果より、茶花抽出物がコラゲナーゼ活性阻害を示すことが明らかとなった。
【００２６】
（化粧品の製造例）
前記茶花抽出物を用いて、常法により以下の化粧品を調製した。
配合量（質量％）
茶花抽出物 ０．０２
エタノール １０．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 １．０
パラオキシ安息香酸メチル ０．１
ジプロピレングリコール ５．０
１，３−ブチレングリコール １０．０
精製水 残量
【産業上の利用可能性】
【００２７】
本発明者らは茶花抽出物がコラゲナーゼ活性阻害を有することを見出し、本発明を完成させた。本発明に記載のコラゲナーゼ活性阻害剤は、茶花抽出物をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
茶花抽出物を含有することを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載のコラゲナーゼ活性阻害剤を含有することを特徴とする化粧品。
【請求項１】
茶花抽出物を含有することを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載のコラゲナーゼ活性阻害剤を含有することを特徴とする化粧品。
【公開番号】特開２０１１−１１９９１（Ｐ２０１１−１１９９１Ａ）
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１５５３６３（Ｐ２００９−１５５３６３）
【出願日】平成２１年６月３０日（２００９．６．３０）
【出願人】（３９８０２８５０３）株式会社東洋新薬 (182)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年６月３０日（２００９．６．３０）
【出願人】（３９８０２８５０３）株式会社東洋新薬 (182)
【Ｆターム（参考）】
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