コラーゲン産生促進剤、皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物
【課題】 肌の弾力や張りに大きく影響するコラーゲンを皮膚線維芽細胞に産出させるコラーゲン産生促進剤、及び該コラーゲン産生促進剤を配合した肌の張り及びしわの改善効果を有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物を提供する。
【解決手段】 クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤、及び該コラーゲン産生促進剤を配合した肌の張り及びしわの改善効果を有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物を提供する。
【解決手段】 クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤、及び該コラーゲン産生促進剤を配合した肌の張り及びしわの改善効果を有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚の弾力、張り、潤いに重要な役割を担うコラーゲンの産生促進剤に関する。更には、コラーゲン産生促進剤を含有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、高齢化社会や女性の社会進出にともない、美容に対する意識が向上している。しかし、皮膚の機能は年齢と共に低下し、老化により弾力や張りを失い、しわが生じてくる。この原因として、皮膚中に存在するコラーゲンとヒアルロン酸の量の低下があげられる。
【０００３】
皮膚は、皮下組織、真皮、表皮の三層から成っていて、皮膚の弾力など皮膚の機能に最も影響を与えているのが真皮であり、この真皮にはコラーゲンとヒアルロン酸が多く含まれている。これらコラーゲンとヒアルロン酸は、真皮中に存在する皮膚線維芽細胞が産生することが知られており、皮膚の弾力性の保持に重要な役割を担っている。
コラーゲンは人のタンパク質全体の約３０％を占めており、そのうち真皮には約７０％が存在する。コラーゲンは細胞をつなぎとめる働きをしているが、これが老化にともない減少していくことから、皮膚にしわやたるみが発生すると考えられている。
【０００４】
さらに従来コラーゲンは、様々な結合組織に、力学的な強度を与えることに重要な役割を果たすことや、現在では、細胞の代謝、形態、増殖、分化、移動などの様々な活動に影響を与えることが知られており、線維芽細胞などの細胞におけるコラーゲン産生量を調節することによる、膠原病等の治療、ケロイドの予防、皮膚老化の予防への応用が期待されている。
【０００５】
皮膚のしわの改善や皮膚の弾力を増進する化粧料として、特許文献１には、有効成分としてレチノールを含有する化粧料が開示されている。また、ケラチン物質（皮膚等）のケア等に使用する組成物として、特許文献２には、親油性活性剤を含むナノカプセルが開示されている。
【０００６】
しかし、特許文献１又は２に記載のレチノールや親油性活性剤は、皮膚刺激性が強く、また不安定な物質であるため特殊な製剤化技術を必要とする。さらに特許文献１及び２には、クララエキス等の特定の植物エキス、又はアルブチン等の特定の化合物が、コラーゲン産生を促進し、皮膚の老化を防止する点については何も開示していない。
【特許文献１】特開２００３−８１７３７公報
【特許文献２】特開２００３−２９２４２０公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、肌の弾力や張りに大きく影響し、若々しい肌を保つ上で重要なコラーゲンを皮膚線維芽細胞に産出させるコラーゲン産生促進剤、及び該コラーゲン産生促進剤を配合した肌の張り及びしわの改善効果を有する組成物を提供することを目的としてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、特定の植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類がコラーゲンの産生を促進する作用を有することを見出し、この知見に基づき本発明を完成させた。
【０００９】
すなわち、本発明は、クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤を提供する。
更に、本発明は、前記コラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤、浴用剤又は飲食物を提供する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のクララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を有効成分として含有するコラーゲン産生促進剤は、皮膚の線維芽細胞においてコラーゲン産生の促進効果を有する。これらのコラーゲン産生促進剤は、皮膚における線維芽細胞のコラーゲン量を多くすることができるので、結果として、肌のしわやたるみを改善することができ、抗老化化粧料、抗老化浴用剤及び抗老化飲食物の有効成分としての利用が期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするものである。
【００１２】
前記植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる２種以上含有する本発明のコラーゲン産生促進剤としては、
クララエキスとアルギン酸オリゴ糖類、アルブチン、イトヒメハギエキス、カキエキス、シャクヤクエキス、タンジンエキス、又はプーアルエキスとの組み合わせ；
イトヒメハギエキスとアルブチン、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、プーアルエキス、又はアルギン酸オリゴ糖類との組み合わせ；
クララエキス、イトヒメハギエキス、及びアルギン酸オリゴ糖類の組み合わせ；
イトヒメハギエキス、アルブチン、及びシャクヤクエキスの組み合わせ；
イトヒメハギエキス、アルブチン、及びカキエキスの組み合わせ；
から選ばれる組み合わせを含有するものが、肌のしわやたるみの改善作用に特に優れることから好ましい。
【００１３】
本発明で使用するクララエキスとは、マメ科植物のクララの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１４】
本発明で使用するイトヒメハギエキスとは、ヒトハギ科植物のイトヒメハギの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１５】
本発明で使用するカキエキスとは、カキノキ科植物のカキの葉を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１６】
本発明で使用するタンジンエキスとは、シソ科植物のタンジンの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１７】
本発明で使用するシャクヤクエキスとは、ボタン科植物のシャクヤクの根の外皮を除去したものを用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１８】
本発明で使用するプーアルエキスとは、ツバキ科植物のチャの葉を黒麹菌などで後発酵させたもの、いわゆるプーアルの葉を用いて抽出する。
【００１９】
本発明において、クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキスなどの植物エキスとしては、上記の各植物の各種部位を未乾燥のまま又は乾燥させた後そのままに、あるいは、破砕又は粉砕後に搾取して使用することができる。さらに、これらを溶媒で抽出して得られるエキスや、該エキスから抽出溶媒を蒸発又は凍結乾燥して得られる不揮発分を使用することができる。
【００２０】
ここで用いられる抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコールなどの低級アルコール類、アセトンなどのケトン類、酢酸エチルなどのエステル類、ジエチルエーテルなどのエーテル類、トルエンなどの芳香族類等の各種の溶媒が挙げられ、単独又は２種以上の溶媒を任意に組み合わせて使用することができる。
【００２１】
本発明で使用するアルブチンとは、コケモモ、ウワウルシ、ナシなどの植物に含まれる天然型（β−グルコシド型）の配糖体であり、化学名が４−ヒドロキシフェニル−β−Ｄ−グルコシピラノシドのものを用いることができる。
【００２２】
本発明で使用するアルギン酸オリゴ糖類とは、高分子アルギン酸又は高分子アルギン酸塩（ナトリウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩など）を低分子化し、分子量を２０００〜２００００に調製したものを用いることが好ましい。そして、その分解方法については、酸又はアルカリ分解、酵素分解、熱分解などの方法で良く、その手法は問わず、また、高分子アルギン酸を低分子アルギン酸とした後、低分子アルギン酸塩にしたものでも良い。
【００２３】
本発明で使用される植物エキスは、医薬又は民間薬、食品、化粧品の成分として一般的に用いられるものであり、その安全性が確認されているものである。
【００２４】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、前記植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有し、コラーゲン産生促進剤への総配合量はその剤型によっても異なるものであり、蒸発残分をそのまま使用しても構わないし、目的用途によって適宜、配合量を調整すればよく、また、本発明のコラーゲン産生促進剤の使用量にも特に制限はなく、用途や適用により適宜調整することができる。
【００２５】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、外用又は内用素材への処理など様々な形態に適用できる。また、通常の外用又は内用素材への処理などで使用されている薬剤などとも組み合わせて使用することができ、併用薬剤により本発明の効果がより発現しやすくなる。
【００２６】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、医薬品、医薬部外品、局所又は全身用の皮膚化粧品、頭皮・頭髪に適用する薬用又は化粧用の製剤類をはじめとする各種の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物などに配合することができる。
【００２７】
本発明の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物は、前記コラーゲン産生促進剤の１種又は２種以上を含有する。そして前記コラーゲン産生促進剤の皮膚外用剤等への総配合量は、剤型により適宜異なるが、前記皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物全体の質量に対し、一般的には、前記コラーゲン産生促進剤に含有される植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類の配合量に換算して、０.０１質量％〜１０質量％、好ましくは０.０２５質量％〜５質量％、さらに特定すると０.０５質量％〜２.５質量％となるように含有することが望ましい。
【００２８】
本発明の皮膚外用剤及び浴用剤には、前記コラーゲン産生促進剤の他に、通常の皮膚外用剤又は浴用剤において従来から使用されている公知の機能成分、例えば、保湿剤、エモリエント剤、血行促進剤、細胞賦活化剤、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤、美白剤、過酸化物抑制剤などを配合することができる。
【００２９】
公知の機能成分としてより具体的には、グリセリン、ブチレングリコール、尿素、アミノ酸類などの保湿剤；スクワラン、マカデミアナッツ油、オリーブ油、ホホバ油、シリコン油などのエモリエント剤；ビタミンＥ類、トウガラシチンキなどの血行促進剤；核酸などの細胞賦活化剤、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ジブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、酢酸トコフェロールなどの抗酸化剤；グリチルリチン、アラントインなどの抗炎症剤；ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩、パラヒドロキシ安息香酸エステルなどの抗菌剤；アスコルビン酸などの美白剤；スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）などの過酸化物抑制剤など、種々の機能成分を配合することができる。
また、オウゴンエキス、イチョウエキス、胎盤抽出物、乳酸菌培養抽出物などの植物・動物・微生物由来の各種抽出物なども制限なく添加して使用することができる。
【００３０】
本発明の皮膚外用剤とは、外用可能な剤であって、その剤型には特に制限はなく、例えば、ペースト剤、クリーム、ジェル、軟膏、ローション、乳液、パック、パウダー、ハップ剤などが例示できる。
【００３１】
本発明の浴用剤の剤型には特に制限はなく、例えば、粉末、顆粒状などの固形製剤、乳液、ペースト状などの液体製剤などが例示できる。
【００３２】
本発明の飲食物には、前記コラーゲン産生促進剤の他に、通常食品に使用されている様々な材料を特に制限なく併用することができる。
【００３３】
本発明の飲食物の剤型としては適用可能なあらゆる形態があり、例えば、ビスケット、クッキー、錠剤、カプセル剤、キャンディー、ガム、粉末などの固形製剤、飲料などの液体製剤、ゼリーなどの半固形製剤などが例示できる。
【００３４】
また、本発明の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物には、その剤型化のために界面活性剤、油脂類などの基材成分や、必要に応じて増粘剤、防腐剤、等張化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、キレート剤、香料、着色料などの種々の添加物を併用できる。
【００３５】
上記の界面活性剤として、特に限定されるものではないが、一般的な非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、両性界面活性剤を用いることができる。例えば、高級アルコールのアルキレンオキサイド付加物、高級アルキルアミンのアルキレンオキサイド付加物、高級脂肪酸のアルキレンオキサイド付加物、高級脂肪酸アミドのアルキレンオキサイド付加物、多価アルコールの脂肪酸エステル、硬化ひまし油のアルキレンオキサイド付加物、ポリエチレングリコールソルビタンアルキルエステル、ステロール等のアルキレンオキサイド付加物などの非イオン界面活性剤；アルキル硫酸ナトリウム、アルキロイルメチルタウリンナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸ナトリウムなどの陰イオン界面活性剤；塩化アルキルピリジニウム、塩化ジステアリルジメリルアンモニウムなどの陽イオン界面活性剤；アミノプロピオン酸ナトリウム、アルキルポリアミノエチルグリシンなどの両性界面活性剤が挙げられる。そして、これらの界面活性剤は１種又は２種以上を選択して使用することができる。
【００３６】
本発明において使用可能な基材成分として、特に限定されるものではないが、例えば、オリーブ油、ツバキ油、アボカド油、マカデミアナッツ油、杏仁油、ホホバ油、スクワラン、スクワレン、馬油、パラフィン、シリコンなど、一般的に知られている油脂類が挙げられる。
【００３７】
本発明において使用可能な増粘剤として、特に限定されるものではないが、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルアクリルアミド、ポリエチレングリコール、及びこれらの各種誘導体；ヒドロキシアルキルセルロースなどのセルロース類及びその誘導体；デキストラン、ゼラチン、アラビアガム、トラガントガムなどのガム類；カルボキシビニルポリマーなどの水溶性高分子などが挙げられる。
【００３８】
本発明において使用可能な防腐剤として、特に限定されるものではないが、例えば、パラヒドロキシ安息香酸エステル、パラオキシ安息香酸塩とその誘導体、フェノキシエタノール、ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩などが挙げられる。
【００３９】
本発明において使用可能な等張化剤として、特に限定されるものではないが、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムなどの無機塩類が挙げられる。
【００４０】
本発明において使用可能な紫外線吸収剤として、特に限定されるものではないが、例えば、パラアミノ安息香酸、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、ベンゾトリアゾール系紫外線吸収剤などが挙げられる。
【００４１】
本発明において使用可能なキレート剤として、特に限定されるものではないが、例えば、エチレンジアミン四酢酸、フィチン酸、クエン酸及びこれらの水溶性塩などが挙げられる。
【実施例】
【００４２】
以下、本発明を更に詳しく説明するために実施例によって説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
（１）植物エキスの製造方法
植物エキスは、以下の表１に示す各植物の各部位を、５０質量％エタノール水溶液の環流下で１時間かけて抽出後、ろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去して各植物エキスを得た。得られた植物エキスを以下に示す実施例に使用した。
【００４３】
【表１】
【００４４】
（２）アルギン酸オリゴ糖類の製造方法
市販のアルギン酸ナトリウムであるＳＫＡＴ−ＵＬＶ（キミカ社製）１.５ｇ、リン酸アンモニウム０.０５ｇ、酵母エキス０.０１ｇ、塩化ナトリウム２ｇをイオン交換水１００ｇ中に溶解させ、オートクレーブで２.１ａｔｍ、１２１℃、２０分間の滅菌操作を行った。滅菌処理後のアルギン酸溶液に対し、アルギン酸分解菌であるＰｓｅｕｄｏ ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ ｈａｌｏｐｌａｎｃｔｉｃ（ＩＴＭ ２２２）を一白金耳埴菌し、室温下で８時間前培養を行った。
【００４５】
次に、得られた前培溶液１ｍＬを、アルギン酸ナトリウム分解用培地（リン酸アンモニウム０.１５ｇ、酵母エキス０.０１ｇ、アルギン酸ナトリウム（キミカ社製）９.０ｇ、塩化ナトリウム６.０ｇをイオン交換水３００ｇに溶解させ、オートクレーブで２.１ａｔｍ、１２１℃、２０分間の滅菌操作を行ったものを使用）に添加後、室温条件下で４８時間振とう培養を行った。
【００４６】
振とう培養後のアルギン酸ナトリウム分解液から、菌体除去のために遠心分離操作（１００００ｒｐｍ×１０分間）を行い、上澄み液を得た。得られた上澄み液に液量と同量のメタノールを加え、分解後のアルギン酸ナトリウム溶液から高分子量（数万）のアルギン酸ナトリウムを沈降させて濾別し、低分子量のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムを含有している濾液を得た。
【００４７】
アルギン酸オリゴ糖ナトリウムを含有している濾液の中から塩化ナトリウムなどの不純物を除去し、精製を行うために、ゲル濾過操作（Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０、Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を行った。ゲル濾過操作後、得られた液を濃縮して、凍結乾燥機で乾燥を行い、目的とするアルギン酸オリゴ糖ナトリウム（平均分子量約２０００）を５.４ｇ（収率６０％）得た。
【００４８】
また、振とう培養時間を４８時間から８時間に換えた以外は上記と同様に操作して、重量平均分子量約２万のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムを得た。
更には、得られた重量平均分子量約２０００のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムをイオン交換樹脂（アンバーライト１００６Ｆ Ｈ、ローム・アンド・ハース・ジャパン社製）と共に操作して、重量平均分子量約２０００のアルギン酸オリゴ糖を得た。
【００４９】
なお、重量平均分子量の測定は、水系ゲルパーミッションクロマトグラフィー装置ＧＰＣ−８０２０（東ソー(株)製）を用いて測定した。測定条件は、カラムにＧ３０００（東ソー(株)製）とＧ５０００（東ソー(株)製）を直結して用い 、カラム温度４０℃、カラム流量１.０ｍＬ／ｍｉｎ、溶出液０.１Ｍ ＮａＣｌ水溶液、ＲＩ検出であり、重量平均分子量はＰＥＧ（ポリエチレングリコール）を標品として換算した値である。
【００５０】
得られたアルギン酸オリゴ糖ナトリウム及びアルギン酸オリゴ糖を以下に示す実施例に使用した。
【００５１】
（３）アルブチン
和光純薬工業(株)製のアルブチンを以下に示す実施例に使用した。
（Ｉ）コラーゲン産生促進剤
［実施例１］
アルブチンを１０ｍｇ／ｍＬとなるよう調製し、その後、クリーンベンチ内で０.２μｍのシリンジフィルターを用いて滅菌した。そして、滅菌精製水を加えて２ｍｇ／ｍＬとなるよう調整して、培地に添加するアルブチンの希釈液を作製した。
次に、倉敷紡績(株)製の正常ヒト皮膚線維芽細胞を規定の調製法に基づき、分化、培養を行った。培地には、低血清増殖添加剤（ＬＳＧＳ）を添加した正常ヒト皮膚線維芽細胞増殖用低血清培地（Ｍｅｄｉｕｍ１０６Ｓ）を用いた。
培地に正常ヒト成人線維芽細胞（５０００００ｃｅｌｌ／ｍＬ）の溶液を播種し、３７℃、５％−ＣＯ2、加湿のインキュベーターに入れ、１日おきに培地を交換し、６日間培養した。
６日後、シャーレから細胞をはがし、細胞浮遊液を作成した（１５０００ｃｅｌｌ／ｍＬ）。細胞浮遊液を２４ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに１ｍＬずつ播種し、２日間培養した。培地交換の際、前記アルブチンの希釈液を１０μＬ（最終濃度が２０μｇ／ｍＬとなる）添加し、さらに２日間培養した。２日おきに培地交換等を行い、細胞播種８日目に培地を回収した。回収した培地をＴａＫａＲａ社のＰｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ ｔｙｐｅ Ｉ Ｃ−ｐｅｐｔｉｄｅ（ＰＩＰ）ＥＩＡ Ｋｉｔを使用し、その使用法に準じて、培養６日目から８日目までの４８時間培養後の上清中に存在するコラーゲン前駆体タンパク質であるＩ型プロコラーゲンＣ末端プロペプチド（以下、ＰＩＰと略す）の量を測定した。このＰＩＰはコラーゲンの量を反映するものである。
この時のＰＩＰの量は比較例１に比べ、すなわち、コラーゲン産生促進成分（アルブチン）の希釈液の代わりに滅菌精製水を添加して、その他は同様の操作をした比較例１のＰＩＰの量と比べると、コラーゲン産生促進能が１７５％であった。
【００５２】
［実施例２〜３７］
コラーゲン産生促進成分及び添加した最終濃度を、表２のように換えた以外は実施例１と同様の操作をして、得られたＰＩＰの量と比較例１のＰＩＰの量とを、同様に比較した結果を表２に示す。
【００５３】
【表２】
【００５４】
表２の実施例１〜３７の結果が示すように、コラーゲン産生促進成分として各種植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類及びその組成物を用いたものは、正常ヒト皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン産生に対し、有意にコラーゲン産生促進効果を示していることがわかる。
【００５５】
（II）皮膚外用剤の処方例
表３〜１７に示す組成でコラーゲン産生促進剤を配合した皮膚外用剤（化粧水、乳液、クリーム、リップスティック、ボディクリーム）の処方を調製した。調製方法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。また、リップスティックの表中のヒマシ油の「残量」も全量を１００ｇとする量である。
【００５６】
化粧水（実施例３８〜５３、比較例２）
表３〜５のＡ成分、Ｂ成分のそれぞれを８０℃で加温して溶解し、Ｂ成分をＡ成分に撹拌しながら徐々に加えて乳化した。その後、撹拌しながら冷却し、４０℃でＣ成分を加えた後、３５℃で調製を終了した。
【００５７】
【表３】
【００５８】
【表４】
【００５９】
【表５】
【００６０】
乳液（実施例５４〜６９、比較例３）
表６〜８のＤ成分、Ｅ成分のそれぞれを８０℃に加温して溶解し、Ｄ成分をＥ成分に撹拌しながら加え、均一とした後、ホモミキサーで乳化した。その後、ハンドルミキサーで撹拌しながら冷却し、４０℃以下でＦ成分を加えて、調製を終了した。
【００６１】
【表６】
【００６２】
【表７】
【００６３】
【表８】
【００６４】
クリーム（実施例７０〜８５、比較例４）
表９のＧ成分、Ｈ成分をそれぞれ７５℃に加温して溶解し、Ｇ成分をパドルミキサーで撹拌しながらＨ成分を少量ずつ加えた。その後、撹拌しながら冷却し、４０℃でＩ成分を加えた後、約３５℃で調製を終了した。
【００６５】
【表９】
【００６６】
【表１０】
【００６７】
【表１１】
【００６８】
リップスティック（実施例８６〜１０１、比較例５）
表１２〜１４のＪ成分を８５℃に加温して溶解し、Ｋ成分を撹拌しながらＪ成分を少量ずつ加えて均一に混合した。その後、撹拌しながら冷却し、６０℃付近でＬ成分を加えた後、更に冷却した。その後容器に充填し、調製を終了した。
【００６９】
【表１２】
【００７０】
【表１３】
【００７１】
【表１４】
【００７２】
ボディクリーム（実施例１０２〜１１７、比較例６）
表１５〜１７のＭ成分、Ｎ成分をそれぞれ７５℃に加温して、Ｍ成分をパドルミキサーで撹拌しながらＮ成分を少量ずつ加えた。その後、撹拌しながら冷却し、４５℃以下でＯ成分を加えて、調製を終了した。
【００７３】
【表１５】
【００７４】
【表１６】
【００７５】
【表１７】
【００７６】
評 価
前記実施例３８〜１１７、比較例２〜６の皮膚外用剤について、肌のしわや張り、弾力の低下の悩みを有する３０〜４０代の女性を対象としたモニター試験を行い、その評価を行った。
皮膚外用剤のそれぞれについて、女性３名ずつの（１７群×５処方）計２５５名に対して、化粧水、乳液、クリームについては１日２回（朝、夕）顔面への塗布、リップスティックについては１日３回（朝、昼、夕）口唇への塗布、ボディクリームについては１日２回（朝、夕）ボディへの塗布をすること以外は通常の生活をするモニター試験を１ヶ月間続けた。１ヶ月後、その使用感を下記の基準で評価した結果を表１８に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有 効 ：使用前に比べて肌の張りや弾力を感じる
やや有効：使用前に比べて肌の張りや弾力をやや感じる
効果無し：使用前と変化なし
【００７７】
【表１８】
【表１９】
【００７８】
本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した実施例３８〜１１７の皮膚外用剤では、各部位に張りや弾力を感じたといった人が多かった一方で、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合していない比較例２〜６の皮膚外用剤では変化なしとの評価であったことから、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した皮膚外用剤は、肌あるいは口唇の張りや弾力の向上に対していずれも有意であった。
【００７９】
（III）浴用剤の処方
次に、表１９〜２１に示す組成でコラーゲン産生促進剤を配合した抗老化浴用剤（入浴剤）の処方を調製した。調製法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【００８０】
入浴剤（実施例１１８〜１３３、比較例７）
表１９〜２１のＰ成分とＱ成分をそれぞれ均一になるまで混合した後、Ｐ成分とＱ成分とを混合し、均一になるまで充分混合して、調製を終了した。
【００８１】
【表２０】
【００８２】
【表２１】
【００８３】
【表２２】
【００８４】
評 価
前記実施例１１８〜１３３、比較例７の入浴剤について、肌のしわや張り、弾力の低下の悩みを有する３０〜４０代の女性を対象としたモニター試験を行い、その評価を行った。
入浴剤のそれぞれについて、女性３名ずつの（１７群）計５１名に対して、毎日の入浴時にお湯１８０Ｌに対して入浴剤３０ｍＬを溶かして入浴すること以外は通常の生活をするモニター試験を１ヶ月間続けた。１ヶ月後、その使用感を下記の基準で評価した結果を表２２に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有 効 ：使用前に比べて肌の張りや弾力を感じる
やや有効：使用前に比べて肌の張りや弾力をやや感じる
効果無し：使用前と変化なし
【００８５】
【表２３】
【００８６】
本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した実施例１１８〜１３３の入浴剤では、肌に張りや弾力を感じたといった人が多かった一方で、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合していない比較例７の入浴剤では変化なしとの評価であったことから、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した入浴剤は、肌の張りや弾力の向上に対しいずれも有意であった。
【００８７】
（IV）飲食物の処方
次に、表２３〜３０に示す組成でコラーゲン産生促進剤を配合した抗老化飲食物（パン、ゼリー、ソーセージ、サプリメント(錠剤)）の処方を調製した。調製法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【００８８】
パン（実施例１３４〜１４１、比較例８）
表２３及び２４のＲ成分全部を混ぜ合わせたものに、４０℃に加温したＳ成分とＴ成分を混ぜ合わせたもの加えて、均一になった時点でよくこねた。３５℃で４０分間一次発酵させ、空気を抜くように再度こねた。４０℃で４０分間二次発酵後、１８０℃で２５分間焼いた。
【００８９】
【表２４】
【００９０】
【表２５】
【００９１】
ゼリー（実施例１４２〜１４９、比較例９）
表２５及び２６のＷ成分にＶ成分を溶解した８０℃のお湯にＵ成分を溶かし、よく混ぜ合わせた。型に１０ｇずつ流し入れた後、冷蔵庫で固めて、調製を終了した。
【００９２】
【表２６】
【００９３】
【表２７】
【００９４】
ソーセージ（実施例１５０〜１５７、比較例１０）
表２７及び２８のＸ成分とＹ成分とを良く混ぜ合わせ、冷蔵庫で冷やした後、塩抜きした羊の腸に詰めた。腸詰めしたものを６０〜７０℃で１時間燻製し、更に１時間かけて乾燥させた。乾燥させたものを約７０℃のお湯で３０分程度ゆでて殺菌処理した。そして再度乾燥させて、調製を終了した。
【００９５】
【表２８】
【００９６】
【表２９】
【００９７】
サプリメント(錠剤)（実施例１５８〜１６５、比較例１１）
表２９及び３０のＡＡ成分とＡＢ成分を良く混ぜ合わせたものを、打錠機を用いてタブレット状に押し固め、錠剤（０.３ｇ）を形成した。
【００９８】
【表３０】
【００９９】
【表３１】
【０１００】
評 価
前記実施例１３４〜１６５、比較例７〜１１の飲食物について、肌のしわや張り、弾力の低下の悩みを有する３０〜４０代の女性を対象としたモニター試験を行い、その評価を行った。
飲食物のそれぞれについて、女性３名ずつの（９群×４処方）計１０８名に対して、パンについては、毎日の朝食時に前記実施例又は比較例のパンを主食として９０ｇ食べること、ゼリーについては、毎日の夕食後に前記実施例又は比較例のゼリーを５０ｇ摂取すること、ソーセージについては、毎日の夕食時に前記実施例又は比較例のソーセージを副食として約６０ｇ食べること、サプリメント（錠剤）については、毎日３回の食事後に前記実施例又は比較例のサプリメント（錠剤）を５錠（１.５ｇ）摂取すること以外は通常の生活をするモニター試験を１ヶ月間続けた。１ヶ月後、その使用感を下記の基準で評価した結果を表３１に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有 効 ：使用前に比べて肌の張りや弾力を感じる
やや有効：使用前に比べて肌の張りや弾力をやや感じる
効果無し：使用前と変化なし
【０１０１】
【表３２】
【０１０２】
本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した実施例１３４〜１６５の飲食物では、肌に張りや弾力を感じたといった人が多かった一方で、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合していない比較例８〜１１の飲食物では変化なしとの評価であったことから、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した飲食物は、肌の張りや弾力の向上に対しいずれも有意であった。
【産業上の利用可能性】
【０１０３】
クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン又はアルギン酸オリゴ糖類及びこれらの混合物は、コラーゲン産生を促進させる作用があり、コラーゲン産生促進剤として有用である。本発明のコラーゲン産生促進剤は、線維芽細胞において産生されるコラーゲンの量を増大させるので、その結果として、しわ、たるみの予防、緩和、改善がなされて、老化現象の防止、改善を目的とした化粧品をはじめとする各種の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物などへの利用が可能となる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚の弾力、張り、潤いに重要な役割を担うコラーゲンの産生促進剤に関する。更には、コラーゲン産生促進剤を含有する皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、高齢化社会や女性の社会進出にともない、美容に対する意識が向上している。しかし、皮膚の機能は年齢と共に低下し、老化により弾力や張りを失い、しわが生じてくる。この原因として、皮膚中に存在するコラーゲンとヒアルロン酸の量の低下があげられる。
【０００３】
皮膚は、皮下組織、真皮、表皮の三層から成っていて、皮膚の弾力など皮膚の機能に最も影響を与えているのが真皮であり、この真皮にはコラーゲンとヒアルロン酸が多く含まれている。これらコラーゲンとヒアルロン酸は、真皮中に存在する皮膚線維芽細胞が産生することが知られており、皮膚の弾力性の保持に重要な役割を担っている。
コラーゲンは人のタンパク質全体の約３０％を占めており、そのうち真皮には約７０％が存在する。コラーゲンは細胞をつなぎとめる働きをしているが、これが老化にともない減少していくことから、皮膚にしわやたるみが発生すると考えられている。
【０００４】
さらに従来コラーゲンは、様々な結合組織に、力学的な強度を与えることに重要な役割を果たすことや、現在では、細胞の代謝、形態、増殖、分化、移動などの様々な活動に影響を与えることが知られており、線維芽細胞などの細胞におけるコラーゲン産生量を調節することによる、膠原病等の治療、ケロイドの予防、皮膚老化の予防への応用が期待されている。
【０００５】
皮膚のしわの改善や皮膚の弾力を増進する化粧料として、特許文献１には、有効成分としてレチノールを含有する化粧料が開示されている。また、ケラチン物質（皮膚等）のケア等に使用する組成物として、特許文献２には、親油性活性剤を含むナノカプセルが開示されている。
【０００６】
しかし、特許文献１又は２に記載のレチノールや親油性活性剤は、皮膚刺激性が強く、また不安定な物質であるため特殊な製剤化技術を必要とする。さらに特許文献１及び２には、クララエキス等の特定の植物エキス、又はアルブチン等の特定の化合物が、コラーゲン産生を促進し、皮膚の老化を防止する点については何も開示していない。
【特許文献１】特開２００３−８１７３７公報
【特許文献２】特開２００３−２９２４２０公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、肌の弾力や張りに大きく影響し、若々しい肌を保つ上で重要なコラーゲンを皮膚線維芽細胞に産出させるコラーゲン産生促進剤、及び該コラーゲン産生促進剤を配合した肌の張り及びしわの改善効果を有する組成物を提供することを目的としてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、特定の植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類がコラーゲンの産生を促進する作用を有することを見出し、この知見に基づき本発明を完成させた。
【０００９】
すなわち、本発明は、クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤を提供する。
更に、本発明は、前記コラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤、浴用剤又は飲食物を提供する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のクララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を有効成分として含有するコラーゲン産生促進剤は、皮膚の線維芽細胞においてコラーゲン産生の促進効果を有する。これらのコラーゲン産生促進剤は、皮膚における線維芽細胞のコラーゲン量を多くすることができるので、結果として、肌のしわやたるみを改善することができ、抗老化化粧料、抗老化浴用剤及び抗老化飲食物の有効成分としての利用が期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするものである。
【００１２】
前記植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる２種以上含有する本発明のコラーゲン産生促進剤としては、
クララエキスとアルギン酸オリゴ糖類、アルブチン、イトヒメハギエキス、カキエキス、シャクヤクエキス、タンジンエキス、又はプーアルエキスとの組み合わせ；
イトヒメハギエキスとアルブチン、シャクヤクエキス、カキエキス、タンジンエキス、プーアルエキス、又はアルギン酸オリゴ糖類との組み合わせ；
クララエキス、イトヒメハギエキス、及びアルギン酸オリゴ糖類の組み合わせ；
イトヒメハギエキス、アルブチン、及びシャクヤクエキスの組み合わせ；
イトヒメハギエキス、アルブチン、及びカキエキスの組み合わせ；
から選ばれる組み合わせを含有するものが、肌のしわやたるみの改善作用に特に優れることから好ましい。
【００１３】
本発明で使用するクララエキスとは、マメ科植物のクララの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１４】
本発明で使用するイトヒメハギエキスとは、ヒトハギ科植物のイトヒメハギの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１５】
本発明で使用するカキエキスとは、カキノキ科植物のカキの葉を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１６】
本発明で使用するタンジンエキスとは、シソ科植物のタンジンの根を用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１７】
本発明で使用するシャクヤクエキスとは、ボタン科植物のシャクヤクの根の外皮を除去したものを用いて抽出するが、地上部さらに同属植物を用いて抽出することができる。
【００１８】
本発明で使用するプーアルエキスとは、ツバキ科植物のチャの葉を黒麹菌などで後発酵させたもの、いわゆるプーアルの葉を用いて抽出する。
【００１９】
本発明において、クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキスなどの植物エキスとしては、上記の各植物の各種部位を未乾燥のまま又は乾燥させた後そのままに、あるいは、破砕又は粉砕後に搾取して使用することができる。さらに、これらを溶媒で抽出して得られるエキスや、該エキスから抽出溶媒を蒸発又は凍結乾燥して得られる不揮発分を使用することができる。
【００２０】
ここで用いられる抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコールなどの低級アルコール類、アセトンなどのケトン類、酢酸エチルなどのエステル類、ジエチルエーテルなどのエーテル類、トルエンなどの芳香族類等の各種の溶媒が挙げられ、単独又は２種以上の溶媒を任意に組み合わせて使用することができる。
【００２１】
本発明で使用するアルブチンとは、コケモモ、ウワウルシ、ナシなどの植物に含まれる天然型（β−グルコシド型）の配糖体であり、化学名が４−ヒドロキシフェニル−β−Ｄ−グルコシピラノシドのものを用いることができる。
【００２２】
本発明で使用するアルギン酸オリゴ糖類とは、高分子アルギン酸又は高分子アルギン酸塩（ナトリウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩など）を低分子化し、分子量を２０００〜２００００に調製したものを用いることが好ましい。そして、その分解方法については、酸又はアルカリ分解、酵素分解、熱分解などの方法で良く、その手法は問わず、また、高分子アルギン酸を低分子アルギン酸とした後、低分子アルギン酸塩にしたものでも良い。
【００２３】
本発明で使用される植物エキスは、医薬又は民間薬、食品、化粧品の成分として一般的に用いられるものであり、その安全性が確認されているものである。
【００２４】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、前記植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有し、コラーゲン産生促進剤への総配合量はその剤型によっても異なるものであり、蒸発残分をそのまま使用しても構わないし、目的用途によって適宜、配合量を調整すればよく、また、本発明のコラーゲン産生促進剤の使用量にも特に制限はなく、用途や適用により適宜調整することができる。
【００２５】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、外用又は内用素材への処理など様々な形態に適用できる。また、通常の外用又は内用素材への処理などで使用されている薬剤などとも組み合わせて使用することができ、併用薬剤により本発明の効果がより発現しやすくなる。
【００２６】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、医薬品、医薬部外品、局所又は全身用の皮膚化粧品、頭皮・頭髪に適用する薬用又は化粧用の製剤類をはじめとする各種の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物などに配合することができる。
【００２７】
本発明の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物は、前記コラーゲン産生促進剤の１種又は２種以上を含有する。そして前記コラーゲン産生促進剤の皮膚外用剤等への総配合量は、剤型により適宜異なるが、前記皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物全体の質量に対し、一般的には、前記コラーゲン産生促進剤に含有される植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類の配合量に換算して、０.０１質量％〜１０質量％、好ましくは０.０２５質量％〜５質量％、さらに特定すると０.０５質量％〜２.５質量％となるように含有することが望ましい。
【００２８】
本発明の皮膚外用剤及び浴用剤には、前記コラーゲン産生促進剤の他に、通常の皮膚外用剤又は浴用剤において従来から使用されている公知の機能成分、例えば、保湿剤、エモリエント剤、血行促進剤、細胞賦活化剤、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤、美白剤、過酸化物抑制剤などを配合することができる。
【００２９】
公知の機能成分としてより具体的には、グリセリン、ブチレングリコール、尿素、アミノ酸類などの保湿剤；スクワラン、マカデミアナッツ油、オリーブ油、ホホバ油、シリコン油などのエモリエント剤；ビタミンＥ類、トウガラシチンキなどの血行促進剤；核酸などの細胞賦活化剤、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ジブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、酢酸トコフェロールなどの抗酸化剤；グリチルリチン、アラントインなどの抗炎症剤；ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩、パラヒドロキシ安息香酸エステルなどの抗菌剤；アスコルビン酸などの美白剤；スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）などの過酸化物抑制剤など、種々の機能成分を配合することができる。
また、オウゴンエキス、イチョウエキス、胎盤抽出物、乳酸菌培養抽出物などの植物・動物・微生物由来の各種抽出物なども制限なく添加して使用することができる。
【００３０】
本発明の皮膚外用剤とは、外用可能な剤であって、その剤型には特に制限はなく、例えば、ペースト剤、クリーム、ジェル、軟膏、ローション、乳液、パック、パウダー、ハップ剤などが例示できる。
【００３１】
本発明の浴用剤の剤型には特に制限はなく、例えば、粉末、顆粒状などの固形製剤、乳液、ペースト状などの液体製剤などが例示できる。
【００３２】
本発明の飲食物には、前記コラーゲン産生促進剤の他に、通常食品に使用されている様々な材料を特に制限なく併用することができる。
【００３３】
本発明の飲食物の剤型としては適用可能なあらゆる形態があり、例えば、ビスケット、クッキー、錠剤、カプセル剤、キャンディー、ガム、粉末などの固形製剤、飲料などの液体製剤、ゼリーなどの半固形製剤などが例示できる。
【００３４】
また、本発明の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物には、その剤型化のために界面活性剤、油脂類などの基材成分や、必要に応じて増粘剤、防腐剤、等張化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、キレート剤、香料、着色料などの種々の添加物を併用できる。
【００３５】
上記の界面活性剤として、特に限定されるものではないが、一般的な非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、両性界面活性剤を用いることができる。例えば、高級アルコールのアルキレンオキサイド付加物、高級アルキルアミンのアルキレンオキサイド付加物、高級脂肪酸のアルキレンオキサイド付加物、高級脂肪酸アミドのアルキレンオキサイド付加物、多価アルコールの脂肪酸エステル、硬化ひまし油のアルキレンオキサイド付加物、ポリエチレングリコールソルビタンアルキルエステル、ステロール等のアルキレンオキサイド付加物などの非イオン界面活性剤；アルキル硫酸ナトリウム、アルキロイルメチルタウリンナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸ナトリウムなどの陰イオン界面活性剤；塩化アルキルピリジニウム、塩化ジステアリルジメリルアンモニウムなどの陽イオン界面活性剤；アミノプロピオン酸ナトリウム、アルキルポリアミノエチルグリシンなどの両性界面活性剤が挙げられる。そして、これらの界面活性剤は１種又は２種以上を選択して使用することができる。
【００３６】
本発明において使用可能な基材成分として、特に限定されるものではないが、例えば、オリーブ油、ツバキ油、アボカド油、マカデミアナッツ油、杏仁油、ホホバ油、スクワラン、スクワレン、馬油、パラフィン、シリコンなど、一般的に知られている油脂類が挙げられる。
【００３７】
本発明において使用可能な増粘剤として、特に限定されるものではないが、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルアクリルアミド、ポリエチレングリコール、及びこれらの各種誘導体；ヒドロキシアルキルセルロースなどのセルロース類及びその誘導体；デキストラン、ゼラチン、アラビアガム、トラガントガムなどのガム類；カルボキシビニルポリマーなどの水溶性高分子などが挙げられる。
【００３８】
本発明において使用可能な防腐剤として、特に限定されるものではないが、例えば、パラヒドロキシ安息香酸エステル、パラオキシ安息香酸塩とその誘導体、フェノキシエタノール、ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン塩などが挙げられる。
【００３９】
本発明において使用可能な等張化剤として、特に限定されるものではないが、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムなどの無機塩類が挙げられる。
【００４０】
本発明において使用可能な紫外線吸収剤として、特に限定されるものではないが、例えば、パラアミノ安息香酸、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、ベンゾトリアゾール系紫外線吸収剤などが挙げられる。
【００４１】
本発明において使用可能なキレート剤として、特に限定されるものではないが、例えば、エチレンジアミン四酢酸、フィチン酸、クエン酸及びこれらの水溶性塩などが挙げられる。
【実施例】
【００４２】
以下、本発明を更に詳しく説明するために実施例によって説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
（１）植物エキスの製造方法
植物エキスは、以下の表１に示す各植物の各部位を、５０質量％エタノール水溶液の環流下で１時間かけて抽出後、ろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去して各植物エキスを得た。得られた植物エキスを以下に示す実施例に使用した。
【００４３】
【表１】
【００４４】
（２）アルギン酸オリゴ糖類の製造方法
市販のアルギン酸ナトリウムであるＳＫＡＴ−ＵＬＶ（キミカ社製）１.５ｇ、リン酸アンモニウム０.０５ｇ、酵母エキス０.０１ｇ、塩化ナトリウム２ｇをイオン交換水１００ｇ中に溶解させ、オートクレーブで２.１ａｔｍ、１２１℃、２０分間の滅菌操作を行った。滅菌処理後のアルギン酸溶液に対し、アルギン酸分解菌であるＰｓｅｕｄｏ ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ ｈａｌｏｐｌａｎｃｔｉｃ（ＩＴＭ ２２２）を一白金耳埴菌し、室温下で８時間前培養を行った。
【００４５】
次に、得られた前培溶液１ｍＬを、アルギン酸ナトリウム分解用培地（リン酸アンモニウム０.１５ｇ、酵母エキス０.０１ｇ、アルギン酸ナトリウム（キミカ社製）９.０ｇ、塩化ナトリウム６.０ｇをイオン交換水３００ｇに溶解させ、オートクレーブで２.１ａｔｍ、１２１℃、２０分間の滅菌操作を行ったものを使用）に添加後、室温条件下で４８時間振とう培養を行った。
【００４６】
振とう培養後のアルギン酸ナトリウム分解液から、菌体除去のために遠心分離操作（１００００ｒｐｍ×１０分間）を行い、上澄み液を得た。得られた上澄み液に液量と同量のメタノールを加え、分解後のアルギン酸ナトリウム溶液から高分子量（数万）のアルギン酸ナトリウムを沈降させて濾別し、低分子量のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムを含有している濾液を得た。
【００４７】
アルギン酸オリゴ糖ナトリウムを含有している濾液の中から塩化ナトリウムなどの不純物を除去し、精製を行うために、ゲル濾過操作（Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０、Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を行った。ゲル濾過操作後、得られた液を濃縮して、凍結乾燥機で乾燥を行い、目的とするアルギン酸オリゴ糖ナトリウム（平均分子量約２０００）を５.４ｇ（収率６０％）得た。
【００４８】
また、振とう培養時間を４８時間から８時間に換えた以外は上記と同様に操作して、重量平均分子量約２万のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムを得た。
更には、得られた重量平均分子量約２０００のアルギン酸オリゴ糖ナトリウムをイオン交換樹脂（アンバーライト１００６Ｆ Ｈ、ローム・アンド・ハース・ジャパン社製）と共に操作して、重量平均分子量約２０００のアルギン酸オリゴ糖を得た。
【００４９】
なお、重量平均分子量の測定は、水系ゲルパーミッションクロマトグラフィー装置ＧＰＣ−８０２０（東ソー(株)製）を用いて測定した。測定条件は、カラムにＧ３０００（東ソー(株)製）とＧ５０００（東ソー(株)製）を直結して用い 、カラム温度４０℃、カラム流量１.０ｍＬ／ｍｉｎ、溶出液０.１Ｍ ＮａＣｌ水溶液、ＲＩ検出であり、重量平均分子量はＰＥＧ（ポリエチレングリコール）を標品として換算した値である。
【００５０】
得られたアルギン酸オリゴ糖ナトリウム及びアルギン酸オリゴ糖を以下に示す実施例に使用した。
【００５１】
（３）アルブチン
和光純薬工業(株)製のアルブチンを以下に示す実施例に使用した。
（Ｉ）コラーゲン産生促進剤
［実施例１］
アルブチンを１０ｍｇ／ｍＬとなるよう調製し、その後、クリーンベンチ内で０.２μｍのシリンジフィルターを用いて滅菌した。そして、滅菌精製水を加えて２ｍｇ／ｍＬとなるよう調整して、培地に添加するアルブチンの希釈液を作製した。
次に、倉敷紡績(株)製の正常ヒト皮膚線維芽細胞を規定の調製法に基づき、分化、培養を行った。培地には、低血清増殖添加剤（ＬＳＧＳ）を添加した正常ヒト皮膚線維芽細胞増殖用低血清培地（Ｍｅｄｉｕｍ１０６Ｓ）を用いた。
培地に正常ヒト成人線維芽細胞（５０００００ｃｅｌｌ／ｍＬ）の溶液を播種し、３７℃、５％−ＣＯ2、加湿のインキュベーターに入れ、１日おきに培地を交換し、６日間培養した。
６日後、シャーレから細胞をはがし、細胞浮遊液を作成した（１５０００ｃｅｌｌ／ｍＬ）。細胞浮遊液を２４ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに１ｍＬずつ播種し、２日間培養した。培地交換の際、前記アルブチンの希釈液を１０μＬ（最終濃度が２０μｇ／ｍＬとなる）添加し、さらに２日間培養した。２日おきに培地交換等を行い、細胞播種８日目に培地を回収した。回収した培地をＴａＫａＲａ社のＰｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ ｔｙｐｅ Ｉ Ｃ−ｐｅｐｔｉｄｅ（ＰＩＰ）ＥＩＡ Ｋｉｔを使用し、その使用法に準じて、培養６日目から８日目までの４８時間培養後の上清中に存在するコラーゲン前駆体タンパク質であるＩ型プロコラーゲンＣ末端プロペプチド（以下、ＰＩＰと略す）の量を測定した。このＰＩＰはコラーゲンの量を反映するものである。
この時のＰＩＰの量は比較例１に比べ、すなわち、コラーゲン産生促進成分（アルブチン）の希釈液の代わりに滅菌精製水を添加して、その他は同様の操作をした比較例１のＰＩＰの量と比べると、コラーゲン産生促進能が１７５％であった。
【００５２】
［実施例２〜３７］
コラーゲン産生促進成分及び添加した最終濃度を、表２のように換えた以外は実施例１と同様の操作をして、得られたＰＩＰの量と比較例１のＰＩＰの量とを、同様に比較した結果を表２に示す。
【００５３】
【表２】
【００５４】
表２の実施例１〜３７の結果が示すように、コラーゲン産生促進成分として各種植物エキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類及びその組成物を用いたものは、正常ヒト皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン産生に対し、有意にコラーゲン産生促進効果を示していることがわかる。
【００５５】
（II）皮膚外用剤の処方例
表３〜１７に示す組成でコラーゲン産生促進剤を配合した皮膚外用剤（化粧水、乳液、クリーム、リップスティック、ボディクリーム）の処方を調製した。調製方法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。また、リップスティックの表中のヒマシ油の「残量」も全量を１００ｇとする量である。
【００５６】
化粧水（実施例３８〜５３、比較例２）
表３〜５のＡ成分、Ｂ成分のそれぞれを８０℃で加温して溶解し、Ｂ成分をＡ成分に撹拌しながら徐々に加えて乳化した。その後、撹拌しながら冷却し、４０℃でＣ成分を加えた後、３５℃で調製を終了した。
【００５７】
【表３】
【００５８】
【表４】
【００５９】
【表５】
【００６０】
乳液（実施例５４〜６９、比較例３）
表６〜８のＤ成分、Ｅ成分のそれぞれを８０℃に加温して溶解し、Ｄ成分をＥ成分に撹拌しながら加え、均一とした後、ホモミキサーで乳化した。その後、ハンドルミキサーで撹拌しながら冷却し、４０℃以下でＦ成分を加えて、調製を終了した。
【００６１】
【表６】
【００６２】
【表７】
【００６３】
【表８】
【００６４】
クリーム（実施例７０〜８５、比較例４）
表９のＧ成分、Ｈ成分をそれぞれ７５℃に加温して溶解し、Ｇ成分をパドルミキサーで撹拌しながらＨ成分を少量ずつ加えた。その後、撹拌しながら冷却し、４０℃でＩ成分を加えた後、約３５℃で調製を終了した。
【００６５】
【表９】
【００６６】
【表１０】
【００６７】
【表１１】
【００６８】
リップスティック（実施例８６〜１０１、比較例５）
表１２〜１４のＪ成分を８５℃に加温して溶解し、Ｋ成分を撹拌しながらＪ成分を少量ずつ加えて均一に混合した。その後、撹拌しながら冷却し、６０℃付近でＬ成分を加えた後、更に冷却した。その後容器に充填し、調製を終了した。
【００６９】
【表１２】
【００７０】
【表１３】
【００７１】
【表１４】
【００７２】
ボディクリーム（実施例１０２〜１１７、比較例６）
表１５〜１７のＭ成分、Ｎ成分をそれぞれ７５℃に加温して、Ｍ成分をパドルミキサーで撹拌しながらＮ成分を少量ずつ加えた。その後、撹拌しながら冷却し、４５℃以下でＯ成分を加えて、調製を終了した。
【００７３】
【表１５】
【００７４】
【表１６】
【００７５】
【表１７】
【００７６】
評 価
前記実施例３８〜１１７、比較例２〜６の皮膚外用剤について、肌のしわや張り、弾力の低下の悩みを有する３０〜４０代の女性を対象としたモニター試験を行い、その評価を行った。
皮膚外用剤のそれぞれについて、女性３名ずつの（１７群×５処方）計２５５名に対して、化粧水、乳液、クリームについては１日２回（朝、夕）顔面への塗布、リップスティックについては１日３回（朝、昼、夕）口唇への塗布、ボディクリームについては１日２回（朝、夕）ボディへの塗布をすること以外は通常の生活をするモニター試験を１ヶ月間続けた。１ヶ月後、その使用感を下記の基準で評価した結果を表１８に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有 効 ：使用前に比べて肌の張りや弾力を感じる
やや有効：使用前に比べて肌の張りや弾力をやや感じる
効果無し：使用前と変化なし
【００７７】
【表１８】
【表１９】
【００７８】
本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した実施例３８〜１１７の皮膚外用剤では、各部位に張りや弾力を感じたといった人が多かった一方で、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合していない比較例２〜６の皮膚外用剤では変化なしとの評価であったことから、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した皮膚外用剤は、肌あるいは口唇の張りや弾力の向上に対していずれも有意であった。
【００７９】
（III）浴用剤の処方
次に、表１９〜２１に示す組成でコラーゲン産生促進剤を配合した抗老化浴用剤（入浴剤）の処方を調製した。調製法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【００８０】
入浴剤（実施例１１８〜１３３、比較例７）
表１９〜２１のＰ成分とＱ成分をそれぞれ均一になるまで混合した後、Ｐ成分とＱ成分とを混合し、均一になるまで充分混合して、調製を終了した。
【００８１】
【表２０】
【００８２】
【表２１】
【００８３】
【表２２】
【００８４】
評 価
前記実施例１１８〜１３３、比較例７の入浴剤について、肌のしわや張り、弾力の低下の悩みを有する３０〜４０代の女性を対象としたモニター試験を行い、その評価を行った。
入浴剤のそれぞれについて、女性３名ずつの（１７群）計５１名に対して、毎日の入浴時にお湯１８０Ｌに対して入浴剤３０ｍＬを溶かして入浴すること以外は通常の生活をするモニター試験を１ヶ月間続けた。１ヶ月後、その使用感を下記の基準で評価した結果を表２２に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有 効 ：使用前に比べて肌の張りや弾力を感じる
やや有効：使用前に比べて肌の張りや弾力をやや感じる
効果無し：使用前と変化なし
【００８５】
【表２３】
【００８６】
本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した実施例１１８〜１３３の入浴剤では、肌に張りや弾力を感じたといった人が多かった一方で、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合していない比較例７の入浴剤では変化なしとの評価であったことから、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した入浴剤は、肌の張りや弾力の向上に対しいずれも有意であった。
【００８７】
（IV）飲食物の処方
次に、表２３〜３０に示す組成でコラーゲン産生促進剤を配合した抗老化飲食物（パン、ゼリー、ソーセージ、サプリメント(錠剤)）の処方を調製した。調製法は下記の通りである。なお、配合量の単位はｇで、表中の精製水の「残量」とは全量を１００ｇとする量である。
【００８８】
パン（実施例１３４〜１４１、比較例８）
表２３及び２４のＲ成分全部を混ぜ合わせたものに、４０℃に加温したＳ成分とＴ成分を混ぜ合わせたもの加えて、均一になった時点でよくこねた。３５℃で４０分間一次発酵させ、空気を抜くように再度こねた。４０℃で４０分間二次発酵後、１８０℃で２５分間焼いた。
【００８９】
【表２４】
【００９０】
【表２５】
【００９１】
ゼリー（実施例１４２〜１４９、比較例９）
表２５及び２６のＷ成分にＶ成分を溶解した８０℃のお湯にＵ成分を溶かし、よく混ぜ合わせた。型に１０ｇずつ流し入れた後、冷蔵庫で固めて、調製を終了した。
【００９２】
【表２６】
【００９３】
【表２７】
【００９４】
ソーセージ（実施例１５０〜１５７、比較例１０）
表２７及び２８のＸ成分とＹ成分とを良く混ぜ合わせ、冷蔵庫で冷やした後、塩抜きした羊の腸に詰めた。腸詰めしたものを６０〜７０℃で１時間燻製し、更に１時間かけて乾燥させた。乾燥させたものを約７０℃のお湯で３０分程度ゆでて殺菌処理した。そして再度乾燥させて、調製を終了した。
【００９５】
【表２８】
【００９６】
【表２９】
【００９７】
サプリメント(錠剤)（実施例１５８〜１６５、比較例１１）
表２９及び３０のＡＡ成分とＡＢ成分を良く混ぜ合わせたものを、打錠機を用いてタブレット状に押し固め、錠剤（０.３ｇ）を形成した。
【００９８】
【表３０】
【００９９】
【表３１】
【０１００】
評 価
前記実施例１３４〜１６５、比較例７〜１１の飲食物について、肌のしわや張り、弾力の低下の悩みを有する３０〜４０代の女性を対象としたモニター試験を行い、その評価を行った。
飲食物のそれぞれについて、女性３名ずつの（９群×４処方）計１０８名に対して、パンについては、毎日の朝食時に前記実施例又は比較例のパンを主食として９０ｇ食べること、ゼリーについては、毎日の夕食後に前記実施例又は比較例のゼリーを５０ｇ摂取すること、ソーセージについては、毎日の夕食時に前記実施例又は比較例のソーセージを副食として約６０ｇ食べること、サプリメント（錠剤）については、毎日３回の食事後に前記実施例又は比較例のサプリメント（錠剤）を５錠（１.５ｇ）摂取すること以外は通常の生活をするモニター試験を１ヶ月間続けた。１ヶ月後、その使用感を下記の基準で評価した結果を表３１に示す。なお、使用期間中に皮膚の異常を訴えたものはいなかった。
有 効 ：使用前に比べて肌の張りや弾力を感じる
やや有効：使用前に比べて肌の張りや弾力をやや感じる
効果無し：使用前と変化なし
【０１０１】
【表３２】
【０１０２】
本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した実施例１３４〜１６５の飲食物では、肌に張りや弾力を感じたといった人が多かった一方で、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合していない比較例８〜１１の飲食物では変化なしとの評価であったことから、本発明のコラーゲン産生促進剤を配合した飲食物は、肌の張りや弾力の向上に対しいずれも有意であった。
【産業上の利用可能性】
【０１０３】
クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン又はアルギン酸オリゴ糖類及びこれらの混合物は、コラーゲン産生を促進させる作用があり、コラーゲン産生促進剤として有用である。本発明のコラーゲン産生促進剤は、線維芽細胞において産生されるコラーゲンの量を増大させるので、その結果として、しわ、たるみの予防、緩和、改善がなされて、老化現象の防止、改善を目的とした化粧品をはじめとする各種の皮膚外用剤、浴用剤及び飲食物などへの利用が可能となる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
請求項１に記載のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項３】
請求項１に記載のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする浴用剤。
【請求項４】
請求項１に記載のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする飲食物。
【請求項１】
クララエキス、イトヒメハギエキス、カキエキス、タンジンエキス、シャクヤクエキス、プーアルエキス、アルブチン及びアルギン酸オリゴ糖類から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
請求項１に記載のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項３】
請求項１に記載のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする浴用剤。
【請求項４】
請求項１に記載のコラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする飲食物。
【公開番号】特開２００８−１０５９８４（Ｐ２００８−１０５９８４Ａ）
【公開日】平成２０年５月８日（２００８．５．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−２８９３０８（Ｐ２００６−２８９３０８）
【出願日】平成１８年１０月２５日（２００６．１０．２５）
【出願人】（０００２２６１６１）日華化学株式会社 (208)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年５月８日（２００８．５．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１０月２５日（２００６．１０．２５）
【出願人】（０００２２６１６１）日華化学株式会社 (208)
【Ｆターム（参考）】
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