コルチコステロイドとヒアルロン酸断片を含んでなる抗炎症性の皮膚用組成物、およびその使用
局所投与を目的とする抗炎症性皮膚用組成物であって、コルチコステロイド０．００５〜０．１重量％、好ましくは０．０１〜０．０５重量％、および平均分子量が２０〜５００ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片０．１〜１重量％、好ましくは０．５〜１重量％を含んでなる、組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、コルチコステロイドとヒアルロン酸断片を含んでなる皮膚用組成物、並びにその使用に関する。
【０００２】
ヒアルロン酸（ＨＡ）は、細胞外マトリックスの主成分であり、皮膚にかなりの量で見出される。ＨＡは、Ｄ−グルクロン酸とＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの反復単位からなる線状グリコサミノグリカン非硫酸塩である(Tammi R., Agren UM., Tuhkanen AL., Tammi M. 「皮膚におけるヒアルロナン代謝」. Prog. Histochem. & Cytochem. 29: 1-81, 1994)。
【０００３】
正常な皮膚では、ＨＡは、本質的に皮膚の繊維芽細胞と表皮のケラチノサイトによって合成される(Tammi R., Agren UM., Tuhkanen AL., Tammi M. 「皮膚におけるヒアルロナン代謝」. Prog. Histochem. & Cytochem. 29: 1-81, 1994)。陰電荷を有するその残基によって、ＨＡは水ポンプの役割を果たしており、これによって皮膚の粘弾性を維持することができる。ＨＡは、食糧、ホルモン、ビタミンおよび結合組織の無機塩の拡散の制御および炎症性反応を誘発する可能性がある代謝廃棄物のクリーニングに主要な役割を有している。年齢と共にＨＡの量およびその重合度は減少して、結合組織に保持される水の量が減少する。次いで、皮膚は老化過程を受けて、繊維症が増加しかつ弾性繊維含量が低下する。
【０００４】
正常な皮膚では、ＨＡは高分子量（６００〜１，０００ｋＤａ）のポリマーとして存在する。皮膚におけるＨＡの生理学的分解は、(i) ＣＤ４４を介するケラチノサイトによるインターナリゼーション、および(ii) ヒアルロニダーゼによる一層小さなサイズの断片への細胞内断片化によって行われる。断片化ＨＡはケラチノサイトによって放出され、基底膜を通過し、リンパ管に直接放出される(Tammi R., Agren UM., Tuhkanen AL., Tammi M. 「皮膚におけるヒアルロナン代謝」. Prog. Histochem. & Cytochem. 29: 1-81, 1994)。
【０００５】
炎症性条件下では、低分子量形態のＨＡの蓄積が明らかにされている。炎症の際には、フィブリンのような血小板性走化性因子が繊維芽細胞の流入および活性化を刺激することによってヒアルロニダーゼが分泌されてＨＡを分解し、ＨＡの小断片の組織濃度が高くなる。これらの小ＨＡ断片の生成は、顆粒球によって放出されたまたは紫外線照射された皮膚における酸素反応種による脱重合のような様々な他の機構または低分子量断片のデ・ノボ合成も伴う。幾つかの研究は、高および低分子量ＨＡが、細胞および組織に様々な生物学的影響を与える可能性があることを示唆している(Mckee CM., Penno MB., Cowman M., Burdick MD., Strieter RM.I., Bao CI, Noble PW. 「ヒアルロナン(HA)断片は肺胞マクロファージにおけるケモカイン遺伝子発現を誘発する。HAサイズおよびCD44の役割」. J. clin Invest. 98:2403-2143, 1996; Termeer CC., Hennies I., Voith U., Ahrens T., Weiss JM., Prehm P., Simon JC., 「ヒアルロナンのオリゴ糖は樹状細胞の強力なアクチベーターである」. J. Immunol. 165:1863-1870, 2000; Fitzgerald KA., Bowie AG., Skeffington BS., O’Neill LA., 「Ras、プロテインキナーゼCζおよびIκBキナーゼ1および2はT-24癌細胞におけるヒアルロン酸断片によるNF-κBの活性化の際のCD44の下流エフェクターである」. J. Immunol 164: 2053-2063, 2000)。
【０００６】
分子量が５０〜７５０ｋＤａの断片に加水分解された非硫酸化ＨＡは、皮膚に生物学的活性、特に表皮ＣＤ４４の発現および細胞外マトリックス沈着における表皮再生の増加を有し、これらの断片がレチノイドと結合しているときには増幅されることが明らかになっている（仏国特許第０４ ００８２６明細書）。
【０００７】
ＨＡの主受容体であるＣＤ４４は、スプライシングと翻訳後修飾を交互に行うことによって生成する幾つかのアイソフォームを有する多形性膜貫通糖タンパクである。ネズミの皮膚におけるＣＤ４４の２つの主要機能は、(i) 細胞外刺激に応答するケラチノサイト増殖の調節および(ii) ＨＡの局所ホメオスタシスの維持であることが明らかにされた(Kaya G., Rodriguez L., Jorcano JL., Vassalli P., Stamenkovic I. 「組織特異的プロモーターによって動かされるアンチセンスCD44トランスジーンを有するマウスのケラチノサイトにおけるCD44の選択的抑制は、皮膚のヒアルロン酸代謝を中断させ、ケラチノサイト増殖を損なう」. Genes, Dev. 11:996-1007, 1997)。硬化性萎縮苔癬(sclero-atrophic lichen)の患者における表皮CD44の発現の減少も観察されている。この減少は、潜在的にこの疾患におけるＨＡの皮膚沈着および表皮萎縮の原因である(Kaya G., Augsburger E., Stamenkovic L., Saurat JH., 「硬化性萎縮性苔癬における表皮の異常ヒアルロン酸蓄積の潜在的機構としての表皮CD44の減少」. J. Invest. Dermatol. 115:1054-1058, 2000)。(i) 中間サイズのＨＡ断片によって誘発されるケラチノサイトのイン・ビトロおよびイン・ビボ増殖応答はＣＤ４４依存性経路を経て進み、かつヘパリン結合性表皮増殖因子（ＨＢ−ＥＧＦ）、ｅｒｂＢＩおよびマトリックスメタロプロテイナーゼの存在を必要とし、(ii) 中間サイズのＨＡ断片はヒト皮膚萎縮の新規治療法の開発の基礎を形成できることが、最近明らかになった(Kaya G., Tran C., Sorg O., Hotz R., Grand D., Carraux P., Didierjean L., Stamenkovic L., Saurat J.-H. 「ヒアルロン酸断片はCD44依存性機構によって皮膚萎縮を逆転させる」. PloS Med. 3 (12): e493, 2006)。
【０００８】
更に、小サイズ（１〜５０ｋＤａ）または大サイズ（４００〜１，０００ｋＤａ）の断片とは異なり、中間サイズのＨＡ断片はかなりの表皮過形成およびケラチノサイト増殖、表皮および皮膚のＣＤ４４およびＨＡの発現増加、並びに皮膚構造の変化およびヘアレスＳＫＨ１およびＤＢＡ／１マウスの細胞充実性の増加を誘発することが、最近明らかになった。最後に、レチンアルデヒドは、ヘアレスＳＫＨ１マウスにおけるコルチコステロイドであるプロピオン酸クロベタゾールによって誘発される表皮萎縮を防止することも明らかになっている(Kaya G., Tran C., Sorg O., Grand D., Hotz R., Carraux P., Didierjean L., Saurat J.-H. 「マウスにおけるコルチコステロイドによって誘発される皮膚萎縮のレチンアルデヒドによる防止」. JEADV 19: 124, 2005)。
【０００９】
中間サイズのＨＡ断片は、老化による既に形成されかつ全身経路で長期間用いたコルチコステロイドの使用によって悪化した萎縮を修復できることが早期に観察されていた(Kaya G., Tran C., Sorg O., Hotz R., Grand D., Carraux P., Didierjean L., Stamenkovic L., Saurat J.-H. 「ヒアルロン酸断片はCD44依存性機構による皮膚萎縮を逆転する」. PloS Med 3 (12): e493, 2006 and patent FR 04 00826)。
【発明の開示】
【００１０】
本発明者らは、驚くべきことに、コルチコステロイドと分子量が２０〜５００ｋＤａのＨＡ断片を同時に使用することによって皮膚萎縮の発生を防止することが可能であることを見出した。
【００１１】
コルチコステロイドの萎縮効果を抑制するということは、これらのＨＡ断片は、主要な探索した治療効果、すなわち抗炎症効果などのコルチコステロイドの他の作用をも阻害するはずである。
【００１２】
本発明者らは、驚くべきことに、一方コルチコステロイドとこれらのＨＡ断片を同時使用してもコルチコステロイドの抗炎症作用を取り消すことにはならないことを見出した。
【００１３】
従って、本発明は、治療効果を局所性コルチコステロイドの主要な二次的効果から幾分引き離して考えることができる。従って、本発明は、ＨＡ断片とコルチコステロイドの結合からなる単一局所製剤を用いることができる。
【００１４】
従って、「治療効果と二次的効果の結合」とは、コルチコステロイドの抗炎症作用を保存しながらその萎縮特性を減少させまたは抑制するという事実を意味する。
【００１５】
更に、一層驚くべきことには、抗炎症性治療効果の可能性さえ観察された。
【００１６】
従って、本発明は、更に具体的には局所投与を目的とする抗炎症性皮膚用組成物であって、コルチコステロイド０．００５〜０．１重量％、好ましくは０．０１〜０．０５重量％、および平均分子量が２０〜５００ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片０．１〜１重量％、好ましくは０．５〜１重量％を含んでなる組成物に関する。
【００１７】
本発明においては、皮膚における多数の病因によって誘発されかつ局所用コルチコステロイドの塗布によって弱められる赤み、浮腫、小疱、疼痛および痒みなどの標準的徴候を局所経路によって抑制することを「抗炎症性」として記載する。
【００１８】
本発明においては、同量の局所用コルチコステロイド単独で得られるより良好な抗炎症作用またはより少量のコルチコステロイドで得られるものと同じ抗炎症作用を得ながら、皮膚萎縮のような局所用コルチコステロイドの主要な二次的効果を回避することを「可能にする」として記載する。
【００１９】
本発明のヒアルロン酸断片は、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を１００℃を上回る温度での熱処理によって得ることができる。
【００２０】
ヒアルロン酸の断片は、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を４００Ｗおよび４℃にて１０〜９０分間、好ましくは４５分間超音波処理した後、ゲル、好ましくはSephacryl S-400ゲル上で濾過することによって得ることもできる。
【００２１】
本発明による組成物は、好ましくはコルチコステロイド０．０５重量％およびヒアルロン酸断片０．５重量％を含んでなる。
【００２２】
本発明による組成物は、好ましくはコルチコステロイド０．０１重量％およびヒアルロン酸断片１重量％を含んでなる。
【００２３】
コルチコステロイドは、好ましくはジプロピオン酸アルクロメタゾン、アムシノニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、安息香酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ブデソニド、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾール、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、酢酸ジフロラゾン、吉草酸ジフルコルトロン、フルランドレノロン、酢酸フルプレドニデン、フルオコルトロン、フルコルチンブチル、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルクロロロンアセトニド、ピバル酸フルメタゾン、塩酸フュージリン(feudiline)、フルメトロン、ハルシノニド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、酢酸メチルプレドニゾロン、フロ酸モメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、並びにそれらの混合物から選択することができる。
【００２４】
コルチコステロイドは、好ましくはプロピオン酸クロベタゾールである。
【００２５】
本発明の目的は、上記組成物と１種類以上の薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物でもある。
【００２６】
本発明による医薬組成物は、好ましくは薬学上許容可能な皮膚軟化基剤を含んでなる。
【００２７】
「皮膚軟化基剤」とは、本発明の意味において、組織の解放、炎症の鎮静化、皮膚の軟化に寄与する任意の化粧生成物を意味する。
【００２８】
本発明による医薬組成物は、また好ましくはクリーム、香油、ゲル、スプレー、軟膏、ローション、フィルム形成溶液、経皮系、例えばパッチ、フォーム、シャンプーとして提供するための他の皮膚科学上許容可能な賦形剤を含んでなる。
【００２９】
本発明の目的は、好ましくは局所用コルチコステロイドの適応症として普通に挙げられる炎症性皮膚病の治療を目的とした、薬剤としての上記組成物であり、更に詳細には、顔のような脆弱な部分、すなわち局所用コルチコステロイドの二次的効果が特に顕著である部分に配置される組成物でもある。実際に、一方では局所用コルチコステロイドの治療効果と主要な二次的効果との結合によって、他方では抗炎症効果の可能性によって、これらの脆弱な部分は余り危険なしに治療することができる。
【００３０】
本発明の目的は、炎症性皮膚病の治療に同時または適時塗布する異なる皮膚科用途のための、クリームとしてのコルチコステロイドと、クリームとしての平均分子量が２００〜５００ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片とを含んでなる組み合わせ物でもある。
【００３１】
ヒアルロン酸断片は、上記の方法の１つによって得ることができる。
【００３２】
本発明を、下記の実施例によって非制限的に説明することにする。
【実施例】
【００３３】
材料および方法
皮膚萎縮プロトコル
ヘアレスＳＫＨマウスの背部に、（分子量が２０〜５００ｋＤａでありかつ上記のような超音波および濾過による処理段階を含む方法によって得られる）ＨＡ断片を含むまたは含まないステロイド（０．０５％プロピオン酸クロベタゾールまたは０．１％デソニド）を用いて局所治療を行った。これらの断片は、下記の実施例ではＨＡＦと呼ばれる。皮膚および表皮の萎縮および皮膚ヒアルロン酸の濃度は、光学顕微鏡法で皮膚−表皮厚みの測定およびＥＬＩＳＡによってそれぞれ測定した。
【００３４】
マウスの耳におけるTPAによって誘発される炎症
皮膚炎症は、０．００５％ＴＰＡ（１２−ｏ−テトラデカノイルフォルボール−１３−アセテート）／アセトンをＣ５７Ｂ１／６マウスの耳に局所投与することによって誘発し、対照動物には同容積のアセトンを投与した。プロピオン酸クロベタゾール（０．０５％）およびＨＡＦ（１％）をキャリヤー１００μｌに溶解し、ＴＰＡと共に４日間投与し、対照動物には同容積のキャリヤーを投与した。炎症は、クリップで耳の厚みおよび光学顕微鏡法での皮膚−表皮厚みを測定することによって、およびミエロペルオキシダーゼ活性を評価することによって決定した。動物は、最後の投与の２４時間後に屠殺した。６ｍｍ生験を採取し、液体窒素で冷凍した後、分析の日まで−７０℃で保管した。組織の残りは、ホルモールで固定し、免疫組織学によって分析した。
【００３５】
ミエロペルオキシダーゼ活性は、耳生験のホモジェネートの上清で測定した。臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）０．５％を含む５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ６．０（１．５ｍｌ）に浸漬した生験材料を、Polytron PT 1200ホモジナイザー中で０℃にて４５秒間摩砕した。ミエロペルオキシダーゼの酵素活性を光度法によるプレートリーダーを用いるように修正したBradley et al.の方法に準じて測定した。下記の試薬を９６穴プレートのウェルに加えた：上清５０μｌ、リン酸緩衝液＋ＨＴＡＢ５０μｌ、０．６８ｍｇ／ｍｌのｏ−ジアニシジン水溶液５０μｌ。反応は、即席で調製した０．００３％過酸化水素を加えることによって開始した。光学濃度は、４５０ｎｍで測定した。酵素活性は、ＴＰＡのみで処理した耳の生験材料のものと比較した。ＣＤ４４、ＣＤ４４ｖ３およびプロ−ＨＢ−ＥＧＦの発現を、上記の方法に準じて免疫組織化学およびウェスタンブロット法によって分析した(PLoS Med 3 (12): e493, 2006)。
【００３６】
結果
表皮および皮膚の厚み（顆粒層と汗腺との距離）は、接眼マイクロメーター測定した。結果は、下表１にまとめている。予防指数は、プロピオン酸クロベタゾール（ＰＣ）のみで処理した対照とＰＣ＋ＨＡＦ組成物との間の比である。
【００３７】
【表１】
【００３８】
図１は、ヘマトキシリン−エオシンで染色したマウスの皮膚および表皮の組織切片を示す。
【００３９】
これらの結果は、ＨＡＦがプロピオン酸クロベタゾール（ＰＣ）によって誘発される皮膚萎縮を防止することを明らかにしている。
【００４０】
表皮厚みを、様々なデソニド濃度で処理した後に接眼マイクロメーターで測定した。マウス当たり、１０回の測定を行った。結果は、表２にまとめている。予防指数は、所定のコルチコステロイド濃度でのコルチコステロイドのみおよびコルチコステロイド組成物＋ＨＡＦで処理した対照の間の比である。
【００４１】
【表２】
【００４２】
従って、これらの結果は、ＨＡＦが用量依存的にデソニドによって誘発される表皮萎縮を防止することを明らかにしている。
【００４３】
表皮の厚みは、様々なコルチコステロイドで処理した後に接眼マイクロメーターで測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、表３にまとめている。予防指数は、コルチコステロイドのみおよびＨＡＦを含んでなる対応する組成物で処理した対照の間の比である。
【００４４】
【表３】
【００４５】
従って、これらの結果は、ＨＡＦは、様々な局所用コルチコステロイド（ＣＳ）によって誘発される表皮萎縮を防止することを明らかにしている。
【００４６】
未処理ヒアルロン酸、ヒアルロニダーゼの作用によって得られる断片、並びにＨＡＦを、それらの予防効果について比較した。表皮の厚みは、接眼マイクロメーターで測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、表４にまとめている。予防指数は、コルチコステロイドのみおよびそれぞれのコルチコステロイド組成物＋ＨＡＦで処理した対照の間の比である。
【００４７】
【表４】
【００４８】
ＨＡＦとは異なり、ヒアルロニダーゼの作用によって調製した断片、並びに未処理ヒアルロン酸は、プロピオン酸クロベタゾールまたはデソニドによって誘発される表皮の萎縮を防止しない。
【００４９】
図２は、抗−ＣＤ４４によるマウス切片の免疫組織化学分析である。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４の発現を回復および増加することを示している。
【００５０】
図３は、マウス皮膚のタンパク質抽出物の抗−ＣＤ４４ｖ３抗体によるウェスタンブロット分析である。これは、ＨＡＦ断片が、デソニドで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４ｖ３の発現を回復および増加すること、従って、ＨＡＦの潜在的効果を示している。
【００５１】
図４は、マウス皮膚のタンパク質抽出物の２５ｋＤａ抗プロ−ＨＢ−ＥＧＦ抗体によるウェスタンブロット分析である。Ａはキャリヤーであり、Ｂはプロピオン酸クロベタゾールであり、Ｃはプロピオン酸クロベタゾール＋ＨＡＦを表す。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウス皮膚におけるプロ−ＨＢ−ＥＧＦの発現を回復および増加することを示している。
【００５２】
ホルボールＴＰＡエステルの投与によって誘発された表皮の炎症を、ＴＰＡ投与後、および次にプロピオン酸クロベタゾールでの処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールおよびＨＡＦを含んでなる組成物での処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、下表５にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、および組成物ＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦで処理した対照の間の比である。
【００５３】
【表５】
【００５４】
ホルボールＴＰＡエステルを投与することによって誘発された皮膚の炎症を、ＴＰＡの投与後、次いでプロピオン酸クロベタゾールで処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールとＨＡＦを含んでなる組成物で処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行い、結果は下表６にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、およびＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦの結合で処理した対照の間の比である。
【００５５】
【表６】
【００５６】
ホルボールＴＰＡエステルを投与することによって誘発された細胞充実性を、ＴＰＡの投与後、次いでプロピオン酸クロベタゾールで処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールとＨＡＦを含んでなる組成物で処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果を表７にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、およびＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦの結合で処理した対照の間の比である。
【００５７】
【表７】
【００５８】
ホルボールＴＰＡエステルを投与することによって誘発された皮膚ミエロペルオキシダーゼ活性を、ＴＰＡの投与後、次いでプロピオン酸クロベタゾールで処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールおよびＨＡＦを含んでなる組成物で処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、表８にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、およびＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦの結合で処理した対照の間の比である。
【００５９】
【表８】
【００６０】
ＨＡＦはプロピオン酸クロベタゾールの抗炎症効果を阻害せず、逆に抗炎症効果を強化する。
【００６１】
図５および図６は、Van GiesonエラスチンおよびSiriusレッドによって染色した組織切片を示す。ＨＡＦは、弾性ネットワークと皮膚コラーゲンをプロピオン酸クロベタゾールによる破壊から保護することを明らかにすることができた。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】ヘマトキシリン−エオシンで染色したマウスの皮膚および表皮の組織切片。
【図２】抗−ＣＤ４４によるマウス切片の免疫組織化学分析。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４の発現を回復および増加することを示している。
【図３】マウス皮膚のタンパク質抽出物の抗−ＣＤ４４ｖ３抗体によるウェスタンブロット分析。これは、ＨＡＦ断片が、デソニドで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４ｖ３の発現を回復および増加すること、従って、ＨＡＦの潜在的効果を示している。
【図４】マウス皮膚のタンパク質抽出物の２５ｋＤａ抗プロ−ＨＢ−ＥＧＦ抗体によるウェスタンブロット分析。Ａはキャリヤーであり、Ｂはプロピオン酸クロベタゾールであり、Ｃはプロピオン酸クロベタゾール＋ＨＡＦを表す。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウス皮膚におけるプロ−ＨＢ−ＥＧＦの発現を回復および増加することを示している。
【図５】Van GiesonエラスチンおよびSiriusレッドによって染色した組織切片。ＨＡＦは、弾性ネットワークと皮膚コラーゲンをプロピオン酸クロベタゾールによる破壊から保護することを明らかにすることができた。
【図６】Van GiesonエラスチンおよびSiriusレッドによって染色した組織切片。ＨＡＦは、弾性ネットワークと皮膚コラーゲンをプロピオン酸クロベタゾールによる破壊から保護することを明らかにすることができた。
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、コルチコステロイドとヒアルロン酸断片を含んでなる皮膚用組成物、並びにその使用に関する。
【０００２】
ヒアルロン酸（ＨＡ）は、細胞外マトリックスの主成分であり、皮膚にかなりの量で見出される。ＨＡは、Ｄ−グルクロン酸とＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの反復単位からなる線状グリコサミノグリカン非硫酸塩である(Tammi R., Agren UM., Tuhkanen AL., Tammi M. 「皮膚におけるヒアルロナン代謝」. Prog. Histochem. & Cytochem. 29: 1-81, 1994)。
【０００３】
正常な皮膚では、ＨＡは、本質的に皮膚の繊維芽細胞と表皮のケラチノサイトによって合成される(Tammi R., Agren UM., Tuhkanen AL., Tammi M. 「皮膚におけるヒアルロナン代謝」. Prog. Histochem. & Cytochem. 29: 1-81, 1994)。陰電荷を有するその残基によって、ＨＡは水ポンプの役割を果たしており、これによって皮膚の粘弾性を維持することができる。ＨＡは、食糧、ホルモン、ビタミンおよび結合組織の無機塩の拡散の制御および炎症性反応を誘発する可能性がある代謝廃棄物のクリーニングに主要な役割を有している。年齢と共にＨＡの量およびその重合度は減少して、結合組織に保持される水の量が減少する。次いで、皮膚は老化過程を受けて、繊維症が増加しかつ弾性繊維含量が低下する。
【０００４】
正常な皮膚では、ＨＡは高分子量（６００〜１，０００ｋＤａ）のポリマーとして存在する。皮膚におけるＨＡの生理学的分解は、(i) ＣＤ４４を介するケラチノサイトによるインターナリゼーション、および(ii) ヒアルロニダーゼによる一層小さなサイズの断片への細胞内断片化によって行われる。断片化ＨＡはケラチノサイトによって放出され、基底膜を通過し、リンパ管に直接放出される(Tammi R., Agren UM., Tuhkanen AL., Tammi M. 「皮膚におけるヒアルロナン代謝」. Prog. Histochem. & Cytochem. 29: 1-81, 1994)。
【０００５】
炎症性条件下では、低分子量形態のＨＡの蓄積が明らかにされている。炎症の際には、フィブリンのような血小板性走化性因子が繊維芽細胞の流入および活性化を刺激することによってヒアルロニダーゼが分泌されてＨＡを分解し、ＨＡの小断片の組織濃度が高くなる。これらの小ＨＡ断片の生成は、顆粒球によって放出されたまたは紫外線照射された皮膚における酸素反応種による脱重合のような様々な他の機構または低分子量断片のデ・ノボ合成も伴う。幾つかの研究は、高および低分子量ＨＡが、細胞および組織に様々な生物学的影響を与える可能性があることを示唆している(Mckee CM., Penno MB., Cowman M., Burdick MD., Strieter RM.I., Bao CI, Noble PW. 「ヒアルロナン(HA)断片は肺胞マクロファージにおけるケモカイン遺伝子発現を誘発する。HAサイズおよびCD44の役割」. J. clin Invest. 98:2403-2143, 1996; Termeer CC., Hennies I., Voith U., Ahrens T., Weiss JM., Prehm P., Simon JC., 「ヒアルロナンのオリゴ糖は樹状細胞の強力なアクチベーターである」. J. Immunol. 165:1863-1870, 2000; Fitzgerald KA., Bowie AG., Skeffington BS., O’Neill LA., 「Ras、プロテインキナーゼCζおよびIκBキナーゼ1および2はT-24癌細胞におけるヒアルロン酸断片によるNF-κBの活性化の際のCD44の下流エフェクターである」. J. Immunol 164: 2053-2063, 2000)。
【０００６】
分子量が５０〜７５０ｋＤａの断片に加水分解された非硫酸化ＨＡは、皮膚に生物学的活性、特に表皮ＣＤ４４の発現および細胞外マトリックス沈着における表皮再生の増加を有し、これらの断片がレチノイドと結合しているときには増幅されることが明らかになっている（仏国特許第０４ ００８２６明細書）。
【０００７】
ＨＡの主受容体であるＣＤ４４は、スプライシングと翻訳後修飾を交互に行うことによって生成する幾つかのアイソフォームを有する多形性膜貫通糖タンパクである。ネズミの皮膚におけるＣＤ４４の２つの主要機能は、(i) 細胞外刺激に応答するケラチノサイト増殖の調節および(ii) ＨＡの局所ホメオスタシスの維持であることが明らかにされた(Kaya G., Rodriguez L., Jorcano JL., Vassalli P., Stamenkovic I. 「組織特異的プロモーターによって動かされるアンチセンスCD44トランスジーンを有するマウスのケラチノサイトにおけるCD44の選択的抑制は、皮膚のヒアルロン酸代謝を中断させ、ケラチノサイト増殖を損なう」. Genes, Dev. 11:996-1007, 1997)。硬化性萎縮苔癬(sclero-atrophic lichen)の患者における表皮CD44の発現の減少も観察されている。この減少は、潜在的にこの疾患におけるＨＡの皮膚沈着および表皮萎縮の原因である(Kaya G., Augsburger E., Stamenkovic L., Saurat JH., 「硬化性萎縮性苔癬における表皮の異常ヒアルロン酸蓄積の潜在的機構としての表皮CD44の減少」. J. Invest. Dermatol. 115:1054-1058, 2000)。(i) 中間サイズのＨＡ断片によって誘発されるケラチノサイトのイン・ビトロおよびイン・ビボ増殖応答はＣＤ４４依存性経路を経て進み、かつヘパリン結合性表皮増殖因子（ＨＢ−ＥＧＦ）、ｅｒｂＢＩおよびマトリックスメタロプロテイナーゼの存在を必要とし、(ii) 中間サイズのＨＡ断片はヒト皮膚萎縮の新規治療法の開発の基礎を形成できることが、最近明らかになった(Kaya G., Tran C., Sorg O., Hotz R., Grand D., Carraux P., Didierjean L., Stamenkovic L., Saurat J.-H. 「ヒアルロン酸断片はCD44依存性機構によって皮膚萎縮を逆転させる」. PloS Med. 3 (12): e493, 2006)。
【０００８】
更に、小サイズ（１〜５０ｋＤａ）または大サイズ（４００〜１，０００ｋＤａ）の断片とは異なり、中間サイズのＨＡ断片はかなりの表皮過形成およびケラチノサイト増殖、表皮および皮膚のＣＤ４４およびＨＡの発現増加、並びに皮膚構造の変化およびヘアレスＳＫＨ１およびＤＢＡ／１マウスの細胞充実性の増加を誘発することが、最近明らかになった。最後に、レチンアルデヒドは、ヘアレスＳＫＨ１マウスにおけるコルチコステロイドであるプロピオン酸クロベタゾールによって誘発される表皮萎縮を防止することも明らかになっている(Kaya G., Tran C., Sorg O., Grand D., Hotz R., Carraux P., Didierjean L., Saurat J.-H. 「マウスにおけるコルチコステロイドによって誘発される皮膚萎縮のレチンアルデヒドによる防止」. JEADV 19: 124, 2005)。
【０００９】
中間サイズのＨＡ断片は、老化による既に形成されかつ全身経路で長期間用いたコルチコステロイドの使用によって悪化した萎縮を修復できることが早期に観察されていた(Kaya G., Tran C., Sorg O., Hotz R., Grand D., Carraux P., Didierjean L., Stamenkovic L., Saurat J.-H. 「ヒアルロン酸断片はCD44依存性機構による皮膚萎縮を逆転する」. PloS Med 3 (12): e493, 2006 and patent FR 04 00826)。
【発明の開示】
【００１０】
本発明者らは、驚くべきことに、コルチコステロイドと分子量が２０〜５００ｋＤａのＨＡ断片を同時に使用することによって皮膚萎縮の発生を防止することが可能であることを見出した。
【００１１】
コルチコステロイドの萎縮効果を抑制するということは、これらのＨＡ断片は、主要な探索した治療効果、すなわち抗炎症効果などのコルチコステロイドの他の作用をも阻害するはずである。
【００１２】
本発明者らは、驚くべきことに、一方コルチコステロイドとこれらのＨＡ断片を同時使用してもコルチコステロイドの抗炎症作用を取り消すことにはならないことを見出した。
【００１３】
従って、本発明は、治療効果を局所性コルチコステロイドの主要な二次的効果から幾分引き離して考えることができる。従って、本発明は、ＨＡ断片とコルチコステロイドの結合からなる単一局所製剤を用いることができる。
【００１４】
従って、「治療効果と二次的効果の結合」とは、コルチコステロイドの抗炎症作用を保存しながらその萎縮特性を減少させまたは抑制するという事実を意味する。
【００１５】
更に、一層驚くべきことには、抗炎症性治療効果の可能性さえ観察された。
【００１６】
従って、本発明は、更に具体的には局所投与を目的とする抗炎症性皮膚用組成物であって、コルチコステロイド０．００５〜０．１重量％、好ましくは０．０１〜０．０５重量％、および平均分子量が２０〜５００ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片０．１〜１重量％、好ましくは０．５〜１重量％を含んでなる組成物に関する。
【００１７】
本発明においては、皮膚における多数の病因によって誘発されかつ局所用コルチコステロイドの塗布によって弱められる赤み、浮腫、小疱、疼痛および痒みなどの標準的徴候を局所経路によって抑制することを「抗炎症性」として記載する。
【００１８】
本発明においては、同量の局所用コルチコステロイド単独で得られるより良好な抗炎症作用またはより少量のコルチコステロイドで得られるものと同じ抗炎症作用を得ながら、皮膚萎縮のような局所用コルチコステロイドの主要な二次的効果を回避することを「可能にする」として記載する。
【００１９】
本発明のヒアルロン酸断片は、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を１００℃を上回る温度での熱処理によって得ることができる。
【００２０】
ヒアルロン酸の断片は、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を４００Ｗおよび４℃にて１０〜９０分間、好ましくは４５分間超音波処理した後、ゲル、好ましくはSephacryl S-400ゲル上で濾過することによって得ることもできる。
【００２１】
本発明による組成物は、好ましくはコルチコステロイド０．０５重量％およびヒアルロン酸断片０．５重量％を含んでなる。
【００２２】
本発明による組成物は、好ましくはコルチコステロイド０．０１重量％およびヒアルロン酸断片１重量％を含んでなる。
【００２３】
コルチコステロイドは、好ましくはジプロピオン酸アルクロメタゾン、アムシノニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、安息香酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ブデソニド、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾール、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、酢酸ジフロラゾン、吉草酸ジフルコルトロン、フルランドレノロン、酢酸フルプレドニデン、フルオコルトロン、フルコルチンブチル、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルクロロロンアセトニド、ピバル酸フルメタゾン、塩酸フュージリン(feudiline)、フルメトロン、ハルシノニド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、酢酸メチルプレドニゾロン、フロ酸モメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、並びにそれらの混合物から選択することができる。
【００２４】
コルチコステロイドは、好ましくはプロピオン酸クロベタゾールである。
【００２５】
本発明の目的は、上記組成物と１種類以上の薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物でもある。
【００２６】
本発明による医薬組成物は、好ましくは薬学上許容可能な皮膚軟化基剤を含んでなる。
【００２７】
「皮膚軟化基剤」とは、本発明の意味において、組織の解放、炎症の鎮静化、皮膚の軟化に寄与する任意の化粧生成物を意味する。
【００２８】
本発明による医薬組成物は、また好ましくはクリーム、香油、ゲル、スプレー、軟膏、ローション、フィルム形成溶液、経皮系、例えばパッチ、フォーム、シャンプーとして提供するための他の皮膚科学上許容可能な賦形剤を含んでなる。
【００２９】
本発明の目的は、好ましくは局所用コルチコステロイドの適応症として普通に挙げられる炎症性皮膚病の治療を目的とした、薬剤としての上記組成物であり、更に詳細には、顔のような脆弱な部分、すなわち局所用コルチコステロイドの二次的効果が特に顕著である部分に配置される組成物でもある。実際に、一方では局所用コルチコステロイドの治療効果と主要な二次的効果との結合によって、他方では抗炎症効果の可能性によって、これらの脆弱な部分は余り危険なしに治療することができる。
【００３０】
本発明の目的は、炎症性皮膚病の治療に同時または適時塗布する異なる皮膚科用途のための、クリームとしてのコルチコステロイドと、クリームとしての平均分子量が２００〜５００ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片とを含んでなる組み合わせ物でもある。
【００３１】
ヒアルロン酸断片は、上記の方法の１つによって得ることができる。
【００３２】
本発明を、下記の実施例によって非制限的に説明することにする。
【実施例】
【００３３】
材料および方法
皮膚萎縮プロトコル
ヘアレスＳＫＨマウスの背部に、（分子量が２０〜５００ｋＤａでありかつ上記のような超音波および濾過による処理段階を含む方法によって得られる）ＨＡ断片を含むまたは含まないステロイド（０．０５％プロピオン酸クロベタゾールまたは０．１％デソニド）を用いて局所治療を行った。これらの断片は、下記の実施例ではＨＡＦと呼ばれる。皮膚および表皮の萎縮および皮膚ヒアルロン酸の濃度は、光学顕微鏡法で皮膚−表皮厚みの測定およびＥＬＩＳＡによってそれぞれ測定した。
【００３４】
マウスの耳におけるTPAによって誘発される炎症
皮膚炎症は、０．００５％ＴＰＡ（１２−ｏ−テトラデカノイルフォルボール−１３−アセテート）／アセトンをＣ５７Ｂ１／６マウスの耳に局所投与することによって誘発し、対照動物には同容積のアセトンを投与した。プロピオン酸クロベタゾール（０．０５％）およびＨＡＦ（１％）をキャリヤー１００μｌに溶解し、ＴＰＡと共に４日間投与し、対照動物には同容積のキャリヤーを投与した。炎症は、クリップで耳の厚みおよび光学顕微鏡法での皮膚−表皮厚みを測定することによって、およびミエロペルオキシダーゼ活性を評価することによって決定した。動物は、最後の投与の２４時間後に屠殺した。６ｍｍ生験を採取し、液体窒素で冷凍した後、分析の日まで−７０℃で保管した。組織の残りは、ホルモールで固定し、免疫組織学によって分析した。
【００３５】
ミエロペルオキシダーゼ活性は、耳生験のホモジェネートの上清で測定した。臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）０．５％を含む５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ６．０（１．５ｍｌ）に浸漬した生験材料を、Polytron PT 1200ホモジナイザー中で０℃にて４５秒間摩砕した。ミエロペルオキシダーゼの酵素活性を光度法によるプレートリーダーを用いるように修正したBradley et al.の方法に準じて測定した。下記の試薬を９６穴プレートのウェルに加えた：上清５０μｌ、リン酸緩衝液＋ＨＴＡＢ５０μｌ、０．６８ｍｇ／ｍｌのｏ−ジアニシジン水溶液５０μｌ。反応は、即席で調製した０．００３％過酸化水素を加えることによって開始した。光学濃度は、４５０ｎｍで測定した。酵素活性は、ＴＰＡのみで処理した耳の生験材料のものと比較した。ＣＤ４４、ＣＤ４４ｖ３およびプロ−ＨＢ−ＥＧＦの発現を、上記の方法に準じて免疫組織化学およびウェスタンブロット法によって分析した(PLoS Med 3 (12): e493, 2006)。
【００３６】
結果
表皮および皮膚の厚み（顆粒層と汗腺との距離）は、接眼マイクロメーター測定した。結果は、下表１にまとめている。予防指数は、プロピオン酸クロベタゾール（ＰＣ）のみで処理した対照とＰＣ＋ＨＡＦ組成物との間の比である。
【００３７】
【表１】
【００３８】
図１は、ヘマトキシリン−エオシンで染色したマウスの皮膚および表皮の組織切片を示す。
【００３９】
これらの結果は、ＨＡＦがプロピオン酸クロベタゾール（ＰＣ）によって誘発される皮膚萎縮を防止することを明らかにしている。
【００４０】
表皮厚みを、様々なデソニド濃度で処理した後に接眼マイクロメーターで測定した。マウス当たり、１０回の測定を行った。結果は、表２にまとめている。予防指数は、所定のコルチコステロイド濃度でのコルチコステロイドのみおよびコルチコステロイド組成物＋ＨＡＦで処理した対照の間の比である。
【００４１】
【表２】
【００４２】
従って、これらの結果は、ＨＡＦが用量依存的にデソニドによって誘発される表皮萎縮を防止することを明らかにしている。
【００４３】
表皮の厚みは、様々なコルチコステロイドで処理した後に接眼マイクロメーターで測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、表３にまとめている。予防指数は、コルチコステロイドのみおよびＨＡＦを含んでなる対応する組成物で処理した対照の間の比である。
【００４４】
【表３】
【００４５】
従って、これらの結果は、ＨＡＦは、様々な局所用コルチコステロイド（ＣＳ）によって誘発される表皮萎縮を防止することを明らかにしている。
【００４６】
未処理ヒアルロン酸、ヒアルロニダーゼの作用によって得られる断片、並びにＨＡＦを、それらの予防効果について比較した。表皮の厚みは、接眼マイクロメーターで測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、表４にまとめている。予防指数は、コルチコステロイドのみおよびそれぞれのコルチコステロイド組成物＋ＨＡＦで処理した対照の間の比である。
【００４７】
【表４】
【００４８】
ＨＡＦとは異なり、ヒアルロニダーゼの作用によって調製した断片、並びに未処理ヒアルロン酸は、プロピオン酸クロベタゾールまたはデソニドによって誘発される表皮の萎縮を防止しない。
【００４９】
図２は、抗−ＣＤ４４によるマウス切片の免疫組織化学分析である。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４の発現を回復および増加することを示している。
【００５０】
図３は、マウス皮膚のタンパク質抽出物の抗−ＣＤ４４ｖ３抗体によるウェスタンブロット分析である。これは、ＨＡＦ断片が、デソニドで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４ｖ３の発現を回復および増加すること、従って、ＨＡＦの潜在的効果を示している。
【００５１】
図４は、マウス皮膚のタンパク質抽出物の２５ｋＤａ抗プロ−ＨＢ−ＥＧＦ抗体によるウェスタンブロット分析である。Ａはキャリヤーであり、Ｂはプロピオン酸クロベタゾールであり、Ｃはプロピオン酸クロベタゾール＋ＨＡＦを表す。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウス皮膚におけるプロ−ＨＢ−ＥＧＦの発現を回復および増加することを示している。
【００５２】
ホルボールＴＰＡエステルの投与によって誘発された表皮の炎症を、ＴＰＡ投与後、および次にプロピオン酸クロベタゾールでの処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールおよびＨＡＦを含んでなる組成物での処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、下表５にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、および組成物ＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦで処理した対照の間の比である。
【００５３】
【表５】
【００５４】
ホルボールＴＰＡエステルを投与することによって誘発された皮膚の炎症を、ＴＰＡの投与後、次いでプロピオン酸クロベタゾールで処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールとＨＡＦを含んでなる組成物で処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行い、結果は下表６にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、およびＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦの結合で処理した対照の間の比である。
【００５５】
【表６】
【００５６】
ホルボールＴＰＡエステルを投与することによって誘発された細胞充実性を、ＴＰＡの投与後、次いでプロピオン酸クロベタゾールで処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールとＨＡＦを含んでなる組成物で処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果を表７にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、およびＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦの結合で処理した対照の間の比である。
【００５７】
【表７】
【００５８】
ホルボールＴＰＡエステルを投与することによって誘発された皮膚ミエロペルオキシダーゼ活性を、ＴＰＡの投与後、次いでプロピオン酸クロベタゾールで処理後、およびプロピオン酸クロベタゾールおよびＨＡＦを含んでなる組成物で処理後に測定した。マウス当たり１０回の測定を行った。結果は、表８にまとめている。抗炎症指数は、ＴＰＡ、およびＴＰＡ＋ＰＣまたはＴＰＡ＋ＰＣ＋ＨＡＦの結合で処理した対照の間の比である。
【００５９】
【表８】
【００６０】
ＨＡＦはプロピオン酸クロベタゾールの抗炎症効果を阻害せず、逆に抗炎症効果を強化する。
【００６１】
図５および図６は、Van GiesonエラスチンおよびSiriusレッドによって染色した組織切片を示す。ＨＡＦは、弾性ネットワークと皮膚コラーゲンをプロピオン酸クロベタゾールによる破壊から保護することを明らかにすることができた。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】ヘマトキシリン−エオシンで染色したマウスの皮膚および表皮の組織切片。
【図２】抗−ＣＤ４４によるマウス切片の免疫組織化学分析。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４の発現を回復および増加することを示している。
【図３】マウス皮膚のタンパク質抽出物の抗−ＣＤ４４ｖ３抗体によるウェスタンブロット分析。これは、ＨＡＦ断片が、デソニドで処理したマウスの皮膚におけるＣＤ４４ｖ３の発現を回復および増加すること、従って、ＨＡＦの潜在的効果を示している。
【図４】マウス皮膚のタンパク質抽出物の２５ｋＤａ抗プロ−ＨＢ−ＥＧＦ抗体によるウェスタンブロット分析。Ａはキャリヤーであり、Ｂはプロピオン酸クロベタゾールであり、Ｃはプロピオン酸クロベタゾール＋ＨＡＦを表す。これは、ＨＡＦが、プロピオン酸クロベタゾールで処理したマウス皮膚におけるプロ−ＨＢ−ＥＧＦの発現を回復および増加することを示している。
【図５】Van GiesonエラスチンおよびSiriusレッドによって染色した組織切片。ＨＡＦは、弾性ネットワークと皮膚コラーゲンをプロピオン酸クロベタゾールによる破壊から保護することを明らかにすることができた。
【図６】Van GiesonエラスチンおよびSiriusレッドによって染色した組織切片。ＨＡＦは、弾性ネットワークと皮膚コラーゲンをプロピオン酸クロベタゾールによる破壊から保護することを明らかにすることができた。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
局所投与を目的とする抗炎症性皮膚用組成物であって、
コルチコステロイド０．００５〜０．１重量％、好ましくは０．０１〜０．０５重量％、および平均分子量が２０〜５００ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片０．１〜１重量％、好ましくは０．５〜１重量％を含んでなり、
前記ヒアルロン酸断片が、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を１００℃を上回る温度で熱処理するか、または高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を４００Ｗおよび４℃で１０〜９０分間、好ましくは４５分間超音波によって処理した後、ゲル上で濾過することによって得ることができるものである、組成物。
【請求項２】
コルチコステロイド０．０５重量％およびヒアルロン酸断片０．５重量％を含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
コルチコステロイド０．０１重量％およびヒアルロン酸断片１重量％を含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
コルチコステロイドが、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、アムシノニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、安息香酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ブデソニド、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾール、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、酢酸ジフロラゾン、吉草酸ジフルコルトロン、フルランドレノロン、酢酸フルプレドニデン、フルオコルトロン、フルコルチンブチル、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルクロロロンアセトニド、ピバル酸フルメタゾン、塩酸フュージリン、フルメトロン、ハルシノニド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、酢酸メチルプレドニゾロン、フロ酸モメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、およびそれらの混合物から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
コルチコステロイドがプロピオン酸クロベタゾールである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物および１種類以上の薬学上許容可能な賦形剤を含んでなる、医薬組成物。
【請求項７】
薬学上許容可能な皮膚軟化基剤を含んでなる、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
クリーム、香油、ゲル、スプレー、軟膏、ローション、フィルム形成溶液、経皮系、フォーム、シャンプーとして提供するための他の皮膚科学上許容可能な賦形剤を含んでなる、請求項６または７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
薬剤としての、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
炎症性皮膚病の治療を目的とする薬剤としての、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
別々の、同時の皮膚科での使用または炎症性皮膚病の治療において適宜塗布される、クリームとしての１種類のコルチコステロイドと、これもまたクリームとしての、平均分子量が２０〜５０ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片とを含んでなる組み合わせ物であって、
前記ヒアルロン酸断片が、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を１００℃を上回る温度で熱処理するか、または高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を４００Ｗおよび４℃で１０〜９０分間、好ましくは４５分間超音波によって処理した後、ゲル上で濾過することによって得ることができるものである、組み合わせ物。
【請求項１】
局所投与を目的とする抗炎症性皮膚用組成物であって、
コルチコステロイド０．００５〜０．１重量％、好ましくは０．０１〜０．０５重量％、および平均分子量が２０〜５００ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片０．１〜１重量％、好ましくは０．５〜１重量％を含んでなり、
前記ヒアルロン酸断片が、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を１００℃を上回る温度で熱処理するか、または高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を４００Ｗおよび４℃で１０〜９０分間、好ましくは４５分間超音波によって処理した後、ゲル上で濾過することによって得ることができるものである、組成物。
【請求項２】
コルチコステロイド０．０５重量％およびヒアルロン酸断片０．５重量％を含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
コルチコステロイド０．０１重量％およびヒアルロン酸断片１重量％を含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
コルチコステロイドが、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、アムシノニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、安息香酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ブデソニド、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾール、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、酢酸ジフロラゾン、吉草酸ジフルコルトロン、フルランドレノロン、酢酸フルプレドニデン、フルオコルトロン、フルコルチンブチル、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルクロロロンアセトニド、ピバル酸フルメタゾン、塩酸フュージリン、フルメトロン、ハルシノニド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、酢酸メチルプレドニゾロン、フロ酸モメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、およびそれらの混合物から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
コルチコステロイドがプロピオン酸クロベタゾールである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物および１種類以上の薬学上許容可能な賦形剤を含んでなる、医薬組成物。
【請求項７】
薬学上許容可能な皮膚軟化基剤を含んでなる、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
クリーム、香油、ゲル、スプレー、軟膏、ローション、フィルム形成溶液、経皮系、フォーム、シャンプーとして提供するための他の皮膚科学上許容可能な賦形剤を含んでなる、請求項６または７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
薬剤としての、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
炎症性皮膚病の治療を目的とする薬剤としての、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
別々の、同時の皮膚科での使用または炎症性皮膚病の治療において適宜塗布される、クリームとしての１種類のコルチコステロイドと、これもまたクリームとしての、平均分子量が２０〜５０ｋＤａ、好ましくは２０〜３７５ｋＤａ、更に好ましくは２０〜１５０ｋＤａのヒアルロン酸断片とを含んでなる組み合わせ物であって、
前記ヒアルロン酸断片が、高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を１００℃を上回る温度で熱処理するか、または高分子量のヒアルロン酸ナトリウムの繊維を４００Ｗおよび４℃で１０〜９０分間、好ましくは４５分間超音波によって処理した後、ゲル上で濾過することによって得ることができるものである、組み合わせ物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公表番号】特表２０１０−５３３６７３（Ｐ２０１０−５３３６７３Ａ）
【公表日】平成２２年１０月２８日（２０１０．１０．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１６４７１（Ｐ２０１０−５１６４７１）
【出願日】平成２０年７月１０日（２００８．７．１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５９０２１
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１０４４８
【国際公開日】平成２１年１月２２日（２００９．１．２２）
【出願人】（５００１６６２３１）ピエール、ファブレ、デルモ‐コスメティーク (30)
【氏名又は名称原語表記】ＰＩＥＲＲＥ ＦＡＢＲＥ ＤＥＲＭＯ−ＣＯＳＭＥＴＩＱＵＥ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年１０月２８日（２０１０．１０．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年７月１０日（２００８．７．１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５９０２１
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１０４４８
【国際公開日】平成２１年１月２２日（２００９．１．２２）
【出願人】（５００１６６２３１）ピエール、ファブレ、デルモ‐コスメティーク (30)
【氏名又は名称原語表記】ＰＩＥＲＲＥ ＦＡＢＲＥ ＤＥＲＭＯ−ＣＯＳＭＥＴＩＱＵＥ
【Ｆターム（参考）】
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