サイロキシン受容体に対するアゴニストまたはアンタゴニストのスクリーニング法
ＧＰＣＲ−Ｔ４、その塩、ＧＰＣＲ−Ｔ４を発現する細胞、または該細胞の膜画分と、サイロキシン、イソコナゾール、化合物Ｉおよび化合物ＩＩからなる群から選ばれるリガンド、および試験物質とを接触させ、該リガンドのＧＰＣＲ−Ｔ４への結合量またはＧＰＣＲ−Ｔ４の活性化の程度を測定し、試験物質を接触させなかった場合と比較することを特徴とするスクリーニング法により、ＧＰＣＲ−Ｔ４のアゴニストまたはアンタゴニストが取得できる。ＧＰＣＲ−Ｔ４のアゴニストまたはアンタゴニスト、あるいはＧＰＣＲ−Ｔ４遺伝子の発現量を増加させる物質または減少させる物質は、甲状腺機能の制御、好中球の活性化または活性化の抑制、炎症性疾患の予防または治療、喘息の予防または治療、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療、感染性疾患の予防または治療に用いることができる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび下記の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドの塩、該ポリペプチドを発現する細胞、あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）下記の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該リガンドの該ポリペプチドへの結合量を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該リガンドの該ポリペプチドへの結合量と比較することを特徴とする、該ポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストのスクリーニング法。
（式ＩＩ中、ｎは６または７の整数である）
【請求項２】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドの塩、該ポリペプチドを発現する細胞、あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該リガンドの該ポリペプチドへの結合量を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該リガンドの該ポリペプチドへの結合量と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング法。
【請求項３】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドの塩、該ポリペプチドを発現する細胞、あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの活性化の程度を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの活性化の程度と比較することを特徴とする、該ポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストのスクリーニング法。
【請求項４】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの活性化の程度を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの活性化の程度と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング法。
【請求項５】
ポリペプチドの活性化の程度を以下の（ａ）〜（ｃ）を指標にして測定する請求項３または４に記載のスクリーニング法。
（ａ）グアノシン５’−Ｏ−３−チオトリフォスフェート（ＧＴＰγＳ）のＧ蛋白質への結合量
（ｂ）Ｇ蛋白質のＧＴＰａｓｅ活性
（ｃ）細胞の応答の程度
【請求項６】
以下の（ａ）および（ｂ）を構成成分として含む、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストのスクリーニング用キット。
（ａ）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の細胞膜画分
（ｂ）（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンド
【請求項７】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の膜画分と試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの構成活性を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの構成活性と比較することを特徴とする、該ポリペプチドに対するアゴニストまたはインバースアゴニストのスクリーニング法。
【請求項８】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の膜画分と試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの構成活性を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの構成活性と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング法。
【請求項９】
ポリペプチドの構成活性を以下の（ａ）〜（ｃ）からなる群から選ばれる少なくとも１つを指標にして測定することを特徴とする、請求項７または８に記載のスクリーニング法。
（ａ）ＧＴＰγＳのＧ蛋白質への結合量
（ｂ）Ｇ蛋白質のＧＴＰａｓｅ活性
（ｃ）細胞の応答の程度
【請求項１０】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドを接触させ、細胞の応答を測定することを特徴とする、該ポリペプチドの機能解析法。
【請求項１１】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストを有効成分として含有する、甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１２】
サイロキシン、サイロキシンの誘導体またはいずれかの薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１３】
イソコナゾール、イソコナゾールの誘導体またはいずれかの薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、あるいは慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤。
【請求項１４】
アゴニストまたはアンタゴニストが請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、該化合物の誘導体またはいずれかの薬理学的に許容される塩である、請求項１１に記載の甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１５】
アゴニストまたはアンタゴニストが、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに特異的に結合する抗体である、請求項１１に記載の甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１６】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする染色体遺伝子のプロモーター領域の下流にレポーター遺伝子の連結されたＤＮＡを含有する形質転換体と試験物質とを接触させ、レポーター遺伝子の発現量を測定し、試験物質を接触させなかった場合のレポーター遺伝子の発現量と比較することを特徴とする、該ポリペプチドをコードする遺伝子の発現量を増加させる物質または減少させる物質のスクリーニング方法。
【請求項１７】
プロモーター領域が、配列番号３で表される塩基配列の連続する５０〜５０００塩基からなる塩基配列を有するＤＮＡである、請求項１６に記載のスクリーニング方法。
【請求項１８】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子の発現量を増加または減少させる物質を有効成分として含有する、甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１９】
遺伝子の発現量を減少させる物質が、配列番号２で表される塩基配列から選ばれる連続した５〜６０塩基と相補的な塩基配列もしくは実質的に相補的な塩基配列を有するオリゴヌクレオチド、または配列番号２で表される塩基配列から選ばれる連続した１９〜２５塩基の配列および該配列と相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドである、請求項１８に記載の甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項２０】
被検者の組織または細胞における配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子の転写量を測定し、健常者の組織または細胞における該遺伝子の転写量と比較することを特徴とする、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２１】
被検者の組織または細胞における、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドの量を測定し、健常者の組織または細胞における該ポリペプチドの量と比較することを特徴とする、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２２】
被検者の組織または細胞における、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子の変異を検出することを特徴とする、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２３】
配列番号２で表される塩基配列を有するＤＮＡとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド、配列番号２で表される塩基配列の連続した５〜６０塩基または配列番号２で表される塩基配列と相補的な塩基配列の連続した５〜６０塩基からなる塩基配列を有するオリゴヌクレオチド、あるいは配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに特異的に結合する抗体を含有する、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２４】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子のノックアウト非ヒト動物を作製し、該動物に試験物質を投与してその症状を観察し、投与しなかった場合の症状と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング方法。
【請求項１】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび下記の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドの塩、該ポリペプチドを発現する細胞、あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）下記の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該リガンドの該ポリペプチドへの結合量を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該リガンドの該ポリペプチドへの結合量と比較することを特徴とする、該ポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストのスクリーニング法。
（式ＩＩ中、ｎは６または７の整数である）
【請求項２】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドの塩、該ポリペプチドを発現する細胞、あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）または式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該リガンドの該ポリペプチドへの結合量を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該リガンドの該ポリペプチドへの結合量と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング法。
【請求項３】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドの塩、該ポリペプチドを発現する細胞、あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの活性化の程度を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの活性化の程度と比較することを特徴とする、該ポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストのスクリーニング法。
【請求項４】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の膜画分と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドおよび試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの活性化の程度を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの活性化の程度と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング法。
【請求項５】
ポリペプチドの活性化の程度を以下の（ａ）〜（ｃ）を指標にして測定する請求項３または４に記載のスクリーニング法。
（ａ）グアノシン５’−Ｏ−３−チオトリフォスフェート（ＧＴＰγＳ）のＧ蛋白質への結合量
（ｂ）Ｇ蛋白質のＧＴＰａｓｅ活性
（ｃ）細胞の応答の程度
【請求項６】
以下の（ａ）および（ｂ）を構成成分として含む、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストのスクリーニング用キット。
（ａ）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の細胞膜画分
（ｂ）（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンド
【請求項７】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の膜画分と試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの構成活性を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの構成活性と比較することを特徴とする、該ポリペプチドに対するアゴニストまたはインバースアゴニストのスクリーニング法。
【請求項８】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞あるいは該細胞の膜画分と試験物質とを接触させ、該ポリペプチドの構成活性を測定し、試験物質を接触させなかった場合の該ポリペプチドの構成活性と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング法。
【請求項９】
ポリペプチドの構成活性を以下の（ａ）〜（ｃ）からなる群から選ばれる少なくとも１つを指標にして測定することを特徴とする、請求項７または８に記載のスクリーニング法。
（ａ）ＧＴＰγＳのＧ蛋白質への結合量
（ｂ）Ｇ蛋白質のＧＴＰａｓｅ活性
（ｃ）細胞の応答の程度
【請求項１０】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドを発現する細胞と、（ｉ）サイロキシン、（ｉｉ）イソコナゾール、（ｉｉｉ）請求項１の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の化合物の誘導体であって該ポリペプチドと結合する化合物、および（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の化合物の薬理学的に許容される塩からなる群から選ばれるリガンドを接触させ、細胞の応答を測定することを特徴とする、該ポリペプチドの機能解析法。
【請求項１１】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストを有効成分として含有する、甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１２】
サイロキシン、サイロキシンの誘導体またはいずれかの薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１３】
イソコナゾール、イソコナゾールの誘導体またはいずれかの薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、あるいは慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤。
【請求項１４】
アゴニストまたはアンタゴニストが請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物、該化合物の誘導体またはいずれかの薬理学的に許容される塩である、請求項１１に記載の甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１５】
アゴニストまたはアンタゴニストが、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに特異的に結合する抗体である、請求項１１に記載の甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１６】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする染色体遺伝子のプロモーター領域の下流にレポーター遺伝子の連結されたＤＮＡを含有する形質転換体と試験物質とを接触させ、レポーター遺伝子の発現量を測定し、試験物質を接触させなかった場合のレポーター遺伝子の発現量と比較することを特徴とする、該ポリペプチドをコードする遺伝子の発現量を増加させる物質または減少させる物質のスクリーニング方法。
【請求項１７】
プロモーター領域が、配列番号３で表される塩基配列の連続する５０〜５０００塩基からなる塩基配列を有するＤＮＡである、請求項１６に記載のスクリーニング方法。
【請求項１８】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子の発現量を増加または減少させる物質を有効成分として含有する、甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項１９】
遺伝子の発現量を減少させる物質が、配列番号２で表される塩基配列から選ばれる連続した５〜６０塩基と相補的な塩基配列もしくは実質的に相補的な塩基配列を有するオリゴヌクレオチド、または配列番号２で表される塩基配列から選ばれる連続した１９〜２５塩基の配列および該配列と相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドである、請求項１８に記載の甲状腺機能の制御剤、好中球の活性化促進剤または活性化抑制剤、炎症性疾患の予防または治療剤、喘息の予防または治療剤、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療剤、あるいは感染性疾患の予防または治療剤。
【請求項２０】
被検者の組織または細胞における配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子の転写量を測定し、健常者の組織または細胞における該遺伝子の転写量と比較することを特徴とする、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２１】
被検者の組織または細胞における、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは該ポリペプチドのアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドの量を測定し、健常者の組織または細胞における該ポリペプチドの量と比較することを特徴とする、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２２】
被検者の組織または細胞における、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子の変異を検出することを特徴とする、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２３】
配列番号２で表される塩基配列を有するＤＮＡとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド、配列番号２で表される塩基配列の連続した５〜６０塩基または配列番号２で表される塩基配列と相補的な塩基配列の連続した５〜６０塩基からなる塩基配列を有するオリゴヌクレオチド、あるいは配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドに特異的に結合する抗体を含有する、甲状腺機能の異常、好中球の活性化の異常、炎症性疾患、慢性閉塞性肺疾患、喘息、または感染防御能の異常の判定方法。
【請求項２４】
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号１で表されるアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつサイロキシン、イソコナゾールおよび請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）で表される化合物からなる群から選ばれるリガンドに反応する活性を有するポリペプチドをコードする遺伝子のノックアウト非ヒト動物を作製し、該動物に試験物質を投与してその症状を観察し、投与しなかった場合の症状と比較することを特徴とする、甲状腺機能の制御作用、好中球の活性化作用または活性化抑制作用、炎症性疾患の予防または治療作用、喘息の予防または治療作用、慢性閉塞性肺疾患の予防または治療作用、あるいは感染性疾患の予防または治療作用を有する物質のスクリーニング方法。
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０６３７４８
【国際公開日】平成１６年７月２９日（２００４．７．２９）
【発行日】平成１８年５月１８日（２００６．５．１８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５０８０１０（Ｐ２００５−５０８０１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０００２３３
【国際出願日】平成１６年１月１５日（２００４．１．１５）
【出願人】（０００００１０２９）協和醗酵工業株式会社 (276)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１６年７月２９日（２００４．７．２９）
【発行日】平成１８年５月１８日（２００６．５．１８）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０００２３３
【国際出願日】平成１６年１月１５日（２００４．１．１５）
【出願人】（０００００１０２９）協和醗酵工業株式会社 (276)
【Ｆターム（参考）】
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