サーチュイン１活性化剤、サーチュイン１活性化組成物、並びにそのサーチュイン１活性化剤若しくは活性化組成物を配合した皮膚外用剤、化粧料、食品
【課題】従来のレスベラトロールのような熱、酸素及び光により酸化や褐色化され、薬効効果が低下するという問題がなく、しかも優れたサーチュイン１活性化能を有するサーチュイン１活性化剤、活性化組成物、皮膚外用剤、化粧料、食品を提供することを課題とする。
【解決手段】カッコンエキスをサーチュイン１活性化剤の有効成分とすることを特徴とする。
【解決手段】カッコンエキスをサーチュイン１活性化剤の有効成分とすることを特徴とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、自然老化の抑制や寿命延長作用に関与するサーチュイン１（以下、ＳＩＲＴ１ともいう）活性化剤と活性化組成物、並びにそのようなサーチュイン１活性化能を有することにより、自然老化の抑制作用を発揮する皮膚外用剤、化粧料、食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
自然老化のスピードを調節することができることは、様々なモデル生物を通して証明されている。古くから、老化の抑制はカロリー制限によって引き起こされることが知られていた。しかし、近年では酵母、線虫、ハエ、げっ歯類など、様々な種で寿命を延長するための遺伝子が同定されている。これらの遺伝子は、悪化する環境条件（カロリー制限など）に応答して、生存率を高めるように進化してきた、進化上保存された経路の一つと考えられている。
【０００３】
酵母は寿命に関する研究をする上で、有用なモデルであることが立証されている。酵母において、寿命は個々の細胞の分裂回数で定義されている。酵母のサーチュイン２（Silent Information Regulator 2：以下、ＳＩＲＴ２ともいう）遺伝子は寿命延長に関与しており、この遺伝子を酵母に付加的に導入すると、寿命が３０〜７０％程度延びると認められている。ＳＩＲＴ２遺伝子は酵母のカロリー制限による寿命延長効果にも必要であることが証明されている。
【０００４】
酵母ＳＩＲＴ２のヒトホモログはＳＩＲＴ１−７（SIR Two ortholog-1-7）と名付けられている。その中でもＳＩＲＴ１が酵母ＳＩＲＴ２と機能的に類似していると考えられている。下記非特許文献１には、ヒトの細胞にＳＩＲＴ１遺伝子を付加的に導入すると、老化の指標であるSenescence Associated-β-galactosidase（SA-β-gal）の量が減少することも記載されている。このことは哺乳類細胞でもＳＩＲＴ１が老化の抑制に効果があることを示している。
【０００５】
ＳＩＲＴ１は、デアセチラーゼとして知られている。ＳＩＲＴ１はデアセチラーゼの中でも、ＮＡＤ＋を必要とするサーチュインファミリーの１種である。ＳＩＲＴ１のデアセチラーゼとしての酵素活性は、レスベラトロール、ブテイン、ピセアンタンノール、フィセチン、ケルセチンといった、トランススチルベン構造を有するポリフェノールによって活性化することが知られている。
【０００６】
ＳＩＲＴ１を活性化させると、寿命延長作用、細胞死の予防を示すことから、自然老化を抑え、寿命を延長させるアンチエイジング効果を示すことが知られている。 ＳＩＲＴ１を強く活性化させる成分として、レスベラトロールが知られている（下記特許文献１、特許文献２）。
【０００７】
本発明者等は、皮膚の細胞中に存在するＳＩＲＴ１を活性化することで、皮膚の老化を抑制できると考えた。実際に、皮膚の線維芽細胞にＳＩＲＴ１活性化物質であるレスベラトロールを加え、老化の指標であるＳＡ−β−ｇａｌの量を測定すると、減少していることがわかった。そのため、ＳＩＲＴ１活性化物質を含んだ化粧料や食品には、抗老化の効果があることが確認できた。
【０００８】
しかし、レスベラトロールは、熱、酸素及び光により酸化や褐色化され、薬効が低下するという問題点を有していた。従って、レスベラトロールに替わるＳＩＲＴ１活性化能と安定性に優れる有効成分の開発や組成物の開発が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００７−３２６８７２号公報
【特許文献２】特開２００６−２９８８７６号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】(1) PLOS ONE. 2008 Mar 5;3(3):e1710
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、このような問題点を解決するためになされたもので、上記従来のレスベラトロールのような熱、酸素及び光により酸化や褐色化され、薬効効果が低下するという問題がなく、しかも優れたサーチュイン１活性化能を有するサーチュイン１活性化剤、活性化組成物、皮膚外用剤、化粧料、食品を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、カッコンエキスに優れたＳＩＲＴ１活性化能を有するとともに、安定性も優れることをも見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、カッコンエキスを有効成分とすることを特徴とするサーチュイン１活性化剤を提供するものである。また本発明は、このようなカッコンエキスを含有することを特徴とするサーチュイン１活性化組成物を提供するものである。
【００１４】
このようなサーチュイン１活性化組成物において、カッコンエキスの他に、レスベラトロールを含有させることも可能である。また、カッコンエキスの他に、ブドウつるエキスを含有させることも可能である。さらには、カッコンエキスの他に、ダイゼインを含有させることも可能である。さらには、キトサン又はキトサン誘導体を含有させることもできる。
【００１５】
カッコンエキスは、たとえばエタノールで抽出することが可能である。
【００１６】
さらに、本発明は、上記のようなサーチュイン１活性化剤又はサーチュイン１活性化組成物を含有する、サーチュイン１活性化能を有する皮膚外用剤、化粧料、食品を提供するものである。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、上述のようにカッコンエキスをサーチュイン１活性化剤の有効成分として用い、或いはカッコンエキスをサーチュイン１活性化組成物に含有させたことで、従来のレスベラトロールに替わるサーチュイン１活性化能に優れた活性化剤若しくは活性化組成物を提供しうるに至った。
【００１８】
また、カッコンエキスを用いることで、従来のレスベラトロールに生じていた熱、酸素及び光により酸化や褐色化され、薬効が低下するという問題も解消しうるという効果がある。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明のサーチュイン１活性化剤は、上述のようにカッコンエキスを有効成分とするものである。また、本発明のサーチュイン１活性化組成物は、上述のようにカッコンエキスを含有するものである。
【００２０】
カッコンエキスは、多年生のつる草の一種であるクズ(Pueraria lobata Ohwi)の根の抽出物である。カッコンエキスの抽出法は、特に限定されるものではないが、クズ(Pueraria lobata Ohwi)の根をそのままあるいは粉砕後、溶媒で、常温乃至溶媒の沸点の温度にて抽出することができる。
【００２１】
利用可能な溶媒は、水、アルコール類（例えば、エタノール、ブタノール、メタノール等の低級アルコール、１、３−ブチレングリコール、グリセリン等の多価アルコール）、アセトン等のケトン類、エチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、酢酸エチル等のエステル類、キシレン、ベンゼン等の有機溶媒を単独又は２種以上任意に組み合わせて使用することができる。さらに用途目的に応じて希釈又は溶媒を留去してペースト状としたり、乾燥末等に加工してもよい。
【００２２】
また、カッコンエキスは、エタノール抽出物を使用するのが好ましい。エタノールによる抽出物が高いＳＩＲＴ１活性化能を示すからである。エタノール抽出物として、たとえば、プエラリン抽出液Ｂ（商品名：池田糖化工業製）を使用することができる。
【００２３】
本発明のサーチュイン１活性化組成物には、上記のようなカッコンエキスの他に、レスベラトロールを含有させることができる。レスベラトロールはブドウの葉、新芽に存在するポリフェノールの一種であり、ｔｒａｎｓ−レスベラトロール、ｃｉｓ−レスベラトロールおよびそれらの混合物の総称である。またレスベラトロールを含有する成分を用いることも可能である。
【００２４】
レスベラトロールを含有する成分としては、レスベラトロールが０．１重量％以上含有されている成分を用いるのが好ましい。レスベラトロールを含有する成分としては、たとえばブドウつるエキスが挙げられる。ブドウつるエキスとしては、たとえばレスベラトロールが１．０〜３．０重量％含有されるブドウつるエキスであるResveratrox（商品名：サンブライト社製）を用いることが可能である。また、レスベラトロール以外にレスベラトロールの二量体であるビニフェリンを用いることもできる。このようなビニフェリンを含有するブドウつるエキスとして、たとえばViniferol（商品名：サンブライト社製）等が挙げられる。
【００２５】
また本発明のサーチュイン１活性化組成物には、ダイゼインを含有させることができる。ダイゼインは、大豆に多く含まれるイソフラボンアグリコンである。ダイゼインを含むエキスとしてダイズエキスなどがある。
【００２６】
さらに、本発明のサーチュイン１活性化組成物には、キチン・キトサン、若しくはこれらの誘導体を含有させることができる。このようなキチン・キトサン若しくはその誘導体を含有させることによって、本発明のＳＩＲＴ１活性化剤の安定性を高めることができる。キチン・キトサンやそれらの誘導体の種類は特に限定されないが、たとえばカルボキシメチルキチン、カルボキシメチルキトサン、キトサンのグリコール酸塩やピロリドンカルボン酸塩や乳酸塩やアスコルビン酸塩等の塩類、部分ミリストイル化キトサンピロリドンカルボン酸（たとえばＰＭ−キトサン（商品名：ピアス株式会社製）、部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン等が挙げられる。
【００２７】
その他、その形態に応じて、化粧料、外用剤、食品で一般的に用いられる成分を本発明の効果や機能性を阻害しない範囲で配合できる。例えば、ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール類、セタノール、 ベヘニルアルコール等の高級アルコール類、流動パラフィン、スクワラン等の非極性油剤類、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル等のエステル系油剤類、小麦胚芽油やオリーブ油等の植物油類、トリメチルシロキシケイ酸、メチルフェニルポリシロキサン等のシリコン化合物類、パーフルオロポリエーテル等のフッ素化合物類等の液状油剤が挙げられる。また、水溶性高分子、保湿柔軟化剤、抗酸化剤、収斂剤、美白剤、抗菌剤、抗炎症剤、紫外線吸収剤類、紫外線散乱剤、水溶性ビタミン類、油溶性ビタミン類、酵素等の医薬部外品原料規格、化粧品種別配合成分規格、化粧品原料基準、日本薬局方、食品添加物公定書規格等の成分等が挙げられる。
【００２８】
化粧料としては、たとえば、１）局所又は全身用の皮膚洗浄料又は皮膚化粧料類、２）頭皮・頭髪に適用する薬用及び／又は化粧用の製剤類、３）浴湯に投じて使用する浴用剤、４）人体用の消臭・防臭剤、５）洗口剤等の口腔用剤、６）皮膚貼付用シート、化粧用シート、化粧用コットン、ウエットティッシュなどを意味し、固形、溶液、ゲル、エマルジョン、シート、スプレー、アンプル、カプセル、粉末（パウダー）など利用上の適当な形態とすることができる。
【００２９】
具体的には、ローション、乳液、クリーム、軟膏、ジェル、美容液、顔面用含浸シート、オイル、パック、ミストなどの基礎化粧料、洗顔料、クレンジングなどの皮膚洗浄料、シャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアートニック、育毛・養毛料などの頭髪化粧料、ファンデーション、口紅、アイシャドウ、アイライナー、マスカラなどのメークアップ化粧料などが挙げられる。
【００３０】
乳化化粧料としては、液状油剤を乳化させて調製することが可能である。具体的な例としては、流動パラフィン、スクワラン、イソノナン酸イソノニル、イソノナン酸イソトリデシル、エチルヘキサン酸セチル、トリ-エチルヘキサン酸グリセリル、トリ(カプリル・カプリン酸)グリセリン、パルミチン酸セチル、イソステアリン酸−２−ヘキシルデシル、ステアリン酸ステアリル、ミリスチン酸イソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸ネオペンチルグリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジイソステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸プロピレングリコール等のエステル系液状油剤やコメ油、コメヌカ油、月見草油、リノール酸、コムギ胚芽油、オリーブ油、ホホバ油、ブドウ種子油、カミツレ油、ローズマリ−油、ウイキョウ油等の植物系液状油や、ホホバ油、卵黄油などの動物系液状油が挙げられる。
【００３１】
この場合、乳化剤としては、脂肪酸モノグリセリド、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリグリセリン脂肪酸エステル等の非イオン系界面活性剤、塩化ベンザルコニウム等のカチオン系界面活性剤、両性界面活性剤、アニオン界面活性剤等を使用することができる。
【００３２】
さらに、本発明のサーチュイン１活性化組成物には、水溶性高分子を含有させることができる。水溶性高分子としては、アラビアゴム、クインシード、寒天、カゼイン、デキストリン、ゼラチン、ペクチン、デンプン、カラギーナン、アルギン酸又はその塩、ヒアルロン酸又はその塩、コンドロイチン硫酸又はその塩、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ニトロセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメタアクリレート、ポリアクリル酸塩、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレンイミン等が例示される。
【００３３】
本発明の食品には、美容食品も含まれる。ここで美容食品とは、美容や健康志向の食品、飲料、内服製剤全般を意味し、形態としては、アンプル、カプセル、錠剤（ペレット）、粉末、顆粒、固形、液体、ゼリー（ゲル）等とすることができる。具体的には、栄養補給、滋養強壮、疲労回復、体質改善、美白、美肌、養毛・育毛、痩身、精神安定等の美容・健康志向食品や飲料の他、ガム、キャンディ、ヨーグルト、清涼飲料水等の嗜好食品又は飲料が挙げられる。
【００３４】
美容食品に使用される色素・着色剤として、ブドウ果汁色素、赤キャベツ色素、赤米色素、アナトー色素、イカスミ色素、ウコン色素、オキアミ色素、柿色素、クチナシ色素、タマネギ色素、スピルリナ色素、ハイビスカス色素、紫イモ色素、紫ヤマイモ色素、ルチン等が挙げられる。
【００３５】
その他、甘味料や栄養強化剤として、砂糖、果糖、アラビノース、キシロビオース、ガラクトース、グルコサミン、コラーゲン、キシロース、トレハロース、アセチルグルコサミン、プロリンやアルギニン等のアミノ酸類、フラクトオリゴ糖、ステビア、マンノース、麦芽糖、蜂蜜、ブドウ糖、ミラクリン、モネリン、甘草抽出物、貝殻焼成カルシウム、酵母、小麦胚芽、ヘミセルロース、ヘム鉄等を使用することができる。
【００３６】
化粧料や美容食品に使用される水溶性ビタミン類として、ビタミンＢ群であるチアミン塩酸塩、チアミン硫酸塩、リボフラビン、ピリドキシンシアノコバラミン、葉酸類、ニコチン酸類、パントテン酸類、ビオチン類、コリン、イノシトール類等を使用することができ、ビタミンＣ群であるアスコルビン酸又はその誘導体、カルニチン、フェルラ酸等を使用することができ、さらにビタミンＰ類であるルチン、エリオシトリン、ヘスペリジン等を使用することができる。
【００３７】
また、化粧料や美容食品に利用される油溶性ビタミン類として、ビタミンＡ群であるレチノール、レチナール、デヒドロレチナール、β-カロチン、リコピン、アスタキサンチン、パルミチン酸レチノール等を使用することができ、ビタミンＤ群であるエルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、ジヒドロタキステロール等を使用することができ、さらにビタミンＥ群であるトコフェロール又はその誘導体等を使用することができ、その他、ビタミンＦやγ−オリザノール等を使用することができる。
【実施例】
【００３８】
以下、本発明の実施例について説明する。
【００３９】
（参考例）
ヒトの皮膚の細胞では加齢と共に細胞中のＳＡ−β−ガラクトシダーゼ量が増加することが知られている。そのため、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼは細胞老化のマーカーとして用いられている。継代培養を４ヶ月処理したヒト皮膚由来の線維芽細胞を用いて、一般にＳＩＲＴ１活性化剤として使用されているレスベラロトール(Sigma社)の老化抑制について、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色による試験を行った。
【００４０】
細胞密度を一定にした後、レスベラロトール（１０−３０μＭ)を含有した培地中で４日間暴露した。ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色には、Cell Senescence detection kit(コスモバイオ社製)を用いた。ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色量を測定するとともに、レスベラロトールを含有しないものをコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色量を１００として、コントロールに対するＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色量の比を求めた。測定結果を表１に示す。表１からも明らかなように、レスベラロトールを添加することにより、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色性が有意に抑制されることが示唆された。更に染色像を二値化し、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ量を定量化した結果、レスベラロトールを添加することにより、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ量が１８〜２３％低下していることが分かった。このようにＳＩＲＴ１を活性化するレスベラロトールに、加齢による皮膚老化を抑えるために有効であることが確認された。このことより、ＳＩＲＴ１活性化剤は加齢による皮膚老化を抑制するために有効であることが示唆された。
【００４１】
【表１】
【００４２】
（実施例１）
本実施例では、本発明のＳＩＲＴ１活性化剤であるカッコンエキスのＳＩＲＴ１活性について試験した。試験には、SIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery Kit（BIOMOL社）を用いた。このキットでは、ｐ５３のアミノ酸配列の中で、ＳＩＲＴ１によって脱アセチル化される３８２番目のリジンを含む配列を元にした蛍光原性ペプチドを基質としており、このペプチドはＳＩＲＴ１によって脱アセチル化されることで蛍光を発するようになることから、ＳＩＲＴ１の酵素活性を測定することができる。
【００４３】
そして、この反応系に様々な物質を加えることで、ＳＩＲＴ１阻害剤や、ＳＩＲＴ１活性化剤をスクリーニングに用いることができる。２５０種以上の成分をスクリーニングした結果、カッコンエキスにＳＩＲＴ１活性能を有することが分かった。カッコンエキス(池田糖化工業製、製品名：プエラリン抽出液Ｂ)を終濃度０．２５重量％、０．０５重量％、０．０２５重量％になるように調製し、SIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery KitでＳＩＲＴ１活性を測定するとともに、精製水をコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＩＲＴ１活性を１００として、コントロールに対するＳＩＲＴ１活性の比を求めた。測定結果を表２に示す。
【００４４】
【表２】
【００４５】
表２からも明らかなように、カッコンエキスのＳＩＲＴ１活性は、それぞれコントロールの７．３倍、２．２５倍、１．８倍の活性を示した。また、終濃度が高いものほど、ＳＩＲＴ１活性が高いことがわかった。この結果から、カッコンエキスはＳＩＲＴ１の脱アセチル化活性を顕著に上昇させることが明らかになった。
【００４６】
レスベラトロールについても同様に測定を行い、カッコンエキスのＳＩＲＴ１活性は、ＳＩＲＴ１の優れた活性化剤として知られているレスベラトロールに匹敵するものであることがわかった。
【００４７】
（比較例１）
カッコンエキス以外の他の植物エキスであるダイズエキス、ローズマリーエキス、チョウジエキス、ボタンビエキス、リョクチャエキス、ピクノジェノール、ウコンエキス、アスパラガスエキス、オウレンエキス、オウバクエキス、キナエキス、ジュウヤクエキス、ハトムギエキス、紅茶エキスを終濃度０．２５重量％になるように調製し、実施例２と同様にSIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery KitでＳＩＲＴ１活性を測定するとともに、精製水をコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＩＲＴ１活性を１００として、コントロールに対するＳＩＲＴ１活性の比を求めた。測定結果を表３に示す。表３からも明らかなように、それぞれコントロールとの差は認められないことから、ＳＩＲＴ１の脱アセチル化活性を上昇させる効果はないことが示された。
【００４８】
【表３】
【００４９】
（実施例２）
本実施例では、カッコンエキスを含有する本発明のＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性について試験した。レスベラトロールを含有する成分として、レスベラトロールが１．０〜３．０重量％含有されるブドウつるエキス(サンブライト製、製品名：Resveratrox)を終濃度０．０５重量％になるように調製し、SIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery KitでＳＩＲＴ１活性を測定するとともに、精製水をコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＩＲＴ１活性を１００として、コントロールに対するＳＩＲＴ１活性の比を求めた。測定試験結果を表４に示す。表４からも明らかなように、ブドウつるエキスは、コントロールの１．３５倍の活性を示した。
【００５０】
【表４】
【００５１】
コントロールの２．２５倍のＳＩＲＴ１活性化能を有するカッコンエキス(池田糖化工業社製、商品名：プエラリン抽出液Ｂ)の０．０５重量％とコントロールの１．３５倍の活性能を有するブドウつるエキス(サンブライト社製、製品名：Resveratrox)の０．０５重量％を共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、そのＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性を測定した。測定の結果、コントロールの３．２５倍の活性を示した。この結果から、カッコンエキスと、レスベラトロールを含有するブドウつるエキスとを共存させることにより、ＳＩＲＴ１の活性を相乗的に上昇させることが明らかになった。
【００５２】
また、コントロールの２．２５倍のＳＩＲＴ１活性化能を有する０．０５重量％カッコンエキス(池田糖化工業製、製品名：プエラリン抽出液Ｂ)と、コントロールの３．１倍の活性化能を有するレスベラトロール（０．０２５ｍＭ）とを共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、そのＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性を測定した。測定の結果、コントロールの５．１５倍の活性を示した。また、０．０２５重量％カッコンエキスと、レスベラトロール（０．０２５ｍＭ）とを共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、同様にＳＩＲＴ１活性を測定したところ、コントロールの４．３倍の活性を示した。これらの結果から、カッコンエキスとレスベラトロールとを共存させることにより、ＳＩＲＴ１の活性を相乗的に上昇させることが明らかになった。
【００５３】
さらに、コントロールの２．２５倍のＳＩＲＴ１活性化能を有するカッコンエキス(池田糖化工業製、製品名：プエラリン抽出液Ｂ)の０．０５％と、コントロールの２．７倍の活性化能を有するダイゼイン（０．０２５ｍＭ）とを共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、そのＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性を測定した。測定の結果、コントロールの４．９５倍の活性を示した。この結果から、カッコンエキスとダイゼインとを共存させることにより、ＳＩＲＴ１の活性を相乗的に上昇させることが明らかになった。
【００５４】
これらの結果から、カッコンエキスと、レスベラトロール、ブドウつるエキス、又はダイゼインとを共存させたＳＩＲＴ１活性化組成物は、ＳＩＲＴ１を活性化するのに有効な組成物であることがわかった。このことにより、皮膚の加齢による老化を抑える抗老化作用の機能を有する化粧料、外用剤、美容食品に有用であることがわかった。
【００５５】
（実施例４）
本実施例では、ＳＩＲＴ１の活性化能の安定性について試験した。ＳＩＲＴ１の活性化能を測定した後、２ヶ月後に４０℃で測定した。その測定結果を表５に示す。表５からも明らかなように、レスベラトロールは、ＳＩＲＴ１の活性化能が減少したのに対して、カッコンエキスには活性化能の低下はほとんど認められず、薬剤安定性に優れる有効成分であることが分かった。
【００５６】
【表５】
【００５７】
(処方例１）(アンチエイジング用エッセンス)
本処方例は、一例として白濁状で低分子界面活性剤を含まない美容液の処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００５８】
組成 配合比（重量％）
ミネラルオイル １．０％
スクワラン １．０％
部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン ０．２％
ブチレングリコール ２．５％
ジプロピレングリコール ５．５％
メチルパラベン ０．１％
カッコンエキス
(池田糖化製、プエラリン抽出液Ｂ-２、溶液タイプ) ５．０％
カッコンエキス(粉末タイプ) ０．０３％
精製水 残量
計 １００．０％
【００５９】
白濁のアンチエイジング用エッセンスの調製は次のようにして行った。すなわち、油相であるミネラルオイルとスクワランを７０℃で加熱溶解後、部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサンやブチレングリコール等から構成される水相に徐々に添加させ、ホモミキサー（８０００ｒｐｍ、５分処理）で均一に分散させた。脱気下で４０℃まで冷却し、ＳＩＲＴ１活性化成分であるカッコンエキス等を添加し、ホモミキサー（３０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気、濾過することにより、白濁の水系エッセンスを得た。
【００６０】
（処方例２）(アンチエイジング用エッセンス)
本処方例は、処方例１と同様に、白濁状で低分子界面活性剤を含まない美容液の処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００６１】
組成 配合比（重量％）
ミネラルオイル １．０％
ミリスチン酸プロピル １．０％
部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン ０．２％
ブチレングリコール ５．５％
プロピレングリコール ５．５％
メチルパラベン ０．１％
カッコンエキス
（池田糖化製、プエラリン抽出液Ｂ−２、溶液タイプ） ５．５％
ブドウつるエキス
（サンブライト製、製品名：Resveratrox、粉末タイプ） ０．３％
ダイゼイン ０．０５％
精製水 残量
計 １００．０％
【００６２】
白濁のアンチエイジング用エッセンスの調製は次のようにして行った。すなわち、油相であるミネラルオイルとミリスチン酸プロピルを７０℃で加熱溶解後、部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサンやブチレングリコール等から構成される水相に徐々に添加させ、ホモミキサー（８０００ｒｐｍ、５分処理）で均一に分散させた。脱気下で４０℃まで冷却し、ＳＩＲＴ１活性化成分であるカッコンエキス等を添加し、ホモミキサー（３０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気、濾過することにより、白濁の水系エッセンスを得た。
【００６３】
（処方例３）親水クリーム（シワ予防クリーム）
本処方例は、シワ予防用の親水クリームの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００６４】
組成 配合比（重量％）
ステアリン酸グリセリル １．０％
ＰＯＥ（２０）セチルエーテル ０．３％
トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル １．０％
ベヘニルアルコール ４．０％
ミリスチン酸プロピル ２．５％
酢酸トコフェロール ０．３％
ワセリン １．０％
ブチレングリコール １．５％
フェノキシエタノール ０．２％
部分ミリストイル化キトサン・ピロリドンカルボン酸塩 ０．３％
キトサン・グリコール酸塩 ０．１％
カッコンエキス（エタノール抽出、粉末タイプ) ０．０５％
レスベラトロール ０．０１％
ブドウつるエキス（粉末タイプ) ０．２％
精製水 残量
計 １００．０％
【００６５】
シワ予防用の親水クリームの調製は次のようにして行った。すなわち、油相であるステアリン酸グリセリル、ＰＯＥ（２０）セチルエーテル、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、ベヘニルアルコール、ミリスチン酸プロピル、酢酸トコフェロール、ワセリンを７０℃で加熱溶解後、部分ミリストイル化キトサンやブチレングリコール等から構成される水相に徐々に添加させ、ホモミキサー（８０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気下で４０℃まで冷却し、ＳＩＲＴ１活性化成分であるカッコンエキスやレスベラトロール等を添加し、ホモミキサー（２０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気、濾過することにより、白濁の親水クリームを得た。
【００６６】
（処方例４）ヘアケアリキッド（育毛用）
本処方例は、育毛用のヘアケアリキッドの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００６７】
組成 配合比（重量％）
エタノール ３０．０％
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム ０．８％
ＰＯＥ（２０）硬化ヒマシ油 ０．２％
部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン ０．３％
プロピレングリコール ７．０％
グリコール酸 ０．３％
酢酸トコフェロール ０．５％
カッコンエキス(エタノール抽出、溶液タイプ) ７．８％
ブドウつるエキス(粉末タイプ、２．５％レスベラトロール含有) ０．２％
精製水 残量
計 １００．０％
【００６８】
（処方例５）美容サプリメント（錠剤）
本処方例は、美容サプリメントの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。そして、次の組成の組成物を打錠し、錠剤としたものである。
【００６９】
組成 配合比（重量％）
グルコサミン ０．５％
コラーゲン末 ３．０％
アルギニン ３．０％
フラクトオリゴ糖、 ５．０％
カッコンエキス(エタノール抽出、粉末タイプ) １．０％
ブドウつるエキス(粉末タイプ、２．５％レスベラトロール含有) １．５％
キトサン・グルタミン酸塩 １．０％
キチン粉末 ０．５％
トウモロコシデンプン ３０％
ヒドロキシプロピルセルロース ３．０％
ステアリン酸マグネシウム １．５％
アスコルビン酸 １．０％
乳糖 残量
計 １００％
【００７０】
（処方例６）美容・健康向けドリンク
本処方例は、美容・健康向けドリンクの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００７１】
組成 配合比（重量％）
フラクトオリゴ糖 ５．０％
カッコンエキス(エタノール抽出、粉末タイプ) ０．１％
ブドウつるエキス(粉末タイプ、２．５％レスベラトロール含有) ０．１％
アスコルビン酸 ０．１％
クエン酸 ０．２％
ソルビトール ０．８％
アセチルグルコサミン ０．５％
精製水 残量
計 １００．０％
【技術分野】
【０００１】
本発明は、自然老化の抑制や寿命延長作用に関与するサーチュイン１（以下、ＳＩＲＴ１ともいう）活性化剤と活性化組成物、並びにそのようなサーチュイン１活性化能を有することにより、自然老化の抑制作用を発揮する皮膚外用剤、化粧料、食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
自然老化のスピードを調節することができることは、様々なモデル生物を通して証明されている。古くから、老化の抑制はカロリー制限によって引き起こされることが知られていた。しかし、近年では酵母、線虫、ハエ、げっ歯類など、様々な種で寿命を延長するための遺伝子が同定されている。これらの遺伝子は、悪化する環境条件（カロリー制限など）に応答して、生存率を高めるように進化してきた、進化上保存された経路の一つと考えられている。
【０００３】
酵母は寿命に関する研究をする上で、有用なモデルであることが立証されている。酵母において、寿命は個々の細胞の分裂回数で定義されている。酵母のサーチュイン２（Silent Information Regulator 2：以下、ＳＩＲＴ２ともいう）遺伝子は寿命延長に関与しており、この遺伝子を酵母に付加的に導入すると、寿命が３０〜７０％程度延びると認められている。ＳＩＲＴ２遺伝子は酵母のカロリー制限による寿命延長効果にも必要であることが証明されている。
【０００４】
酵母ＳＩＲＴ２のヒトホモログはＳＩＲＴ１−７（SIR Two ortholog-1-7）と名付けられている。その中でもＳＩＲＴ１が酵母ＳＩＲＴ２と機能的に類似していると考えられている。下記非特許文献１には、ヒトの細胞にＳＩＲＴ１遺伝子を付加的に導入すると、老化の指標であるSenescence Associated-β-galactosidase（SA-β-gal）の量が減少することも記載されている。このことは哺乳類細胞でもＳＩＲＴ１が老化の抑制に効果があることを示している。
【０００５】
ＳＩＲＴ１は、デアセチラーゼとして知られている。ＳＩＲＴ１はデアセチラーゼの中でも、ＮＡＤ＋を必要とするサーチュインファミリーの１種である。ＳＩＲＴ１のデアセチラーゼとしての酵素活性は、レスベラトロール、ブテイン、ピセアンタンノール、フィセチン、ケルセチンといった、トランススチルベン構造を有するポリフェノールによって活性化することが知られている。
【０００６】
ＳＩＲＴ１を活性化させると、寿命延長作用、細胞死の予防を示すことから、自然老化を抑え、寿命を延長させるアンチエイジング効果を示すことが知られている。 ＳＩＲＴ１を強く活性化させる成分として、レスベラトロールが知られている（下記特許文献１、特許文献２）。
【０００７】
本発明者等は、皮膚の細胞中に存在するＳＩＲＴ１を活性化することで、皮膚の老化を抑制できると考えた。実際に、皮膚の線維芽細胞にＳＩＲＴ１活性化物質であるレスベラトロールを加え、老化の指標であるＳＡ−β−ｇａｌの量を測定すると、減少していることがわかった。そのため、ＳＩＲＴ１活性化物質を含んだ化粧料や食品には、抗老化の効果があることが確認できた。
【０００８】
しかし、レスベラトロールは、熱、酸素及び光により酸化や褐色化され、薬効が低下するという問題点を有していた。従って、レスベラトロールに替わるＳＩＲＴ１活性化能と安定性に優れる有効成分の開発や組成物の開発が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００７−３２６８７２号公報
【特許文献２】特開２００６−２９８８７６号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】(1) PLOS ONE. 2008 Mar 5;3(3):e1710
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、このような問題点を解決するためになされたもので、上記従来のレスベラトロールのような熱、酸素及び光により酸化や褐色化され、薬効効果が低下するという問題がなく、しかも優れたサーチュイン１活性化能を有するサーチュイン１活性化剤、活性化組成物、皮膚外用剤、化粧料、食品を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、カッコンエキスに優れたＳＩＲＴ１活性化能を有するとともに、安定性も優れることをも見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、カッコンエキスを有効成分とすることを特徴とするサーチュイン１活性化剤を提供するものである。また本発明は、このようなカッコンエキスを含有することを特徴とするサーチュイン１活性化組成物を提供するものである。
【００１４】
このようなサーチュイン１活性化組成物において、カッコンエキスの他に、レスベラトロールを含有させることも可能である。また、カッコンエキスの他に、ブドウつるエキスを含有させることも可能である。さらには、カッコンエキスの他に、ダイゼインを含有させることも可能である。さらには、キトサン又はキトサン誘導体を含有させることもできる。
【００１５】
カッコンエキスは、たとえばエタノールで抽出することが可能である。
【００１６】
さらに、本発明は、上記のようなサーチュイン１活性化剤又はサーチュイン１活性化組成物を含有する、サーチュイン１活性化能を有する皮膚外用剤、化粧料、食品を提供するものである。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、上述のようにカッコンエキスをサーチュイン１活性化剤の有効成分として用い、或いはカッコンエキスをサーチュイン１活性化組成物に含有させたことで、従来のレスベラトロールに替わるサーチュイン１活性化能に優れた活性化剤若しくは活性化組成物を提供しうるに至った。
【００１８】
また、カッコンエキスを用いることで、従来のレスベラトロールに生じていた熱、酸素及び光により酸化や褐色化され、薬効が低下するという問題も解消しうるという効果がある。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明のサーチュイン１活性化剤は、上述のようにカッコンエキスを有効成分とするものである。また、本発明のサーチュイン１活性化組成物は、上述のようにカッコンエキスを含有するものである。
【００２０】
カッコンエキスは、多年生のつる草の一種であるクズ(Pueraria lobata Ohwi)の根の抽出物である。カッコンエキスの抽出法は、特に限定されるものではないが、クズ(Pueraria lobata Ohwi)の根をそのままあるいは粉砕後、溶媒で、常温乃至溶媒の沸点の温度にて抽出することができる。
【００２１】
利用可能な溶媒は、水、アルコール類（例えば、エタノール、ブタノール、メタノール等の低級アルコール、１、３−ブチレングリコール、グリセリン等の多価アルコール）、アセトン等のケトン類、エチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、酢酸エチル等のエステル類、キシレン、ベンゼン等の有機溶媒を単独又は２種以上任意に組み合わせて使用することができる。さらに用途目的に応じて希釈又は溶媒を留去してペースト状としたり、乾燥末等に加工してもよい。
【００２２】
また、カッコンエキスは、エタノール抽出物を使用するのが好ましい。エタノールによる抽出物が高いＳＩＲＴ１活性化能を示すからである。エタノール抽出物として、たとえば、プエラリン抽出液Ｂ（商品名：池田糖化工業製）を使用することができる。
【００２３】
本発明のサーチュイン１活性化組成物には、上記のようなカッコンエキスの他に、レスベラトロールを含有させることができる。レスベラトロールはブドウの葉、新芽に存在するポリフェノールの一種であり、ｔｒａｎｓ−レスベラトロール、ｃｉｓ−レスベラトロールおよびそれらの混合物の総称である。またレスベラトロールを含有する成分を用いることも可能である。
【００２４】
レスベラトロールを含有する成分としては、レスベラトロールが０．１重量％以上含有されている成分を用いるのが好ましい。レスベラトロールを含有する成分としては、たとえばブドウつるエキスが挙げられる。ブドウつるエキスとしては、たとえばレスベラトロールが１．０〜３．０重量％含有されるブドウつるエキスであるResveratrox（商品名：サンブライト社製）を用いることが可能である。また、レスベラトロール以外にレスベラトロールの二量体であるビニフェリンを用いることもできる。このようなビニフェリンを含有するブドウつるエキスとして、たとえばViniferol（商品名：サンブライト社製）等が挙げられる。
【００２５】
また本発明のサーチュイン１活性化組成物には、ダイゼインを含有させることができる。ダイゼインは、大豆に多く含まれるイソフラボンアグリコンである。ダイゼインを含むエキスとしてダイズエキスなどがある。
【００２６】
さらに、本発明のサーチュイン１活性化組成物には、キチン・キトサン、若しくはこれらの誘導体を含有させることができる。このようなキチン・キトサン若しくはその誘導体を含有させることによって、本発明のＳＩＲＴ１活性化剤の安定性を高めることができる。キチン・キトサンやそれらの誘導体の種類は特に限定されないが、たとえばカルボキシメチルキチン、カルボキシメチルキトサン、キトサンのグリコール酸塩やピロリドンカルボン酸塩や乳酸塩やアスコルビン酸塩等の塩類、部分ミリストイル化キトサンピロリドンカルボン酸（たとえばＰＭ−キトサン（商品名：ピアス株式会社製）、部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン等が挙げられる。
【００２７】
その他、その形態に応じて、化粧料、外用剤、食品で一般的に用いられる成分を本発明の効果や機能性を阻害しない範囲で配合できる。例えば、ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール類、セタノール、 ベヘニルアルコール等の高級アルコール類、流動パラフィン、スクワラン等の非極性油剤類、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル等のエステル系油剤類、小麦胚芽油やオリーブ油等の植物油類、トリメチルシロキシケイ酸、メチルフェニルポリシロキサン等のシリコン化合物類、パーフルオロポリエーテル等のフッ素化合物類等の液状油剤が挙げられる。また、水溶性高分子、保湿柔軟化剤、抗酸化剤、収斂剤、美白剤、抗菌剤、抗炎症剤、紫外線吸収剤類、紫外線散乱剤、水溶性ビタミン類、油溶性ビタミン類、酵素等の医薬部外品原料規格、化粧品種別配合成分規格、化粧品原料基準、日本薬局方、食品添加物公定書規格等の成分等が挙げられる。
【００２８】
化粧料としては、たとえば、１）局所又は全身用の皮膚洗浄料又は皮膚化粧料類、２）頭皮・頭髪に適用する薬用及び／又は化粧用の製剤類、３）浴湯に投じて使用する浴用剤、４）人体用の消臭・防臭剤、５）洗口剤等の口腔用剤、６）皮膚貼付用シート、化粧用シート、化粧用コットン、ウエットティッシュなどを意味し、固形、溶液、ゲル、エマルジョン、シート、スプレー、アンプル、カプセル、粉末（パウダー）など利用上の適当な形態とすることができる。
【００２９】
具体的には、ローション、乳液、クリーム、軟膏、ジェル、美容液、顔面用含浸シート、オイル、パック、ミストなどの基礎化粧料、洗顔料、クレンジングなどの皮膚洗浄料、シャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアートニック、育毛・養毛料などの頭髪化粧料、ファンデーション、口紅、アイシャドウ、アイライナー、マスカラなどのメークアップ化粧料などが挙げられる。
【００３０】
乳化化粧料としては、液状油剤を乳化させて調製することが可能である。具体的な例としては、流動パラフィン、スクワラン、イソノナン酸イソノニル、イソノナン酸イソトリデシル、エチルヘキサン酸セチル、トリ-エチルヘキサン酸グリセリル、トリ(カプリル・カプリン酸)グリセリン、パルミチン酸セチル、イソステアリン酸−２−ヘキシルデシル、ステアリン酸ステアリル、ミリスチン酸イソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸ネオペンチルグリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジイソステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸プロピレングリコール等のエステル系液状油剤やコメ油、コメヌカ油、月見草油、リノール酸、コムギ胚芽油、オリーブ油、ホホバ油、ブドウ種子油、カミツレ油、ローズマリ−油、ウイキョウ油等の植物系液状油や、ホホバ油、卵黄油などの動物系液状油が挙げられる。
【００３１】
この場合、乳化剤としては、脂肪酸モノグリセリド、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリグリセリン脂肪酸エステル等の非イオン系界面活性剤、塩化ベンザルコニウム等のカチオン系界面活性剤、両性界面活性剤、アニオン界面活性剤等を使用することができる。
【００３２】
さらに、本発明のサーチュイン１活性化組成物には、水溶性高分子を含有させることができる。水溶性高分子としては、アラビアゴム、クインシード、寒天、カゼイン、デキストリン、ゼラチン、ペクチン、デンプン、カラギーナン、アルギン酸又はその塩、ヒアルロン酸又はその塩、コンドロイチン硫酸又はその塩、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ニトロセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメタアクリレート、ポリアクリル酸塩、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレンイミン等が例示される。
【００３３】
本発明の食品には、美容食品も含まれる。ここで美容食品とは、美容や健康志向の食品、飲料、内服製剤全般を意味し、形態としては、アンプル、カプセル、錠剤（ペレット）、粉末、顆粒、固形、液体、ゼリー（ゲル）等とすることができる。具体的には、栄養補給、滋養強壮、疲労回復、体質改善、美白、美肌、養毛・育毛、痩身、精神安定等の美容・健康志向食品や飲料の他、ガム、キャンディ、ヨーグルト、清涼飲料水等の嗜好食品又は飲料が挙げられる。
【００３４】
美容食品に使用される色素・着色剤として、ブドウ果汁色素、赤キャベツ色素、赤米色素、アナトー色素、イカスミ色素、ウコン色素、オキアミ色素、柿色素、クチナシ色素、タマネギ色素、スピルリナ色素、ハイビスカス色素、紫イモ色素、紫ヤマイモ色素、ルチン等が挙げられる。
【００３５】
その他、甘味料や栄養強化剤として、砂糖、果糖、アラビノース、キシロビオース、ガラクトース、グルコサミン、コラーゲン、キシロース、トレハロース、アセチルグルコサミン、プロリンやアルギニン等のアミノ酸類、フラクトオリゴ糖、ステビア、マンノース、麦芽糖、蜂蜜、ブドウ糖、ミラクリン、モネリン、甘草抽出物、貝殻焼成カルシウム、酵母、小麦胚芽、ヘミセルロース、ヘム鉄等を使用することができる。
【００３６】
化粧料や美容食品に使用される水溶性ビタミン類として、ビタミンＢ群であるチアミン塩酸塩、チアミン硫酸塩、リボフラビン、ピリドキシンシアノコバラミン、葉酸類、ニコチン酸類、パントテン酸類、ビオチン類、コリン、イノシトール類等を使用することができ、ビタミンＣ群であるアスコルビン酸又はその誘導体、カルニチン、フェルラ酸等を使用することができ、さらにビタミンＰ類であるルチン、エリオシトリン、ヘスペリジン等を使用することができる。
【００３７】
また、化粧料や美容食品に利用される油溶性ビタミン類として、ビタミンＡ群であるレチノール、レチナール、デヒドロレチナール、β-カロチン、リコピン、アスタキサンチン、パルミチン酸レチノール等を使用することができ、ビタミンＤ群であるエルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、ジヒドロタキステロール等を使用することができ、さらにビタミンＥ群であるトコフェロール又はその誘導体等を使用することができ、その他、ビタミンＦやγ−オリザノール等を使用することができる。
【実施例】
【００３８】
以下、本発明の実施例について説明する。
【００３９】
（参考例）
ヒトの皮膚の細胞では加齢と共に細胞中のＳＡ−β−ガラクトシダーゼ量が増加することが知られている。そのため、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼは細胞老化のマーカーとして用いられている。継代培養を４ヶ月処理したヒト皮膚由来の線維芽細胞を用いて、一般にＳＩＲＴ１活性化剤として使用されているレスベラロトール(Sigma社)の老化抑制について、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色による試験を行った。
【００４０】
細胞密度を一定にした後、レスベラロトール（１０−３０μＭ)を含有した培地中で４日間暴露した。ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色には、Cell Senescence detection kit(コスモバイオ社製)を用いた。ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色量を測定するとともに、レスベラロトールを含有しないものをコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色量を１００として、コントロールに対するＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色量の比を求めた。測定結果を表１に示す。表１からも明らかなように、レスベラロトールを添加することにより、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ染色性が有意に抑制されることが示唆された。更に染色像を二値化し、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ量を定量化した結果、レスベラロトールを添加することにより、ＳＡ−β−ガラクトシダーゼ量が１８〜２３％低下していることが分かった。このようにＳＩＲＴ１を活性化するレスベラロトールに、加齢による皮膚老化を抑えるために有効であることが確認された。このことより、ＳＩＲＴ１活性化剤は加齢による皮膚老化を抑制するために有効であることが示唆された。
【００４１】
【表１】
【００４２】
（実施例１）
本実施例では、本発明のＳＩＲＴ１活性化剤であるカッコンエキスのＳＩＲＴ１活性について試験した。試験には、SIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery Kit（BIOMOL社）を用いた。このキットでは、ｐ５３のアミノ酸配列の中で、ＳＩＲＴ１によって脱アセチル化される３８２番目のリジンを含む配列を元にした蛍光原性ペプチドを基質としており、このペプチドはＳＩＲＴ１によって脱アセチル化されることで蛍光を発するようになることから、ＳＩＲＴ１の酵素活性を測定することができる。
【００４３】
そして、この反応系に様々な物質を加えることで、ＳＩＲＴ１阻害剤や、ＳＩＲＴ１活性化剤をスクリーニングに用いることができる。２５０種以上の成分をスクリーニングした結果、カッコンエキスにＳＩＲＴ１活性能を有することが分かった。カッコンエキス(池田糖化工業製、製品名：プエラリン抽出液Ｂ)を終濃度０．２５重量％、０．０５重量％、０．０２５重量％になるように調製し、SIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery KitでＳＩＲＴ１活性を測定するとともに、精製水をコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＩＲＴ１活性を１００として、コントロールに対するＳＩＲＴ１活性の比を求めた。測定結果を表２に示す。
【００４４】
【表２】
【００４５】
表２からも明らかなように、カッコンエキスのＳＩＲＴ１活性は、それぞれコントロールの７．３倍、２．２５倍、１．８倍の活性を示した。また、終濃度が高いものほど、ＳＩＲＴ１活性が高いことがわかった。この結果から、カッコンエキスはＳＩＲＴ１の脱アセチル化活性を顕著に上昇させることが明らかになった。
【００４６】
レスベラトロールについても同様に測定を行い、カッコンエキスのＳＩＲＴ１活性は、ＳＩＲＴ１の優れた活性化剤として知られているレスベラトロールに匹敵するものであることがわかった。
【００４７】
（比較例１）
カッコンエキス以外の他の植物エキスであるダイズエキス、ローズマリーエキス、チョウジエキス、ボタンビエキス、リョクチャエキス、ピクノジェノール、ウコンエキス、アスパラガスエキス、オウレンエキス、オウバクエキス、キナエキス、ジュウヤクエキス、ハトムギエキス、紅茶エキスを終濃度０．２５重量％になるように調製し、実施例２と同様にSIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery KitでＳＩＲＴ１活性を測定するとともに、精製水をコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＩＲＴ１活性を１００として、コントロールに対するＳＩＲＴ１活性の比を求めた。測定結果を表３に示す。表３からも明らかなように、それぞれコントロールとの差は認められないことから、ＳＩＲＴ１の脱アセチル化活性を上昇させる効果はないことが示された。
【００４８】
【表３】
【００４９】
（実施例２）
本実施例では、カッコンエキスを含有する本発明のＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性について試験した。レスベラトロールを含有する成分として、レスベラトロールが１．０〜３．０重量％含有されるブドウつるエキス(サンブライト製、製品名：Resveratrox)を終濃度０．０５重量％になるように調製し、SIRT1 Fluorescent Activity Assay / Drug Discovery KitでＳＩＲＴ１活性を測定するとともに、精製水をコントロールとして同様に測定し、コントロールのＳＩＲＴ１活性を１００として、コントロールに対するＳＩＲＴ１活性の比を求めた。測定試験結果を表４に示す。表４からも明らかなように、ブドウつるエキスは、コントロールの１．３５倍の活性を示した。
【００５０】
【表４】
【００５１】
コントロールの２．２５倍のＳＩＲＴ１活性化能を有するカッコンエキス(池田糖化工業社製、商品名：プエラリン抽出液Ｂ)の０．０５重量％とコントロールの１．３５倍の活性能を有するブドウつるエキス(サンブライト社製、製品名：Resveratrox)の０．０５重量％を共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、そのＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性を測定した。測定の結果、コントロールの３．２５倍の活性を示した。この結果から、カッコンエキスと、レスベラトロールを含有するブドウつるエキスとを共存させることにより、ＳＩＲＴ１の活性を相乗的に上昇させることが明らかになった。
【００５２】
また、コントロールの２．２５倍のＳＩＲＴ１活性化能を有する０．０５重量％カッコンエキス(池田糖化工業製、製品名：プエラリン抽出液Ｂ)と、コントロールの３．１倍の活性化能を有するレスベラトロール（０．０２５ｍＭ）とを共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、そのＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性を測定した。測定の結果、コントロールの５．１５倍の活性を示した。また、０．０２５重量％カッコンエキスと、レスベラトロール（０．０２５ｍＭ）とを共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、同様にＳＩＲＴ１活性を測定したところ、コントロールの４．３倍の活性を示した。これらの結果から、カッコンエキスとレスベラトロールとを共存させることにより、ＳＩＲＴ１の活性を相乗的に上昇させることが明らかになった。
【００５３】
さらに、コントロールの２．２５倍のＳＩＲＴ１活性化能を有するカッコンエキス(池田糖化工業製、製品名：プエラリン抽出液Ｂ)の０．０５％と、コントロールの２．７倍の活性化能を有するダイゼイン（０．０２５ｍＭ）とを共存させてＳＩＲＴ１活性化組成物とし、そのＳＩＲＴ１活性化組成物のＳＩＲＴ１活性を測定した。測定の結果、コントロールの４．９５倍の活性を示した。この結果から、カッコンエキスとダイゼインとを共存させることにより、ＳＩＲＴ１の活性を相乗的に上昇させることが明らかになった。
【００５４】
これらの結果から、カッコンエキスと、レスベラトロール、ブドウつるエキス、又はダイゼインとを共存させたＳＩＲＴ１活性化組成物は、ＳＩＲＴ１を活性化するのに有効な組成物であることがわかった。このことにより、皮膚の加齢による老化を抑える抗老化作用の機能を有する化粧料、外用剤、美容食品に有用であることがわかった。
【００５５】
（実施例４）
本実施例では、ＳＩＲＴ１の活性化能の安定性について試験した。ＳＩＲＴ１の活性化能を測定した後、２ヶ月後に４０℃で測定した。その測定結果を表５に示す。表５からも明らかなように、レスベラトロールは、ＳＩＲＴ１の活性化能が減少したのに対して、カッコンエキスには活性化能の低下はほとんど認められず、薬剤安定性に優れる有効成分であることが分かった。
【００５６】
【表５】
【００５７】
(処方例１）(アンチエイジング用エッセンス)
本処方例は、一例として白濁状で低分子界面活性剤を含まない美容液の処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００５８】
組成 配合比（重量％）
ミネラルオイル １．０％
スクワラン １．０％
部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン ０．２％
ブチレングリコール ２．５％
ジプロピレングリコール ５．５％
メチルパラベン ０．１％
カッコンエキス
(池田糖化製、プエラリン抽出液Ｂ-２、溶液タイプ) ５．０％
カッコンエキス(粉末タイプ) ０．０３％
精製水 残量
計 １００．０％
【００５９】
白濁のアンチエイジング用エッセンスの調製は次のようにして行った。すなわち、油相であるミネラルオイルとスクワランを７０℃で加熱溶解後、部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサンやブチレングリコール等から構成される水相に徐々に添加させ、ホモミキサー（８０００ｒｐｍ、５分処理）で均一に分散させた。脱気下で４０℃まで冷却し、ＳＩＲＴ１活性化成分であるカッコンエキス等を添加し、ホモミキサー（３０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気、濾過することにより、白濁の水系エッセンスを得た。
【００６０】
（処方例２）(アンチエイジング用エッセンス)
本処方例は、処方例１と同様に、白濁状で低分子界面活性剤を含まない美容液の処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００６１】
組成 配合比（重量％）
ミネラルオイル １．０％
ミリスチン酸プロピル １．０％
部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン ０．２％
ブチレングリコール ５．５％
プロピレングリコール ５．５％
メチルパラベン ０．１％
カッコンエキス
（池田糖化製、プエラリン抽出液Ｂ−２、溶液タイプ） ５．５％
ブドウつるエキス
（サンブライト製、製品名：Resveratrox、粉末タイプ） ０．３％
ダイゼイン ０．０５％
精製水 残量
計 １００．０％
【００６２】
白濁のアンチエイジング用エッセンスの調製は次のようにして行った。すなわち、油相であるミネラルオイルとミリスチン酸プロピルを７０℃で加熱溶解後、部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサンやブチレングリコール等から構成される水相に徐々に添加させ、ホモミキサー（８０００ｒｐｍ、５分処理）で均一に分散させた。脱気下で４０℃まで冷却し、ＳＩＲＴ１活性化成分であるカッコンエキス等を添加し、ホモミキサー（３０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気、濾過することにより、白濁の水系エッセンスを得た。
【００６３】
（処方例３）親水クリーム（シワ予防クリーム）
本処方例は、シワ予防用の親水クリームの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００６４】
組成 配合比（重量％）
ステアリン酸グリセリル １．０％
ＰＯＥ（２０）セチルエーテル ０．３％
トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル １．０％
ベヘニルアルコール ４．０％
ミリスチン酸プロピル ２．５％
酢酸トコフェロール ０．３％
ワセリン １．０％
ブチレングリコール １．５％
フェノキシエタノール ０．２％
部分ミリストイル化キトサン・ピロリドンカルボン酸塩 ０．３％
キトサン・グリコール酸塩 ０．１％
カッコンエキス（エタノール抽出、粉末タイプ) ０．０５％
レスベラトロール ０．０１％
ブドウつるエキス（粉末タイプ) ０．２％
精製水 残量
計 １００．０％
【００６５】
シワ予防用の親水クリームの調製は次のようにして行った。すなわち、油相であるステアリン酸グリセリル、ＰＯＥ（２０）セチルエーテル、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、ベヘニルアルコール、ミリスチン酸プロピル、酢酸トコフェロール、ワセリンを７０℃で加熱溶解後、部分ミリストイル化キトサンやブチレングリコール等から構成される水相に徐々に添加させ、ホモミキサー（８０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気下で４０℃まで冷却し、ＳＩＲＴ１活性化成分であるカッコンエキスやレスベラトロール等を添加し、ホモミキサー（２０００ｒｐｍ、１分処理）で均一に分散させた。脱気、濾過することにより、白濁の親水クリームを得た。
【００６６】
（処方例４）ヘアケアリキッド（育毛用）
本処方例は、育毛用のヘアケアリキッドの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００６７】
組成 配合比（重量％）
エタノール ３０．０％
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム ０．８％
ＰＯＥ（２０）硬化ヒマシ油 ０．２％
部分ミリストイル化カルボキシメチルキトサン ０．３％
プロピレングリコール ７．０％
グリコール酸 ０．３％
酢酸トコフェロール ０．５％
カッコンエキス(エタノール抽出、溶液タイプ) ７．８％
ブドウつるエキス(粉末タイプ、２．５％レスベラトロール含有) ０．２％
精製水 残量
計 １００．０％
【００６８】
（処方例５）美容サプリメント（錠剤）
本処方例は、美容サプリメントの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。そして、次の組成の組成物を打錠し、錠剤としたものである。
【００６９】
組成 配合比（重量％）
グルコサミン ０．５％
コラーゲン末 ３．０％
アルギニン ３．０％
フラクトオリゴ糖、 ５．０％
カッコンエキス(エタノール抽出、粉末タイプ) １．０％
ブドウつるエキス(粉末タイプ、２．５％レスベラトロール含有) １．５％
キトサン・グルタミン酸塩 １．０％
キチン粉末 ０．５％
トウモロコシデンプン ３０％
ヒドロキシプロピルセルロース ３．０％
ステアリン酸マグネシウム １．５％
アスコルビン酸 １．０％
乳糖 残量
計 １００％
【００７０】
（処方例６）美容・健康向けドリンク
本処方例は、美容・健康向けドリンクの処方例であり、組成および配合比は次のとおりである。
【００７１】
組成 配合比（重量％）
フラクトオリゴ糖 ５．０％
カッコンエキス(エタノール抽出、粉末タイプ) ０．１％
ブドウつるエキス(粉末タイプ、２．５％レスベラトロール含有) ０．１％
アスコルビン酸 ０．１％
クエン酸 ０．２％
ソルビトール ０．８％
アセチルグルコサミン ０．５％
精製水 残量
計 １００．０％
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カッコンエキスを有効成分とすることを特徴とするサーチュイン１活性化剤。
【請求項２】
カッコンエキスがエタノールで抽出されたものである請求項１記載のサーチュイン１活性化剤。
【請求項３】
カッコンエキスを含有することを特徴とするサーチュイン１活性化組成物。
【請求項４】
レスベラトロールをさらに含有する請求項３記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項５】
ブドウつるエキスをさらに含有する請求項３又は４記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項６】
ダイゼインをさらに含有する請求項３乃至５のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項７】
カッコンエキスがエタノールで抽出されたものである、請求項３乃至６記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項８】
キトサン又はキトサン誘導体をさらに含有する請求項３乃至７のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項９】
請求項１若しくは２記載のサーチュイン１活性化剤、又は請求項３乃至８のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物を配合したことを特徴とするサーチュイン１活性化能を有する皮膚外用剤。
【請求項１０】
請求項１若しくは２記載のサーチュイン１活性化剤、又は請求項３乃至８のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物を配合したことを特徴とするサーチュイン１活性化能を有する化粧料。
【請求項１１】
請求項１若しくは２記載のサーチュイン１活性化剤、又は請求項３乃至８のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物を配合したことを特徴とするサーチュイン１活性化能を有する食品。
【請求項１】
カッコンエキスを有効成分とすることを特徴とするサーチュイン１活性化剤。
【請求項２】
カッコンエキスがエタノールで抽出されたものである請求項１記載のサーチュイン１活性化剤。
【請求項３】
カッコンエキスを含有することを特徴とするサーチュイン１活性化組成物。
【請求項４】
レスベラトロールをさらに含有する請求項３記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項５】
ブドウつるエキスをさらに含有する請求項３又は４記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項６】
ダイゼインをさらに含有する請求項３乃至５のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項７】
カッコンエキスがエタノールで抽出されたものである、請求項３乃至６記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項８】
キトサン又はキトサン誘導体をさらに含有する請求項３乃至７のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物。
【請求項９】
請求項１若しくは２記載のサーチュイン１活性化剤、又は請求項３乃至８のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物を配合したことを特徴とするサーチュイン１活性化能を有する皮膚外用剤。
【請求項１０】
請求項１若しくは２記載のサーチュイン１活性化剤、又は請求項３乃至８のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物を配合したことを特徴とするサーチュイン１活性化能を有する化粧料。
【請求項１１】
請求項１若しくは２記載のサーチュイン１活性化剤、又は請求項３乃至８のいずれかに記載のサーチュイン１活性化組成物を配合したことを特徴とするサーチュイン１活性化能を有する食品。
【公開番号】特開２０１０−２７００１２（Ｐ２０１０−２７００１２Ａ）
【公開日】平成２２年１２月２日（２０１０．１２．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１２１０４７（Ｐ２００９−１２１０４７）
【出願日】平成２１年５月１９日（２００９．５．１９）
【出願人】（０００１１２２６６）ピアス株式会社 (49)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１２月２日（２０１０．１２．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年５月１９日（２００９．５．１９）
【出願人】（０００１１２２６６）ピアス株式会社 (49)
【Ｆターム（参考）】
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