トリアザスピロ［５．５］ウンデカン誘導体の新規結晶
本発明は、トリアザスピロ［５．５］ウンデカン誘導体の新規結晶に関する。（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶は、医薬品原薬として安全で、かつ大量に供給可能であり、また、強力なケモカイン／ケモカイン受容体の拮抗作用を有することから、各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、自己免疫疾患、移植臓器拒絶反応、後天性免疫不全症候群等の予防および／または治療剤の製造に有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
本発明は、医薬品として有用で、かつ新規な（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩（以下、化合物（Ｉ）と略記する場合がある。）の結晶、その製造方法、およびその結晶を有効成分として含有する薬剤に関する。
【背景技術】
ケモカインは、内因性の白血球走化性、活性化作用を有し、ヘパリン結合性の強い塩基性蛋白質として知られている。現在では、ケモカインは、炎症、免疫反応時の特異的白血球の浸潤を制御するのみならず、発生、生理的条件下でのリンパ球のホーミング、血球前駆細胞、体細胞の移動にも関わると考えられている。
血球細胞は種々のサイトカインによって、その分化、増殖、細胞死が制御されている。生体内において炎症は局所的にみられ、リンパ球の分化、成熟等はある特定の部位で行われている。すなわち、必要とされる種々の細胞が、ある特定の部位に移動し、集積して、一連の炎症・免疫反応が起こる。従って、細胞の分化、増殖、死に加えて、細胞の移動も免疫系にとって必要不可欠な現象である。
生体内での血球細胞の移動は、まず、発生過程において、ＡＧＭ領域に始まる造血が胎児肝を経て、骨髄での永久造血へと移行することから始まる。更に、胎児肝・骨髄から胸腺へと、Ｔ細胞・胸腺樹状細胞の前駆細胞が移動し、胸腺環境下で細胞分化する。クローン選択を受けたＴ細胞は、二次リンパ組織へ移動し、末梢における免疫反応に関与する。抗原を捕らえて、活性化・分化した皮膚のランゲルハンス細胞は、局所リンパ節のＴ細胞領域に移動し、樹状突起細胞としてナイーブＴ細胞を活性化する。メモリーＴ細胞はリンパ管・血管を経て、再びリンパ節にホーミングする。また、Ｂ細胞、腸管上皮内Ｔ細胞、γδＴ細胞、ＮＫＴ細胞、樹状細胞は、骨髄より胸腺を経ずに移動・分化し、免疫反応に関与する。
ケモカインは、このような種々の細胞の移動に深く関与している。例えば、ＭＩＰ３β、ＳＬＣとその受容体であるＣＣＲ７は、抗原を捕らえた成熟樹状細胞が、ナイーブＴ細胞およびメモリーＴ細胞と効率良く出会うために、これらの細胞の局所リンパ組織への移動・ホーミングにおいて重要な働きをしている。ＳＬＣの発現に欠損があるＰＬＴマウスの二次リンパ節には、抗原特異的な免疫反応を司るために必要なＴ細胞、並びに樹状細胞がほとんど観察されない（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８９（３），４５１（１９９９））。
ＭＤＣ、ＴＡＲＣとその受容体であるＣＣＲ４は、Ｔｈ２細胞の関わる免疫・炎症反応において、Ｔｈ２細胞の局所への移動に重要な働きをしている。ラット劇症肝炎モデル（Ｐ．ａｃｎｅｓ＋ＬＰＳ）において、抗ＴＡＲＣ抗体は、血中ＡＬＴ量の上昇、および肝臓中ＴＮＦα、ＦａｓＬの発現量の上昇を抑制し、更にラット致死率を改善した（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０２，１９３３（１９９８））。また、マウスＯＶＡ誘発気道過敏性モデルにおいて、抗ＭＤＣ抗体は肺間質に集積する好酸球数を減らし、気道過敏性を抑制した（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１６３，４０３（１９９９））。
ＭＣＰ−１とその受容体であるＣＣＲ２は、マクロファージの炎症部位への浸潤に関与している。抗ＭＣＰ−１抗体は、ラット抗Ｔｈｙ１．１抗体腎炎モデルにおいて、糸球体への単球・マクロファージの浸潤に対する抑制効果を示した（Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．，５１，７７０（１９９７））。
このように、ケモカイン受容体は、種々の特異的な細胞において、ある特定した時期に発現し、そのエフェクター細胞がケモカインの産生される個所に集積するというメカニズムを通じて、炎症・免疫反応の制御に大きく関与している。
ヒト免疫不全ウィルス（以下、ＨＩＶと略する。）感染によって引き起こされる後天性免疫不全症候群（エイズ（ＡＩＤＳ）と呼ばれている。）は、近年最もその治療法を切望されている疾患の一つである。主要な標的細胞であるＣＤ４陽性細胞にＨＩＶの感染が一度成立すると、ＨＩＶは患者の体内で増殖をくり返し、やがては免疫機能をつかさどるＴ細胞を壊滅的に破壊する。この過程で徐々に免疫機能が低下し、発熱・下痢・リンパ節の腫脹等の様々な免疫不全状態を示すようになり、カリニ肺炎等の種々の日和見感染症を併発し易くなる。このような状態がエイズの発症であり、カボジ肉腫等の悪性腫瘍を誘発し、重篤化することはよく知られている。
現在エイズに対する各種の予防、治療方法としては、例えば、（１）逆転写酵素阻害剤やプロテアーゼ阻害剤の投与によるＨＩＶの増殖抑制、（２）免疫賦活作用のある薬物の投与による日和見感染症の予防、緩和等が試みられている。
ＨＩＶは、免疫系の中枢を司るヘルパーＴ細胞に主に感染する。その際、Ｔ細胞の膜上に発現している膜蛋白ＣＤ４を利用することは、１９８５年より知られている（Ｃｅｌｌ，５２，６３１（１９８５））。ＣＤ４分子は４３３個のアミノ酸残基からなり、成熟ヘルパーＴ細胞以外にマクロファージ、一部のＢ細胞、血管内皮細胞、皮膚組織のランゲルハンス細胞、リンパ組織にある樹状細胞、中枢神経系のグリア細胞等で発現が見られる。しかし、ＣＤ４分子のみではＨＩＶの感染が成立しないことが明らかになるにつれて、ＨＩＶが細胞に感染する際にかかわるＣＤ４分子以外の因子の存在の可能性が示唆されるようになった。
１９９６年になって、ＣＤ４分子以外のＨＩＶ感染にかかわる因子としてＦｕｓｉｎという細胞膜蛋白が同定された（Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７２，８７２（１９９６））。このＦｕｓｉｎ分子は、ストローマ細胞由来因子−１（Ｓｔｒｏｍａｌ Ｄｅｒｉｖｅｄ Ｆａｃｔｏｒ−１：ＳＤＦ−１と略する。）の受容体（すなわち、ＣＸＣＲ４である。）であることが証明された。更に、インビトロでＳＤＦ−１が、Ｔ細胞指向性（Ｘ４）ＨＩＶの感染を特異的に抑制することも証明された（Ｎａｔｕｒｅ，３８２，８２９（１９９６）、Ｎａｔｕｒｅ，３８２，８３３（１９９６））。すなわち、ＳＤＦ−１がＨＩＶより先にＣＸＣＲ４に結合することによって、ＨＩＶが細胞に感染するための足掛かりを奪い、ＨＩＶの感染が阻害されたと考えられる。
また同じ頃、別のケモカイン受容体であり、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１βの受容体であるＣＣＲ５も、マクロファージ指向性（Ｒ５）ＨＩＶが感染する際に利用されることが発見された（Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７２，１９５５（１９９６））。
従って、ＨＩＶとＣＸＣＲ４やＣＣＲ５を奪い合うことのできるもの、あるいはＨＩＶウイルスに結合し、該ウイルスをＣＸＣＲ４やＣＣＲ５に結合できない状態にさせるものは、ＨＩＶ感染阻害剤となり得るはずである。また当初、ＨＩＶ感染阻害剤として発見された低分子化合物が、実はＣＸＣＲ４のアンタゴニストであることが示された例もある（Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，４，７２（１９９８））。
以上から、ケモカイン／ケモカイン受容体は、炎症、免疫疾患またはＨＩＶ感染に深く関与していると考えられる。例えば、各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患（アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症等）、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、乾癬、鼻炎、結膜炎、虚血再灌流傷害、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、自己免疫疾患、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、癌転移予防、後天性免疫不全症候群等に関与していると考えられる。
既に、トリアザスピロ［５．５］ウンデカン誘導体がケモカイン／ケモカイン受容体拮抗作用を有し、ケモカインが関与している疾患、例えば各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患（アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症等）、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、乾癬、鼻炎、結膜炎、虚血再灌流傷害、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、自己免疫疾患、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、癌転移予防、後天性免疫不全症候群等の治療および／または予防に有用であることが開示されている（ＷＯ０１／４０２２７号参照。）。
しかしながら、該明細書には、化合物（Ｉ）に関する記載は全くされておらず、化合物（Ｉ）は新規な化合物である。
【発明の開示】
化合物（Ｉ）は、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載されている。しかしながら、本発明者らの研究によれば、この明細書に記載された方法に従って化合物（Ｉ）を製造したところ、結晶ではなく、非結晶であることがわかった。
一般に、非結晶である物質は、医薬品の原薬として以下の点の問題点が予想される。すなわち、医薬品が実際に製造され、流通するときに一定の品質を保つことができない可能性が考えられる。
医薬品は、いかに薬効に優れ、安全性が確認された物質であろうとも、一定の品質を保つことができないのであれば、むしろ有害な事態を招きかねず、そのような化合物は医薬品としての存在意義が無い。このように医薬品において品質の確保は極めて重要な課題の１つである。この品質を確保するためには、常に一定の品質の原薬を安定供給できることが必要条件である。非結晶ではなく、安定な結晶を原薬として供給することはそのための非常に効果的な方法である。
つまり、ＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載した方法に従って製造される化合物（Ｉ）は、非結晶であるため、常に一定の品質の化合物を安定に大量供給することが非常に困難であり、この方法によって得られる原薬は、医薬品として実用に供する上で重大な障害をもつものであると考えられる。そのため、化合物（Ｉ）について、常に一定の品質を有し、かつ医薬品原薬として大量供給することのできる、単一でかつ安定な結晶を提供することが望まれている。
そこで、本発明者らは、化合物（Ｉ）の結晶を得るべく、種々検討を行った。すなわち、塩酸（すなわち塩化水素水溶液）とメタノールの混合溶媒に、化合物（Ｉ）のフリー体、すなわち、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンを溶解し、５０℃乃至５５℃で撹拌し、室温まで冷却し、さらに０℃乃至５℃まで冷却し、析出した固体をろ取した。しかしながら、この固体を分析したところ、意外にも溶媒の成分を含む固体であることがわかった（後記のＢ固体）。このＢ固体を常温でのＸ線結晶回折スペクトルにより解析したが、常に同じＸ線結晶回折スペクトルを与えないため、明確な構造解析を行うことができなかった。しかし、低温でのＸ線結晶回折スペクトルの解析結果から、Ｂ固体は、メタノールおよび水の溶媒和物であることが推察された。このように、当業者が通常行う結晶化操作では、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得ることが困難であることがわかった。従って、化合物（Ｉ）は、非常に溶媒和しやすい化合物であることが予測された。このような溶媒和物は、医薬品原薬として用いるには、安定性や毒性の面で問題となる場合がある。例えば水和物では、吸湿性や水分子の放出等によって質量が変化することもあり、またメタノールの溶媒和物は、メタノールが毒性を有するため、医薬品原薬として用いることはできない。
そこで、本発明者らは、このような問題点についても解決を試み、鋭意検討した結果、化合物（Ｉ）の、無溶媒和物の、純粋で単一な結晶を得ることに成功し、またその結晶化方法を確立することにより、本発明を完成した。
本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶（以下、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶と略記する場合がある。）は、ＷＯ０２／０７４７７０号には記載されていない化合物である。すなわち、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法に従って製造した化合物とは、Ｘ線結晶回折スペクトル、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、赤外線吸収スペクトルのデータが明らかに異なっており、新規な化合物である。
また、本発明者らは、化合物（Ｉ）の溶媒和物、または化合物（Ｉ）の非結晶から、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得ることにも成功した。
すなわち、本発明は、
１．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の結晶、
２．無溶媒和物である前記１記載の結晶、
３．融点が、約２３０℃乃至約２４０℃である前記１記載の結晶、
４．融点が、約２３２℃乃至約２３５℃である前記１記載の結晶、
５．粉末Ｘ線回折スペクトルが、図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルである前記１記載の結晶、
６．粉末Ｘ線回折スペクトルにおける回折角２θが、５．１５、８．０６、１０．２６、１１．０１、１３．７２、１５．４６、１７．３６、１８．０３、１８．５８、１９．００、１９．５１、２０．７１、２１．７３、２２．５８、２３．８０、２４．９６、２７．０７（度）である前記５記載の結晶、
７．赤外吸収スペクトルが、図３に示される赤外吸収スペクトルである前記１記載の結晶、
８．赤外吸収スペクトルにおいて、２９２４、２５０４、１６８２、１６３２、１５９７、１５０３、１４２６、１３７７、１２３５、１１６３、１０９８、９６１、９２８、８７６、８５５、７７０、７２７、６８１ｃｍ−１に吸収を有する前記７記載の結晶、
９．平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至約２００μｍである前記１記載の結晶、
１０．Ｐ２１空間群の結晶である前記２記載の結晶、
１１．格子定数が、ａ＝１１．８１０５オングストローム±７％、ｂ＝７．８７３０オングストローム±７％、ｃ＝１８．２３５１オングストローム±７％を示す前記１０記載の結晶、
１２．低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒を実質的に含まないか、または残留量として、５０００ｐｐｍ以下である前記２記載の結晶、
１３．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の粗精製物を溶解または懸濁させた、水を含有していてもよい低級アルコール系溶媒、または水を含有していてもよい水と混和するエーテル系溶媒から結晶化させることを特徴とする（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法、
１４．低級アルコール系溶媒が、Ｃ１〜４アルキルアルコール、または酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルである前記１３記載の製造方法、
１５．低級アルコール系溶媒が、メタノールまたはエタノールである前記１４載の製造方法、
１６．低級アルコール系溶媒が、酢酸エチルである前記１４記載の製造方法、
１７．水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである前記１３記載の製造方法、
１８．水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：５０乃至７：３である前記１３記載の製造方法、
１９．水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：３５乃至５：５である前記１８記載の製造方法、
２０．結晶化の温度が、約−１０℃乃至約４０℃である前記１３記載の製造方法、
２１．結晶化の時間が、約２０分乃至約５時間である前記１３記載の製造方法、
２２．前記１３乃至２１のいずれかの項に記載の製造法により得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶、
２３．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法、
２４．Ｃ１〜４アルキルアルコールが、メタノールまたはエタノールである前記２３記載の製造方法、
２５．水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである前記２３記載の製造方法、
２６．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程、ついでＣ１〜４アルキルアルコールまたは水と混和するエーテル系溶媒を添加する工程、ついで所望によって水を添加する工程を含むことを特徴とする、前記２３記載の製造方法、
２７．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の溶媒和物または（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の非結晶を、酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルに溶解または懸濁する工程、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程および約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法、
２８．前記２０乃至２４のいずれかの項に記載の方法によって得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶、
２９．平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至２００μｍである前記２８記載の結晶、
３０．前記１、２２または２８記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物、
３１．ケモカイン／ケモカイン受容体の作用の制御剤である前記３０記載の組成物、
３２．ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の治療および／または予防剤である前記３１記載の組成物、
３３．前記１、２２または２８記載の結晶の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物におけるケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防または治療方法、および
３４．ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防および／または治療剤を製造するための前記１、２８または２８記載の結晶の使用等に関する。
化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶、すなわち（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶は、以下の粉末Ｘ線回折スペクトルデータ、赤外吸収スペクトルデータ、示差走査熱量測定データ等によって特徴づけられる。
Ｃｕ−Ｋα線を使用して得られる粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ）、半値幅および相対強度が表１に示される（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（以下Ａ結晶と略記する場合がある。）。
赤外吸収スペクトルにおいて、２９２４、２５０４、１６８２、１６３２、１５９７、１５０３、１４２６、１３７７、１２３５、１１６３、１０９８、９６１、９２８、８７６、８５５、７７０、７２７、６８１ｃｍ−１に吸収を有する（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
示差走査熱量測定において、２４４℃付近に吸熱ピークを有する（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであるが、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
例えば、粉末Ｘ線回折スペクトルのデータの性質上、結晶の同一性の認定においては、回折角（２θ）や半値幅や全体的なパターンが重要であり、相対強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変わりうる。
また、示差走査熱量測定データにおいても、結晶の同一性の認定においては、全体的なパターンが重要であり、測定条件によって多少変わりうる。
さらに、赤外線吸収スペクトルにおいても、結晶の同一性の認定においては、全体的なパターンが重要であり、測定条件によって多少変わりうる。
本明細書中、化合物（Ｉ）にメタノールおよび水が溶媒和した固体、すなわち後記のＢ固体は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであり、その製造方法は限定されない。すなわち、後記した実施例に記載するＢ固体の示差走査熱量測定データおよび／または赤外線吸収スペクトルデータを示す固体であれば、如何なる製法によって製造される固体であっても、Ｂ固体に包含される。ただし、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
本明細書中、化合物（Ｉ）にエタノールおよび／または水が溶媒和した固体、すなわち後記のＣ固体は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであり、その製造方法は限定されない。すなわち、後記した実施例に記載するＣ固体の示差走査熱量測定データおよび／または赤外線吸収スペクトルデータを示す固体であれば、如何なる製法によって製造された固体であっても、Ｃ固体として包含される。ただし、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
本明細書中、化合物（Ｉ）の非結晶は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであり、その製造方法はＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載した方法に限定されない。すなわち、後記した実施例に記載する化合物（Ｉ）の非結晶の示差走査熱量測定データおよび／または赤外線吸収スペクトルデータを示す非結晶であれば、如何なる製法によって製造された非結晶であっても、化合物（Ｉ）の非結晶として包含される。ただし、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
本明細書中、化合物（Ｉ）の粗精製物とは、化合物（Ｉ）を成分として含み、かつ化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶が示す本明細書中の物理化学的性質を示さないものを意味する。
本明細書中、化合物（Ｉ）の結晶は、化合物（Ｉ）の結晶であればこれをすべて包含し、溶媒和の有無には左右されない。すなわち、化合物（Ｉ）に溶媒が溶媒和している結晶であってもよく、また、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であってもよい。ここで、化合物（Ｉ）の結晶として好ましくは、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶である。化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶としては、医薬品の原薬として使用可能な平均粒子径の結晶が好ましい。該結晶の平均粒子径として具体的には、例えば約０．０５μｍ乃至約２００μｍが好ましく、約１μｍ乃至約５０μｍがより好ましく、約５μｍ乃至約３０μｍが特に好ましい。とりわけ約１０μｍ乃至約２０μｍが好ましい。
本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とは、実質的に溶媒和していない結晶を意味する。実質的に溶媒和していない結晶とは、その結晶格子中に溶媒の成分を含まない結晶を意味し、結晶格子外に溶媒の成分が含まれるものも包含する。すなわち、該化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶には、例えば、結晶格子外に溶媒の成分を含む結晶等も含まれる。
さらに本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶には、許容される範囲内の非結晶、または許容される範囲内の溶媒和物の固体（例えば、前記したＢ固体、Ｃ固体またはそれら以外の溶媒和した固体等）が混在していてもよい。
上記したように、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶には、結晶格子外に溶媒の成分が含まれるもの、および／または許容される範囲内の溶媒和物の固体が混在しているものが含まれるが、この場合の溶媒成分の量（残留量または溶媒残留量と呼ばれることがある）は、溶媒によって異なるが、医薬品原薬として許容される範囲内の溶媒成分の量であることが好ましい。例えば、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒等は、実質的に含まないか、または残留量として約５０００ｐｐｍ以下であることが好ましい。より具体的には、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶における溶媒残留量は、例えばメタノールであれば約０ｐｐｍ乃至約３０００ｐｐｍ、好ましくは約０ｐｐｍ乃至約２０００ｐｐｍ、より好ましくは約０ｐｐｍ乃至約１５００ｐｐｍの範囲内にあることが好ましく、例えば酢酸エチルであれば約０ｐｐｍ乃至約５０００ｐｐｍの範囲内にあることが好ましい。また水分含量は約１％以下であることが好ましい。
化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、Ｐ２１空間群の結晶であり、その格子定数は、ａ＝１１．８１０５オングストローム（Å）、ｂ＝７．８７３０オングストローム（Å）、ｃ＝１８．２３５１オングストローム（Å）である。ここで、ａ、ｂ、ｃで表わされる格子定数は、例えば温度等の影響によって増減するため、厳密に解されるべきではない。格子定数の変化は、ａ、ｂ、ｃそれぞれ約±１５％、より好ましくは約±７％、特に好ましくは約±５％以内であることが好ましい。
また、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、約２２５℃以上の融点を示す。より具体的には、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、約２３０℃乃至約２４０℃、好ましくは約２３２℃乃至約２３５℃に融点を示す。融点は、一般的に行われる融点測定法等で確認することができるが、測定条件によって、多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
［本発明化合物の製造方法］
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の結晶は、以下に記載した方法、これらに準ずる方法または実施例に記載した方法によって製造することができる。より具体的には、本発明の（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶は、下記の方法１〜方法４の反応によって製造することができる。
方法１：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、単離精製することなく、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法；
方法２：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＢ固体）を単離精製し、その後、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法；
方法３：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＣ固体）を単離精製し、その後、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法；
方法４：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の非結晶を単離精製し、（ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法により行われる）その後、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法である。
以下に各方法について、詳細に説明する。
（１）方法１は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンを、塩酸塩への変換反応に付し、単離精製することなく、さらに結晶化することによって、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
塩酸塩への変換反応は公知であり、例えば、塩化水素を含む溶媒中、約０℃乃至約９０℃、好ましくは約４０℃乃至約８０℃の温度で行われる。ここで、「塩化水素を含む溶媒」における溶媒は、塩化水素を溶解しうる溶媒、または塩化水素を溶解しうる溶媒と混和できる溶媒であればよい。塩化水素を含む溶媒は、塩化水素を溶解しうる溶媒、または塩化水素を溶解しうる溶媒と混和できる溶媒に、塩化水素ガス、または塩化水素水溶液、すなわち塩酸を添加することによって容易に調製することができる。「塩化水素を含む溶媒」における溶媒としては、例えば（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水等が挙げられる。また、該「塩化水素を含む溶媒」における溶媒は、塩酸塩への変換反応の後に行われる結晶化における溶媒としても用いることができるものが好ましい。このような溶媒としては、例えば「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」等が挙げられる。「低級アルコール系溶媒」としては、例えば、Ｃ１〜４アルキルアルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｓｅｃ−ブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール等）またはＣ１〜４アルキルアルコールの酢酸エステル、すなわち酢酸Ｃ１〜４アルキルエステル（例えば、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸ｓｅｃ−ブチル、酢酸ｔｅｒｔ−ブチル等）等が挙げられる。「水と混和するエーテル系溶媒」としては、例えば、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサン、テトラヒドロフラン等が挙げられる。塩酸塩への変換反応における溶媒としての、「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」として好ましくは、水と、前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」の混合溶媒、または水と、前記「水と混和するエーテル系溶媒」の混合溶媒等が挙げられる。より好ましくは、水とメタノールの混合溶媒、水とエタノールの混合溶媒、水とジオキサンの混合溶媒等が挙げられ、特に、水とメタノールの混合溶媒が好ましい。
この結晶化は、塩酸塩への変換反応に付した反応混合溶液を、約−１０℃乃至約４０℃で撹拌し、Ａ結晶を結晶化させることにより行われる。
より具体的には、例えば、塩化水素を含む「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」等を用いて約４０℃乃至約８０℃で塩酸塩への変換反応を行った後、さらに約−１０℃乃至約４０℃、好ましくは約−５℃乃至約３５℃、より好ましくは約−５℃乃至約１０℃で撹拌し、必要であれば、処理し（例えば、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒を加える等）、Ａ結晶を析出させ、必要であれば、さらに処理する（例えば、水を加える等）ことにより、効率的に化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であるＡ結晶を製造することができる。
前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」を用いた場合には、溶媒和した固体（例えば、後記したＢ固体またはＣ固体等）が生成するので、安定に化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であるＡ結晶を得るためには、塩酸塩への変換反応の後、必要であれば、前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」を加え、水と前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」の混合体積比を変化させることが好ましい。
また、前記の「Ｃ１〜４アルキルアルコール」または「水と混和するエーテル系溶媒」を用いた場合には、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であるＡ結晶の収量を向上するために、必要であれば、水を加えることが好ましい。
上記した方法１における水と前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」の混合体積比、または水と前記「水と混和するエーテル系溶媒」の混合体積比は特に限定されないが、好ましくは１：５０乃至７：３、より好ましくは１：３５乃至１：１の範囲内で行うことが好ましい。
（２）方法２は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を含む、メタノールと水の混合溶媒を用いて、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＢ固体）を単離精製し、その後、結晶化することにより、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
塩酸塩への変換反応は、上記した方法１の塩酸塩への変換反応と同様に行われる。詳しくは、約４０℃乃至約８０℃で塩酸塩への変換反応を行い、さらに約−１０℃乃至約３５℃で撹拌し、好ましくは約−５℃乃至約１０℃で撹拌し、固体を析出させることにより行われる。析出した固体は、当業者によって通常行われる方法（例えば、ろ過、乾燥等）を用いて単離精製し、以下の結晶化に供される。
この結晶化は、上記の反応によって得られた固体を、前記「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」等を用いて、約４０℃乃至約８０℃、好ましくは約５０℃乃至約８０℃で撹拌し、さらに約−５℃乃至約３５℃、好ましくは約１０℃乃至約３５℃で撹拌し、結晶を析出させることにより行われる。該「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」として好ましくは、例えば酢酸エチル、メタノール、エタノール、１，２−ジメトキシエタン等、またはこれらと水の混合溶媒（例えば、メタノール水溶液、エタノール水溶液、１，２−ジメトキシエタン水溶液等）等が挙げられる。とりわけ、酢酸エチルが好ましい。結晶化は、水を含有しない溶媒を用いて行うことがより好ましいが、所望によって、任意の混合比率の、水と低級アルコール系溶媒の混合溶媒、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、好ましくは水の比率が２５％以下のこれらの混合溶媒を用いることができる。
（３）方法３は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと、塩化水素を含む、エタノールと水の混合溶媒を用いて、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＣ固体）を単離精製し、その後、結晶化することにより、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
塩酸塩への変換反応は、上記した方法１の塩酸塩への変換反応と同様に行われる。詳しくは、約４０℃乃至約８０℃で塩酸塩への変換反応を行い、さらに約−１０℃乃至約３５℃、好ましくは約−５℃乃至約１０℃で撹拌し、固体を析出させることにより行われる。析出した固体は、当業者によって通常行われる方法（例えば、ろ過、乾燥等）を用いて単離精製し、前記した方法２に記載の結晶化に付すことで、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とすることができる。
（４）方法４は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンを、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法によって、化合物（Ｉ）の非結晶を単離精製し、さらに結晶化することにより、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
ここで、塩酸塩への変換反応および精製方法は、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法と同様に行われる。この方法によって得られた非結晶は、前記した方法２に記載の結晶化に付すことで、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とすることができる。
塩酸塩への変換反応と結晶化は、操作における利便性から、一連した反応として行うことが好ましい。
方法２〜方法４において、Ｂ固体、Ｃ固体、または非結晶を得る方法を開示したが、これらの固体または非結晶を得る方法は、これらの方法に限定されない。従って、如何なる方法によって得られたＢ固体、Ｃ固体、または非結晶を用いても、上記した方法によって、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得ることができるものであれば、その方法は、すべて本発明に包含される。
また、塩酸塩への変換反応によって、上記した以外の溶媒和物、または非結晶が得られた場合にも、前記した方法２に記載の結晶化に付すことで、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とすることができる。
また、本発明化合物の製造に用いる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンは、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩と４−（４−ホルミルフェニルオキシ）安息香酸を還元的アミノ化反応に付すことにより製造することができる。
この還元的アミノ化反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、ジクロロエタン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、酢酸およびこれらの混合物等）中、三級アミン（例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等）の存在下、あるいは非存在下、還元剤（例えば、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等）の存在下、０℃乃至４０℃の温度で行われる。
さらに、この反応の原料である（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩は、以下の反応工程式（Ｉ）によって製造することができる。
前記反応工程式中、各反応はそれぞれ公知の方法によって行われる。また、前記反応工程式において、出発物質として用いる式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）で示される化合物は、それ自体公知であるか、あるいは公知の方法により容易に製造することができる。また、本明細書中、Ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を表わし、酸付加物塩は、無機酸塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩等）、あるいは有機酸塩（例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩等）を表わす。
具体的には、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩は、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）で示される化合物を反応に付し、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を得、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を脱Ｂｏｃ基反応、環化反応、所望により酸付加物塩への変換反応に付し、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩を得、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩を脱ベンジル基反応に付すことにより製造することができる。
より具体的には、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物は、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）で示される化合物を、例えば有機溶媒（例えばメタノール、エタノール等）中、混合し、３０℃乃至１００℃に加熱することにより得ることができる。
さらに、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩は、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を、脱Ｂｏｃ基反応、環化反応、所望により酸付加物塩への変換反応に付すことにより製造することができる。
この脱Ｂｏｃ基反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、ジオキサン、酢酸エチル、アニソール等）中、有機酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ｐ−トシル酸等）、または無機酸（例えば、塩酸、硫酸等）もしくはこれらの混合物（例えば、臭化水素／酢酸等）中、０℃乃至１００℃の温度で行なわれる。
また、この環化反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、酢酸エチル、ジクロロエタン、トルエン等）中、三級アミン（例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等）を用いるか、酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸等）を用いるか、または用いないで６０℃乃至１２０℃に加熱することにより行われる。この反応はモルホリノエチルアミノ基の切断と同時に環化される反応である。
さらに、この酸付加物塩への変換反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、メタノール、エタノール、ジオキサン、酢酸エチルおよびこれらの混合物等）中、水の存在下または非存在下、酸（例えば、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸等）、あるいは有機酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、酒石酸、シュウ酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、イセチオン酸、グルクロン酸、グルコン酸等）等）存在下、０℃乃至９０℃の温度で行われる。さらにこの反応混合物を−１０℃乃至４０℃で撹拌し、結晶を析出させることにより行われる。
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩は、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩を脱ベンジル基反応に付すことにより製造することができる。この脱ベンジル基反応は公知であり、例えば、溶媒（例えば、エーテル系（例えば、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチルエーテル等）、アルコール系（例えば、メタノール、エタノール等）、ベンゼン系（例えば、ベンゼン、トルエン等）、ケトン系（例えば、アセトン、メチルエチルケトン等）、ニトリル系（例えば、アセトニトリル等）、アミド系（例えば、ジメチルホルムアミド等）、水、酢酸エチル、酢酸またはそれらの２以上の混合溶媒等）中、触媒（例えば、パラジウム／炭素、パラジウム黒、水酸化パラジウム、酸化白金、ラネーニッケル等）の存在下、常圧または加圧下の水素雰囲気下またはギ酸アンモニウム存在下、０℃乃至２００℃の温度で行なわれる。
［薬理活性］
本発明化合物である（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶、またはその溶媒和物の固体が、ＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載した方法に従って製造された非結晶と同程度の、強いケモカイン／ケモカイン受容体拮抗作用を有することは、ＷＯ０１／４０２２７号に記載された方法により確認した。
［毒性］
本発明化合物の毒性は非常に低く、例えばラットを用いた単回投与試験では、２０００ｍｇ／ｋｇでも顕著な毒性は見られなかった。従って本発明化合物は、医薬として使用するために十分安全であると判断できる。
【産業上の利用可能性】
［医薬品への適用］
ヒトを含めた動物、特にヒトにおいて、本発明化合物は、ケモカイン／ケモカイン受容体の作用を制御するので、ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患、例えば各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患（アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症等）、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、乾癬、鼻炎、結膜炎、虚血再灌流傷害、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、自己免疫疾患、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、癌転移予防、後天性免疫不全症候群等の予防および／または治療に有用である。
本発明化合物、あるいは塩酸塩以外の非毒性の塩、酸付加塩、またはその水和物を上記の目的で用いるには、通常、全身的または局所的に、経口または非経口の形で投与される。
投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人一人あたり、１回につき、１ｍｇから１０００ｍｇの範囲で、１日１回から数回経口投与されるか、または成人一人あたり、１回につき、１ｍｇから１００ｍｇの範囲で、１日１回から数回非経口投与（好ましくは、静脈内投与）されるか、または１日１時間から２４時間の範囲で静脈内に持続投与される。
もちろん前記したように、投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、また範囲を越えて必要な場合もある。
本発明化合物を投与する際には、経口投与のための内服用固形剤、内服用液剤および、非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤等として用いられる。
経口投与のための内服用固形剤には、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。カプセル剤には、ハードカプセルおよびソフトカプセルが含まれる。
このような内服用固形剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質はそのままか、または賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。さらにゼラチンのような吸収されうる物質のカプセルも包含される。
経口投与のための内服用液剤は、薬剤的に許容される水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含む。このような液剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質が、一般的に用いられる希釈剤（精製水、エタノールまたはそれらの混液等）に溶解、懸濁または乳化される。さらにこの液剤は、湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤、緩衝剤等を含有していてもよい。
非経口投与のための注射剤としては、溶液、懸濁液、乳濁液および用時溶剤に溶解または懸濁して用いる固形の注射剤を包含する。注射剤は、ひとつまたはそれ以上の活性物質を溶剤に溶解、懸濁または乳化させて用いられる。溶剤として、例えば注射用蒸留水、生理食塩水、植物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノールのようなアルコール類等およびそれらの組み合わせが用いられる。さらにこの注射剤は、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリソルベート８０（登録商標）等）、懸濁化剤、乳化剤、無痛化剤、緩衝剤、保存剤等を含んでいてもよい。これらは最終工程において滅菌するか無菌操作法によって製造される。また無菌の固形剤、例えば凍結乾燥品を製造し、その使用前に無菌化または無菌の注射用蒸留水または他の溶剤に溶解して使用することもできる。
非経口投与のためのその他の製剤としては、ひとつまたはそれ以上の活性物質を含み、常法により処方される外用液剤、軟膏剤、塗布剤、吸入剤、スプレー剤、坐剤および膣内投与のためのペッサリー等が含まれる。
スプレー剤は、一般的に用いられる希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムのような安定剤と等張性を与えるような緩衝剤、例えば塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウムあるいはクエン酸のような等張剤を含有していてもよい。スプレー剤の製造方法は、例えば米国特許第２，８６８，６９１号および同第３，０９５，３５５号に詳しく記載されている。
本発明化合物は、他の薬剤、例えば、ＨＩＶ感染の予防および／または治療剤（特に、ＡＩＤＳの予防および／または治療剤）と組み合わせて用いてもよい。この場合、これらの薬物は、別々にあるいは同時に、薬理学的に許容されうる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、溶解補助剤、希釈剤等と混合して製剤化し、ＨＩＶ感染の予防および／または治療のための医薬組成物として経口的にまたは非経口的に投与することができる。
本発明化合物は、他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤（特に、ＡＩＤＳの予防および／または治療剤）に対して耐性を獲得したＨＩＶ−１に対して感染阻害作用を有する。従って、他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤が効果を示さなくなったＨＩＶ感染者に対しても用いることができる。この場合、本発明化合物を単剤で用いても良いが、感染しているＨＩＶ−１株が耐性を獲得したＨＩＶ感染の予防および／または治療剤またはそれ以外の薬剤と併用して用いても良い。
本発明化合物は、ＨＩＶ感染を阻害しない薬物と組み合わせて、単剤よりもＨＩＶ感染の予防および／または治療効果を増強するものを含む。
本発明化合物と組み合わせて用いられる他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤の例としては、逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、ケモカイン拮抗剤（例えば、ＣＣＲ２拮抗剤、ＣＣＲ３拮抗剤、ＣＣＲ４拮抗剤、ＣＣＲ５拮抗剤、ＣＸＣＲ４拮抗剤等）、フュージョン阻害剤、ＨＩＶ−１の表面抗原に対する抗体、ＨＩＶ−１のワクチン等が挙げられる。
逆転写酵素阻害剤として、具体的には、（１）核酸系逆転写酵素阻害剤のジドブジン（商品名：レトロビル）、ジダノシン（商品名：ヴァイデックス）、ザルシタビン（商品名：ハイビッド）、スタブジン（商品名：ゼリット）、ラミブジン（商品名：エピビル）、アバカビル（商品名：ザイアジェン）、アデフォビル、アデフォビル ジピボキシル、エントリシタビン（商品名：コビラシル）、ＰＭＰＡ（商品名：テノフォヴィル）等、（２）非核酸系逆転写酵素阻害剤のネビラピン（商品名：ビラミューン）、デラビルジン（商品名：レスクリプター）、エファビレンツ（商品名：サスティバ、ストックリン）、カプラヴィリン（ＡＧ１５４９）等が挙げられる。
プロテアーゼ阻害剤として、具体的には、インジナビル（商品名：クリキシバン）、リトナビル（商品名：ノービア）、ネルフィナビル（商品名：ビラセプト）、サキナビル（商品名：インビラーゼ、フォートベース）、アンプリナビル（商品名：エジネラーゼ）、ロピナビル（商品名：カレトラ）、ティプラナビル等が挙げられる。
ケモカイン拮抗剤としては、ケモカインレセプターの内因性のリガンド、またはその誘導体および非ペプチド性低分子化合物、またはケモカインレセプターに対する抗体が含まれる。
ケモカインレセプターの内因性のリガンドとしては、具体的には、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１α、ＳＤＦ−１β、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−４、エオタキシン（Ｅｏｔａｘｉｎ）、ＭＤＣ等が挙げられる。
内因性リガンドの誘導体としては、具体的には、ＡＯＰ−ＲＡＮＴＥＳ、Ｍｅｔ−ＳＤＦ−１α、Ｍｅｔ−ＳＤＦ−１β等が挙げられる。
ケモカインレセプターの抗体としては、具体的には、Ｐｒｏ−１４０等が挙げられる。
ＣＣＲ２拮抗剤としては、具体的には、ＷＯ９９／０７３５１号、ＷＯ９９／４０９１３号、ＷＯ００／４６１９５号、ＷＯ００／４６１９６号、ＷＯ００／４６１９７号、ＷＯ００／４６１９８号、ＷＯ００／４６１９９号、ＷＯ００／６９４３２号、ＷＯ００／６９８１５号またはＢｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１０，１８０３（２０００）に記載された化合物等が挙げられる。
ＣＣＲ３拮抗剤としては、具体的には、ＤＥ１９８３７３８６号、ＷＯ９９／５５３２４号、ＷＯ９９／５５３３０号、ＷＯ００／０４００３号、ＷＯ００／２７８００号、ＷＯ００／２７８３５号、ＷＯ００／２７８４３号、ＷＯ００／２９３７７号、ＷＯ００／３１０３２号、ＷＯ００／３１０３３号、ＷＯ００／３４２７８号、ＷＯ００／３５４４９号、ＷＯ００／３５４５１号、ＷＯ００／３５４５２号、ＷＯ００／３５４５３号、ＷＯ００／３５４５４号、ＷＯ００／３５８７６号、ＷＯ００／３５８７７号、ＷＯ００／４１６８５号、ＷＯ００／５１６０７号、ＷＯ００／５１６０８号、ＷＯ００／５１６０９号、ＷＯ００／５１６１０号、ＷＯ００／５３１７２号、ＷＯ００／５３６００号、ＷＯ００／５８３０５号、ＷＯ００／５９４９７号、ＷＯ００／５９４９８号、ＷＯ００／５９５０２号、ＷＯ００／５９５０３号、ＷＯ００／６２８１４号、ＷＯ００／７３３２７号またはＷＯ０１／０９０８８号に記載された化合物等が挙げられる。
ＣＣＲ５拮抗剤としては、具体的には、ＷＯ９９／１７７７３号、ＷＯ９９／３２１００号、ＷＯ００／０６０８５号、ＷＯ００／０６１４６号、ＷＯ００／１０９６５号、ＷＯ００／０６１５３号、ＷＯ００／２１９１６号、ＷＯ００／３７４５５号、ＥＰ１０１３２７６号、ＷＯ００／３８６８０号、ＷＯ００／３９１２５号、ＷＯ００／４０２３９号、ＷＯ００／４２０４５号、ＷＯ００／５３１７５号、ＷＯ００／４２８５２号、ＷＯ００／６６５５１号、ＷＯ００／６６５５８号、ＷＯ００／６６５５９号、ＷＯ００／６６１４１号、ＷＯ００／６８２０３号、特開２０００−３０９５９８号、ＷＯ００／５１６０７号、ＷＯ００／５１６０８号、ＷＯ００／５１６０９号、ＷＯ００／５１６１０号、ＷＯ００／５６７２９号、ＷＯ００／５９４９７号、ＷＯ００／５９４９８号、ＷＯ００／５９５０２号、ＷＯ００／５９５０３号、ＷＯ００／７６９３３号、ＷＯ９８／２５６０５号、ＷＯ９９／０４７９４号、ＷＯ９９／３８５１４号またはＢｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１０，１８０３（２０００）に記載された化合物等が挙げられる。
ＣＸＣＲ４拮抗剤としては、具体的には、ＡＭＤ−３１００、Ｔ−２２、ＫＲＨ−１１２０またはＷＯ００／６６１１２号に記載された化合物等が挙げられる。
フュージョン阻害剤としては、具体的には、Ｔ−２０（ｐｅｎｔａｆｕｓｉｄｅ）、Ｔ−１２４９等が挙げられる。
以上の併用薬剤は例であって、本発明はこれらに限定されるものではない。
代表的な逆転写酵素阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤の通常の臨床投与量は、例えば、以下に示すとおりであるが、本発明はこれらに限定されるものではない。
ジドブジン：１００ｍｇカプセル、１回２００ｍｇ、１日３回；
３００ｍｇ錠剤、１回３００ｍｇ、１日２回；
ジダノシン：２５−２００ｍｇ錠剤 １回１２５−２００ｍｇ、１日２回；
ザルシタビン：０．３７５−０．７５ｍｇ錠剤、１回０．７５ｍｇ、１日３回；
スタブジン：１５−４０ｍｇカプセル、１回３０−４０ｍｇ、１日２回；
ラミブジン：１５０ｍｇ錠剤、１回１５０ｍｇ、１日２回；
アバカビル：３００ｍｇ錠剤、１回３００ｍｇ、１日２回；
ネビラピン：２００ｍｇ錠剤、１回２００ｍｇ、１４日間１日１回、その後１日２回；
デラビルジン：１００ｍｇ錠剤、１回４００ｍｇ、１日３回；
エファビレンツ：５０−２００ｍｇカプセル、１回６００ｍｇ、１日１回；
インジナビル：２００−４００カプセル、１回８００ｍｇ、１日３回；
リトナビル：１００ｍｇカプセル、１回６００ｍｇ、１日２回；
ネルフィナビル：２５０ｍｇ錠剤、１回７５０ｍｇ、１日３回；
サキナビル：２００ｍｇカプセル、１回１，２００ｍｇ、１日３回；
アンプレナビル：５０−１５０ｍｇ錠剤、１回１，２００ｍｇ、１日２回。
【図面の簡単な説明】
図１は、実施例１で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２は、実施例１で得られたＡ結晶の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図３は、実施例１で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図４は、実施例１で得られたＡ結晶の単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データ（１）である。
図５は、実施例１で得られたＡ結晶の単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データ（２）である。
図６は、実施例２で得られたＢ固体の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図７は、実施例２で得られたＢ固体の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図８は、実施例３で得られたＣ固体の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図９は、実施例３で得られたＣ固体の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１０は、実施例４で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１１は、実施例４で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１２は、比較例１で得られた非結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１３は、比較例１で得られた非結晶の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図１４は、比較例１で得られた非結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１５は、実施例５（１）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１６は、実施例５（１）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１７は、実施例５（２）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１８は、実施例５（２）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１９は、実施例５（３）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２０は、実施例５（３）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２１は、実施例５（４）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２２は、実施例５（４）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２３は、実施例５（５）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２４は、実施例５（５）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２５は、実施例５（６）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２６は、実施例５（６）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２７は、実施例５（７）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２８は、実施例５（７）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２９は、実施例５（８）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図３０は、実施例５（８）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図３１は、実施例５（９）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図３２は、実施例５（９）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
【発明を実施するための最良の形態】
以下、参考例および実施例によって本発明を詳述するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
参考例１
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−ベンジル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・メタンスルホン酸塩
窒素ガス雰囲気下、１−ベンジル−４−ピペリドン（７９８ｇ）のメタノール（４Ｌ）溶液に、ｎ−ブチルアミン（３１０ｇ）、（２Ｒ，３Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−シクロヘキシル−３−ヒドロキシプロピオン酸（１２００ｇ）、２−モルホリノエチルイソシアナイド（６００ｇ）を順次加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、濃塩酸（２Ｌ）を加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、メタノール（２Ｌ）、水（１２Ｌ）を加え、２５％水酸化ナトリウム水溶液（３．０３Ｌ）を加えた。反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出した。抽出液に、氷酢酸（１．１４Ｌ）を加え、２時間還流した。反応混合物を室温まで冷却し、水、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（９．５Ｌ）、３３％食塩水（５．４Ｌ）で洗浄し、濃縮した。得られた残渣に、酢酸エチル（１０．４Ｌ）を加え、６０℃乃至６５℃で３０分間撹拌し、６０℃乃至７０℃でメタンスルホン酸（３８８ｇ）を加えた。反応混合物を同温度で１０分間撹拌し、結晶を析出させた。反応混合物を４０℃乃至４５℃、０℃乃至５℃に冷却し、１時間撹拌した。析出した結晶をろ過し、酢酸エチルで洗浄後、乾燥し、以下の物性値を有する標題化合物（１８０２ｇ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ ０．４２（クロロホルム：メタノール＝１０：１）；
ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ７．５１−７．２２（ｍ，５Ｈ），４．３６（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．００（ｍ，１Ｈ），３．７６（ｍ，１Ｈ），３．５９−３．３８（ｍ，３Ｈ），３．３０−３．０３（ｍ，２Ｈ），２．７０（ｓ，３Ｈ），２．５４−１．８３（ｍ，６Ｈ），１．８２−１．５６（ｍ，５Ｈ），１．５３−１．０８（ｍ，６Ｈ），１．０６−０．７７（ｍ，５Ｈ）。
参考例２
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・メタンスルホン酸塩
窒素ガス雰囲気下、参考例１で製造した化合物（１７９２ｇ）のジメチルホルムアミド溶液（３．３Ｌ）に１０％パラジウム／炭素（１８ｇ）を加えた。反応混合物を水素ガスで置換した。反応混合物を水素ガス圧０．５ＭＰａ下、８０℃で１時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、反広混合物をろ過し、標題化合物のジメチルホルムアミド溶液を得た。
参考例３
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン
窒素ガス雰囲気下、参考例２で製造した化合物のジメチルホルムアミド溶液（８．４Ｌ）に、トリエチルアミン（３４０ｇ）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１４８６ｇ）、４−（４−ホルミルフェニルオキシ）安息香酸（９６９ｇ）を加えた。反応混合物を室温で８時間撹拌した。反応混合物を６５℃乃至７０℃まで加熱し、７０℃に加熱した水（３．３Ｌ）を加え、混合物を６５℃乃至７０℃で１０分間撹拌し、結晶を析出させた。さらに反応混合物に７０℃に加熱した水（３．３Ｌ）を加え、６５℃乃至７０℃で１０分間撹拌した。反応混合物を１５℃乃至３０℃まで冷却し、３０分間撹拌した。析出した結晶を濾取し、６０％メタノール水溶液で洗浄することにより、以下の物性値を有する、標題化合物（２３５４ｇ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ ０．４８（クロロホルム：メタノール：酢酸＝２０：４：１）；
ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）：δ７．９２（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｍ，１Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），５．０７（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），３．９５（ｓ，１Ｈ），３．５１（ｓ，２Ｈ），３．４０−３．０９（ｍ，３Ｈ），２．８３−２．６２（ｍ，４Ｈ），２．１０−１．８４（ｍ，４Ｈ），１．８０−１．４４（ｍ，７Ｈ），１．４０−１．２２（ｍ，３Ｈ），１．２０−１．０４（ｍ，３Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），０．８５−０．７５（ｍ，２Ｈ）。
【実施例１】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（Ａ結晶）
０．０３２Ｍ塩酸（５０．８Ｌ）のメタノール（１２６Ｌ）溶液に、２０℃乃至５０℃で、参考例３で製造した化合物（湿重量３０．３ｋｇ、乾燥時の換算重量２０ｋｇ、１０．３ｋｇのメタノール：水＝６：４の混合溶液を含有）を加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で３０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、７０％メタノール水溶液で洗浄した。濾液を５０℃乃至５５℃で撹拌した。反応混合溶液を室温まで冷却し、１０分間撹拌した。さらに反応混合物を０℃乃至５℃まで冷却し、結晶を析出させた。このようにして得られた懸濁液にメタノール（４１Ｌ）を加え、０℃乃至５℃で１時間撹拌し、５℃に冷却した水（５８Ｌ）を加え、同温度で３０分間撹拌した。このようにして析出した結晶をろ過し、６０％メタノール水溶液で洗浄し、乾燥し、以下の物性値を有する本発明化合物のＡ結晶（１８．５ｋｇ）を得た。また、該結晶の平均粒子径は、１５．８μｍ（レーザー回折式粒度分布測定装置、ＳＡＬＤ−２１００（島津製作所）で測定）であり、融点は、約２３５℃（日本薬局方記載のキャピラリー法で測定）であった。
このようにして得られた本発明化合物のＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１に、示差走査熱量測定データを図２に、赤外線吸収スペクトルデータを図３に、単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データを図４、５にそれぞれ示した。
（１）粉末Ｘ線回折スペクトルデータ
［測定条件］
装置：ＢＲＵＫＥＲ ＤＩＳＣＯＶＥＲ ｗｉｔｈ ＧＡＤＤＳ（Ｃ２）
ターゲット：Ｃｕ
フィルター：なし
電圧：４０ｋＶ
電流：４０ｍＡ
露光時間：１８０ｓｅｃ
［結果］
結果を表２に示す。
（２）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：２．８ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、２４４℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（３）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（Ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ｔｏｔａｌ ｒｅｆｌｅｃｔａｎｃｅ法（以下ＡＴＲ法と略記する）：２９２４，２５０４，１６８２，１６３２，１５９７，１５０３，１４２６，１３７７，１２３５，１１６３，１０９８，９６１，９２８，８７６，８５５，７７０，７２７，６８１ｃｍ−１。
（４）単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データ
［測定条件］
装置：リガク ＲＡＸＩＳ−ＲＡＰＩＤイメージングプレート
ターゲット：ＣｕＫα（λ＝１．５４１７８Å）
フィルター：ｇｒａｐｈｉｔｅ ｍｏｎｏｃｈｒｏｍａｔｅｄ
電圧：６０ｋＶ
電流：９０ｍＡ
スキャンスピード：１°／ｍｉｎ
［結果］
結晶学的データは以下のものであった。
格子定数：ａ＝１１．８１０５（４）Å
ｂ＝７．８７３０（２）Å
ｃ＝１８．２３５１（７）Å
空間群：Ｐ２１（＃４）
Ｒ因子：０．０４２
【実施例２】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩のメタノールおよび水からなる溶媒和物の固体（Ｂ固体）
０．３５Ｍ塩酸（１７０ｍＬ）のメタノール（２５６ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：２８．４ｇ）を加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で溶解した。反応混合物を２０℃乃至３０℃まで冷却し、３０分間撹拌した。さらに、０℃乃至５℃まで冷却し、１時間撹拌した。析出した固体をろ過し、乾燥し、以下の物性値を有するＢ固体（２７．１ｇ）を得た。
このＢ固体が、メタノールおよび水が溶媒和したものであることはＮＭＲによって確認した。
このようにして得られたＢ固体の示差走査熱量測定データを図６に、赤外線吸収スペクトルデータを図７にそれぞれ示した。
（１）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：３．４ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、１６４，２５２℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（２）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（ＡＴＲ法）：３２５６，２９３２，１６６１，１５９７，１５０３，１４１８，１２４０，１１６７，１１１３，９２８，８７８，８６２，８４９，７７５，６８１ｃｍ−１。
【実施例３】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩のエタノールおよび／または水からなる溶媒和物の固体（Ｃ固体）
６Ｍ塩酸（１．０５ｍＬ）のエタノール溶液（１７．３ｍＬ）に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：３．４６ｇ）を加え、加熱して溶解した。反応混合物に５０℃乃至５３℃に加熱した水（３３．３ｍＬ）を加え、２１時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、３０分間撹拌した。さらに、０℃乃至５℃まで冷却し、析出した固体をろ過し、乾燥し、以下の物性値を有するＣ固体（２．７４ｇ）を得た。
このＣ固体が、エタノールおよび／または水が溶媒和したものであることはＮＭＲによって確認した。
このようにして得られたＣ固体の示差走査熱量測定データを図８に、赤外線吸収スペクトルデータを図９にそれぞれ示した。
（１）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：２．０５ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、１５８，２２９℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（２）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（ＡＴＲ法）：２９３４，１６６７，１６０１，１５０３，１３８５，１２５０，１１６９，１０９６，１０２４，９３０，８５１，７７５ｃｍ−１。
【実施例４】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（Ａ結晶）
酢酸エチル（４４０ｍＬ）に、実施例２で製造した固体（Ｂ固体）（２９．４ｇ）を加えた。混合物を６０℃乃至６５℃で１時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、３０分間撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、実施例１と同様の物性値を有する本発明化合物のＡ結晶（２８．５ｇ）を得た。
実施例４で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１０に、赤外線吸収スペクトルデータを図１１にそれぞれ示した。
比較例１
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の非結晶
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩を、ＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載された製造方法に従って、クロロホルム：メタノール＝５：１でカラム精製することにより製造した。
このようにして得られた比較化合物は、非結晶であることがわかった。この非結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１２に、示差走査熱量測定データを図１３に、赤外線吸収スペクトルデータを図１４にそれぞれ示した。
（１）粉末Ｘ線回折スペクトルデータ
［測定条件］
装置：ＢＲＵＫＥＲ ＤＩＳＣＯＶＥＲ ｗｉｔｈ ＧＡＤＤＳ（Ｃ２）
ターゲット：Ｃｕ
フィルター：なし
電圧：４０ｋＶ
電流：４０ｍＡ
露光時間：１８０ｓｅｃ
［結果］
粉末Ｘ線回折スペクトルでは、ピークは認められなかった。
（２）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：４．０ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、６９，２４８℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（３）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（ＡＴＲ法）：２９２６，１６５９，１５９７，１５０１，１４１８，１２３８，１１５９，１０９８，９２８，８７６，８４９，７７４ｃｍ−１。
【実施例５（１）〜５（９）】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（Ａ結晶）
以下に示した方法によって、本発明化合物のＡ結晶をそれぞれ得た。
【実施例５（１）】
６Ｍ塩酸（０．１７３ｍＬ）のメタノール（４．５ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：０．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、水（３ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（１）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１５に、赤外線吸収スペクトルデータを図１６にそれぞれ示した。
【実施例５（２）】
６Ｍ塩酸（０．１７３ｍＬ）のメタノール（５．２５ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：０．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、水（２．２５ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（２）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１７に、赤外線吸収スペクトルデータを図１８にそれぞれ示した。
【実施例５（３）】
６Ｍ塩酸（０．１７３ｍＬ）のメタノール（６ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：０．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、水（１．５ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（３）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１９に、赤外線吸収スペクトルデータを図２０にそれぞれ示した。
【実施例５（４）】
６Ｍ塩酸（０．３４６ｍＬ）と水（２．３５４ｍＬ）のメタノール（６．３ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：１ｇ）を加えた。反応混合物を５１℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（１．８ｍＬ）を加え撹拌した。さらに、水（２．７ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（４）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２１に、赤外線吸収スペクトルデータを図２２にそれぞれ示した。
【実施例５（５）】
６Ｍ塩酸（０．３４６ｍＬ）と水（４．４５４ｍＬ）のメタノール（７．２ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：１ｇ）を加えた。反応混合物を５７℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（７．２ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（５）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２３に、赤外線吸収スペクトルデータを図２４にそれぞれ示した。
【実施例５（６）】
濃塩酸（１．２９ｋｇ）と水（１５．４７ｋｇ）のメタノール（３０．８５ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：６．０７ｋｇ）を加えた。反応混合物を５２℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（９．７ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（１８ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（６）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２５に、赤外線吸収スペクトルデータを図２６にそれぞれ示した。
【実施例５（７）】
濃塩酸（１９．５ｋｇ）と水（２３７ｋｇ）のメタノール（４７３ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：９１．５ｋｇ）を加えた。反応混合物を５１℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（１５０ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（２７０ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（７）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２７に、赤外線吸収スペクトルデータを図２８にそれぞれ示した。
【実施例５（８）】
濃塩酸（６８．６ｋｇ）と水（８３５ｋｇ）のメタノール（１６４５ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：３２２ｋｇ）を加えた。反応混合物を５１℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（５２０ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（９３０ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（８）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２９に、赤外線吸収スペクトルデータを図３０にそれぞれ示した。
【実施例５（９）】
濃塩酸（３３．４ｋｇ）と水（４０２ｋｇ）のメタノール（８１２ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：１５７ｋｇ）を加えた。反応混合物を５２℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（２５０ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（４６０ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（９）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図３１に、赤外線吸収スペクトルデータを図３２にそれぞれ示した。
製剤例１
以下の各成分を常法により混合した後打錠して、一錠中に５０ｍｇの活性成分を含有する錠剤１０万錠を得た。
・（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロ
キシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニル
オキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデ
カン・塩酸塩の結晶 ・・・５．０ｋｇ
・カルボキシメチルセルロースカルシウム（崩壊剤） ・・・０．２ｋｇ
・ステアリン酸マグネシウム（潤滑剤） ・・・０．１ｋｇ
・微結晶セルロース ・・・４．７ｋｇ
製剤例２
以下の各成分を常法により混合した後、溶液を常法により滅菌し、５ｍｌずつアンプルに充填し、常法により凍結乾燥し、１アンプル中２０ｍｇの活性成分を含有するアンプル１０万本を得た。
・（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロ
キシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニル
オキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデ
カン・塩酸塩の結晶 ・・・２．０ｋｇ
・マンニトール ・・・２０．０ｋｇ
・蒸留水 ・・・５００Ｌ
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【技術分野】
本発明は、医薬品として有用で、かつ新規な（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩（以下、化合物（Ｉ）と略記する場合がある。）の結晶、その製造方法、およびその結晶を有効成分として含有する薬剤に関する。
【背景技術】
ケモカインは、内因性の白血球走化性、活性化作用を有し、ヘパリン結合性の強い塩基性蛋白質として知られている。現在では、ケモカインは、炎症、免疫反応時の特異的白血球の浸潤を制御するのみならず、発生、生理的条件下でのリンパ球のホーミング、血球前駆細胞、体細胞の移動にも関わると考えられている。
血球細胞は種々のサイトカインによって、その分化、増殖、細胞死が制御されている。生体内において炎症は局所的にみられ、リンパ球の分化、成熟等はある特定の部位で行われている。すなわち、必要とされる種々の細胞が、ある特定の部位に移動し、集積して、一連の炎症・免疫反応が起こる。従って、細胞の分化、増殖、死に加えて、細胞の移動も免疫系にとって必要不可欠な現象である。
生体内での血球細胞の移動は、まず、発生過程において、ＡＧＭ領域に始まる造血が胎児肝を経て、骨髄での永久造血へと移行することから始まる。更に、胎児肝・骨髄から胸腺へと、Ｔ細胞・胸腺樹状細胞の前駆細胞が移動し、胸腺環境下で細胞分化する。クローン選択を受けたＴ細胞は、二次リンパ組織へ移動し、末梢における免疫反応に関与する。抗原を捕らえて、活性化・分化した皮膚のランゲルハンス細胞は、局所リンパ節のＴ細胞領域に移動し、樹状突起細胞としてナイーブＴ細胞を活性化する。メモリーＴ細胞はリンパ管・血管を経て、再びリンパ節にホーミングする。また、Ｂ細胞、腸管上皮内Ｔ細胞、γδＴ細胞、ＮＫＴ細胞、樹状細胞は、骨髄より胸腺を経ずに移動・分化し、免疫反応に関与する。
ケモカインは、このような種々の細胞の移動に深く関与している。例えば、ＭＩＰ３β、ＳＬＣとその受容体であるＣＣＲ７は、抗原を捕らえた成熟樹状細胞が、ナイーブＴ細胞およびメモリーＴ細胞と効率良く出会うために、これらの細胞の局所リンパ組織への移動・ホーミングにおいて重要な働きをしている。ＳＬＣの発現に欠損があるＰＬＴマウスの二次リンパ節には、抗原特異的な免疫反応を司るために必要なＴ細胞、並びに樹状細胞がほとんど観察されない（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８９（３），４５１（１９９９））。
ＭＤＣ、ＴＡＲＣとその受容体であるＣＣＲ４は、Ｔｈ２細胞の関わる免疫・炎症反応において、Ｔｈ２細胞の局所への移動に重要な働きをしている。ラット劇症肝炎モデル（Ｐ．ａｃｎｅｓ＋ＬＰＳ）において、抗ＴＡＲＣ抗体は、血中ＡＬＴ量の上昇、および肝臓中ＴＮＦα、ＦａｓＬの発現量の上昇を抑制し、更にラット致死率を改善した（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０２，１９３３（１９９８））。また、マウスＯＶＡ誘発気道過敏性モデルにおいて、抗ＭＤＣ抗体は肺間質に集積する好酸球数を減らし、気道過敏性を抑制した（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１６３，４０３（１９９９））。
ＭＣＰ−１とその受容体であるＣＣＲ２は、マクロファージの炎症部位への浸潤に関与している。抗ＭＣＰ−１抗体は、ラット抗Ｔｈｙ１．１抗体腎炎モデルにおいて、糸球体への単球・マクロファージの浸潤に対する抑制効果を示した（Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．，５１，７７０（１９９７））。
このように、ケモカイン受容体は、種々の特異的な細胞において、ある特定した時期に発現し、そのエフェクター細胞がケモカインの産生される個所に集積するというメカニズムを通じて、炎症・免疫反応の制御に大きく関与している。
ヒト免疫不全ウィルス（以下、ＨＩＶと略する。）感染によって引き起こされる後天性免疫不全症候群（エイズ（ＡＩＤＳ）と呼ばれている。）は、近年最もその治療法を切望されている疾患の一つである。主要な標的細胞であるＣＤ４陽性細胞にＨＩＶの感染が一度成立すると、ＨＩＶは患者の体内で増殖をくり返し、やがては免疫機能をつかさどるＴ細胞を壊滅的に破壊する。この過程で徐々に免疫機能が低下し、発熱・下痢・リンパ節の腫脹等の様々な免疫不全状態を示すようになり、カリニ肺炎等の種々の日和見感染症を併発し易くなる。このような状態がエイズの発症であり、カボジ肉腫等の悪性腫瘍を誘発し、重篤化することはよく知られている。
現在エイズに対する各種の予防、治療方法としては、例えば、（１）逆転写酵素阻害剤やプロテアーゼ阻害剤の投与によるＨＩＶの増殖抑制、（２）免疫賦活作用のある薬物の投与による日和見感染症の予防、緩和等が試みられている。
ＨＩＶは、免疫系の中枢を司るヘルパーＴ細胞に主に感染する。その際、Ｔ細胞の膜上に発現している膜蛋白ＣＤ４を利用することは、１９８５年より知られている（Ｃｅｌｌ，５２，６３１（１９８５））。ＣＤ４分子は４３３個のアミノ酸残基からなり、成熟ヘルパーＴ細胞以外にマクロファージ、一部のＢ細胞、血管内皮細胞、皮膚組織のランゲルハンス細胞、リンパ組織にある樹状細胞、中枢神経系のグリア細胞等で発現が見られる。しかし、ＣＤ４分子のみではＨＩＶの感染が成立しないことが明らかになるにつれて、ＨＩＶが細胞に感染する際にかかわるＣＤ４分子以外の因子の存在の可能性が示唆されるようになった。
１９９６年になって、ＣＤ４分子以外のＨＩＶ感染にかかわる因子としてＦｕｓｉｎという細胞膜蛋白が同定された（Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７２，８７２（１９９６））。このＦｕｓｉｎ分子は、ストローマ細胞由来因子−１（Ｓｔｒｏｍａｌ Ｄｅｒｉｖｅｄ Ｆａｃｔｏｒ−１：ＳＤＦ−１と略する。）の受容体（すなわち、ＣＸＣＲ４である。）であることが証明された。更に、インビトロでＳＤＦ−１が、Ｔ細胞指向性（Ｘ４）ＨＩＶの感染を特異的に抑制することも証明された（Ｎａｔｕｒｅ，３８２，８２９（１９９６）、Ｎａｔｕｒｅ，３８２，８３３（１９９６））。すなわち、ＳＤＦ−１がＨＩＶより先にＣＸＣＲ４に結合することによって、ＨＩＶが細胞に感染するための足掛かりを奪い、ＨＩＶの感染が阻害されたと考えられる。
また同じ頃、別のケモカイン受容体であり、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１βの受容体であるＣＣＲ５も、マクロファージ指向性（Ｒ５）ＨＩＶが感染する際に利用されることが発見された（Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７２，１９５５（１９９６））。
従って、ＨＩＶとＣＸＣＲ４やＣＣＲ５を奪い合うことのできるもの、あるいはＨＩＶウイルスに結合し、該ウイルスをＣＸＣＲ４やＣＣＲ５に結合できない状態にさせるものは、ＨＩＶ感染阻害剤となり得るはずである。また当初、ＨＩＶ感染阻害剤として発見された低分子化合物が、実はＣＸＣＲ４のアンタゴニストであることが示された例もある（Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，４，７２（１９９８））。
以上から、ケモカイン／ケモカイン受容体は、炎症、免疫疾患またはＨＩＶ感染に深く関与していると考えられる。例えば、各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患（アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症等）、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、乾癬、鼻炎、結膜炎、虚血再灌流傷害、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、自己免疫疾患、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、癌転移予防、後天性免疫不全症候群等に関与していると考えられる。
既に、トリアザスピロ［５．５］ウンデカン誘導体がケモカイン／ケモカイン受容体拮抗作用を有し、ケモカインが関与している疾患、例えば各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患（アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症等）、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、乾癬、鼻炎、結膜炎、虚血再灌流傷害、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、自己免疫疾患、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、癌転移予防、後天性免疫不全症候群等の治療および／または予防に有用であることが開示されている（ＷＯ０１／４０２２７号参照。）。
しかしながら、該明細書には、化合物（Ｉ）に関する記載は全くされておらず、化合物（Ｉ）は新規な化合物である。
【発明の開示】
化合物（Ｉ）は、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載されている。しかしながら、本発明者らの研究によれば、この明細書に記載された方法に従って化合物（Ｉ）を製造したところ、結晶ではなく、非結晶であることがわかった。
一般に、非結晶である物質は、医薬品の原薬として以下の点の問題点が予想される。すなわち、医薬品が実際に製造され、流通するときに一定の品質を保つことができない可能性が考えられる。
医薬品は、いかに薬効に優れ、安全性が確認された物質であろうとも、一定の品質を保つことができないのであれば、むしろ有害な事態を招きかねず、そのような化合物は医薬品としての存在意義が無い。このように医薬品において品質の確保は極めて重要な課題の１つである。この品質を確保するためには、常に一定の品質の原薬を安定供給できることが必要条件である。非結晶ではなく、安定な結晶を原薬として供給することはそのための非常に効果的な方法である。
つまり、ＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載した方法に従って製造される化合物（Ｉ）は、非結晶であるため、常に一定の品質の化合物を安定に大量供給することが非常に困難であり、この方法によって得られる原薬は、医薬品として実用に供する上で重大な障害をもつものであると考えられる。そのため、化合物（Ｉ）について、常に一定の品質を有し、かつ医薬品原薬として大量供給することのできる、単一でかつ安定な結晶を提供することが望まれている。
そこで、本発明者らは、化合物（Ｉ）の結晶を得るべく、種々検討を行った。すなわち、塩酸（すなわち塩化水素水溶液）とメタノールの混合溶媒に、化合物（Ｉ）のフリー体、すなわち、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンを溶解し、５０℃乃至５５℃で撹拌し、室温まで冷却し、さらに０℃乃至５℃まで冷却し、析出した固体をろ取した。しかしながら、この固体を分析したところ、意外にも溶媒の成分を含む固体であることがわかった（後記のＢ固体）。このＢ固体を常温でのＸ線結晶回折スペクトルにより解析したが、常に同じＸ線結晶回折スペクトルを与えないため、明確な構造解析を行うことができなかった。しかし、低温でのＸ線結晶回折スペクトルの解析結果から、Ｂ固体は、メタノールおよび水の溶媒和物であることが推察された。このように、当業者が通常行う結晶化操作では、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得ることが困難であることがわかった。従って、化合物（Ｉ）は、非常に溶媒和しやすい化合物であることが予測された。このような溶媒和物は、医薬品原薬として用いるには、安定性や毒性の面で問題となる場合がある。例えば水和物では、吸湿性や水分子の放出等によって質量が変化することもあり、またメタノールの溶媒和物は、メタノールが毒性を有するため、医薬品原薬として用いることはできない。
そこで、本発明者らは、このような問題点についても解決を試み、鋭意検討した結果、化合物（Ｉ）の、無溶媒和物の、純粋で単一な結晶を得ることに成功し、またその結晶化方法を確立することにより、本発明を完成した。
本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶（以下、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶と略記する場合がある。）は、ＷＯ０２／０７４７７０号には記載されていない化合物である。すなわち、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法に従って製造した化合物とは、Ｘ線結晶回折スペクトル、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、赤外線吸収スペクトルのデータが明らかに異なっており、新規な化合物である。
また、本発明者らは、化合物（Ｉ）の溶媒和物、または化合物（Ｉ）の非結晶から、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得ることにも成功した。
すなわち、本発明は、
１．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の結晶、
２．無溶媒和物である前記１記載の結晶、
３．融点が、約２３０℃乃至約２４０℃である前記１記載の結晶、
４．融点が、約２３２℃乃至約２３５℃である前記１記載の結晶、
５．粉末Ｘ線回折スペクトルが、図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルである前記１記載の結晶、
６．粉末Ｘ線回折スペクトルにおける回折角２θが、５．１５、８．０６、１０．２６、１１．０１、１３．７２、１５．４６、１７．３６、１８．０３、１８．５８、１９．００、１９．５１、２０．７１、２１．７３、２２．５８、２３．８０、２４．９６、２７．０７（度）である前記５記載の結晶、
７．赤外吸収スペクトルが、図３に示される赤外吸収スペクトルである前記１記載の結晶、
８．赤外吸収スペクトルにおいて、２９２４、２５０４、１６８２、１６３２、１５９７、１５０３、１４２６、１３７７、１２３５、１１６３、１０９８、９６１、９２８、８７６、８５５、７７０、７２７、６８１ｃｍ−１に吸収を有する前記７記載の結晶、
９．平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至約２００μｍである前記１記載の結晶、
１０．Ｐ２１空間群の結晶である前記２記載の結晶、
１１．格子定数が、ａ＝１１．８１０５オングストローム±７％、ｂ＝７．８７３０オングストローム±７％、ｃ＝１８．２３５１オングストローム±７％を示す前記１０記載の結晶、
１２．低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒を実質的に含まないか、または残留量として、５０００ｐｐｍ以下である前記２記載の結晶、
１３．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の粗精製物を溶解または懸濁させた、水を含有していてもよい低級アルコール系溶媒、または水を含有していてもよい水と混和するエーテル系溶媒から結晶化させることを特徴とする（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法、
１４．低級アルコール系溶媒が、Ｃ１〜４アルキルアルコール、または酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルである前記１３記載の製造方法、
１５．低級アルコール系溶媒が、メタノールまたはエタノールである前記１４載の製造方法、
１６．低級アルコール系溶媒が、酢酸エチルである前記１４記載の製造方法、
１７．水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである前記１３記載の製造方法、
１８．水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：５０乃至７：３である前記１３記載の製造方法、
１９．水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：３５乃至５：５である前記１８記載の製造方法、
２０．結晶化の温度が、約−１０℃乃至約４０℃である前記１３記載の製造方法、
２１．結晶化の時間が、約２０分乃至約５時間である前記１３記載の製造方法、
２２．前記１３乃至２１のいずれかの項に記載の製造法により得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶、
２３．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法、
２４．Ｃ１〜４アルキルアルコールが、メタノールまたはエタノールである前記２３記載の製造方法、
２５．水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである前記２３記載の製造方法、
２６．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程、ついでＣ１〜４アルキルアルコールまたは水と混和するエーテル系溶媒を添加する工程、ついで所望によって水を添加する工程を含むことを特徴とする、前記２３記載の製造方法、
２７．（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の溶媒和物または（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の非結晶を、酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルに溶解または懸濁する工程、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程および約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法、
２８．前記２０乃至２４のいずれかの項に記載の方法によって得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶、
２９．平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至２００μｍである前記２８記載の結晶、
３０．前記１、２２または２８記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物、
３１．ケモカイン／ケモカイン受容体の作用の制御剤である前記３０記載の組成物、
３２．ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の治療および／または予防剤である前記３１記載の組成物、
３３．前記１、２２または２８記載の結晶の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物におけるケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防または治療方法、および
３４．ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防および／または治療剤を製造するための前記１、２８または２８記載の結晶の使用等に関する。
化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶、すなわち（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶は、以下の粉末Ｘ線回折スペクトルデータ、赤外吸収スペクトルデータ、示差走査熱量測定データ等によって特徴づけられる。
Ｃｕ−Ｋα線を使用して得られる粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ）、半値幅および相対強度が表１に示される（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（以下Ａ結晶と略記する場合がある。）。
赤外吸収スペクトルにおいて、２９２４、２５０４、１６８２、１６３２、１５９７、１５０３、１４２６、１３７７、１２３５、１１６３、１０９８、９６１、９２８、８７６、８５５、７７０、７２７、６８１ｃｍ−１に吸収を有する（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
示差走査熱量測定において、２４４℃付近に吸熱ピークを有する（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであるが、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
例えば、粉末Ｘ線回折スペクトルのデータの性質上、結晶の同一性の認定においては、回折角（２θ）や半値幅や全体的なパターンが重要であり、相対強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変わりうる。
また、示差走査熱量測定データにおいても、結晶の同一性の認定においては、全体的なパターンが重要であり、測定条件によって多少変わりうる。
さらに、赤外線吸収スペクトルにおいても、結晶の同一性の認定においては、全体的なパターンが重要であり、測定条件によって多少変わりうる。
本明細書中、化合物（Ｉ）にメタノールおよび水が溶媒和した固体、すなわち後記のＢ固体は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであり、その製造方法は限定されない。すなわち、後記した実施例に記載するＢ固体の示差走査熱量測定データおよび／または赤外線吸収スペクトルデータを示す固体であれば、如何なる製法によって製造される固体であっても、Ｂ固体に包含される。ただし、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
本明細書中、化合物（Ｉ）にエタノールおよび／または水が溶媒和した固体、すなわち後記のＣ固体は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであり、その製造方法は限定されない。すなわち、後記した実施例に記載するＣ固体の示差走査熱量測定データおよび／または赤外線吸収スペクトルデータを示す固体であれば、如何なる製法によって製造された固体であっても、Ｃ固体として包含される。ただし、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
本明細書中、化合物（Ｉ）の非結晶は、本明細書中の物理化学的性質によって特定されるものであり、その製造方法はＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載した方法に限定されない。すなわち、後記した実施例に記載する化合物（Ｉ）の非結晶の示差走査熱量測定データおよび／または赤外線吸収スペクトルデータを示す非結晶であれば、如何なる製法によって製造された非結晶であっても、化合物（Ｉ）の非結晶として包含される。ただし、各スペクトルのデータの性質上多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
本明細書中、化合物（Ｉ）の粗精製物とは、化合物（Ｉ）を成分として含み、かつ化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶が示す本明細書中の物理化学的性質を示さないものを意味する。
本明細書中、化合物（Ｉ）の結晶は、化合物（Ｉ）の結晶であればこれをすべて包含し、溶媒和の有無には左右されない。すなわち、化合物（Ｉ）に溶媒が溶媒和している結晶であってもよく、また、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であってもよい。ここで、化合物（Ｉ）の結晶として好ましくは、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶である。化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶としては、医薬品の原薬として使用可能な平均粒子径の結晶が好ましい。該結晶の平均粒子径として具体的には、例えば約０．０５μｍ乃至約２００μｍが好ましく、約１μｍ乃至約５０μｍがより好ましく、約５μｍ乃至約３０μｍが特に好ましい。とりわけ約１０μｍ乃至約２０μｍが好ましい。
本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とは、実質的に溶媒和していない結晶を意味する。実質的に溶媒和していない結晶とは、その結晶格子中に溶媒の成分を含まない結晶を意味し、結晶格子外に溶媒の成分が含まれるものも包含する。すなわち、該化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶には、例えば、結晶格子外に溶媒の成分を含む結晶等も含まれる。
さらに本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶には、許容される範囲内の非結晶、または許容される範囲内の溶媒和物の固体（例えば、前記したＢ固体、Ｃ固体またはそれら以外の溶媒和した固体等）が混在していてもよい。
上記したように、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶には、結晶格子外に溶媒の成分が含まれるもの、および／または許容される範囲内の溶媒和物の固体が混在しているものが含まれるが、この場合の溶媒成分の量（残留量または溶媒残留量と呼ばれることがある）は、溶媒によって異なるが、医薬品原薬として許容される範囲内の溶媒成分の量であることが好ましい。例えば、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒等は、実質的に含まないか、または残留量として約５０００ｐｐｍ以下であることが好ましい。より具体的には、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶における溶媒残留量は、例えばメタノールであれば約０ｐｐｍ乃至約３０００ｐｐｍ、好ましくは約０ｐｐｍ乃至約２０００ｐｐｍ、より好ましくは約０ｐｐｍ乃至約１５００ｐｐｍの範囲内にあることが好ましく、例えば酢酸エチルであれば約０ｐｐｍ乃至約５０００ｐｐｍの範囲内にあることが好ましい。また水分含量は約１％以下であることが好ましい。
化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、Ｐ２１空間群の結晶であり、その格子定数は、ａ＝１１．８１０５オングストローム（Å）、ｂ＝７．８７３０オングストローム（Å）、ｃ＝１８．２３５１オングストローム（Å）である。ここで、ａ、ｂ、ｃで表わされる格子定数は、例えば温度等の影響によって増減するため、厳密に解されるべきではない。格子定数の変化は、ａ、ｂ、ｃそれぞれ約±１５％、より好ましくは約±７％、特に好ましくは約±５％以内であることが好ましい。
また、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、約２２５℃以上の融点を示す。より具体的には、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶は、約２３０℃乃至約２４０℃、好ましくは約２３２℃乃至約２３５℃に融点を示す。融点は、一般的に行われる融点測定法等で確認することができるが、測定条件によって、多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
［本発明化合物の製造方法］
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の結晶は、以下に記載した方法、これらに準ずる方法または実施例に記載した方法によって製造することができる。より具体的には、本発明の（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶は、下記の方法１〜方法４の反応によって製造することができる。
方法１：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、単離精製することなく、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法；
方法２：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＢ固体）を単離精製し、その後、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法；
方法３：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＣ固体）を単離精製し、その後、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法；
方法４：化合物（Ｉ）のフリー体を、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の非結晶を単離精製し、（ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法により行われる）その後、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得る方法である。
以下に各方法について、詳細に説明する。
（１）方法１は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンを、塩酸塩への変換反応に付し、単離精製することなく、さらに結晶化することによって、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
塩酸塩への変換反応は公知であり、例えば、塩化水素を含む溶媒中、約０℃乃至約９０℃、好ましくは約４０℃乃至約８０℃の温度で行われる。ここで、「塩化水素を含む溶媒」における溶媒は、塩化水素を溶解しうる溶媒、または塩化水素を溶解しうる溶媒と混和できる溶媒であればよい。塩化水素を含む溶媒は、塩化水素を溶解しうる溶媒、または塩化水素を溶解しうる溶媒と混和できる溶媒に、塩化水素ガス、または塩化水素水溶液、すなわち塩酸を添加することによって容易に調製することができる。「塩化水素を含む溶媒」における溶媒としては、例えば（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水等が挙げられる。また、該「塩化水素を含む溶媒」における溶媒は、塩酸塩への変換反応の後に行われる結晶化における溶媒としても用いることができるものが好ましい。このような溶媒としては、例えば「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」等が挙げられる。「低級アルコール系溶媒」としては、例えば、Ｃ１〜４アルキルアルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｓｅｃ−ブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール等）またはＣ１〜４アルキルアルコールの酢酸エステル、すなわち酢酸Ｃ１〜４アルキルエステル（例えば、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸ｓｅｃ−ブチル、酢酸ｔｅｒｔ−ブチル等）等が挙げられる。「水と混和するエーテル系溶媒」としては、例えば、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサン、テトラヒドロフラン等が挙げられる。塩酸塩への変換反応における溶媒としての、「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」として好ましくは、水と、前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」の混合溶媒、または水と、前記「水と混和するエーテル系溶媒」の混合溶媒等が挙げられる。より好ましくは、水とメタノールの混合溶媒、水とエタノールの混合溶媒、水とジオキサンの混合溶媒等が挙げられ、特に、水とメタノールの混合溶媒が好ましい。
この結晶化は、塩酸塩への変換反応に付した反応混合溶液を、約−１０℃乃至約４０℃で撹拌し、Ａ結晶を結晶化させることにより行われる。
より具体的には、例えば、塩化水素を含む「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」等を用いて約４０℃乃至約８０℃で塩酸塩への変換反応を行った後、さらに約−１０℃乃至約４０℃、好ましくは約−５℃乃至約３５℃、より好ましくは約−５℃乃至約１０℃で撹拌し、必要であれば、処理し（例えば、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒を加える等）、Ａ結晶を析出させ、必要であれば、さらに処理する（例えば、水を加える等）ことにより、効率的に化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であるＡ結晶を製造することができる。
前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」を用いた場合には、溶媒和した固体（例えば、後記したＢ固体またはＣ固体等）が生成するので、安定に化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であるＡ結晶を得るためには、塩酸塩への変換反応の後、必要であれば、前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」を加え、水と前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」の混合体積比を変化させることが好ましい。
また、前記の「Ｃ１〜４アルキルアルコール」または「水と混和するエーテル系溶媒」を用いた場合には、化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶であるＡ結晶の収量を向上するために、必要であれば、水を加えることが好ましい。
上記した方法１における水と前記「Ｃ１〜４アルキルアルコール」の混合体積比、または水と前記「水と混和するエーテル系溶媒」の混合体積比は特に限定されないが、好ましくは１：５０乃至７：３、より好ましくは１：３５乃至１：１の範囲内で行うことが好ましい。
（２）方法２は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を含む、メタノールと水の混合溶媒を用いて、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＢ固体）を単離精製し、その後、結晶化することにより、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
塩酸塩への変換反応は、上記した方法１の塩酸塩への変換反応と同様に行われる。詳しくは、約４０℃乃至約８０℃で塩酸塩への変換反応を行い、さらに約−１０℃乃至約３５℃で撹拌し、好ましくは約−５℃乃至約１０℃で撹拌し、固体を析出させることにより行われる。析出した固体は、当業者によって通常行われる方法（例えば、ろ過、乾燥等）を用いて単離精製し、以下の結晶化に供される。
この結晶化は、上記の反応によって得られた固体を、前記「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」等を用いて、約４０℃乃至約８０℃、好ましくは約５０℃乃至約８０℃で撹拌し、さらに約−５℃乃至約３５℃、好ましくは約１０℃乃至約３５℃で撹拌し、結晶を析出させることにより行われる。該「水を含有していてもよい、低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒」として好ましくは、例えば酢酸エチル、メタノール、エタノール、１，２−ジメトキシエタン等、またはこれらと水の混合溶媒（例えば、メタノール水溶液、エタノール水溶液、１，２−ジメトキシエタン水溶液等）等が挙げられる。とりわけ、酢酸エチルが好ましい。結晶化は、水を含有しない溶媒を用いて行うことがより好ましいが、所望によって、任意の混合比率の、水と低級アルコール系溶媒の混合溶媒、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、好ましくは水の比率が２５％以下のこれらの混合溶媒を用いることができる。
（３）方法３は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと、塩化水素を含む、エタノールと水の混合溶媒を用いて、塩酸塩への変換反応に付し、化合物（Ｉ）の溶媒和物（後記のＣ固体）を単離精製し、その後、結晶化することにより、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
塩酸塩への変換反応は、上記した方法１の塩酸塩への変換反応と同様に行われる。詳しくは、約４０℃乃至約８０℃で塩酸塩への変換反応を行い、さらに約−１０℃乃至約３５℃、好ましくは約−５℃乃至約１０℃で撹拌し、固体を析出させることにより行われる。析出した固体は、当業者によって通常行われる方法（例えば、ろ過、乾燥等）を用いて単離精製し、前記した方法２に記載の結晶化に付すことで、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とすることができる。
（４）方法４は、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンを、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法によって、化合物（Ｉ）の非結晶を単離精製し、さらに結晶化することにより、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を製造する方法である。
ここで、塩酸塩への変換反応および精製方法は、ＷＯ０２／０７４７７０号の実施例９（５４）に記載した方法と同様に行われる。この方法によって得られた非結晶は、前記した方法２に記載の結晶化に付すことで、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とすることができる。
塩酸塩への変換反応と結晶化は、操作における利便性から、一連した反応として行うことが好ましい。
方法２〜方法４において、Ｂ固体、Ｃ固体、または非結晶を得る方法を開示したが、これらの固体または非結晶を得る方法は、これらの方法に限定されない。従って、如何なる方法によって得られたＢ固体、Ｃ固体、または非結晶を用いても、上記した方法によって、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶を得ることができるものであれば、その方法は、すべて本発明に包含される。
また、塩酸塩への変換反応によって、上記した以外の溶媒和物、または非結晶が得られた場合にも、前記した方法２に記載の結晶化に付すことで、本発明の化合物（Ｉ）の無溶媒和物の結晶とすることができる。
また、本発明化合物の製造に用いる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンは、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩と４−（４−ホルミルフェニルオキシ）安息香酸を還元的アミノ化反応に付すことにより製造することができる。
この還元的アミノ化反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、ジクロロエタン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、酢酸およびこれらの混合物等）中、三級アミン（例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等）の存在下、あるいは非存在下、還元剤（例えば、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等）の存在下、０℃乃至４０℃の温度で行われる。
さらに、この反応の原料である（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩は、以下の反応工程式（Ｉ）によって製造することができる。
前記反応工程式中、各反応はそれぞれ公知の方法によって行われる。また、前記反応工程式において、出発物質として用いる式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）で示される化合物は、それ自体公知であるか、あるいは公知の方法により容易に製造することができる。また、本明細書中、Ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を表わし、酸付加物塩は、無機酸塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩等）、あるいは有機酸塩（例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩等）を表わす。
具体的には、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩は、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）で示される化合物を反応に付し、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を得、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を脱Ｂｏｃ基反応、環化反応、所望により酸付加物塩への変換反応に付し、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩を得、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩を脱ベンジル基反応に付すことにより製造することができる。
より具体的には、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物は、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）で示される化合物を、例えば有機溶媒（例えばメタノール、エタノール等）中、混合し、３０℃乃至１００℃に加熱することにより得ることができる。
さらに、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩は、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を、脱Ｂｏｃ基反応、環化反応、所望により酸付加物塩への変換反応に付すことにより製造することができる。
この脱Ｂｏｃ基反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、ジオキサン、酢酸エチル、アニソール等）中、有機酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ｐ−トシル酸等）、または無機酸（例えば、塩酸、硫酸等）もしくはこれらの混合物（例えば、臭化水素／酢酸等）中、０℃乃至１００℃の温度で行なわれる。
また、この環化反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、酢酸エチル、ジクロロエタン、トルエン等）中、三級アミン（例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等）を用いるか、酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸等）を用いるか、または用いないで６０℃乃至１２０℃に加熱することにより行われる。この反応はモルホリノエチルアミノ基の切断と同時に環化される反応である。
さらに、この酸付加物塩への変換反応は公知であり、例えば、有機溶媒（例えば、メタノール、エタノール、ジオキサン、酢酸エチルおよびこれらの混合物等）中、水の存在下または非存在下、酸（例えば、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸等）、あるいは有機酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、酒石酸、シュウ酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、イセチオン酸、グルクロン酸、グルコン酸等）等）存在下、０℃乃至９０℃の温度で行われる。さらにこの反応混合物を−１０℃乃至４０℃で撹拌し、結晶を析出させることにより行われる。
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン、またはその酸付加物塩は、式（ＩＸ）で示される化合物、またはその酸付加物塩を脱ベンジル基反応に付すことにより製造することができる。この脱ベンジル基反応は公知であり、例えば、溶媒（例えば、エーテル系（例えば、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチルエーテル等）、アルコール系（例えば、メタノール、エタノール等）、ベンゼン系（例えば、ベンゼン、トルエン等）、ケトン系（例えば、アセトン、メチルエチルケトン等）、ニトリル系（例えば、アセトニトリル等）、アミド系（例えば、ジメチルホルムアミド等）、水、酢酸エチル、酢酸またはそれらの２以上の混合溶媒等）中、触媒（例えば、パラジウム／炭素、パラジウム黒、水酸化パラジウム、酸化白金、ラネーニッケル等）の存在下、常圧または加圧下の水素雰囲気下またはギ酸アンモニウム存在下、０℃乃至２００℃の温度で行なわれる。
［薬理活性］
本発明化合物である（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶、またはその溶媒和物の固体が、ＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載した方法に従って製造された非結晶と同程度の、強いケモカイン／ケモカイン受容体拮抗作用を有することは、ＷＯ０１／４０２２７号に記載された方法により確認した。
［毒性］
本発明化合物の毒性は非常に低く、例えばラットを用いた単回投与試験では、２０００ｍｇ／ｋｇでも顕著な毒性は見られなかった。従って本発明化合物は、医薬として使用するために十分安全であると判断できる。
【産業上の利用可能性】
［医薬品への適用］
ヒトを含めた動物、特にヒトにおいて、本発明化合物は、ケモカイン／ケモカイン受容体の作用を制御するので、ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患、例えば各種炎症性疾患、喘息、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー疾患（アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性好酸球性胃腸症等）、腎炎、腎症、肝炎、関節炎、慢性関節リウマチ、乾癬、鼻炎、結膜炎、虚血再灌流傷害、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、急性呼吸窮迫症候群、細菌感染に伴うショック、糖尿病、自己免疫疾患、移植臓器拒絶反応、免疫抑制、癌転移予防、後天性免疫不全症候群等の予防および／または治療に有用である。
本発明化合物、あるいは塩酸塩以外の非毒性の塩、酸付加塩、またはその水和物を上記の目的で用いるには、通常、全身的または局所的に、経口または非経口の形で投与される。
投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人一人あたり、１回につき、１ｍｇから１０００ｍｇの範囲で、１日１回から数回経口投与されるか、または成人一人あたり、１回につき、１ｍｇから１００ｍｇの範囲で、１日１回から数回非経口投与（好ましくは、静脈内投与）されるか、または１日１時間から２４時間の範囲で静脈内に持続投与される。
もちろん前記したように、投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、また範囲を越えて必要な場合もある。
本発明化合物を投与する際には、経口投与のための内服用固形剤、内服用液剤および、非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤等として用いられる。
経口投与のための内服用固形剤には、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。カプセル剤には、ハードカプセルおよびソフトカプセルが含まれる。
このような内服用固形剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質はそのままか、または賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。さらにゼラチンのような吸収されうる物質のカプセルも包含される。
経口投与のための内服用液剤は、薬剤的に許容される水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含む。このような液剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質が、一般的に用いられる希釈剤（精製水、エタノールまたはそれらの混液等）に溶解、懸濁または乳化される。さらにこの液剤は、湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤、緩衝剤等を含有していてもよい。
非経口投与のための注射剤としては、溶液、懸濁液、乳濁液および用時溶剤に溶解または懸濁して用いる固形の注射剤を包含する。注射剤は、ひとつまたはそれ以上の活性物質を溶剤に溶解、懸濁または乳化させて用いられる。溶剤として、例えば注射用蒸留水、生理食塩水、植物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノールのようなアルコール類等およびそれらの組み合わせが用いられる。さらにこの注射剤は、安定剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリソルベート８０（登録商標）等）、懸濁化剤、乳化剤、無痛化剤、緩衝剤、保存剤等を含んでいてもよい。これらは最終工程において滅菌するか無菌操作法によって製造される。また無菌の固形剤、例えば凍結乾燥品を製造し、その使用前に無菌化または無菌の注射用蒸留水または他の溶剤に溶解して使用することもできる。
非経口投与のためのその他の製剤としては、ひとつまたはそれ以上の活性物質を含み、常法により処方される外用液剤、軟膏剤、塗布剤、吸入剤、スプレー剤、坐剤および膣内投与のためのペッサリー等が含まれる。
スプレー剤は、一般的に用いられる希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムのような安定剤と等張性を与えるような緩衝剤、例えば塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウムあるいはクエン酸のような等張剤を含有していてもよい。スプレー剤の製造方法は、例えば米国特許第２，８６８，６９１号および同第３，０９５，３５５号に詳しく記載されている。
本発明化合物は、他の薬剤、例えば、ＨＩＶ感染の予防および／または治療剤（特に、ＡＩＤＳの予防および／または治療剤）と組み合わせて用いてもよい。この場合、これらの薬物は、別々にあるいは同時に、薬理学的に許容されうる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、溶解補助剤、希釈剤等と混合して製剤化し、ＨＩＶ感染の予防および／または治療のための医薬組成物として経口的にまたは非経口的に投与することができる。
本発明化合物は、他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤（特に、ＡＩＤＳの予防および／または治療剤）に対して耐性を獲得したＨＩＶ−１に対して感染阻害作用を有する。従って、他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤が効果を示さなくなったＨＩＶ感染者に対しても用いることができる。この場合、本発明化合物を単剤で用いても良いが、感染しているＨＩＶ−１株が耐性を獲得したＨＩＶ感染の予防および／または治療剤またはそれ以外の薬剤と併用して用いても良い。
本発明化合物は、ＨＩＶ感染を阻害しない薬物と組み合わせて、単剤よりもＨＩＶ感染の予防および／または治療効果を増強するものを含む。
本発明化合物と組み合わせて用いられる他のＨＩＶ感染の予防および／または治療剤の例としては、逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、ケモカイン拮抗剤（例えば、ＣＣＲ２拮抗剤、ＣＣＲ３拮抗剤、ＣＣＲ４拮抗剤、ＣＣＲ５拮抗剤、ＣＸＣＲ４拮抗剤等）、フュージョン阻害剤、ＨＩＶ−１の表面抗原に対する抗体、ＨＩＶ−１のワクチン等が挙げられる。
逆転写酵素阻害剤として、具体的には、（１）核酸系逆転写酵素阻害剤のジドブジン（商品名：レトロビル）、ジダノシン（商品名：ヴァイデックス）、ザルシタビン（商品名：ハイビッド）、スタブジン（商品名：ゼリット）、ラミブジン（商品名：エピビル）、アバカビル（商品名：ザイアジェン）、アデフォビル、アデフォビル ジピボキシル、エントリシタビン（商品名：コビラシル）、ＰＭＰＡ（商品名：テノフォヴィル）等、（２）非核酸系逆転写酵素阻害剤のネビラピン（商品名：ビラミューン）、デラビルジン（商品名：レスクリプター）、エファビレンツ（商品名：サスティバ、ストックリン）、カプラヴィリン（ＡＧ１５４９）等が挙げられる。
プロテアーゼ阻害剤として、具体的には、インジナビル（商品名：クリキシバン）、リトナビル（商品名：ノービア）、ネルフィナビル（商品名：ビラセプト）、サキナビル（商品名：インビラーゼ、フォートベース）、アンプリナビル（商品名：エジネラーゼ）、ロピナビル（商品名：カレトラ）、ティプラナビル等が挙げられる。
ケモカイン拮抗剤としては、ケモカインレセプターの内因性のリガンド、またはその誘導体および非ペプチド性低分子化合物、またはケモカインレセプターに対する抗体が含まれる。
ケモカインレセプターの内因性のリガンドとしては、具体的には、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＤＦ−１α、ＳＤＦ−１β、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−４、エオタキシン（Ｅｏｔａｘｉｎ）、ＭＤＣ等が挙げられる。
内因性リガンドの誘導体としては、具体的には、ＡＯＰ−ＲＡＮＴＥＳ、Ｍｅｔ−ＳＤＦ−１α、Ｍｅｔ−ＳＤＦ−１β等が挙げられる。
ケモカインレセプターの抗体としては、具体的には、Ｐｒｏ−１４０等が挙げられる。
ＣＣＲ２拮抗剤としては、具体的には、ＷＯ９９／０７３５１号、ＷＯ９９／４０９１３号、ＷＯ００／４６１９５号、ＷＯ００／４６１９６号、ＷＯ００／４６１９７号、ＷＯ００／４６１９８号、ＷＯ００／４６１９９号、ＷＯ００／６９４３２号、ＷＯ００／６９８１５号またはＢｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１０，１８０３（２０００）に記載された化合物等が挙げられる。
ＣＣＲ３拮抗剤としては、具体的には、ＤＥ１９８３７３８６号、ＷＯ９９／５５３２４号、ＷＯ９９／５５３３０号、ＷＯ００／０４００３号、ＷＯ００／２７８００号、ＷＯ００／２７８３５号、ＷＯ００／２７８４３号、ＷＯ００／２９３７７号、ＷＯ００／３１０３２号、ＷＯ００／３１０３３号、ＷＯ００／３４２７８号、ＷＯ００／３５４４９号、ＷＯ００／３５４５１号、ＷＯ００／３５４５２号、ＷＯ００／３５４５３号、ＷＯ００／３５４５４号、ＷＯ００／３５８７６号、ＷＯ００／３５８７７号、ＷＯ００／４１６８５号、ＷＯ００／５１６０７号、ＷＯ００／５１６０８号、ＷＯ００／５１６０９号、ＷＯ００／５１６１０号、ＷＯ００／５３１７２号、ＷＯ００／５３６００号、ＷＯ００／５８３０５号、ＷＯ００／５９４９７号、ＷＯ００／５９４９８号、ＷＯ００／５９５０２号、ＷＯ００／５９５０３号、ＷＯ００／６２８１４号、ＷＯ００／７３３２７号またはＷＯ０１／０９０８８号に記載された化合物等が挙げられる。
ＣＣＲ５拮抗剤としては、具体的には、ＷＯ９９／１７７７３号、ＷＯ９９／３２１００号、ＷＯ００／０６０８５号、ＷＯ００／０６１４６号、ＷＯ００／１０９６５号、ＷＯ００／０６１５３号、ＷＯ００／２１９１６号、ＷＯ００／３７４５５号、ＥＰ１０１３２７６号、ＷＯ００／３８６８０号、ＷＯ００／３９１２５号、ＷＯ００／４０２３９号、ＷＯ００／４２０４５号、ＷＯ００／５３１７５号、ＷＯ００／４２８５２号、ＷＯ００／６６５５１号、ＷＯ００／６６５５８号、ＷＯ００／６６５５９号、ＷＯ００／６６１４１号、ＷＯ００／６８２０３号、特開２０００−３０９５９８号、ＷＯ００／５１６０７号、ＷＯ００／５１６０８号、ＷＯ００／５１６０９号、ＷＯ００／５１６１０号、ＷＯ００／５６７２９号、ＷＯ００／５９４９７号、ＷＯ００／５９４９８号、ＷＯ００／５９５０２号、ＷＯ００／５９５０３号、ＷＯ００／７６９３３号、ＷＯ９８／２５６０５号、ＷＯ９９／０４７９４号、ＷＯ９９／３８５１４号またはＢｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１０，１８０３（２０００）に記載された化合物等が挙げられる。
ＣＸＣＲ４拮抗剤としては、具体的には、ＡＭＤ−３１００、Ｔ−２２、ＫＲＨ−１１２０またはＷＯ００／６６１１２号に記載された化合物等が挙げられる。
フュージョン阻害剤としては、具体的には、Ｔ−２０（ｐｅｎｔａｆｕｓｉｄｅ）、Ｔ−１２４９等が挙げられる。
以上の併用薬剤は例であって、本発明はこれらに限定されるものではない。
代表的な逆転写酵素阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤の通常の臨床投与量は、例えば、以下に示すとおりであるが、本発明はこれらに限定されるものではない。
ジドブジン：１００ｍｇカプセル、１回２００ｍｇ、１日３回；
３００ｍｇ錠剤、１回３００ｍｇ、１日２回；
ジダノシン：２５−２００ｍｇ錠剤 １回１２５−２００ｍｇ、１日２回；
ザルシタビン：０．３７５−０．７５ｍｇ錠剤、１回０．７５ｍｇ、１日３回；
スタブジン：１５−４０ｍｇカプセル、１回３０−４０ｍｇ、１日２回；
ラミブジン：１５０ｍｇ錠剤、１回１５０ｍｇ、１日２回；
アバカビル：３００ｍｇ錠剤、１回３００ｍｇ、１日２回；
ネビラピン：２００ｍｇ錠剤、１回２００ｍｇ、１４日間１日１回、その後１日２回；
デラビルジン：１００ｍｇ錠剤、１回４００ｍｇ、１日３回；
エファビレンツ：５０−２００ｍｇカプセル、１回６００ｍｇ、１日１回；
インジナビル：２００−４００カプセル、１回８００ｍｇ、１日３回；
リトナビル：１００ｍｇカプセル、１回６００ｍｇ、１日２回；
ネルフィナビル：２５０ｍｇ錠剤、１回７５０ｍｇ、１日３回；
サキナビル：２００ｍｇカプセル、１回１，２００ｍｇ、１日３回；
アンプレナビル：５０−１５０ｍｇ錠剤、１回１，２００ｍｇ、１日２回。
【図面の簡単な説明】
図１は、実施例１で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２は、実施例１で得られたＡ結晶の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図３は、実施例１で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図４は、実施例１で得られたＡ結晶の単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データ（１）である。
図５は、実施例１で得られたＡ結晶の単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データ（２）である。
図６は、実施例２で得られたＢ固体の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図７は、実施例２で得られたＢ固体の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図８は、実施例３で得られたＣ固体の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図９は、実施例３で得られたＣ固体の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１０は、実施例４で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１１は、実施例４で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１２は、比較例１で得られた非結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１３は、比較例１で得られた非結晶の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データである。
図１４は、比較例１で得られた非結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１５は、実施例５（１）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１６は、実施例５（１）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１７は、実施例５（２）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図１８は、実施例５（２）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図１９は、実施例５（３）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２０は、実施例５（３）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２１は、実施例５（４）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２２は、実施例５（４）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２３は、実施例５（５）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２４は、実施例５（５）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２５は、実施例５（６）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２６は、実施例５（６）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２７は、実施例５（７）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図２８は、実施例５（７）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図２９は、実施例５（８）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図３０は、実施例５（８）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
図３１は、実施例５（９）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータである。
図３２は、実施例５（９）で得られたＡ結晶の赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルデータである。
【発明を実施するための最良の形態】
以下、参考例および実施例によって本発明を詳述するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
参考例１
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−ベンジル−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・メタンスルホン酸塩
窒素ガス雰囲気下、１−ベンジル−４−ピペリドン（７９８ｇ）のメタノール（４Ｌ）溶液に、ｎ−ブチルアミン（３１０ｇ）、（２Ｒ，３Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−シクロヘキシル−３−ヒドロキシプロピオン酸（１２００ｇ）、２−モルホリノエチルイソシアナイド（６００ｇ）を順次加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、濃塩酸（２Ｌ）を加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、メタノール（２Ｌ）、水（１２Ｌ）を加え、２５％水酸化ナトリウム水溶液（３．０３Ｌ）を加えた。反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出した。抽出液に、氷酢酸（１．１４Ｌ）を加え、２時間還流した。反応混合物を室温まで冷却し、水、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（９．５Ｌ）、３３％食塩水（５．４Ｌ）で洗浄し、濃縮した。得られた残渣に、酢酸エチル（１０．４Ｌ）を加え、６０℃乃至６５℃で３０分間撹拌し、６０℃乃至７０℃でメタンスルホン酸（３８８ｇ）を加えた。反応混合物を同温度で１０分間撹拌し、結晶を析出させた。反応混合物を４０℃乃至４５℃、０℃乃至５℃に冷却し、１時間撹拌した。析出した結晶をろ過し、酢酸エチルで洗浄後、乾燥し、以下の物性値を有する標題化合物（１８０２ｇ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ ０．４２（クロロホルム：メタノール＝１０：１）；
ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ７．５１−７．２２（ｍ，５Ｈ），４．３６（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．００（ｍ，１Ｈ），３．７６（ｍ，１Ｈ），３．５９−３．３８（ｍ，３Ｈ），３．３０−３．０３（ｍ，２Ｈ），２．７０（ｓ，３Ｈ），２．５４−１．８３（ｍ，６Ｈ），１．８２−１．５６（ｍ，５Ｈ），１．５３−１．０８（ｍ，６Ｈ），１．０６−０．７７（ｍ，５Ｈ）。
参考例２
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・メタンスルホン酸塩
窒素ガス雰囲気下、参考例１で製造した化合物（１７９２ｇ）のジメチルホルムアミド溶液（３．３Ｌ）に１０％パラジウム／炭素（１８ｇ）を加えた。反応混合物を水素ガスで置換した。反応混合物を水素ガス圧０．５ＭＰａ下、８０℃で１時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、反広混合物をろ過し、標題化合物のジメチルホルムアミド溶液を得た。
参考例３
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン
窒素ガス雰囲気下、参考例２で製造した化合物のジメチルホルムアミド溶液（８．４Ｌ）に、トリエチルアミン（３４０ｇ）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１４８６ｇ）、４−（４−ホルミルフェニルオキシ）安息香酸（９６９ｇ）を加えた。反応混合物を室温で８時間撹拌した。反応混合物を６５℃乃至７０℃まで加熱し、７０℃に加熱した水（３．３Ｌ）を加え、混合物を６５℃乃至７０℃で１０分間撹拌し、結晶を析出させた。さらに反応混合物に７０℃に加熱した水（３．３Ｌ）を加え、６５℃乃至７０℃で１０分間撹拌した。反応混合物を１５℃乃至３０℃まで冷却し、３０分間撹拌した。析出した結晶を濾取し、６０％メタノール水溶液で洗浄することにより、以下の物性値を有する、標題化合物（２３５４ｇ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ ０．４８（クロロホルム：メタノール：酢酸＝２０：４：１）；
ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）：δ７．９２（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｍ，１Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），５．０７（ｂｒ−ｓ，１Ｈ），３．９５（ｓ，１Ｈ），３．５１（ｓ，２Ｈ），３．４０−３．０９（ｍ，３Ｈ），２．８３−２．６２（ｍ，４Ｈ），２．１０−１．８４（ｍ，４Ｈ），１．８０−１．４４（ｍ，７Ｈ），１．４０−１．２２（ｍ，３Ｈ），１．２０−１．０４（ｍ，３Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），０．８５−０．７５（ｍ，２Ｈ）。
【実施例１】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（Ａ結晶）
０．０３２Ｍ塩酸（５０．８Ｌ）のメタノール（１２６Ｌ）溶液に、２０℃乃至５０℃で、参考例３で製造した化合物（湿重量３０．３ｋｇ、乾燥時の換算重量２０ｋｇ、１０．３ｋｇのメタノール：水＝６：４の混合溶液を含有）を加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で３０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、７０％メタノール水溶液で洗浄した。濾液を５０℃乃至５５℃で撹拌した。反応混合溶液を室温まで冷却し、１０分間撹拌した。さらに反応混合物を０℃乃至５℃まで冷却し、結晶を析出させた。このようにして得られた懸濁液にメタノール（４１Ｌ）を加え、０℃乃至５℃で１時間撹拌し、５℃に冷却した水（５８Ｌ）を加え、同温度で３０分間撹拌した。このようにして析出した結晶をろ過し、６０％メタノール水溶液で洗浄し、乾燥し、以下の物性値を有する本発明化合物のＡ結晶（１８．５ｋｇ）を得た。また、該結晶の平均粒子径は、１５．８μｍ（レーザー回折式粒度分布測定装置、ＳＡＬＤ−２１００（島津製作所）で測定）であり、融点は、約２３５℃（日本薬局方記載のキャピラリー法で測定）であった。
このようにして得られた本発明化合物のＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１に、示差走査熱量測定データを図２に、赤外線吸収スペクトルデータを図３に、単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データを図４、５にそれぞれ示した。
（１）粉末Ｘ線回折スペクトルデータ
［測定条件］
装置：ＢＲＵＫＥＲ ＤＩＳＣＯＶＥＲ ｗｉｔｈ ＧＡＤＤＳ（Ｃ２）
ターゲット：Ｃｕ
フィルター：なし
電圧：４０ｋＶ
電流：４０ｍＡ
露光時間：１８０ｓｅｃ
［結果］
結果を表２に示す。
（２）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：２．８ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、２４４℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（３）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（Ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ｔｏｔａｌ ｒｅｆｌｅｃｔａｎｃｅ法（以下ＡＴＲ法と略記する）：２９２４，２５０４，１６８２，１６３２，１５９７，１５０３，１４２６，１３７７，１２３５，１１６３，１０９８，９６１，９２８，８７６，８５５，７７０，７２７，６８１ｃｍ−１。
（４）単結晶Ｘ線回折スペクトル構造解析データ
［測定条件］
装置：リガク ＲＡＸＩＳ−ＲＡＰＩＤイメージングプレート
ターゲット：ＣｕＫα（λ＝１．５４１７８Å）
フィルター：ｇｒａｐｈｉｔｅ ｍｏｎｏｃｈｒｏｍａｔｅｄ
電圧：６０ｋＶ
電流：９０ｍＡ
スキャンスピード：１°／ｍｉｎ
［結果］
結晶学的データは以下のものであった。
格子定数：ａ＝１１．８１０５（４）Å
ｂ＝７．８７３０（２）Å
ｃ＝１８．２３５１（７）Å
空間群：Ｐ２１（＃４）
Ｒ因子：０．０４２
【実施例２】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩のメタノールおよび水からなる溶媒和物の固体（Ｂ固体）
０．３５Ｍ塩酸（１７０ｍＬ）のメタノール（２５６ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：２８．４ｇ）を加えた。反応混合物を５０℃乃至５５℃で溶解した。反応混合物を２０℃乃至３０℃まで冷却し、３０分間撹拌した。さらに、０℃乃至５℃まで冷却し、１時間撹拌した。析出した固体をろ過し、乾燥し、以下の物性値を有するＢ固体（２７．１ｇ）を得た。
このＢ固体が、メタノールおよび水が溶媒和したものであることはＮＭＲによって確認した。
このようにして得られたＢ固体の示差走査熱量測定データを図６に、赤外線吸収スペクトルデータを図７にそれぞれ示した。
（１）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：３．４ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、１６４，２５２℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（２）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（ＡＴＲ法）：３２５６，２９３２，１６６１，１５９７，１５０３，１４１８，１２４０，１１６７，１１１３，９２８，８７８，８６２，８４９，７７５，６８１ｃｍ−１。
【実施例３】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩のエタノールおよび／または水からなる溶媒和物の固体（Ｃ固体）
６Ｍ塩酸（１．０５ｍＬ）のエタノール溶液（１７．３ｍＬ）に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：３．４６ｇ）を加え、加熱して溶解した。反応混合物に５０℃乃至５３℃に加熱した水（３３．３ｍＬ）を加え、２１時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、３０分間撹拌した。さらに、０℃乃至５℃まで冷却し、析出した固体をろ過し、乾燥し、以下の物性値を有するＣ固体（２．７４ｇ）を得た。
このＣ固体が、エタノールおよび／または水が溶媒和したものであることはＮＭＲによって確認した。
このようにして得られたＣ固体の示差走査熱量測定データを図８に、赤外線吸収スペクトルデータを図９にそれぞれ示した。
（１）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：２．０５ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、１５８，２２９℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（２）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（ＡＴＲ法）：２９３４，１６６７，１６０１，１５０３，１３８５，１２５０，１１６９，１０９６，１０２４，９３０，８５１，７７５ｃｍ−１。
【実施例４】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（Ａ結晶）
酢酸エチル（４４０ｍＬ）に、実施例２で製造した固体（Ｂ固体）（２９．４ｇ）を加えた。混合物を６０℃乃至６５℃で１時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、３０分間撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、実施例１と同様の物性値を有する本発明化合物のＡ結晶（２８．５ｇ）を得た。
実施例４で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１０に、赤外線吸収スペクトルデータを図１１にそれぞれ示した。
比較例１
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の非結晶
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩を、ＷＯ０２／０７４７７０号の明細書に記載された製造方法に従って、クロロホルム：メタノール＝５：１でカラム精製することにより製造した。
このようにして得られた比較化合物は、非結晶であることがわかった。この非結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１２に、示差走査熱量測定データを図１３に、赤外線吸収スペクトルデータを図１４にそれぞれ示した。
（１）粉末Ｘ線回折スペクトルデータ
［測定条件］
装置：ＢＲＵＫＥＲ ＤＩＳＣＯＶＥＲ ｗｉｔｈ ＧＡＤＤＳ（Ｃ２）
ターゲット：Ｃｕ
フィルター：なし
電圧：４０ｋＶ
電流：４０ｍＡ
露光時間：１８０ｓｅｃ
［結果］
粉末Ｘ線回折スペクトルでは、ピークは認められなかった。
（２）示差走査熱量測定データ
［測定条件］
装置：ＳＥＩＫＯ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ ＤＳＣ６２００
試料量：４．０ｍｇ
試料セル：ＳＵＳ 密封容器
窒素ガス流量：２０ｍＬ／ｍｉｎ
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
［結果］
その結果、６９，２４８℃付近に吸熱ピークを有することがわかった。
（３）赤外線吸収スペクトルデータ
［測定条件］
装置：日本分光 ＦＴＩＲ−６６０ｐｌｕｓ／ＳＥＮＳＩＲ ＤＵＲＡＳＣＯＰＥ
分解能：４ｃｍ−１
スキャン回数：１６
［結果］
ＩＲ（ＡＴＲ法）：２９２６，１６５９，１５９７，１５０１，１４１８，１２３８，１１５９，１０９８，９２８，８７６，８４９，７７４ｃｍ−１。
【実施例５（１）〜５（９）】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶（Ａ結晶）
以下に示した方法によって、本発明化合物のＡ結晶をそれぞれ得た。
【実施例５（１）】
６Ｍ塩酸（０．１７３ｍＬ）のメタノール（４．５ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：０．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、水（３ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（１）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１５に、赤外線吸収スペクトルデータを図１６にそれぞれ示した。
【実施例５（２）】
６Ｍ塩酸（０．１７３ｍＬ）のメタノール（５．２５ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：０．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、水（２．２５ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（２）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１７に、赤外線吸収スペクトルデータを図１８にそれぞれ示した。
【実施例５（３）】
６Ｍ塩酸（０．１７３ｍＬ）のメタノール（６ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：０．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、水（１．５ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（３）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図１９に、赤外線吸収スペクトルデータを図２０にそれぞれ示した。
【実施例５（４）】
６Ｍ塩酸（０．３４６ｍＬ）と水（２．３５４ｍＬ）のメタノール（６．３ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：１ｇ）を加えた。反応混合物を５１℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（１．８ｍＬ）を加え撹拌した。さらに、水（２．７ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（４）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２１に、赤外線吸収スペクトルデータを図２２にそれぞれ示した。
【実施例５（５）】
６Ｍ塩酸（０．３４６ｍＬ）と水（４．４５４ｍＬ）のメタノール（７．２ｍＬ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：１ｇ）を加えた。反応混合物を５７℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（７．２ｍＬ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（５）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２３に、赤外線吸収スペクトルデータを図２４にそれぞれ示した。
【実施例５（６）】
濃塩酸（１．２９ｋｇ）と水（１５．４７ｋｇ）のメタノール（３０．８５ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：６．０７ｋｇ）を加えた。反応混合物を５２℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（９．７ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（１８ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（６）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２５に、赤外線吸収スペクトルデータを図２６にそれぞれ示した。
【実施例５（７）】
濃塩酸（１９．５ｋｇ）と水（２３７ｋｇ）のメタノール（４７３ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：９１．５ｋｇ）を加えた。反応混合物を５１℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（１５０ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（２７０ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（７）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２７に、赤外線吸収スペクトルデータを図２８にそれぞれ示した。
【実施例５（８）】
濃塩酸（６８．６ｋｇ）と水（８３５ｋｇ）のメタノール（１６４５ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：３２２ｋｇ）を加えた。反応混合物を５１℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（５２０ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（９３０ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（８）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図２９に、赤外線吸収スペクトルデータを図３０にそれぞれ示した。
【実施例５（９）】
濃塩酸（３３．４ｋｇ）と水（４０２ｋｇ）のメタノール（８１２ｋｇ）溶液に、参考例３で製造した化合物（乾燥重量：１５７ｋｇ）を加えた。反応混合物を５２℃に加熱し、溶解した。混合物を氷冷後、メタノール（２５０ｋｇ）を加え撹拌した。さらに、水（４６０ｋｇ）を加え撹拌した。析出した結晶をろ過し、乾燥し、以下の本発明のＡ結晶を得た。
実施例５（９）で得られたＡ結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルデータを図３１に、赤外線吸収スペクトルデータを図３２にそれぞれ示した。
製剤例１
以下の各成分を常法により混合した後打錠して、一錠中に５０ｍｇの活性成分を含有する錠剤１０万錠を得た。
・（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロ
キシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニル
オキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデ
カン・塩酸塩の結晶 ・・・５．０ｋｇ
・カルボキシメチルセルロースカルシウム（崩壊剤） ・・・０．２ｋｇ
・ステアリン酸マグネシウム（潤滑剤） ・・・０．１ｋｇ
・微結晶セルロース ・・・４．７ｋｇ
製剤例２
以下の各成分を常法により混合した後、溶液を常法により滅菌し、５ｍｌずつアンプルに充填し、常法により凍結乾燥し、１アンプル中２０ｍｇの活性成分を含有するアンプル１０万本を得た。
・（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロ
キシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニル
オキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデ
カン・塩酸塩の結晶 ・・・２．０ｋｇ
・マンニトール ・・・２０．０ｋｇ
・蒸留水 ・・・５００Ｌ
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の結晶。
【請求項２】
無溶媒和物である請求の範囲１記載の結晶。
【請求項３】
融点が、約２３０℃乃至約２４０℃である請求の範囲１記載の結晶。
【請求項４】
融点が、約２３２℃乃至約２３５℃である請求の範囲１記載の結晶。
【請求項５】
粉末Ｘ線回折スペクトルが、図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルである請求の範囲１記載の結晶。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおける回折角２θが、５．１５、８．０６、１０．２６、１１．０１、１３．７２、１５．４６、１７．３６、１８．０３、１８．５８、１９．００、１９．５１、２０．７１、２１．７３、２２．５８、２３．８０、２４．９６、２７．０７（度）である請求の範囲５記載の結晶。
【請求項７】
赤外吸収スペクトルが、図３に示される赤外吸収スペクトルである請求の範囲１記載の結晶。
【請求項８】
赤外吸収スペクトルにおいて、２９２４、２５０４、１６８２、１６３２、１５９７、１５０３、１４２６、１３７７、１２３５、１１６３、１０９８、９６１、９２８、８７６、８５５、７７０、７２７、６８１ｃｍ−１に吸収を有する請求の範囲７記載の結晶。
【請求項９】
平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至約２００μｍである請求の範囲１記載の結晶。
【請求項１０】
Ｐ２１空間群の結晶である請求の範囲２記載の結晶。
【請求項１１】
格子定数が、ａ＝１１．８１０５オングストローム±７％、ｂ＝７．８７３０オングストローム±７％、ｃ＝１８．２３５１オングストローム±７％を示す請求の範囲１０記載の結晶。
【請求項１２】
低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒を実質的に含まないか、または残留量として、５０００ｐｐｍ以下である請求の範囲２記載の結晶。
【請求項１３】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の粗精製物を溶解または懸濁させた、水を含有していてもよい低級アルコール系溶媒、または水を含有していてもよい水と混和するエーテル系溶媒から結晶化させることを特徴とする（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法。
【請求項１４】
低級アルコール系溶媒が、Ｃ１〜４アルキルアルコール、または酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルである請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項１５】
低級アルコール系溶媒が、メタノールまたはエタノールである請求の範囲１４載の製造方法。
【請求項１６】
低級アルコール系溶媒が、酢酸エチルである請求の範囲１４記載の製造方法。
【請求項１７】
水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項１８】
水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：５０乃至７：３である請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項１９】
水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：３５乃至５：５である請求の範囲１８記載の製造方法。
【請求項２０】
結晶化の温度が、約−１０℃乃至約４０℃である請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項２１】
結晶化の時間が、約２０分乃至約５時間である請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項２２】
請求の範囲１３乃至２１のいずれかの項に記載の製造法により得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
【請求項２３】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法。
【請求項２４】
Ｃ１〜４アルキルアルコールが、メタノールまたはエタノールである請求の範囲２３記載の製造方法。
【請求項２５】
水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである請求の範囲２３記載の製造方法。
【請求項２６】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程、ついでＣ１〜４アルキルアルコールまたは水と混和するエーテル系溶媒を添加する工程、ついで所望によって水を添加する工程を含むことを特徴とする、請求の範囲２３記載の製造方法。
【請求項２７】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の溶媒和物または（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の非結晶を、酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルに溶解または懸濁する工程、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程および約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法。
【請求項２８】
請求の範囲２０乃至２４のいずれかの項に記載の方法によって得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
【請求項２９】
平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至２００μｍである請求の範囲２８記載の結晶。
【請求項３０】
請求の範囲１、２２または２８記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項３１】
ケモカイン／ケモカイン受容体の作用の制御剤である請求の範囲３０記載の組成物。
【請求項３２】
ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の治療および／または予防剤である請求の範囲３１記載の組成物。
【請求項３３】
請求の範囲１、２２または２８記載の結晶の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物におけるケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防または治療方法。
【請求項３４】
ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防および／または治療剤を製造するための請求の範囲１、２８または２８記載の結晶の使用。
【請求項１】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の結晶。
【請求項２】
無溶媒和物である請求の範囲１記載の結晶。
【請求項３】
融点が、約２３０℃乃至約２４０℃である請求の範囲１記載の結晶。
【請求項４】
融点が、約２３２℃乃至約２３５℃である請求の範囲１記載の結晶。
【請求項５】
粉末Ｘ線回折スペクトルが、図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルである請求の範囲１記載の結晶。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおける回折角２θが、５．１５、８．０６、１０．２６、１１．０１、１３．７２、１５．４６、１７．３６、１８．０３、１８．５８、１９．００、１９．５１、２０．７１、２１．７３、２２．５８、２３．８０、２４．９６、２７．０７（度）である請求の範囲５記載の結晶。
【請求項７】
赤外吸収スペクトルが、図３に示される赤外吸収スペクトルである請求の範囲１記載の結晶。
【請求項８】
赤外吸収スペクトルにおいて、２９２４、２５０４、１６８２、１６３２、１５９７、１５０３、１４２６、１３７７、１２３５、１１６３、１０９８、９６１、９２８、８７６、８５５、７７０、７２７、６８１ｃｍ−１に吸収を有する請求の範囲７記載の結晶。
【請求項９】
平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至約２００μｍである請求の範囲１記載の結晶。
【請求項１０】
Ｐ２１空間群の結晶である請求の範囲２記載の結晶。
【請求項１１】
格子定数が、ａ＝１１．８１０５オングストローム±７％、ｂ＝７．８７３０オングストローム±７％、ｃ＝１８．２３５１オングストローム±７％を示す請求の範囲１０記載の結晶。
【請求項１２】
低級アルコール系溶媒または水と混和するエーテル系溶媒を実質的に含まないか、または残留量として、５０００ｐｐｍ以下である請求の範囲２記載の結晶。
【請求項１３】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の粗精製物を溶解または懸濁させた、水を含有していてもよい低級アルコール系溶媒、または水を含有していてもよい水と混和するエーテル系溶媒から結晶化させることを特徴とする（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法。
【請求項１４】
低級アルコール系溶媒が、Ｃ１〜４アルキルアルコール、または酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルである請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項１５】
低級アルコール系溶媒が、メタノールまたはエタノールである請求の範囲１４載の製造方法。
【請求項１６】
低級アルコール系溶媒が、酢酸エチルである請求の範囲１４記載の製造方法。
【請求項１７】
水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項１８】
水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：５０乃至７：３である請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項１９】
水と低級アルコール系溶媒の混合体積比、または水と、水と混和するエーテル系溶媒の混合体積比が１：３５乃至５：５である請求の範囲１８記載の製造方法。
【請求項２０】
結晶化の温度が、約−１０℃乃至約４０℃である請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項２１】
結晶化の時間が、約２０分乃至約５時間である請求の範囲１３記載の製造方法。
【請求項２２】
請求の範囲１３乃至２１のいずれかの項に記載の製造法により得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
【請求項２３】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法。
【請求項２４】
Ｃ１〜４アルキルアルコールが、メタノールまたはエタノールである請求の範囲２３記載の製造方法。
【請求項２５】
水と混和するエーテル系溶媒が、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサンまたはテトラヒドロフランである請求の範囲２３記載の製造方法。
【請求項２６】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカンと塩化水素を、（１）Ｃ１〜４アルキルアルコール、（２）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水の混合溶媒、（３）水と混和するエーテル系溶媒、（４）水と混和するエーテル系溶媒と水の混合溶媒、（５）Ｃ１〜４アルキルアルコールと水と混和するエーテル系溶媒の混合溶媒、（６）Ｃ１〜４アルキルアルコール、水と混和するエーテル系溶媒、および水の混合溶媒、または（７）水から選択される溶媒に溶解または懸濁し、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程、ついで約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程、ついでＣ１〜４アルキルアルコールまたは水と混和するエーテル系溶媒を添加する工程、ついで所望によって水を添加する工程を含むことを特徴とする、請求の範囲２３記載の製造方法。
【請求項２７】
（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の溶媒和物または（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の非結晶を、酢酸Ｃ１〜４アルキルエステルに溶解または懸濁する工程、約４０℃乃至約８０℃に昇温する工程および約−５℃乃至約３５℃に冷却する工程を含むことを特徴とする、（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶の製造方法。
【請求項２８】
請求の範囲２０乃至２４のいずれかの項に記載の方法によって得られる（３Ｒ）−１−ブチル−２，５−ジオキソ−３−（（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−シクロヘキシルメチル）−９−（４−（４−カルボキシフェニルオキシ）フェニルメチル）−１，４，９−トリアザスピロ［５．５］ウンデカン・塩酸塩の無溶媒和物の結晶。
【請求項２９】
平均粒子径が、約０．０５μｍ乃至２００μｍである請求の範囲２８記載の結晶。
【請求項３０】
請求の範囲１、２２または２８記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項３１】
ケモカイン／ケモカイン受容体の作用の制御剤である請求の範囲３０記載の組成物。
【請求項３２】
ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の治療および／または予防剤である請求の範囲３１記載の組成物。
【請求項３３】
請求の範囲１、２２または２８記載の結晶の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物におけるケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防または治療方法。
【請求項３４】
ケモカイン／ケモカイン受容体の作用に起因する疾患の予防および／または治療剤を製造するための請求の範囲１、２８または２８記載の結晶の使用。
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０２６８７４
【国際公開日】平成１６年４月１日（２００４．４．１）
【発行日】平成１８年１月２６日（２００６．１．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５３７５８３（Ｐ２００４−５３７５８３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００３／０１１８３５
【国際出願日】平成１５年９月１７日（２００３．９．１７）
【出願人】（０００１８５９８３）小野薬品工業株式会社 (180)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１６年４月１日（２００４．４．１）
【発行日】平成１８年１月２６日（２００６．１．２６）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００３／０１１８３５
【国際出願日】平成１５年９月１７日（２００３．９．１７）
【出願人】（０００１８５９８３）小野薬品工業株式会社 (180)
【Ｆターム（参考）】
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