ニゲロース含蜜結晶および結晶ニゲロースの製造方法
【課題】比較的低純度のニゲロースからであっても結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることができる方法を提供すること。
【解決手段】固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法。起晶および／または育晶のための撹拌工程を含む。前記方法により得られたニゲロース含蜜結晶から分蜜することにより結晶ニゲロースを得ることを特徴とする結晶ニゲロースの製造方法。
【解決手段】固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法。起晶および／または育晶のための撹拌工程を含む。前記方法により得られたニゲロース含蜜結晶から分蜜することにより結晶ニゲロースを得ることを特徴とする結晶ニゲロースの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ニゲロースは、１９５０年代にアスペルギルス・ニガー由来の微生物多糖であるニゲランの酸加水分解物中よりその構成単位の一つとして見出された、グルコースを構成糖とするα−１，３−グルコシド結合を有する二糖類であり、天然にはほとんど存在しない［非特許文献１］。
【０００３】
ニゲロースは、日本では清酒や麹汁中から単離され、非発酵性糖のサケビオースとして呼ばれていた［非特許文献２］。この名称が指し示すように、ニゲロースは、清酒、みりん、味噌、ビールそして麹汁のような醗酵食品に含まれている。その他にハチミツなどわれわれが日常的に摂取してきた飲料や食物中にその存在が確認され、これらの芳醇なコク味を形成する重要な糖質として知られている。
【０００４】
ニゲロースを含むニゲロオリゴ糖は、食品の二次機能改善効果として、低塩下での旨味保持や高甘味度甘味料の異味改善などの味質改善機能［特許文献１、特許文献２］、そしてアントシアニン系色素の退色抑制効果を持つことが知られている ［特許文献３］。すなわち、ニゲロースを含むニゲロオリゴ糖は、特有の味質のため塩なれ効果を有すると同時に、低塩下での旨味保持さらには旨味増強をも可能とするほか、保存中の温度や光の影響により退色しやすいアントシアニン系色素が紫外線や太陽光、そして温度による退色を抑制する効果を持つ。
【０００５】
ニゲロースを含むニゲロオリゴ糖の三次機能としては、抗う蝕性［非特許文献３］および免疫賦活・調節作用の生理活性が報告されている［特許文献３］。このような有用な機能を持つニゲロースの製法は、これまでに有機合成法［非特許文献４］、微生物多糖のエルシナンやニゲランの分解、シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼによる糖転移反応、あるいはグルコアミラーゼによる縮合反応、α−１，３−およびα−１，６−グルコシド結合からなる環状四糖に酢酸を作用させ得る方法［非特許文献５］などを用いた方法が報告されている。現在までに最も経済性に優れた方法としては、デンプンを原料として酵素的に糖転移反応・縮合反応を利用する方法が開示されている［特許文献４、特許文献５］。
【０００６】
しかしながら、これらに記載された方法によって得られるニゲロースは、液状または非晶質の粉末である。この非晶質の粉末は、吸湿性が高く粉末状態を維持することが極めて困難であり、容易にベタ付いてしまい、いわゆる泣き現象を起こしてしまうため、粉末としての安定性に欠けるものであった。そのため、このような非晶質ニゲロースを使用する場合には、乾燥剤の併用や凍結保存の必要があった。
【０００７】
一方、ロイコノストック・メセンテロイデスＢ株由来のデキストランを酢酸分解し、活性炭カラムでニゲロースを分離後、８０％メタノール中で保存することにより結晶ニゲロースが生成したと報告がある［非特許文献６］。
しかしながら、この報告には、ニゲロースの純度や濃度などの結晶化条件の記載が一切ない。さらに、この報告後、結晶ニゲロースまたはそれを含有する含蜜結晶を生成した報告はなく、Ｋ．Ｔａｋｅｏ ａｎｄ Ｓ． Ｍａｔｓｕｚａｋｉらの報告では、ニゲロースは非晶質の粉末として得られ、結晶化することができなかったと記載されている［非特許文献７］。このように、結晶ニゲロースまたはそれを含有する含蜜結晶を得る方法は全く確立されておらず、工業的生産は不可能であった。
【非特許文献１】Ｓ．Ａ． Ｂａｒｋｅｒ， Ｅ．Ｊ． Ｂｏｕｒｎｅ， Ｍ． Ｓｔａｃｅｙ， Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ． Ｐａｒｔ Ｉ． Ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｌｙｇｌｕｃｏｓａｎ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ ｂｙ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ １５２， Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， （１９５３） ３０８４−３０９０．
【非特許文献２】松田和雄， 麻生清， 非醗酵性糖に関する研究 （第４報） 清酒並びに米麹汁中のｕｎｆｅｒｍｅｎｔａｂｌｅ ｄｉｓａｃｃｈａｒｉｄｅについて， 醗工， ３１ （１９５３） ２１１−２１３．， 松田和雄， 廣島吾郎， 柴崎一雄， 麻生清， 非醗酵性糖に関する研究 （第１１報） 清酒及び米麹汁中のｕｎｆｅｒｍｅｎｔａｂｌｅ ｄｉｓａｃｃｈａｒｉｄｅについて（ＩＩＩ）， ｓａｋeｂｉｏｓｅとｎｉｇｅｒｏｓｅ及びｙ−ｓｕｇａｒの同定，醗工， ３２ （１９５４） ４９８−５０１．
【非特許文献３】Ｓ． Ｉｍａｉ， Ｋ． Ｔａｋｅｕｃｈｉ， Ｋ． Ｓｈｉｂａｔａ， Ｓ． Ｙｏｓｈｉｋａｗａ， Ｓ． Ｋｉｔａｈａｔａ， Ｓ． Ｏｋａｄａ， Ｓ． Ａｒａｙａ， Ｔ． Ｎｉｓｈｉｚａｗａ， Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｓｕｇｅｒｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｇａｉｎｓｔ ｓｕｃｒｏｓｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ａｄｈｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｇｌｕｃａｎ ａｎｄ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ， Ｊ． Ｄｅｎｔ． Ｒｅｓ．， ６３ （１９８４） １２９３−１２９７．
【非特許文献４】Ｋ． Ｔａｋｅｏ， Ｓ． Ｋｉｔａｍｕｒａ， Ｙ． Ｍｕｒａｔａ， Ｓｙｎｙｈｅｓｉｓ ｏｆ ｎｉｇｅｒｏ−ｏｌｉｇｏｓａｃｈａｒｉｄｅｓ， Ｃｒａｂｏｈｙｄｒ． Ｒｅｓ．， ２２４ （１９９２） １１１−１２２．
【非特許文献５】日本農芸化学会２００３年度大会講演要旨集 ｐ．６８
【非特許文献６】Ｆ． Ｙａｍａｕｃｈｉ， Ｋ． Ｍａｔｓｕｄａ， Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ β−Ｎｉｇｅｒｏｓｅ， Ｎａｔｕｒｅ， ２０４ （１９６４） １０８８．
【非特許文献７】Ｃｒａｂｏｈｙｄｒ． Ｒｅｓ．， １１３ （１９８３） ２８１−２８９．
【特許文献１】特開平１０−２１０９４９号公報
【特許文献２】特開平１０−２３４３３１号
【特許文献３】特許第３３６４４４２号明細書
【特許文献４】特開平９−２９９０９５号公報
【特許文献５】特開２００３−１６９６６５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明者らは、高純度化され夾雑二糖類含有量が低減されたニゲロースを用いて結晶化を行うことにより、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得る方法を発明し、既に特許出願している（特願２００５−０３３９１８号）。本方法により、従来製造が不可能と考えられていた結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶の提供が可能になった。しかし、この方法は、高純度化されたニゲロースを使用するため、ニゲロースを高度に精製するプロセスが必要となる。そこで、比較的低純度のニゲロースからでも結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることができる手段が求められていた。
【０００９】
本発明の目的は、比較的低純度のニゲロースからであっても結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることができる方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記目的を達成するために鋭意検討を重ねた結果、起晶および／または育晶のために攪拌を行うことにより、固形分当たりのニゲロース含有量が５０質量％以上の糖溶液から、ニゲロースを結晶化させることができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
即ち、上記目的を達成する手段は、以下の通りである。
[１] 固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法であって、
起晶および／または育晶のための撹拌工程を含むことを特徴とする、前記方法。
[２] 前記糖溶液の固形分濃度が１０質量％以上である[１]に記載の方法。
[３] 前記糖溶液の溶媒は、水、エタノール、およびメタノールからなる群から選ばれる少なくとも一種である[１]または[２]に記載の方法。
[４] 前記糖溶液の溶媒は、８０容量％未満のメタノールを含むメタノール水溶液である[３]に記載の方法。
[５] 前記結晶の析出は、種結晶存在下で行われる[１]〜[４]のいずれかに記載の方法。
[６] 起晶および／または育晶のための冷却工程を含む[１]〜[５]のいずれかに記載の方法。
[７] 前記ニゲロース含蜜結晶を粉末化することを含む[１]〜[６]のいずれかに記載の方法。
[８] [１]〜[７]のいずれかに記載の方法により得られたニゲロース含蜜結晶から分蜜することにより結晶ニゲロースを得ることを特徴とする結晶ニゲロースの製造方法。
[９] 前記結晶ニゲロースを粉末化することを含む[８]に記載の方法。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の方法によれば、比較的低純度のニゲロースから、結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶を得ることができる。更に、本発明の方法によれば、比較的低濃度の結晶母液から結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明について更に詳細に説明する。
本発明のニゲロース含蜜結晶の製造方法は、固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法であって、起晶および／または育晶のための撹拌工程を含むことを特徴とする。ここで、「ニゲロース含蜜結晶」とは、結晶ニゲロースを含む含蜜結晶をいうものとする。
【００１４】
本発明において使用される原料ニゲロースは、特に限定されず、公知の方法によって得られたものであることができる。具体的には、例えば、経済性に優れたデンプンを原料として酵素的に糖転移反応・縮合反応を利用する方法（特開平９−２９９０９５号公報、特許第３３６４４４２号明細書参照）、α−１，３−およびα−１，６−グルコシド結合からなる環状四糖に酢酸を作用させ得る方法（日本農芸化学会２００３年度大会講演要旨集 ｐ．６８参照）によって得られたニゲロースを用いることができる。また、試薬として市販されているニゲロースを必要に応じて精製して用いることができる。
【００１５】
本発明では、原料ニゲロースを適当な溶媒に溶解して糖溶液を調製する。前記糖溶液は、固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む。前述の方法によって調製されたニゲロースまたは市販のニゲロースが所望の純度を有する場合には、そのまま糖溶液の調製に用いることができる。また、ニゲロース以外の夾雑糖類、特に夾雑二糖類を、イオン交換樹脂、シリカゲルや活性炭を用いたカラムクロマトグラフィーによる分画、アルコールやアセトンなどの有機溶媒による分別、適度な分離性能を有する膜による分離により除去して原料ニゲロースを高純度化することができる。また、ニゲロースを利用せず夾雑糖類を資化または分解する微生物、例えば乳酸菌、酢酸菌、酵母などによる発酵処理、ニゲロースを分解せず夾雑糖類を分解する酵素、例えばグルコアミラーゼなどによる酵素処理の１種または２種以上の方法により夾雑糖類、特に夾雑二糖類を除去することにより、原料ニゲロースを高純度化することもできる。なお、糖組成は、例えば高速液体クロマトグラフィー等の公知の方法で求めることができる。
【００１６】
上記のように必要に応じて高純度化した原料ニゲロースを用いて調製された糖溶液は、固形分当たりのニゲロース含有量が５０質量％以上、好ましくは６０質量％以上、より好ましくは６９〜９９質量％である。また、原料ニゲロースのニゲロース以外の二糖類含有量は、３５質量％以下であり、好ましくは２５質量％以下、より好ましくは０．５〜２０質量％である。前記糖溶液の固形分当たりのニゲロース含有量が５０質量未満になると結晶を析出させることが困難となる。
【００１７】
結晶析出のために使用する糖溶液は、原料ニゲロースを適当な溶媒に溶解することによって調製することができる。原料ニゲロース溶解時には、溶液を加温することが好ましい。溶液の加温温度は適宜設定することができる。
【００１８】
本発明では、起晶および／または育晶のために攪拌を行うため、前記糖溶液の固形分濃度は、攪拌の容易性を考慮して決定することが好ましい。また、結晶化を容易に行うためには、前記糖溶液は、ニゲロースの過飽和溶液であることが好ましい。以上の点を考慮すると、前記糖溶液は、固形分濃度が１０質量％以上のニゲロース溶液であることが好ましく、固形分濃度１５質量％以上のニゲロース溶液であることが更に好ましく、固形分濃度２５〜５５質量％のニゲロース過飽和溶液であることがより一層好ましい。
【００１９】
糖溶液の溶媒としては、水、エタノール、およびメタノールからなる群から選ばれる少なくとも一種を用いることができ、エタノール水溶液またはメタノール水溶液を用いることが好ましい。エタノール水溶液およびメタノール水溶液の濃度は、適宜設定することができる。本発明では、例えば、２容量％以上、好ましくは５〜９９容量％のエタノールを含むエタノール水溶液、８０容量％未満、好ましくは２〜７９容量％のメタノールを含むメタノール水溶液を用いることができる。
【００２０】
本発明では、前記糖溶液を、例えば室温下（例えば１０〜４０℃程度）で助晶缶にとり、必要に応じて温度制御を行いながら攪拌しつつ徐冷することにより、結晶ニゲロースを含む含蜜結晶（ニゲロース含蜜結晶）をマセキットとして得ることができる。上記攪拌時の温度は、ニゲロース溶液が過飽和度を保つ温度、好ましくは１０〜９０℃の範囲の温度とすることができる。前記攪拌は、例えば、（１）攪拌羽根を使用する方法、（２）マグネチックスターラーを使用する方法、（３）エアーを吹き込む方法、（４）助晶缶自体を回転または往復振とうなどさせる方法、（５）超音波振動などで、助晶缶自体を振動させる方法、（６）これらの方法を組み合わせる方法、等の公知の方法で行うことができる。いずれの方法においても、母液の泡立ち、発熱、着色、変性、過度の酸化などを伴わないことを考慮して、攪拌条件を設定することが好ましい。
【００２１】
また、撹拌速度は、結晶母液が十分に撹拌されればよく、容器の大きさや形状に合わせて結晶化率が高く経済的に優れる速度を適宜設定することができる。すなわち、小さな容器では十分に撹拌するため、速い撹拌速度が必要となり、大きな容器では遅い撹拌速度でも十分である。攪拌速度は、例えば、０．３〜２００ ｒｐｍの範囲であることが好ましく、０．５〜１７０ ｒｐｍの範囲であることが更に好ましく、１〜１５０ ｒｐｍの範囲であることがより一層好ましい。攪拌を行う時間は、結晶化の状態を観察しつつ決定することができ、例えば1時間〜１ヶ月間、好ましくは１０時間〜２週間とすることができる。
【００２２】
結晶の析出は、結晶ニゲロースまたはニゲロース含蜜結晶を種結晶として含む糖溶液を用いて行うことが好ましい。種結晶の量は、適宜調整することができる。また、糖溶液からの起晶および／または育晶を容易に行うためには、糖溶液を冷却することが好ましい。冷却温度は、適宜設定することができる。
【００２３】
得られたマセキットは、分蜜方法、ブロック粉砕方法、流動造粒方法、噴霧乾燥方法等の公知の方法で処理することができる。マセキットを分蜜工程に付してニゲロース以外の糖成分を除去（分蜜）することにより、結晶ニゲロースを得ることができる。分蜜は公知の方法で行うことができる。例えばマセキットを遠心分離して得られた結晶成分を洗浄、乾燥することにより、ニゲロース含蜜結晶から結晶ニゲロースを精製することができる。こうして得られた結晶ニゲロースは、更に例えば前述の公知の方法によって粉末化することもできる。また、分蜜方法を行わずにマセキットを粉末化することにより、粉末ニゲロース、即ち、結晶ニゲロースと分蜜液とを含有するニゲロース含蜜結晶粉末を得ることができる。また、マセキットに他の糖類を添加した後に粉末化することも可能である。また、マセキットを分蜜工程に付した後に他の糖類を添加して粉末化することもできる。こうして得られた粉末ニゲロースは、結晶ニゲロースを８０質量％以上含有するものであることができ、結晶ニゲロース以外の成分として、分蜜液および／またはニゲロース以外の糖類を含有するものであることができる。分蜜液および／または他の糖類は、ブドウ糖、果糖、トレハロース、コージビオース、マルトース、イソマルトース、乳糖、水あめ、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、乳果オリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、マンノオリゴ糖、マンノース含有へテロオリゴ糖、デキストリン、および糖アルコールからなる群から選ばれる少なくとも一種を含むものであることができる。
【００２４】
本発明の方法により、純度８５％以上、好ましくは純度９０〜９９．９％の結晶ニゲロースおよびそれを含むニゲロース含蜜結晶を得ることができる。なお、ここで純度とは、質量％をいうものとする。結晶ニゲロースおよびそれを含むニゲロース含蜜結晶の粉末は、非晶質のニゲロース粉末と比べて吸湿性が低く取り扱いが容易である。吸湿性が低いとは、空調された通常の室内にて粉末ニゲロースを取り扱った場合、容易にべた付かず泣きや潮解が起こらないことをいう。より具体的には、例えば２５℃、相対湿度６５％の環境に放置した場合、７％以上の重量変化や潮解を起こさないことを意味する。
【００２５】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、他の甘味成分と混合して使用することもできる。例えば、ショ糖、水飴、粉飴、ブドウ糖、果糖、マルトース、異性化糖、乳糖、蜂蜜、カップリングシュガー、フラクトシルオリゴ糖等の各種糖類、エリスリトール、ソルビトール、マルチトール、キシリトール、マンニトール、ラクチトール、還元キシロオリゴ糖、還元グルコースシラップ等の糖アルコール、アスパルテーム、アリテーム、サッカリン、グリチルリチン、ステビオシド、レバウディオシド、スクラロース、アセスルファムＫ等の高甘味度甘味、グリシン、アラニンなどの甘味料から選ばれた１種又は２種以上と組み合わせて用いることができる。また、必要ならば、デキストリン、澱粉などのような増量剤と混合して使用することもできる。
【００２６】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、無毒、無害の甘味料で、芳醇で深み・コク味を有する独特の甘味を呈する白色の粉末または固形物である。耐熱性、耐酸性にも優れた安定な糖質であり、加熱により適度に着色し、他の素材と混合し加工しても異臭などを発生することはなく、混合した他の素材を損なうこともほとんどない。また、浸透圧調節性、賦形性、照り付与性、保湿性、粘性、離水防止性、固結防止性、保香性、変色防止性、安定性、他の糖の晶出防止性、難醗酵性、デンプン老化防止性、蛋白質変性防止性、脂質劣化防止性など種々の性質をも具備している。したがって、結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶は、そのままで、または他の甘味成分と混合して、甘味料、難醗酵性食品素材、呈味改良剤、風味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、保香剤、変色防止剤、脂質劣化防止剤、安定剤、賦形剤、粉末化基材などとして好適に用いることができる。さらに結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶は吸湿性が低く粉末状でも付着・固結防止性を有していることから、プルラン、ヒドロキシエチルスターチおよびポリビニルピロリドンなどの１種または２種以上の結合剤と併用して錠剤や糖衣錠として利用することもできる。このため、そのまま、または必要に応じて公知材料と適宜併用して、各種飲食物、嗜好物、飼料、餌料、化粧品、医薬品等の各種組成物に有利に利用できる。公知の材料としては、例えば、呈味料、着色料、着香料、強化剤、乳化剤、酸化防止剤、紫外線防止剤、または薬効成分など適宜利用できる。
【００２７】
さらに、結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶は、通常の飲食物の甘味付けや呈味改良、風味改良、品質改良等の効果の他、塩味や他の旨味をまろやかにしつつ引き立てる効果も有しているので、例えば、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、各種ふりかけ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、麺つゆ、ソース、ケチャップ、焼肉等のタレ、カレールウ、シチューの素、だしの素、各種複合調味料、みりん、新みりん、テーブルトップシュガー、コーヒーシュガー、中華の素、天つゆ等の各種調味料、合成酒、造醸酒、清酒、果実酒、発泡酒、ビールなどの酒類、コーヒー、ココア、ジュース、炭酸飲料、乳酸飲料、乳酸菌飲料などの清涼飲料などに有効に使用することができる。
【００２８】
また、低甘味で非常に上品な甘味を有し、甘味付けとしてだけでなく、甘味質、味質の改善効果も有し、更に、艶出し効果や蛋白質変性防止効果、賦コク等の効果も有しているので、煎餅、あられ、かりん糖、おこし、餅類、饅頭、求肥、餡類、羊羮、ゼリー、カステラ、飴玉、パン、パイ、クラッカー、ビスケット、プリン、ワッフル、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、スポンジケーキ、ドーナツ、アイスクリーム、シャーベット等の各種飲食物や、フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト等のペースト類、ジャム、マーマレード等の各種ジャム類、福神漬、千枚漬、らっきょう漬等の漬物類、ハム、ソーセージ、蒲鉾、ちくわ等の畜産練製品、水産練製品及びその原材料のすり身、各種珍味類、佃煮等に用いることができる。上記のような飲食物等に含有させるには、その飲食物等の任意の製造工程において、例えば、混和、混捏、溶解、融解、浸漬、浸透、散布、被覆、噴霧、注入、晶出、固化、造粒等の公知の方法を適宜選択して行うことができる。上記したような効果の他に、飲食品成分の結晶化防止、アミラーゼ、グリコシダーゼ、リパーゼ、プロテアーゼなどの酵素安定化等の効果も有している。
【００２９】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、家畜、家禽、その他、ミツバチ、蚕、魚などの飼育動物ための飼料、餌料などの嗜好性向上のほか、免疫賦活能、ナチュラルキラー細胞活性化能、ＱＯＬ(Quality of Life)向上能などの性質を有することから、感染症防止、滋養強壮、健康維持、ストレス低減などの目的にも使用できる。上記のような飼料、餌料などに使用する場合、トウモロコシ、マイロ、大麦などの穀類、グルコースやデンプンなどの他の糖質、植物や動物由来の蛋白質、リジン、スレオニンやトリプトファンのアミノ酸類、ビタミンＡ、ビタミンＢ２、ビタミンＢ１２、ビタミンＥなどのビタミン類、ホルモン類、抗生物質などと混合して使用することができる。
【００３０】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、他の天然糖質と同様に皮膚へ適用した場合、低刺激性かつ皮膚の水分保持にも奏功するので、皮膚外用組成物に配合して使用することができる。例えば、化粧品として、油脂、アルコール類、界面活性剤、色素、香料、ホルモン類、ビタミン類、動物エキス、植物エキス、微生物エキス、塩類、紫外線吸収剤、抗酸化剤、殺菌剤、制汗剤、消臭剤、清涼剤、糖類、キレート剤、増粘剤などから適宜選ばれる１種または２種以上とともに配合することができる。
【００３１】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、輸液製剤、経腸栄養剤などの医薬品にも適用できる。結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、結晶グルコースや結晶マルトースと同様のカロリーを持つことや、免疫賦活能、ナチュラルキラー細胞活性化能、インターロイキン−１２産生誘導能、ＱＯＬ向上能などの性質を具備することから、栄養補給、栄養管理、感染症防止、体調維持などの目的に使用できる。上記のような輸液製剤に使用する場合、グルコース、フルクトース、ソルビトール、キシロースなどの他の糖質、リジン、バリン、イソロイシンなどの必須アミノ酸やアラニン、アルギニン、プロリンなどのアミノ酸類のほか、脂質、ミネラル、ビタミン、微量元素などと混合して使用することができる。
【００３２】
前述のように、ニゲロースは、免疫賦活能、ナチュラルキラー細胞活性化能、インターロイキン−１２産生誘導能、ＱＯＬ向上能などの諸特性を有し、これらの特性を利用して、栄養補給、栄養管理、滋養強壮、健康維持、感染症防止、体調維持、ストレス低減などの目的で、食品、医薬品、飼料、餌料等に添加することができる。本発明の結晶ニゲロース、ニゲロース含蜜結晶および粉末ニゲロースは、吸湿性が低く取り扱いが容易であるため、食品、医薬品、飼料、餌料の調製に好適に用いることができる。更に、優れた保存性および安定性を有するため、例えば錠剤や粉末薬のように調製後も結晶性を維持した状態で使用、流通される用途に好適である。
【００３３】
なお、上記目的でニゲロースを使用する場合の使用量およびその効果については、以下の文献を参照することができる。
特許３３９６１２９号明細書、特開平１１−２２８４２５号公報、特開２００１−０６４１７４号公報、特開２００２−０８０３６４号公報、特開２００２−２６５３６６号公報、特開２００２−２６５３８５号公報、特開２００２−３２５５５５号公報、Biosci Biotechnol Biochem 63: 373-8,1999）、Int Immunopharmacol 2: 151-9, 2002、薬理と治療 29: 815-26,2001、薬理と治療 30:81-90, 2002.
【実施例】
【００３４】
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によりなんら限定されるものではない。なお、以下において「％」とは、特に断らない限り「質量％」を示す。
［参考例１］
ニゲロースの調製（１）
ニゲロオリゴ糖を固形分あたり４０％以上含有する市販ニゲロオリゴ糖含有シラップ（日食テイストオリゴ、日本食品化工(株)製）を原料に、以下のようにニゲロースを調製した。固形分が７％になるようにテイストオリゴを水で溶解した液にパン酵母を接種し、室温にて２４時間醗酵させテイストオリゴ中に含まれるグルコース、マルトースそしてマルトトリオースを資化後、グルコアミラーゼを添加し糖化液中のデキストリンやマルトオリゴ糖をグルコースにまで分解させ共存する酵母により随時醗酵させ、ニゲロオリゴ糖を固形分当たり９５％含有する水溶液を得た。この水溶液を活性炭による脱色、イオン交換樹脂による精製を行った後、固形分濃度５０％まで濃縮し、ニゲロオリゴ糖を９５％含有するシラップを得た。このシラップをあらかじめ水で平衡化された活性炭カラムに供し、グルコースを除去後２％エタノール溶液によりニゲロースを溶出させた後（画分Ａ）、５％エタノール溶液によりニゲロースと他の糖を溶出させた（画分Ｂ）。溶出した画分ＡとＢを回収し、それぞれろ過、濃縮操作によるエタノールを除去、イオン交換樹脂による精製後、凍結乾燥し非結晶状の粉末を画分Ａ ２００ｇ、画分Ｂ ３００ｇを得た。それぞれの糖組成は、画分Ａ（グルコース ２％、ニゲロース ９１％、３糖類 ７％）、画分Ｂ（グルコース ２％、ニゲロース ７２％、３糖類 ２６％）であった。画分Ａの粉末を粉末Ｘ線回析法により回析Ｘ線を測定したところ、図１に示されるように回折を示さなかった。糖組成の分析方法は、高速液体クロマトグラフィーを用い、分析条件は以下の通りである。
カラム ： Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ ＮＨ２Ｐ−５０ ４Ｅ （４．６ｍｍＩＤ×２５０ｍｍ）
溶離液 ： アセトニトリル／水＝７５／２５
流速 ： ０．９ ｍｌ／ｍｉｎ
検出器 ： 示差屈折計
カラム温度 ： ３０℃
【００３５】
［参考例２］
ニゲロースの調製（２）
ニゲロオリゴ糖を固形分あたり４０質量％以上含有する市販ニゲロオリゴ糖含有シラップ（日食テイストオリゴ、日本食品化工(株)製）を原料に、以下のようにニゲロースを調製した。固形分が７質量％になるようにテイストオリゴを水で溶解した液にパン酵母を接種し、室温にて２４時間醗酵させテイストオリゴ中に含まれるグルコース、マルトースそしてマルトトリオースを資化後、グルコアミラーゼを添加し糖化液中のデキストリンやマルトオリゴ糖をグルコースにまで分解させ共存する酵母により随時醗酵させ、ニゲロオリゴ糖を固形分当たり９５質量％含有する水溶液を得た。この水溶液を活性炭による脱色、イオン交換樹脂による精製を行った後、固形分濃度５０質量％まで濃縮し、ニゲロオリゴ糖を９５質量％含有するシラップを得た。このシラップをあらかじめ水で平行化したイオン交換カラム（樹脂， ＸＦＳ−４３２７８）に供し、２糖類画分（グルコース １１質量％、ニゲロース ３６質量％、３糖類 ５３質量％）を回収した（画分Ｘ）。これを固形分濃度 ５０質量％まで濃縮し、あらかじめ水で平衡化された活性炭カラムに供し、グルコースを除去後５容量％エタノール溶液によりニゲロースを溶出させた（画分Ｃ）。溶出した画分Ｃを回収し、ろ過、濃縮操作によるエタノールを除去、イオン交換樹脂による精製後、凍結乾燥し非結晶状の粉末を３００ｇ得た。その糖組成は、画分Ｃ（グルコース １質量％、ニゲロース ８６質量％、３糖類 １３質量％）であった。糖組成の分析方法は、参考例１と同様に行った。
【００３６】
［参考例３］
ニゲロースの調製（３）
参考例１および２で得られた画分Ｂと画分Ｃを１５：８５の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｄとして調製した。さらに、画分Ｃと画分Ｘを５０：５０の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｅ、画分Ｃと画分Ｘを７０：３０の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｆ、画分Ｃと画分Ｘを７５：２５の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｆとして調製した。それぞれの糖組成は、画分Ｄ（グルコース １質量％、ニゲロース ８４質量％、３糖類 １５質量％）、画分Ｅ（グルコース ６質量％、ニゲロース ６１質量％、３糖類 ３３質量％）、画分Ｆ（グルコース ８質量％、ニゲロース ５１質量％、３糖類 ４１質量％）、画分Ｇ（グルコース ８．５質量％、ニゲロース ４８．５質量％、３糖類 ４３質量％）であった。糖組成の分析方法は、参考例１と同様に行った。
【００３７】
[実施例１]
参考例１で得た粉末ニゲロース（画分Ａ；ニゲロース含有量９１％）を１４〜５０質量％の濃度に、７８容量％メタノール溶液に加温しながら溶解し５ｍｌずつ調製した。この母液に結晶ニゲロースをそれぞれ２ｍｇずつ加え、撹拌しながら（１５０ ｒｐｍ）、２５℃で放置した。攪拌を一晩続けたところ、母液の白濁が認められ、２．５日で完全に白濁したマセキットを得た。それぞれのマセキットを遠心分離により分蜜を行い、結晶を洗浄後乾燥し、白色粉末を得た。これら粉末を偏光顕微鏡にて観察したところ偏光像が認められたため、結晶性物質であることが確認された。また、これら粉末を参考例１と同様の条件で分析したところ、その糖組成は、いずれもニゲロース含有量９５質量％以上であった。なお、マセキットを遠心分離により分蜜して得られた分蜜液の糖組成、固形分そして質量から、分蜜液中のニゲロース含量を求め、以下の式により結晶化率を算出した。結果を図２に示す。なお、結晶化率が１０％以上であれば、結晶が得られたと判断することができる。
【００３８】
【数１】
【００３９】
[実施例２〜７、比較例１]
画分Ｂ〜Ｇまでの粉末ニゲロースを表１に示す濃度に、７８容量％メタノール溶液に加温しながら溶解し５ｍｌずつ調製した。この母液に結晶ニゲロースをそれぞれ２ｍｇずつ加え、撹拌しながら（２００ ｒｐｍ）、２５℃で放置した。攪拌を一晩続けたところ、実施例２〜７では、母液の白濁が認められ、２．５日で完全に白濁したマセキットを得た。それに対し、糖溶液中の固形分当たりのニゲロース含有量が４８．５質量％の比較例１では、結晶化は起こらなかった。
実施例２〜７で得られたそれぞれのマセキットを遠心分離により分蜜を行い、結晶を洗浄後乾燥し、白色粉末を得た。これら粉末を偏光顕微鏡にて観察したところ偏光像が得られたため結晶性物質であることが確認された。また、これら粉末を参考例１と同様の条件で分析したところ、その糖組成は、いずれもニゲロース含有量９０質量％以上であった。実施例１と同様に結晶化率を算出した。結果を表１に示す。
【００４０】
【表１】
【００４１】
[実施例８]
粉末ニゲロース（画分Ｄ；ニゲロース含有量８４％）を７５容量％メタノール溶液に加温しながら溶解し固形分濃度５０質量％と３５質量％の結晶母液を調製した。それぞれ５０ ｒｐｍと１５０ ｒｐｍで撹拌しながら、２５℃で放置した。攪拌開始後１週間で母液の白濁が認められ、３週間で白濁したマセキットを得た。それぞれのマセキットを遠心分離により分蜜を行い、結晶を洗浄後乾燥し、白色粉末を得た。これら粉末を偏光顕微鏡にて観察したところ偏光像が得られたため結晶性物質であることが確認された。また、これら粉末を参考例１と同様の条件で分析したところ、その糖組成は、いずれもニゲロース含有量９０質量％以上であった。実施例１と同様に結晶化率を算出した。結果を表２に示す。この結果から、結晶母液の撹拌が十分に行われると、結晶化率が上昇することがわかる。
【００４２】
【表２】
【産業上の利用可能性】
【００４３】
以上説明したように、本発明によれば、低純度かつ低濃度のニゲロースから、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることできる。本発明によれば、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を工業的に大量に製造することができる。また、非晶質の粉末ニゲロースは、吸湿性が高く、保存性、安定性に欠けるものであるのに対し、本発明により得られる結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、吸湿性が低く、安定性に優れる。結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、低甘味で芳醇なコク味、適度な粘性、賦形性を有し、甘味料、呈味改良剤、風味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、賦形剤、粉末化基材などとして、各種飲食物、化粧品、医薬品などの組成物に有効に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】凍結乾燥した粉末画分Ａ（非晶質）の粉末Ｘ線回析ピークを示す。
【図２】ニゲロースの結晶母液濃度と結晶化率の関係を示す。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ニゲロースは、１９５０年代にアスペルギルス・ニガー由来の微生物多糖であるニゲランの酸加水分解物中よりその構成単位の一つとして見出された、グルコースを構成糖とするα−１，３−グルコシド結合を有する二糖類であり、天然にはほとんど存在しない［非特許文献１］。
【０００３】
ニゲロースは、日本では清酒や麹汁中から単離され、非発酵性糖のサケビオースとして呼ばれていた［非特許文献２］。この名称が指し示すように、ニゲロースは、清酒、みりん、味噌、ビールそして麹汁のような醗酵食品に含まれている。その他にハチミツなどわれわれが日常的に摂取してきた飲料や食物中にその存在が確認され、これらの芳醇なコク味を形成する重要な糖質として知られている。
【０００４】
ニゲロースを含むニゲロオリゴ糖は、食品の二次機能改善効果として、低塩下での旨味保持や高甘味度甘味料の異味改善などの味質改善機能［特許文献１、特許文献２］、そしてアントシアニン系色素の退色抑制効果を持つことが知られている ［特許文献３］。すなわち、ニゲロースを含むニゲロオリゴ糖は、特有の味質のため塩なれ効果を有すると同時に、低塩下での旨味保持さらには旨味増強をも可能とするほか、保存中の温度や光の影響により退色しやすいアントシアニン系色素が紫外線や太陽光、そして温度による退色を抑制する効果を持つ。
【０００５】
ニゲロースを含むニゲロオリゴ糖の三次機能としては、抗う蝕性［非特許文献３］および免疫賦活・調節作用の生理活性が報告されている［特許文献３］。このような有用な機能を持つニゲロースの製法は、これまでに有機合成法［非特許文献４］、微生物多糖のエルシナンやニゲランの分解、シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼによる糖転移反応、あるいはグルコアミラーゼによる縮合反応、α−１，３−およびα−１，６−グルコシド結合からなる環状四糖に酢酸を作用させ得る方法［非特許文献５］などを用いた方法が報告されている。現在までに最も経済性に優れた方法としては、デンプンを原料として酵素的に糖転移反応・縮合反応を利用する方法が開示されている［特許文献４、特許文献５］。
【０００６】
しかしながら、これらに記載された方法によって得られるニゲロースは、液状または非晶質の粉末である。この非晶質の粉末は、吸湿性が高く粉末状態を維持することが極めて困難であり、容易にベタ付いてしまい、いわゆる泣き現象を起こしてしまうため、粉末としての安定性に欠けるものであった。そのため、このような非晶質ニゲロースを使用する場合には、乾燥剤の併用や凍結保存の必要があった。
【０００７】
一方、ロイコノストック・メセンテロイデスＢ株由来のデキストランを酢酸分解し、活性炭カラムでニゲロースを分離後、８０％メタノール中で保存することにより結晶ニゲロースが生成したと報告がある［非特許文献６］。
しかしながら、この報告には、ニゲロースの純度や濃度などの結晶化条件の記載が一切ない。さらに、この報告後、結晶ニゲロースまたはそれを含有する含蜜結晶を生成した報告はなく、Ｋ．Ｔａｋｅｏ ａｎｄ Ｓ． Ｍａｔｓｕｚａｋｉらの報告では、ニゲロースは非晶質の粉末として得られ、結晶化することができなかったと記載されている［非特許文献７］。このように、結晶ニゲロースまたはそれを含有する含蜜結晶を得る方法は全く確立されておらず、工業的生産は不可能であった。
【非特許文献１】Ｓ．Ａ． Ｂａｒｋｅｒ， Ｅ．Ｊ． Ｂｏｕｒｎｅ， Ｍ． Ｓｔａｃｅｙ， Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ． Ｐａｒｔ Ｉ． Ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｌｙｇｌｕｃｏｓａｎ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ ｂｙ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ １５２， Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， （１９５３） ３０８４−３０９０．
【非特許文献２】松田和雄， 麻生清， 非醗酵性糖に関する研究 （第４報） 清酒並びに米麹汁中のｕｎｆｅｒｍｅｎｔａｂｌｅ ｄｉｓａｃｃｈａｒｉｄｅについて， 醗工， ３１ （１９５３） ２１１−２１３．， 松田和雄， 廣島吾郎， 柴崎一雄， 麻生清， 非醗酵性糖に関する研究 （第１１報） 清酒及び米麹汁中のｕｎｆｅｒｍｅｎｔａｂｌｅ ｄｉｓａｃｃｈａｒｉｄｅについて（ＩＩＩ）， ｓａｋeｂｉｏｓｅとｎｉｇｅｒｏｓｅ及びｙ−ｓｕｇａｒの同定，醗工， ３２ （１９５４） ４９８−５０１．
【非特許文献３】Ｓ． Ｉｍａｉ， Ｋ． Ｔａｋｅｕｃｈｉ， Ｋ． Ｓｈｉｂａｔａ， Ｓ． Ｙｏｓｈｉｋａｗａ， Ｓ． Ｋｉｔａｈａｔａ， Ｓ． Ｏｋａｄａ， Ｓ． Ａｒａｙａ， Ｔ． Ｎｉｓｈｉｚａｗａ， Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｓｕｇｅｒｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｇａｉｎｓｔ ｓｕｃｒｏｓｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ａｄｈｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｇｌｕｃａｎ ａｎｄ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ， Ｊ． Ｄｅｎｔ． Ｒｅｓ．， ６３ （１９８４） １２９３−１２９７．
【非特許文献４】Ｋ． Ｔａｋｅｏ， Ｓ． Ｋｉｔａｍｕｒａ， Ｙ． Ｍｕｒａｔａ， Ｓｙｎｙｈｅｓｉｓ ｏｆ ｎｉｇｅｒｏ−ｏｌｉｇｏｓａｃｈａｒｉｄｅｓ， Ｃｒａｂｏｈｙｄｒ． Ｒｅｓ．， ２２４ （１９９２） １１１−１２２．
【非特許文献５】日本農芸化学会２００３年度大会講演要旨集 ｐ．６８
【非特許文献６】Ｆ． Ｙａｍａｕｃｈｉ， Ｋ． Ｍａｔｓｕｄａ， Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ β−Ｎｉｇｅｒｏｓｅ， Ｎａｔｕｒｅ， ２０４ （１９６４） １０８８．
【非特許文献７】Ｃｒａｂｏｈｙｄｒ． Ｒｅｓ．， １１３ （１９８３） ２８１−２８９．
【特許文献１】特開平１０−２１０９４９号公報
【特許文献２】特開平１０−２３４３３１号
【特許文献３】特許第３３６４４４２号明細書
【特許文献４】特開平９−２９９０９５号公報
【特許文献５】特開２００３−１６９６６５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明者らは、高純度化され夾雑二糖類含有量が低減されたニゲロースを用いて結晶化を行うことにより、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得る方法を発明し、既に特許出願している（特願２００５−０３３９１８号）。本方法により、従来製造が不可能と考えられていた結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶の提供が可能になった。しかし、この方法は、高純度化されたニゲロースを使用するため、ニゲロースを高度に精製するプロセスが必要となる。そこで、比較的低純度のニゲロースからでも結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることができる手段が求められていた。
【０００９】
本発明の目的は、比較的低純度のニゲロースからであっても結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることができる方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記目的を達成するために鋭意検討を重ねた結果、起晶および／または育晶のために攪拌を行うことにより、固形分当たりのニゲロース含有量が５０質量％以上の糖溶液から、ニゲロースを結晶化させることができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
即ち、上記目的を達成する手段は、以下の通りである。
[１] 固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法であって、
起晶および／または育晶のための撹拌工程を含むことを特徴とする、前記方法。
[２] 前記糖溶液の固形分濃度が１０質量％以上である[１]に記載の方法。
[３] 前記糖溶液の溶媒は、水、エタノール、およびメタノールからなる群から選ばれる少なくとも一種である[１]または[２]に記載の方法。
[４] 前記糖溶液の溶媒は、８０容量％未満のメタノールを含むメタノール水溶液である[３]に記載の方法。
[５] 前記結晶の析出は、種結晶存在下で行われる[１]〜[４]のいずれかに記載の方法。
[６] 起晶および／または育晶のための冷却工程を含む[１]〜[５]のいずれかに記載の方法。
[７] 前記ニゲロース含蜜結晶を粉末化することを含む[１]〜[６]のいずれかに記載の方法。
[８] [１]〜[７]のいずれかに記載の方法により得られたニゲロース含蜜結晶から分蜜することにより結晶ニゲロースを得ることを特徴とする結晶ニゲロースの製造方法。
[９] 前記結晶ニゲロースを粉末化することを含む[８]に記載の方法。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の方法によれば、比較的低純度のニゲロースから、結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶を得ることができる。更に、本発明の方法によれば、比較的低濃度の結晶母液から結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明について更に詳細に説明する。
本発明のニゲロース含蜜結晶の製造方法は、固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法であって、起晶および／または育晶のための撹拌工程を含むことを特徴とする。ここで、「ニゲロース含蜜結晶」とは、結晶ニゲロースを含む含蜜結晶をいうものとする。
【００１４】
本発明において使用される原料ニゲロースは、特に限定されず、公知の方法によって得られたものであることができる。具体的には、例えば、経済性に優れたデンプンを原料として酵素的に糖転移反応・縮合反応を利用する方法（特開平９−２９９０９５号公報、特許第３３６４４４２号明細書参照）、α−１，３−およびα−１，６−グルコシド結合からなる環状四糖に酢酸を作用させ得る方法（日本農芸化学会２００３年度大会講演要旨集 ｐ．６８参照）によって得られたニゲロースを用いることができる。また、試薬として市販されているニゲロースを必要に応じて精製して用いることができる。
【００１５】
本発明では、原料ニゲロースを適当な溶媒に溶解して糖溶液を調製する。前記糖溶液は、固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む。前述の方法によって調製されたニゲロースまたは市販のニゲロースが所望の純度を有する場合には、そのまま糖溶液の調製に用いることができる。また、ニゲロース以外の夾雑糖類、特に夾雑二糖類を、イオン交換樹脂、シリカゲルや活性炭を用いたカラムクロマトグラフィーによる分画、アルコールやアセトンなどの有機溶媒による分別、適度な分離性能を有する膜による分離により除去して原料ニゲロースを高純度化することができる。また、ニゲロースを利用せず夾雑糖類を資化または分解する微生物、例えば乳酸菌、酢酸菌、酵母などによる発酵処理、ニゲロースを分解せず夾雑糖類を分解する酵素、例えばグルコアミラーゼなどによる酵素処理の１種または２種以上の方法により夾雑糖類、特に夾雑二糖類を除去することにより、原料ニゲロースを高純度化することもできる。なお、糖組成は、例えば高速液体クロマトグラフィー等の公知の方法で求めることができる。
【００１６】
上記のように必要に応じて高純度化した原料ニゲロースを用いて調製された糖溶液は、固形分当たりのニゲロース含有量が５０質量％以上、好ましくは６０質量％以上、より好ましくは６９〜９９質量％である。また、原料ニゲロースのニゲロース以外の二糖類含有量は、３５質量％以下であり、好ましくは２５質量％以下、より好ましくは０．５〜２０質量％である。前記糖溶液の固形分当たりのニゲロース含有量が５０質量未満になると結晶を析出させることが困難となる。
【００１７】
結晶析出のために使用する糖溶液は、原料ニゲロースを適当な溶媒に溶解することによって調製することができる。原料ニゲロース溶解時には、溶液を加温することが好ましい。溶液の加温温度は適宜設定することができる。
【００１８】
本発明では、起晶および／または育晶のために攪拌を行うため、前記糖溶液の固形分濃度は、攪拌の容易性を考慮して決定することが好ましい。また、結晶化を容易に行うためには、前記糖溶液は、ニゲロースの過飽和溶液であることが好ましい。以上の点を考慮すると、前記糖溶液は、固形分濃度が１０質量％以上のニゲロース溶液であることが好ましく、固形分濃度１５質量％以上のニゲロース溶液であることが更に好ましく、固形分濃度２５〜５５質量％のニゲロース過飽和溶液であることがより一層好ましい。
【００１９】
糖溶液の溶媒としては、水、エタノール、およびメタノールからなる群から選ばれる少なくとも一種を用いることができ、エタノール水溶液またはメタノール水溶液を用いることが好ましい。エタノール水溶液およびメタノール水溶液の濃度は、適宜設定することができる。本発明では、例えば、２容量％以上、好ましくは５〜９９容量％のエタノールを含むエタノール水溶液、８０容量％未満、好ましくは２〜７９容量％のメタノールを含むメタノール水溶液を用いることができる。
【００２０】
本発明では、前記糖溶液を、例えば室温下（例えば１０〜４０℃程度）で助晶缶にとり、必要に応じて温度制御を行いながら攪拌しつつ徐冷することにより、結晶ニゲロースを含む含蜜結晶（ニゲロース含蜜結晶）をマセキットとして得ることができる。上記攪拌時の温度は、ニゲロース溶液が過飽和度を保つ温度、好ましくは１０〜９０℃の範囲の温度とすることができる。前記攪拌は、例えば、（１）攪拌羽根を使用する方法、（２）マグネチックスターラーを使用する方法、（３）エアーを吹き込む方法、（４）助晶缶自体を回転または往復振とうなどさせる方法、（５）超音波振動などで、助晶缶自体を振動させる方法、（６）これらの方法を組み合わせる方法、等の公知の方法で行うことができる。いずれの方法においても、母液の泡立ち、発熱、着色、変性、過度の酸化などを伴わないことを考慮して、攪拌条件を設定することが好ましい。
【００２１】
また、撹拌速度は、結晶母液が十分に撹拌されればよく、容器の大きさや形状に合わせて結晶化率が高く経済的に優れる速度を適宜設定することができる。すなわち、小さな容器では十分に撹拌するため、速い撹拌速度が必要となり、大きな容器では遅い撹拌速度でも十分である。攪拌速度は、例えば、０．３〜２００ ｒｐｍの範囲であることが好ましく、０．５〜１７０ ｒｐｍの範囲であることが更に好ましく、１〜１５０ ｒｐｍの範囲であることがより一層好ましい。攪拌を行う時間は、結晶化の状態を観察しつつ決定することができ、例えば1時間〜１ヶ月間、好ましくは１０時間〜２週間とすることができる。
【００２２】
結晶の析出は、結晶ニゲロースまたはニゲロース含蜜結晶を種結晶として含む糖溶液を用いて行うことが好ましい。種結晶の量は、適宜調整することができる。また、糖溶液からの起晶および／または育晶を容易に行うためには、糖溶液を冷却することが好ましい。冷却温度は、適宜設定することができる。
【００２３】
得られたマセキットは、分蜜方法、ブロック粉砕方法、流動造粒方法、噴霧乾燥方法等の公知の方法で処理することができる。マセキットを分蜜工程に付してニゲロース以外の糖成分を除去（分蜜）することにより、結晶ニゲロースを得ることができる。分蜜は公知の方法で行うことができる。例えばマセキットを遠心分離して得られた結晶成分を洗浄、乾燥することにより、ニゲロース含蜜結晶から結晶ニゲロースを精製することができる。こうして得られた結晶ニゲロースは、更に例えば前述の公知の方法によって粉末化することもできる。また、分蜜方法を行わずにマセキットを粉末化することにより、粉末ニゲロース、即ち、結晶ニゲロースと分蜜液とを含有するニゲロース含蜜結晶粉末を得ることができる。また、マセキットに他の糖類を添加した後に粉末化することも可能である。また、マセキットを分蜜工程に付した後に他の糖類を添加して粉末化することもできる。こうして得られた粉末ニゲロースは、結晶ニゲロースを８０質量％以上含有するものであることができ、結晶ニゲロース以外の成分として、分蜜液および／またはニゲロース以外の糖類を含有するものであることができる。分蜜液および／または他の糖類は、ブドウ糖、果糖、トレハロース、コージビオース、マルトース、イソマルトース、乳糖、水あめ、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、乳果オリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、マンノオリゴ糖、マンノース含有へテロオリゴ糖、デキストリン、および糖アルコールからなる群から選ばれる少なくとも一種を含むものであることができる。
【００２４】
本発明の方法により、純度８５％以上、好ましくは純度９０〜９９．９％の結晶ニゲロースおよびそれを含むニゲロース含蜜結晶を得ることができる。なお、ここで純度とは、質量％をいうものとする。結晶ニゲロースおよびそれを含むニゲロース含蜜結晶の粉末は、非晶質のニゲロース粉末と比べて吸湿性が低く取り扱いが容易である。吸湿性が低いとは、空調された通常の室内にて粉末ニゲロースを取り扱った場合、容易にべた付かず泣きや潮解が起こらないことをいう。より具体的には、例えば２５℃、相対湿度６５％の環境に放置した場合、７％以上の重量変化や潮解を起こさないことを意味する。
【００２５】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、他の甘味成分と混合して使用することもできる。例えば、ショ糖、水飴、粉飴、ブドウ糖、果糖、マルトース、異性化糖、乳糖、蜂蜜、カップリングシュガー、フラクトシルオリゴ糖等の各種糖類、エリスリトール、ソルビトール、マルチトール、キシリトール、マンニトール、ラクチトール、還元キシロオリゴ糖、還元グルコースシラップ等の糖アルコール、アスパルテーム、アリテーム、サッカリン、グリチルリチン、ステビオシド、レバウディオシド、スクラロース、アセスルファムＫ等の高甘味度甘味、グリシン、アラニンなどの甘味料から選ばれた１種又は２種以上と組み合わせて用いることができる。また、必要ならば、デキストリン、澱粉などのような増量剤と混合して使用することもできる。
【００２６】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、無毒、無害の甘味料で、芳醇で深み・コク味を有する独特の甘味を呈する白色の粉末または固形物である。耐熱性、耐酸性にも優れた安定な糖質であり、加熱により適度に着色し、他の素材と混合し加工しても異臭などを発生することはなく、混合した他の素材を損なうこともほとんどない。また、浸透圧調節性、賦形性、照り付与性、保湿性、粘性、離水防止性、固結防止性、保香性、変色防止性、安定性、他の糖の晶出防止性、難醗酵性、デンプン老化防止性、蛋白質変性防止性、脂質劣化防止性など種々の性質をも具備している。したがって、結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶は、そのままで、または他の甘味成分と混合して、甘味料、難醗酵性食品素材、呈味改良剤、風味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、保香剤、変色防止剤、脂質劣化防止剤、安定剤、賦形剤、粉末化基材などとして好適に用いることができる。さらに結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶は吸湿性が低く粉末状でも付着・固結防止性を有していることから、プルラン、ヒドロキシエチルスターチおよびポリビニルピロリドンなどの１種または２種以上の結合剤と併用して錠剤や糖衣錠として利用することもできる。このため、そのまま、または必要に応じて公知材料と適宜併用して、各種飲食物、嗜好物、飼料、餌料、化粧品、医薬品等の各種組成物に有利に利用できる。公知の材料としては、例えば、呈味料、着色料、着香料、強化剤、乳化剤、酸化防止剤、紫外線防止剤、または薬効成分など適宜利用できる。
【００２７】
さらに、結晶ニゲロースおよびそれを含有するニゲロース含蜜結晶は、通常の飲食物の甘味付けや呈味改良、風味改良、品質改良等の効果の他、塩味や他の旨味をまろやかにしつつ引き立てる効果も有しているので、例えば、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、各種ふりかけ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、麺つゆ、ソース、ケチャップ、焼肉等のタレ、カレールウ、シチューの素、だしの素、各種複合調味料、みりん、新みりん、テーブルトップシュガー、コーヒーシュガー、中華の素、天つゆ等の各種調味料、合成酒、造醸酒、清酒、果実酒、発泡酒、ビールなどの酒類、コーヒー、ココア、ジュース、炭酸飲料、乳酸飲料、乳酸菌飲料などの清涼飲料などに有効に使用することができる。
【００２８】
また、低甘味で非常に上品な甘味を有し、甘味付けとしてだけでなく、甘味質、味質の改善効果も有し、更に、艶出し効果や蛋白質変性防止効果、賦コク等の効果も有しているので、煎餅、あられ、かりん糖、おこし、餅類、饅頭、求肥、餡類、羊羮、ゼリー、カステラ、飴玉、パン、パイ、クラッカー、ビスケット、プリン、ワッフル、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、スポンジケーキ、ドーナツ、アイスクリーム、シャーベット等の各種飲食物や、フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト等のペースト類、ジャム、マーマレード等の各種ジャム類、福神漬、千枚漬、らっきょう漬等の漬物類、ハム、ソーセージ、蒲鉾、ちくわ等の畜産練製品、水産練製品及びその原材料のすり身、各種珍味類、佃煮等に用いることができる。上記のような飲食物等に含有させるには、その飲食物等の任意の製造工程において、例えば、混和、混捏、溶解、融解、浸漬、浸透、散布、被覆、噴霧、注入、晶出、固化、造粒等の公知の方法を適宜選択して行うことができる。上記したような効果の他に、飲食品成分の結晶化防止、アミラーゼ、グリコシダーゼ、リパーゼ、プロテアーゼなどの酵素安定化等の効果も有している。
【００２９】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、家畜、家禽、その他、ミツバチ、蚕、魚などの飼育動物ための飼料、餌料などの嗜好性向上のほか、免疫賦活能、ナチュラルキラー細胞活性化能、ＱＯＬ(Quality of Life)向上能などの性質を有することから、感染症防止、滋養強壮、健康維持、ストレス低減などの目的にも使用できる。上記のような飼料、餌料などに使用する場合、トウモロコシ、マイロ、大麦などの穀類、グルコースやデンプンなどの他の糖質、植物や動物由来の蛋白質、リジン、スレオニンやトリプトファンのアミノ酸類、ビタミンＡ、ビタミンＢ２、ビタミンＢ１２、ビタミンＥなどのビタミン類、ホルモン類、抗生物質などと混合して使用することができる。
【００３０】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、他の天然糖質と同様に皮膚へ適用した場合、低刺激性かつ皮膚の水分保持にも奏功するので、皮膚外用組成物に配合して使用することができる。例えば、化粧品として、油脂、アルコール類、界面活性剤、色素、香料、ホルモン類、ビタミン類、動物エキス、植物エキス、微生物エキス、塩類、紫外線吸収剤、抗酸化剤、殺菌剤、制汗剤、消臭剤、清涼剤、糖類、キレート剤、増粘剤などから適宜選ばれる１種または２種以上とともに配合することができる。
【００３１】
結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、輸液製剤、経腸栄養剤などの医薬品にも適用できる。結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、結晶グルコースや結晶マルトースと同様のカロリーを持つことや、免疫賦活能、ナチュラルキラー細胞活性化能、インターロイキン−１２産生誘導能、ＱＯＬ向上能などの性質を具備することから、栄養補給、栄養管理、感染症防止、体調維持などの目的に使用できる。上記のような輸液製剤に使用する場合、グルコース、フルクトース、ソルビトール、キシロースなどの他の糖質、リジン、バリン、イソロイシンなどの必須アミノ酸やアラニン、アルギニン、プロリンなどのアミノ酸類のほか、脂質、ミネラル、ビタミン、微量元素などと混合して使用することができる。
【００３２】
前述のように、ニゲロースは、免疫賦活能、ナチュラルキラー細胞活性化能、インターロイキン−１２産生誘導能、ＱＯＬ向上能などの諸特性を有し、これらの特性を利用して、栄養補給、栄養管理、滋養強壮、健康維持、感染症防止、体調維持、ストレス低減などの目的で、食品、医薬品、飼料、餌料等に添加することができる。本発明の結晶ニゲロース、ニゲロース含蜜結晶および粉末ニゲロースは、吸湿性が低く取り扱いが容易であるため、食品、医薬品、飼料、餌料の調製に好適に用いることができる。更に、優れた保存性および安定性を有するため、例えば錠剤や粉末薬のように調製後も結晶性を維持した状態で使用、流通される用途に好適である。
【００３３】
なお、上記目的でニゲロースを使用する場合の使用量およびその効果については、以下の文献を参照することができる。
特許３３９６１２９号明細書、特開平１１−２２８４２５号公報、特開２００１−０６４１７４号公報、特開２００２−０８０３６４号公報、特開２００２−２６５３６６号公報、特開２００２−２６５３８５号公報、特開２００２−３２５５５５号公報、Biosci Biotechnol Biochem 63: 373-8,1999）、Int Immunopharmacol 2: 151-9, 2002、薬理と治療 29: 815-26,2001、薬理と治療 30:81-90, 2002.
【実施例】
【００３４】
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によりなんら限定されるものではない。なお、以下において「％」とは、特に断らない限り「質量％」を示す。
［参考例１］
ニゲロースの調製（１）
ニゲロオリゴ糖を固形分あたり４０％以上含有する市販ニゲロオリゴ糖含有シラップ（日食テイストオリゴ、日本食品化工(株)製）を原料に、以下のようにニゲロースを調製した。固形分が７％になるようにテイストオリゴを水で溶解した液にパン酵母を接種し、室温にて２４時間醗酵させテイストオリゴ中に含まれるグルコース、マルトースそしてマルトトリオースを資化後、グルコアミラーゼを添加し糖化液中のデキストリンやマルトオリゴ糖をグルコースにまで分解させ共存する酵母により随時醗酵させ、ニゲロオリゴ糖を固形分当たり９５％含有する水溶液を得た。この水溶液を活性炭による脱色、イオン交換樹脂による精製を行った後、固形分濃度５０％まで濃縮し、ニゲロオリゴ糖を９５％含有するシラップを得た。このシラップをあらかじめ水で平衡化された活性炭カラムに供し、グルコースを除去後２％エタノール溶液によりニゲロースを溶出させた後（画分Ａ）、５％エタノール溶液によりニゲロースと他の糖を溶出させた（画分Ｂ）。溶出した画分ＡとＢを回収し、それぞれろ過、濃縮操作によるエタノールを除去、イオン交換樹脂による精製後、凍結乾燥し非結晶状の粉末を画分Ａ ２００ｇ、画分Ｂ ３００ｇを得た。それぞれの糖組成は、画分Ａ（グルコース ２％、ニゲロース ９１％、３糖類 ７％）、画分Ｂ（グルコース ２％、ニゲロース ７２％、３糖類 ２６％）であった。画分Ａの粉末を粉末Ｘ線回析法により回析Ｘ線を測定したところ、図１に示されるように回折を示さなかった。糖組成の分析方法は、高速液体クロマトグラフィーを用い、分析条件は以下の通りである。
カラム ： Ｓｈｏｄｅｘ Ａｓａｈｉｐａｋ ＮＨ２Ｐ−５０ ４Ｅ （４．６ｍｍＩＤ×２５０ｍｍ）
溶離液 ： アセトニトリル／水＝７５／２５
流速 ： ０．９ ｍｌ／ｍｉｎ
検出器 ： 示差屈折計
カラム温度 ： ３０℃
【００３５】
［参考例２］
ニゲロースの調製（２）
ニゲロオリゴ糖を固形分あたり４０質量％以上含有する市販ニゲロオリゴ糖含有シラップ（日食テイストオリゴ、日本食品化工(株)製）を原料に、以下のようにニゲロースを調製した。固形分が７質量％になるようにテイストオリゴを水で溶解した液にパン酵母を接種し、室温にて２４時間醗酵させテイストオリゴ中に含まれるグルコース、マルトースそしてマルトトリオースを資化後、グルコアミラーゼを添加し糖化液中のデキストリンやマルトオリゴ糖をグルコースにまで分解させ共存する酵母により随時醗酵させ、ニゲロオリゴ糖を固形分当たり９５質量％含有する水溶液を得た。この水溶液を活性炭による脱色、イオン交換樹脂による精製を行った後、固形分濃度５０質量％まで濃縮し、ニゲロオリゴ糖を９５質量％含有するシラップを得た。このシラップをあらかじめ水で平行化したイオン交換カラム（樹脂， ＸＦＳ−４３２７８）に供し、２糖類画分（グルコース １１質量％、ニゲロース ３６質量％、３糖類 ５３質量％）を回収した（画分Ｘ）。これを固形分濃度 ５０質量％まで濃縮し、あらかじめ水で平衡化された活性炭カラムに供し、グルコースを除去後５容量％エタノール溶液によりニゲロースを溶出させた（画分Ｃ）。溶出した画分Ｃを回収し、ろ過、濃縮操作によるエタノールを除去、イオン交換樹脂による精製後、凍結乾燥し非結晶状の粉末を３００ｇ得た。その糖組成は、画分Ｃ（グルコース １質量％、ニゲロース ８６質量％、３糖類 １３質量％）であった。糖組成の分析方法は、参考例１と同様に行った。
【００３６】
［参考例３］
ニゲロースの調製（３）
参考例１および２で得られた画分Ｂと画分Ｃを１５：８５の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｄとして調製した。さらに、画分Ｃと画分Ｘを５０：５０の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｅ、画分Ｃと画分Ｘを７０：３０の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｆ、画分Ｃと画分Ｘを７５：２５の重量比で混合した非結晶状の粉末１００ｇを画分Ｆとして調製した。それぞれの糖組成は、画分Ｄ（グルコース １質量％、ニゲロース ８４質量％、３糖類 １５質量％）、画分Ｅ（グルコース ６質量％、ニゲロース ６１質量％、３糖類 ３３質量％）、画分Ｆ（グルコース ８質量％、ニゲロース ５１質量％、３糖類 ４１質量％）、画分Ｇ（グルコース ８．５質量％、ニゲロース ４８．５質量％、３糖類 ４３質量％）であった。糖組成の分析方法は、参考例１と同様に行った。
【００３７】
[実施例１]
参考例１で得た粉末ニゲロース（画分Ａ；ニゲロース含有量９１％）を１４〜５０質量％の濃度に、７８容量％メタノール溶液に加温しながら溶解し５ｍｌずつ調製した。この母液に結晶ニゲロースをそれぞれ２ｍｇずつ加え、撹拌しながら（１５０ ｒｐｍ）、２５℃で放置した。攪拌を一晩続けたところ、母液の白濁が認められ、２．５日で完全に白濁したマセキットを得た。それぞれのマセキットを遠心分離により分蜜を行い、結晶を洗浄後乾燥し、白色粉末を得た。これら粉末を偏光顕微鏡にて観察したところ偏光像が認められたため、結晶性物質であることが確認された。また、これら粉末を参考例１と同様の条件で分析したところ、その糖組成は、いずれもニゲロース含有量９５質量％以上であった。なお、マセキットを遠心分離により分蜜して得られた分蜜液の糖組成、固形分そして質量から、分蜜液中のニゲロース含量を求め、以下の式により結晶化率を算出した。結果を図２に示す。なお、結晶化率が１０％以上であれば、結晶が得られたと判断することができる。
【００３８】
【数１】
【００３９】
[実施例２〜７、比較例１]
画分Ｂ〜Ｇまでの粉末ニゲロースを表１に示す濃度に、７８容量％メタノール溶液に加温しながら溶解し５ｍｌずつ調製した。この母液に結晶ニゲロースをそれぞれ２ｍｇずつ加え、撹拌しながら（２００ ｒｐｍ）、２５℃で放置した。攪拌を一晩続けたところ、実施例２〜７では、母液の白濁が認められ、２．５日で完全に白濁したマセキットを得た。それに対し、糖溶液中の固形分当たりのニゲロース含有量が４８．５質量％の比較例１では、結晶化は起こらなかった。
実施例２〜７で得られたそれぞれのマセキットを遠心分離により分蜜を行い、結晶を洗浄後乾燥し、白色粉末を得た。これら粉末を偏光顕微鏡にて観察したところ偏光像が得られたため結晶性物質であることが確認された。また、これら粉末を参考例１と同様の条件で分析したところ、その糖組成は、いずれもニゲロース含有量９０質量％以上であった。実施例１と同様に結晶化率を算出した。結果を表１に示す。
【００４０】
【表１】
【００４１】
[実施例８]
粉末ニゲロース（画分Ｄ；ニゲロース含有量８４％）を７５容量％メタノール溶液に加温しながら溶解し固形分濃度５０質量％と３５質量％の結晶母液を調製した。それぞれ５０ ｒｐｍと１５０ ｒｐｍで撹拌しながら、２５℃で放置した。攪拌開始後１週間で母液の白濁が認められ、３週間で白濁したマセキットを得た。それぞれのマセキットを遠心分離により分蜜を行い、結晶を洗浄後乾燥し、白色粉末を得た。これら粉末を偏光顕微鏡にて観察したところ偏光像が得られたため結晶性物質であることが確認された。また、これら粉末を参考例１と同様の条件で分析したところ、その糖組成は、いずれもニゲロース含有量９０質量％以上であった。実施例１と同様に結晶化率を算出した。結果を表２に示す。この結果から、結晶母液の撹拌が十分に行われると、結晶化率が上昇することがわかる。
【００４２】
【表２】
【産業上の利用可能性】
【００４３】
以上説明したように、本発明によれば、低純度かつ低濃度のニゲロースから、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を得ることできる。本発明によれば、結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶を工業的に大量に製造することができる。また、非晶質の粉末ニゲロースは、吸湿性が高く、保存性、安定性に欠けるものであるのに対し、本発明により得られる結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、吸湿性が低く、安定性に優れる。結晶ニゲロースおよびそれを含有する含蜜結晶は、低甘味で芳醇なコク味、適度な粘性、賦形性を有し、甘味料、呈味改良剤、風味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、賦形剤、粉末化基材などとして、各種飲食物、化粧品、医薬品などの組成物に有効に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】凍結乾燥した粉末画分Ａ（非晶質）の粉末Ｘ線回析ピークを示す。
【図２】ニゲロースの結晶母液濃度と結晶化率の関係を示す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法であって、
起晶および／または育晶のための撹拌工程を含むことを特徴とする、前記方法。
【請求項２】
前記糖溶液の固形分濃度が１０質量％以上である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記糖溶液の溶媒は、水、エタノール、およびメタノールからなる群から選ばれる少なくとも一種である請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記糖溶液の溶媒は、８０容量％未満のメタノールを含むメタノール水溶液である請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記結晶の析出は、種結晶存在下で行われる請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
起晶および／または育晶のための冷却工程を含む請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記ニゲロース含蜜結晶を粉末化することを含む請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法により得られたニゲロース含蜜結晶から分蜜することにより結晶ニゲロースを得ることを特徴とする結晶ニゲロースの製造方法。
【請求項９】
前記結晶ニゲロースを粉末化することを含む請求項８に記載の方法。
【請求項１】
固形分当たり５０質量％以上のニゲロースを含む糖溶液から結晶ニゲロースを析出させるニゲロース含蜜結晶の製造方法であって、
起晶および／または育晶のための撹拌工程を含むことを特徴とする、前記方法。
【請求項２】
前記糖溶液の固形分濃度が１０質量％以上である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記糖溶液の溶媒は、水、エタノール、およびメタノールからなる群から選ばれる少なくとも一種である請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記糖溶液の溶媒は、８０容量％未満のメタノールを含むメタノール水溶液である請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記結晶の析出は、種結晶存在下で行われる請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
起晶および／または育晶のための冷却工程を含む請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記ニゲロース含蜜結晶を粉末化することを含む請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法により得られたニゲロース含蜜結晶から分蜜することにより結晶ニゲロースを得ることを特徴とする結晶ニゲロースの製造方法。
【請求項９】
前記結晶ニゲロースを粉末化することを含む請求項８に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２００６−２９８７６３（Ｐ２００６−２９８７６３Ａ）
【公開日】平成１８年１１月２日（２００６．１１．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−１１７８１９（Ｐ２００５−１１７８１９）
【出願日】平成１７年４月１５日（２００５．４．１５）
【出願人】（０００２３１４５３）日本食品化工株式会社 (68)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年１１月２日（２００６．１１．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年４月１５日（２００５．４．１５）
【出願人】（０００２３１４５３）日本食品化工株式会社 (68)
【Ｆターム（参考）】
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