ニトリル誘導体ならびにそれらの薬学的使用および組成物
ニトリル誘導体、およびニトリル誘導体を含む薬学的組成物が開示される。本薬学的組成物は、式Ｉ：（Ｉ）の化合物およびそのような化合物の薬学的に許容される塩を含む。そのような化合物の調製のための過程と、そのような化合物の調製において使用される中間物と、過剰増殖性疾患、炎症性疾患、およびウイルスおよび細菌感染の治療、ならびに癌細胞内でのアポトーシスの誘導におけるそのような化合物の使用、もまた開示される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ニトリル誘導体およびニトリル誘導体を含む薬学的組成物に関する。本発明は、そのような化合物の薬学的に許容される塩、そのような化合物を調製するための過程、そのような化合物の調製に使用される中間体、ならびに過剰増殖性疾患、炎症性疾患、およびウイルスおよび細菌感染の治療におけるそのような化合物の使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
前述される誘導体およびそれらの薬学的に許容される塩は、ＡＫＴ阻害、細胞周期過剰増殖の阻害、癌細胞におけるアポトーシスの細胞周期特異的誘導、ＬＴＢ４活性の阻害、および抗血管形成活性のうちの１つまたは複数の特性を有し、実験動物において、腫瘍の大きさの著しい減少を示す。したがって、これらの化合物は、過剰増殖性疾患、例えば、神経膠腫を含む頭頸部癌、薬物耐性肺癌、ヒトにおけるエストロゲン依存性または非依存性癌、非小細胞肺癌、および結腸癌を含むが、これらに限定されない、哺乳動物における広範な疾患の治療に有用である。エストロゲン依存性癌の非限定例は、乳癌および卵巣癌である。それらのＬＴＢ４活性の阻害の結果として、これらの化合物は、炎症性疾患、例えば、アレルギー、喘息、および関節炎等の炎症性疾患の治療に有用であり、それらのＡＫＴ阻害およびサイトカイン活性の結果として、これらの化合物は、ウイルスおよび細菌感染の治療にも有用である。現在、前述の疾患に対する新しい治療法を見出すことに大きな関心が寄せられている。
【０００３】
置換イソチオ尿素化合物の塩は、Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＳ，Ｖｏｌ．６２，２０９９−２１０３（１９４０）、Ｓｈａｐｉｒｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．７，Ｎｏ．１，２２−３４（１９５７）、Ｋｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．８，１４９９−１５０６（１９７８）、Ｂａｕｅｒ ａｎｄ Ｗｅｌｓｈ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．５，１４４３−１４４５（１９６１）、Ｓｏｕｔｈａｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，Ｖｏｌ．１１４，５１０−５１６（１９９５）、およびＧｅｒｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ．７７，１８６（２０００）において言及されている。
【発明の概要】
【０００４】
特定の実施形態において、本発明は、ヒトを含むが、これに限定されない哺乳動物において、癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患を治療するための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、
【化１】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、アルキル、アルケニル、およびアルキニル基のアルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化２】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化３】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化４】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化５】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化８】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化９】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む。
【０００５】
一実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルから独立して選択され、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される１つまたは複数の置換基を担持し得る。
【０００６】
発明の一実施形態において、式Ｉの化合物は、式ＩＩ
【化１０】
の化合物であり、式中、ｎ、ｍ、Ｗ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、上記で定義されるとおりであり、Ｘは、薬学的に許容される酸である。一実施形態において、酸は、ＨＣｌである。別の実施形態において、酸は、ＨＢｒである。
【０００７】
発明の一実施形態において、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、または白金である。発明の別の実施形態において、Ｚは硫黄である。発明の別の実施形態において、Ｚは銅である。発明の別の実施形態において、Ｚは金である。発明の別の実施形態において、Ｚは、上記で定義されるようなハロゲン含有部分である。発明の別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ水素である。発明の一特定化合物において、Ｚは銅であり、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ水素であり、ｍは１であり、ｎは１であり、ＷはＣＨ２である。
【０００８】
発明の一実施形態において、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ビニル、アリール、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルから独立して選択され、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される、１つまたは複数の置換基を担持し得る。
【０００９】
発明の一実施形態において、Ｗは、アリールまたはビニルである。
【００１０】
本発明の一実施形態は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の４−イソチオウレイドブチロニトリル（Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはＳ−（γ−シアノプロピル）イソチオ尿素とも称される）またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む。特定の実施形態において、組成物は、「Ｋｅｖｅｔｒｉｎ」としても知られる、４−イソチオウレイドブチロニトリルの塩酸酸付加塩を含む。この塩は、以下の式を有する。
【化１１】
【００１１】
別の実施形態において、組成物は、４−イソチオウレイドブチロニトリルの臭化水素酸酸付加塩を含む。
【００１２】
別の実施形態において、本発明は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量のＳ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む。
【００１３】
別の実施形態において、本発明は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量のＳ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩から選択される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む。別の実施形態において、薬学的組成物は、以下に記載される実施例１１で説明されるように調製される化合物から選択される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、またはその遊離塩基、および薬学的に許容される担体を含む。
【００１４】
発明の一実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＣｌまたはＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、遊離塩基または塩として、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素を含まない。
【００１５】
発明の一実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒ、およびＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＣｌを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＣｌ、またはＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、およびＳ−シアノメチルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素を遊離塩基または塩として含まず、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素を遊離塩基または塩として含まない。
【００１６】
発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホネート、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ピクリン酸、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭化水素酸塩も含まない。
【００１７】
発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されない。
【００１８】
式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、その酸付加および塩基塩（二塩を含む）を含む。適切な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。例には、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプチン酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩／塩化物、臭化水素酸塩／臭化物、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、オキサル酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素／リン酸二水素、サッカラート、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。適切な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例には、アルミニウム、アルギニン、ベンザチン、カルシウム、塩素、ジエチルアミン、ジオラミン、グリシン、リシン、マグネシウム、メグルミン、オラミン、カリウム、ナトリウム、トロメタミン、および亜鉛塩が挙げられる。適切な塩に関する考察は、″Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ″ｂｙ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２００２）を参照されたい。
【００１９】
式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、式Ｉの化合物の溶液および所望の酸または塩基を、必要に応じて一緒に混合することによって容易に調製され得る。塩は、溶液から沈殿し、ろ過によって収集され得るか、または溶媒の蒸発によって回収され得る。塩中のイオン化の程度は、完全なイオン化からほぼ非イオン化まで異なり得る。
【００２０】
式Ｉの化合物およびその薬学的に許容される塩（以降、活性化合物とも称される）は、非溶媒および溶媒形態で存在し得る。活性化合物（塩、遊離塩基、遊離酸、および中性化合物の形態のものを含む）は、水和物および他の溶媒を形成し得る。「溶媒和物」とう用語は、本明細書において、発明の化合物、および１つまたは複数の薬学的に許容される溶媒分子、例えば、エタノールを含む、分子複合体を説明するために使用される。「水和物」という用語は、当該溶媒が水である場合に用いられる。薬学的に許容される溶媒は、水和物および他の溶媒を含み、結晶化の溶媒は、同位体置換、例えば、Ｄ２Ｏ、ｄ６−アセトン、ｄ６−ＤＭＳＯであり得る。活性化合物は、クラスレートまたは他の複合体として存在し得る。一般に、溶媒、水和等の形態は、非溶媒、非水和／無水等の形態と同等であり、本明細書において請求される化合物、組成物、および用途は、これらの形態、ならびに異性体、結晶、および非晶質形態、ならびに以下に論じられる同位体標識化合物を、本発明の範囲内に包含することが意図される。
【００２１】
１つまたは複数の非対称炭素原子を含有する式Ｉの化合物は、２つ以上の立体異性体として存在し得る。式Ｉの化合物がアルケニルまたはアルケニレン基、あるいはシクロアルケニル基を含有する場合、幾何ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ（またはＺ／Ｅ）異性体が可能である。化合物が、例えば、ケトまたはオキシム基、あるいは芳香族部分を含有する場合、互変異性異性（「互変異性」）が起こり得る。単一の化合物が、１種類より多くの互変異性を呈し得るということになる。式Ｉの化合物は、それらが酸付加または塩基塩を形成する場合、異性体としても存在し得、そこでは対イオンは、光学的に活性な、例えば、Ｄ−乳酸またはＬ−リシン、あるいはラセミ、例えば、ＤＬ−酒石酸またはＤＬ−アルギニンである。
【００２２】
立体異性体の混合物は、当業者に知られている従来技術によって分離され得る。例えば、″Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ″ｂｙ Ｅ．Ｌ．．Ｅｌｉｅｌ（Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９４）を参照されたい。
【００２３】
Ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ異性体は、当業者によく知られている従来技術、例えば、クロマトグラフィおよび分別結晶によって分離され得る。
【００２４】
一般に、本発明の鏡像異性的に純粋な化合物は、当該技術分野において知られている過程、例えば、適切な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成およびラセミ化合物（または塩あるいは誘導体のラセミ化合物）の溶解に従って、調製および単離され得る。例えば、ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）は、キラル高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を使用して分離され得る。代替として、ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）は、適切な光学的に活性な化合物、例えば、アルコールと反応し得るか、または式Ｉの化合物が酸性または塩基性部分を含有する場合は、酸または塩基、例えば、酒石酸または１−フェニルエチルアミンと反応し得る。得られるジアステレオ異性体混合物は、クロマトグラフィまたは分別結晶、あるいはそれらの両方によって分離され得、両方のジアステレオ異性体は、当業者によく知られている手段によって、１つまたは複数の対応する純粋な鏡像異性体に変換され得る。
【００２５】
本発明のキラル化合物（およびそのキラル前駆体）は、クロマトグラフィ、通常、ＨＰＬＣを使用して、鏡像異性的に富化された形態で、非対称固定相および移動相を有する樹脂上で取得されてもよく、それは炭化水素、通常、ヘプタンまたはヘキサンから成り、０〜５０％のイソプロパノール、通常、２〜２０％、および０〜５％のアルキルアミン、通常０．１％のジエチルアミンを含有する。溶出液の濃縮は、富化混合物をもたらす。
【００２６】
固体の状態において、本発明の化合物は、結晶または非晶質形態で存在し得る。
【００２７】
本発明は、本明細書において請求される式Ｉの薬学的に許容されるすべての同位体標識化合物を含み、そこでは１つまたは複数の原子が、同一の原子番号を有するが、原子質量または質量番号が、自然界で通常見出される原子質量または質量番号とは異なる原子と置換される。
【００２８】
発明の化合物に含有するために適した同位体の例には、水素の同位体、例えば２Ｈおよび３Ｈ、炭素の同位体、例えば１１Ｃ、１３Ｃ、および１４Ｃ、塩素の同位体、例えば３６Ｃｌ、フッ素のの同位体、例えば１８Ｆ、ヨウ素の同位体、例えば１２３Ｉおよび１２５Ｉ、窒素の同位体、例えば１３Ｎおよび１５Ｎ、酸素の同位体、例えば１５Ｏ、１７Ｏ、および１８Ｏ、リンの同位体、例えば３２Ｐ、および硫黄の同位体、例えば、３５Ｓが挙げられる。式Ｉの特定の同位体的標識化合物、例えば、放射性同位体を組み込むものは、薬物および／または基質組織分布研究において有用である。放射性同位体のトリチウム、すなわち３Ｈ、および炭素１４、すなわち１４Ｃは、それらの組み込みの容易さ、および検出の容易な手段を考慮すると、この目的で特に有用である。より重い同位体、例えば、ジウテリウム、すなわち２Ｈによる置換は、優れた代謝安定性、例えば、インビボ半減期の増加または用量要件の減少によって生じる特定の治療利益をもたらし得、したがって、いくつかの状況において好適であり得る。陽電子放出同位体、例えば、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、および１３Ｎによる置換は、陽電子放出トポグラフィ（ＰＥＴ）研究において、置換基受容体の占有を調べるために有用であり得る。
【００２９】
式Ｉの同位体的標識化合物は、一般に、当業者に知られている従来技術によって、または添付の実施例に記載されるものに類似する過程によって、以前に用いられた非標識試薬の代わりに、適切な同位体的標識試薬を使用して、調製され得る。
【００３０】
本発明は、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、細胞過剰増殖の治療のための薬学的組成物にも関する。別の実施形態において、本発明は、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、癌治療のための薬学的組成物に関する。別の実施形態において、本発明は、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、癌治療のための薬学的組成物に関する。他の実施形態において、上述される薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、この段落で参照される薬学的組成物からも同様に除外され得る。
【００３１】
本発明は、癌を含むが、それに限定されない細胞過剰増殖の治療のための、抗過剰増殖または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、用量単位形態の薬学的組成物にも関する。他の実施形態において、上述される薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、前述の薬学的組成物からも同様に除外され得る。
【００３２】
本発明は、癌を含むが、それに限定されない細胞過剰増殖の治療のための、抗過剰増殖または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、非経口薬学的組成物にも関する。医薬品は、所望される量の製品を、滅菌等張液に溶解することによって得ることができ、任意の所望される経路で容易に投与され得る。他の実施形態において、上述薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、前述の薬学的組成物からも同様に除外され得る。
【００３３】
本発明は、ヒトを含む哺乳動物において、癌を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を治療する方法にも関し、そのような治療を必要とする患者に、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルスまたは抗菌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。一実施形態において、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、およびＳ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択される。別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩から選択される。別の実施形態において、化合物は、以下の実施例１１に記載されるように調製される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、またはその遊離塩基から選択される。
【００３４】
本発明は、過剰増殖性疾患を治療する方法にも関し、そのような治療を必要とする患者に、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。別の実施形態において、本発明は、癌を治療する方法に関し、そのような治療を必要とする患者に、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。別の実施形態において、本発明は、癌を治療する方法に関し、そのような治療を必要とする患者に、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。他の実施形態において、上述薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、この段落で参照される方法からも同様に除外され得る。
【００３５】
本発明は、哺乳動物において、頭頸部癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型の肺および任意の女性癌、卵巣癌、乳癌、または結腸癌を治療する方法にも関し、そのような治療を必要とする哺乳動物に、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。本発明の一実施形態において、癌は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、および結腸癌から選択される。本発明の一実施形態において、頭部癌は、神経膠腫である。
【００３６】
本発明は、アポトーシスの誘導に応答する過剰増殖性疾患の治療を、そのような治療を必要とする哺乳動物において行う方法にも関し、それを必要とする哺乳動物に、個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩である、活性化合物の量、および少なくとも１つの二次化合物または放射線の量を投与することを含み、二次化合物は、化学療法抗癌剤および標的特異的抗癌剤から成る群から選択される抗癌剤であり、活性化合物および当該二次化合物または放射線の量は、治療効果をもたらす。発明の一実施形態において、当該二次化合物は、（ｉ）アルキル化／カルバミル化剤、（ｉｉ）白金誘導体、（ｉｉｉ）抗有糸分裂剤／チューブリン阻害剤、（ｉｖ）トポイソメラーゼ阻害剤、（ｖ）ピリミジン拮抗薬、（ｖｉ）プリン拮抗薬、（ｖｉｉ）葉酸拮抗薬、および（ｖｉｉｉ）注入放射性物質から成る群から選択される。発明の一実施形態において、当該標的特異的抗癌剤は、（ｉ）キナーゼ阻害剤、（ｉｉ）プロテアソーム阻害剤、（ｉｉｉ）ヒストン脱アセチル化阻害剤、（ｉｖ）熱衝撃タンパク質９０阻害剤、（ｖ）血管標的剤（ＶＡＴ）抗血管新生薬、およびＫＤＲチロシンキナーゼ阻害剤、（ｖｉ）モノクローナル抗体および変異体、およびモノクローナル抗体と抗体フラグメントの複合体、（ｖｉｉ）オリゴヌクレオチド系治療薬、（ｖｉｉｉ）トール様受容体／ＴＬＲ９作動薬、ＴＬＲ７作動薬およびその類似体、またはＴＬＲ７／８作動薬およびＴＬＲ７／８作動薬としての免疫刺激性ＲＮＡ、（ｉｘ）プロテアーゼ阻害剤、（ｘ）ホルモン治療薬、（ｘｉ）ブレオマイシン、（ｘｉｉ）レチノイド、（ｘｉｉｉ）ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、（ｘｉｖ）アラノシン、（ｘｖ）サイトカイン、（ｘｖｉ）インターフェロン、および（ｘｖｉｉ）細胞死受容体作動薬から成る群から選択される。発明の一実施形態において、当該式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩は、抗癌有効量の放射線と個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして投与される。本明細書で使用される、用語「有効量」は、それ自体で投与される場合に有効な活性化合物の量、および別の治療剤と併せて投与される場合に有効な活性化合物の量を含むことは、前述から明らかである。
【００３７】
本発明の方法によって治療され得る過剰増殖性疾患には、これらに限定されないが、乳房、膀胱、骨、脳、中枢および末梢神経系、結腸、内分泌腺、食道、子宮内膜、生殖細胞、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、咽頭および下咽頭、中皮腫、肉腫、卵巣、膵臓、前立腺、肛門、小腸、柔組織、睾丸、胃、皮膚、尿管、膣および外陰の癌、遺伝性癌、網膜芽腫、およびウィルムス腫瘍、白血病、リンパ腫、非ホジキン病、慢性および急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、ホジキン病、多発性骨髄腫、およびＴ細胞リンパ腫、骨髄異形成症候群、形質細胞新生組織形成、腫瘍随伴症候群、未知の原発部位の癌、薬物耐性癌、およびＡＩＤＳ関連悪性腫瘍が挙げられ、疾患は、そのような治療を必要とする哺乳動物に、抗過剰増殖または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することによって治療される。発明の一実施形態において、過剰増殖性疾患は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型肺癌および任意の女性癌、乳癌、卵巣癌、および結腸癌から成る群から選択される。
【００３８】
本発明は、上記で定義されるような式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩であるが、但し、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホン酸塩、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素 ピクリン酸、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌではないことを条件とする、化合物にも関する。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭化水素酸塩でもない。
【００３９】
本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩ではない。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されない。
【００４０】
Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノメチルエステルとも称され、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノエチルエステルとも称され、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノプロピルエステルとも称され、Ｓ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，（４−シアノフェニル）メチルエステルとも称されることに留意されたい。
【００４１】
本発明の一実施形態において、化合物は、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、およびＳ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、ならびにその薬学的に許容される塩から選択される。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩、またはその異なる薬学的に許容される塩から選択される。別の実施形態において、化合物は、以下に記載される実施例１１で説明されるように調製される化合物、またはの異なる薬学的に許容される塩、もしくはその遊離塩基から選択される。
【００４２】
本発明は、Ｚが硫黄である、式Ｉの化合物の塩酸塩付加塩を調製するための過程にも関し、チオ尿素または式
【化１２】
のチオ尿素誘導体であって、式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、式Ｉに関して上
記で定義されるとおりである、チオ尿素誘導体を、式ＮＣ−（ＣＨ２）ｎ−Ｗ−（ＣＨ２）ｍＣｌの適切なニトリル誘導体であって、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して上記で定義されるとおりである、ニトリル誘導体と、水または水／アルコール溶媒中、あるいは極性溶媒中、還流温度で反応させて、Ｚが硫黄である式Ｉの化合物を得ること、および必要に応じて、遊離塩基または異なる酸付加塩を調製することを含む。発明の一実施形態において、溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノールから選択されるアルコール、および前述のアルコールの１つまたは複数と水との混合液から選択される。
【００４３】
本発明は、式Ｉの化合物の塩酸付加塩を調製するための過程にも関し、Ｚは、銅、銀、金、白金、およびＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分から選択され、式ＮＣ−（ＣＨ２）ｎ−Ｗ−（ＣＨ２）ｍＣｌの化合物であって、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して上記で定義されるとおりである、化合物を、それぞれの金属の塩またはハロゲン含有部分の塩と反応させて、中間化合物を形成すること、および次に、中間化合物を、チオ尿素または式
【化１３】
のチオ尿素誘導体であって、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、式Ｉに関して上記で定義されるとおりである、チオ尿素誘導体と反応させて、Ｚが銅、銀、金、白金、またはＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分である、式Ｉの化合物を得ることであって、中間物の形成および酸付加塩の形成は、水または水／アルコール溶媒または極性溶媒中、還流温度で行われることと、および必要に応じて、遊離塩基または異なる酸付加塩を調製することを含む。発明の一実施形態において、溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノールから選択されるアルコール、および前述のアルコールの１つまたは複数と水との混合液から選択される。本発明は、式Ｉの化合物の臭化水素酸酸付加塩、および式Ｉの化合物のメシレート塩の調製にも関する。臭化水素酸酸付加塩は、上述の過程において、開始物質を含有する臭素を置換することによって調製される。メシレート塩は、上述の過程において、メシレート開始物質を置換することによって調製される。本発明の二塩は、塩を開始物質として使用することによって同様に調製され得る。遊離塩基が２つの塩基中心を有する場合、そのような塩を形成することが可能であり得る。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】Ｋｅｖｅｔｒｉｎ細胞毒性の時間依存性を示す。ヒト癌細胞を、異なる濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎに、５、１０、２０、３０、あるいは４５分間、または１、２、６、２４、または１２０時間曝露した。ＩＣ５０として表される細胞生存能力を、ＭＴＴ分析を使用して測定して、Ｋｅｖｅｔｒｉｎ曝露の時間に対してプロットした。
【図２】Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンの活性スペクトルを示す。Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンが、表示腫瘍細胞株の生存能力に及ぼす影響を、３倍増時間Ｋｅｖｅｔｒｉｎに連続曝露した後、ＭＴＴ分析を使用して測定した。表示値は、以下のように計算する：ログ（ＩＣ５０個別の細胞株−ＩＣ５０平均）。負の値は、細胞株が、平均よりも感受性が高いことを示すが、正の値は、細胞株が平均よりも耐性が高いことを示す。試験したすべての細胞株の平均ＩＣ５０は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの場合、４．９ｘ１０−７Ｍ、シスプラチンの場合、２．１ｘ１０−６Ｍであった。
【図３】Ｋｅｖｅｔｒｉｎに起因するマウスの体重変化を示す。０日目にＫｅｖｅｔｒｉｎ ＩＶ１００ｍｇ／ｋｇまたは２００ｍｇ／ｋｇのいずれかで処置した後のマウスの動物体重が示される。
【図４】哺乳動物癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはタキソールの有効性を示す。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌を持つマウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇＫｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入で処置し、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇタキソールの静脈内注入と比較した。
【図５】結腸癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたは５−ＦＵの有効性を示す。ＨＴ−２９腫瘍を持つ裸マウスを、７、９、および１１日目に、２００ｍｇ／ｋｇのＫｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または５−ＦＵのいずれかで処置した。
【図６】前立腺癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはシスプラチンの有用性を示す。ＰＣ−３腫瘍を有する裸マウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または７日目に１０ｍｇ／ｋｇのシスプラチンのいずれかで処置した。
【図７】ヒトＰ−糖タンパク質媒介耐性結腸癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはタキソールの有効性を示す。ＨＣＴ−１５腫瘍を有する裸マウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または腫瘍後７、９、１１、および１３日目に２２ｍｇ／ｋｇタキソールのいずれかで処置した。
【図８】Ａ５４９多剤耐性ヒト肺癌における７、９、および１１日目のＫｅｖｅｔｒｉｎ２００ｍｇ／ｋｇ、および７、９、１１、および１３日目のタキソール２２ｍｇ／ｋｇの有効性を示す。
【図９】ＮＣＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌における７、９、および１１日目のＫｅｖｅｔｒｉｎ２００ｍｇ／ｋｇ、および１３日目のタキソール２２ｍｇ／ｋｇの有効性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
Ｚが硫黄である、本発明において有用な化合物は、チオ尿素を、式ＮＣ−（ＣＨ２）ｎ−Ｗ−（ＣＨ２）ｍＣｌの適切なニトリル誘導体と反応させることによって、水中で調製され、式中、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して上で定義されるとおりである。等量のチオ尿素およびニトリルを、１０倍量の水または水／アルコール溶媒、または極性溶媒に添加し、加熱して、約４時間、大気圧で還流させる。水およびアルコールの混合液を調製するため、または極性溶媒として使用するために適したアルコールの非限定例には、メタノール、エタノール、およびイソプロパノールが挙げられる。反応混合液を蒸発させて、所望の生成物を得る。この生成物は、エタノールまたは別の適切な溶媒、例えば、イソプロパノールまたはメタノール、あるいは前述のアルコールの１つとアセトンとの混合液からの再結晶化によって精製される。結晶物質は、ろ過によって収集され、高真空下で乾燥される。Ｚが、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺが、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択される、ハロゲン含有部分である、式Ｉの化合物は、同様に調製される。
【００４６】
Ｗ部分のＹが、硫黄、酸素、または窒素である、式Ｉの化合物は、硫黄、酸素、または窒素が、Ｗ部分の環上の所望の位置にある、適切なニトリル誘導体を選択することによって調製される。
【００４７】
当業者であれば、関心対象の特定の化合物を形成するために、上述のものから条件を選択する方法、またはそこに修正を行う方法が分かる。
【００４８】
患者の疾患および状態に応じて、本明細書で使用される、用語「治療」は、治療、緩和、および予防的治療の１つまたは複数を含み得る。活性化合物は、患者の治療において、放射線と一緒に、または他の抗過剰増殖化合物、例えば、シクロホスファミド、シスプラチン、カルボプラチン、タキソール、およびアービタックス、ならびに他の認可された抗過剰増殖化合物と一緒に、複合または連続的に投与され得る。特定の疾患および患者の状態に応じて、そのような治療は、化合物単独または放射線単独のいずれよりも有効であり得る。抗過剰増殖、抗炎症、抗菌、または抗ウイルス用途の各活性化合物の正確な投与量は、患者のタイプ、治療される疾患状態のタイプ、患者の年齢、および投与経路が挙げられるが、これらに限定されない多数の因子に応じて異なる。
【００４９】
ヒト患者に投与する場合、活性化合物の総日量は、投与方法に応じて、体重１ｋｇ当り１ｍｇ〜３００ｍｇの範囲であることが予想される。例えば、経口投与は、体重１ｋｇ当り１００ｍｇ〜３００ｍｇの総日量を必要とし得るが、静脈内用量は、体重１ｋｇ当り２０ｍｇ〜２００ｍｇだけを必要とし得る。総日量は、単一または分割用量で投与されてもよい。体重約７０ｋｇの平均的ヒト対象の場合、用量は、経口投与で約１４００ｍｇ〜２１０００ｍｇ、静脈内投与で約１４０ｍｇ〜１４００ｍｇとなるであろう。医師は、体重がこの範囲外である対象、例えば、幼児および高齢者に対する用量を容易に決定することができるであろう。獣医は、他の哺乳動物に対する用量を容易に決定することができるであろう。
【００５０】
一実施形態において、発明は、体重１ｋｇ当り２００ｍｇの活性化合物を含む、静脈内溶液または懸濁液の投与を含む。上述の治療用途の場合、投与される用量は、当然のことながら、用いられる化合物、投与方法、所望される治療、および示される疾患によって異なる。総日量は、単一または分割用量で投与されてもよい。本発明は、持続放出組成物も包含する。
【００５１】
薬学的組成物は、例えば、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、持続放出製剤、懸濁液として経口投与に適した形態、滅菌溶液、懸濁液、または乳剤として非経口注入に適した形態、軟膏またはクリームとして局所投与に適した形態、または坐薬として肛門投与に適した形態であり得る。薬学的組成物は、精密用量の単一投与に適した単位用量形態であってもよい。薬学的組成物は、従来の薬学的担体または賦形剤、および活性化合物を含む。さらに、他の医薬剤、担体、アジュバント等を含んでもよい。
【００５２】
典型的な非経口投与形態は、滅菌水溶液、例えば、水性プロピレングリコールまたはデキストロース溶液中の活性化合物の溶液または懸濁液を含む。そのような投与形態は、必要に応じて、適切に緩衝され得る。
【００５３】
適切な薬学的担体は、不活性希釈剤または充填剤、水、および種々の有機溶媒を含む。薬学的組成物は、必要に応じて、追加の成分、例えば、香味剤、結合剤、賦形剤等を含有し得る。したがって、経口投与の場合、種々の賦形剤、例えば、クエン酸を含有する錠剤は、種々の崩壊剤、例えば、スターチ、アルギニン酸、および特定の複合ケイ酸と一緒に、およびスクロース、ゼラチン、およびアカシア等の結合剤と一緒に用いられてもよい。さらに、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルク等の滑沢剤は、錠剤化目的で有用な場合が多い。類似型の固形組成物は、軟および硬ゼラチンカプセルで用いられてもよい。これらの組成物の有用な成分は、ラクトース、乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールを含む。水性懸濁液またはエリキシルが、経口投与に所望される場合、そこでの活性化合物は、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、またはそれらの組み合わせと一緒に、種々の甘味剤または香味剤、着色物質または染料、および必要に応じて、乳化剤または懸濁剤と組み合わされてもよい。
【００５４】
種々の薬学的組成物を特定量の活性化合物で調製する方法は、既知であるか、または当業者に明らかとなるであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｅｒ，Ｐａ．，１５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９７５）を参照されたい。
【００５５】
本明細書に記載される用量範囲は、単なる例証であり、請求される組成物の範囲または実践を限定することを意図しない。例えば、用量は、毒性作用および／または検査値等の臨床効果を含み得る、薬物動態または薬力学的パラメータに基づいて調整されてもよい。したがって、本発明は、熟練者によって決定されるように、患者内用量上昇を包含する。化学療法剤の投与に適した用量およびレジメンを決定することは、関連技術においてよく知られており、本明細書に開示される教示が一旦提供されると、熟練者によって包含されることが理解される。
【００５６】
発明の薬学的組成物は、単一単位用量、または複数の単一単位用量として、バルクで調製、包装、または販売されてもよい。本明細書で使用される、「単位用量」は、規定量の活性化合物を含む、個別量の薬学的組成物である。活性化合物の量は、概して、対象に投与される、活性化合物の用量、またはそのような用量の便宜的分数、例えば、そのような用量の１／２または１／３に等しい。
【００５７】
発明の薬学的組成物中の活性化合物、薬学的に許容される担体、および任意の追加成分の相対量は、治療される対象が何であるが、その大きさ、および状態に応じて、さらに組成物が投与される経路に応じて異なる。例として、組成物は、０．１％〜１００％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
【００５８】
活性化合物に加えて、本発明の薬学的組成物は、上述のように、１つまたは複数の追加の治療上有効な化合物をさらに含み得る。
【００５９】
本明細書で使用される、薬学的組成物の「非経口投与」は、対象の組織の物理的な切れ目を入れることによって特徴付けられる任意の投与経路、および組織内の切れ目を通しての薬学的組成物の投与を含む。したがって、非経口投与には、非経口投与には、組成物の注入、外科的切開を通る組成物の適用、組織関数非外科的創傷を通る組成物の適用による、薬学的組成物の投与が挙げられるが、これらに限定されない。したがって、活性化合物は、血流、筋肉、または内臓に直接投与され得る。非経口投与に適した手段には、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、および皮下、および腎透析注入技術が挙げられる。そのような非経口投与に適したデバイスには、針（極微針を含む）、注射器、無針注射器、および注入装置が挙げられる。
【００６０】
非経口製剤は、通常、塩、炭水化物、および緩衝剤（好ましくは、ｐＨ３〜９）等の賦形剤を含有し得る、水溶液であるが、いくつかの適用の場合、それらは、滅菌非水溶液またはピロゲンを含まない滅菌水等適切な媒体と併せて使用される乾燥形態として、より適切に製剤され得る。
【００６１】
滅菌条件下、例えば、凍結乾燥による非経口製剤の調製は、当業者によく知られている標準薬学的技術を使用して、容易に達成され得る。
【００６２】
非経口投与に適した薬学的組成物の製剤は、薬学的に許容される担体、例えば、滅菌水または滅菌等張食塩水と組み合わされる、活性成分を含む。そのような製剤は、ボーラス投与または連続投与に適した携帯で、調製、包装、または販売され得る。注入可能な製剤は、単位用量形態、例えば、アンプルまたは保存量を含有する複数回投与容器で調製、包装、または販売され得る。非経口投与のための製剤には、懸濁液、溶液、油性または水性媒体中の乳剤、ペースト、および以下に論じられるような移植可能な持続放出または生分解性製剤が挙げられるが、これらに限定されない。そのような製剤は、懸濁剤、安定剤、または分散剤を含むが、これらに限定されない１つまたは複数の追加成分をさらに含んでもよい。非経口投与用製剤の一実施形態において、活性成分は、再構成成分の非経口投与に先立って、適切な媒体（例えば、ピロゲンを含まない滅菌水）による再構成のために、乾燥（すなわち、粉末または粒状）形態で提供される。
【００６３】
薬学的組成物は、滅菌注入可能な水性または油性の懸濁液または溶液の形態で、調製、包装、または販売され得る。懸濁液または溶液は、周知の技術に従って製剤され得、活性成分に加えて、本明細書に記載される分散剤、湿潤剤、または懸濁剤等の追加成分を含んでもよい。そのような滅菌注入可能な製剤は、非毒性の非経口投与可能な希釈剤または溶媒、例えば、水または１，３−ブタンジオール等を使用して調製され得る。他の許容される希釈剤および溶媒には、リンガー溶液、等張性塩化ナトリウム溶液、および固定油、例えば、合成モノ−またはジ−グリセリドが挙げられるが、これらに限定されない。有用な他の非経口投与可能な製剤には、活性成分を、微結晶形態で、リポソーム調製物中、または生分解性ポリマー系化合物として含むものが挙げられる。持続放出または移植用の組成物は、薬学的に許容されるポリマーまたは疎水性物質、例えば、乳剤、イオン交換樹脂、難溶性ポリマー、または難溶性塩を含み得る。
【００６４】
活性化合物は、細胞過剰増殖の阻害剤であるか、または癌細胞におけるアポトーシスの細胞周期特異的誘導体であるか、または両方である。したがって、これらの化合物は、過剰増殖疾患および障害、例えば、癌を治療するために有用であり、アポトーシスの誘導に応答性である疾患および障害、例えば、癌を治療するために有用である。細胞周期特異的モードの作用を有することによって、これらの化合物は、ＤＮＡ複製等の基本細胞過程を標的とするか、またはＤＮＡ等の基本細胞分子を干渉する標準化学療法薬と比較して、治療指数が高いはずである。したがって、例えば、本明細書において論じられる活性化合物は、目標とされる癌治療において有用となることが期待される。活性化合物は、血管形成に対しても有効であり得る。
【００６５】
本発明の文脈において、過剰増殖および類似する用語は、異常または非調節、あるいは異常および非調節細胞成長、癌等の疾患の特徴を説明するために使用される。細胞増殖の阻害および類似する用語は、本明細書において、化合物が、その化合物と接触されない細胞と比較して、その化合物と接触される細胞の成長を遅延させる、および／または殺傷する能力を示すために使用される。最も好ましくは、この細胞増殖の阻害は、１００％であり、すべての細胞の増殖が停止される、および／または細胞がプログラム化細胞死を経ることを意味する。いくつかの実施形態において、接触される細胞は、腫瘍細胞である。腫瘍細胞は、異常細胞増殖のある細胞として定義される。良性腫瘍細胞は、攻撃的な転移腫瘍をインビボで形成することができない細胞の過剰増殖によって説明される。対照的に、悪性腫瘍は、例えば、腫瘍転移を形成することができる、異なる細胞および生化学的異常のある細胞によって説明される。悪性腫瘍細胞の後天的機能異常（「癌の特徴」とも定義される）は、複製能（「過剰増殖」）、成長シグナルの自給、抗成長シグナルに対する非感受性、アポトーシスからの回避、持続的血管形成、組織侵襲、および転移である。
【００６６】
アポトーシスの誘導体および類似する用語は、本明細書において、その化合物と接触される細胞においてプログラム化細胞死を実行する、化合物を特定するために使用される。アポトーシスは、接触される細胞内の複雑な生化学的事象、例えば、システイン特異的プロテイナーゼ（「カスパーゼ」）の活性、およびクロマチンのフラグメント化によって定義される。化合物と接触される細胞におけるアポトーシスの誘導は、必ずしも細胞増殖の阻害を伴うとは限らない。好ましくは、細胞増殖の阻害および／またはアポトーシスの誘導は、異常細胞成長（過剰増殖）のある細胞に特異的である。したがって、異常細胞成長のある細胞と比較して、正常な増殖または停止細胞は、化合物の増殖阻害またはアポトーシス誘導活性に対して感受性が低いか、または非感受性でさえある。最後に、細胞毒性は、細胞周期依存または細胞周期独立の様式で、アポトーシス／プログラム化細胞死の誘導を含む、種々の機序によって細胞を殺傷する化合物を特定するために、より一般的な意味で使用される。
【００６７】
細胞周期特異的および類似する用語は、本明細書において、化合物を、静止している非分割細胞内ではなく、細胞周期の特定の相を活発に通過する連続的増殖細胞内でのみアポトーシスを誘導するものとして特定するために使用される。連続増殖細胞は、疾患様癌に典型的であり、細胞分割周期のすべての相、つまりＧ（「ギャップ」）１、Ｓ（「ＤＮＡ合成」）、Ｇ２およびＭ（「有糸分裂」）相によって特徴付けられる。
【００６８】
ＡＫＴ（タンパク質キナーゼＢ（ＰＫＢ）としても知られる）、およびその遺伝子族生成物は、セリン／トレオニンタンパク質キナーゼとして特定されている。Ｔｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００１，９８，１０９８３−１０９８５、Ｌａｗｌｏｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．，２００１，１１４，２９０３−２９１０、Ｄｕａｎ，Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．，２０００，８６，１５−２３。ＰＫＢは、細胞増殖、アポトーシス、およびインスリン応答において重要な役割を果たす。したがって、ＰＫＢの調節は、腫瘍形成、異常細胞増殖、および糖尿病の治療において感心対象である。本発明の文脈において、過剰増殖および類似する用語は、異常／非調節細胞成長、疾患様癌の特徴を説明するために使用される。
【００６９】
ＰＫＢ分析
ＰＫＢ活性を評価するためのキナーゼ分析は、活性ＰＫＢ酵素、ＰＰＫＢ特定基質、およびＰ３３標識ＡＴＰを含む。ＰＫＢ酵素の２つの形態、全長ＰＫＢαおよびプレクストリンドメイン（アミノ酸１〜１１７）が削除された、ＰＫＢαのキナーゼドメインを使用する。両方のＰＫＢ酵素は、Ｕｐｓｔａｔｅ Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ（カタログ番号１４〜２７６および１４〜３４１）から入手することができる。使用されるＰＫＢ基質は、Ｏｂａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０００，２７５，３６１０８−３６１１５に記載されるような合成ペプチド（ＡＲＫＲＥＲＴＹＳＦＧＨＨＡ）である。リン酸化基質は、ホスホセルロース膜フィルタプレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって捕捉され、Ｗａｌｌａｃ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ液体シンチレーションカウンタ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）によって測定される。
【００７０】
細胞中のＰＫＢ活性は、ＰＴＥＮヌルヒト乳房主要細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−４６８において分析される。ＰＫＢ基質ＦＫＨＲＬ１、ＧＳＫ３ａ／ｂ、およびツベリンのリン酸化状態は、ホスホ特異的抗体（細胞シグナリング技術）を利用する免疫分析によって測定される。
【００７１】
ＰＫＢ阻害が細胞生存能力に及ぼす影響は、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、Ｕ８７−ＭＧ、ＬＮ−２２９、ＰＣ−３、ＤＵ１４５が挙げられるが、これらに限定されない、一連のヒト主要細胞株において測定される。細胞は、通常の成長培地において７２時間処理し、細胞生存能力は、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ，ＵＫ）によって測定する。
【００７２】
以下の非限定実施例は、活性化合物の調製を説明する。１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ、Ｍｅｒｃｕｒｙ−３００）スペクトルは、提案される構造と一致した。特徴的な化学シフト（δ）は、主要なピークの指定のための従来の省略形（例えば、ｓ単項、ｄ二重項、ｔ三重項、ｑ四重項、ｍ多項、ｂｒ広範）を使用して、テトラメチルシランから１００万分の１ダウンフィールドで示される。質量スペクトル（ｍ／ｚ）は、エレクトロスプレイイオン化（ＥＳＩ）または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）のいずれかを使用して、Ａｇｉｌｅｎｔモデル１１００質量分析計で記録した。以下の略語を、一般的な溶媒に対して使用する：ＣＤＣｌ３：デウテロクロロホルム、Ｄ６−ＤＭＳＯ：デウテロメチルスルホキシド、ＣＤ３ＯＤ：デウテロメタノール。
【実施例】
【００７３】
実施例１
Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩（Ｋｅｖｅｔｒｉｎとしても知られる）
【化１４】
γ−クロロブチロニトリル（５．０ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水に混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、５．４４ｇ（３０．３ｍｍｏｌ、収率６２．７％）の生成物を、白い結晶として、融点１３４〜１３５℃、９７％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６ＤＭＳＯ）δ１．８９（ｍ，２Ｈ）、２．６３（ｔ，２Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．２３（ｔ，２Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．３８（ｓ，３Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ）δ１５．３，２５．０，２８．８，１１９．８，１６９．７
式： Ｃ５Ｈ１０ＣｌＮ３Ｓ
精密質量： １７９．０３
分子量： １７９．６７
ｍ／ｅ： １７９．０３（１００．０％），１８１．０３（３２．１％），１８０．０３（７．４％），１８１．０２（４．５％），１８２．０３（２．０％），１８３．０２（１．５％）．Ｃ，３３．４２、Ｈ，５．６１、Ｃｌ，１９．７３、Ｎ，２３．３９、Ｓ，１７．８５
解析計算値： ３３．４２ ５．６１ ２３．３９ １７．８５
実測値： ３３．４４ ５．４８ ２３．４０ １８．３１
【００７４】
実施例２
Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素塩酸塩
【化１５】
３−クロロプロパンニトリル（４．３２ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。
【００７５】
実施例３
Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素塩酸塩
【化１６】
５−クロロペンタンニトリル（５．６８ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。
【００７６】
実施例４
Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素塩酸塩
【化１７】
６−クロロヘキサンニトリル（６．３６ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。
【００７７】
実施例５
Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化１８】
４−クロロメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（１０１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１９ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ、収率７５％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．０３（ｓ，２Ｈ）、４．５０（ｓ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ）、７．４５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ）、９．２２（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０６．００
式： Ｃ１０Ｈ１２ＣｌＮ３Ｓ
精密質量： ２４１．０４ （２０５．０７）
分子量： ２４１．７４
ｍ／ｅ：２４１．０４（１００．０％）、２４３．０４（３６．６％）、２４２．０５（１１．０％）、２４４．０４（４．６％）、２４２．０４（１．９％）、２４５．０４（１．５％）
【００７８】
実施例６
Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート
【化１９】
メシレート（２００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（６６ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２０３ｍｇ（０．６２ｍｍｏｌ、収率７８％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ２．３５（ｓ，３Ｈ）、２．８０（ｍ，２Ｈ）、２．８５（ｍ，２Ｈ）、２．９１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４）、３．４２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４）、７．２４（ｓ，４Ｈ）、９．０４（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２３４．０７
式： Ｃ１３Ｈ１９Ｎ３Ｏ３Ｓ２
精密質量： ３２９．０９（２３３．１０）
分子量： ３２９．４４
ｍ／ｅ： ３２９．０９（１００．０％）、３３０．０９（１６．０％）、３３１．０８（９．１％）、３３１．０９（１．９％）、３３２．０９（１．４％）、３３０．０８（１．１％）
【００７９】
実施例７
Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２０】
２−クロロメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（１０１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２３１ｍｇ（０．９５ｍｍｏｌ、収率７９％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．１４（ｓ，２Ｈ）、４．５６（ｓ，２Ｈ）、７．３７（ｍ，２Ｈ）、７．４５（ｍ，２Ｈ）、９．２３（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０５．９７
式： Ｃ１０Ｈ１２ＣｌＮ３Ｓ
精密質量： ２４１．０４（２０５．０７）
分子量： ２４１．７４
ｍ／ｅ： ２４１．０４（１００．０％）、２４３．０４（３６．６％）、２４２．０５（１１．０％）、２４４．０４（４．６％）、２４２．０４（１．９％）、２４５．０４（１．５％）
【００８０】
実施例８
Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２１】
６−クロロメチル−２−ピリジルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（１０１ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１６ｍｇ（０．８９ｍｍｏｌ、収率７４％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．２９（ｓ，２Ｈ）、４．６４（ｓ，２Ｈ）、７．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、７．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、７．９１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、９．４６（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０７．００
式： Ｃ９Ｈ１１ＣｌＮ４Ｓ
精密質量： ２４２．０４（２０６．０６）
分子量： ２４２．７３
ｍ／ｅ： ２４２．０４（１００．０％）、２４４．０４（３６．７％）、２４３．０４（１２．０％）、２４５．０４（３．９％）、２４６．０３（１．５％）
【００８１】
実施例９
Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２２】
３−ブロモメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（８０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱して、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１５ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ、収率７９％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．０８（ｓ，２Ｈ）、４．５３（ｓ，２Ｈ）、７．３１（ｍ，２Ｈ）、７．４０（ｍ，２Ｈ）、９．２５（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０６．００
式： Ｃ１０Ｈ１２ＢｒＮ３Ｓ
精密質量： ２８４．９９（２０５．０７）
分子量： ２８６．１９
ｍ／ｅ： ２８６．９９（１００．０％）、２８４．９９（９８．１％）、２８７．９９（１２．７％）、２８６．００（１０．７％）、２８８．９９（４．５％）、２８５．９９（１．９％）
【００８２】
実施例１０
Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２３】
２−ブロモメチル−１−ナフチルアセトニトリル（２００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（６４ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱して、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１５ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ、収率８３％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．５７（ｓ，２Ｈ）、４．８３（ｓ，２Ｈ）、７．６３（ｍ，２Ｈ）、７．７２（ｍ，１Ｈ）、８．０５（ｍ，２Ｈ）、８．２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２４）、９．１（ｓ，２Ｈ）、９．２８（ｓ，２Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２５６．００。
式： Ｃ１４Ｈ１４ＢｒＮ３Ｓ
精密質量： ３３５．０１（２５５．０８）
分子量： ３３６．２５
ｍ／ｅ： ３３５．０１（１００．０％）、３３７．０１（９７．６％）、３３６．０１（１７．１％）、３３８．０１（１６．４％）、３３７．００（４．５％）、３３９．００（４．４％）、３３９．０１（１．４％）、３３８．００（１．１％）、３３７．０２（１．１％）
【００８３】
実施例１１
本発明の化合物の調製を示す、化学反応が以下に表される。示されるように、これらの化合物は、適切なニトリル誘導体をチオ尿素と反応させることによって、実施例１のそれに類似する方法で調製され得る。チオ尿素は、窒素原子上の４個の置換基のうちの１、２、もしくは３個が、水素以外であり、式Ｉの他の化合物を提供する、誘導体によって置換されてもよい。
【化２４】
【化２５】
【化２６】
【化２７】
【化２８】
【化２９】
【００８４】
この実施例で表される反応において、ｎおよびｍは、ゼロであるか、または独立して、１〜８の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ビニル、アリール、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロヘキシル部分等であり、これらも１つまたは複数の置換基を有し得る。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、アルケニルおよびアルキニルでもあり得る。アルケニル基には、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル等が挙げられるが、これらに限定されない。代表的なアルキニル基には、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルが挙げられる。
【００８５】
上述のとおり調製される塩酸塩は、対応する遊離塩基または他の薬学的に許容される塩に、既知の方法によって変換され得る。他の薬学的に許容される塩は、上記反応のそれぞれにおいて、ニトリルを適切な開始物質（例えば、ニトリルを含有するクロリンではなく、ニトリルを含有するブロミン）を置換することによって、調製されてもよい。
【００８６】
実施例１２−Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有効性研究
化学物質、細胞および培地
Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、実施例１に記載されるように合成した。シスプラチン、ビンクリスチン、５−ＦＵ、およびタキソールは、Ｓｉｇｍａ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した。Ｈ４６０およびＨ５２２肺癌細胞、ＨＴ−２９、ＳＷ−６２０、およびＣｏｌｏ２０５、およびＨＣＴ−１５結腸癌細胞、ＯｖＣａｒ−３、およびＳＫＯｖ−３卵巣癌細胞、ＤＵ−１４５、およびＰＣ−３前立腺癌細胞、ならびにＳＮＢ−１９およびＵ−２５１グリオーマ細胞、ＨＴ−１０８０線維肉腫、およびＳＷ−４８０結腸癌細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から購入した。Ａ２７８０卵巣癌細胞およびそれらのシスプラチン耐性変異型Ａ２７８０／ＣＰ１およびＡ２７８０／ＣＰ２は、社内で生成した。Ｃｏｌｏｎ ＨＣＴ−１１６結腸癌細胞、それらのｐ５３−／−、およびｐ２１−／−亜株は、Ｃｅｎｔｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｓａｌｅｎ，Ｏｈｉｏ）のＧａｎｇａｄｈａｒａｎ博士から厚意で提供されたが、染色体３が補充されたＨＣＴ−１１６は、Ｔｈｅ Ｒａｊｉｖ Ｇａｎｄｈｉ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｒｏｈｉｎｉ，Ｄｅｌｈｉ，Ｉｎｄｉａ）から入手した。特に指示のない限り、媒体および他の試薬は、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎから購入した。Ｂｉｏ Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ製の基礎培養培地（ＲＰＭＩ−１６４０）は、０．２２μｍ Ｍｉｌｌｅｘ−ＧＶフィルタ装置（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を通して滅菌した。調製された培地は、小アリコート中、５℃で、暗所保管した。基礎培養培地は、培養培地として使用するために、１０％ウシ胎仔血清を補充し（ＦＣＳ−５６０で３０分間熱不活性化される）、ミトゲン、すなわち、リポ多糖類（ＬＰＳ、１０〜５０μｇ／ｍＬ）を添加して、細胞を増殖させた。
【００８７】
成長阻害分析
細胞毒性は、Ｍａｘｉｍｕｍ Ｔｏｌｅｒａｔｅｄ Ｔｉｔｅｒ（ＭＴＴ）分析によって決定した。簡潔に述べると、細胞を２４ウェル組織培養プレートに、１０，０００〜１５，０００細胞／ウェルで播種し、一晩培養した。指数関数的に成長する細胞を、次に、異なる薬物濃度に３〜４世代時間曝露した。細胞生存性は、細胞をＭＴＴテトラゾリウム塩に４ 時間、３７℃で曝露することによって決定し、ホルマザンの形成は、マイクロプレートリーダによって５６０ｎｍで測定した。未処理対照と比較した、５０％細胞成長を阻害する濃度は、用量の関数として、生存率をプロットする曲線から決定した。すべての値は、それぞれ重複して行われた少なくとも３つの独立実験の平均である。
【００８８】
細胞増殖分析
ＭＴＴ溶液（１０μＬ）を、４８時間培養したリンパ球のすべてのウェルに添加し、４時間３７℃で培養した。２つの培養セットを調製し、ＬＰＳを１つのセットのみに添加した。この期間中、ホルマザン結晶が、各ウェルの底に形成した。消費された媒体を、培養細胞の懸濁液とともにピペットで除去した。次に、酸性化イソプロパノール（無水イソプロパノール中１００μＬの０．１Ｎ ＨＣｌ）を、すべてのウェルに添加し、完全に混合して、紺青色の結晶を溶解した。数分後、室温で、プレートアナライザを使用して、二波長測定システムによってプレートを読み取った（試験波長５４０ｎｍ、参照波長６３０ｎｍ）。プレートは、酸性化イソプロパノールの添加から１時間以内に読み取った。細胞増殖は、刺激指数として以下のように計算した。
【数１】
【００８９】
ｐ５３の免疫学的局在決定
細胞の増殖をもたらすタンパク質である、ｐ５３の局在を決定するために、免疫細胞化学分析を行った。簡潔に述べると、ＨＣＴ−１１６細胞（ＡＴＣＣ）を、ガラススライドに一晩付着させ、イソ毒性濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎ（３００ｎｇ／ｍｌ）、またはシスプラチン（１１μｇ／ｍｌ）に６時間曝露した。薬物曝露後に、細胞を３．７％ホルムアルデヒドで固定し、０．２５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で透過処理し、１％ ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）で遮断した。次に、細胞を１時間、抗ｐ５３ポリクローナル抗体（Ｓｃ−６２４３、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）、続いて、二次抗ウサギＦＩＴＣ結合抗体（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕ．Ｋ．）と共に培養した。カバースリップをＶｅｃｔａｓｈｉｅｌｄに載置し（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｖｅｃｔｏｒ，Ｕ．Ｋ．）、プランＡｐｏｃｈｒｏｍａｔ ｘ６３対物レンズ（Ｚｅｉｓｓ）を使用することによって、適切なフィルタおよびレーザー共焦点走査システムＬＳＭ５１０を備える、落射蛍光顕微鏡Ａｘｉｏｖｅｒｔ１００Ｍで分析した。
【００９０】
ウェスタンブロット分析
ウェスタンブロット分析を行った。全体細胞溶解物を、イソ毒性濃度のＫｅｖｉｔｒｅｎ（３００ｎｇ／ｍｌ）、またはシスプラチン（１１ｎｇ／ｍｌ）で６時間処理された細胞から調製した。タンパク質（５０μｇ／レーン）を、４〜１２％ポリアクリルアミドＳＤＳゲル上で分離し、ＰｏｌｙＳｃｒｅｅｎ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）に移した。ｐ５３、ｐ２１、およびβ−アクチンの存在を、それぞれ抗ｐ５３抗体（Ｓｃ−６２４３、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、抗ｐ２１抗体（Ｓｃ−３９７６、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、および抗アクチン抗体（Ｓｃ−１６１６、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）によって明らかにした後、ペルオキシダーゼ共役二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）で培養し、強化された化学発光（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ，Ｈｅｂｒｏｎ，ＣＴ）によって検出した。
【００９１】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎがヒト腫瘍細胞株の生存能力に及ぼす影響
Ｋｅｖｅｔｒｉｎが、肺、結腸、乳房、卵巣、前立腺の癌、肉腫、神経膠腫、および白血病を含む、１０種類の異なるヒト腫瘍細胞の生存能力に及ぼす影響を、上述の細胞増殖分析を使用して決定した。細胞生存能力は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎに３倍増期間、連続曝露した後に測定した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの指示濃度は、平均ＩＣ５０に対応する。結果は、以下に記載される。一般に、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、上皮起源のヒト腫瘍細胞に対して、強力な活性を有する。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの細胞毒性作用は、非小細胞肺、結腸、および卵巣癌に対して最も顕著であり、ＩＣ５０は、１１〜６８ｎｇ／ｍｌの範囲であった。興味深いことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、悪性神経膠腫細胞に対しても強力な活性を示した（ＩＣ５０〜３０ｎｇ／ｍｌ）。
【表１】
【００９２】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎ細胞毒性の時間依存性
曝露時間がＫｅｖｅｔｒｉｎの細胞毒性作用に及ぼす影響を決定するために、ＤＵ−１４５、ＨＣＴ−１１６、またはＨＴ−２９癌細胞を、異なる濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎに、５、１０、２０、３０、または４５分、あるいは１、２、６、２４、または１２０時間曝露した。長い曝露時間が細胞毒性の増加と関連する、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの明白な時間依存の細胞毒性作用が、３つの細胞株すべてに認められた。結果を、図１に示す。時間依存性は、曝露時間が３０〜４５分以下の場合に特に劇的であった。対照的に、薬物曝露時間を２４時間を超えて延長することは、細胞毒性に影響しなかった。
【００９３】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンの活性スペクトラム
Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンが指示腫瘍株の生存能力に及ぼす影響を、ＭＴＴ分析を使用して、Ｋｅｖｅｔｒｉｎに３倍増時間、連続曝露した後に測定し、結果を、図２に示す。示される値は、以下のように計算される：ログ（ＩＣ５０個別の細胞株−ＩＣ５０平均）。負の値は、細胞株が、平均よりも敏感であることを示すのに対して、正の値は、細胞株が平均よりも耐性があることを示す。試験されたすべての細胞株の平均ＩＣ５０は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの場合、４．９ｘ１０−７Ｍ、およびシスプラチンの場合、２．１ｘ１０−６Ｍであった。ＭＴＴ分析結果を考慮すると、図２の１０種類の異なるヒト腫瘍細胞に対するシスプラチンおよびＫｅｖｅｔｒｉｎの活性スペクトラムの比較は、２つの薬物間の明らかな相違を示す。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの活性は、肺、頭頸部、乳房、卵巣、および結腸細胞株に対して、シスプラチンのそれよりも顕著であった。興味深いことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、一般に、特定の腫瘍細胞型内で高い異種反応を呈する、シスプラチンとは対照的に、試験された頭頸部、非小細胞肺、卵巣、結腸、および神経膠腫全てに対して活性を示した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎとシスプラチンとの間の差異は、３つの頭頸部癌細胞株に対して特に顕著であったが、そこでＫｅｖｅｔｒｉｎは、すべての細胞株に対して活性を示したが、シスプラチンは、３つの細胞株のうちの１つに対して活性であったことである。驚くべきことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、シスプラチンの場合に認められたものとは異なる、アルキル化剤に敏感である、白血病に対して比較的制限された活性を有した。
【００９４】
ヒト腫瘍異種移植片を有する裸マウスにおけるＫｅｖｅｔｒｉｎのインビボ有効性研究
動物および動物ケア
マウスは、１２時間／１２時間の明暗サイクルで、室温１８〜２６℃、および比較的高い湿度３０〜７０％で飼育した。動物の飼料および水は、不断で付与した。この順応期間中、各動物は、少なくとも１日１回、任意の異常または感染性疾患の発症に関して観察された。使用に適していると決定された動物のみをこの研究に割り当てた。本研究での使用に許容されないと考えられるいかなる動物も、同一業者からの類似する年齢および体重の動物と置き換えた。腫瘍質量が、平均、約１００ｍｍ３に達すると、腫瘍の大きさに従って、無作為化し、グループに分けた。
【００９５】
ヒト腫瘍細胞株
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌（ＨＴＢ−２６）、ＨＴ−２９結腸癌（ＨＴＢ−３８）、ＰＣ−３前立腺癌（ＣＲＬ−１４３５）、ＨＣＴ−１５Ｐ−糖タンパク質耐性結腸癌は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から購入した。
【００９６】
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株は、最初に、乳腺腺癌の５１歳白人女性の胸水から単離された。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【００９７】
ＨＴ−２９細胞株は、最初に、結腸直腸腺癌の４４歳白人女性から１９６４年に単離された。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【００９８】
ＰＣ−３細胞株は、最初に、グレードＩＶ転移性前立腺腺癌の６２歳白人男性の骨転移から単離された。これらの細胞は、低い酸ホスファターゼおよびテストステロン−５−アルファ還元酵素活性を呈し、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【００９９】
ＨＣＴ−１５親細胞株は、最初に、デュークＣ型結腸直腸腺癌の男性から単離された。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【０１００】
Ａ５４９およびＮＣＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌株は、Ｄａｎａ Ｆａｒｂｅｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）からの寄贈であった。
【０１０１】
試験システム
細胞は、１０％ＦＢＳ ＲＰＭＩ培地中で培養した。細胞は、本有用性研究に対して、さらなる拡張のために、５代継代で取得した。裸マウス（Ｎｕ／Ｎｕ）の雄（２０〜２４ｇ）および雌（１９〜２２ｇ）の両方を、６〜８週齢で、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。これらのマウスは、研究の開始時においてナイーブであり、耳の穿孔によって識別された。マウスは、５日間放置して、新しい環境に順化させた。ＲＰＭＩ：マトリゲル５０：５０混合中のヒト腫瘍細胞を、各マウスの右脇腹に皮下的に移植した。腫瘍が平均容積１００ｍｍ３に達したときに、投与を開始した。
【０１０２】
生存中の観察および測定
任意の悪影響について、マウスを毎日観察した。処置前、処置中の隔日、および処置後に、マウスの体重を測定した。動物の状態が悪化した場合は、その動物のいかなる処置をも中断した。回復しない場合は、動物を犠牲死させた。１５％を超える体重喪失を示すいかなる動物も、状態が悪化していると見なした。２０％を超える体重喪失を示すいかなる動物も、犠牲死させた。腫瘍部位上に皮膚の持続的潰瘍化を呈するいかなる動物も、犠牲死させた。マウスの腫瘍の大きさの測定値を、処置前、処置中の隔日、および処置後に取った。同一の科学者が、研究を通して、腫瘍測定値の測定を担当した。
【０１０３】
終末手順
媒体群からの腫瘍が１０００ｍｍ３に到達すると、すべての群からのすべての動物を、ＣＯ２窒息により犠牲死させた。犠牲死時に、腫瘍を除去し、測量した。
【０１０４】
研究スケジュール
ＲＰＭＩ：マトリゲル５０：５０混合中の５ｘ１０６腫瘍細胞を、各裸マウスの右脇腹に皮下的に移植した。腫瘍が平均容積１００ｍｍ３に到達したときに（通常、移植後１４日目までに達した）、投与を開始し、投与は８日間行った。剖検は、治療の終了後、４１日目に行った。
【０１０５】
材料
Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、実施例１に記載されるように調製した。周囲温度（または−２０℃以下）で保存し、光から保護した。試験動物に投与するために、Ｋｅｖｅｔｒｉｎをリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に懸濁させた（滅菌、ｐＨ＝７．４）。使用する前に、ＰＢＳを周囲温度で保存した。各懸濁液を調製した後、−２０℃以下で保存し、光から保護した。
【０１０６】
投与
投与手順は、マウスを無作為化し、グループ分けした日に開始した。以下の段落において論じられるように、腫瘍移植後７、９、および１１日目に用量を投与した。各用量は、尾静脈を介して投与した。
【０１０７】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎに起因する体重喪失
Ｋｅｖｅｔｒｉｎを、腫瘍を持つ動物に静脈内注入（ＩＶ）した場合、化合物の投与に起因する体重喪失は、許容可能な範囲内であった。７、９、および１１日目に静脈内投与された１００ｍｇ／ｋｇは、体重の６．８％の喪失をもたらし、同一スケジュールで投与された２００ｍｇ／ｋｇは、９．３％の体重喪失をもたらした。これらの濃度はいずれも、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性を確立するために使用され得る。これらの結果を、図３に示す。
【０１０８】
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソール静脈内注入と比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト乳癌ＭＤＡ−ＭＢ−２３１を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、タキソール治療した動物よりも高い有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物よりも１２日、未治療の対照よりも３２日遅延した。結果を、図４に示す。
【０１０９】
ＨＴ−２９結腸癌における、７〜１２日目の５−ＦＵと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト結腸癌ＨＴ−２９を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、５−ＦＵ治療した動物よりも高い有用性を示した。腫瘍成長は、５−ＦＵ治療した動物よりも１０日、未治療の対照よりも３３日遅延した。結果を、図５に示す。
【０１１０】
ＰＣ−３ヒト前立腺癌における、７日目の１０ｍｇ／ｋｇシスプラチンと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト前立腺癌ＰＣ−３を皮下的に移植した。スケジュールに従って、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを静脈内注入し、シスプラチンを腹腔内（ＩＰ）注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、シスプラチン治療した動物よりも高い有用性を示した。腫瘍成長は、シスプラチン治療した動物よりも８日、未治療の対照よりも３４日遅延した。結果は、図６に示される。
【０１１１】
Ｐ−糖タンパク質媒介耐性を有するＨＣＴ−１５ヒト結腸癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性
動物に、Ｐ−糖タンパク質耐性細胞モデルである、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１５を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物、および未治療の対照よりも１５日遅延した。結果を、図７に示す。
【０１１２】
Ａ５４９多剤耐性ヒト肺癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ の有用性
動物に、多剤耐性ヒト肺癌を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において強力な有用性を示した。腫瘍成長は、未治療の対照よりも２６日遅延した。結果を、図８に示す。
【０１１３】
ＮＣｌＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性
動物に、別の多剤耐性ヒト肺癌を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において強力な有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物よりも約９日、および未治療の対照よりも約２４日遅延した。結果を、図９に示す。
【０１１４】
書籍および学術論文を含むが、これらに限定されない、本出願において引用されるすべての出版物は、それぞれ参照することによりそれら全体が本明細書に組み込まれる。
【０１１５】
発明は、開示される実施形態を参照して上述されたが、当業者であれば、詳述される特定の実験が、発明の単なる例証に過ぎないことを容易に理解するであろう。発明の精神から逸脱することなく、種々の修正を行うことができることを理解されたい。したがって、発明は、以下の請求項によってのみ制限される。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ニトリル誘導体およびニトリル誘導体を含む薬学的組成物に関する。本発明は、そのような化合物の薬学的に許容される塩、そのような化合物を調製するための過程、そのような化合物の調製に使用される中間体、ならびに過剰増殖性疾患、炎症性疾患、およびウイルスおよび細菌感染の治療におけるそのような化合物の使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
前述される誘導体およびそれらの薬学的に許容される塩は、ＡＫＴ阻害、細胞周期過剰増殖の阻害、癌細胞におけるアポトーシスの細胞周期特異的誘導、ＬＴＢ４活性の阻害、および抗血管形成活性のうちの１つまたは複数の特性を有し、実験動物において、腫瘍の大きさの著しい減少を示す。したがって、これらの化合物は、過剰増殖性疾患、例えば、神経膠腫を含む頭頸部癌、薬物耐性肺癌、ヒトにおけるエストロゲン依存性または非依存性癌、非小細胞肺癌、および結腸癌を含むが、これらに限定されない、哺乳動物における広範な疾患の治療に有用である。エストロゲン依存性癌の非限定例は、乳癌および卵巣癌である。それらのＬＴＢ４活性の阻害の結果として、これらの化合物は、炎症性疾患、例えば、アレルギー、喘息、および関節炎等の炎症性疾患の治療に有用であり、それらのＡＫＴ阻害およびサイトカイン活性の結果として、これらの化合物は、ウイルスおよび細菌感染の治療にも有用である。現在、前述の疾患に対する新しい治療法を見出すことに大きな関心が寄せられている。
【０００３】
置換イソチオ尿素化合物の塩は、Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＳ，Ｖｏｌ．６２，２０９９−２１０３（１９４０）、Ｓｈａｐｉｒｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．７，Ｎｏ．１，２２−３４（１９５７）、Ｋｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．８，１４９９−１５０６（１９７８）、Ｂａｕｅｒ ａｎｄ Ｗｅｌｓｈ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．５，１４４３−１４４５（１９６１）、Ｓｏｕｔｈａｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，Ｖｏｌ．１１４，５１０−５１６（１９９５）、およびＧｅｒｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ．７７，１８６（２０００）において言及されている。
【発明の概要】
【０００４】
特定の実施形態において、本発明は、ヒトを含むが、これに限定されない哺乳動物において、癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患を治療するための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、
【化１】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、アルキル、アルケニル、およびアルキニル基のアルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化２】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化３】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化４】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化５】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化８】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化９】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む。
【０００５】
一実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルから独立して選択され、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される１つまたは複数の置換基を担持し得る。
【０００６】
発明の一実施形態において、式Ｉの化合物は、式ＩＩ
【化１０】
の化合物であり、式中、ｎ、ｍ、Ｗ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、上記で定義されるとおりであり、Ｘは、薬学的に許容される酸である。一実施形態において、酸は、ＨＣｌである。別の実施形態において、酸は、ＨＢｒである。
【０００７】
発明の一実施形態において、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、または白金である。発明の別の実施形態において、Ｚは硫黄である。発明の別の実施形態において、Ｚは銅である。発明の別の実施形態において、Ｚは金である。発明の別の実施形態において、Ｚは、上記で定義されるようなハロゲン含有部分である。発明の別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ水素である。発明の一特定化合物において、Ｚは銅であり、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ水素であり、ｍは１であり、ｎは１であり、ＷはＣＨ２である。
【０００８】
発明の一実施形態において、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ビニル、アリール、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルから独立して選択され、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される、１つまたは複数の置換基を担持し得る。
【０００９】
発明の一実施形態において、Ｗは、アリールまたはビニルである。
【００１０】
本発明の一実施形態は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の４−イソチオウレイドブチロニトリル（Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはＳ−（γ−シアノプロピル）イソチオ尿素とも称される）またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む。特定の実施形態において、組成物は、「Ｋｅｖｅｔｒｉｎ」としても知られる、４−イソチオウレイドブチロニトリルの塩酸酸付加塩を含む。この塩は、以下の式を有する。
【化１１】
【００１１】
別の実施形態において、組成物は、４−イソチオウレイドブチロニトリルの臭化水素酸酸付加塩を含む。
【００１２】
別の実施形態において、本発明は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量のＳ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む。
【００１３】
別の実施形態において、本発明は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量のＳ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩から選択される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む。別の実施形態において、薬学的組成物は、以下に記載される実施例１１で説明されるように調製される化合物から選択される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、またはその遊離塩基、および薬学的に許容される担体を含む。
【００１４】
発明の一実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＣｌまたはＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、遊離塩基または塩として、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素を含まない。
【００１５】
発明の一実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒ、およびＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＣｌを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＣｌ、またはＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、およびＳ−シアノメチルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素を遊離塩基または塩として含まず、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素を遊離塩基または塩として含まない。
【００１６】
発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホネート、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ピクリン酸、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭化水素酸塩も含まない。
【００１７】
発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されない。
【００１８】
式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、その酸付加および塩基塩（二塩を含む）を含む。適切な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。例には、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプチン酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩／塩化物、臭化水素酸塩／臭化物、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、オキサル酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素／リン酸二水素、サッカラート、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。適切な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例には、アルミニウム、アルギニン、ベンザチン、カルシウム、塩素、ジエチルアミン、ジオラミン、グリシン、リシン、マグネシウム、メグルミン、オラミン、カリウム、ナトリウム、トロメタミン、および亜鉛塩が挙げられる。適切な塩に関する考察は、″Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ″ｂｙ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２００２）を参照されたい。
【００１９】
式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、式Ｉの化合物の溶液および所望の酸または塩基を、必要に応じて一緒に混合することによって容易に調製され得る。塩は、溶液から沈殿し、ろ過によって収集され得るか、または溶媒の蒸発によって回収され得る。塩中のイオン化の程度は、完全なイオン化からほぼ非イオン化まで異なり得る。
【００２０】
式Ｉの化合物およびその薬学的に許容される塩（以降、活性化合物とも称される）は、非溶媒および溶媒形態で存在し得る。活性化合物（塩、遊離塩基、遊離酸、および中性化合物の形態のものを含む）は、水和物および他の溶媒を形成し得る。「溶媒和物」とう用語は、本明細書において、発明の化合物、および１つまたは複数の薬学的に許容される溶媒分子、例えば、エタノールを含む、分子複合体を説明するために使用される。「水和物」という用語は、当該溶媒が水である場合に用いられる。薬学的に許容される溶媒は、水和物および他の溶媒を含み、結晶化の溶媒は、同位体置換、例えば、Ｄ２Ｏ、ｄ６−アセトン、ｄ６−ＤＭＳＯであり得る。活性化合物は、クラスレートまたは他の複合体として存在し得る。一般に、溶媒、水和等の形態は、非溶媒、非水和／無水等の形態と同等であり、本明細書において請求される化合物、組成物、および用途は、これらの形態、ならびに異性体、結晶、および非晶質形態、ならびに以下に論じられる同位体標識化合物を、本発明の範囲内に包含することが意図される。
【００２１】
１つまたは複数の非対称炭素原子を含有する式Ｉの化合物は、２つ以上の立体異性体として存在し得る。式Ｉの化合物がアルケニルまたはアルケニレン基、あるいはシクロアルケニル基を含有する場合、幾何ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ（またはＺ／Ｅ）異性体が可能である。化合物が、例えば、ケトまたはオキシム基、あるいは芳香族部分を含有する場合、互変異性異性（「互変異性」）が起こり得る。単一の化合物が、１種類より多くの互変異性を呈し得るということになる。式Ｉの化合物は、それらが酸付加または塩基塩を形成する場合、異性体としても存在し得、そこでは対イオンは、光学的に活性な、例えば、Ｄ−乳酸またはＬ−リシン、あるいはラセミ、例えば、ＤＬ−酒石酸またはＤＬ−アルギニンである。
【００２２】
立体異性体の混合物は、当業者に知られている従来技術によって分離され得る。例えば、″Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ″ｂｙ Ｅ．Ｌ．．Ｅｌｉｅｌ（Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９４）を参照されたい。
【００２３】
Ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ異性体は、当業者によく知られている従来技術、例えば、クロマトグラフィおよび分別結晶によって分離され得る。
【００２４】
一般に、本発明の鏡像異性的に純粋な化合物は、当該技術分野において知られている過程、例えば、適切な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成およびラセミ化合物（または塩あるいは誘導体のラセミ化合物）の溶解に従って、調製および単離され得る。例えば、ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）は、キラル高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を使用して分離され得る。代替として、ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）は、適切な光学的に活性な化合物、例えば、アルコールと反応し得るか、または式Ｉの化合物が酸性または塩基性部分を含有する場合は、酸または塩基、例えば、酒石酸または１−フェニルエチルアミンと反応し得る。得られるジアステレオ異性体混合物は、クロマトグラフィまたは分別結晶、あるいはそれらの両方によって分離され得、両方のジアステレオ異性体は、当業者によく知られている手段によって、１つまたは複数の対応する純粋な鏡像異性体に変換され得る。
【００２５】
本発明のキラル化合物（およびそのキラル前駆体）は、クロマトグラフィ、通常、ＨＰＬＣを使用して、鏡像異性的に富化された形態で、非対称固定相および移動相を有する樹脂上で取得されてもよく、それは炭化水素、通常、ヘプタンまたはヘキサンから成り、０〜５０％のイソプロパノール、通常、２〜２０％、および０〜５％のアルキルアミン、通常０．１％のジエチルアミンを含有する。溶出液の濃縮は、富化混合物をもたらす。
【００２６】
固体の状態において、本発明の化合物は、結晶または非晶質形態で存在し得る。
【００２７】
本発明は、本明細書において請求される式Ｉの薬学的に許容されるすべての同位体標識化合物を含み、そこでは１つまたは複数の原子が、同一の原子番号を有するが、原子質量または質量番号が、自然界で通常見出される原子質量または質量番号とは異なる原子と置換される。
【００２８】
発明の化合物に含有するために適した同位体の例には、水素の同位体、例えば２Ｈおよび３Ｈ、炭素の同位体、例えば１１Ｃ、１３Ｃ、および１４Ｃ、塩素の同位体、例えば３６Ｃｌ、フッ素のの同位体、例えば１８Ｆ、ヨウ素の同位体、例えば１２３Ｉおよび１２５Ｉ、窒素の同位体、例えば１３Ｎおよび１５Ｎ、酸素の同位体、例えば１５Ｏ、１７Ｏ、および１８Ｏ、リンの同位体、例えば３２Ｐ、および硫黄の同位体、例えば、３５Ｓが挙げられる。式Ｉの特定の同位体的標識化合物、例えば、放射性同位体を組み込むものは、薬物および／または基質組織分布研究において有用である。放射性同位体のトリチウム、すなわち３Ｈ、および炭素１４、すなわち１４Ｃは、それらの組み込みの容易さ、および検出の容易な手段を考慮すると、この目的で特に有用である。より重い同位体、例えば、ジウテリウム、すなわち２Ｈによる置換は、優れた代謝安定性、例えば、インビボ半減期の増加または用量要件の減少によって生じる特定の治療利益をもたらし得、したがって、いくつかの状況において好適であり得る。陽電子放出同位体、例えば、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、および１３Ｎによる置換は、陽電子放出トポグラフィ（ＰＥＴ）研究において、置換基受容体の占有を調べるために有用であり得る。
【００２９】
式Ｉの同位体的標識化合物は、一般に、当業者に知られている従来技術によって、または添付の実施例に記載されるものに類似する過程によって、以前に用いられた非標識試薬の代わりに、適切な同位体的標識試薬を使用して、調製され得る。
【００３０】
本発明は、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、細胞過剰増殖の治療のための薬学的組成物にも関する。別の実施形態において、本発明は、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、癌治療のための薬学的組成物に関する。別の実施形態において、本発明は、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、癌治療のための薬学的組成物に関する。他の実施形態において、上述される薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、この段落で参照される薬学的組成物からも同様に除外され得る。
【００３１】
本発明は、癌を含むが、それに限定されない細胞過剰増殖の治療のための、抗過剰増殖または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、用量単位形態の薬学的組成物にも関する。他の実施形態において、上述される薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、前述の薬学的組成物からも同様に除外され得る。
【００３２】
本発明は、癌を含むが、それに限定されない細胞過剰増殖の治療のための、抗過剰増殖または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、非経口薬学的組成物にも関する。医薬品は、所望される量の製品を、滅菌等張液に溶解することによって得ることができ、任意の所望される経路で容易に投与され得る。他の実施形態において、上述薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、前述の薬学的組成物からも同様に除外され得る。
【００３３】
本発明は、ヒトを含む哺乳動物において、癌を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を治療する方法にも関し、そのような治療を必要とする患者に、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルスまたは抗菌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。一実施形態において、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、およびＳ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択される。別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩から選択される。別の実施形態において、化合物は、以下の実施例１１に記載されるように調製される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、またはその遊離塩基から選択される。
【００３４】
本発明は、過剰増殖性疾患を治療する方法にも関し、そのような治療を必要とする患者に、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。別の実施形態において、本発明は、癌を治療する方法に関し、そのような治療を必要とする患者に、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。別の実施形態において、本発明は、癌を治療する方法に関し、そのような治療を必要とする患者に、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。他の実施形態において、上述薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、この段落で参照される方法からも同様に除外され得る。
【００３５】
本発明は、哺乳動物において、頭頸部癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型の肺および任意の女性癌、卵巣癌、乳癌、または結腸癌を治療する方法にも関し、そのような治療を必要とする哺乳動物に、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。本発明の一実施形態において、癌は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、および結腸癌から選択される。本発明の一実施形態において、頭部癌は、神経膠腫である。
【００３６】
本発明は、アポトーシスの誘導に応答する過剰増殖性疾患の治療を、そのような治療を必要とする哺乳動物において行う方法にも関し、それを必要とする哺乳動物に、個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩である、活性化合物の量、および少なくとも１つの二次化合物または放射線の量を投与することを含み、二次化合物は、化学療法抗癌剤および標的特異的抗癌剤から成る群から選択される抗癌剤であり、活性化合物および当該二次化合物または放射線の量は、治療効果をもたらす。発明の一実施形態において、当該二次化合物は、（ｉ）アルキル化／カルバミル化剤、（ｉｉ）白金誘導体、（ｉｉｉ）抗有糸分裂剤／チューブリン阻害剤、（ｉｖ）トポイソメラーゼ阻害剤、（ｖ）ピリミジン拮抗薬、（ｖｉ）プリン拮抗薬、（ｖｉｉ）葉酸拮抗薬、および（ｖｉｉｉ）注入放射性物質から成る群から選択される。発明の一実施形態において、当該標的特異的抗癌剤は、（ｉ）キナーゼ阻害剤、（ｉｉ）プロテアソーム阻害剤、（ｉｉｉ）ヒストン脱アセチル化阻害剤、（ｉｖ）熱衝撃タンパク質９０阻害剤、（ｖ）血管標的剤（ＶＡＴ）抗血管新生薬、およびＫＤＲチロシンキナーゼ阻害剤、（ｖｉ）モノクローナル抗体および変異体、およびモノクローナル抗体と抗体フラグメントの複合体、（ｖｉｉ）オリゴヌクレオチド系治療薬、（ｖｉｉｉ）トール様受容体／ＴＬＲ９作動薬、ＴＬＲ７作動薬およびその類似体、またはＴＬＲ７／８作動薬およびＴＬＲ７／８作動薬としての免疫刺激性ＲＮＡ、（ｉｘ）プロテアーゼ阻害剤、（ｘ）ホルモン治療薬、（ｘｉ）ブレオマイシン、（ｘｉｉ）レチノイド、（ｘｉｉｉ）ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、（ｘｉｖ）アラノシン、（ｘｖ）サイトカイン、（ｘｖｉ）インターフェロン、および（ｘｖｉｉ）細胞死受容体作動薬から成る群から選択される。発明の一実施形態において、当該式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩は、抗癌有効量の放射線と個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして投与される。本明細書で使用される、用語「有効量」は、それ自体で投与される場合に有効な活性化合物の量、および別の治療剤と併せて投与される場合に有効な活性化合物の量を含むことは、前述から明らかである。
【００３７】
本発明の方法によって治療され得る過剰増殖性疾患には、これらに限定されないが、乳房、膀胱、骨、脳、中枢および末梢神経系、結腸、内分泌腺、食道、子宮内膜、生殖細胞、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、咽頭および下咽頭、中皮腫、肉腫、卵巣、膵臓、前立腺、肛門、小腸、柔組織、睾丸、胃、皮膚、尿管、膣および外陰の癌、遺伝性癌、網膜芽腫、およびウィルムス腫瘍、白血病、リンパ腫、非ホジキン病、慢性および急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、ホジキン病、多発性骨髄腫、およびＴ細胞リンパ腫、骨髄異形成症候群、形質細胞新生組織形成、腫瘍随伴症候群、未知の原発部位の癌、薬物耐性癌、およびＡＩＤＳ関連悪性腫瘍が挙げられ、疾患は、そのような治療を必要とする哺乳動物に、抗過剰増殖または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することによって治療される。発明の一実施形態において、過剰増殖性疾患は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型肺癌および任意の女性癌、乳癌、卵巣癌、および結腸癌から成る群から選択される。
【００３８】
本発明は、上記で定義されるような式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩であるが、但し、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホン酸塩、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素 ピクリン酸、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌではないことを条件とする、化合物にも関する。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭化水素酸塩でもない。
【００３９】
本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩ではない。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されない。
【００４０】
Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノメチルエステルとも称され、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノエチルエステルとも称され、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノプロピルエステルとも称され、Ｓ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，（４−シアノフェニル）メチルエステルとも称されることに留意されたい。
【００４１】
本発明の一実施形態において、化合物は、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、およびＳ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、ならびにその薬学的に許容される塩から選択される。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩、またはその異なる薬学的に許容される塩から選択される。別の実施形態において、化合物は、以下に記載される実施例１１で説明されるように調製される化合物、またはの異なる薬学的に許容される塩、もしくはその遊離塩基から選択される。
【００４２】
本発明は、Ｚが硫黄である、式Ｉの化合物の塩酸塩付加塩を調製するための過程にも関し、チオ尿素または式
【化１２】
のチオ尿素誘導体であって、式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、式Ｉに関して上
記で定義されるとおりである、チオ尿素誘導体を、式ＮＣ−（ＣＨ２）ｎ−Ｗ−（ＣＨ２）ｍＣｌの適切なニトリル誘導体であって、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して上記で定義されるとおりである、ニトリル誘導体と、水または水／アルコール溶媒中、あるいは極性溶媒中、還流温度で反応させて、Ｚが硫黄である式Ｉの化合物を得ること、および必要に応じて、遊離塩基または異なる酸付加塩を調製することを含む。発明の一実施形態において、溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノールから選択されるアルコール、および前述のアルコールの１つまたは複数と水との混合液から選択される。
【００４３】
本発明は、式Ｉの化合物の塩酸付加塩を調製するための過程にも関し、Ｚは、銅、銀、金、白金、およびＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分から選択され、式ＮＣ−（ＣＨ２）ｎ−Ｗ−（ＣＨ２）ｍＣｌの化合物であって、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して上記で定義されるとおりである、化合物を、それぞれの金属の塩またはハロゲン含有部分の塩と反応させて、中間化合物を形成すること、および次に、中間化合物を、チオ尿素または式
【化１３】
のチオ尿素誘導体であって、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、式Ｉに関して上記で定義されるとおりである、チオ尿素誘導体と反応させて、Ｚが銅、銀、金、白金、またはＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分である、式Ｉの化合物を得ることであって、中間物の形成および酸付加塩の形成は、水または水／アルコール溶媒または極性溶媒中、還流温度で行われることと、および必要に応じて、遊離塩基または異なる酸付加塩を調製することを含む。発明の一実施形態において、溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノールから選択されるアルコール、および前述のアルコールの１つまたは複数と水との混合液から選択される。本発明は、式Ｉの化合物の臭化水素酸酸付加塩、および式Ｉの化合物のメシレート塩の調製にも関する。臭化水素酸酸付加塩は、上述の過程において、開始物質を含有する臭素を置換することによって調製される。メシレート塩は、上述の過程において、メシレート開始物質を置換することによって調製される。本発明の二塩は、塩を開始物質として使用することによって同様に調製され得る。遊離塩基が２つの塩基中心を有する場合、そのような塩を形成することが可能であり得る。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】Ｋｅｖｅｔｒｉｎ細胞毒性の時間依存性を示す。ヒト癌細胞を、異なる濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎに、５、１０、２０、３０、あるいは４５分間、または１、２、６、２４、または１２０時間曝露した。ＩＣ５０として表される細胞生存能力を、ＭＴＴ分析を使用して測定して、Ｋｅｖｅｔｒｉｎ曝露の時間に対してプロットした。
【図２】Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンの活性スペクトルを示す。Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンが、表示腫瘍細胞株の生存能力に及ぼす影響を、３倍増時間Ｋｅｖｅｔｒｉｎに連続曝露した後、ＭＴＴ分析を使用して測定した。表示値は、以下のように計算する：ログ（ＩＣ５０個別の細胞株−ＩＣ５０平均）。負の値は、細胞株が、平均よりも感受性が高いことを示すが、正の値は、細胞株が平均よりも耐性が高いことを示す。試験したすべての細胞株の平均ＩＣ５０は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの場合、４．９ｘ１０−７Ｍ、シスプラチンの場合、２．１ｘ１０−６Ｍであった。
【図３】Ｋｅｖｅｔｒｉｎに起因するマウスの体重変化を示す。０日目にＫｅｖｅｔｒｉｎ ＩＶ１００ｍｇ／ｋｇまたは２００ｍｇ／ｋｇのいずれかで処置した後のマウスの動物体重が示される。
【図４】哺乳動物癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはタキソールの有効性を示す。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌を持つマウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇＫｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入で処置し、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇタキソールの静脈内注入と比較した。
【図５】結腸癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたは５−ＦＵの有効性を示す。ＨＴ−２９腫瘍を持つ裸マウスを、７、９、および１１日目に、２００ｍｇ／ｋｇのＫｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または５−ＦＵのいずれかで処置した。
【図６】前立腺癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはシスプラチンの有用性を示す。ＰＣ−３腫瘍を有する裸マウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または７日目に１０ｍｇ／ｋｇのシスプラチンのいずれかで処置した。
【図７】ヒトＰ−糖タンパク質媒介耐性結腸癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはタキソールの有効性を示す。ＨＣＴ−１５腫瘍を有する裸マウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または腫瘍後７、９、１１、および１３日目に２２ｍｇ／ｋｇタキソールのいずれかで処置した。
【図８】Ａ５４９多剤耐性ヒト肺癌における７、９、および１１日目のＫｅｖｅｔｒｉｎ２００ｍｇ／ｋｇ、および７、９、１１、および１３日目のタキソール２２ｍｇ／ｋｇの有効性を示す。
【図９】ＮＣＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌における７、９、および１１日目のＫｅｖｅｔｒｉｎ２００ｍｇ／ｋｇ、および１３日目のタキソール２２ｍｇ／ｋｇの有効性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
Ｚが硫黄である、本発明において有用な化合物は、チオ尿素を、式ＮＣ−（ＣＨ２）ｎ−Ｗ−（ＣＨ２）ｍＣｌの適切なニトリル誘導体と反応させることによって、水中で調製され、式中、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して上で定義されるとおりである。等量のチオ尿素およびニトリルを、１０倍量の水または水／アルコール溶媒、または極性溶媒に添加し、加熱して、約４時間、大気圧で還流させる。水およびアルコールの混合液を調製するため、または極性溶媒として使用するために適したアルコールの非限定例には、メタノール、エタノール、およびイソプロパノールが挙げられる。反応混合液を蒸発させて、所望の生成物を得る。この生成物は、エタノールまたは別の適切な溶媒、例えば、イソプロパノールまたはメタノール、あるいは前述のアルコールの１つとアセトンとの混合液からの再結晶化によって精製される。結晶物質は、ろ過によって収集され、高真空下で乾燥される。Ｚが、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺが、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択される、ハロゲン含有部分である、式Ｉの化合物は、同様に調製される。
【００４６】
Ｗ部分のＹが、硫黄、酸素、または窒素である、式Ｉの化合物は、硫黄、酸素、または窒素が、Ｗ部分の環上の所望の位置にある、適切なニトリル誘導体を選択することによって調製される。
【００４７】
当業者であれば、関心対象の特定の化合物を形成するために、上述のものから条件を選択する方法、またはそこに修正を行う方法が分かる。
【００４８】
患者の疾患および状態に応じて、本明細書で使用される、用語「治療」は、治療、緩和、および予防的治療の１つまたは複数を含み得る。活性化合物は、患者の治療において、放射線と一緒に、または他の抗過剰増殖化合物、例えば、シクロホスファミド、シスプラチン、カルボプラチン、タキソール、およびアービタックス、ならびに他の認可された抗過剰増殖化合物と一緒に、複合または連続的に投与され得る。特定の疾患および患者の状態に応じて、そのような治療は、化合物単独または放射線単独のいずれよりも有効であり得る。抗過剰増殖、抗炎症、抗菌、または抗ウイルス用途の各活性化合物の正確な投与量は、患者のタイプ、治療される疾患状態のタイプ、患者の年齢、および投与経路が挙げられるが、これらに限定されない多数の因子に応じて異なる。
【００４９】
ヒト患者に投与する場合、活性化合物の総日量は、投与方法に応じて、体重１ｋｇ当り１ｍｇ〜３００ｍｇの範囲であることが予想される。例えば、経口投与は、体重１ｋｇ当り１００ｍｇ〜３００ｍｇの総日量を必要とし得るが、静脈内用量は、体重１ｋｇ当り２０ｍｇ〜２００ｍｇだけを必要とし得る。総日量は、単一または分割用量で投与されてもよい。体重約７０ｋｇの平均的ヒト対象の場合、用量は、経口投与で約１４００ｍｇ〜２１０００ｍｇ、静脈内投与で約１４０ｍｇ〜１４００ｍｇとなるであろう。医師は、体重がこの範囲外である対象、例えば、幼児および高齢者に対する用量を容易に決定することができるであろう。獣医は、他の哺乳動物に対する用量を容易に決定することができるであろう。
【００５０】
一実施形態において、発明は、体重１ｋｇ当り２００ｍｇの活性化合物を含む、静脈内溶液または懸濁液の投与を含む。上述の治療用途の場合、投与される用量は、当然のことながら、用いられる化合物、投与方法、所望される治療、および示される疾患によって異なる。総日量は、単一または分割用量で投与されてもよい。本発明は、持続放出組成物も包含する。
【００５１】
薬学的組成物は、例えば、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、持続放出製剤、懸濁液として経口投与に適した形態、滅菌溶液、懸濁液、または乳剤として非経口注入に適した形態、軟膏またはクリームとして局所投与に適した形態、または坐薬として肛門投与に適した形態であり得る。薬学的組成物は、精密用量の単一投与に適した単位用量形態であってもよい。薬学的組成物は、従来の薬学的担体または賦形剤、および活性化合物を含む。さらに、他の医薬剤、担体、アジュバント等を含んでもよい。
【００５２】
典型的な非経口投与形態は、滅菌水溶液、例えば、水性プロピレングリコールまたはデキストロース溶液中の活性化合物の溶液または懸濁液を含む。そのような投与形態は、必要に応じて、適切に緩衝され得る。
【００５３】
適切な薬学的担体は、不活性希釈剤または充填剤、水、および種々の有機溶媒を含む。薬学的組成物は、必要に応じて、追加の成分、例えば、香味剤、結合剤、賦形剤等を含有し得る。したがって、経口投与の場合、種々の賦形剤、例えば、クエン酸を含有する錠剤は、種々の崩壊剤、例えば、スターチ、アルギニン酸、および特定の複合ケイ酸と一緒に、およびスクロース、ゼラチン、およびアカシア等の結合剤と一緒に用いられてもよい。さらに、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルク等の滑沢剤は、錠剤化目的で有用な場合が多い。類似型の固形組成物は、軟および硬ゼラチンカプセルで用いられてもよい。これらの組成物の有用な成分は、ラクトース、乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールを含む。水性懸濁液またはエリキシルが、経口投与に所望される場合、そこでの活性化合物は、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、またはそれらの組み合わせと一緒に、種々の甘味剤または香味剤、着色物質または染料、および必要に応じて、乳化剤または懸濁剤と組み合わされてもよい。
【００５４】
種々の薬学的組成物を特定量の活性化合物で調製する方法は、既知であるか、または当業者に明らかとなるであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｅｒ，Ｐａ．，１５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９７５）を参照されたい。
【００５５】
本明細書に記載される用量範囲は、単なる例証であり、請求される組成物の範囲または実践を限定することを意図しない。例えば、用量は、毒性作用および／または検査値等の臨床効果を含み得る、薬物動態または薬力学的パラメータに基づいて調整されてもよい。したがって、本発明は、熟練者によって決定されるように、患者内用量上昇を包含する。化学療法剤の投与に適した用量およびレジメンを決定することは、関連技術においてよく知られており、本明細書に開示される教示が一旦提供されると、熟練者によって包含されることが理解される。
【００５６】
発明の薬学的組成物は、単一単位用量、または複数の単一単位用量として、バルクで調製、包装、または販売されてもよい。本明細書で使用される、「単位用量」は、規定量の活性化合物を含む、個別量の薬学的組成物である。活性化合物の量は、概して、対象に投与される、活性化合物の用量、またはそのような用量の便宜的分数、例えば、そのような用量の１／２または１／３に等しい。
【００５７】
発明の薬学的組成物中の活性化合物、薬学的に許容される担体、および任意の追加成分の相対量は、治療される対象が何であるが、その大きさ、および状態に応じて、さらに組成物が投与される経路に応じて異なる。例として、組成物は、０．１％〜１００％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
【００５８】
活性化合物に加えて、本発明の薬学的組成物は、上述のように、１つまたは複数の追加の治療上有効な化合物をさらに含み得る。
【００５９】
本明細書で使用される、薬学的組成物の「非経口投与」は、対象の組織の物理的な切れ目を入れることによって特徴付けられる任意の投与経路、および組織内の切れ目を通しての薬学的組成物の投与を含む。したがって、非経口投与には、非経口投与には、組成物の注入、外科的切開を通る組成物の適用、組織関数非外科的創傷を通る組成物の適用による、薬学的組成物の投与が挙げられるが、これらに限定されない。したがって、活性化合物は、血流、筋肉、または内臓に直接投与され得る。非経口投与に適した手段には、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、および皮下、および腎透析注入技術が挙げられる。そのような非経口投与に適したデバイスには、針（極微針を含む）、注射器、無針注射器、および注入装置が挙げられる。
【００６０】
非経口製剤は、通常、塩、炭水化物、および緩衝剤（好ましくは、ｐＨ３〜９）等の賦形剤を含有し得る、水溶液であるが、いくつかの適用の場合、それらは、滅菌非水溶液またはピロゲンを含まない滅菌水等適切な媒体と併せて使用される乾燥形態として、より適切に製剤され得る。
【００６１】
滅菌条件下、例えば、凍結乾燥による非経口製剤の調製は、当業者によく知られている標準薬学的技術を使用して、容易に達成され得る。
【００６２】
非経口投与に適した薬学的組成物の製剤は、薬学的に許容される担体、例えば、滅菌水または滅菌等張食塩水と組み合わされる、活性成分を含む。そのような製剤は、ボーラス投与または連続投与に適した携帯で、調製、包装、または販売され得る。注入可能な製剤は、単位用量形態、例えば、アンプルまたは保存量を含有する複数回投与容器で調製、包装、または販売され得る。非経口投与のための製剤には、懸濁液、溶液、油性または水性媒体中の乳剤、ペースト、および以下に論じられるような移植可能な持続放出または生分解性製剤が挙げられるが、これらに限定されない。そのような製剤は、懸濁剤、安定剤、または分散剤を含むが、これらに限定されない１つまたは複数の追加成分をさらに含んでもよい。非経口投与用製剤の一実施形態において、活性成分は、再構成成分の非経口投与に先立って、適切な媒体（例えば、ピロゲンを含まない滅菌水）による再構成のために、乾燥（すなわち、粉末または粒状）形態で提供される。
【００６３】
薬学的組成物は、滅菌注入可能な水性または油性の懸濁液または溶液の形態で、調製、包装、または販売され得る。懸濁液または溶液は、周知の技術に従って製剤され得、活性成分に加えて、本明細書に記載される分散剤、湿潤剤、または懸濁剤等の追加成分を含んでもよい。そのような滅菌注入可能な製剤は、非毒性の非経口投与可能な希釈剤または溶媒、例えば、水または１，３−ブタンジオール等を使用して調製され得る。他の許容される希釈剤および溶媒には、リンガー溶液、等張性塩化ナトリウム溶液、および固定油、例えば、合成モノ−またはジ−グリセリドが挙げられるが、これらに限定されない。有用な他の非経口投与可能な製剤には、活性成分を、微結晶形態で、リポソーム調製物中、または生分解性ポリマー系化合物として含むものが挙げられる。持続放出または移植用の組成物は、薬学的に許容されるポリマーまたは疎水性物質、例えば、乳剤、イオン交換樹脂、難溶性ポリマー、または難溶性塩を含み得る。
【００６４】
活性化合物は、細胞過剰増殖の阻害剤であるか、または癌細胞におけるアポトーシスの細胞周期特異的誘導体であるか、または両方である。したがって、これらの化合物は、過剰増殖疾患および障害、例えば、癌を治療するために有用であり、アポトーシスの誘導に応答性である疾患および障害、例えば、癌を治療するために有用である。細胞周期特異的モードの作用を有することによって、これらの化合物は、ＤＮＡ複製等の基本細胞過程を標的とするか、またはＤＮＡ等の基本細胞分子を干渉する標準化学療法薬と比較して、治療指数が高いはずである。したがって、例えば、本明細書において論じられる活性化合物は、目標とされる癌治療において有用となることが期待される。活性化合物は、血管形成に対しても有効であり得る。
【００６５】
本発明の文脈において、過剰増殖および類似する用語は、異常または非調節、あるいは異常および非調節細胞成長、癌等の疾患の特徴を説明するために使用される。細胞増殖の阻害および類似する用語は、本明細書において、化合物が、その化合物と接触されない細胞と比較して、その化合物と接触される細胞の成長を遅延させる、および／または殺傷する能力を示すために使用される。最も好ましくは、この細胞増殖の阻害は、１００％であり、すべての細胞の増殖が停止される、および／または細胞がプログラム化細胞死を経ることを意味する。いくつかの実施形態において、接触される細胞は、腫瘍細胞である。腫瘍細胞は、異常細胞増殖のある細胞として定義される。良性腫瘍細胞は、攻撃的な転移腫瘍をインビボで形成することができない細胞の過剰増殖によって説明される。対照的に、悪性腫瘍は、例えば、腫瘍転移を形成することができる、異なる細胞および生化学的異常のある細胞によって説明される。悪性腫瘍細胞の後天的機能異常（「癌の特徴」とも定義される）は、複製能（「過剰増殖」）、成長シグナルの自給、抗成長シグナルに対する非感受性、アポトーシスからの回避、持続的血管形成、組織侵襲、および転移である。
【００６６】
アポトーシスの誘導体および類似する用語は、本明細書において、その化合物と接触される細胞においてプログラム化細胞死を実行する、化合物を特定するために使用される。アポトーシスは、接触される細胞内の複雑な生化学的事象、例えば、システイン特異的プロテイナーゼ（「カスパーゼ」）の活性、およびクロマチンのフラグメント化によって定義される。化合物と接触される細胞におけるアポトーシスの誘導は、必ずしも細胞増殖の阻害を伴うとは限らない。好ましくは、細胞増殖の阻害および／またはアポトーシスの誘導は、異常細胞成長（過剰増殖）のある細胞に特異的である。したがって、異常細胞成長のある細胞と比較して、正常な増殖または停止細胞は、化合物の増殖阻害またはアポトーシス誘導活性に対して感受性が低いか、または非感受性でさえある。最後に、細胞毒性は、細胞周期依存または細胞周期独立の様式で、アポトーシス／プログラム化細胞死の誘導を含む、種々の機序によって細胞を殺傷する化合物を特定するために、より一般的な意味で使用される。
【００６７】
細胞周期特異的および類似する用語は、本明細書において、化合物を、静止している非分割細胞内ではなく、細胞周期の特定の相を活発に通過する連続的増殖細胞内でのみアポトーシスを誘導するものとして特定するために使用される。連続増殖細胞は、疾患様癌に典型的であり、細胞分割周期のすべての相、つまりＧ（「ギャップ」）１、Ｓ（「ＤＮＡ合成」）、Ｇ２およびＭ（「有糸分裂」）相によって特徴付けられる。
【００６８】
ＡＫＴ（タンパク質キナーゼＢ（ＰＫＢ）としても知られる）、およびその遺伝子族生成物は、セリン／トレオニンタンパク質キナーゼとして特定されている。Ｔｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００１，９８，１０９８３−１０９８５、Ｌａｗｌｏｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．，２００１，１１４，２９０３−２９１０、Ｄｕａｎ，Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．，２０００，８６，１５−２３。ＰＫＢは、細胞増殖、アポトーシス、およびインスリン応答において重要な役割を果たす。したがって、ＰＫＢの調節は、腫瘍形成、異常細胞増殖、および糖尿病の治療において感心対象である。本発明の文脈において、過剰増殖および類似する用語は、異常／非調節細胞成長、疾患様癌の特徴を説明するために使用される。
【００６９】
ＰＫＢ分析
ＰＫＢ活性を評価するためのキナーゼ分析は、活性ＰＫＢ酵素、ＰＰＫＢ特定基質、およびＰ３３標識ＡＴＰを含む。ＰＫＢ酵素の２つの形態、全長ＰＫＢαおよびプレクストリンドメイン（アミノ酸１〜１１７）が削除された、ＰＫＢαのキナーゼドメインを使用する。両方のＰＫＢ酵素は、Ｕｐｓｔａｔｅ Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ（カタログ番号１４〜２７６および１４〜３４１）から入手することができる。使用されるＰＫＢ基質は、Ｏｂａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０００，２７５，３６１０８−３６１１５に記載されるような合成ペプチド（ＡＲＫＲＥＲＴＹＳＦＧＨＨＡ）である。リン酸化基質は、ホスホセルロース膜フィルタプレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって捕捉され、Ｗａｌｌａｃ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ液体シンチレーションカウンタ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）によって測定される。
【００７０】
細胞中のＰＫＢ活性は、ＰＴＥＮヌルヒト乳房主要細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−４６８において分析される。ＰＫＢ基質ＦＫＨＲＬ１、ＧＳＫ３ａ／ｂ、およびツベリンのリン酸化状態は、ホスホ特異的抗体（細胞シグナリング技術）を利用する免疫分析によって測定される。
【００７１】
ＰＫＢ阻害が細胞生存能力に及ぼす影響は、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、Ｕ８７−ＭＧ、ＬＮ−２２９、ＰＣ−３、ＤＵ１４５が挙げられるが、これらに限定されない、一連のヒト主要細胞株において測定される。細胞は、通常の成長培地において７２時間処理し、細胞生存能力は、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ，ＵＫ）によって測定する。
【００７２】
以下の非限定実施例は、活性化合物の調製を説明する。１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ、Ｍｅｒｃｕｒｙ−３００）スペクトルは、提案される構造と一致した。特徴的な化学シフト（δ）は、主要なピークの指定のための従来の省略形（例えば、ｓ単項、ｄ二重項、ｔ三重項、ｑ四重項、ｍ多項、ｂｒ広範）を使用して、テトラメチルシランから１００万分の１ダウンフィールドで示される。質量スペクトル（ｍ／ｚ）は、エレクトロスプレイイオン化（ＥＳＩ）または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）のいずれかを使用して、Ａｇｉｌｅｎｔモデル１１００質量分析計で記録した。以下の略語を、一般的な溶媒に対して使用する：ＣＤＣｌ３：デウテロクロロホルム、Ｄ６−ＤＭＳＯ：デウテロメチルスルホキシド、ＣＤ３ＯＤ：デウテロメタノール。
【実施例】
【００７３】
実施例１
Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩（Ｋｅｖｅｔｒｉｎとしても知られる）
【化１４】
γ−クロロブチロニトリル（５．０ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水に混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、５．４４ｇ（３０．３ｍｍｏｌ、収率６２．７％）の生成物を、白い結晶として、融点１３４〜１３５℃、９７％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６ＤＭＳＯ）δ１．８９（ｍ，２Ｈ）、２．６３（ｔ，２Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．２３（ｔ，２Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．３８（ｓ，３Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ）δ１５．３，２５．０，２８．８，１１９．８，１６９．７
式： Ｃ５Ｈ１０ＣｌＮ３Ｓ
精密質量： １７９．０３
分子量： １７９．６７
ｍ／ｅ： １７９．０３（１００．０％），１８１．０３（３２．１％），１８０．０３（７．４％），１８１．０２（４．５％），１８２．０３（２．０％），１８３．０２（１．５％）．Ｃ，３３．４２、Ｈ，５．６１、Ｃｌ，１９．７３、Ｎ，２３．３９、Ｓ，１７．８５
解析計算値： ３３．４２ ５．６１ ２３．３９ １７．８５
実測値： ３３．４４ ５．４８ ２３．４０ １８．３１
【００７４】
実施例２
Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素塩酸塩
【化１５】
３−クロロプロパンニトリル（４．３２ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。
【００７５】
実施例３
Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素塩酸塩
【化１６】
５−クロロペンタンニトリル（５．６８ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。
【００７６】
実施例４
Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素塩酸塩
【化１７】
６−クロロヘキサンニトリル（６．３６ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。
【００７７】
実施例５
Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化１８】
４−クロロメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（１０１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１９ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ、収率７５％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．０３（ｓ，２Ｈ）、４．５０（ｓ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ）、７．４５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ）、９．２２（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０６．００
式： Ｃ１０Ｈ１２ＣｌＮ３Ｓ
精密質量： ２４１．０４ （２０５．０７）
分子量： ２４１．７４
ｍ／ｅ：２４１．０４（１００．０％）、２４３．０４（３６．６％）、２４２．０５（１１．０％）、２４４．０４（４．６％）、２４２．０４（１．９％）、２４５．０４（１．５％）
【００７８】
実施例６
Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート
【化１９】
メシレート（２００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（６６ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２０３ｍｇ（０．６２ｍｍｏｌ、収率７８％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ２．３５（ｓ，３Ｈ）、２．８０（ｍ，２Ｈ）、２．８５（ｍ，２Ｈ）、２．９１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４）、３．４２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４）、７．２４（ｓ，４Ｈ）、９．０４（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２３４．０７
式： Ｃ１３Ｈ１９Ｎ３Ｏ３Ｓ２
精密質量： ３２９．０９（２３３．１０）
分子量： ３２９．４４
ｍ／ｅ： ３２９．０９（１００．０％）、３３０．０９（１６．０％）、３３１．０８（９．１％）、３３１．０９（１．９％）、３３２．０９（１．４％）、３３０．０８（１．１％）
【００７９】
実施例７
Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２０】
２−クロロメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（１０１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２３１ｍｇ（０．９５ｍｍｏｌ、収率７９％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．１４（ｓ，２Ｈ）、４．５６（ｓ，２Ｈ）、７．３７（ｍ，２Ｈ）、７．４５（ｍ，２Ｈ）、９．２３（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０５．９７
式： Ｃ１０Ｈ１２ＣｌＮ３Ｓ
精密質量： ２４１．０４（２０５．０７）
分子量： ２４１．７４
ｍ／ｅ： ２４１．０４（１００．０％）、２４３．０４（３６．６％）、２４２．０５（１１．０％）、２４４．０４（４．６％）、２４２．０４（１．９％）、２４５．０４（１．５％）
【００８０】
実施例８
Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２１】
６−クロロメチル−２−ピリジルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（１０１ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１６ｍｇ（０．８９ｍｍｏｌ、収率７４％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．２９（ｓ，２Ｈ）、４．６４（ｓ，２Ｈ）、７．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、７．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、７．９１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、９．４６（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０７．００
式： Ｃ９Ｈ１１ＣｌＮ４Ｓ
精密質量： ２４２．０４（２０６．０６）
分子量： ２４２．７３
ｍ／ｅ： ２４２．０４（１００．０％）、２４４．０４（３６．７％）、２４３．０４（１２．０％）、２４５．０４（３．９％）、２４６．０３（１．５％）
【００８１】
実施例９
Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２２】
３−ブロモメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（８０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱して、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１５ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ、収率７９％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．０８（ｓ，２Ｈ）、４．５３（ｓ，２Ｈ）、７．３１（ｍ，２Ｈ）、７．４０（ｍ，２Ｈ）、９．２５（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０６．００
式： Ｃ１０Ｈ１２ＢｒＮ３Ｓ
精密質量： ２８４．９９（２０５．０７）
分子量： ２８６．１９
ｍ／ｅ： ２８６．９９（１００．０％）、２８４．９９（９８．１％）、２８７．９９（１２．７％）、２８６．００（１０．７％）、２８８．９９（４．５％）、２８５．９９（１．９％）
【００８２】
実施例１０
Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩
【化２３】
２−ブロモメチル−１−ナフチルアセトニトリル（２００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（６４ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱して、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１５ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ、収率８３％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ４．５７（ｓ，２Ｈ）、４．８３（ｓ，２Ｈ）、７．６３（ｍ，２Ｈ）、７．７２（ｍ，１Ｈ）、８．０５（ｍ，２Ｈ）、８．２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２４）、９．１（ｓ，２Ｈ）、９．２８（ｓ，２Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２５６．００。
式： Ｃ１４Ｈ１４ＢｒＮ３Ｓ
精密質量： ３３５．０１（２５５．０８）
分子量： ３３６．２５
ｍ／ｅ： ３３５．０１（１００．０％）、３３７．０１（９７．６％）、３３６．０１（１７．１％）、３３８．０１（１６．４％）、３３７．００（４．５％）、３３９．００（４．４％）、３３９．０１（１．４％）、３３８．００（１．１％）、３３７．０２（１．１％）
【００８３】
実施例１１
本発明の化合物の調製を示す、化学反応が以下に表される。示されるように、これらの化合物は、適切なニトリル誘導体をチオ尿素と反応させることによって、実施例１のそれに類似する方法で調製され得る。チオ尿素は、窒素原子上の４個の置換基のうちの１、２、もしくは３個が、水素以外であり、式Ｉの他の化合物を提供する、誘導体によって置換されてもよい。
【化２４】
【化２５】
【化２６】
【化２７】
【化２８】
【化２９】
【００８４】
この実施例で表される反応において、ｎおよびｍは、ゼロであるか、または独立して、１〜８の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ビニル、アリール、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロヘキシル部分等であり、これらも１つまたは複数の置換基を有し得る。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、アルケニルおよびアルキニルでもあり得る。アルケニル基には、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル等が挙げられるが、これらに限定されない。代表的なアルキニル基には、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルが挙げられる。
【００８５】
上述のとおり調製される塩酸塩は、対応する遊離塩基または他の薬学的に許容される塩に、既知の方法によって変換され得る。他の薬学的に許容される塩は、上記反応のそれぞれにおいて、ニトリルを適切な開始物質（例えば、ニトリルを含有するクロリンではなく、ニトリルを含有するブロミン）を置換することによって、調製されてもよい。
【００８６】
実施例１２−Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有効性研究
化学物質、細胞および培地
Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、実施例１に記載されるように合成した。シスプラチン、ビンクリスチン、５−ＦＵ、およびタキソールは、Ｓｉｇｍａ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した。Ｈ４６０およびＨ５２２肺癌細胞、ＨＴ−２９、ＳＷ−６２０、およびＣｏｌｏ２０５、およびＨＣＴ−１５結腸癌細胞、ＯｖＣａｒ−３、およびＳＫＯｖ−３卵巣癌細胞、ＤＵ−１４５、およびＰＣ−３前立腺癌細胞、ならびにＳＮＢ−１９およびＵ−２５１グリオーマ細胞、ＨＴ−１０８０線維肉腫、およびＳＷ−４８０結腸癌細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から購入した。Ａ２７８０卵巣癌細胞およびそれらのシスプラチン耐性変異型Ａ２７８０／ＣＰ１およびＡ２７８０／ＣＰ２は、社内で生成した。Ｃｏｌｏｎ ＨＣＴ−１１６結腸癌細胞、それらのｐ５３−／−、およびｐ２１−／−亜株は、Ｃｅｎｔｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｓａｌｅｎ，Ｏｈｉｏ）のＧａｎｇａｄｈａｒａｎ博士から厚意で提供されたが、染色体３が補充されたＨＣＴ−１１６は、Ｔｈｅ Ｒａｊｉｖ Ｇａｎｄｈｉ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｒｏｈｉｎｉ，Ｄｅｌｈｉ，Ｉｎｄｉａ）から入手した。特に指示のない限り、媒体および他の試薬は、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎから購入した。Ｂｉｏ Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ製の基礎培養培地（ＲＰＭＩ−１６４０）は、０．２２μｍ Ｍｉｌｌｅｘ−ＧＶフィルタ装置（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を通して滅菌した。調製された培地は、小アリコート中、５℃で、暗所保管した。基礎培養培地は、培養培地として使用するために、１０％ウシ胎仔血清を補充し（ＦＣＳ−５６０で３０分間熱不活性化される）、ミトゲン、すなわち、リポ多糖類（ＬＰＳ、１０〜５０μｇ／ｍＬ）を添加して、細胞を増殖させた。
【００８７】
成長阻害分析
細胞毒性は、Ｍａｘｉｍｕｍ Ｔｏｌｅｒａｔｅｄ Ｔｉｔｅｒ（ＭＴＴ）分析によって決定した。簡潔に述べると、細胞を２４ウェル組織培養プレートに、１０，０００〜１５，０００細胞／ウェルで播種し、一晩培養した。指数関数的に成長する細胞を、次に、異なる薬物濃度に３〜４世代時間曝露した。細胞生存性は、細胞をＭＴＴテトラゾリウム塩に４ 時間、３７℃で曝露することによって決定し、ホルマザンの形成は、マイクロプレートリーダによって５６０ｎｍで測定した。未処理対照と比較した、５０％細胞成長を阻害する濃度は、用量の関数として、生存率をプロットする曲線から決定した。すべての値は、それぞれ重複して行われた少なくとも３つの独立実験の平均である。
【００８８】
細胞増殖分析
ＭＴＴ溶液（１０μＬ）を、４８時間培養したリンパ球のすべてのウェルに添加し、４時間３７℃で培養した。２つの培養セットを調製し、ＬＰＳを１つのセットのみに添加した。この期間中、ホルマザン結晶が、各ウェルの底に形成した。消費された媒体を、培養細胞の懸濁液とともにピペットで除去した。次に、酸性化イソプロパノール（無水イソプロパノール中１００μＬの０．１Ｎ ＨＣｌ）を、すべてのウェルに添加し、完全に混合して、紺青色の結晶を溶解した。数分後、室温で、プレートアナライザを使用して、二波長測定システムによってプレートを読み取った（試験波長５４０ｎｍ、参照波長６３０ｎｍ）。プレートは、酸性化イソプロパノールの添加から１時間以内に読み取った。細胞増殖は、刺激指数として以下のように計算した。
【数１】
【００８９】
ｐ５３の免疫学的局在決定
細胞の増殖をもたらすタンパク質である、ｐ５３の局在を決定するために、免疫細胞化学分析を行った。簡潔に述べると、ＨＣＴ−１１６細胞（ＡＴＣＣ）を、ガラススライドに一晩付着させ、イソ毒性濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎ（３００ｎｇ／ｍｌ）、またはシスプラチン（１１μｇ／ｍｌ）に６時間曝露した。薬物曝露後に、細胞を３．７％ホルムアルデヒドで固定し、０．２５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で透過処理し、１％ ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）で遮断した。次に、細胞を１時間、抗ｐ５３ポリクローナル抗体（Ｓｃ−６２４３、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）、続いて、二次抗ウサギＦＩＴＣ結合抗体（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕ．Ｋ．）と共に培養した。カバースリップをＶｅｃｔａｓｈｉｅｌｄに載置し（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｖｅｃｔｏｒ，Ｕ．Ｋ．）、プランＡｐｏｃｈｒｏｍａｔ ｘ６３対物レンズ（Ｚｅｉｓｓ）を使用することによって、適切なフィルタおよびレーザー共焦点走査システムＬＳＭ５１０を備える、落射蛍光顕微鏡Ａｘｉｏｖｅｒｔ１００Ｍで分析した。
【００９０】
ウェスタンブロット分析
ウェスタンブロット分析を行った。全体細胞溶解物を、イソ毒性濃度のＫｅｖｉｔｒｅｎ（３００ｎｇ／ｍｌ）、またはシスプラチン（１１ｎｇ／ｍｌ）で６時間処理された細胞から調製した。タンパク質（５０μｇ／レーン）を、４〜１２％ポリアクリルアミドＳＤＳゲル上で分離し、ＰｏｌｙＳｃｒｅｅｎ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）に移した。ｐ５３、ｐ２１、およびβ−アクチンの存在を、それぞれ抗ｐ５３抗体（Ｓｃ−６２４３、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、抗ｐ２１抗体（Ｓｃ−３９７６、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、および抗アクチン抗体（Ｓｃ−１６１６、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）によって明らかにした後、ペルオキシダーゼ共役二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）で培養し、強化された化学発光（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ，Ｈｅｂｒｏｎ，ＣＴ）によって検出した。
【００９１】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎがヒト腫瘍細胞株の生存能力に及ぼす影響
Ｋｅｖｅｔｒｉｎが、肺、結腸、乳房、卵巣、前立腺の癌、肉腫、神経膠腫、および白血病を含む、１０種類の異なるヒト腫瘍細胞の生存能力に及ぼす影響を、上述の細胞増殖分析を使用して決定した。細胞生存能力は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎに３倍増期間、連続曝露した後に測定した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの指示濃度は、平均ＩＣ５０に対応する。結果は、以下に記載される。一般に、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、上皮起源のヒト腫瘍細胞に対して、強力な活性を有する。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの細胞毒性作用は、非小細胞肺、結腸、および卵巣癌に対して最も顕著であり、ＩＣ５０は、１１〜６８ｎｇ／ｍｌの範囲であった。興味深いことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、悪性神経膠腫細胞に対しても強力な活性を示した（ＩＣ５０〜３０ｎｇ／ｍｌ）。
【表１】
【００９２】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎ細胞毒性の時間依存性
曝露時間がＫｅｖｅｔｒｉｎの細胞毒性作用に及ぼす影響を決定するために、ＤＵ−１４５、ＨＣＴ−１１６、またはＨＴ−２９癌細胞を、異なる濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎに、５、１０、２０、３０、または４５分、あるいは１、２、６、２４、または１２０時間曝露した。長い曝露時間が細胞毒性の増加と関連する、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの明白な時間依存の細胞毒性作用が、３つの細胞株すべてに認められた。結果を、図１に示す。時間依存性は、曝露時間が３０〜４５分以下の場合に特に劇的であった。対照的に、薬物曝露時間を２４時間を超えて延長することは、細胞毒性に影響しなかった。
【００９３】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンの活性スペクトラム
Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンが指示腫瘍株の生存能力に及ぼす影響を、ＭＴＴ分析を使用して、Ｋｅｖｅｔｒｉｎに３倍増時間、連続曝露した後に測定し、結果を、図２に示す。示される値は、以下のように計算される：ログ（ＩＣ５０個別の細胞株−ＩＣ５０平均）。負の値は、細胞株が、平均よりも敏感であることを示すのに対して、正の値は、細胞株が平均よりも耐性があることを示す。試験されたすべての細胞株の平均ＩＣ５０は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの場合、４．９ｘ１０−７Ｍ、およびシスプラチンの場合、２．１ｘ１０−６Ｍであった。ＭＴＴ分析結果を考慮すると、図２の１０種類の異なるヒト腫瘍細胞に対するシスプラチンおよびＫｅｖｅｔｒｉｎの活性スペクトラムの比較は、２つの薬物間の明らかな相違を示す。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの活性は、肺、頭頸部、乳房、卵巣、および結腸細胞株に対して、シスプラチンのそれよりも顕著であった。興味深いことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、一般に、特定の腫瘍細胞型内で高い異種反応を呈する、シスプラチンとは対照的に、試験された頭頸部、非小細胞肺、卵巣、結腸、および神経膠腫全てに対して活性を示した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎとシスプラチンとの間の差異は、３つの頭頸部癌細胞株に対して特に顕著であったが、そこでＫｅｖｅｔｒｉｎは、すべての細胞株に対して活性を示したが、シスプラチンは、３つの細胞株のうちの１つに対して活性であったことである。驚くべきことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、シスプラチンの場合に認められたものとは異なる、アルキル化剤に敏感である、白血病に対して比較的制限された活性を有した。
【００９４】
ヒト腫瘍異種移植片を有する裸マウスにおけるＫｅｖｅｔｒｉｎのインビボ有効性研究
動物および動物ケア
マウスは、１２時間／１２時間の明暗サイクルで、室温１８〜２６℃、および比較的高い湿度３０〜７０％で飼育した。動物の飼料および水は、不断で付与した。この順応期間中、各動物は、少なくとも１日１回、任意の異常または感染性疾患の発症に関して観察された。使用に適していると決定された動物のみをこの研究に割り当てた。本研究での使用に許容されないと考えられるいかなる動物も、同一業者からの類似する年齢および体重の動物と置き換えた。腫瘍質量が、平均、約１００ｍｍ３に達すると、腫瘍の大きさに従って、無作為化し、グループに分けた。
【００９５】
ヒト腫瘍細胞株
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌（ＨＴＢ−２６）、ＨＴ−２９結腸癌（ＨＴＢ−３８）、ＰＣ−３前立腺癌（ＣＲＬ−１４３５）、ＨＣＴ−１５Ｐ−糖タンパク質耐性結腸癌は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から購入した。
【００９６】
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株は、最初に、乳腺腺癌の５１歳白人女性の胸水から単離された。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【００９７】
ＨＴ−２９細胞株は、最初に、結腸直腸腺癌の４４歳白人女性から１９６４年に単離された。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【００９８】
ＰＣ−３細胞株は、最初に、グレードＩＶ転移性前立腺腺癌の６２歳白人男性の骨転移から単離された。これらの細胞は、低い酸ホスファターゼおよびテストステロン−５−アルファ還元酵素活性を呈し、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【００９９】
ＨＣＴ−１５親細胞株は、最初に、デュークＣ型結腸直腸腺癌の男性から単離された。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。
【０１００】
Ａ５４９およびＮＣＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌株は、Ｄａｎａ Ｆａｒｂｅｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）からの寄贈であった。
【０１０１】
試験システム
細胞は、１０％ＦＢＳ ＲＰＭＩ培地中で培養した。細胞は、本有用性研究に対して、さらなる拡張のために、５代継代で取得した。裸マウス（Ｎｕ／Ｎｕ）の雄（２０〜２４ｇ）および雌（１９〜２２ｇ）の両方を、６〜８週齢で、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。これらのマウスは、研究の開始時においてナイーブであり、耳の穿孔によって識別された。マウスは、５日間放置して、新しい環境に順化させた。ＲＰＭＩ：マトリゲル５０：５０混合中のヒト腫瘍細胞を、各マウスの右脇腹に皮下的に移植した。腫瘍が平均容積１００ｍｍ３に達したときに、投与を開始した。
【０１０２】
生存中の観察および測定
任意の悪影響について、マウスを毎日観察した。処置前、処置中の隔日、および処置後に、マウスの体重を測定した。動物の状態が悪化した場合は、その動物のいかなる処置をも中断した。回復しない場合は、動物を犠牲死させた。１５％を超える体重喪失を示すいかなる動物も、状態が悪化していると見なした。２０％を超える体重喪失を示すいかなる動物も、犠牲死させた。腫瘍部位上に皮膚の持続的潰瘍化を呈するいかなる動物も、犠牲死させた。マウスの腫瘍の大きさの測定値を、処置前、処置中の隔日、および処置後に取った。同一の科学者が、研究を通して、腫瘍測定値の測定を担当した。
【０１０３】
終末手順
媒体群からの腫瘍が１０００ｍｍ３に到達すると、すべての群からのすべての動物を、ＣＯ２窒息により犠牲死させた。犠牲死時に、腫瘍を除去し、測量した。
【０１０４】
研究スケジュール
ＲＰＭＩ：マトリゲル５０：５０混合中の５ｘ１０６腫瘍細胞を、各裸マウスの右脇腹に皮下的に移植した。腫瘍が平均容積１００ｍｍ３に到達したときに（通常、移植後１４日目までに達した）、投与を開始し、投与は８日間行った。剖検は、治療の終了後、４１日目に行った。
【０１０５】
材料
Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、実施例１に記載されるように調製した。周囲温度（または−２０℃以下）で保存し、光から保護した。試験動物に投与するために、Ｋｅｖｅｔｒｉｎをリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に懸濁させた（滅菌、ｐＨ＝７．４）。使用する前に、ＰＢＳを周囲温度で保存した。各懸濁液を調製した後、−２０℃以下で保存し、光から保護した。
【０１０６】
投与
投与手順は、マウスを無作為化し、グループ分けした日に開始した。以下の段落において論じられるように、腫瘍移植後７、９、および１１日目に用量を投与した。各用量は、尾静脈を介して投与した。
【０１０７】
Ｋｅｖｅｔｒｉｎに起因する体重喪失
Ｋｅｖｅｔｒｉｎを、腫瘍を持つ動物に静脈内注入（ＩＶ）した場合、化合物の投与に起因する体重喪失は、許容可能な範囲内であった。７、９、および１１日目に静脈内投与された１００ｍｇ／ｋｇは、体重の６．８％の喪失をもたらし、同一スケジュールで投与された２００ｍｇ／ｋｇは、９．３％の体重喪失をもたらした。これらの濃度はいずれも、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性を確立するために使用され得る。これらの結果を、図３に示す。
【０１０８】
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソール静脈内注入と比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト乳癌ＭＤＡ−ＭＢ−２３１を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、タキソール治療した動物よりも高い有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物よりも１２日、未治療の対照よりも３２日遅延した。結果を、図４に示す。
【０１０９】
ＨＴ−２９結腸癌における、７〜１２日目の５−ＦＵと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト結腸癌ＨＴ−２９を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、５−ＦＵ治療した動物よりも高い有用性を示した。腫瘍成長は、５−ＦＵ治療した動物よりも１０日、未治療の対照よりも３３日遅延した。結果を、図５に示す。
【０１１０】
ＰＣ−３ヒト前立腺癌における、７日目の１０ｍｇ／ｋｇシスプラチンと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト前立腺癌ＰＣ−３を皮下的に移植した。スケジュールに従って、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを静脈内注入し、シスプラチンを腹腔内（ＩＰ）注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、シスプラチン治療した動物よりも高い有用性を示した。腫瘍成長は、シスプラチン治療した動物よりも８日、未治療の対照よりも３４日遅延した。結果は、図６に示される。
【０１１１】
Ｐ−糖タンパク質媒介耐性を有するＨＣＴ−１５ヒト結腸癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性
動物に、Ｐ−糖タンパク質耐性細胞モデルである、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１５を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物、および未治療の対照よりも１５日遅延した。結果を、図７に示す。
【０１１２】
Ａ５４９多剤耐性ヒト肺癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ の有用性
動物に、多剤耐性ヒト肺癌を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において強力な有用性を示した。腫瘍成長は、未治療の対照よりも２６日遅延した。結果を、図８に示す。
【０１１３】
ＮＣｌＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性
動物に、別の多剤耐性ヒト肺癌を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において強力な有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物よりも約９日、および未治療の対照よりも約２４日遅延した。結果を、図９に示す。
【０１１４】
書籍および学術論文を含むが、これらに限定されない、本出願において引用されるすべての出版物は、それぞれ参照することによりそれら全体が本明細書に組み込まれる。
【０１１５】
発明は、開示される実施形態を参照して上述されたが、当業者であれば、詳述される特定の実験が、発明の単なる例証に過ぎないことを容易に理解するであろう。発明の精神から逸脱することなく、種々の修正を行うことができることを理解されたい。したがって、発明は、以下の請求項によってのみ制限される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物において、過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療するための薬学的組成物であって、抗増殖性疾患、抗炎症性、抗ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、
【化３０】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化３１】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、前記二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化３２】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化３３】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化３４】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化３５】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、前記６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、前記５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、前記３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化３６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化３７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化３８】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項２】
Ｚは、硫黄である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記式Ｉの化合物は、式ＩＩの化合物であり、
【化３９】
式中、ｎ、ｍ、Ｗ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、請求項１に定義されるとおりであり、Ｘは、薬学的に許容される酸である、請求項１または２に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
前記薬学的に許容される酸は、ＨＣｌまたはＨＢｒである、請求項３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
前記組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含有しないことを条件とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素から選択される化合物、ならびにその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記過剰増殖性疾患は、細胞過剰増殖であり、前記組成物は、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、前記組成物は、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、前記組成物は、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜８および１０のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記組成物は、用量単位形態である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の非経口薬学的組成物。
【請求項１４】
前記哺乳動物は、ヒトである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、
【化４０】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化４１】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化４２】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化４３】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化４４】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化４５】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、前記６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、前記５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、前記３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有すし、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化４６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有すし、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化４７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化４８】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である環、
から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩を、投与することを含む、方法。
【請求項１６】
前記過剰増殖性疾患は、細胞性過剰増殖であり、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩が投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩が投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩が投与される、請求項１５または１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記過剰増殖性疾患は、乳房、膀胱、骨、脳、中枢および末梢神経系、結腸、内分泌腺、食道、子宮内膜、生殖細胞、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、咽頭および下咽頭、中皮腫、肉腫、卵巣、膵臓、前立腺、肛門、小腸、柔組織、睾丸、胃、皮膚、尿管、膣および外陰の癌、遺伝性癌、網膜芽腫、およびウィルムス腫瘍、白血病、リンパ腫、非ホジキン病、慢性ならびに急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、ホジキン病、多発性骨髄腫、およびＴ細胞リンパ腫、骨髄異形成症候群、形質細胞新生組織形成、腫瘍随伴症候群、未知の原発部位の癌、薬物耐性癌、およびＡＩＤＳ関連悪性腫瘍から成る群から選択され、前記疾患は、抗過剰増殖性疾患有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、そのような治療を必要とする哺乳類に投与することによって治療される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記増殖性疾患は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型の肺癌および任意の女性癌、卵巣癌、および結腸癌から成る群から選択される癌であり、前記疾患は、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、そのような治療を必要とする哺乳類に投与することによって治療される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記過剰増殖性疾患は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、および結腸癌から成る群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記頭部癌は、神経膠腫である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記哺乳類は、ヒトである、請求項１５〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１５に記載の過剰増殖性疾患を治療する方法であって、前記疾患は、哺乳類患者において、アポトーシスの誘導に応答性であり、それを必要とする前記患者に、請求項２０に定義される、式Ｉの化合物であるある量の活性化合物、またはその薬学的に許容される塩と、ある量の少なくとも１つの第２の化合物または放射線とを、個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして投与することを含み、前記第２の化合物は、化学療法抗癌剤および標的特異的抗癌剤から成る群から選択される抗癌剤であり、前記量の前記活性化合物および前記第２の化合物または放射線は、治療効果をもたらす、方法。
【請求項２５】
前記第２の化合物は、（ｉ）アルキル化／カルバミル化剤、（ｉｉ）白金誘導体、（ｉｉｉ）抗有糸分裂剤／チューブリン阻害剤、（ｉｖ）トポイソメラーゼ阻害剤、（ｖ）ピリミジン拮抗薬、（ｖｉ）プリン拮抗薬、（ｖｉｉ）葉酸拮抗薬、および（ｖｉｉｉ）注入放射性物質から成る群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記標的特異的抗癌剤は、（ｉ）キナーゼ阻害剤、（ｉｉ）プロテアソーム阻害剤、（ｉｉｉ）ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、（ｉｖ）熱ショックタンパク質９０阻害剤、（ｖ）血管標的剤（ＶＡＴ）抗血管新生薬およびＫＤＲチロシンキナーゼ阻害剤、（ｖｉ）モノクローナル抗体ならびにモノクローナル抗体の変異体および複合体、ならびに抗体フラグメント、（ｖｉｉ）オリゴヌクレオチド系治療薬、（ｖｉｉｉ）トール様受容体／ＴＬＲ９作動薬、ＴＬＲ７作動薬およびその類似体、またはＴＬＲ７／８作動薬、ならびにＴＬＲ７／８作動薬としての免疫刺激ＲＮＡ、（ｉｘ）プロテアーゼ阻害剤、（ｘ）ホルモン治療薬、（ｘｉ）ブレオマイシン、（ｘｉｉ）レチノイド、（ｘｉｉｉ）ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、（ｘｉｖ）アラノシン、（ｘｖ）サイトカイン、（ｘｖｉ）インターフェロン、および（ｘｖｉｉ）細胞死受容体作動薬から成る群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記式Ｉの化合物または前記その薬学的に許容される塩は、個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして、抗癌有効量の放射線とともに投与される、請求項２４に記載の方法
【請求項２８】
Ｚは、硫黄である、請求項１５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはその薬学的に許容される塩である、請求項１５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩である、請求項１５〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記化合物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素、および前記その薬学的に許容される塩から選択される、請求項１５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
式Ｉの化合物であって、
【化４９】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり
【化５０】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化５１】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化５２】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化５３】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化５４】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、前記６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、前記５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、前記３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化５５】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化５６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化５７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩であるが、但し、前記化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホン酸塩、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ピクリン酸塩、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌではないことを条件とする、化合物。
【請求項３３】
Ｚは、硫黄である、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭化水素酸塩ではないことを条件とする、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３５】
前記化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩ではないことを条件とする、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３６】
前記化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されないことを条件とする、請求項３２に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３７】
Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、およびＳ−（１−シアノメチルナフチ−２−イル））メチルイソチオ尿素、およびそれらの薬学的に許容される塩から選択される、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３８】
前記式Ｉの化合物は、以下の化合物
【化５８】
【化５９】
【化６０】
およびそれらの薬学的に許容される塩から選択され、式中、ｎおよびｍは、ゼロまたは独立して１〜８の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ビニル、アリル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、および−ＣＨ２−シクロヘキシル部分であり得、これらは請求項３５において定義されるような１つまたは複数の置換基を有し得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４はまた、アルケニルおよびアルキニルであってもよく、前記アルケニル基は、エテニル、プロペニル、ブテニル、または１−メチル−２−ブテン−１−イルであり、前記アルキニル基は、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、または１−プロピニルでもあり得る、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３９】
抗過剰増殖、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の請求項３８に記載の化合物、および薬学的に許容される担体を含む、哺乳類において過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療するための、薬学的組成物。
【請求項４０】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、前記組成物は、アポトーシス誘導量の前記化合物を含む、請求項３９に記載の薬学的組成物。
【請求項４１】
哺乳類において過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項３８に記載の抗過剰増殖、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項４２】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、アポトーシスを誘導する量の化合物が投与される、請求項４１に記載の方法。
【請求項１】
哺乳動物において、過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療するための薬学的組成物であって、抗増殖性疾患、抗炎症性、抗ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、
【化３０】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化３１】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、前記二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化３２】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化３３】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化３４】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化３５】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、前記６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、前記５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、前記３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化３６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化３７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化３８】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項２】
Ｚは、硫黄である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記式Ｉの化合物は、式ＩＩの化合物であり、
【化３９】
式中、ｎ、ｍ、Ｗ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、請求項１に定義されるとおりであり、Ｘは、薬学的に許容される酸である、請求項１または２に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
前記薬学的に許容される酸は、ＨＣｌまたはＨＢｒである、請求項３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
前記組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含有しないことを条件とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素から選択される化合物、ならびにその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記過剰増殖性疾患は、細胞過剰増殖であり、前記組成物は、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、前記組成物は、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、前記組成物は、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項１〜８および１０のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記組成物は、用量単位形態である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の非経口薬学的組成物。
【請求項１４】
前記哺乳動物は、ヒトである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、
【化４０】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化４１】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化４２】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化４３】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化４４】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化４５】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、前記６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、前記５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、前記３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有すし、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化４６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有すし、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化４７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化４８】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である環、
から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩を、投与することを含む、方法。
【請求項１６】
前記過剰増殖性疾患は、細胞性過剰増殖であり、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩が投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩が投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩が投与される、請求項１５または１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記過剰増殖性疾患は、乳房、膀胱、骨、脳、中枢および末梢神経系、結腸、内分泌腺、食道、子宮内膜、生殖細胞、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、咽頭および下咽頭、中皮腫、肉腫、卵巣、膵臓、前立腺、肛門、小腸、柔組織、睾丸、胃、皮膚、尿管、膣および外陰の癌、遺伝性癌、網膜芽腫、およびウィルムス腫瘍、白血病、リンパ腫、非ホジキン病、慢性ならびに急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、ホジキン病、多発性骨髄腫、およびＴ細胞リンパ腫、骨髄異形成症候群、形質細胞新生組織形成、腫瘍随伴症候群、未知の原発部位の癌、薬物耐性癌、およびＡＩＤＳ関連悪性腫瘍から成る群から選択され、前記疾患は、抗過剰増殖性疾患有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、そのような治療を必要とする哺乳類に投与することによって治療される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記増殖性疾患は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型の肺癌および任意の女性癌、卵巣癌、および結腸癌から成る群から選択される癌であり、前記疾患は、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、そのような治療を必要とする哺乳類に投与することによって治療される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記過剰増殖性疾患は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、および結腸癌から成る群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記頭部癌は、神経膠腫である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記哺乳類は、ヒトである、請求項１５〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１５に記載の過剰増殖性疾患を治療する方法であって、前記疾患は、哺乳類患者において、アポトーシスの誘導に応答性であり、それを必要とする前記患者に、請求項２０に定義される、式Ｉの化合物であるある量の活性化合物、またはその薬学的に許容される塩と、ある量の少なくとも１つの第２の化合物または放射線とを、個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして投与することを含み、前記第２の化合物は、化学療法抗癌剤および標的特異的抗癌剤から成る群から選択される抗癌剤であり、前記量の前記活性化合物および前記第２の化合物または放射線は、治療効果をもたらす、方法。
【請求項２５】
前記第２の化合物は、（ｉ）アルキル化／カルバミル化剤、（ｉｉ）白金誘導体、（ｉｉｉ）抗有糸分裂剤／チューブリン阻害剤、（ｉｖ）トポイソメラーゼ阻害剤、（ｖ）ピリミジン拮抗薬、（ｖｉ）プリン拮抗薬、（ｖｉｉ）葉酸拮抗薬、および（ｖｉｉｉ）注入放射性物質から成る群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記標的特異的抗癌剤は、（ｉ）キナーゼ阻害剤、（ｉｉ）プロテアソーム阻害剤、（ｉｉｉ）ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、（ｉｖ）熱ショックタンパク質９０阻害剤、（ｖ）血管標的剤（ＶＡＴ）抗血管新生薬およびＫＤＲチロシンキナーゼ阻害剤、（ｖｉ）モノクローナル抗体ならびにモノクローナル抗体の変異体および複合体、ならびに抗体フラグメント、（ｖｉｉ）オリゴヌクレオチド系治療薬、（ｖｉｉｉ）トール様受容体／ＴＬＲ９作動薬、ＴＬＲ７作動薬およびその類似体、またはＴＬＲ７／８作動薬、ならびにＴＬＲ７／８作動薬としての免疫刺激ＲＮＡ、（ｉｘ）プロテアーゼ阻害剤、（ｘ）ホルモン治療薬、（ｘｉ）ブレオマイシン、（ｘｉｉ）レチノイド、（ｘｉｉｉ）ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、（ｘｉｖ）アラノシン、（ｘｖ）サイトカイン、（ｘｖｉ）インターフェロン、および（ｘｖｉｉ）細胞死受容体作動薬から成る群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記式Ｉの化合物または前記その薬学的に許容される塩は、個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして、抗癌有効量の放射線とともに投与される、請求項２４に記載の方法
【請求項２８】
Ｚは、硫黄である、請求項１５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはその薬学的に許容される塩である、請求項１５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩である、請求項１５〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記化合物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素、および前記その薬学的に許容される塩から選択される、請求項１５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
式Ｉの化合物であって、
【化４９】
式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ２、ＢｒＯ２、およびＩＯ２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ１およびＲ２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり
【化５０】
式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
またはＲ２およびＲ３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
【化５１】
Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
【化５２】
、または−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−、ｃｉｓ−ＣＲ４＝ＣＲ５−から選択され、Ｒ４およびＲ５は、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ１−Ｃ６アルキルエーテル（Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、
【化５３】
式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、
（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，２−二置換３員環であって、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９を有してもよく、
【化５４】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、前記６員環は、飽和であり得るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、前記５員環および４員環は、飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、前記３員環は、飽和であり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｃ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜１３番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０を有してもよく、
【化５５】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｄ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１を有してもよく、
【化５６】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、
（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示されるように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、前記環は、以下に記載される２〜９番目の環から選択され、前記二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する前記基であり、前記二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３を有してもよく、
【化５７】
式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、およびＲ１３は、水素、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、またはＣ１−Ｃ６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ２）ｍおよび（ＣＨ２）ｎにどのように結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩であるが、但し、前記化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホン酸塩、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ピクリン酸塩、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌではないことを条件とする、化合物。
【請求項３３】
Ｚは、硫黄である、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭化水素酸塩ではないことを条件とする、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３５】
前記化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩ではないことを条件とする、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３６】
前記化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されないことを条件とする、請求項３２に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３７】
Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、およびＳ−（１−シアノメチルナフチ−２−イル））メチルイソチオ尿素、およびそれらの薬学的に許容される塩から選択される、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３８】
前記式Ｉの化合物は、以下の化合物
【化５８】
【化５９】
【化６０】
およびそれらの薬学的に許容される塩から選択され、式中、ｎおよびｍは、ゼロまたは独立して１〜８の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、ビニル、アリル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、および−ＣＨ２−シクロヘキシル部分であり得、これらは請求項３５において定義されるような１つまたは複数の置換基を有し得、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４はまた、アルケニルおよびアルキニルであってもよく、前記アルケニル基は、エテニル、プロペニル、ブテニル、または１−メチル−２−ブテン−１−イルであり、前記アルキニル基は、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、または１−プロピニルでもあり得る、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３９】
抗過剰増殖、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の請求項３８に記載の化合物、および薬学的に許容される担体を含む、哺乳類において過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療するための、薬学的組成物。
【請求項４０】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、前記組成物は、アポトーシス誘導量の前記化合物を含む、請求項３９に記載の薬学的組成物。
【請求項４１】
哺乳類において過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項３８に記載の抗過剰増殖、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項４２】
前記過剰増殖性疾患は、癌であり、アポトーシスを誘導する量の化合物が投与される、請求項４１に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【公表番号】特表２０１２−５２７４６４（Ｐ２０１２−５２７４６４Ａ）
【公表日】平成２４年１１月８日（２０１２．１１．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５１１９０７（Ｐ２０１２−５１１９０７）
【出願日】平成２２年５月１４日（２０１０．５．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３４８３８
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１３５１７０
【国際公開日】平成２２年１１月２５日（２０１０．１１．２５）
【出願人】（５１１２８２７７１）セルセウティックス コーポレイション (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１１月８日（２０１２．１１．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年５月１４日（２０１０．５．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３４８３８
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１３５１７０
【国際公開日】平成２２年１１月２５日（２０１０．１１．２５）
【出願人】（５１１２８２７７１）セルセウティックス コーポレイション (1)
【Ｆターム（参考）】
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