ノイラミン酸誘導体、シアリダーゼ活性阻害剤及び抗インフルエンザ薬
【課題】ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性を阻害し難い、ノイラミン酸誘導体、シアリダーゼ活性阻害剤及び抗インフルエンザ薬を提供する。
【解決手段】本発明のノイラミン酸誘導体は、下記化学式（１）（ただし、Ｒ１及びＲ２は、水素又は炭素数１〜８の分岐してもよいアルキル基若しくは炭素数１〜８の分岐してもよいシクロアルキル基を示し、Ｒ３は水素又はフッ素を示す）又はその薬学上許容される塩、水和物、溶媒和物若しくはプロドラッグからなることを特徴とする。
【解決手段】本発明のノイラミン酸誘導体は、下記化学式（１）（ただし、Ｒ１及びＲ２は、水素又は炭素数１〜８の分岐してもよいアルキル基若しくは炭素数１〜８の分岐してもよいシクロアルキル基を示し、Ｒ３は水素又はフッ素を示す）又はその薬学上許容される塩、水和物、溶媒和物若しくはプロドラッグからなることを特徴とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ノイラミン酸誘導体、並びにそれを有効成分として含有するシアリダーゼ活性阻害剤及び抗インフルエンザ薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
インフルエンザウイルスは鳥類等が感染し、伝播の過程できわめて変異しやすく、タミフルのような既存の薬剤に対する耐性が発現する。こうして新型ウイルスが発生すると、世界同時流行（パンデミック）となる場合もあり、社会的、経済的に甚大な被害をもたらす。ウイルス感染にはワクチンが有効であるが、インフルエンザウイルスやＨＩＶのような、きわめて変異しやすいウイルスにおいては、ワクチンのみでは対応できない場合もあり、それを補うものとして、抗ウイルス薬の開発が社会的急務となっている。
【０００３】
ウイルスの表面には、ヘマグルチニン（ＨＡ）及びノイラミニダーゼ（ＮＡ）（シアリダーゼとも呼ばれるが、ウイルス学の分野ではノイラミニダーゼと呼ばれる場合が多い。）という２つの重要な糖タンパク質スパイクが存在しており、ウイルスの侵入や複製に重要な役割をしている。すなわち、ヘマグルチニンは糖複合体の残基に結合するシアル酸の末端を認識し、結合する。これにより、宿主細胞に付着したり、侵入したりするのを媒介する。
一方、ノイラミニダーゼは、ウイルス分子表面のヘマグルチニンに結合する糖タンパク質端末のシアル酸（Ｉ）（下記構造式化１参照）を加水分解する反応を触媒し（これをシアリダーゼ活性という）、これにより宿主細胞からのウイルスの放出過程を促進する。さらに、ノイラミニダーゼは呼吸器系の粘液を通じてウイルス分子の移動を促し、ウイルス分子の凝集を防ぎ、ウイルスの出芽（発芽）・遊離を促進する。このため、シアリダーゼ活性を阻害する薬剤は、インフルエンザの治療予防に効果があると考えられている。
【０００４】
【化１】
【０００５】
現在まで、シアリダーゼ活性を阻害してインフルエンザを予防する薬剤として、下記構造式（化１）に示すオセルタミビル（２）(登録商標名：タミフル)や、ザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ)が開発され、さらには、それらの様々な誘導体が開発されている（特許文献１及び２参照）。
【０００６】
【化２】
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００１−３５４６３５
【特許文献２】特開２００８−２９７３２０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、従来のインフルエンザを予防薬剤では、精神神経疾患、高血糖症、出血性疾患、皮膚疾患、肝臓と腎臓疾患、突然死等の症例と関連する、重篤な副作用の症例が報告されており、問題となっていた。そして、それらの副作用の原因として、上記従来のシアリダーゼ活性阻害剤が、ウイルスのノイラミニダーゼのみならず、ヒトのシアリダーゼに対しても活性阻害を有することに起因するのではないかと考えられている。なぜならば、ヒトのシアリダーゼとウイルスのノイラミニダーゼとは、三次元構造及び活性部位の構造において顕著な類似性を示すからである。このため、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性を阻害しない薬剤の開発が望まれていた。
【０００９】
本発明は、上記従来の実情に鑑みてなされたものであり、ウイルスのノイラミニダーゼの活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性を阻害し難い、ノイラミン酸誘導体、シアリダーゼ活性阻害剤及び抗インフルエンザ薬を提供することを解決すべき課題としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者は、上記課題を解決すべく、ザナミビル（３）のグリセロール部分の末端をアミドに替えた化合物を合成し、そのシアリダーゼ活性について調べた。その結果、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性はほとんど阻害しないことを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
すなわち、本発明のノイラミン酸誘導体は、下記化学式（１）（ただし、Ｒ１及びＲ２は、水素又は炭素数１〜８の分岐してもよいアルキル基若しくは炭素数１〜８の分岐してもよいシクロアルキル基を示し、Ｒ３は水素又はフッ素を示す）又はその薬学上許容される塩、水和物、溶媒和物若しくはプロドラッグからなることを特徴とする。
【００１２】
【化３】
【００１３】
本発明者らは、上記化学式（１）におけるＲ１＝ｎ−ブチル基、Ｒ２＝メチル基、Ｒ３＝水素であるノイラミン酸誘導体や、Ｒ１＝シクロペンチル基、Ｒ２＝メチル基、Ｒ３＝水素であるノイラミン酸誘導体が、ウイルスのシアリダーゼ活性を確実に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性をほとんど阻害しないことを確認している。
【００１４】
以上の結果から、本発明のノイラミン酸誘導体をシアリダーゼ活性阻害剤に利用することができる。すなわち、本発明のシアリダーゼ活性阻害剤は、本発明のノイラミン酸誘導体を有効成分として含有することを特徴とする。
【００１５】
さらには、本発明のノイラミン酸誘導体を有効成分とする抗インフルエンザ薬は、シアリダーゼ活性阻害効果が高く、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害することから、副作用が少ないという利点を有する。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【００１６】
（実施例１）
実施例１では、下記化４の合成経路に従ってノイラミン酸誘導体（１１）を合成した。
【００１７】
【化４】
【００１８】
（ステップ１）
5-Acetamido-4-azido-7,8,9-tri-O-acetyl-2,3,4,5-tetradeoxy-D-glycero-D-galacto-
non-2-enopyranosonic acid methyl ester (4)の合成
出発物質となる化合物（４）はMalcolm Chandlerらの方法（J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1173-1180 (1995)参照）に従い、下記の合成経路で合成を行った。
【００１９】
【化５】
【００２０】
（ステップ２）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-7,8,9-tri-O-acetyl-2,3,4,5-tetradeoxy-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (5)の合成
ステップ１で合成した化合物（４）（7.95g, 15mmol）を酢酸エチル（250ml）に溶解させ、リンドラ―触媒（4g）、二炭酸ジ-tert-ブチル（20ml）を順次加え、水素雰囲気化、１気圧、５０℃で２日間撹拌した。反応が完了した後、反応混合物をセライトろ過し、メタノールで洗浄した。続いてエバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル１００％)で精製し、化合物（５）(9.1 g (98%))を白色泡状物として得た。得られた化合物（５）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CDCl3)δ 1.41 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.92, 2.05, 2.07, 2.10 (12H, 4 × s, 3 × OCOCH3, 1 ×NHCOCH3), 3.78 (3H, s, COOCH3 ), 4.13 to 4.23 (3H, m, H-5, H-6, H-9a), 4.46 (1H, td, J 4,NH 9.6 , J 4,3 2.1, J 4,5 9.6, H-4), 4.66 to 4.70 (2H, m, NH4, H-9b), 5.30 (1H, ddd, J 8,7 7.5, J 8,9a 5.5, J 8,9b 2.8, H-8), 5.46 (1H, dd, J 7,8 4.8, J 7,6 1.3, H-7), 5.54 (1H, d, J NH,5 8.9, NH5), 6.90 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3)
HR-MS (Positive): Calcd. for C23H34N2O12 (M+Na)+, 553.2009, Found 553.2012.
【００２１】
（ステップ３）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5-tetradeoxy-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (6)の合成
ステップ２で合成した化合物（５）（5.3g，10mmol）をメタノール（50ml）に溶解させ、触媒量のナトリウムメトキシド加え、室温で一晩撹拌した。反応が完了した後、Dowex-50×8(H+)を用いて、ＰＨ７になるよう調製した。反応混合物をろ過した後エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(クロロホルム：メタノール＝１：２０)で精製し、化合物（６）(3.03g，75%)を白色固体として得た。得られた化合物（６）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 1.44 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.98 (3H, s, NHCOCH3), 3.57 to 3.67 (2H, m, H-7, H-9a), 3.76 (3H, s, COOCH3 ), 3.81 (1H, dd, J 9b,9a 11.2, J 9b,8 3.1, H-9b), 3.87 (1H, ddd, J 8,7 11.2, J 8,9a 4.5, J 8,9b 2.2, H-8), 4.05 (1H, dd, J 5,4 8.7, J 5,6 9.8, H-5), 4.22 (1H, dd, J 6,5 9.8, J 6,7 <1, H-6), 4.46 (1H, dd, J 4,5 8.7, J 4,3 2.2, H-4), 5.82 (1H, d, J 3,4 2.2, H-3);
HR-MS (Positive): Calcd. for C17H28N2O9 (M+Na)+, 427.1693, Found 427.1673.
【００２２】
（ステップ４）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5-tetradeoxy-9-O-(p-toluene sulphonyl)-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (7)の合成
ステップ３で合成した化合物（６）（2.23g，4mmol）と、p-トルエンスルホニルクロリド（1.15g, 18 mmol）を二股フラスコに入れ、シリカゲルが入っているデシゲータ中で減圧下、一晩乾燥させた。化合物（６）を脱水ピリジン（15 mL）に溶解させ、p-トルエンスルホニルクロリドを、−１０℃で１２時間以上かけて加え、０℃にて一晩撹拌した。反応混合物に脱水メタノールを加えて反応を停止させ、３０分撹拌した後、エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝0、1/20の順)で精製し、化合物（７）(2.49g ，81%)を白色固体として得た。得られた化合物（６）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 1.43 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.98 (3H, s, NHCOCH3), 2.45 (3H, s, Ar-CH3 ), 3.51 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 9.1, H-7), 3.76 (3H, s, COOCH3 ), 3.96 to 4.16 (4H, m, H-5, H-6, H-8, H-9a), 4.29 (1H, dd, J 9b,9a 9.6, J 9b,8 1.3, H-9b), 4.44 (1H, dd, J 4,3 2.1, J 4,5 9.0, H-4), 5.81 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3), 7.43 (2H, d, H-2', H-6'), 7.80 (2H, d, H-3', H-5')
HR-MS (Positive): Calcd. for C24H34N2O11S (M+Na)+, 581.1781, Found 581.1791.
【００２３】
（ステップ５）
5-Acetamido-9-azido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-)-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (8)の合成
ステップ４で合成した化合物（７）（1.11g，2mmol）をＤＭＦ（10ml）に溶解させ、アジ化ナトリウム（650mg, 10mmol）及び１８-クラウン-６-エーテル（105mg, 0.4 mmol）を加えて５０℃で一晩撹拌した。その後、室温まで冷却し、エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝0、1/20の順)で精製し、化合物（８）(770mg，92%)を白色泡状物として得た。得られた化合物（８）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 1.44 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.99 (3H, s, NHCOCH3), 3.38 (1H, dd, J 9a,9b 12.8, J 9a,8 6, H-9a), 3.52 to 3.56 (2H, m, H-7, H-9b), 3.77 (3H, s, COOCH3 ), 4.01 to 4.06 (2H, m, H-5, H-8), 4.22 (1H, dd, J 6,7 <1, J 6,5 11.0, H-6), 4.46 (1H, dd, J 4,3 2.3, J 4,5 9.6, H-4), 5.81 (1H, d, J 3,4 2.3, H-3)
HR-MS (Positive): Calcd. for C17H27N5O8 (M+Na)+, 452.1757, Found 452.1756.
【００２４】
（ステップ６）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-pentanamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (9)の合成
ステップ５で合成したアジド化合物（８）（243mg, 0.5 mmol）とＮ-ヒドロキシスクシンイミジルバレリルエステル(Valeryl NHS ester )（200mg, 1mmol）とを脱水テトラヒドロフラン（3ml）に溶解させ、トリメチルホスフィン（1M in THF, 1mL, 1mmol）を、窒素が発生するまで室温で滴下した後、一晩撹拌した。そして、エバポレータで溶媒留去し、残渣に水（20ml）を加えて、酢酸エチル（20 ml）で抽出した。水層を酢酸エチル（10 ml）で再度抽出し、先に抽出した酢酸エチル層と合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水（20mL）で順次洗浄し、硫酸ナトリウムを加えて乾燥させた。ろ過した後、エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝0、1/20の順)で精製し、化合物（９）(204mg，74%)を白色固体として得た。得られた化合物（９）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.93 (3H, t, H-4'), 1.36 (2H, sex, , H-3'), 1.43 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.59 (2H, p, H-2'), 1.97 (3H, s, NHCOCH3), 2.23 (2H, t, H-1'), 3.32 (1H, H-9a, mixed with CD3OD peak), 3.43 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 8.9, H-7), 3.56 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 2.8, H-9b), 3.76 (3H, s, COOCH3 ), 3.92 (1H, ddd, J 8,7 9.6, J 8,9a 6.2, J 8,9b 2.8, H-8), 4.04 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.25 (1H, dd, J 6,5 11.0, J 6,7 <1, H-6), 4.47 (1H, dd, J 4,5 8.9 , J 4,3 2.0, H-4), 5.82 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3)
HR-MS (Positive): Calcd. for C22H37N3O9 (M+Na)+, 510.2427, Found 510.2482.
【００２５】
（ステップ７）
5-Acetamido-4-(N,N'-bis-tert-butoxycarbonyl)guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-pentanamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (10)の合成
ステップ６で合成した化合物（９）（195mg，0.4mmol）をジクロロメタン（２ml）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（2mL）を室温にて加えた。出発原料の消失を確認した後、エバポレータで溶媒留去した。残渣をＮ，Ｎ'−ジメチルホルムアミド（2ml）に溶解させ、トリエチルアミン（165μl, 1.2mmol）を加えた。N,N’-bis-(tert-butoxycarbonyl)-1H-pyrazole-1-carboxamidine (Bis-BocPCH)(185mg, 0.6mmol)をジメチルホルムアミド（２ｍｌ）に溶解させた溶液を、反応溶液に滴下し、５０℃にて１６時間攪拌した。エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝4/10、9/10の順)で精製し、化合物（１０）(141mg，56%) を白色固体として得た。得られた化合物（１０）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.93 (3H, t, H-4'), 1.36 (2H, sex, , H-3'), 1.47, 1.52 (18H, 2 × s, 2 ×, NHCOC(CH3)3), 1.60 (2H, p, H-2'), 1.95 (3H, s, NHCOCH3), 2.23 (2H, t, H-1'), 3.34 (1H, dd, J 9a,9b 13.7, J 9a,8 6.9, H-9a), 3.45 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 8.4, H-7), 3.59 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 2.8, H-9b), 3.78 (3H, s, COOCH3 ), 3.93 (1H, ddd, J 8,7 8.4, J 8,9a 6.9, J 8,9b 2.8, H-8), 4.21 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.30 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 <1, H-6), 5.06 (1H, dd, J 4,5 9.6 , J 4,3 2.0, H-4), 5.89 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3); HR-MS (Positive): Calcd. for C28H47N5O11 (M+Na)+, 652.3170, Found 652.3232.
【００２６】
（ステップ８）
5-Acetamido-4-guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-pentanamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid Trifluoroacetic Acid Salt (11)の合成
ステップ７で合成した化合物(10) （100mg, 0.16mmol）を、メタノール／ＴＨＦ混合溶媒(5/1)2mlに溶かし、ＬｉＯＨ(25mg)を水1mlに溶かしたアルカリ溶液を、０℃に冷却した反応液に加え、１２時間撹拌を行う。反応終了後、反応混合物をイオン交換樹脂（Dowex-50×8 (H+)）に通してpH7とした後、反応混合物をろ過し、エバポレートして、黄色固体として得た。これをジクロロメタン(2mL)とトリフルオロ酢酸(2mL)に室温下で溶かした。出発物質が消滅していることを確認した後、エバポレータで乾燥させ、こうして得られた粗成物は逆相カラムクロマトグラフィーにより、0〜20% メタノール水溶液（0.1% のトリフルオロ酢酸を含む）によって精製した。精製したフラクションを乾燥させ、凍結乾燥し、白色固体としてノイラミン酸誘導体（１１）を(64mg，76%) で得た。得られたノイラミン酸誘導体（１１）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (D2O)δ 0.90 (3H, t, H-4'), 1.32 (2H, sex, , H-3'), 1.57 (2H, p, H-2'), 2.03 (3H, s, NHCOCH3), 2.29 (2H, t, H-1'), 3.36 (1H, dd, J 9a,9b 14.4, J 9a,8 6.8, H-9a), 3.56 to 3.58 (2H, m, H-7, H-9b), 3.98 (1H, ddd, J 8,7 12.3, J 8,9a 10.3, J 8,9b 3.4, H-8), 4.22 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.38 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 <1, H-6), 4.44 (1H, dd, J 4,5 9.6 , J 4,3 2.7, H-4), 5.64 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3); HR-MS (Negative): Calcd. For C19H29F3N5O9 (M-H)-, 528.1923, Found 528.1783.
【００２７】
（実施例２）
実施例２では、下記化４の合成経路に従ってノイラミン酸誘導体（１４）を合成した。
【００２８】
【化６】
【００２９】
（ステップ１）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-cyclopropane-carboxamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (12) の合成
上記実施例１における中間化合物であるアジド化合物(8) (243mg, 0.5 mmol)とシクロプロパンカルボンのN-ヒドロキシコハク酸イミジルエステル(シクロプロピルNHS エステル) (185mg, 1mmol)とを乾燥ＴＨＦ(3ml)に溶かし、撹拌しながらトリメチルホスフィン (1M in THF, 1mL, 1mmol) を室温下で窒素の発生が完了するまで滴下した。そして、反応混合物を１昼夜撹拌し他後、揮発成分を減圧下で留去させ、残渣を酢酸エチル(20 ml)と水 (20 ml)とで抽出した。水相を分離し、さらに酢酸エチル(10ml)で抽出した。そして、酢酸エチル抽出物は飽和NaHCO3及び水（20mL）で洗浄し、無水Na2SO4を加えて乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。こうして得られた粗成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(0〜5% メタノール／酢酸エチル)で精製し、化合物(12)190mg (収率81%)を白色粉体として得た。得られた化合物（１２）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.76 to 0.90 (4H, 2 × m, H-2', H-3'), 1.45 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.57 to 1.61 (1H, m, H-1'), 2.01 (3H, s, NHCOCH3), 3.39 to 3.44 (2H, m, H-7, H-9b), 3.61 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 3.4, H-9b), 3.78 (3H, s, COOCH3 ), 3.94 (1H, ddd, J 8,7 9.6, J 8,9a 6.2, J 8,9b 3.4, H-8), 4.05 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.23 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 <1, H-6), 4.46 (1H, dd, J 4,5 10.3, J 4,3 2.7, H-4), 5.82 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3); HR-MS (Positive): Calcd. for C21H33N3O9 (M+Na)+, 494.2114, Found 494.2149.
【００３０】
（ステップ２）
5-Acetamido-4-(N,N'-bis-tert-butoxycarbonyl)guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-cyclopropanecarboxamido D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (13)の合成
上記のようにして得られた化合物（１２）（188mg，0.4mmol）をジクロルメタン(2mL)とトリフルオロ酢酸(2mL)の混合物に室温下で加え、出発物質の消失を確認した後、反応液をエバポレートして、乾燥した。残渣をジクロルメタン (2ml)とトリエチルアミン (165μl,1.2mmol)の混合液に加えた。N,N'-bis-(tert-butoxycarbonyl)-1H-pyrazole-1-carboxamidine (Bis-BocPCH)(185mg, 0.6mmol) のジクロルメタン (2ml)溶液を反応液に滴下し、５０℃で１６時間撹拌を行なった後、真空下で溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(40〜90% 酢酸エチル／ヘキサン)で精製し、化合物（１３）146mg (収率61%)を白色粉体として得た。得られた化合物（１３）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.74 to 0.86 (4H, 2 × m, H-2', H-3'), 1.47, 1.52 (18H, 2 × s, 2 ×, NHCOC(CH3)3), 1.61 to 1.65 (2H, m, H-1'), 1.95 (3H, s, NHCOCH3), 3.37 (1H, dd, J 9a,9b 13.6, J 9a,8 6.2, H-9a), 3.45 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 8.9, H-7), 3.58 to 3.61 (1H, m, H-9b), 3.77 (3H, s, COOCH3 ), 3.93 (1H, ddd, J 8,7 9.6, J 8,9a 6.8, J 8,9b 3.4, H-8), 4.21 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.31 (1H, dd, J 6,5 11.0, J 6,7 <1, H-6), 5.04 (1H, dd, J 4,5 10.3 , J 4,3 2.7, H-4), 5.89 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3); HR-MS (Positive): Calcd. for C27H43N5O11 (M+Na)+, 636.2857, Found 636.2884.
【００３１】
（ステップ３）
5-Acetamido-4-guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-cyclopropanecarboxamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid Trifluoroacetic Acid Salt (14)の合成
上記のようにして得られた化合物（１３）(100mg, 0.16mmol)をメタノール/THF(5/1)混合溶媒2mlに溶かし、０℃に冷却下、LiOH (25mg)／H2O(1ml)のアルカリ液を滴下し、12時間撹拌する。反応終了後、反応混合物をイオン交換樹脂（Dowex-50×8 (H+)）に通してpH7とした後、反応混合物をろ過し、エバポレートして、黄白色固体として得た。これをジクロロメタン(2mL)とトリフルオロ酢酸(2mL)に室温下で溶かした。出発物質が消滅していることを確認した後、エバポレータで乾燥させ、こうして得られた粗成物は逆相カラムクロマトグラフィーにより、0〜20% メタノール水溶液（0.1% のトリフルオロ酢酸を含む）によって精製した。精製したフラクションを乾燥させ、凍結乾燥し、白色固体としてノイラミン酸誘導体（１４）を67mg (収率83%)で得た。得られたノイラミン酸誘導体（１４）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (D2O)δ 0.83 to 0.84 (4H, 2 × m, H-2', H-3'), 1.63 to 1.66 (2H, m, H-1'), 2.02 (3H, s, NHCOCH3), 3.34 (1H, dd, J 9a,9b 13.7, J 9a,8 7.6, H-9a), 3.55 (1H, dd, J 7,8 8.9 , J 7,6 1.4, H-7), 3.59 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 2.8, H-9b), 3.97 (1H, ddd, J 8,7 12.3, J 8,9a 6.9, J 8,9b 3.4, H-8), 4.20 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.36 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 1.4, H-6), 4.42 (1H, dd, J 4,5 9.6 , J 4,3 2.7, H-4), 5.61 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3); HR-MS (Negative): Calcd. For C18H25F3N5O9 (M-H)-, 512.1610, Found 512.1729.
【００３２】
＜評 価＞
（ウイルスシアリダーゼに対する活性阻害の測定）
上記のようにして合成したノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）について、インフルエンザＡ型ウイルスのシダリダーゼに対する活性阻害を、4-methylumbelliferyl N-acetylneuraminic酸（ＭＵＮＡ）を用いた蛍光測定法によって評価した。
すなわち、２０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）１５μｌと、５段階の濃度に調整した所定量のノイラミン酸誘導体と、２ユニットのシアリダーゼを含むウイルス５μｌとを混合し、３７℃で１５分インキュベーションを行った。ここで、ウイルスシアリダーゼの１ユニットとは、ｐＨ６．０で３７℃で１分につき１ｎｍｏｌのＭＵの生成をするために必要な酵素量と定義される。
次に、５μｌのＭＵＮＡを加え、さらに３７℃で１５分インキュベーションを行った。
最後に、２００ｍＭ炭酸ナトリウム−重炭酸塩緩衝液（ｐＨ１０．６）２００μｌを加えて反応を終了させた。リリースされるノイラミン酸と等しい量のＭＵは、プレートリーダー（ミトラＬＢ９４０、バートルドＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｐｆｏｒｚｈｅｉｍ、ドイツ）によって、３５５ｎｍの励起と４６０ｎｍの蛍光によって検出された。ＩＣ５０値は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（サンディエゴ、ＣＡ、ＵＳＡ）で非線形回帰分析法を使用して計算した。また、比較のため、オセルタミビル（２）（登録商標名：タミフル）及びザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ）の活性阻害についても、同様に測定した。結果を表１並びに図３及び図４に示す。
【００３３】
【表１】
【００３４】
図１及び表1に示すように、ノイラミン酸誘導体（１１）は、H1N1、H3N2及びH5N3のウイルスのシアリダーゼに対して、高い活性阻害作用を奏することが分かった。また、ノイラミン酸誘導体（１４）は、図２及び表１に示すように、活性阻害の効果は、ノイラミン酸誘導体（１１）よりも顕著であり、ザナミビル（３）やオセルタミビル（２）と同程度であった。
以上の結果は、ノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）がシアリダーゼ活性阻害剤及び抗ウイルス薬として充分な効果を有することを明らかにしている。
【００３５】
（ヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２及びＮＥＵ４）に対する活性阻害の測定）
上記のようにして合成したノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）について、３種類（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、及びＮＥＵ４）のヒト−シアリダーゼに対する活性阻害を、4-methylumbelliferyl N-acetylneuraminic酸（ＭＵＮＡ）を用いた蛍光測定法によって評価した。
すなわち、５０μＬの反応液において、５００ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ＮＥＵ１及びＮＥＵ４に対してはｐＨ４．６、ＮＥＵ２に対してはｐＨ５．５）１０μＬ、５段階の濃度に調整した所定量のノイラミン酸誘導体、５０μｇの子牛由来のアルブミン、２０ｎmolのＭＵＮＡ、所定量の組み換え型ヒト−シアリダーゼを混合し、３７℃で３０分間インキュベーションを行った。そしてリリースされるノイラミン酸と等しい量のＭＵを、ウイルスシアリダーゼに対する活性阻害の測定の場合と同様の方法で測定した。
なお、ＩＣ５０値は、マイクロソフトエクセルによる非線形回帰分析法を用いて計算した。
また、比較のため、ザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ)の活性阻害についても同様に測定した。
【００３６】
（ヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ３）に対する活性阻害の測定）
上記のようにして合成したノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）について、ヒト−シアリダーゼＮＥＵ３に対する活性阻害を、malononitrileを用いた高速液体クロマトグラフィーによる蛍光測定法によって評価した。
すなわち、５μＬの反応液において、５００ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．５）１０μＬ、５段階の濃度に調整した所定量のノイラミン酸誘導体、５０μｇの子牛由来のアルブミン、５ｎmolのガングリオシドＧＭ３、５０μｇのトリトンＸ−１００、所定量の組み換え型ヒト−シアリダーゼを混合し、３７℃で３０分間インキュベーションを行った。
最後に、２００ｍＭ炭酸ナトリウム−重炭酸塩緩衝液（ｐＨ１０．６）２００μｌを加えて反応を終了させた。そしてＧＭ３からリリースされたシアル酸をmalononitrileを用いた高速液体クロマトグラフィーによる蛍光測定法によって測定した。
なお、ＩＣ５０値は、マイクロソフトエクセルによる非線形回帰分析法を用いて計算した。
また、比較のため、ザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ)の活性阻害についても同様に測定した。
【００３７】
【表２】
【００３８】
結果を表２並びに図３及び図４に示す。
表２及び図３に示すように、ノイラミン酸誘導体（１１）は、ヒト由来の４種類のシアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）のいずれに対しても、ヒト−シアリダーゼ活性阻害（ＩＣ５０）はほとんど認められない程度であった。
また、表２及び図４に示すように、ノイラミン酸誘導体（１４）についても、ヒト由来の４種類のシアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）のいずれに対しても、ヒト−シアリダーゼ活性阻害（ＩＣ５０）はほとんど認められない程度であった。
以上の結果は、ノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）を抗ウイルス薬として用いた場合においても、副作用の可能性が極めて少ないことを示している。
【００３９】
この発明は上記発明の実施の態様及び実施例の説明に何ら限定されるものではない。特許請求の範囲を逸脱せず、当業者が容易に想到できる範囲で種々の変形態様もこの発明に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】ノイラミン酸誘導体（１１）のウイルス（Ｈ１Ｎ１、Ｈ３Ｎ２及びＨ５Ｎ３）シアリダーゼに対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【図２】ノイラミン酸誘導体（１４）のウイルス（Ｈ１Ｎ１、Ｈ３Ｎ２及びＨ５Ｎ３）シアリダーゼに対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【図３】ノイラミン酸誘導体（１１）のヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）に対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【図４】ノイラミン酸誘導体（１４）のヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）に対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明のノイラミン酸誘導体及びシアリダーゼ活性阻害剤は、シアリダーゼの機能を調べる生物学的ツールとして利用することができる。また、本発明のノイラミン酸誘導体は、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性をほとんど阻害しないことから、副作用の少ない抗インフルエンザ薬等に利用できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ノイラミン酸誘導体、並びにそれを有効成分として含有するシアリダーゼ活性阻害剤及び抗インフルエンザ薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
インフルエンザウイルスは鳥類等が感染し、伝播の過程できわめて変異しやすく、タミフルのような既存の薬剤に対する耐性が発現する。こうして新型ウイルスが発生すると、世界同時流行（パンデミック）となる場合もあり、社会的、経済的に甚大な被害をもたらす。ウイルス感染にはワクチンが有効であるが、インフルエンザウイルスやＨＩＶのような、きわめて変異しやすいウイルスにおいては、ワクチンのみでは対応できない場合もあり、それを補うものとして、抗ウイルス薬の開発が社会的急務となっている。
【０００３】
ウイルスの表面には、ヘマグルチニン（ＨＡ）及びノイラミニダーゼ（ＮＡ）（シアリダーゼとも呼ばれるが、ウイルス学の分野ではノイラミニダーゼと呼ばれる場合が多い。）という２つの重要な糖タンパク質スパイクが存在しており、ウイルスの侵入や複製に重要な役割をしている。すなわち、ヘマグルチニンは糖複合体の残基に結合するシアル酸の末端を認識し、結合する。これにより、宿主細胞に付着したり、侵入したりするのを媒介する。
一方、ノイラミニダーゼは、ウイルス分子表面のヘマグルチニンに結合する糖タンパク質端末のシアル酸（Ｉ）（下記構造式化１参照）を加水分解する反応を触媒し（これをシアリダーゼ活性という）、これにより宿主細胞からのウイルスの放出過程を促進する。さらに、ノイラミニダーゼは呼吸器系の粘液を通じてウイルス分子の移動を促し、ウイルス分子の凝集を防ぎ、ウイルスの出芽（発芽）・遊離を促進する。このため、シアリダーゼ活性を阻害する薬剤は、インフルエンザの治療予防に効果があると考えられている。
【０００４】
【化１】
【０００５】
現在まで、シアリダーゼ活性を阻害してインフルエンザを予防する薬剤として、下記構造式（化１）に示すオセルタミビル（２）(登録商標名：タミフル)や、ザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ)が開発され、さらには、それらの様々な誘導体が開発されている（特許文献１及び２参照）。
【０００６】
【化２】
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００１−３５４６３５
【特許文献２】特開２００８−２９７３２０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、従来のインフルエンザを予防薬剤では、精神神経疾患、高血糖症、出血性疾患、皮膚疾患、肝臓と腎臓疾患、突然死等の症例と関連する、重篤な副作用の症例が報告されており、問題となっていた。そして、それらの副作用の原因として、上記従来のシアリダーゼ活性阻害剤が、ウイルスのノイラミニダーゼのみならず、ヒトのシアリダーゼに対しても活性阻害を有することに起因するのではないかと考えられている。なぜならば、ヒトのシアリダーゼとウイルスのノイラミニダーゼとは、三次元構造及び活性部位の構造において顕著な類似性を示すからである。このため、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性を阻害しない薬剤の開発が望まれていた。
【０００９】
本発明は、上記従来の実情に鑑みてなされたものであり、ウイルスのノイラミニダーゼの活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性を阻害し難い、ノイラミン酸誘導体、シアリダーゼ活性阻害剤及び抗インフルエンザ薬を提供することを解決すべき課題としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者は、上記課題を解決すべく、ザナミビル（３）のグリセロール部分の末端をアミドに替えた化合物を合成し、そのシアリダーゼ活性について調べた。その結果、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性はほとんど阻害しないことを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
すなわち、本発明のノイラミン酸誘導体は、下記化学式（１）（ただし、Ｒ１及びＲ２は、水素又は炭素数１〜８の分岐してもよいアルキル基若しくは炭素数１〜８の分岐してもよいシクロアルキル基を示し、Ｒ３は水素又はフッ素を示す）又はその薬学上許容される塩、水和物、溶媒和物若しくはプロドラッグからなることを特徴とする。
【００１２】
【化３】
【００１３】
本発明者らは、上記化学式（１）におけるＲ１＝ｎ−ブチル基、Ｒ２＝メチル基、Ｒ３＝水素であるノイラミン酸誘導体や、Ｒ１＝シクロペンチル基、Ｒ２＝メチル基、Ｒ３＝水素であるノイラミン酸誘導体が、ウイルスのシアリダーゼ活性を確実に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性をほとんど阻害しないことを確認している。
【００１４】
以上の結果から、本発明のノイラミン酸誘導体をシアリダーゼ活性阻害剤に利用することができる。すなわち、本発明のシアリダーゼ活性阻害剤は、本発明のノイラミン酸誘導体を有効成分として含有することを特徴とする。
【００１５】
さらには、本発明のノイラミン酸誘導体を有効成分とする抗インフルエンザ薬は、シアリダーゼ活性阻害効果が高く、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害することから、副作用が少ないという利点を有する。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【００１６】
（実施例１）
実施例１では、下記化４の合成経路に従ってノイラミン酸誘導体（１１）を合成した。
【００１７】
【化４】
【００１８】
（ステップ１）
5-Acetamido-4-azido-7,8,9-tri-O-acetyl-2,3,4,5-tetradeoxy-D-glycero-D-galacto-
non-2-enopyranosonic acid methyl ester (4)の合成
出発物質となる化合物（４）はMalcolm Chandlerらの方法（J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1173-1180 (1995)参照）に従い、下記の合成経路で合成を行った。
【００１９】
【化５】
【００２０】
（ステップ２）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-7,8,9-tri-O-acetyl-2,3,4,5-tetradeoxy-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (5)の合成
ステップ１で合成した化合物（４）（7.95g, 15mmol）を酢酸エチル（250ml）に溶解させ、リンドラ―触媒（4g）、二炭酸ジ-tert-ブチル（20ml）を順次加え、水素雰囲気化、１気圧、５０℃で２日間撹拌した。反応が完了した後、反応混合物をセライトろ過し、メタノールで洗浄した。続いてエバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル１００％)で精製し、化合物（５）(9.1 g (98%))を白色泡状物として得た。得られた化合物（５）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CDCl3)δ 1.41 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.92, 2.05, 2.07, 2.10 (12H, 4 × s, 3 × OCOCH3, 1 ×NHCOCH3), 3.78 (3H, s, COOCH3 ), 4.13 to 4.23 (3H, m, H-5, H-6, H-9a), 4.46 (1H, td, J 4,NH 9.6 , J 4,3 2.1, J 4,5 9.6, H-4), 4.66 to 4.70 (2H, m, NH4, H-9b), 5.30 (1H, ddd, J 8,7 7.5, J 8,9a 5.5, J 8,9b 2.8, H-8), 5.46 (1H, dd, J 7,8 4.8, J 7,6 1.3, H-7), 5.54 (1H, d, J NH,5 8.9, NH5), 6.90 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3)
HR-MS (Positive): Calcd. for C23H34N2O12 (M+Na)+, 553.2009, Found 553.2012.
【００２１】
（ステップ３）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5-tetradeoxy-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (6)の合成
ステップ２で合成した化合物（５）（5.3g，10mmol）をメタノール（50ml）に溶解させ、触媒量のナトリウムメトキシド加え、室温で一晩撹拌した。反応が完了した後、Dowex-50×8(H+)を用いて、ＰＨ７になるよう調製した。反応混合物をろ過した後エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(クロロホルム：メタノール＝１：２０)で精製し、化合物（６）(3.03g，75%)を白色固体として得た。得られた化合物（６）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 1.44 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.98 (3H, s, NHCOCH3), 3.57 to 3.67 (2H, m, H-7, H-9a), 3.76 (3H, s, COOCH3 ), 3.81 (1H, dd, J 9b,9a 11.2, J 9b,8 3.1, H-9b), 3.87 (1H, ddd, J 8,7 11.2, J 8,9a 4.5, J 8,9b 2.2, H-8), 4.05 (1H, dd, J 5,4 8.7, J 5,6 9.8, H-5), 4.22 (1H, dd, J 6,5 9.8, J 6,7 <1, H-6), 4.46 (1H, dd, J 4,5 8.7, J 4,3 2.2, H-4), 5.82 (1H, d, J 3,4 2.2, H-3);
HR-MS (Positive): Calcd. for C17H28N2O9 (M+Na)+, 427.1693, Found 427.1673.
【００２２】
（ステップ４）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5-tetradeoxy-9-O-(p-toluene sulphonyl)-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (7)の合成
ステップ３で合成した化合物（６）（2.23g，4mmol）と、p-トルエンスルホニルクロリド（1.15g, 18 mmol）を二股フラスコに入れ、シリカゲルが入っているデシゲータ中で減圧下、一晩乾燥させた。化合物（６）を脱水ピリジン（15 mL）に溶解させ、p-トルエンスルホニルクロリドを、−１０℃で１２時間以上かけて加え、０℃にて一晩撹拌した。反応混合物に脱水メタノールを加えて反応を停止させ、３０分撹拌した後、エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝0、1/20の順)で精製し、化合物（７）(2.49g ，81%)を白色固体として得た。得られた化合物（６）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 1.43 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.98 (3H, s, NHCOCH3), 2.45 (3H, s, Ar-CH3 ), 3.51 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 9.1, H-7), 3.76 (3H, s, COOCH3 ), 3.96 to 4.16 (4H, m, H-5, H-6, H-8, H-9a), 4.29 (1H, dd, J 9b,9a 9.6, J 9b,8 1.3, H-9b), 4.44 (1H, dd, J 4,3 2.1, J 4,5 9.0, H-4), 5.81 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3), 7.43 (2H, d, H-2', H-6'), 7.80 (2H, d, H-3', H-5')
HR-MS (Positive): Calcd. for C24H34N2O11S (M+Na)+, 581.1781, Found 581.1791.
【００２３】
（ステップ５）
5-Acetamido-9-azido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-)-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (8)の合成
ステップ４で合成した化合物（７）（1.11g，2mmol）をＤＭＦ（10ml）に溶解させ、アジ化ナトリウム（650mg, 10mmol）及び１８-クラウン-６-エーテル（105mg, 0.4 mmol）を加えて５０℃で一晩撹拌した。その後、室温まで冷却し、エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝0、1/20の順)で精製し、化合物（８）(770mg，92%)を白色泡状物として得た。得られた化合物（８）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 1.44 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.99 (3H, s, NHCOCH3), 3.38 (1H, dd, J 9a,9b 12.8, J 9a,8 6, H-9a), 3.52 to 3.56 (2H, m, H-7, H-9b), 3.77 (3H, s, COOCH3 ), 4.01 to 4.06 (2H, m, H-5, H-8), 4.22 (1H, dd, J 6,7 <1, J 6,5 11.0, H-6), 4.46 (1H, dd, J 4,3 2.3, J 4,5 9.6, H-4), 5.81 (1H, d, J 3,4 2.3, H-3)
HR-MS (Positive): Calcd. for C17H27N5O8 (M+Na)+, 452.1757, Found 452.1756.
【００２４】
（ステップ６）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-pentanamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (9)の合成
ステップ５で合成したアジド化合物（８）（243mg, 0.5 mmol）とＮ-ヒドロキシスクシンイミジルバレリルエステル(Valeryl NHS ester )（200mg, 1mmol）とを脱水テトラヒドロフラン（3ml）に溶解させ、トリメチルホスフィン（1M in THF, 1mL, 1mmol）を、窒素が発生するまで室温で滴下した後、一晩撹拌した。そして、エバポレータで溶媒留去し、残渣に水（20ml）を加えて、酢酸エチル（20 ml）で抽出した。水層を酢酸エチル（10 ml）で再度抽出し、先に抽出した酢酸エチル層と合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水（20mL）で順次洗浄し、硫酸ナトリウムを加えて乾燥させた。ろ過した後、エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝0、1/20の順)で精製し、化合物（９）(204mg，74%)を白色固体として得た。得られた化合物（９）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.93 (3H, t, H-4'), 1.36 (2H, sex, , H-3'), 1.43 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.59 (2H, p, H-2'), 1.97 (3H, s, NHCOCH3), 2.23 (2H, t, H-1'), 3.32 (1H, H-9a, mixed with CD3OD peak), 3.43 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 8.9, H-7), 3.56 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 2.8, H-9b), 3.76 (3H, s, COOCH3 ), 3.92 (1H, ddd, J 8,7 9.6, J 8,9a 6.2, J 8,9b 2.8, H-8), 4.04 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.25 (1H, dd, J 6,5 11.0, J 6,7 <1, H-6), 4.47 (1H, dd, J 4,5 8.9 , J 4,3 2.0, H-4), 5.82 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3)
HR-MS (Positive): Calcd. for C22H37N3O9 (M+Na)+, 510.2427, Found 510.2482.
【００２５】
（ステップ７）
5-Acetamido-4-(N,N'-bis-tert-butoxycarbonyl)guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-pentanamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (10)の合成
ステップ６で合成した化合物（９）（195mg，0.4mmol）をジクロロメタン（２ml）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（2mL）を室温にて加えた。出発原料の消失を確認した後、エバポレータで溶媒留去した。残渣をＮ，Ｎ'−ジメチルホルムアミド（2ml）に溶解させ、トリエチルアミン（165μl, 1.2mmol）を加えた。N,N’-bis-(tert-butoxycarbonyl)-1H-pyrazole-1-carboxamidine (Bis-BocPCH)(185mg, 0.6mmol)をジメチルホルムアミド（２ｍｌ）に溶解させた溶液を、反応溶液に滴下し、５０℃にて１６時間攪拌した。エバポレータで溶媒留去し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(メタノール／クロロホルム＝4/10、9/10の順)で精製し、化合物（１０）(141mg，56%) を白色固体として得た。得られた化合物（１０）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.93 (3H, t, H-4'), 1.36 (2H, sex, , H-3'), 1.47, 1.52 (18H, 2 × s, 2 ×, NHCOC(CH3)3), 1.60 (2H, p, H-2'), 1.95 (3H, s, NHCOCH3), 2.23 (2H, t, H-1'), 3.34 (1H, dd, J 9a,9b 13.7, J 9a,8 6.9, H-9a), 3.45 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 8.4, H-7), 3.59 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 2.8, H-9b), 3.78 (3H, s, COOCH3 ), 3.93 (1H, ddd, J 8,7 8.4, J 8,9a 6.9, J 8,9b 2.8, H-8), 4.21 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.30 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 <1, H-6), 5.06 (1H, dd, J 4,5 9.6 , J 4,3 2.0, H-4), 5.89 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3); HR-MS (Positive): Calcd. for C28H47N5O11 (M+Na)+, 652.3170, Found 652.3232.
【００２６】
（ステップ８）
5-Acetamido-4-guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-pentanamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid Trifluoroacetic Acid Salt (11)の合成
ステップ７で合成した化合物(10) （100mg, 0.16mmol）を、メタノール／ＴＨＦ混合溶媒(5/1)2mlに溶かし、ＬｉＯＨ(25mg)を水1mlに溶かしたアルカリ溶液を、０℃に冷却した反応液に加え、１２時間撹拌を行う。反応終了後、反応混合物をイオン交換樹脂（Dowex-50×8 (H+)）に通してpH7とした後、反応混合物をろ過し、エバポレートして、黄色固体として得た。これをジクロロメタン(2mL)とトリフルオロ酢酸(2mL)に室温下で溶かした。出発物質が消滅していることを確認した後、エバポレータで乾燥させ、こうして得られた粗成物は逆相カラムクロマトグラフィーにより、0〜20% メタノール水溶液（0.1% のトリフルオロ酢酸を含む）によって精製した。精製したフラクションを乾燥させ、凍結乾燥し、白色固体としてノイラミン酸誘導体（１１）を(64mg，76%) で得た。得られたノイラミン酸誘導体（１１）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (D2O)δ 0.90 (3H, t, H-4'), 1.32 (2H, sex, , H-3'), 1.57 (2H, p, H-2'), 2.03 (3H, s, NHCOCH3), 2.29 (2H, t, H-1'), 3.36 (1H, dd, J 9a,9b 14.4, J 9a,8 6.8, H-9a), 3.56 to 3.58 (2H, m, H-7, H-9b), 3.98 (1H, ddd, J 8,7 12.3, J 8,9a 10.3, J 8,9b 3.4, H-8), 4.22 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.38 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 <1, H-6), 4.44 (1H, dd, J 4,5 9.6 , J 4,3 2.7, H-4), 5.64 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3); HR-MS (Negative): Calcd. For C19H29F3N5O9 (M-H)-, 528.1923, Found 528.1783.
【００２７】
（実施例２）
実施例２では、下記化４の合成経路に従ってノイラミン酸誘導体（１４）を合成した。
【００２８】
【化６】
【００２９】
（ステップ１）
5-Acetamido-4-(N-tert-butoxycarbonyl)amino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-cyclopropane-carboxamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (12) の合成
上記実施例１における中間化合物であるアジド化合物(8) (243mg, 0.5 mmol)とシクロプロパンカルボンのN-ヒドロキシコハク酸イミジルエステル(シクロプロピルNHS エステル) (185mg, 1mmol)とを乾燥ＴＨＦ(3ml)に溶かし、撹拌しながらトリメチルホスフィン (1M in THF, 1mL, 1mmol) を室温下で窒素の発生が完了するまで滴下した。そして、反応混合物を１昼夜撹拌し他後、揮発成分を減圧下で留去させ、残渣を酢酸エチル(20 ml)と水 (20 ml)とで抽出した。水相を分離し、さらに酢酸エチル(10ml)で抽出した。そして、酢酸エチル抽出物は飽和NaHCO3及び水（20mL）で洗浄し、無水Na2SO4を加えて乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。こうして得られた粗成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(0〜5% メタノール／酢酸エチル)で精製し、化合物(12)190mg (収率81%)を白色粉体として得た。得られた化合物（１２）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.76 to 0.90 (4H, 2 × m, H-2', H-3'), 1.45 (9H, s, NHCOC(CH3)3), 1.57 to 1.61 (1H, m, H-1'), 2.01 (3H, s, NHCOCH3), 3.39 to 3.44 (2H, m, H-7, H-9b), 3.61 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 3.4, H-9b), 3.78 (3H, s, COOCH3 ), 3.94 (1H, ddd, J 8,7 9.6, J 8,9a 6.2, J 8,9b 3.4, H-8), 4.05 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.23 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 <1, H-6), 4.46 (1H, dd, J 4,5 10.3, J 4,3 2.7, H-4), 5.82 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3); HR-MS (Positive): Calcd. for C21H33N3O9 (M+Na)+, 494.2114, Found 494.2149.
【００３０】
（ステップ２）
5-Acetamido-4-(N,N'-bis-tert-butoxycarbonyl)guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-cyclopropanecarboxamido D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid methyl ester (13)の合成
上記のようにして得られた化合物（１２）（188mg，0.4mmol）をジクロルメタン(2mL)とトリフルオロ酢酸(2mL)の混合物に室温下で加え、出発物質の消失を確認した後、反応液をエバポレートして、乾燥した。残渣をジクロルメタン (2ml)とトリエチルアミン (165μl,1.2mmol)の混合液に加えた。N,N'-bis-(tert-butoxycarbonyl)-1H-pyrazole-1-carboxamidine (Bis-BocPCH)(185mg, 0.6mmol) のジクロルメタン (2ml)溶液を反応液に滴下し、５０℃で１６時間撹拌を行なった後、真空下で溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(40〜90% 酢酸エチル／ヘキサン)で精製し、化合物（１３）146mg (収率61%)を白色粉体として得た。得られた化合物（１３）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (CD3OD)δ 0.74 to 0.86 (4H, 2 × m, H-2', H-3'), 1.47, 1.52 (18H, 2 × s, 2 ×, NHCOC(CH3)3), 1.61 to 1.65 (2H, m, H-1'), 1.95 (3H, s, NHCOCH3), 3.37 (1H, dd, J 9a,9b 13.6, J 9a,8 6.2, H-9a), 3.45 (1H, dd, J 7,6 <1, J 7,8 8.9, H-7), 3.58 to 3.61 (1H, m, H-9b), 3.77 (3H, s, COOCH3 ), 3.93 (1H, ddd, J 8,7 9.6, J 8,9a 6.8, J 8,9b 3.4, H-8), 4.21 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.31 (1H, dd, J 6,5 11.0, J 6,7 <1, H-6), 5.04 (1H, dd, J 4,5 10.3 , J 4,3 2.7, H-4), 5.89 (1H, d, J 3,4 2.1, H-3); HR-MS (Positive): Calcd. for C27H43N5O11 (M+Na)+, 636.2857, Found 636.2884.
【００３１】
（ステップ３）
5-Acetamido-4-guanidino-2,3,4,5,9-pentadeoxy-9-cyclopropanecarboxamido-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid Trifluoroacetic Acid Salt (14)の合成
上記のようにして得られた化合物（１３）(100mg, 0.16mmol)をメタノール/THF(5/1)混合溶媒2mlに溶かし、０℃に冷却下、LiOH (25mg)／H2O(1ml)のアルカリ液を滴下し、12時間撹拌する。反応終了後、反応混合物をイオン交換樹脂（Dowex-50×8 (H+)）に通してpH7とした後、反応混合物をろ過し、エバポレートして、黄白色固体として得た。これをジクロロメタン(2mL)とトリフルオロ酢酸(2mL)に室温下で溶かした。出発物質が消滅していることを確認した後、エバポレータで乾燥させ、こうして得られた粗成物は逆相カラムクロマトグラフィーにより、0〜20% メタノール水溶液（0.1% のトリフルオロ酢酸を含む）によって精製した。精製したフラクションを乾燥させ、凍結乾燥し、白色固体としてノイラミン酸誘導体（１４）を67mg (収率83%)で得た。得られたノイラミン酸誘導体（１４）の1H-NMRデータ及び、HR-MSデータを以下に示す。
1H NMR (D2O)δ 0.83 to 0.84 (4H, 2 × m, H-2', H-3'), 1.63 to 1.66 (2H, m, H-1'), 2.02 (3H, s, NHCOCH3), 3.34 (1H, dd, J 9a,9b 13.7, J 9a,8 7.6, H-9a), 3.55 (1H, dd, J 7,8 8.9 , J 7,6 1.4, H-7), 3.59 (1H, dd, J 9b,9a 13.7, J 9b,8 2.8, H-9b), 3.97 (1H, ddd, J 8,7 12.3, J 8,9a 6.9, J 8,9b 3.4, H-8), 4.20 (1H, dd, J 5,4 = J 5,6 10.3, H-5), 4.36 (1H, dd, J 6,5 10.3, J 6,7 1.4, H-6), 4.42 (1H, dd, J 4,5 9.6 , J 4,3 2.7, H-4), 5.61 (1H, d, J 3,4 2.0, H-3); HR-MS (Negative): Calcd. For C18H25F3N5O9 (M-H)-, 512.1610, Found 512.1729.
【００３２】
＜評 価＞
（ウイルスシアリダーゼに対する活性阻害の測定）
上記のようにして合成したノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）について、インフルエンザＡ型ウイルスのシダリダーゼに対する活性阻害を、4-methylumbelliferyl N-acetylneuraminic酸（ＭＵＮＡ）を用いた蛍光測定法によって評価した。
すなわち、２０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）１５μｌと、５段階の濃度に調整した所定量のノイラミン酸誘導体と、２ユニットのシアリダーゼを含むウイルス５μｌとを混合し、３７℃で１５分インキュベーションを行った。ここで、ウイルスシアリダーゼの１ユニットとは、ｐＨ６．０で３７℃で１分につき１ｎｍｏｌのＭＵの生成をするために必要な酵素量と定義される。
次に、５μｌのＭＵＮＡを加え、さらに３７℃で１５分インキュベーションを行った。
最後に、２００ｍＭ炭酸ナトリウム−重炭酸塩緩衝液（ｐＨ１０．６）２００μｌを加えて反応を終了させた。リリースされるノイラミン酸と等しい量のＭＵは、プレートリーダー（ミトラＬＢ９４０、バートルドＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｐｆｏｒｚｈｅｉｍ、ドイツ）によって、３５５ｎｍの励起と４６０ｎｍの蛍光によって検出された。ＩＣ５０値は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（サンディエゴ、ＣＡ、ＵＳＡ）で非線形回帰分析法を使用して計算した。また、比較のため、オセルタミビル（２）（登録商標名：タミフル）及びザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ）の活性阻害についても、同様に測定した。結果を表１並びに図３及び図４に示す。
【００３３】
【表１】
【００３４】
図１及び表1に示すように、ノイラミン酸誘導体（１１）は、H1N1、H3N2及びH5N3のウイルスのシアリダーゼに対して、高い活性阻害作用を奏することが分かった。また、ノイラミン酸誘導体（１４）は、図２及び表１に示すように、活性阻害の効果は、ノイラミン酸誘導体（１１）よりも顕著であり、ザナミビル（３）やオセルタミビル（２）と同程度であった。
以上の結果は、ノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）がシアリダーゼ活性阻害剤及び抗ウイルス薬として充分な効果を有することを明らかにしている。
【００３５】
（ヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２及びＮＥＵ４）に対する活性阻害の測定）
上記のようにして合成したノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）について、３種類（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、及びＮＥＵ４）のヒト−シアリダーゼに対する活性阻害を、4-methylumbelliferyl N-acetylneuraminic酸（ＭＵＮＡ）を用いた蛍光測定法によって評価した。
すなわち、５０μＬの反応液において、５００ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ＮＥＵ１及びＮＥＵ４に対してはｐＨ４．６、ＮＥＵ２に対してはｐＨ５．５）１０μＬ、５段階の濃度に調整した所定量のノイラミン酸誘導体、５０μｇの子牛由来のアルブミン、２０ｎmolのＭＵＮＡ、所定量の組み換え型ヒト−シアリダーゼを混合し、３７℃で３０分間インキュベーションを行った。そしてリリースされるノイラミン酸と等しい量のＭＵを、ウイルスシアリダーゼに対する活性阻害の測定の場合と同様の方法で測定した。
なお、ＩＣ５０値は、マイクロソフトエクセルによる非線形回帰分析法を用いて計算した。
また、比較のため、ザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ)の活性阻害についても同様に測定した。
【００３６】
（ヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ３）に対する活性阻害の測定）
上記のようにして合成したノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）について、ヒト−シアリダーゼＮＥＵ３に対する活性阻害を、malononitrileを用いた高速液体クロマトグラフィーによる蛍光測定法によって評価した。
すなわち、５μＬの反応液において、５００ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．５）１０μＬ、５段階の濃度に調整した所定量のノイラミン酸誘導体、５０μｇの子牛由来のアルブミン、５ｎmolのガングリオシドＧＭ３、５０μｇのトリトンＸ−１００、所定量の組み換え型ヒト−シアリダーゼを混合し、３７℃で３０分間インキュベーションを行った。
最後に、２００ｍＭ炭酸ナトリウム−重炭酸塩緩衝液（ｐＨ１０．６）２００μｌを加えて反応を終了させた。そしてＧＭ３からリリースされたシアル酸をmalononitrileを用いた高速液体クロマトグラフィーによる蛍光測定法によって測定した。
なお、ＩＣ５０値は、マイクロソフトエクセルによる非線形回帰分析法を用いて計算した。
また、比較のため、ザナミビル（３）（登録商標名：リレンザ)の活性阻害についても同様に測定した。
【００３７】
【表２】
【００３８】
結果を表２並びに図３及び図４に示す。
表２及び図３に示すように、ノイラミン酸誘導体（１１）は、ヒト由来の４種類のシアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）のいずれに対しても、ヒト−シアリダーゼ活性阻害（ＩＣ５０）はほとんど認められない程度であった。
また、表２及び図４に示すように、ノイラミン酸誘導体（１４）についても、ヒト由来の４種類のシアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）のいずれに対しても、ヒト−シアリダーゼ活性阻害（ＩＣ５０）はほとんど認められない程度であった。
以上の結果は、ノイラミン酸誘導体（１１）及びノイラミン酸誘導体（１４）を抗ウイルス薬として用いた場合においても、副作用の可能性が極めて少ないことを示している。
【００３９】
この発明は上記発明の実施の態様及び実施例の説明に何ら限定されるものではない。特許請求の範囲を逸脱せず、当業者が容易に想到できる範囲で種々の変形態様もこの発明に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】ノイラミン酸誘導体（１１）のウイルス（Ｈ１Ｎ１、Ｈ３Ｎ２及びＨ５Ｎ３）シアリダーゼに対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【図２】ノイラミン酸誘導体（１４）のウイルス（Ｈ１Ｎ１、Ｈ３Ｎ２及びＨ５Ｎ３）シアリダーゼに対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【図３】ノイラミン酸誘導体（１１）のヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）に対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【図４】ノイラミン酸誘導体（１４）のヒト−シアリダーゼ（ＮＥＵ１、ＮＥＵ２、ＮＥＵ３及びＮＥＵ４）に対する活性阻害の測定結果を示すグラフである。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明のノイラミン酸誘導体及びシアリダーゼ活性阻害剤は、シアリダーゼの機能を調べる生物学的ツールとして利用することができる。また、本発明のノイラミン酸誘導体は、ウイルスのシアリダーゼ活性を選択的に阻害し、ヒトのシアリダーゼ活性をほとんど阻害しないことから、副作用の少ない抗インフルエンザ薬等に利用できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式（１）（ただし、Ｒ１及びＲ２は、水素又は炭素数１〜８の分岐してもよいアルキル基若しくは炭素数１〜８の分岐してもよいシクロアルキル基を示し、Ｒ３は水素又はフッ素を示す）又はその薬学上許容される塩、水和物、溶媒和物若しくはプロドラッグからなることを特徴とするノイラミン酸誘導体。
【化１】
【請求項２】
Ｒ１はｎ−ブチル基であり、Ｒ２はメチル基であり、Ｒ３は水素であることを特徴とする請求項１記載のノイラミン酸誘導体。
【請求項３】
Ｒ１はシクロペンチル基であり、Ｒ２はメチル基であり、Ｒ３は水素であることを特徴とする請求項１記載のノイラミン酸誘導体。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれか1項に記載のノイラミン酸誘導体を有効成分として含有することを特徴とするシアリダーゼ活性阻害剤。
【請求項５】
請求項１乃至３のいずれか1項に記載のノイラミン酸誘導体を有効成分として含有することを特徴とする抗インフルエンザ薬。
【請求項１】
下記化学式（１）（ただし、Ｒ１及びＲ２は、水素又は炭素数１〜８の分岐してもよいアルキル基若しくは炭素数１〜８の分岐してもよいシクロアルキル基を示し、Ｒ３は水素又はフッ素を示す）又はその薬学上許容される塩、水和物、溶媒和物若しくはプロドラッグからなることを特徴とするノイラミン酸誘導体。
【化１】
【請求項２】
Ｒ１はｎ−ブチル基であり、Ｒ２はメチル基であり、Ｒ３は水素であることを特徴とする請求項１記載のノイラミン酸誘導体。
【請求項３】
Ｒ１はシクロペンチル基であり、Ｒ２はメチル基であり、Ｒ３は水素であることを特徴とする請求項１記載のノイラミン酸誘導体。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれか1項に記載のノイラミン酸誘導体を有効成分として含有することを特徴とするシアリダーゼ活性阻害剤。
【請求項５】
請求項１乃至３のいずれか1項に記載のノイラミン酸誘導体を有効成分として含有することを特徴とする抗インフルエンザ薬。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２０１１−１３６９６４（Ｐ２０１１−１３６９６４Ａ）
【公開日】平成２３年７月１４日（２０１１．７．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２９８７８８（Ｐ２００９−２９８７８８）
【出願日】平成２１年１２月２８日（２００９．１２．２８）
【出願人】（３０４０１９３９９）国立大学法人岐阜大学 (289)
【出願人】（５００４３３２２５）学校法人中部大学 (105)
【出願人】（５９１０７４７３６）宮城県 (60)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年７月１４日（２０１１．７．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１２月２８日（２００９．１２．２８）
【出願人】（３０４０１９３９９）国立大学法人岐阜大学 (289)
【出願人】（５００４３３２２５）学校法人中部大学 (105)
【出願人】（５９１０７４７３６）宮城県 (60)
【Ｆターム（参考）】
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