バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物
【課題】本発明は、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などを有するバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を提供することにある。言い換えれば、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を含む保湿剤、コラーゲン生成促進剤、細胞賦活剤、抗老化剤、育毛剤及び肌荒れ改善剤などを提供することにある。さらに、当該化粧品組成物を含む化粧品組成物、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物や、当該組成物を含む化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することである。
【解決手段】バイオサーファクタントと紫外線吸収剤を少なくとも含有することを特徴とする化粧品組成物を提供する。さらに、抗菌剤を含有する化粧品組成物を提供する。
【解決手段】バイオサーファクタントと紫外線吸収剤を少なくとも含有することを特徴とする化粧品組成物を提供する。さらに、抗菌剤を含有する化粧品組成物を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオサーファクタントを有効成分とする化粧品組成物に関するものであり、当該化粧品組成物が保湿剤、コラーゲン生成促進剤、細胞賦活剤、抗老化剤、紫外線吸収剤及び肌荒れ改善剤としての作用を有し、特に、老化防止や発毛・脱毛防止に有効なバイオサーファクタントを含有する化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に関するものである。より詳しくは、バイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）あるいはエリスリトール以外のアルジトールを含むマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）であることを特徴とする化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
個体老化やこれに伴って発生する各種の疾患などは、分裂するすべての細胞の老化（分裂速度の低下、細胞機能の低下）と深く関わっている。例えば皮膚は、表皮細胞、繊維芽細胞、およびこれら細胞外の皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の細胞外マトリックスによって構成されている。若い皮膚においては、これらの皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことによって水分保持、柔軟性、弾力性が確保され、肌は外観的にも張りと艶があり、みずみずしい状態に維持される。ところが、加齢や紫外線、乾燥、ストレスなどによって特に細胞外マトリックスや繊維芽細胞の機能低下が引き起こされ、その結果、皮膚の柔軟性、保湿機能は低下し、肌は張りや艶を失い、荒れ、しわ、くすみなどの老化症状が発生する。
【０００３】
細胞レベルで老化防止や抑制を目的に賦活化剤、抗老化剤の探索が行われている。例えば動物由来の賦活化剤としては、結合組織加水分解物（特許文献１）、胸腺・脾臓由来水溶性蛋白（特許文献２）、牛胎盤エキス（特許文献３）などが知られている。植物由来の賦活化剤としては、ゴマ、サンヤク、トウガラシ、トウキ、ドクダミ、バクモンドウ（特許文献４）、アーモンド、セイヨウタンポポ、セイヨウニワトコ、センキュウ、センブリ、ソウハクヒ、トウニン、ニンジン、ホップ、ムクゲ、ヨクイニン（特許文献５、特許文献６）、ショウガ科ウコン属（特許文献７）、ハナヤスリ科ハナヤスリ属（特許文献８）の抽出物などが知られている。これらの一部は賦活化剤、抗老化剤として医薬部外品や化粧品に利用されているが、満足すべき作用効果を発揮する賦活化剤や抗老化剤は得られていない。
【０００４】
また、肌荒れを予防または治癒する検討もなされている。荒れ肌とは、一般に角質細胞の剥離現象が認められる乾燥状態の皮膚をいう。このような荒れ肌はコレステロール、セラミド、脂肪酸等の角質細胞間脂質の溶出、および紫外線、洗剤等に起因する角質細胞の変性や表皮細胞の増殖・角化バランスの崩壊による角層透過バリアの形成不全等によって発生する。この荒れ肌を予防または治癒する目的で、角質細胞間脂質成分又はそれに類似する合成の角質細胞間脂質を供給するなどの検討が行われている。
【０００５】
この角層細胞間脂質は、有棘層と顆粒層の細胞で生合成された層板顆粒が、角層直下で細胞間に放出され、伸展し、層板（ラメラ）構造をとり、細胞間に広がったものである。層板顆粒はグルコシルセラミド、コレステロール、セラミド、リン脂質等から構成されるが、角層細胞間脂質にはグルコシルセラミドは殆ど含まれていない。すなわち、層板顆粒中のグルコシルセラミドは、β−グルコセレブロシダーゼによって加水分解を受け、セラミドに変換され、このセラミドがラメラ構造をとる結果、角層細胞間脂質として角層透過バリアの形成を改善し、荒れ肌防御のバリアの働きを持つと考えられる。洗浄剤による肌荒れはセラミドの補充が有効であり、肌荒れの改善に高い効果を示すことが報告されている（非特許文献１）。
【０００６】
しかし、グルコシルセラミドが主成分である植物抽出液は、セラミドの代替としては未だ満足のいく結果は得られていないし、セラミドの合成も反応ステップが多く大量に得るにはコスト高になる。
【０００７】
マンノシルエリスリトールリピッド(ＭＥＬ)は酵母が作る天然系の界面活性剤であり種々の生理作用が報告されている（非特許文献１）。また最近ではエリスリトールがマンニトールに代わったマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）が見出されている（特許文献９）。外用剤や化粧品としての用途としては、抗炎症剤および抗アレルギー剤（特許文献１０）、養毛・育毛剤（特許文献１１）としての有用性や、抗菌作用（特許文献１２）や表面張力低下作用（特許文献１３）が知られている。また、MELがセラミドの代替として作用し、肌荒れを改善する効果（特許文献１４）も報告されている。
【０００８】
しかし、ＭＥＬを紫外線吸収剤と共存することにより、その効果が向上することは報告されていなかった。
【特許文献１】特開昭６２−８４０２４号公報
【特許文献２】特開昭６３−１８８６９７号公報
【特許文献３】特開平０３−１４１２９９号公報
【特許文献４】特開平１０−４５６１５号公報
【特許文献５】特開平１０−０３６２７９号公報
【特許文献６】特開平１０−３６２７９号公報
【特許文献７】特開２００４−７５６３２号公報
【特許文献８】特開２００５−８９３７５号公報
【特許文献９】特開２００５−１０４８３７号公報
【特許文献１０】特開２００５−６８０１５号公報
【特許文献１１】特開２００３−２６１４２４号公報
【特許文献１２】特開昭５７−１４５８９６号公報
【特許文献１３】特開昭６１−２０５４５０号公報
【特許文献１４】ＷＯ２００７／０６０９５６
【非特許文献１】ジャーナル オブ バイオサイエンス アンド バイオエンジニアリング、９４，１８７（２００２）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
哺乳類、特にヒトに対して賦活化や抗老化を付与することは極めて重要な課題であり、動物由来、植物由来の賦活物質や抗老化剤は各種見つかっているが、実際には産業上利用可能な程度に十分かつ安定した効果は得られておらず、新規な賦活化剤や抗老化剤が探索されているのが現状である。また、セラミドは肌荒れに有用な成分として化粧品に使用されているが、合成品あるいは植物抽出品は高価であり、少量しか使用できないのが現状である。
【００１０】
本発明は、上記問題点を改善した、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などを有するバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を提供することにある。言い換えれば、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を含む保湿剤、コラーゲン生成促進剤、細胞賦活剤、抗老化剤、育毛剤及び肌荒れ改善剤などを提供することにある。さらに、当該化粧品組成物を含む化粧品組成物、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物や、当該組成物を含む化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することである。
【００１１】
さらに、本発明は、紫外線吸収剤を含有する皮膚外用剤において、刺激の少ない皮膚外用剤を求めて鋭意研究努力を重ねた結果紫外線吸収剤と共に含有する界面活性剤としてバイオサーファクタントを用いることにより、紫外線吸収剤の皮膚浸透性が向上しその効果が高まると共に刺激を少なくできるという特性が発揮できることを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、以下に示す技術に関するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは上記の目的を達成すべく鋭意努力した結果、バイオサーファクタント、特にＭＥＬ、エリスリトール以外のアルジトールを含むＭＡＬ（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）、トリアシルＭＥＬおよびトリアシルＭＡＬを含む化粧品組成物が有効であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、以下の発明を包含する。
【００１３】
１．バイオサーファクタントと紫外線吸収剤を少なくとも含有することを特徴とする化粧品組成物。
２．バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする１に記載の化粧品組成物。
３．バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする１または２に記載の化粧品組成物。
４．マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）、マンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）及び／又はマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする３に記載の化粧品組成物。
５．MELが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（MEL−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（MEL−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（MEL−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（MEL−Ｄ）、MEL−Ａのトリアシル体、MEL−Ｂのトリアシル体、MEL−Ｃのトリアシル体及びMEL−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする４に記載の化粧品組成物。
６．バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸を含有していることを特徴とする１〜５のいずれかに記載の化粧品組成物。
７．バイオサーファクタントが、ラメラ構造及び／又はリポソームを形成していることを特徴とする１〜６のいずれかに記載の化粧品組成物。
８．バイオサーファクタントが形成するラメラ構造及び／又はリポソームの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする７に記載の化粧品組成物。
９．紫外線吸収剤が、安息香酸系紫外線吸収剤 、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤、トリアジン系紫外線吸収剤及びベンゾフェノン系紫外線吸収剤からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする１〜８のいずれかに記載の化粧品組成物。
１０．さらに、抗菌剤を含有することを特徴とする１〜９のいずれかに記載の化粧品組成物。
１１．抗菌剤が有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であることを特徴とする１０に記載の化粧品組成物。
１２．化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである１〜１１のいずれかに記載の化粧品組成物。
【発明の効果】
【００１４】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物により、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などの効果を有する、化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することできる。特に、本発明によれば、紫外線吸収剤を含有する皮膚外用剤において、刺激性の少ない皮膚外用剤を提供することができる。
また、バイオサーファクタントは生物由来の天然界面活性剤であるため安全性に優れており、本発明に係る化粧品組成物は長期にわたる使用に十分に耐え得るという効果を奏する。さらに、バイオサーファクタントは、微生物の培養により製造できるため原料コストが安価であり、大量生産可能である。したがって、本発明係る化粧品組成物は低価格で提供できるという効果を奏する。バイオサーファクタントは、プレミックス品として使用してもよい。
【００１５】
バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、洗浄性と、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などを併せ持つので、洗浄用化粧料の配合成分としても有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
（賦活化剤）
本明細書において「賦活化」とは、細胞機能や細胞活性を維持または亢進させることが意図される。その結果、細胞機能や細胞活性の低下を抑制、すなわち細胞の老化を抑制することができる。したがって、「賦活化剤」は「細胞賦活剤」と同義であり、「抗老化剤」としての有用性を持つ。
【００１７】
例えば、皮膚細胞における「賦活化、抗老化」とは、加齢や光老化による基低膜の構造変化の蓄積に伴う皮膚細胞の機能低下を小さくすることで、皮膚のしわ、たるみ、硬化等を防止、改善して弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することなどを指している。また、例えば、毛乳頭細胞または毛母細胞においては、加齢、ストレス、ホルモンバランスによる毛乳頭細胞または毛母細胞の機能低下を小さくすることで、ヘアサイクルを維持して脱毛を抑えることなどを指している。
【００１８】
（バイオサーファクタント）
「バイオサーファクタント」とは生物によって生み出される界面活性能力や乳化能力を有する物質の総称であり、優れた界面活性や、高い生分解性を示すばかりでなく、様々な生理作用を有していることから合成界面活性剤とは異なる挙動・機能を発現する可能性がある。なお、バイオサーファクタントは微生物の培養により大量に製造可能であり、プレミックス品として使用してもよい。
【００１９】
「プレミックス品」とは機能性の素材の他に、分散剤などを添加したり、溶媒で化粧品製造時に使いやすいように希釈したりしたものである。
【００２０】
バイオサーファクタントとしては、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）、トレハロースリピッド、ラムノリピッド、ソホロリピッド、サーファクチン、スピクルスポル酸、エマルザンなどが挙げられ、いずれも本発明に係る賦活化剤に使用できる。なかでも、ラメラ構造を形成するバイオサーファクタントを利用するのが好ましく、ＭＥＬ、ＭＡＬが特に好ましい。
【００２１】
（MEL)
ＭＥＬは、マンノースの４位および６位のアセチル基の有無からＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−ＣおよびＭＥＬ−Ｄの４種類が知られている。式（I）にＭＥＬ−Ａの構造を示す。式（I）中、Ｒ１およびＲ２は炭化水素基を示す。すなわち、ＭＥＬ−Ａは、式（I）中、マンノースの２位、３位に炭素数５〜１９のアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位にアセチル基を有する化合物である。なお、ＭＥＬ−Ｂは式（I）においてマンノースの４位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｃは式（I）においてマンノースの６位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｄは式（I）においてマンノースの４位および６位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がいずれもＨである。
【００２２】
【化１】
【００２３】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数１〜１６、より好ましくは炭素数１〜１４の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。ｎは6〜10の整数、ｍは6〜10の整数を各々表す。〕
【００２４】
式（I）に対応させれば、ＭＥＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。
【００２５】
R1、R2の好ましい基としては、CH3(CH2)6、CH3(CH2)8、CH3(CH2)10などのC7〜C11のアルキル基が挙げられる。R1、R2がC7〜C11のアルキル基である式(I)または(IA)のＭＥＬ−Ａは、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの飽和またはモノ不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。同様に、R1、R2がアルケニル基、アルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基である式(I)のMEL-Aは、原料として二重結合を２個以上有するリノール酸、リノレン酸、アラキドン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの高度不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。R1、R2で表される好ましいアルカノイル基は、C7H14、C9H18、C11H22などのC7〜C11のアルケニル基が挙げられる。R1、R2で表される好ましいアルカジエニル基は、C7H12、C9H16、C11H20などのC7〜C11のアルカジエニル基が挙げられる。R1、R2で表される好ましいアルカトリエニル基は、C7H10、C9H14、C11H18などのC7〜C11のアルカトリエニル基が挙げられる。
【００２６】
（MML)
MMLの構造は式(II)に示し、好ましいMMLは式(IIA) に示す（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。式（II）に対応させれば、ＭＭＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。
【００２７】
【化２】
【００２８】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数１〜１６、より好ましくは炭素数１〜１４の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。ｎは6〜10の整数、ｍは6〜10の整数を各々表す。〕
【００２９】
（ＭＡＬ)
ＭＡＬの構造は式(III)に示す（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。式（III）に対応させれば、ＭＡＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。
【００３０】
【化３】
【００３１】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数１〜１６、より好ましくは炭素数１〜１４の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。ｎは6〜10の整数、ｍは6〜10の整数を各々表す。〕
【００３２】
（トリアシル体）
本発明に係る賦活化剤に用いられるバイオサーファクタントは、ＭＥＬのトリアシル体およびＭＭＬのトリアシル体でもよい。トリアシル体のバイオサーファクタントは、ＭＥＬやＭＭＬよりもさらに高い疎水性を有する新規構造のバイオサーファクタントである。例えば、ＭＥＬ生産菌の培養液以外から大量に得る時は、酵素を用いてＭＥＬを種々の植物油と反応することによって製造することができる。
【００３３】
ＭＥＬのトリアシル体、すなわちトリアシルマンノシルエリスリトールリピッド（トリアシルＭＥＬと称することがある）は、式（IV）のような構造を示す。
【００３４】
【化４】
【００３５】
式（IV）中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立して炭化水素基または酸素原子含有炭化水素基を示し、マンノースの４位および６位の水酸基のいずれか一方、あるいは両方の水素原子がアセチル基に置換されていてもよい。炭化水素基は飽和結合のみを有していてもよく、不飽和結合を有していてもよい。不飽和結合を有している場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。また、酸素原子含有炭化水素基の場合、含まれる酸素原子の数および位置は限定されない。
【００３６】
式（IV）中、Ｒ１、Ｒ２は炭素数が６〜２０であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてマンノースの２位および３位の水酸基とエステル結合をしており、残りの水酸基にはアセチル基がエステル結合していてもよい。Ｒ３は炭素数が６〜２０であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてエリスリトールの一級水酸基とエステル結合をしている。
【００３７】
トリアシルＭＥＬは脂肪酸エステルが付加した構造であり高い疎水性を有することからエモリエント剤として従来のＭＥＬと比べても種々のオイル成分と馴染みやすい点で優れている。
【００３８】
これらのバイオサーファクタントは、単独で使用してもよいが、２種以上のバイオサーファクタントを併用することもできる。
【００３９】
（バイオサーファクタントの製造方法）
バイオサーファクタントの製造方法は特に制限されるものはないが、微生物を用いた発酵方法を任意に選択して行えば良い。例えばMEL (MEL-A, MEL-B, MEL-C)の培養生産は常法に従って、Pseudozymaantarctica NBRC 10736により生産することができ、微生物としてはPseudozyma antarctica、Pseudozyma sp.、等を用いることができる。いずれの微生物でも容易にＭＥＬ混合物が得られることは周知の事実である。ＭＥＬ混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃを単離することが出来る。また、ＭＥＬ−Ｂを生産する菌としては、Pseudozyma antarctica 、およびPseudozyma tsukubaensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬ−Ｃを生産する菌としては、Pseudozyma hubeiensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬを生産する能力を有する微生物としては特に限定するものではなく、目的に応じて適宜使用することができる。
【００４０】
バイオサーファクタントを生産するときの発酵培地は、酵母エキス、ペプトン等のＮ源、グルコース、フルクトース等のＣ源、および硝酸ナトリウム、リン酸水素二カリウム、硫酸マグネシウム７水塩等の無機塩類からなる一般的な組成の培地を用いることができ、これにオリーブ油、ダイズ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油、キャノーラ油、ココナッツ油等の油脂類、並びに、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独或いは２種以上を添加したものを使用することができる。
【００４１】
ｐＨや温度等の発酵条件や培養時間等は任意に設定でき、発酵後の培養液をそのまま本発明のバイオサーファクタントとして使用することが可能である。また、発酵後の培養液を必要に応じて濾過、遠心分離、抽出、精製、滅菌等の任意の操作を適宜加えることも可能であり、得られたエキスを希釈、濃縮、乾燥することもできる。
【００４２】
原料とする油脂類としては植物油脂が好ましい。植物油脂は特に限定されず、目的に応じて適宜選定することができる。例えば、大豆油、菜種油、コーン油、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、パーム油などが挙げられ、これらの中でも、大豆油、オリーブ油がバイオサーファクタント（特にＭＥＬ）の生産効率（生産量、生産速度、および収率）を向上させることができる点で特に好ましい。これらは、１種を単独で、または２種以上を併用しても構わない。
【００４３】
無機窒素源としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選定することができるが、例えば、硝酸アンモニウム、尿素、硝酸ナトリウム、塩化アンモニウム、硫安等が挙げられる。
【００４４】
バイオサーファクタントの回収、精製方法には特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。例えば、培養液を遠心分離して油分を回収し、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出濃縮することにより回収することができる。
【００４５】
抽出溶媒としては、水、アルコール類（例えば、メタノール、無水エタノール、エタノールなどの低級アルコール、またはプロピレングリコール、１，３-ブチレングリコール
などの多価アルコール）、アセトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、酢酸エチルなどのエステル類、キシレン、ベンゼン、クロロホルムなどの有機溶媒を、単独であるいは２種類以上の混液を任意に組み合わせて使用することができ、また、各々の溶媒抽出物が組み合わされたものでも使用することができる。
【００４６】
抽出方法は特に制限されるものはないが、通常、常温から常圧下での溶媒の沸点の範囲であればよく、抽出後は濾過またはイオン交換樹脂を用い、吸着・脱色・精製して溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状とすればよい。多くの場合は、そのままの状態で利用できるが、必要であれば、その効力に影響のない範囲でさらに脱臭、脱色などの精製処理を加えてもよい。脱臭・脱色等の精製処理手段としては、活性炭カラムなどを用いればよく、抽出物質により一般的に適用される通常の手段を任意に選択して行えばよい。必要に応じて、シリカゲルカラムを用いて精製することにより、純度の高いバイオサーファクタントを得ることができる。
【００４７】
（トリアシル体製造方法）
バイオサーファクタントのトリアシル体を得る方法を、ＭＥＬのトリアシル体を製造する方法を例として説明するが、本発明に用いられるバイオサーファクタントのトリアシル体はトリアシルＭＥＬに限定されない。
【００４８】
例えば、トリアシルＭＥＬを得るためには、上記のようにして微生物を発酵して製造した培養液からトリアシルＭＥＬ画分を精製して得ることができる。また、大量に得るためには、ＭＥＬを有機溶媒に溶かし、植物油などの脂肪酸誘導体を添加、加水分解酵素の存在下でエステル化反応またはエステル交換反応を行う。
【００４９】
ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸は長鎖炭化水素の1価のカルボン酸であればよい。また、飽和脂肪酸であっても不飽和脂肪酸であってもよい。不飽和脂肪酸の場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。さらに、脂肪酸の誘導体である脂肪酸誘導体を本発明に使用してもよいし、脂肪酸と脂肪酸誘導体の混合物を本発明に使用してもよい。ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸または脂肪酸誘導体は、油類、高級脂肪酸、合成エステル由来であることが好ましい。
【００５０】
「油類」としては、植物油、動物油、鉱物油およびその硬化油であればよい。具体的には、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油およびその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンが挙げられる。好ましくはアボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、より好ましくはオリーブ油、大豆油である。
【００５１】
「高級脂肪酸」としては、例えばカプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などが挙げられる。好ましくはラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ウンデシレン酸、より好ましくはオレイン酸、リノール酸、ウンデシレン酸である。
【００５２】
「合成エステル」としては、例えば、カプロン酸メチル、カプリル酸メチル、カプリン酸メチル、ラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシン酸メチル、カプロン酸エチル、カプリル酸エチル、カプリン酸エチル、ラウリン酸エチル、ミリスチン酸エチル、パルミチン酸エチル、オレイン酸エチル、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、ステアリン酸エチル、ウンデシン酸エチル、カプロン酸ビニル、カプリル酸ビニル、カプリン酸ビニル、ラウリン酸ビニル、ミリスチン酸ビニル、パルミチン酸ビニル、オレイン酸ビニル、リノール酸ビニル、リノレン酸ビニル、ステアリン酸ビニル、ウンデシン酸ビニル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等が挙げられる。好ましくはラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシレン酸メチル、より好ましくはオレイン酸メチル、リノール酸メチル、ウンデシレン酸メチルである。
【００５３】
トリアシルＭＥＬは、上述のようにＭＥＬを有機溶媒に溶解して反応させることにより生産することができる。有機溶媒としては、ＭＥＬを可溶化できるものであれば限定されない。全部を可溶化できなくても一部を可溶化できるものであればよい。また、有機溶媒は複数の有機溶媒の混合物でもよい。具体的には、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、プロパノン、ブタノン、ペンタン−２−オン、１，２−エタンジオール、２，３−ブタンジオール、ジオキサン、アセトニトリル、２−メチル−ブタン−２−オール、第３級ブタノール、２−メチルプロパノール、４−ヒドロキシ−２−メチルペンタノン、テトラヒドロフラン、ヘキサン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ピリジン、メチルエチルケトンなどを挙げることができる。好ましくはアセトン、テトラヒドロフラン、第３級ブタノール、アセトニトリル、ジオキサン、より好ましくはアセトンである。
【００５４】
加水分解酵素としては、リパーゼ、プロテアーゼ、エステラーゼが挙げられる。これらの中から選択される少なくとも１種を用いることが好ましく、複数の加水分解酵素を用いてもよい。好ましくはリパーゼ、エステラーゼ、より好ましくはリパーゼである。
【００５５】
具体的には、例えば、ＭＥＬ生産微生物の培養液から精製したＭＥＬを有機溶媒（例えば、アセトン）に溶解し、これに市販のリパーゼ（例えば、ノボザイム４３５（ノボザイムズ社製）など）および植物油脂を添加する。
【００５６】
この製造方法の場合、反応温度は１０〜１００℃、好ましくは２０〜５０℃、より好ましくは２５〜４０℃で、１日〜７日間攪拌すればよい。また、反応液にモレキュラーシーブスを添加してもよい。この製造方法により、材料として添加したＭＥＬがほぼ定量的にトリアシル体となる。
【００５７】
トリアシルＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００５８】
（飽和側鎖有するＭＥＬの製造方法）
飽和側鎖有するＭＥＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料とする油脂類としては、オリーブ油、飽和脂肪酸あるいはそのエステル体、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
飽和側鎖有するＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００５９】
（ＭＭＬ等のＭＡＬの製造方法）
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトール等のアルジトールの単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００６０】
（リポソームを得る方法）
バイオサーファクタントは、油溶性基剤、或いは油溶性成分に溶解して化粧料に配合してもよく、リポソームの形態で化粧料、特に化粧水、保湿液などの水系の化粧料に好ましく配合される。リポソームに配合されたバイオサーファクタントは、皮膚細胞と融合して吸収性が向上するために好ましい。リポソームの調整法としては公知の調製法のいずれを採用してもよく、特に限定されないが、例えばエタノール注入法、バンガム法を例示することができる。
【００６１】
例えば、エタノール注入法によるＭＥＬ−Ｂリポソーム溶液の調製は次の通りに行えばよい。すなわち、ＭＥＬ−Ｂ１０ｍｇをエタノール０．５ｍｌに溶解し、あらかじめ70℃前後に温めておいた蒸留水１mLを加え、軽く振り混ぜた後、残存しているエタノールをロータリーエバポレーターで留去する。これを水浴型超音波装置(W-220R、本多電子株式会社)を用い約５分間超音波処理した後、蒸留水で１mlにメスアップすればよい。
【００６２】
例えば、バンガム法によるＭＥＬ−Ｂリポソーム溶液の調製は次の通りに行えばよい。すなわち、ＭＥＬ−Ｂ１０ｍｇをクロロホルム１ｍｌに溶解し、ロータリーエバポレーターで溶媒を留去し薄膜を作成すればよい。そこに蒸留水１ｍｌを加え水浴型超音波装置(W-220R、本多電子株式会社)を用い約５分間超音波処理すればよい。
【００６３】
（バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の製造方法）
化粧品組成物中のバイオサーファクタントの添加量は、バイオサーファクタントの有する作用を損なわない範囲で添加すれば良く、通常０．００１〜５０質量％が好ましく、０．１〜２０質量％がより好ましく、１〜１５質量％がさらに好ましく３〜１０質量％が特に好ましい。ここで、化粧品組成物に添加する前記バイオサーファクタントの使用形態は任意である。例えば、バイオサーファクタントを培養液からの抽出物のまま、あるいは精製した高純度品、もしくは水に懸濁し、あるいはエタノール等の有機溶媒に溶かした後使用してもよい。
【００６４】
（紫外線吸収剤）
紫外線吸収剤 としては、安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤 、トリアジン系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤などを使用しても良い。
【００６５】
例えば紫外線吸収剤 として、紫外線吸収剤が安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸オクチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸フェニル、サリチル酸オクチル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸２−エトキシエチル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ２−エチルヘキサン酸グリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸およびその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルフォン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、４−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−メトキシ−ジベンゾイルメタン、２、４、６−トリアニリノ−ｐ−（カルボ−２’−エチルヘキシル−１’−オキシ）−１、３、５−トリアジン、2-(2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、パラジメチルアミノ安息香酸2-エチルヘキシル、パラアミノ安息香酸エチル、トプチルメトキシジペンゾイルメタン、オキシベンゾン-1、グアイアズレンスルホン酸エチル、酸化亜鉛、シノキサート、アントラニル酸系紫外線吸収剤 としては、例えば、ホモメンチル−Ｎ− アセチルアントラニレートなどが例示される。
【００６６】
これらの紫外線吸収剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００６７】
（抗菌剤）
抗菌剤が、有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であってもよい。
【００６８】
例えば抗菌剤として、オウバク抽出液、ハロカルバン、クロロフェネシン、塩化リゾチーム、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、イソプロピルメチルフェノール、チモール、ヘキサクロロフェン、ベルベリン、チオキソロン、サリチル酸およびそれらの誘導体、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、パラクロルメタクレゾール、塩化ベンザルコニウム、フェノキシエタノール、イソプロピルメチルフェノール、石炭酸、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ヘキサクロロフェン、塩化クロルヘキシジン、トリクロロカルバニリド、感光素、ビス（２−ピリジルチオ−１−オキシド）亜鉛、チアントール、ヒノキチオール、トリクロサン、トリクロロヒドロキシジフェニルエーテル、クロルヘキシジングルコン酸塩、フェノキシエタノール、レゾルシン、アズレン、サリチル酸、ジンクピリチオン、モノニトログアヤコールナトリウム、ウイキョウエキス、サンショウエキス、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウム及びウンデシレン酸誘導体などが例示される。
【００６９】
これらの抗菌剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００７０】
（バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の利用方法）
バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の形態は特に制限されない。したがって、固体、液体、ペースト、ゼリー、粉末などのいずれの状態をとるものであってもよい。このような状態を形成するために、例えばゲル化剤を用いて固化したり、液体を用いて分散状態にしたりすることができる。また、溶媒を添加して溶液にしたり、噴霧乾燥して粉末状にしたりすることもできる。
【００７１】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、優れた保湿効果と肌荒れ防止効果を有しており、皮膚表面に適度な潤いを与え平滑性を保つことが確認されている。すなわち、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、皮膚の水分を長時間にわたって保持することができる。したがって、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、肌荒れ改善、角質改善または肌の保護が必要とされる場合に極めて効果的に使用することができる。
【００７２】
例えば、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は化粧品として使用することができる。例えば、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧品、染毛料、練香水、パウダー、パック、クレンジングクリーム、ひげそり用クリーム、びげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧品、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、養毛剤および育毛剤などとして使用することができる。また、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。
【００７３】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物には、使用目的に応じてバイオサーファクタント、紫外線吸収剤、抗菌剤以外のさまざまな成分をさらに添加させておくことができる。
【００７４】
例えば、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物においてバイオサーファクタントは疎水性が高いため、非イオン性の界面活性剤や低級アルコール、多価アルコール、あるいはオリーブ油、スクワラン、脂肪酸などの天然油脂に溶解して用いてもよい。
【００７５】
非イオン界面活性剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンセスキオレエート、ソルビタントリオレエート、ペンタ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン、テトラ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン等）；グリセリンポリグリセリン脂肪酸類（例えば、モノ綿実油脂肪酸グリセリン、モノエルカ酸グリセリン、セスキオレイン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリン、α，α’−オレイン酸ピログルタミン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリンリンゴ酸等）；プロピレングリコール脂肪酸エステル類（例えば、モノステアリン酸プロピレングリコール等）；硬化ヒマシ油誘導体；グリセリンアルキルエーテル等が挙げられる。
【００７６】
ＰＯＥ系の親水性非イオン界面活性剤としては、例えば、ＰＯＥ−ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンモノステアレート、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンテトラオレエート等）；ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート、ＰＯＥ−ソルビットモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビットペンタオレエート、ＰＯＥ−ソルビットモノステアレート等）；ＰＯＥ−グリセリン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−グリセリンモノステアレート、ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート、ＰＯＥ−グリセリントリイソステアレート等のＰＯＥ−モノオレエート等）；ＰＯＥ−脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ジステアレート、ＰＯＥ−モノジオレエート、ジステアリン酸エチレングリコール等）；ＰＯＥ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ−ラウリルエーテル、ＰＯＥ−オレイルエーテル、ＰＯＥ−ステアリルエーテル、ＰＯＥ−ベヘニルエーテル、ＰＯＥ−２−オクチルドデシルエーテル、ＰＯＥ−コレスタノールエーテル等）；プルロニック型類（例えば、プルロニック等）；ＰＯＥ・ＰＯＰ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ・ＰＯＰ−セチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−２−デシルテトラデシルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−モノブチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−水添ラノリン、ＰＯＥ・ＰＯＰ−グリセリンエーテル等）；テトラＰＯＥ・テトラＰＯＰ−エチレンジアミン縮合物類（例えば、テトロニック等）；ＰＯＥ−ヒマシ油硬化ヒマシ油誘導体（例えば、ＰＯＥ−ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油トリイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノピログルタミン酸モノイソステアリン酸ジエステル、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油マレイン酸等）；ＰＯＥ−ミツロウ・ラノリン誘導体（例えば、ＰＯＥ−ソルビットミツロウ等）；アルカノールアミド（例えば、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド、ラウリン酸モノエタノールアミド、脂肪酸イソプロパノールアミド等）；ＰＯＥ−プロピレングリコール脂肪酸エステル；ＰＯＥ−アルキルアミン；ＰＯＥ−脂肪酸アミド；ショ糖脂肪酸エステル；アルキルエトキシジメチルアミンオキシド；トリオレイルリン酸等が挙げられる。
【００７７】
低級アルコールとしては、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、イソブチルアルコール、ｔ−ブチルアルコール等が挙げられる。
【００７８】
多価アルコールとしては、例えば、２価のアルコール（例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、１，２−ブチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、テトラメチレングリコール、２，３−ブチレングリコール、ペンタメチレングリコール、２−ブテン−１，４−ジオール、ヘキシレングリコール、オクチレングリコール等）；３価のアルコール（例えば、グリセリン、トリメチロールプロパン等）；４価アルコール（例えば、１，２，６−ヘキサントリオール等のペンタエリスリトール等）；５価アルコール（例えば、キシリトール等）；６価アルコール（例えば、ソルビトール、マンニトール等）；多価アルコール重合体（例えば、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、トリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、テトラエチレングリコール、ジグリセリン、ポリエチレングリコール、トリグリセリン、テトラグリセリン、ポリグリセリン等）；２価のアルコールアルキルエーテル類（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノフェニルエーテル、エチレングリコールモノヘキシルエーテル、エチレングリコールモノ２−メチルヘキシルエーテル、エチレングリコールイソアミルエーテル、エチレングリコールベンジルエーテル、エチレングリコールイソプロピルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、エチレングリコールジブチルエーテル等）；２価アルコールアルキルエーテル類（例えば、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル、ジエチレングリコールブチルエーテル、ジエチレングリコールメチルエチルエーテル、トリエチレングリコールモノメチルエーテル、トリエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールイソプロピルエーテル、ジプロピレングリコールメチルエーテル、ジプロピレングリコールエチルエーテル、ジプロピレングリコールブチルエーテル等）；２価アルコールエーテルエステル（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノフェニルエーテルアセテート、エチレングリコールジアジベート、エチレングリコールジサクシネート、ジエチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、ジエチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノメチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノエチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノプロピルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノフェニルエーテルアセテート等）；グリセリンモノアルキルエーテル（例えば、キミルアルコール、セラキルアルコール、バチルアルコール等）；糖アルコール（例えば、ソルビトール、マルチトール、マルトトリオース、マンニトール、ショ糖、エリトリトール、グルコース、フルクトース、デンプン分解糖、マルトース、キシリトース、デンプン分解糖還元アルコール等）；グリソリッド；テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＥ−テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＰ−ブチルエーテル；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ブチルエーテル；トリポリオキシプロピレングリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテルリン酸；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ペンタンエリスリトールエーテル、ポリグリセリン等が挙げられる。
【００７９】
油類としては、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油およびその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンがある。
【００８０】
高級脂肪酸としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などがある。高級アルコールとしては、例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ミリスチルアルコール、オレイルアルコール、セトステアリルアルコール、ホホバアルコール、ラノリンアルコール、バチルアルコール、２−デシルテトラテセシノール、コレステロール、フィトステロール、イソステアリルアルコール等がある。合成エステルとしては、例えば、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等がある。シリコーンとしては、例えば、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン、デカメチルシクロポリシロキサン等の環状ポリシロキサン、シリコーン樹脂等の三次元網目構造のもの等がある。
【００８１】
上述のように、本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に配合して実施することが好ましい。
【００８２】
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品の形態で実施する場合、剤形は限定されず、アンプル、カプセル、粉末、顆粒、丸剤、錠剤、固形剤、液剤、ゲル、気泡、乳液、クリーム、軟膏、シート、ムース、浴用剤など多様なものとすることができる。
【００８３】
具体的には、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品としては、例えば内用・外用薬用製剤、化粧水、乳液、クリーム、軟膏、ローション、オイル、パックなどの基礎化粧料、洗顔料や皮膚洗浄料、シャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアクリーム、ポマード、ヘアスプレー、整髪料、パーマ剤、ヘアートニック、染毛料、育毛・養毛料などの頭髪化粧料、ファンデーション、白粉、おしろい、口紅、頬紅、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、眉墨、まつ毛などのメークアップ化粧料、美爪料などの仕上げ用化粧料、香水類、浴用剤、その他、歯磨き類、口中清涼剤・含嗽剤、液臭・防臭防止剤、衛生用品、衛生綿類、ウエットティシュなどが挙げられる。より具体的には、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧品、染毛料、練香水、パウダー、パック、クレンジングクリーム、ひげそり用クリーム、びげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧品、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、養毛剤および育毛剤などとして使用することができる。また、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。
【００８４】
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物はヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が期待できる限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【００８５】
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に使用される成分や添加剤を併用して配合することができる。
【００８６】
例えば、ロウ類としては、ミツロウ、カルナバロウ、鯨ロウ、ラノリン、液状ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、カンデリラロウ、モンタンロウ、セラックロウなどが挙げられる。
【００８７】
例えば、鉱物油としては、流動パラフィン、ワセリン、パラフィン、オゾケライド、セレシン、マイクロクリスタンワックス、ポリエチレン末、スクワレン、スクワラン、プリスタンなどが挙げられる。
【００８８】
例えば、脂肪酸類としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、オレイン酸、１２-ヒドロキシステアリン酸、ウンデシレン酸、トール油、
ラノリン脂肪酸などの天然脂肪酸、イソノナン酸、カプロン酸、２−エチルブタン酸、イソペンタン酸、２−メチルペンタン酸、２−エチルヘキサン酸、イソペンタン酸などの合成脂肪酸が挙げられる。
【００８９】
例えば、アルコール類としては、エタノール、イソピロパノール、ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、フィトステロールなどの天然アルコール、２−ヘキシルデカノール、イソステアリルアルコール、２−オクチルドデカノールなどの合成アルコール、酸化エチレン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ポリエチレングリコール、酸化プロピレン、プロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、バチルアルコール、ペンタエリトリトール、ソルビトール、マンニトール、ブドウ糖、ショ糖などの多価アルコール類などが挙げられる。
【００９０】
例えば、エステル類としては、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸オレイル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、フタル酸ジエチル、フタル酸ジブチル、酢酸ラノリン、モノステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、ジオレイン酸プロピレングリコールなどが挙げられる。
【００９１】
例えば、金属セッケンとしては、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸カルシウム、パルミチン酸亜鉛、ミリスチン酸マグネシウム、ラウリン酸亜鉛、ウンデシレン酸亜鉛などが挙げられる。
【００９２】
例えば、ガム質および水溶性高分子化合物としては、アラビアゴム、ベンゾインゴム、ダンマルゴム、グアヤク脂、アイルランド苔、カラヤゴム、トラガントゴム、キャロブゴム、クインシード、寒天、カゼイン、デキストリン、ゼラチン、ペクチン、デンプン、カラギーナン、カルボキシアルキルキチン、キトサン、ヒドロキシアルキルキチン、低分子キトサン、キトサン塩、硫酸化キチン、リン酸化キチン、アルギン酸およびその塩、ヒアルロン酸およびその塩、コンドロイチン硫酸、ヘパリン、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、カルボキシエチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ニトロセルロース、結晶セルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメタアクリレート、ポリアクリル酸塩、ポリエチレンオキサイドやポリプロピレンオキサイド等のポリアルキレンオキサイドまたはその架橋重合物、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレンイミンなどが挙げられる。
【００９３】
例えば、界面活性剤としては、アニオン界面活性剤（カルボン酸塩、スルホン酸塩、硫酸エステル塩、リン酸エステル塩）、カチオン界面活性剤（アミン塩、四級アンモニウム塩）、両性界面活性剤（カルボン酸型両性界面活性剤、硫酸エステル型両性界面活性剤、スルホン酸型両性界面活性剤、リン酸エステル型両性界面活性剤）、非イオン界面活性剤（エーテル型非イオン界面活性剤、エーテルエステル型非イオン界面活性剤、エステル型非イオン界面活性剤、ブロックポリマー型非イオン界面活性剤、含窒素型非イオン界面活性剤）、その他の界面活性剤（天然界面活性剤、タンパク質加水分解物の誘導体、高分子界面活性剤、チタン・ケイ素を含む界面活性剤、フッ化炭素系界面活性剤などが挙げられる。
【００９４】
例えば、ビタミン類としては、ビタミンＡ群ではレチノール、レチナール（ビタミンＡ1）、デヒドロレチナール（ビタミンＡ2）、カロチン、リコピン（プロビタミンＡ）、ビタミンＢ群では、チアミン塩酸塩、チアミン硫酸塩（ビタミンＢ1）、リボフラビン（ビタミンＢ2）、ピリドキシン（ビタミンＢ6）、シアノコバラミン（ビタミンＢ12）、葉酸類、ニコチン酸類、パントテン酸類、ビオチン類、コリン、イノシトール類、ビタミンＣ群では、アスコルビン酸およびその誘導体、ビタミンＤ群では、エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ2）、コレカルシフェロール（ビタミンＤ3）、ジヒドロタキステロール、ビタミンＥ群では、トコフェロールおよびその誘導体、ユビキノン類、ビタミンＫ群では、フィトナジオン（ビタミンＫ1）、メナキノン（ビタミンＫ2）、メナジオン（ビタミンＫ3）、メナジオール（ビタミンＫ4）などが挙げられる。
【００９５】
例えば、アミノ酸としては、バリン、ロイシン、イソロイシン、トレオニン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、システイン、シスチン、チロシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒドロキシリジン、アルギニン、オルニチン、ヒスチジンなどや、それらの硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、あるいはピロリドンカルボン酸の如きアミノ酸誘導体などが挙げられる。
【００９６】
例えば、動物あるいは植物、生薬の抽出物やエキスとしては、アセンヤク（阿仙薬）、アシタバ、アセロラ、アルテア、アルニカ、アボカド、アマチャ（甘茶）、アロエ、アロエベラ、イラクサ、イチョウ（銀杏葉、銀杏）、ウイキョウ（茴香）、ウコン（鬱金）、ウスバサイシン（細辛）、ウメ（烏梅）、ウラジロガシ、ウワウルシ、ノイバラ（営実）、ヒキオコシ（延命草）、オウギ（黄耆）、コガネバナ（オウゴン）、ヤマザクラ（桜皮）、キハダ（黄柏）、オウレン（黄連）、オタネニンジン（人参）、オトギリソウ（弟切草）、オドリコソウ、オランダガラシ、オレンジ、イトヒメハギ（遠志）、ウツボグサ（夏枯草）、ツルドクダミ（何首烏）、エンジュ（槐花）、ヨモギ（ガイ葉）、ガジュツ（莪朮）、クズ（葛根）、カノコソウ（吉草根）、カミツレ、キカラスウリ（瓜呂根）、カワラヨモギ（茵チン蒿）、カンゾウ（甘草）、フキタンポポ（款冬花、款冬葉）、キイチゴ、キウイ果実、キキョウ（桔梗）、キク（菊花）、キササゲ（梓実）、ミカン属植物果実（枳実）、タチバナ(橘皮)、キュウリ、ウドまたはシシウド（羌活、独活）、アンズ（杏仁）、クコ（地骨皮、枸杞子、枸杞葉）、クララ（苦参）、クスノキ、クマザサ、グレープフルーツ果実、ニッケイ（桂皮）、ケイガイ（ケイガイ）、エビスグサ（決明子）、マルバアサガオまたはアサガオ（ケン牛子）、ベニバナ（紅花）、ゴバイシ（五倍子）、コンフリー、コパイバ、クチナシ（山梔子）、ゲンチアナ、ホオノキ（厚朴）、ヒナタイノコズチ（牛膝）、ゴシュユ（呉茱萸）、ゴボウ、チョウセンゴミシ（五味子）、米、米ぬか、コムギ、ミシマサイコ（柴胡）、サフラン、サボンソウ、サンザシ（山ザ子）、サンショウ（山椒）、サルビア、サンシチニンジン（三七人参）、シイタケ（椎茸）、ジオウ（地黄）、シクンシ（使君子）、ムラサキ(紫根)、シソ（紫蘇葉、紫蘇子）、カキ（柿蒂）、シャクヤク（芍薬）、オオバコ（車前子、車前草）、ショウガ（生姜）、ショウブ（菖蒲）、トウネズミモチ（女貞子）、シモツケソウ、シラカバ、スイカズラ（金銀花、忍冬）、セイヨウキヅタ、セイヨウノコギリソウ、セイヨウニワトコ、アズキ（赤小豆）、ニワトコ（接骨木）、ゼニアオイ、センキュウ（川キュウ）、センブリ（当薬）、クワ（桑白皮、桑葉）、ナツメ（大棗）、ダイズ、タラノキ、チクセツニンジン（竹節人参）、ハナスゲ（知母）、ワレモコウ（地楡）、ドクダミ（十薬）、フユムシナツクサタケ（冬虫夏草）、トウガラシ、ホオズキ（登呂根）、タチジャコウソウ、リョクチャ（緑茶）、コウチャ（紅茶）、チョウジ（丁子）、ウンシュウミカン（陳皮）、ツバキ、ツボクサ、トウガラシ（番椒）、トウキ（当帰）、トウキンセンカ、ダイダイ（橙皮）、ワレモコウ（地楡）、トウモロコシ（南蛮毛）、トチュウ（杜仲、杜仲葉）、トマト、ナンテン（南天実）、ニンニク（大サン）、オオムギ（麦芽）、ハクセン（白蘚皮）、ジャノヒゲ（麦門冬）、パセリ、バタタ、ハッカ（薄荷）、ハマメリス、バラ、ビワ葉（枇杷葉）、マツホド（茯リョウ）、ブドウまたはその葉、ヘチマ、ボダイジュ、ボタン（牡丹皮）、ホップ、マイカイ（マイ瑰花）、松葉、マロニエ、マンネンロウ、ムクロジ、メリッサ、メリロート、ボケ（木瓜）、モヤシ、モモ（桃仁、桃葉）、ヒオウギ（射干）、ビンロウジュ（檳ロウ子）、メハジキ（益母草）、ヤグルマギク、ユキノシタ（虎耳草）、ヤマモモ（楊梅皮）、ヤシャブシ（矢車）、ハトムギ（ヨクイニン）、モウコヨモギ、ヤマヨモギ、ラベンダー、リンゴ果実、マンネンタケ（霊芝）、レモン果実、レンギョウ（連翹）、レンゲソウ、ゲンノショウコ（老鸛草）、ハシリドコロ（ロート根）、鶏トサカ、牛・人の胎盤抽出物、豚・牛の胃、十二指腸、或いは腸の抽出物若しくはその分解物、水溶性コラーゲン、水溶性コラーゲン誘導体、コラーゲン加水分解物、エラスチン、エラスチン加水分解物、水溶性エラスチン誘導体、シルク蛋白、シルク蛋白分解物、牛血球蛋白分解物などが挙げられる。
【００９７】
例えば、微生物培養代謝物としては、酵母エキス、亜鉛含有酵母エキス、ゲルマニウム含有酵母エキス、セレン含有酵母エキス、マグネシウム含有酵母エキス、米醗酵エキス、ユーグレナ抽出物、脱脂粉乳の乳酸発酵物などが挙げられる。
【００９８】
例えば、α−ヒドロキシ酸としては、グリコール酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、乳酸などが挙げられる。
【００９９】
例えば、無機顔料としては、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、タルク、カオリン、ベントナイト、マイカ、雲母チタン、オキシ塩化ビスマス、酸化ジルコニウム、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、酸化チタン、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、黄酸化鉄、ベンガラ、黒酸化鉄、グンジョウ、酸化クロム、水酸化クロム、カーボンブラック、カラミンなどが挙げられる。
【０１００】
例えば、収斂剤としては、乳酸、酒石酸、コハク酸、クエン酸、アラントイン、塩化亜鉛、硫酸亜鉛、酸化亜鉛、カラミン、ｐ−フェノールスルホン酸亜鉛、硫酸アルミニウムカリウム、レソルシン、塩化第二鉄、タンニン酸などが挙げられる。
【０１０１】
例えば、殺菌・消毒薬としては、アクリノール、イオウ、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化メチルロザニリン、クレゾール、グルコン酸カルシウム、グルコン酸クロルヘキシジン、スルファミン、マーキュロクロム、ラクトフェリンまたはその加水分解物などが挙げられる。
【０１０２】
例えば、頭髪用剤としては、二硫化セレン、臭化アルキルイソキノリニウム液、ジンクピリチオン、ビフェナミン、チアントール、カスタリチンキ、ショウキョウチンキ、トウガラシチンキ、塩酸キニーネ、強アンモニア水、臭素酸カリウム、臭素酸ナトリウム、チオグリコール酸などが挙げられる。
【０１０３】
例えば、香料としては、ジャコウ、シベット、カストリウム、アンバーグリスなどの天然動物性香料、アニス精油、アンゲリカ精油、イラン精油、イリス精油、ウイキョウ精油、オレンジ精油、カナンガ精油、カラウェー精油、カルダモン精油、グアヤクウッド精油、クミン精油、黒文字精油、ケイ皮精油、シンナモン精油、ゲラニウム精油、コパイババルサム精油、コリアンデル精油、シソ精油、シダーウッド精油、シトロネラ精油、ジャスミン精油、ジンジャーグラス精油、杉精油、スペアミント精油、西洋ハッカ精油、大茴香精油、チュベローズ精油、丁字精油、橙花精油、冬緑精油、トルーバルサム精油、バチュリー精油、バラ精油、パルマローザ精油、檜精油、ヒバ精油、白檀精油、プチグレン精油、ベイ精油、ベチバ精油、ベルガモット精油、ペルーバルサム精油、ボアドローズ精油、芳樟精油、マンダリン精油、ユーカリ精油、ライム精油、ラベンダー精油、リナロエ精油、レモングラス精油、レモン精油、ローズマリー精油、和種ハッカ精油などの植物性香料、その他合成香料などが挙げられる。
【０１０４】
例えば、色素・着色剤としては、赤キャベツ色素、赤米色素、アカネ色素、アナトー色素、イカスミ色素、ウコン色素、エンジュ色素、オキアミ色素、柿色素、カラメル、金、銀、クチナシ色素、コーン色素、タマネギ色素、タマリンド色素、スピルリナ色素、ソバ全草色素、チェリー色素、海苔色素、ハイビスカス色素、ブドウ果汁色素、マリーゴールド色素、紫イモ色素、紫ヤマイモ色素、ラック色素、ルチンなどが挙げられる。
【０１０５】
例えば、甘味料としては、砂糖、甘茶、果糖、アラビノース、ガラクトース、キシロース、マンノース、麦芽糖、蜂蜜、ブドウ糖、ミラクリン、モネリンなどが挙げられる。
【０１０６】
例えば、栄養強化剤としては、貝殻焼成カルシウム、シアノコラバミン、酵母、小麦胚芽、大豆胚芽、卵黄粉末、ヘミセルロース、ヘム鉄などが挙げられる。
【０１０７】
その他、ホルモン類、金属イオン封鎖剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐・防バイ剤、清涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質およびその分解物、動・植物性多糖類およびその分解物、動・植物性糖蛋白質およびその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗アレルギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、増泡剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調味料、酵素などが挙げられる。
【０１０８】
〔抗老化方法〕
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を用いることにより、抗老化方法を提供することができる。すなわち、本発明には、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を用いる抗老化方法が含まれる。
【０１０９】
本発明に係る抗老化方法は、（ｉ）バイオサーファクタントを動物に接触させる工程を含むことを特徴としている。バイオサーファクタントとしては、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）のトリアシル体およびマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）のトリアシル体からなる群より選択された少なくとも１種であることが好ましい。
【０１１０】
動物としては、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の抗老化効果が期待できる限り特に限定されないが、哺乳動物が好ましく、ヒトが特に好ましい。
【０１１１】
「動物に接触させる」とは、動物の皮膚、粘膜など、外用剤が適用される範囲にバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を接触させることが意図される。
【０１１２】
本発明に係る抗老化方法は、さらに（ｉｉ）バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物で細胞を賦活させる工程を含むことを特徴としている。細胞賦活作用を有するバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物で細胞を賦活させることにより、例えば、皮膚のしわ、たるみ、硬化等を防止、改善して弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することなどの抗老化効果を発揮することが可能となる。
【０１１３】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、保湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などが必要とされる場合に広く使用することができる。使用量は、所期の湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などを十分に奏する範囲内で決定する。
【０１１４】
本発明にかかる化粧品組成物は、前記のような効果を期待して用いるものであるから、化粧品組成物や化粧品として利用されることは勿論であるが、そのほかにも、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物、機能性食品組成物や、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品などの形態やプレミックス品などの形態で利用することができる。
【０１１５】
なお、発明を実施するための最良の形態の項においてなした具体的な実施態様および以下の実施例は、あくまでも、本発明の技術内容を明らかにするものであって、そのような具体例にのみ限定して狭義に解釈されるべきものではなく、当業者は、本発明の精神および添付の特許請求の範囲内で変更して実施することができる。
【実施例】
【０１１６】
以下の実施例により、本発明を更に詳細に説明するが、本発明は、これらに何ら限定されるものではない。
（肌荒れ改善作用評価方法）
テストスキン（東洋紡績株式会社製）ＬＳＥ−００２または００３キット付属の取り扱い説明の要領に沿って組織を取り出す。薬剤暴露部位を確保するリングをＬＳＥ組織表面に接着させ、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）１%水溶液をリング内に添加し５分間室温で静置する。その後、ＳＤＳをアスピレーターで除去し、アッセイ培地３ｍｌをピペットで吹きかけ洗浄した。この操作にて、角層の保湿成分が溶出し、乾燥肌が作成された。
【０１１７】
次に、被験物溶液を各７０μｌマイクロピペットにてＬＳＥ（Living Skin Equivalent)組織表面に添加した。続いて温度３７℃、相対湿度１５%ＲＨから２０％RHに調整したCO２インキュベーターにＬＳＥ組織をアッセイ培地が入っているアッセイトレイに乗せて状態で入れ、２４時間インキュベートした。その後、ＬＳＥ組織をＣＯ２インキュベーターより取り出し、ＬＳＥ−００２キット付属の取り扱い説明の要領に沿って、テトラゾリウム塩（ＭＴＴ）試薬０．３３３ｇ／ｍｌが含まれるアッセイ培地の混合液０．６ｍｌをアッセイトレイに入れ、温度３７℃、相対湿度１５%ＲＨから２０％RHに調整したCO２インキュベーター内で３時間インキュベートした。
【０１１８】
ＭＴＴ処理後、ＬＳＥ組織中央部を８ｍｍφのバイオプシーパンチを用いてポリカーボネートの膜ごとくり抜き、切片を小試験管に移し、０．０４Ｎ塩酸−イソプロパノールを７００μｌ加え、暗所にて２時間抽出した。抽出終了後、攪拌し、十分混和後、抽出された青紫色のホルマザンの５６２ｎｍの吸光度を測定した。この方法により得られる吸光度と肌荒れ改善効果とは密接な関係があり、ヒトの肌荒れの状態評価を定量的、簡易的、且つ経済的に実施できる有効な肌荒れ改善評価方法である。
【０１１９】
実施例１ ＭＥＬ−ＡおよびトリアシルＭＥＬ−Ａの製造
種菌培養はPseudozyma antarcticaNBRC 10736を種培地(20ml/500ml坂口フラスコ)に1 loop植菌して実施した。30℃にて一晩培養した。得られた培養液を種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO3、0.02% MgSO4・H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養は上記種菌75mlを生産培地1.5L（５L-jar）に植菌し、30℃、300rpm（攪拌回転）、0.5L/min0（Air）の条件で5L-jarを用いて培養した。生産培地組成は、3% ダイズ油、0.02% MgSO4・H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養液250mlを遠心（6500rpm、30min）し、上清を取り除き、沈殿（菌体）を回収した。沈殿に、50mlの酢酸エチルを加え、十分攪拌後、遠心(8500rpm、30min)し、沈殿と上清に分け、上清をエバポーレーターで濃縮した。シリカゲルを用いて、ヘキサン：アセトン＝５：１、ヘキサン：アセトン＝１：２で溶出しＭＥＬ画分（MEL-A、MEL-B、MEL-C）およびトリアシルＭＥＬ−Ａ画分を得た。
【０１２０】
実施例２ ＭＥＬ−ＢおよびトリアシルＭＥＬ−Ｂの製造
0.2mlのP.tsukubaensisフローズンストックを20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（MEL-Bを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしMEL-B粗精製品を得た。得られたMEL-B粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−ＢおよびトリアシルＭＥＬ−Ｂ画分精製品を得た。
【０１２１】
実施例３ ＭＥＬ−ＣおよびトリアシルＭＥＬ−Ｃの製造
0.2mlのP.hubeiensisフローズンストックを20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（MEL-Cを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしMEL-B粗精製品を得た。得られたMEL-C粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−ＣおよびトリアシルＭＥＬ−Ｃ画分精製品を得た。
【０１２２】
実施例４
実施例１におけるMELの製造では、生産原料にダイズ油を用いたが、その代わりにオリーブ油を用いて実施例１と同様の方法で培養しMEL-A、MEL-B、MEL-Cを単離精製する。この時得られるMEL画分を、実施例１のMELと区別するためMEL-A(OL)、MEL-B(OL)、MEL-C(OL)と呼ぶ。
【０１２３】
実施例５ マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）の製造
シュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozyma parantarctica）JCM 11752株の培養を行った。すなわち、保存培地（麦芽エキス３ｇ／Ｌ、酵母エキス３ｇ／Ｌ、ペプトン５ｇ／Ｌグルコース１０ｇ／Ｌ、寒天３０ｇ／Ｌ）に保存しておいたシュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozyma parantarctica）JCM 11752株を、グルコース２０ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム ０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地２ｍＬが入った試験管に１白金耳接種し、３０℃で１日間振とう培養を行った。続いて、得られた菌体培養液を、植物油脂としてオリーブ油５０ｇ／Ｌ、糖アルコールとしてマンニトール１００ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地３０ｍＬの入った坂口フラスコに接種して、３４℃で７日間培養を行った。上記の培養液を採取し、培養液中のマンノシルアルジトールリピッドを酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトで精製後、13C NMR と1H NMRで生産物の構造解析を行った
【０１２４】
実施例６ マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてアラビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＡｒａＬを製造した。
【０１２５】
実施例７ マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてソルビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＳＬを製造した。
【０１２６】
実施例８ マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてリビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＲＬを製造した。
【０１２７】
実施例９：紫外線吸収剤を含むＭＥＬ−Ａ美容液の製造
以下に示す組成の美容液を常法により製造した。コントロールとして、ＭＥＬ−Ａを含まない美容液も常法により製造した。
（組成） （重量％）
油層成分：ステアリン酸 ３．０
スクワラン ５．０
オリーブ油 ５．０
ＭＥＬ−Ａ ５．０
乳化剤：ＰＯＥソルビタンモノラウレート ５．０
ソルビタンモノステアレート ５．０
アルカリ：トリエタノールアミン １．０
紫外線吸収剤：パラアミノ安息香酸オクチル ４．０
水相成分：プロピレングリコール ５．０
精製水 全体で１００となる量
【０１２８】
実施例１０：紫外線吸収剤、保湿剤を含むＭＥＬ−Ａ美容液の製造
以下に示す組成の美容液を常法により製造した。コントロールとして、ＭＥＬ−Ａを含まない美容液も常法により製造した。
（組成） （重量％）
油層成分：ステアリン酸 ３．０
スクワラン ５．０
オリーブ油 ５．０
ＭＥＬ−Ａ ５．０
乳化剤：ＰＯＥソルビタンモノラウレート ５．０
ソルビタンモノステアレート ５．０
アルカリ：トリエタノールアミン １．０
紫外線吸収剤：パラアミノ安息香酸オクチル ４．０
紫外線吸収剤：パラアミノ安息香酸オクチル ４．０
水相成分：プロピレングリコール ５．０
精製水 全体で１００となる量
【０１２９】
実施例１１ ＭＥＬ−Ｂ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＥＬ−Ｂを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＥＬ−Ｂ美容液を製造した。
【０１３０】
実施例１２ ＭＥＬ−Ｃ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＥＬ−Ｃを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＥＬ−Ｃ美容液を製造した。
【０１３１】
実施例１３ ＭＭＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＭＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＭＬ美容液を製造した。
【０１３２】
実施例１４ ＭＡｒａＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＡｒａＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＡｒａＬ美容液を製造した。
【０１３３】
実施例１５ ＭＳＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＳＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＳＬ美容液を製造した。
【０１３４】
実施例１６ ＭＲＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＲＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＲＬ美容液を製造した。
【０１３５】
実施例１７ トリアシルＭＥＬ−Ａ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにトリアシルＭＥＬ−Ａを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でトリアシルＭＥＬ−Ａ美容液を製造した。
【０１３６】
実施例１８ トリアシルＭＥＬ−Ｂ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにトリアシルＭＥＬ−Ｂを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でトリアシルＭＥＬ−Ｂ美容液を製造した。
【０１３７】
実施例１９ トリアシルＭＥＬ−Ｃ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにトリアシルＭＥＬ−Ｃを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でトリアシルＭＥＬ−Ｃ美容液を製造した。
【０１３８】
比較例１
実施例９〜１０に示した組成で作成したＭＥＬを含まない美容液を用いて、５名のパネリストが、これを使用したときの、のび、つき、しっとり感、かさつきにくさについて評価し、次の基準に従って判定した。結果を表１に示す。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１３９】
【表１】
【０１４０】
実施例２０
実施例９〜１０に示した組成の美容液を用いて、５名のパネリストが、これを使用したときの、のび、つき、しっとり感、かさつきにくさについて評価し、次の基準に従って判定した。結果を表２に示す。なお、いずれの場合も、紫外線吸収効果は良好と評価された。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１４１】
【表２】
【０１４２】
実施例２１
実施例１１〜１９に示した組成の美容液を用いて、５名のパネリストが、これを使用したときの、のび、つき、しっとり感、かさつきにくさについて評価し、次の基準に従って判定した。結果を表３〜表１１に示す。なお、いずれの場合も、紫外線吸収効果は良好と評価された。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１４３】
【表３】
【０１４４】
【表４】
【０１４５】
【表５】
【０１４６】
【表６】
【０１４７】
【表７】
【０１４８】
【表８】
【０１４９】
【表９】
【０１５０】
【表１０】
【０１５１】
【表１１】
【０１５２】
表１から表１１で明らかなように、本発明品はのび、つき、しっとり感、かさつきにくさのいずれも良好であった。
【０１５３】
実施例２４
実施例９〜１０に示したＭＥＬを含む組成の美容液の５名のパネリストがこれを使用したときの紫外線吸収効果について、実施例９〜１０に示した組成で作成したＭＥＬを含まない美容液を比較例として、評価した。表１２で明らかなように、本発明品は紫外線吸収効果は良好と評価された。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１５４】
【表１２】
【産業上の利用可能性】
【０１５５】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物により、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などの効果を有する、化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することできる。また、本発明により、紫外線吸収剤を含有する皮膚外用剤において、刺激性の少ない皮膚外用剤を提供することができ、さらに従来より、原料コストが安価であり、大量生産可能となり、長期にわたる使用に十分に耐え得ることからも、産業界に大きく寄与することが期待される。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオサーファクタントを有効成分とする化粧品組成物に関するものであり、当該化粧品組成物が保湿剤、コラーゲン生成促進剤、細胞賦活剤、抗老化剤、紫外線吸収剤及び肌荒れ改善剤としての作用を有し、特に、老化防止や発毛・脱毛防止に有効なバイオサーファクタントを含有する化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に関するものである。より詳しくは、バイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）あるいはエリスリトール以外のアルジトールを含むマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）であることを特徴とする化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
個体老化やこれに伴って発生する各種の疾患などは、分裂するすべての細胞の老化（分裂速度の低下、細胞機能の低下）と深く関わっている。例えば皮膚は、表皮細胞、繊維芽細胞、およびこれら細胞外の皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の細胞外マトリックスによって構成されている。若い皮膚においては、これらの皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことによって水分保持、柔軟性、弾力性が確保され、肌は外観的にも張りと艶があり、みずみずしい状態に維持される。ところが、加齢や紫外線、乾燥、ストレスなどによって特に細胞外マトリックスや繊維芽細胞の機能低下が引き起こされ、その結果、皮膚の柔軟性、保湿機能は低下し、肌は張りや艶を失い、荒れ、しわ、くすみなどの老化症状が発生する。
【０００３】
細胞レベルで老化防止や抑制を目的に賦活化剤、抗老化剤の探索が行われている。例えば動物由来の賦活化剤としては、結合組織加水分解物（特許文献１）、胸腺・脾臓由来水溶性蛋白（特許文献２）、牛胎盤エキス（特許文献３）などが知られている。植物由来の賦活化剤としては、ゴマ、サンヤク、トウガラシ、トウキ、ドクダミ、バクモンドウ（特許文献４）、アーモンド、セイヨウタンポポ、セイヨウニワトコ、センキュウ、センブリ、ソウハクヒ、トウニン、ニンジン、ホップ、ムクゲ、ヨクイニン（特許文献５、特許文献６）、ショウガ科ウコン属（特許文献７）、ハナヤスリ科ハナヤスリ属（特許文献８）の抽出物などが知られている。これらの一部は賦活化剤、抗老化剤として医薬部外品や化粧品に利用されているが、満足すべき作用効果を発揮する賦活化剤や抗老化剤は得られていない。
【０００４】
また、肌荒れを予防または治癒する検討もなされている。荒れ肌とは、一般に角質細胞の剥離現象が認められる乾燥状態の皮膚をいう。このような荒れ肌はコレステロール、セラミド、脂肪酸等の角質細胞間脂質の溶出、および紫外線、洗剤等に起因する角質細胞の変性や表皮細胞の増殖・角化バランスの崩壊による角層透過バリアの形成不全等によって発生する。この荒れ肌を予防または治癒する目的で、角質細胞間脂質成分又はそれに類似する合成の角質細胞間脂質を供給するなどの検討が行われている。
【０００５】
この角層細胞間脂質は、有棘層と顆粒層の細胞で生合成された層板顆粒が、角層直下で細胞間に放出され、伸展し、層板（ラメラ）構造をとり、細胞間に広がったものである。層板顆粒はグルコシルセラミド、コレステロール、セラミド、リン脂質等から構成されるが、角層細胞間脂質にはグルコシルセラミドは殆ど含まれていない。すなわち、層板顆粒中のグルコシルセラミドは、β−グルコセレブロシダーゼによって加水分解を受け、セラミドに変換され、このセラミドがラメラ構造をとる結果、角層細胞間脂質として角層透過バリアの形成を改善し、荒れ肌防御のバリアの働きを持つと考えられる。洗浄剤による肌荒れはセラミドの補充が有効であり、肌荒れの改善に高い効果を示すことが報告されている（非特許文献１）。
【０００６】
しかし、グルコシルセラミドが主成分である植物抽出液は、セラミドの代替としては未だ満足のいく結果は得られていないし、セラミドの合成も反応ステップが多く大量に得るにはコスト高になる。
【０００７】
マンノシルエリスリトールリピッド(ＭＥＬ)は酵母が作る天然系の界面活性剤であり種々の生理作用が報告されている（非特許文献１）。また最近ではエリスリトールがマンニトールに代わったマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）が見出されている（特許文献９）。外用剤や化粧品としての用途としては、抗炎症剤および抗アレルギー剤（特許文献１０）、養毛・育毛剤（特許文献１１）としての有用性や、抗菌作用（特許文献１２）や表面張力低下作用（特許文献１３）が知られている。また、MELがセラミドの代替として作用し、肌荒れを改善する効果（特許文献１４）も報告されている。
【０００８】
しかし、ＭＥＬを紫外線吸収剤と共存することにより、その効果が向上することは報告されていなかった。
【特許文献１】特開昭６２−８４０２４号公報
【特許文献２】特開昭６３−１８８６９７号公報
【特許文献３】特開平０３−１４１２９９号公報
【特許文献４】特開平１０−４５６１５号公報
【特許文献５】特開平１０−０３６２７９号公報
【特許文献６】特開平１０−３６２７９号公報
【特許文献７】特開２００４−７５６３２号公報
【特許文献８】特開２００５−８９３７５号公報
【特許文献９】特開２００５−１０４８３７号公報
【特許文献１０】特開２００５−６８０１５号公報
【特許文献１１】特開２００３−２６１４２４号公報
【特許文献１２】特開昭５７−１４５８９６号公報
【特許文献１３】特開昭６１−２０５４５０号公報
【特許文献１４】ＷＯ２００７／０６０９５６
【非特許文献１】ジャーナル オブ バイオサイエンス アンド バイオエンジニアリング、９４，１８７（２００２）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
哺乳類、特にヒトに対して賦活化や抗老化を付与することは極めて重要な課題であり、動物由来、植物由来の賦活物質や抗老化剤は各種見つかっているが、実際には産業上利用可能な程度に十分かつ安定した効果は得られておらず、新規な賦活化剤や抗老化剤が探索されているのが現状である。また、セラミドは肌荒れに有用な成分として化粧品に使用されているが、合成品あるいは植物抽出品は高価であり、少量しか使用できないのが現状である。
【００１０】
本発明は、上記問題点を改善した、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などを有するバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を提供することにある。言い換えれば、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を含む保湿剤、コラーゲン生成促進剤、細胞賦活剤、抗老化剤、育毛剤及び肌荒れ改善剤などを提供することにある。さらに、当該化粧品組成物を含む化粧品組成物、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物や、当該組成物を含む化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することである。
【００１１】
さらに、本発明は、紫外線吸収剤を含有する皮膚外用剤において、刺激の少ない皮膚外用剤を求めて鋭意研究努力を重ねた結果紫外線吸収剤と共に含有する界面活性剤としてバイオサーファクタントを用いることにより、紫外線吸収剤の皮膚浸透性が向上しその効果が高まると共に刺激を少なくできるという特性が発揮できることを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、以下に示す技術に関するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは上記の目的を達成すべく鋭意努力した結果、バイオサーファクタント、特にＭＥＬ、エリスリトール以外のアルジトールを含むＭＡＬ（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）、トリアシルＭＥＬおよびトリアシルＭＡＬを含む化粧品組成物が有効であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、以下の発明を包含する。
【００１３】
１．バイオサーファクタントと紫外線吸収剤を少なくとも含有することを特徴とする化粧品組成物。
２．バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする１に記載の化粧品組成物。
３．バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする１または２に記載の化粧品組成物。
４．マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）、マンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）及び／又はマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする３に記載の化粧品組成物。
５．MELが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（MEL−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（MEL−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（MEL−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（MEL−Ｄ）、MEL−Ａのトリアシル体、MEL−Ｂのトリアシル体、MEL−Ｃのトリアシル体及びMEL−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする４に記載の化粧品組成物。
６．バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸を含有していることを特徴とする１〜５のいずれかに記載の化粧品組成物。
７．バイオサーファクタントが、ラメラ構造及び／又はリポソームを形成していることを特徴とする１〜６のいずれかに記載の化粧品組成物。
８．バイオサーファクタントが形成するラメラ構造及び／又はリポソームの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする７に記載の化粧品組成物。
９．紫外線吸収剤が、安息香酸系紫外線吸収剤 、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤、トリアジン系紫外線吸収剤及びベンゾフェノン系紫外線吸収剤からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする１〜８のいずれかに記載の化粧品組成物。
１０．さらに、抗菌剤を含有することを特徴とする１〜９のいずれかに記載の化粧品組成物。
１１．抗菌剤が有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であることを特徴とする１０に記載の化粧品組成物。
１２．化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである１〜１１のいずれかに記載の化粧品組成物。
【発明の効果】
【００１４】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物により、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などの効果を有する、化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することできる。特に、本発明によれば、紫外線吸収剤を含有する皮膚外用剤において、刺激性の少ない皮膚外用剤を提供することができる。
また、バイオサーファクタントは生物由来の天然界面活性剤であるため安全性に優れており、本発明に係る化粧品組成物は長期にわたる使用に十分に耐え得るという効果を奏する。さらに、バイオサーファクタントは、微生物の培養により製造できるため原料コストが安価であり、大量生産可能である。したがって、本発明係る化粧品組成物は低価格で提供できるという効果を奏する。バイオサーファクタントは、プレミックス品として使用してもよい。
【００１５】
バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、洗浄性と、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などを併せ持つので、洗浄用化粧料の配合成分としても有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
（賦活化剤）
本明細書において「賦活化」とは、細胞機能や細胞活性を維持または亢進させることが意図される。その結果、細胞機能や細胞活性の低下を抑制、すなわち細胞の老化を抑制することができる。したがって、「賦活化剤」は「細胞賦活剤」と同義であり、「抗老化剤」としての有用性を持つ。
【００１７】
例えば、皮膚細胞における「賦活化、抗老化」とは、加齢や光老化による基低膜の構造変化の蓄積に伴う皮膚細胞の機能低下を小さくすることで、皮膚のしわ、たるみ、硬化等を防止、改善して弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することなどを指している。また、例えば、毛乳頭細胞または毛母細胞においては、加齢、ストレス、ホルモンバランスによる毛乳頭細胞または毛母細胞の機能低下を小さくすることで、ヘアサイクルを維持して脱毛を抑えることなどを指している。
【００１８】
（バイオサーファクタント）
「バイオサーファクタント」とは生物によって生み出される界面活性能力や乳化能力を有する物質の総称であり、優れた界面活性や、高い生分解性を示すばかりでなく、様々な生理作用を有していることから合成界面活性剤とは異なる挙動・機能を発現する可能性がある。なお、バイオサーファクタントは微生物の培養により大量に製造可能であり、プレミックス品として使用してもよい。
【００１９】
「プレミックス品」とは機能性の素材の他に、分散剤などを添加したり、溶媒で化粧品製造時に使いやすいように希釈したりしたものである。
【００２０】
バイオサーファクタントとしては、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）、トレハロースリピッド、ラムノリピッド、ソホロリピッド、サーファクチン、スピクルスポル酸、エマルザンなどが挙げられ、いずれも本発明に係る賦活化剤に使用できる。なかでも、ラメラ構造を形成するバイオサーファクタントを利用するのが好ましく、ＭＥＬ、ＭＡＬが特に好ましい。
【００２１】
（MEL)
ＭＥＬは、マンノースの４位および６位のアセチル基の有無からＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−ＣおよびＭＥＬ−Ｄの４種類が知られている。式（I）にＭＥＬ−Ａの構造を示す。式（I）中、Ｒ１およびＲ２は炭化水素基を示す。すなわち、ＭＥＬ−Ａは、式（I）中、マンノースの２位、３位に炭素数５〜１９のアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位にアセチル基を有する化合物である。なお、ＭＥＬ−Ｂは式（I）においてマンノースの４位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｃは式（I）においてマンノースの６位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｄは式（I）においてマンノースの４位および６位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がいずれもＨである。
【００２２】
【化１】
【００２３】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数１〜１６、より好ましくは炭素数１〜１４の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。ｎは6〜10の整数、ｍは6〜10の整数を各々表す。〕
【００２４】
式（I）に対応させれば、ＭＥＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。
【００２５】
R1、R2の好ましい基としては、CH3(CH2)6、CH3(CH2)8、CH3(CH2)10などのC7〜C11のアルキル基が挙げられる。R1、R2がC7〜C11のアルキル基である式(I)または(IA)のＭＥＬ−Ａは、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの飽和またはモノ不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。同様に、R1、R2がアルケニル基、アルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基である式(I)のMEL-Aは、原料として二重結合を２個以上有するリノール酸、リノレン酸、アラキドン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの高度不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。R1、R2で表される好ましいアルカノイル基は、C7H14、C9H18、C11H22などのC7〜C11のアルケニル基が挙げられる。R1、R2で表される好ましいアルカジエニル基は、C7H12、C9H16、C11H20などのC7〜C11のアルカジエニル基が挙げられる。R1、R2で表される好ましいアルカトリエニル基は、C7H10、C9H14、C11H18などのC7〜C11のアルカトリエニル基が挙げられる。
【００２６】
（MML)
MMLの構造は式(II)に示し、好ましいMMLは式(IIA) に示す（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。式（II）に対応させれば、ＭＭＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。
【００２７】
【化２】
【００２８】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数１〜１６、より好ましくは炭素数１〜１４の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。ｎは6〜10の整数、ｍは6〜10の整数を各々表す。〕
【００２９】
（ＭＡＬ)
ＭＡＬの構造は式(III)に示す（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。式（III）に対応させれば、ＭＡＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。
【００３０】
【化３】
【００３１】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数１〜１６、より好ましくは炭素数１〜１４の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。ｎは6〜10の整数、ｍは6〜10の整数を各々表す。〕
【００３２】
（トリアシル体）
本発明に係る賦活化剤に用いられるバイオサーファクタントは、ＭＥＬのトリアシル体およびＭＭＬのトリアシル体でもよい。トリアシル体のバイオサーファクタントは、ＭＥＬやＭＭＬよりもさらに高い疎水性を有する新規構造のバイオサーファクタントである。例えば、ＭＥＬ生産菌の培養液以外から大量に得る時は、酵素を用いてＭＥＬを種々の植物油と反応することによって製造することができる。
【００３３】
ＭＥＬのトリアシル体、すなわちトリアシルマンノシルエリスリトールリピッド（トリアシルＭＥＬと称することがある）は、式（IV）のような構造を示す。
【００３４】
【化４】
【００３５】
式（IV）中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立して炭化水素基または酸素原子含有炭化水素基を示し、マンノースの４位および６位の水酸基のいずれか一方、あるいは両方の水素原子がアセチル基に置換されていてもよい。炭化水素基は飽和結合のみを有していてもよく、不飽和結合を有していてもよい。不飽和結合を有している場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。また、酸素原子含有炭化水素基の場合、含まれる酸素原子の数および位置は限定されない。
【００３６】
式（IV）中、Ｒ１、Ｒ２は炭素数が６〜２０であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてマンノースの２位および３位の水酸基とエステル結合をしており、残りの水酸基にはアセチル基がエステル結合していてもよい。Ｒ３は炭素数が６〜２０であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてエリスリトールの一級水酸基とエステル結合をしている。
【００３７】
トリアシルＭＥＬは脂肪酸エステルが付加した構造であり高い疎水性を有することからエモリエント剤として従来のＭＥＬと比べても種々のオイル成分と馴染みやすい点で優れている。
【００３８】
これらのバイオサーファクタントは、単独で使用してもよいが、２種以上のバイオサーファクタントを併用することもできる。
【００３９】
（バイオサーファクタントの製造方法）
バイオサーファクタントの製造方法は特に制限されるものはないが、微生物を用いた発酵方法を任意に選択して行えば良い。例えばMEL (MEL-A, MEL-B, MEL-C)の培養生産は常法に従って、Pseudozymaantarctica NBRC 10736により生産することができ、微生物としてはPseudozyma antarctica、Pseudozyma sp.、等を用いることができる。いずれの微生物でも容易にＭＥＬ混合物が得られることは周知の事実である。ＭＥＬ混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃを単離することが出来る。また、ＭＥＬ−Ｂを生産する菌としては、Pseudozyma antarctica 、およびPseudozyma tsukubaensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬ−Ｃを生産する菌としては、Pseudozyma hubeiensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬを生産する能力を有する微生物としては特に限定するものではなく、目的に応じて適宜使用することができる。
【００４０】
バイオサーファクタントを生産するときの発酵培地は、酵母エキス、ペプトン等のＮ源、グルコース、フルクトース等のＣ源、および硝酸ナトリウム、リン酸水素二カリウム、硫酸マグネシウム７水塩等の無機塩類からなる一般的な組成の培地を用いることができ、これにオリーブ油、ダイズ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油、キャノーラ油、ココナッツ油等の油脂類、並びに、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独或いは２種以上を添加したものを使用することができる。
【００４１】
ｐＨや温度等の発酵条件や培養時間等は任意に設定でき、発酵後の培養液をそのまま本発明のバイオサーファクタントとして使用することが可能である。また、発酵後の培養液を必要に応じて濾過、遠心分離、抽出、精製、滅菌等の任意の操作を適宜加えることも可能であり、得られたエキスを希釈、濃縮、乾燥することもできる。
【００４２】
原料とする油脂類としては植物油脂が好ましい。植物油脂は特に限定されず、目的に応じて適宜選定することができる。例えば、大豆油、菜種油、コーン油、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、パーム油などが挙げられ、これらの中でも、大豆油、オリーブ油がバイオサーファクタント（特にＭＥＬ）の生産効率（生産量、生産速度、および収率）を向上させることができる点で特に好ましい。これらは、１種を単独で、または２種以上を併用しても構わない。
【００４３】
無機窒素源としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選定することができるが、例えば、硝酸アンモニウム、尿素、硝酸ナトリウム、塩化アンモニウム、硫安等が挙げられる。
【００４４】
バイオサーファクタントの回収、精製方法には特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。例えば、培養液を遠心分離して油分を回収し、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出濃縮することにより回収することができる。
【００４５】
抽出溶媒としては、水、アルコール類（例えば、メタノール、無水エタノール、エタノールなどの低級アルコール、またはプロピレングリコール、１，３-ブチレングリコール
などの多価アルコール）、アセトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、酢酸エチルなどのエステル類、キシレン、ベンゼン、クロロホルムなどの有機溶媒を、単独であるいは２種類以上の混液を任意に組み合わせて使用することができ、また、各々の溶媒抽出物が組み合わされたものでも使用することができる。
【００４６】
抽出方法は特に制限されるものはないが、通常、常温から常圧下での溶媒の沸点の範囲であればよく、抽出後は濾過またはイオン交換樹脂を用い、吸着・脱色・精製して溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状とすればよい。多くの場合は、そのままの状態で利用できるが、必要であれば、その効力に影響のない範囲でさらに脱臭、脱色などの精製処理を加えてもよい。脱臭・脱色等の精製処理手段としては、活性炭カラムなどを用いればよく、抽出物質により一般的に適用される通常の手段を任意に選択して行えばよい。必要に応じて、シリカゲルカラムを用いて精製することにより、純度の高いバイオサーファクタントを得ることができる。
【００４７】
（トリアシル体製造方法）
バイオサーファクタントのトリアシル体を得る方法を、ＭＥＬのトリアシル体を製造する方法を例として説明するが、本発明に用いられるバイオサーファクタントのトリアシル体はトリアシルＭＥＬに限定されない。
【００４８】
例えば、トリアシルＭＥＬを得るためには、上記のようにして微生物を発酵して製造した培養液からトリアシルＭＥＬ画分を精製して得ることができる。また、大量に得るためには、ＭＥＬを有機溶媒に溶かし、植物油などの脂肪酸誘導体を添加、加水分解酵素の存在下でエステル化反応またはエステル交換反応を行う。
【００４９】
ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸は長鎖炭化水素の1価のカルボン酸であればよい。また、飽和脂肪酸であっても不飽和脂肪酸であってもよい。不飽和脂肪酸の場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。さらに、脂肪酸の誘導体である脂肪酸誘導体を本発明に使用してもよいし、脂肪酸と脂肪酸誘導体の混合物を本発明に使用してもよい。ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸または脂肪酸誘導体は、油類、高級脂肪酸、合成エステル由来であることが好ましい。
【００５０】
「油類」としては、植物油、動物油、鉱物油およびその硬化油であればよい。具体的には、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油およびその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンが挙げられる。好ましくはアボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、より好ましくはオリーブ油、大豆油である。
【００５１】
「高級脂肪酸」としては、例えばカプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などが挙げられる。好ましくはラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ウンデシレン酸、より好ましくはオレイン酸、リノール酸、ウンデシレン酸である。
【００５２】
「合成エステル」としては、例えば、カプロン酸メチル、カプリル酸メチル、カプリン酸メチル、ラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシン酸メチル、カプロン酸エチル、カプリル酸エチル、カプリン酸エチル、ラウリン酸エチル、ミリスチン酸エチル、パルミチン酸エチル、オレイン酸エチル、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、ステアリン酸エチル、ウンデシン酸エチル、カプロン酸ビニル、カプリル酸ビニル、カプリン酸ビニル、ラウリン酸ビニル、ミリスチン酸ビニル、パルミチン酸ビニル、オレイン酸ビニル、リノール酸ビニル、リノレン酸ビニル、ステアリン酸ビニル、ウンデシン酸ビニル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等が挙げられる。好ましくはラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシレン酸メチル、より好ましくはオレイン酸メチル、リノール酸メチル、ウンデシレン酸メチルである。
【００５３】
トリアシルＭＥＬは、上述のようにＭＥＬを有機溶媒に溶解して反応させることにより生産することができる。有機溶媒としては、ＭＥＬを可溶化できるものであれば限定されない。全部を可溶化できなくても一部を可溶化できるものであればよい。また、有機溶媒は複数の有機溶媒の混合物でもよい。具体的には、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、プロパノン、ブタノン、ペンタン−２−オン、１，２−エタンジオール、２，３−ブタンジオール、ジオキサン、アセトニトリル、２−メチル−ブタン−２−オール、第３級ブタノール、２−メチルプロパノール、４−ヒドロキシ−２−メチルペンタノン、テトラヒドロフラン、ヘキサン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ピリジン、メチルエチルケトンなどを挙げることができる。好ましくはアセトン、テトラヒドロフラン、第３級ブタノール、アセトニトリル、ジオキサン、より好ましくはアセトンである。
【００５４】
加水分解酵素としては、リパーゼ、プロテアーゼ、エステラーゼが挙げられる。これらの中から選択される少なくとも１種を用いることが好ましく、複数の加水分解酵素を用いてもよい。好ましくはリパーゼ、エステラーゼ、より好ましくはリパーゼである。
【００５５】
具体的には、例えば、ＭＥＬ生産微生物の培養液から精製したＭＥＬを有機溶媒（例えば、アセトン）に溶解し、これに市販のリパーゼ（例えば、ノボザイム４３５（ノボザイムズ社製）など）および植物油脂を添加する。
【００５６】
この製造方法の場合、反応温度は１０〜１００℃、好ましくは２０〜５０℃、より好ましくは２５〜４０℃で、１日〜７日間攪拌すればよい。また、反応液にモレキュラーシーブスを添加してもよい。この製造方法により、材料として添加したＭＥＬがほぼ定量的にトリアシル体となる。
【００５７】
トリアシルＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００５８】
（飽和側鎖有するＭＥＬの製造方法）
飽和側鎖有するＭＥＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料とする油脂類としては、オリーブ油、飽和脂肪酸あるいはそのエステル体、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
飽和側鎖有するＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００５９】
（ＭＭＬ等のＭＡＬの製造方法）
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトール等のアルジトールの単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００６０】
（リポソームを得る方法）
バイオサーファクタントは、油溶性基剤、或いは油溶性成分に溶解して化粧料に配合してもよく、リポソームの形態で化粧料、特に化粧水、保湿液などの水系の化粧料に好ましく配合される。リポソームに配合されたバイオサーファクタントは、皮膚細胞と融合して吸収性が向上するために好ましい。リポソームの調整法としては公知の調製法のいずれを採用してもよく、特に限定されないが、例えばエタノール注入法、バンガム法を例示することができる。
【００６１】
例えば、エタノール注入法によるＭＥＬ−Ｂリポソーム溶液の調製は次の通りに行えばよい。すなわち、ＭＥＬ−Ｂ１０ｍｇをエタノール０．５ｍｌに溶解し、あらかじめ70℃前後に温めておいた蒸留水１mLを加え、軽く振り混ぜた後、残存しているエタノールをロータリーエバポレーターで留去する。これを水浴型超音波装置(W-220R、本多電子株式会社)を用い約５分間超音波処理した後、蒸留水で１mlにメスアップすればよい。
【００６２】
例えば、バンガム法によるＭＥＬ−Ｂリポソーム溶液の調製は次の通りに行えばよい。すなわち、ＭＥＬ−Ｂ１０ｍｇをクロロホルム１ｍｌに溶解し、ロータリーエバポレーターで溶媒を留去し薄膜を作成すればよい。そこに蒸留水１ｍｌを加え水浴型超音波装置(W-220R、本多電子株式会社)を用い約５分間超音波処理すればよい。
【００６３】
（バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の製造方法）
化粧品組成物中のバイオサーファクタントの添加量は、バイオサーファクタントの有する作用を損なわない範囲で添加すれば良く、通常０．００１〜５０質量％が好ましく、０．１〜２０質量％がより好ましく、１〜１５質量％がさらに好ましく３〜１０質量％が特に好ましい。ここで、化粧品組成物に添加する前記バイオサーファクタントの使用形態は任意である。例えば、バイオサーファクタントを培養液からの抽出物のまま、あるいは精製した高純度品、もしくは水に懸濁し、あるいはエタノール等の有機溶媒に溶かした後使用してもよい。
【００６４】
（紫外線吸収剤）
紫外線吸収剤 としては、安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤 、トリアジン系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤などを使用しても良い。
【００６５】
例えば紫外線吸収剤 として、紫外線吸収剤が安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸オクチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸フェニル、サリチル酸オクチル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸２−エトキシエチル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ２−エチルヘキサン酸グリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸およびその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルフォン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、４−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−メトキシ−ジベンゾイルメタン、２、４、６−トリアニリノ−ｐ−（カルボ−２’−エチルヘキシル−１’−オキシ）−１、３、５−トリアジン、2-(2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、パラジメチルアミノ安息香酸2-エチルヘキシル、パラアミノ安息香酸エチル、トプチルメトキシジペンゾイルメタン、オキシベンゾン-1、グアイアズレンスルホン酸エチル、酸化亜鉛、シノキサート、アントラニル酸系紫外線吸収剤 としては、例えば、ホモメンチル−Ｎ− アセチルアントラニレートなどが例示される。
【００６６】
これらの紫外線吸収剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００６７】
（抗菌剤）
抗菌剤が、有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であってもよい。
【００６８】
例えば抗菌剤として、オウバク抽出液、ハロカルバン、クロロフェネシン、塩化リゾチーム、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、イソプロピルメチルフェノール、チモール、ヘキサクロロフェン、ベルベリン、チオキソロン、サリチル酸およびそれらの誘導体、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、パラクロルメタクレゾール、塩化ベンザルコニウム、フェノキシエタノール、イソプロピルメチルフェノール、石炭酸、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ヘキサクロロフェン、塩化クロルヘキシジン、トリクロロカルバニリド、感光素、ビス（２−ピリジルチオ−１−オキシド）亜鉛、チアントール、ヒノキチオール、トリクロサン、トリクロロヒドロキシジフェニルエーテル、クロルヘキシジングルコン酸塩、フェノキシエタノール、レゾルシン、アズレン、サリチル酸、ジンクピリチオン、モノニトログアヤコールナトリウム、ウイキョウエキス、サンショウエキス、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウム及びウンデシレン酸誘導体などが例示される。
【００６９】
これらの抗菌剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００７０】
（バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の利用方法）
バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の形態は特に制限されない。したがって、固体、液体、ペースト、ゼリー、粉末などのいずれの状態をとるものであってもよい。このような状態を形成するために、例えばゲル化剤を用いて固化したり、液体を用いて分散状態にしたりすることができる。また、溶媒を添加して溶液にしたり、噴霧乾燥して粉末状にしたりすることもできる。
【００７１】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、優れた保湿効果と肌荒れ防止効果を有しており、皮膚表面に適度な潤いを与え平滑性を保つことが確認されている。すなわち、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、皮膚の水分を長時間にわたって保持することができる。したがって、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、肌荒れ改善、角質改善または肌の保護が必要とされる場合に極めて効果的に使用することができる。
【００７２】
例えば、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は化粧品として使用することができる。例えば、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧品、染毛料、練香水、パウダー、パック、クレンジングクリーム、ひげそり用クリーム、びげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧品、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、養毛剤および育毛剤などとして使用することができる。また、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。
【００７３】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物には、使用目的に応じてバイオサーファクタント、紫外線吸収剤、抗菌剤以外のさまざまな成分をさらに添加させておくことができる。
【００７４】
例えば、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物においてバイオサーファクタントは疎水性が高いため、非イオン性の界面活性剤や低級アルコール、多価アルコール、あるいはオリーブ油、スクワラン、脂肪酸などの天然油脂に溶解して用いてもよい。
【００７５】
非イオン界面活性剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンセスキオレエート、ソルビタントリオレエート、ペンタ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン、テトラ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン等）；グリセリンポリグリセリン脂肪酸類（例えば、モノ綿実油脂肪酸グリセリン、モノエルカ酸グリセリン、セスキオレイン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリン、α，α’−オレイン酸ピログルタミン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリンリンゴ酸等）；プロピレングリコール脂肪酸エステル類（例えば、モノステアリン酸プロピレングリコール等）；硬化ヒマシ油誘導体；グリセリンアルキルエーテル等が挙げられる。
【００７６】
ＰＯＥ系の親水性非イオン界面活性剤としては、例えば、ＰＯＥ−ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンモノステアレート、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンテトラオレエート等）；ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート、ＰＯＥ−ソルビットモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビットペンタオレエート、ＰＯＥ−ソルビットモノステアレート等）；ＰＯＥ−グリセリン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−グリセリンモノステアレート、ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート、ＰＯＥ−グリセリントリイソステアレート等のＰＯＥ−モノオレエート等）；ＰＯＥ−脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ジステアレート、ＰＯＥ−モノジオレエート、ジステアリン酸エチレングリコール等）；ＰＯＥ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ−ラウリルエーテル、ＰＯＥ−オレイルエーテル、ＰＯＥ−ステアリルエーテル、ＰＯＥ−ベヘニルエーテル、ＰＯＥ−２−オクチルドデシルエーテル、ＰＯＥ−コレスタノールエーテル等）；プルロニック型類（例えば、プルロニック等）；ＰＯＥ・ＰＯＰ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ・ＰＯＰ−セチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−２−デシルテトラデシルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−モノブチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−水添ラノリン、ＰＯＥ・ＰＯＰ−グリセリンエーテル等）；テトラＰＯＥ・テトラＰＯＰ−エチレンジアミン縮合物類（例えば、テトロニック等）；ＰＯＥ−ヒマシ油硬化ヒマシ油誘導体（例えば、ＰＯＥ−ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油トリイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノピログルタミン酸モノイソステアリン酸ジエステル、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油マレイン酸等）；ＰＯＥ−ミツロウ・ラノリン誘導体（例えば、ＰＯＥ−ソルビットミツロウ等）；アルカノールアミド（例えば、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド、ラウリン酸モノエタノールアミド、脂肪酸イソプロパノールアミド等）；ＰＯＥ−プロピレングリコール脂肪酸エステル；ＰＯＥ−アルキルアミン；ＰＯＥ−脂肪酸アミド；ショ糖脂肪酸エステル；アルキルエトキシジメチルアミンオキシド；トリオレイルリン酸等が挙げられる。
【００７７】
低級アルコールとしては、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、イソブチルアルコール、ｔ−ブチルアルコール等が挙げられる。
【００７８】
多価アルコールとしては、例えば、２価のアルコール（例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、１，２−ブチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、テトラメチレングリコール、２，３−ブチレングリコール、ペンタメチレングリコール、２−ブテン−１，４−ジオール、ヘキシレングリコール、オクチレングリコール等）；３価のアルコール（例えば、グリセリン、トリメチロールプロパン等）；４価アルコール（例えば、１，２，６−ヘキサントリオール等のペンタエリスリトール等）；５価アルコール（例えば、キシリトール等）；６価アルコール（例えば、ソルビトール、マンニトール等）；多価アルコール重合体（例えば、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、トリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、テトラエチレングリコール、ジグリセリン、ポリエチレングリコール、トリグリセリン、テトラグリセリン、ポリグリセリン等）；２価のアルコールアルキルエーテル類（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノフェニルエーテル、エチレングリコールモノヘキシルエーテル、エチレングリコールモノ２−メチルヘキシルエーテル、エチレングリコールイソアミルエーテル、エチレングリコールベンジルエーテル、エチレングリコールイソプロピルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、エチレングリコールジブチルエーテル等）；２価アルコールアルキルエーテル類（例えば、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル、ジエチレングリコールブチルエーテル、ジエチレングリコールメチルエチルエーテル、トリエチレングリコールモノメチルエーテル、トリエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールイソプロピルエーテル、ジプロピレングリコールメチルエーテル、ジプロピレングリコールエチルエーテル、ジプロピレングリコールブチルエーテル等）；２価アルコールエーテルエステル（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノフェニルエーテルアセテート、エチレングリコールジアジベート、エチレングリコールジサクシネート、ジエチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、ジエチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノメチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノエチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノプロピルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノフェニルエーテルアセテート等）；グリセリンモノアルキルエーテル（例えば、キミルアルコール、セラキルアルコール、バチルアルコール等）；糖アルコール（例えば、ソルビトール、マルチトール、マルトトリオース、マンニトール、ショ糖、エリトリトール、グルコース、フルクトース、デンプン分解糖、マルトース、キシリトース、デンプン分解糖還元アルコール等）；グリソリッド；テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＥ−テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＰ−ブチルエーテル；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ブチルエーテル；トリポリオキシプロピレングリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテルリン酸；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ペンタンエリスリトールエーテル、ポリグリセリン等が挙げられる。
【００７９】
油類としては、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油およびその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンがある。
【００８０】
高級脂肪酸としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などがある。高級アルコールとしては、例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ミリスチルアルコール、オレイルアルコール、セトステアリルアルコール、ホホバアルコール、ラノリンアルコール、バチルアルコール、２−デシルテトラテセシノール、コレステロール、フィトステロール、イソステアリルアルコール等がある。合成エステルとしては、例えば、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等がある。シリコーンとしては、例えば、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン、デカメチルシクロポリシロキサン等の環状ポリシロキサン、シリコーン樹脂等の三次元網目構造のもの等がある。
【００８１】
上述のように、本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に配合して実施することが好ましい。
【００８２】
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品の形態で実施する場合、剤形は限定されず、アンプル、カプセル、粉末、顆粒、丸剤、錠剤、固形剤、液剤、ゲル、気泡、乳液、クリーム、軟膏、シート、ムース、浴用剤など多様なものとすることができる。
【００８３】
具体的には、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品としては、例えば内用・外用薬用製剤、化粧水、乳液、クリーム、軟膏、ローション、オイル、パックなどの基礎化粧料、洗顔料や皮膚洗浄料、シャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアクリーム、ポマード、ヘアスプレー、整髪料、パーマ剤、ヘアートニック、染毛料、育毛・養毛料などの頭髪化粧料、ファンデーション、白粉、おしろい、口紅、頬紅、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、眉墨、まつ毛などのメークアップ化粧料、美爪料などの仕上げ用化粧料、香水類、浴用剤、その他、歯磨き類、口中清涼剤・含嗽剤、液臭・防臭防止剤、衛生用品、衛生綿類、ウエットティシュなどが挙げられる。より具体的には、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧品、染毛料、練香水、パウダー、パック、クレンジングクリーム、ひげそり用クリーム、びげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧品、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、養毛剤および育毛剤などとして使用することができる。また、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。
【００８４】
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物はヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が期待できる限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【００８５】
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に使用される成分や添加剤を併用して配合することができる。
【００８６】
例えば、ロウ類としては、ミツロウ、カルナバロウ、鯨ロウ、ラノリン、液状ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、カンデリラロウ、モンタンロウ、セラックロウなどが挙げられる。
【００８７】
例えば、鉱物油としては、流動パラフィン、ワセリン、パラフィン、オゾケライド、セレシン、マイクロクリスタンワックス、ポリエチレン末、スクワレン、スクワラン、プリスタンなどが挙げられる。
【００８８】
例えば、脂肪酸類としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、オレイン酸、１２-ヒドロキシステアリン酸、ウンデシレン酸、トール油、
ラノリン脂肪酸などの天然脂肪酸、イソノナン酸、カプロン酸、２−エチルブタン酸、イソペンタン酸、２−メチルペンタン酸、２−エチルヘキサン酸、イソペンタン酸などの合成脂肪酸が挙げられる。
【００８９】
例えば、アルコール類としては、エタノール、イソピロパノール、ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、フィトステロールなどの天然アルコール、２−ヘキシルデカノール、イソステアリルアルコール、２−オクチルドデカノールなどの合成アルコール、酸化エチレン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ポリエチレングリコール、酸化プロピレン、プロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、バチルアルコール、ペンタエリトリトール、ソルビトール、マンニトール、ブドウ糖、ショ糖などの多価アルコール類などが挙げられる。
【００９０】
例えば、エステル類としては、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸オレイル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、フタル酸ジエチル、フタル酸ジブチル、酢酸ラノリン、モノステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、ジオレイン酸プロピレングリコールなどが挙げられる。
【００９１】
例えば、金属セッケンとしては、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸カルシウム、パルミチン酸亜鉛、ミリスチン酸マグネシウム、ラウリン酸亜鉛、ウンデシレン酸亜鉛などが挙げられる。
【００９２】
例えば、ガム質および水溶性高分子化合物としては、アラビアゴム、ベンゾインゴム、ダンマルゴム、グアヤク脂、アイルランド苔、カラヤゴム、トラガントゴム、キャロブゴム、クインシード、寒天、カゼイン、デキストリン、ゼラチン、ペクチン、デンプン、カラギーナン、カルボキシアルキルキチン、キトサン、ヒドロキシアルキルキチン、低分子キトサン、キトサン塩、硫酸化キチン、リン酸化キチン、アルギン酸およびその塩、ヒアルロン酸およびその塩、コンドロイチン硫酸、ヘパリン、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、カルボキシエチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ニトロセルロース、結晶セルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメタアクリレート、ポリアクリル酸塩、ポリエチレンオキサイドやポリプロピレンオキサイド等のポリアルキレンオキサイドまたはその架橋重合物、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレンイミンなどが挙げられる。
【００９３】
例えば、界面活性剤としては、アニオン界面活性剤（カルボン酸塩、スルホン酸塩、硫酸エステル塩、リン酸エステル塩）、カチオン界面活性剤（アミン塩、四級アンモニウム塩）、両性界面活性剤（カルボン酸型両性界面活性剤、硫酸エステル型両性界面活性剤、スルホン酸型両性界面活性剤、リン酸エステル型両性界面活性剤）、非イオン界面活性剤（エーテル型非イオン界面活性剤、エーテルエステル型非イオン界面活性剤、エステル型非イオン界面活性剤、ブロックポリマー型非イオン界面活性剤、含窒素型非イオン界面活性剤）、その他の界面活性剤（天然界面活性剤、タンパク質加水分解物の誘導体、高分子界面活性剤、チタン・ケイ素を含む界面活性剤、フッ化炭素系界面活性剤などが挙げられる。
【００９４】
例えば、ビタミン類としては、ビタミンＡ群ではレチノール、レチナール（ビタミンＡ1）、デヒドロレチナール（ビタミンＡ2）、カロチン、リコピン（プロビタミンＡ）、ビタミンＢ群では、チアミン塩酸塩、チアミン硫酸塩（ビタミンＢ1）、リボフラビン（ビタミンＢ2）、ピリドキシン（ビタミンＢ6）、シアノコバラミン（ビタミンＢ12）、葉酸類、ニコチン酸類、パントテン酸類、ビオチン類、コリン、イノシトール類、ビタミンＣ群では、アスコルビン酸およびその誘導体、ビタミンＤ群では、エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ2）、コレカルシフェロール（ビタミンＤ3）、ジヒドロタキステロール、ビタミンＥ群では、トコフェロールおよびその誘導体、ユビキノン類、ビタミンＫ群では、フィトナジオン（ビタミンＫ1）、メナキノン（ビタミンＫ2）、メナジオン（ビタミンＫ3）、メナジオール（ビタミンＫ4）などが挙げられる。
【００９５】
例えば、アミノ酸としては、バリン、ロイシン、イソロイシン、トレオニン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、システイン、シスチン、チロシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒドロキシリジン、アルギニン、オルニチン、ヒスチジンなどや、それらの硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、あるいはピロリドンカルボン酸の如きアミノ酸誘導体などが挙げられる。
【００９６】
例えば、動物あるいは植物、生薬の抽出物やエキスとしては、アセンヤク（阿仙薬）、アシタバ、アセロラ、アルテア、アルニカ、アボカド、アマチャ（甘茶）、アロエ、アロエベラ、イラクサ、イチョウ（銀杏葉、銀杏）、ウイキョウ（茴香）、ウコン（鬱金）、ウスバサイシン（細辛）、ウメ（烏梅）、ウラジロガシ、ウワウルシ、ノイバラ（営実）、ヒキオコシ（延命草）、オウギ（黄耆）、コガネバナ（オウゴン）、ヤマザクラ（桜皮）、キハダ（黄柏）、オウレン（黄連）、オタネニンジン（人参）、オトギリソウ（弟切草）、オドリコソウ、オランダガラシ、オレンジ、イトヒメハギ（遠志）、ウツボグサ（夏枯草）、ツルドクダミ（何首烏）、エンジュ（槐花）、ヨモギ（ガイ葉）、ガジュツ（莪朮）、クズ（葛根）、カノコソウ（吉草根）、カミツレ、キカラスウリ（瓜呂根）、カワラヨモギ（茵チン蒿）、カンゾウ（甘草）、フキタンポポ（款冬花、款冬葉）、キイチゴ、キウイ果実、キキョウ（桔梗）、キク（菊花）、キササゲ（梓実）、ミカン属植物果実（枳実）、タチバナ(橘皮)、キュウリ、ウドまたはシシウド（羌活、独活）、アンズ（杏仁）、クコ（地骨皮、枸杞子、枸杞葉）、クララ（苦参）、クスノキ、クマザサ、グレープフルーツ果実、ニッケイ（桂皮）、ケイガイ（ケイガイ）、エビスグサ（決明子）、マルバアサガオまたはアサガオ（ケン牛子）、ベニバナ（紅花）、ゴバイシ（五倍子）、コンフリー、コパイバ、クチナシ（山梔子）、ゲンチアナ、ホオノキ（厚朴）、ヒナタイノコズチ（牛膝）、ゴシュユ（呉茱萸）、ゴボウ、チョウセンゴミシ（五味子）、米、米ぬか、コムギ、ミシマサイコ（柴胡）、サフラン、サボンソウ、サンザシ（山ザ子）、サンショウ（山椒）、サルビア、サンシチニンジン（三七人参）、シイタケ（椎茸）、ジオウ（地黄）、シクンシ（使君子）、ムラサキ(紫根)、シソ（紫蘇葉、紫蘇子）、カキ（柿蒂）、シャクヤク（芍薬）、オオバコ（車前子、車前草）、ショウガ（生姜）、ショウブ（菖蒲）、トウネズミモチ（女貞子）、シモツケソウ、シラカバ、スイカズラ（金銀花、忍冬）、セイヨウキヅタ、セイヨウノコギリソウ、セイヨウニワトコ、アズキ（赤小豆）、ニワトコ（接骨木）、ゼニアオイ、センキュウ（川キュウ）、センブリ（当薬）、クワ（桑白皮、桑葉）、ナツメ（大棗）、ダイズ、タラノキ、チクセツニンジン（竹節人参）、ハナスゲ（知母）、ワレモコウ（地楡）、ドクダミ（十薬）、フユムシナツクサタケ（冬虫夏草）、トウガラシ、ホオズキ（登呂根）、タチジャコウソウ、リョクチャ（緑茶）、コウチャ（紅茶）、チョウジ（丁子）、ウンシュウミカン（陳皮）、ツバキ、ツボクサ、トウガラシ（番椒）、トウキ（当帰）、トウキンセンカ、ダイダイ（橙皮）、ワレモコウ（地楡）、トウモロコシ（南蛮毛）、トチュウ（杜仲、杜仲葉）、トマト、ナンテン（南天実）、ニンニク（大サン）、オオムギ（麦芽）、ハクセン（白蘚皮）、ジャノヒゲ（麦門冬）、パセリ、バタタ、ハッカ（薄荷）、ハマメリス、バラ、ビワ葉（枇杷葉）、マツホド（茯リョウ）、ブドウまたはその葉、ヘチマ、ボダイジュ、ボタン（牡丹皮）、ホップ、マイカイ（マイ瑰花）、松葉、マロニエ、マンネンロウ、ムクロジ、メリッサ、メリロート、ボケ（木瓜）、モヤシ、モモ（桃仁、桃葉）、ヒオウギ（射干）、ビンロウジュ（檳ロウ子）、メハジキ（益母草）、ヤグルマギク、ユキノシタ（虎耳草）、ヤマモモ（楊梅皮）、ヤシャブシ（矢車）、ハトムギ（ヨクイニン）、モウコヨモギ、ヤマヨモギ、ラベンダー、リンゴ果実、マンネンタケ（霊芝）、レモン果実、レンギョウ（連翹）、レンゲソウ、ゲンノショウコ（老鸛草）、ハシリドコロ（ロート根）、鶏トサカ、牛・人の胎盤抽出物、豚・牛の胃、十二指腸、或いは腸の抽出物若しくはその分解物、水溶性コラーゲン、水溶性コラーゲン誘導体、コラーゲン加水分解物、エラスチン、エラスチン加水分解物、水溶性エラスチン誘導体、シルク蛋白、シルク蛋白分解物、牛血球蛋白分解物などが挙げられる。
【００９７】
例えば、微生物培養代謝物としては、酵母エキス、亜鉛含有酵母エキス、ゲルマニウム含有酵母エキス、セレン含有酵母エキス、マグネシウム含有酵母エキス、米醗酵エキス、ユーグレナ抽出物、脱脂粉乳の乳酸発酵物などが挙げられる。
【００９８】
例えば、α−ヒドロキシ酸としては、グリコール酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、乳酸などが挙げられる。
【００９９】
例えば、無機顔料としては、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、タルク、カオリン、ベントナイト、マイカ、雲母チタン、オキシ塩化ビスマス、酸化ジルコニウム、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、酸化チタン、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、黄酸化鉄、ベンガラ、黒酸化鉄、グンジョウ、酸化クロム、水酸化クロム、カーボンブラック、カラミンなどが挙げられる。
【０１００】
例えば、収斂剤としては、乳酸、酒石酸、コハク酸、クエン酸、アラントイン、塩化亜鉛、硫酸亜鉛、酸化亜鉛、カラミン、ｐ−フェノールスルホン酸亜鉛、硫酸アルミニウムカリウム、レソルシン、塩化第二鉄、タンニン酸などが挙げられる。
【０１０１】
例えば、殺菌・消毒薬としては、アクリノール、イオウ、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化メチルロザニリン、クレゾール、グルコン酸カルシウム、グルコン酸クロルヘキシジン、スルファミン、マーキュロクロム、ラクトフェリンまたはその加水分解物などが挙げられる。
【０１０２】
例えば、頭髪用剤としては、二硫化セレン、臭化アルキルイソキノリニウム液、ジンクピリチオン、ビフェナミン、チアントール、カスタリチンキ、ショウキョウチンキ、トウガラシチンキ、塩酸キニーネ、強アンモニア水、臭素酸カリウム、臭素酸ナトリウム、チオグリコール酸などが挙げられる。
【０１０３】
例えば、香料としては、ジャコウ、シベット、カストリウム、アンバーグリスなどの天然動物性香料、アニス精油、アンゲリカ精油、イラン精油、イリス精油、ウイキョウ精油、オレンジ精油、カナンガ精油、カラウェー精油、カルダモン精油、グアヤクウッド精油、クミン精油、黒文字精油、ケイ皮精油、シンナモン精油、ゲラニウム精油、コパイババルサム精油、コリアンデル精油、シソ精油、シダーウッド精油、シトロネラ精油、ジャスミン精油、ジンジャーグラス精油、杉精油、スペアミント精油、西洋ハッカ精油、大茴香精油、チュベローズ精油、丁字精油、橙花精油、冬緑精油、トルーバルサム精油、バチュリー精油、バラ精油、パルマローザ精油、檜精油、ヒバ精油、白檀精油、プチグレン精油、ベイ精油、ベチバ精油、ベルガモット精油、ペルーバルサム精油、ボアドローズ精油、芳樟精油、マンダリン精油、ユーカリ精油、ライム精油、ラベンダー精油、リナロエ精油、レモングラス精油、レモン精油、ローズマリー精油、和種ハッカ精油などの植物性香料、その他合成香料などが挙げられる。
【０１０４】
例えば、色素・着色剤としては、赤キャベツ色素、赤米色素、アカネ色素、アナトー色素、イカスミ色素、ウコン色素、エンジュ色素、オキアミ色素、柿色素、カラメル、金、銀、クチナシ色素、コーン色素、タマネギ色素、タマリンド色素、スピルリナ色素、ソバ全草色素、チェリー色素、海苔色素、ハイビスカス色素、ブドウ果汁色素、マリーゴールド色素、紫イモ色素、紫ヤマイモ色素、ラック色素、ルチンなどが挙げられる。
【０１０５】
例えば、甘味料としては、砂糖、甘茶、果糖、アラビノース、ガラクトース、キシロース、マンノース、麦芽糖、蜂蜜、ブドウ糖、ミラクリン、モネリンなどが挙げられる。
【０１０６】
例えば、栄養強化剤としては、貝殻焼成カルシウム、シアノコラバミン、酵母、小麦胚芽、大豆胚芽、卵黄粉末、ヘミセルロース、ヘム鉄などが挙げられる。
【０１０７】
その他、ホルモン類、金属イオン封鎖剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐・防バイ剤、清涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質およびその分解物、動・植物性多糖類およびその分解物、動・植物性糖蛋白質およびその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗アレルギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、増泡剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調味料、酵素などが挙げられる。
【０１０８】
〔抗老化方法〕
本発明に係るバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を用いることにより、抗老化方法を提供することができる。すなわち、本発明には、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を用いる抗老化方法が含まれる。
【０１０９】
本発明に係る抗老化方法は、（ｉ）バイオサーファクタントを動物に接触させる工程を含むことを特徴としている。バイオサーファクタントとしては、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（MALにはマンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）が含まれる）、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）のトリアシル体およびマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）のトリアシル体からなる群より選択された少なくとも１種であることが好ましい。
【０１１０】
動物としては、バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の抗老化効果が期待できる限り特に限定されないが、哺乳動物が好ましく、ヒトが特に好ましい。
【０１１１】
「動物に接触させる」とは、動物の皮膚、粘膜など、外用剤が適用される範囲にバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物を接触させることが意図される。
【０１１２】
本発明に係る抗老化方法は、さらに（ｉｉ）バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物で細胞を賦活させる工程を含むことを特徴としている。細胞賦活作用を有するバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物で細胞を賦活させることにより、例えば、皮膚のしわ、たるみ、硬化等を防止、改善して弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することなどの抗老化効果を発揮することが可能となる。
【０１１３】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、保湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などが必要とされる場合に広く使用することができる。使用量は、所期の湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などを十分に奏する範囲内で決定する。
【０１１４】
本発明にかかる化粧品組成物は、前記のような効果を期待して用いるものであるから、化粧品組成物や化粧品として利用されることは勿論であるが、そのほかにも、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物、機能性食品組成物や、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品などの形態やプレミックス品などの形態で利用することができる。
【０１１５】
なお、発明を実施するための最良の形態の項においてなした具体的な実施態様および以下の実施例は、あくまでも、本発明の技術内容を明らかにするものであって、そのような具体例にのみ限定して狭義に解釈されるべきものではなく、当業者は、本発明の精神および添付の特許請求の範囲内で変更して実施することができる。
【実施例】
【０１１６】
以下の実施例により、本発明を更に詳細に説明するが、本発明は、これらに何ら限定されるものではない。
（肌荒れ改善作用評価方法）
テストスキン（東洋紡績株式会社製）ＬＳＥ−００２または００３キット付属の取り扱い説明の要領に沿って組織を取り出す。薬剤暴露部位を確保するリングをＬＳＥ組織表面に接着させ、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）１%水溶液をリング内に添加し５分間室温で静置する。その後、ＳＤＳをアスピレーターで除去し、アッセイ培地３ｍｌをピペットで吹きかけ洗浄した。この操作にて、角層の保湿成分が溶出し、乾燥肌が作成された。
【０１１７】
次に、被験物溶液を各７０μｌマイクロピペットにてＬＳＥ（Living Skin Equivalent)組織表面に添加した。続いて温度３７℃、相対湿度１５%ＲＨから２０％RHに調整したCO２インキュベーターにＬＳＥ組織をアッセイ培地が入っているアッセイトレイに乗せて状態で入れ、２４時間インキュベートした。その後、ＬＳＥ組織をＣＯ２インキュベーターより取り出し、ＬＳＥ−００２キット付属の取り扱い説明の要領に沿って、テトラゾリウム塩（ＭＴＴ）試薬０．３３３ｇ／ｍｌが含まれるアッセイ培地の混合液０．６ｍｌをアッセイトレイに入れ、温度３７℃、相対湿度１５%ＲＨから２０％RHに調整したCO２インキュベーター内で３時間インキュベートした。
【０１１８】
ＭＴＴ処理後、ＬＳＥ組織中央部を８ｍｍφのバイオプシーパンチを用いてポリカーボネートの膜ごとくり抜き、切片を小試験管に移し、０．０４Ｎ塩酸−イソプロパノールを７００μｌ加え、暗所にて２時間抽出した。抽出終了後、攪拌し、十分混和後、抽出された青紫色のホルマザンの５６２ｎｍの吸光度を測定した。この方法により得られる吸光度と肌荒れ改善効果とは密接な関係があり、ヒトの肌荒れの状態評価を定量的、簡易的、且つ経済的に実施できる有効な肌荒れ改善評価方法である。
【０１１９】
実施例１ ＭＥＬ−ＡおよびトリアシルＭＥＬ−Ａの製造
種菌培養はPseudozyma antarcticaNBRC 10736を種培地(20ml/500ml坂口フラスコ)に1 loop植菌して実施した。30℃にて一晩培養した。得られた培養液を種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO3、0.02% MgSO4・H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養は上記種菌75mlを生産培地1.5L（５L-jar）に植菌し、30℃、300rpm（攪拌回転）、0.5L/min0（Air）の条件で5L-jarを用いて培養した。生産培地組成は、3% ダイズ油、0.02% MgSO4・H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養液250mlを遠心（6500rpm、30min）し、上清を取り除き、沈殿（菌体）を回収した。沈殿に、50mlの酢酸エチルを加え、十分攪拌後、遠心(8500rpm、30min)し、沈殿と上清に分け、上清をエバポーレーターで濃縮した。シリカゲルを用いて、ヘキサン：アセトン＝５：１、ヘキサン：アセトン＝１：２で溶出しＭＥＬ画分（MEL-A、MEL-B、MEL-C）およびトリアシルＭＥＬ−Ａ画分を得た。
【０１２０】
実施例２ ＭＥＬ−ＢおよびトリアシルＭＥＬ−Ｂの製造
0.2mlのP.tsukubaensisフローズンストックを20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（MEL-Bを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしMEL-B粗精製品を得た。得られたMEL-B粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−ＢおよびトリアシルＭＥＬ−Ｂ画分精製品を得た。
【０１２１】
実施例３ ＭＥＬ−ＣおよびトリアシルＭＥＬ−Ｃの製造
0.2mlのP.hubeiensisフローズンストックを20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（MEL-Cを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしMEL-B粗精製品を得た。得られたMEL-C粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−ＣおよびトリアシルＭＥＬ−Ｃ画分精製品を得た。
【０１２２】
実施例４
実施例１におけるMELの製造では、生産原料にダイズ油を用いたが、その代わりにオリーブ油を用いて実施例１と同様の方法で培養しMEL-A、MEL-B、MEL-Cを単離精製する。この時得られるMEL画分を、実施例１のMELと区別するためMEL-A(OL)、MEL-B(OL)、MEL-C(OL)と呼ぶ。
【０１２３】
実施例５ マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）の製造
シュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozyma parantarctica）JCM 11752株の培養を行った。すなわち、保存培地（麦芽エキス３ｇ／Ｌ、酵母エキス３ｇ／Ｌ、ペプトン５ｇ／Ｌグルコース１０ｇ／Ｌ、寒天３０ｇ／Ｌ）に保存しておいたシュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozyma parantarctica）JCM 11752株を、グルコース２０ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム ０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地２ｍＬが入った試験管に１白金耳接種し、３０℃で１日間振とう培養を行った。続いて、得られた菌体培養液を、植物油脂としてオリーブ油５０ｇ／Ｌ、糖アルコールとしてマンニトール１００ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地３０ｍＬの入った坂口フラスコに接種して、３４℃で７日間培養を行った。上記の培養液を採取し、培養液中のマンノシルアルジトールリピッドを酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトで精製後、13C NMR と1H NMRで生産物の構造解析を行った
【０１２４】
実施例６ マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてアラビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＡｒａＬを製造した。
【０１２５】
実施例７ マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてソルビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＳＬを製造した。
【０１２６】
実施例８ マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてリビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＲＬを製造した。
【０１２７】
実施例９：紫外線吸収剤を含むＭＥＬ−Ａ美容液の製造
以下に示す組成の美容液を常法により製造した。コントロールとして、ＭＥＬ−Ａを含まない美容液も常法により製造した。
（組成） （重量％）
油層成分：ステアリン酸 ３．０
スクワラン ５．０
オリーブ油 ５．０
ＭＥＬ−Ａ ５．０
乳化剤：ＰＯＥソルビタンモノラウレート ５．０
ソルビタンモノステアレート ５．０
アルカリ：トリエタノールアミン １．０
紫外線吸収剤：パラアミノ安息香酸オクチル ４．０
水相成分：プロピレングリコール ５．０
精製水 全体で１００となる量
【０１２８】
実施例１０：紫外線吸収剤、保湿剤を含むＭＥＬ−Ａ美容液の製造
以下に示す組成の美容液を常法により製造した。コントロールとして、ＭＥＬ−Ａを含まない美容液も常法により製造した。
（組成） （重量％）
油層成分：ステアリン酸 ３．０
スクワラン ５．０
オリーブ油 ５．０
ＭＥＬ−Ａ ５．０
乳化剤：ＰＯＥソルビタンモノラウレート ５．０
ソルビタンモノステアレート ５．０
アルカリ：トリエタノールアミン １．０
紫外線吸収剤：パラアミノ安息香酸オクチル ４．０
紫外線吸収剤：パラアミノ安息香酸オクチル ４．０
水相成分：プロピレングリコール ５．０
精製水 全体で１００となる量
【０１２９】
実施例１１ ＭＥＬ−Ｂ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＥＬ−Ｂを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＥＬ−Ｂ美容液を製造した。
【０１３０】
実施例１２ ＭＥＬ−Ｃ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＥＬ−Ｃを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＥＬ−Ｃ美容液を製造した。
【０１３１】
実施例１３ ＭＭＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＭＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＭＬ美容液を製造した。
【０１３２】
実施例１４ ＭＡｒａＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＡｒａＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＡｒａＬ美容液を製造した。
【０１３３】
実施例１５ ＭＳＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＳＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＳＬ美容液を製造した。
【０１３４】
実施例１６ ＭＲＬ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにＭＲＬを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でＭＲＬ美容液を製造した。
【０１３５】
実施例１７ トリアシルＭＥＬ−Ａ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにトリアシルＭＥＬ−Ａを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でトリアシルＭＥＬ−Ａ美容液を製造した。
【０１３６】
実施例１８ トリアシルＭＥＬ−Ｂ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにトリアシルＭＥＬ−Ｂを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でトリアシルＭＥＬ−Ｂ美容液を製造した。
【０１３７】
実施例１９ トリアシルＭＥＬ−Ｃ美容液の製造
実施例９〜１０の美容液の製造において、ＭＥＬ−Ａの代わりにトリアシルＭＥＬ−Ｃを用いること以外は、実施例９〜１０と同様の方法でトリアシルＭＥＬ−Ｃ美容液を製造した。
【０１３８】
比較例１
実施例９〜１０に示した組成で作成したＭＥＬを含まない美容液を用いて、５名のパネリストが、これを使用したときの、のび、つき、しっとり感、かさつきにくさについて評価し、次の基準に従って判定した。結果を表１に示す。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１３９】
【表１】
【０１４０】
実施例２０
実施例９〜１０に示した組成の美容液を用いて、５名のパネリストが、これを使用したときの、のび、つき、しっとり感、かさつきにくさについて評価し、次の基準に従って判定した。結果を表２に示す。なお、いずれの場合も、紫外線吸収効果は良好と評価された。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１４１】
【表２】
【０１４２】
実施例２１
実施例１１〜１９に示した組成の美容液を用いて、５名のパネリストが、これを使用したときの、のび、つき、しっとり感、かさつきにくさについて評価し、次の基準に従って判定した。結果を表３〜表１１に示す。なお、いずれの場合も、紫外線吸収効果は良好と評価された。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１４３】
【表３】
【０１４４】
【表４】
【０１４５】
【表５】
【０１４６】
【表６】
【０１４７】
【表７】
【０１４８】
【表８】
【０１４９】
【表９】
【０１５０】
【表１０】
【０１５１】
【表１１】
【０１５２】
表１から表１１で明らかなように、本発明品はのび、つき、しっとり感、かさつきにくさのいずれも良好であった。
【０１５３】
実施例２４
実施例９〜１０に示したＭＥＬを含む組成の美容液の５名のパネリストがこれを使用したときの紫外線吸収効果について、実施例９〜１０に示した組成で作成したＭＥＬを含まない美容液を比較例として、評価した。表１２で明らかなように、本発明品は紫外線吸収効果は良好と評価された。
判定基準：
◎：５名中４名以上が良好と評価した。
○：５名中３名が良好と評価した。
△：５名中２名が良好と評価した。
×：５名中１名以下が良好と評価した。
【０１５４】
【表１２】
【産業上の利用可能性】
【０１５５】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物により、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などの効果を有する、化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することできる。また、本発明により、紫外線吸収剤を含有する皮膚外用剤において、刺激性の少ない皮膚外用剤を提供することができ、さらに従来より、原料コストが安価であり、大量生産可能となり、長期にわたる使用に十分に耐え得ることからも、産業界に大きく寄与することが期待される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
バイオサーファクタントと紫外線吸収剤を少なくとも含有することを特徴とする化粧品組成物。
【請求項２】
バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする請求項１に記載の化粧品組成物。
【請求項３】
バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする請求項１または２に記載の化粧品組成物。
【請求項４】
マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）、マンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）及び／又はマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする請求項３に記載の化粧品組成物。
【請求項５】
MELが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（MEL−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（MEL−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（MEL−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（MEL−Ｄ）、MEL−Ａのトリアシル体、MEL−Ｂのトリアシル体、MEL−Ｃのトリアシル体及びMEL−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項４に記載の化粧品組成物。
【請求項６】
バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸を含有していることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項７】
バイオサーファクタントが、ラメラ構造及び／又はリポソームを形成していることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項８】
バイオサーファクタントが形成するラメラ構造及び／又はリポソームの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする請求項７に記載の化粧品組成物。
【請求項９】
紫外線吸収剤が、安息香酸系紫外線吸収剤 、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤、トリアジン系紫外線吸収剤及びベンゾフェノン系紫外線吸収剤からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項１〜８のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項１０】
さらに、抗菌剤を含有することを特徴とする請求項１〜９のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項１１】
抗菌剤が有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であることを特徴とする請求項１０に記載の化粧品組成物。
【請求項１２】
化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである請求項１〜１１のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項１】
バイオサーファクタントと紫外線吸収剤を少なくとも含有することを特徴とする化粧品組成物。
【請求項２】
バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする請求項１に記載の化粧品組成物。
【請求項３】
バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする請求項１または２に記載の化粧品組成物。
【請求項４】
マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）、マンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）及び／又はマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする請求項３に記載の化粧品組成物。
【請求項５】
MELが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（MEL−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（MEL−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（MEL−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（MEL−Ｄ）、MEL−Ａのトリアシル体、MEL−Ｂのトリアシル体、MEL−Ｃのトリアシル体及びMEL−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項４に記載の化粧品組成物。
【請求項６】
バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸を含有していることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項７】
バイオサーファクタントが、ラメラ構造及び／又はリポソームを形成していることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項８】
バイオサーファクタントが形成するラメラ構造及び／又はリポソームの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする請求項７に記載の化粧品組成物。
【請求項９】
紫外線吸収剤が、安息香酸系紫外線吸収剤 、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤、トリアジン系紫外線吸収剤及びベンゾフェノン系紫外線吸収剤からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項１〜８のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項１０】
さらに、抗菌剤を含有することを特徴とする請求項１〜９のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項１１】
抗菌剤が有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であることを特徴とする請求項１０に記載の化粧品組成物。
【請求項１２】
化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである請求項１〜１１のいずれかに記載の化粧品組成物。
【公開番号】特開２００９−１６７１５９（Ｐ２００９−１６７１５９Ａ）
【公開日】平成２１年７月３０日（２００９．７．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−７５９７３（Ｐ２００８−７５９７３）
【出願日】平成２０年３月２４日（２００８．３．２４）
【出願人】（０００００３１６０）東洋紡績株式会社 (3,622)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年７月３０日（２００９．７．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年３月２４日（２００８．３．２４）
【出願人】（０００００３１６０）東洋紡績株式会社 (3,622)
【Ｆターム（参考）】
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