ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態を治療または予防するためのメキタジン
本願は、ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態の予防または治療を目的とした薬剤を製造するための１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたはその薬学上許容される塩の使用に関する。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、一般に、ヒスタミンＨ４受容体の活性化により媒介される病態を局所、経口または肺経路によって予防または治療することを目的とした薬剤を製造するための、１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたは１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンならびにその薬学上許容される塩の使用に関する。１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンおよび１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンはラセミ体から誘導される。まず第一に、このラセミ体はアレルギー性疾患の処置に有効な薬剤である。それはＨ１クラスの抗ヒスタミン薬である。それは不斉炭素を有し、これが左旋性（Ｓ配置）と右旋性（Ｒ配置）の２つの異なる立体配置をもたらす。この２つの鏡像異性体およびラセミ混合物の薬理学的特性の分析は、これらの化合物が、予測されない方式でヒスタミンＨ４受容体に対する親和性を有することを示す。この特性は、Ｈ１受容体に対するそれらの親和性に加えてのものである。この特定の特性は先行技術では示されておらず、また、考慮されたことさえない。
【０００２】
Nakamura et al. (2000)により報告され、Morse et al. (2001)によりクローニングされたＨ４受容体は、Ｇｉ／ｏヘテロ二量体と結合した、アミノ酸３９０個のトランスメンブランタンパク質であり、その活性化は細胞内のカルシウム動員、ｃＡＭＰの減少およびＭＡＰキナーゼ経路の活性化を誘導する。この受容体は三次元的にＨ１受容体と類似しているが、それらは３５％の相同性しかない。
【０００３】
どちらかのヒスタミン受容体サブタイプの活性化は異なる生理学的または生理病理学的作用によって発現されると広く仮定される。この受容体選択性はヒスタミン受容体サブタイプの存在を正当化する。Ｈ１受容体の活性化はタンパク質Ｇｑの活性化を誘導し、Ｈ２受容体の活性化はタンパク質Ｇｓの活性化を誘導し、Ｈ３受容体の活性化はタンパク質Ｇｉ／ｏの活性化を誘導する(Lovenberg et al., 1999)。機能的に、これらの受容体の活性化は種々の分子作用により発現される。考慮するＨ３受容体リガンドによって、Ｈ４受容体に対して親和性を有するものがある。これらにはチオペラミド、クロベンプロピット(clobenpropit)、イメチット(imetit)およびＲ−α−メチルヒスタミンが含まれる。さらに、受容体サブタイプの分布もまた異なる。ヒトでは、Ｈ４受容体は主として骨髄細胞造血細胞（好酸球、好塩基球、肥満細胞、Ｔリンパ球および樹状細胞）などの末梢組織で発現される。
【０００４】
それらの解剖学的分布の他、生理病理学におけるヒスタミン受容体の役割の特異性は、これらのプロセスにおけるヒスタミンの関与によって異なる。アレルギーメディエーターとしてのヒスタミンの機能は十分確立されている。最近の多くのデータは、免疫応答の調節における機能、より厳密には最近報告されたＨ４受容体を介したものがヒスタミンにあるとするものである。受容体Ｈ４アンタゴニストはＴリンパ球の反応を阻害し、抗原刺激に対する細胞性免疫応答は、in vitroでは、アポトーシスタンパク質キナーゼ依存的プロセスに従ったＨ４受容体の不活性化により阻害される(Sugata et al., 2007)。ヒスタミンは、即時型アレルギー反応の重要なメディエーターであるが、抗原提示細胞の調節にも介入する(Dy et al., 2004)。よって、Ｈ４受容体の活性化は免疫適格樹状細胞において単球分化を誘導する。Ｈ４受容体が活性化されると、ＩＬ−１２ ｐ７０の低下が見られ、単球分化がもたらされる(Gutzner et al., 2005)。Takeshita et al. (2003)は、Ｈ４受容体が多核好中球の動員に直接介入したことを示しているが、この動員または走化性は肥満細胞に依存していた。
【０００５】
よって、走化性の低下、およびＨ４受容体の不活性化による好中球浸潤の低下は明確に確立されている。例えば、カラギーナンなどの薬剤の注射によって引き起こされる炎症のモデルまたはオボアルブミン刺激による炎症のモデルでは、Ｈ４受容体アンタゴニストの重要性が末梢炎症現象を制御するための推定因子として浮上する。大多数は次の生理病理学に関連する。
・アトピー性皮膚炎、皮膚掻痒症
・気管支炎症（喘息、閉塞性気管支肺障害）
・腸炎症（過敏性腸症候群）
・関節炎症（関節リウマチ）
・脈管形成とその結果である腫瘍発達を可能とする、腫瘍周辺間質の炎症
【０００６】
皮膚炎症／掻痒症におけるＨ４受容体の関与
ＪＮＪ７７７７１２０などの特定のリガンドによるＨ４受容体の阻害は、事前に皮下ヒスタミン注射により掻痒症が誘導された動物において掻きむしり(self-scratching)を制限する(Bell et al., 2004)。Ｈ４受容体アンタゴニストの活性はデスロラタジンまたはセチリジンなどのＨ１アンタゴニストの活性よりも高いと思われる。しかしながら、これらの「従来の」抗ヒスタミン薬の活性はこのモデルでは０ではなく、Ｈ１抗ヒスタミン薬の鎮痒作用はそれらの鎮静特性にあるのではないことを示している。さらに、この鎮痒活性は、鎮静作用を除いた特定のＨ１アンタゴニストに関しても示された。加えて、Ｈ４受容体の末梢局在は、その不活性化が中枢制御とは対照的に罹患部の局部制御を可能とする仮説を確立する。受容体Ｈ４発現はこれらのデータを確証する。実際に、Lippert et al. (2004)によれば、ヒト皮膚肥満細胞はヒスタミンＨ４受容体を発現し、これは皮膚炎症の自己分泌およびパラ分泌レギュレーターとしてのヒスタミンの役割を確かなものとする。さらに、アトピーのない患者のＴリンパ球では、ヒスタミンはＨ４受容体を介してＳＴＡＴ１タンパク質の活性化を阻害することによって働くことが示されている。このメッセンジャーは、免疫応答およびＴｈ１／Ｔｈ２バランスを制御する因子の転写を活性化するタンパク質である。アトピー患者のリンパ球の場合、シグナルはやはりヒスタミンによるＨ４受容体の活性化によって媒介され、最終的にインターフェロン−γの生成により発現される。この因子は炎症現象の増幅を引き起こす。アトピーのない患者の細胞では、ＳＴＡＴ１の発現はすでに低下しており、インターフェロン−γのレベルは低い。よって、Ｈ４受容体の阻害は健常なボランティアよりもアトピー患者でより有効である(Horr et al., 2006)。
【０００７】
従って、Ｈ４アンタゴニストと組み合わせたＨ１アンタゴニストの複合作用は、かゆみおよびその関連合併症といった掻痒症の皮膚科的帰結を制御することを意図した治療薬の選択肢の特性を構成すると結論付けることができる。
【０００８】
気道炎症におけるＨ４受容体の関与
気管支および肺胞上皮におけるＨ４受容体の発現は、検討を喘息または閉塞性気管支肺障害などの気管支炎症現象におけるその関与を調べるに導いた。オボアルブミン刺激を用いたこれらの病態の動物モデルは、これに関してのＨ４受容体の役割を特定することを可能とする(Dunford et al., 2006)。これまでに見られたように、特定のアンタゴニストを介したＨ４受容体の不活性化は走化性、および従って炎症を起こした肺上皮内の好中球浸潤を制限する。この帰結は、免疫および炎症カスケードの破壊である。実際に、ＣＤ４ Ｔリンパ球は、Ｈ４受容体が中和された際にはもはや活性化されない。さらに、ケモカインおよびサイトカインレベルが低下し、その帰結がＴリンパ球応答の低下である。よって、その起源が何であれ（中毒、アレルギー性反応または腫瘍により引き起こされる慢性呼吸困難）、肺上皮の炎症現象に対抗するための薬剤としていずれかのＨ４受容体アンタゴニストを提案することは論理にかなったことである。
【０００９】
腸管炎症におけるＨ４受容体の関与
Ｈ４受容体アンタゴニストによる炎症現象の阻害の別の例がVarga et al. (2005)の研究に示されている。結腸の炎症は、トリニトロベンゼンの投与により動物に引き起こされる。事前に、Ｈ４受容体アンタゴニストを用いた処置が適用される。最終的に、このように前処置された動物は対照動物よりも組織学的炎症スコアが低い。並行して、ＴＮＦ−αなどの炎症因子のレベルにおける低下も示されている。従って、過敏性腸症候群などの病態においてはＨ４受容体阻害剤の重要性が明らかである。
【００１０】
関節炎症におけるＨ４受容体の関与
関節リウマチの結果としての炎症現象においてもＨ４受容体の関与が確認されている。Ikawa et al. (2005)は、関節リウマチ患者の滑膜細胞のサンプルにおける間接的な転写物の測定（ＲＴ−ＰＣＲ）によるＨ４受容体の発現を分析した。これらの分析は、Ｈ４受容体の発現がこれらのサンプルにおいて極めて高いことを示し、ヒスタミンＨ４受容体が関節リウマチの結果としの炎症カスケードにおいて役割を果たすことを示唆している。結論として、滑膜細胞の炎症性病態におけるＨ４受容体阻害剤の重要性が明らかであると思われる。
【００１１】
腫瘍発達に関連する脈管形成におけるＨ４受容体の関与
ヒスタミン合成を触媒する酵素であるヒスチジンデカルボキシラーゼの活性が多くの腫瘍組織で見られる。これは必ずしも、ヒスタミンレベルの上昇が癌性現象の出現を起こすことを意味するのではないが、組織の癌化に伴う炎症がヒスタミンに関与することは明らかに確認される。ヒスチジンデカルボキシラーゼは結腸、乳房および子宮内膜の腫瘍、小細胞肺腫瘍および黒色腫で発現される。Cianchi et al. (2005)による研究は、Ｃａｃｏ２、ＨＴ２９およびＨＣＴ１１６細胞におけるこの酵素の過剰発現を実証した。in vitroにおいてヒスタミンは、これらの結腸腺癌培養物において炎症性因子、すなわちプロスタグランジンＥ２の生産の増加および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）の生産の増加を誘導した。Ｈ４受容体を介したヒスタミンのこのアゴニスト作用は細胞分裂の増強により発現される可能性がある。実際、これら２つのバイオマーカーは腫瘍周囲の血管網（脈管形成）の発達に関与する。血管発達に対するヒスタミンのアゴニスト作用はＨ４受容体阻害剤ならびにシクロオキシゲナーゼ１および２阻害剤によって拮抗作用を受ける。ＣＯＸ阻害剤の作用はそれらの抗炎症能のために既知であるが、Ｈ４受容体アンタゴニストの作用およびそれらの腫瘍周囲血管網発達現象に対する有効性が新たに記載される。これらのデータは脈管形成におけるＨ４受容体アンタゴニストの有用性を示唆する。さらに、これらの研究の結果は、Ｈ４受容体を遮断することによるヒスタミン活性の阻害が結腸腺癌培養細胞による細胞分裂を低下させることを示す。
【００１２】
上記に挙げた理由により、ヒスタミンにより媒介される末梢炎症の阻害に関して完全な作用を持つためには、この候補阻害剤がＨ１受容体とＨ４受容体の双方に対して二重の結合作用を有するべきであると思われる。
【００１３】
Ｈ４受容体が関与する皮膚科病態に関して、抗ヒスタミン薬により誘導される有害作用を軽減する目的では、候補分子が、角膜層を経てその皮下標的であるＨ４受容体発現肥満細胞に到達する傾向を有しているので、経皮経路が有利であると思われる。同様に、気道の炎症性病態に関しては、目的の薬剤の全身浸透を制限することにより、おそらくは気管支上皮に直接標的を到達させる生薬形態を提供することが有利である。
【００１４】
よって、薬剤の活性代謝物の血漿レベルの制限はまた、具体的投与経路にかかわらず、最初に投与された薬剤の作用を悪化し得る、または副作用の頻度および強度を高め得る活性代謝物を産生しない特定の肝臓代謝にあり得る。
【００１５】
さらに、製品の半減期が長いほど投与頻度が少ないことを意味し、治療コンプライアンスの助けとなる。
【発明の開示】
【００１６】
本発明の目的は、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（メキタジンの右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称で分類）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（メキタジンの左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称で分類）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称で分類）の特定の予期されない特性を実証することである。
【００１７】
本発明は、ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態の予防または治療を目的とした薬剤を製造するための、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、またはその薬学上許容される塩の使用に関する。
【００１８】
本発明の別の特徴によれば、ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態は、アトピー性皮膚炎、掻痒症、ならびに喘息および閉塞性気管支肺障害などの気管支炎症から選択される。
【００１９】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、標的ヒスタミンＨ４受容体と拮抗するに十分な有効成分含量を含んでなる経口投与に好適な形態で提供される。
【００２０】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、１μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、有利には０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇの投与量を可能とする経口投与単位で提供される。
【００２１】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は錠剤の形態で提供される。
【００２２】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、喘息または閉塞性気管支肺障害の処置に特に適した経口スプレー溶液または吸入用粉末の形態で提供される。
【００２３】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、ヒスタミンＨ４受容体およびムスカリン性受容体が同時に関与する病態を予防または治療するために使用される。
【００２４】
本発明の別の特徴によれば、上述の受容体が関与する病態は呼吸器系病態から選択される。
【００２５】
本発明の別の特徴によれば、上述の病態は気腫、喘息および閉塞性気管支肺障害から選択される。
【００２６】
本発明の別の特徴によれば、本発明は１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンを含有する製品に及ぶ。
【００２７】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、その局所経路による投与に適した形態で提供される。
【００２８】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、有効成分濃度が０．０１重量％〜１０重量％の、ゲル、エマルションまたはクリームとして提供される。
【００２９】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、アトピー性皮膚炎および掻痒症を処置するために使用される。
【００３０】
アトピー性皮膚炎は、アトピー性湿疹とも呼ばれる。例えば、細菌、真菌またはアレルゲンなどの種々の起源の痒い病巣を特徴とする皮膚の炎症性疾患である。
【００３１】
一般に、本発明の目的は、種々のタイプの皮膚科病巣に関連して現れるかゆい皮膚の症状と一般的にみなされる掻痒症を処置することである。
【００３２】
最後に、本発明はまた、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンもしくは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたはその薬学上許容される塩、ならびにヒスタミンＨ４受容体の拮抗作用による抗炎症療法における同時、個別または拡張使用のための組合せ製品としての、Ｈ１抗ヒスタミン薬、コルチコイド、遅効性または即効性抗ムスカリン作用薬およびβ２−メミティクスのクラスの薬剤を含有する製品にも及ぶ。
【００３３】
以下の実施例は、
・ヒトヒスタミンＨ４受容体に対するin vitro親和性が、マイクロモル濃度の上記３種類の化合物で有効であること
・これらの化合物がＨ４受容体に関するインバースアゴニストとして振る舞うこと（この特性は先行技術には記載されたことがない）
・化合物Ｖ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３の経皮または経粘膜経路が考えられ、このファルマコフォアに特異的であること
・これらの化合物の半減期が長く、これらの製品の潜在的適応に適合する投与計画の交換を可能とすること
を示す。
【００３４】
本発明の実施例として集約されたこれら全ての特性の組合せによれば、予期せず、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称で分類）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称で分類）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称で分類）が、上記に挙げられたものなどのＨ４受容体が関与する病態において有効な化合物であることが示される。
【実施例】
【００３５】
実施例１：in vitroにおける１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称でコード）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称でコード）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称でコード）によるヒトヒスタミンＨ４受容体に対する親和性
この研究の目的は、in vitroにおいてヒトヒスタミンＨ４受容体に対する化合物の親和性定数を決定することである。選択されたモデルは、ヒトＨ４受容体をコードするｃＤＮＡにより安定的にトランスフェクトされたＨＥＫ−２９３細胞である(Liu et al., 2001)。まず、各種受容体を発現する細胞の、その受容体と１００％結合することも確認されているリガンドに対する親和性を決定する。この組換え受容体に対する最適リガンドは１０ｎＭトリチウム化ヒスタミンである。受容体結合は次のように定義される：総結合と過剰量の非放射性リガンドの存在下で決定された非特異的結合との差。これらの結果をリガンドモデル（１００％）で得られた最適結合のパーセンテージとして表す。
【００３６】
【表１】
【００３７】
これらの結果は、Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３が、予期されない様式でヒトヒスタミンＨ４受容体と強く結合する化合物であることを示す。
【００３８】
第二の一連の実験において、これらの３つの化合物の親和性定数を、ヒスタミンＨ４受容体を安定に発現するＣＨＯ細胞からの膜調製物に対するトリチウム化ヒスタミン放射性リガンドとの競合によって厳密に決定する。
【００３９】
【表２】
【００４０】
これらの結果は、これら３つの化合物がヒスタミンＨ４受容体に対して親和性を示すことを示す。これらの親和性はマイクロモルレベルである。Ｈ４受容体に対するこれらの化合物の活性は、これらの３つの化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３が皮膚障壁を通過する高い能力を持つという事実により増強される。さらに、生物体内でのそれらの長い半減期はこの受容体標的のレベルに対する残留作用を示唆する。
【００４１】
実施例２：化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３の、Ｈ４受容体のインバースアゴニストとしての同定
これらの研究は、化合物１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称でコード）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称でコード）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称でコード）のＨ４受容体（アゴニスト、アンタゴニスト、インバースアゴニスト）に対する機能的影響を定義する目的で行った。
【００４２】
Ｇタンパク質は、多くの必須細胞機能において分子スイッチとして働くタンパク質ファミリーに属す。それらの調節活性はＧＤＰに関する不活性型とＧＴＰに関する活性型の間で循環するそれらの能力に基づき、後者は活動シグナルをシグナルカスケードの下流に位置するいわゆるエフェクタータンパク質へ伝達する。Ｈ４受容体に対する３つの化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３の機能的影響を特徴付けるため、Ｇタンパク質活性化試験を用いた研究を行った。簡単に言うと、この試験は、受容体に対する種々の化合物の結合の際に誘導されるＧタンパク質結合［３５Ｓ］放射性標識ＧＴＰの量に着目する。
【００４３】
これらの結果を付属の図１および２に示されている図の形で報告する。
【００４４】
図１ａに示されるＧタンパク質活性化試験の結果は、３つの化合物Ｖ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３は、チオペラミドおよび選択的Ｈ４アンタゴニストＪＮＪ７７７７１２０で見られたように、Ｈ４受容体に対して０．１μＭヒスタミンにより誘導された活性化作用に拮抗することを示す。Ｈ４受容体は構成的活性を有することを知られており、図１ｂは、化合物Ｖ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３はＨ４受容体のインバースアゴニストとしてのチオペラミドにように振る舞う（アゴニストの不在下で基本活性を低下させる）が、化合物ＪＮＪ７７７７１２０はニュートラルアンタゴニストであることを示す。
【００４５】
図２ａ〜２ｄは、ニュートラルアンタゴニストＪＮＪ７７７７１２０がこの活性を遮断することを示しているので、この化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４、Ｌ００１３およびチオペラミドのインバースアゴニスト活性は、明らかにＨ４受容体に対する作用によるものである。これらの結果は全体として、化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３がＨ４受容体のインバースアゴニストであることを初めて示す。この受容体不活性化に対する機能はＶ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３をＪＮＪ７７７７１２０などのニュートラルアンタゴニストファミリーから区別する。
【００４６】
実施例３：マウスヒスタミン誘発足底浮腫モデルにおけるＶ０１１４およびＬ００１３のin vivo抗炎症活性
この実験の目的は、マウスにおけるヒスタミン誘発足底浮腫に対するＶ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３の潜在的抗炎症活性を検出することであった。この試験の原理はKreutner et al. (2000)の発表により示唆される。全ての群が１０匹の動物からなった。処理前と、炎症誘発剤処理の１２０、９０、６０および３０分前に経口経路により製品（２５ｍｌ／ｋｇ）を投与した。６０分後、イソフラン麻酔下で足への注射（１０μｌ）を行った。右足に１３μｇの二塩酸ヒスタミンを、左足に生理食塩水（ヒスタミンビヒクル）を施した。注射の３０分後に頸椎脱臼により動物を安楽死させた。足を採取し、秤量した。浮腫は、足の重量の差（右足の重量−左足の重量）により定量した。
【００４７】
【表３】
【００４８】
Ｖ０１１４およびＬ００１３は、同時にビヒクル前処理した群と比較して、強力かつ統計学的に有意な抗炎症作用を誘導する。炎症誘発剤を足へ注射する９０分および１２０分前に動物を前処理した際には、このＶ０１１４に対する活性（−５８％〜−７２％）およびＬ００１３に対する活性（−５４％〜−８２％）はより高い。これらの試験条件下で、１２０分前、９０分前、６０分前および３０分前に経口形路により投与されたＶ０１１４とＬ００１３は、マウスの足におけるヒスタミン浮腫に対して強力な抗炎症作用を示す。Ｖ０１６２はこの浮腫を軽減せず、このモデルにおいて抗ヒスタミン作用が無いことを示す傾向にある。しかしながら、これらの製品は経口経路により投与される。以下の試験において、静脈内経路により直接投与した場合でも製品Ｖ０１６２はやはり有効である。結論として、この試験は、in vitroにおいて示されたＨ４抗ヒスタミン活性はin vivoにおける動物でも確認されることを示す。
【００４９】
実施例４：マウスヒスタミン誘発気管支収縮モデルにおける静脈内経路による投与後のＶ０１１４およびＬ００１３の抗ヒスタミン活性
これらの試験の目的は、Konzett (1940)モルモットモデルにおけるヒスタミン誘発気管支収縮に対する３つの化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３の活性を評価することである。これまでの本発明者らは、これらの３つの化合物がin vitroではＨ４受容体に対して抗ヒスタミン活性を示すが、他方、in vivoではＶ０１１４とＬ００１３だけが、炎症がヒスタミンにより生じる場合に抗炎症を示すことを見出している。Ｖ０１６２は、経口経路により投与される場合にはその活性を消失することも示されている。これらの３つの製品の静脈内経路による活性を分析する目的で、以下の試験を行った。動物に、定圧呼吸ポンプの手段により、過剰量の空気によって人工呼吸を行う。肺へ浸透しない空気はセンサーに到達し、毎回の吸気を測定する。見られた変動は気管支緊張の変化を表す。ヒスタミンにより誘発される気管支収縮は、センサーによって測定される余剰量の増加を生じる。種々の化合物を、予めカテーテルを留置した頚静脈経路により投与する。その後、ヒスタミン刺激を静脈内経路により７μｇ／ｋｇの用量で行う。
【００５０】
【表４】
【００５１】
このモデルにおいてヒスタミンは気管支収縮を誘発する。静脈経路により投与すると、３つの化合物はヒスタミンの作用の阻害を誘導する。よって、この投与経路は標的に到達するために重要であると思われる。しかし、この結果は、３０分後の測定を考えた場合には違ってくる。Ｖ０１６２はそのアンタゴニスト活性を消失すると思われるが、この活性はＶ０１１４で最大である。
【００５２】
これらの試験は、in vivoにおいて、静脈投与後、これらの化合物は肺レベルでこのメディエーターを生じる現象に対するヒスタミンの作用に対抗することを示す。
【００５３】
実施例５：１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの経皮経路
掻痒症におけるＨ４受容体の重要性が最近確認された。従って、皮膚掻痒症に含まれるヒスタミンＨ４受容体を標的とするアンタゴニストは、掻痒症に関連する挙動を打破するため、そして結果として掻痒症により引き起こされる皮膚病巣によって発生する重複感染を避けるための選択手段となる。同様に、このようなＨ４抗ヒスタミン薬は、これまでにように示されたように、アトピーの原因に見られる徴候の予防または排除に有用であることが分かる。この目的で、皮膚のマスト細胞上のその標的に到達させるために、皮膚障壁を通過し得るＨ４抗ヒスタミン薬を持つことが有用である。これらの試験の目的は、１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの、皮膚障壁を通過する能力を評価することである。ヒト皮膚外植片を動的拡散チャンバー（拡散領域０．６３６ｃｍ２）中に、その真皮を受容体媒体（水０．９％、ＮａＣｌ０．９％、ＮａＮ３０．１％／エタノール；７５／２５；ｖ／ｖ）と接触させて置く。流速は１．５ｍｌ／時である。試験は３２℃で行う。Ｔ＝０の時点で、化合物を含有する溶液（５００μｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌまたは１０μＣｉ／細胞）を入れる。受容液を３、６、９、１２、１６、２０および２４時間の時点でサンプリングする。
【００５４】
結果は、１６時間後にほぼ一定の最大化合物流に達し、２４時間目の蓄積量が５．４μｇ／ｃｍ２／時；１０７μｇ／ｃｍ２であることを示す。
【００５５】
２４時間目の表皮および真皮の化合物量（図３ｂ）は濃度勾配を示し、従って、皮膚におけるこの分子の一様な分布を示す。
・表皮＝５６±１７μｇ／ｃｍ２
・真皮＝４５±１４μｇ／ｃｍ２
・合計＝１０１μｇ／ｃｍ２
・受容体ゾーン＝１０７±２８μｇ／ｃｍ２
【００５６】
この試験は、１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンが経皮経路に良好な能力（およそ１００μｇ／ｃｍ２／２４時）を有する分子であることを示す。２４時間後に皮膚に貯蓄されている化合物の量は、２４時間後の受容液に見られる蓄積量と同等か、または高くさえある。
【００５７】
実施例６：ラット閉塞性慢性気管支肺障害モデルにおける化合物Ｖ０１１４およびＶ０１６２の抗炎症活性の評価
肺炎症の軽減における化合物の重要性を以下のモデルで評価した。動物を、常用的霧化によりカドミウム投与に曝す。やがて動物は炎症反応と常習的に肺気腫を生じる。このモデルを、Ｈ４受容体の活性化により媒介される好中球性炎症反応の持続に関連する慢性呼吸器系疾患を処置するために潜在的に有効な分子を同定するのに用いるために、ラットでバリデートした。適当な病態となったところで、１０μｇ〜５０μｇで異なる用量の目的化合物を霧化により肺投与することで動物を毎日処置した。
【００５８】
結果は、供試化合物が呼吸能、最も著しくは呼吸速度を部分的に回復させ、吸気流と呼気流を増すことを示す。さらに、試験の終了時、気管支肺胞液を採取し、免疫適格細胞を数える。結果は、処置群をプラシーボのみを受容した動物と比べた場合、浸潤好中球の増加を示す。
【００５９】
これらの結果をまとめると、ヒスタミンＨ４受容体の拮抗作用を介した供試化合物の抗炎症活性が確認される。
【００６０】
これら３つの化合物は、Ｈ４受容体に対して受容体親和性を示す。本発明者らは、それらはこの受容体のインバースアゴニストであることを確定した。in vitroおよびin vivoにおいてこれらの抗炎活性が示され、受け入れられているモデルで確認された。さらに、これらの化合物は、局所投与（皮膚または肺）を可能とする薬物動態および経皮浸透の品質を有する。これらの３つの化合物のＨ４受容体に対する特定の特性および結果としての治療的使用はこれまでには示されたことが無い。これらの特性を考え合わせて、あるいは個別に考えて、以上に具体的に示されている。
【００６１】
これらの実施例は、ヒスタミンＨ４受容体により媒介される病態における１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの合理的使用を示す。さらに、これまでに確認されている、左旋性誘導体（１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）およびラセミ混合物（１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）のＨ１受容体阻害剤としての活性は、これら２つの製品にＨ４およびＨ１抗ヒスタミンの二重の特性を与える。この二重の能力は、これらの化合物を、これまでに先行技術で記載されている抗ヒスタミン製品よりも優れたものとする。同様に、他所で明らかに確認されている右旋性誘導体（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）の抗ムスカリン活性も、そのＨ４抗ヒスタミン活性により増強される。この二重の特性は、先行技術では、化合物（１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）、（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）および（１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）に関して記載されていない。
【００６２】
本発明はさらに、Ｖ０１６２およびＬ００１３に関しても、喘息または閉塞性気管支肺障害患者の炎症現象および呼吸困難の阻害における抗Ｈ４および抗Ｍ１／Ｍ３の二重の活性を示した。
【００６３】
受容体Ｈ４は、免疫適格細胞、最も顕著には好酸球およびマクロファージの動員が関与する病態に関与している。従って、気腫、閉塞性気管支肺障害または喘息の際に、肺レベルへの好酸球の浸潤およびマクロファージの動員を制限する目的でこの受容体のリガンドを使用することが考えられた。この活性に鎮痙活性を補完することが賢明であり得る。
【００６４】
予期されないことに、Ｖ０１６２または（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）およびＬ００１３または（１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）は、相補的抗コリン活性を示す。この活性は、in vivoにおいて、左旋性鏡像異性体Ｖ０１１４または（１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）では見られない。
【００６５】
これらの２つの特性を１つの化合物中に組み合わせると、喘息および閉塞性気管支肺障害などの呼吸器系病態を処置するためにＶ０１６２および／またはＬ００１３の使用を考えることが可能となる。
【００６６】
実施例７：ムスカリン性受容体に対するＶ０１６２の親和性
この試験の目的は、アセチルコリンのＭ１、Ｍ２およびＭ３受容体への結合に対する化合物の阻害活性を評価することである。この目的で、種々の用量の供試化合物：Ｖ０１６２、Ｌ００１３およびＶ０１１４の存在下で固定量の放射性標識アセチルコリンをインキュベートする。
【００６７】
【表５】
【００６８】
従って、in vitroにおいて、Ｖ０１６２およびＬ００１３は、気管支筋肉の収縮の誘発、調節および維持に関与するムスカリン性受容体に対して極めて高い親和性を示す。左旋性鏡像異性体は、アセチルコリンの、３つのムスカリン性受容体への結合をあまり阻害しない。この違いは、in vivoにおいては、Ｖ０１６２とＬ００１３だけがアセチルコリンの作用に拮抗するので、いっそう顕著である。
【００６９】
実施例８：呼吸器筋肉収縮に対するアセチルコリン作用の阻害
モルモットを麻酔し、人工呼吸器を付ける。肺へ浸透する空気をセンサーで測定する。従って、吸気を毎回定量する。次に、アセチルコリンの静脈注射により気管支収縮を誘発させる。このアセチルコリンの作用は気管支緊張の直接的かつ即時的変化である。アセチルコリンの気管支収縮作用は作用の極大時にｍｍで評価する。アセチルコリン注射の２０分後に、種々の供試製品：Ｖ０１６２、Ｌ００１３およびＶ０１１４を投与する。各製品の作用を参照法であるアトロピンの場合と比較する。
【００７０】
【表６】
【００７１】
結果は、Ｖ０１６２およびＬ００１３がアセチルコリンにより誘発された気管支痙攣の阻害を誘導し得る２つの製品であることを示す。他方、Ｖ０１１４にはあまり効果は無い。
【００７２】
実施例９：Ｌ００１３の気管支拡張作用、Ｖ０１１４には気管支拡張作用は無い
呼吸器機能に対するＶ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ）の作用を、雄ウィスターラット（一用量８匹）に経口投与（ｐｅｒ ｏｓ）した後に分析する。同じ条件下で投与したＬ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）を参照物質として用いる。同じ試験条件下で投与したテオフィリン（１００ｍｇ／ｋｇ）も参照物質として用いる。蒸留水中、カルボキシメチルセルロース（０．５％）を対照ビヒクルとして用いる。試験期間の終了時に（すなわち、その用量を投与した３６０分後）、動物の挙動ならびにそれらの瞳孔の直径（縮瞳／散瞳）を評価する。血中の物質濃度を分析するために、各ラット（テオフィリン群に属するもの以外）から血液サンプルを採取する。対照ビヒクルは、吸気時間、呼気時間、極大吸気流、極大呼気流、呼吸量、呼吸速度、弛緩時間または呼吸休止時間に作用を持たないが、３６０分の試験時間後の呼吸休止時間を改善する。投与後の呼吸休止時間に若干の増加が見られた（１２０分の時点で対照ビヒクル群の＋２４％、ｐ＜０．０１）。Ｖ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）は、３６０分の試験時間の後の対照ビヒクル群に対し、評価した９つの呼吸パラメーターのいずれにも有意な作用は無い。
【００７３】
Ｌ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）は呼吸器速度を有意に高める（投与６０分目で、対照ビヒクルの−９％に対して最大＋８０％、ｐ＜０．０５）。Ｌ００１３は吸気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋６％に対して−２６％）、呼気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋３％に対して−２４％）、弛緩時間（投与１２０分で対照ビヒクル群の−２％に対して−３０％）および呼吸量（投与６０分で対照ビヒクル群の−６％に対して−２６％）を引き下げる傾向にある。それはまた、極大吸気流（投与６０分で対照ビヒクル群の−１３％に対して＋１４％）、極大呼気流（投与１２０分で対照ビヒクル群の−４％に対して＋２３％）を引き上げる傾向にある。これらの効果は刺激的かつ気管支拡張性の呼吸特性を示す。
【００７４】
テオフィリン（１００ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）は、吸気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋６％に対して−６０％、ｐ＜０．００１）、呼気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋３％に対して−６３％、ｐ＜０．００１）および弛緩時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋０％に対して−６１％、ｐ＜０．００１）を明確かつ迅速に引き下げる。テオフィリンは、極大吸気流（投与６０分で対照ビヒクル群の−１３％に対して＋１１６％、ｐ＜０．００１）、極大呼気流（投与６０分で対照ビヒクル群の−７％に対して＋１２１％、ｐ＜０．００１）および呼吸速度（投与６０分で対照ビヒクル群の−９％に対して＋２２３％、ｐ＜０．００１）を明確かつ迅速に引き上げる。さらに、テオフィリンは呼吸休止時間を若干引き下げ（投与３００分で対照ビヒクル群の＋１５％に対して−２０％、ｐ＜０．０１）、および呼吸休止時間を改善する（投与３００分で対照ビヒクル群の＋１９％に対して−３７％、ｐ＜０．０５）。テオフィリンはまた、呼吸量を若干、徐々に引き下げる傾向にある（投与１２０分で対照ビヒクル群の＋２％に対して−１７％、ＮＳ）。これらの作用は、テオフィリンの刺激的かつ気管支拡張性の呼吸特性を示す。
【００７５】
試験の終了時に（すなわち、投与後３６０分）、Ｖ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ）、Ｌ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）およびテオフィリン（１００ｍｇ／ｋｇ）の投与後に挙動または病態徴候に変化は示されなかった。Ｖ０１１４処置群において、投与３６０分後、ラット瞳孔径を測定したところ、投与に関連して５０ｍｇ／ｋｇの増加が示された。同様にして、対照物質として用いたＬ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）で処置したラットの瞳孔径に相当な増加が示された。
【００７６】
これらの結果は、雄ウィスターラットに経口投与されたＶ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ）は３６０分の試験時間後に呼吸機能に作用を示さないことを示唆する。
【００７７】
他方、Ｌ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）は、その刺激的かつ気管支拡張性の呼吸特性を証明する作用を表す。
【００７８】
これらの結果を考え合わせると、Ｖ０１６２およびＬ００１３はそれらのＨ４受容体阻害活性に加えて抗ムスカリン能を示す。これら２つの特性は、閉塞性気管支肺障害、喘息またはいずれかの呼吸機能欠陥などのムスカリン性およびヒスタミン作動性Ｈ４受容体が関与する呼吸器系病態を予防、軽減および処置するための薬物形態を製造する目的で重要である。
【００７９】
実施例１０：動物における呼吸困難に対する、溶液または粉末状吸入剤で投与されるＶ０１６２の好ましい作用
霧化によりＶ０１６２を投与するための溶媒としてエタノールを用いる。さらに、無水粉末処方物を製造する。これらの試験において、Ｖ０１６２の溶液とＶ０１６２が乳吸入粉末の２つの生薬形態を評価する。Ｖ０１６２（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）溶液の霧化またはＶ０１６２含有無水粉末の微粉化によりラットを処置する。Ｖ０１６２を種々の濃度で投与し、その動物を曝露チャンバーに入れる。Ｖ０１６２曝露１５分後に、メタコリン刺激試験を行う。これらの動物を漸増濃度のメタコリンで処理する。示された値は各メタコリン投与段階の後の、気流に対して呼吸器系が示した抵抗の値である。これらの結果は、Ｖ０１６２が呼吸困難を軽減し、従って、残っている機能を高めることを示す。
【００８０】
【表７】
【００８１】
Ｈ４受容体の阻害を介した抗ムスカリン性および抗炎症性の二重の活性は、粉末または溶液の形態で吸入されたＶ０１６２に、閉塞性気管支肺障害または喘息などの気管支炎症および全般的に呼吸困難の処置に利用可能な真の特性を付与するものと思われる。
【図面の簡単な説明】
【００８２】
【図１】
【図２】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、一般に、ヒスタミンＨ４受容体の活性化により媒介される病態を局所、経口または肺経路によって予防または治療することを目的とした薬剤を製造するための、１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたは１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンならびにその薬学上許容される塩の使用に関する。１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンおよび１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンはラセミ体から誘導される。まず第一に、このラセミ体はアレルギー性疾患の処置に有効な薬剤である。それはＨ１クラスの抗ヒスタミン薬である。それは不斉炭素を有し、これが左旋性（Ｓ配置）と右旋性（Ｒ配置）の２つの異なる立体配置をもたらす。この２つの鏡像異性体およびラセミ混合物の薬理学的特性の分析は、これらの化合物が、予測されない方式でヒスタミンＨ４受容体に対する親和性を有することを示す。この特性は、Ｈ１受容体に対するそれらの親和性に加えてのものである。この特定の特性は先行技術では示されておらず、また、考慮されたことさえない。
【０００２】
Nakamura et al. (2000)により報告され、Morse et al. (2001)によりクローニングされたＨ４受容体は、Ｇｉ／ｏヘテロ二量体と結合した、アミノ酸３９０個のトランスメンブランタンパク質であり、その活性化は細胞内のカルシウム動員、ｃＡＭＰの減少およびＭＡＰキナーゼ経路の活性化を誘導する。この受容体は三次元的にＨ１受容体と類似しているが、それらは３５％の相同性しかない。
【０００３】
どちらかのヒスタミン受容体サブタイプの活性化は異なる生理学的または生理病理学的作用によって発現されると広く仮定される。この受容体選択性はヒスタミン受容体サブタイプの存在を正当化する。Ｈ１受容体の活性化はタンパク質Ｇｑの活性化を誘導し、Ｈ２受容体の活性化はタンパク質Ｇｓの活性化を誘導し、Ｈ３受容体の活性化はタンパク質Ｇｉ／ｏの活性化を誘導する(Lovenberg et al., 1999)。機能的に、これらの受容体の活性化は種々の分子作用により発現される。考慮するＨ３受容体リガンドによって、Ｈ４受容体に対して親和性を有するものがある。これらにはチオペラミド、クロベンプロピット(clobenpropit)、イメチット(imetit)およびＲ−α−メチルヒスタミンが含まれる。さらに、受容体サブタイプの分布もまた異なる。ヒトでは、Ｈ４受容体は主として骨髄細胞造血細胞（好酸球、好塩基球、肥満細胞、Ｔリンパ球および樹状細胞）などの末梢組織で発現される。
【０００４】
それらの解剖学的分布の他、生理病理学におけるヒスタミン受容体の役割の特異性は、これらのプロセスにおけるヒスタミンの関与によって異なる。アレルギーメディエーターとしてのヒスタミンの機能は十分確立されている。最近の多くのデータは、免疫応答の調節における機能、より厳密には最近報告されたＨ４受容体を介したものがヒスタミンにあるとするものである。受容体Ｈ４アンタゴニストはＴリンパ球の反応を阻害し、抗原刺激に対する細胞性免疫応答は、in vitroでは、アポトーシスタンパク質キナーゼ依存的プロセスに従ったＨ４受容体の不活性化により阻害される(Sugata et al., 2007)。ヒスタミンは、即時型アレルギー反応の重要なメディエーターであるが、抗原提示細胞の調節にも介入する(Dy et al., 2004)。よって、Ｈ４受容体の活性化は免疫適格樹状細胞において単球分化を誘導する。Ｈ４受容体が活性化されると、ＩＬ−１２ ｐ７０の低下が見られ、単球分化がもたらされる(Gutzner et al., 2005)。Takeshita et al. (2003)は、Ｈ４受容体が多核好中球の動員に直接介入したことを示しているが、この動員または走化性は肥満細胞に依存していた。
【０００５】
よって、走化性の低下、およびＨ４受容体の不活性化による好中球浸潤の低下は明確に確立されている。例えば、カラギーナンなどの薬剤の注射によって引き起こされる炎症のモデルまたはオボアルブミン刺激による炎症のモデルでは、Ｈ４受容体アンタゴニストの重要性が末梢炎症現象を制御するための推定因子として浮上する。大多数は次の生理病理学に関連する。
・アトピー性皮膚炎、皮膚掻痒症
・気管支炎症（喘息、閉塞性気管支肺障害）
・腸炎症（過敏性腸症候群）
・関節炎症（関節リウマチ）
・脈管形成とその結果である腫瘍発達を可能とする、腫瘍周辺間質の炎症
【０００６】
皮膚炎症／掻痒症におけるＨ４受容体の関与
ＪＮＪ７７７７１２０などの特定のリガンドによるＨ４受容体の阻害は、事前に皮下ヒスタミン注射により掻痒症が誘導された動物において掻きむしり(self-scratching)を制限する(Bell et al., 2004)。Ｈ４受容体アンタゴニストの活性はデスロラタジンまたはセチリジンなどのＨ１アンタゴニストの活性よりも高いと思われる。しかしながら、これらの「従来の」抗ヒスタミン薬の活性はこのモデルでは０ではなく、Ｈ１抗ヒスタミン薬の鎮痒作用はそれらの鎮静特性にあるのではないことを示している。さらに、この鎮痒活性は、鎮静作用を除いた特定のＨ１アンタゴニストに関しても示された。加えて、Ｈ４受容体の末梢局在は、その不活性化が中枢制御とは対照的に罹患部の局部制御を可能とする仮説を確立する。受容体Ｈ４発現はこれらのデータを確証する。実際に、Lippert et al. (2004)によれば、ヒト皮膚肥満細胞はヒスタミンＨ４受容体を発現し、これは皮膚炎症の自己分泌およびパラ分泌レギュレーターとしてのヒスタミンの役割を確かなものとする。さらに、アトピーのない患者のＴリンパ球では、ヒスタミンはＨ４受容体を介してＳＴＡＴ１タンパク質の活性化を阻害することによって働くことが示されている。このメッセンジャーは、免疫応答およびＴｈ１／Ｔｈ２バランスを制御する因子の転写を活性化するタンパク質である。アトピー患者のリンパ球の場合、シグナルはやはりヒスタミンによるＨ４受容体の活性化によって媒介され、最終的にインターフェロン−γの生成により発現される。この因子は炎症現象の増幅を引き起こす。アトピーのない患者の細胞では、ＳＴＡＴ１の発現はすでに低下しており、インターフェロン−γのレベルは低い。よって、Ｈ４受容体の阻害は健常なボランティアよりもアトピー患者でより有効である(Horr et al., 2006)。
【０００７】
従って、Ｈ４アンタゴニストと組み合わせたＨ１アンタゴニストの複合作用は、かゆみおよびその関連合併症といった掻痒症の皮膚科的帰結を制御することを意図した治療薬の選択肢の特性を構成すると結論付けることができる。
【０００８】
気道炎症におけるＨ４受容体の関与
気管支および肺胞上皮におけるＨ４受容体の発現は、検討を喘息または閉塞性気管支肺障害などの気管支炎症現象におけるその関与を調べるに導いた。オボアルブミン刺激を用いたこれらの病態の動物モデルは、これに関してのＨ４受容体の役割を特定することを可能とする(Dunford et al., 2006)。これまでに見られたように、特定のアンタゴニストを介したＨ４受容体の不活性化は走化性、および従って炎症を起こした肺上皮内の好中球浸潤を制限する。この帰結は、免疫および炎症カスケードの破壊である。実際に、ＣＤ４ Ｔリンパ球は、Ｈ４受容体が中和された際にはもはや活性化されない。さらに、ケモカインおよびサイトカインレベルが低下し、その帰結がＴリンパ球応答の低下である。よって、その起源が何であれ（中毒、アレルギー性反応または腫瘍により引き起こされる慢性呼吸困難）、肺上皮の炎症現象に対抗するための薬剤としていずれかのＨ４受容体アンタゴニストを提案することは論理にかなったことである。
【０００９】
腸管炎症におけるＨ４受容体の関与
Ｈ４受容体アンタゴニストによる炎症現象の阻害の別の例がVarga et al. (2005)の研究に示されている。結腸の炎症は、トリニトロベンゼンの投与により動物に引き起こされる。事前に、Ｈ４受容体アンタゴニストを用いた処置が適用される。最終的に、このように前処置された動物は対照動物よりも組織学的炎症スコアが低い。並行して、ＴＮＦ−αなどの炎症因子のレベルにおける低下も示されている。従って、過敏性腸症候群などの病態においてはＨ４受容体阻害剤の重要性が明らかである。
【００１０】
関節炎症におけるＨ４受容体の関与
関節リウマチの結果としての炎症現象においてもＨ４受容体の関与が確認されている。Ikawa et al. (2005)は、関節リウマチ患者の滑膜細胞のサンプルにおける間接的な転写物の測定（ＲＴ−ＰＣＲ）によるＨ４受容体の発現を分析した。これらの分析は、Ｈ４受容体の発現がこれらのサンプルにおいて極めて高いことを示し、ヒスタミンＨ４受容体が関節リウマチの結果としの炎症カスケードにおいて役割を果たすことを示唆している。結論として、滑膜細胞の炎症性病態におけるＨ４受容体阻害剤の重要性が明らかであると思われる。
【００１１】
腫瘍発達に関連する脈管形成におけるＨ４受容体の関与
ヒスタミン合成を触媒する酵素であるヒスチジンデカルボキシラーゼの活性が多くの腫瘍組織で見られる。これは必ずしも、ヒスタミンレベルの上昇が癌性現象の出現を起こすことを意味するのではないが、組織の癌化に伴う炎症がヒスタミンに関与することは明らかに確認される。ヒスチジンデカルボキシラーゼは結腸、乳房および子宮内膜の腫瘍、小細胞肺腫瘍および黒色腫で発現される。Cianchi et al. (2005)による研究は、Ｃａｃｏ２、ＨＴ２９およびＨＣＴ１１６細胞におけるこの酵素の過剰発現を実証した。in vitroにおいてヒスタミンは、これらの結腸腺癌培養物において炎症性因子、すなわちプロスタグランジンＥ２の生産の増加および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）の生産の増加を誘導した。Ｈ４受容体を介したヒスタミンのこのアゴニスト作用は細胞分裂の増強により発現される可能性がある。実際、これら２つのバイオマーカーは腫瘍周囲の血管網（脈管形成）の発達に関与する。血管発達に対するヒスタミンのアゴニスト作用はＨ４受容体阻害剤ならびにシクロオキシゲナーゼ１および２阻害剤によって拮抗作用を受ける。ＣＯＸ阻害剤の作用はそれらの抗炎症能のために既知であるが、Ｈ４受容体アンタゴニストの作用およびそれらの腫瘍周囲血管網発達現象に対する有効性が新たに記載される。これらのデータは脈管形成におけるＨ４受容体アンタゴニストの有用性を示唆する。さらに、これらの研究の結果は、Ｈ４受容体を遮断することによるヒスタミン活性の阻害が結腸腺癌培養細胞による細胞分裂を低下させることを示す。
【００１２】
上記に挙げた理由により、ヒスタミンにより媒介される末梢炎症の阻害に関して完全な作用を持つためには、この候補阻害剤がＨ１受容体とＨ４受容体の双方に対して二重の結合作用を有するべきであると思われる。
【００１３】
Ｈ４受容体が関与する皮膚科病態に関して、抗ヒスタミン薬により誘導される有害作用を軽減する目的では、候補分子が、角膜層を経てその皮下標的であるＨ４受容体発現肥満細胞に到達する傾向を有しているので、経皮経路が有利であると思われる。同様に、気道の炎症性病態に関しては、目的の薬剤の全身浸透を制限することにより、おそらくは気管支上皮に直接標的を到達させる生薬形態を提供することが有利である。
【００１４】
よって、薬剤の活性代謝物の血漿レベルの制限はまた、具体的投与経路にかかわらず、最初に投与された薬剤の作用を悪化し得る、または副作用の頻度および強度を高め得る活性代謝物を産生しない特定の肝臓代謝にあり得る。
【００１５】
さらに、製品の半減期が長いほど投与頻度が少ないことを意味し、治療コンプライアンスの助けとなる。
【発明の開示】
【００１６】
本発明の目的は、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（メキタジンの右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称で分類）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（メキタジンの左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称で分類）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称で分類）の特定の予期されない特性を実証することである。
【００１７】
本発明は、ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態の予防または治療を目的とした薬剤を製造するための、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、またはその薬学上許容される塩の使用に関する。
【００１８】
本発明の別の特徴によれば、ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態は、アトピー性皮膚炎、掻痒症、ならびに喘息および閉塞性気管支肺障害などの気管支炎症から選択される。
【００１９】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、標的ヒスタミンＨ４受容体と拮抗するに十分な有効成分含量を含んでなる経口投与に好適な形態で提供される。
【００２０】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、１μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、有利には０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇの投与量を可能とする経口投与単位で提供される。
【００２１】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は錠剤の形態で提供される。
【００２２】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、喘息または閉塞性気管支肺障害の処置に特に適した経口スプレー溶液または吸入用粉末の形態で提供される。
【００２３】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、ヒスタミンＨ４受容体およびムスカリン性受容体が同時に関与する病態を予防または治療するために使用される。
【００２４】
本発明の別の特徴によれば、上述の受容体が関与する病態は呼吸器系病態から選択される。
【００２５】
本発明の別の特徴によれば、上述の病態は気腫、喘息および閉塞性気管支肺障害から選択される。
【００２６】
本発明の別の特徴によれば、本発明は１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンを含有する製品に及ぶ。
【００２７】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、その局所経路による投与に適した形態で提供される。
【００２８】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、有効成分濃度が０．０１重量％〜１０重量％の、ゲル、エマルションまたはクリームとして提供される。
【００２９】
本発明の別の特徴によれば、薬剤は、アトピー性皮膚炎および掻痒症を処置するために使用される。
【００３０】
アトピー性皮膚炎は、アトピー性湿疹とも呼ばれる。例えば、細菌、真菌またはアレルゲンなどの種々の起源の痒い病巣を特徴とする皮膚の炎症性疾患である。
【００３１】
一般に、本発明の目的は、種々のタイプの皮膚科病巣に関連して現れるかゆい皮膚の症状と一般的にみなされる掻痒症を処置することである。
【００３２】
最後に、本発明はまた、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンもしくは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたはその薬学上許容される塩、ならびにヒスタミンＨ４受容体の拮抗作用による抗炎症療法における同時、個別または拡張使用のための組合せ製品としての、Ｈ１抗ヒスタミン薬、コルチコイド、遅効性または即効性抗ムスカリン作用薬およびβ２−メミティクスのクラスの薬剤を含有する製品にも及ぶ。
【００３３】
以下の実施例は、
・ヒトヒスタミンＨ４受容体に対するin vitro親和性が、マイクロモル濃度の上記３種類の化合物で有効であること
・これらの化合物がＨ４受容体に関するインバースアゴニストとして振る舞うこと（この特性は先行技術には記載されたことがない）
・化合物Ｖ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３の経皮または経粘膜経路が考えられ、このファルマコフォアに特異的であること
・これらの化合物の半減期が長く、これらの製品の潜在的適応に適合する投与計画の交換を可能とすること
を示す。
【００３４】
本発明の実施例として集約されたこれら全ての特性の組合せによれば、予期せず、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称で分類）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称で分類）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称で分類）が、上記に挙げられたものなどのＨ４受容体が関与する病態において有効な化合物であることが示される。
【実施例】
【００３５】
実施例１：in vitroにおける１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称でコード）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称でコード）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称でコード）によるヒトヒスタミンＨ４受容体に対する親和性
この研究の目的は、in vitroにおいてヒトヒスタミンＨ４受容体に対する化合物の親和性定数を決定することである。選択されたモデルは、ヒトＨ４受容体をコードするｃＤＮＡにより安定的にトランスフェクトされたＨＥＫ−２９３細胞である(Liu et al., 2001)。まず、各種受容体を発現する細胞の、その受容体と１００％結合することも確認されているリガンドに対する親和性を決定する。この組換え受容体に対する最適リガンドは１０ｎＭトリチウム化ヒスタミンである。受容体結合は次のように定義される：総結合と過剰量の非放射性リガンドの存在下で決定された非特異的結合との差。これらの結果をリガンドモデル（１００％）で得られた最適結合のパーセンテージとして表す。
【００３６】
【表１】
【００３７】
これらの結果は、Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３が、予期されない様式でヒトヒスタミンＨ４受容体と強く結合する化合物であることを示す。
【００３８】
第二の一連の実験において、これらの３つの化合物の親和性定数を、ヒスタミンＨ４受容体を安定に発現するＣＨＯ細胞からの膜調製物に対するトリチウム化ヒスタミン放射性リガンドとの競合によって厳密に決定する。
【００３９】
【表２】
【００４０】
これらの結果は、これら３つの化合物がヒスタミンＨ４受容体に対して親和性を示すことを示す。これらの親和性はマイクロモルレベルである。Ｈ４受容体に対するこれらの化合物の活性は、これらの３つの化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３が皮膚障壁を通過する高い能力を持つという事実により増強される。さらに、生物体内でのそれらの長い半減期はこの受容体標的のレベルに対する残留作用を示唆する。
【００４１】
実施例２：化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３の、Ｈ４受容体のインバースアゴニストとしての同定
これらの研究は、化合物１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（右旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１６２の名称でコード）、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（左旋性鏡像異性体；本明細書ではＶ０１１４の名称でコード）および２つの鏡像異性体のラセミ混合物１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン（本明細書ではＬ００１３の名称でコード）のＨ４受容体（アゴニスト、アンタゴニスト、インバースアゴニスト）に対する機能的影響を定義する目的で行った。
【００４２】
Ｇタンパク質は、多くの必須細胞機能において分子スイッチとして働くタンパク質ファミリーに属す。それらの調節活性はＧＤＰに関する不活性型とＧＴＰに関する活性型の間で循環するそれらの能力に基づき、後者は活動シグナルをシグナルカスケードの下流に位置するいわゆるエフェクタータンパク質へ伝達する。Ｈ４受容体に対する３つの化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３の機能的影響を特徴付けるため、Ｇタンパク質活性化試験を用いた研究を行った。簡単に言うと、この試験は、受容体に対する種々の化合物の結合の際に誘導されるＧタンパク質結合［３５Ｓ］放射性標識ＧＴＰの量に着目する。
【００４３】
これらの結果を付属の図１および２に示されている図の形で報告する。
【００４４】
図１ａに示されるＧタンパク質活性化試験の結果は、３つの化合物Ｖ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３は、チオペラミドおよび選択的Ｈ４アンタゴニストＪＮＪ７７７７１２０で見られたように、Ｈ４受容体に対して０．１μＭヒスタミンにより誘導された活性化作用に拮抗することを示す。Ｈ４受容体は構成的活性を有することを知られており、図１ｂは、化合物Ｖ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３はＨ４受容体のインバースアゴニストとしてのチオペラミドにように振る舞う（アゴニストの不在下で基本活性を低下させる）が、化合物ＪＮＪ７７７７１２０はニュートラルアンタゴニストであることを示す。
【００４５】
図２ａ〜２ｄは、ニュートラルアンタゴニストＪＮＪ７７７７１２０がこの活性を遮断することを示しているので、この化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４、Ｌ００１３およびチオペラミドのインバースアゴニスト活性は、明らかにＨ４受容体に対する作用によるものである。これらの結果は全体として、化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３がＨ４受容体のインバースアゴニストであることを初めて示す。この受容体不活性化に対する機能はＶ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３をＪＮＪ７７７７１２０などのニュートラルアンタゴニストファミリーから区別する。
【００４６】
実施例３：マウスヒスタミン誘発足底浮腫モデルにおけるＶ０１１４およびＬ００１３のin vivo抗炎症活性
この実験の目的は、マウスにおけるヒスタミン誘発足底浮腫に対するＶ０１１４、Ｖ０１６２およびＬ００１３の潜在的抗炎症活性を検出することであった。この試験の原理はKreutner et al. (2000)の発表により示唆される。全ての群が１０匹の動物からなった。処理前と、炎症誘発剤処理の１２０、９０、６０および３０分前に経口経路により製品（２５ｍｌ／ｋｇ）を投与した。６０分後、イソフラン麻酔下で足への注射（１０μｌ）を行った。右足に１３μｇの二塩酸ヒスタミンを、左足に生理食塩水（ヒスタミンビヒクル）を施した。注射の３０分後に頸椎脱臼により動物を安楽死させた。足を採取し、秤量した。浮腫は、足の重量の差（右足の重量−左足の重量）により定量した。
【００４７】
【表３】
【００４８】
Ｖ０１１４およびＬ００１３は、同時にビヒクル前処理した群と比較して、強力かつ統計学的に有意な抗炎症作用を誘導する。炎症誘発剤を足へ注射する９０分および１２０分前に動物を前処理した際には、このＶ０１１４に対する活性（−５８％〜−７２％）およびＬ００１３に対する活性（−５４％〜−８２％）はより高い。これらの試験条件下で、１２０分前、９０分前、６０分前および３０分前に経口形路により投与されたＶ０１１４とＬ００１３は、マウスの足におけるヒスタミン浮腫に対して強力な抗炎症作用を示す。Ｖ０１６２はこの浮腫を軽減せず、このモデルにおいて抗ヒスタミン作用が無いことを示す傾向にある。しかしながら、これらの製品は経口経路により投与される。以下の試験において、静脈内経路により直接投与した場合でも製品Ｖ０１６２はやはり有効である。結論として、この試験は、in vitroにおいて示されたＨ４抗ヒスタミン活性はin vivoにおける動物でも確認されることを示す。
【００４９】
実施例４：マウスヒスタミン誘発気管支収縮モデルにおける静脈内経路による投与後のＶ０１１４およびＬ００１３の抗ヒスタミン活性
これらの試験の目的は、Konzett (1940)モルモットモデルにおけるヒスタミン誘発気管支収縮に対する３つの化合物Ｖ０１６２、Ｖ０１１４およびＬ００１３の活性を評価することである。これまでの本発明者らは、これらの３つの化合物がin vitroではＨ４受容体に対して抗ヒスタミン活性を示すが、他方、in vivoではＶ０１１４とＬ００１３だけが、炎症がヒスタミンにより生じる場合に抗炎症を示すことを見出している。Ｖ０１６２は、経口経路により投与される場合にはその活性を消失することも示されている。これらの３つの製品の静脈内経路による活性を分析する目的で、以下の試験を行った。動物に、定圧呼吸ポンプの手段により、過剰量の空気によって人工呼吸を行う。肺へ浸透しない空気はセンサーに到達し、毎回の吸気を測定する。見られた変動は気管支緊張の変化を表す。ヒスタミンにより誘発される気管支収縮は、センサーによって測定される余剰量の増加を生じる。種々の化合物を、予めカテーテルを留置した頚静脈経路により投与する。その後、ヒスタミン刺激を静脈内経路により７μｇ／ｋｇの用量で行う。
【００５０】
【表４】
【００５１】
このモデルにおいてヒスタミンは気管支収縮を誘発する。静脈経路により投与すると、３つの化合物はヒスタミンの作用の阻害を誘導する。よって、この投与経路は標的に到達するために重要であると思われる。しかし、この結果は、３０分後の測定を考えた場合には違ってくる。Ｖ０１６２はそのアンタゴニスト活性を消失すると思われるが、この活性はＶ０１１４で最大である。
【００５２】
これらの試験は、in vivoにおいて、静脈投与後、これらの化合物は肺レベルでこのメディエーターを生じる現象に対するヒスタミンの作用に対抗することを示す。
【００５３】
実施例５：１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの経皮経路
掻痒症におけるＨ４受容体の重要性が最近確認された。従って、皮膚掻痒症に含まれるヒスタミンＨ４受容体を標的とするアンタゴニストは、掻痒症に関連する挙動を打破するため、そして結果として掻痒症により引き起こされる皮膚病巣によって発生する重複感染を避けるための選択手段となる。同様に、このようなＨ４抗ヒスタミン薬は、これまでにように示されたように、アトピーの原因に見られる徴候の予防または排除に有用であることが分かる。この目的で、皮膚のマスト細胞上のその標的に到達させるために、皮膚障壁を通過し得るＨ４抗ヒスタミン薬を持つことが有用である。これらの試験の目的は、１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの、皮膚障壁を通過する能力を評価することである。ヒト皮膚外植片を動的拡散チャンバー（拡散領域０．６３６ｃｍ２）中に、その真皮を受容体媒体（水０．９％、ＮａＣｌ０．９％、ＮａＮ３０．１％／エタノール；７５／２５；ｖ／ｖ）と接触させて置く。流速は１．５ｍｌ／時である。試験は３２℃で行う。Ｔ＝０の時点で、化合物を含有する溶液（５００μｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌまたは１０μＣｉ／細胞）を入れる。受容液を３、６、９、１２、１６、２０および２４時間の時点でサンプリングする。
【００５４】
結果は、１６時間後にほぼ一定の最大化合物流に達し、２４時間目の蓄積量が５．４μｇ／ｃｍ２／時；１０７μｇ／ｃｍ２であることを示す。
【００５５】
２４時間目の表皮および真皮の化合物量（図３ｂ）は濃度勾配を示し、従って、皮膚におけるこの分子の一様な分布を示す。
・表皮＝５６±１７μｇ／ｃｍ２
・真皮＝４５±１４μｇ／ｃｍ２
・合計＝１０１μｇ／ｃｍ２
・受容体ゾーン＝１０７±２８μｇ／ｃｍ２
【００５６】
この試験は、１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンが経皮経路に良好な能力（およそ１００μｇ／ｃｍ２／２４時）を有する分子であることを示す。２４時間後に皮膚に貯蓄されている化合物の量は、２４時間後の受容液に見られる蓄積量と同等か、または高くさえある。
【００５７】
実施例６：ラット閉塞性慢性気管支肺障害モデルにおける化合物Ｖ０１１４およびＶ０１６２の抗炎症活性の評価
肺炎症の軽減における化合物の重要性を以下のモデルで評価した。動物を、常用的霧化によりカドミウム投与に曝す。やがて動物は炎症反応と常習的に肺気腫を生じる。このモデルを、Ｈ４受容体の活性化により媒介される好中球性炎症反応の持続に関連する慢性呼吸器系疾患を処置するために潜在的に有効な分子を同定するのに用いるために、ラットでバリデートした。適当な病態となったところで、１０μｇ〜５０μｇで異なる用量の目的化合物を霧化により肺投与することで動物を毎日処置した。
【００５８】
結果は、供試化合物が呼吸能、最も著しくは呼吸速度を部分的に回復させ、吸気流と呼気流を増すことを示す。さらに、試験の終了時、気管支肺胞液を採取し、免疫適格細胞を数える。結果は、処置群をプラシーボのみを受容した動物と比べた場合、浸潤好中球の増加を示す。
【００５９】
これらの結果をまとめると、ヒスタミンＨ４受容体の拮抗作用を介した供試化合物の抗炎症活性が確認される。
【００６０】
これら３つの化合物は、Ｈ４受容体に対して受容体親和性を示す。本発明者らは、それらはこの受容体のインバースアゴニストであることを確定した。in vitroおよびin vivoにおいてこれらの抗炎活性が示され、受け入れられているモデルで確認された。さらに、これらの化合物は、局所投与（皮膚または肺）を可能とする薬物動態および経皮浸透の品質を有する。これらの３つの化合物のＨ４受容体に対する特定の特性および結果としての治療的使用はこれまでには示されたことが無い。これらの特性を考え合わせて、あるいは個別に考えて、以上に具体的に示されている。
【００６１】
これらの実施例は、ヒスタミンＨ４受容体により媒介される病態における１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの合理的使用を示す。さらに、これまでに確認されている、左旋性誘導体（１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）およびラセミ混合物（１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）のＨ１受容体阻害剤としての活性は、これら２つの製品にＨ４およびＨ１抗ヒスタミンの二重の特性を与える。この二重の能力は、これらの化合物を、これまでに先行技術で記載されている抗ヒスタミン製品よりも優れたものとする。同様に、他所で明らかに確認されている右旋性誘導体（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）の抗ムスカリン活性も、そのＨ４抗ヒスタミン活性により増強される。この二重の特性は、先行技術では、化合物（１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）、（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）および（１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）に関して記載されていない。
【００６２】
本発明はさらに、Ｖ０１６２およびＬ００１３に関しても、喘息または閉塞性気管支肺障害患者の炎症現象および呼吸困難の阻害における抗Ｈ４および抗Ｍ１／Ｍ３の二重の活性を示した。
【００６３】
受容体Ｈ４は、免疫適格細胞、最も顕著には好酸球およびマクロファージの動員が関与する病態に関与している。従って、気腫、閉塞性気管支肺障害または喘息の際に、肺レベルへの好酸球の浸潤およびマクロファージの動員を制限する目的でこの受容体のリガンドを使用することが考えられた。この活性に鎮痙活性を補完することが賢明であり得る。
【００６４】
予期されないことに、Ｖ０１６２または（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）およびＬ００１３または（１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）は、相補的抗コリン活性を示す。この活性は、in vivoにおいて、左旋性鏡像異性体Ｖ０１１４または（１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）では見られない。
【００６５】
これらの２つの特性を１つの化合物中に組み合わせると、喘息および閉塞性気管支肺障害などの呼吸器系病態を処置するためにＶ０１６２および／またはＬ００１３の使用を考えることが可能となる。
【００６６】
実施例７：ムスカリン性受容体に対するＶ０１６２の親和性
この試験の目的は、アセチルコリンのＭ１、Ｍ２およびＭ３受容体への結合に対する化合物の阻害活性を評価することである。この目的で、種々の用量の供試化合物：Ｖ０１６２、Ｌ００１３およびＶ０１１４の存在下で固定量の放射性標識アセチルコリンをインキュベートする。
【００６７】
【表５】
【００６８】
従って、in vitroにおいて、Ｖ０１６２およびＬ００１３は、気管支筋肉の収縮の誘発、調節および維持に関与するムスカリン性受容体に対して極めて高い親和性を示す。左旋性鏡像異性体は、アセチルコリンの、３つのムスカリン性受容体への結合をあまり阻害しない。この違いは、in vivoにおいては、Ｖ０１６２とＬ００１３だけがアセチルコリンの作用に拮抗するので、いっそう顕著である。
【００６９】
実施例８：呼吸器筋肉収縮に対するアセチルコリン作用の阻害
モルモットを麻酔し、人工呼吸器を付ける。肺へ浸透する空気をセンサーで測定する。従って、吸気を毎回定量する。次に、アセチルコリンの静脈注射により気管支収縮を誘発させる。このアセチルコリンの作用は気管支緊張の直接的かつ即時的変化である。アセチルコリンの気管支収縮作用は作用の極大時にｍｍで評価する。アセチルコリン注射の２０分後に、種々の供試製品：Ｖ０１６２、Ｌ００１３およびＶ０１１４を投与する。各製品の作用を参照法であるアトロピンの場合と比較する。
【００７０】
【表６】
【００７１】
結果は、Ｖ０１６２およびＬ００１３がアセチルコリンにより誘発された気管支痙攣の阻害を誘導し得る２つの製品であることを示す。他方、Ｖ０１１４にはあまり効果は無い。
【００７２】
実施例９：Ｌ００１３の気管支拡張作用、Ｖ０１１４には気管支拡張作用は無い
呼吸器機能に対するＶ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ）の作用を、雄ウィスターラット（一用量８匹）に経口投与（ｐｅｒ ｏｓ）した後に分析する。同じ条件下で投与したＬ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）を参照物質として用いる。同じ試験条件下で投与したテオフィリン（１００ｍｇ／ｋｇ）も参照物質として用いる。蒸留水中、カルボキシメチルセルロース（０．５％）を対照ビヒクルとして用いる。試験期間の終了時に（すなわち、その用量を投与した３６０分後）、動物の挙動ならびにそれらの瞳孔の直径（縮瞳／散瞳）を評価する。血中の物質濃度を分析するために、各ラット（テオフィリン群に属するもの以外）から血液サンプルを採取する。対照ビヒクルは、吸気時間、呼気時間、極大吸気流、極大呼気流、呼吸量、呼吸速度、弛緩時間または呼吸休止時間に作用を持たないが、３６０分の試験時間後の呼吸休止時間を改善する。投与後の呼吸休止時間に若干の増加が見られた（１２０分の時点で対照ビヒクル群の＋２４％、ｐ＜０．０１）。Ｖ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）は、３６０分の試験時間の後の対照ビヒクル群に対し、評価した９つの呼吸パラメーターのいずれにも有意な作用は無い。
【００７３】
Ｌ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）は呼吸器速度を有意に高める（投与６０分目で、対照ビヒクルの−９％に対して最大＋８０％、ｐ＜０．０５）。Ｌ００１３は吸気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋６％に対して−２６％）、呼気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋３％に対して−２４％）、弛緩時間（投与１２０分で対照ビヒクル群の−２％に対して−３０％）および呼吸量（投与６０分で対照ビヒクル群の−６％に対して−２６％）を引き下げる傾向にある。それはまた、極大吸気流（投与６０分で対照ビヒクル群の−１３％に対して＋１４％）、極大呼気流（投与１２０分で対照ビヒクル群の−４％に対して＋２３％）を引き上げる傾向にある。これらの効果は刺激的かつ気管支拡張性の呼吸特性を示す。
【００７４】
テオフィリン（１００ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．）は、吸気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋６％に対して−６０％、ｐ＜０．００１）、呼気時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋３％に対して−６３％、ｐ＜０．００１）および弛緩時間（投与６０分で対照ビヒクル群の＋０％に対して−６１％、ｐ＜０．００１）を明確かつ迅速に引き下げる。テオフィリンは、極大吸気流（投与６０分で対照ビヒクル群の−１３％に対して＋１１６％、ｐ＜０．００１）、極大呼気流（投与６０分で対照ビヒクル群の−７％に対して＋１２１％、ｐ＜０．００１）および呼吸速度（投与６０分で対照ビヒクル群の−９％に対して＋２２３％、ｐ＜０．００１）を明確かつ迅速に引き上げる。さらに、テオフィリンは呼吸休止時間を若干引き下げ（投与３００分で対照ビヒクル群の＋１５％に対して−２０％、ｐ＜０．０１）、および呼吸休止時間を改善する（投与３００分で対照ビヒクル群の＋１９％に対して−３７％、ｐ＜０．０５）。テオフィリンはまた、呼吸量を若干、徐々に引き下げる傾向にある（投与１２０分で対照ビヒクル群の＋２％に対して−１７％、ＮＳ）。これらの作用は、テオフィリンの刺激的かつ気管支拡張性の呼吸特性を示す。
【００７５】
試験の終了時に（すなわち、投与後３６０分）、Ｖ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ）、Ｌ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）およびテオフィリン（１００ｍｇ／ｋｇ）の投与後に挙動または病態徴候に変化は示されなかった。Ｖ０１１４処置群において、投与３６０分後、ラット瞳孔径を測定したところ、投与に関連して５０ｍｇ／ｋｇの増加が示された。同様にして、対照物質として用いたＬ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）で処置したラットの瞳孔径に相当な増加が示された。
【００７６】
これらの結果は、雄ウィスターラットに経口投与されたＶ０１１４（０．５、５０および１００ｍｇ／ｋｇ）は３６０分の試験時間後に呼吸機能に作用を示さないことを示唆する。
【００７７】
他方、Ｌ００１３（１００ｍｇ／ｋｇ）は、その刺激的かつ気管支拡張性の呼吸特性を証明する作用を表す。
【００７８】
これらの結果を考え合わせると、Ｖ０１６２およびＬ００１３はそれらのＨ４受容体阻害活性に加えて抗ムスカリン能を示す。これら２つの特性は、閉塞性気管支肺障害、喘息またはいずれかの呼吸機能欠陥などのムスカリン性およびヒスタミン作動性Ｈ４受容体が関与する呼吸器系病態を予防、軽減および処置するための薬物形態を製造する目的で重要である。
【００７９】
実施例１０：動物における呼吸困難に対する、溶液または粉末状吸入剤で投与されるＶ０１６２の好ましい作用
霧化によりＶ０１６２を投与するための溶媒としてエタノールを用いる。さらに、無水粉末処方物を製造する。これらの試験において、Ｖ０１６２の溶液とＶ０１６２が乳吸入粉末の２つの生薬形態を評価する。Ｖ０１６２（１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン）溶液の霧化またはＶ０１６２含有無水粉末の微粉化によりラットを処置する。Ｖ０１６２を種々の濃度で投与し、その動物を曝露チャンバーに入れる。Ｖ０１６２曝露１５分後に、メタコリン刺激試験を行う。これらの動物を漸増濃度のメタコリンで処理する。示された値は各メタコリン投与段階の後の、気流に対して呼吸器系が示した抵抗の値である。これらの結果は、Ｖ０１６２が呼吸困難を軽減し、従って、残っている機能を高めることを示す。
【００８０】
【表７】
【００８１】
Ｈ４受容体の阻害を介した抗ムスカリン性および抗炎症性の二重の活性は、粉末または溶液の形態で吸入されたＶ０１６２に、閉塞性気管支肺障害または喘息などの気管支炎症および全般的に呼吸困難の処置に利用可能な真の特性を付与するものと思われる。
【図面の簡単な説明】
【００８２】
【図１】
【図２】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アトピー性皮膚炎、掻痒症、または喘息および閉塞性気管支肺障害などの気管支炎症から選択される、ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態を予防または治療することを目的とした薬剤を製造するための、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンもしくは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、またはその薬学上許容される塩の使用。
【請求項２】
薬剤が１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンである、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
薬剤が１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンである、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
薬剤が、標的ヒスタミンＨ４受容体と拮抗するに十分な有効成分含量を含んでなる経口投与に好適な形態で提供される、請求項１または３に記載の使用。
【請求項５】
薬剤が、１μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、有利には０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇの投与量を可能とする経口投与単位で提供される、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
薬剤が錠剤の形態で提供される、請求項４または５に記載の使用。
【請求項７】
薬剤が、喘息または閉塞性気管支肺障害の処置に特に適した経口スプレー溶液または吸入用粉末の形態で提供される、請求項４または５に記載の使用。
【請求項８】
薬剤が、ヒスタミンＨ４受容体とムスカリン性受容体が同時に関与する病態を予防または治療することを意図したものである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記受容体が関与する病態が呼吸器系病態から選択されるものである、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
前記病態が、気腫、喘息および閉塞性気管支肺障害から選択されるものである、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
薬剤が、その局所経路による投与に適した形態で提供される、請求項１または２に記載の使用。
【請求項１３】
薬剤が、有効成分濃度が０．０１重量％〜１０重量％の、ゲル、エマルションまたはクリームとして提供される、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
薬剤が、アトピー性皮膚炎および掻痒症を処置するために使用される、請求項１２または１３に記載の使用。
【請求項１５】
薬剤が１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンである、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンもしくは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたはその薬学上許容される塩、ならびにヒスタミンＨ４受容体の拮抗作用による抗炎症療法における同時、個別または拡張使用のための組合せ製品としての、Ｈ１抗ヒスタミン薬、コルチコイド、遅効性または即効性抗ムスカリン作用薬およびβ２−メミティクスのクラスの薬剤を含有する、製品。
【請求項１】
アトピー性皮膚炎、掻痒症、または喘息および閉塞性気管支肺障害などの気管支炎症から選択される、ヒスタミンＨ４受容体が関与する病態を予防または治療することを目的とした薬剤を製造するための、１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンもしくは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、またはその薬学上許容される塩の使用。
【請求項２】
薬剤が１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンである、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
薬剤が１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンである、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
薬剤が、標的ヒスタミンＨ４受容体と拮抗するに十分な有効成分含量を含んでなる経口投与に好適な形態で提供される、請求項１または３に記載の使用。
【請求項５】
薬剤が、１μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、有利には０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇの投与量を可能とする経口投与単位で提供される、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
薬剤が錠剤の形態で提供される、請求項４または５に記載の使用。
【請求項７】
薬剤が、喘息または閉塞性気管支肺障害の処置に特に適した経口スプレー溶液または吸入用粉末の形態で提供される、請求項４または５に記載の使用。
【請求項８】
薬剤が、ヒスタミンＨ４受容体とムスカリン性受容体が同時に関与する病態を予防または治療することを意図したものである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記受容体が関与する病態が呼吸器系病態から選択されるものである、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
前記病態が、気腫、喘息および閉塞性気管支肺障害から選択されるものである、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンの、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
薬剤が、その局所経路による投与に適した形態で提供される、請求項１または２に記載の使用。
【請求項１３】
薬剤が、有効成分濃度が０．０１重量％〜１０重量％の、ゲル、エマルションまたはクリームとして提供される、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
薬剤が、アトピー性皮膚炎および掻痒症を処置するために使用される、請求項１２または１３に記載の使用。
【請求項１５】
薬剤が１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンである、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
１０−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジン、１０−［（３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンもしくは１０−［（３Ｒ，３Ｓ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルメチル］−１０Ｈ−フェノチアジンまたはその薬学上許容される塩、ならびにヒスタミンＨ４受容体の拮抗作用による抗炎症療法における同時、個別または拡張使用のための組合せ製品としての、Ｈ１抗ヒスタミン薬、コルチコイド、遅効性または即効性抗ムスカリン作用薬およびβ２−メミティクスのクラスの薬剤を含有する、製品。
【図１】
【図２】
【図２】
【公表番号】特表２０１１−５０５４１１（Ｐ２０１１−５０５４１１Ａ）
【公表日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３６４５７（Ｐ２０１０−５３６４５７）
【出願日】平成２０年１２月４日（２００８．１２．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０６６７８７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７１６２５
【国際公開日】平成２１年６月１１日（２００９．６．１１）
【出願人】（５０００３３４８３）ピエール、ファーブル、メディカマン (73)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１２月４日（２００８．１２．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０６６７８７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７１６２５
【国際公開日】平成２１年６月１１日（２００９．６．１１）
【出願人】（５０００３３４８３）ピエール、ファーブル、メディカマン (73)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]