ヒトＩＬ−１２に結合するヒト抗体およびその産生法
【課題】ヒトＩＬ−１２に結合するヒト抗体、並びに、前記ヒト抗ＩＬ−１２抗体を用いた、ＩＬ−１２に関連する急性または慢性疾患の治療または予防方法を提供する。
【解決手段】ヒトインターロイキン１２（ｈＩＬ−１２）に特異的に結合し、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでｈＩＬ−１２に高い親和性を有し、ｈＩＬ−１２活性を中和するヒト抗体、または、その抗原結合部分。前記ヒト抗体発現用の核酸、ベクター、および宿主細胞ならびに組換えヒト抗体の合成法。ｈＩＬ−１２活性が同定された障害を罹患したヒト被験体におけるｈＩＬ−１２の検出またはｈＩＬ−１２活性の阻害のための使用。
【解決手段】ヒトインターロイキン１２（ｈＩＬ−１２）に特異的に結合し、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでｈＩＬ−１２に高い親和性を有し、ｈＩＬ−１２活性を中和するヒト抗体、または、その抗原結合部分。前記ヒト抗体発現用の核酸、ベクター、および宿主細胞ならびに組換えヒト抗体の合成法。ｈＩＬ−１２活性が同定された障害を罹患したヒト被験体におけるｈＩＬ−１２の検出またはｈＩＬ−１２活性の阻害のための使用。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト抗体が中和抗体である、ヒトＩＬ−１２に結合する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２】
ヒトＩＬ−１２に結合するように、好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置において活性を向上させるアミノ酸残基により選択的に変異させた、ヒト抗体またはその抗体結合部分を含む、選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項３】
ヒトＩＬ−１２に結合するように、好ましい選択的変異位置において活性を向上させるアミノ酸残基により選択的に変異させたヒト抗体またはその抗体結合部分を含む、選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項４】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、１つを超える好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置で活性を向上させるアミノ酸残基により選択的に変異された、請求項２に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項５】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、３箇所以下の好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置において選択的に変異された、請求項４に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項６】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、２箇所以下の好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置で選択的に変異された、請求項４に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項７】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、ファージディスプレイ技術を用いて同一の抗原に対して抗体を選択した場合に達成可能なレベルを超えるように目標特異性親和性レベルを達成するように選択的に変異される、請求項２に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項８】
前記選択的変異ヒト抗体が、少なくとも１つの所望の特性または特徴をさらに保持する、請求項７に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項９】
ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１０】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−２ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−７Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１１】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−３ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−８Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１２】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−４ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１３】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−５ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−１０Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１４】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−５ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−１１Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１５】
以下の特徴：
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１６】
配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項１５に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１７】
配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項１５に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１８】
配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１９】
以下の特徴：
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２０】
配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項１９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２１】
配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項１９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２２】
配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、請求項１９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２３】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２４】
配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項２３に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２５】
配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項２３に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２６】
配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２７】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ定常部からなる群から選択される重鎖定常部を含む、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項２８】
前記抗体重鎖定常部がＩｇＧ１である、請求項２７に記載の単離ヒト抗体。
【請求項２９】
Ｆａｂフラグメントである、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３０】
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３１】
短鎖Ｆｖフラグメントである、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３２】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害するか、
ｂ）配列番号４０４〜配列番号４６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有するか、
ｃ）配列番号５３４〜配列番号５７９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３３】
配列番号３３５〜配列番号４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２または配列番号５０６〜配列番号５３３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３４】
配列番号２８８〜配列番号３３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１または配列番号４７０〜配列番号５０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３５】
配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３６】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ定常部からなる群から選択される重鎖定常部を含む、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３７】
前記抗体重鎖定常部がＩｇＧ１である、請求項３６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３８】
Ｆａｂフラグメントである、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３９】
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４０】
短鎖Ｆｖフラグメントである、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４１】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４２】
配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項４１に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４３】
配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項４１記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４４】
配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４５】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ定常部からなる群から選択される重鎖定常部を含む、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４６】
前記抗体重鎖定常部がＩｇＧ１である、請求項４５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４７】
Ｆａｂフラグメントである、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４８】
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４９】
短鎖Ｆｖフラグメントである、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項５０】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置に１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ４、配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５１】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５２】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ４、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５３】
配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項５４】
抗体重鎖可変部をコードする、請求項５３に記載の単離核酸。
【請求項５５】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号１９のアミノ酸配列を含む、請求項５４に記載の単離核酸。
【請求項５６】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号２１のアミノ酸配列を含む、請求項５４に記載の単離核酸。
【請求項５７】
配列番号２３のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変部をコードする、請求項５６に記載の単離核酸。
【請求項５８】
配列番号１８のアミノ酸を含む軽鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項５９】
抗体軽鎖可変部をコードする、請求項５８に記載の単離核酸。
【請求項６０】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項５９に記載の単離核酸。
【請求項６１】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号２２のアミノ酸配列を含む、請求項５９に記載の単離核酸。
【請求項６２】
配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変部をコードする、請求項６１に記載の単離核酸。
【請求項６３】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６４】
配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項６５】
抗体重鎖可変部をコードする、請求項６４に記載の単離核酸。
【請求項６６】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号２７のアミノ酸配列を含む、請求項６５に記載の単離核酸。
【請求項６７】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号２９のアミノ酸配列を含む、請求項６５に記載の単離核酸。
【請求項６８】
配列番号３１のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変部をコードする、請求項６７に記載の単離核酸。
【請求項６９】
配列番号２６のアミノ酸を含む軽鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項７０】
抗体軽鎖可変部をコードする、請求項６９に記載の単離核酸。
【請求項７１】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号２８のアミノ酸配列を含む、請求項７０に記載の単離核酸。
【請求項７２】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号３０のアミノ酸配列を含む、請求項７０に記載の単離核酸。
【請求項７３】
配列番号３２のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変部をコードする、請求項７２に記載の単離核酸。
【請求項７４】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）ＶＨ３生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基との変異を有し、
ｃ）Ｖλ１生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基との変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７５】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号５９５〜６６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置における活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有し、
ｃ）配列番号６６９〜６７５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基との変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７６】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）ＣＯＳ−３生殖系列アミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有し、
ｃ）ＤＰＬ８生殖系列アミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７７】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）ＶＨ３生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は他のＶＨ３生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ２に構造的に類似したＣＤＲ２および他のＶＨ３生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ１に構造的に類似したＣＤＲ１を含み、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有し、
ｃ）Ｖλ１生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は他のＶλ１生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ２に構造的に類似したＣＤＲ２および他のＶλ１生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ１に構造的に類似したＣＤＲ１を含み、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７８】
前記変異が前記重鎖ＣＤＲ３中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７９】
前記変異が前記軽鎖ＣＤＲ３中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８０】
前記変異が前記重鎖ＣＤＲ２中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８１】
前記変異が前記軽鎖ＣＤＲ２中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８２】
前記変異が前記重鎖ＣＤＲ１中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８３】
前記変異が前記軽鎖ＣＤＲ１中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８４】
ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む可変部を有する抗体重鎖および
ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変部を有する抗体軽鎖を含む、組換え発現ベクター。
【請求項８５】
請求項８４に記載の組換え発現ベクターが移入されている、宿主細胞。
【請求項８６】
ヒトＩＬ−１２に結合するヒト抗体が細胞によって合成されるまで、培養培地中で請求項８５に記載の宿主細胞を培養する工程を包含する、ヒトＩＬ−１２に結合するヒト抗体の合成法。
【請求項８７】
ヒトＩＬ−１２ならびにヒヒＩＬ−１２、マーモセットＩＬ−１２、チンパンジーＩＬ−１２、カニクイザルＩＬ−１２、およびアカゲザルＩＬ−１２からなる群から選択される少なくとも１つのさらなる霊長類ＩＬ−１２の活性を中和するがマウスＩＬ−１２の活性を中和しない、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８８】
請求項１〜５２、請求項７４〜８３、および請求項８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物。
【請求項８９】
請求項１〜５２、請求項７４〜８３、および請求項８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分およびさらなる薬剤を含む組成物。
【請求項９０】
前記さらなる薬剤が治療薬である、請求項８９に記載の組成物。
【請求項９１】
前記治療薬が、ブデノシド、上皮成長因子、コルチコステロイド、シクロスポリン、スルファラジン、アミノサリチレート、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、メトロニダゾール、リポキシゲナーゼインヒビター、メサラミン、オルサラジン、バルサラジド、抗酸化薬、トロンボキサンインヒビター、ＩＬ−１レセプタアンタゴニスト、抗ＩＬ−１βモノクローナル抗体、抗ＩＬ−６モノクローナル抗体、成長因子、エラスターゼインヒビター、ピリジニル−イミダゾール化合物、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ，およびＰＤＧＦの抗体またはアゴニスト、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ９０の抗体またはそのリガンド、メトトレキセート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノマイド、ＮＳＡＩＤ、イブプロフェン、コルチコステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼインヒビター、アデノシンアゴニスト、抗血栓剤、捕体インヒビター、アドレナリン作用薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ，ｐ３８、ＭＡＰキナーゼインヒビター、ＩＬ−１β変換酵素インヒビター、ＴＮＦα変換酵素インヒビター、Ｔ細胞シグナル伝達インヒビター、メタロプロテイナーゼインヒビター、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンギオテンシン変換酵素インヒビター、可溶性サイトカインレセプタ、可溶性ｐ５５ＴＮＦレセプタ、可溶性ｐ７５ＴＮＦレセプタ、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１３、およびＴＧＦβからなる群から選択される、請求項９０に記載の組成物。
【請求項９２】
前記治療薬が、抗ＴＮＦ抗体およびその抗体フラグメント、ＴＮＦＲ−Ｉｇ構築物、ＴＡＣＥインヒビター、ＰＤＥ４インヒビター、コルチコステロイド、ブデノシド、デキサメタゾン、スルファサラジン、５−アミノサリチル酸、オルサラジン、ＩＬ−１β変換酵素インヒビター、ＩＬ−１ｒａ、チロシンキナーゼインヒビター、６−メルカプトプリン、ならびにＩＬ−１１からなる群から選択される、請求項９０に記載の治療組成物。
【請求項９３】
前記治療薬が、コルチコステロイド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキセート、４−アミノピリジン、チザニジン、インターフェロンβ１ａ、インターフェロンβ１ｂ、コポリマー１、高圧酸素、静脈内免疫グロブリン、クラブリビン（ｃｌａｂｒｉｂｉｎｅ）、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、およびＰＤＧＦの抗体またはアゴニスト、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５，ＣＤ６９、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ９０の抗体またはそのリガンド、メトトレキセート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノマイド、ＮＳＡＩＤ、イブプロフェン、コルチコステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼインヒビター、アデノシンアゴニスト、抗血栓剤、捕体インヒビター、アドレナリン作用薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８またはＭＡＰキナーゼインヒビター、ＩＬ−１β変換酵素インヒビター、ＴＡＣＥインヒビター、Ｔ細胞シグナル伝達インヒビター、キナーゼインヒビター、メタロプロテイナーゼインヒビター、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンギオテンシン変換酵素インヒビター、可溶性サイトカインレセプタ、可溶性ｐ５５ＴＮＦレセプタ、可溶性ｐ７５ＴＮＦレセプタ、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、ｓＩＬ−１３Ｒ、抗Ｐ７、ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド（ＰＳＧＬ）、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、およびＴＧＦβからなる群から選択される、請求項９０に記載の治療組成物。
【請求項９４】
ヒトＩＬ−１２活性を阻害するようにヒトＩＬ−１２と請求項４４に記載の抗体とを接触させる工程を包含する、ヒトＩＬ−１２活性の阻害法。
【請求項９５】
ヒト対象におけるヒトＩＬ−１２活性が阻害されるようにヒト対象に請求項４４に記載の抗体を投与する工程を包含する、ＩＬ−１２活性が有害な障害を有するヒト被験体におけるヒトＩＬ−１２活性の阻害法。
【請求項９６】
前記障害が、慢性関節リウマチ、変形性関節炎、若年型慢性関節炎、ライム関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、強直性脊椎炎、全身性紅斑性狼瘡、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、多発性硬化症、インスリン依存性糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、皮膚炎、強皮症、甲状腺炎、移植片対宿主疾患、臓器移植拒絶、臓器移植に関連する急性もしくは慢性免疫疾患、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化症、血管内凝固症候群、川崎病、グレーブス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、結節性多発性動脈炎、ヴェグナー肉芽腫症、ヘーノホ−シェーンライン紫斑病、腎臓の微視的脈管炎、慢性滑動性肝炎、シェーグレン症候群、ブドウ膜炎、敗血症、敗血症性ショック、敗血症症候群、成人呼吸窮迫症候群、悪液質、感染症、寄生虫症、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、重症筋無力症、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳卒中、原発性胆汁性肝硬変、線維性肺疾患、溶血性貧血、悪性腫瘍、心不全、および心筋梗塞からなる群から選択される、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記障害がクローン病である、請求項９５に記載の方法。
【請求項９８】
前記障害が多発性硬化症である、請求項９５に記載の方法。
【請求項９９】
前記障害が慢性関節リウマチである、請求項９５に記載の方法。
【請求項１００】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５３、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択される好ましい選択的変異誘発位置を選択する工程と、
ｃ）前記選択された好ましい選択的変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異することによって変異抗体またはその抗原結合物の第１のパネルを作製する工程と、
ｄ）１つの選択的変異位置の変異により予め同定した目標活性または部分的目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるかどうかを決定するために、前記変異抗体またはその抗原結合部分の第１のパネルの活性を評価する工程と、
ｅ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｆ）前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分が予め同定した目標活性または部分的目標活性を有するかどうかを決定するために、前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
ｇ）工程ｄ）または工程ｆ）で予め同定した目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られないか部分的活性のみを有する抗体が得られる場合、前記方法はＨ３５、Ｈ５０、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｌ３０Ａ、およびＬ９６からなる群から選択されるさらなるアミノ酸残基を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にさらに変異して、変異抗体またはその抗原結合部分の第２のパネルを作製する工程をさらに包含し、
ｈ）Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｌ３０Ａ、およびＬ９６からなる群から選択される１つのアミノ酸残基の変異により予め同定した目標活性またはその部分的活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるかどうかを決定するために、前記変異抗体またはその抗原結合部分の第２のパネルの活性を評価する工程と、
ｉ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す工程ｇ）の各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｊ）前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分が予め同定した目標活性または部分的標的活性を有するかどうかを決定するために、前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
ｋ）工程ｈ）または工程ｊ）で予め同定した目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られないか部分的活性のみを有する抗体が得られる場合、前記方法はＨ３３Ｂ、Ｈ５２Ｂ、およびＬ３１Ａからなる群から選択されるさらなるアミノ酸残基を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にさらに変異することによって変異抗体またはその抗原結合部分の第３のパネルを作製する工程をさらに包含し、
ｌ）Ｈ３３Ｂ、Ｈ５２Ｂ、およびＬ３１Ａからなる群から選択される１つのアミノ酸残基の変異により予め同定した目標活性またはその部分的活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるかどうかを決定するために、前記変異抗体またはその抗原結合部分の第３のパネルの活性を評価する工程と、
ｍ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す工程ｋ）の各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｎ）前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分が予め同定した目標活性または部分的標的活性を有し、それによって予め同定した目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるのかどうかを決定するために、前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
を包含する、予め同定した目標活性を達成するための抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１０１】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価する工程と、
ｅ）前記所望の抗体活性が得られない場合、少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ｂ）〜ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１０２】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０４】
前記好ましい位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０５】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０６】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価する工程と、
ｅ）前記所望の抗体活性が得られない場合、少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ｂ）〜ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す各変異を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１０７】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０９】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１０】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１１】
ａ）組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記選択された好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記適切な発現系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、を包含し、前記特性または特徴は抗体中で維持されなければならないものである、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１１２】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１４】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１５】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１６】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記選択された好ましい変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程であって、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、
ｆ）少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ａ）〜ｅ）を繰り返す工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｈ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程とを包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１１７】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１１８】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１１９】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１２０】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１２１】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択した接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、を包含し、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１２２】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２４】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１２５】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程であって、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、
ｆ）少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ａ）〜ｅ）を繰り返す工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｈ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１２６】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２７】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２８】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２９】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１３０】
ａ）親親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基に変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３１】
ａ）親親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基に変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６での位置でもないＣＤＲ内の少なくとも１つの他の位置について工程ｂ）〜工程ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して、活性を向上させるアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３２】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られるがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択した接触または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程とを包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３３】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、非ファージディスプレイ系で発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４での位置でもないＣＤＲ内の少なくとも１つの他の位置について工程ｂ）〜工程ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記組換え抗体またはその抗原結合部分と比較して、２つの活性を向上させるアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性および他の特性または特徴を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３４】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを評価する工程と、を包含し、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、他の特性に影響を与えない抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３５】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、
ｆ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６での位置でもない少なくとも１つのＣＤＲ位置について工程ｂ）〜工程ｅ）を繰り返す工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示すが少なくとも１つの特性または特徴に影響を与えない少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、少なくとも１つの特性または特徴を保持した組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｈ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して、２つの活性を向上させるアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性および少なくとも１つの特性または特徴を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３６】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、非ファージディスプレイ系で発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３７】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、非ファージディスプレイ系で発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性および少なくとも１つの他の特性または特徴の保持を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４での位置でもない少なくとも１つの他のＣＤＲ位置について工程ｂ）〜工程ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示し、且つ少なくとも１つの他の特性または特徴に影響を与えない少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの他の保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記組換え抗体またはその抗原結合部分と比較して、活性を向上させる２つのアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性および少なくとも１つの他の特性または特徴の保持を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３８】
前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、または１３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３９】
ヒトＩＬ−１２が検出されるように、ＩＬ−１２と請求項１〜５２、７４〜８３、および８７のいずれか１項に記載のヒトＩＬ−１２と抗体またはその抗原結合部分とを接触させる工程を包含する、ヒトＩＬ−１２の検出法。
【請求項１４０】
前記ヒトＩＬ−１２がｉｎ ｖｉｔｒｏで検出される、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４１】
前記ヒトＩＬ−１２が診断目的で生体サンプル中で検出される、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４２】
治療における請求項１〜５２、７４〜８３、および８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分の使用。
【請求項１４３】
ＩＬ−１２活性が有害である障害の治療用の薬物製造における請求項１〜５２、７４〜８３、および８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分の使用。
【請求項１４４】
前記障害が、慢性関節リウマチ、変形性関節炎、若年型慢性関節炎、ライム関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、強直性脊椎炎、全身性紅斑性狼瘡、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、多発性硬化症、インスリン依存性糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、皮膚炎、強皮症、甲状腺炎、移植片対宿主疾患、臓器移植拒絶、臓器移植に関連する急性もしくは慢性免疫疾患、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化症、血管内凝固症候群、川崎病、グレーブス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、結節性多発性動脈炎、ヴェグナー肉芽腫症、ヘーノホ−シェーンライン紫斑病、腎臓の微視的脈管炎、慢性滑動性肝炎、シェーグレン症候群、ブドウ膜炎、敗血症、敗血症性ショック、敗血症症候群、成人呼吸窮迫症候群、悪液質、感染症、寄生虫症、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、重症筋無力症、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳卒中、原発性胆汁性肝硬変、線維性肺疾患、溶血性貧血、悪性腫瘍、心不全、および心筋梗塞からなる群から選択される、請求項１４３に記載の使用。
【請求項１４５】
前記障害がクローン病である、請求項１４３に記載の使用。
【請求項１４６】
前記障害が多発性硬化症である、請求項１４３に記載の使用。
【請求項１４７】
前記障害が慢性関節リウマチである、請求項１４３に記載の使用。
【請求項１】
ヒト抗体が中和抗体である、ヒトＩＬ−１２に結合する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２】
ヒトＩＬ−１２に結合するように、好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置において活性を向上させるアミノ酸残基により選択的に変異させた、ヒト抗体またはその抗体結合部分を含む、選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項３】
ヒトＩＬ−１２に結合するように、好ましい選択的変異位置において活性を向上させるアミノ酸残基により選択的に変異させたヒト抗体またはその抗体結合部分を含む、選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項４】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、１つを超える好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置で活性を向上させるアミノ酸残基により選択的に変異された、請求項２に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項５】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、３箇所以下の好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置において選択的に変異された、請求項４に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項６】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、２箇所以下の好ましい選択的変異位置、接触位置、または過剰変異位置で選択的に変異された、請求項４に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項７】
前記ヒト抗体またはその抗原結合部分が、ファージディスプレイ技術を用いて同一の抗原に対して抗体を選択した場合に達成可能なレベルを超えるように目標特異性親和性レベルを達成するように選択的に変異される、請求項２に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項８】
前記選択的変異ヒト抗体が、少なくとも１つの所望の特性または特徴をさらに保持する、請求項７に記載の選択的変異ヒトＩＬ−１２抗体。
【請求項９】
ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１０】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−２ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−７Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１１】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−３ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−８Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１２】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−４ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１３】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−５ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−１０Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１４】
表面プラスモン共鳴で測定すると１×１０−５ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−１１Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害する、請求項９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１５】
以下の特徴：
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１６】
配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項１５に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１７】
配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項１５に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１８】
配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１９】
以下の特徴：
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２０】
配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項１９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２１】
配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項１９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２２】
配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、請求項１９に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２３】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２４】
配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項２３に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２５】
配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項２３に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２６】
配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２７】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ定常部からなる群から選択される重鎖定常部を含む、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項２８】
前記抗体重鎖定常部がＩｇＧ１である、請求項２７に記載の単離ヒト抗体。
【請求項２９】
Ｆａｂフラグメントである、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３０】
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３１】
短鎖Ｆｖフラグメントである、請求項２６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３２】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害するか、
ｂ）配列番号４０４〜配列番号４６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有するか、
ｃ）配列番号５３４〜配列番号５７９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３３】
配列番号３３５〜配列番号４０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２または配列番号５０６〜配列番号５３３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３４】
配列番号２８８〜配列番号３３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１または配列番号４７０〜配列番号５０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３５】
配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３６】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ定常部からなる群から選択される重鎖定常部を含む、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３７】
前記抗体重鎖定常部がＩｇＧ１である、請求項３６に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３８】
Ｆａｂフラグメントである、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項３９】
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４０】
短鎖Ｆｖフラグメントである、請求項３５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４１】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有し、
ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４２】
配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２をさらに有する、請求項４１に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４３】
配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１をさらに有する、請求項４１記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４４】
配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変部および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４５】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ定常部からなる群から選択される重鎖定常部を含む、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４６】
前記抗体重鎖定常部がＩｇＧ１である、請求項４５に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４７】
Ｆａｂフラグメントである、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４８】
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項４９】
短鎖Ｆｖフラグメントである、請求項４４に記載の単離ヒト抗体。
【請求項５０】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置に１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ４、配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５１】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５２】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ４、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５３】
配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項５４】
抗体重鎖可変部をコードする、請求項５３に記載の単離核酸。
【請求項５５】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号１９のアミノ酸配列を含む、請求項５４に記載の単離核酸。
【請求項５６】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号２１のアミノ酸配列を含む、請求項５４に記載の単離核酸。
【請求項５７】
配列番号２３のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変部をコードする、請求項５６に記載の単離核酸。
【請求項５８】
配列番号１８のアミノ酸を含む軽鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項５９】
抗体軽鎖可変部をコードする、請求項５８に記載の単離核酸。
【請求項６０】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項５９に記載の単離核酸。
【請求項６１】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号２２のアミノ酸配列を含む、請求項５９に記載の単離核酸。
【請求項６２】
配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変部をコードする、請求項６１に記載の単離核酸。
【請求項６３】
ａ）ｉｎ ｖｉｔｒｏＰＨＡアッセイにおいて１×１０−９Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、および配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有し、
ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、または接触位置または過剰変異位置で１つまたは複数のアミノ酸置換を有するその変異体を含み、前記変異体が配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１を含む抗体より１０倍以下高いｋｏｆｆ速度を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６４】
配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項６５】
抗体重鎖可変部をコードする、請求項６４に記載の単離核酸。
【請求項６６】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号２７のアミノ酸配列を含む、請求項６５に記載の単離核酸。
【請求項６７】
前記抗体重鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号２９のアミノ酸配列を含む、請求項６５に記載の単離核酸。
【請求項６８】
配列番号３１のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変部をコードする、請求項６７に記載の単離核酸。
【請求項６９】
配列番号２６のアミノ酸を含む軽鎖ＣＤＲ３をコードする単離核酸。
【請求項７０】
抗体軽鎖可変部をコードする、請求項６９に記載の単離核酸。
【請求項７１】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ２が配列番号２８のアミノ酸配列を含む、請求項７０に記載の単離核酸。
【請求項７２】
前記抗体軽鎖可変部のＣＤＲ１が配列番号３０のアミノ酸配列を含む、請求項７０に記載の単離核酸。
【請求項７３】
配列番号３２のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変部をコードする、請求項７２に記載の単離核酸。
【請求項７４】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）ＶＨ３生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基との変異を有し、
ｃ）Ｖλ１生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基との変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７５】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）配列番号５９５〜６６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置における活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有し、
ｃ）配列番号６６９〜６７５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基との変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７６】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）ＣＯＳ−３生殖系列アミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有し、
ｃ）ＤＰＬ８生殖系列アミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７７】
以下の特徴：
ａ）ヒトＩＬ−１２に結合し、表面プラスモン共鳴で測定すると０．１ｓ−１以下のｋｏｆｆ速度定数でヒトＩＬ−１２から解離するか、ｉｎ ｖｉｔｒｏフィトヘマグルチニン芽細胞増殖アッセイ（ＰＨＡアッセイ）において１×１０−６Ｍ以下のＩＣ５０でフィトヘマグルチニン芽細胞増殖を阻害し、
ｂ）ＶＨ３生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変部を有し、前記重鎖可変部は他のＶＨ３生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ２に構造的に類似したＣＤＲ２および他のＶＨ３生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ１に構造的に類似したＣＤＲ１を含み、前記重鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有し、
ｃ）Ｖλ１生殖系列ファミリーメンバーから選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変部を有し、前記軽鎖可変部は他のＶλ１生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ２に構造的に類似したＣＤＲ２および他のＶλ１生殖系列ファミリーメンバー由来のＣＤＲ１に構造的に類似したＣＤＲ１を含み、前記軽鎖可変部は接触または過剰変異位置での活性を向上させるアミノ酸残基による変異を有する、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７８】
前記変異が前記重鎖ＣＤＲ３中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７９】
前記変異が前記軽鎖ＣＤＲ３中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８０】
前記変異が前記重鎖ＣＤＲ２中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８１】
前記変異が前記軽鎖ＣＤＲ２中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８２】
前記変異が前記重鎖ＣＤＲ１中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８３】
前記変異が前記軽鎖ＣＤＲ１中に存在する、請求項７４、請求項７５、請求項７６、または請求項７７に記載の単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８４】
ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む可変部を有する抗体重鎖および
ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変部を有する抗体軽鎖を含む、組換え発現ベクター。
【請求項８５】
請求項８４に記載の組換え発現ベクターが移入されている、宿主細胞。
【請求項８６】
ヒトＩＬ−１２に結合するヒト抗体が細胞によって合成されるまで、培養培地中で請求項８５に記載の宿主細胞を培養する工程を包含する、ヒトＩＬ−１２に結合するヒト抗体の合成法。
【請求項８７】
ヒトＩＬ−１２ならびにヒヒＩＬ−１２、マーモセットＩＬ−１２、チンパンジーＩＬ−１２、カニクイザルＩＬ−１２、およびアカゲザルＩＬ−１２からなる群から選択される少なくとも１つのさらなる霊長類ＩＬ−１２の活性を中和するがマウスＩＬ−１２の活性を中和しない、単離ヒト抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８８】
請求項１〜５２、請求項７４〜８３、および請求項８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物。
【請求項８９】
請求項１〜５２、請求項７４〜８３、および請求項８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分およびさらなる薬剤を含む組成物。
【請求項９０】
前記さらなる薬剤が治療薬である、請求項８９に記載の組成物。
【請求項９１】
前記治療薬が、ブデノシド、上皮成長因子、コルチコステロイド、シクロスポリン、スルファラジン、アミノサリチレート、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、メトロニダゾール、リポキシゲナーゼインヒビター、メサラミン、オルサラジン、バルサラジド、抗酸化薬、トロンボキサンインヒビター、ＩＬ−１レセプタアンタゴニスト、抗ＩＬ−１βモノクローナル抗体、抗ＩＬ−６モノクローナル抗体、成長因子、エラスターゼインヒビター、ピリジニル−イミダゾール化合物、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ，およびＰＤＧＦの抗体またはアゴニスト、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ９０の抗体またはそのリガンド、メトトレキセート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノマイド、ＮＳＡＩＤ、イブプロフェン、コルチコステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼインヒビター、アデノシンアゴニスト、抗血栓剤、捕体インヒビター、アドレナリン作用薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ，ｐ３８、ＭＡＰキナーゼインヒビター、ＩＬ−１β変換酵素インヒビター、ＴＮＦα変換酵素インヒビター、Ｔ細胞シグナル伝達インヒビター、メタロプロテイナーゼインヒビター、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンギオテンシン変換酵素インヒビター、可溶性サイトカインレセプタ、可溶性ｐ５５ＴＮＦレセプタ、可溶性ｐ７５ＴＮＦレセプタ、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１３、およびＴＧＦβからなる群から選択される、請求項９０に記載の組成物。
【請求項９２】
前記治療薬が、抗ＴＮＦ抗体およびその抗体フラグメント、ＴＮＦＲ−Ｉｇ構築物、ＴＡＣＥインヒビター、ＰＤＥ４インヒビター、コルチコステロイド、ブデノシド、デキサメタゾン、スルファサラジン、５−アミノサリチル酸、オルサラジン、ＩＬ−１β変換酵素インヒビター、ＩＬ−１ｒａ、チロシンキナーゼインヒビター、６−メルカプトプリン、ならびにＩＬ−１１からなる群から選択される、請求項９０に記載の治療組成物。
【請求項９３】
前記治療薬が、コルチコステロイド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキセート、４−アミノピリジン、チザニジン、インターフェロンβ１ａ、インターフェロンβ１ｂ、コポリマー１、高圧酸素、静脈内免疫グロブリン、クラブリビン（ｃｌａｂｒｉｂｉｎｅ）、ＴＮＦ、ＬＴ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、およびＰＤＧＦの抗体またはアゴニスト、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５，ＣＤ６９、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ９０の抗体またはそのリガンド、メトトレキセート、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、レフルノマイド、ＮＳＡＩＤ、イブプロフェン、コルチコステロイド、プレドニゾロン、ホスホジエステラーゼインヒビター、アデノシンアゴニスト、抗血栓剤、捕体インヒビター、アドレナリン作用薬、ＩＲＡＫ、ＮＩＫ、ＩＫＫ、ｐ３８またはＭＡＰキナーゼインヒビター、ＩＬ−１β変換酵素インヒビター、ＴＡＣＥインヒビター、Ｔ細胞シグナル伝達インヒビター、キナーゼインヒビター、メタロプロテイナーゼインヒビター、スルファサラジン、アザチオプリン、６−メルカプトプリン、アンギオテンシン変換酵素インヒビター、可溶性サイトカインレセプタ、可溶性ｐ５５ＴＮＦレセプタ、可溶性ｐ７５ＴＮＦレセプタ、ｓＩＬ−１ＲＩ、ｓＩＬ−１ＲＩＩ、ｓＩＬ−６Ｒ、ｓＩＬ−１３Ｒ、抗Ｐ７、ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド（ＰＳＧＬ）、抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、およびＴＧＦβからなる群から選択される、請求項９０に記載の治療組成物。
【請求項９４】
ヒトＩＬ−１２活性を阻害するようにヒトＩＬ−１２と請求項４４に記載の抗体とを接触させる工程を包含する、ヒトＩＬ−１２活性の阻害法。
【請求項９５】
ヒト対象におけるヒトＩＬ−１２活性が阻害されるようにヒト対象に請求項４４に記載の抗体を投与する工程を包含する、ＩＬ−１２活性が有害な障害を有するヒト被験体におけるヒトＩＬ−１２活性の阻害法。
【請求項９６】
前記障害が、慢性関節リウマチ、変形性関節炎、若年型慢性関節炎、ライム関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、強直性脊椎炎、全身性紅斑性狼瘡、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、多発性硬化症、インスリン依存性糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、皮膚炎、強皮症、甲状腺炎、移植片対宿主疾患、臓器移植拒絶、臓器移植に関連する急性もしくは慢性免疫疾患、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化症、血管内凝固症候群、川崎病、グレーブス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、結節性多発性動脈炎、ヴェグナー肉芽腫症、ヘーノホ−シェーンライン紫斑病、腎臓の微視的脈管炎、慢性滑動性肝炎、シェーグレン症候群、ブドウ膜炎、敗血症、敗血症性ショック、敗血症症候群、成人呼吸窮迫症候群、悪液質、感染症、寄生虫症、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、重症筋無力症、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳卒中、原発性胆汁性肝硬変、線維性肺疾患、溶血性貧血、悪性腫瘍、心不全、および心筋梗塞からなる群から選択される、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記障害がクローン病である、請求項９５に記載の方法。
【請求項９８】
前記障害が多発性硬化症である、請求項９５に記載の方法。
【請求項９９】
前記障害が慢性関節リウマチである、請求項９５に記載の方法。
【請求項１００】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５３、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択される好ましい選択的変異誘発位置を選択する工程と、
ｃ）前記選択された好ましい選択的変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異することによって変異抗体またはその抗原結合物の第１のパネルを作製する工程と、
ｄ）１つの選択的変異位置の変異により予め同定した目標活性または部分的目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるかどうかを決定するために、前記変異抗体またはその抗原結合部分の第１のパネルの活性を評価する工程と、
ｅ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｆ）前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分が予め同定した目標活性または部分的目標活性を有するかどうかを決定するために、前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
ｇ）工程ｄ）または工程ｆ）で予め同定した目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られないか部分的活性のみを有する抗体が得られる場合、前記方法はＨ３５、Ｈ５０、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｌ３０Ａ、およびＬ９６からなる群から選択されるさらなるアミノ酸残基を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にさらに変異して、変異抗体またはその抗原結合部分の第２のパネルを作製する工程をさらに包含し、
ｈ）Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｌ３０Ａ、およびＬ９６からなる群から選択される１つのアミノ酸残基の変異により予め同定した目標活性またはその部分的活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるかどうかを決定するために、前記変異抗体またはその抗原結合部分の第２のパネルの活性を評価する工程と、
ｉ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す工程ｇ）の各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｊ）前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分が予め同定した目標活性または部分的標的活性を有するかどうかを決定するために、前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
ｋ）工程ｈ）または工程ｊ）で予め同定した目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られないか部分的活性のみを有する抗体が得られる場合、前記方法はＨ３３Ｂ、Ｈ５２Ｂ、およびＬ３１Ａからなる群から選択されるさらなるアミノ酸残基を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にさらに変異することによって変異抗体またはその抗原結合部分の第３のパネルを作製する工程をさらに包含し、
ｌ）Ｈ３３Ｂ、Ｈ５２Ｂ、およびＬ３１Ａからなる群から選択される１つのアミノ酸残基の変異により予め同定した目標活性またはその部分的活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるかどうかを決定するために、前記変異抗体またはその抗原結合部分の第３のパネルの活性を評価する工程と、
ｍ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す工程ｋ）の各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｎ）前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分が予め同定した目標活性または部分的標的活性を有し、それによって予め同定した目標活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるのかどうかを決定するために、前記組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
を包含する、予め同定した目標活性を達成するための抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１０１】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価する工程と、
ｅ）前記所望の抗体活性が得られない場合、少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ｂ）〜ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す各変異を段階的に組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、
を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１０２】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０４】
前記好ましい位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０５】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０６】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価する工程と、
ｅ）前記所望の抗体活性が得られない場合、少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ｂ）〜ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す各変異を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１０７】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０９】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１０】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１１】
ａ）組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記選択された好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記適切な発現系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、を包含し、前記特性または特徴は抗体中で維持されなければならないものである、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１１２】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１４】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１５】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１６】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記選択された好ましい変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程であって、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、
ｆ）少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ａ）〜ｅ）を繰り返す工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｈ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程とを包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１１７】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１１８】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１１９】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１２０】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
【請求項１２１】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択した接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、を包含し、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１２２】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２４】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１２５】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）相補性決定領域（ＣＤＲ）内で好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を変異について選択することによって選択された好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置を同定する工程と、
ｃ）前記好ましい選択的変異誘発位置または接触位置または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程であって、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、
ｆ）少なくとも１つの他の好ましい選択的変異誘発位置、接触位置または過剰変異位置について工程ａ）〜ｅ）を繰り返す工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｈ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１２６】
前記接触位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２７】
前記過剰変異位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５３、およびＬ９３からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２８】
前記好ましい選択的変異誘発位置が、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ５２、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ５０、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２９】
前記接触位置が、Ｌ５０およびＬ９４からなる群から選択され、前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１３０】
ａ）親親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基に変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３１】
ａ）親親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基に変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６での位置でもないＣＤＲ内の少なくとも１つの他の位置について工程ｂ）〜工程ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して、活性を向上させるアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３２】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られるがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない組換え抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択した接触または過剰変異位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、前記非ファージディスプレイ系におけるパネルを発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程とを包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３３】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、非ファージディスプレイ系で発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４での位置でもないＣＤＲ内の少なくとも１つの他の位置について工程ｂ）〜工程ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示す少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記組換え抗体またはその抗原結合部分と比較して、２つの活性を向上させるアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性および他の特性または特徴を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３４】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを評価する工程と、を包含し、前記特性または特徴は維持されなければならないものである、他の特性に影響を与えない抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３５】
ａ）親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製する工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分を評価する工程と、
ｆ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６での位置でもない少なくとも１つのＣＤＲ位置について工程ｂ）〜工程ｅ）を繰り返す工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示すが少なくとも１つの特性または特徴に影響を与えない少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、少なくとも１つの特性または特徴を保持した組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｈ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して、２つの活性を向上させるアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性および少なくとも１つの特性または特徴を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３６】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、非ファージディスプレイ系で発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、少なくとも１つの他の特性または特徴の変化について親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３７】
ａ）ファージディスプレイ系での選択によって得られたがその活性を前記ファージディスプレイ系における変異誘発によってさらに改良することができない親抗体またはその抗原結合部分を得る工程と、
ｂ）変異のために、Ｈ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、およびＬ９６以外の位置で相補性決定領域（ＣＤＲ）内でアミノ酸残基を選択する工程と、
ｃ）前記選択位置を少なくとも２つの他のアミノ酸残基にそれぞれ変異させることによって変異抗体またはその抗原結合部分のパネルを作製し、非ファージディスプレイ系で発現させる工程と、
ｄ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して前記変異抗体またはその抗原結合部分のパネルの活性および少なくとも１つの他の特性または特徴の保持を評価することによって活性を向上させるアミノ酸残基を同定する工程と、
ｅ）工程ｂ）で選択された位置でもＨ３０、Ｈ３１、Ｈ３１Ｂ、Ｈ３２、Ｈ３３、Ｈ３５、Ｈ５０、Ｈ５２、Ｈ５２Ａ、Ｈ５３、Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８、Ｈ９５、Ｈ９６、Ｈ９７、Ｈ９８、Ｈ１０１、Ｌ３０、Ｌ３１、Ｌ３２、Ｌ３４、Ｌ５０、Ｌ５２、Ｌ５３、Ｌ５５、Ｌ９１、Ｌ９２、Ｌ９３、およびＬ９４での位置でもない少なくとも１つの他のＣＤＲ位置について工程ｂ）〜工程ｄ）を繰り返す工程と、
ｆ）前記親抗体またはその抗原結合部分中に改良された活性を有することを示し、且つ少なくとも１つの他の特性または特徴に影響を与えない少なくとも２つの各活性を向上させるアミノ酸残基を組み合わせて、組み合わせ抗体またはその抗原結合部分を形成させる工程と、
ｇ）前記親抗体またはその抗原結合部分と比較して改良された活性および少なくとも１つの他の保持された特性または特徴を有する抗体またはその抗原結合部分が得られるまで、前記組換え抗体またはその抗原結合部分と比較して、活性を向上させる２つのアミノ酸残基を有する組み合わせ抗体またはその抗原結合部分の活性および少なくとも１つの他の特性または特徴の保持を評価する工程と、を包含する、抗体またはその抗原結合部分の活性の改良法。
【請求項１３８】
前記他の特性または特徴が、他のタンパク質との非交差反応性の保存、他のヒト組織との非相互反応性の保存、エピトープ認識の保存、および生殖系列免疫グロブリン配列に密接な配列を有する抗体からなる群から選択される、請求項１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、または１３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３９】
ヒトＩＬ−１２が検出されるように、ＩＬ−１２と請求項１〜５２、７４〜８３、および８７のいずれか１項に記載のヒトＩＬ−１２と抗体またはその抗原結合部分とを接触させる工程を包含する、ヒトＩＬ−１２の検出法。
【請求項１４０】
前記ヒトＩＬ−１２がｉｎ ｖｉｔｒｏで検出される、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４１】
前記ヒトＩＬ−１２が診断目的で生体サンプル中で検出される、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４２】
治療における請求項１〜５２、７４〜８３、および８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分の使用。
【請求項１４３】
ＩＬ−１２活性が有害である障害の治療用の薬物製造における請求項１〜５２、７４〜８３、および８７のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分の使用。
【請求項１４４】
前記障害が、慢性関節リウマチ、変形性関節炎、若年型慢性関節炎、ライム関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、強直性脊椎炎、全身性紅斑性狼瘡、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、多発性硬化症、インスリン依存性糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、皮膚炎、強皮症、甲状腺炎、移植片対宿主疾患、臓器移植拒絶、臓器移植に関連する急性もしくは慢性免疫疾患、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化症、血管内凝固症候群、川崎病、グレーブス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、結節性多発性動脈炎、ヴェグナー肉芽腫症、ヘーノホ−シェーンライン紫斑病、腎臓の微視的脈管炎、慢性滑動性肝炎、シェーグレン症候群、ブドウ膜炎、敗血症、敗血症性ショック、敗血症症候群、成人呼吸窮迫症候群、悪液質、感染症、寄生虫症、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、重症筋無力症、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳卒中、原発性胆汁性肝硬変、線維性肺疾患、溶血性貧血、悪性腫瘍、心不全、および心筋梗塞からなる群から選択される、請求項１４３に記載の使用。
【請求項１４５】
前記障害がクローン病である、請求項１４３に記載の使用。
【請求項１４６】
前記障害が多発性硬化症である、請求項１４３に記載の使用。
【請求項１４７】
前記障害が慢性関節リウマチである、請求項１４３に記載の使用。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図１Ｄ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図２Ｃ】
【図２Ｄ】
【図２Ｅ】
【図２Ｆ】
【図２Ｇ】
【図２Ｈ】
【図３】
【図４】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図１Ｄ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図２Ｃ】
【図２Ｄ】
【図２Ｅ】
【図２Ｆ】
【図２Ｇ】
【図２Ｈ】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２０１２−１０７０２（Ｐ２０１２−１０７０２Ａ）
【公開日】平成２４年１月１９日（２０１２．１．１９）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１１−１６１２５８（Ｐ２０１１−１６１２５８）
【出願日】平成２３年７月２２日（２０１１．７．２２）
【分割の表示】特願２０００−６０６６３２（Ｐ２０００−６０６６３２）の分割
【原出願日】平成１２年３月２４日（２０００．３．２４）
【出願人】（５０２１０４２２８）アボット ゲーエムベーハー ウント カンパニー カーゲー (89)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１月１９日（２０１２．１．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１６１２５８（Ｐ２０１１−１６１２５８）
【出願日】平成２３年７月２２日（２０１１．７．２２）
【分割の表示】特願２０００−６０６６３２（Ｐ２０００−６０６６３２）の分割
【原出願日】平成１２年３月２４日（２０００．３．２４）
【出願人】（５０２１０４２２８）アボット ゲーエムベーハー ウント カンパニー カーゲー (89)
【Ｆターム（参考）】
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