ビーズまたは他の捕捉物を用いた分子または粒子の超高感度検出
本発明は、流体試料中のアナライト分子または粒子を検出するための、いくつかの場合においては流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するためのシステムおよび方法に関する。本発明の方法は、複数のアナライト分子または粒子を複数の捕捉物に対して固定化することを含むことができる。複数の捕捉物の少なくとも一部は、複数の区画に空間的に分離することができる。流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度は、捕捉物に対して固定化されたアナライト分子を含む反応器の数に、少なくとも部分的に基づいて決定することができる。いくつかの場合、アッセイはさらに、結合リガンド、前駆標識剤および／または酵素成分を含むステップを含むことができる。
Notice: Undefined index: DEJ in /mnt/www/gzt_disp.php on line 298
【特許請求の範囲】
【請求項１】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を各々が含む複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露すること；
アナライト分子または粒子を、前記複数の捕捉物に対して、少なくともいくつかの捕捉物は少なくとも１つのアナライト分子または粒子に結びつき、かつ捕捉物の統計的に有意な割合はいかなるアナライト分子または粒子にも結びつかないような様式で固定化すること；
固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；
空間的分別ステップを経た複数の区画の少なくとも一部にアドレスし、アナライト分子または粒子を含む前記区画の数を決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、アナライト分子または粒子を含むと決定された区画の数に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項２】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を各々が含む複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露して、少なくとも１つの固定化されたアナライト分子または粒子を含む捕捉物を形成すること；
暴露ステップで調製された捕捉物を、複数の結合リガンドと、少なくともいくつかの捕捉物は１つの結合リガンドに結びつき、かつ捕捉物の統計的に有意な割合はいかなる結合リガンドにも結びつかないような様式で混合すること；
混合ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、複数の区画に空間的に分別すること；
空間的分別ステップを経た複数の区画の少なくとも一部にアドレスし、結合リガンドを含む区画の数を決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、結合リガンドを含むと決定された区画の数に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項３】
少なくとも１つのアナライト分子または粒子および／または結合リガンドと結びついた捕捉物のパーセンテージが、捕捉物総数の約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１０％未満、または約５％未満、または約１％未満、または約０．５％未満、または約０．１％未満である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
いかなるアナライト分子または粒子および／または結合リガンドとも結びつかない捕捉物のパーセンテージが、捕捉物総数の少なくとも約２０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％、または少なくとも約９９．５％、または少なくとも約９９．９％である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
アドレスするステップにおいて、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含み、かつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含まない捕捉物を含む区画の数を決定する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有する捕捉物を含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定された区画の総数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有する捕捉物を含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むが、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有するいかなる捕捉物も含まないと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有する捕捉物を含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含まない区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項１または２に記載の方法。
【請求項９】
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む複数の捕捉物が、複数のビーズを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１０】
複数の区画が、複数の反応器を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１１】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドに結びついている、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
アナライト分子または粒子が酵素成分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
結合リガンドが酵素成分を含む、請求項２または１２に記載の方法。
【請求項１５】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０−１５Ｍ未満、または約４０×１０−１５Ｍ未満、または約３０×１０−１５Ｍ未満、または約２０×１０−１５Ｍ未満、または約１０×１０−１５Ｍ未満、または約５×１０−１５Ｍ未満、または約１×１０−１５Ｍ未満である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１６】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、測定されたパラメータと校正標準の比較により少なくとも部分的に決定する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１７】
固定化ステップの間に、アナライト分子または粒子の少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％が、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物に対して固定化される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
混合ステップの間に、固定化されたアナライト分子または粒子の少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、結合リガンドに結びつく、請求項２に記載の方法。
【請求項１９】
空間的分別ステップの間に、固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、複数の区画に空間的に分離される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２０】
アドレスするステップにおいてアドレスされる反応器の数が、反応器の総数の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２１】
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物の一部が、複数の区画を複数の捕捉物を含む溶液に暴露することにより、空間的に分離される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２２】
空間的分別のステップに続いて、区画を前駆標識剤に暴露する、請求項２または１２に記載の方法。
【請求項２３】
前駆標識剤が、結合リガンドに暴露されると標識剤に変換される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
アナライト分子もしくは粒子または標識剤を含有する捕捉物を含む区画の数を、標識剤を含む区画の数を決定することにより決定する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
アナライト分子または粒子がタンパク質である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２７】
アナライト分子または粒子が核酸である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２８】
複数の反応器が、封着要素の少なくとも一部を基板の少なくとも一部と合わせることにより形成される、請求項１０に記載の方法。
【請求項２９】
複数の反応器が、平らな基板に形成される、請求項１０に記載の方法。
【請求項３０】
複数の反応器の平均容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項１０に記載の方法。
【請求項３１】
複数の反応器の平均容積が、約１フェムトリットルから約１ピコリットルの間である、請求項１０に記載の方法。
【請求項３２】
複数のビーズの平均直径が、約０．１μｍから約１００μｍの間である、請求項９に記載の方法。
【請求項３３】
複数のビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項９に記載の方法。
【請求項３４】
少なくとも１つの洗浄ステップをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３５】
複数の反応器を密封することをさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項３６】
複数の区画を、光学技術を用いてアドレスする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３７】
結合表面が複数の捕捉成分を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３８】
アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子または粒子を含むと決定された区画のパーセンテージが、アドレスされた区画の総数の約１０％未満、または約５％未満、または約１％未満、または約０．１％未満である、請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
アドレスするステップにおいてアドレスされ、結合リガンドを含むと決定された区画のパーセンテージが、アドレスされた区画の総数の約１０％未満、または約５％未満、または約１％未満、または約０．１％未満である、請求項２に記載の方法。
【請求項４０】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくともその一部がビーズを含んでいる複数の区画を含む基板であって、基板上に存在するビーズの総数に関して、少なくとも１つのアナライト分子または粒子を含むビーズの、アナライト分子または粒子を含まないビーズに対する比率が約８：１から約１：１０，０００，０００の間である、前記基板を供給すること；
複数の区画の少なくとも一部にアドレスすること、ここで、アドレスするステップの間に、複数の区画の少なくとも２つに、少なくとも部分的に同時にアドレスすること；
アドレスした各区画において、ビーズの有無および、もし存在する場合は該ビーズが任意のアナライト分子または粒子を含むかどうかを検出すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含むビーズを含むアドレスした区画の数を決定することにより、少なくとも部分的に決定すること、
を含む、前記方法。
【請求項４１】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくともその一部がビーズを含んでいる複数の区画を含む基板であって、基板上に存在するビーズの総数に関して、結合リガンドに結びついた少なくとも１つのアナライト分子または粒子を含むビーズの、結合リガンドに結びついたアナライト分子または粒子を含まないビーズに対する比率が、約８：１から約１：１０，０００，０００の間である、前記基板を供給すること；
複数の区画の少なくとも一部にアドレスすること、ここで、アドレスするステップの間に、複数の区画の少なくとも２つに、少なくとも部分的に同時にアドレスすること；
アドレスした各区画において、ビーズの有無および、もし存在する場合は該ビーズが結合リガンドに結びついた任意のアナライト分子または粒子を含むかどうかを検出すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、結合リガンドに結びついた少なくとも１つのアナライト分子または粒子を含むビーズを含むアドレスした区画の数を決定することにより、少なくとも部分的に決定すること、
を含む、前記方法。
【請求項４２】
比率が、約２：１から約１：１，０００，０００の間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４３】
比率が、約１：１０から約１：１００，０００の間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４４】
比率が、約２：１から約１：１０の間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４５】
アドレスするステップにおいて、ビーズを含むが、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むいかなるビーズも含まない区画の数を決定する、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４６】
アドレスするステップにおいて、ビーズを含む区画の数を決定する、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むビーズを含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、ビーズを含むと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むビーズを含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、ビーズを含むが、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むいかなるビーズも含まないと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むビーズを含むと決定された区画の数の、アドレスされた区画の総数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５０】
複数の区画が、複数の反応器を含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５１】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
少なくとも１つのビーズを含む区画のパーセントが、約５０％より大、または約６０％より大、または約７０％より大、または約８０％より大、または約９０％より大、または約９５％より大である、請求項３または４に記載の方法。
【請求項５３】
アナライト分子または粒子が、タンパク質または核酸である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５４】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドと結びついている、請求項４０に記載の方法。
【請求項５５】
結合リガンドが、酵素成分を含む、請求項４１または５４に記載の方法。
【請求項５６】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０―１５Ｍ未満である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度を、測定されたパラメータと校正標準の比較により少なくとも部分的に決定する、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５８】
少なくとも１つのアナライト分子を含む捕捉物の各々が、１、２、３、４、または５つのアナライト分子を含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５９】
供給するステップに続いて、区画を前駆標識剤に暴露する、請求項４１または５４に記載の方法。
【請求項６０】
前駆結合リガンドが、結合リガンドに暴露されると標識剤に変換される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含み、かつアナライト分子もしくは粒子または標識剤を含有する捕捉物を含むと決定される区画の数を、アドレスされ、標識剤を含む区画の数を決定することにより決定する、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
複数の反応器が、封着要素の少なくとも一部を第２基板の少なくとも一部と合わせることにより形成される、請求項５０に記載の方法。
【請求項６４】
複数の反応器の各々の容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項５０に記載の方法。
【請求項６５】
ビーズの平均直径が、約０．１μｍから約１００μｍの間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６６】
ビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６７】
少なくとも１つの洗浄ステップを実施することさらに含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６８】
複数の区画を、光検出を用いてアドレスする、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６９】
ビーズが、複数の捕捉成分を含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項７０】
アドレスされる反応器の数が、反応器の総数の少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％である、請求項５０に記載の方法。
【請求項７１】
物品またはキットであって、
約０．１μｍから約１００μｍの間の平均直径を有する複数のビーズ；および
複数の反応器を含む基板であって、反応器の平均深さがビーズの平均直径の約１．０倍から約１．５倍の間であり、反応器の平均直径がビーズの平均直径の約１．０倍から約１．９倍の間である、前記基板、
を含む、前記物品またはキット。
【請求項７２】
複数ビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７３】
複数ビーズの平均直径が、約１μｍから約５μｍの間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７４】
複数反応器が、光ファイバー束の端部に形成される、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７５】
物品がさらに封着要素を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７６】
複数反応器の平均深さが、ビーズの平均直径の約１．１倍から約１．３倍の間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７７】
複数反応器の平均直径が、ビーズの平均直径の約１．３倍から約１．８倍の間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７８】
複数反応器の平均容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７９】
複数反応器の平均容積が、約１フェムトリットルから約１ピコリットルの間の間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８０】
複数ビーズが、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８１】
結合表面が、複数の捕捉成分を含む、請求項８０に記載の物品またはキット。
【請求項８２】
基板が、約１，０００から約１，０００，０００の反応器を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８３】
基板が、約１０，０００から約１００，０００の反応器を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８４】
複数の対照ビーズをさらに含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８５】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を各々が含む複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露すること、ここで少なくともいくつかの捕捉物は、少なくとも１つのアナライト分子または粒子と結びつき；
暴露ステップで調製された複数の捕捉物を、酵素成分を含む複数の結合リガンドと、少なくとも１つのアナライト分子または粒子と結びついた捕捉物の統計的に有意な割合が１つの結合リガンドと結びつくような様式で、混合すること；
混合ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、空間的分別のステップを経た複数の区画の少なくとも一部にアドレスして、酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物の存在を決定することに、少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項８６】
アナライト分子または粒子がタンパク質である、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
結合表面が複数の捕捉成分を含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項８８】
酵素成分が関与する反応が、酵素成分を前駆標識剤に暴露することを含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項８９】
前駆標識剤が、酵素成分に暴露されると標識剤に変換される、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
酵素成分が、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、またはアルカリホスファターゼを含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項９２】
複数の区画が、複数の反応器を含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項９３】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数を決定することをさらに含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項９５】
決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定されたが、しかし酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含まないと決定された区画の数を決定することをさらに含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定された区画の数を決定することをさらに含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項９７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数に少なくとも部分的に基づく、請求項９４に記載の方法。
【請求項９８】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数の、決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項９６に記載の方法。
【請求項９９】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数の、決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定されたが、しかし酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含まないと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項９５に記載の方法。
【請求項１００】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数の、アドレスされた区画の総数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項９４に記載の方法。
【請求項１０１】
区画が光学的にアドレスされる、請求項８５に記載の方法。
【請求項１０２】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
複数のアナライト分子または粒子を複数ビーズに対して固定化すること；
複数ビーズの少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；
複数の区画の少なくともいくつかにアドレスし、ビーズを含む区画の数を決定すること；
ビーズおよびアナライト分子または粒子を含む前記区画の数をさらに決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、ビーズおよびアナライト分子および粒子を含む区画の数の、ビーズを含む区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項１０３】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
複数のアナライト分子または粒子を複数ビーズに対して固定化すること；
複数ビーズの少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；
複数の区画の少なくともいくつかにアドレスし、ビーズを含む区画の数を決定すること；
ビーズおよびアナライト分子または粒子を含む前記区画の数をさらに決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、ビーズおよびアナライト分子および粒子を含む区画の数の、ビーズを含むがいかなるアナライト分子または粒子も含まない区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項１０４】
ビーズを含む区画の数を、光学技術を用いて決定する、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
ビーズを含む区画の数を、白色光を用いて決定する、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
ビーズおよびアナライト分子または粒子を含む区画の数を、蛍光を用いて決定する、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０７】
光学技術が、ＣＣＤ検出器の使用を含む、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０８】
光学技術が、ＣＩＤ、ＣＭＯＳ、ｓＣＭＯＳまたはＴＤＩ装置の使用を含む、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０９】
複数の区画が複数の反応器を含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１０】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドと結びついている、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１２】
アナライト分子または粒子が、酵素成分を含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１３】
結合リガンドが酵素成分を含む、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０−１５Ｍ未満、または約４０×１０−１５Ｍ未満、または約３０×１０−１５Ｍ未満、または約２０×１０−１５Ｍ未満、または約１０×１０−１５Ｍ未満、または約１×１０−１５Ｍ未満である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１５】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、測定されたパラメータを校正標準と比較することにより少なくとも部分的に決定する、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１６】
空間的分別ステップの間に、固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、複数の区画に空間的に分離される、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１７】
アドレスするステップにおいてアドレスされる区画の数が、区画の総数の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１８】
複数のビーズの各々が、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１９】
空間的分別ステップに続いて、区画を前駆標識剤に暴露する、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２０】
前駆標識剤が、結合リガンドに暴露されると標識剤に変換される、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
アナライト分子もしくは粒子または標識剤を含有する捕捉物を含む区画の数を、標識剤を含む区画の数を決定することにより決定する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２３】
アナライト分子または粒子がタンパク質である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２４】
アナライト分子または粒子が核酸である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２５】
複数の反応器の平均容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１２６】
複数の反応器の平均容積が、約１フェムトリットルから約１ピコリットルの間である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１２７】
複数のビーズの平均直径が、約０．１μｍから約１００μｍの間である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２８】
複数のビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２９】
少なくとも１つの洗浄ステップを行うことをさらに含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１３０】
複数の反応器を密封することをさらに含む、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１３１】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
各々が、１つのアナライト分子または粒子と結びついたか、またはいかなるアナライト分子または粒子からもフリーである、複数の捕捉物を供給すること；
捕捉物の少なくとも一部に個別にアドレスし、アナライト分子または粒子と結びついた前記捕捉物の数を決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、アドレスするステップを経てアナライト分子または粒子と結びついたと決定された捕捉物の数に少なくとも部分的に基づいて決定すること、
を含む、前記方法。
【請求項１３２】
捕捉物の各々が、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含み、形成するステップが、複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露することを含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
アナライト分子または粒子を、複数の捕捉物に対して、捕捉物の統計的に有意な割合は１つのアナライト分子または粒子に結びつき、捕捉物の統計的に有意な割合はいかなるアナライト分子または粒子からもフリーであるような様式で固定化することを含む、請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、捕捉物の該一部の残り部分から個別に分離するステップを含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
捕捉物が、少なくともアドレスするステップの間にそれが懸濁される流体内に混合しない液滴を含むか、また該液滴内に含まれる、請求項１３４に記載の方法。
【請求項１３６】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドに結びついた、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３７】
アナライト分子または粒子が、酵素成分を含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３８】
結合リガンドが、酵素成分を含む、請求項１３６に記載の方法。
【請求項１３９】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０−１５Ｍ未満、または約４０×１０−１５Ｍ未満、または約３０×１０−１５Ｍ未満、または約２０×１０−１５Ｍ未満、または約１０×１０−１５Ｍ未満、または約５×１０−１５Ｍ未満、または約１×１０−１５Ｍ未満である、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１４０】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、測定されたパラメータを校正標準と比較することにより少なくとも部分的に決定する、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１４１】
複数の区画を、光学技術を用いてアドレスする、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を各々が含む複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露すること；
アナライト分子または粒子を、前記複数の捕捉物に対して、少なくともいくつかの捕捉物は少なくとも１つのアナライト分子または粒子に結びつき、かつ捕捉物の統計的に有意な割合はいかなるアナライト分子または粒子にも結びつかないような様式で固定化すること；
固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；
空間的分別ステップを経た複数の区画の少なくとも一部にアドレスし、アナライト分子または粒子を含む前記区画の数を決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、アナライト分子または粒子を含むと決定された区画の数に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項２】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を各々が含む複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露して、少なくとも１つの固定化されたアナライト分子または粒子を含む捕捉物を形成すること；
暴露ステップで調製された捕捉物を、複数の結合リガンドと、少なくともいくつかの捕捉物は１つの結合リガンドに結びつき、かつ捕捉物の統計的に有意な割合はいかなる結合リガンドにも結びつかないような様式で混合すること；
混合ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、複数の区画に空間的に分別すること；
空間的分別ステップを経た複数の区画の少なくとも一部にアドレスし、結合リガンドを含む区画の数を決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、結合リガンドを含むと決定された区画の数に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項３】
少なくとも１つのアナライト分子または粒子および／または結合リガンドと結びついた捕捉物のパーセンテージが、捕捉物総数の約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１０％未満、または約５％未満、または約１％未満、または約０．５％未満、または約０．１％未満である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
いかなるアナライト分子または粒子および／または結合リガンドとも結びつかない捕捉物のパーセンテージが、捕捉物総数の少なくとも約２０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％、または少なくとも約９９．５％、または少なくとも約９９．９％である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
アドレスするステップにおいて、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含み、かつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含まない捕捉物を含む区画の数を決定する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有する捕捉物を含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定された区画の総数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有する捕捉物を含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むが、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有するいかなる捕捉物も含まないと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含みかつアナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含有する捕捉物を含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含まない区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項１または２に記載の方法。
【請求項９】
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む複数の捕捉物が、複数のビーズを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１０】
複数の区画が、複数の反応器を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１１】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドに結びついている、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
アナライト分子または粒子が酵素成分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
結合リガンドが酵素成分を含む、請求項２または１２に記載の方法。
【請求項１５】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０−１５Ｍ未満、または約４０×１０−１５Ｍ未満、または約３０×１０−１５Ｍ未満、または約２０×１０−１５Ｍ未満、または約１０×１０−１５Ｍ未満、または約５×１０−１５Ｍ未満、または約１×１０−１５Ｍ未満である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１６】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、測定されたパラメータと校正標準の比較により少なくとも部分的に決定する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１７】
固定化ステップの間に、アナライト分子または粒子の少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％が、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物に対して固定化される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
混合ステップの間に、固定化されたアナライト分子または粒子の少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、結合リガンドに結びつく、請求項２に記載の方法。
【請求項１９】
空間的分別ステップの間に、固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、複数の区画に空間的に分離される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２０】
アドレスするステップにおいてアドレスされる反応器の数が、反応器の総数の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２１】
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物の一部が、複数の区画を複数の捕捉物を含む溶液に暴露することにより、空間的に分離される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２２】
空間的分別のステップに続いて、区画を前駆標識剤に暴露する、請求項２または１２に記載の方法。
【請求項２３】
前駆標識剤が、結合リガンドに暴露されると標識剤に変換される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
アナライト分子もしくは粒子または標識剤を含有する捕捉物を含む区画の数を、標識剤を含む区画の数を決定することにより決定する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
アナライト分子または粒子がタンパク質である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２７】
アナライト分子または粒子が核酸である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２８】
複数の反応器が、封着要素の少なくとも一部を基板の少なくとも一部と合わせることにより形成される、請求項１０に記載の方法。
【請求項２９】
複数の反応器が、平らな基板に形成される、請求項１０に記載の方法。
【請求項３０】
複数の反応器の平均容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項１０に記載の方法。
【請求項３１】
複数の反応器の平均容積が、約１フェムトリットルから約１ピコリットルの間である、請求項１０に記載の方法。
【請求項３２】
複数のビーズの平均直径が、約０．１μｍから約１００μｍの間である、請求項９に記載の方法。
【請求項３３】
複数のビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項９に記載の方法。
【請求項３４】
少なくとも１つの洗浄ステップをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３５】
複数の反応器を密封することをさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項３６】
複数の区画を、光学技術を用いてアドレスする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３７】
結合表面が複数の捕捉成分を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３８】
アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子または粒子を含むと決定された区画のパーセンテージが、アドレスされた区画の総数の約１０％未満、または約５％未満、または約１％未満、または約０．１％未満である、請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
アドレスするステップにおいてアドレスされ、結合リガンドを含むと決定された区画のパーセンテージが、アドレスされた区画の総数の約１０％未満、または約５％未満、または約１％未満、または約０．１％未満である、請求項２に記載の方法。
【請求項４０】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくともその一部がビーズを含んでいる複数の区画を含む基板であって、基板上に存在するビーズの総数に関して、少なくとも１つのアナライト分子または粒子を含むビーズの、アナライト分子または粒子を含まないビーズに対する比率が約８：１から約１：１０，０００，０００の間である、前記基板を供給すること；
複数の区画の少なくとも一部にアドレスすること、ここで、アドレスするステップの間に、複数の区画の少なくとも２つに、少なくとも部分的に同時にアドレスすること；
アドレスした各区画において、ビーズの有無および、もし存在する場合は該ビーズが任意のアナライト分子または粒子を含むかどうかを検出すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含むビーズを含むアドレスした区画の数を決定することにより、少なくとも部分的に決定すること、
を含む、前記方法。
【請求項４１】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくともその一部がビーズを含んでいる複数の区画を含む基板であって、基板上に存在するビーズの総数に関して、結合リガンドに結びついた少なくとも１つのアナライト分子または粒子を含むビーズの、結合リガンドに結びついたアナライト分子または粒子を含まないビーズに対する比率が、約８：１から約１：１０，０００，０００の間である、前記基板を供給すること；
複数の区画の少なくとも一部にアドレスすること、ここで、アドレスするステップの間に、複数の区画の少なくとも２つに、少なくとも部分的に同時にアドレスすること；
アドレスした各区画において、ビーズの有無および、もし存在する場合は該ビーズが結合リガンドに結びついた任意のアナライト分子または粒子を含むかどうかを検出すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、結合リガンドに結びついた少なくとも１つのアナライト分子または粒子を含むビーズを含むアドレスした区画の数を決定することにより、少なくとも部分的に決定すること、
を含む、前記方法。
【請求項４２】
比率が、約２：１から約１：１，０００，０００の間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４３】
比率が、約１：１０から約１：１００，０００の間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４４】
比率が、約２：１から約１：１０の間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４５】
アドレスするステップにおいて、ビーズを含むが、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むいかなるビーズも含まない区画の数を決定する、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４６】
アドレスするステップにおいて、ビーズを含む区画の数を決定する、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むビーズを含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、ビーズを含むと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むビーズを含むと決定された区画の数の、アドレスするステップにおいてアドレスされ、ビーズを含むが、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むいかなるビーズも含まないと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、アドレスするステップにおいてアドレスされ、アナライト分子もしくは粒子または結合リガンドを含むビーズを含むと決定された区画の数の、アドレスされた区画の総数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５０】
複数の区画が、複数の反応器を含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５１】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
少なくとも１つのビーズを含む区画のパーセントが、約５０％より大、または約６０％より大、または約７０％より大、または約８０％より大、または約９０％より大、または約９５％より大である、請求項３または４に記載の方法。
【請求項５３】
アナライト分子または粒子が、タンパク質または核酸である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５４】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドと結びついている、請求項４０に記載の方法。
【請求項５５】
結合リガンドが、酵素成分を含む、請求項４１または５４に記載の方法。
【請求項５６】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０―１５Ｍ未満である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度を、測定されたパラメータと校正標準の比較により少なくとも部分的に決定する、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５８】
少なくとも１つのアナライト分子を含む捕捉物の各々が、１、２、３、４、または５つのアナライト分子を含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項５９】
供給するステップに続いて、区画を前駆標識剤に暴露する、請求項４１または５４に記載の方法。
【請求項６０】
前駆結合リガンドが、結合リガンドに暴露されると標識剤に変換される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
アドレスするステップにおいてアドレスされ、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含み、かつアナライト分子もしくは粒子または標識剤を含有する捕捉物を含むと決定される区画の数を、アドレスされ、標識剤を含む区画の数を決定することにより決定する、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
複数の反応器が、封着要素の少なくとも一部を第２基板の少なくとも一部と合わせることにより形成される、請求項５０に記載の方法。
【請求項６４】
複数の反応器の各々の容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項５０に記載の方法。
【請求項６５】
ビーズの平均直径が、約０．１μｍから約１００μｍの間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６６】
ビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６７】
少なくとも１つの洗浄ステップを実施することさらに含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６８】
複数の区画を、光検出を用いてアドレスする、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項６９】
ビーズが、複数の捕捉成分を含む、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項７０】
アドレスされる反応器の数が、反応器の総数の少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％である、請求項５０に記載の方法。
【請求項７１】
物品またはキットであって、
約０．１μｍから約１００μｍの間の平均直径を有する複数のビーズ；および
複数の反応器を含む基板であって、反応器の平均深さがビーズの平均直径の約１．０倍から約１．５倍の間であり、反応器の平均直径がビーズの平均直径の約１．０倍から約１．９倍の間である、前記基板、
を含む、前記物品またはキット。
【請求項７２】
複数ビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７３】
複数ビーズの平均直径が、約１μｍから約５μｍの間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７４】
複数反応器が、光ファイバー束の端部に形成される、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７５】
物品がさらに封着要素を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７６】
複数反応器の平均深さが、ビーズの平均直径の約１．１倍から約１．３倍の間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７７】
複数反応器の平均直径が、ビーズの平均直径の約１．３倍から約１．８倍の間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７８】
複数反応器の平均容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項７９】
複数反応器の平均容積が、約１フェムトリットルから約１ピコリットルの間の間である、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８０】
複数ビーズが、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８１】
結合表面が、複数の捕捉成分を含む、請求項８０に記載の物品またはキット。
【請求項８２】
基板が、約１，０００から約１，０００，０００の反応器を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８３】
基板が、約１０，０００から約１００，０００の反応器を含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８４】
複数の対照ビーズをさらに含む、請求項７１に記載の物品またはキット。
【請求項８５】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を各々が含む複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露すること、ここで少なくともいくつかの捕捉物は、少なくとも１つのアナライト分子または粒子と結びつき；
暴露ステップで調製された複数の捕捉物を、酵素成分を含む複数の結合リガンドと、少なくとも１つのアナライト分子または粒子と結びついた捕捉物の統計的に有意な割合が１つの結合リガンドと結びつくような様式で、混合すること；
混合ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、空間的分別のステップを経た複数の区画の少なくとも一部にアドレスして、酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物の存在を決定することに、少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項８６】
アナライト分子または粒子がタンパク質である、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
結合表面が複数の捕捉成分を含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項８８】
酵素成分が関与する反応が、酵素成分を前駆標識剤に暴露することを含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項８９】
前駆標識剤が、酵素成分に暴露されると標識剤に変換される、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
酵素成分が、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、またはアルカリホスファターゼを含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項９２】
複数の区画が、複数の反応器を含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項９３】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数を決定することをさらに含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項９５】
決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定されたが、しかし酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含まないと決定された区画の数を決定することをさらに含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定された区画の数を決定することをさらに含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項９７】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数に少なくとも部分的に基づく、請求項９４に記載の方法。
【請求項９８】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数の、決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項９６に記載の方法。
【請求項９９】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数の、決定するステップでアドレスされて少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む捕捉物を含むと決定されたが、しかし酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含まないと決定された区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項９５に記載の方法。
【請求項１００】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度が、決定するステップでアドレスされて酵素成分または酵素成分が関与する反応の産物を含むと決定された区画の数の、アドレスされた区画の総数に対する比率に少なくとも部分的に基づく、請求項９４に記載の方法。
【請求項１０１】
区画が光学的にアドレスされる、請求項８５に記載の方法。
【請求項１０２】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
複数のアナライト分子または粒子を複数ビーズに対して固定化すること；
複数ビーズの少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；
複数の区画の少なくともいくつかにアドレスし、ビーズを含む区画の数を決定すること；
ビーズおよびアナライト分子または粒子を含む前記区画の数をさらに決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、ビーズおよびアナライト分子および粒子を含む区画の数の、ビーズを含む区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項１０３】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
複数のアナライト分子または粒子を複数ビーズに対して固定化すること；
複数ビーズの少なくとも一部を、複数の別々の区画に空間的に分別すること；
複数の区画の少なくともいくつかにアドレスし、ビーズを含む区画の数を決定すること；
ビーズおよびアナライト分子または粒子を含む前記区画の数をさらに決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、ビーズおよびアナライト分子および粒子を含む区画の数の、ビーズを含むがいかなるアナライト分子または粒子も含まない区画の数に対する比率に少なくとも部分的に基づいて決定すること；
を含む、前記方法。
【請求項１０４】
ビーズを含む区画の数を、光学技術を用いて決定する、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
ビーズを含む区画の数を、白色光を用いて決定する、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
ビーズおよびアナライト分子または粒子を含む区画の数を、蛍光を用いて決定する、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０７】
光学技術が、ＣＣＤ検出器の使用を含む、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０８】
光学技術が、ＣＩＤ、ＣＭＯＳ、ｓＣＭＯＳまたはＴＤＩ装置の使用を含む、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０９】
複数の区画が複数の反応器を含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１０】
複数の反応器が、光ファイバー束の端部に形成されている、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドと結びついている、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１２】
アナライト分子または粒子が、酵素成分を含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１３】
結合リガンドが酵素成分を含む、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０−１５Ｍ未満、または約４０×１０−１５Ｍ未満、または約３０×１０−１５Ｍ未満、または約２０×１０−１５Ｍ未満、または約１０×１０−１５Ｍ未満、または約１×１０−１５Ｍ未満である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１５】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、測定されたパラメータを校正標準と比較することにより少なくとも部分的に決定する、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１６】
空間的分別ステップの間に、固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、複数の区画に空間的に分離される、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１７】
アドレスするステップにおいてアドレスされる区画の数が、区画の総数の少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１８】
複数のビーズの各々が、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１１９】
空間的分別ステップに続いて、区画を前駆標識剤に暴露する、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２０】
前駆標識剤が、結合リガンドに暴露されると標識剤に変換される、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
アナライト分子もしくは粒子または標識剤を含有する捕捉物を含む区画の数を、標識剤を含む区画の数を決定することにより決定する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
標識剤が色原体、蛍光体、または化学発光体である、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２３】
アナライト分子または粒子がタンパク質である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２４】
アナライト分子または粒子が核酸である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２５】
複数の反応器の平均容積が、約１０アトリットルから約１００ピコリットルの間である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１２６】
複数の反応器の平均容積が、約１フェムトリットルから約１ピコリットルの間である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１２７】
複数のビーズの平均直径が、約０．１μｍから約１００μｍの間である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２８】
複数のビーズの平均直径が、約１μｍから約１０μｍの間である、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１２９】
少なくとも１つの洗浄ステップを行うことをさらに含む、請求項１０２または１０３に記載の方法。
【請求項１３０】
複数の反応器を密封することをさらに含む、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１３１】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を決定するための方法であって、
各々が、１つのアナライト分子または粒子と結びついたか、またはいかなるアナライト分子または粒子からもフリーである、複数の捕捉物を供給すること；
捕捉物の少なくとも一部に個別にアドレスし、アナライト分子または粒子と結びついた前記捕捉物の数を決定すること；および
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、アドレスするステップを経てアナライト分子または粒子と結びついたと決定された捕捉物の数に少なくとも部分的に基づいて決定すること、
を含む、前記方法。
【請求項１３２】
捕捉物の各々が、少なくとも１種のアナライト分子または粒子に対して親和性を有する結合表面を含み、形成するステップが、複数の捕捉物を、前記少なくとも１種のアナライト分子または粒子を含有するかまたは含有する疑いのある溶液に暴露することを含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
アナライト分子または粒子を、複数の捕捉物に対して、捕捉物の統計的に有意な割合は１つのアナライト分子または粒子に結びつき、捕捉物の統計的に有意な割合はいかなるアナライト分子または粒子からもフリーであるような様式で固定化することを含む、請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
固定化ステップを経た捕捉物の少なくとも一部を、捕捉物の該一部の残り部分から個別に分離するステップを含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
捕捉物が、少なくともアドレスするステップの間にそれが懸濁される流体内に混合しない液滴を含むか、また該液滴内に含まれる、請求項１３４に記載の方法。
【請求項１３６】
アナライト分子または粒子の少なくとも一部が、少なくとも１つの結合リガンドに結びついた、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３７】
アナライト分子または粒子が、酵素成分を含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３８】
結合リガンドが、酵素成分を含む、請求項１３６に記載の方法。
【請求項１３９】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度が、約５０×１０−１５Ｍ未満、または約４０×１０−１５Ｍ未満、または約３０×１０−１５Ｍ未満、または約２０×１０−１５Ｍ未満、または約１０×１０−１５Ｍ未満、または約５×１０−１５Ｍ未満、または約１×１０−１５Ｍ未満である、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１４０】
流体試料中のアナライト分子または粒子の濃度の測度を、測定されたパラメータを校正標準と比較することにより少なくとも部分的に決定する、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１４１】
複数の区画を、光学技術を用いてアドレスする、請求項１３１に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図４Ｃ】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１Ａ】
【図１１Ｂ】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９ＡＢ】
【図１９Ｃ】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５ＡＢ】
【図２５Ｃ】
【図２５Ｄ】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９Ａ−Ｃ】
【図２９Ｄ】
【図３０Ａ】
【図３０Ｂ】
【図３１】
【図２】
【図３】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図４Ｃ】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１Ａ】
【図１１Ｂ】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９ＡＢ】
【図１９Ｃ】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５ＡＢ】
【図２５Ｃ】
【図２５Ｄ】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９Ａ−Ｃ】
【図２９Ｄ】
【図３０Ａ】
【図３０Ｂ】
【図３１】
【公表番号】特表２０１３−５２１４９９（Ｐ２０１３−５２１４９９Ａ）
【公表日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５５６１６４（Ｐ２０１２−５５６１６４）
【出願日】平成２３年３月１日（２０１１．３．１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２６６４５
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／１０９３６４
【国際公開日】平成２３年９月９日（２０１１．９．９）
【出願人】（５１２２２８４９５）クワンテリクス コーポレーション (2)
【氏名又は名称原語表記】ＱＵＡＮＴＥＲＩＸ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【住所又は居所原語表記】Ｏｎｅ Ｋｅｎｄａｌｌ Ｓｑｕａｒｅ， Ｂｕｉｌｄｉｎｇ １４００， ２ｎｄ Ｆｌｏｏｒ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ， ＭＡ ０２１３９ Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年３月１日（２０１１．３．１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２６６４５
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／１０９３６４
【国際公開日】平成２３年９月９日（２０１１．９．９）
【出願人】（５１２２２８４９５）クワンテリクス コーポレーション (2)
【氏名又は名称原語表記】ＱＵＡＮＴＥＲＩＸ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【住所又は居所原語表記】Ｏｎｅ Ｋｅｎｄａｌｌ Ｓｑｕａｒｅ， Ｂｕｉｌｄｉｎｇ １４００， ２ｎｄ Ｆｌｏｏｒ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ， ＭＡ ０２１３９ Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]