ピペット部材および細胞単離器具
【課題】生体組織から単離された細胞を効率的に回収可能な細胞単離器具を低コストで提供する。
【解決手段】細胞単離器具は、組織と液体を収容可能な容器と、容器に装着されて撹拌により組織から細胞を単離するためのピペット部材とを備える。ピペット部材は、筒体と濾過部材とを備える。筒体は、容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、第１の開口と第２の開口を連通する通路が形成されている。濾過部材は筒体の内部に設けられ、通路を第１の開口を含む第１の部分と、第２の開口を含む第２の部分とに隔てる。
【解決手段】細胞単離器具は、組織と液体を収容可能な容器と、容器に装着されて撹拌により組織から細胞を単離するためのピペット部材とを備える。ピペット部材は、筒体と濾過部材とを備える。筒体は、容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、第１の開口と第２の開口を連通する通路が形成されている。濾過部材は筒体の内部に設けられ、通路を第１の開口を含む第１の部分と、第２の開口を含む第２の部分とに隔てる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、病理解析を行なう場合において用いられる細胞単離器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
病理標本作成の後に、細胞検査士や病理医によって組織切片による病理診断が行なわれている。組織から細胞単離を行なうためには、刃物を用いたミンスが必要である。更に、単離した細胞を含む細胞浮遊液を得るためにはミンスした後の懸濁液をフィルタによって濾過する必要がある。このように病理診断に用いる細胞浮遊液を得るためには二段階の操作が必要である。
【０００３】
細胞検査士もしくは病理医による診断や標本作成のためには、熟練した技術が必要であり、そのような技術の差により診断結果に違いが生じるおそれがある。また組織摘出から診断を行なうまでには、組織固定、切片作成、染色といった手技が必要であり、細胞検査士等を一定時間拘束する。このため診断までの手技を自動化することが求められている。
【０００４】
特許文献１には、細胞培養を行なうために必要な組織をミンスする器具が記載されている。この器具は、上部開口と下部開口の各々に金網を設けた筒体を備えている。この金網上に組織片を載置し、筒体を遠心分離に供することで組織がミンスされる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許４１５６８４７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献１に記載の構成によれば、ミンスを自動的に行なうことが可能であるが、切片作成や染色といった手技を自動化することはできない。また単離細胞を含む細胞浮遊液の回収を自動化することも想定されていない。
【０００７】
本発明は上記課題の少なくとも一部を解決するためになされたものであり、組織（生体組織）から単離された細胞を効率的に回収可能な細胞単離器具を低コストで提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題の少なくとも一部を解決するために、本発明によれば、以下に掲げる種々の態様を採り得る。
【０００９】
（１）本発明の第１の態様は、組織と液体を収容可能な容器に装着可能であって、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材であって、（Ａ）前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、（Ｂ）前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【００１０】
（２）本発明の第１の態様においては、前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている。
【００１１】
（３）本発明の第１の態様においては、前記第２の開口の一部を構成する蓋体を更に備え、前記濾過部材は、少なくとも一部が前記蓋体と接している。
【００１２】
（４）本発明の第１の態様においては、前記第１の開口は、前記第２の開口よりも径小に形成されている。
【００１３】
（５）本発明の第１の態様においては、前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記通路と連通するスリットが形成されている。
【００１４】
（６）本発明の第１の態様においては、前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記組織を載置可能な載置部材が形成されている。
【００１５】
（７）本発明の第１の態様においては、前記ピペット部材が前記容器に装着された状態において、前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されるように構成されている。
【００１６】
（８）本発明の第１の態様においては、前記濾過部材は、単離した細胞より小さな物質を濾過するように構成されている。
【００１７】
（９）本発明の第２の態様は、（Ａ）組織と液体を収容可能な容器と、（Ｂ）前記容器に装着され、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材とを備える細胞単離器具であって、前記ピペット部材は、（Ｃ）前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、（Ｄ）前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【００１８】
（１０）本発明の第２の態様においては、前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている。
【００１９】
（１１）本発明の第２の態様においては、前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されている。
【００２０】
（１２）本発明の第２の態様においては、前記細胞単離器具が前記細胞単離装置に装着された状態において、前記容器の中心軸が鉛直方向に対して傾斜するように構成されている。
【００２１】
（１３）本発明の第２の態様においては、前記容器の底部には乾燥された試薬が配置されている。
【発明の効果】
【００２２】
上記（１）の構成によれば、通路の第１の部分を用いて撹拌による細胞単離処理を行ない、濾過部材に当該処理により得られた懸濁液を通過させて単離細胞を含んだ細胞浮遊液を通路の第２の部分に得ることができる。したがって、細胞単離処理と単離細胞の回収処理とを、細胞単離装置に同一のピペット部材を接続したままで遂行することが可能である。懸濁液を別の容器に移し替えて濾過を行なっていた従来の工程と比較して大幅な作業効率の向上が簡素な構成で可能である。また、懸濁液に異物が混入したり、使用者が触れる可能性が極めて低くすることができるため、精度良く、安全な処理が可能である。
【００２３】
上記（２）の構成によれば、撹拌による細胞単離処理のみならず、濾過による単離細胞の回収処理をも容易に自動化することができる。また空気のみが濾過部材を通過する際には吸引抵抗を可及的に小さくできるため、撹拌動作時において細胞単離装置にかかる負荷を最小限に抑えることができる。
【００２４】
上記（３）の構成によれば、濾過部材の所定位置への設置が容易となり、組立て作業性が向上する。
【００２５】
上記（４）の構成によれば、第１の開口に出入りする液流を強めることができ、撹拌処理を円滑に遂行することができる。
【００２６】
上記（５）の構成によれば、ピペット部材に撹拌のための吸引力が作用している場合、ピペット部材に吸着された組織が第１の開口を完全に塞いでしまっても、スリットを通じて液体が流通するため、所望の吸引動作を遂行することができる。また吸引力を印加する細胞単離装置にかかる負荷を低減できる。
【００２７】
上記（６）の構成によれば、組織をピペット部材の先端で掬い取って載置部材上に載置した状態で、ピペット部材を容器に装着することにより、組織を容器内の所定位置に困難なく設置できる。これにより撹拌作業を円滑に遂行することができる。
【００２８】
上記（７）の構成によれば、ピペット部材に撹拌のための加圧力が印加された場合に、第１の開口から噴射された液流が容器の内側壁に衝突し、容器の底部に堆積している組織を巻き上げるような流れを形成する。これにより組織が第１の開口に吸着されやすくなり、撹拌による細胞単離処理を円滑に遂行することができる。
【００２９】
上記（８）の構成によれば、濾過部材が、単離した細胞より小さな物質を濾過するため、必要な裸核化された細胞のみを収集することができる。これにより、精度の良い細胞単離処理を円滑に遂行することができる。
【００３０】
上記（９）の構成によれば、上記（１）の構成と同様の作用効果が得られる。
【００３１】
上記（１０）の構成によれば、上記（２）の構成と同様の作用効果が得られる。
【００３２】
上記（１１）および（１２）の構成によれば、上記（７）の構成と同様の作用効果が得られる。
【００３３】
上記（１３）の構成によれば、液体を容器に収容した際に試薬が当該液体中に溶解し、当該試薬が目的とする処理を撹拌による細胞単離処理と併行して遂行することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の一実施形態に係る細胞単離器具を示す分解斜視図である。
【図２】図１の細胞単離器具を組み立てた状態を示す縦断面図である。
【図３】図１の細胞単離器具を用いて撹拌処理を行なっている状態を示す縦断面図である。
【図４】図１の細胞単離器具を用いて濾過済み細胞浮遊液を回収する状態を示す縦断面図である。
【図５】図１の細胞単離器具の変形例を示す部分拡大図である。
【図６】図１の細胞単離器具の変形例を示す部分拡大図である。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
本発明の実施形態を添付の図面を参照しつつ以下詳細に説明する。
【００３６】
本発明の一実施形態に係る細胞単離器具１を分解した状態を図１に示し、組み立てた状態を図２に示す。細胞単離器具１は、ピペット部材１０と、容器２０とを備えて構成されている。何れも細胞毒性のない樹脂材料等により形成されている。
【００３７】
ピペット部材１０は、本体１１と、フィルタ１２（濾過部材）と、蓋体１３とを備えている。
【００３８】
本体１１は、先端部１１ａが先細り形状とされた中空の円筒状部材である。本体１１の先端（下端）には開口１１ｂ（第１の開口）が形成され、上端面１１ｃには開口１１ｄが形成されている。開口１１ｂと開口１１ｄは、本体１１の内部に形成された通路１４により連通されている。
【００３９】
本体１１の上端部には、保持部材１５が設けられている。保持部材１５は大径部１５ａと小径部１５ｂを有し、大径部１５ａと小径部１５ｂの境界には段部１５ｃが画成されている。大径部１５ａは上端面１１ｃを含んでいる。保持部材１５の役割については後述する。
【００４０】
蓋体１３は、大径部１３ａと小径部１３ｂを有する円筒状の部材であり、大径部１３ａと小径部１３ｂの境界には段部１３ｃが画成されている。大径部１３ａを含む上端面には開口１３ｄ（第２の開口）が形成され、小径部１３ｂを含む下端面には開口１３ｅが形成されている。開口１３ｄと開口１３ｅは、蓋体１３の内部に形成された通路１６により連通されている。
【００４１】
フィルタ１２は、細胞毒性のない材料により形成され、単離された細胞（裸核化された細胞）を含む液体が通過可能な程度の目開きを有する。本実施形態では、フィルタ１２として目開き５０μｍのナイロンメッシュが用いられ、開口１３ｅを覆うように蓋体１３に接着または溶着されている。
【００４２】
図２に示されるように、フィルタ１２および蓋体１３の小径部１３ｂが開口１１ｄに挿入されて本体１１に装着され、本体１１と蓋体１３は本発明の筒体を構成する。蓋体１３の段部１３ｃは本体１１の上端面１１ｃに接着または溶着される。この状態において、本体１１の通路１４（第１の部分）と蓋体１３の通路１６（第２の部分）とが所定位置に配置されたフィルタ１２を介して連通する。この「所定の位置」の詳細については後述する。
【００４３】
容器２０は、上端面２０ａに開口２０ｂを有し、下端部が丸底の円筒状の部材である。容器２０は透明であり、中空の内部空間２０ｃが視認可能とされている。内部空間２０ｃは開口２０ｂに連通している。
【００４４】
界面活性剤、ＲＮＡ（リボ核酸）除去剤、および蛍光染料色素を含んだ試薬２１が、乾燥あるいは凍結乾燥された状態で内部空間２０ｃの底に収容されている。細胞単離処理に供される組織３０および細胞処理液３１（液体）を内部空間２０ｃに投入すると、試薬２１が細胞処理液３１中に溶解する。細胞処理液３１としては、ＰＢＳ（リン酸緩衝液）等の浸透圧が生体と同じであるものが望ましい。後述する撹拌による細胞単離処理と併行して、界面活性剤による組織細胞の裸核化、ＲＮＡ除去剤によるＲＮＡ除去、および蛍光染料色素による裸核化されたＤＮＡ細胞核の染色を遂行することができる。これにより後述の細胞単離装置に回収された後、蛍光分析装置（フローサイトメータ）等による測定が可能な状態となり、迅速な診断を実現できる。
【００４５】
図２に示されるように、組織３０および細胞処理液３１を内部空間２０ｃに収容した容器２０にピペット部材１０が装着される。具体的には、容器２０の上端面２０ａが保持部材１５の段部１５ｃに当接するまで、ピペット部材１０の本体１１が容器２０の開口２０ｂから内部空間２０ｃへ挿入される。この状態において、保持部材１５の小径部１５ｂの外周面が容器２０の内面に当接する。
【００４６】
すなわち保持部材１５は、容器２０の上端部に嵌合されてピペット部材１０の先端部１０ａを容器２０の内部空間２０ｃにおける所定の位置に配置する。具体的には、本体１１の先端（開口１１ｂ）は容器２０の中心軸Ｃ１（図１参照）上に配置され、内部空間２０ｃの底と一定の間隔を介して対向する。図２に示される状態では、本体１１の先端と内部空間２０ｃの底との間に投入された組織３０が位置している。本体１１の先端部１１ａは投入された細胞処理液３１に浸っている。
【００４７】
次に図３を参照しつつ、本実施形態に係る細胞単離器具１を用いた細胞単離処理について説明する。
【００４８】
先ず図２に示されるように組み立てられた細胞単離器具１の上端部が、図３に示されるように、細胞単離装置が備えるノズル４０の下端部に接続される。具体的には、ノズル４０内の通路４１と蓋体１３内の通路１６とが、適宜の係合構造を介して気密液密的に連通される。
【００４９】
詳細は図示を省略するが、細胞単離装置はノズル４０に接続されたポンプ機構を備えている。ユーザが設定した撹拌条件（撹拌強さ、繰り返し回数、継続時間等）に基づいて制御部がポンプ機構を制御し、加圧状態と減圧状態とを形成可能に構成されている。加圧状態においては、通路４１を通じてノズル４０から空気が吹き出し、減圧状態においては、通路４１を通じてノズル４０から空気が吸入される。
【００５０】
加圧状態と減圧状態を繰り返すことにより、ノズル４０に接続されたピペット部材１０を通じて容器２０内の組織３０および組織処理液３１（試薬２１を含む）を撹拌することができる。
【００５１】
図３の（ａ）は、細胞単離装置が減圧状態を形成している状態を示している。ピペット部材１０には所定の吸引力（第１の吸引力）が作用し、容器２０内の組織処理液３１はピペット部材１０に吸い上げられる。組織処理液３１の一部は通路１４内を上昇し、組織３０はピペット部材１０の先端（開口１１ｂ）に吸着される。このとき、ピペット部材１０の先端との衝突によって組織の一部が粉砕される。
【００５２】
図３の（ｂ）は、細胞単離装置が加圧状態を形成している状態を示している。ピペット部材１０には所定の圧力が加わり、通路１４内の組織処理液３１は開口１１ｂから噴射されて容器２０の内部空間２０ｃに戻される。このとき開口１１ｂに吸着していた組織３０は、噴射の衝撃で組織の一部を粉砕されつつ組織処理液３１内に戻される。
【００５３】
上記の吸い込みと噴き出しを繰り返し行なうことにより、組織３０は次第に細かく粉砕され、ミンスされた状態となる。一定時間の撹拌処理を行なうことにより、単離された細胞を含んだ懸濁液３２（図４参照）を得ることができる。
【００５４】
単離された細胞は病理解析に供されるが、懸濁液３２中には単離細胞以外にもミンスされた不要な組織片が浮遊している。単離された細胞のみを解析に供するために、単離細胞よりも大きな組織片を濾過する工程が必要となる。
【００５５】
本実施形態においては、細胞単離器具１をノズル４０に接続したまま、撹拌処理時に作用させた吸引力よりも大きな吸引力（第２の吸引力）を、細胞単離装置がピペット部材１０に作用させる。
【００５６】
すると図４に示されるように、容器２０内の懸濁液３２はピペット部材１０に吸い込まれ、通路１４内を上昇する。細胞単離装置が吸引を継続すると、懸濁液３２は通路１４と通路１６を隔てているフィルタ１２に到達する。懸濁液３２がフィルタ１２を通過することによって不要な組織片が濾過され、所望の単離細胞を含む細胞浮遊液３３が通路１６に得られる。さらに吸引動作を継続することにより、細胞浮遊液３３が細胞単離装置に回収され、フローサイトメータによる蛍光分析等の解析処理に供される。
【００５７】
つまり、撹拌による細胞単離処理と、懸濁液を濾過することによる単離細胞の回収処理とを、細胞単離装置のノズル４０に同一の細胞単離器具１を接続したままで遂行することが可能である。懸濁液を別の容器に移し替えて濾過を行なっていた従来の工程と比較して大幅な作業効率の向上が可能であり、また濾過による単離細胞の回収処理をも自動化することができる。
【００５８】
また本実施形態に係るピペット部材１０は、本体１１にフィルタ１２および蓋体１３を装着した簡素な構成であり、上記の効果を低廉な部品・製造コストで得ることが可能である。またピペット部材１０は、本体１１にフィルタ１２および蓋体１３とが装着した状態で廃棄可能であり、使用者が懸濁液に直接触れることを避けられるため、安全性に優れる。
【００５９】
ここで前述したフィルタ１２の「所定位置」について説明する。上記のように、細胞単離装置は、撹拌を行なうためと濾過を行なうための二種類の吸引力をピペット部材１０に作用させている。本実施形態においては、フィルタ１２の位置は、撹拌のための吸引力によっては通路１４に進入した液体はフィルタ１２に到達せず、濾過のための吸引力によってのみ通路１４に進入した液体がフィルタ１２を通過するように定められている。
【００６０】
すなわち図３の（ａ）に示されるように、撹拌時に印加される吸引力によっては空気のみがフィルタ１２を通過し、図４に示されるように撹拌時よりも大きな吸引力が印加された場合に液体がフィルタ１２を通過する。つまり撹拌時にはフィルタ１２は液体に浸らず、空気のみがフィルタ１２を通過するため、撹拌抵抗を可及的に小さくできる。よって撹拌動作時において細胞単離装置のポンプ機構にかかる負荷を最小限に抑えることができる。
【００６１】
次に図５および図６を参照しつつ、本実施形態に係る細胞単離器具１の変形例について説明する。
【００６２】
図５の（ａ）に示されるように、ピペット部材１０の先端の開口１１ｂの近傍にスリット１７が形成された構成としてもよい。
【００６３】
図３の（ａ）に示されるように、ピペット部材１０に撹拌のための吸引力が作用している場合、ピペット部材１０に吸着された組織３０が開口１１を完全に塞いでしまうことがある。本変形例の構成によれば、そのような場合でもスリット１７を通じて細胞処理液３１が流通するため、所望の吸引動作を遂行することができる。また吸引力を印加する細胞単離装置のポンプ機構にかかる負荷を低減できる。
【００６４】
スリット１７は、開口１１ｂの近傍に形成されて細胞処理液３１の流通を妨げないものであれば、その位置と形状は特に限定されるものではない。図５の（ａ）に示されるように開口１１ｂと連続していてもよく、図５の（ｂ）に示されるように開口１１ｂから独立していてもよい。すなわち開口１１ｂ以外に液体が流通可能な部位を有していればよい。
【００６５】
図５の（ｃ）に示されるように、ピペット部材１０の先端の開口１１ｂの近傍に耳状の載置部材１８が形成される構成としてもよい。
【００６６】
本変形例の構成によれば、組織３０をピペット部材１０の先端で掬い取って載置部材１８上に載置した状態で、ピペット部材１０を容器２０に装着することにより、組織３０を内部空間２０ｃの底部の所定位置に困難なく設置できる。これにより撹拌作業を円滑に遂行することができる。載置部材１８の形状と大きさは、取り扱う組織３０に応じて適宜定められる。
【００６７】
図６の（ａ）に示されるように、ピペット部材１０が容器２０に装着された状態において、ピペット部材１０の先端の開口１１ｂが容器２０の中心軸Ｃ１から外れた位置に配置される構成としてもよい。換言すると、開口１１ｂの中心軸Ｃ２が容器２０の中心軸Ｃ１に対して傾斜している構成としてもよい。
【００６８】
このような構成を得るためには適宜の構成を採用可能である。例えばピペット部材１０における本体１１の先端部１１ａを屈曲した形状としたり、保持部材１５の形状を中心軸Ｃ１に対して非対称とし、先端部１１ａが傾斜した姿勢となるように構成したりすることができる。
【００６９】
本変形例の構成によれば、ピペット部材１０に撹拌のための加圧力が印加された場合に、開口１１ｂから噴射された液流が内部空間２０ｃの内側壁に衝突し、底部に張り付いて堆積している組織３０を巻き上げるような流れを形成する。これにより組織３０が開口１１ｂに吸着されやすくなり、撹拌による細胞単離処理を円滑に遂行することができる。
【００７０】
また同様の効果を得るために、図６の（ｂ）に示されるように、細胞単離器具１が細胞単離装置に接続された状態において、容器２０の中心軸Ｃ１が鉛直方向Ｖに対して傾斜するように構成してもよい。
【００７１】
このような構成を得るためには適宜の構成を採用可能である。例えば細胞単離装置のノズル４０と接続される蓋体１３に屈曲部分を設け、本体１１および容器２０が鉛直方向Ｖに対して傾斜した姿勢となるように構成することができる。
【００７２】
さらに、図６の（ｃ）に示されるように、容器２０の中心軸Ｃ１と開口１１ｂの中心軸Ｃ２とが平行かつ非同軸な関係となる構成としてもよい。
【００７３】
上記実施形態は本発明の理解を容易にするためのものであって、本発明を限定するものではない。本発明は、その趣旨を逸脱することなく変更・改良され得ると共に、本発明にはその等価物が含まれる事は勿論である。
【００７４】
ピペット部材１０において、蓋体１３は必ずしも必要でない。細胞単離装置のノズル４０に接続される基端側の開口を本体１１が備え、本体１１内の通路１４がフィルタ１２によって撹拌用の部分（第１の部分）と細胞浮遊液回収用の部分（第２の部分）に隔てられている構成としてもよい。この場合、フィルタ１２は通路１４の適宜の位置に接着あるいは溶着される。可能であれば本体１１と一体成形してもよい。
【００７５】
但し上記実施形態のように、ピペット部材１０を本体１１と蓋体１３を含むように構成すると、フィルタ１２の所定位置への設置が容易となり、組立て作業性が向上する。
【００７６】
フィルタ１２は、必ずしも蓋体１３の開口１３ｅを覆うように接着または溶着されている必要はない。例えば蓋体１３の小径部１３ｂよりも大きな径を有するフィルタ１２を、本体１１の開口１１ｄの内面と蓋体１３の小径部１３ｂの外面とで挟み込んで所定位置に固定する構成としてもよい。換言すると、フィルタ１２の少なくとも一部が蓋体１３と接する構成とすれば、前記の組立て容易性は確保され得る。
【００７７】
本体１１の先端部１１ａは、必ずしも先細り形状とされている必要はない。本体１１の開口１１ｂの大きさは適宜に定めることが可能である。但し上記実施形態のように、本体１１の開口１１ｂの大きさを蓋体１３の開口１３ｄよりも径小に形成することにより、撹拌処理時に強い液流を得ることができる。
【符号の説明】
【００７８】
１：細胞単離器具、１０：ピペット部材、１１：本体、１１ｂ：開口、１２：フィルタ、１３：蓋体、１３ｄ：開口、１４：通路、１６：通路、１７：スリット、１８：載置部材、２０：容器、２１：試薬、３０：組織、３１：細胞処理液、３２：懸濁液、３３：細胞浮遊液、４０：ノズル、Ｃ１：容器の中心軸、Ｖ：鉛直方向
【技術分野】
【０００１】
本発明は、病理解析を行なう場合において用いられる細胞単離器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
病理標本作成の後に、細胞検査士や病理医によって組織切片による病理診断が行なわれている。組織から細胞単離を行なうためには、刃物を用いたミンスが必要である。更に、単離した細胞を含む細胞浮遊液を得るためにはミンスした後の懸濁液をフィルタによって濾過する必要がある。このように病理診断に用いる細胞浮遊液を得るためには二段階の操作が必要である。
【０００３】
細胞検査士もしくは病理医による診断や標本作成のためには、熟練した技術が必要であり、そのような技術の差により診断結果に違いが生じるおそれがある。また組織摘出から診断を行なうまでには、組織固定、切片作成、染色といった手技が必要であり、細胞検査士等を一定時間拘束する。このため診断までの手技を自動化することが求められている。
【０００４】
特許文献１には、細胞培養を行なうために必要な組織をミンスする器具が記載されている。この器具は、上部開口と下部開口の各々に金網を設けた筒体を備えている。この金網上に組織片を載置し、筒体を遠心分離に供することで組織がミンスされる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許４１５６８４７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献１に記載の構成によれば、ミンスを自動的に行なうことが可能であるが、切片作成や染色といった手技を自動化することはできない。また単離細胞を含む細胞浮遊液の回収を自動化することも想定されていない。
【０００７】
本発明は上記課題の少なくとも一部を解決するためになされたものであり、組織（生体組織）から単離された細胞を効率的に回収可能な細胞単離器具を低コストで提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題の少なくとも一部を解決するために、本発明によれば、以下に掲げる種々の態様を採り得る。
【０００９】
（１）本発明の第１の態様は、組織と液体を収容可能な容器に装着可能であって、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材であって、（Ａ）前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、（Ｂ）前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【００１０】
（２）本発明の第１の態様においては、前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている。
【００１１】
（３）本発明の第１の態様においては、前記第２の開口の一部を構成する蓋体を更に備え、前記濾過部材は、少なくとも一部が前記蓋体と接している。
【００１２】
（４）本発明の第１の態様においては、前記第１の開口は、前記第２の開口よりも径小に形成されている。
【００１３】
（５）本発明の第１の態様においては、前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記通路と連通するスリットが形成されている。
【００１４】
（６）本発明の第１の態様においては、前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記組織を載置可能な載置部材が形成されている。
【００１５】
（７）本発明の第１の態様においては、前記ピペット部材が前記容器に装着された状態において、前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されるように構成されている。
【００１６】
（８）本発明の第１の態様においては、前記濾過部材は、単離した細胞より小さな物質を濾過するように構成されている。
【００１７】
（９）本発明の第２の態様は、（Ａ）組織と液体を収容可能な容器と、（Ｂ）前記容器に装着され、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材とを備える細胞単離器具であって、前記ピペット部材は、（Ｃ）前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、（Ｄ）前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【００１８】
（１０）本発明の第２の態様においては、前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている。
【００１９】
（１１）本発明の第２の態様においては、前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されている。
【００２０】
（１２）本発明の第２の態様においては、前記細胞単離器具が前記細胞単離装置に装着された状態において、前記容器の中心軸が鉛直方向に対して傾斜するように構成されている。
【００２１】
（１３）本発明の第２の態様においては、前記容器の底部には乾燥された試薬が配置されている。
【発明の効果】
【００２２】
上記（１）の構成によれば、通路の第１の部分を用いて撹拌による細胞単離処理を行ない、濾過部材に当該処理により得られた懸濁液を通過させて単離細胞を含んだ細胞浮遊液を通路の第２の部分に得ることができる。したがって、細胞単離処理と単離細胞の回収処理とを、細胞単離装置に同一のピペット部材を接続したままで遂行することが可能である。懸濁液を別の容器に移し替えて濾過を行なっていた従来の工程と比較して大幅な作業効率の向上が簡素な構成で可能である。また、懸濁液に異物が混入したり、使用者が触れる可能性が極めて低くすることができるため、精度良く、安全な処理が可能である。
【００２３】
上記（２）の構成によれば、撹拌による細胞単離処理のみならず、濾過による単離細胞の回収処理をも容易に自動化することができる。また空気のみが濾過部材を通過する際には吸引抵抗を可及的に小さくできるため、撹拌動作時において細胞単離装置にかかる負荷を最小限に抑えることができる。
【００２４】
上記（３）の構成によれば、濾過部材の所定位置への設置が容易となり、組立て作業性が向上する。
【００２５】
上記（４）の構成によれば、第１の開口に出入りする液流を強めることができ、撹拌処理を円滑に遂行することができる。
【００２６】
上記（５）の構成によれば、ピペット部材に撹拌のための吸引力が作用している場合、ピペット部材に吸着された組織が第１の開口を完全に塞いでしまっても、スリットを通じて液体が流通するため、所望の吸引動作を遂行することができる。また吸引力を印加する細胞単離装置にかかる負荷を低減できる。
【００２７】
上記（６）の構成によれば、組織をピペット部材の先端で掬い取って載置部材上に載置した状態で、ピペット部材を容器に装着することにより、組織を容器内の所定位置に困難なく設置できる。これにより撹拌作業を円滑に遂行することができる。
【００２８】
上記（７）の構成によれば、ピペット部材に撹拌のための加圧力が印加された場合に、第１の開口から噴射された液流が容器の内側壁に衝突し、容器の底部に堆積している組織を巻き上げるような流れを形成する。これにより組織が第１の開口に吸着されやすくなり、撹拌による細胞単離処理を円滑に遂行することができる。
【００２９】
上記（８）の構成によれば、濾過部材が、単離した細胞より小さな物質を濾過するため、必要な裸核化された細胞のみを収集することができる。これにより、精度の良い細胞単離処理を円滑に遂行することができる。
【００３０】
上記（９）の構成によれば、上記（１）の構成と同様の作用効果が得られる。
【００３１】
上記（１０）の構成によれば、上記（２）の構成と同様の作用効果が得られる。
【００３２】
上記（１１）および（１２）の構成によれば、上記（７）の構成と同様の作用効果が得られる。
【００３３】
上記（１３）の構成によれば、液体を容器に収容した際に試薬が当該液体中に溶解し、当該試薬が目的とする処理を撹拌による細胞単離処理と併行して遂行することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の一実施形態に係る細胞単離器具を示す分解斜視図である。
【図２】図１の細胞単離器具を組み立てた状態を示す縦断面図である。
【図３】図１の細胞単離器具を用いて撹拌処理を行なっている状態を示す縦断面図である。
【図４】図１の細胞単離器具を用いて濾過済み細胞浮遊液を回収する状態を示す縦断面図である。
【図５】図１の細胞単離器具の変形例を示す部分拡大図である。
【図６】図１の細胞単離器具の変形例を示す部分拡大図である。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
本発明の実施形態を添付の図面を参照しつつ以下詳細に説明する。
【００３６】
本発明の一実施形態に係る細胞単離器具１を分解した状態を図１に示し、組み立てた状態を図２に示す。細胞単離器具１は、ピペット部材１０と、容器２０とを備えて構成されている。何れも細胞毒性のない樹脂材料等により形成されている。
【００３７】
ピペット部材１０は、本体１１と、フィルタ１２（濾過部材）と、蓋体１３とを備えている。
【００３８】
本体１１は、先端部１１ａが先細り形状とされた中空の円筒状部材である。本体１１の先端（下端）には開口１１ｂ（第１の開口）が形成され、上端面１１ｃには開口１１ｄが形成されている。開口１１ｂと開口１１ｄは、本体１１の内部に形成された通路１４により連通されている。
【００３９】
本体１１の上端部には、保持部材１５が設けられている。保持部材１５は大径部１５ａと小径部１５ｂを有し、大径部１５ａと小径部１５ｂの境界には段部１５ｃが画成されている。大径部１５ａは上端面１１ｃを含んでいる。保持部材１５の役割については後述する。
【００４０】
蓋体１３は、大径部１３ａと小径部１３ｂを有する円筒状の部材であり、大径部１３ａと小径部１３ｂの境界には段部１３ｃが画成されている。大径部１３ａを含む上端面には開口１３ｄ（第２の開口）が形成され、小径部１３ｂを含む下端面には開口１３ｅが形成されている。開口１３ｄと開口１３ｅは、蓋体１３の内部に形成された通路１６により連通されている。
【００４１】
フィルタ１２は、細胞毒性のない材料により形成され、単離された細胞（裸核化された細胞）を含む液体が通過可能な程度の目開きを有する。本実施形態では、フィルタ１２として目開き５０μｍのナイロンメッシュが用いられ、開口１３ｅを覆うように蓋体１３に接着または溶着されている。
【００４２】
図２に示されるように、フィルタ１２および蓋体１３の小径部１３ｂが開口１１ｄに挿入されて本体１１に装着され、本体１１と蓋体１３は本発明の筒体を構成する。蓋体１３の段部１３ｃは本体１１の上端面１１ｃに接着または溶着される。この状態において、本体１１の通路１４（第１の部分）と蓋体１３の通路１６（第２の部分）とが所定位置に配置されたフィルタ１２を介して連通する。この「所定の位置」の詳細については後述する。
【００４３】
容器２０は、上端面２０ａに開口２０ｂを有し、下端部が丸底の円筒状の部材である。容器２０は透明であり、中空の内部空間２０ｃが視認可能とされている。内部空間２０ｃは開口２０ｂに連通している。
【００４４】
界面活性剤、ＲＮＡ（リボ核酸）除去剤、および蛍光染料色素を含んだ試薬２１が、乾燥あるいは凍結乾燥された状態で内部空間２０ｃの底に収容されている。細胞単離処理に供される組織３０および細胞処理液３１（液体）を内部空間２０ｃに投入すると、試薬２１が細胞処理液３１中に溶解する。細胞処理液３１としては、ＰＢＳ（リン酸緩衝液）等の浸透圧が生体と同じであるものが望ましい。後述する撹拌による細胞単離処理と併行して、界面活性剤による組織細胞の裸核化、ＲＮＡ除去剤によるＲＮＡ除去、および蛍光染料色素による裸核化されたＤＮＡ細胞核の染色を遂行することができる。これにより後述の細胞単離装置に回収された後、蛍光分析装置（フローサイトメータ）等による測定が可能な状態となり、迅速な診断を実現できる。
【００４５】
図２に示されるように、組織３０および細胞処理液３１を内部空間２０ｃに収容した容器２０にピペット部材１０が装着される。具体的には、容器２０の上端面２０ａが保持部材１５の段部１５ｃに当接するまで、ピペット部材１０の本体１１が容器２０の開口２０ｂから内部空間２０ｃへ挿入される。この状態において、保持部材１５の小径部１５ｂの外周面が容器２０の内面に当接する。
【００４６】
すなわち保持部材１５は、容器２０の上端部に嵌合されてピペット部材１０の先端部１０ａを容器２０の内部空間２０ｃにおける所定の位置に配置する。具体的には、本体１１の先端（開口１１ｂ）は容器２０の中心軸Ｃ１（図１参照）上に配置され、内部空間２０ｃの底と一定の間隔を介して対向する。図２に示される状態では、本体１１の先端と内部空間２０ｃの底との間に投入された組織３０が位置している。本体１１の先端部１１ａは投入された細胞処理液３１に浸っている。
【００４７】
次に図３を参照しつつ、本実施形態に係る細胞単離器具１を用いた細胞単離処理について説明する。
【００４８】
先ず図２に示されるように組み立てられた細胞単離器具１の上端部が、図３に示されるように、細胞単離装置が備えるノズル４０の下端部に接続される。具体的には、ノズル４０内の通路４１と蓋体１３内の通路１６とが、適宜の係合構造を介して気密液密的に連通される。
【００４９】
詳細は図示を省略するが、細胞単離装置はノズル４０に接続されたポンプ機構を備えている。ユーザが設定した撹拌条件（撹拌強さ、繰り返し回数、継続時間等）に基づいて制御部がポンプ機構を制御し、加圧状態と減圧状態とを形成可能に構成されている。加圧状態においては、通路４１を通じてノズル４０から空気が吹き出し、減圧状態においては、通路４１を通じてノズル４０から空気が吸入される。
【００５０】
加圧状態と減圧状態を繰り返すことにより、ノズル４０に接続されたピペット部材１０を通じて容器２０内の組織３０および組織処理液３１（試薬２１を含む）を撹拌することができる。
【００５１】
図３の（ａ）は、細胞単離装置が減圧状態を形成している状態を示している。ピペット部材１０には所定の吸引力（第１の吸引力）が作用し、容器２０内の組織処理液３１はピペット部材１０に吸い上げられる。組織処理液３１の一部は通路１４内を上昇し、組織３０はピペット部材１０の先端（開口１１ｂ）に吸着される。このとき、ピペット部材１０の先端との衝突によって組織の一部が粉砕される。
【００５２】
図３の（ｂ）は、細胞単離装置が加圧状態を形成している状態を示している。ピペット部材１０には所定の圧力が加わり、通路１４内の組織処理液３１は開口１１ｂから噴射されて容器２０の内部空間２０ｃに戻される。このとき開口１１ｂに吸着していた組織３０は、噴射の衝撃で組織の一部を粉砕されつつ組織処理液３１内に戻される。
【００５３】
上記の吸い込みと噴き出しを繰り返し行なうことにより、組織３０は次第に細かく粉砕され、ミンスされた状態となる。一定時間の撹拌処理を行なうことにより、単離された細胞を含んだ懸濁液３２（図４参照）を得ることができる。
【００５４】
単離された細胞は病理解析に供されるが、懸濁液３２中には単離細胞以外にもミンスされた不要な組織片が浮遊している。単離された細胞のみを解析に供するために、単離細胞よりも大きな組織片を濾過する工程が必要となる。
【００５５】
本実施形態においては、細胞単離器具１をノズル４０に接続したまま、撹拌処理時に作用させた吸引力よりも大きな吸引力（第２の吸引力）を、細胞単離装置がピペット部材１０に作用させる。
【００５６】
すると図４に示されるように、容器２０内の懸濁液３２はピペット部材１０に吸い込まれ、通路１４内を上昇する。細胞単離装置が吸引を継続すると、懸濁液３２は通路１４と通路１６を隔てているフィルタ１２に到達する。懸濁液３２がフィルタ１２を通過することによって不要な組織片が濾過され、所望の単離細胞を含む細胞浮遊液３３が通路１６に得られる。さらに吸引動作を継続することにより、細胞浮遊液３３が細胞単離装置に回収され、フローサイトメータによる蛍光分析等の解析処理に供される。
【００５７】
つまり、撹拌による細胞単離処理と、懸濁液を濾過することによる単離細胞の回収処理とを、細胞単離装置のノズル４０に同一の細胞単離器具１を接続したままで遂行することが可能である。懸濁液を別の容器に移し替えて濾過を行なっていた従来の工程と比較して大幅な作業効率の向上が可能であり、また濾過による単離細胞の回収処理をも自動化することができる。
【００５８】
また本実施形態に係るピペット部材１０は、本体１１にフィルタ１２および蓋体１３を装着した簡素な構成であり、上記の効果を低廉な部品・製造コストで得ることが可能である。またピペット部材１０は、本体１１にフィルタ１２および蓋体１３とが装着した状態で廃棄可能であり、使用者が懸濁液に直接触れることを避けられるため、安全性に優れる。
【００５９】
ここで前述したフィルタ１２の「所定位置」について説明する。上記のように、細胞単離装置は、撹拌を行なうためと濾過を行なうための二種類の吸引力をピペット部材１０に作用させている。本実施形態においては、フィルタ１２の位置は、撹拌のための吸引力によっては通路１４に進入した液体はフィルタ１２に到達せず、濾過のための吸引力によってのみ通路１４に進入した液体がフィルタ１２を通過するように定められている。
【００６０】
すなわち図３の（ａ）に示されるように、撹拌時に印加される吸引力によっては空気のみがフィルタ１２を通過し、図４に示されるように撹拌時よりも大きな吸引力が印加された場合に液体がフィルタ１２を通過する。つまり撹拌時にはフィルタ１２は液体に浸らず、空気のみがフィルタ１２を通過するため、撹拌抵抗を可及的に小さくできる。よって撹拌動作時において細胞単離装置のポンプ機構にかかる負荷を最小限に抑えることができる。
【００６１】
次に図５および図６を参照しつつ、本実施形態に係る細胞単離器具１の変形例について説明する。
【００６２】
図５の（ａ）に示されるように、ピペット部材１０の先端の開口１１ｂの近傍にスリット１７が形成された構成としてもよい。
【００６３】
図３の（ａ）に示されるように、ピペット部材１０に撹拌のための吸引力が作用している場合、ピペット部材１０に吸着された組織３０が開口１１を完全に塞いでしまうことがある。本変形例の構成によれば、そのような場合でもスリット１７を通じて細胞処理液３１が流通するため、所望の吸引動作を遂行することができる。また吸引力を印加する細胞単離装置のポンプ機構にかかる負荷を低減できる。
【００６４】
スリット１７は、開口１１ｂの近傍に形成されて細胞処理液３１の流通を妨げないものであれば、その位置と形状は特に限定されるものではない。図５の（ａ）に示されるように開口１１ｂと連続していてもよく、図５の（ｂ）に示されるように開口１１ｂから独立していてもよい。すなわち開口１１ｂ以外に液体が流通可能な部位を有していればよい。
【００６５】
図５の（ｃ）に示されるように、ピペット部材１０の先端の開口１１ｂの近傍に耳状の載置部材１８が形成される構成としてもよい。
【００６６】
本変形例の構成によれば、組織３０をピペット部材１０の先端で掬い取って載置部材１８上に載置した状態で、ピペット部材１０を容器２０に装着することにより、組織３０を内部空間２０ｃの底部の所定位置に困難なく設置できる。これにより撹拌作業を円滑に遂行することができる。載置部材１８の形状と大きさは、取り扱う組織３０に応じて適宜定められる。
【００６７】
図６の（ａ）に示されるように、ピペット部材１０が容器２０に装着された状態において、ピペット部材１０の先端の開口１１ｂが容器２０の中心軸Ｃ１から外れた位置に配置される構成としてもよい。換言すると、開口１１ｂの中心軸Ｃ２が容器２０の中心軸Ｃ１に対して傾斜している構成としてもよい。
【００６８】
このような構成を得るためには適宜の構成を採用可能である。例えばピペット部材１０における本体１１の先端部１１ａを屈曲した形状としたり、保持部材１５の形状を中心軸Ｃ１に対して非対称とし、先端部１１ａが傾斜した姿勢となるように構成したりすることができる。
【００６９】
本変形例の構成によれば、ピペット部材１０に撹拌のための加圧力が印加された場合に、開口１１ｂから噴射された液流が内部空間２０ｃの内側壁に衝突し、底部に張り付いて堆積している組織３０を巻き上げるような流れを形成する。これにより組織３０が開口１１ｂに吸着されやすくなり、撹拌による細胞単離処理を円滑に遂行することができる。
【００７０】
また同様の効果を得るために、図６の（ｂ）に示されるように、細胞単離器具１が細胞単離装置に接続された状態において、容器２０の中心軸Ｃ１が鉛直方向Ｖに対して傾斜するように構成してもよい。
【００７１】
このような構成を得るためには適宜の構成を採用可能である。例えば細胞単離装置のノズル４０と接続される蓋体１３に屈曲部分を設け、本体１１および容器２０が鉛直方向Ｖに対して傾斜した姿勢となるように構成することができる。
【００７２】
さらに、図６の（ｃ）に示されるように、容器２０の中心軸Ｃ１と開口１１ｂの中心軸Ｃ２とが平行かつ非同軸な関係となる構成としてもよい。
【００７３】
上記実施形態は本発明の理解を容易にするためのものであって、本発明を限定するものではない。本発明は、その趣旨を逸脱することなく変更・改良され得ると共に、本発明にはその等価物が含まれる事は勿論である。
【００７４】
ピペット部材１０において、蓋体１３は必ずしも必要でない。細胞単離装置のノズル４０に接続される基端側の開口を本体１１が備え、本体１１内の通路１４がフィルタ１２によって撹拌用の部分（第１の部分）と細胞浮遊液回収用の部分（第２の部分）に隔てられている構成としてもよい。この場合、フィルタ１２は通路１４の適宜の位置に接着あるいは溶着される。可能であれば本体１１と一体成形してもよい。
【００７５】
但し上記実施形態のように、ピペット部材１０を本体１１と蓋体１３を含むように構成すると、フィルタ１２の所定位置への設置が容易となり、組立て作業性が向上する。
【００７６】
フィルタ１２は、必ずしも蓋体１３の開口１３ｅを覆うように接着または溶着されている必要はない。例えば蓋体１３の小径部１３ｂよりも大きな径を有するフィルタ１２を、本体１１の開口１１ｄの内面と蓋体１３の小径部１３ｂの外面とで挟み込んで所定位置に固定する構成としてもよい。換言すると、フィルタ１２の少なくとも一部が蓋体１３と接する構成とすれば、前記の組立て容易性は確保され得る。
【００７７】
本体１１の先端部１１ａは、必ずしも先細り形状とされている必要はない。本体１１の開口１１ｂの大きさは適宜に定めることが可能である。但し上記実施形態のように、本体１１の開口１１ｂの大きさを蓋体１３の開口１３ｄよりも径小に形成することにより、撹拌処理時に強い液流を得ることができる。
【符号の説明】
【００７８】
１：細胞単離器具、１０：ピペット部材、１１：本体、１１ｂ：開口、１２：フィルタ、１３：蓋体、１３ｄ：開口、１４：通路、１６：通路、１７：スリット、１８：載置部材、２０：容器、２１：試薬、３０：組織、３１：細胞処理液、３２：懸濁液、３３：細胞浮遊液、４０：ノズル、Ｃ１：容器の中心軸、Ｖ：鉛直方向
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組織と液体を収容可能な容器に装着可能であって、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材であって、
前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、
前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【請求項２】
前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている、請求項１に記載のピペット部材。
【請求項３】
前記第２の開口の一部を構成する蓋体を更に備え、
前記濾過部材は、少なくとも一部が前記蓋体と接している、請求項２に記載のピペット部材。
【請求項４】
前記第１の開口は、前記第２の開口よりも径小に形成されている、請求項１ないし３の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項５】
前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記通路と連通するスリットが形成されている、請求項１ないし４の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項６】
前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記組織を載置可能な載置部材が形成されている、請求項１ないし５の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項７】
前記容器に装着された状態において、前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されるように構成されている、請求項１ないし６の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項８】
前記濾過部材は、単離した細胞より小さな物質を濾過する、請求項１ないし７の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項９】
組織と液体を収容可能な容器と、
前記容器に装着され、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材とを備える細胞単離器具であって、
前記ピペット部材は、
前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、
前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【請求項１０】
前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている、請求項９に記載の細胞単離器具。
【請求項１１】
前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されている、請求項９または１０に記載の細胞単離器具。
【請求項１２】
前記細胞単離装置に装着された状態において、前記容器の中心軸が鉛直方向に対して傾斜するように構成されている、請求項９または１０に記載の細胞単離器具。
【請求項１３】
前記容器の底部には乾燥された試薬が配置されている、請求項９ないし１２の何れか１項に記載の細胞単離器具。
【請求項１】
組織と液体を収容可能な容器に装着可能であって、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材であって、
前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、
前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【請求項２】
前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている、請求項１に記載のピペット部材。
【請求項３】
前記第２の開口の一部を構成する蓋体を更に備え、
前記濾過部材は、少なくとも一部が前記蓋体と接している、請求項２に記載のピペット部材。
【請求項４】
前記第１の開口は、前記第２の開口よりも径小に形成されている、請求項１ないし３の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項５】
前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記通路と連通するスリットが形成されている、請求項１ないし４の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項６】
前記筒体における前記第１の開口の近傍に、前記組織を載置可能な載置部材が形成されている、請求項１ないし５の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項７】
前記容器に装着された状態において、前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されるように構成されている、請求項１ないし６の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項８】
前記濾過部材は、単離した細胞より小さな物質を濾過する、請求項１ないし７の何れか１項に記載のピペット部材。
【請求項９】
組織と液体を収容可能な容器と、
前記容器に装着され、撹拌により前記組織から細胞を単離するためのピペット部材とを備える細胞単離器具であって、
前記ピペット部材は、
前記容器に収容される第１の開口と、細胞単離装置に接続される第２の開口とを備え、前記第１の開口と前記第２の開口を連通する通路が形成された筒体と、
前記筒体の内部に設けられ、前記通路を前記第１の開口を含む第１の部分と、前記第２の開口を含む第２の部分とに隔てる濾過部材とを備える。
【請求項１０】
前記濾過部材の位置は、前記撹拌のために前記細胞単離装置が印加する第１の吸引力によっては空気のみが前記濾過部材を通過し、前記第１の吸引力よりも大きな第２の吸引力が前記細胞単離装置により印加された場合に、単離された前記細胞を含む前記液体が前記濾過部材を通過するように定められている、請求項９に記載の細胞単離器具。
【請求項１１】
前記第１の開口が前記容器の中心軸から外れた位置に配置されている、請求項９または１０に記載の細胞単離器具。
【請求項１２】
前記細胞単離装置に装着された状態において、前記容器の中心軸が鉛直方向に対して傾斜するように構成されている、請求項９または１０に記載の細胞単離器具。
【請求項１３】
前記容器の底部には乾燥された試薬が配置されている、請求項９ないし１２の何れか１項に記載の細胞単離器具。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公開番号】特開２０１３−１７４５８（Ｐ２０１３−１７４５８Ａ）
【公開日】平成２５年１月３１日（２０１３．１．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１５５６３６（Ｐ２０１１−１５５６３６）
【出願日】平成２３年７月１４日（２０１１．７．１４）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）「国等の委託研究の成果に係る特許出願（平成２２年度経済産業省「課題解決型医療機器の開発・改良に向けた病院・企業間の連携支援事業」委託研究、産業技術力強化法第１９条の適用を受ける特許出願）」
【出願人】（０００２３０９６２）日本光電工業株式会社 (179)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年１月３１日（２０１３．１．３１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年７月１４日（２０１１．７．１４）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）「国等の委託研究の成果に係る特許出願（平成２２年度経済産業省「課題解決型医療機器の開発・改良に向けた病院・企業間の連携支援事業」委託研究、産業技術力強化法第１９条の適用を受ける特許出願）」
【出願人】（０００２３０９６２）日本光電工業株式会社 (179)
【Ｆターム（参考）】
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