プロスタグランジン含有凍結乾燥品
本発明のシクロデキストリンを含んでいてもよいプロスタグランジンＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物からなる製剤であり、水分含量が約１．５重量％未満であり、さらにマルトースを含む凍結乾燥品は、ＰＧＥ１の分解物としてＰＧＡ１だけでなく、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）の生成も抑制された、より安定化された凍結乾燥品であり、医薬として有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロスタグランジン（ＰＧＥ１）を含有する安定化された凍結乾燥品に関する。さらに詳しくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である安定化された凍結乾燥品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＧにはＰＧＥ、ＰＧＦ、ＰＧＡ等の種類が存在し、それぞれが様々な作用を有する。例えば、ＰＧＥの１種であるＰＧＥ１は血管拡張作用、血小板凝集抑制作用を有し、慢性動脈閉塞症等の予防または／および治療に有効であることが知られている。
しかし、ＰＧＥ１は熱等に対して不安定な物質であり、分解してＰＧＡ１になることが知られており、ＰＧＡ１に分解することのない安定なＰＧＥ１含有製剤の検討が多くなされている。例えば、特開昭４９−６６８１６号公報にはＰＧＥのシクロデキストリン包接化合物またはＰＧＥ類似化合物のシクロデキストリン包接化合物の水溶液に、ビタミンＣまたはクエン酸を添加して凍結乾燥する方法、特開昭５４−１０３８４４号公報にはＰＧまたはＰＧ類似化合物のシクロデキストリン、クエン酸水溶液に少糖類を添加して凍結乾燥する方法、特開昭５７−１５６４６０号公報にはＰＧまたはＰＧ類似化合物、およびシクロデキストリン、および少糖類からなる安定化組成物、特開平１１−２４０８３５号公報にはＰＧＥ１をクエン酸ナトリウム／クエン酸緩衝液に溶解し、無菌ろ過して凍結乾燥したＰＧＥ１含有注射剤組成物がある。
【０００３】
一方、本発明者らはＰＧＥ１の分解生成物について鋭意検討した結果、今まで知られていたＰＧＡ１の他に、ＰＧＥ１のω鎖中の１５位水酸基が脱離することによって生じる、下記に示す分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が生ずることを見出した。
【０００４】
これらの分解生成物は、ＰＧＥ１の分解生成物として知られていたＰＧＡ１とは異なる構造であり、今までまったく知られていなかった。従来のＰＧＥ１またはそのシクロデキストリン包接化合物の安定化方法では、これらの分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成に対して全く未検討であり、かつ未解決であった。例えば、特開昭５７−１５６４６０号公報に記載の解決方法、具体的には、乳糖とＰＧＥ１からなる組成物は分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）が生成する。
医薬品において、主活性物質が経時的に分解することによって分解生成物が増加することは好ましくない。特に、ＰＧは種類により作用が異なるので、分解生成物の有する作用が副作用となる可能性があり好ましくない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる安定化された凍結乾燥品の提供である。つまりＰＧＥ１のＰＧＡ１への分解を抑制することはもちろん、さらに分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解も抑制するという、今までにないより一層安定化されたシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる凍結乾燥品を提供することであって、かつできるだけ少ない添加物によって安定化された凍結乾燥品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは鋭意検討を行った結果、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品は安定化されること、さらに驚いたことにマルトースを添加することによって分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）の生成が極めて抑制された、より一層安定化されたシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる凍結乾燥品となることを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち本発明は、
（１）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品、
（２）さらにマルトースを含む前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（３）薬物がＰＧＥ１のα−シクロデキストリン包接化合物である（１）記載の凍結乾燥品、
（４）マルトースがｐＨ約４．７〜約６．３のマルトース水溶液として添加され製造された凍結乾燥品である前記（２）記載の凍結乾燥品、
（５）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約１００００重量部である前記（２）記載の凍結乾燥品、
（６）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５００〜約１００００重量部である前記（５）記載の凍結乾燥品、
（７）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約２０００〜約３０００重量部である前記（６）に記載の凍結乾燥品、
（８）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約５００重量部である前記（５）に記載の凍結乾燥品、
（９）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約１００〜約３００重量部である前記（８）に記載の凍結乾燥品、
（１０）バイアルに充填した前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（１１）水分含量が約１．０重量％以下である前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（１２）１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約４０〜約６０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である前記（２）に記載の凍結乾燥品、
（１３）１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約５０〜約１５０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である前記（２）に記載の凍結乾燥品、
（１４）約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されない品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１５）約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下であり、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１６）約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１７）約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１８）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有する水溶液を（ａ）約−５０〜−３０℃で凍結する工程、（ｂ）真空度約５〜２０パスカルで、約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程、および（ｃ）約２５〜５５℃に昇温し、その温度で二次乾燥する工程を含む前記（１）に記載の凍結乾燥品の製造方法、
（１９）前記（１８）に記載の製造方法によって得られる前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（２０）慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤である前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（２１）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを含有する水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるよう凍結乾燥することを特徴とするＰＧＥ１分解抑制方法、
（２２）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびｐＨが約４．７〜約６．３のマルトースを含んでなるｐＨが約４．３〜約５．１の凍結乾燥用水溶液、
（２３）前記（１）に記載の凍結乾燥品の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療方法、
（２４）慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤を製造するための、前記（１）に記載の凍結乾燥品の使用、
（２５）１凍結乾燥品当たり、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含むか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含んでなる製剤であって、水分含量が約０．１〜約０．８重量％である凍結乾燥品、
（２６）約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である前記（２５）に記載の凍結乾燥品、
（２７）約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である前記（２５）に記載の凍結乾燥品、
（２８）約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、または分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である前記（２５）に記載の凍結乾燥品、および
（２９）１凍結乾燥品当たり、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含むか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含んでなる製剤であって、水分含量が約０．１〜約０．８重量％であり、約６０℃で約１週間保存後に実質的に形態変化しなく、ＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上であり、かつ約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、または分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である凍結乾燥品、
に関する。
【０００８】
特開昭５７−１５６４６０号公報にはＰＧまたはＰＧ類似化合物、およびシクロデキストリン、および少糖類からなる安定化組成物が記載されている。しかし、ＰＧＥ１とマルトースの具体的な組合せを示す記載はない。さらにＰＧＥ１が分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）に分解される旨の記載および示唆もない。また、該明細書には安定化組成物の水分含量についての記載はなく、適切な水分含量についての示唆もない。さらに、該明細書に記載されているＰＧＥ１と乳糖からなる凍結乾燥品は、分解生成物（Ｉ）および分解生成物（ＩＩ）が生成した。
【０００９】
本発明者らは、従来の方法では解決できないＰＧＥ１の分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）の生成を抑制し、より安定化された凍結乾燥品を提供することを、水分含量を約１．５重量％未満にすること、さらにマルトースを添加することよって初めて解決した。
医薬品において、その製剤化には主薬以外の種々添加剤が必要となる場合が多いが、副作用等を考慮してできるだけ添加剤は少ないことが好ましい。本発明の凍結乾燥品は、複数の添加剤を必要とせず、マルトースのみを添加剤として添加するだけでもよく、それでもって充分に安定な製剤が得られるから大変好ましい。
【００１０】
本発明において、シクロデキストリンとしては、例えば、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが挙げられ、これらから選ばれる１種または２種以上の混合物が用いられる。特に好ましくはα−シクロデキストリンである。
本発明において、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物のいずれを用いても好ましい。具体的には、ＰＧＥ１、シクロデキストリンを含むＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物が用いられる。好ましくはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物が用いられ、ＰＧＥ１のα−シクロデキストリン包接化合物が特に好ましい。
【００１１】
本発明のＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物は、例えば、特公昭５０−３３６２号公報、特公昭５２−３１４０４号公報に記載されている製造方法によって製造される。ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を製造する際、１重量部のＰＧＥ１に対して、シクロデキストリンを約２０〜約４０重量部用いて製造することが好ましく、約２８〜約３７重量部がより好ましい。特に好ましくは、約３０〜約３５重量部である。例えばα−シクロデキストリンを使用する場合は、１重量部のＰＧＥ１に対して、約３０．２〜約３４．７重量部が好ましい。また、シクロデキストリンを含むＰＧＥ１は通常はシフロデキストリンとＰＧＥ１との混合物である。シクロデキストリンを含むＰＧＥ１の場合に使用するシクロデキストリンの好ましい量およびより好ましい量も同様である。
【００１２】
本発明で用いるマルトースの種類は特に限定されない。結晶、非結晶、無水物および水和物のマルトースであってよい。さらに、市販のマルトースをそのまま本発明に使用してもよいし、さらに精製工程を経てから使用してもよい。また、ｐＨが約４．７〜約６．３であるマルトースが好ましく、より好ましくは約５．０〜約６．０である。ｐＨはマルトースを水に溶解したときの値である。また、その純度は約９８．０％以上であることが好ましい。
本発明で用いるマルトースは、１重量部のＰＧＥ１に対して、約５０〜約１００００重量部を用いることが好ましく、約１００〜約５０００がより好ましい。例えば、１凍結乾燥品当たりのＰＧＥ１が低含量である場合、例えば約５μｇ〜約５０μｇの場合は、１重量部のＰＧＥ１に対して約５００〜約１００００重量部が好ましく、より好ましくは約１５００〜約５０００重量部であり、特に好ましくは約２０００〜約３０００である。１凍結乾燥品当たりのＰＧＥ１が高含量である場合、例えば約４００〜約６００μｇの場合は、１重量部のＰＧＥ１に対して約５０〜約５００重量部が好ましく、より好ましくは約１００〜約３００重量部である。
【００１３】
本発明において、好ましい凍結乾燥品は、１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約４０〜約６０ｍｇ含有する凍結乾燥品、および１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約５０〜約１５０ｍｇ含有する凍結乾燥品である。より好ましくは、１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含有する凍結乾燥品、および１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含有する凍結乾燥品である。
本発明において、マルトースの添加方法は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物と一緒に水（例えば、注射用水）に溶解することで添加する方法か、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥した後、その凍結乾燥品に添加する方法である。より好ましくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物と一緒に水（例えば、注射用水）に溶解することでマルトースを添加する方法である。
【００１４】
本発明の凍結乾燥品の水分含量は約１．５重量％未満である。その中でも約１．０重量％以下であることが好ましい。詳しくは、約０．０５〜約１．０重量％であることが好ましく、より好ましくは約０．１〜約０．８重量％である。またその水分含量は、凍結乾燥品の製造時はもちろん、保存期間を通してその値が維持されることが好ましい。本発明では、凍結乾燥品の製造時における水分含量が、上記値の範囲にあることがより好ましい。
本発明において、凍結乾燥品の水分含量は、カールフィッシャー法によって定量される。本発明において、カールフィッシャー法は通常用いられている方法で行われ、例えば、カールフィッシャー法水分測定装置を用いて行われる。
【００１５】
本発明は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品の製造方法、およびその製造方法によって製造された凍結乾燥品をも包含する。
【００１６】
本発明の凍結乾燥品は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥することによって製造される。より詳しくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液は、マルトースを含んでいてもよく、その水溶液を凍結乾燥するか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥し、その後マルトースを添加することによって、本発明の凍結乾燥品は製造される。本発明の凍結乾燥品は、好ましくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥することによって製造された凍結乾燥品である。例えば、注射用水にマルトースを溶解し、その溶液にシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を溶解後、さらに注射用水で濃度調製するか、または注射用水にシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を溶解し、その溶液に注射用水に溶解したマルトース溶液を加えた後、さらに注射用水で濃度調製して得られる水溶液が用いられる。好ましくは、注射用水にマルトースを溶解し、その溶液にシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を溶解後、さらに注射用水で濃度調製した水溶液が用いられる。さらに、調製された水溶液は無菌ろ過される。また、その調製された水溶液はｐＨが約４．３〜約５．１、より好ましくは約４．５〜約４．８であることが好ましい。
【００１７】
本発明は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびｐＨが約４．７〜約６．３のマルトースを含んでなるｐＨが約４．３〜約５．１の凍結乾燥用水溶液も包含する。
本発明の凍結乾燥品は、本発明の凍結乾燥用水溶液を凍結乾燥することにより製造される。
本発明の凍結乾燥の工程は、（ａ）予備凍結乾燥工程、（ｂ）真空一次乾燥工程および（ｃ）二次乾燥工程を包含する。詳しくは（ａ）予備凍結乾燥工程は、約−５０〜−３０℃で凍結する工程であり、（ｂ）真空一次乾燥工程は、真空度約５〜２０パスカルで、約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程であり、（ｃ）二次乾燥工程は、約２５〜５５℃に昇温し、その温度で二次乾燥する工程である。
【００１８】
より詳しくは、（ａ）予備凍結乾燥工程は、約−５０〜−３０℃で凍結する工程であり、約２〜５時間で行われる。より好ましくは約−５０〜−４５℃で凍結する工程であり、約２．５〜４．５時間で行われる。（ｂ）真空一次乾燥工程は予備凍結乾燥工程に引き続いて行われる工程であり、真空度約５〜２０パスカルの条件下、約−５０〜−３０℃から約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程であり、約５〜２０時間で行われる。より好ましくは真空度約５〜２０パスカルの条件下、約−１５〜１５℃に昇温し、その温度で維持する工程であり、約６〜１６時間で行われる。（ｃ）二次乾燥工程は真空一次乾燥工程に引き続いて行われる工程であり、約−２０〜２０℃から約２５〜５５℃に昇温し、その温度で乾燥し、所望により引き続いてその温度より約５〜１５℃低下させ、その温度で乾燥する工程であり、約７〜１０時間で行われる。より好ましくは約３５〜５０℃に昇温し、その温度で乾燥し、所望により引き続いてその温度より約１０〜１５℃低下させ、その温度で乾燥する工程であり、約７．５〜９．５時間で行われる。上記の凍結乾燥によって得られる凍結乾燥品の水分含量は、通常約１．５重量％未満であるが、例えば、真空度や温度を調節したり、凍結乾燥時間をさらに延長して水分含量をより少なくさせてもよい。
【００１９】
本発明の凍結乾燥品は、例えば、注射用容器に充填される。注射用容器としては、例えば、バイアルまたはアンプルが用いられる。それらは特に限定されず、例えば、ガラス製（例えば、硬質ガラス製）、シリコンコーティングしたガラス製、または内表面を二酸化ケイ素で処理したガラス製、環状ポリオレフィン製、ポリプロピレン製等であってよい。好ましくは、バイアルであり、その容量が３〜５ｍＬの硬質ガラス製のバイアルが好ましい。マルトース、およびシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有する水溶液を注射容器に充填する場合、その容量は０．５〜１．５ｍＬ、好ましくは０．５〜１．０ｍＬの水溶液が充填される。本発明においては、そのような水溶液を容器に充填した状態で凍結乾燥に付してもよい。
【００２０】
本発明は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを含有する水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるよう凍結乾燥することを特徴とするＰＧＥ１分解抑制方法をも包含する。シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物に、さらにマルトースを添加した水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるように、前記の凍結乾燥を行うことによって、ＰＧＥ１のＰＧＡ１への分解が抑制される上、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解も極めて少なくすることができる。
【００２１】
本発明の凍結乾燥品は、ＰＧＥ１のＰＧＡ１への分解が抑制され、分解生成物（Ｉ）および分解生成物（ＩＩ）への分解が極めて少ない、より安定化された注射用の凍結乾燥品である。本発明における安定とは、化学的および物理的な安定性を意味する。化学的安定性には主薬であるＰＧＥ１の残存量が指標となる。物理的安定性には経時的な外観の形態変化が指標となる。物理的安定性が劣ると、凍結乾燥された内容物が収縮、融解、潮解および／または溶解等の形態変化を起こす。
【００２２】
本発明の凍結乾燥品は、４０℃、湿度７５％で６ヶ月間保存する加速試験において、ＰＧＥ１の残存率が約９９．０％以上であり、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることが好ましい。形態変化とは、ケーキ状である凍結乾燥品の収縮、融解、潮解および／または溶解を意味する。また、６０℃で１ヶ月間保存する苛酷試験において、ＰＧＥ１の残存率が約９８．５％以上であることが好ましく、６０℃で１週間保存後に実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることが好ましい。形態変化は前記と同じ意味を表わす。また６０℃で約１ヶ月保存後に、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることがより好ましい。これらの加速試験および苛酷試験から考え、室温で少なくとも３年間保存する長期保存試験におけるＰＧＥ１の残存率は約９８．５％以上であって、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観性状が変化しない品質であることが好ましく、より好ましくは残存率が約９９．０％以上であって、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることである。
【００２３】
一方、本発明の凍結乾燥品は、４０℃、湿度７５％で６ヶ月間保存する加速試験においてＰＧＥ１の分解物の生成率は約１．０％以下であることが好ましい。特に好ましくは、ＰＧＡ１への分解率が約１．０％以下であり、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）が実質的に生成しないことである。６０℃で１ヶ月間保存する苛酷試験においては、ＰＧＥ１の分解物の生成率は約１．５％以下であることが好ましい。特に好ましくは約１．０％以下であり、中でもＰＧＡ１への分解率が約０．８％以下であり、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）が実質的に生成しないか、あるいは分解生成物（Ｉ）への分解率が約０．０５％以下であり、分解生成物（ＩＩ）への分解率が約０．１５％以下であることが好ましい。
【００２４】
本発明の凍結乾燥品は医薬として有用である。例えば、慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤として有用である。より詳しくは、慢性動脈閉塞症、例えば、バージャー病または閉塞性動脈硬化症における四肢潰瘍ならびに安静時疼痛、末梢血行障害に伴う自覚症状ならびに末梢循環、神経機能および／または運動機能障害、血行再建術後の血流、動脈管依存性先天性心疾患、脊柱管狭窄症（頸部、胸部または腰部）ならびにそれに伴う自覚症状（例えば、麻痺、知覚鈍麻、疼痛、しびれ症状）、筋力低下、間歇跛行または歩行能力低下の予防および／または治療剤として有用である。また、高血圧症または虚血性心疾患を合併する場合等の外科手術時の低血圧維持や、外科手術時の異常高血圧の救急処置にも有効である。本発明の凍結乾燥品は、年齢、体重、疾患、その症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、相応しい溶解液（例えば、注射用蒸留水、生理食塩水、種々輸液）に溶解後、１日１時間から２４時間の範囲で動脈内または静脈内に持続的投与される。
【発明の効果】
【００２５】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物およびマルトースを含有し、水分含量が約１．５重量％未満である本発明の凍結乾燥品は、ＰＧＥ１のＰＧＡ１、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解が抑制された従来品よりもより安定なＰＧＥ１凍結乾燥品である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
本発明を以下の実施例によって説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２７】
注射用水（８００ｍＬ）にマルトース（８３．３ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１１４５ｍｇ：ＰＧＥ１として３３．３ｍｇ）を加え、注射用水で全量（１０００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。１５００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約２０パスカルの真空度で、徐々に昇温して１０℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．８重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例２】
【００２８】
実施例１と同様にして得た１５００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１５パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．４重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例３】
【００２９】
実施例１と同様にして得た１５００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．３重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例４】
【００３０】
注射用水（６Ｌ）にマルトース（６２５ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（８．５９ｇ：ＰＧＥ１として２５０ｍｇ）を加え、注射用水で全量（７．５Ｌ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。１２０００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．１重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例５】
【００３１】
注射用水（３９Ｌ）にマルトース（６５００ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１０８３ｇ：ＰＧＥ１として３２．５ｇ）を加え、注射用水で全量（６５Ｌ）とした。溶液を無菌ろ過後、１ｍＬずつバイアルに充填した。６００００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して−１５℃で２５時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．３重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３２】
比較例１
注射用水（８００ｍＬ）にＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１３３３ｍｇ）を溶解し、注射用水で全量（１０００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．５ｍＬずつバイアルに充填した。１５００本のバイアルを７時間かけて−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、５時間かけて昇温後、３０℃で６時間乾燥して凍結乾燥品を製造した。
【００３３】
比較例２
注射用水（８００ｍＬ）に注射用ラクトース（１００ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１３３３ｍｇ）を加え、注射用水で全量（１０００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．５ｍＬずつアンプルに充填した。アンプルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で５．５時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．８重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３４】
比較例３
注射用水（４００ｍＬ）にマルトース（４１．７ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（６６７ｍｇ）を加え、注射用水で全量（５００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。バイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約５パスカルの真空度で、徐々に昇温して−１０℃で３．５時間乾燥した。その後、３０℃で最終乾燥して、水分含量２．４重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３５】
比較例４
注射用水（４００ｍＬ）にマルトース（４１．７ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（６６７ｍｇ）を加え、注射用水で全量（５００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。バイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約２０パスカルの真空度で、徐々に昇温して１０℃で３．５時間乾燥した。その後、３０℃で最終乾燥して、水分含量１．６重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３６】
比較例５
注射用水（３０Ｌ）に注射用ラクトース（６０００ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１０００ｇ；ＰＧＥ１として３０ｇ）を加え、注射用水で全量（６０Ｌ）とした。溶液を無菌ろ過後、１ｍＬずつバイアルに充填した。バイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して０℃で１２時間乾燥した。その後、３０℃で最終乾燥して、水分含量０．５〜０．７重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３７】
実施例６：加速試験条件下での安定性試験
実施例１〜４および比較例２〜４で製造した凍結乾燥品を、温度４０℃、湿度７５％で６ヶ月間保存した時、および比較例１で製造した凍結乾燥品を温度５０℃で１ヶ月間保存した時の、ＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成量を測定し、かつその外観を観察した。結果を表１に示す。なお、ＮＤは非検出（ｎｏｎ−ｄｅｔｅｃｔ）を意味する。
【００３８】
なお、ＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成量は以下の方法によって測定した。
（Ａ）ＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量の測定
実施例および比較例の凍結乾燥品について各々１０個を対象とした。凍結乾燥品が入っているバイアル１個につき水（０．１ｍＬ）を加えて溶解し、１０個分の溶解液を集めた。バイアル１個につき，水／アセトニトリル混液（０．１３ｍＬ；１１：２（ｖ／ｖ）を加え、容器内部を洗い、１０個分の洗液を先に集めた溶解液に加えた。同様の洗浄操作をもう一度繰り返した。集めた溶解液および洗浄液に内標準溶液（０．４ｍＬ）を加え、試料溶液とした。別にＰＧＥ１標準品（１０ｍｇ）をアセトニトリルに溶解して２０ｍＬとした。ＰＧＡ１標準品（１ｍｇ）をアセトニトリルに溶解して１０ｍＬとした。ＰＧＥ１標準品の溶液（１０ｍＬ）に、ＰＧＡ１標準品の溶液（５ｍＬ）と、内標準溶液（１０ｍＬ）を加えた。この溶液は常時−１５℃以下で保存し、用時室温にもどした後必要量をとり、１当量のアセトニトリルと２当量の精製水を加えて希釈して標準溶液とした。試料溶液（４０μＬ）および標準溶液（４０μＬ）について、下記条件で液体クロマトグラフ法により試験を行い、内標準物質のピーク面積に対するＰＧＥ１およびＰＧＡ１のピーク面積の比ＱｔＰＧＥ１、ＱｔＰＧＡ１、ＱｓＰＧＥ１およびＱｓＰＧＡ１を求めた。
【００３９】
ＰＧＥ１量（ｍｇ）＝ＰＧＥ１標準品量（ｍｇ）×ＱｔＰＧＥ１／ＱｓＰＧＥ１×１／５００
ＰＧＡ１量（ｍｇ）＝ＰＧＡ１標準品量（ｍｇ）×ＱｔＰＧＡ１／ＱｓＰＧＡ１×１／５００
内標準溶液＝テストステロン（内部標準物質１ｇ）のアセトニトリル溶液（２０００ｍＬ）
なお、ＰＧＥ１残存率とＰＧＡ１生成率の計算は以下の通りである。
ＰＧＥ１残存率（％）＝ＰＧＥ１量（ｍｇ）／０．０２（ｍｇ）×１００
ＰＧＡ１生成率（％）＝ＰＧＡ１量（ｍｇ）／０．０２（ｍｇ）×１００
【００４０】
［操作条件］
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：２０５ｎｍ）
カラム：内径約４．６ｍｍ、長さ約１５０ｍｍのステンレス管に５μｍの液体クロマトグラフ用オクタデシルシリル化シリカゲルを充填（ＳＵＰＥＲＩＯＲＥＸ ＯＤＳ 資生堂Ｎｏ．４１５０３）。カラムは、標準溶液（４０μＬ）につき、上記の条件で操作するとき、ＰＧＥ１、内標準物質、ＰＧＡ１の順に溶出し、それぞれのピークが完全に分離するものを用いた。
カラム温度：２５℃付近の一定温度
移動相：０．０２ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム溶液にリン酸を加えてｐＨ４．０に調整した液／アセトニトリルの混液（１３：８ｖ／ｖ）
流量：ＰＧＥ１の保持時間が約６分となるように調整（１．１ｍＬ／ｍｉｎ）
【００４１】
（Ｂ）分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）生成量の測定
上記（Ａ）で調製した試料溶液（４０μＬ）につき、次の条件で液体クロマトグラフ法により試験を行い、内標準物質のピーク面積に対する分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）のピーク面積の比を百分率で評価した。
［操作条件］
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：２３５ｎｍ）
流量：分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の保持時間が各々約２４分および３０分となるように調整した（１．４ｍＬ／ｍｉｎ）。
その他の条件は（Ａ）と同様に操作した。
【００４２】
【００４３】
本発明の凍結乾燥品は、保存後のＰＧＥ１残存率が非常に高く、ＰＧＡ１生成率を低く抑え、かつ分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）は検出されなかった。また、外観も白色ケーキ状であり、収縮、融解、潮解および／または溶解等の外観の形態変化は見られなかった。これに対し、マルトースを含有しない比較例１、およびマルトースの代わりにラクトースを含有する比較例２の凍結乾燥品は、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）が検出された。さらに、比較例１の凍結乾燥品の形態はリング状であり、ＰＧＡ１の生成率が高く、ＰＧＥ１の残存率は低かった。また、マルトースを含有し、水分含量が１．５重量％を越える比較例３および比較例４の凍結乾燥品は、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）は検出されなかったが、ＰＧＡ１の生成率が大変高く、ＰＧＥ１の残存率が大変低かった。
【００４４】
実施例７：苛酷試験条件下での安定性試験
実施例１〜５および比較例２〜５で製造した凍結乾燥品を、温度６０℃で１ヶ月間保存した時、および比較例１で製造した凍結乾燥品を温度５０℃で１ヶ月間保存した時のＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成量を測定し、かつその外観を観察した。ＰＧＥ１残存量および分解生成物の生成量は、実施例６と同様の方法にて測定した。なお、実施例５および比較例５におけるＰＧＥ１残存率、ＰＧＡ１生成率の計算方法は、
ＰＧＥ１残存率（％）＝ＰＧＥ１量（ｍｇ）／０．５（ｍｇ）×１００
ＰＧＡ１残存率（％）＝ＰＧＡ１量（ｍｇ）／０．５（ｍｇ）×１００
である。
結果を表２および表３に示す。
【００４５】
【００４６】
本発明の凍結乾燥品は、保存後のＰＧＥ１残存率が非常に高く、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）は検出されないか、もしくは極少量の生成でしかなかった。また、外観も白色ケーキ状であり、収縮、融解、潮解および／または溶解等の外観の形態変化は見られなかった。これに対し、マルトースを含有しない比較例１、およびマルトースの代わりにラクトースを含有する比較例２および比較例５の凍結乾燥品は多くの分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）が生成していた。マルトースを含有し、水分含量が１．５重量％を越える比較例３および比較例４の凍結乾燥品は、１週間保存後に白色ケーキが融解し、無色の飴に変化したため、ＰＧＥ１残存率および分解生成物の測定はできなかった。
【００４７】
これらの実験結果より、本発明の水分含量が約１．５％未満であり、マルトースを含有する凍結乾燥品は、ＰＧＡ１の生成を低く抑え、かつ分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解を生じないか、あるいは極力分解を抑え、かつ融解、潮解および／または溶解等の外観の形態変化が起こらない、安定性に大変優れた凍結乾燥品であることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明により、今までにないより安定化されたシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有してなる、医薬として有用な凍結乾燥品を提供することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロスタグランジン（ＰＧＥ１）を含有する安定化された凍結乾燥品に関する。さらに詳しくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である安定化された凍結乾燥品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＧにはＰＧＥ、ＰＧＦ、ＰＧＡ等の種類が存在し、それぞれが様々な作用を有する。例えば、ＰＧＥの１種であるＰＧＥ１は血管拡張作用、血小板凝集抑制作用を有し、慢性動脈閉塞症等の予防または／および治療に有効であることが知られている。
しかし、ＰＧＥ１は熱等に対して不安定な物質であり、分解してＰＧＡ１になることが知られており、ＰＧＡ１に分解することのない安定なＰＧＥ１含有製剤の検討が多くなされている。例えば、特開昭４９−６６８１６号公報にはＰＧＥのシクロデキストリン包接化合物またはＰＧＥ類似化合物のシクロデキストリン包接化合物の水溶液に、ビタミンＣまたはクエン酸を添加して凍結乾燥する方法、特開昭５４−１０３８４４号公報にはＰＧまたはＰＧ類似化合物のシクロデキストリン、クエン酸水溶液に少糖類を添加して凍結乾燥する方法、特開昭５７−１５６４６０号公報にはＰＧまたはＰＧ類似化合物、およびシクロデキストリン、および少糖類からなる安定化組成物、特開平１１−２４０８３５号公報にはＰＧＥ１をクエン酸ナトリウム／クエン酸緩衝液に溶解し、無菌ろ過して凍結乾燥したＰＧＥ１含有注射剤組成物がある。
【０００３】
一方、本発明者らはＰＧＥ１の分解生成物について鋭意検討した結果、今まで知られていたＰＧＡ１の他に、ＰＧＥ１のω鎖中の１５位水酸基が脱離することによって生じる、下記に示す分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が生ずることを見出した。
【０００４】
これらの分解生成物は、ＰＧＥ１の分解生成物として知られていたＰＧＡ１とは異なる構造であり、今までまったく知られていなかった。従来のＰＧＥ１またはそのシクロデキストリン包接化合物の安定化方法では、これらの分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成に対して全く未検討であり、かつ未解決であった。例えば、特開昭５７−１５６４６０号公報に記載の解決方法、具体的には、乳糖とＰＧＥ１からなる組成物は分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）が生成する。
医薬品において、主活性物質が経時的に分解することによって分解生成物が増加することは好ましくない。特に、ＰＧは種類により作用が異なるので、分解生成物の有する作用が副作用となる可能性があり好ましくない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる安定化された凍結乾燥品の提供である。つまりＰＧＥ１のＰＧＡ１への分解を抑制することはもちろん、さらに分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解も抑制するという、今までにないより一層安定化されたシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる凍結乾燥品を提供することであって、かつできるだけ少ない添加物によって安定化された凍結乾燥品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは鋭意検討を行った結果、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品は安定化されること、さらに驚いたことにマルトースを添加することによって分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）の生成が極めて抑制された、より一層安定化されたシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる凍結乾燥品となることを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち本発明は、
（１）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品、
（２）さらにマルトースを含む前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（３）薬物がＰＧＥ１のα−シクロデキストリン包接化合物である（１）記載の凍結乾燥品、
（４）マルトースがｐＨ約４．７〜約６．３のマルトース水溶液として添加され製造された凍結乾燥品である前記（２）記載の凍結乾燥品、
（５）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約１００００重量部である前記（２）記載の凍結乾燥品、
（６）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５００〜約１００００重量部である前記（５）記載の凍結乾燥品、
（７）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約２０００〜約３０００重量部である前記（６）に記載の凍結乾燥品、
（８）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約５００重量部である前記（５）に記載の凍結乾燥品、
（９）１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約１００〜約３００重量部である前記（８）に記載の凍結乾燥品、
（１０）バイアルに充填した前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（１１）水分含量が約１．０重量％以下である前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（１２）１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約４０〜約６０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である前記（２）に記載の凍結乾燥品、
（１３）１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約５０〜約１５０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である前記（２）に記載の凍結乾燥品、
（１４）約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されない品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１５）約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下であり、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１６）約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１７）約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である前記（１０）、（１２）または（１３）に記載の凍結乾燥品、
（１８）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有する水溶液を（ａ）約−５０〜−３０℃で凍結する工程、（ｂ）真空度約５〜２０パスカルで、約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程、および（ｃ）約２５〜５５℃に昇温し、その温度で二次乾燥する工程を含む前記（１）に記載の凍結乾燥品の製造方法、
（１９）前記（１８）に記載の製造方法によって得られる前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（２０）慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤である前記（１）に記載の凍結乾燥品、
（２１）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを含有する水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるよう凍結乾燥することを特徴とするＰＧＥ１分解抑制方法、
（２２）シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびｐＨが約４．７〜約６．３のマルトースを含んでなるｐＨが約４．３〜約５．１の凍結乾燥用水溶液、
（２３）前記（１）に記載の凍結乾燥品の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療方法、
（２４）慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤を製造するための、前記（１）に記載の凍結乾燥品の使用、
（２５）１凍結乾燥品当たり、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含むか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含んでなる製剤であって、水分含量が約０．１〜約０．８重量％である凍結乾燥品、
（２６）約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である前記（２５）に記載の凍結乾燥品、
（２７）約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である前記（２５）に記載の凍結乾燥品、
（２８）約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、または分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である前記（２５）に記載の凍結乾燥品、および
（２９）１凍結乾燥品当たり、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含むか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含んでなる製剤であって、水分含量が約０．１〜約０．８重量％であり、約６０℃で約１週間保存後に実質的に形態変化しなく、ＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上であり、かつ約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、または分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である凍結乾燥品、
に関する。
【０００８】
特開昭５７−１５６４６０号公報にはＰＧまたはＰＧ類似化合物、およびシクロデキストリン、および少糖類からなる安定化組成物が記載されている。しかし、ＰＧＥ１とマルトースの具体的な組合せを示す記載はない。さらにＰＧＥ１が分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）に分解される旨の記載および示唆もない。また、該明細書には安定化組成物の水分含量についての記載はなく、適切な水分含量についての示唆もない。さらに、該明細書に記載されているＰＧＥ１と乳糖からなる凍結乾燥品は、分解生成物（Ｉ）および分解生成物（ＩＩ）が生成した。
【０００９】
本発明者らは、従来の方法では解決できないＰＧＥ１の分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）の生成を抑制し、より安定化された凍結乾燥品を提供することを、水分含量を約１．５重量％未満にすること、さらにマルトースを添加することよって初めて解決した。
医薬品において、その製剤化には主薬以外の種々添加剤が必要となる場合が多いが、副作用等を考慮してできるだけ添加剤は少ないことが好ましい。本発明の凍結乾燥品は、複数の添加剤を必要とせず、マルトースのみを添加剤として添加するだけでもよく、それでもって充分に安定な製剤が得られるから大変好ましい。
【００１０】
本発明において、シクロデキストリンとしては、例えば、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが挙げられ、これらから選ばれる１種または２種以上の混合物が用いられる。特に好ましくはα−シクロデキストリンである。
本発明において、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物のいずれを用いても好ましい。具体的には、ＰＧＥ１、シクロデキストリンを含むＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物が用いられる。好ましくはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物が用いられ、ＰＧＥ１のα−シクロデキストリン包接化合物が特に好ましい。
【００１１】
本発明のＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物は、例えば、特公昭５０−３３６２号公報、特公昭５２−３１４０４号公報に記載されている製造方法によって製造される。ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を製造する際、１重量部のＰＧＥ１に対して、シクロデキストリンを約２０〜約４０重量部用いて製造することが好ましく、約２８〜約３７重量部がより好ましい。特に好ましくは、約３０〜約３５重量部である。例えばα−シクロデキストリンを使用する場合は、１重量部のＰＧＥ１に対して、約３０．２〜約３４．７重量部が好ましい。また、シクロデキストリンを含むＰＧＥ１は通常はシフロデキストリンとＰＧＥ１との混合物である。シクロデキストリンを含むＰＧＥ１の場合に使用するシクロデキストリンの好ましい量およびより好ましい量も同様である。
【００１２】
本発明で用いるマルトースの種類は特に限定されない。結晶、非結晶、無水物および水和物のマルトースであってよい。さらに、市販のマルトースをそのまま本発明に使用してもよいし、さらに精製工程を経てから使用してもよい。また、ｐＨが約４．７〜約６．３であるマルトースが好ましく、より好ましくは約５．０〜約６．０である。ｐＨはマルトースを水に溶解したときの値である。また、その純度は約９８．０％以上であることが好ましい。
本発明で用いるマルトースは、１重量部のＰＧＥ１に対して、約５０〜約１００００重量部を用いることが好ましく、約１００〜約５０００がより好ましい。例えば、１凍結乾燥品当たりのＰＧＥ１が低含量である場合、例えば約５μｇ〜約５０μｇの場合は、１重量部のＰＧＥ１に対して約５００〜約１００００重量部が好ましく、より好ましくは約１５００〜約５０００重量部であり、特に好ましくは約２０００〜約３０００である。１凍結乾燥品当たりのＰＧＥ１が高含量である場合、例えば約４００〜約６００μｇの場合は、１重量部のＰＧＥ１に対して約５０〜約５００重量部が好ましく、より好ましくは約１００〜約３００重量部である。
【００１３】
本発明において、好ましい凍結乾燥品は、１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約４０〜約６０ｍｇ含有する凍結乾燥品、および１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約５０〜約１５０ｍｇ含有する凍結乾燥品である。より好ましくは、１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含有する凍結乾燥品、および１凍結乾燥品当たりＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含有する凍結乾燥品である。
本発明において、マルトースの添加方法は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物と一緒に水（例えば、注射用水）に溶解することで添加する方法か、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥した後、その凍結乾燥品に添加する方法である。より好ましくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物と一緒に水（例えば、注射用水）に溶解することでマルトースを添加する方法である。
【００１４】
本発明の凍結乾燥品の水分含量は約１．５重量％未満である。その中でも約１．０重量％以下であることが好ましい。詳しくは、約０．０５〜約１．０重量％であることが好ましく、より好ましくは約０．１〜約０．８重量％である。またその水分含量は、凍結乾燥品の製造時はもちろん、保存期間を通してその値が維持されることが好ましい。本発明では、凍結乾燥品の製造時における水分含量が、上記値の範囲にあることがより好ましい。
本発明において、凍結乾燥品の水分含量は、カールフィッシャー法によって定量される。本発明において、カールフィッシャー法は通常用いられている方法で行われ、例えば、カールフィッシャー法水分測定装置を用いて行われる。
【００１５】
本発明は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品の製造方法、およびその製造方法によって製造された凍結乾燥品をも包含する。
【００１６】
本発明の凍結乾燥品は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥することによって製造される。より詳しくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液は、マルトースを含んでいてもよく、その水溶液を凍結乾燥するか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥し、その後マルトースを添加することによって、本発明の凍結乾燥品は製造される。本発明の凍結乾燥品は、好ましくは、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを水（例えば、注射用水）に溶解した水溶液を凍結乾燥することによって製造された凍結乾燥品である。例えば、注射用水にマルトースを溶解し、その溶液にシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を溶解後、さらに注射用水で濃度調製するか、または注射用水にシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を溶解し、その溶液に注射用水に溶解したマルトース溶液を加えた後、さらに注射用水で濃度調製して得られる水溶液が用いられる。好ましくは、注射用水にマルトースを溶解し、その溶液にシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を溶解後、さらに注射用水で濃度調製した水溶液が用いられる。さらに、調製された水溶液は無菌ろ過される。また、その調製された水溶液はｐＨが約４．３〜約５．１、より好ましくは約４．５〜約４．８であることが好ましい。
【００１７】
本発明は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびｐＨが約４．７〜約６．３のマルトースを含んでなるｐＨが約４．３〜約５．１の凍結乾燥用水溶液も包含する。
本発明の凍結乾燥品は、本発明の凍結乾燥用水溶液を凍結乾燥することにより製造される。
本発明の凍結乾燥の工程は、（ａ）予備凍結乾燥工程、（ｂ）真空一次乾燥工程および（ｃ）二次乾燥工程を包含する。詳しくは（ａ）予備凍結乾燥工程は、約−５０〜−３０℃で凍結する工程であり、（ｂ）真空一次乾燥工程は、真空度約５〜２０パスカルで、約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程であり、（ｃ）二次乾燥工程は、約２５〜５５℃に昇温し、その温度で二次乾燥する工程である。
【００１８】
より詳しくは、（ａ）予備凍結乾燥工程は、約−５０〜−３０℃で凍結する工程であり、約２〜５時間で行われる。より好ましくは約−５０〜−４５℃で凍結する工程であり、約２．５〜４．５時間で行われる。（ｂ）真空一次乾燥工程は予備凍結乾燥工程に引き続いて行われる工程であり、真空度約５〜２０パスカルの条件下、約−５０〜−３０℃から約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程であり、約５〜２０時間で行われる。より好ましくは真空度約５〜２０パスカルの条件下、約−１５〜１５℃に昇温し、その温度で維持する工程であり、約６〜１６時間で行われる。（ｃ）二次乾燥工程は真空一次乾燥工程に引き続いて行われる工程であり、約−２０〜２０℃から約２５〜５５℃に昇温し、その温度で乾燥し、所望により引き続いてその温度より約５〜１５℃低下させ、その温度で乾燥する工程であり、約７〜１０時間で行われる。より好ましくは約３５〜５０℃に昇温し、その温度で乾燥し、所望により引き続いてその温度より約１０〜１５℃低下させ、その温度で乾燥する工程であり、約７．５〜９．５時間で行われる。上記の凍結乾燥によって得られる凍結乾燥品の水分含量は、通常約１．５重量％未満であるが、例えば、真空度や温度を調節したり、凍結乾燥時間をさらに延長して水分含量をより少なくさせてもよい。
【００１９】
本発明の凍結乾燥品は、例えば、注射用容器に充填される。注射用容器としては、例えば、バイアルまたはアンプルが用いられる。それらは特に限定されず、例えば、ガラス製（例えば、硬質ガラス製）、シリコンコーティングしたガラス製、または内表面を二酸化ケイ素で処理したガラス製、環状ポリオレフィン製、ポリプロピレン製等であってよい。好ましくは、バイアルであり、その容量が３〜５ｍＬの硬質ガラス製のバイアルが好ましい。マルトース、およびシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有する水溶液を注射容器に充填する場合、その容量は０．５〜１．５ｍＬ、好ましくは０．５〜１．０ｍＬの水溶液が充填される。本発明においては、そのような水溶液を容器に充填した状態で凍結乾燥に付してもよい。
【００２０】
本発明は、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを含有する水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるよう凍結乾燥することを特徴とするＰＧＥ１分解抑制方法をも包含する。シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物に、さらにマルトースを添加した水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるように、前記の凍結乾燥を行うことによって、ＰＧＥ１のＰＧＡ１への分解が抑制される上、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解も極めて少なくすることができる。
【００２１】
本発明の凍結乾燥品は、ＰＧＥ１のＰＧＡ１への分解が抑制され、分解生成物（Ｉ）および分解生成物（ＩＩ）への分解が極めて少ない、より安定化された注射用の凍結乾燥品である。本発明における安定とは、化学的および物理的な安定性を意味する。化学的安定性には主薬であるＰＧＥ１の残存量が指標となる。物理的安定性には経時的な外観の形態変化が指標となる。物理的安定性が劣ると、凍結乾燥された内容物が収縮、融解、潮解および／または溶解等の形態変化を起こす。
【００２２】
本発明の凍結乾燥品は、４０℃、湿度７５％で６ヶ月間保存する加速試験において、ＰＧＥ１の残存率が約９９．０％以上であり、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることが好ましい。形態変化とは、ケーキ状である凍結乾燥品の収縮、融解、潮解および／または溶解を意味する。また、６０℃で１ヶ月間保存する苛酷試験において、ＰＧＥ１の残存率が約９８．５％以上であることが好ましく、６０℃で１週間保存後に実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることが好ましい。形態変化は前記と同じ意味を表わす。また６０℃で約１ヶ月保存後に、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることがより好ましい。これらの加速試験および苛酷試験から考え、室温で少なくとも３年間保存する長期保存試験におけるＰＧＥ１の残存率は約９８．５％以上であって、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観性状が変化しない品質であることが好ましく、より好ましくは残存率が約９９．０％以上であって、実質的にケーキ状である形態を保持し、外観の形態が変化しない品質であることである。
【００２３】
一方、本発明の凍結乾燥品は、４０℃、湿度７５％で６ヶ月間保存する加速試験においてＰＧＥ１の分解物の生成率は約１．０％以下であることが好ましい。特に好ましくは、ＰＧＡ１への分解率が約１．０％以下であり、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）が実質的に生成しないことである。６０℃で１ヶ月間保存する苛酷試験においては、ＰＧＥ１の分解物の生成率は約１．５％以下であることが好ましい。特に好ましくは約１．０％以下であり、中でもＰＧＡ１への分解率が約０．８％以下であり、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）が実質的に生成しないか、あるいは分解生成物（Ｉ）への分解率が約０．０５％以下であり、分解生成物（ＩＩ）への分解率が約０．１５％以下であることが好ましい。
【００２４】
本発明の凍結乾燥品は医薬として有用である。例えば、慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤として有用である。より詳しくは、慢性動脈閉塞症、例えば、バージャー病または閉塞性動脈硬化症における四肢潰瘍ならびに安静時疼痛、末梢血行障害に伴う自覚症状ならびに末梢循環、神経機能および／または運動機能障害、血行再建術後の血流、動脈管依存性先天性心疾患、脊柱管狭窄症（頸部、胸部または腰部）ならびにそれに伴う自覚症状（例えば、麻痺、知覚鈍麻、疼痛、しびれ症状）、筋力低下、間歇跛行または歩行能力低下の予防および／または治療剤として有用である。また、高血圧症または虚血性心疾患を合併する場合等の外科手術時の低血圧維持や、外科手術時の異常高血圧の救急処置にも有効である。本発明の凍結乾燥品は、年齢、体重、疾患、その症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、相応しい溶解液（例えば、注射用蒸留水、生理食塩水、種々輸液）に溶解後、１日１時間から２４時間の範囲で動脈内または静脈内に持続的投与される。
【発明の効果】
【００２５】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物およびマルトースを含有し、水分含量が約１．５重量％未満である本発明の凍結乾燥品は、ＰＧＥ１のＰＧＡ１、分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解が抑制された従来品よりもより安定なＰＧＥ１凍結乾燥品である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
本発明を以下の実施例によって説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２７】
注射用水（８００ｍＬ）にマルトース（８３．３ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１１４５ｍｇ：ＰＧＥ１として３３．３ｍｇ）を加え、注射用水で全量（１０００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。１５００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約２０パスカルの真空度で、徐々に昇温して１０℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．８重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例２】
【００２８】
実施例１と同様にして得た１５００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１５パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．４重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例３】
【００２９】
実施例１と同様にして得た１５００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．３重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例４】
【００３０】
注射用水（６Ｌ）にマルトース（６２５ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（８．５９ｇ：ＰＧＥ１として２５０ｍｇ）を加え、注射用水で全量（７．５Ｌ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。１２０００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で７時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．１重量％である凍結乾燥品を製造した。
【実施例５】
【００３１】
注射用水（３９Ｌ）にマルトース（６５００ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１０８３ｇ：ＰＧＥ１として３２．５ｇ）を加え、注射用水で全量（６５Ｌ）とした。溶液を無菌ろ過後、１ｍＬずつバイアルに充填した。６００００本のバイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して−１５℃で２５時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．３重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３２】
比較例１
注射用水（８００ｍＬ）にＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１３３３ｍｇ）を溶解し、注射用水で全量（１０００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．５ｍＬずつバイアルに充填した。１５００本のバイアルを７時間かけて−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、５時間かけて昇温後、３０℃で６時間乾燥して凍結乾燥品を製造した。
【００３３】
比較例２
注射用水（８００ｍＬ）に注射用ラクトース（１００ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１３３３ｍｇ）を加え、注射用水で全量（１０００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．５ｍＬずつアンプルに充填した。アンプルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して５℃で５．５時間乾燥した。その後、４５℃で最終乾燥して、水分含量０．８重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３４】
比較例３
注射用水（４００ｍＬ）にマルトース（４１．７ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（６６７ｍｇ）を加え、注射用水で全量（５００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。バイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約５パスカルの真空度で、徐々に昇温して−１０℃で３．５時間乾燥した。その後、３０℃で最終乾燥して、水分含量２．４重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３５】
比較例４
注射用水（４００ｍＬ）にマルトース（４１．７ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（６６７ｍｇ）を加え、注射用水で全量（５００ｍＬ）とした。溶液を無菌ろ過後、０．６ｍＬずつバイアルに充填した。バイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約２０パスカルの真空度で、徐々に昇温して１０℃で３．５時間乾燥した。その後、３０℃で最終乾燥して、水分含量１．６重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３６】
比較例５
注射用水（３０Ｌ）に注射用ラクトース（６０００ｇ）を溶解後、ＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物（１０００ｇ；ＰＧＥ１として３０ｇ）を加え、注射用水で全量（６０Ｌ）とした。溶液を無菌ろ過後、１ｍＬずつバイアルに充填した。バイアルを−４０℃以下に冷却して溶液を凍結させ、次いで約１０パスカルの真空度で、徐々に昇温して０℃で１２時間乾燥した。その後、３０℃で最終乾燥して、水分含量０．５〜０．７重量％である凍結乾燥品を製造した。
【００３７】
実施例６：加速試験条件下での安定性試験
実施例１〜４および比較例２〜４で製造した凍結乾燥品を、温度４０℃、湿度７５％で６ヶ月間保存した時、および比較例１で製造した凍結乾燥品を温度５０℃で１ヶ月間保存した時の、ＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成量を測定し、かつその外観を観察した。結果を表１に示す。なお、ＮＤは非検出（ｎｏｎ−ｄｅｔｅｃｔ）を意味する。
【００３８】
なお、ＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成量は以下の方法によって測定した。
（Ａ）ＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量の測定
実施例および比較例の凍結乾燥品について各々１０個を対象とした。凍結乾燥品が入っているバイアル１個につき水（０．１ｍＬ）を加えて溶解し、１０個分の溶解液を集めた。バイアル１個につき，水／アセトニトリル混液（０．１３ｍＬ；１１：２（ｖ／ｖ）を加え、容器内部を洗い、１０個分の洗液を先に集めた溶解液に加えた。同様の洗浄操作をもう一度繰り返した。集めた溶解液および洗浄液に内標準溶液（０．４ｍＬ）を加え、試料溶液とした。別にＰＧＥ１標準品（１０ｍｇ）をアセトニトリルに溶解して２０ｍＬとした。ＰＧＡ１標準品（１ｍｇ）をアセトニトリルに溶解して１０ｍＬとした。ＰＧＥ１標準品の溶液（１０ｍＬ）に、ＰＧＡ１標準品の溶液（５ｍＬ）と、内標準溶液（１０ｍＬ）を加えた。この溶液は常時−１５℃以下で保存し、用時室温にもどした後必要量をとり、１当量のアセトニトリルと２当量の精製水を加えて希釈して標準溶液とした。試料溶液（４０μＬ）および標準溶液（４０μＬ）について、下記条件で液体クロマトグラフ法により試験を行い、内標準物質のピーク面積に対するＰＧＥ１およびＰＧＡ１のピーク面積の比ＱｔＰＧＥ１、ＱｔＰＧＡ１、ＱｓＰＧＥ１およびＱｓＰＧＡ１を求めた。
【００３９】
ＰＧＥ１量（ｍｇ）＝ＰＧＥ１標準品量（ｍｇ）×ＱｔＰＧＥ１／ＱｓＰＧＥ１×１／５００
ＰＧＡ１量（ｍｇ）＝ＰＧＡ１標準品量（ｍｇ）×ＱｔＰＧＡ１／ＱｓＰＧＡ１×１／５００
内標準溶液＝テストステロン（内部標準物質１ｇ）のアセトニトリル溶液（２０００ｍＬ）
なお、ＰＧＥ１残存率とＰＧＡ１生成率の計算は以下の通りである。
ＰＧＥ１残存率（％）＝ＰＧＥ１量（ｍｇ）／０．０２（ｍｇ）×１００
ＰＧＡ１生成率（％）＝ＰＧＡ１量（ｍｇ）／０．０２（ｍｇ）×１００
【００４０】
［操作条件］
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：２０５ｎｍ）
カラム：内径約４．６ｍｍ、長さ約１５０ｍｍのステンレス管に５μｍの液体クロマトグラフ用オクタデシルシリル化シリカゲルを充填（ＳＵＰＥＲＩＯＲＥＸ ＯＤＳ 資生堂Ｎｏ．４１５０３）。カラムは、標準溶液（４０μＬ）につき、上記の条件で操作するとき、ＰＧＥ１、内標準物質、ＰＧＡ１の順に溶出し、それぞれのピークが完全に分離するものを用いた。
カラム温度：２５℃付近の一定温度
移動相：０．０２ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム溶液にリン酸を加えてｐＨ４．０に調整した液／アセトニトリルの混液（１３：８ｖ／ｖ）
流量：ＰＧＥ１の保持時間が約６分となるように調整（１．１ｍＬ／ｍｉｎ）
【００４１】
（Ｂ）分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）生成量の測定
上記（Ａ）で調製した試料溶液（４０μＬ）につき、次の条件で液体クロマトグラフ法により試験を行い、内標準物質のピーク面積に対する分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）のピーク面積の比を百分率で評価した。
［操作条件］
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：２３５ｎｍ）
流量：分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の保持時間が各々約２４分および３０分となるように調整した（１．４ｍＬ／ｍｉｎ）。
その他の条件は（Ａ）と同様に操作した。
【００４２】
【００４３】
本発明の凍結乾燥品は、保存後のＰＧＥ１残存率が非常に高く、ＰＧＡ１生成率を低く抑え、かつ分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）は検出されなかった。また、外観も白色ケーキ状であり、収縮、融解、潮解および／または溶解等の外観の形態変化は見られなかった。これに対し、マルトースを含有しない比較例１、およびマルトースの代わりにラクトースを含有する比較例２の凍結乾燥品は、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）が検出された。さらに、比較例１の凍結乾燥品の形態はリング状であり、ＰＧＡ１の生成率が高く、ＰＧＥ１の残存率は低かった。また、マルトースを含有し、水分含量が１．５重量％を越える比較例３および比較例４の凍結乾燥品は、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）は検出されなかったが、ＰＧＡ１の生成率が大変高く、ＰＧＥ１の残存率が大変低かった。
【００４４】
実施例７：苛酷試験条件下での安定性試験
実施例１〜５および比較例２〜５で製造した凍結乾燥品を、温度６０℃で１ヶ月間保存した時、および比較例１で製造した凍結乾燥品を温度５０℃で１ヶ月間保存した時のＰＧＥ１残存量、ＰＧＡ１生成量、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）の生成量を測定し、かつその外観を観察した。ＰＧＥ１残存量および分解生成物の生成量は、実施例６と同様の方法にて測定した。なお、実施例５および比較例５におけるＰＧＥ１残存率、ＰＧＡ１生成率の計算方法は、
ＰＧＥ１残存率（％）＝ＰＧＥ１量（ｍｇ）／０．５（ｍｇ）×１００
ＰＧＡ１残存率（％）＝ＰＧＡ１量（ｍｇ）／０．５（ｍｇ）×１００
である。
結果を表２および表３に示す。
【００４５】
【００４６】
本発明の凍結乾燥品は、保存後のＰＧＥ１残存率が非常に高く、分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）は検出されないか、もしくは極少量の生成でしかなかった。また、外観も白色ケーキ状であり、収縮、融解、潮解および／または溶解等の外観の形態変化は見られなかった。これに対し、マルトースを含有しない比較例１、およびマルトースの代わりにラクトースを含有する比較例２および比較例５の凍結乾燥品は多くの分解生成物（Ｉ）および（ＩＩ）が生成していた。マルトースを含有し、水分含量が１．５重量％を越える比較例３および比較例４の凍結乾燥品は、１週間保存後に白色ケーキが融解し、無色の飴に変化したため、ＰＧＥ１残存率および分解生成物の測定はできなかった。
【００４７】
これらの実験結果より、本発明の水分含量が約１．５％未満であり、マルトースを含有する凍結乾燥品は、ＰＧＡ１の生成を低く抑え、かつ分解生成物（Ｉ）および／または分解生成物（ＩＩ）への分解を生じないか、あるいは極力分解を抑え、かつ融解、潮解および／または溶解等の外観の形態変化が起こらない、安定性に大変優れた凍結乾燥品であることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明により、今までにないより安定化されたシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有してなる、医薬として有用な凍結乾燥品を提供することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品。
【請求項２】
さらにマルトースを含む請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項３】
薬物がＰＧＥ１のα−シクロデキストリン包接化合物である請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項４】
マルトースがｐＨ約４．７〜約６．３のマルトース水溶液として添加され製造された凍結乾燥品である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項５】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約１００００重量部である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項６】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５００〜約１００００重量部である請求の範囲第５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項７】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約２０００〜約３０００重量部である請求の範囲第６項に記載の凍結乾燥品。
【請求項８】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約５００重量部である請求の範囲第５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項９】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約１００〜約３００重量部である請求の範囲第８項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１０】
バイアルに充填した請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１１】
水分含量が約１．０重量％以下である請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１２】
１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約４０〜約６０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１３】
１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約５０〜約１５０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１４】
約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されない品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１５】
約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下であり、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１６】
約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１７】
約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１８】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有する水溶液を（ａ）約−５０〜約−３０℃で凍結する工程、（ｂ）真空度約５〜約２０パスカルで、約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程、および（ｃ）約２５〜５５℃に昇温し、その温度で二次乾燥する工程を含む請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品の製造方法。
【請求項１９】
請求の範囲第１８項に記載の製造方法によって得られる請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２０】
慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤である請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２１】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを含有する水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるよう凍結乾燥することを特徴とするＰＧＥ１分解抑制方法。
【請求項２２】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびｐＨが約４．７〜約６．３のマルトースを含んでなるｐＨが約４．３〜約５．１の凍結乾燥用水溶液。
【請求項２３】
請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療方法。
【請求項２４】
慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤を製造するための、請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品の使用。
【請求項２５】
１凍結乾燥品当たり、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含むか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含んでなる製剤であって、水分含量が約０．１〜約０．８重量％である凍結乾燥品。
【請求項２６】
約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である請求の範囲第２５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２７】
約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である請求の範囲第２５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２８】
約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、または分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である請求の範囲第２５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含んでなる製剤であって、水分含量が約１．５重量％未満である凍結乾燥品。
【請求項２】
さらにマルトースを含む請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項３】
薬物がＰＧＥ１のα−シクロデキストリン包接化合物である請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項４】
マルトースがｐＨ約４．７〜約６．３のマルトース水溶液として添加され製造された凍結乾燥品である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項５】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約１００００重量部である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項６】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５００〜約１００００重量部である請求の範囲第５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項７】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約２０００〜約３０００重量部である請求の範囲第６項に記載の凍結乾燥品。
【請求項８】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約５０〜約５００重量部である請求の範囲第５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項９】
１重量部のＰＧＥ１に対して、マルトースが約１００〜約３００重量部である請求の範囲第８項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１０】
バイアルに充填した請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１１】
水分含量が約１．０重量％以下である請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１２】
１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約２０μｇ、およびマルトースを約４０〜約６０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１３】
１凍結乾燥品当たり、ＰＧＥ１を約５００μｇ、およびマルトースを約５０〜約１５０ｍｇ含有し、水分含量が約０．０５〜約１．０重量％である請求の範囲第２項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１４】
約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されない品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１５】
約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下であり、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１６】
約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１７】
約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である請求の範囲第１０項、第１２項または第１３項に記載の凍結乾燥品。
【請求項１８】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物を含有する水溶液を（ａ）約−５０〜約−３０℃で凍結する工程、（ｂ）真空度約５〜約２０パスカルで、約−２０〜２０℃に昇温し、その温度で真空一次乾燥する工程、および（ｃ）約２５〜５５℃に昇温し、その温度で二次乾燥する工程を含む請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品の製造方法。
【請求項１９】
請求の範囲第１８項に記載の製造方法によって得られる請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２０】
慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤である請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２１】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびマルトースを含有する水溶液を、水分含量が約１．５重量％未満になるよう凍結乾燥することを特徴とするＰＧＥ１分解抑制方法。
【請求項２２】
シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物、およびｐＨが約４．７〜約６．３のマルトースを含んでなるｐＨが約４．３〜約５．１の凍結乾燥用水溶液。
【請求項２３】
請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品の有効量を哺乳動物に投与することを特徴とする、慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療方法。
【請求項２４】
慢性動脈閉塞症、末梢血行障害、動脈管依存性先天性心疾患および／または脊柱管狭窄症の予防および／または治療剤を製造するための、請求の範囲第１項に記載の凍結乾燥品の使用。
【請求項２５】
１凍結乾燥品当たり、シクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約２０μｇ、およびマルトースを約５０ｍｇ含むか、あるいはシクロデキストリンを含んでいてもよいＰＧＥ１、またはＰＧＥ１シクロデキストリン包接化合物をＰＧＥ１として約５００μｇ、およびマルトースを約１００ｍｇ含んでなる製剤であって、水分含量が約０．１〜約０．８重量％である凍結乾燥品。
【請求項２６】
約６０℃で約１ヶ月保存後にＰＧＥ１の残存率が、約９８．５％以上の品質である請求の範囲第２５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２７】
約６０℃で約１週間保存後に、実質的に形態変化しない品質である請求の範囲第２５項に記載の凍結乾燥品。
【請求項２８】
約６０℃で約１ヶ月保存後に、分解生成物（Ｉ）
および／または分解生成物（ＩＩ）
が実質的に検出されないか、または分解生成物（Ｉ）の生成率が約０．０５％以下、分解生成物（ＩＩ）の生成率が約０．１５％以下の品質である請求の範囲第２５項に記載の凍結乾燥品。
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０４６６９９
【国際公開日】平成１７年５月２６日（２００５．５．２６）
【発行日】平成１９年６月７日（２００７．６．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５１５４５７（Ｐ２００５−５１５４５７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１６８４８
【国際出願日】平成１６年１１月１２日（２００４．１１．１２）
【特許番号】特許第３８２９８７４号（Ｐ３８２９８７４）
【特許公報発行日】平成１８年１０月４日（２００６．１０．４）
【出願人】（０００１８５９８３）小野薬品工業株式会社 (180)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１７年５月２６日（２００５．５．２６）
【発行日】平成１９年６月７日（２００７．６．７）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１６８４８
【国際出願日】平成１６年１１月１２日（２００４．１１．１２）
【特許番号】特許第３８２９８７４号（Ｐ３８２９８７４）
【特許公報発行日】平成１８年１０月４日（２００６．１０．４）
【出願人】（０００１８５９８３）小野薬品工業株式会社 (180)
【Ｆターム（参考）】
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