マルチドメインタンパク質治療薬を製造するための統合的手法
本発明は、初期スクリーニング工程に治療および／または製剤化および／または製造上の要件を組み込む、治療用タンパク質薬剤開発の方法を提供する。この手法は、所望の治療特性を備えると決定されたドメインの複数の様々な変異体をスクリーニングすることにより、所望の治療および／または製剤化特性を備える１以上の変異体を同定し、同定したドメイン変異体を用いて、完全なマルチドメインタンパク質を構築することを含む。本発明はまた、製剤におけるマルチドメインタンパク質の貯蔵寿命を決定する方法も提供する。この方法は、アンフォールディングにより、溶液中のタンパク質の凝集を招く当該タンパク質のドメインの熱変性および／または再生曲線を決定することを含む。この方法は、変性／再生曲線に基づき、マルチドメインタンパク質の貯蔵寿命を評価する。本発明はまた、マルチドメインタンパク質を操作することにより、それらの治療および／または製剤化特性を改善する方法も提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
マルチドメインタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）予め定めた特定の結合特異性を有する複数のタンパク質ドメインの各々についてpIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ｂ）そのpIおよび／またはTmに基づき、１以上のタンパク質ドメインを選択するステップと、
（ｃ）ステップ（ｂ）で選択した１以上のドメインと１以上の他のドメインを用いてマルチドメインタンパク質を構築するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項２】
選択したタンパク質ドメインの各々が、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記マルチドメインタンパク質が抗体であり、前記予め定めた結合特異性が標的に対する結合特異性である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記複数のタンパク質ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記抗原結合ドメインの少なくともいくつかが、標的の様々なエピトープに結合する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記抗原結合ドメインが、標的を用いて発現ライブラリーをスクリーニングすることにより得られる、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記抗原結合ドメインが、複数のモノクローナル抗体を消化することにより得られる、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
選択した各抗原結合ドメインを抗体定常領域ドメインと組合わせることにより、マルチドメインタンパク質を作製する、請求項４〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記ステップ（ｃ）の前に、
（i）複数の抗体定常領域ドメインの各々について、pIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ii）そのpIおよび／またはTmに基づき、抗体定常領域ドメインを選択するステップと、
をさらに含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
複数のタンパク質ドメインが抗体定常領域ドメインであり、かつ、予め定めた結合特異性が、Fcリガンドに対する結合特異性である、請求項３に記載の方法。
【請求項１１】
選択した各定常領域ドメインを抗原結合ドメインと組合わせることにより、マルチドメインタンパク質を作製する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
マルチドメインタンパク質を選択する方法であって、
（ａ）予め定めた特定の結合特異性を有する複数のマルチドメインタンパク質の各々について、マルチドメインタンパク質内の１以上のドメインのpIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ｂ）上記１以上のドメインのpIおよび／またはTmに基づき、１以上のマルチドメインタンパク質を選択するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項１３】
前記マルチドメインタンパク質が抗体であり、前記予め定めた結合特異性が標的に対する結合特異性である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１以上のドメインが、抗原結合ドメインである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗原結合ドメインの少なくともいくつかが、標的の様々なエピトープに結合する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記複数のマルチドメインタンパク質が、標的を用いて発現ライブラリーをスクリーニングすることにより得られる、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
選択したマルチドメインタンパク質の抗原結合ドメインが、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項１４〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記１以上のタンパク質ドメインが、Fcドメインである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
選択したマルチドメインタンパク質の抗体定常領域ドメインが、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記pIおよび／またはTmが、様々なpH値、様々な温度、様々なせん断応力、および様々な凍結／解凍サイクルからなる群より選択される１以上の様々な条件下で決定される、請求項１または１２に記載の方法。
【請求項２１】
予め定めた抗原をターゲッティングする１以上の抗体を作製する方法であって、
（ａ）予め定めた閾値レベルを超える、抗原に対する結合アフィニティーを呈示する複数の抗原結合ドメインを同定するステップと、
（ｂ）同定した各抗原結合ドメインについて、TmおよびpI値を決定するステップと、
（ｃ）決定したTmおよびpI値に基づき、１以上の抗原結合ドメインを選択するステップと、
（ｄ）ステップ（ｃ）で選択した抗原結合ドメインと定常領域ドメインを含む抗体を構築するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項２２】
選択した抗原結合ドメインの各々が、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記複数の抗原結合ドメインが、標的を用いて発現ライブラリーをスクリーニングすることにより得られる、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記複数の抗原結合ドメインが、標的に結合する複数のモノクローナル抗体を消化することにより得られる、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記抗原結合ドメインの少なくともいくつかが、標的の様々なエピトープに結合する、請求項２２〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ステップ（ｄ）の前に、
（i）複数の抗体定常領域ドメインの各々についてpIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ii）そのpIおよび／またはTmに基づき、抗体定常領域ドメインを選択するステップと、
をさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
選択した抗体定常領域ドメインの各々が、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
抗体を操作することにより、抗体の血清半減期、補体固定、Fc受容体結合および抗原依存的細胞傷害性からなる群より選択される１以上の生物活性を有意に低減することなく、１以上の治療および／または製剤化特性を改善する方法であって、抗体において１以上のアミノ酸を置換および／または挿入することを含み、その際、上記アミノ酸置換および／または挿入が、抗体の１以上の治療および／または製剤化特性を改善するようなものである、上記方法。
【請求項２９】
前記１以上の製剤化特性が、安定性、溶解性および粘性からなる群より選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記１以上の治療特性が、非特異的毒性および生体分布からなる群より選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記安定性が、Tmを特徴付けることにより決定され、非特異的毒性、生体分布、溶解性および粘性が、pIを特徴付けることにより決定される、請求項２９または３０に記載の方法。
【請求項３２】
操作した抗体のTmを高くする、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
操作した抗体のpIを高くする、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
操作した抗体のpIを低くする、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記アミノ酸置換が、抗体の血清半減期、補体固定、Fc受容体結合および抗原依存的細胞傷害性からなる群より選択される１以上の生物活性をさらに改善するようなものである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３６】
溶液中のマルチドメインタンパク質の長期安定性を評価する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質の溶液を用意するステップであって、その際、マルチドメインタンパク質は、アンフォールディングにより、マルチドメインタンパク質の凝集を招くドメインを含む、ステップと、
（ｂ）上記マルチドメインタンパク質溶液を少なくとも50℃の温度に加熱するステップと、
（ｃ）上記ドメインが変性するか否かを決定するステップと、
（ｄ）マルチドメインタンパク質中のドメインが、ステップ（ｃ）で変性しないと決定された場合、溶液中で長期安定性を有するものとして上記マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項３７】
前記ステップ（ｃ）において、50℃未満の温度に冷却すると、前記ドメインがリフォールディングするか否かを決定し、マルチドメインタンパク質中のドメインが、ステップ（ｃ）でリフォールディングすると決定された場合、溶液中で長期安定性を有するものとして上記マルチドメインタンパク質を分類することをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
熱変性曲線を作製することにより、前記ステップ（ｂ）および（ｃ）を実施する、請求項３６〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
示差走査熱量測定を用いて、前記熱変性曲線を作製する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
アンフォールディングにより、溶液中のマルチドメインタンパク質の凝集を引き起こす１以上のドメインをマルチドメインタンパク質において同定する方法であって、
（ａ）上記溶液を少なくとも50℃の温度に加熱することにより、１以上のドメインを変性させるステップと、
（ｂ）上記１以上のドメインが、50℃未満の温度への冷却時に、リフォールディングするか否かを決定するステップと、
（ｃ）上記ステップ（ｂ）において冷却時にリフォールディングしない１以上のドメインを同定し、これによって、アンフォールディングにより、溶液中のマルチドメインタンパク質の凝集を引き起こす１以上のドメインを同定するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項４４】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項４３または４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項４３または４４に記載の方法。
【請求項４７】
熱変性／再生曲線を作製することにより、前記ステップ（ａ）および（ｂ）を実施する、請求項４３〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
示差走査熱量測定を用いて、前記熱変性／再生曲線を作製する、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
長期安定性が改善されるようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、該マルチドメインタンパク質は、アンフォールディングにより、溶液中のマルチドメインタンパク質の凝集を引き起こすドメインを含んでおり、
（ａ）上記ドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換することにより、上記ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質の溶液を少なくとも50℃の温度に加熱するステップと、
（ｃ）上記マルチドメインタンパク質中の改変ドメインがステップ（ｂ）において変性するか否かを決定するステップと、
（ｄ）上記改変ドメインが、ステップ（ｃ）で変性しないと決定された場合、長期安定性が改善されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項５０】
前記ステップ（ｃ）において、50℃未満の温度に冷却すると、前記改変ドメインがリフォールディングするか否かを決定し、上記改変ドメインがステップ（ｃ）でリフォールディングすると決定された場合、溶液中で長期安定性を有するものとして上記マルチドメインタンパク質を分類することをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５３】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５４】
熱変性曲線を作製することにより、前記ステップ（ｂ）および（ｃ）を実施する、請求項５０〜５３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
示差走査熱量測定を用いて、前記熱変性曲線を作製する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
改善された溶解性および／または低下した粘性を有するようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、上昇したpIを有すると決定された場合、溶解性および／または粘性が改善されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項５７】
請求項５６に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項５８】
非特異的毒性が低減されるようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、低下したpIを有すると決定された場合、非特異的毒性が低減されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項５９】
請求項５８に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項６０】
肝毒性が低減されるようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、低下したpIを有すると決定された場合、非特異的毒性が低減されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項６１】
請求項６０に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項６２】
特異的生体分布を有するようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、低下したpIを有すると決定された場合、細胞内局在化が低減したものとして、あるいは、上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、上昇したpIを有すると決定された場合、細胞内および／または脈管外局在化が増大したものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項６３】
請求項６２に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項６４】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項５６、５８、６０および６１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６５】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項５６、５８、６０および６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６６】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項５６、５８、６０および６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
等電点電気泳動により、前記ステップ（ｂ）を実施する、請求項５６、５８、６０、６１および６４〜６６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
前記改変が、K338、A339、K340、G341、Q342、R344、E345、R355、E356、E357、M358、T359、K360、N361、Q362、L365、T366、K370、N390、Y391、K392、T393、T394、V397、L398、D399、S400、D401、F405、K409、L410、D413およびK414（番号付けは、Kabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６９】
前記アミノ酸置換が、K338を任意の非荷電残基に；K338D；K338E；A339D；A339E；A339K；A339R；K340 を任意の非荷電残基に；K340D；K340E；G314D；G314E；G314K；G314R；Q342D；Q342E；Q342K；Q342R；R344を任意の非荷電残基に；R344D；R344E；E345を任意の非荷電残基に；E345K；E345R；R355を任意の非荷電残基に；R355D；R355E；E356を任意の非荷電残基に；E356K；E356R；E357を任意の非荷電残基に；E357K；E357R；M358D；M358E；M358K；M358R；T359D；T359E；T359K；T359R；K360を任意の非荷電残基に；K360D；K360E；N361D；N361E；N361K；N361R；Q362D；Q362E；Q362K；Q362R；L365D；L365E；L365K；L365R；T366D；T366E；T366K；T366R；K370を任意の非荷電残基に；K370D；K370E；N390D；N390E；N390K；N390R；Y391D；Y391E；Y391K；Y391R；K392を任意の非荷電残基に；K392D；K392E；T393D；T393E；T393K；T393R；T394D；T394E；T394K；T394R；V397D；V397E；V397K；V397R；L398D；L398E；L398K；L398R；D399を任意の非荷電残基に；D399K；D399R；S400D；S400E；S400K；S400R；D401を任意の非荷電残基に；D401K；D401R；F405D；F405E；F405K；F405R；K409を任意の非荷電残基に；K409D；K409E；L410D；L410E；L410K；L410R；D413を任意の非荷電残基に；D413K；D413R；K414を任意の非荷電残基に；K414D；およびK414E（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
請求項６４〜６９のいずれか１項に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７１】
Fcドメインを含む操作されたマルチドメインタンパク質であって、該FcドメインはpIが上昇または低下するように改変されている、前記マルチドメインタンパク質。
【請求項７２】
前記改変が、K338、A339、K340、G341、Q342、R344、E345、R355、E356、E357、M358、T359、K360、N361、Q362、L365、T366、K370、N390、Y391、K392、T393、T394、V397、L398、D399、S400、D401、F405、K409、L410、D413およびK414（番号付けは、Kabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記アミノ酸置換が、K338を任意の非荷電残基に；K338D；K338E；A339D；A339E；A339K；A339R；K340 を任意の非荷電残基に；K340D；K340E；G314D；G314E；G314K；G314R；Q342D；Q342E；Q342K；Q342R；R344を任意の非荷電残基に；R344D；R344E；E345を任意の非荷電残基に；E345K；E345R；R355を任意の非荷電残基に；R355D；R355E；E356を任意の非荷電残基に；E356K；E356R；E357を任意の非荷電残基に；E357K；E357R；M358D；M358E；M358K；M358R；T359D；T359E；T359K；T359R；K360を任意の非荷電残基に；K360D；K360E；N361D；N361E；N361K；N361R；Q362D；Q362E；Q362K；Q362R；L365D；L365E；L365K；L365R；T366D；T366E；T366K；T366R；K370を任意の非荷電残基に；K370D；K370E；N390D；N390E；N390K；N390R；Y391D；Y391E；Y391K；Y391R；K392を任意の非荷電残基に；K392D；K392E；T393D；T393E；T393K；T393R；T394D；T394E；T394K；T394R；V397D；V397E；V397K；V397R；L398D；L398E；L398K；L398R；D399を任意の非荷電残基に；D399K；D399R；S400D；S400E；S400K；S400R；D401を任意の非荷電残基に；D401K；D401R；F405D；F405E；F405K；F405R；K409を任意の非荷電残基に；K409D；K409E；L410D；L410E；L410K；L410R；D413を任意の非荷電残基に；D413K；D413R；K414を任意の非荷電残基に；K414D；およびK414E（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記pIを低下させた、請求項７１に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７５】
前記改変が、A339、G341、Q342、E345、E356、E357、M358、T359、N361、Q362、L365、T366、N390、Y391、T393、T394、V397、L398、D399、S400、D401、F405、L410およびD413（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７４に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７６】
前記アミノ酸置換が、A339K；A339R；G314K；G314R；Q342K；Q342R；E345を任意の非荷電残基に；E345K；E345R；E356を任意の非荷電残基に；E356K；E356R；E357を任意の非荷電残基に；E357K；E357R；M358K；M358R；T359K；T359R；N361K；N361R；Q362K；Q362R；L365K；L365R；T366K；T366R；N390K；N390R；Y391K；Y391R；T393K；T393R；T394K；T394R；V397K；V397R；L398K；L398R；D399を任意の非荷電残基に；D399K；D399R；S400K；S400R；D401を任意の非荷電残基に；D401K；D401R；F405K；F405R；L410K；L410R；D413を任意の非荷電残基に；D413K；およびD413R（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、請求項７５に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７７】
前記pIを上昇させた、請求項７１に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７８】
前記改変が、K338、A339、K340、G341、Q342、R344、R355、M358、T359、K360、N361、Q362、L365、T366、K370、N390、Y391、K392、T393、T394、V397、L398、S400、F405、K409、L410、およびK414（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７７に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７９】
前記改変が、K338を任意の非荷電残基に；K338D；K338E；A339D；A339E；K340 を任意の非荷電残基に；K340D；K340E；G314D；G314E；Q342D；Q342E；R344を任意の非荷電残基に；R344D；R344E；R355を任意の非荷電残基に；R355D；R355E；M358D；M358E；T359D；T359E；K360を任意の非荷電残基に；K360D；K360E；N361D；N361E；Q362D；Q362E；L365D；L365E；T366D；K370を任意の非荷電残基に；K370D；K370E；N390D；N390E；Y391D；Y391E；K392を任意の非荷電残基に；K392D；K392E；T393D；T393E；T394D；T394E；V397D；V397E；L398D；L398E；S400D；S400E；F405D；F405E；K409を任意の非荷電残基に；K409D；K409E；L410D；L410E；K414を任意の非荷電残基に；K414D；およびK414E（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７８に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項１】
マルチドメインタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）予め定めた特定の結合特異性を有する複数のタンパク質ドメインの各々についてpIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ｂ）そのpIおよび／またはTmに基づき、１以上のタンパク質ドメインを選択するステップと、
（ｃ）ステップ（ｂ）で選択した１以上のドメインと１以上の他のドメインを用いてマルチドメインタンパク質を構築するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項２】
選択したタンパク質ドメインの各々が、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記マルチドメインタンパク質が抗体であり、前記予め定めた結合特異性が標的に対する結合特異性である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記複数のタンパク質ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記抗原結合ドメインの少なくともいくつかが、標的の様々なエピトープに結合する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記抗原結合ドメインが、標的を用いて発現ライブラリーをスクリーニングすることにより得られる、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記抗原結合ドメインが、複数のモノクローナル抗体を消化することにより得られる、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
選択した各抗原結合ドメインを抗体定常領域ドメインと組合わせることにより、マルチドメインタンパク質を作製する、請求項４〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記ステップ（ｃ）の前に、
（i）複数の抗体定常領域ドメインの各々について、pIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ii）そのpIおよび／またはTmに基づき、抗体定常領域ドメインを選択するステップと、
をさらに含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
複数のタンパク質ドメインが抗体定常領域ドメインであり、かつ、予め定めた結合特異性が、Fcリガンドに対する結合特異性である、請求項３に記載の方法。
【請求項１１】
選択した各定常領域ドメインを抗原結合ドメインと組合わせることにより、マルチドメインタンパク質を作製する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
マルチドメインタンパク質を選択する方法であって、
（ａ）予め定めた特定の結合特異性を有する複数のマルチドメインタンパク質の各々について、マルチドメインタンパク質内の１以上のドメインのpIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ｂ）上記１以上のドメインのpIおよび／またはTmに基づき、１以上のマルチドメインタンパク質を選択するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項１３】
前記マルチドメインタンパク質が抗体であり、前記予め定めた結合特異性が標的に対する結合特異性である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１以上のドメインが、抗原結合ドメインである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗原結合ドメインの少なくともいくつかが、標的の様々なエピトープに結合する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記複数のマルチドメインタンパク質が、標的を用いて発現ライブラリーをスクリーニングすることにより得られる、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
選択したマルチドメインタンパク質の抗原結合ドメインが、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項１４〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記１以上のタンパク質ドメインが、Fcドメインである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
選択したマルチドメインタンパク質の抗体定常領域ドメインが、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記pIおよび／またはTmが、様々なpH値、様々な温度、様々なせん断応力、および様々な凍結／解凍サイクルからなる群より選択される１以上の様々な条件下で決定される、請求項１または１２に記載の方法。
【請求項２１】
予め定めた抗原をターゲッティングする１以上の抗体を作製する方法であって、
（ａ）予め定めた閾値レベルを超える、抗原に対する結合アフィニティーを呈示する複数の抗原結合ドメインを同定するステップと、
（ｂ）同定した各抗原結合ドメインについて、TmおよびpI値を決定するステップと、
（ｃ）決定したTmおよびpI値に基づき、１以上の抗原結合ドメインを選択するステップと、
（ｄ）ステップ（ｃ）で選択した抗原結合ドメインと定常領域ドメインを含む抗体を構築するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項２２】
選択した抗原結合ドメインの各々が、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記複数の抗原結合ドメインが、標的を用いて発現ライブラリーをスクリーニングすることにより得られる、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記複数の抗原結合ドメインが、標的に結合する複数のモノクローナル抗体を消化することにより得られる、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記抗原結合ドメインの少なくともいくつかが、標的の様々なエピトープに結合する、請求項２２〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ステップ（ｄ）の前に、
（i）複数の抗体定常領域ドメインの各々についてpIおよび／またはTmを決定するステップと、
（ii）そのpIおよび／またはTmに基づき、抗体定常領域ドメインを選択するステップと、
をさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
選択した抗体定常領域ドメインの各々が、少なくとも50℃のTmおよび少なくとも6.5のpI、または少なくとも50℃のTmおよび6.5未満のpIを有する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
抗体を操作することにより、抗体の血清半減期、補体固定、Fc受容体結合および抗原依存的細胞傷害性からなる群より選択される１以上の生物活性を有意に低減することなく、１以上の治療および／または製剤化特性を改善する方法であって、抗体において１以上のアミノ酸を置換および／または挿入することを含み、その際、上記アミノ酸置換および／または挿入が、抗体の１以上の治療および／または製剤化特性を改善するようなものである、上記方法。
【請求項２９】
前記１以上の製剤化特性が、安定性、溶解性および粘性からなる群より選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記１以上の治療特性が、非特異的毒性および生体分布からなる群より選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記安定性が、Tmを特徴付けることにより決定され、非特異的毒性、生体分布、溶解性および粘性が、pIを特徴付けることにより決定される、請求項２９または３０に記載の方法。
【請求項３２】
操作した抗体のTmを高くする、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
操作した抗体のpIを高くする、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
操作した抗体のpIを低くする、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記アミノ酸置換が、抗体の血清半減期、補体固定、Fc受容体結合および抗原依存的細胞傷害性からなる群より選択される１以上の生物活性をさらに改善するようなものである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３６】
溶液中のマルチドメインタンパク質の長期安定性を評価する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質の溶液を用意するステップであって、その際、マルチドメインタンパク質は、アンフォールディングにより、マルチドメインタンパク質の凝集を招くドメインを含む、ステップと、
（ｂ）上記マルチドメインタンパク質溶液を少なくとも50℃の温度に加熱するステップと、
（ｃ）上記ドメインが変性するか否かを決定するステップと、
（ｄ）マルチドメインタンパク質中のドメインが、ステップ（ｃ）で変性しないと決定された場合、溶液中で長期安定性を有するものとして上記マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項３７】
前記ステップ（ｃ）において、50℃未満の温度に冷却すると、前記ドメインがリフォールディングするか否かを決定し、マルチドメインタンパク質中のドメインが、ステップ（ｃ）でリフォールディングすると決定された場合、溶液中で長期安定性を有するものとして上記マルチドメインタンパク質を分類することをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
熱変性曲線を作製することにより、前記ステップ（ｂ）および（ｃ）を実施する、請求項３６〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
示差走査熱量測定を用いて、前記熱変性曲線を作製する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
アンフォールディングにより、溶液中のマルチドメインタンパク質の凝集を引き起こす１以上のドメインをマルチドメインタンパク質において同定する方法であって、
（ａ）上記溶液を少なくとも50℃の温度に加熱することにより、１以上のドメインを変性させるステップと、
（ｂ）上記１以上のドメインが、50℃未満の温度への冷却時に、リフォールディングするか否かを決定するステップと、
（ｃ）上記ステップ（ｂ）において冷却時にリフォールディングしない１以上のドメインを同定し、これによって、アンフォールディングにより、溶液中のマルチドメインタンパク質の凝集を引き起こす１以上のドメインを同定するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項４４】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項４３または４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項４３または４４に記載の方法。
【請求項４７】
熱変性／再生曲線を作製することにより、前記ステップ（ａ）および（ｂ）を実施する、請求項４３〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
示差走査熱量測定を用いて、前記熱変性／再生曲線を作製する、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
長期安定性が改善されるようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、該マルチドメインタンパク質は、アンフォールディングにより、溶液中のマルチドメインタンパク質の凝集を引き起こすドメインを含んでおり、
（ａ）上記ドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換することにより、上記ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質の溶液を少なくとも50℃の温度に加熱するステップと、
（ｃ）上記マルチドメインタンパク質中の改変ドメインがステップ（ｂ）において変性するか否かを決定するステップと、
（ｄ）上記改変ドメインが、ステップ（ｃ）で変性しないと決定された場合、長期安定性が改善されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項５０】
前記ステップ（ｃ）において、50℃未満の温度に冷却すると、前記改変ドメインがリフォールディングするか否かを決定し、上記改変ドメインがステップ（ｃ）でリフォールディングすると決定された場合、溶液中で長期安定性を有するものとして上記マルチドメインタンパク質を分類することをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５３】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５４】
熱変性曲線を作製することにより、前記ステップ（ｂ）および（ｃ）を実施する、請求項５０〜５３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
示差走査熱量測定を用いて、前記熱変性曲線を作製する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
改善された溶解性および／または低下した粘性を有するようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、上昇したpIを有すると決定された場合、溶解性および／または粘性が改善されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項５７】
請求項５６に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項５８】
非特異的毒性が低減されるようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、低下したpIを有すると決定された場合、非特異的毒性が低減されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項５９】
請求項５８に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項６０】
肝毒性が低減されるようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、低下したpIを有すると決定された場合、非特異的毒性が低減されたものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項６１】
請求項６０に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項６２】
特異的生体分布を有するようにマルチドメインタンパク質を操作する方法であって、
（ａ）マルチドメインタンパク質のドメイン内の１以上のアミノ酸残基を置換および／または挿入することにより、該ドメインを改変して、改変ドメインを作製するステップと、
（ｂ）上記改変ドメインのpIを決定するか、または上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質のpIを決定するステップと、
（ｃ）上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、低下したpIを有すると決定された場合、細胞内局在化が低減したものとして、あるいは、上記改変ドメインまたは上記改変ドメインを含むマルチドメインタンパク質が、ステップ（ｂ）で、上昇したpIを有すると決定された場合、細胞内および／または脈管外局在化が増大したものとして、上記改変ドメイン含有マルチドメインタンパク質を分類するステップと、
を含む、上記方法。
【請求項６３】
請求項６２に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項６４】
前記マルチドメインタンパク質が抗体である、請求項５６、５８、６０および６１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６５】
前記ドメインが、抗原結合ドメインである、請求項５６、５８、６０および６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６６】
前記ドメインが、定常領域ドメインである、請求項５６、５８、６０および６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
等電点電気泳動により、前記ステップ（ｂ）を実施する、請求項５６、５８、６０、６１および６４〜６６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
前記改変が、K338、A339、K340、G341、Q342、R344、E345、R355、E356、E357、M358、T359、K360、N361、Q362、L365、T366、K370、N390、Y391、K392、T393、T394、V397、L398、D399、S400、D401、F405、K409、L410、D413およびK414（番号付けは、Kabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６９】
前記アミノ酸置換が、K338を任意の非荷電残基に；K338D；K338E；A339D；A339E；A339K；A339R；K340 を任意の非荷電残基に；K340D；K340E；G314D；G314E；G314K；G314R；Q342D；Q342E；Q342K；Q342R；R344を任意の非荷電残基に；R344D；R344E；E345を任意の非荷電残基に；E345K；E345R；R355を任意の非荷電残基に；R355D；R355E；E356を任意の非荷電残基に；E356K；E356R；E357を任意の非荷電残基に；E357K；E357R；M358D；M358E；M358K；M358R；T359D；T359E；T359K；T359R；K360を任意の非荷電残基に；K360D；K360E；N361D；N361E；N361K；N361R；Q362D；Q362E；Q362K；Q362R；L365D；L365E；L365K；L365R；T366D；T366E；T366K；T366R；K370を任意の非荷電残基に；K370D；K370E；N390D；N390E；N390K；N390R；Y391D；Y391E；Y391K；Y391R；K392を任意の非荷電残基に；K392D；K392E；T393D；T393E；T393K；T393R；T394D；T394E；T394K；T394R；V397D；V397E；V397K；V397R；L398D；L398E；L398K；L398R；D399を任意の非荷電残基に；D399K；D399R；S400D；S400E；S400K；S400R；D401を任意の非荷電残基に；D401K；D401R；F405D；F405E；F405K；F405R；K409を任意の非荷電残基に；K409D；K409E；L410D；L410E；L410K；L410R；D413を任意の非荷電残基に；D413K；D413R；K414を任意の非荷電残基に；K414D；およびK414E（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
請求項６４〜６９のいずれか１項に記載の方法により生産されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７１】
Fcドメインを含む操作されたマルチドメインタンパク質であって、該FcドメインはpIが上昇または低下するように改変されている、前記マルチドメインタンパク質。
【請求項７２】
前記改変が、K338、A339、K340、G341、Q342、R344、E345、R355、E356、E357、M358、T359、K360、N361、Q362、L365、T366、K370、N390、Y391、K392、T393、T394、V397、L398、D399、S400、D401、F405、K409、L410、D413およびK414（番号付けは、Kabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記アミノ酸置換が、K338を任意の非荷電残基に；K338D；K338E；A339D；A339E；A339K；A339R；K340 を任意の非荷電残基に；K340D；K340E；G314D；G314E；G314K；G314R；Q342D；Q342E；Q342K；Q342R；R344を任意の非荷電残基に；R344D；R344E；E345を任意の非荷電残基に；E345K；E345R；R355を任意の非荷電残基に；R355D；R355E；E356を任意の非荷電残基に；E356K；E356R；E357を任意の非荷電残基に；E357K；E357R；M358D；M358E；M358K；M358R；T359D；T359E；T359K；T359R；K360を任意の非荷電残基に；K360D；K360E；N361D；N361E；N361K；N361R；Q362D；Q362E；Q362K；Q362R；L365D；L365E；L365K；L365R；T366D；T366E；T366K；T366R；K370を任意の非荷電残基に；K370D；K370E；N390D；N390E；N390K；N390R；Y391D；Y391E；Y391K；Y391R；K392を任意の非荷電残基に；K392D；K392E；T393D；T393E；T393K；T393R；T394D；T394E；T394K；T394R；V397D；V397E；V397K；V397R；L398D；L398E；L398K；L398R；D399を任意の非荷電残基に；D399K；D399R；S400D；S400E；S400K；S400R；D401を任意の非荷電残基に；D401K；D401R；F405D；F405E；F405K；F405R；K409を任意の非荷電残基に；K409D；K409E；L410D；L410E；L410K；L410R；D413を任意の非荷電残基に；D413K；D413R；K414を任意の非荷電残基に；K414D；およびK414E（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記pIを低下させた、請求項７１に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７５】
前記改変が、A339、G341、Q342、E345、E356、E357、M358、T359、N361、Q362、L365、T366、N390、Y391、T393、T394、V397、L398、D399、S400、D401、F405、L410およびD413（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７４に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７６】
前記アミノ酸置換が、A339K；A339R；G314K；G314R；Q342K；Q342R；E345を任意の非荷電残基に；E345K；E345R；E356を任意の非荷電残基に；E356K；E356R；E357を任意の非荷電残基に；E357K；E357R；M358K；M358R；T359K；T359R；N361K；N361R；Q362K；Q362R；L365K；L365R；T366K；T366R；N390K；N390R；Y391K；Y391R；T393K；T393R；T394K；T394R；V397K；V397R；L398K；L398R；D399を任意の非荷電残基に；D399K；D399R；S400K；S400R；D401を任意の非荷電残基に；D401K；D401R；F405K；F405R；L410K；L410R；D413を任意の非荷電残基に；D413K；およびD413R（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、請求項７５に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７７】
前記pIを上昇させた、請求項７１に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７８】
前記改変が、K338、A339、K340、G341、Q342、R344、R355、M358、T359、K360、N361、Q362、L365、T366、K370、N390、Y391、K392、T393、T394、V397、L398、S400、F405、K409、L410、およびK414（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７７に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【請求項７９】
前記改変が、K338を任意の非荷電残基に；K338D；K338E；A339D；A339E；K340 を任意の非荷電残基に；K340D；K340E；G314D；G314E；Q342D；Q342E；R344を任意の非荷電残基に；R344D；R344E；R355を任意の非荷電残基に；R355D；R355E；M358D；M358E；T359D；T359E；K360を任意の非荷電残基に；K360D；K360E；N361D；N361E；Q362D；Q362E；L365D；L365E；T366D；K370を任意の非荷電残基に；K370D；K370E；N390D；N390E；Y391D；Y391E；K392を任意の非荷電残基に；K392D；K392E；T393D；T393E；T394D；T394E；V397D；V397E；L398D；L398E；S400D；S400E；F405D；F405E；K409を任意の非荷電残基に；K409D；K409E；L410D；L410E；K414を任意の非荷電残基に；K414D；およびK414E（番号付けはKabatに記載されるEUインデックスに従う）からなる群より選択される、１以上のアミノ酸残基での置換を含む、請求項７８に記載の操作されたマルチドメインタンパク質。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８Ａ】
【図１８Ｂ】
【図１８Ｃ】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２Ａ】
【図２２Ｂ】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８Ａ】
【図１８Ｂ】
【図１８Ｃ】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２Ａ】
【図２２Ｂ】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【公表番号】特表２００９−５００３４４（Ｐ２００９−５００３４４Ａ）
【公表日】平成２１年１月８日（２００９．１．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５１９６１５（Ｐ２００８−５１９６１５）
【出願日】平成１８年６月３０日（２００６．６．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２５５９０
【国際公開番号】ＷＯ２００７／００５６１２
【国際公開日】平成１９年１月１１日（２００７．１．１１）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．テフロン
【出願人】（５０４３３３９７２）メディミューン，エルエルシー (108)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１月８日（２００９．１．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年６月３０日（２００６．６．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２５５９０
【国際公開番号】ＷＯ２００７／００５６１２
【国際公開日】平成１９年１月１１日（２００７．１．１１）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．テフロン
【出願人】（５０４３３３９７２）メディミューン，エルエルシー (108)
【Ｆターム（参考）】
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