本発明は、適当な宿主細胞系において異種遺伝子産物を発現させるために、および/または異種遺伝子産物を発現し、パッケージングし、かつ/または提示するネガティブ鎖RNA組換えウイルスをレスキューするために、使用することができる組換えウシ・パラインフルエンザウイルス（bPIV）cDNAもしくはRNAに関する。特に、異種遺伝子産物には、別の種のPIV由来または別のネガティブ鎖RNAウイルス（インフルエンザウイルス、呼吸器多核体ウイルス、ヒト・メタニューモウイルス、およびトリ・ニューモウイルスを含むが、これらに限らない）由来の遺伝子産物が含まれる。このキメラウイルスおよび発現産物は、広範な病原体および抗原に対するワクチンを含めたワクチン製剤において有利に使用される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物メタニューモウイルスのヌクレオチド配列を含んでなる組換えパラインフルエンザウイルス３型であって、該哺乳動物メタニューモウイルスが、パラミクソウイルス(Paramyxoviridae)科ニューモウイルス(Pneumovirinae)亜科に属するネガティブセンス一本鎖RNAウイルスであり、かつ該哺乳動物メタニューモウイルスは、系統発生的に、シチメンチョウ鼻気管炎ウイルス(TRTV)との近縁性よりも、CNCM（パリ）にI-2614として寄託されたウイルス分離株との近縁性が高いことを特徴とする、組換えパラインフルエンザウイルス３型。
【請求項２】
哺乳動物メタニューモウイルスのヌクレオチド配列が、パラインフルエンザのヌクレオチド配列に取って代わっているか、またはパラインフルエンザウイルスのゲノムに挿入されている、請求項１に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項３】
哺乳動物メタニューモウイルスのヌクレオチド配列が、パラインフルエンザウイルスゲノムの位置1、2、3、4、5または6に挿入されている、請求項１に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項４】
さらにRSVヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項５】
パラインフルエンザウイルスがウシ・パラインフルエンザウイルスである、請求項１に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項６】
さらにヒト・パラインフルエンザウイルスのヌクレオチド配列を１つ以上含む、請求項５に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項７】
前記ヌクレオチド配列が哺乳動物メタニューモウイルスのポリペプチドをコードしている、請求項１に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項８】
前記ポリペプチドが、哺乳動物メタニューモウイルスのFもしくはGタンパク質、またはその断片である、請求項７に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項９】
前記ポリペプチドが、配列番号70もしくはその断片と少なくとも90％同一、配列番号78もしくはその断片と少なくとも70％同一、配列番号62もしくはその断片と少なくとも90％同一、配列番号18もしくはその断片と少なくとも82％同一、配列番号42もしくはその断片と少なくとも85％同一、配列番号50もしくはその断片と少なくとも60％同一、配列番号34もしくはその断片と少なくとも85％同一、配列番号26もしくはその断片と少なくとも20％同一、または配列番号86もしくはその断片と少なくとも30％同一である、請求項７に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項１０】
前記ポリペプチドが、配列番号78、配列番号62、配列番号18、配列番号42、配列番号50、配列番号34、配列番号26、配列番号86、配列番号70、配列番号28、配列番号72、配列番号80、配列番号64、配列番号20、配列番号44、配列番号52、配列番号88、配列番号36、配列番号29、配列番号73、配列番号81、配列番号65、配列番号21、配列番号45、配列番号53、配列番号89、配列番号37、配列番号27、配列番号71、配列番号79、配列番号63、配列番号43、配列番号51、配列番号87、配列番号35、またはその断片である、請求項７に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項１１】
前記ヌクレオチド配列が、配列番号22〜25、配列番号30〜33、配列番号38〜41、配列番号46〜49、配列番号54〜61、配列番号66〜69、配列番号74〜77、配列番号82〜85、配列番号90〜93、配列番号98〜132、配列番号168〜247、またはその断片からなる群より選択される、請求項１に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項１２】
前記断片が、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも50、少なくとも75、少なくとも100、少なくとも150、少なくとも250、少なくとも500、少なくとも750、または少なくとも1000アミノ酸長である、請求項９または10に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項１３】
前記断片が、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも50、少なくとも75、少なくとも100、少なくとも150、少なくとも250、少なくとも500、少なくとも750、または少なくとも1000ヌクレオチド長である、請求項11に記載の組換えパラインフルエンザウイルス。
【請求項１４】
異種ヌクレオチド配列がヒト・メタニューモウイルス由来である、請求項１に記載のウイルス。
【請求項１５】
哺乳動物メタニューモウイルス配列が、Fタンパク質、Gタンパク質、SHタンパク質、Nタンパク質、Pタンパク質、M2タンパク質、M2-1タンパク質、M2-2タンパク質、Lタンパク質、またはその断片をコードしている、請求項７に記載のウイルス。
【請求項１６】
請求項１〜14のいずれか1項に記載のウイルスのゲノムをコードする組換えDNAまたはRNA分子。
【請求項１７】
請求項15に記載のウイルスのゲノムをコードする組換えDNAまたはRNA分子。
【請求項１８】
請求項１〜14のいずれか1項に記載の組換えウイルスおよび製薬上許容される添加剤を含有するワクチン製剤。
【請求項１９】
請求項15に記載の組換えウイルスおよび製薬上許容される添加剤を含有するワクチン製剤。
【請求項２０】
請求項18に記載のワクチンを投与することを含んでなる、哺乳動物における呼吸器感染症の処置方法。
【請求項２１】
請求項19に記載のワクチンを投与することを含んでなる、哺乳動物における呼吸器感染症の処置方法。
【請求項２２】
哺乳動物がヒトである、請求項20に記載の方法。
【請求項２３】
哺乳動物がヒトである、請求項21に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１〜15のいずれか１項に記載の組換えウイルスを増やす方法であって、該ウイルスを感染させた細胞を、該細胞の増殖に最適な温度より低い温度で培養することを含んでなる上記方法。
【請求項２５】
請求項１〜15のいずれか１項に記載の組換えウイルスを増やす方法であって、(i) 該ウイルスを感染させる前に第１の温度で細胞を培養し、(ii) 該細胞にウイルスを感染させ、(iii) 該細胞へのウイルスの感染後に第２の温度で該細胞を培養する、ことを含んでなり、第２の温度が第１の温度より低いことを特徴とする、上記方法。
【請求項２６】
請求項１〜15のいずれか１項に記載の組換えウイルスを増やす方法であって、該ウイルスを感染させた細胞を血清の非存在下で培養することを含んでなる上記方法。
【請求項２７】
請求項１〜15のいずれか１項に記載の組換えウイルスを増やす方法であって、(i) 該ウイルスを感染させる前に血清の存在下で細胞を培養し、(ii) 該細胞にウイルスを感染させ、(iii) 該細胞へのウイルスの感染後に血清の非存在下で該細胞を培養する、ことを含んでなる上記方法。
【請求項２８】
請求項１〜15のいずれか１項に記載の組換えウイルスを増やす方法であって、該ウイルスを感染させた細胞を、血清の非存在下に、該細胞の増殖に最適な温度より低い温度で培養することを含んでなる上記方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５Ａ−Ｂ】

【図５Ｃ】

【図５Ｄ】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図８】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１３Ｃ】

【図１３Ｄ】

【図１４】

【図１５】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１６Ｃ】

【図１６Ｄ】

【図１６Ｅ】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【公表番号】特表２００６−５２４５１１（Ｐ２００６−５２４５１１Ａ）
【公表日】平成１８年１１月２日（２００６．１１．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１３３００（Ｐ２００６−５１３３００）
【出願日】平成１６年４月２３日（２００４．４．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１２７２３
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０２７８２５
【国際公開日】平成１７年３月３１日（２００５．３．３１）
【出願人】（５０５３９６２２４）メッドイミューン　バクシーンズ，インコーポレイティド (13)
【出願人】（５０４３１７９４９）ヴァイロノヴァティヴ　ビーヴイ (7)
【Ｆターム（参考）】