ロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品
【課題】植物抽出物中の薬効成分を活用することによって得られる安全かつ効果の高いロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品を提供すること。
【解決手段】キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の花を含む部位の抽出物を有効成分とすることを特徴とするロイコトリエン産生抑制剤。
【解決手段】キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の花を含む部位の抽出物を有効成分とすることを特徴とするロイコトリエン産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物抽出物を有効成分とするロイコトリエン産生抑制剤に関し、更に詳細にはロイコトリエン産生抑制剤として生体内におけるロイコトリエンの産生を抑制し、結果として鼻閉、気管支喘息等の症状を治療しあるいは緩和する事を目的とするロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
花粉やダニ等の抗原がアレルギー性鼻炎患者の鼻粘膜上に吸引されると、肥満細胞の表面でIgE抗体と結合しヒスタミンやロイコトリエンを主とする化学伝達物質が放出され、アレルギー反応が起こる。これらの化学伝達物質に対する鼻粘膜の知覚神経終末、血管の反応として、くしゃみ、水様性鼻汁（鼻水）、鼻粘膜腫脹（鼻閉）が見られる。これがアレルギー性鼻炎の即時相反応と呼ばれる症状である。
抗原に曝露された後、鼻粘膜内では肥満細胞等で産生されるサイトカインやケモカインにより好酸球を中心とする様々な炎症細胞が集まり、主に好酸球から産生されるシステイニルロイコトリエンの働きにより鼻粘膜腫脹（鼻閉）が起こる。これがアレルギー性鼻炎の遅発相反応と呼ばれる症状であり、抗原が体内に入ってから６〜１０時間後にみられる。遅発相反応は夜間の就寝時に発症する事が多く、鼻閉による呼吸困難の為に十分な睡眠を取ることができず、結果としてQOL（クオリティオブライフ）を低下させる大きな要因となっている。
【０００３】
近年、このようなアレルギー性鼻炎の遅発相症状は、ケミカルメディエーターとして、ロイコトリエンが関与することにより引き起こされていることが明らかにされており、ロイコトリエンの産生抑制が当該症状の改善に有効な方策であることが分かっている（例えば、非特許文献１参照）。
従来、アレルギー性鼻炎の症状の改善には、抗ヒスタミン作用を有する抗アレルギー薬が汎用されてきた（例えば、非特許文献２参照）。しかしながら、このような抗アレルギー薬では、上記鼻炎症状の内、即時相の症状に対しては一定の効果を示すものの、遅発相の症状に対しては満足できる効果が得られていないのが現状である。又、これらの抗アレルギー薬は化学合成製品である為、眠気やめまいあるいは吐き気を催したり、倦怠感が起こったり、さらには下痢を催したりする副作用があるという問題点も有している（例えば、非特許文献３参照）。
このような背景の下、安全性に問題が少ないという点から天然物である植物からロイコトリエン産生抑制効果を有する抽出物の探索が行われており、フキ（例えば、特許文献１参照）等が開示されているが、十分なロイコトリエン産生抑制効果を有する抽出物は未だ得られていないのが現状である。
【０００４】
【特許文献１】特開２００５-１７９３０８号公報
【非特許文献１】鼻アレルギー診療ガイドライン ｐ１４-１６,２００５年版
【非特許文献２】鼻アレルギー診療ガイドライン ｐ７０-７８,２００５年版
【非特許文献３】ポケット医薬品集（２００１年版）、白文社、ｐ４５４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、上記のような従来技術の問題点を解決するためになされたもので、植物抽出物中の薬効成分を活用することによって得られる安全かつ効果の高いロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を解決するため、本発明者らは、広くロイコトリエン産生抑制活性を示す物質のスクリーニングを行った結果、キク科ハハコグサ属（Compositae Gnaphalium）植物の抽出物がロイコトリエン産生抑制効果を有することを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００７】
すなわち、本発明はキク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とするロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品である。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のロイコトリエン産生抑制剤は古くから生薬や民間伝承的に用いられている植物の抽出物を使用するものであるから、呈味に優れ、かつ安全性の点で問題はない。
そのため、本発明のロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品は、化学合成品からなる抗ヒスタミン剤のような副作用を伴わずに、アレルギー性鼻炎の鼻閉症状、風邪による鼻閉、鼻閉症状が慢性化した慢性副鼻腔炎、蕁麻疹、湿疹・皮膚炎、皮膚掻痒症、痒疹、気管支喘息、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、アレルギー性結膜炎、春季カタル、慢性結膜炎、リウマチ様関節炎、脊椎関節炎、痛風、アテロ−ム性動脈硬化症、慢性炎症性腸疾患、肺循環昇圧、片頭痛等の疾患を予防することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明を詳細に説明する。本発明のロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含有する飲食品の製造方法及び効能について述べるが、本発明はこれら記載に限定されるものではない。
【００１０】
本発明で使用するキク科ハハコグサ属（Compositae Gnaphalium）植物は、ハハコグサ（オギョウ、ゴギョウ、鼠麹草ともいう）（Gnaphalium affine, Gnaphalium multiceps Wall）、チチコグサ（Gnaphalium japonicum Thunb）、アキノハハコグサ（Gnaphalium hypoleucum）、チチコグサモドキ（Gnaphalium purpureum）、エゾノハハコグサ（Gnaphalium uliginosum）、ウィラウィラ（Gnaphalium viravira）等、本種属に含まれていれば特に植物の種類は限定しない。
また、抽出に供する為の植物部位については花を含む部位であれば、その全体、開花期地上部等を使用することができるが、花を使用する事が好ましい。
【００１１】
上記植物はそのまま使用してもよいが、乾燥して破砕することにより粉末として使用したほうが抽出効率がよくなり好適である。また、本発明のロイコトリエン産生抑制剤を得るための抽出に用いる溶剤に関しては特に限定しないが、水（熱水）の他にメタノール、エタノールまたはプロパノール等のアルコール類や、エーテル、クロロホルム、酢酸エチル、アセトン、グリセリン、プロピレングリコール等の有機溶剤またはこれらを適宜混合した溶剤を、好ましくは親水性の有機溶剤またはこれらを適宜混合した溶剤を用いて抽出することができる。しかし、本発明では、ロイコトリエン産生抑制剤として上記抽出物を経口で摂取することも考慮すると、安全性の面から水、エタノールもしくはその混合液を用いて抽出することが望ましい。
【００１２】
上記植物より抽出物を得るための抽出条件としては、特に制限はないが、２０〜１００℃で１〜５時間程度が好ましい。抽出液はさらに濾過し、抽出溶剤を留去したあと、減圧下において濃縮または凍結乾燥したものを使用することができる。また、これらの抽出物を有機溶剤分画、カラムクロマトグラフィー等により分画精製したものを使用することもできる。
【００１３】
本発明のロイコトリエン産生抑制剤は、上記方法によって作製した植物抽出物の１種又は２種以上を有効成分として使用することにより調製することができる。そのままでも使用する事ができるが、必要により適当な液体単体に溶解するか或いは分散させ、または適当な粉末単体と混合するか或いはこれに吸着させ、場合によっては、さらにこれに乳化剤、安定剤、分散剤、矯味剤、保存剤、芳香剤、着色剤、コーティング剤等を添加して、錠剤、液剤、注射剤、軟膏、クリーム、ローション、スプレー剤、エアゾール剤、座剤等の所望の剤型にして、経口剤、外用剤、注射剤、吸入剤、点鼻・点眼剤等として使用してもよい。この場合の添加量は、その形態及び容量等により一概に規定することは困難であるが、剤に対して植物抽出物を０．０１〜９５重量％使用するのが好適である。
【００１４】
また、本発明のロイコトリエン産生抑制剤は、香り、呈味性に優れ、安全性が高いことから、チューインガム、キャンディ、錠菓、グミゼリー、チョコレート及びビスケット等の菓子、アイスクリーム、シャーベット及び氷菓等の冷菓並びに飲料等に配合して日常的に利用することが可能である。
本発明の飲食品へのロイコトリエン産生抑制剤添加量は特に限定はしないが約０．００１重量％以上、好ましくは約０．０１〜９５重量％とするのが好適である。
【００１５】
本発明で使用するキク科ハハコグサ属（Compositae Gnaphalium）植物の抽出物は、生薬、食品素材、ハーブティーとして古くから用いられているものであり、これらの抽出物及びこれを配合した飲食品の安全性について全く問題がない。
【００１６】
以下、試験例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
＜試験例１＞
本試験は、植物体より植物抽出物を得るために行なった。
【００１７】
１） 試験法
以下に述べる方法にて植物抽出物を調製した。
〔試料調製例１〕
乾燥し破砕したチチコグサの花、アキノハハコグサの花、エゾノハハコグサの花それぞれ３０ｇに３００ｍｌの５０％エタノールを加え、１時間、９０℃で還流抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。チチコグサ抽出物は４．７ｇ、アキノハハコグサ抽出物は４．２ｇ、エゾノハハコグサ抽出物は５．０ｇ得られた。
〔試料調製例２〕
乾燥し破砕した、ハハコグサの花、ウィラウィラの花それぞれ１０ｇに３００ｍｌの５０％エタノールを加え、２時間、８０℃で還流抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は２．１ｇ、ウィラウィラ抽出物は１．５ｇ得られた。
〔試料調製例３〕
乾燥し破砕したチチコグサの花、アキノハハコグサの花、エゾノハハコグサの花それぞれ３０ｇに３００ｍｌの水を加え、１時間、９０℃で還流抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。チチコグサ抽出物は４．２ｇ、アキノハハコグサ抽出物は４．１ｇ、エゾノハハコグサ抽出物は４．７ｇ得られた。
〔試料調製例４〕
乾燥し破砕したハハコグサの開花期地上部、ウィラウィラの花それぞれ１０ｇに１００ｍｌの水を加え、３時間、室温で抽出を行った。得られた抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は１．４ｇ、ウィラウィラ抽出物は１．１ｇ得られた。
〔試料調製例５〕
乾燥し破砕したチチコグサの花、アキノハハコグサの花、エゾノハハコグサの花それぞれ３０ｇに３００ｍｌの１００％エタノールを加え、１時間、室温で抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。チチコグサ抽出物は１．３ｇ、アキノハハコグサ抽出物は１．７ｇ、エゾノハハコグサ抽出物は１．５ｇ得られた。
〔試料調製例６〕
乾燥し破砕したハハコグサの花、ウィラウィラの花それぞれ１０ｇに３００ｍｌの１００％エタノールを加え、２時間、７０℃で抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は１．４ｇ、ウィラウィラ抽出物は１．１ｇ得られた。
〔試料調製例７〕
乾燥し破砕したハハコグサの花、ウィラウィラの全草それぞれ１０ｇに１００ｍｌの１００％メタノールを加え、１時間、７０℃で抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、減圧乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は０．９ｇ、ウィラウィラ抽出物は０．７ｇ得られた。
〔比較試料１〕
乾燥し破砕したフキ１０ｇに２００ｍｌの７０％エタノールを加え、２時間、７０℃で還流抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することによりフキ抽出物５．５６ｇを得た。
〔比較試料２〕
乾燥し破砕したハハコグサの葉１０ｇに１００ｍｌの５０％エタノールを加え、２時間、７０℃で還流抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することによりハハコグサ抽出物２．０ｇを得た。
〔比較試料３〕
乾燥し破砕したウィラウィラの茎１０ｇに１００ｍｌの５０％エタノールを加え、２時間、７０℃で還流抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することによりウィラウィラ抽出物１．５ｇを得た。
＜試験例２＞
【００１８】
本試験は、試験例１で得られた植物抽出物のロイコトリエン産生抑制効果を調べるために行なった。
【００１９】
１）供試試料
試験例１で調製した植物抽出物を用いた。
【００２０】
２）試験法
試料調製例１〜７で示した本発明品であるロイコトリエン産生抑制剤及び比較試料１で示した比較抽出物を試料として、ロイコトリエン産生抑制効果を調べた。
本試験は、ラット好塩基性細胞株（ＲＢＬ−２Ｈ３細胞、資源番号ＪＣＲＢ００２３）を用いて産生されるシステイニルロイコトリエン量を測定し、植物抽出物がシステイニルロイコトリエンの産生を抑制する効果を確認するものである。なお、ロイコトリエンの中でロイコトリエンＣ４、Ｄ４、Ｅ４の三つがシステイニルロイコトリエンと呼ばれる。
ＲＢＬ−２Ｈ３細胞をウシ胎児血清（１０％）、ペニシリン（５０U／ｍｌ）、ストレプトマイシン（５０μg／ｍｌ）を含有するMinimum Essential Medium Eagle（ＥＭＥＭ培地）中で３７℃、５％ＣＯ2で継代培養を行った。
試験日の前日にＲＢＬ−２Ｈ３細胞を２４穴平底マイクロプレートに２．０×１０５個（４００μｌ／ｗｅｌｌ）ずつ播種した。試験当日、プレートを５００μｌのＰＩＰＥＳ 緩衝液（１１９ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２ 、０．４ｍＭ ＭｇＣｌ２、５．６ｍＭ ｇｌｕｃｏｓｅ、２５ｍＭ ＰＩＰＥＳ、４０ｍＭ ＮａＯＨ、０．１％ ＢＳＡ、ｐＨ７．２）で２回洗浄し、試料を添加したＰＩＰＥＳ 緩衝液を２００μｌ加えて３７℃で１０分間、加温した。次に１０μｌの刺激剤（カルシウムイオノフォアＡ２３１８７：終濃度５μＭ）を加えて１５分間反応させた。反応終了後、１０分間、氷冷して反応を止めた後に上清１８０μｌを回収、１０００ｒｐｍで３分間、遠心分離して上清１５０μｌを得た。
得られた上清中に含まれるシステイニルロイコトリエン量（ロイコトリエンＣ４、Ｄ４及びＥ４各量の合計）をケイマンケミカル社製システイニルロイコトリエンＥＩＡキットにて測定し、各試料のロイコトリエン産生抑制率を以下の式により算出した。
ロイコトリエン産生抑制率（％）＝〔（Ｃ-Ｂ-Ｓ）／（Ｃ-Ｂ）〕×１００
但し、Ｓ＝試料と刺激剤を添加した場合のロイコトリエン産生量、Ｃ＝刺激剤のみを添加した場合のロイコトリエン産生量、Ｂ＝試料及び刺激剤を双方共に添加しない場合のロイコトリエン産生量 とする。
【００２１】
３）試験結果
それぞれの試料の１００μｇ／ｍｌ濃度でのロイコトリエン産生抑制率を表１に示した。
【００２２】
【表１】
【００２３】
試験例２より、本発明のチチコグサ、アキノハハコグサ、エゾノハハコグサ、ハハコグサ及びウィラウィラの花を含む部位から作製された抽出物は、強いロイコトリエン産生抑制作用を示すことが明らかになった。比較試料に示したフキ抽出物、ハハコグサ抽出物及びウィラウィラ抽出物のロイコトリエン産生抑制活性は弱いものであった。
【００２４】
以下、実施例を挙げて本発明品を更に詳細に説明するが、それらによって本発明品の範囲を制限するものでなない。
【００２５】
試料調製例１乃至７で調製した植物抽出物を用いて、錠剤、散剤、吸入剤、点鼻薬、チューインガム、キャンディ、チョコレート、ビスケット、グミゼリー、錠菓、アイスクリーム、シャーベット、飲料を常法にて調製した。以下にその処方を示した。
【実施例１】
【００２６】
下記処方にしたがって錠剤を調製した。
Ｄ−マンニトール ４２．６％
乳糖 ４２．６
結晶セルロース ８．５
ヒドロキシプロピルセルロース ４．３
試料調製例７のウィラウィラ抽出物 ２．０
１００．０％
本錠剤は、錠剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００２７】
実施例１と同じ配合比率で、試料調製例７のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のウィラウィラ抽出物を除く）を配合した錠剤をそれぞれ同様に調製した。これらは錠剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２】
【００２８】
下記処方にしたがって散剤を調製した。
乳糖 ６２．５％
馬鈴薯でんぷん １２．５
試料調製例５のチチコグサ抽出物 ２５．０
１００．０％
本散剤は、散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００２９】
実施例２と同じ配合比率で、試料調整例５のチチコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調整例５のチチコグサ抽出物を除く）を配合した散剤をそれぞれ同様に調製した。これらは散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例３】
【００３０】
下記処方にしたがって散剤を調製した。
乳糖 ２．５％
馬鈴薯でんぷん ２．５
試料調製例２のハハコグサ抽出物 ９５．０
１００．０％
本散剤は、散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３１】
実施例３と同じ配合比率で、試料調製例２のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のハハコグサ抽出物を除く）を配合した散剤をそれぞれ同様に調製した。これらは散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例４】
【００３２】
下記処方にしたがって吸入剤を調製した。
エタノール ５．０％
試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物 １．０
Ｌ−メントール ２．０
水 ９２．０
１００．０％
本吸入剤は、吸入剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３３】
実施例４と同じ配合比率で、試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物を除く）を配合した吸入剤をそれぞれ同様に調製した。これらは吸入剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例５】
【００３４】
下記処方にしたがって点鼻薬を調製した。
サリチル酸メチル ０．０３ｇ
マレイン酸クロルフェニラミン ０．３
ｄｌ―塩酸メチルエフェドリン ０．３
ポリソルベート８０ ０．２
塩化ベンザルコニウム ０．０１
塩化ナトリウム ０．６
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
試料調製例１のアキノハハコグサ抽出物 ０．０１
水 適量
１００．０ｍｌ
（ｐＨ６．５）
本点鼻薬は、点鼻薬としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３５】
実施例５と同じ配合比率で、試料調製例１のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例１のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合した点鼻薬をそれぞれ同様に調製した。これらは点鼻薬としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例６】
【００３６】
下記処方にしたがってチューインガムを調製した。
ガムベース ２０．０％
砂糖 ５４．７
グルコース １５．０
水飴 ９．３
香料 ０．５
試料調製例２のハハコグサ抽出物 ０．５
１００．０％
本チューインガムは、チューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３７】
実施例６と同じ配合比率で、試料調製例２のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のハハコグサ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製した。これらはチューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例７】
【００３８】
下記処方にしたがってチューインガムを調製した。
ガムベース ２０．０％
砂糖 ５４．５
グルコース １０．０
水飴 １３．０
香料 ０．５
試料調製例２のウィラウィラ抽出物 １．０
試料調製例５のエゾノハハコグサ抽出物 １．０
１００．０％
本チューインガムは、チューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３９】
実施例７と同じ配合比率で、試料調製例２のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製し、また、試料調製例５のエゾノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例５のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製した。これらはチューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例８】
【００４０】
下記処方にしたがってチューインガムを調製した。
ガムベース ２０．０％
砂糖 ５０．５
グルコース １４．０
水飴 １３．０
香料 ０．５
試料調製例３のチチコグサ抽出物 ２．０
１００．０％
本チューインガムは、チューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４１】
実施例８と同じ配合比率で、試料調製例３のチチコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のチチコグサ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製した。これらはチューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例９】
【００４２】
下記処方にしたがってキャンディを調製した。
砂糖 ５０．０％
水飴 ３３．０
クエン酸 １．０
香料 ０．２
Ｌ−メントール １．０
試料調製例７のハハコグサ抽出物 ０．４
水 １４．４
１００．０％
本キャンディは、キャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４３】
実施例９と同じ配合比率で、試料調製例７のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のハハコグサ抽出物を除く）を配合したキャンディをそれぞれ同様に調製した。これらはキャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１０】
【００４４】
下記処方にしたがってキャンディを調製した。
砂糖 ３８．０％
水飴 ４２．０
クエン酸 １．０
香料 ０．２
試料調製例６のウィラウィラ抽出物 ０．４
水 １８．４
１００．０％
本キャンディは、キャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４５】
実施例１０と同じ配合比率で、試料調製例６のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例６のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したキャンディをそれぞれ同様に調製した。これらはキャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１１】
【００４６】
下記処方にしたがってチョコレートを調製した。
カカオビター ２０．０％
全脂粉乳 ２０．０
カカオバター １７．０
粉糖 ４１．８５
レシチン ０．４５
香料 ０．１
試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物 ０．６
１００．０％
本チョコレートは、チョコレートとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４７】
実施例１０と同じ配合比率で、試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合したチョコレートをそれぞれ同様に調製した。これらはチョコレートとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１２】
【００４８】
下記処方にしたがってビスケットを調製した。
砂糖 ３１．７％
小麦粉 ２６．８
片栗粉 ２６．８
バター ３．２
卵 １０．２
重曹 ０．３
試料調製例２のハハコグサ抽出物 ０．５
試料調製例２のウィラウィラ抽出物 ０．５
１００．０％
本ビスケットは、ビスケットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４９】
実施例１２と同じ配合比率で、試料調製例２のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のハハコグサ抽出物を除く）を配合したビスケットをそれぞれ同様に調製し、また、試料調製例２のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したビスケットをそれぞれ同様に調製した。これらはビスケットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１３】
【００５０】
下記処方にしたがってグミゼリーを調製した。
ポリデキストロース水溶液 ４０．０％
ソルビトール水溶液 ８．０
パラチノース水溶液 ９．０
マルトース水溶液 ２０．０
トレハロース水溶液 １１．０
ゼラチン １０．０
酒石酸 １．０
試料調製例４のハハコグサ抽出物 １．０
１００．０％
本グミゼリーは、グミゼリーとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５１】
実施例１３と同じ配合比率で、試料調製例４のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例４のハハコグサ抽出物を除く）を配合したグミゼリーをそれぞれ同様に調製した。これらはグミゼリーとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１４】
【００５２】
下記処方にしたがって錠菓を調製した。
砂糖 ７６．１％
グルコース １９．０
ショ糖脂肪酸エステル ０．２
香料 ０．１５
試料調製例６のハハコグサ抽出物 ０．１
水 ４．０
１００．０％
本錠菓は、錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５３】
実施例１４と同じ配合比率で、試料調製例６のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例６のハハコグサ抽出物を除く）を配合した錠菓をそれぞれ同様に調製した。これらは錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１５】
【００５４】
下記処方にしたがって錠菓を調製した。
砂糖 ７４．７％
乳糖 １８．９
ショ糖脂肪酸エステル ０．１５
試料調製例７のハハコグサ抽出物 ２．０
水 ４．２５
１００．０％
本錠菓は、錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５５】
実施例１５と同じ配合比率で、試料調製例７のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のハハコグサ抽出物を除く）を配合した錠菓をそれぞれ同様に調製した。これらは錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１６】
【００５６】
下記処方にしたがって錠菓を調製した。
砂糖 ５６．７％
乳糖 １８．９
ショ糖脂肪酸エステル ０．１５
試料調製例７のウィラウィラ抽出物 ２０．０
水 ４．２５
１００．０％
本錠菓は、錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５７】
実施例１６と同じ配合比率で、試料調製例７のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のウィラウィラ抽出物を除く）を配合した錠菓をそれぞれ同様に調製した。これらは錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１７】
【００５８】
下記処方にしたがってタブレットを調製した。
砂糖 ３５．８５％
ショ糖脂肪酸エステル ０．１５
試料調製例２のウィラウィラ抽出物 ６０．０
水 ４．０
１００．０％
本タブレットは、タブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５９】
実施例１７と同じ配合比率で、試料調製例２のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したタブレットをそれぞれ同様に調製した。これらはタブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１８】
【００６０】
下記処方にしたがってタブレットを調製した。
砂糖 ２．９％
ショ糖脂肪酸エステル ０．１
試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物 ９５．０
水 ２．０
１００．０％
本タブレットは、タブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６１】
実施例１８と同じ配合比率で、試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合したタブレットをそれぞれ同様に調製した。これらはタブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１９】
【００６２】
下記処方にしたがってアイスクリームを調製した。
卵黄 １１．０％
砂糖 １４．０
牛乳 ３７．０
生クリーム ３７．０
バニラビーンズ ０．５
試料調製例５のアキノハハコグサ抽出物 ０．５
１００．０％
本アイスクリームは、アイスクリームとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６３】
実施例１９と同じ配合比率で、試料調製例５のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例５のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合したアイスクリームをそれぞれ同様に調製した。これらはアイスクリームとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２０】
【００６４】
下記処方にしたがってシャーベットを調製した。
オレンジ果汁 １６．０％
砂糖 ３１．０
試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物 ３．０
水 ５０．０
１００．０％
本シャーベットは、シャーベットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６５】
実施例２０と同じ配合比率で、試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物を除く）を配合したシャーベットをそれぞれ同様に調製した。これらはシャーベットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２１】
【００６６】
下記処方にしたがって飲料を調製した。
オレンジ果汁 ３０．０％
異性化糖 １５．３３
クエン酸 ０．１
ビタミンＣ ０．０４
香料 ０．１
試料調製例４のウィラウィラ抽出物 ０．０１
水 ５４．４２
１００．０％
本飲料は、飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６７】
実施例２１と同じ配合比率で、試料調製例４のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例４のウィラウィラ抽出物を除く）を配合した飲料をそれぞれ同様に調製した。これらは飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２２】
【００６８】
下記処方にしたがって飲料を調製した。
グレープ果汁 ２５．０％
異性化糖 １５．３３
クエン酸 ０．１
ビタミンＣ ０．０５
香料 ０．１
試料調製例３のチチコグサ抽出物 ０．００１
水 適量
１００．０％
本飲料は、飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６９】
実施例２２と同じ配合比率で、試料調製例３のチチコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のチチコグサ抽出物を除く）を配合した飲料をそれぞれ同様に調製した。これらは飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物抽出物を有効成分とするロイコトリエン産生抑制剤に関し、更に詳細にはロイコトリエン産生抑制剤として生体内におけるロイコトリエンの産生を抑制し、結果として鼻閉、気管支喘息等の症状を治療しあるいは緩和する事を目的とするロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
花粉やダニ等の抗原がアレルギー性鼻炎患者の鼻粘膜上に吸引されると、肥満細胞の表面でIgE抗体と結合しヒスタミンやロイコトリエンを主とする化学伝達物質が放出され、アレルギー反応が起こる。これらの化学伝達物質に対する鼻粘膜の知覚神経終末、血管の反応として、くしゃみ、水様性鼻汁（鼻水）、鼻粘膜腫脹（鼻閉）が見られる。これがアレルギー性鼻炎の即時相反応と呼ばれる症状である。
抗原に曝露された後、鼻粘膜内では肥満細胞等で産生されるサイトカインやケモカインにより好酸球を中心とする様々な炎症細胞が集まり、主に好酸球から産生されるシステイニルロイコトリエンの働きにより鼻粘膜腫脹（鼻閉）が起こる。これがアレルギー性鼻炎の遅発相反応と呼ばれる症状であり、抗原が体内に入ってから６〜１０時間後にみられる。遅発相反応は夜間の就寝時に発症する事が多く、鼻閉による呼吸困難の為に十分な睡眠を取ることができず、結果としてQOL（クオリティオブライフ）を低下させる大きな要因となっている。
【０００３】
近年、このようなアレルギー性鼻炎の遅発相症状は、ケミカルメディエーターとして、ロイコトリエンが関与することにより引き起こされていることが明らかにされており、ロイコトリエンの産生抑制が当該症状の改善に有効な方策であることが分かっている（例えば、非特許文献１参照）。
従来、アレルギー性鼻炎の症状の改善には、抗ヒスタミン作用を有する抗アレルギー薬が汎用されてきた（例えば、非特許文献２参照）。しかしながら、このような抗アレルギー薬では、上記鼻炎症状の内、即時相の症状に対しては一定の効果を示すものの、遅発相の症状に対しては満足できる効果が得られていないのが現状である。又、これらの抗アレルギー薬は化学合成製品である為、眠気やめまいあるいは吐き気を催したり、倦怠感が起こったり、さらには下痢を催したりする副作用があるという問題点も有している（例えば、非特許文献３参照）。
このような背景の下、安全性に問題が少ないという点から天然物である植物からロイコトリエン産生抑制効果を有する抽出物の探索が行われており、フキ（例えば、特許文献１参照）等が開示されているが、十分なロイコトリエン産生抑制効果を有する抽出物は未だ得られていないのが現状である。
【０００４】
【特許文献１】特開２００５-１７９３０８号公報
【非特許文献１】鼻アレルギー診療ガイドライン ｐ１４-１６,２００５年版
【非特許文献２】鼻アレルギー診療ガイドライン ｐ７０-７８,２００５年版
【非特許文献３】ポケット医薬品集（２００１年版）、白文社、ｐ４５４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、上記のような従来技術の問題点を解決するためになされたもので、植物抽出物中の薬効成分を活用することによって得られる安全かつ効果の高いロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を解決するため、本発明者らは、広くロイコトリエン産生抑制活性を示す物質のスクリーニングを行った結果、キク科ハハコグサ属（Compositae Gnaphalium）植物の抽出物がロイコトリエン産生抑制効果を有することを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００７】
すなわち、本発明はキク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とするロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品である。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のロイコトリエン産生抑制剤は古くから生薬や民間伝承的に用いられている植物の抽出物を使用するものであるから、呈味に優れ、かつ安全性の点で問題はない。
そのため、本発明のロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含む飲食品は、化学合成品からなる抗ヒスタミン剤のような副作用を伴わずに、アレルギー性鼻炎の鼻閉症状、風邪による鼻閉、鼻閉症状が慢性化した慢性副鼻腔炎、蕁麻疹、湿疹・皮膚炎、皮膚掻痒症、痒疹、気管支喘息、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、アレルギー性結膜炎、春季カタル、慢性結膜炎、リウマチ様関節炎、脊椎関節炎、痛風、アテロ−ム性動脈硬化症、慢性炎症性腸疾患、肺循環昇圧、片頭痛等の疾患を予防することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明を詳細に説明する。本発明のロイコトリエン産生抑制剤及びそれを含有する飲食品の製造方法及び効能について述べるが、本発明はこれら記載に限定されるものではない。
【００１０】
本発明で使用するキク科ハハコグサ属（Compositae Gnaphalium）植物は、ハハコグサ（オギョウ、ゴギョウ、鼠麹草ともいう）（Gnaphalium affine, Gnaphalium multiceps Wall）、チチコグサ（Gnaphalium japonicum Thunb）、アキノハハコグサ（Gnaphalium hypoleucum）、チチコグサモドキ（Gnaphalium purpureum）、エゾノハハコグサ（Gnaphalium uliginosum）、ウィラウィラ（Gnaphalium viravira）等、本種属に含まれていれば特に植物の種類は限定しない。
また、抽出に供する為の植物部位については花を含む部位であれば、その全体、開花期地上部等を使用することができるが、花を使用する事が好ましい。
【００１１】
上記植物はそのまま使用してもよいが、乾燥して破砕することにより粉末として使用したほうが抽出効率がよくなり好適である。また、本発明のロイコトリエン産生抑制剤を得るための抽出に用いる溶剤に関しては特に限定しないが、水（熱水）の他にメタノール、エタノールまたはプロパノール等のアルコール類や、エーテル、クロロホルム、酢酸エチル、アセトン、グリセリン、プロピレングリコール等の有機溶剤またはこれらを適宜混合した溶剤を、好ましくは親水性の有機溶剤またはこれらを適宜混合した溶剤を用いて抽出することができる。しかし、本発明では、ロイコトリエン産生抑制剤として上記抽出物を経口で摂取することも考慮すると、安全性の面から水、エタノールもしくはその混合液を用いて抽出することが望ましい。
【００１２】
上記植物より抽出物を得るための抽出条件としては、特に制限はないが、２０〜１００℃で１〜５時間程度が好ましい。抽出液はさらに濾過し、抽出溶剤を留去したあと、減圧下において濃縮または凍結乾燥したものを使用することができる。また、これらの抽出物を有機溶剤分画、カラムクロマトグラフィー等により分画精製したものを使用することもできる。
【００１３】
本発明のロイコトリエン産生抑制剤は、上記方法によって作製した植物抽出物の１種又は２種以上を有効成分として使用することにより調製することができる。そのままでも使用する事ができるが、必要により適当な液体単体に溶解するか或いは分散させ、または適当な粉末単体と混合するか或いはこれに吸着させ、場合によっては、さらにこれに乳化剤、安定剤、分散剤、矯味剤、保存剤、芳香剤、着色剤、コーティング剤等を添加して、錠剤、液剤、注射剤、軟膏、クリーム、ローション、スプレー剤、エアゾール剤、座剤等の所望の剤型にして、経口剤、外用剤、注射剤、吸入剤、点鼻・点眼剤等として使用してもよい。この場合の添加量は、その形態及び容量等により一概に規定することは困難であるが、剤に対して植物抽出物を０．０１〜９５重量％使用するのが好適である。
【００１４】
また、本発明のロイコトリエン産生抑制剤は、香り、呈味性に優れ、安全性が高いことから、チューインガム、キャンディ、錠菓、グミゼリー、チョコレート及びビスケット等の菓子、アイスクリーム、シャーベット及び氷菓等の冷菓並びに飲料等に配合して日常的に利用することが可能である。
本発明の飲食品へのロイコトリエン産生抑制剤添加量は特に限定はしないが約０．００１重量％以上、好ましくは約０．０１〜９５重量％とするのが好適である。
【００１５】
本発明で使用するキク科ハハコグサ属（Compositae Gnaphalium）植物の抽出物は、生薬、食品素材、ハーブティーとして古くから用いられているものであり、これらの抽出物及びこれを配合した飲食品の安全性について全く問題がない。
【００１６】
以下、試験例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
＜試験例１＞
本試験は、植物体より植物抽出物を得るために行なった。
【００１７】
１） 試験法
以下に述べる方法にて植物抽出物を調製した。
〔試料調製例１〕
乾燥し破砕したチチコグサの花、アキノハハコグサの花、エゾノハハコグサの花それぞれ３０ｇに３００ｍｌの５０％エタノールを加え、１時間、９０℃で還流抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。チチコグサ抽出物は４．７ｇ、アキノハハコグサ抽出物は４．２ｇ、エゾノハハコグサ抽出物は５．０ｇ得られた。
〔試料調製例２〕
乾燥し破砕した、ハハコグサの花、ウィラウィラの花それぞれ１０ｇに３００ｍｌの５０％エタノールを加え、２時間、８０℃で還流抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は２．１ｇ、ウィラウィラ抽出物は１．５ｇ得られた。
〔試料調製例３〕
乾燥し破砕したチチコグサの花、アキノハハコグサの花、エゾノハハコグサの花それぞれ３０ｇに３００ｍｌの水を加え、１時間、９０℃で還流抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。チチコグサ抽出物は４．２ｇ、アキノハハコグサ抽出物は４．１ｇ、エゾノハハコグサ抽出物は４．７ｇ得られた。
〔試料調製例４〕
乾燥し破砕したハハコグサの開花期地上部、ウィラウィラの花それぞれ１０ｇに１００ｍｌの水を加え、３時間、室温で抽出を行った。得られた抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は１．４ｇ、ウィラウィラ抽出物は１．１ｇ得られた。
〔試料調製例５〕
乾燥し破砕したチチコグサの花、アキノハハコグサの花、エゾノハハコグサの花それぞれ３０ｇに３００ｍｌの１００％エタノールを加え、１時間、室温で抽出を行った。得られた各抽出液を個別に濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。チチコグサ抽出物は１．３ｇ、アキノハハコグサ抽出物は１．７ｇ、エゾノハハコグサ抽出物は１．５ｇ得られた。
〔試料調製例６〕
乾燥し破砕したハハコグサの花、ウィラウィラの花それぞれ１０ｇに３００ｍｌの１００％エタノールを加え、２時間、７０℃で抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は１．４ｇ、ウィラウィラ抽出物は１．１ｇ得られた。
〔試料調製例７〕
乾燥し破砕したハハコグサの花、ウィラウィラの全草それぞれ１０ｇに１００ｍｌの１００％メタノールを加え、１時間、７０℃で抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、減圧乾燥することにより、本発明であるロイコトリエン産生抑制剤を得た。ハハコグサ抽出物は０．９ｇ、ウィラウィラ抽出物は０．７ｇ得られた。
〔比較試料１〕
乾燥し破砕したフキ１０ｇに２００ｍｌの７０％エタノールを加え、２時間、７０℃で還流抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することによりフキ抽出物５．５６ｇを得た。
〔比較試料２〕
乾燥し破砕したハハコグサの葉１０ｇに１００ｍｌの５０％エタノールを加え、２時間、７０℃で還流抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することによりハハコグサ抽出物２．０ｇを得た。
〔比較試料３〕
乾燥し破砕したウィラウィラの茎１０ｇに１００ｍｌの５０％エタノールを加え、２時間、７０℃で還流抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濃縮、凍結乾燥することによりウィラウィラ抽出物１．５ｇを得た。
＜試験例２＞
【００１８】
本試験は、試験例１で得られた植物抽出物のロイコトリエン産生抑制効果を調べるために行なった。
【００１９】
１）供試試料
試験例１で調製した植物抽出物を用いた。
【００２０】
２）試験法
試料調製例１〜７で示した本発明品であるロイコトリエン産生抑制剤及び比較試料１で示した比較抽出物を試料として、ロイコトリエン産生抑制効果を調べた。
本試験は、ラット好塩基性細胞株（ＲＢＬ−２Ｈ３細胞、資源番号ＪＣＲＢ００２３）を用いて産生されるシステイニルロイコトリエン量を測定し、植物抽出物がシステイニルロイコトリエンの産生を抑制する効果を確認するものである。なお、ロイコトリエンの中でロイコトリエンＣ４、Ｄ４、Ｅ４の三つがシステイニルロイコトリエンと呼ばれる。
ＲＢＬ−２Ｈ３細胞をウシ胎児血清（１０％）、ペニシリン（５０U／ｍｌ）、ストレプトマイシン（５０μg／ｍｌ）を含有するMinimum Essential Medium Eagle（ＥＭＥＭ培地）中で３７℃、５％ＣＯ2で継代培養を行った。
試験日の前日にＲＢＬ−２Ｈ３細胞を２４穴平底マイクロプレートに２．０×１０５個（４００μｌ／ｗｅｌｌ）ずつ播種した。試験当日、プレートを５００μｌのＰＩＰＥＳ 緩衝液（１１９ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２ 、０．４ｍＭ ＭｇＣｌ２、５．６ｍＭ ｇｌｕｃｏｓｅ、２５ｍＭ ＰＩＰＥＳ、４０ｍＭ ＮａＯＨ、０．１％ ＢＳＡ、ｐＨ７．２）で２回洗浄し、試料を添加したＰＩＰＥＳ 緩衝液を２００μｌ加えて３７℃で１０分間、加温した。次に１０μｌの刺激剤（カルシウムイオノフォアＡ２３１８７：終濃度５μＭ）を加えて１５分間反応させた。反応終了後、１０分間、氷冷して反応を止めた後に上清１８０μｌを回収、１０００ｒｐｍで３分間、遠心分離して上清１５０μｌを得た。
得られた上清中に含まれるシステイニルロイコトリエン量（ロイコトリエンＣ４、Ｄ４及びＥ４各量の合計）をケイマンケミカル社製システイニルロイコトリエンＥＩＡキットにて測定し、各試料のロイコトリエン産生抑制率を以下の式により算出した。
ロイコトリエン産生抑制率（％）＝〔（Ｃ-Ｂ-Ｓ）／（Ｃ-Ｂ）〕×１００
但し、Ｓ＝試料と刺激剤を添加した場合のロイコトリエン産生量、Ｃ＝刺激剤のみを添加した場合のロイコトリエン産生量、Ｂ＝試料及び刺激剤を双方共に添加しない場合のロイコトリエン産生量 とする。
【００２１】
３）試験結果
それぞれの試料の１００μｇ／ｍｌ濃度でのロイコトリエン産生抑制率を表１に示した。
【００２２】
【表１】
【００２３】
試験例２より、本発明のチチコグサ、アキノハハコグサ、エゾノハハコグサ、ハハコグサ及びウィラウィラの花を含む部位から作製された抽出物は、強いロイコトリエン産生抑制作用を示すことが明らかになった。比較試料に示したフキ抽出物、ハハコグサ抽出物及びウィラウィラ抽出物のロイコトリエン産生抑制活性は弱いものであった。
【００２４】
以下、実施例を挙げて本発明品を更に詳細に説明するが、それらによって本発明品の範囲を制限するものでなない。
【００２５】
試料調製例１乃至７で調製した植物抽出物を用いて、錠剤、散剤、吸入剤、点鼻薬、チューインガム、キャンディ、チョコレート、ビスケット、グミゼリー、錠菓、アイスクリーム、シャーベット、飲料を常法にて調製した。以下にその処方を示した。
【実施例１】
【００２６】
下記処方にしたがって錠剤を調製した。
Ｄ−マンニトール ４２．６％
乳糖 ４２．６
結晶セルロース ８．５
ヒドロキシプロピルセルロース ４．３
試料調製例７のウィラウィラ抽出物 ２．０
１００．０％
本錠剤は、錠剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００２７】
実施例１と同じ配合比率で、試料調製例７のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のウィラウィラ抽出物を除く）を配合した錠剤をそれぞれ同様に調製した。これらは錠剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２】
【００２８】
下記処方にしたがって散剤を調製した。
乳糖 ６２．５％
馬鈴薯でんぷん １２．５
試料調製例５のチチコグサ抽出物 ２５．０
１００．０％
本散剤は、散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００２９】
実施例２と同じ配合比率で、試料調整例５のチチコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調整例５のチチコグサ抽出物を除く）を配合した散剤をそれぞれ同様に調製した。これらは散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例３】
【００３０】
下記処方にしたがって散剤を調製した。
乳糖 ２．５％
馬鈴薯でんぷん ２．５
試料調製例２のハハコグサ抽出物 ９５．０
１００．０％
本散剤は、散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３１】
実施例３と同じ配合比率で、試料調製例２のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のハハコグサ抽出物を除く）を配合した散剤をそれぞれ同様に調製した。これらは散剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例４】
【００３２】
下記処方にしたがって吸入剤を調製した。
エタノール ５．０％
試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物 １．０
Ｌ−メントール ２．０
水 ９２．０
１００．０％
本吸入剤は、吸入剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３３】
実施例４と同じ配合比率で、試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物を除く）を配合した吸入剤をそれぞれ同様に調製した。これらは吸入剤としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例５】
【００３４】
下記処方にしたがって点鼻薬を調製した。
サリチル酸メチル ０．０３ｇ
マレイン酸クロルフェニラミン ０．３
ｄｌ―塩酸メチルエフェドリン ０．３
ポリソルベート８０ ０．２
塩化ベンザルコニウム ０．０１
塩化ナトリウム ０．６
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
試料調製例１のアキノハハコグサ抽出物 ０．０１
水 適量
１００．０ｍｌ
（ｐＨ６．５）
本点鼻薬は、点鼻薬としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３５】
実施例５と同じ配合比率で、試料調製例１のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例１のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合した点鼻薬をそれぞれ同様に調製した。これらは点鼻薬としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例６】
【００３６】
下記処方にしたがってチューインガムを調製した。
ガムベース ２０．０％
砂糖 ５４．７
グルコース １５．０
水飴 ９．３
香料 ０．５
試料調製例２のハハコグサ抽出物 ０．５
１００．０％
本チューインガムは、チューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３７】
実施例６と同じ配合比率で、試料調製例２のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のハハコグサ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製した。これらはチューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例７】
【００３８】
下記処方にしたがってチューインガムを調製した。
ガムベース ２０．０％
砂糖 ５４．５
グルコース １０．０
水飴 １３．０
香料 ０．５
試料調製例２のウィラウィラ抽出物 １．０
試料調製例５のエゾノハハコグサ抽出物 １．０
１００．０％
本チューインガムは、チューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００３９】
実施例７と同じ配合比率で、試料調製例２のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製し、また、試料調製例５のエゾノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例５のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製した。これらはチューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例８】
【００４０】
下記処方にしたがってチューインガムを調製した。
ガムベース ２０．０％
砂糖 ５０．５
グルコース １４．０
水飴 １３．０
香料 ０．５
試料調製例３のチチコグサ抽出物 ２．０
１００．０％
本チューインガムは、チューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４１】
実施例８と同じ配合比率で、試料調製例３のチチコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のチチコグサ抽出物を除く）を配合したチューインガムをそれぞれ同様に調製した。これらはチューインガムとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例９】
【００４２】
下記処方にしたがってキャンディを調製した。
砂糖 ５０．０％
水飴 ３３．０
クエン酸 １．０
香料 ０．２
Ｌ−メントール １．０
試料調製例７のハハコグサ抽出物 ０．４
水 １４．４
１００．０％
本キャンディは、キャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４３】
実施例９と同じ配合比率で、試料調製例７のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のハハコグサ抽出物を除く）を配合したキャンディをそれぞれ同様に調製した。これらはキャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１０】
【００４４】
下記処方にしたがってキャンディを調製した。
砂糖 ３８．０％
水飴 ４２．０
クエン酸 １．０
香料 ０．２
試料調製例６のウィラウィラ抽出物 ０．４
水 １８．４
１００．０％
本キャンディは、キャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４５】
実施例１０と同じ配合比率で、試料調製例６のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例６のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したキャンディをそれぞれ同様に調製した。これらはキャンディとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１１】
【００４６】
下記処方にしたがってチョコレートを調製した。
カカオビター ２０．０％
全脂粉乳 ２０．０
カカオバター １７．０
粉糖 ４１．８５
レシチン ０．４５
香料 ０．１
試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物 ０．６
１００．０％
本チョコレートは、チョコレートとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４７】
実施例１０と同じ配合比率で、試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合したチョコレートをそれぞれ同様に調製した。これらはチョコレートとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１２】
【００４８】
下記処方にしたがってビスケットを調製した。
砂糖 ３１．７％
小麦粉 ２６．８
片栗粉 ２６．８
バター ３．２
卵 １０．２
重曹 ０．３
試料調製例２のハハコグサ抽出物 ０．５
試料調製例２のウィラウィラ抽出物 ０．５
１００．０％
本ビスケットは、ビスケットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００４９】
実施例１２と同じ配合比率で、試料調製例２のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のハハコグサ抽出物を除く）を配合したビスケットをそれぞれ同様に調製し、また、試料調製例２のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したビスケットをそれぞれ同様に調製した。これらはビスケットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１３】
【００５０】
下記処方にしたがってグミゼリーを調製した。
ポリデキストロース水溶液 ４０．０％
ソルビトール水溶液 ８．０
パラチノース水溶液 ９．０
マルトース水溶液 ２０．０
トレハロース水溶液 １１．０
ゼラチン １０．０
酒石酸 １．０
試料調製例４のハハコグサ抽出物 １．０
１００．０％
本グミゼリーは、グミゼリーとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５１】
実施例１３と同じ配合比率で、試料調製例４のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例４のハハコグサ抽出物を除く）を配合したグミゼリーをそれぞれ同様に調製した。これらはグミゼリーとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１４】
【００５２】
下記処方にしたがって錠菓を調製した。
砂糖 ７６．１％
グルコース １９．０
ショ糖脂肪酸エステル ０．２
香料 ０．１５
試料調製例６のハハコグサ抽出物 ０．１
水 ４．０
１００．０％
本錠菓は、錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５３】
実施例１４と同じ配合比率で、試料調製例６のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例６のハハコグサ抽出物を除く）を配合した錠菓をそれぞれ同様に調製した。これらは錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１５】
【００５４】
下記処方にしたがって錠菓を調製した。
砂糖 ７４．７％
乳糖 １８．９
ショ糖脂肪酸エステル ０．１５
試料調製例７のハハコグサ抽出物 ２．０
水 ４．２５
１００．０％
本錠菓は、錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５５】
実施例１５と同じ配合比率で、試料調製例７のハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のハハコグサ抽出物を除く）を配合した錠菓をそれぞれ同様に調製した。これらは錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１６】
【００５６】
下記処方にしたがって錠菓を調製した。
砂糖 ５６．７％
乳糖 １８．９
ショ糖脂肪酸エステル ０．１５
試料調製例７のウィラウィラ抽出物 ２０．０
水 ４．２５
１００．０％
本錠菓は、錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５７】
実施例１６と同じ配合比率で、試料調製例７のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例７のウィラウィラ抽出物を除く）を配合した錠菓をそれぞれ同様に調製した。これらは錠菓としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１７】
【００５８】
下記処方にしたがってタブレットを調製した。
砂糖 ３５．８５％
ショ糖脂肪酸エステル ０．１５
試料調製例２のウィラウィラ抽出物 ６０．０
水 ４．０
１００．０％
本タブレットは、タブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００５９】
実施例１７と同じ配合比率で、試料調製例２のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例２のウィラウィラ抽出物を除く）を配合したタブレットをそれぞれ同様に調製した。これらはタブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１８】
【００６０】
下記処方にしたがってタブレットを調製した。
砂糖 ２．９％
ショ糖脂肪酸エステル ０．１
試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物 ９５．０
水 ２．０
１００．０％
本タブレットは、タブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６１】
実施例１８と同じ配合比率で、試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合したタブレットをそれぞれ同様に調製した。これらはタブレットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例１９】
【００６２】
下記処方にしたがってアイスクリームを調製した。
卵黄 １１．０％
砂糖 １４．０
牛乳 ３７．０
生クリーム ３７．０
バニラビーンズ ０．５
試料調製例５のアキノハハコグサ抽出物 ０．５
１００．０％
本アイスクリームは、アイスクリームとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６３】
実施例１９と同じ配合比率で、試料調製例５のアキノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例５のアキノハハコグサ抽出物を除く）を配合したアイスクリームをそれぞれ同様に調製した。これらはアイスクリームとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２０】
【００６４】
下記処方にしたがってシャーベットを調製した。
オレンジ果汁 １６．０％
砂糖 ３１．０
試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物 ３．０
水 ５０．０
１００．０％
本シャーベットは、シャーベットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６５】
実施例２０と同じ配合比率で、試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例１のエゾノハハコグサ抽出物を除く）を配合したシャーベットをそれぞれ同様に調製した。これらはシャーベットとしての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２１】
【００６６】
下記処方にしたがって飲料を調製した。
オレンジ果汁 ３０．０％
異性化糖 １５．３３
クエン酸 ０．１
ビタミンＣ ０．０４
香料 ０．１
試料調製例４のウィラウィラ抽出物 ０．０１
水 ５４．４２
１００．０％
本飲料は、飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６７】
実施例２１と同じ配合比率で、試料調製例４のウィラウィラ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例４のウィラウィラ抽出物を除く）を配合した飲料をそれぞれ同様に調製した。これらは飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【実施例２２】
【００６８】
下記処方にしたがって飲料を調製した。
グレープ果汁 ２５．０％
異性化糖 １５．３３
クエン酸 ０．１
ビタミンＣ ０．０５
香料 ０．１
試料調製例３のチチコグサ抽出物 ０．００１
水 適量
１００．０％
本飲料は、飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【００６９】
実施例２２と同じ配合比率で、試料調製例３のチチコグサ抽出物の代わりに試料調製例１乃至７の各抽出物（試料調製例３のチチコグサ抽出物を除く）を配合した飲料をそれぞれ同様に調製した。これらは飲料としての性質を損なうことなくロイコトリエン産生抑制効果を有していた。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とすることを特徴とするロイコトリエン産生抑制剤。
【請求項２】
キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の花を含む部位の抽出物を有効成分とすることを特徴とするロイコトリエン産生抑制剤。
【請求項３】
キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）植物がハハコグサ（オギョウ、ゴギョウ、鼠麹草ともいう）（Gnaphalium affine, Gnaphalium multiceps Wall）及び/又はウィラウィラ（Gnaphalium viravira）であることを特徴とする請求項１又は２のいずれかに記載のロイコトリエン産生抑制剤。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれかに記載のロイコトリエン産生抑制剤を含むことを特徴とする飲食品。
【請求項５】
上記ロイコトリエン産生抑制剤を約０．００１重量％以上、好ましくは約０．０１〜９５重量％含むことを特徴とする請求項４記載の飲食品。
【請求項１】
キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とすることを特徴とするロイコトリエン産生抑制剤。
【請求項２】
キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）より選択される１種又は２種以上の植物の花を含む部位の抽出物を有効成分とすることを特徴とするロイコトリエン産生抑制剤。
【請求項３】
キク科（Compositae）ハハコグサ属（Gnaphalium）植物がハハコグサ（オギョウ、ゴギョウ、鼠麹草ともいう）（Gnaphalium affine, Gnaphalium multiceps Wall）及び/又はウィラウィラ（Gnaphalium viravira）であることを特徴とする請求項１又は２のいずれかに記載のロイコトリエン産生抑制剤。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれかに記載のロイコトリエン産生抑制剤を含むことを特徴とする飲食品。
【請求項５】
上記ロイコトリエン産生抑制剤を約０．００１重量％以上、好ましくは約０．０１〜９５重量％含むことを特徴とする請求項４記載の飲食品。
【公開番号】特開２００８−１１５１３８（Ｐ２００８−１１５１３８Ａ）
【公開日】平成２０年５月２２日（２００８．５．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−３０２４０２（Ｐ２００６−３０２４０２）
【出願日】平成１８年１１月８日（２００６．１１．８）
【出願人】（３０７０１３８５７）株式会社ロッテ (101)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年５月２２日（２００８．５．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１１月８日（２００６．１１．８）
【出願人】（３０７０１３８５７）株式会社ロッテ (101)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]