上皮ナトリウムチャンネル（ＥＮａＣ）活性を改変するための薬剤および方法。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
２重治療活性を持つ１または複数の薬剤を同定する方法であって：
ａ）上皮ナトリウムチャンネル（ＥＮａＣ）の異常な発現または活性に関連する疾患の１または複数の症状を抑制または処置する１または複数の薬剤を選択し；
ｂ）哺乳動物細胞を、該１または複数の薬剤および遺伝子治療ベクターと接触させ；そして
ｃ）該遺伝子治療ベクターと接触したが、該１または複数の薬剤とは接触していない哺乳動物細胞に比べて、該遺伝子治療ベクターの効力を高める薬剤を同定する、
ことを含んでなる上記方法。
【請求項２】
２重治療活性を持つ１または複数の薬剤を同定する方法であって：
ａ）哺乳動物細胞中で遺伝子治療ベクターの効力を高める１または複数の薬剤を選択し；
ｂ）上皮ナトリウムチャンネル（ＥＮａＣ）の異常な発現または活性を有する哺乳動物細胞を、該１または複数の薬剤と接触させ；そして
ｃ）ＥＮａＣ発現または活性を改変する薬剤を同定する、
ことを含んでなる上記方法。
【請求項３】
遺伝子治療ベクターがウイルスベクターである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ウイルスベクターがレトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクターのアデノウイルスベクターである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
遺伝子治療ベクターがマーカー遺伝子を含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
哺乳動物細胞が機能的ＣＦＴＲを発現しない、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
選択された薬剤がＥＮａＣの１または複数のサブユニットの転写のレベルまたは量を下げるために効果的である、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
選択された薬剤がＥＮａＣのα、βおよびγサブユニットの転写のレベルまたは量を下げるために効果的である、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
選択された薬剤がＥＮａＣ活性を改変するために効果的である、請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
哺乳動物細胞中の上皮ナトリウムチャンネル（ＥＮａＣ）の１または複数のサブユニットの転写のレベルまたは量を下げる１または複数の薬剤を同定する方法であって：
ａ）ＥＮａＣを発現する哺乳動物細胞を、プロテアソーム調節剤である少なくとも１つの薬剤と接触させ、ここで該薬剤は細胞のゲノムによりコードされる遺伝子もしくは遺伝子産物、該遺伝子の相補鎖、または該遺伝子もしくはその相補鎖の一部ではなく；そして
ｂ）薬剤が哺乳動物細胞中でＥＮａＣの１または複数のサブユニットからの転写のレベルまたは量を下げるかどうかを同定する、
ことを含んでなる上記方法。
【請求項１１】
哺乳動物細胞中のＥＮａＣのα、βおよびγサブユニットからの転写のレベルまたは量を下げる１または複数の薬剤を同定する方法であって：
ａ）ＥＮａＣを発現する哺乳動物細胞を、少なくとも１つの薬剤と接触させ；そして
ｂ）該薬剤が哺乳動物細胞中でＥＮａＣのα、βおよびγサブユニットからの転写のレベルまたは量を下げるかどうかを同定する、
ことを含んでなる上記方法。
【請求項１２】
哺乳動物細胞中のＥＮａＣの１または複数のサブユニットの転写のレベルまたは量を下げる１または複数の薬剤を同定する方法であって：
ａ）ＥＮａＣを発現する哺乳動物細胞を、ウイルスの形質導入を高める少なくとも１つの薬剤と接触させ；そして
ｂ）該薬剤が哺乳動物細胞中で該ＥＮａＣの１または複数のサブユニットからの転写のレベルまたは量を下げるかどうかを同定する、
ことを含んでなる上記方法。
【請求項１３】
細胞が哺乳動物の肺または腎臓細胞である、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
１つの薬剤が、細胞のゲノムによりコードされる遺伝子もしくは遺伝子産物、該遺伝子の相補鎖、または該遺伝子もしくはその相補鎖の一部ではなく、細胞が哺乳動物の腎臓細胞である、請求項１１または１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
細胞がヒトの細胞、イヌの細胞、マウスの細胞、ラットの細胞またはウサギの細胞である、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
薬剤の１つが抗生物質である、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
薬剤の１つが化学療法剤である、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
薬剤の１つが脂質低下剤である、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
薬剤の１つが食品添加物である、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
薬剤の１つがエポキソミシン、ドキソルビシン、ドキシル、ダウノルビシン、イダルビシン、エピルビシン、アクラルビシン、カンプトテシン、シンバスタチン、タンニン酸またはシスプラチンである、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
薬剤の１つがプロテアソームの細胞内の局在化をモジュレートする、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
薬剤がＥＮａＣの翻訳後プロセッシングを改変しない、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
薬剤の１つがＥＮａＣ転写を調節する１または複数の分子の転写をモジュレートする、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
薬剤の量が１週間より長く転写のレベルまたは量を下げる、請求項１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
薬剤の量が少なくとも１日、転写のレベルまたは量を下げる、請求項１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
薬剤の量が少なくとも３日、転写のレベルまたは量を下げる、請求項１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
薬剤の量が２週間より長く転写のレベルまたは量を下げる、請求項１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
薬剤の１つが核への、または核からの分子の輸送をモジュレートする、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
薬剤の１つがエンドソームのプロテアーゼインヒビターである、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
薬剤の１つがシステインプロテアーゼインヒビターである、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
薬剤の１つがＴＰＡではない、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
薬剤の１つがエンドソームのプロセッシングを改変する、請求項１ないし２または１０ないし１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
上昇したＥＮａＣレベルまたは上昇したＥＮａＣ活性に関連する状態を抑制または処置する方法であって：状態の危険にあるか、または状態を有する哺乳動物を、１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を阻害または低下し、および／または１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を改変する分子のレベル、量または活性を改変し、そして遺伝子治療ベクターの効力を高める、有効量の薬剤と接触させることを含んでなる上記方法。
【請求項３４】
上昇したＥＮａＣレベルまたは上昇したＥＮａＣ活性に関連する状態を抑制または処置する方法であって：状態の危険にあるか、または状態を有する哺乳動物を、１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を阻害または低下し、および／または１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を改変する、分子のレベル、量または活性を改変する有効量の薬剤と接触させることを含んでなり、該薬剤がプロテアソーム調節剤であり、そして該薬剤が哺乳動物のゲノムによりコードされる遺伝子もしくは遺伝子産物、該遺伝子の相補鎖、または該遺伝子もしくはその相補鎖の一部ではない上記方法。
【請求項３５】
上昇したＥＮａＣレベルまたは上昇したＥＮａＣ活性に関連する状態を抑制または処置する方法であって：状態の危険にあるか、または状態を有する哺乳動物を、ＥＮａＣのα、βおよびγサブユニットの転写を阻害または低下するか、あるいはＥＮａＣのα、βおよびγサブユニットの転写を改変する分子のレベル、量または活性を改変する、有効量の薬剤と接触させることを含んでなる上記方法。
【請求項３６】
上昇したＥＮａＣレベルまたは上昇したＥＮａＣ活性に関連する状態を抑制または処置する方法であって：状態の危険にあるか、または状態を有する哺乳動物を、１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を阻害または低下し、および／または１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を改変する分子のレベル、量または活性を改変し、そして哺乳動物細胞に感染するウイルスの形質導入を高める、有効量の薬剤と接触させることを含んでなる上記方法。
【請求項３７】
薬剤がエポキソミシン、ドキソルビシン、ドキシル、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、アクラルビシン、カンプトテシン、シンバスタチン、タンニン酸またはシスプラチンである、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
薬剤が化学療法剤である、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
薬剤が抗生物質である、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
薬剤が食品添加物である、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
薬剤が脂質低下剤である、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
薬剤がＥＮａＣの翻訳後プロセッシングを改変しない、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
薬剤がＴＰＡではない、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
薬剤がＥＮａＣ転写をモジュレートする１または複数の分子の転写をモジュレートする、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
薬剤が核への、または核からの分子の輸送をモジュレートする、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
薬剤がプロテアソームの細胞内の局在化をモジュレートする、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
薬剤が、薬剤と接触しなかった対応する哺乳動物に比べて、少なくとも２倍、ＥＮａＣの転写レベルを下げる、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
薬剤が、薬剤と接触しなかった対応する哺乳動物に比べて、少なくとも３倍、ＥＮａＣの転写レベルを下げる、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
薬剤が、薬剤と接触しなかった対応する哺乳動物に比べて、少なくとも１０倍、ＥＮａＣの転写レベルを下げる、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
さらに哺乳動物を組換えウイルスと接触させることを含んでなる、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
薬剤を哺乳動物の気道と接触させることを含んでなる、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
薬剤がアデノウイルス、レトロウイルス、アデノ随伴ウイルスまたはレンチウイルスベクターの効力または形質導入を高める、請求項３３ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
１つの薬剤が細胞のゲノムによりコードされる遺伝子もしくは遺伝子産物、該遺伝子の相補鎖、または該遺伝子もしくはその相補鎖の一部ではなく、細胞が哺乳動物の腎臓細胞である、請求項３３または３５ないし３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
哺乳動物における上昇したＥＮａＣレベルまたは上昇したＥＮａＣ活性に関連する状態を抑制または処置する薬剤を調製するための、１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を阻害し、または下げ、および／または１または複数のＥＮａＣサブユニット遺伝子の転写を改変する分子のレベル、量または活性を改変する、１または複数の薬剤の使用。
【請求項５５】
哺乳動物における上昇したＥＮａＣレベルまたは上昇したＥＮａＣ活性に関連する状態を抑制または処置するための、ＥＮａＣのα、βおよびγサブユニットの転写を阻害し、または下げ、あるいはＥＮａＣのα、βおよびγサブユニット遺伝子の転写を改変する分子のレベル、量または活性を改変する、１または複数の薬剤の使用。
【請求項５６】
１または複数の薬剤が遺伝子治療ベクターの効力を高める、請求項５４または５５に記載の使用。
【請求項５７】
１または複数の薬剤が、哺乳動物細胞に感染するウイルスの形質導入を高める、請求項５４または５５に記載の使用。
【請求項５８】
薬剤がプロテアソーム調節剤である、請求項５４または５５に記載の使用。
【請求項５９】
薬剤が哺乳動物のゲノムによりコードされる遺伝子もしくは遺伝子産物、該遺伝子の相補鎖、または該遺伝子もしくはその相補鎖の一部ではない、請求項５４または５５に記載の使用。

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】








【図１２】

【図１３】



【図１５】

【公表番号】特表２００７−５２４３７９（Ｐ２００７−５２４３７９Ａ）
【公表日】平成１９年８月３０日（２００７．８．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０９５４９（Ｐ２００６−５０９５４９）
【出願日】平成１６年３月３１日（２００４．３．３１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／００９９５０
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８９４２３
【国際公開日】平成１６年１０月２１日（２００４．１０．２１）
【出願人】（３０４０３０３０５）ユニバーシテイ・オブ・アイオワ・リサーチ・フアウンデーシヨン (3)
【出願人】（３０６０３８５９２）
【出願人】（３０６０３８６０６）
【Ｆターム（参考）】