【課題】天然サイトカインの特定混合物の製造方法の提供。
【解決手段】少なくとも一種のマイトジェンを組織培養容器中で固定する工程、好中球及び赤血球を含まないリンパ球の単離された集団を無血清培地中で懸濁させる工程、懸濁されたリンパ球を容器に入れる工程、リンパ球を培養する工程、培地を除去する工程及び培地をサイトカインの収率について特性決定する工程を含むとことを特徴とする天然サイトカイン混合物方法であって、１つの実施形態において、無血清培地がＸ ｖｉｖｏ−１０及びＸ ｖｉｖｏ−１５から選択される、方法。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はサイトカインの天然化合物の改良された製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
【数１】

【０００３】
【数２】

【０００４】
【数３】

【０００５】
【数４】

【０００６】
【数５】

【０００７】
【数６−１】

【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
【数６−２】

【０００９】
【数７−１】

【００１０】
【数７Ａ】

【００１１】
【数７Ｂ】

【００１２】
【数８−２】

【００１３】
【数９】

【００１４】
【数１０】

【００１５】
【数１１】

【００１６】
【数１２】

【００１７】
【数１３】

【００１８】
【数１４】

【００１９】
【数１５】

【００２０】
【数１６】

【００２１】
【数１７】

【００２２】
【数１８】

【００２３】
【数１９】

【００２４】
【数２０】

【００２５】
【数２１】

【００２６】
【数２２】

【００２７】
【数２３】

【００２８】
【数２４】

【００２９】
【数２５】

【００３０】
【数２６】

【００３１】
【数２７】

【００３２】
【数２８】

【００３３】
【数２９】

【００３４】
【数３０】

【００３５】
本発明のその他の利点が、図面に関して考慮される時に以下の詳細な説明を参考にして良く理解されるようになるので容易に認められるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】図１は、Ｘ−ｖｉｖｏ−１０（ＢＸ_１０）、Ｘ−ｖｉｖｏ−１５（ＥＸ_１５）、Ｘ−ｖｉｖｏ−２０（ＥＸ_２０）及び最少必須培地（ＭＥＭ）中のＮＣＭのＩＬ含量（ＥＬＩＳＡにより測定されるＩＬ−１（ＩＬ_２）の光学密度として表される）を示し、マイトジェンＰＨＡへの連続露出（開いたバー）をパルス化露出（クロスハッチ付き）と比較する棒グラフである。
【図２】図２は異なる培地、１×１０^６／ｍｌの細胞（クロスハッチ付き）、２．５×１０^６／の細胞（斜線）及び５×１０^６／ｍｌの細胞（開いたバー）中１μｇ／ｍｌのＰＨＡによるＮＣＭ生成に関する細胞濃度の効果を示す棒グラフである。
【図３】図３は異なる培地、１×１０^６／ｍｌの細胞（クロスハッチ付き）、２．５×１０^６の細胞（斜線）及び５×１０^６／ｍｌの細胞（開いたバー）中２μｇ／ｍｌのＰＨＡによるＮＣＭ生成に関する細胞濃度の効果を示す棒グラフである。
【図４】図４は、均等濃度のＩＬ−２における組換えＩＬ−２（破線）と比較したＮＣＭ（実線）によるナイーブマウスからの脾臓細胞のｉｎ ｖｉｔｒｏ処理のチミジンとり込み（ＣｏｎＡ刺激）に関する効果を示す投薬量応答グラフである。
【図５】図５は、均等濃度の１−２における組換えＩＬ−２（破線）と比較したＮＣＭ（実線）によるナイーブマウスからの胸腺細胞のｉｎ ｖｉｔｒｏ処理のチミジンとり込みに関する効果を示す投薬量応答グラフである。
【図６】図６は、ｒＩＬ−１、ｒＩＬ−２、ｒＩＬ−１＋ｒＩＬ−２またはＮＣＭによるｉｎ ｖｉｔｒｏ処理後のｒＩＬ−１（開いたバー）、ｒＩＬ−２（ソリッドバー）、ＮＣＭ（クロスハッチ付き）及びコンカナバリンＡ（斜線）に対するｉｎ ｖｉｔｒｏの脾臓細胞応答の棒グラフである。
【図７】図７は、図６のようなｉｎ ｖｉｖｏ処理後のｒＩＬ−１、ｒＩＬ−２、ＮＣＭ及びＣｏｎＡに対するｉｎ ｖｉｖｏの胸腺細胞応答の棒グラフである。
【図８】図８は、ＣＤ４^＋細胞、ＣＤ８^＋細胞、及びＣＤ４-／ＣＤ８-（--）細胞の脾臓細胞マーカーに関する対照（開いたバー）またはＮＣＭ（ソリッドバー）によるマウスのｉｎ ｖｉｔｒｏ処理の結果を示す棒グラフである。
【図９】図９は、ＣＤ４^-／ＣＤ８^-（--）、ＣＤ４^＋／ＣＤ８^＋（＋＋）並びにＣＤ８^＋細胞とＣＤ４^＋細胞（ＣＤ４＋ＣＤ８）の胸腺細胞マーカーに関する対照（開いたバー）またはＮＣＭ（ソリッドバー）によるマウスのｉｎ ｖｉｔｒｏ処理の結果を示す棒グラフである。
【図１０】図１０は、対照培地（開いたバー）及びＮＣＭ（ソリッドバー）によるｉｎ ｖｉｖｏ処現後のｌＬ−１、ＩＬ−２及びＮＣＭに対するｉｎ ｖｉｔｒｏの胸腺細胞応答の棒グラフである。
【図１１】図１１は、図１０と同様の脾臓細胞応答の捧グラフである。
【図１２】図１２は、対照培地（開いたバー）及びＮＣＭ（閉じたバー）によるｉｎ ｖｉｔｒｏ処理後のＣｏｎＡ及びＰＨＡに対するｉｎ ｖｉｔｒｏの胸腺細胞応答の棒グラフである。
【図１３】図１３は、図１２と同様の脾臓細胞応答の棒グラフである。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
天然サイトカイン混合物の製造法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【公開番号】特開２００７−２３６３９５（Ｐ２００７−２３６３９５Ａ）
【公開日】平成１９年９月２０日（２００７．９．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−１４６３３２（Ｐ２００７−１４６３３２）
【出願日】平成１９年５月３１日（２００７．５．３１）
【分割の表示】特願２００５−１０８００９（Ｐ２００５−１０８００９）の分割
【原出願日】平成７年１１月１６日（１９９５．１１．１６）
【出願人】（３９８０１４３３３）ユニバーシティ　オブ　サウス　フロリダ (17)
【Ｆターム（参考）】