亜硝酸イオンの定量方法
【課題】検査水に含まれる亜硝酸イオンを簡単な操作で高濃度の領域まで定量できるようにする。
【解決手段】検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量方法は、検査水に対し、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬を添加し、塩酸等を添加した酸性下において反応させる工程１と、工程１を経た検査水について、ジアゾ化試薬による着色の吸光度または生成したジアゾニウム塩による着色の吸光度を測定する工程２とを含んでいる。ジアゾ化試薬としては、１−アミノアントラキノン、ｐ−ニトロアニリンおよび３’−アミノアセトフェノン等のケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群と３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン等の３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群とからなる群から選ばれた化合物を用いる。
【解決手段】検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量方法は、検査水に対し、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬を添加し、塩酸等を添加した酸性下において反応させる工程１と、工程１を経た検査水について、ジアゾ化試薬による着色の吸光度または生成したジアゾニウム塩による着色の吸光度を測定する工程２とを含んでいる。ジアゾ化試薬としては、１−アミノアントラキノン、ｐ−ニトロアニリンおよび３’−アミノアセトフェノン等のケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群と３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン等の３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群とからなる群から選ばれた化合物を用いる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、亜硝酸イオンの定量方法、特に、検査水に含まれる亜硝酸イオンを吸光度の測定により定量する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
窒素は海洋水、湖沼水、河川水および地下水等の富栄養化に関わる原因物質の一つであることから、工場排水等での排出規制が設けられており、工場排水等は、環境への排出前に生態系の栄養源となるイオン状態の窒素（例えば、硝酸イオンや亜硝酸イオン）の定量が求められる。しかし、工場排水等は、イオン状態で窒素を含むだけではなく、各種の窒素化合物として窒素を含むのが一般的であり、この窒素化合物は環境への排出後に自然分解されることでイオン状態の窒素を発生する。このため、工場排水等は、窒素化合物から生成し得るイオン状態の窒素を含めた窒素の総量、いわゆる全窒素の定量が求められることが多い。
【０００３】
工場排水等の検査水に含まれる全窒素の定量の一形態では、検査水に含まれる窒素化合物を酸化分解により硝酸イオンへ変換した後にさらに還元して亜硝酸イオンへ変換する前処理をし、この前処理後の検査水に含まれる亜硝酸イオンを定量する。
【０００４】
検査水に含まれる亜硝酸イオンの公的な定量方法として、日本工業規格（ＪＩＳ）において規定されたナフチルエチレンジアミン吸光光度法が知られている（非特許文献１）。この定量方法（以下、ＪＩＳ法という。）は、検査水に含まれる亜硝酸イオンが酸性下でスルファニルアミドと反応して生成するジアゾニウム塩をナフチルエチレンジアミンとカップリング反応させ、それにより生成するアゾ化合物による検査水の着色（発色）を吸光光度法により測定することで亜硝酸イオンを定量するものである。
【０００５】
しかし、ＪＩＳ法は、生成するアゾ化合物による検査水の着色が非常に鋭敏であって着色強度（モル吸光係数）が高まり過ぎることから、検査水における高濃度の亜硝酸イオンの正確な定量が困難であり、亜硝酸イオン濃度の測定可能範囲が０．０６〜０．６ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌに制限されている。この範囲の亜硝酸イオン濃度は全窒素に換算すると０．０２〜０．２ｍｇ［Ｎ］／Ｌ程度の微量範囲であることから、ＪＩＳ法は、全窒素の定量に適用するのが困難である。
【０００６】
特許文献１には、ＪＩＳ法に替わる亜硝酸イオンの定量方法として、ポルフィン核にアミノ基を有するポルフィリン化合物を検査水へ添加し、当該ポルフィリン化合物と亜硝酸イオンとの反応により生成するジアゾ基を有するポルフィリン化合物の吸光度または励起時の蛍光強度を測定する方法が記載されている。この方法は、ポルフィリン化合物のソーレ吸収帯がジアゾ基の生成により減少することを利用したもので、必要な反応はポルフィリン化合物と亜硝酸イオンとの反応だけであるから、ジアゾニウム塩の生成反応とカップリング反応との二段階の反応が必要なＪＩＳ法に比べて簡単な操作で亜硝酸イオンを定量可能である。しかし、この定量方法は、特許文献１の記載（特に、段落００２３）によると亜硝酸イオン濃度の測定可能範囲が０〜０．０１８ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌ程度であり、この範囲の亜硝酸イオン濃度は全窒素に換算すると０〜０．００６ｍｇ［Ｎ］／Ｌ程度の微量範囲でしかないことから、ＪＩＳ法と同じく全窒素の定量に適用するのが困難である。しかも、この定量方法は、特許文献１の記載（特に、段落００２３および図４）によると、ジアゾ基を有するポルフィリン化合物を生成させるために、検査水に含まれる亜硝酸イオンの２倍モル当量以上の多量のポルフィリン化合物を用いる必要があるため、不経済であり、定量の自動化装置を実現する上で装置の小型化を図るのが困難である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】日本工業規格 ＪＩＳ Ｋ ０１０２、工場排水試験方法（２００８） ４３．１．１
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開平９−８９７８１号公報（特許請求の範囲、段落００１２、００１６および００２３並びに図４等）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、検査水に含まれる亜硝酸イオンを簡単な操作で高濃度の領域まで定量できるようにすることにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量方法に関するものである。この定量方法は、検査水に対し、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬を添加し、酸性下において反応させる工程１と、工程１を経た検査水について、ジアゾ化試薬による着色の吸光度および生成したジアゾニウム塩による着色の吸光度のうちの少なくとも一つの吸光度を測定する工程２とを含んでいる。この定量方法は、ジアゾ化試薬として、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群および３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群からなる群から選ばれた化合物を用いる。
【００１１】
ここで用いられる芳香族第一級アミン化合物群は、通常、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群とからなる。第１群は、例えば、１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリンおよび２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンからなり、第２群は、例えば、３’−アミノアセトフェノンおよび３−アミノベンゾフェノンからなる。
【００１２】
一方、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群は、例えば、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンおよび２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンからなる。
【発明の効果】
【００１３】
本発明に係る亜硝酸イオンの定量方法は、特定のジアゾ化試薬を用いているため、複数の反応工程を必要としない簡単な操作で高濃度の領域まで亜硝酸イオンを定量することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】実施例１で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２】実施例１で作成した検量線を示す図。
【図３】実施例２で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図４】実施例２で作成した検量線を示す図。
【図５】実施例３で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図６】実施例３で作成した検量線を示す図。
【図７】実施例４で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図８】実施例４で作成した検量線を示す図。
【図９】実施例５で作成した検量線を示す図。
【図１０】実施例６で作成した検量線を示す図。
【図１１】実施例７で作成した検量線を示す図。
【図１２】実施例８で作成した検量線を示す図。
【図１３】実施例９で作成した検量線を示す図。
【図１４】実施例１０で作成した検量線を示す図。
【図１５】実施例１１で作成した検量線を示す図。
【図１６】実施例１２で作成した検量線を示す図。
【図１７】実施例１３で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図１８】実施例１３で作成した検量線を示す図。
【図１９】実施例１４で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２０】実施例１４で作成した検量線を示す図。
【図２１】実施例１５で作成した検量線を示す図。
【図２２】実施例１６で作成した検量線を示す図。
【図２３】実施例１７で作成した検量線を示す図。
【図２４】実施例１８で作成した検量線を示す図。
【図２５】比較例１で作成した検量線を示す図。
【図２６】実験例の実験１で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２７】実験例の実験２で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２８】実験例の実験３で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の方法により亜硝酸イオンを定量可能な検査水は、特に限定されるものではないが、通常は工場排水や生活排水等の窒素の排出規制が設けられている排水の他、海洋水、湖沼水、河川水および地下水等の天然水である。
【００１６】
検査水の亜硝酸イオンを定量する際には、先ず、所定量の検査水を採取し、この検査水に対してジアゾ化試薬を添加して反応させる（工程１）。ここで、検査水の全窒素を測定する場合は、ジアゾ化試薬を添加する前に検査水に含まれる窒素化合物を分解し、窒素元素を亜硝酸イオンへ変換する前処理を実施する。例えば、検査水にペルオキソ二硫酸カリウム等の酸化剤を添加して加熱することで窒素化合物を酸化分解し、それにより生成する硝酸イオンをさらに還元して亜硝酸イオンへ変換する。このような前処理方法としては、例えば、日本工業規格 ＪＩＳ Ｋ０１０２ 「工場排水試験方法（２００８）」の４５．４に挙げられた銅・カドミウムカラム還元−ナフチルエチレンジアミン吸光光度法を採用することができるが、その他の還元法や紫外線を照射する方法を採用することもできる。
【００１７】
この工程で用いられるジアゾ化試薬は、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なもの、特に、検査水への添加によりそれ自体で検査水を着色させ、同時に、生成したジアゾニウム塩により検査水を着色させることができるものである。このようなジアゾ化試薬としては、通常、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物の群および３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物の群からなる群から選ばれた化合物を用いることができる。
【００１８】
芳香族第一級アミン化合物の群は、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群とからなる。
【００１９】
第１群は、例えば、１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリン、２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノン、２−アミノ−２’−フルオロ−５−ブロモベンゾフェノン、４−アミノベンゾフェノン、４−フルオロ−２−ニトロアニリン、５−アミノ−２−ニトロベンゾトリフルオリド、４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノン、２−アミノ−５−ニトロベンゾフェノン、１−アミノ−４−ブロモアントラキノン−２−スルホン酸ナトリウムおよび４，６−ジニトロ−ｏ−トルイジンなどを含むが、１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリンおよび２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンからなるものが好ましい。
【００２０】
一方、第２群は、例えば、３’−アミノアセトフェノン、３−アミノベンゾフェノン、２−アミノ−９−フルオレノン、ｍ−ニトロアニリンおよび２−クロロ−５−ニトロアニリンなどを含むが、３’−アミノアセトフェノンおよび３−アミノベンゾフェノンからなるものが好ましい。
【００２１】
３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物の群は、例えば、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン、２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンおよび３−アミノ−５，５−ジメチル−２−シクロヘキセン−１−オンなどを含むが、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンおよび２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンからなるものが好ましい。
【００２２】
ジアゾ化試薬は、通常、溶媒に溶解した溶液として検査水に添加するのが好ましい。ジアゾ化試薬を溶解するために用いられる溶媒としては、例えば、逆浸透膜等により膜処理することで得られる純水、蒸留水およびイオン交換水等の精製水、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、エタノールやメタノール等のアルコール類並びにアセトンなどが挙げられる。
【００２３】
検査水へのジアゾ化試薬の添加量は、検査水に含まれる亜硝酸イオンの全量がジアゾニウム塩の生成に関与するのに十分な量に設定する必要があり、検査水に含まれるものと想定される亜硝酸イオンと少なくとも等モルに設定する必要がある。この点に関し、検査水中に含まれる窒素化合物から硝酸イオンを経て誘導される亜硝酸イオンを考慮すると、検査水に含まれる亜硝酸イオン濃度は一般的に０〜３５ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌ程度の範囲と想定されることから、例えば、検査水の量を２．０ｍＬとした場合のジアゾ化試薬の添加量は、通常、１．５μｍｏｌ以上になるよう設定するのが好ましい。但し、検査水の亜硝酸イオン濃度が３５ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌよりも大幅に低いことが判明している、または、想定されるような場合、ジアゾ化試薬の添加量は１．５μｍｏｌ未満であってもよい。
【００２４】
この工程において、ジアゾ化試薬と亜硝酸イオンとの反応、すなわちジアゾニウム塩の生成反応は、酸性下で進行させる。具体的には、定量結果に影響する可能性がある窒素元素を含まずかつジアゾ化試薬と亜硝酸イオンとの反応を阻害しない酸を検査水に添加することで検査水を酸性に調整し、その環境下で反応を進行させる。酸としては、例えば、塩酸および硫酸などの無機酸、酢酸、ベンゼンスルホン酸、クエン酸およびコハク酸などの有機酸並びにこれらの水溶液を用いることができるが、通常は塩酸水溶液を用いるのが好ましい。検査水に対する酸の添加時期は、ジアゾ化試薬を添加する前であってもよいし、ジアゾ化試薬の添加後であってもよい。
【００２５】
検査水に対する酸の添加量は、検査水に含まれる亜硝酸イオンとジアゾ化試薬との反応が安定に進行するように検査水を酸性に調整可能なように設定する必要があり、通常、検査水のｐＨが６．０以下になるように設定するのが好ましく、０〜４．０になるよう設定するのが特に好ましい。
【００２６】
この工程での反応は、通常、５〜４０℃程度の室温で進行させることができる。反応に要する時間は、温度により変動するが、通常、１〜１０分程度である。なお、反応時間を短縮するために、検査水を適宜加熱することもできる。この場合、加熱温度は、４０〜９５℃に設定するのが好ましい。
【００２７】
この工程において、検査水に含まれる亜硝酸イオンは、酸により調整された酸性下においてジアゾ化試薬と反応し、ジアゾニウム塩を生成する。これにより、ジアゾ化試薬の添加により着色した検査水は、ジアゾ化試薬が亜硝酸イオンとの反応により消化されることでジアゾ化試薬自体による着色が退色し、同時に、生成したジアゾニウム塩による着色を呈するようになる。
【００２８】
次に、ジアゾ化試薬の反応後の検査水の吸光度を測定する（工程２）。ここで測定する吸光度は、検査水に残留しているジアゾ化試薬が検査水に付与している着色の吸光度（以下、「吸光度Ａ」と称することがある。）、または、ジアゾ化試薬の反応により生成するジアゾニウム塩が検査水に付与している着色の吸光度（以下、「吸光度Ｂ」と称することがある。）である。
【００２９】
吸光度Ａは、ジアゾ化試薬そのものが検査水に付与する着色についてのものであり、この着色はジアゾ化試薬が検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消化されるに従って着色強度が低下する。このため、吸光度Ａと検査水におけるジアゾ化試薬濃度および亜硝酸イオン濃度とは相関性を有する。吸光度Ａの測定波長は、ジアゾ化試薬が検査水に付与する着色の極大吸収波長またはその付近の波長であり、使用するジアゾ化試薬の種類により異なるため特定されるものではないが、通常は２５０〜６００ｎｍの範囲にある。
【００３０】
一方、吸光度Ｂは、反応により生成したジアゾニウム塩が検査水に付与する着色についてのものであり、この着色は反応の進行によりジアゾニウム塩濃度が高まるに従って着色強度が高まる。このため、吸光度Ｂと検査水におけるジアゾニウム塩濃度とは相関性を有する。吸光度Ｂの測定波長は、生成するジアゾニウム塩が検査水に付与する着色の極大吸収波長またはその付近の波長であり、生成するジアゾニウム塩の種類（すなわち使用するジアゾ化試薬の種類）により異なるため特定されるものではないが、通常は２５０〜６００ｎｍの範囲にある。
【００３１】
この工程では、吸光度Ａまたは吸光度Ｂと亜硝酸イオン濃度との関係を予め調べて作成しておいた検量線に基づいて、吸光度Ａまたは吸光度Ｂの測定値から検査水の亜硝酸イオン量を判定する。ここで作成する検量線は、亜硝酸イオン濃度と吸光度Ａまたは吸光度Ｂとの間の直線関係が比較的高濃度の亜硝酸イオン濃度の範囲まで良好に成立することから、検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量可能範囲がＪＩＳ法等の従来法で可能な範囲よりも広い０〜５３ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌ（全窒素換算で０〜１６ｍｇ［Ｎ］／Ｌ）の範囲になる。このため、この定量方法は、亜硝酸イオンの含有量が多い検査水、例えば、全窒素の定量のために窒素化合物を既述の前処理により亜硝酸イオンへ変換したような検査水について適用する場合に特に有用である。
【００３２】
なお、工程２では、亜硝酸イオンの定量結果の信頼性を高めるために、吸光度Ａと吸光度Ｂとの両方を測定し、各吸光度に基づいて検査水の亜硝酸イオン量を別々に判定することもできる。この場合、吸光度Ａによる判定結果と吸光度Ｂによる判定結果とが実質的に一致していれば、定量結果の信頼性が高いものと判断することができる。
【００３３】
本発明の定量方法は、工程２において吸光度Ａを測定する場合、工程２の前に、工程１を経た検査水のｐＨが７より大きくなるよう調整するのが好ましい。吸光度Ａは、検査水のｐＨが７以下のとき、ｐＨ値により数値が異なる場合があることから亜硝酸イオンの定量結果に多少の誤差を生じさせる可能性があるが、このような調整をすると、吸光度ＡはｐＨの影響による測定誤差が小さくなるため、亜硝酸イオン濃度の定量精度をより高めることができる。
【００３４】
検査水のｐＨは、通常、工程１の終了後の検査水へアルカリ金属の水酸化物、炭酸塩若しくは炭酸水素塩などのアルカリ化合物またはその水溶液を添加することで調整することができるが、通常は水酸化ナトリウム水溶液を添加することで調整するのが好ましい。
【００３５】
本発明の定量方法の好ましい一形態では、工程１においてオルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群からジアゾ化試薬を選択し、工程２において吸光度Ａを測定する。また、他の好ましい一形態では、工程１において３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物の群からジアゾ化試薬を選択し、工程２において吸光度Ａを測定する。これらの場合、ジアゾ化試薬が検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消化されやすく、ジアゾ化試薬による着色強度が低下しやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。
【００３６】
さらに他の好ましい一形態では、工程１においてメタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群からジアゾ化試薬を選択し、工程２において吸光度Ｂを測定する。この場合、第２群のジアゾ化試薬と検査水中の亜硝酸イオンとの反応が進行しやすく、生成するジアゾニウム塩による着色強度が高まりやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。
【００３７】
さらに他の好ましい一形態では、工程１においてメタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群からジアゾ化試薬を選択し、かつ、工程２において吸光度Ａを測定するとともに、工程２の前に、工程１を経た検査水のｐＨが７より大きくなるよう調整する。この場合、吸光度ＡはｐＨの影響による測定誤差が小さくなり、また、第２群のジアゾ化試薬は検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消化されやすいことから検査水での着色強度が低下しやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。
【実施例】
【００３８】
試薬および分光光度計
以下の実施例等で用いた試薬および分光光度計は次のものである。
亜硝酸性窒素標準液（イオンクロマトグラフ用）：和光純薬工業株式会社 コード１４７−０６３４１
１０重量％塩酸：和光純薬工業株式会社 コード０８５−０７５３５
１ｍｏｌ／Ｌ塩酸：和光純薬工業株式会社 コード０８３−０１０９５
１０ｗ／ｖ％水酸化ナトリウム溶液：和光純薬工業株式会社 コード１９１−１１５５５
１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液：和光純薬工業株式会社 コード１９２−０２１７５
１−プロパノール：和光純薬工業株式会社 コード１６２−０４８１６
ジメチルスルホキシド（試薬特級）：和光純薬工業株式会社 コード０４３−０７２１６
１−アミノアントラキノン：東京化成工業株式会社 コードＡ０５９０
２−ニトロアニリン：東京化成工業株式会社 コードＮ０１１８
４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム：東京化成工業株式会社 コードＡ０３７５
ｐ−ニトロアニリン：東京化成工業株式会社 コードＮ０１１９
２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノン：東京化成工業株式会社 コードＡ０３１５
３’−アミノアセトフェノン：東京化成工業株式会社 コードＡ０２４９
３−アミノベンゾフェノン：東京化成工業株式会社 コードＡ１８９９
３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン：東京化成工業株式会社 コードＡ１９３６
２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノン：東京化成工業株式会社 コードＡ１２８８
スルファニルアミド（試薬特級）：和光純薬工業株式会社 コード１９１−０４５０２
ナフチルエチレンジアミン（窒素酸化物測定用）：和光純薬工業株式会社 コード１４７−０４１４１
分光光度計：株式会社島津製作所の商品名「ＵＶ−１６００ＰＣ」
【００３９】
実施例１
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０、６．０、８．０、１０．０および１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの７種類の亜硝酸イオン溶液を用意した。亜硝酸イオン濃度が０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの亜硝酸イオン溶液は蒸留水をそのまま用い、また、他の亜硝酸イオン溶液は亜硝酸性窒素標準液を蒸留水で希釈することで亜硝酸イオン濃度を調整した。
【００４０】
（検量線の作成）
用意した７種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して１−アミノアントラキノンの１−プロパノール溶液（濃度０．２ｇ／Ｌ）２．０ｍＬを添加し、さらに１０重量％塩酸０．５ｍＬを添加してｐＨを０．６に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１５分間放置して反応させた後、反応液の２８２〜６００ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図１に示す。
【００４１】
次に、測定した吸光スペクトルから１−アミノアントラキノンによる発色波長である４８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、測定した吸光スペクトルから反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図２に示す。図２によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４２】
実施例２
ｐＨを０．６に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１５分間放置して反応させた後、反応液に１０ｗ／ｖ％水酸化ナトリウム溶液０．６ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．４に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて実施例１と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。吸光スペクトルの測定結果を図３に示し、検量線を図４に示す。図４によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４３】
実施例３
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０および６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの４種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００４４】
（検量線の作成）
用意した４種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して２−ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３ｇ／Ｌ）０．５ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．２に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液の２４０〜５００ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図５に示す。
【００４５】
次に、測定した吸光スペクトルから２−ニトロアニリンによる発色波長である４１０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、測定した吸光スペクトルから反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である２８０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図６に示す。図６によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４６】
実施例４
ｐＨを１．２に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．７に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて実施例３と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。吸光スペクトルの測定結果を図７に示し、検量線を図８に示す。図８によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４７】
実施例５
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、０．５、１．０、１．５および２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００４８】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウムの水溶液（濃度０．６ｇ／Ｌ）０．２ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．１に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、この反応液について４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウムによる発色波長である３７０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である２６０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図９に示す。図９によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４９】
実施例６
ｐＨを１．１に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．９に調整してから４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウムによる発色波長である３７０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）および生成したジアゾニウム塩による発色波長である２６０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定した点を除いて実施例５と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。結果を図１０に示す。図１０によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５０】
実施例７
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、１．０、２．０、３．０、４．０および５．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの６種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００５１】
（検量線の作成）
用意した６種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対してｐ−ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３３ｇ／Ｌ）０．３ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．５ｍＬを添加してｐＨを０．７に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、この反応液についてｐ−ニトロアニリンによる発色波長である３８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である３１０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図１１に示す。図１１によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜５．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５２】
実施例８
ｐＨを０．７に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．７ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．８に調整してからｐ−ニトロアニリンによる発色波長である３８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例７と同様に操作し、検量線を作成した。結果を図１２に示す。図１２によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜５．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５３】
実施例９
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、４．０、８．０、１２．０および１６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００５４】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．５ｍＬに対して２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．５ｇ／Ｌ）１．５ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．３に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、この反応液について２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンによる発色波長である５２０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である４６０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図１３に示す。図１３によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５５】
実施例１０
ｐＨを１．３に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．５ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．８に調整してから２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンによる発色波長である５６０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）および生成したジアゾニウム塩による発色波長である５２０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定した点を除いて実施例９と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。結果を図１４に示す。図１４によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５６】
実施例１１
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、０．５、１．０、１．５および２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００５７】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３３ｇ／Ｌ）０．１ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．１に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、この反応液について３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンによる発色波長である２８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図１５に示す。図１５によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５８】
実施例１２
ｐＨを１．１に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．９に調整してから３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンによる発色波長である２７０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例１１と同様に操作し、検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である３２０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図１６に示す。図１６によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５９】
実施例１３
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、４．０、８．０および１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの４種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００６０】
（検量線の作成）
用意した４種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．５ｇ／Ｌ）１．０ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．３に設定した。この亜硝酸イオン溶液を９５℃で３０分間放置して反応させた後、３００〜６００ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図１７に示す。
【００６１】
次に、測定した吸光スペクトルから２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンによる発色波長である４６０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図１８に示す。図１８によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６２】
実施例１４
ｐＨを１．３に調整した亜硝酸イオン溶液を９５℃で３０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．５ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．９に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて実施例１３と同様に操作し、検量線を作成した。検量線は、吸光スペクトルから２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンによる発色波長である４８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）と、生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）とを抽出し、それぞれの吸光度による２種類のものを作成した。吸光スペクトルの測定結果を図１９に示し、検量線を図２０に示す。図２０によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６３】
実施例１５
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０、６．０および８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００６４】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して３’−アミノアセトフェノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３ｇ／Ｌ）１．０ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．２に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、この反応液について３’−アミノアセトフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図２１に示す。図２１によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６５】
実施例１６
ｐＨを１．２に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．７に調整してから３’−アミノアセトフェノン自体による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例１５と同様に操作し、検量線を作成した。また、反応液について、３’−アミノアセトフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３１０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図２２に示す。図２２によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６６】
実施例１７
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０、６．０および８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００６７】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して３−アミノベンゾフェノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．５ｇ／Ｌ）１．０ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．２に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置した後、３−アミノベンゾフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図２３に示す。図２３によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６８】
実施例１８
ｐＨを１．２に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．７に調整してから３−アミノベンゾフェノン自体による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例１７と同様に操作し、検量線を作成した。結果を図２４に示す。図２４によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６９】
比較例１
亜硝酸イオン濃度が０．０、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９および１．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの１１種類の亜硝酸イオン溶液を用意した。そして、各亜硝酸イオン溶液に対して日本工業規格 ＪＩＳ Ｋ ０１０２、工場排水試験方法（２００８）４３．１．１（非特許文献１）に規定されたナフチルエチレンジアミン吸光光度法を適用し、５４０ｎｍの吸光度と亜硝酸イオン濃度との関係を調べた。結果を図２５に示す。
【００７０】
図２５によると、亜硝酸イオン濃度の定量可能範囲は０〜０．３ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲に止まり、本法で高濃度の亜硝酸イオンを定量することはできないことがわかる。
【００７１】
実験例
（実験１）
蒸留水２．５ｍＬ対してジアゾ化試薬であるｐ−ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３ｇ／Ｌ）０．１５ｍＬを添加したジアゾ化試薬水溶液を４つ用意し、このうちの３つのそれぞれに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を０．０３ｍＬ、０．０６ｍＬおよび０．０９ｍＬ添加することで水素イオン濃度を０．０１１ｍｏｌ／Ｌ、０．０２２ｍｏｌ／Ｌおよび０．０３３ｍｏｌ／Ｌに調整した３種類の溶液を調製した。これらの溶液を２５℃で５分間放置した後、２９０〜４８０ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図２６に示す。図２６には、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を添加していないジアゾ化試薬水溶液のみについて同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。
【００７２】
（実験２）
実験１で用意したものと同様のジアゾ化試薬水溶液を４つ用意し、このうちの３つのそれぞれに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸に替えて１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を０．０３ｍＬ、０．０６ｍＬおよび０．０９ｍＬ添加することでｐＨを７以上に調整した３種類の溶液を調整した。これらの溶液について、実験１と同様の条件で放置した後に吸光スペクトルを測定した。結果を図２７に示す。図２７には、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を添加していないジアゾ化試薬水溶液のみについて同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。
【００７３】
（実験３）
実験１と同様にして水素イオン濃度を調整した３種類の溶液を調製し、これらの溶液を２５℃で５分間放置した。その後、それぞれの溶液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．１５ｍＬを添加し、ｐＨをそれぞれ１２．６、１２．５および１２．３に調整した３種類の溶液を調製した。これらの溶液について、実験１と同様に吸光スペクトルを測定した結果を図２８に示す。図２８には、実験１で用意したものと同じジアゾ化試薬水溶液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．１５ｍＬのみを添加することでｐＨを１２．７に調整した溶液について、同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。
【００７４】
（実験１〜３の説明）
実験１に関する図２６は、吸光スペクトルを測定した溶液の水素イオン濃度が異なることで、ジアゾ化試薬であるｐ−ニトロアニリンの濃度が同じであっても極大吸収波長の吸光度が異なることを示している。より具体的には、溶液の水素イオン濃度が０．０１１ｍｏｌ／Ｌ増加する毎に、極大吸収波長の吸光度は約５％低下することを示している。これに対し、実験２に関する図２７は、ジアゾ化試薬水溶液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を添加してｐＨを７以上に設定すれば、ｐ−ニトロアニリンの濃度が同じ溶液において極大吸収波長の吸光度に大きな変化が生じないことを示している。そして、実験３に関する図２８は、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を添加することで水素イオン濃度を高めた溶液は、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液の添加によりｐＨを７以上に調整してから吸収スペクトルを測定すると、極大吸収波長の吸光度に殆ど変化が生じないことを示している。
【００７５】
以上の結果より、検査水の亜硝酸イオンを吸光度Ａの測定により定量するときは、ジアゾ化試薬の反応後の検査水のｐＨを７以上に調整してから吸光度Ａを測定するのが好ましいものと考えられる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、亜硝酸イオンの定量方法、特に、検査水に含まれる亜硝酸イオンを吸光度の測定により定量する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
窒素は海洋水、湖沼水、河川水および地下水等の富栄養化に関わる原因物質の一つであることから、工場排水等での排出規制が設けられており、工場排水等は、環境への排出前に生態系の栄養源となるイオン状態の窒素（例えば、硝酸イオンや亜硝酸イオン）の定量が求められる。しかし、工場排水等は、イオン状態で窒素を含むだけではなく、各種の窒素化合物として窒素を含むのが一般的であり、この窒素化合物は環境への排出後に自然分解されることでイオン状態の窒素を発生する。このため、工場排水等は、窒素化合物から生成し得るイオン状態の窒素を含めた窒素の総量、いわゆる全窒素の定量が求められることが多い。
【０００３】
工場排水等の検査水に含まれる全窒素の定量の一形態では、検査水に含まれる窒素化合物を酸化分解により硝酸イオンへ変換した後にさらに還元して亜硝酸イオンへ変換する前処理をし、この前処理後の検査水に含まれる亜硝酸イオンを定量する。
【０００４】
検査水に含まれる亜硝酸イオンの公的な定量方法として、日本工業規格（ＪＩＳ）において規定されたナフチルエチレンジアミン吸光光度法が知られている（非特許文献１）。この定量方法（以下、ＪＩＳ法という。）は、検査水に含まれる亜硝酸イオンが酸性下でスルファニルアミドと反応して生成するジアゾニウム塩をナフチルエチレンジアミンとカップリング反応させ、それにより生成するアゾ化合物による検査水の着色（発色）を吸光光度法により測定することで亜硝酸イオンを定量するものである。
【０００５】
しかし、ＪＩＳ法は、生成するアゾ化合物による検査水の着色が非常に鋭敏であって着色強度（モル吸光係数）が高まり過ぎることから、検査水における高濃度の亜硝酸イオンの正確な定量が困難であり、亜硝酸イオン濃度の測定可能範囲が０．０６〜０．６ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌに制限されている。この範囲の亜硝酸イオン濃度は全窒素に換算すると０．０２〜０．２ｍｇ［Ｎ］／Ｌ程度の微量範囲であることから、ＪＩＳ法は、全窒素の定量に適用するのが困難である。
【０００６】
特許文献１には、ＪＩＳ法に替わる亜硝酸イオンの定量方法として、ポルフィン核にアミノ基を有するポルフィリン化合物を検査水へ添加し、当該ポルフィリン化合物と亜硝酸イオンとの反応により生成するジアゾ基を有するポルフィリン化合物の吸光度または励起時の蛍光強度を測定する方法が記載されている。この方法は、ポルフィリン化合物のソーレ吸収帯がジアゾ基の生成により減少することを利用したもので、必要な反応はポルフィリン化合物と亜硝酸イオンとの反応だけであるから、ジアゾニウム塩の生成反応とカップリング反応との二段階の反応が必要なＪＩＳ法に比べて簡単な操作で亜硝酸イオンを定量可能である。しかし、この定量方法は、特許文献１の記載（特に、段落００２３）によると亜硝酸イオン濃度の測定可能範囲が０〜０．０１８ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌ程度であり、この範囲の亜硝酸イオン濃度は全窒素に換算すると０〜０．００６ｍｇ［Ｎ］／Ｌ程度の微量範囲でしかないことから、ＪＩＳ法と同じく全窒素の定量に適用するのが困難である。しかも、この定量方法は、特許文献１の記載（特に、段落００２３および図４）によると、ジアゾ基を有するポルフィリン化合物を生成させるために、検査水に含まれる亜硝酸イオンの２倍モル当量以上の多量のポルフィリン化合物を用いる必要があるため、不経済であり、定量の自動化装置を実現する上で装置の小型化を図るのが困難である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】日本工業規格 ＪＩＳ Ｋ ０１０２、工場排水試験方法（２００８） ４３．１．１
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開平９−８９７８１号公報（特許請求の範囲、段落００１２、００１６および００２３並びに図４等）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、検査水に含まれる亜硝酸イオンを簡単な操作で高濃度の領域まで定量できるようにすることにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量方法に関するものである。この定量方法は、検査水に対し、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬を添加し、酸性下において反応させる工程１と、工程１を経た検査水について、ジアゾ化試薬による着色の吸光度および生成したジアゾニウム塩による着色の吸光度のうちの少なくとも一つの吸光度を測定する工程２とを含んでいる。この定量方法は、ジアゾ化試薬として、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群および３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群からなる群から選ばれた化合物を用いる。
【００１１】
ここで用いられる芳香族第一級アミン化合物群は、通常、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群とからなる。第１群は、例えば、１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリンおよび２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンからなり、第２群は、例えば、３’−アミノアセトフェノンおよび３−アミノベンゾフェノンからなる。
【００１２】
一方、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群は、例えば、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンおよび２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンからなる。
【発明の効果】
【００１３】
本発明に係る亜硝酸イオンの定量方法は、特定のジアゾ化試薬を用いているため、複数の反応工程を必要としない簡単な操作で高濃度の領域まで亜硝酸イオンを定量することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】実施例１で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２】実施例１で作成した検量線を示す図。
【図３】実施例２で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図４】実施例２で作成した検量線を示す図。
【図５】実施例３で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図６】実施例３で作成した検量線を示す図。
【図７】実施例４で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図８】実施例４で作成した検量線を示す図。
【図９】実施例５で作成した検量線を示す図。
【図１０】実施例６で作成した検量線を示す図。
【図１１】実施例７で作成した検量線を示す図。
【図１２】実施例８で作成した検量線を示す図。
【図１３】実施例９で作成した検量線を示す図。
【図１４】実施例１０で作成した検量線を示す図。
【図１５】実施例１１で作成した検量線を示す図。
【図１６】実施例１２で作成した検量線を示す図。
【図１７】実施例１３で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図１８】実施例１３で作成した検量線を示す図。
【図１９】実施例１４で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２０】実施例１４で作成した検量線を示す図。
【図２１】実施例１５で作成した検量線を示す図。
【図２２】実施例１６で作成した検量線を示す図。
【図２３】実施例１７で作成した検量線を示す図。
【図２４】実施例１８で作成した検量線を示す図。
【図２５】比較例１で作成した検量線を示す図。
【図２６】実験例の実験１で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２７】実験例の実験２で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【図２８】実験例の実験３で測定した吸光スペクトルの結果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の方法により亜硝酸イオンを定量可能な検査水は、特に限定されるものではないが、通常は工場排水や生活排水等の窒素の排出規制が設けられている排水の他、海洋水、湖沼水、河川水および地下水等の天然水である。
【００１６】
検査水の亜硝酸イオンを定量する際には、先ず、所定量の検査水を採取し、この検査水に対してジアゾ化試薬を添加して反応させる（工程１）。ここで、検査水の全窒素を測定する場合は、ジアゾ化試薬を添加する前に検査水に含まれる窒素化合物を分解し、窒素元素を亜硝酸イオンへ変換する前処理を実施する。例えば、検査水にペルオキソ二硫酸カリウム等の酸化剤を添加して加熱することで窒素化合物を酸化分解し、それにより生成する硝酸イオンをさらに還元して亜硝酸イオンへ変換する。このような前処理方法としては、例えば、日本工業規格 ＪＩＳ Ｋ０１０２ 「工場排水試験方法（２００８）」の４５．４に挙げられた銅・カドミウムカラム還元−ナフチルエチレンジアミン吸光光度法を採用することができるが、その他の還元法や紫外線を照射する方法を採用することもできる。
【００１７】
この工程で用いられるジアゾ化試薬は、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なもの、特に、検査水への添加によりそれ自体で検査水を着色させ、同時に、生成したジアゾニウム塩により検査水を着色させることができるものである。このようなジアゾ化試薬としては、通常、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物の群および３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物の群からなる群から選ばれた化合物を用いることができる。
【００１８】
芳香族第一級アミン化合物の群は、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群とからなる。
【００１９】
第１群は、例えば、１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリン、２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノン、２−アミノ−２’−フルオロ−５−ブロモベンゾフェノン、４−アミノベンゾフェノン、４−フルオロ−２−ニトロアニリン、５−アミノ−２−ニトロベンゾトリフルオリド、４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノン、２−アミノ−５−ニトロベンゾフェノン、１−アミノ−４−ブロモアントラキノン−２−スルホン酸ナトリウムおよび４，６−ジニトロ−ｏ−トルイジンなどを含むが、１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリンおよび２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンからなるものが好ましい。
【００２０】
一方、第２群は、例えば、３’−アミノアセトフェノン、３−アミノベンゾフェノン、２−アミノ−９−フルオレノン、ｍ−ニトロアニリンおよび２−クロロ−５−ニトロアニリンなどを含むが、３’−アミノアセトフェノンおよび３−アミノベンゾフェノンからなるものが好ましい。
【００２１】
３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物の群は、例えば、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン、２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンおよび３−アミノ−５，５−ジメチル−２−シクロヘキセン−１−オンなどを含むが、３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンおよび２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンからなるものが好ましい。
【００２２】
ジアゾ化試薬は、通常、溶媒に溶解した溶液として検査水に添加するのが好ましい。ジアゾ化試薬を溶解するために用いられる溶媒としては、例えば、逆浸透膜等により膜処理することで得られる純水、蒸留水およびイオン交換水等の精製水、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、エタノールやメタノール等のアルコール類並びにアセトンなどが挙げられる。
【００２３】
検査水へのジアゾ化試薬の添加量は、検査水に含まれる亜硝酸イオンの全量がジアゾニウム塩の生成に関与するのに十分な量に設定する必要があり、検査水に含まれるものと想定される亜硝酸イオンと少なくとも等モルに設定する必要がある。この点に関し、検査水中に含まれる窒素化合物から硝酸イオンを経て誘導される亜硝酸イオンを考慮すると、検査水に含まれる亜硝酸イオン濃度は一般的に０〜３５ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌ程度の範囲と想定されることから、例えば、検査水の量を２．０ｍＬとした場合のジアゾ化試薬の添加量は、通常、１．５μｍｏｌ以上になるよう設定するのが好ましい。但し、検査水の亜硝酸イオン濃度が３５ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌよりも大幅に低いことが判明している、または、想定されるような場合、ジアゾ化試薬の添加量は１．５μｍｏｌ未満であってもよい。
【００２４】
この工程において、ジアゾ化試薬と亜硝酸イオンとの反応、すなわちジアゾニウム塩の生成反応は、酸性下で進行させる。具体的には、定量結果に影響する可能性がある窒素元素を含まずかつジアゾ化試薬と亜硝酸イオンとの反応を阻害しない酸を検査水に添加することで検査水を酸性に調整し、その環境下で反応を進行させる。酸としては、例えば、塩酸および硫酸などの無機酸、酢酸、ベンゼンスルホン酸、クエン酸およびコハク酸などの有機酸並びにこれらの水溶液を用いることができるが、通常は塩酸水溶液を用いるのが好ましい。検査水に対する酸の添加時期は、ジアゾ化試薬を添加する前であってもよいし、ジアゾ化試薬の添加後であってもよい。
【００２５】
検査水に対する酸の添加量は、検査水に含まれる亜硝酸イオンとジアゾ化試薬との反応が安定に進行するように検査水を酸性に調整可能なように設定する必要があり、通常、検査水のｐＨが６．０以下になるように設定するのが好ましく、０〜４．０になるよう設定するのが特に好ましい。
【００２６】
この工程での反応は、通常、５〜４０℃程度の室温で進行させることができる。反応に要する時間は、温度により変動するが、通常、１〜１０分程度である。なお、反応時間を短縮するために、検査水を適宜加熱することもできる。この場合、加熱温度は、４０〜９５℃に設定するのが好ましい。
【００２７】
この工程において、検査水に含まれる亜硝酸イオンは、酸により調整された酸性下においてジアゾ化試薬と反応し、ジアゾニウム塩を生成する。これにより、ジアゾ化試薬の添加により着色した検査水は、ジアゾ化試薬が亜硝酸イオンとの反応により消化されることでジアゾ化試薬自体による着色が退色し、同時に、生成したジアゾニウム塩による着色を呈するようになる。
【００２８】
次に、ジアゾ化試薬の反応後の検査水の吸光度を測定する（工程２）。ここで測定する吸光度は、検査水に残留しているジアゾ化試薬が検査水に付与している着色の吸光度（以下、「吸光度Ａ」と称することがある。）、または、ジアゾ化試薬の反応により生成するジアゾニウム塩が検査水に付与している着色の吸光度（以下、「吸光度Ｂ」と称することがある。）である。
【００２９】
吸光度Ａは、ジアゾ化試薬そのものが検査水に付与する着色についてのものであり、この着色はジアゾ化試薬が検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消化されるに従って着色強度が低下する。このため、吸光度Ａと検査水におけるジアゾ化試薬濃度および亜硝酸イオン濃度とは相関性を有する。吸光度Ａの測定波長は、ジアゾ化試薬が検査水に付与する着色の極大吸収波長またはその付近の波長であり、使用するジアゾ化試薬の種類により異なるため特定されるものではないが、通常は２５０〜６００ｎｍの範囲にある。
【００３０】
一方、吸光度Ｂは、反応により生成したジアゾニウム塩が検査水に付与する着色についてのものであり、この着色は反応の進行によりジアゾニウム塩濃度が高まるに従って着色強度が高まる。このため、吸光度Ｂと検査水におけるジアゾニウム塩濃度とは相関性を有する。吸光度Ｂの測定波長は、生成するジアゾニウム塩が検査水に付与する着色の極大吸収波長またはその付近の波長であり、生成するジアゾニウム塩の種類（すなわち使用するジアゾ化試薬の種類）により異なるため特定されるものではないが、通常は２５０〜６００ｎｍの範囲にある。
【００３１】
この工程では、吸光度Ａまたは吸光度Ｂと亜硝酸イオン濃度との関係を予め調べて作成しておいた検量線に基づいて、吸光度Ａまたは吸光度Ｂの測定値から検査水の亜硝酸イオン量を判定する。ここで作成する検量線は、亜硝酸イオン濃度と吸光度Ａまたは吸光度Ｂとの間の直線関係が比較的高濃度の亜硝酸イオン濃度の範囲まで良好に成立することから、検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量可能範囲がＪＩＳ法等の従来法で可能な範囲よりも広い０〜５３ｍｇ［ＮＯ２−］／Ｌ（全窒素換算で０〜１６ｍｇ［Ｎ］／Ｌ）の範囲になる。このため、この定量方法は、亜硝酸イオンの含有量が多い検査水、例えば、全窒素の定量のために窒素化合物を既述の前処理により亜硝酸イオンへ変換したような検査水について適用する場合に特に有用である。
【００３２】
なお、工程２では、亜硝酸イオンの定量結果の信頼性を高めるために、吸光度Ａと吸光度Ｂとの両方を測定し、各吸光度に基づいて検査水の亜硝酸イオン量を別々に判定することもできる。この場合、吸光度Ａによる判定結果と吸光度Ｂによる判定結果とが実質的に一致していれば、定量結果の信頼性が高いものと判断することができる。
【００３３】
本発明の定量方法は、工程２において吸光度Ａを測定する場合、工程２の前に、工程１を経た検査水のｐＨが７より大きくなるよう調整するのが好ましい。吸光度Ａは、検査水のｐＨが７以下のとき、ｐＨ値により数値が異なる場合があることから亜硝酸イオンの定量結果に多少の誤差を生じさせる可能性があるが、このような調整をすると、吸光度ＡはｐＨの影響による測定誤差が小さくなるため、亜硝酸イオン濃度の定量精度をより高めることができる。
【００３４】
検査水のｐＨは、通常、工程１の終了後の検査水へアルカリ金属の水酸化物、炭酸塩若しくは炭酸水素塩などのアルカリ化合物またはその水溶液を添加することで調整することができるが、通常は水酸化ナトリウム水溶液を添加することで調整するのが好ましい。
【００３５】
本発明の定量方法の好ましい一形態では、工程１においてオルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群からジアゾ化試薬を選択し、工程２において吸光度Ａを測定する。また、他の好ましい一形態では、工程１において３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物の群からジアゾ化試薬を選択し、工程２において吸光度Ａを測定する。これらの場合、ジアゾ化試薬が検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消化されやすく、ジアゾ化試薬による着色強度が低下しやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。
【００３６】
さらに他の好ましい一形態では、工程１においてメタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群からジアゾ化試薬を選択し、工程２において吸光度Ｂを測定する。この場合、第２群のジアゾ化試薬と検査水中の亜硝酸イオンとの反応が進行しやすく、生成するジアゾニウム塩による着色強度が高まりやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。
【００３７】
さらに他の好ましい一形態では、工程１においてメタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群からジアゾ化試薬を選択し、かつ、工程２において吸光度Ａを測定するとともに、工程２の前に、工程１を経た検査水のｐＨが７より大きくなるよう調整する。この場合、吸光度ＡはｐＨの影響による測定誤差が小さくなり、また、第２群のジアゾ化試薬は検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消化されやすいことから検査水での着色強度が低下しやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。
【実施例】
【００３８】
試薬および分光光度計
以下の実施例等で用いた試薬および分光光度計は次のものである。
亜硝酸性窒素標準液（イオンクロマトグラフ用）：和光純薬工業株式会社 コード１４７−０６３４１
１０重量％塩酸：和光純薬工業株式会社 コード０８５−０７５３５
１ｍｏｌ／Ｌ塩酸：和光純薬工業株式会社 コード０８３−０１０９５
１０ｗ／ｖ％水酸化ナトリウム溶液：和光純薬工業株式会社 コード１９１−１１５５５
１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液：和光純薬工業株式会社 コード１９２−０２１７５
１−プロパノール：和光純薬工業株式会社 コード１６２−０４８１６
ジメチルスルホキシド（試薬特級）：和光純薬工業株式会社 コード０４３−０７２１６
１−アミノアントラキノン：東京化成工業株式会社 コードＡ０５９０
２−ニトロアニリン：東京化成工業株式会社 コードＮ０１１８
４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム：東京化成工業株式会社 コードＡ０３７５
ｐ−ニトロアニリン：東京化成工業株式会社 コードＮ０１１９
２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノン：東京化成工業株式会社 コードＡ０３１５
３’−アミノアセトフェノン：東京化成工業株式会社 コードＡ０２４９
３−アミノベンゾフェノン：東京化成工業株式会社 コードＡ１８９９
３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン：東京化成工業株式会社 コードＡ１９３６
２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノン：東京化成工業株式会社 コードＡ１２８８
スルファニルアミド（試薬特級）：和光純薬工業株式会社 コード１９１−０４５０２
ナフチルエチレンジアミン（窒素酸化物測定用）：和光純薬工業株式会社 コード１４７−０４１４１
分光光度計：株式会社島津製作所の商品名「ＵＶ−１６００ＰＣ」
【００３９】
実施例１
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０、６．０、８．０、１０．０および１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの７種類の亜硝酸イオン溶液を用意した。亜硝酸イオン濃度が０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの亜硝酸イオン溶液は蒸留水をそのまま用い、また、他の亜硝酸イオン溶液は亜硝酸性窒素標準液を蒸留水で希釈することで亜硝酸イオン濃度を調整した。
【００４０】
（検量線の作成）
用意した７種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して１−アミノアントラキノンの１−プロパノール溶液（濃度０．２ｇ／Ｌ）２．０ｍＬを添加し、さらに１０重量％塩酸０．５ｍＬを添加してｐＨを０．６に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１５分間放置して反応させた後、反応液の２８２〜６００ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図１に示す。
【００４１】
次に、測定した吸光スペクトルから１−アミノアントラキノンによる発色波長である４８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、測定した吸光スペクトルから反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図２に示す。図２によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４２】
実施例２
ｐＨを０．６に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１５分間放置して反応させた後、反応液に１０ｗ／ｖ％水酸化ナトリウム溶液０．６ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．４に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて実施例１と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。吸光スペクトルの測定結果を図３に示し、検量線を図４に示す。図４によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４３】
実施例３
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０および６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの４種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００４４】
（検量線の作成）
用意した４種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して２−ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３ｇ／Ｌ）０．５ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．２に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液の２４０〜５００ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図５に示す。
【００４５】
次に、測定した吸光スペクトルから２−ニトロアニリンによる発色波長である４１０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、測定した吸光スペクトルから反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である２８０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図６に示す。図６によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４６】
実施例４
ｐＨを１．２に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．７に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて実施例３と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。吸光スペクトルの測定結果を図７に示し、検量線を図８に示す。図８によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４７】
実施例５
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、０．５、１．０、１．５および２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００４８】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウムの水溶液（濃度０．６ｇ／Ｌ）０．２ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．１に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、この反応液について４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウムによる発色波長である３７０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である２６０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図９に示す。図９によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００４９】
実施例６
ｐＨを１．１に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．９に調整してから４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウムによる発色波長である３７０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）および生成したジアゾニウム塩による発色波長である２６０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定した点を除いて実施例５と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。結果を図１０に示す。図１０によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５０】
実施例７
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、１．０、２．０、３．０、４．０および５．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの６種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００５１】
（検量線の作成）
用意した６種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対してｐ−ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３３ｇ／Ｌ）０．３ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．５ｍＬを添加してｐＨを０．７に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、この反応液についてｐ−ニトロアニリンによる発色波長である３８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である３１０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図１１に示す。図１１によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜５．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５２】
実施例８
ｐＨを０．７に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．７ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．８に調整してからｐ−ニトロアニリンによる発色波長である３８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例７と同様に操作し、検量線を作成した。結果を図１２に示す。図１２によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜５．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５３】
実施例９
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、４．０、８．０、１２．０および１６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００５４】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．５ｍＬに対して２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．５ｇ／Ｌ）１．５ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．３に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、この反応液について２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンによる発色波長である５２０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である４６０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図１３に示す。図１３によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５５】
実施例１０
ｐＨを１．３に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で５分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．５ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．８に調整してから２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンによる発色波長である５６０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）および生成したジアゾニウム塩による発色波長である５２０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定した点を除いて実施例９と同様に操作し、２種類の検量線を作成した。結果を図１４に示す。図１４によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１６．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５６】
実施例１１
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、０．５、１．０、１．５および２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００５７】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３３ｇ／Ｌ）０．１ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．１に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、この反応液について３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンによる発色波長である２８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図１５に示す。図１５によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５８】
実施例１２
ｐＨを１．１に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．９に調整してから３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンによる発色波長である２７０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例１１と同様に操作し、検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である３２０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図１６に示す。図１６によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００５９】
実施例１３
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、４．０、８．０および１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの４種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００６０】
（検量線の作成）
用意した４種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．５ｇ／Ｌ）１．０ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．３に設定した。この亜硝酸イオン溶液を９５℃で３０分間放置して反応させた後、３００〜６００ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図１７に示す。
【００６１】
次に、測定した吸光スペクトルから２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンによる発色波長である４６０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図１８に示す。図１８によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６２】
実施例１４
ｐＨを１．３に調整した亜硝酸イオン溶液を９５℃で３０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．５ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．９に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて実施例１３と同様に操作し、検量線を作成した。検量線は、吸光スペクトルから２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンによる発色波長である４８０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）と、生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）とを抽出し、それぞれの吸光度による２種類のものを作成した。吸光スペクトルの測定結果を図１９に示し、検量線を図２０に示す。図２０によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜１２．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６３】
実施例１５
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０、６．０および８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００６４】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して３’−アミノアセトフェノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３ｇ／Ｌ）１．０ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．２に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、この反応液について３’−アミノアセトフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図２１に示す。図２１によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６５】
実施例１６
ｐＨを１．２に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．７に調整してから３’−アミノアセトフェノン自体による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例１５と同様に操作し、検量線を作成した。また、反応液について、３’−アミノアセトフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３１０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図２２に示す。図２２によると、作成した２種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６６】
実施例１７
（亜硝酸イオン溶液の調製）
亜硝酸イオン濃度が０．０、２．０、４．０、６．０および８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの５種類の亜硝酸イオン溶液を実施例１と同様の方法で用意した。
【００６７】
（検量線の作成）
用意した５種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ２．０ｍＬに対して３−アミノベンゾフェノンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．５ｇ／Ｌ）１．０ｍＬを添加し、さらに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．２ｍＬを添加してｐＨを１．２に設定した。この亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置した後、３−アミノベンゾフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ｂ）を測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図２３に示す。図２３によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６８】
実施例１８
ｐＨを１．２に調整した亜硝酸イオン溶液を２５℃で１０分間放置して反応させた後、反応液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．４ｍＬをさらに加えてｐＨを１２．７に調整してから３−アミノベンゾフェノン自体による発色波長である３３０ｎｍの吸光度（吸光度Ａ）を測定した点を除いて実施例１７と同様に操作し、検量線を作成した。結果を図２４に示す。図２４によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が０〜８．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲で高い直線性を示している。
【００６９】
比較例１
亜硝酸イオン濃度が０．０、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９および１．０ｍｇ［Ｎ］／Ｌの１１種類の亜硝酸イオン溶液を用意した。そして、各亜硝酸イオン溶液に対して日本工業規格 ＪＩＳ Ｋ ０１０２、工場排水試験方法（２００８）４３．１．１（非特許文献１）に規定されたナフチルエチレンジアミン吸光光度法を適用し、５４０ｎｍの吸光度と亜硝酸イオン濃度との関係を調べた。結果を図２５に示す。
【００７０】
図２５によると、亜硝酸イオン濃度の定量可能範囲は０〜０．３ｍｇ［Ｎ］／Ｌの範囲に止まり、本法で高濃度の亜硝酸イオンを定量することはできないことがわかる。
【００７１】
実験例
（実験１）
蒸留水２．５ｍＬ対してジアゾ化試薬であるｐ−ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液（濃度０．３ｇ／Ｌ）０．１５ｍＬを添加したジアゾ化試薬水溶液を４つ用意し、このうちの３つのそれぞれに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を０．０３ｍＬ、０．０６ｍＬおよび０．０９ｍＬ添加することで水素イオン濃度を０．０１１ｍｏｌ／Ｌ、０．０２２ｍｏｌ／Ｌおよび０．０３３ｍｏｌ／Ｌに調整した３種類の溶液を調製した。これらの溶液を２５℃で５分間放置した後、２９０〜４８０ｎｍの吸光スペクトルを測定した。結果を図２６に示す。図２６には、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を添加していないジアゾ化試薬水溶液のみについて同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。
【００７２】
（実験２）
実験１で用意したものと同様のジアゾ化試薬水溶液を４つ用意し、このうちの３つのそれぞれに１ｍｏｌ／Ｌ塩酸に替えて１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を０．０３ｍＬ、０．０６ｍＬおよび０．０９ｍＬ添加することでｐＨを７以上に調整した３種類の溶液を調整した。これらの溶液について、実験１と同様の条件で放置した後に吸光スペクトルを測定した。結果を図２７に示す。図２７には、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を添加していないジアゾ化試薬水溶液のみについて同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。
【００７３】
（実験３）
実験１と同様にして水素イオン濃度を調整した３種類の溶液を調製し、これらの溶液を２５℃で５分間放置した。その後、それぞれの溶液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．１５ｍＬを添加し、ｐＨをそれぞれ１２．６、１２．５および１２．３に調整した３種類の溶液を調製した。これらの溶液について、実験１と同様に吸光スペクトルを測定した結果を図２８に示す。図２８には、実験１で用意したものと同じジアゾ化試薬水溶液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液０．１５ｍＬのみを添加することでｐＨを１２．７に調整した溶液について、同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。
【００７４】
（実験１〜３の説明）
実験１に関する図２６は、吸光スペクトルを測定した溶液の水素イオン濃度が異なることで、ジアゾ化試薬であるｐ−ニトロアニリンの濃度が同じであっても極大吸収波長の吸光度が異なることを示している。より具体的には、溶液の水素イオン濃度が０．０１１ｍｏｌ／Ｌ増加する毎に、極大吸収波長の吸光度は約５％低下することを示している。これに対し、実験２に関する図２７は、ジアゾ化試薬水溶液に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を添加してｐＨを７以上に設定すれば、ｐ−ニトロアニリンの濃度が同じ溶液において極大吸収波長の吸光度に大きな変化が生じないことを示している。そして、実験３に関する図２８は、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を添加することで水素イオン濃度を高めた溶液は、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液の添加によりｐＨを７以上に調整してから吸収スペクトルを測定すると、極大吸収波長の吸光度に殆ど変化が生じないことを示している。
【００７５】
以上の結果より、検査水の亜硝酸イオンを吸光度Ａの測定により定量するときは、ジアゾ化試薬の反応後の検査水のｐＨを７以上に調整してから吸光度Ａを測定するのが好ましいものと考えられる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量方法であって、
前記検査水に対し、前記亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬を添加し、酸性下において反応させる工程１と、
工程１を経た前記検査水について、前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度および生成した前記ジアゾニウム塩による着色の吸光度のうちの少なくとも一つの吸光度を測定する工程２とを含み、
前記ジアゾ化試薬として、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群および３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群からなる群から選ばれた化合物を用いる、
亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項２】
前記芳香族第一級アミン化合物群は、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群とからなる、請求項１に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項３】
前記第１群が１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリンおよび２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンからなり、前記第２群が３’−アミノアセトフェノンおよび３−アミノベンゾフェノンからなる、請求項２に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項４】
前記３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群が３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンおよび２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンからなる、請求項１から３のいずれかに記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項５】
工程１において前記ジアゾ化試薬を前記第１群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項２または３に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項６】
工程１において前記ジアゾ化試薬を前記３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項１または４に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項７】
工程２の前に、工程１を経た前記検査水のｐＨが７より大きくなるよう調整する、請求項１から６のいずれかに記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項８】
工程１において前記ジアゾ化試薬を前記第２群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾニウム塩による着色の吸光度を測定する、請求項２または３に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項９】
工程２の前に、工程１を経た前記検査水のｐＨが７よりも大きくなるよう調整する工程をさらに含み、工程１において前記ジアゾ化試薬を前記第２群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項２または３に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項１】
検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量方法であって、
前記検査水に対し、前記亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬を添加し、酸性下において反応させる工程１と、
工程１を経た前記検査水について、前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度および生成した前記ジアゾニウム塩による着色の吸光度のうちの少なくとも一つの吸光度を測定する工程２とを含み、
前記ジアゾ化試薬として、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群および３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群からなる群から選ばれた化合物を用いる、
亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項２】
前記芳香族第一級アミン化合物群は、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第１群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第２群とからなる、請求項１に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項３】
前記第１群が１−アミノアントラキノン、２−ニトロアニリン、４−ニトロアニリン−２−スルホン酸ナトリウム、ｐ−ニトロアニリンおよび２−アミノ−３−ヒドロキシアントラキノンからなり、前記第２群が３’−アミノアセトフェノンおよび３−アミノベンゾフェノンからなる、請求項２に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項４】
前記３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群が３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オンおよび２−アミノ−３−クロロ−１，４−ナフトキノンからなる、請求項１から３のいずれかに記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項５】
工程１において前記ジアゾ化試薬を前記第１群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項２または３に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項６】
工程１において前記ジアゾ化試薬を前記３−アミノ−２−シクロヘキセン−１−オン骨格含有化合物群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項１または４に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項７】
工程２の前に、工程１を経た前記検査水のｐＨが７より大きくなるよう調整する、請求項１から６のいずれかに記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項８】
工程１において前記ジアゾ化試薬を前記第２群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾニウム塩による着色の吸光度を測定する、請求項２または３に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【請求項９】
工程２の前に、工程１を経た前記検査水のｐＨが７よりも大きくなるよう調整する工程をさらに含み、工程１において前記ジアゾ化試薬を前記第２群から選択し、かつ、工程２において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項２または３に記載の亜硝酸イオンの定量方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【公開番号】特開２０１２−１８５１４７（Ｐ２０１２−１８５１４７Ａ）
【公開日】平成２４年９月２７日（２０１２．９．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−２０２６１９（Ｐ２０１１−２０２６１９）
【出願日】平成２３年９月１６日（２０１１．９．１６）
【出願人】（０００１７５２７２）三浦工業株式会社 (1,055)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年９月２７日（２０１２．９．２７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年９月１６日（２０１１．９．１６）
【出願人】（０００１７５２７２）三浦工業株式会社 (1,055)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]