伝染性気管支炎の治療用組成物および方法
【解決手段】 伝染性気管支炎の予防的治療、及び伝染性気管支炎の治療に関する。本方法は、ターメリックから得られる第１の成分と、緑茶から得られる第２の成分と、生姜から得られる第３の成分と、許容可能な担体とを有する一定量の組成物をトリに投与する工程を含むものである。本発明による組成物は、伝染性気管支炎の発症の軽減、または伝染性気管支炎の伝染性の軽減の目的に利用可能である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、伝染性気管支炎の治療、または発症を軽減させる方法に関するものである。より具体的には、本発明はトリの伝染性気管支炎の治療または発症の軽減、及び伝染性気管支炎の伝染性を軽減する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
伝染性気管支炎は、コロナウイルスによって引き起こされ、急性で極めて接触感染性の高い、ニワトリに感染する呼吸器系疾患である。最も接触感染性の高い家禽の疾患の１つと考えられており、このウイルスは、感染したニワトリ、またはトリ籠、器具、および鶏舎などの汚染表面との直接接触によって蔓延する可能性がある。伝染性気管支炎は、特に若い家禽において高い死亡率を有する。感染したニワトリは、息切れ、咳嗽といった重度の呼吸器症状、卵管の障害による産卵の減少、および／または感染の結果として生じるストレスに苦しめられる。さらに、伝染性気管支炎は、潜在的なウイルスまたは細菌感染を活性化し、特にブロイラー業界は重大な経済的損失をもたらす。現在のところ、この疾患の有効な治療方法は知られていない。
【０００３】
伝染性気管支炎に有効であるものとして、不活性化ウイルスおよび／または生ウイルス由来のワクチンの利用が周知である。しかし、不活性化およびまたは生ウイルスの投与によって、多くの問題が頻繁に生じる。いくつかのケースでは、ホルマリンおよび紫外線といった不活性化物質による伝染性気管支炎ウイルスの不活性化後に、免疫特性の喪失が起こる可能性がある（Ｍ．Ｓ．Ｈｏｆｓｔａｄ，Ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ Ｐｏｕｌｔｒｙ，Ｂｉｅｓｔｅｒ ａｎｄ Ｓｃｈｗａｒｔｅ，Ｉｏｗａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｐｒｅｓｓ．Ａｍｅｓ（１９６５），６１５）。生存、非弱毒化、または軽微に弱毒化したウイルスワクチンによる１次ワクチン接種によって、健康なニワトリが死亡または罹患する可能性もある。生後２または３週間の動物および現在または近々産卵を始めるニワトリには、特に危険がある。
【０００４】
他のワクチン接種の形態では、マサチューセッツ株および特にＩＢＶ Ｗ４８，Ｍ４１、および８２８２８株、更に例えばＡ ５９６８株などのコネチカット分離株に由来する、２５若しくはそれ以上の胚を経由することでそれらの病原性を軽減したウイルス、修飾生ウイルスワクチンを利用する。しかし、それらのウイルスの免疫能力は、特定の伝染性気管支炎ウイルス株に対して特異的である。従って、前記ワクチンは、ウイルスの抗原性変異に対してトリを免疫することが不可能であり（Ａｒｃｈｉｖ ｆｕｒ ｄｉｅ Ｇｅｓａｍｔｅ Ｖｉｒｕｓｆｏｒｓｃｈｕｎｇ ３４，ｐ．３２（１９７１）、およびＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ Ｃ．Ｈ．Ｄｅｖｅｌｏｐ．Ｂｉｏｌ．Ｓｔａｎｄａｒｄ，３３ ｐ．３１１（１９７６））、大発生を有効に回避することは不可能である（Ａｖｉａｎ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｖｏｌ．２０，Ｎｏ．１，ｐａｇｅｓ４２ ａｎｄ １７７（１９７６）、およびＡｖｉａｎ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．２，ｐａｇｅｓ３２３ａｎｄ５８３（１９７５））。
【０００５】
さらに、ＩＢＶ株の異なる血清型に対応するＩＢＶ株由来の混合ワクチンを利用した家禽のワクチン接種は、相互作用によってそれぞれの元のウイルスへの免疫特性を減少させる（Ａｍ．Ｊ．Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．３６，４，５２４ ａｎｄ ５２５（１９６５）およびＡｖｉａｎ Ｄｉｓｅａｓｅｓ １２，５７７（１９６８））。
【０００６】
このような一般的な問題を受けて、ウイルスに基づかない治療方法の開発のための研究を行ってきた。米国公開特許第２００３／０１８５９１２号および第２００５／０１４７６９７号など、ターメリック、緑茶、生姜、およびセイヨウワサビから成る組成物の抗ウイルス特性を述べる、数少ない参考文献は存在するものの、そうした文献は伝染性気管支炎の治療方法は開示していない。
【０００７】
従って、伝染性気管支炎の治療、発症の軽減、または伝染性を軽減する方法が必要である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、伝染性気管支炎の治療、伝染性気管支炎の発症の軽減、伝染性気管支炎の伝染性を軽減する方法を対象とする。
【０００９】
第１の態様において、本発明は、伝染性気管支炎の発症および／または伝染性を軽減する組成物の予防的利用方法に関連する。前記方法は、伝染性気管支炎ウイルスに曝露した、曝露したであろう、または曝露するトリへの、ターメリックから得られる第１の成分および緑茶から得られる第２の成分を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。組成物を投与することにより、伝染性気管支炎ウイルスの発症および／または伝染性が軽減した場合、組成物の量は有効である。
【００１０】
本発明の第２の態様において、ターメリックから得られる第１の成分および緑茶から得られる第２の成分を含む組成物は、伝染性気管支炎の治療に有効な量の前記組成物を投与によって伝染性気管支炎に感染したトリを治療するために用いられる。
【００１１】
本発明の第３の態様は、ターメリックから得られる第１の成分、緑茶から得られる第２の成分、および許容可能な賦形剤を含む、エアロゾル、スプレー、霧、液体組成物に関するものである。前記エアロゾル、スプレー、霧、液組成物は、伝染性気管支炎の治療として投与する、または例えばトリへのスプレーまたは噴霧など、エアロゾルまたは液組成物に適切なあらゆる標準的技術を用いて予防的にトリへ投与することが可能である。
【００１２】
第４の態様において、本発明は、ターメリックから得られる第１の成分および緑茶から得られる第２の成分を含む動物飼料に関するものである。
【００１３】
これらおよび他の様々な利点および本発明を特徴付ける新規性の特性は、本明細書に添付し、その一部を形成する請求項において詳細に指摘する。しかしながら、本発明、その利点、およびその利用により得られる対象物をより良く理解するためには、本発明の好ましい実施形態を記述した添付文書への参照がなされるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞中での伝染性気管支炎ウイルス（ＩＢＶ）Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株の生存率に対する組成物１の効果を示した細胞濃度に対する希釈対数を示すグラフである。
【図２】図２は、胚含有卵中でのＩＢＶ Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株の生存率に対する組成物１の効果を表す、細胞濃度に対する希釈記録を示すグラフである。
【図３】図３の左パネルは、組成物１の１×１０−３希釈で処理したＩＢＶへ曝露後、細胞変性効果（ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ：ＣＰＥ）を示さない細胞を表した写真であり、右パネルは、プラシーボの１×１０−３希釈で処理したＩＢＶへ曝露後、ＣＰＥを示す細胞を表した写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
一態様において、本発明は、伝染性気管支炎ウイルス（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ：ＩＢＶ）の罹患および伝染の事例を軽減する組成物の予防的利用方法に関連する。当該方法は、ターメリックから得られる第１の成分、緑茶から得られる第２の成分、および選択的に許容可能な担体を有する組成物の一定量を伝染性気管支炎に曝露した、または曝露するトリに投与する工程を有する。前記組成物の量は、投与した場合、伝染性気管支炎の発症および／または伝染の発生を軽減するのに有効な量である。
【００１６】
他の一態様では、本発明は、ターメリックから得られる第１の成分、緑茶から得られる第２の成分、および選択的に許容可能な担体を有する組成物の有効量を投与することにより、伝染性気管支炎に感染したトリを治療する方法に関連する。前記組成物の量は、投与した場合に、伝染性気管支炎ウイルスを治療するのに有効な量である。
【００１７】
本発明の方法に用いる組成物は、ターメリックから得られる第１の成分、および緑茶から得られる第２の成分を含むものであっても良い。本発明の組成物の選択的且つ更なる有効成分として、生姜および／またはセイヨウワサビから得られる成分を含むことも可能である。
【００１８】
本願明細書で用いられる場合、「許容可能な（ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」という用語は、トリに対して過度の不都合な副作用（毒性、炎症、アレルギー反応など）がなく、適度な危険性／利点の比と釣り合いのとれた使用に適した成分を意味する。
【００１９】
さらに、本願明細書で用いられる場合、「安全かつ有効な量（ｓａｆｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｍｏｕｎｔ）」という用語は、本願明細書で記述した方法で利用した場合に、過度の副作用（毒性、炎症、アレルギー反応など）がなく、適度な危険性／利点の比と釣り合いのとれた所望の治療反応を得るために十分な成分の量について言及する。
【００２０】
本願明細書で用いられる場合、「抑制する（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ）」という用語は、伝染性気管支炎ウイルス株のさらなる成長を軽減または予防する、または正常細胞への伝染性気管支炎ウイルス株の付着を予防する、および／または処理したヒトまたは動物から一部または全ての感染粒子を除去する、ことについて言及する。ウイルス抑制の適切な測定方法は、実施例において議論する。
【００２１】
本願明細書で用いられる場合、「伝染性（ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｖｉｔｙ）」または「伝染性の（ｔｒａｎｓｍｉｔｔｉｎｇ）」という用語は、１つの宿主から他への微生物の移動に言及するものである。
【００２２】
本発明で用いられる全ての活性化合物は、入手可能であれば、他の材料から得ることが可能である。従って、「から得ることが可能な」または「から得ることができる」という語句は、ターメリック、緑茶、生姜、またはセイヨウワサビから得られる化合物または組成物を包含し、従って同一の化合物および／または組成物の合成形態も包含し、さらには他の材料から得られる同一の化合物および／または組成物もまた包含することを意味する。
【００２３】
第１の実施形態において、本発明の組成物は、本願明細書に記述する１若しくはそれ以上の有益な効果を提供するために安全かつ有効な量の、ターメリックから得られる第１の成分、および緑茶から得られる第２の成分を含む。
【００２４】
本発明の組成物の第１の成分はターメリックから得ることが可能であり、本願明細書に記述する１若しくはそれ以上の有益な効果を提供するために安全且つ有効な量で使用される。ターメリック（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ（Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ））またはヒンディー語でＨａｌｄｉと呼ばれるものは、薬物としてだけでなく、インド料理の一般的材料としても非常に広く用いられている。ターメリックの根茎は微粉として、薬物および食品に用いられる。
【００２５】
ターメリック根茎の黄色い色素は、クルクミノイドとして知られる３つの化合物から成る。３つのクルクミノイドは、クルクミン（ジフェルロイルメタン）、デスメトキシクルクミン（ヒドロキシシンナモイルフェルロイルメタン）、およびビス−デスメトキシクルクミン（ジヒドロキシジシンナモイルメタン）である（Ｄｒｕｇ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎｄ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ｐ．１６９，Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｉｎｃ．，１９７３ を参照のこと）。ターメリック（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ（Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ））の精油は、主として以下の化合物から成る：ｄ−ショウノウ（約１％）、環状イソプレンミルセン（約８５％），およびｐ−トリルメチルカルビノール（約５％）、（Ｅ．Ｇｕｎｔｈｅｒ，Ｔｈｅ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｏｉｌ，ｐｐ．１２３〜４、Ｖａｎ Ｎｏｓｔｒａｎｄ Ｃｏ．，１９５５を参照）。
【００２６】
ターメリックから得られる本発明の組成物の成分は、好ましくは、クルクミン（ジフェルロイルメタン）、デスメトキシクルクミン（ヒドロキシシンナモイルフェルロイルメタン）、およびビス−デスメトキシクルクミン（ジヒドロキシジシンナモイルメタン）といったクルクミノイド、およびそれらクルクミノイドの２若しくはそれ以上の混合物を含む。
【００２７】
ターメリックからのクルクミノイドの単離方法は既知である（Ｊａｎａｋｉ ａｎｄ Ｂｏｓｅ，Ａｎ Ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍｉｎ Ｆｒｏｍ Ｔｕｒｍｅｒｉｃ，Ｊ．Ｉｎｄｉａｎ Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．４４：９８５，１９６７ を参照のこと）。あるいは、本発明に用いるクルクミノイドは、合成方法によって調製可能である。
【００２８】
ターメリックから得られる成分は、あらゆる異なる形態において本発明の組成物に組み入れることが可能である。それら異なる形態は、好ましくは、ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、Ａｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）Ｔｕｒｍｅｒｉｃ、Ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ（登録商標）Ｔｕｒｍｅｒｉｃ、といったターメリック抽出物、１若しくはそれ以上のクルクミノイド化合物、およびターメリック粉末、ターメリックの植物全体または一部、それらのチンキ剤、およびそれらの混合物を含む。より好ましくは、ターメリックから得られる第１の成分は、ターメリック抽出物である。
【００２９】
ターメリックから得られる成分を用いる場合、本発明の組成物の１グラム当たりには、好ましくは、約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇのターメリック粉末抽出物などターメリックから得られる成分を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約１５ｍｇのターメリック粉末抽出物などターメリックから得られる成分を含む。
【００３０】
それらの範囲は、摂取製剤であるＴｕｒｍｅｒｉｃ Ｅｘｔｒａｃｔ ９５％，ｅｘ． Ｐｈａｒｍｌｉｎｅ，Ｉｎｃ．、およびスプレー製剤であるＴｕｒｍｅｒｉｃ Ｒｏｏｔ Ｅｘｔｒａｃｔ（Ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ（登録商標）Ｔｕｒｍｅｒｉｃ），ｅｘ．Ｋａｌｓｅｃ，Ｉｎｃ．，ミシガン州Ｋａｌａｍａｚｏｏ．、の利用に基づいたものである。
【００３１】
本発明の組成物の第２の成分は、緑茶から得ることができる。緑茶から得られる第２の成分は、抗酸化作用を有する可能性がある。緑茶は、カメリアシネンシス潅木の乾燥葉および葉芽である。それは主に、中国および日本で生産されている。乾燥茶葉は主に、ポリフェノール（約３６％）として知られる植物化学物質、主にフラボノール（カテキンを含む）、フラボノイド、およびフラボンジオールから成る。葉は、カフェインを含めた植物アルカノイド（約４％）、テオブロミン、およびテオフィリンもまた含む。
【００３２】
緑茶の薬理活性は主にその活性化合物によるものである。本発明において有用な緑茶の活性化合物は、これらに限定されないが、フラボノール、カテキン、フラボノイド、フラボンジオール、植物アルカロイド、カフェイン、テオブロミン、テオフィリン、フェノール酸、タンパク質、炭水化物、およびミネラルを含む。
【００３３】
緑茶から得られる第２の成分は、緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、および１若しくはそれ以上の緑茶活性化合物といった緑茶抽出物、緑茶の植物全体または一部、緑茶葉、それらのチンキ剤、またはそれらの混合物の形態において組成物に含有させることが可能である。好ましくは、本発明の組成物の第２の成分は、緑茶葉、緑茶粉末、および緑茶抽出物から選択する。より好ましくは、本発明の組成物の第２の成分は、緑茶抽出物である。
【００３４】
本発明の組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶抽出物などの緑茶から得られる成分を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約１５ｍｇの緑茶抽出物など緑茶から得られる成分を含む。それらの範囲は、摂取製剤であるＧｒｅｅｎ Ｔｅａ，ｅｘ．Ｓｔｒｙｋｅｒ Ｂｏｔａｎｉｃｓ、およびスプレー製剤であるＧｒｅｅｎ Ｔｅａ Ｅｘｔｒａｃｔ，ｅｘ．Ｐｈｙｔｏｗａｙ，Ｉｎｃ，Ｃｈａｎｇ Ｓｈａ，Ｐ．Ｒ．中国、の利用を基準として用いた。
【００３５】
本発明の組成物の選択的な成分は、安全且つ有効な量を生姜から得ることが可能である。南アジア原産の生姜は、長さ１フィートおよび幅約１インチの草状葉を生じる２〜４フィートの多年生植物である。食品店では生姜の根と呼ばれているが、実際は植物の地下茎から成り、樹皮状の外皮を削り取ったものである。
【００３６】
本発明に使用する生姜の活性化合物は、これらに限定されないが、１，８−シネオール、１０−デヒドロジンゲジオン、１０−ジンジェロール、６−ジンゲジオン、６−ジンジェロール、６−ショウガオール、８−ベータ−１７−エポキシ−λ−トランス−１２−エン−１５，１６−ジオール、８−ジンジェロール、８−ショウガオール、９−オクソ−ネロリドール、アセトアルデヒド、酢酸、アラニン、アルファ−リノレン酸、アルファ−リノレン酸、アルファ−フェランドレン、アルファ−ピネン、アルファ−テルピネン、アルファ−テルピネオール、アルファ−ジンギベレン、芳香クルクメン、アルギニン、アスコルビン酸、アスパラギン、ベータ−ビサボロール、ベータ−カロチン、ベータ−エレメン、ベータ−ユーデスモール、ベータ−イオノン、ベータ−ミルセン、ベータ−フェランドレン、ベータ−ピネン、ベータ−セリネン、ベータ−セスキフェランドレン、ベータ−シトステロール、ベータ−ツジョン、酢酸ボルニル、ホウ素、コーヒー酸、カルシウム、カンフェン、ショウノウ、カプリン酸、カプリル酸、カプサイシン、カリオフィレン、カビコール、クロロゲン酸、クロム、シトラール、シトロネラル、シトロネラル、コバルト、銅、クメン、クルクミン、シスチン、デルフィニジン、デルタ−カジネン、エレモール、酢酸エチル、ミリスチン酸エチル、ファルネサール、ファルネセン、フェルラ酸、フルフラール、ガンマ−アミノ酪酸、ガンマ−テルピネン、ゲラニアール、ゲラニオール、酢酸ゲラニル、ｇｉｎｇｅｒｅｎｏｎｅ、グルタミン酸、グリシン、ヘキサハイドロクルクミン、ヒスチジン、ｉｓｏｇｉｎｇｅｒｅｎｏｎｅ−Ｂ、イソロイシン、ケンペロール、レシチン、リモネン、リノール酸、マグネシウム、マンガン、メチオニン、ｍｕｆａ、ミルセン、ミリセチン、ミリスチン酸、ネラール、ネロール、ネロリドール、ナイアシン、ニッケル、オレイン酸、シュウ酸、ｐ−クマル酸、ｐ−シメン、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、パルミチン酸、パントテン酸、パラドール、ｐａｔｃｈｏｕｌｉｃ ａｌｃｏｈｏｌ、フェニルアラニン、ケルセチン、リボフラビン、セレン、シキミ酸、テルピン−４−オール、チアミン、トリプトファン、バニリン酸、バニリン、亜鉛、およびジンゲロン、を含む。また、それら活性化合物の２若しくはそれ以上の混合物もまた使用可能である。
【００３７】
生姜は、本発明の組成物に対して多くの異なる形態で取り込むことが可能であり、前記異なる形態は、生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物を含む生姜抽出物といった抽出物、生姜根粉末、Ａｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒ、生姜含油樹脂を含む生姜粉末、および生姜の１若しくはそれ以上の活性化合物、生姜の植物全体、または一部、それらのチンキ剤、およびそれらの混合物を含む。好ましくは、本発明の組成物の選択的な成分は、生姜抽出物、および生姜粉末から選択される。
【００３８】
本発明の組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇの生姜抽出物などの生姜から得られる成分を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約２０ｍｇの生姜抽出物などの生姜から得られる成分を含む。それら使用量の範囲は、摂取製剤であるＧｉｎｇｅｒ Ｒｏｏｔ Ｐｏｗｄｅｒ，ｅｘ．Ｓｔｒｙｋａ Ｂｏｔａｎｉｃｓ、およびスプレー製剤であるＧｉｎｇｅｒ Ｅｘｔｒａｃｔ Ｋ（Ａｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒ），ｅｘ．Ｋａｌｓｅｃ，Ｉｎｃ．，ミシガン州Ｋａｌａｍａｚｏｏの利用を基準として用いた。
【００３９】
様々な成分の量は、成分、すなわち生姜根抽出物の１つの形態に関して本願明細書にを定めている。その成分が別の形態で存在する場合、用いられる量は、本願明細書で定めるその成分の量と同量の１若しくはそれ以上の活性化合物を提供するだけの量である。
【００４０】
また、本発明の組成物は、本願明細書で記述する１若しくはそれ以上の有益な効果を提供するだけの安全かつ有効な量のセイヨウワサビから得られる１若しくはそれ以上の成分を含むことが可能である。セイヨウワサビから得られる選択的な成分は、Ｃｏｃｈｌｅａｒｉａ Ａｒｍｏｒａｃｉａからの抽出物を含むものであっても良い。セイヨウワサビから得られる成分は、例えばセイヨウワサビ粉末抽出物、セイヨウワサビ液体抽出物といったセイヨウワサビ抽出物、およびセイヨウワサビ油といったセイヨウワサビ根抽出物、の形態とすることができる。セイヨウワサビは、マスタードに見られるのと同様な揮発性油を含む。それらは、グルコシノレート（からし油配糖体）、グルコナストルチイン、および胃中で分解した場合にイソチオシアン酸アリルを生成するシニグリンを含む。本発明の組成物は、組成物１グラム当たりに、好ましくは、約０．０００１ｍｇ〜１０ｍｇの、セイヨウワサビ油といったセイヨウワサビから得られる成分を含み、より好ましくは、本発明の組成物は、組成物１グラム当たりに、０．００１ｍｇ〜５ｍｇの、セイヨウワサビ油といったセイヨウワサビから得られる成分を含む。
【００４１】
エタノール、プロピレングリコール、およびグリセリン、およびそれらの様々な組合せを本発明の液組成物中に選択的に、選択的な成分の総重量で約１０％まで含有させることが可能である。最も好ましくは、選択的な成分として、総重量の約１０％までのエタノールを添加する。よりさらに好ましくは、２．５〜７％エタノールを添加する。
【００４２】
好ましくは、ターメリックおよび緑茶、および選択的に、生姜および／またはセイヨウワサビに由来する上述の成分が、組成物の総重量の約０．００１〜約９０％を構成する。より好ましくは、主要成分が、組成物の総重量の約０．０１〜約２０％を構成する。最も好ましくは、主要成分が、組成物の総重量の約１〜約１０％を構成する。
【００４３】
上述したターメリック、生姜、および緑茶から得られる成分を含む、組成物の非担体成分は、組成物の意図する利用法の有効性に大幅に影響しない範囲で、組成物中に用いる担体の量に依存して、本発明の組成物中で比例的に増減することが可能である。
【００４４】
本発明の組成物中に用いることができる、例えば、ターメリック抽出物、生姜抽出物、緑茶抽出物、およびセイヨウワサビ抽出物などの植物抽出物は、一般的な抽出手順を用いて作成できる。あるいは、抽出物は、ｔｈｅ Ｋａｌｓｅｃ，Ｉｎｃ．ミシガン州Ｋａｌａｍａｚｏｏ．など商業的供給源から購入できる。
【００４５】
上述のいずれかの植物からの便利で投与可能な剤形中の薬理学的または生物学的に活性な植物抽出物の調製手順は、当該技術分野で周知である。
【００４６】
本発明の組成物は、伝染性気管支炎ウイルスの様々な株のトリ間での感染性および伝染性を抑制し、それによってトリ間での感染発生を軽減するために利用することができる。前記組成物は、伝染性気管支炎の治療、およびそれによって伝染性気管支炎に関連した症状を和らげるための、治療組成物として用いることもまた、できる。
【００４７】
本発明の組成物の安全かつ有効な量は、伝染性気管支炎に曝露された、または曝露されるトリへ投与して、伝染性気管支炎ウイルスに曝露された、または曝露されるトリでの、前記疾患の発症を軽減することができる。
【００４８】
好ましくは、本発明の組成物は、限定するわけではないが、トリの餌などの動物飼料、粉末、スプレー、鼻腔用スプレー、点鼻薬、懸濁液、溶液、注射、または大量予防接種のあらゆる標準的形態を含む、あらゆる許容可能な剤形で製剤化することができる。本発明の組成物は、本発明の組成物が栄養補給剤となりうる場合、または追加的成分を含む栄養補給剤の一部をなすことができる場合には、栄養補給剤の形態で投与することもまた、できる。
【００４９】
本発明の錠剤は、形状、サイズ、および製造技術において異なることができる。錠剤の場合、経口での利用では、許容可能な担体は乳糖、およびコーンスターチをさらに含むことができる。例えば、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルクを含む、平滑剤を錠剤へ添加することもまた、できる。錠剤は、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、およびリン酸カルシウムなどの賦形剤を含むこともまた、できる。澱粉、アルギン酸、および複合ケイ酸塩などの崩壊剤もまた、利用できる。錠剤は、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ＰＥＧ−８０００、およびアカシアゴムなどの結合剤もまた含むことができる。
【００５０】
あるいは、本発明の組成物は、水、またはそれ以外の液体などの溶媒または分散剤によって、シロップ、溶液、液剤、霧、またはスプレーといった液状形態で、および選択的に、持続的な期間において前記組成物を口腔および口腔咽頭粘膜へ繰り返し投与するための、薬理学的に許容できる担体中で、製剤化することができる。好ましくは、口腔、鼻咽頭および咽喉組織への組成物の長期間の接触を許すために、治療時間は約５〜６０分間、より好ましくは約２０〜３０分間とする。あるいは、そうした製剤は、使用前に、水または他の材料で希釈するのに適する濃縮形態とすることが可能である。
【００５１】
本発明の組成物は、許容可能な担体と共に製剤化することも可能である。許容可能な担体は、これらに限定されないが、（ａ）グリセリン、（ｂ）エタノール、（ｃ）リン脂質、（ｄ）ＭＣＴ ｏｉｌ、（ｅ）水、および（ｆ）澱粉、セルロース、シクロデキストリン、二酸化ケイ素、および脂質／油脂を含む、比較的に不溶性の適切な賦形剤を含有させることが可能である。
【００５２】
組成物は、動物飼料の成分および／または食品添加物などとして、チュアブル形態（ｃｈｅｗａｂｌｅ ｆｏｒｍｓ）で製剤化することも可能である。あるいは、本発明の組成物は、希釈剤の有無に関わらずカプセル形態で製剤化することも可能である。カプセルに有用な希釈剤は、乳糖および乾燥コーンスターチを含む。懸濁液を利用する場合は、懸濁液中に、乳化および／または懸濁剤を用いることが可能である。更に、上述のトローチ剤の１若しくはそれ以上の成分を含む固体組成物は、ソフトおよびハード・ゼラチンカプセルに用いることができる。
【００５３】
本発明の組成物は、エアロゾルまたは吸入組成物として製剤化することも可能である。そうした組成物は、周知の技術を用いて調製することができる。それらのタイプの製剤では、適切な担体は以下の成分、すなわち１若しくはそれ以上の防腐剤を含む生理食塩水、生物学的利用能を高める吸収促進剤、フッ化炭素、および／または標準的な可溶化または分散剤を含有させることが可能である。
【００５４】
組成物は、既知のあらゆる標準的デリバリー方法を用いて投与することも可能である。組成物は、水または溶液の添加物として製剤化することができる。さらに、組成物はインオボ（ｉｎ ｏｖｏ）で投与することが可能である。
【００５５】
本発明の組成物に選択的に含ませることが可能な他の材料は、レスベラトロル（トリヒドロキシスチルベン）、イノシトール、他のビタミンＢ複合体、および追加的な抗炎症剤、を含む。また、甘味剤、フレーバラント、着色剤、染料、防腐剤、乳化剤、懸濁剤、溶融剤、賦形剤、鎮痛剤、および水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリンといった溶剤または希釈剤、およびそれらの様々な組合せなどの成分を本発明の組成物へ含ませることができる。伝染の軽減または抑制は、（感染した）トリから（未感染の）他のトリへの微生物の拡大の抑制または軽減に関連する。一部のトリは感染の保菌者と考えることができる。保菌者は、伝染性気管支炎の微生物を活発に撒き散らすが、急性感染を被ることはない個体である。それら保菌者は、伝染性気管支炎の株で、持続（または慢性的）感染を受けたと言うことができる。持続感染を受けた感染源に加えて、感染した他のトリは、活動性感染するもの、および特に、急性感染の初期または後期に当たるものである。本発明の一態様は、他のトリへの疾病の拡大を防ぐための、伝染性気管支炎の株に感染したトリへの、本発明の組成物の投与に関連する。
【００５６】
予防治療は、伝染性気管支炎に間もなく曝露される、または伝染性気管支炎ウイルスに最近すでに曝露されたトリに対して、活動性感染の事例を軽減する目的で行うものである。そういった予防治療は、単独またはワクチンへの追加としてのいずれでも有効であろう。本発明の予防治療は、ワクチンが未だ入手不可能な伝染性気管支炎のウイルス株に対しても用いることができる。
【００５７】
本発明は、例えば、疾病の持続期間、死亡率、または有害影響の軽減による疾病の治療のための、伝染性気管支炎に感染したトリの治療方法にも関連する。本発明は、ウイルス感染の少なくとも１つの症状または有害影響を、軽減、治療、和らげる、または少なくとも部分的に抑制することが可能である。そうした症状は、エネルギー欠乏、産卵の減少、卵殻の脆弱化、鼻の腫れ、鼻汁、咳嗽、くしゃみ、囀り、下痢、気管の雑音、眼の濡れ、および腹部の水分蓄積を含む。
【００５８】
当該組成物は、一般的な商業用家禽類であるニワトリ、七面鳥、アヒル、およびガチョウ、一般性がやや低いものとしては、ダチョウ、それらに加えて例えばカナリアおよびオウムなど一般的にペットとして飼育されている他の鳥類を含む鳥類のあらゆる種類に投与可能である。
【００５９】
当該組成物は、トリの鼻道に当該組成物を直接的にスプレーすること、及びトリの口腔に当該組成物をスプレーすることによって投与することが可能であり、またはトリに曝露される霧を発生することにより当該組成物を投与することが可能である。従って、当該組成物は、殺ウイルス性またはウイルス増殖抑止として作用させることによって、予防的に与えることができる。あるいは、当該組成物は、ウイルスの伝染性を軽減するために用いることができる。
【００６０】
当該組成物の有効量は、治療対象、投与の特定の方式、利用する特定の有効成分の活性、日齢、体重、健康状態、トリの性別および食習慣、投与の時間、排泄速度、利用する成分の特定の組合せ、組成物の主成分の総含量、および疾病または症状の重篤性、などの要因に依存して変化する。それら要因を説明するのは、当業者における１つの技量の範囲内である。
【００６１】
当該組成物は、必要に応じて１日当たり約１〜１５回、より好ましくは、必要に応じて１日当たり約２〜１２回、または最も好ましくは、必要に応じて１日当たり約６〜１０回、投与することが可能である。本発明の組成物は、上述した通り、限定されないが、錠剤、カプセル、粉末、口腔スプレー、鼻腔用スプレー、チュアブル組成物（ｃｈｅｗａｂｌｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ）、懸濁液、溶液、およびインオボ投与、を含めて許容可能なあらゆる剤形で投与することができる。
【００６２】
当該組成物のそれぞれの用量は、本発明の組成物の安全かつ有効な量を含む。各治療のための投与の有効量は、ターメリックおよび緑茶から得られる成分を総量で約０．００１ミリグラム〜約１グラムまでを含む。より好ましくは、各治療のための投与の有効量は、ターメリックおよび緑茶から得られる成分を総量で約０．０１ミリグラム〜約０．５グラムまでを含む。
【００６３】
当該組成物を飼料または水の添加物として投与する場合は、飼料または水の添加物中の有効成分の量は、飼料全体の組成の約０．０１〜５０重量％の範囲とすることができる。好ましい一実施形態では、前記有効成分は、飼料全体の組成の約０．１〜約３０重量％を構成し、最も好ましい一実施形態では、前記有効成分は飼料全体の組成の約１〜約２０重量％を構成する。前記有効成分は、ターメリックからの成分、緑茶からの成分、生姜からの成分、および／またはセイヨウワサビからの成分を含む。
【００６４】
当該組成物をスプレーとして投与する場合、例えばトローチ剤またはカプセルと比較して、スプレー組成物は前記有効成分をそれらが必要とされる場所により直接的に輸送するため、各有効成分の量は低減することができる。当該組成物は、水または他の適切な希釈剤で、あらゆる所望の濃度まで希釈することができる。希釈組成物は、水または他の希釈剤の約０．１重量％〜約９９．９９９重量％のいずれの値も含有させることが可能であり、より好ましくは、水または他の希釈剤の約１０重量％〜約４０重量％、および最も好ましくは水または他の希釈剤の約１０重量％〜約３０重量％である。
【００６５】
以下の好ましい範囲は、本発明の方法に従った、スプレー製剤での投与に適した本発明に従った組成物を規定する。
【００６６】
本発明の方法に従ったスプレーによって投与する組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約１２ｍｇの、可溶性ターメリック含油樹脂などのターメリック抽出物を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約９ｍｇの、可溶性ターメリック含油樹脂などのターメリック抽出物を含む。本発明の方法に従ったスプレーによって投与する組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶葉抽出物などの緑茶抽出物を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たりには、約０．０１ｍｇ〜約１５ｍｇの緑茶葉抽出物などの緑茶抽出物を含む。
【００６７】
本発明の方法に従ったスプレーによって投与する組成物の選択的な実施形態の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約１０ｍｇのＡｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒなどの生姜抽出物を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約７ｍｇのＡｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒなどの生姜抽出物を含む。
【００６８】
選択的に、組成物の１グラム当たり、約０．０００１ｍｇ〜約１ｍｇのセイヨウワサビ根抽出物、より好ましくは約０．００１ｍｇ〜約２ｍｇのセイヨウワサビ根抽出物、および最も好ましくは約０．５ｍｇ〜約１ｍｇのセイヨウワサビ根抽出物も含有する。
【００６９】
器具に付着するＩＢＶのあらゆる株の一部または全てを不活性化するために、トリへ組成物を投与するのに用いるあらゆる器具を消毒および／または滅菌する組成物の有効量を用いることもまた可能である。器具を消毒するために、組成物をあらゆる器具または機器の表面へ局所的に適用できる。
【００７０】
本発明は以下に与える実施例によってさらに説明されるが、前記実施例は本発明を限定するものとは決して解釈すべきでない。本発明の範囲は、本願明細書に添付する請求項によって決定されるべきである。
【００７１】
実施例
【実施例１】
【００７２】
【表１】
【００７３】
スプレー、霧、エアロゾル、または液組成物などとしての様々な適用に使用する、より希薄な組成物を提供するためには、製剤を水または他の適切な希釈剤で１〜１３００倍に希釈することができる。
【実施例２】
【００７４】
様々な用量および投与経路を用いて、ニワトリの伝染性気管支炎を治療するために、実施例１で開示した組成物１の安全性および許容性の実験を行った。その結果、組成物１は、家禽の給水への液体添加物、点鼻薬製剤への液体添加物、家禽飼料への固体添加物として有効で適切であることが示された。
【００７５】
１３２羽の約７日齢の白色レグホン種ニワトリを１１グループに分け、表１（ａ）〜１（ｃ）に対応する様々な形態および濃度の組成物１を投与し、その後に伝染性気管支炎ウイルスへ曝露した。
【００７６】
【表１ａ】
【００７７】
【表１ｂ】
【００７８】
【表１ｃ】
【００７９】
各トリ籠にニワトリを３羽ずつ入れた。トリ籠は華氏約８５度および相対湿度６５％に維持した。それらへ毎日、白色光を連続１６時間、続いて暗闇を８時間提供した。
【００８０】
組成物１に対するニワトリの許容性および毒性を決定するために、ニワトリを観察した。各グループによって消費された水および飼料の量を評価し、ニワトリ各個体の体重を定期的に測定した。
【００８１】
組成物１を点鼻薬の形態で投与したニワトリについては、飼料および水で投与したグループと平行して、４日間の投与の間、１日４（４）回、各鼻孔へ１（１）滴ずつ点鼻薬を投与した。点鼻薬は朝２回、各投与の間隔を約１時間空けて行い、午後／夕方に２回、やはり各投与の間隔を約１時間空けて行った。この鼻孔投与スケジュールは、朝または午後に立て続けに１時間より短い間隔で投与しない限り、１日当たり各鼻孔に全部で４滴を投与するならば柔軟に変更可能である。点鼻薬は、２０滴／ｍｌ、または１滴当たり５０マイクロリットルを含む標準的なボトル型点眼器を用いて投与した。
【００８２】
組成物１を飼料添加物として投与したニワトリについては、飼料添加物を４日の期間提供した。２４羽のニワトリの１グループへは、高用量の飼料添加物を与えた。他の２４羽のニワトリの１グループへは中用量を、他の２４羽のニワトリの１グループへは低用量を与えた。飼料および水は、４日間定期的に随意、提供した。
組成物１を水分添加物として投与したニワトリについては、水分添加物を４日の期間提供した。２４羽のニワトリの１グループへは、高用量の水分添加物を与えた。他の２４羽のニワトリの１グループへは中用量を、他の２４羽のニワトリの１グループへは低用量を与えた。水は４日間定期的に随意、提供した。飼料は随意に提供した。本実験のコントロールグループは、通常の条件に従って４日間、トリ籠へ入れて飼育した。
【００８３】
最適な有効用量を決定するために、ニワトリの各グループへ１週間のうち１〜４日の期間で組成物１を投与した。ニワトリを毎日観察して、羽の逆立ち、元気の無い様子、元気の無いトリ、またはストレスまたは不快感を示す他の兆候を含めて、気分の不調または異常行動の現われを探した。あらゆる障害または異常は毎日ごとに記録した。実験の終了後、ニワトリは安楽死させ、個別に解剖してあらゆる障害を検査した。収集したサンプルは組織学的評価のために１０％ホルマリンへ漬けた。
【００８４】
飼料および水は、毎日、トリ籠ごとに重量を測定した。量はデータ収集形式で記録した。１日目に、飼料および水を最初に測定および記録した。２〜４日目には、追加的な飼料および水を測定して、飼料および水の表へ追加的に記録した。５日目には、残った飼料および水を秤量し、実験全体の期間にトリ籠ごとで消費された飼料および水の総量を計算した。
【００８５】
表２には、体重変化のデータを要約した。低飼料、低水分、低飼料および水分、中飼料、高飼料、鼻、およびコントロールを与えたニワトリについては、処理グループ間の相違は統計学的に有意ではなかった。
【００８６】
【表２−１】
【００８７】
【表２−２】
【００８８】
【表２−３】
【００８９】
表３には、水および飼料の消費データを要約した。この表では、データはトリ籠ごとの基準で要約した。未使用の４つのトリ籠は、自然に起こる飼料および水の損失を示す解析に含めた。低飼料、低水分、低飼料および水分、中飼料、高飼料、鼻、およびコントロールを与えたニワトリについては、処理グループ間の相違は統計学的に有意ではなかった。
【００９０】
【表３−１】
【００９１】
【表３−２】
【００９２】
【表３−３】
【００９３】
表４には、飼料消費データに対する体重増加の比率を要約した。この表では、データはトリ籠ごとの基準で要約した。この解析によって、以下の処理グループ間の相違は統計学的に有意でないことが明らかとなった：低飼料、低水分、低飼料および水分、中飼料、高飼料、鼻、およびコントロール。
【００９４】
【表４−１】
【００９５】
【表４−２】
【００９６】
【表４−３】
【００９７】
これらの結果は、家禽への組成物１の適切な用量を提供する。データは、様々な（低、中、および高）濃度の薬用飼料を、安全性の問題または許容性の問題なしに、成長期の家禽へ提供可能であることを示している。
【実施例３】
【００９８】
希釈していない実施例１の抗ウイルス組成物である組成物１、および１０倍希釈系列を調製して、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞および受精後１０日のニワトリ胚含有卵中で、ＩＢＶに対する抗ウイルス活性を試験した。加えて、プラシーボも同様に希釈して試験した。
【００９９】
ＶＥＲＯ Ｅ６連続継代性細胞系（ＣＲＬ−１５８６）はＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（メリーランド州、Ｒｏｃｋｄａｌｅ）から入手し、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１．５ｇ／Ｌ 重炭酸ナトリウム、０．１ｍＭ 非必須アミノ酸、１．０ｍＭ ピルビン酸ナトリウム、および１０％ウシ胎仔血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ［Ｇｉｂｃｏ］，カリフォルニア州、Ｃａｒｌｓｂａｄ）を添加した最小必須（イーグル）培地中で、３７℃および５％ＣＯ２で増殖させた。細胞は、Ｔ７５ ｆｌａｓｋ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ニュージャージー州、Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ）中で増殖させ、９６穴プレートへ移して、９０％コンフルエントまで成長させた。
【０１００】
組織培養感染用量５０（Ｔｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄｏｓｅ５０：ＴＣＩＤ５０）の濃度１×１０３のＩＢＶのＢｅａｕｄｅｔｔｅ株を、抗ウイルス化合物、または細胞培養維持培地（１％ウシ胎仔血清を含む）中で調整したプラシーボの（細胞に対して非毒性の、１×１０−３希釈から始まる）７つの１０倍希釈系列と混合した。混合物は室温で３０分間インキュベートして；次に細胞への接種のために、各混合物の９つの１０倍希釈系列を調製した。細胞培地を細胞から除去して、前記混合物を単層上へ接種した。細胞培養維持培地のみを与えたネガティブコントロールのウェルも、同様に実験に含めた。３７℃および５％ＣＯ２で７日間、細胞をインキュベートして、毎日２回、細胞変性効果（ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ：ＣＰＥ）の検査を行った。
【０１０１】
図１は、ＩＢＶへの抗ウイルス効果の結果を示している。図３は、本発明の組成物によってウイルス感染から保護されたＶＥＲＯ Ｅ６細胞、および組成物を適用しておらず、ＩＢＶに感染した細胞を示している。１×１０−３希釈した組成物１の抗ウイルス化合物は、平均で１×１０３０から１×１０１８ＴＣＩＤ５０までＩＢＶの力価を１００倍以上軽減した。１×１０−４希釈の組成物１はＩＢＶ力価を２倍軽減した。それ以上に希釈した組成物１はいずれもＩＢＶの力価を軽減しなかった。それに対して、プラシーボではどの希釈率でもＩＢＶのウイルス力価の軽減は観察されず、これは組成物１中の有効成分が抗ウイルス効果に関与していることを示している。加えて、ネガティブコントロールのウェルではＣＰＥは全く見られなかった。
【０１０２】
組成物の効能を決定するために、ＩＢＶで感染したニワトリ胚含有卵でもまた、試験を行った。ニワトリ胚含有卵も、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞と同様の方法で調整した。組織培養細胞の代わりに受精後１０日のニワトリ胚含有卵に接種したこと、および化合物は胚に対して毒性を示さないため、組成物１およびプラシーボは希釈しないものから始めたこと、以外については実験計画は同一とした。特定病原体未感染（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｆｒｅｅ：ＳＰＦ）のニワトリ受精卵は、Ｓｕｎｒｉｓｅ ｆａｒｍｓ（ニューヨーク州、Ｃａｔｓｋｉｌｌ）から入手し、３７℃で１０日間インキュベートした。ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中で調製した組成物またはプラシーボの未希釈物および各１０倍希釈系列物２００μｌを用意して、１×１０４胚感染用量５０（ＥＩＤ５０）または１×１０７ ＥＩＤ５０のＩＢＶと混合したものを、胚含有卵の漿尿嚢（ｃｈｏｒｉｏａｌｌａｎｔｏｉｃ ｓａｃ：ＣＡＳ）中へ接種した。ＰＢＳのみを与えたネガティブコントロール卵もまた、含めた。卵は３７℃でインキュベートし、７日間、毎日明りに透かして検査して、死亡率を記録した。最初の２４時間以内に生じたあらゆる死亡は、接種に関連した外傷によるものと判断して無視した。７日目に、残った全ての卵を４℃に冷却し、殻を開けて臨床的兆候について胚を検査した。
【０１０３】
図２は、胚含有卵中のＩＢＶに対する組成物１の効果を示したものである。組成物１の１×１０−２希釈までは、ＩＢＶの力価に対する相当量の効果を有し、前記ＩＢＶの力価を１００倍以上も軽減した。それに対して、１×１０−３〜１×１０−７、またはいずれの希釈率でのプラシーボについても、何も影響が観察されず、これは組成物１中の有効成分が抗ウイルス効果に関与していることを示している。
【実施例４】
【０１０４】
ニワトリの伝染性気管支炎に対する試験
治療のタイミングは、ウイルス攻撃の６時間前、ウイルス攻撃の２時間前、およびウイルス攻撃の２時間後とした。抗ウイルス活性は、ウイルス攻撃の５日後に、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲを用いて伝染性気管支炎ウイルス（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ：ＩＢＶ）に関するトリの検査、および臨床的兆候および前記疾患に特徴的な障害の記録、によって評価した。
【０１０５】
この実験には、特定病原体未感染の２週齢レグホン種ニワトリを用いた。トリは、ＨＥＰＡフィルタ付陽圧ｈｏｒｓｅｆａｌ隔離棟中で飼育し、随意に飼料および水を与えた。
【０１０６】
組成物の３つの異なる投与経路を試験した。鼻腔内経路では、実施例１の組成物２００μｌを、各トリの鼻孔へ直接適用した。
【０１０７】
トリ１羽当たり、実施例１の組成物の約１ｍｌをスプレーするためには、噴霧器を用いた。隔離棟への新鮮な空気の流入を一時的に遮断して、トリへスプレーして、約１０分後に新鮮な空気の流入を再開した。
【０１０８】
トリは裂けたパレット（ｃｌｅｆｔ ｐａｌｌｅｔ）を有しているため、組成物を飲み水へ入れることで、口腔および鼻が薬剤に曝露されるはずである。実施例１の組成物を飲み水へ入れる１時間前から、トリに水を与えずにおいて喉が渇いた状態にしておいた。トリ１羽当たり、実施例１の組成物の約１ｍｌを、水で戻した脱脂粉乳の同量と混合した。３０分以内にトリが全ての液体を飲まなかった場合には、残された材料と同量のものをそのトリの口へ投与した。抗ウイルス化合物を消費した後、新鮮な水を提供した。
【０１０９】
【表５】
【０１１０】
処理した全てのトリおよび未処理のグループのうち１つに対して、トリ１羽当たりにＩＢＶのＭａｓｓ４１病原性株を１×１０４ 胚感染用量５０でウイルス攻撃した。攻撃ウイルスは鼻腔内投与して、毎日２回、疾病の臨床的兆候に関してトリを検査した。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲを用いた気管でのウイルス検出によって決定したところ、この量の攻撃ウイルスは、トリの９０％を感染させるのに十分であった。
【０１１１】
臨床的兆候は毎日記録して、瀕死のトリは除外して殺傷して解剖を行った。ウイルス攻撃後の５日目（これはＩＢＶワクチン有効性試験では慣例的である）に、トリを殺傷して解剖した。解剖では、鼻および気管スワブ（ｓｉｎｕｓ ａｎｄ ｔｒａｃｈｅａｌ ｓｗａｂｓ）を採取して、氷冷ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中に設置した。ウイルスの存在は、鼻および気管スワブから直接行った、定量的リアルタイムＲＴ−ＰＣＲによって決定した。有効性は、未処理のコントロールの９０％以上が攻撃ウイルスに対して陽性であり、処理したトリの９０％以上がウイルスに対して陰性であったことに基づいたものである。有効性は、臨床的兆候および障害にもまた、基づいたものである。障害は記録して、気管は組織病理学のために採取した。気管は、１０％中性緩衝ホルマリン中に収集して、組織病理学に供した。組織は通常通りにパラフィンへ包埋して、５μｍ切片をヘマトキシリンおよびエオシン染色のために切断した。上皮過形成、リンパ球浸潤、および上皮線毛消失の重篤度を、各気管に対して採点した。
【０１１２】
処理／ウイルス攻撃の全てのグループを、コントロールのグループ（ウイルス攻撃あり、および無しの両方）と比較した。
【０１１３】
ウイルス攻撃の２時間前または２時間後の鼻腔内接種、およびウイルス攻撃の６時間前、２時間前、および２時間後のスプレーが、最も良い結果を与えた。データの概要は以下の表６に示した。
【０１１４】
【表６】
【実施例５】
【０１１５】
用量反応試験
ニワトリでＩＢＶに対して抗ウイルス効果を得ることが可能な活性配合の最小量を同定するために、スプレー接種を用いた。
【０１１６】
実施例４で用いたのと同じ種類および日齢のトリ、および鶏舎を、この実施例でも同様に用いた。
【０１１７】
以下の濃度の実施例１の製剤を用いた：未希釈物、および、製剤：水の比率が、１:５，１:１０，１:２０，１：４０，１：８０，１：１６０，１：３２０，１：６４０、および１：１２８０、である水による希釈物である。実施例４の記述と同様に、処理したトリおよび未処理のトリのグループへウイルス攻撃を行った。他の未処理のトリはネガティブコントロールとした。
【０１１８】
【表７】
【０１１９】
ウイルス攻撃の２時間前の処理では検出可能なウイルスは対数スケールで３だけ減少したが、それに対して、ウイルス攻撃の２時間後の処理では検出可能なウイルスは対数スケールで２．５だけ減少した。２週齢の感染しやすい特定病原体未感染のニワトリは、１×１０３ＥＩＤ５０以下の病原性ＩＢＶによるウイルス攻撃では、ほとんどのトリが病気にならないことが知られているため、このことは極めて重要である。これは、より低い希釈率で処理したグループで臨床的兆候を示すトリがより少ないという以下のデータと一致する。従って、１：４０またはそれ以下の希釈率での本発明の組成物によるウイルス攻撃の２時間前の処理によって、野外での疾病を減少させるまたは防止する可能性があり得る。感染の２時間後での処理は矛盾しない用量反応を示したため、１：４０またはそれ以下の希釈率で与えた場合に病状の改善をもたらすであろう。
【０１２０】
【表８】
【０１２１】
これまでの記述中に、本発明の数量的特徴および利点が、本発明の構造および機能の詳細と共に説明されているものの、開示内容は説明のためのみであり、詳細において、特に、本発明の方式中の形状、サイズ、および部品の配置については、添付の請求項が表現する用語の広範な意味によって示される最大限まで変更が可能である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、伝染性気管支炎の治療、または発症を軽減させる方法に関するものである。より具体的には、本発明はトリの伝染性気管支炎の治療または発症の軽減、及び伝染性気管支炎の伝染性を軽減する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
伝染性気管支炎は、コロナウイルスによって引き起こされ、急性で極めて接触感染性の高い、ニワトリに感染する呼吸器系疾患である。最も接触感染性の高い家禽の疾患の１つと考えられており、このウイルスは、感染したニワトリ、またはトリ籠、器具、および鶏舎などの汚染表面との直接接触によって蔓延する可能性がある。伝染性気管支炎は、特に若い家禽において高い死亡率を有する。感染したニワトリは、息切れ、咳嗽といった重度の呼吸器症状、卵管の障害による産卵の減少、および／または感染の結果として生じるストレスに苦しめられる。さらに、伝染性気管支炎は、潜在的なウイルスまたは細菌感染を活性化し、特にブロイラー業界は重大な経済的損失をもたらす。現在のところ、この疾患の有効な治療方法は知られていない。
【０００３】
伝染性気管支炎に有効であるものとして、不活性化ウイルスおよび／または生ウイルス由来のワクチンの利用が周知である。しかし、不活性化およびまたは生ウイルスの投与によって、多くの問題が頻繁に生じる。いくつかのケースでは、ホルマリンおよび紫外線といった不活性化物質による伝染性気管支炎ウイルスの不活性化後に、免疫特性の喪失が起こる可能性がある（Ｍ．Ｓ．Ｈｏｆｓｔａｄ，Ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ Ｐｏｕｌｔｒｙ，Ｂｉｅｓｔｅｒ ａｎｄ Ｓｃｈｗａｒｔｅ，Ｉｏｗａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｐｒｅｓｓ．Ａｍｅｓ（１９６５），６１５）。生存、非弱毒化、または軽微に弱毒化したウイルスワクチンによる１次ワクチン接種によって、健康なニワトリが死亡または罹患する可能性もある。生後２または３週間の動物および現在または近々産卵を始めるニワトリには、特に危険がある。
【０００４】
他のワクチン接種の形態では、マサチューセッツ株および特にＩＢＶ Ｗ４８，Ｍ４１、および８２８２８株、更に例えばＡ ５９６８株などのコネチカット分離株に由来する、２５若しくはそれ以上の胚を経由することでそれらの病原性を軽減したウイルス、修飾生ウイルスワクチンを利用する。しかし、それらのウイルスの免疫能力は、特定の伝染性気管支炎ウイルス株に対して特異的である。従って、前記ワクチンは、ウイルスの抗原性変異に対してトリを免疫することが不可能であり（Ａｒｃｈｉｖ ｆｕｒ ｄｉｅ Ｇｅｓａｍｔｅ Ｖｉｒｕｓｆｏｒｓｃｈｕｎｇ ３４，ｐ．３２（１９７１）、およびＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ Ｃ．Ｈ．Ｄｅｖｅｌｏｐ．Ｂｉｏｌ．Ｓｔａｎｄａｒｄ，３３ ｐ．３１１（１９７６））、大発生を有効に回避することは不可能である（Ａｖｉａｎ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｖｏｌ．２０，Ｎｏ．１，ｐａｇｅｓ４２ ａｎｄ １７７（１９７６）、およびＡｖｉａｎ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．２，ｐａｇｅｓ３２３ａｎｄ５８３（１９７５））。
【０００５】
さらに、ＩＢＶ株の異なる血清型に対応するＩＢＶ株由来の混合ワクチンを利用した家禽のワクチン接種は、相互作用によってそれぞれの元のウイルスへの免疫特性を減少させる（Ａｍ．Ｊ．Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．３６，４，５２４ ａｎｄ ５２５（１９６５）およびＡｖｉａｎ Ｄｉｓｅａｓｅｓ １２，５７７（１９６８））。
【０００６】
このような一般的な問題を受けて、ウイルスに基づかない治療方法の開発のための研究を行ってきた。米国公開特許第２００３／０１８５９１２号および第２００５／０１４７６９７号など、ターメリック、緑茶、生姜、およびセイヨウワサビから成る組成物の抗ウイルス特性を述べる、数少ない参考文献は存在するものの、そうした文献は伝染性気管支炎の治療方法は開示していない。
【０００７】
従って、伝染性気管支炎の治療、発症の軽減、または伝染性を軽減する方法が必要である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、伝染性気管支炎の治療、伝染性気管支炎の発症の軽減、伝染性気管支炎の伝染性を軽減する方法を対象とする。
【０００９】
第１の態様において、本発明は、伝染性気管支炎の発症および／または伝染性を軽減する組成物の予防的利用方法に関連する。前記方法は、伝染性気管支炎ウイルスに曝露した、曝露したであろう、または曝露するトリへの、ターメリックから得られる第１の成分および緑茶から得られる第２の成分を含む組成物の有効量を投与する工程を含む。組成物を投与することにより、伝染性気管支炎ウイルスの発症および／または伝染性が軽減した場合、組成物の量は有効である。
【００１０】
本発明の第２の態様において、ターメリックから得られる第１の成分および緑茶から得られる第２の成分を含む組成物は、伝染性気管支炎の治療に有効な量の前記組成物を投与によって伝染性気管支炎に感染したトリを治療するために用いられる。
【００１１】
本発明の第３の態様は、ターメリックから得られる第１の成分、緑茶から得られる第２の成分、および許容可能な賦形剤を含む、エアロゾル、スプレー、霧、液体組成物に関するものである。前記エアロゾル、スプレー、霧、液組成物は、伝染性気管支炎の治療として投与する、または例えばトリへのスプレーまたは噴霧など、エアロゾルまたは液組成物に適切なあらゆる標準的技術を用いて予防的にトリへ投与することが可能である。
【００１２】
第４の態様において、本発明は、ターメリックから得られる第１の成分および緑茶から得られる第２の成分を含む動物飼料に関するものである。
【００１３】
これらおよび他の様々な利点および本発明を特徴付ける新規性の特性は、本明細書に添付し、その一部を形成する請求項において詳細に指摘する。しかしながら、本発明、その利点、およびその利用により得られる対象物をより良く理解するためには、本発明の好ましい実施形態を記述した添付文書への参照がなされるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞中での伝染性気管支炎ウイルス（ＩＢＶ）Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株の生存率に対する組成物１の効果を示した細胞濃度に対する希釈対数を示すグラフである。
【図２】図２は、胚含有卵中でのＩＢＶ Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株の生存率に対する組成物１の効果を表す、細胞濃度に対する希釈記録を示すグラフである。
【図３】図３の左パネルは、組成物１の１×１０−３希釈で処理したＩＢＶへ曝露後、細胞変性効果（ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ：ＣＰＥ）を示さない細胞を表した写真であり、右パネルは、プラシーボの１×１０−３希釈で処理したＩＢＶへ曝露後、ＣＰＥを示す細胞を表した写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
一態様において、本発明は、伝染性気管支炎ウイルス（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ：ＩＢＶ）の罹患および伝染の事例を軽減する組成物の予防的利用方法に関連する。当該方法は、ターメリックから得られる第１の成分、緑茶から得られる第２の成分、および選択的に許容可能な担体を有する組成物の一定量を伝染性気管支炎に曝露した、または曝露するトリに投与する工程を有する。前記組成物の量は、投与した場合、伝染性気管支炎の発症および／または伝染の発生を軽減するのに有効な量である。
【００１６】
他の一態様では、本発明は、ターメリックから得られる第１の成分、緑茶から得られる第２の成分、および選択的に許容可能な担体を有する組成物の有効量を投与することにより、伝染性気管支炎に感染したトリを治療する方法に関連する。前記組成物の量は、投与した場合に、伝染性気管支炎ウイルスを治療するのに有効な量である。
【００１７】
本発明の方法に用いる組成物は、ターメリックから得られる第１の成分、および緑茶から得られる第２の成分を含むものであっても良い。本発明の組成物の選択的且つ更なる有効成分として、生姜および／またはセイヨウワサビから得られる成分を含むことも可能である。
【００１８】
本願明細書で用いられる場合、「許容可能な（ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」という用語は、トリに対して過度の不都合な副作用（毒性、炎症、アレルギー反応など）がなく、適度な危険性／利点の比と釣り合いのとれた使用に適した成分を意味する。
【００１９】
さらに、本願明細書で用いられる場合、「安全かつ有効な量（ｓａｆｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｍｏｕｎｔ）」という用語は、本願明細書で記述した方法で利用した場合に、過度の副作用（毒性、炎症、アレルギー反応など）がなく、適度な危険性／利点の比と釣り合いのとれた所望の治療反応を得るために十分な成分の量について言及する。
【００２０】
本願明細書で用いられる場合、「抑制する（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ）」という用語は、伝染性気管支炎ウイルス株のさらなる成長を軽減または予防する、または正常細胞への伝染性気管支炎ウイルス株の付着を予防する、および／または処理したヒトまたは動物から一部または全ての感染粒子を除去する、ことについて言及する。ウイルス抑制の適切な測定方法は、実施例において議論する。
【００２１】
本願明細書で用いられる場合、「伝染性（ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｖｉｔｙ）」または「伝染性の（ｔｒａｎｓｍｉｔｔｉｎｇ）」という用語は、１つの宿主から他への微生物の移動に言及するものである。
【００２２】
本発明で用いられる全ての活性化合物は、入手可能であれば、他の材料から得ることが可能である。従って、「から得ることが可能な」または「から得ることができる」という語句は、ターメリック、緑茶、生姜、またはセイヨウワサビから得られる化合物または組成物を包含し、従って同一の化合物および／または組成物の合成形態も包含し、さらには他の材料から得られる同一の化合物および／または組成物もまた包含することを意味する。
【００２３】
第１の実施形態において、本発明の組成物は、本願明細書に記述する１若しくはそれ以上の有益な効果を提供するために安全かつ有効な量の、ターメリックから得られる第１の成分、および緑茶から得られる第２の成分を含む。
【００２４】
本発明の組成物の第１の成分はターメリックから得ることが可能であり、本願明細書に記述する１若しくはそれ以上の有益な効果を提供するために安全且つ有効な量で使用される。ターメリック（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ（Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ））またはヒンディー語でＨａｌｄｉと呼ばれるものは、薬物としてだけでなく、インド料理の一般的材料としても非常に広く用いられている。ターメリックの根茎は微粉として、薬物および食品に用いられる。
【００２５】
ターメリック根茎の黄色い色素は、クルクミノイドとして知られる３つの化合物から成る。３つのクルクミノイドは、クルクミン（ジフェルロイルメタン）、デスメトキシクルクミン（ヒドロキシシンナモイルフェルロイルメタン）、およびビス−デスメトキシクルクミン（ジヒドロキシジシンナモイルメタン）である（Ｄｒｕｇ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎｄ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ｐ．１６９，Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｉｎｃ．，１９７３ を参照のこと）。ターメリック（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ（Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ））の精油は、主として以下の化合物から成る：ｄ−ショウノウ（約１％）、環状イソプレンミルセン（約８５％），およびｐ−トリルメチルカルビノール（約５％）、（Ｅ．Ｇｕｎｔｈｅｒ，Ｔｈｅ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｏｉｌ，ｐｐ．１２３〜４、Ｖａｎ Ｎｏｓｔｒａｎｄ Ｃｏ．，１９５５を参照）。
【００２６】
ターメリックから得られる本発明の組成物の成分は、好ましくは、クルクミン（ジフェルロイルメタン）、デスメトキシクルクミン（ヒドロキシシンナモイルフェルロイルメタン）、およびビス−デスメトキシクルクミン（ジヒドロキシジシンナモイルメタン）といったクルクミノイド、およびそれらクルクミノイドの２若しくはそれ以上の混合物を含む。
【００２７】
ターメリックからのクルクミノイドの単離方法は既知である（Ｊａｎａｋｉ ａｎｄ Ｂｏｓｅ，Ａｎ Ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍｉｎ Ｆｒｏｍ Ｔｕｒｍｅｒｉｃ，Ｊ．Ｉｎｄｉａｎ Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．４４：９８５，１９６７ を参照のこと）。あるいは、本発明に用いるクルクミノイドは、合成方法によって調製可能である。
【００２８】
ターメリックから得られる成分は、あらゆる異なる形態において本発明の組成物に組み入れることが可能である。それら異なる形態は、好ましくは、ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、Ａｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）Ｔｕｒｍｅｒｉｃ、Ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ（登録商標）Ｔｕｒｍｅｒｉｃ、といったターメリック抽出物、１若しくはそれ以上のクルクミノイド化合物、およびターメリック粉末、ターメリックの植物全体または一部、それらのチンキ剤、およびそれらの混合物を含む。より好ましくは、ターメリックから得られる第１の成分は、ターメリック抽出物である。
【００２９】
ターメリックから得られる成分を用いる場合、本発明の組成物の１グラム当たりには、好ましくは、約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇのターメリック粉末抽出物などターメリックから得られる成分を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約１５ｍｇのターメリック粉末抽出物などターメリックから得られる成分を含む。
【００３０】
それらの範囲は、摂取製剤であるＴｕｒｍｅｒｉｃ Ｅｘｔｒａｃｔ ９５％，ｅｘ． Ｐｈａｒｍｌｉｎｅ，Ｉｎｃ．、およびスプレー製剤であるＴｕｒｍｅｒｉｃ Ｒｏｏｔ Ｅｘｔｒａｃｔ（Ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ（登録商標）Ｔｕｒｍｅｒｉｃ），ｅｘ．Ｋａｌｓｅｃ，Ｉｎｃ．，ミシガン州Ｋａｌａｍａｚｏｏ．、の利用に基づいたものである。
【００３１】
本発明の組成物の第２の成分は、緑茶から得ることができる。緑茶から得られる第２の成分は、抗酸化作用を有する可能性がある。緑茶は、カメリアシネンシス潅木の乾燥葉および葉芽である。それは主に、中国および日本で生産されている。乾燥茶葉は主に、ポリフェノール（約３６％）として知られる植物化学物質、主にフラボノール（カテキンを含む）、フラボノイド、およびフラボンジオールから成る。葉は、カフェインを含めた植物アルカノイド（約４％）、テオブロミン、およびテオフィリンもまた含む。
【００３２】
緑茶の薬理活性は主にその活性化合物によるものである。本発明において有用な緑茶の活性化合物は、これらに限定されないが、フラボノール、カテキン、フラボノイド、フラボンジオール、植物アルカロイド、カフェイン、テオブロミン、テオフィリン、フェノール酸、タンパク質、炭水化物、およびミネラルを含む。
【００３３】
緑茶から得られる第２の成分は、緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、および１若しくはそれ以上の緑茶活性化合物といった緑茶抽出物、緑茶の植物全体または一部、緑茶葉、それらのチンキ剤、またはそれらの混合物の形態において組成物に含有させることが可能である。好ましくは、本発明の組成物の第２の成分は、緑茶葉、緑茶粉末、および緑茶抽出物から選択する。より好ましくは、本発明の組成物の第２の成分は、緑茶抽出物である。
【００３４】
本発明の組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶抽出物などの緑茶から得られる成分を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約１５ｍｇの緑茶抽出物など緑茶から得られる成分を含む。それらの範囲は、摂取製剤であるＧｒｅｅｎ Ｔｅａ，ｅｘ．Ｓｔｒｙｋｅｒ Ｂｏｔａｎｉｃｓ、およびスプレー製剤であるＧｒｅｅｎ Ｔｅａ Ｅｘｔｒａｃｔ，ｅｘ．Ｐｈｙｔｏｗａｙ，Ｉｎｃ，Ｃｈａｎｇ Ｓｈａ，Ｐ．Ｒ．中国、の利用を基準として用いた。
【００３５】
本発明の組成物の選択的な成分は、安全且つ有効な量を生姜から得ることが可能である。南アジア原産の生姜は、長さ１フィートおよび幅約１インチの草状葉を生じる２〜４フィートの多年生植物である。食品店では生姜の根と呼ばれているが、実際は植物の地下茎から成り、樹皮状の外皮を削り取ったものである。
【００３６】
本発明に使用する生姜の活性化合物は、これらに限定されないが、１，８−シネオール、１０−デヒドロジンゲジオン、１０−ジンジェロール、６−ジンゲジオン、６−ジンジェロール、６−ショウガオール、８−ベータ−１７−エポキシ−λ−トランス−１２−エン−１５，１６−ジオール、８−ジンジェロール、８−ショウガオール、９−オクソ−ネロリドール、アセトアルデヒド、酢酸、アラニン、アルファ−リノレン酸、アルファ−リノレン酸、アルファ−フェランドレン、アルファ−ピネン、アルファ−テルピネン、アルファ−テルピネオール、アルファ−ジンギベレン、芳香クルクメン、アルギニン、アスコルビン酸、アスパラギン、ベータ−ビサボロール、ベータ−カロチン、ベータ−エレメン、ベータ−ユーデスモール、ベータ−イオノン、ベータ−ミルセン、ベータ−フェランドレン、ベータ−ピネン、ベータ−セリネン、ベータ−セスキフェランドレン、ベータ−シトステロール、ベータ−ツジョン、酢酸ボルニル、ホウ素、コーヒー酸、カルシウム、カンフェン、ショウノウ、カプリン酸、カプリル酸、カプサイシン、カリオフィレン、カビコール、クロロゲン酸、クロム、シトラール、シトロネラル、シトロネラル、コバルト、銅、クメン、クルクミン、シスチン、デルフィニジン、デルタ−カジネン、エレモール、酢酸エチル、ミリスチン酸エチル、ファルネサール、ファルネセン、フェルラ酸、フルフラール、ガンマ−アミノ酪酸、ガンマ−テルピネン、ゲラニアール、ゲラニオール、酢酸ゲラニル、ｇｉｎｇｅｒｅｎｏｎｅ、グルタミン酸、グリシン、ヘキサハイドロクルクミン、ヒスチジン、ｉｓｏｇｉｎｇｅｒｅｎｏｎｅ−Ｂ、イソロイシン、ケンペロール、レシチン、リモネン、リノール酸、マグネシウム、マンガン、メチオニン、ｍｕｆａ、ミルセン、ミリセチン、ミリスチン酸、ネラール、ネロール、ネロリドール、ナイアシン、ニッケル、オレイン酸、シュウ酸、ｐ−クマル酸、ｐ−シメン、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、パルミチン酸、パントテン酸、パラドール、ｐａｔｃｈｏｕｌｉｃ ａｌｃｏｈｏｌ、フェニルアラニン、ケルセチン、リボフラビン、セレン、シキミ酸、テルピン−４−オール、チアミン、トリプトファン、バニリン酸、バニリン、亜鉛、およびジンゲロン、を含む。また、それら活性化合物の２若しくはそれ以上の混合物もまた使用可能である。
【００３７】
生姜は、本発明の組成物に対して多くの異なる形態で取り込むことが可能であり、前記異なる形態は、生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物を含む生姜抽出物といった抽出物、生姜根粉末、Ａｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒ、生姜含油樹脂を含む生姜粉末、および生姜の１若しくはそれ以上の活性化合物、生姜の植物全体、または一部、それらのチンキ剤、およびそれらの混合物を含む。好ましくは、本発明の組成物の選択的な成分は、生姜抽出物、および生姜粉末から選択される。
【００３８】
本発明の組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇの生姜抽出物などの生姜から得られる成分を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約２０ｍｇの生姜抽出物などの生姜から得られる成分を含む。それら使用量の範囲は、摂取製剤であるＧｉｎｇｅｒ Ｒｏｏｔ Ｐｏｗｄｅｒ，ｅｘ．Ｓｔｒｙｋａ Ｂｏｔａｎｉｃｓ、およびスプレー製剤であるＧｉｎｇｅｒ Ｅｘｔｒａｃｔ Ｋ（Ａｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒ），ｅｘ．Ｋａｌｓｅｃ，Ｉｎｃ．，ミシガン州Ｋａｌａｍａｚｏｏの利用を基準として用いた。
【００３９】
様々な成分の量は、成分、すなわち生姜根抽出物の１つの形態に関して本願明細書にを定めている。その成分が別の形態で存在する場合、用いられる量は、本願明細書で定めるその成分の量と同量の１若しくはそれ以上の活性化合物を提供するだけの量である。
【００４０】
また、本発明の組成物は、本願明細書で記述する１若しくはそれ以上の有益な効果を提供するだけの安全かつ有効な量のセイヨウワサビから得られる１若しくはそれ以上の成分を含むことが可能である。セイヨウワサビから得られる選択的な成分は、Ｃｏｃｈｌｅａｒｉａ Ａｒｍｏｒａｃｉａからの抽出物を含むものであっても良い。セイヨウワサビから得られる成分は、例えばセイヨウワサビ粉末抽出物、セイヨウワサビ液体抽出物といったセイヨウワサビ抽出物、およびセイヨウワサビ油といったセイヨウワサビ根抽出物、の形態とすることができる。セイヨウワサビは、マスタードに見られるのと同様な揮発性油を含む。それらは、グルコシノレート（からし油配糖体）、グルコナストルチイン、および胃中で分解した場合にイソチオシアン酸アリルを生成するシニグリンを含む。本発明の組成物は、組成物１グラム当たりに、好ましくは、約０．０００１ｍｇ〜１０ｍｇの、セイヨウワサビ油といったセイヨウワサビから得られる成分を含み、より好ましくは、本発明の組成物は、組成物１グラム当たりに、０．００１ｍｇ〜５ｍｇの、セイヨウワサビ油といったセイヨウワサビから得られる成分を含む。
【００４１】
エタノール、プロピレングリコール、およびグリセリン、およびそれらの様々な組合せを本発明の液組成物中に選択的に、選択的な成分の総重量で約１０％まで含有させることが可能である。最も好ましくは、選択的な成分として、総重量の約１０％までのエタノールを添加する。よりさらに好ましくは、２．５〜７％エタノールを添加する。
【００４２】
好ましくは、ターメリックおよび緑茶、および選択的に、生姜および／またはセイヨウワサビに由来する上述の成分が、組成物の総重量の約０．００１〜約９０％を構成する。より好ましくは、主要成分が、組成物の総重量の約０．０１〜約２０％を構成する。最も好ましくは、主要成分が、組成物の総重量の約１〜約１０％を構成する。
【００４３】
上述したターメリック、生姜、および緑茶から得られる成分を含む、組成物の非担体成分は、組成物の意図する利用法の有効性に大幅に影響しない範囲で、組成物中に用いる担体の量に依存して、本発明の組成物中で比例的に増減することが可能である。
【００４４】
本発明の組成物中に用いることができる、例えば、ターメリック抽出物、生姜抽出物、緑茶抽出物、およびセイヨウワサビ抽出物などの植物抽出物は、一般的な抽出手順を用いて作成できる。あるいは、抽出物は、ｔｈｅ Ｋａｌｓｅｃ，Ｉｎｃ．ミシガン州Ｋａｌａｍａｚｏｏ．など商業的供給源から購入できる。
【００４５】
上述のいずれかの植物からの便利で投与可能な剤形中の薬理学的または生物学的に活性な植物抽出物の調製手順は、当該技術分野で周知である。
【００４６】
本発明の組成物は、伝染性気管支炎ウイルスの様々な株のトリ間での感染性および伝染性を抑制し、それによってトリ間での感染発生を軽減するために利用することができる。前記組成物は、伝染性気管支炎の治療、およびそれによって伝染性気管支炎に関連した症状を和らげるための、治療組成物として用いることもまた、できる。
【００４７】
本発明の組成物の安全かつ有効な量は、伝染性気管支炎に曝露された、または曝露されるトリへ投与して、伝染性気管支炎ウイルスに曝露された、または曝露されるトリでの、前記疾患の発症を軽減することができる。
【００４８】
好ましくは、本発明の組成物は、限定するわけではないが、トリの餌などの動物飼料、粉末、スプレー、鼻腔用スプレー、点鼻薬、懸濁液、溶液、注射、または大量予防接種のあらゆる標準的形態を含む、あらゆる許容可能な剤形で製剤化することができる。本発明の組成物は、本発明の組成物が栄養補給剤となりうる場合、または追加的成分を含む栄養補給剤の一部をなすことができる場合には、栄養補給剤の形態で投与することもまた、できる。
【００４９】
本発明の錠剤は、形状、サイズ、および製造技術において異なることができる。錠剤の場合、経口での利用では、許容可能な担体は乳糖、およびコーンスターチをさらに含むことができる。例えば、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルクを含む、平滑剤を錠剤へ添加することもまた、できる。錠剤は、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、およびリン酸カルシウムなどの賦形剤を含むこともまた、できる。澱粉、アルギン酸、および複合ケイ酸塩などの崩壊剤もまた、利用できる。錠剤は、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ＰＥＧ−８０００、およびアカシアゴムなどの結合剤もまた含むことができる。
【００５０】
あるいは、本発明の組成物は、水、またはそれ以外の液体などの溶媒または分散剤によって、シロップ、溶液、液剤、霧、またはスプレーといった液状形態で、および選択的に、持続的な期間において前記組成物を口腔および口腔咽頭粘膜へ繰り返し投与するための、薬理学的に許容できる担体中で、製剤化することができる。好ましくは、口腔、鼻咽頭および咽喉組織への組成物の長期間の接触を許すために、治療時間は約５〜６０分間、より好ましくは約２０〜３０分間とする。あるいは、そうした製剤は、使用前に、水または他の材料で希釈するのに適する濃縮形態とすることが可能である。
【００５１】
本発明の組成物は、許容可能な担体と共に製剤化することも可能である。許容可能な担体は、これらに限定されないが、（ａ）グリセリン、（ｂ）エタノール、（ｃ）リン脂質、（ｄ）ＭＣＴ ｏｉｌ、（ｅ）水、および（ｆ）澱粉、セルロース、シクロデキストリン、二酸化ケイ素、および脂質／油脂を含む、比較的に不溶性の適切な賦形剤を含有させることが可能である。
【００５２】
組成物は、動物飼料の成分および／または食品添加物などとして、チュアブル形態（ｃｈｅｗａｂｌｅ ｆｏｒｍｓ）で製剤化することも可能である。あるいは、本発明の組成物は、希釈剤の有無に関わらずカプセル形態で製剤化することも可能である。カプセルに有用な希釈剤は、乳糖および乾燥コーンスターチを含む。懸濁液を利用する場合は、懸濁液中に、乳化および／または懸濁剤を用いることが可能である。更に、上述のトローチ剤の１若しくはそれ以上の成分を含む固体組成物は、ソフトおよびハード・ゼラチンカプセルに用いることができる。
【００５３】
本発明の組成物は、エアロゾルまたは吸入組成物として製剤化することも可能である。そうした組成物は、周知の技術を用いて調製することができる。それらのタイプの製剤では、適切な担体は以下の成分、すなわち１若しくはそれ以上の防腐剤を含む生理食塩水、生物学的利用能を高める吸収促進剤、フッ化炭素、および／または標準的な可溶化または分散剤を含有させることが可能である。
【００５４】
組成物は、既知のあらゆる標準的デリバリー方法を用いて投与することも可能である。組成物は、水または溶液の添加物として製剤化することができる。さらに、組成物はインオボ（ｉｎ ｏｖｏ）で投与することが可能である。
【００５５】
本発明の組成物に選択的に含ませることが可能な他の材料は、レスベラトロル（トリヒドロキシスチルベン）、イノシトール、他のビタミンＢ複合体、および追加的な抗炎症剤、を含む。また、甘味剤、フレーバラント、着色剤、染料、防腐剤、乳化剤、懸濁剤、溶融剤、賦形剤、鎮痛剤、および水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリンといった溶剤または希釈剤、およびそれらの様々な組合せなどの成分を本発明の組成物へ含ませることができる。伝染の軽減または抑制は、（感染した）トリから（未感染の）他のトリへの微生物の拡大の抑制または軽減に関連する。一部のトリは感染の保菌者と考えることができる。保菌者は、伝染性気管支炎の微生物を活発に撒き散らすが、急性感染を被ることはない個体である。それら保菌者は、伝染性気管支炎の株で、持続（または慢性的）感染を受けたと言うことができる。持続感染を受けた感染源に加えて、感染した他のトリは、活動性感染するもの、および特に、急性感染の初期または後期に当たるものである。本発明の一態様は、他のトリへの疾病の拡大を防ぐための、伝染性気管支炎の株に感染したトリへの、本発明の組成物の投与に関連する。
【００５６】
予防治療は、伝染性気管支炎に間もなく曝露される、または伝染性気管支炎ウイルスに最近すでに曝露されたトリに対して、活動性感染の事例を軽減する目的で行うものである。そういった予防治療は、単独またはワクチンへの追加としてのいずれでも有効であろう。本発明の予防治療は、ワクチンが未だ入手不可能な伝染性気管支炎のウイルス株に対しても用いることができる。
【００５７】
本発明は、例えば、疾病の持続期間、死亡率、または有害影響の軽減による疾病の治療のための、伝染性気管支炎に感染したトリの治療方法にも関連する。本発明は、ウイルス感染の少なくとも１つの症状または有害影響を、軽減、治療、和らげる、または少なくとも部分的に抑制することが可能である。そうした症状は、エネルギー欠乏、産卵の減少、卵殻の脆弱化、鼻の腫れ、鼻汁、咳嗽、くしゃみ、囀り、下痢、気管の雑音、眼の濡れ、および腹部の水分蓄積を含む。
【００５８】
当該組成物は、一般的な商業用家禽類であるニワトリ、七面鳥、アヒル、およびガチョウ、一般性がやや低いものとしては、ダチョウ、それらに加えて例えばカナリアおよびオウムなど一般的にペットとして飼育されている他の鳥類を含む鳥類のあらゆる種類に投与可能である。
【００５９】
当該組成物は、トリの鼻道に当該組成物を直接的にスプレーすること、及びトリの口腔に当該組成物をスプレーすることによって投与することが可能であり、またはトリに曝露される霧を発生することにより当該組成物を投与することが可能である。従って、当該組成物は、殺ウイルス性またはウイルス増殖抑止として作用させることによって、予防的に与えることができる。あるいは、当該組成物は、ウイルスの伝染性を軽減するために用いることができる。
【００６０】
当該組成物の有効量は、治療対象、投与の特定の方式、利用する特定の有効成分の活性、日齢、体重、健康状態、トリの性別および食習慣、投与の時間、排泄速度、利用する成分の特定の組合せ、組成物の主成分の総含量、および疾病または症状の重篤性、などの要因に依存して変化する。それら要因を説明するのは、当業者における１つの技量の範囲内である。
【００６１】
当該組成物は、必要に応じて１日当たり約１〜１５回、より好ましくは、必要に応じて１日当たり約２〜１２回、または最も好ましくは、必要に応じて１日当たり約６〜１０回、投与することが可能である。本発明の組成物は、上述した通り、限定されないが、錠剤、カプセル、粉末、口腔スプレー、鼻腔用スプレー、チュアブル組成物（ｃｈｅｗａｂｌｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ）、懸濁液、溶液、およびインオボ投与、を含めて許容可能なあらゆる剤形で投与することができる。
【００６２】
当該組成物のそれぞれの用量は、本発明の組成物の安全かつ有効な量を含む。各治療のための投与の有効量は、ターメリックおよび緑茶から得られる成分を総量で約０．００１ミリグラム〜約１グラムまでを含む。より好ましくは、各治療のための投与の有効量は、ターメリックおよび緑茶から得られる成分を総量で約０．０１ミリグラム〜約０．５グラムまでを含む。
【００６３】
当該組成物を飼料または水の添加物として投与する場合は、飼料または水の添加物中の有効成分の量は、飼料全体の組成の約０．０１〜５０重量％の範囲とすることができる。好ましい一実施形態では、前記有効成分は、飼料全体の組成の約０．１〜約３０重量％を構成し、最も好ましい一実施形態では、前記有効成分は飼料全体の組成の約１〜約２０重量％を構成する。前記有効成分は、ターメリックからの成分、緑茶からの成分、生姜からの成分、および／またはセイヨウワサビからの成分を含む。
【００６４】
当該組成物をスプレーとして投与する場合、例えばトローチ剤またはカプセルと比較して、スプレー組成物は前記有効成分をそれらが必要とされる場所により直接的に輸送するため、各有効成分の量は低減することができる。当該組成物は、水または他の適切な希釈剤で、あらゆる所望の濃度まで希釈することができる。希釈組成物は、水または他の希釈剤の約０．１重量％〜約９９．９９９重量％のいずれの値も含有させることが可能であり、より好ましくは、水または他の希釈剤の約１０重量％〜約４０重量％、および最も好ましくは水または他の希釈剤の約１０重量％〜約３０重量％である。
【００６５】
以下の好ましい範囲は、本発明の方法に従った、スプレー製剤での投与に適した本発明に従った組成物を規定する。
【００６６】
本発明の方法に従ったスプレーによって投与する組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約１２ｍｇの、可溶性ターメリック含油樹脂などのターメリック抽出物を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約９ｍｇの、可溶性ターメリック含油樹脂などのターメリック抽出物を含む。本発明の方法に従ったスプレーによって投与する組成物の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶葉抽出物などの緑茶抽出物を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たりには、約０．０１ｍｇ〜約１５ｍｇの緑茶葉抽出物などの緑茶抽出物を含む。
【００６７】
本発明の方法に従ったスプレーによって投与する組成物の選択的な実施形態の１グラム当たり、好ましくは約０．００１ｍｇ〜約１０ｍｇのＡｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒなどの生姜抽出物を含む。最も好ましくは、組成物の１グラム当たり、約０．０１ｍｇ〜約７ｍｇのＡｑｕａｒｅｓｉｎ（登録商標）ｇｉｎｇｅｒなどの生姜抽出物を含む。
【００６８】
選択的に、組成物の１グラム当たり、約０．０００１ｍｇ〜約１ｍｇのセイヨウワサビ根抽出物、より好ましくは約０．００１ｍｇ〜約２ｍｇのセイヨウワサビ根抽出物、および最も好ましくは約０．５ｍｇ〜約１ｍｇのセイヨウワサビ根抽出物も含有する。
【００６９】
器具に付着するＩＢＶのあらゆる株の一部または全てを不活性化するために、トリへ組成物を投与するのに用いるあらゆる器具を消毒および／または滅菌する組成物の有効量を用いることもまた可能である。器具を消毒するために、組成物をあらゆる器具または機器の表面へ局所的に適用できる。
【００７０】
本発明は以下に与える実施例によってさらに説明されるが、前記実施例は本発明を限定するものとは決して解釈すべきでない。本発明の範囲は、本願明細書に添付する請求項によって決定されるべきである。
【００７１】
実施例
【実施例１】
【００７２】
【表１】
【００７３】
スプレー、霧、エアロゾル、または液組成物などとしての様々な適用に使用する、より希薄な組成物を提供するためには、製剤を水または他の適切な希釈剤で１〜１３００倍に希釈することができる。
【実施例２】
【００７４】
様々な用量および投与経路を用いて、ニワトリの伝染性気管支炎を治療するために、実施例１で開示した組成物１の安全性および許容性の実験を行った。その結果、組成物１は、家禽の給水への液体添加物、点鼻薬製剤への液体添加物、家禽飼料への固体添加物として有効で適切であることが示された。
【００７５】
１３２羽の約７日齢の白色レグホン種ニワトリを１１グループに分け、表１（ａ）〜１（ｃ）に対応する様々な形態および濃度の組成物１を投与し、その後に伝染性気管支炎ウイルスへ曝露した。
【００７６】
【表１ａ】
【００７７】
【表１ｂ】
【００７８】
【表１ｃ】
【００７９】
各トリ籠にニワトリを３羽ずつ入れた。トリ籠は華氏約８５度および相対湿度６５％に維持した。それらへ毎日、白色光を連続１６時間、続いて暗闇を８時間提供した。
【００８０】
組成物１に対するニワトリの許容性および毒性を決定するために、ニワトリを観察した。各グループによって消費された水および飼料の量を評価し、ニワトリ各個体の体重を定期的に測定した。
【００８１】
組成物１を点鼻薬の形態で投与したニワトリについては、飼料および水で投与したグループと平行して、４日間の投与の間、１日４（４）回、各鼻孔へ１（１）滴ずつ点鼻薬を投与した。点鼻薬は朝２回、各投与の間隔を約１時間空けて行い、午後／夕方に２回、やはり各投与の間隔を約１時間空けて行った。この鼻孔投与スケジュールは、朝または午後に立て続けに１時間より短い間隔で投与しない限り、１日当たり各鼻孔に全部で４滴を投与するならば柔軟に変更可能である。点鼻薬は、２０滴／ｍｌ、または１滴当たり５０マイクロリットルを含む標準的なボトル型点眼器を用いて投与した。
【００８２】
組成物１を飼料添加物として投与したニワトリについては、飼料添加物を４日の期間提供した。２４羽のニワトリの１グループへは、高用量の飼料添加物を与えた。他の２４羽のニワトリの１グループへは中用量を、他の２４羽のニワトリの１グループへは低用量を与えた。飼料および水は、４日間定期的に随意、提供した。
組成物１を水分添加物として投与したニワトリについては、水分添加物を４日の期間提供した。２４羽のニワトリの１グループへは、高用量の水分添加物を与えた。他の２４羽のニワトリの１グループへは中用量を、他の２４羽のニワトリの１グループへは低用量を与えた。水は４日間定期的に随意、提供した。飼料は随意に提供した。本実験のコントロールグループは、通常の条件に従って４日間、トリ籠へ入れて飼育した。
【００８３】
最適な有効用量を決定するために、ニワトリの各グループへ１週間のうち１〜４日の期間で組成物１を投与した。ニワトリを毎日観察して、羽の逆立ち、元気の無い様子、元気の無いトリ、またはストレスまたは不快感を示す他の兆候を含めて、気分の不調または異常行動の現われを探した。あらゆる障害または異常は毎日ごとに記録した。実験の終了後、ニワトリは安楽死させ、個別に解剖してあらゆる障害を検査した。収集したサンプルは組織学的評価のために１０％ホルマリンへ漬けた。
【００８４】
飼料および水は、毎日、トリ籠ごとに重量を測定した。量はデータ収集形式で記録した。１日目に、飼料および水を最初に測定および記録した。２〜４日目には、追加的な飼料および水を測定して、飼料および水の表へ追加的に記録した。５日目には、残った飼料および水を秤量し、実験全体の期間にトリ籠ごとで消費された飼料および水の総量を計算した。
【００８５】
表２には、体重変化のデータを要約した。低飼料、低水分、低飼料および水分、中飼料、高飼料、鼻、およびコントロールを与えたニワトリについては、処理グループ間の相違は統計学的に有意ではなかった。
【００８６】
【表２−１】
【００８７】
【表２−２】
【００８８】
【表２−３】
【００８９】
表３には、水および飼料の消費データを要約した。この表では、データはトリ籠ごとの基準で要約した。未使用の４つのトリ籠は、自然に起こる飼料および水の損失を示す解析に含めた。低飼料、低水分、低飼料および水分、中飼料、高飼料、鼻、およびコントロールを与えたニワトリについては、処理グループ間の相違は統計学的に有意ではなかった。
【００９０】
【表３−１】
【００９１】
【表３−２】
【００９２】
【表３−３】
【００９３】
表４には、飼料消費データに対する体重増加の比率を要約した。この表では、データはトリ籠ごとの基準で要約した。この解析によって、以下の処理グループ間の相違は統計学的に有意でないことが明らかとなった：低飼料、低水分、低飼料および水分、中飼料、高飼料、鼻、およびコントロール。
【００９４】
【表４−１】
【００９５】
【表４−２】
【００９６】
【表４−３】
【００９７】
これらの結果は、家禽への組成物１の適切な用量を提供する。データは、様々な（低、中、および高）濃度の薬用飼料を、安全性の問題または許容性の問題なしに、成長期の家禽へ提供可能であることを示している。
【実施例３】
【００９８】
希釈していない実施例１の抗ウイルス組成物である組成物１、および１０倍希釈系列を調製して、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞および受精後１０日のニワトリ胚含有卵中で、ＩＢＶに対する抗ウイルス活性を試験した。加えて、プラシーボも同様に希釈して試験した。
【００９９】
ＶＥＲＯ Ｅ６連続継代性細胞系（ＣＲＬ−１５８６）はＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（メリーランド州、Ｒｏｃｋｄａｌｅ）から入手し、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１．５ｇ／Ｌ 重炭酸ナトリウム、０．１ｍＭ 非必須アミノ酸、１．０ｍＭ ピルビン酸ナトリウム、および１０％ウシ胎仔血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ［Ｇｉｂｃｏ］，カリフォルニア州、Ｃａｒｌｓｂａｄ）を添加した最小必須（イーグル）培地中で、３７℃および５％ＣＯ２で増殖させた。細胞は、Ｔ７５ ｆｌａｓｋ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ニュージャージー州、Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ）中で増殖させ、９６穴プレートへ移して、９０％コンフルエントまで成長させた。
【０１００】
組織培養感染用量５０（Ｔｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄｏｓｅ５０：ＴＣＩＤ５０）の濃度１×１０３のＩＢＶのＢｅａｕｄｅｔｔｅ株を、抗ウイルス化合物、または細胞培養維持培地（１％ウシ胎仔血清を含む）中で調整したプラシーボの（細胞に対して非毒性の、１×１０−３希釈から始まる）７つの１０倍希釈系列と混合した。混合物は室温で３０分間インキュベートして；次に細胞への接種のために、各混合物の９つの１０倍希釈系列を調製した。細胞培地を細胞から除去して、前記混合物を単層上へ接種した。細胞培養維持培地のみを与えたネガティブコントロールのウェルも、同様に実験に含めた。３７℃および５％ＣＯ２で７日間、細胞をインキュベートして、毎日２回、細胞変性効果（ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ：ＣＰＥ）の検査を行った。
【０１０１】
図１は、ＩＢＶへの抗ウイルス効果の結果を示している。図３は、本発明の組成物によってウイルス感染から保護されたＶＥＲＯ Ｅ６細胞、および組成物を適用しておらず、ＩＢＶに感染した細胞を示している。１×１０−３希釈した組成物１の抗ウイルス化合物は、平均で１×１０３０から１×１０１８ＴＣＩＤ５０までＩＢＶの力価を１００倍以上軽減した。１×１０−４希釈の組成物１はＩＢＶ力価を２倍軽減した。それ以上に希釈した組成物１はいずれもＩＢＶの力価を軽減しなかった。それに対して、プラシーボではどの希釈率でもＩＢＶのウイルス力価の軽減は観察されず、これは組成物１中の有効成分が抗ウイルス効果に関与していることを示している。加えて、ネガティブコントロールのウェルではＣＰＥは全く見られなかった。
【０１０２】
組成物の効能を決定するために、ＩＢＶで感染したニワトリ胚含有卵でもまた、試験を行った。ニワトリ胚含有卵も、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞と同様の方法で調整した。組織培養細胞の代わりに受精後１０日のニワトリ胚含有卵に接種したこと、および化合物は胚に対して毒性を示さないため、組成物１およびプラシーボは希釈しないものから始めたこと、以外については実験計画は同一とした。特定病原体未感染（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｆｒｅｅ：ＳＰＦ）のニワトリ受精卵は、Ｓｕｎｒｉｓｅ ｆａｒｍｓ（ニューヨーク州、Ｃａｔｓｋｉｌｌ）から入手し、３７℃で１０日間インキュベートした。ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中で調製した組成物またはプラシーボの未希釈物および各１０倍希釈系列物２００μｌを用意して、１×１０４胚感染用量５０（ＥＩＤ５０）または１×１０７ ＥＩＤ５０のＩＢＶと混合したものを、胚含有卵の漿尿嚢（ｃｈｏｒｉｏａｌｌａｎｔｏｉｃ ｓａｃ：ＣＡＳ）中へ接種した。ＰＢＳのみを与えたネガティブコントロール卵もまた、含めた。卵は３７℃でインキュベートし、７日間、毎日明りに透かして検査して、死亡率を記録した。最初の２４時間以内に生じたあらゆる死亡は、接種に関連した外傷によるものと判断して無視した。７日目に、残った全ての卵を４℃に冷却し、殻を開けて臨床的兆候について胚を検査した。
【０１０３】
図２は、胚含有卵中のＩＢＶに対する組成物１の効果を示したものである。組成物１の１×１０−２希釈までは、ＩＢＶの力価に対する相当量の効果を有し、前記ＩＢＶの力価を１００倍以上も軽減した。それに対して、１×１０−３〜１×１０−７、またはいずれの希釈率でのプラシーボについても、何も影響が観察されず、これは組成物１中の有効成分が抗ウイルス効果に関与していることを示している。
【実施例４】
【０１０４】
ニワトリの伝染性気管支炎に対する試験
治療のタイミングは、ウイルス攻撃の６時間前、ウイルス攻撃の２時間前、およびウイルス攻撃の２時間後とした。抗ウイルス活性は、ウイルス攻撃の５日後に、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲを用いて伝染性気管支炎ウイルス（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ：ＩＢＶ）に関するトリの検査、および臨床的兆候および前記疾患に特徴的な障害の記録、によって評価した。
【０１０５】
この実験には、特定病原体未感染の２週齢レグホン種ニワトリを用いた。トリは、ＨＥＰＡフィルタ付陽圧ｈｏｒｓｅｆａｌ隔離棟中で飼育し、随意に飼料および水を与えた。
【０１０６】
組成物の３つの異なる投与経路を試験した。鼻腔内経路では、実施例１の組成物２００μｌを、各トリの鼻孔へ直接適用した。
【０１０７】
トリ１羽当たり、実施例１の組成物の約１ｍｌをスプレーするためには、噴霧器を用いた。隔離棟への新鮮な空気の流入を一時的に遮断して、トリへスプレーして、約１０分後に新鮮な空気の流入を再開した。
【０１０８】
トリは裂けたパレット（ｃｌｅｆｔ ｐａｌｌｅｔ）を有しているため、組成物を飲み水へ入れることで、口腔および鼻が薬剤に曝露されるはずである。実施例１の組成物を飲み水へ入れる１時間前から、トリに水を与えずにおいて喉が渇いた状態にしておいた。トリ１羽当たり、実施例１の組成物の約１ｍｌを、水で戻した脱脂粉乳の同量と混合した。３０分以内にトリが全ての液体を飲まなかった場合には、残された材料と同量のものをそのトリの口へ投与した。抗ウイルス化合物を消費した後、新鮮な水を提供した。
【０１０９】
【表５】
【０１１０】
処理した全てのトリおよび未処理のグループのうち１つに対して、トリ１羽当たりにＩＢＶのＭａｓｓ４１病原性株を１×１０４ 胚感染用量５０でウイルス攻撃した。攻撃ウイルスは鼻腔内投与して、毎日２回、疾病の臨床的兆候に関してトリを検査した。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲを用いた気管でのウイルス検出によって決定したところ、この量の攻撃ウイルスは、トリの９０％を感染させるのに十分であった。
【０１１１】
臨床的兆候は毎日記録して、瀕死のトリは除外して殺傷して解剖を行った。ウイルス攻撃後の５日目（これはＩＢＶワクチン有効性試験では慣例的である）に、トリを殺傷して解剖した。解剖では、鼻および気管スワブ（ｓｉｎｕｓ ａｎｄ ｔｒａｃｈｅａｌ ｓｗａｂｓ）を採取して、氷冷ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中に設置した。ウイルスの存在は、鼻および気管スワブから直接行った、定量的リアルタイムＲＴ−ＰＣＲによって決定した。有効性は、未処理のコントロールの９０％以上が攻撃ウイルスに対して陽性であり、処理したトリの９０％以上がウイルスに対して陰性であったことに基づいたものである。有効性は、臨床的兆候および障害にもまた、基づいたものである。障害は記録して、気管は組織病理学のために採取した。気管は、１０％中性緩衝ホルマリン中に収集して、組織病理学に供した。組織は通常通りにパラフィンへ包埋して、５μｍ切片をヘマトキシリンおよびエオシン染色のために切断した。上皮過形成、リンパ球浸潤、および上皮線毛消失の重篤度を、各気管に対して採点した。
【０１１２】
処理／ウイルス攻撃の全てのグループを、コントロールのグループ（ウイルス攻撃あり、および無しの両方）と比較した。
【０１１３】
ウイルス攻撃の２時間前または２時間後の鼻腔内接種、およびウイルス攻撃の６時間前、２時間前、および２時間後のスプレーが、最も良い結果を与えた。データの概要は以下の表６に示した。
【０１１４】
【表６】
【実施例５】
【０１１５】
用量反応試験
ニワトリでＩＢＶに対して抗ウイルス効果を得ることが可能な活性配合の最小量を同定するために、スプレー接種を用いた。
【０１１６】
実施例４で用いたのと同じ種類および日齢のトリ、および鶏舎を、この実施例でも同様に用いた。
【０１１７】
以下の濃度の実施例１の製剤を用いた：未希釈物、および、製剤：水の比率が、１:５，１:１０，１:２０，１：４０，１：８０，１：１６０，１：３２０，１：６４０、および１：１２８０、である水による希釈物である。実施例４の記述と同様に、処理したトリおよび未処理のトリのグループへウイルス攻撃を行った。他の未処理のトリはネガティブコントロールとした。
【０１１８】
【表７】
【０１１９】
ウイルス攻撃の２時間前の処理では検出可能なウイルスは対数スケールで３だけ減少したが、それに対して、ウイルス攻撃の２時間後の処理では検出可能なウイルスは対数スケールで２．５だけ減少した。２週齢の感染しやすい特定病原体未感染のニワトリは、１×１０３ＥＩＤ５０以下の病原性ＩＢＶによるウイルス攻撃では、ほとんどのトリが病気にならないことが知られているため、このことは極めて重要である。これは、より低い希釈率で処理したグループで臨床的兆候を示すトリがより少ないという以下のデータと一致する。従って、１：４０またはそれ以下の希釈率での本発明の組成物によるウイルス攻撃の２時間前の処理によって、野外での疾病を減少させるまたは防止する可能性があり得る。感染の２時間後での処理は矛盾しない用量反応を示したため、１：４０またはそれ以下の希釈率で与えた場合に病状の改善をもたらすであろう。
【０１２０】
【表８】
【０１２１】
これまでの記述中に、本発明の数量的特徴および利点が、本発明の構造および機能の詳細と共に説明されているものの、開示内容は説明のためのみであり、詳細において、特に、本発明の方式中の形状、サイズ、および部品の配置については、添付の請求項が表現する用語の広範な意味によって示される最大限まで変更が可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
伝染性気管支炎ウイルス株を有するトリの治療方法であって、
伝染性気管支炎を有するトリに、安全かつ有効な量の組成物を投与する工程を有し、前記組成物は、
ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、ターメリック抽出物、ターメリック粉末、ターメリックの植物全体の少なくとも一部、ターメリックのチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第１の成分と、
緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、緑茶の植物全体の少なくとも一部、緑茶のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第２の成分と、
生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物、生姜粉末、生姜の植物全体の少なくとも一部、生姜のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第３の成分と、
許容可能な担体と
を含む組成物であり、前記量は、投与した場合に、他のトリによる伝染性気管支炎の発症を軽減するのに有効な量である、方法。
【請求項２】
伝染性気管支炎の発症または伝染性を軽減するための組成物の予防的使用方法であって、伝染性気管支炎に曝露された、または曝露されるトリに、安全かつ有効な量の組成物を投与する工程を有し、前記組成物は、
ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、ターメリック抽出物、ターメリック粉末、ターメリックの植物全体の少なくとも一部、ターメリックのチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第１の成分と、
緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、緑茶の植物全体の少なくとも一部、緑茶のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第２の成分と、
生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物、生姜粉末、生姜の植物全体の少なくとも一部、生姜のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第３の成分と、
許容可能な担体と
を含む組成物であり、
前記量は、投与した場合に、前記処理したトリに曝露した他のトリの発症を軽減するために有効な量である、方法。
【請求項３】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、乾燥製剤、液剤、錠剤、カプセル、飼料添加物、および水添加物から成る群から選択される形態で投与されるものである。
【請求項４】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、エアロゾル、スプレー、または霧として投与されるものである。
【請求項５】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、インオボ（ｉｎ ｏｖｏ）で投与されるものである。
【請求項６】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物の投与は、器具上に存在する伝染性気管支炎ウイルスの少なくとも一部を不活性な状態にするために、前記器具の物品を消毒するのに有効な量の前記組成物を使用する工程をさらに有するものである。
【請求項７】
請求項１〜６記載のいずれか１つの方法において、第１の成分はターメリック抽出物を含み、第２の成分は緑茶抽出物を含むものである。
【請求項８】
請求項１〜７記載のいずれか１つの方法において、前記組成物の１グラム当たりは、約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶抽出物、および約０．００１１ｍｇ〜約３０ｍｇのターメリック粉末抽出物を含むものである。
【請求項９】
請求項１〜８記載のいずれか１つの方法において、前記第３の成分は生姜抽出物を含むものである。
【請求項１０】
請求項１〜９記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇのターメリック粉末抽出物を含むものである。
【請求項１１】
請求項１〜１０記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、セイヨウワサビ根、セイヨウワサビ油、セイヨウワサビ粉末抽出物、セイヨウワサビ液体抽出物、およびセイヨウワサビ根抽出物から成る群から選択される第４の成分をさらに含むものである。
【請求項１２】
請求項１〜１１記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、リン脂質、中鎖脂肪酸トリグリセリド油、および水から成る群から選択される１若しくはそれ以上の成分をさらに有するものである。
【請求項１３】
請求項１１記載の方法において、前記第４の成分はセイヨウワサビ根抽出物を含むものである。
【請求項１４】
トリの餌であって、
トリの飼料成分と、
安全かつ有効な量の組成物と
を有し、前記組成物は、
ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、ターメリック抽出物、ターメリック粉末、ターメリックの植物全体の少なくとも一部、ターメリックのチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第１の成分と、
緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、緑茶の植物全体の少なくとも一部、緑茶のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第２の成分と、
生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物、生姜粉末、生姜の植物全体の少なくとも一部、生姜のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第３の成分と、
を含む組成物であり、
前記量は、トリに飼料として投与した場合、伝染性気管支炎を治療、前記トリにおける伝染性気管支炎の発症を軽減、または前記治療したトリに曝露した他のトリでの伝染性気管支炎の発生を軽減するために有効な量である、トリの餌。
【請求項１５】
請求項１４記載のトリの餌において、前記第１の成分はターメリック抽出物を含み、前記第２の成分は緑茶抽出物を含むものである。
【請求項１６】
請求項１４〜１５記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は１グラム当たり、約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶抽出物、および約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇのターメリック粉末抽出物を含むものである。
【請求項１７】
請求項１４〜１６記載のいずれか１つのトリの餌において、前記第３の成分は生姜抽出物を含むものである。
【請求項１８】
請求項１４〜１７記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は、約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇの生姜抽出物を含むものである。
【請求項１９】
請求項１４〜１８記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は、セイヨウワサビ油、セイヨウワサビ根、セイヨウワサビ粉末抽出物、セイヨウワサビ液体抽出物、およびセイヨウワサビ根抽出物から成る群から選択される第４の成分を含むものである。
【請求項２０】
請求項１４〜１９記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、リン脂質、中鎖脂肪酸トリグリセリド油、および水から成る群から選択される１若しくはそれ以上の成分をさらに含むものである。
【請求項２１】
請求項１４〜２０記載のいずれか１つのトリの餌において、前記トリの餌は、前記トリの餌の総重量に基づいて約０．００１〜約５０重量％の前記組成物を含むものである。
【請求項２２】
請求項１４〜２０記載のいずれか１つのトリの餌において、前記トリの餌は、前記トリの餌の総重量に基づいて約０．０１〜約３０重量％の前記組成物を含むものである。
【請求項２３】
請求項１４〜２０記載のいずれか１つのトリの餌において、前記トリの餌は、前記トリの餌の総重量に基づいて約０．１〜約２０重量％の前記組成物を含むものである。
【請求項２４】
請求項１９記載の前記トリの餌において、前記第４の成分はセイヨウワサビ油を含むものである。
【請求項１】
伝染性気管支炎ウイルス株を有するトリの治療方法であって、
伝染性気管支炎を有するトリに、安全かつ有効な量の組成物を投与する工程を有し、前記組成物は、
ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、ターメリック抽出物、ターメリック粉末、ターメリックの植物全体の少なくとも一部、ターメリックのチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第１の成分と、
緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、緑茶の植物全体の少なくとも一部、緑茶のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第２の成分と、
生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物、生姜粉末、生姜の植物全体の少なくとも一部、生姜のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第３の成分と、
許容可能な担体と
を含む組成物であり、前記量は、投与した場合に、他のトリによる伝染性気管支炎の発症を軽減するのに有効な量である、方法。
【請求項２】
伝染性気管支炎の発症または伝染性を軽減するための組成物の予防的使用方法であって、伝染性気管支炎に曝露された、または曝露されるトリに、安全かつ有効な量の組成物を投与する工程を有し、前記組成物は、
ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、ターメリック抽出物、ターメリック粉末、ターメリックの植物全体の少なくとも一部、ターメリックのチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第１の成分と、
緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、緑茶の植物全体の少なくとも一部、緑茶のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第２の成分と、
生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物、生姜粉末、生姜の植物全体の少なくとも一部、生姜のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第３の成分と、
許容可能な担体と
を含む組成物であり、
前記量は、投与した場合に、前記処理したトリに曝露した他のトリの発症を軽減するために有効な量である、方法。
【請求項３】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、乾燥製剤、液剤、錠剤、カプセル、飼料添加物、および水添加物から成る群から選択される形態で投与されるものである。
【請求項４】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、エアロゾル、スプレー、または霧として投与されるものである。
【請求項５】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、インオボ（ｉｎ ｏｖｏ）で投与されるものである。
【請求項６】
請求項１〜２記載のいずれか１つの方法において、前記組成物の投与は、器具上に存在する伝染性気管支炎ウイルスの少なくとも一部を不活性な状態にするために、前記器具の物品を消毒するのに有効な量の前記組成物を使用する工程をさらに有するものである。
【請求項７】
請求項１〜６記載のいずれか１つの方法において、第１の成分はターメリック抽出物を含み、第２の成分は緑茶抽出物を含むものである。
【請求項８】
請求項１〜７記載のいずれか１つの方法において、前記組成物の１グラム当たりは、約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶抽出物、および約０．００１１ｍｇ〜約３０ｍｇのターメリック粉末抽出物を含むものである。
【請求項９】
請求項１〜８記載のいずれか１つの方法において、前記第３の成分は生姜抽出物を含むものである。
【請求項１０】
請求項１〜９記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇのターメリック粉末抽出物を含むものである。
【請求項１１】
請求項１〜１０記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、セイヨウワサビ根、セイヨウワサビ油、セイヨウワサビ粉末抽出物、セイヨウワサビ液体抽出物、およびセイヨウワサビ根抽出物から成る群から選択される第４の成分をさらに含むものである。
【請求項１２】
請求項１〜１１記載のいずれか１つの方法において、前記組成物は、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、リン脂質、中鎖脂肪酸トリグリセリド油、および水から成る群から選択される１若しくはそれ以上の成分をさらに有するものである。
【請求項１３】
請求項１１記載の方法において、前記第４の成分はセイヨウワサビ根抽出物を含むものである。
【請求項１４】
トリの餌であって、
トリの飼料成分と、
安全かつ有効な量の組成物と
を有し、前記組成物は、
ターメリック粉末抽出物、ターメリック液体抽出物、ターメリック抽出物、ターメリック粉末、ターメリックの植物全体の少なくとも一部、ターメリックのチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第１の成分と、
緑茶粉末、緑茶粉末抽出物、緑茶液体抽出物、緑茶の植物全体の少なくとも一部、緑茶のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第２の成分と、
生姜粉末抽出物、生姜液体抽出物、生姜粉末、生姜の植物全体の少なくとも一部、生姜のチンキ剤、およびそれらの混合物から成る群から選択される第３の成分と、
を含む組成物であり、
前記量は、トリに飼料として投与した場合、伝染性気管支炎を治療、前記トリにおける伝染性気管支炎の発症を軽減、または前記治療したトリに曝露した他のトリでの伝染性気管支炎の発生を軽減するために有効な量である、トリの餌。
【請求項１５】
請求項１４記載のトリの餌において、前記第１の成分はターメリック抽出物を含み、前記第２の成分は緑茶抽出物を含むものである。
【請求項１６】
請求項１４〜１５記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は１グラム当たり、約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇの緑茶抽出物、および約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇのターメリック粉末抽出物を含むものである。
【請求項１７】
請求項１４〜１６記載のいずれか１つのトリの餌において、前記第３の成分は生姜抽出物を含むものである。
【請求項１８】
請求項１４〜１７記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は、約０．００１ｍｇ〜約３０ｍｇの生姜抽出物を含むものである。
【請求項１９】
請求項１４〜１８記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は、セイヨウワサビ油、セイヨウワサビ根、セイヨウワサビ粉末抽出物、セイヨウワサビ液体抽出物、およびセイヨウワサビ根抽出物から成る群から選択される第４の成分を含むものである。
【請求項２０】
請求項１４〜１９記載のいずれか１つのトリの餌において、前記組成物は、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、リン脂質、中鎖脂肪酸トリグリセリド油、および水から成る群から選択される１若しくはそれ以上の成分をさらに含むものである。
【請求項２１】
請求項１４〜２０記載のいずれか１つのトリの餌において、前記トリの餌は、前記トリの餌の総重量に基づいて約０．００１〜約５０重量％の前記組成物を含むものである。
【請求項２２】
請求項１４〜２０記載のいずれか１つのトリの餌において、前記トリの餌は、前記トリの餌の総重量に基づいて約０．０１〜約３０重量％の前記組成物を含むものである。
【請求項２３】
請求項１４〜２０記載のいずれか１つのトリの餌において、前記トリの餌は、前記トリの餌の総重量に基づいて約０．１〜約２０重量％の前記組成物を含むものである。
【請求項２４】
請求項１９記載の前記トリの餌において、前記第４の成分はセイヨウワサビ油を含むものである。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公表番号】特表２０１０−５２２１３８（Ｐ２０１０−５２２１３８Ａ）
【公表日】平成２２年７月１日（２０１０．７．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５４１６１２（Ｐ２００９−５４１６１２）
【出願日】平成１９年１２月１４日（２００７．１２．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０８７５５１
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０７４０３１
【国際公開日】平成２０年６月１９日（２００８．６．１９）
【出願人】（５０３２２０５６５）ザ キグリー コーポレーション (3)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年７月１日（２０１０．７．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１２月１４日（２００７．１２．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０８７５５１
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０７４０３１
【国際公開日】平成２０年６月１９日（２００８．６．１９）
【出願人】（５０３２２０５６５）ザ キグリー コーポレーション (3)
【Ｆターム（参考）】
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