健康機能向上剤
【課題】 健康機能向上剤の提供。
【解決手段】 δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を有効成分とする健康機能向上剤。
【解決手段】 δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を有効成分とする健康機能向上剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、健康機能向上剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
人や動物の健康機能は、疲労、病気、妊娠、加齢、栄養障害、栄養欠乏により低下する。この疲労には肉体疲労と精神疲労があり、現代人の疲労は肉体疲労だけでなく精神疲労が大きく関与している。
【０００３】
このうち、肉体疲労に有効な栄養としては、糖分、でんぷんからなる複合炭水化物等が用いられている。また薬物としては、ビタミンＢ1、ビタミンＢ2、ニコチン酸等のビタミンＢ群、メラトニン、ビタミンＣ、ビタミンＥ、マグネシウムなどが用いられている。
【０００４】
また、最近、必須アミノ酸や非必須アミノ酸を含む特定の組成のアミノ酸類に疲労時の運動機能を向上させる効果があることが報告されている（特許文献１）。必須アミノ酸は、バリン、ロイシン、イソロイシン、リジン、スレオニン、メチオニンなど、また非必須アミノ酸としては、アルギニン、グルタミン、プロリンなどがある。
【特許文献１】特開平９−２４９５５６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、アミノ酸のうち、グルタミンは溶解度が低く不安定で、体内でグルタミン酸とアンモニアに分解するという問題があり、またアルギニンは、肌荒れ、皮膚が厚くなる、関節の肥大、骨の奇形という副作用があることが知られており、その摂取については大変な注意が必要である。
従って、本発明の目的は、長期間摂取できる健康機能向上剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで本発明者は、種々のアミノ酸の薬理作用を検討してきたところ、５−アミノレブリン酸に代表されるδ−アミノ酸類が、特に老齢化した動物の健康機能を有意に増加させる作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を有効成分とする健康機能向上剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、健康機能が低下した動物、例えば高齢化に伴ない、健康機能が低下した人を含む動物の健康機能を向上させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の健康機能向上剤の有効成分は、δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩である。当該δ−アミノ酸類としては、次式（１）
【０００９】
【化１】
【００１０】
（式中、Ｒ1は水素原子又はアシル基を示し、Ｒ2は水素原子又は置換基を有していてもよい炭化水素基を示す)
で表される５−アミノレブリン酸、その誘導体類又はその塩（以下、「５−アミノレブリン酸類」と称する）が挙げられる。
【００１１】
当該５−アミノレブリン酸類は、光動力学的治療における光増感剤（特表２００４−５０５１０５号）、植物成長調節剤（特開平０７−５３４８７号）、除草剤（特開平０５−１１７１１０号）、魚類病原性微生物、寄生虫の感染治療（特開２００１−３１６２５５号）、豚成育促進剤（特開２００３−４０７７０号）等として有用であることは知られている。
【００１２】
式（１）中、Ｒ1で示されるアシル基としては、例えば炭素数１〜２４のアルカノイル基、芳香族アシル基、ベンジルオキシカルボニル基等が挙げられる。好ましいアシル基の具体例としては、例えばアセチル基、ｎ−プロパノイル基、ｎ−ブタノイル基、ｎ−ペンタノイル基、ｎ−ヘキサノイル基、ｎ−ノナノイル基、ベンジルオキシカルボニル基等が挙げられる。このうち、炭素数１〜６のアルカノイル基がより好ましい。
【００１３】
また、Ｒ2で示される置換基を有していてもよい炭化水素基としては、例えば、ヒドロキシ、アルコキシ、アシルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アミノ、アリール、オキソ、フロロ、クロロ及びニトロから選ばれる基が置換していてもよい炭化水素基を示す。ここで、炭化水素基としては、アルキル基、アルケニル基、アラルキル基又はアリール基が好ましい。ここで、アルキル基としては、直鎖、分岐鎖又は環状のアルキル基が挙げられ、炭素数１〜４０、更に１〜１８、特に１〜７のアルキル基が好ましい。アルケニル基としては、直鎖、分岐鎖又は環状のアルケニル基が挙げられ、炭素数２〜４０、更に２〜１８のアルケニル基が好ましい。アラルキル基としては炭素数６〜２０のアリール基と炭素数１〜６のアルキル基から構成されるものが挙げられる。また、アリール基としては炭素数６〜２０のアリール基が挙げられる。
アルコキシ基としては炭素数１〜１８のアルコキシ基、特に炭素数１〜７のアルコキシ基が好ましい。アシルオキシ基としては、炭素数１〜１８のアルカノイルオキシ基、特に炭素数２〜８のアルカノイルオキシ基が好ましい。アルコキシカルボニルオキシ基としては、Ｃ1-18アルコキシ−カルボニルオキシ基、特にＣ1-7アルコキシ−カルボニルオキシ基が好ましい。
炭素数１〜１８の好ましいアルキル基としては例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、エチルブチル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルヘキシル基、ｎ−オクチル基、イソオクチル基、ｔｅｒｔ−オクチル基、２−エチルヘキシル基、３−メチルヘプチル基、ｎ−ノニル基、イソノニル基、１−メチルオクチル基、エチルヘプチル基、ｎ−デシル基、１−メチルノニル基、ｎ−ウンデシル基、１，１−ジメチルノニル基、ｎ−ドデシル基、ｎ−トリデシル基、ｎ−テトラデシル基、ｎ−ペンタデシル基、ｎ−ヘキサデシル基、ｎ−ヘプタデシル基、ｎ−オクタデシル基等が挙げられる。
炭素数１〜７のより好ましいアルキル基としては例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、エチルブチル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルヘキシル基が挙げられる。
ヒドロキシが置換した炭素数１〜１８のアルキル基としては、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、４−ヒドロキシブチル、５−ヒドロキシペンチル、６−ヒドロキシヘキシル等が挙げられる。
アルコキシが置換した炭素数１〜１８のアルキル基としては、Ｃ1-7アルコキシ−Ｃ1-18アルキル基、例えば２−メトキシエチル、２−エトキシエチル、３−メトキシプロピル、３−エトキシプロピル、４−メトキシブチル、４−エトキシブチル、２−（２−メトキシエチル）エチル等が挙げられる。
アシルオキシ基が置換したアルキル基としては、Ｃ2-7アルカノイルオキシ−Ｃ1-18アルキル基が挙げられる。アルコキシカルボニルオキシ基が置換したアルキル基としては、Ｃ1-18アルコキシ−カルボニルオキシ−Ｃ1-18アルキル基が挙げられる。アミノ基が置換したアルキル基としては、アミノ−Ｃ1-18アルキル基が挙げられる。
炭素数２〜１８のアルケニル基としては、ビニル基、アリル基、イソプロペニル基、２−ブテニル基、２−メチルアリル基、１，１−ジメチルアリル基、３−メチル−２−ブテニル基、３−メチル−３−ブテニル基、４−ペンテニル基、ヘキセニル基、オクテニル基、ノネニル基、デセニル基、シクロプロペニル基、シクロブテニル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘプテニル基、シクロオクテニル基、４−メチルシクロヘキセニル基、４−エチルシクロヘキセニル基、２−シクロペンテニルエチル基、シクロヘキセニルメチル基、シクロヘプテニルメチル基、２−シクロブテニルエチル基、２−シクロオクテニルエチル基、３−（４−メチルシクロヘキセニル）プロピル基、４−シクロプロペニルブチル基、５−（４−エチルシクロヘキセニル）ペンチル基、オレイル基、バクセニル基、リノレイル基、リノレニル基、ｔｒａｎｓ−９−オクタデセニル基、９Ｅ，１２Ｅ−オクタデカジエニル基、９Ｅ，１２Ｅ，１５Ｅ−オクタデカトリエニル基等が挙げられる。
炭素数７〜２６のアラルキル基としては、炭素数１〜６のアルキル基と炭素数６〜２０のアリール基とから構成されるものが好ましい。炭素数１〜６のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロヘキシル基等が挙げられ、炭素数６〜２０のアリール基としては、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。炭素数７〜２６のアラルキル基のうち、ベンジル基、フェネチル基、９−フルオレニルメチル基が好ましく、ベンジル基、フルオレニルメチル基が特に好ましい。当該アラルキル基のアリール基は、上記記載の炭素数１〜６のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等の炭素数１〜６のアルコキシ基、水酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子、カルボキシ基等の置換基１〜３個によって置換されていてもよい。
炭素数６〜２０のアリール基としては、フェニル基、ナフチル基等が挙げられ、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロヘキシル基等の炭素数１〜６のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等の炭素数１〜６のアルコキシ基、水酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子、カルボキシ基等の置換基１〜３個によって置換されていてもよい。尚、上記Ｒ1は、アミノ基の置換基、Ｒ2はカルボン酸基の置換基を示しているが、例示したこれらの置換基は５−アミノレブリン酸類のみならず、δ−アミノ酸類の置換基でもある。
【００１４】
δ−アミノ酸又はその誘導体の塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩、メチルリン酸塩、エチルリン酸塩、亜リン酸塩、次亜リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、トルエンスルホン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、メタンスルホン酸塩、酪酸塩、吉草酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩等の酸付加塩、及びナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩等の金属塩、アンモニウム塩、アルキルアンモニウム塩等が挙げられる。なお、これらの塩は使用時において水溶液又は粉体として用いられる。
【００１５】
以上のδ−アミノ酸、その誘導体又はそれらの塩は、水和物又は溶媒和物を形成していてもよく、またいずれかを単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【００１６】
δ−アミノ酸、その誘導体又はそれらの塩（以下、「δ−アミノ酸類」と称する。）は、化学合成、微生物による生産、酵素による生産のいずれの方法によっても製造することができる。また前記δ−アミノ酸類のうち、５−アミノレブリン酸類は、特開昭４８−９２３２８号公報、特開昭６２−１１１９５４号公報、特開平２−７６８４１号公報、特開平６−１７２２８１号公報、特開平７−１８８１３３号公報、特開平１１−４２０８３号公報等に記載の方法に準じて製造することができる。上記のようにして製造されたδ−アミノ酸類、それらの精製前の化学反応溶液や発酵液は、有害な物質を含まない限り、分離精製することなくそのまま用いることができる。
また市販品なども使用することができる。
【００１７】
上記δ−アミノ酸類は、後記実施例に示すように、特に老齢化して健康機能が低下したマウスの自然運動量を増加させ、又体重増加を促進させ、低下した健康機能、狭義には、運動機能を向上させる作用をする。又、δ−アミノ酸類は、肝機能向上剤であり、後記実施例で示すように、マウスに経口投与することで、マウスのγ−ＧＴＰ値を減少させる作用をする。従って、上記δ−アミノ酸類は人を含む動物の健康機能向上剤として有用であり、特に加齢により健康機能が低下した人を含む動物の健康機能向上剤として有用である。
【００１８】
また、本発明の健康機能向上剤は、ミネラルを含有させるか、同時に摂取することにより、さらにその効果を向上させることができる。ミネラルとしては、鉄、亜鉛、銅、リン、カルシウム、マグネシウム、カリウム、セレン、クロム、マンガン、ヨウ素、ホウ素、ケイ素、バナジウム、モリブデン、コバルトなどが挙げられるが、特に好ましくは鉄、マグネシウム、マンガンである。これらのミネラル分は単独で、又は二種以上を組み合わせて用いることができる。ミネラルの化学的性状としては生物に害を与えるものでなければどんなものを用いてもよい。
【００１９】
本発明の健康機能向上剤には、必要に応じて栄養剤等を加えることができる。栄養剤としては、例えば、必須アミノ酸類、非必須アミノ酸類、ビタミン類、タウリン、コエンザイムＱ１０、αリポ酸などの体内因子、ハーブ類、プロテイン、種々の酵素、ポリフェノール類などの抗酸化剤などが挙げられる。
【００２０】
本発明の健康機能向上剤は、δ−アミノ酸類の粉末、δ−アミノ酸類を水に溶かした水溶液、上記方法で製造したδ−アミノ酸類を含む発酵液を、賦形剤等の担体に吸着させて使用することもできる。担体の種類としては、一般的なものでよく、結晶性セルロース、ゼラチン、でんぷん、デキストリン、油かす、パン酵母、ビール酵母、酒酵母、ワイン酵母、脱脂粉乳、乳糖、動物性及び植物性油脂、無水リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ケイ酸アルミン酸マグネシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムなどが挙げられる。
【００２１】
本発明の健康機能向上剤の剤型としては、注射剤、錠剤、カプセル剤、細粒剤、シロップ剤、坐薬等が挙げられる。これらは溶剤、分散媒、増量剤、賦形剤等を適宜用い、常法に従って製造することができる。また、食品の形態として摂取してもよい。
【００２２】
本発明の健康機能向上剤を水溶液として調製する場合には、δ−アミノ酸類が５−アミノレブリン酸類の場合、有効成分である５−アミノレブリン酸類の分解を防ぐため、水溶液がアルカリ性とならないように留意する必要がある。アルカリ性となってしまう場合は、酸素を除去することによって有効成分の分解を防ぐことができる。
【００２３】
本発明の健康機能向上剤は、本剤を摂取してその健康機能を向上させることができればよく、本剤の使用方法に制限はないが、好ましい態様について以下に示す。
【００２４】
本剤を用いた健康機能向上剤の対象となる動物は特に限定されないが、哺乳類、爬虫類、鳥類、両生類、魚類などの脊椎動物が好ましい。これらの例としては、人、牛、豚、羊、やぎ、マウス、ラット、ウサギ、犬、猫、鶏、鶉、ニジマス、コイ、ウナギ、イワナなどの淡水魚、ギンザケ、ブリ、マダイ、サバ、マグロなどの海水魚、及び熱帯魚や爬虫類などの観賞生物などが挙げられる。
【００２５】
本剤の健康機能向上剤の使用は動物の成育のどの時点でも可能であるが、人であれば１５歳以降が好ましく、３５歳以降が特に好ましい。
【００２６】
本発明の健康機能向上剤の摂取方法としては特に限定されないが、経口摂取、注射による摂取、経管による摂取又は経腸による摂取が挙げられ、なかでも経口摂取が好ましい。
【００２７】
本剤は、１度の摂取でも十分な効果を示すが、さらに効果を強めるために複数回摂取することもできる。摂取する剤あたりの効果は複数回摂取の方が効果的であり、毎日少量ずつ摂取するのが効率的な使用方法である。
【００２８】
本剤の対象動物１kgあたり１回の摂取量は、δ−アミノ酸類として０．００１mg〜１０００mgが好ましく、さらには０．００１mg〜１００mg、特に０．００１mg〜５０mgが好ましい。本剤の摂取量は、成育が旺盛な時期ほど、また摂取回数の少ないほど多くの量が必要である。適切な範囲を超えた摂取は不経済であるばかりか日光傷害を起こす可能性があるため望ましくない。
【００２９】
またミネラル類を併用する場合は同時に使用してもよいし別々に使用してもよい。使用するミネラルの種類、その使用方法及びその使用量は通常市販されているミネラル類と同じで差し支えない。その使用量は、例えば鉄の場合には成人男性で１日あたり１〜４５mgであればよく、５〜２０mgが好ましい。マグネシウムの場合には５０mg〜７００mgであればよく、１００〜５００mgが好ましい。マンガンの場合には０．１〜１１mgであればよく、２〜８mgが好ましい。
【実施例】
【００３０】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに何ら限定されない。
【００３１】
実施例１
一週間予備飼育したマウス（３５〜４５週齢、ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ）にマウス体重１kgあたり５−アミノレブリン酸（以下、ＡＬＡと称す）塩酸塩１０mgを一日一回、７日間連続して摂取させた。ＡＬＡ塩酸塩は蒸留水で０．５ｇ／mLの濃度に調整し、マウスに経口投与した。試験後、床面積が２０cm×２０cmのゲージに入れ、５分間の移動距離を計測した。試験は１区あたり雄と雌のマウス各５匹、計１０匹で実施、値は平均値を示した。ＡＬＡを処理した区においては、雄、雌いずれの場合も移動距離が多く、運動能力が向上していることを確認した。また試験中、ＡＬＡ処理したマウスには肉眼的に異常な興奮・行動などの症状は観察されなかった。
【００３２】
【表１】
【００３３】
実施例２
一週間予備飼育した老齢のリタイアマウス（３５〜４５週齢、ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ）にマウス体重１kgあたりＡＬＡ塩酸塩１０mgを一日一回、７日間連続して摂取させた。ＡＬＡ塩酸塩は蒸留水で０．５ｇ／mLの濃度に調整し、マウスに経口投与した。試験後、マウスを解剖しマウスの血液を採取し血液１mLあたりのＡＬＡ酸脱水酵素（ＡＬＡＤ）活性（５−アミノレブリン酸が二量化し、１分子のピロール物質であるポルホビリノーゲン（以下、ＰＢＧと称す）を形成する活性）及びポルホビリノーゲンデアミナーゼ（ＰＢＧＤ）活性（ＰＢＧからヒドロキシメチルビランに変換する活性）を測定した。ＡＬＡがＰＢＧを形成するパス及びＰＢＧからヒドロキシメチルビランに変換するパスは、ヘム合成の重要なパスの一部である。ヘパリン処理したマウスの全血０．０２mLに蒸留水を０．３３mL加えた後、０．５Ｍ Ｎａ−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ pH６．４、０．０５mL、０．１Ｍ ＤＴＴ（１mM ＺｎＳＯ4を含む）を０．０５mL、５０mM ＡＬＡ塩酸塩を０．０５mL加え、総量０．５mLとし、これを３７℃、３０分間保持した後、１Ｍ トリクロロ酢酸を０．５mL加え、反応を停止した後３０００rpmの上清にエールリッヒ試薬を等量加え、正確に１０分後、分光光度計を用いて、エールリッヒ試薬とＰＢＧが反応して生成する化合物の特性吸収である５５３nmの吸光度を測定した（ＯＤ）。
【００３４】
計算はＡＬＡＤ活性によって得られる反応産物ＰＢＧの分子吸光係数６１０００を用いて以下のごとく行った。空試料は反応時間０分を用いた（ＯＤ0）。
【００３５】
ＡＬＡＤ活性＝1M×(OD-OD0)/61000×2/1000×1/反応試料量mL×1
＝32.8×(OD-OD0)/反応試料量(mL)nmolPBG/mL/h
【００３６】
またＰＢＧＤ活性は以下の通り測定した。ヘパリン処理したマウスの全血０．０２mLに蒸留水を０．３８mL加えた後、０．６mM ＰＢＧ（０．３８Ｍ Ｎａ−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ pH７．８を含む）を０．０５mL加えた後、３７℃、３０分間保持した。５Ｍ トリクロロ酢酸（０．８％ヨウ素を含む）を０．０５mL加え、反応を停止した後、３０００rpm５分間の遠心上清をそのまま蛍光分光光度計にて励起波長４０５nm、蛍光波長５９７nmの蛍光強度を測定した。
【００３７】
計算はＰＢＧＤ活性によって得られるウロポルフィリノーゲン１型異性体の標準物質を用いて比例計算した。
【００３８】
すなわち、標準物質０．５３６nmol ＵＲＯ／mLのときにＦＵ（Ｅｍ＝５９７nmの蛍光強度）＝１３９
したがって、ＰＢＧＤ活性＝0.536/139×0.5/0.01×2×FU／Ht
【００３９】
試験は１区あたり雄のマウス５匹で実施、値は平均値を示した。ＡＬＡを処理した区においては、ＡＬＡＤ活性及びＰＢＧＤ活性が向上していることを確認した。
【００４０】
【表２】
【００４１】
上記のように、ＡＬＡを摂取することにより、呼吸電子伝達系の重要な因子であるヘムタンパク質を構成するヘム合成経路の活性（ＡＬＡＤ活性、ＰＢＧＤ活性）を向上させることを見出した。よって、本経路が活性化することにより、動物体内でエネルギー代謝を行うクエン酸回路（ＴＣＡサイクル）が活性化され、運動機能が向上したと考えられる。
【００４２】
実施例３
一週間予備飼育したマウス（３５〜４５週齢、ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃ１）にマウス体重１kgあたりＡＬＡ塩酸塩１０mgを一日一回、７日間連続して摂取させた。ＡＬＡ塩酸塩は蒸留水で０．５ｇ／mLの濃度に調整し、マウスに経口投与した。試験前後で、回転式運動量測定器（回転篭：直径２００mm×巾５０mm、飼育篭：Ｗ９０mm×Ｄ２２０mm×Ｈ９０mm、（株）シナノ製作所社製）に入れ、１６時間の回転数を計測した。試験は回転式運動量１個にマウス1匹で実施し、無処理５匹、ＡＬＡ処理５匹を１区として雌のマウスに対し実施し、値は平均値を示した。ＡＬＡを処理した区においては、回転量が多く、運動能力が向上していることを確認した。
【００４３】
【表３】
【００４４】
実施例４
日本医科学動物資材研究所（株）生産のｄｄＹ−Ｎ系マウスを１２０頭（雄、雌各６０頭）を約４週齢で導入し、１週間の検疫を行って健康状態に異常ないこと確認し試験に用いた。試験区は、注射用水を供試マウスの体重１kgあたり１０mLの割合で２８日間連続して胃ゾンデを用いて強制経口投与する対照区、ＡＬＡ酸塩酸塩を供試マウスの体重１kgあたり５mg、１０mg及び２５mgの割合で同様に投与する３試験区の計４区を設定した。供試マウスを各群の平均体重がほぼ均等となるように、雄、雌毎に１群を５匹とした１２群に区分し、各区に雄、雌各３群ずつを割付けて、２８日間飼育した。供試マウスは、室温２３．０±２．０℃、照射時間１２時間／日に設定した飼育室に設置したステンレス製５連ケージを用いて群毎に飼育した。試験開始時より１週間間隔で固体別体重を測定して増体量を算出した。
【００４５】
その結果、試験期間中の発育曲線（雄、雌の平均、図１）で示すように、１０mg／kg投与区が他の３区より優れる発育を示し、実施例３の結果と併せると、運動機能が向上し、体重増加効果も認められることから、健康機能向上剤として有用であることがわかった。
なお、ＡＬＡ添加群においても、健康状態に異常は認められなかった。
【００４６】
実施例５
養豚場で同日に生産されたＬＷ・Ｄ種子豚を１４頭（去勢、雌各７頭）ずつ３回に分けて導入し、９〜１２日間の予備飼育を行って健康状態に異常ないこと確認したのち、各回とも、１２頭（去勢、雌各６頭）ずつを選抜して試験に用いた。試験区は、ＡＬＡ塩酸塩無添加の対照飼料（表４）を供給する対照区と、ＡＬＡ塩酸塩を１０ppm及び５０ppm添加した飼料を供給する試験区２区の計３区を設定した。供試豚を、体重の分布がほぼ均等となるように４頭（去勢、雌各２頭）ずつ３群に区分し、各区に１群ずつを割付けて６週間飼育した。供試豚舎は１．８×２．７ｍのコンクリート床豚房が１４房ずつ並列した開放型豚舎でブロック毎に隣接した３豚房を用いて群飼した。敷科は稲ワラを用いた。各豚房内には試験開始後３週まで保温箱を設置した。飼料及び飲水は不断供与した。試験開始時より１週間間隔で固体別体重を測定して増体量を算出した。
その結果、試験期間中の発育曲線（去勢、雌の平均、図２）で示すように、１０ppm、５０ppm添加区で対照区より優れる発育を示し、実施例３の結果と併せると、運動機能が向上し、体重増加効果も認められることから、健康機能向上剤として有用であることがわかった。
なお、ＡＬＡ添加群においても、健康状態に異常は認められなかった。
【００４７】
【表４】
【００４８】
実施例６
ブロイラー初生ヒナ（チャンキー）雌雄各１５０羽、合計３００羽を導入した。導入後異常の認められるヒナ（衰弱や矮小）を除外し、個体識別のため翼帯を装着して、個体別に体重を測定した。雌雄別に、体重により３グループ（１グループ当たり４５羽以上）に分け、各グループ内で無作為に１５羽ずつ３群に割り付けた。閉鎖型畜舎内に設置したチックガードに、雌雄各１５羽（計３０羽）を１群として収容し、動物用赤外線ランプを設置して保温した。チックガードは、ヒナの発育に伴なって拡大した。飼料及び飲水は、不断給与した。試験群は、ＡＬＡ塩酸塩無添加の対照飼料（初生から３週齢までは試験用標準飼料ＳＤＢ Ｎｏ．１、３週齢から７週齢までは試験用標準飼料ＳＤＢ Ｎｏ．２（いずれも日本配合飼料（株）製、表５）を用いた）を供給する対照群とＡＬＡ塩酸塩を１０ppm及び５０ppm添加した飼料を供給するＡＬＡ−１０ppm添加群とＡＬＡ−５０ppm添加群２群の計３群を設定し、各群３反復区を配した。各試験群の供試羽数は表６のとおりとした。試験期間は初生（添加飼料給与開始）から７週間（７週齢）とし、初生時及びそれ以降１週ごとに、反復区ごとに雌雄別総体重を測定した。また、３週齢及び７週齢に各群１８羽（雌雄各３羽／反復）の上腕静脈（尺側皮静脈）から約２mLの血液を採取し、そのうち約１．５mLを、ヘパリン−リチウム塩を用いて凝固防止処理した後、血漿を分離し、LDH、GOT（AST）、γ-GTP、ALP、総タンパク、アルブミン、グロブリン、総コレステロール、中性脂肪、血糖、尿酸、総ビリルビン、尿酸、クレアチニン、カルシウム、無機リンの項目を検査した。その結果、試験期間中の体重（雌雄の平均）は、表７に示すように、初生から３週齢までの体重に、試験群間で差はみられなかったが、３週齢以降の体重は、ＡＬＡ−１０ppm添加群とＡＬＡ−５０ppm添加群２群で対照群より大きくなった。また、血液検査の結果では、表８に示すようにγ−ＧＴＰ（ガンマグルタミルトランスペプチダーゼ）がＡＬＡ−１０ppm添加群とＡＬＡ−５０ppm添加群２群で対照群より減少していることが認められ、ＡＬＡが肝機能向上効果を有し、健康機能向上剤として有用であることがわかった。
なお、ＡＬＡ添加群においても、試験期間中の一般状態に異常は認められず、育成率及び剖検所見にも添加によると考えられる異常は認められなかった。
【００４９】
【表５】
【００５０】
【表６】
【００５１】
【表７】
【００５２】
【表８】
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】マウスの発育曲線を示す図である。
【図２】養豚の発育曲線を示す図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、健康機能向上剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
人や動物の健康機能は、疲労、病気、妊娠、加齢、栄養障害、栄養欠乏により低下する。この疲労には肉体疲労と精神疲労があり、現代人の疲労は肉体疲労だけでなく精神疲労が大きく関与している。
【０００３】
このうち、肉体疲労に有効な栄養としては、糖分、でんぷんからなる複合炭水化物等が用いられている。また薬物としては、ビタミンＢ1、ビタミンＢ2、ニコチン酸等のビタミンＢ群、メラトニン、ビタミンＣ、ビタミンＥ、マグネシウムなどが用いられている。
【０００４】
また、最近、必須アミノ酸や非必須アミノ酸を含む特定の組成のアミノ酸類に疲労時の運動機能を向上させる効果があることが報告されている（特許文献１）。必須アミノ酸は、バリン、ロイシン、イソロイシン、リジン、スレオニン、メチオニンなど、また非必須アミノ酸としては、アルギニン、グルタミン、プロリンなどがある。
【特許文献１】特開平９−２４９５５６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、アミノ酸のうち、グルタミンは溶解度が低く不安定で、体内でグルタミン酸とアンモニアに分解するという問題があり、またアルギニンは、肌荒れ、皮膚が厚くなる、関節の肥大、骨の奇形という副作用があることが知られており、その摂取については大変な注意が必要である。
従って、本発明の目的は、長期間摂取できる健康機能向上剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで本発明者は、種々のアミノ酸の薬理作用を検討してきたところ、５−アミノレブリン酸に代表されるδ−アミノ酸類が、特に老齢化した動物の健康機能を有意に増加させる作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を有効成分とする健康機能向上剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、健康機能が低下した動物、例えば高齢化に伴ない、健康機能が低下した人を含む動物の健康機能を向上させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の健康機能向上剤の有効成分は、δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩である。当該δ−アミノ酸類としては、次式（１）
【０００９】
【化１】
【００１０】
（式中、Ｒ1は水素原子又はアシル基を示し、Ｒ2は水素原子又は置換基を有していてもよい炭化水素基を示す)
で表される５−アミノレブリン酸、その誘導体類又はその塩（以下、「５−アミノレブリン酸類」と称する）が挙げられる。
【００１１】
当該５−アミノレブリン酸類は、光動力学的治療における光増感剤（特表２００４−５０５１０５号）、植物成長調節剤（特開平０７−５３４８７号）、除草剤（特開平０５−１１７１１０号）、魚類病原性微生物、寄生虫の感染治療（特開２００１−３１６２５５号）、豚成育促進剤（特開２００３−４０７７０号）等として有用であることは知られている。
【００１２】
式（１）中、Ｒ1で示されるアシル基としては、例えば炭素数１〜２４のアルカノイル基、芳香族アシル基、ベンジルオキシカルボニル基等が挙げられる。好ましいアシル基の具体例としては、例えばアセチル基、ｎ−プロパノイル基、ｎ−ブタノイル基、ｎ−ペンタノイル基、ｎ−ヘキサノイル基、ｎ−ノナノイル基、ベンジルオキシカルボニル基等が挙げられる。このうち、炭素数１〜６のアルカノイル基がより好ましい。
【００１３】
また、Ｒ2で示される置換基を有していてもよい炭化水素基としては、例えば、ヒドロキシ、アルコキシ、アシルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アミノ、アリール、オキソ、フロロ、クロロ及びニトロから選ばれる基が置換していてもよい炭化水素基を示す。ここで、炭化水素基としては、アルキル基、アルケニル基、アラルキル基又はアリール基が好ましい。ここで、アルキル基としては、直鎖、分岐鎖又は環状のアルキル基が挙げられ、炭素数１〜４０、更に１〜１８、特に１〜７のアルキル基が好ましい。アルケニル基としては、直鎖、分岐鎖又は環状のアルケニル基が挙げられ、炭素数２〜４０、更に２〜１８のアルケニル基が好ましい。アラルキル基としては炭素数６〜２０のアリール基と炭素数１〜６のアルキル基から構成されるものが挙げられる。また、アリール基としては炭素数６〜２０のアリール基が挙げられる。
アルコキシ基としては炭素数１〜１８のアルコキシ基、特に炭素数１〜７のアルコキシ基が好ましい。アシルオキシ基としては、炭素数１〜１８のアルカノイルオキシ基、特に炭素数２〜８のアルカノイルオキシ基が好ましい。アルコキシカルボニルオキシ基としては、Ｃ1-18アルコキシ−カルボニルオキシ基、特にＣ1-7アルコキシ−カルボニルオキシ基が好ましい。
炭素数１〜１８の好ましいアルキル基としては例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、エチルブチル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルヘキシル基、ｎ−オクチル基、イソオクチル基、ｔｅｒｔ−オクチル基、２−エチルヘキシル基、３−メチルヘプチル基、ｎ−ノニル基、イソノニル基、１−メチルオクチル基、エチルヘプチル基、ｎ−デシル基、１−メチルノニル基、ｎ−ウンデシル基、１，１−ジメチルノニル基、ｎ−ドデシル基、ｎ−トリデシル基、ｎ−テトラデシル基、ｎ−ペンタデシル基、ｎ−ヘキサデシル基、ｎ−ヘプタデシル基、ｎ−オクタデシル基等が挙げられる。
炭素数１〜７のより好ましいアルキル基としては例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、エチルブチル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルヘキシル基が挙げられる。
ヒドロキシが置換した炭素数１〜１８のアルキル基としては、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、４−ヒドロキシブチル、５−ヒドロキシペンチル、６−ヒドロキシヘキシル等が挙げられる。
アルコキシが置換した炭素数１〜１８のアルキル基としては、Ｃ1-7アルコキシ−Ｃ1-18アルキル基、例えば２−メトキシエチル、２−エトキシエチル、３−メトキシプロピル、３−エトキシプロピル、４−メトキシブチル、４−エトキシブチル、２−（２−メトキシエチル）エチル等が挙げられる。
アシルオキシ基が置換したアルキル基としては、Ｃ2-7アルカノイルオキシ−Ｃ1-18アルキル基が挙げられる。アルコキシカルボニルオキシ基が置換したアルキル基としては、Ｃ1-18アルコキシ−カルボニルオキシ−Ｃ1-18アルキル基が挙げられる。アミノ基が置換したアルキル基としては、アミノ−Ｃ1-18アルキル基が挙げられる。
炭素数２〜１８のアルケニル基としては、ビニル基、アリル基、イソプロペニル基、２−ブテニル基、２−メチルアリル基、１，１−ジメチルアリル基、３−メチル−２−ブテニル基、３−メチル−３−ブテニル基、４−ペンテニル基、ヘキセニル基、オクテニル基、ノネニル基、デセニル基、シクロプロペニル基、シクロブテニル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘプテニル基、シクロオクテニル基、４−メチルシクロヘキセニル基、４−エチルシクロヘキセニル基、２−シクロペンテニルエチル基、シクロヘキセニルメチル基、シクロヘプテニルメチル基、２−シクロブテニルエチル基、２−シクロオクテニルエチル基、３−（４−メチルシクロヘキセニル）プロピル基、４−シクロプロペニルブチル基、５−（４−エチルシクロヘキセニル）ペンチル基、オレイル基、バクセニル基、リノレイル基、リノレニル基、ｔｒａｎｓ−９−オクタデセニル基、９Ｅ，１２Ｅ−オクタデカジエニル基、９Ｅ，１２Ｅ，１５Ｅ−オクタデカトリエニル基等が挙げられる。
炭素数７〜２６のアラルキル基としては、炭素数１〜６のアルキル基と炭素数６〜２０のアリール基とから構成されるものが好ましい。炭素数１〜６のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロヘキシル基等が挙げられ、炭素数６〜２０のアリール基としては、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。炭素数７〜２６のアラルキル基のうち、ベンジル基、フェネチル基、９−フルオレニルメチル基が好ましく、ベンジル基、フルオレニルメチル基が特に好ましい。当該アラルキル基のアリール基は、上記記載の炭素数１〜６のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等の炭素数１〜６のアルコキシ基、水酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子、カルボキシ基等の置換基１〜３個によって置換されていてもよい。
炭素数６〜２０のアリール基としては、フェニル基、ナフチル基等が挙げられ、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロヘキシル基等の炭素数１〜６のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等の炭素数１〜６のアルコキシ基、水酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子、カルボキシ基等の置換基１〜３個によって置換されていてもよい。尚、上記Ｒ1は、アミノ基の置換基、Ｒ2はカルボン酸基の置換基を示しているが、例示したこれらの置換基は５−アミノレブリン酸類のみならず、δ−アミノ酸類の置換基でもある。
【００１４】
δ−アミノ酸又はその誘導体の塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩、メチルリン酸塩、エチルリン酸塩、亜リン酸塩、次亜リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、トルエンスルホン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、メタンスルホン酸塩、酪酸塩、吉草酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩等の酸付加塩、及びナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩等の金属塩、アンモニウム塩、アルキルアンモニウム塩等が挙げられる。なお、これらの塩は使用時において水溶液又は粉体として用いられる。
【００１５】
以上のδ−アミノ酸、その誘導体又はそれらの塩は、水和物又は溶媒和物を形成していてもよく、またいずれかを単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【００１６】
δ−アミノ酸、その誘導体又はそれらの塩（以下、「δ−アミノ酸類」と称する。）は、化学合成、微生物による生産、酵素による生産のいずれの方法によっても製造することができる。また前記δ−アミノ酸類のうち、５−アミノレブリン酸類は、特開昭４８−９２３２８号公報、特開昭６２−１１１９５４号公報、特開平２−７６８４１号公報、特開平６−１７２２８１号公報、特開平７−１８８１３３号公報、特開平１１−４２０８３号公報等に記載の方法に準じて製造することができる。上記のようにして製造されたδ−アミノ酸類、それらの精製前の化学反応溶液や発酵液は、有害な物質を含まない限り、分離精製することなくそのまま用いることができる。
また市販品なども使用することができる。
【００１７】
上記δ−アミノ酸類は、後記実施例に示すように、特に老齢化して健康機能が低下したマウスの自然運動量を増加させ、又体重増加を促進させ、低下した健康機能、狭義には、運動機能を向上させる作用をする。又、δ−アミノ酸類は、肝機能向上剤であり、後記実施例で示すように、マウスに経口投与することで、マウスのγ−ＧＴＰ値を減少させる作用をする。従って、上記δ−アミノ酸類は人を含む動物の健康機能向上剤として有用であり、特に加齢により健康機能が低下した人を含む動物の健康機能向上剤として有用である。
【００１８】
また、本発明の健康機能向上剤は、ミネラルを含有させるか、同時に摂取することにより、さらにその効果を向上させることができる。ミネラルとしては、鉄、亜鉛、銅、リン、カルシウム、マグネシウム、カリウム、セレン、クロム、マンガン、ヨウ素、ホウ素、ケイ素、バナジウム、モリブデン、コバルトなどが挙げられるが、特に好ましくは鉄、マグネシウム、マンガンである。これらのミネラル分は単独で、又は二種以上を組み合わせて用いることができる。ミネラルの化学的性状としては生物に害を与えるものでなければどんなものを用いてもよい。
【００１９】
本発明の健康機能向上剤には、必要に応じて栄養剤等を加えることができる。栄養剤としては、例えば、必須アミノ酸類、非必須アミノ酸類、ビタミン類、タウリン、コエンザイムＱ１０、αリポ酸などの体内因子、ハーブ類、プロテイン、種々の酵素、ポリフェノール類などの抗酸化剤などが挙げられる。
【００２０】
本発明の健康機能向上剤は、δ−アミノ酸類の粉末、δ−アミノ酸類を水に溶かした水溶液、上記方法で製造したδ−アミノ酸類を含む発酵液を、賦形剤等の担体に吸着させて使用することもできる。担体の種類としては、一般的なものでよく、結晶性セルロース、ゼラチン、でんぷん、デキストリン、油かす、パン酵母、ビール酵母、酒酵母、ワイン酵母、脱脂粉乳、乳糖、動物性及び植物性油脂、無水リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ケイ酸アルミン酸マグネシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムなどが挙げられる。
【００２１】
本発明の健康機能向上剤の剤型としては、注射剤、錠剤、カプセル剤、細粒剤、シロップ剤、坐薬等が挙げられる。これらは溶剤、分散媒、増量剤、賦形剤等を適宜用い、常法に従って製造することができる。また、食品の形態として摂取してもよい。
【００２２】
本発明の健康機能向上剤を水溶液として調製する場合には、δ−アミノ酸類が５−アミノレブリン酸類の場合、有効成分である５−アミノレブリン酸類の分解を防ぐため、水溶液がアルカリ性とならないように留意する必要がある。アルカリ性となってしまう場合は、酸素を除去することによって有効成分の分解を防ぐことができる。
【００２３】
本発明の健康機能向上剤は、本剤を摂取してその健康機能を向上させることができればよく、本剤の使用方法に制限はないが、好ましい態様について以下に示す。
【００２４】
本剤を用いた健康機能向上剤の対象となる動物は特に限定されないが、哺乳類、爬虫類、鳥類、両生類、魚類などの脊椎動物が好ましい。これらの例としては、人、牛、豚、羊、やぎ、マウス、ラット、ウサギ、犬、猫、鶏、鶉、ニジマス、コイ、ウナギ、イワナなどの淡水魚、ギンザケ、ブリ、マダイ、サバ、マグロなどの海水魚、及び熱帯魚や爬虫類などの観賞生物などが挙げられる。
【００２５】
本剤の健康機能向上剤の使用は動物の成育のどの時点でも可能であるが、人であれば１５歳以降が好ましく、３５歳以降が特に好ましい。
【００２６】
本発明の健康機能向上剤の摂取方法としては特に限定されないが、経口摂取、注射による摂取、経管による摂取又は経腸による摂取が挙げられ、なかでも経口摂取が好ましい。
【００２７】
本剤は、１度の摂取でも十分な効果を示すが、さらに効果を強めるために複数回摂取することもできる。摂取する剤あたりの効果は複数回摂取の方が効果的であり、毎日少量ずつ摂取するのが効率的な使用方法である。
【００２８】
本剤の対象動物１kgあたり１回の摂取量は、δ−アミノ酸類として０．００１mg〜１０００mgが好ましく、さらには０．００１mg〜１００mg、特に０．００１mg〜５０mgが好ましい。本剤の摂取量は、成育が旺盛な時期ほど、また摂取回数の少ないほど多くの量が必要である。適切な範囲を超えた摂取は不経済であるばかりか日光傷害を起こす可能性があるため望ましくない。
【００２９】
またミネラル類を併用する場合は同時に使用してもよいし別々に使用してもよい。使用するミネラルの種類、その使用方法及びその使用量は通常市販されているミネラル類と同じで差し支えない。その使用量は、例えば鉄の場合には成人男性で１日あたり１〜４５mgであればよく、５〜２０mgが好ましい。マグネシウムの場合には５０mg〜７００mgであればよく、１００〜５００mgが好ましい。マンガンの場合には０．１〜１１mgであればよく、２〜８mgが好ましい。
【実施例】
【００３０】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに何ら限定されない。
【００３１】
実施例１
一週間予備飼育したマウス（３５〜４５週齢、ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ）にマウス体重１kgあたり５−アミノレブリン酸（以下、ＡＬＡと称す）塩酸塩１０mgを一日一回、７日間連続して摂取させた。ＡＬＡ塩酸塩は蒸留水で０．５ｇ／mLの濃度に調整し、マウスに経口投与した。試験後、床面積が２０cm×２０cmのゲージに入れ、５分間の移動距離を計測した。試験は１区あたり雄と雌のマウス各５匹、計１０匹で実施、値は平均値を示した。ＡＬＡを処理した区においては、雄、雌いずれの場合も移動距離が多く、運動能力が向上していることを確認した。また試験中、ＡＬＡ処理したマウスには肉眼的に異常な興奮・行動などの症状は観察されなかった。
【００３２】
【表１】
【００３３】
実施例２
一週間予備飼育した老齢のリタイアマウス（３５〜４５週齢、ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ）にマウス体重１kgあたりＡＬＡ塩酸塩１０mgを一日一回、７日間連続して摂取させた。ＡＬＡ塩酸塩は蒸留水で０．５ｇ／mLの濃度に調整し、マウスに経口投与した。試験後、マウスを解剖しマウスの血液を採取し血液１mLあたりのＡＬＡ酸脱水酵素（ＡＬＡＤ）活性（５−アミノレブリン酸が二量化し、１分子のピロール物質であるポルホビリノーゲン（以下、ＰＢＧと称す）を形成する活性）及びポルホビリノーゲンデアミナーゼ（ＰＢＧＤ）活性（ＰＢＧからヒドロキシメチルビランに変換する活性）を測定した。ＡＬＡがＰＢＧを形成するパス及びＰＢＧからヒドロキシメチルビランに変換するパスは、ヘム合成の重要なパスの一部である。ヘパリン処理したマウスの全血０．０２mLに蒸留水を０．３３mL加えた後、０．５Ｍ Ｎａ−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ pH６．４、０．０５mL、０．１Ｍ ＤＴＴ（１mM ＺｎＳＯ4を含む）を０．０５mL、５０mM ＡＬＡ塩酸塩を０．０５mL加え、総量０．５mLとし、これを３７℃、３０分間保持した後、１Ｍ トリクロロ酢酸を０．５mL加え、反応を停止した後３０００rpmの上清にエールリッヒ試薬を等量加え、正確に１０分後、分光光度計を用いて、エールリッヒ試薬とＰＢＧが反応して生成する化合物の特性吸収である５５３nmの吸光度を測定した（ＯＤ）。
【００３４】
計算はＡＬＡＤ活性によって得られる反応産物ＰＢＧの分子吸光係数６１０００を用いて以下のごとく行った。空試料は反応時間０分を用いた（ＯＤ0）。
【００３５】
ＡＬＡＤ活性＝1M×(OD-OD0)/61000×2/1000×1/反応試料量mL×1
＝32.8×(OD-OD0)/反応試料量(mL)nmolPBG/mL/h
【００３６】
またＰＢＧＤ活性は以下の通り測定した。ヘパリン処理したマウスの全血０．０２mLに蒸留水を０．３８mL加えた後、０．６mM ＰＢＧ（０．３８Ｍ Ｎａ−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ pH７．８を含む）を０．０５mL加えた後、３７℃、３０分間保持した。５Ｍ トリクロロ酢酸（０．８％ヨウ素を含む）を０．０５mL加え、反応を停止した後、３０００rpm５分間の遠心上清をそのまま蛍光分光光度計にて励起波長４０５nm、蛍光波長５９７nmの蛍光強度を測定した。
【００３７】
計算はＰＢＧＤ活性によって得られるウロポルフィリノーゲン１型異性体の標準物質を用いて比例計算した。
【００３８】
すなわち、標準物質０．５３６nmol ＵＲＯ／mLのときにＦＵ（Ｅｍ＝５９７nmの蛍光強度）＝１３９
したがって、ＰＢＧＤ活性＝0.536/139×0.5/0.01×2×FU／Ht
【００３９】
試験は１区あたり雄のマウス５匹で実施、値は平均値を示した。ＡＬＡを処理した区においては、ＡＬＡＤ活性及びＰＢＧＤ活性が向上していることを確認した。
【００４０】
【表２】
【００４１】
上記のように、ＡＬＡを摂取することにより、呼吸電子伝達系の重要な因子であるヘムタンパク質を構成するヘム合成経路の活性（ＡＬＡＤ活性、ＰＢＧＤ活性）を向上させることを見出した。よって、本経路が活性化することにより、動物体内でエネルギー代謝を行うクエン酸回路（ＴＣＡサイクル）が活性化され、運動機能が向上したと考えられる。
【００４２】
実施例３
一週間予備飼育したマウス（３５〜４５週齢、ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃ１）にマウス体重１kgあたりＡＬＡ塩酸塩１０mgを一日一回、７日間連続して摂取させた。ＡＬＡ塩酸塩は蒸留水で０．５ｇ／mLの濃度に調整し、マウスに経口投与した。試験前後で、回転式運動量測定器（回転篭：直径２００mm×巾５０mm、飼育篭：Ｗ９０mm×Ｄ２２０mm×Ｈ９０mm、（株）シナノ製作所社製）に入れ、１６時間の回転数を計測した。試験は回転式運動量１個にマウス1匹で実施し、無処理５匹、ＡＬＡ処理５匹を１区として雌のマウスに対し実施し、値は平均値を示した。ＡＬＡを処理した区においては、回転量が多く、運動能力が向上していることを確認した。
【００４３】
【表３】
【００４４】
実施例４
日本医科学動物資材研究所（株）生産のｄｄＹ−Ｎ系マウスを１２０頭（雄、雌各６０頭）を約４週齢で導入し、１週間の検疫を行って健康状態に異常ないこと確認し試験に用いた。試験区は、注射用水を供試マウスの体重１kgあたり１０mLの割合で２８日間連続して胃ゾンデを用いて強制経口投与する対照区、ＡＬＡ酸塩酸塩を供試マウスの体重１kgあたり５mg、１０mg及び２５mgの割合で同様に投与する３試験区の計４区を設定した。供試マウスを各群の平均体重がほぼ均等となるように、雄、雌毎に１群を５匹とした１２群に区分し、各区に雄、雌各３群ずつを割付けて、２８日間飼育した。供試マウスは、室温２３．０±２．０℃、照射時間１２時間／日に設定した飼育室に設置したステンレス製５連ケージを用いて群毎に飼育した。試験開始時より１週間間隔で固体別体重を測定して増体量を算出した。
【００４５】
その結果、試験期間中の発育曲線（雄、雌の平均、図１）で示すように、１０mg／kg投与区が他の３区より優れる発育を示し、実施例３の結果と併せると、運動機能が向上し、体重増加効果も認められることから、健康機能向上剤として有用であることがわかった。
なお、ＡＬＡ添加群においても、健康状態に異常は認められなかった。
【００４６】
実施例５
養豚場で同日に生産されたＬＷ・Ｄ種子豚を１４頭（去勢、雌各７頭）ずつ３回に分けて導入し、９〜１２日間の予備飼育を行って健康状態に異常ないこと確認したのち、各回とも、１２頭（去勢、雌各６頭）ずつを選抜して試験に用いた。試験区は、ＡＬＡ塩酸塩無添加の対照飼料（表４）を供給する対照区と、ＡＬＡ塩酸塩を１０ppm及び５０ppm添加した飼料を供給する試験区２区の計３区を設定した。供試豚を、体重の分布がほぼ均等となるように４頭（去勢、雌各２頭）ずつ３群に区分し、各区に１群ずつを割付けて６週間飼育した。供試豚舎は１．８×２．７ｍのコンクリート床豚房が１４房ずつ並列した開放型豚舎でブロック毎に隣接した３豚房を用いて群飼した。敷科は稲ワラを用いた。各豚房内には試験開始後３週まで保温箱を設置した。飼料及び飲水は不断供与した。試験開始時より１週間間隔で固体別体重を測定して増体量を算出した。
その結果、試験期間中の発育曲線（去勢、雌の平均、図２）で示すように、１０ppm、５０ppm添加区で対照区より優れる発育を示し、実施例３の結果と併せると、運動機能が向上し、体重増加効果も認められることから、健康機能向上剤として有用であることがわかった。
なお、ＡＬＡ添加群においても、健康状態に異常は認められなかった。
【００４７】
【表４】
【００４８】
実施例６
ブロイラー初生ヒナ（チャンキー）雌雄各１５０羽、合計３００羽を導入した。導入後異常の認められるヒナ（衰弱や矮小）を除外し、個体識別のため翼帯を装着して、個体別に体重を測定した。雌雄別に、体重により３グループ（１グループ当たり４５羽以上）に分け、各グループ内で無作為に１５羽ずつ３群に割り付けた。閉鎖型畜舎内に設置したチックガードに、雌雄各１５羽（計３０羽）を１群として収容し、動物用赤外線ランプを設置して保温した。チックガードは、ヒナの発育に伴なって拡大した。飼料及び飲水は、不断給与した。試験群は、ＡＬＡ塩酸塩無添加の対照飼料（初生から３週齢までは試験用標準飼料ＳＤＢ Ｎｏ．１、３週齢から７週齢までは試験用標準飼料ＳＤＢ Ｎｏ．２（いずれも日本配合飼料（株）製、表５）を用いた）を供給する対照群とＡＬＡ塩酸塩を１０ppm及び５０ppm添加した飼料を供給するＡＬＡ−１０ppm添加群とＡＬＡ−５０ppm添加群２群の計３群を設定し、各群３反復区を配した。各試験群の供試羽数は表６のとおりとした。試験期間は初生（添加飼料給与開始）から７週間（７週齢）とし、初生時及びそれ以降１週ごとに、反復区ごとに雌雄別総体重を測定した。また、３週齢及び７週齢に各群１８羽（雌雄各３羽／反復）の上腕静脈（尺側皮静脈）から約２mLの血液を採取し、そのうち約１．５mLを、ヘパリン−リチウム塩を用いて凝固防止処理した後、血漿を分離し、LDH、GOT（AST）、γ-GTP、ALP、総タンパク、アルブミン、グロブリン、総コレステロール、中性脂肪、血糖、尿酸、総ビリルビン、尿酸、クレアチニン、カルシウム、無機リンの項目を検査した。その結果、試験期間中の体重（雌雄の平均）は、表７に示すように、初生から３週齢までの体重に、試験群間で差はみられなかったが、３週齢以降の体重は、ＡＬＡ−１０ppm添加群とＡＬＡ−５０ppm添加群２群で対照群より大きくなった。また、血液検査の結果では、表８に示すようにγ−ＧＴＰ（ガンマグルタミルトランスペプチダーゼ）がＡＬＡ−１０ppm添加群とＡＬＡ−５０ppm添加群２群で対照群より減少していることが認められ、ＡＬＡが肝機能向上効果を有し、健康機能向上剤として有用であることがわかった。
なお、ＡＬＡ添加群においても、試験期間中の一般状態に異常は認められず、育成率及び剖検所見にも添加によると考えられる異常は認められなかった。
【００４９】
【表５】
【００５０】
【表６】
【００５１】
【表７】
【００５２】
【表８】
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】マウスの発育曲線を示す図である。
【図２】養豚の発育曲線を示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を有効成分とする健康機能向上剤。
【請求項２】
運動機能が向上することにより、健康機能が向上することを特徴とする、請求項１記載の健康機能向上剤。
【請求項３】
肝機能が向上することにより、健康機能が向上することを特徴とする、請求項１記載の健康機能向上剤。
【請求項４】
δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩が、次式（１）
【化１】
（式中、Ｒ1は水素原子又はアシル基を示し、Ｒ2は水素原子又は置換基を有していてもよい炭化水素基を示す)
で表される化合物又はその塩である請求項1〜３のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【請求項５】
さらにミネラルを含むものである請求項１〜４のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【請求項６】
ミネラルが、鉄又は銅である請求項５記載の健康機能向上剤。
【請求項７】
経口、注射、経管又は経腸摂取用剤である請求項１〜６のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【請求項８】
δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を、１日に体重１kgあたり０．００１〜１０００mg摂取するためのものである請求項１〜７のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【請求項１】
δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を有効成分とする健康機能向上剤。
【請求項２】
運動機能が向上することにより、健康機能が向上することを特徴とする、請求項１記載の健康機能向上剤。
【請求項３】
肝機能が向上することにより、健康機能が向上することを特徴とする、請求項１記載の健康機能向上剤。
【請求項４】
δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩が、次式（１）
【化１】
（式中、Ｒ1は水素原子又はアシル基を示し、Ｒ2は水素原子又は置換基を有していてもよい炭化水素基を示す)
で表される化合物又はその塩である請求項1〜３のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【請求項５】
さらにミネラルを含むものである請求項１〜４のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【請求項６】
ミネラルが、鉄又は銅である請求項５記載の健康機能向上剤。
【請求項７】
経口、注射、経管又は経腸摂取用剤である請求項１〜６のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【請求項８】
δ−アミノ酸、その誘導体又はその塩を、１日に体重１kgあたり０．００１〜１０００mg摂取するためのものである請求項１〜７のいずれか１項記載の健康機能向上剤。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２００６−９６７４５（Ｐ２００６−９６７４５Ａ）
【公開日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−２１８４３５（Ｐ２００５−２１８４３５）
【出願日】平成１７年７月２８日（２００５．７．２８）
【出願人】（０００１０５５６７）コスモ石油株式会社 (443)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年７月２８日（２００５．７．２８）
【出願人】（０００１０５５６７）コスモ石油株式会社 (443)
【Ｆターム（参考）】
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