分析用デバイス
【課題】分析試薬が飛散しない分析試薬を有する分析用デバイスを提供することを目的とする。
【解決手段】遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスであって、分析試薬１８ａにはブロッキング用タンパク質が添加されていることを特徴とする。
【解決手段】遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスであって、分析試薬１８ａにはブロッキング用タンパク質が添加されていることを特徴とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生物などから採取した液体の分析に使用する分析用デバイスに関するものであり、具体的には、遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
生物学的試料中の任意の物質を定量する分析装置の中で、試薬を乾燥した状態で安定化させた試験片を用いて、測定時に生物学的試料によって液相を生じさせ反応が行われるドライケミストリーシステムが知られている。ドライケミストリーシステムの特長としては、分離操作や反応セルを用いる必要がなく簡単に測定できること、さらに分析試薬の保存安定性が優れており室温でも保存できることなどが挙げられる。
【０００３】
分析試薬の乾燥方法であるが、
・ 試薬をニトロセルロース、ガラス繊維濾紙など任意の多孔質性担体に染込ませ固定化乾燥させる方法、
・ 試薬を凍結乾燥させ、試薬が保持できる構成のチャンバーに置く方法、
・ 試薬を基盤上に直接に塗布し乾燥させる方法
がある。特許文献１では、遠心分離機内の血液試料の分析用の組成物および乾燥試薬の製造方法に関して記載されており、乾燥方法として凍結乾燥が採用されている。製造された球状試薬は、代表的には約１０秒より短い時間で、迅速に、かつ完全に溶液中に溶解することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−２７２３９４号公報
【特許文献２】特開２００９−９２３９０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、凍結試薬の中には高湿度環境に置かれるなどした場合、即時に収縮してしまい溶解性が悪化するものがある。
さらには、球状試薬は、所望の試薬（１種または２種以上）の水溶性液を調製し、この水溶性溶液の正確に測量されている滴を冷凍剤中に分散させ、次いでこの冷凍された滴を凍結乾燥させることによって生成されるので、製造工程が複雑である。また微少担持が困難である。
【０００６】
液状試薬を基盤上に直接に塗布し乾燥させる方法は、多孔質性担体を必要とせず、チャンバー形状の工夫も必要としないため使い勝手がよく、また自然乾燥させるため製造工程が簡素化できるが、潮解性の高い試薬を含む乾燥試薬が高湿度条件に曝されると液状化するので、特許文献２に見られるように、遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスにおいて分析試薬とした場合には、分析試薬が所定の場所から遠心力によって飛散するという問題を有している。
【０００７】
なお、ここでいう潮解性とは、湿気をもつ環境におかれた物質が空気中の水（水蒸気）を取り込んで自発的に水溶液となる性質のことである。
本発明は、前記従来の課題を解決するもので、分析試薬が所定の場所から飛散しない組成の分析試薬を有する分析用デバイスを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の分析用デバイスは、遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスであって、前記分析試薬にはブロッキング用タンパク質が添加されていることを特徴とする。
【０００９】
前記分析試薬は乾燥状態で配置されている。具体的には、前記分析試薬は塗布した液体を風乾で乾燥されていることを特徴とする。
また、添加される前記ブロッキング用タンパク質は、親水／疎水率が０．６付近で構成されるタンパク質であることを特徴とする。更に具体的には、前記ブロッキング用タンパク質は、ＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）を０．１重量％〜１０重量％含有していることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の分析用デバイスの分析試薬には、ブロッキング用タンパク質が添加されており、この試薬組成によれば、乾燥状態で保持されている分析試薬が、高湿度条件にさらされたとしても、該試薬が所定の場所から飛散することが解消され、それにともなう不具合が発生せずに精度よく分析できる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の実施の形態１における分析用デバイスを使用する分析装置の構成図
【図２】分析装置の回転駆動部とこれにセットされた分析用デバイスの外観斜視図
【図３】同実施の形態の分析用デバイスの内部の構造図
【図４】親水／疎水率とブロッキング能と試薬潮解への効果を示す実験結果説明図
【図５】同実施の形態におけるトリグリセリド測定試薬のトリグリセリド濃度依存性をブロッキング用タンパク質を添加したときと添加していないときで比較した説明図
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の分析用デバイスを図１〜図５に基づいて説明する。
（実施の形態１）
図１と図２は分析用デバイスがセットされる分析装置を示す。
【００１３】
分析装置１は、分析用デバイス２を回転させる回転駆動部３と、光源４と、光検出部５と、光検出部５の検出結果を処理する処理部６とを備えている。
分析試料をセットした分析用デバイス２は回転駆動部３に装着される。回転駆動部３が分析用デバイス２を矢印Ｒの方向に軸心周りに回転させることにより、分析用デバイス２に遠心力をかけ、この遠心力と分析用デバイス２内に配置された連絡流路（図３を参照）に働く毛細管力とを合わせることで、分析用デバイス２内に収容される分析試料の移動を制御することができる。分析用デバイス２内の分析試料の流れの状態、化学的な状態は、光源４から照射される光７に対する分析試料の光吸収特性を光検出部５で測定することによって検出することができる。
【００１４】
分析用デバイス２の内部は、図３に示すように構成されている。
分析用デバイス２はその軸心側から外周側との間に、分析試料を注入するための注入口１１と、注入口１１より外周側に配置され注入口１１と移送用流路１２ａで連結されたチャンバー１３と、チャンバー１３と移送用流路１２ｂの連結口１７より外側に配置されたチャンバー１４と、チャンバー１３より外周側に配置されチャンバー１３と移送用流路１２ｂで連結されたチャンバー１５と、チャンバー１５より外周側に配置されチャンバー１５と移送用流路１２ｃで連結されたチャンバー１６が設けられている。チャンバー１３，１４，１５，１６は、それぞれ、０．５〜５マイクロリットルの容量を有する。
【００１５】
このうち、チャンバー１５には分析試料の分析に必要な第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂが乾燥状態で保持されている。
分析試料を測定する具体的な分析方法を説明する。
【００１６】
まず、５マイクロリットルの分析試料を分析用デバイス２の注入口１１より注入する。
この分析試料がセットされた分析用デバイス２を図２に示すように回転駆動部３に装着する。
【００１７】
回転駆動部３により分析用デバイスを矢印Ｒの方向に軸心周りに遠心力１８００Ｇで約１分間回転させることにより、注入口１１より注入された分析試料を、チャンバー１３へ移送させると同時にチャンバー１４へ血球など分析に不必要な固形成分を分離させる。
【００１８】
回転を停止させると、分析に必要な液体成分は毛細管力によって移送用流路１２ｂを通り、エアーバルブとして機能しているチャンバー１５への出口手前で停止する。約３０秒間回転を停止した後、分析用デバイス２を矢印Ｒの方向に軸心周りに遠心力１２００Ｇで約１分間回転させることにより、前記液体成分はサイフォンの原理でチャンバー１５へ移送用流路１２ｂを通り一気に流入し、あらかじめ乾燥状態で保持された第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂが前記液体成分中に溶解する。
【００１９】
分析用デバイス２の前記回転を停止させると、前記液体成分は毛細管力によって移送用流路１２ｃを通り、エアーバルブとして機能しているチャンバー１６への出口手前で停止する。
【００２０】
約１０秒間回転を停止した後、分析用デバイス２を矢印Ｒの方向に軸心周りに遠心力１２００Ｇで回転させることにより、チャンバー１５にある前記液体成分はサイフォンの原理で移送用流路１２ｃを通りチャンバー１６へ一気に流入する。
【００２１】
光源４から照射される光７はチャンバー１６を透過し、光検出部５で得られた光量から処理部６にて分析試料中の分析対象物の測定値を算出する。
第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂの組成を具体的に説明する。
【００２２】
注入口１１より分析試料として血液を注入し、血液中の総コレステロール、トリグリセリド、ＨＤＬコレステロール、ＡＬＴ、ＡＳＴなどを分析対象物として測定する場合などの例えば、トリグリセリドの分析に必要な試薬組成を例に挙げて説明する。
【００２３】
（比較例１）
− 第一試薬１８ａ −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Ｔｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
− 第二試薬１８ｂ −
ＷＳＴ−８（同仁化学製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３５ｍＭ
ＮＡＤ＋（オリエンタル酵母製）・・・・・・・・・・・・・・・・３０ｍＭ
第一試薬１８ａはトリグリセリドの反応に必要な酵素および緩衝液を含み、第二試薬１８ｂは、比色法で測定するための色素および電子メディエーターを含む。上記試薬を混合して１つにまとめると、ブランク反応により徐々に呈色するので、測定までは第一試薬１８ａと第二試薬１８ｂに分けてチャンバー１５に塗布、乾燥する必要がある。
【００２４】
第一試薬１８ａの調製方法の一例を説明する。
ＧＹＤ-３０１の凍結乾燥品を純水で溶解させ２８８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＬＰＬ-３１１の凍結乾燥品を純水で溶解させ３８４ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＤＡＤ-３０１の凍結乾燥品を純水で溶解させ４８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、既知の方法でＴｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ １２００ｍＭを調製したあと、以上４試薬を等量ずつ混合させる。第二試薬１８ｂも同様の方法で調製できる。
【００２５】
チャンバー１５への試薬塗布乾燥プロセスの一例を説明する。
液状の第一試薬１８ａをチャンバー１５の所定の場所に１．２マイクロリットル塗布し、さらに、チャンバー１５の第一試薬１８ａを塗布した場所とは別の場所に液状の第二試薬１８ｂを１．２マイクロリットル塗布し、これらを風乾させる。
【００２６】
風乾の条件は限定されないが、本検討では、温度２５℃、湿度３０％の環境下、１時間放置して乾燥させた。
この分析用デバイス２を温度４０℃、湿度８０％の環境下に３０分放置させると、第一試薬１８ａは潮解性をもつ水酸化ナトリウムを含むため、水分を吸収することによって乾燥状態から液状に変化する。第二試薬１８ｂに関しては潮解性を示さなかった。
【００２７】
温度４０℃、湿度８０％の環境下で比較例１の分析用デバイス２を用いた場合、分析用デバイス２を遠心力１８００Ｇで約１分間回転させることにより、第一試薬１８ａが遠心力方向へ飛散し、測定精度に影響を与えた。
【００２８】
（実施例１）
比較例１の課題を解決するため鋭意検討した結果、比較例１の第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂのどちらか一方または両方に、ブロッキング用たんぱく質を添加することによって高湿度環境下でも試薬の飛散を防止でき、試薬の固定化技術として有用である。
【００２９】
ここでいうブロッキングとは、容器や担体などへの成分の非特異的吸着を妨げることを言い、特にプラスチックなどの樹脂へのタンパク質の非特異的吸着を妨げることをいう。様々な測定において、測定対象の成分が非特異的に器壁に吸着することにより、バックグラウンドとして測定を妨げることが問題となる。特に免疫学的測定において、抗体のポリスチレンプレートへの吸着は顕著であり、通常、あらかじめ樹脂等に吸着しやすいタンパク質を添加して、抗体の非特異的吸着を妨げる操作、すなわちブロッキングを行うことが広く行われている。ブロッキング能を示すには、タンパク質分子の中の比較的疎水的な領域に加え、親水的な領域が必要であるということが条件になっていることが知られている。
【００３０】
潮解性を持つ試薬にブロッキング用タンパク質を添加することによって、ブロッキング用タンパク質の親水的な領域が、潮解性を持つ試薬のうち水を取り込む物質と結合し、疎水的な領域が水を取り込む物質と空気中の水（水蒸気）との接触を阻害し、結果として試薬の液状化を防止できるということが推察される。
【００３１】
ブロッキング用タンパク質としては、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ウシ由来カゼインや、東洋紡績製のＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）について検討を行った。それぞれのタンパク質全体の親水／疎水率は図４に示すように、ＢＳＡは０．９０、ウシ由来αカゼインは０．７６、ＢＰＦ−３０１は０．６４であって、添加される前記ブロッキング用タンパク質は、親水／疎水率が０．６付近で構成されるタンパク質が好ましい。具体的には、親水／疎水率が０．５より大きく０．７以下で構成されるタンパク質が使用可能である。
【００３２】
ここでいう「親水／疎水率」を説明する。
タンパク質のアミノ酸配列のうち、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、ヒスチジン、アルギニン、チロシンを親水性アミノ酸として定義し、また、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、プロリンを疎水性アミノ酸として定義した場合に、タンパク質の親疎水性を数値化するために、親水性アミノ酸含有率を疎水性アミノ酸含有率で割った値を「親水／疎水率」と定義する。
【００３３】
この実施例１では、比較例１の第一試薬１８ａの試薬組成を以下に変更して、その効果の検討を行った。
− 第一試薬１８ａの改良品 −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Ｔｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
ブロッキング用タンパク質・・・・・・・・・・・・・０．１〜２．０％（ｗ/ｗ）
第一試薬１８ａの改良品の調製方法の一例を説明する。
【００３４】
まず、ブロッキング用タンパク質の凍結乾燥品を純水で溶解させ０．１％から２．０％（ｗ/ｗ）の範囲における特定の濃度のブロッキング用タンパク質溶液を調製し、ＧＹＤ-３０１の凍結乾燥品を前記ブロッキング用タンパク質溶液で溶解させ２８８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＬＰＬ-３１１の凍結乾燥品を前記ブロッキング用タンパク質溶液で溶解させ３８４ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＤＡＤ-３０１の凍結乾燥品を前記ブロッキング用タンパク質溶液で溶解させ４８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、既知の方法で純水の代わりにブロッキング用タンパク質溶液を用いてＴｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ １２００ｍＭを調製したあと、以上４試薬を等量ずつ混合させる。
【００３５】
第一試薬１８ａの改良品をチャンバー１５に１．２マイクロリットルだけ塗布し充分に自然乾燥（風乾）させたあと、４０℃、８０％条件で３０分放置した。遠心治具を用いて遠心力を１分間かけて試薬の状態を目視チェックした。
【００３６】
ブロッキング用タンパク質を添加しない場合（比較例１）においては、１０７０Ｇまでは試薬の飛散が認められなかったものの、１２５０Ｇ以上になると飛散したのに対して、ＢＳＡを１．５％添加した実施例１の場合には、１２５０Ｇまでは試薬の飛散が認められず、効果があることが示された。しかしながら、１６００Ｇ以上になるとＢＳＡを２．０％添加しても試薬は飛散した。ＢＳＡを２．０％以上添加した場合は、試薬反応の感度が低下し精度も悪化した。
【００３７】
カゼインを０．５％添加した実施例１の場合、１２５０Ｇまでは試薬の飛散が認められず、効果があることが示された。しかしながら、１６００Ｇ以上になると試薬は飛散した。カゼインを１．０％以上添加した場合は、試薬反応の感度が低下し精度も悪化した。
【００３８】
ＢＰＦ−３０１を添加した実施例１の場合、０．５％添加することによって１２５０Ｇまでは試薬の飛散が認められなかった。また、１．０％添加することによって１８００Ｇ以上でも試薬の飛散が認められず、非常に効果が高いことが示された。
【００３９】
比較例として、ブロッキング能が備わっていないPseudomonas由来リパーゼを２．０％添加したが１２５０Ｇ以上になると飛散した。Pseudomonas由来リパーゼの親水／疎水率は、０．４１であり、疎水性が大きすぎても効果が発揮されないことが分かった。
【００４０】
このように、潮解性を持つ試薬にブロッキング用タンパク質を添加することにより、高湿度環境下に放置された場合でも試薬の液状化を防止し、遠心力による試薬の飛散を防止することができる。親水／疎水率と試薬潮解への効果を図４にまとめた。
【００４１】
潮解への効果として、試薬の飛散を確認する実験で、１８００Ｇ以上で回転させたときにも飛散を防止したタンパク質を○、１８００Ｇ以上で回転させたときには飛散するものの、１２５０Ｇで回転させたときに飛散を防止したタンパク質を△、１２５０Ｇで回転させたときに試薬飛散したタンパク質を×と表記した。したがって、ブロッキング用タンパク質は試薬飛散防止機能をもち、特にＢＰＦ−３０１は飛散防止機能に優れていることが分かった。ＢＰＦ−３０１では０．１重量％〜１０重量％含有させた場合に良好な結果が得られた。
【００４２】
（実施の形態２）
この実施の形態２では、潮解性を持つ試薬にブロッキング用タンパク質を添加することにより、高湿度環境下に放置された場合でも試薬の液状化を防止し、遠心力による試薬の飛散を防止することができるが、ブロッキング用タンパク質が試薬反応に悪影響を及ぼさないかどうかを確認した。
【００４３】
例としてトリグリセリドの分析におけるＢＰＦ−３０１の試薬反応への影響を確認した。
下記の組成からなるトリグリセリド用分析試薬を調製した。
【００４４】
（実施例２）
− 試薬組成１の第一試薬１８ａ −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Ｔｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
ＢＰＦ−３０１（東洋紡績製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・２．０％
− 試薬組成１の第二試薬１８ｂ −
ＷＳＴ−８（同仁化学製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３５ｍＭ
ＮＡＤ＋（オリエンタル酵母製）・・・・・・・・・・・・・・・・３０ｍＭ
（比較例２）
比較例２として、以下の組成からなるトリグリセリド用分析試薬を調製した。
【００４５】
− 試薬組成２の第一試薬１８ａ −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Tricine−ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
− 試薬組成２の第二試薬１８ｂ −
ＷＳＴ−８（同仁化学製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３５ｍＭ
ＮＡＤ＋（オリエンタル酵母製）・・・・・・・・・・・・・・・・３０ｍＭ
本発明の実施例２の試薬組成１、比較例２の試薬組成２の試薬を用いて、ＰＢＳ溶液およびヒト血漿中のトリグリセリド濃度に依存した吸光度を次のようにして測定した。
【００４６】
先ず、第一試薬１８ａを１２μｌ、第二試薬１８ｂ１２μｌを同一容器内に塗布し、温度２５℃、湿度３０％の環境化で１２時間放置することによって乾燥を行った。乾燥後、前記容器内にＰＢＳ溶液およびヒト血漿を６０μｌ加え、攪拌することによって乾燥状態の第一試薬１８ａ、第二試薬１８ｂを溶解させた。前記容器を３７℃恒温槽内に３分間放置することによって反応を行った。光路長６００μｍにて波長４６０ｎｍの光量を測光することによって、吸光度を求めた。それぞれのトリグリセリド濃度依存性を図５にグラフ化した。
【００４７】
この図５から明らかなように、本発明の実施例２の試薬組成１と比較例２の試薬組成２を比較して、測定値に大きな乖離が認められないため、ＢＰＦ−３０１を２．０％添加した場合でもトリグリセリドの反応性に影響を及ぼすことはないことが確認された。
【００４８】
上記の各実施例では、第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂのうちの潮解性が高い第一試薬１８ａにブロッキング用タンパク質を含有させたが、測定する分析対象物によって必要とされる試薬が複数あって、それぞれが潮解性が高い場合には、全部の試薬にブロッキング用タンパク質を含有させてもよい。
【００４９】
また、乾燥方法として風乾を採用したことによって、凍結乾燥によって製造する場合に比べて製造工程を簡素化できる。なお、出来上がった分析用デバイスの試薬を見てブロッキング用タンパク質を含有させて風乾させた実施品は、凍結乾燥されたものとは異なり平面状に薄く広がった仕上がりになり、風乾された試薬か凍結乾燥された試薬か乾燥方法を区別できる。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
本発明は、分析用デバイスにおける試薬の固定化技術として有用であり、分析精度の向上に寄与する。
【符号の説明】
【００５１】
１ 分析装置
２ 分析用デバイス
３ 回転駆動部
４ 光源
５ 光検出部
６ 処理部
７ 光
１１ 注入口
１２ａ，１２ｂ，１２ｃ 移送用流路
１３，１４，１５，１６ チャンバー
１７ 連結口
１８ａ 第一試薬
１８ｂ 第二試薬
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生物などから採取した液体の分析に使用する分析用デバイスに関するものであり、具体的には、遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
生物学的試料中の任意の物質を定量する分析装置の中で、試薬を乾燥した状態で安定化させた試験片を用いて、測定時に生物学的試料によって液相を生じさせ反応が行われるドライケミストリーシステムが知られている。ドライケミストリーシステムの特長としては、分離操作や反応セルを用いる必要がなく簡単に測定できること、さらに分析試薬の保存安定性が優れており室温でも保存できることなどが挙げられる。
【０００３】
分析試薬の乾燥方法であるが、
・ 試薬をニトロセルロース、ガラス繊維濾紙など任意の多孔質性担体に染込ませ固定化乾燥させる方法、
・ 試薬を凍結乾燥させ、試薬が保持できる構成のチャンバーに置く方法、
・ 試薬を基盤上に直接に塗布し乾燥させる方法
がある。特許文献１では、遠心分離機内の血液試料の分析用の組成物および乾燥試薬の製造方法に関して記載されており、乾燥方法として凍結乾燥が採用されている。製造された球状試薬は、代表的には約１０秒より短い時間で、迅速に、かつ完全に溶液中に溶解することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−２７２３９４号公報
【特許文献２】特開２００９−９２３９０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、凍結試薬の中には高湿度環境に置かれるなどした場合、即時に収縮してしまい溶解性が悪化するものがある。
さらには、球状試薬は、所望の試薬（１種または２種以上）の水溶性液を調製し、この水溶性溶液の正確に測量されている滴を冷凍剤中に分散させ、次いでこの冷凍された滴を凍結乾燥させることによって生成されるので、製造工程が複雑である。また微少担持が困難である。
【０００６】
液状試薬を基盤上に直接に塗布し乾燥させる方法は、多孔質性担体を必要とせず、チャンバー形状の工夫も必要としないため使い勝手がよく、また自然乾燥させるため製造工程が簡素化できるが、潮解性の高い試薬を含む乾燥試薬が高湿度条件に曝されると液状化するので、特許文献２に見られるように、遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスにおいて分析試薬とした場合には、分析試薬が所定の場所から遠心力によって飛散するという問題を有している。
【０００７】
なお、ここでいう潮解性とは、湿気をもつ環境におかれた物質が空気中の水（水蒸気）を取り込んで自発的に水溶液となる性質のことである。
本発明は、前記従来の課題を解決するもので、分析試薬が所定の場所から飛散しない組成の分析試薬を有する分析用デバイスを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の分析用デバイスは、遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスであって、前記分析試薬にはブロッキング用タンパク質が添加されていることを特徴とする。
【０００９】
前記分析試薬は乾燥状態で配置されている。具体的には、前記分析試薬は塗布した液体を風乾で乾燥されていることを特徴とする。
また、添加される前記ブロッキング用タンパク質は、親水／疎水率が０．６付近で構成されるタンパク質であることを特徴とする。更に具体的には、前記ブロッキング用タンパク質は、ＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）を０．１重量％〜１０重量％含有していることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の分析用デバイスの分析試薬には、ブロッキング用タンパク質が添加されており、この試薬組成によれば、乾燥状態で保持されている分析試薬が、高湿度条件にさらされたとしても、該試薬が所定の場所から飛散することが解消され、それにともなう不具合が発生せずに精度よく分析できる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の実施の形態１における分析用デバイスを使用する分析装置の構成図
【図２】分析装置の回転駆動部とこれにセットされた分析用デバイスの外観斜視図
【図３】同実施の形態の分析用デバイスの内部の構造図
【図４】親水／疎水率とブロッキング能と試薬潮解への効果を示す実験結果説明図
【図５】同実施の形態におけるトリグリセリド測定試薬のトリグリセリド濃度依存性をブロッキング用タンパク質を添加したときと添加していないときで比較した説明図
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の分析用デバイスを図１〜図５に基づいて説明する。
（実施の形態１）
図１と図２は分析用デバイスがセットされる分析装置を示す。
【００１３】
分析装置１は、分析用デバイス２を回転させる回転駆動部３と、光源４と、光検出部５と、光検出部５の検出結果を処理する処理部６とを備えている。
分析試料をセットした分析用デバイス２は回転駆動部３に装着される。回転駆動部３が分析用デバイス２を矢印Ｒの方向に軸心周りに回転させることにより、分析用デバイス２に遠心力をかけ、この遠心力と分析用デバイス２内に配置された連絡流路（図３を参照）に働く毛細管力とを合わせることで、分析用デバイス２内に収容される分析試料の移動を制御することができる。分析用デバイス２内の分析試料の流れの状態、化学的な状態は、光源４から照射される光７に対する分析試料の光吸収特性を光検出部５で測定することによって検出することができる。
【００１４】
分析用デバイス２の内部は、図３に示すように構成されている。
分析用デバイス２はその軸心側から外周側との間に、分析試料を注入するための注入口１１と、注入口１１より外周側に配置され注入口１１と移送用流路１２ａで連結されたチャンバー１３と、チャンバー１３と移送用流路１２ｂの連結口１７より外側に配置されたチャンバー１４と、チャンバー１３より外周側に配置されチャンバー１３と移送用流路１２ｂで連結されたチャンバー１５と、チャンバー１５より外周側に配置されチャンバー１５と移送用流路１２ｃで連結されたチャンバー１６が設けられている。チャンバー１３，１４，１５，１６は、それぞれ、０．５〜５マイクロリットルの容量を有する。
【００１５】
このうち、チャンバー１５には分析試料の分析に必要な第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂが乾燥状態で保持されている。
分析試料を測定する具体的な分析方法を説明する。
【００１６】
まず、５マイクロリットルの分析試料を分析用デバイス２の注入口１１より注入する。
この分析試料がセットされた分析用デバイス２を図２に示すように回転駆動部３に装着する。
【００１７】
回転駆動部３により分析用デバイスを矢印Ｒの方向に軸心周りに遠心力１８００Ｇで約１分間回転させることにより、注入口１１より注入された分析試料を、チャンバー１３へ移送させると同時にチャンバー１４へ血球など分析に不必要な固形成分を分離させる。
【００１８】
回転を停止させると、分析に必要な液体成分は毛細管力によって移送用流路１２ｂを通り、エアーバルブとして機能しているチャンバー１５への出口手前で停止する。約３０秒間回転を停止した後、分析用デバイス２を矢印Ｒの方向に軸心周りに遠心力１２００Ｇで約１分間回転させることにより、前記液体成分はサイフォンの原理でチャンバー１５へ移送用流路１２ｂを通り一気に流入し、あらかじめ乾燥状態で保持された第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂが前記液体成分中に溶解する。
【００１９】
分析用デバイス２の前記回転を停止させると、前記液体成分は毛細管力によって移送用流路１２ｃを通り、エアーバルブとして機能しているチャンバー１６への出口手前で停止する。
【００２０】
約１０秒間回転を停止した後、分析用デバイス２を矢印Ｒの方向に軸心周りに遠心力１２００Ｇで回転させることにより、チャンバー１５にある前記液体成分はサイフォンの原理で移送用流路１２ｃを通りチャンバー１６へ一気に流入する。
【００２１】
光源４から照射される光７はチャンバー１６を透過し、光検出部５で得られた光量から処理部６にて分析試料中の分析対象物の測定値を算出する。
第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂの組成を具体的に説明する。
【００２２】
注入口１１より分析試料として血液を注入し、血液中の総コレステロール、トリグリセリド、ＨＤＬコレステロール、ＡＬＴ、ＡＳＴなどを分析対象物として測定する場合などの例えば、トリグリセリドの分析に必要な試薬組成を例に挙げて説明する。
【００２３】
（比較例１）
− 第一試薬１８ａ −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Ｔｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
− 第二試薬１８ｂ −
ＷＳＴ−８（同仁化学製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３５ｍＭ
ＮＡＤ＋（オリエンタル酵母製）・・・・・・・・・・・・・・・・３０ｍＭ
第一試薬１８ａはトリグリセリドの反応に必要な酵素および緩衝液を含み、第二試薬１８ｂは、比色法で測定するための色素および電子メディエーターを含む。上記試薬を混合して１つにまとめると、ブランク反応により徐々に呈色するので、測定までは第一試薬１８ａと第二試薬１８ｂに分けてチャンバー１５に塗布、乾燥する必要がある。
【００２４】
第一試薬１８ａの調製方法の一例を説明する。
ＧＹＤ-３０１の凍結乾燥品を純水で溶解させ２８８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＬＰＬ-３１１の凍結乾燥品を純水で溶解させ３８４ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＤＡＤ-３０１の凍結乾燥品を純水で溶解させ４８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、既知の方法でＴｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ １２００ｍＭを調製したあと、以上４試薬を等量ずつ混合させる。第二試薬１８ｂも同様の方法で調製できる。
【００２５】
チャンバー１５への試薬塗布乾燥プロセスの一例を説明する。
液状の第一試薬１８ａをチャンバー１５の所定の場所に１．２マイクロリットル塗布し、さらに、チャンバー１５の第一試薬１８ａを塗布した場所とは別の場所に液状の第二試薬１８ｂを１．２マイクロリットル塗布し、これらを風乾させる。
【００２６】
風乾の条件は限定されないが、本検討では、温度２５℃、湿度３０％の環境下、１時間放置して乾燥させた。
この分析用デバイス２を温度４０℃、湿度８０％の環境下に３０分放置させると、第一試薬１８ａは潮解性をもつ水酸化ナトリウムを含むため、水分を吸収することによって乾燥状態から液状に変化する。第二試薬１８ｂに関しては潮解性を示さなかった。
【００２７】
温度４０℃、湿度８０％の環境下で比較例１の分析用デバイス２を用いた場合、分析用デバイス２を遠心力１８００Ｇで約１分間回転させることにより、第一試薬１８ａが遠心力方向へ飛散し、測定精度に影響を与えた。
【００２８】
（実施例１）
比較例１の課題を解決するため鋭意検討した結果、比較例１の第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂのどちらか一方または両方に、ブロッキング用たんぱく質を添加することによって高湿度環境下でも試薬の飛散を防止でき、試薬の固定化技術として有用である。
【００２９】
ここでいうブロッキングとは、容器や担体などへの成分の非特異的吸着を妨げることを言い、特にプラスチックなどの樹脂へのタンパク質の非特異的吸着を妨げることをいう。様々な測定において、測定対象の成分が非特異的に器壁に吸着することにより、バックグラウンドとして測定を妨げることが問題となる。特に免疫学的測定において、抗体のポリスチレンプレートへの吸着は顕著であり、通常、あらかじめ樹脂等に吸着しやすいタンパク質を添加して、抗体の非特異的吸着を妨げる操作、すなわちブロッキングを行うことが広く行われている。ブロッキング能を示すには、タンパク質分子の中の比較的疎水的な領域に加え、親水的な領域が必要であるということが条件になっていることが知られている。
【００３０】
潮解性を持つ試薬にブロッキング用タンパク質を添加することによって、ブロッキング用タンパク質の親水的な領域が、潮解性を持つ試薬のうち水を取り込む物質と結合し、疎水的な領域が水を取り込む物質と空気中の水（水蒸気）との接触を阻害し、結果として試薬の液状化を防止できるということが推察される。
【００３１】
ブロッキング用タンパク質としては、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ウシ由来カゼインや、東洋紡績製のＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）について検討を行った。それぞれのタンパク質全体の親水／疎水率は図４に示すように、ＢＳＡは０．９０、ウシ由来αカゼインは０．７６、ＢＰＦ−３０１は０．６４であって、添加される前記ブロッキング用タンパク質は、親水／疎水率が０．６付近で構成されるタンパク質が好ましい。具体的には、親水／疎水率が０．５より大きく０．７以下で構成されるタンパク質が使用可能である。
【００３２】
ここでいう「親水／疎水率」を説明する。
タンパク質のアミノ酸配列のうち、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、ヒスチジン、アルギニン、チロシンを親水性アミノ酸として定義し、また、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、プロリンを疎水性アミノ酸として定義した場合に、タンパク質の親疎水性を数値化するために、親水性アミノ酸含有率を疎水性アミノ酸含有率で割った値を「親水／疎水率」と定義する。
【００３３】
この実施例１では、比較例１の第一試薬１８ａの試薬組成を以下に変更して、その効果の検討を行った。
− 第一試薬１８ａの改良品 −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Ｔｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
ブロッキング用タンパク質・・・・・・・・・・・・・０．１〜２．０％（ｗ/ｗ）
第一試薬１８ａの改良品の調製方法の一例を説明する。
【００３４】
まず、ブロッキング用タンパク質の凍結乾燥品を純水で溶解させ０．１％から２．０％（ｗ/ｗ）の範囲における特定の濃度のブロッキング用タンパク質溶液を調製し、ＧＹＤ-３０１の凍結乾燥品を前記ブロッキング用タンパク質溶液で溶解させ２８８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＬＰＬ-３１１の凍結乾燥品を前記ブロッキング用タンパク質溶液で溶解させ３８４ｕ／ｍｌの溶液を調製し、ＤＡＤ-３０１の凍結乾燥品を前記ブロッキング用タンパク質溶液で溶解させ４８０ｕ／ｍｌの溶液を調製し、既知の方法で純水の代わりにブロッキング用タンパク質溶液を用いてＴｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ １２００ｍＭを調製したあと、以上４試薬を等量ずつ混合させる。
【００３５】
第一試薬１８ａの改良品をチャンバー１５に１．２マイクロリットルだけ塗布し充分に自然乾燥（風乾）させたあと、４０℃、８０％条件で３０分放置した。遠心治具を用いて遠心力を１分間かけて試薬の状態を目視チェックした。
【００３６】
ブロッキング用タンパク質を添加しない場合（比較例１）においては、１０７０Ｇまでは試薬の飛散が認められなかったものの、１２５０Ｇ以上になると飛散したのに対して、ＢＳＡを１．５％添加した実施例１の場合には、１２５０Ｇまでは試薬の飛散が認められず、効果があることが示された。しかしながら、１６００Ｇ以上になるとＢＳＡを２．０％添加しても試薬は飛散した。ＢＳＡを２．０％以上添加した場合は、試薬反応の感度が低下し精度も悪化した。
【００３７】
カゼインを０．５％添加した実施例１の場合、１２５０Ｇまでは試薬の飛散が認められず、効果があることが示された。しかしながら、１６００Ｇ以上になると試薬は飛散した。カゼインを１．０％以上添加した場合は、試薬反応の感度が低下し精度も悪化した。
【００３８】
ＢＰＦ−３０１を添加した実施例１の場合、０．５％添加することによって１２５０Ｇまでは試薬の飛散が認められなかった。また、１．０％添加することによって１８００Ｇ以上でも試薬の飛散が認められず、非常に効果が高いことが示された。
【００３９】
比較例として、ブロッキング能が備わっていないPseudomonas由来リパーゼを２．０％添加したが１２５０Ｇ以上になると飛散した。Pseudomonas由来リパーゼの親水／疎水率は、０．４１であり、疎水性が大きすぎても効果が発揮されないことが分かった。
【００４０】
このように、潮解性を持つ試薬にブロッキング用タンパク質を添加することにより、高湿度環境下に放置された場合でも試薬の液状化を防止し、遠心力による試薬の飛散を防止することができる。親水／疎水率と試薬潮解への効果を図４にまとめた。
【００４１】
潮解への効果として、試薬の飛散を確認する実験で、１８００Ｇ以上で回転させたときにも飛散を防止したタンパク質を○、１８００Ｇ以上で回転させたときには飛散するものの、１２５０Ｇで回転させたときに飛散を防止したタンパク質を△、１２５０Ｇで回転させたときに試薬飛散したタンパク質を×と表記した。したがって、ブロッキング用タンパク質は試薬飛散防止機能をもち、特にＢＰＦ−３０１は飛散防止機能に優れていることが分かった。ＢＰＦ−３０１では０．１重量％〜１０重量％含有させた場合に良好な結果が得られた。
【００４２】
（実施の形態２）
この実施の形態２では、潮解性を持つ試薬にブロッキング用タンパク質を添加することにより、高湿度環境下に放置された場合でも試薬の液状化を防止し、遠心力による試薬の飛散を防止することができるが、ブロッキング用タンパク質が試薬反応に悪影響を及ぼさないかどうかを確認した。
【００４３】
例としてトリグリセリドの分析におけるＢＰＦ−３０１の試薬反応への影響を確認した。
下記の組成からなるトリグリセリド用分析試薬を調製した。
【００４４】
（実施例２）
− 試薬組成１の第一試薬１８ａ −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Ｔｒｉｃｉｎｅ-ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
ＢＰＦ−３０１（東洋紡績製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・２．０％
− 試薬組成１の第二試薬１８ｂ −
ＷＳＴ−８（同仁化学製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３５ｍＭ
ＮＡＤ＋（オリエンタル酵母製）・・・・・・・・・・・・・・・・３０ｍＭ
（比較例２）
比較例２として、以下の組成からなるトリグリセリド用分析試薬を調製した。
【００４５】
− 試薬組成２の第一試薬１８ａ −
ＧＹＤ-３０１（グリセロールデヒドロゲナーゼ、東洋紡績製）・・７２０ｕ／ｍｌ
ＬＰＬ-３１１（リポプロテインリパーゼ、東洋紡績製）・・・・・・９６ｕ／ｍｌ
ＤＡＤ-３０１（ジアホラーゼ、東洋紡績製）・・・・・・・・・・１２０ｕ／ｍｌ
Tricine−ＮａＯＨ ｐＨ８．５ ・・・・・・・・・・・・・・・３００ｍＭ
− 試薬組成２の第二試薬１８ｂ −
ＷＳＴ−８（同仁化学製）・・・・・・・・・・・・・・・・・・・３５ｍＭ
ＮＡＤ＋（オリエンタル酵母製）・・・・・・・・・・・・・・・・３０ｍＭ
本発明の実施例２の試薬組成１、比較例２の試薬組成２の試薬を用いて、ＰＢＳ溶液およびヒト血漿中のトリグリセリド濃度に依存した吸光度を次のようにして測定した。
【００４６】
先ず、第一試薬１８ａを１２μｌ、第二試薬１８ｂ１２μｌを同一容器内に塗布し、温度２５℃、湿度３０％の環境化で１２時間放置することによって乾燥を行った。乾燥後、前記容器内にＰＢＳ溶液およびヒト血漿を６０μｌ加え、攪拌することによって乾燥状態の第一試薬１８ａ、第二試薬１８ｂを溶解させた。前記容器を３７℃恒温槽内に３分間放置することによって反応を行った。光路長６００μｍにて波長４６０ｎｍの光量を測光することによって、吸光度を求めた。それぞれのトリグリセリド濃度依存性を図５にグラフ化した。
【００４７】
この図５から明らかなように、本発明の実施例２の試薬組成１と比較例２の試薬組成２を比較して、測定値に大きな乖離が認められないため、ＢＰＦ−３０１を２．０％添加した場合でもトリグリセリドの反応性に影響を及ぼすことはないことが確認された。
【００４８】
上記の各実施例では、第一試薬１８ａ，第二試薬１８ｂのうちの潮解性が高い第一試薬１８ａにブロッキング用タンパク質を含有させたが、測定する分析対象物によって必要とされる試薬が複数あって、それぞれが潮解性が高い場合には、全部の試薬にブロッキング用タンパク質を含有させてもよい。
【００４９】
また、乾燥方法として風乾を採用したことによって、凍結乾燥によって製造する場合に比べて製造工程を簡素化できる。なお、出来上がった分析用デバイスの試薬を見てブロッキング用タンパク質を含有させて風乾させた実施品は、凍結乾燥されたものとは異なり平面状に薄く広がった仕上がりになり、風乾された試薬か凍結乾燥された試薬か乾燥方法を区別できる。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
本発明は、分析用デバイスにおける試薬の固定化技術として有用であり、分析精度の向上に寄与する。
【符号の説明】
【００５１】
１ 分析装置
２ 分析用デバイス
３ 回転駆動部
４ 光源
５ 光検出部
６ 処理部
７ 光
１１ 注入口
１２ａ，１２ｂ，１２ｃ 移送用流路
１３，１４，１５，１６ チャンバー
１７ 連結口
１８ａ 第一試薬
１８ｂ 第二試薬
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスであって、
前記分析試薬にはブロッキング用タンパク質が添加されている
分析用デバイス。
【請求項２】
前記分析試薬は乾燥状態で配置されている
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項３】
前記分析試薬は、塗布した液体を風乾で乾燥されている
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項４】
添加される前記ブロッキング用タンパク質は、親水／疎水率が０．６付近で構成されるタンパク質である
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項５】
前記ブロッキング用タンパク質は、ＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）である
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項６】
前記ブロッキング用タンパク質は、ＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）を０．１重量％〜１０重量％含有している
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項１】
遠心力と毛細管力で分析試料を移送し、反応部で分析試薬と前記分析試料とを攪拌して分析を行う分析用デバイスであって、
前記分析試薬にはブロッキング用タンパク質が添加されている
分析用デバイス。
【請求項２】
前記分析試薬は乾燥状態で配置されている
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項３】
前記分析試薬は、塗布した液体を風乾で乾燥されている
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項４】
添加される前記ブロッキング用タンパク質は、親水／疎水率が０．６付近で構成されるタンパク質である
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項５】
前記ブロッキング用タンパク質は、ＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）である
請求項１記載の分析用デバイス。
【請求項６】
前記ブロッキング用タンパク質は、ＢＰＦ−３０１（Blocking Peptide Fragment）を０．１重量％〜１０重量％含有している
請求項１記載の分析用デバイス。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【公開番号】特開２０１１−６９６７４（Ｐ２０１１−６９６７４Ａ）
【公開日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２１９８３２（Ｐ２００９−２１９８３２）
【出願日】平成２１年９月２５日（２００９．９．２５）
【出願人】（０００００５８２１）パナソニック株式会社 (73,050)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月２５日（２００９．９．２５）
【出願人】（０００００５８２１）パナソニック株式会社 (73,050)
【Ｆターム（参考）】
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