制がん剤
【課題】リポ酸誘導体を有効成分とする制がん剤を提供する。
【解決手段】次の一般式（１）
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）で表わされる化合物、またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする制がん剤。
【解決手段】次の一般式（１）
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）で表わされる化合物、またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする制がん剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、αリポ酸誘導体を有効成分とする制がん剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
がんは何らかのきっかけで生じるＤＮＡの突然変異による制御不能な細胞分裂によって生じ、条件を問わず転移と増殖を繰り返し、宿主を死に至らしめる。多くの制がん剤（抗がん剤）は細胞分裂をターゲットとして、その分裂を短時間に効果的に阻害することを標的にしている。
【０００３】
従来の制がん剤は、大きくアルキル化剤、代謝拮抗剤、抗がん性抗生物質剤、植物アルカロイド剤、ホルモン療法剤、白金錯体剤およびアスパラギナーゼ剤などに分類される。
【０００４】
このような制がん剤は、通常、細胞毒性を有し、またある種の薬剤はアポトーシス（細胞自殺）を引き起こすため、がん細胞のみならず、正常な細胞にも障害を与えてしまう。特に効果が強いとされる制がん剤は、制がん効果と副作用が隣合わせであるため、そのバランスを考えながら使うことが非常に重要になっている。
【０００５】
ところで、αリポ酸（チオクト酸）はミトコンドリア中に存在する補酵素で、生体内では一部還元されてジヒドロリポ酸になる。これは酸化型のグルタチオンやビタミンＣを還元型に再生させる作用が知られている。しかし、空気中では非常に不安定であり、酸化されて一部αリポ酸に戻ることが知られている。
【０００６】
かかるαリポ酸またはリポ酸誘導体の還元体は、金属でキレート化することで安定化させることができる。かかるαリポ酸またはリポ酸誘導体の金属キレート化物、具体的には６，８−ジメルカプトオクタン酸金属キレート化合物またはその誘導体には、抗酸化作用、フリーラジカル抑制作用、チロシナーゼ阻害作用、エラスターゼ阻害作用、メラニン産生抑制作用、頭皮脱毛治癒作用、抗がん作用があることが知られている（特許文献１〜３参照）。
【０００７】
αリポ酸の誘導体としては、αリポ酸にグリシン、メチオニン、グルタミン酸、またはバリンなどのアミノ酸残基が結合したαリポイルアミノ酸（特許文献４〜５）、αリポイルアミノエチルスルホン酸のイミダゾール塩（特許文献６）、リポイルエステル、及びジヒドロリポ酸及びジヒドロリポアミドの金属誘導体が知られている。
【０００８】
またリポ酸のＳ原子（２価）を酸化してスルホン酸（６価）に導いたリポ酸のスルホン酸誘導体も知られている。
【０００９】
αリポ酸は有機溶媒には溶けるが、水には殆んど溶けない難溶性の化合物である。水溶液のｐＨをアルカリ性にすることで溶解するものの安定性が悪くなるという問題がある。これを解決する方法として、αリポ酸またはαリポイルアミノ酸に亜硫酸塩やメタ重亜硫酸塩等の亜硫酸塩類を加える方法が提案されている（特許文献７及び８）。かかる方法によればｐＨ７以下の水溶液にも溶解し、経時的にも安定である。その構造は、αリポ酸のＳＳ結合が開環し、生じた少なくとも一方のＳ原子に亜硫酸が付加したもの（Ｓ−スルホ−リポ酸またはＳ−ジスルホ−リポ酸）であり、上記リポ酸のスルホン酸誘導体とは構造及び性状を異にするものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】国際公開第２００２／０７６９３５号
【特許文献２】国際公開第２００４／０２４１３９号
【特許文献３】特表２００２−５２８４４６号公報
【特許文献４】特公昭４２−１２８６号公報（対応米国特許第3238224号）
【特許文献５】特開２００３−２８６１６８号公報
【特許文献６】特開２０００−１６９３７１号公報
【特許文献７】特開２００５−２０９６号公報
【特許文献８】特開２００３−４８８３３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、リポ酸誘導体を有効成分とする新規な制がん剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねていたところ、下記一般式（１）で示されるαリポ酸の誘導体、特にジヒドロリポ酸（ジメルカプトオクタン酸）またはその誘導体の２つのＳＨ基のどちらか少なくとも一方の水素原子がスルホン酸又はその塩に置換された化合物、並びにαリポイルアミノ酸が、がん細胞に対して高い親和性を有しており、有意な制がん作用があることを見出した。
【００１３】
本願発明はかかる知見に基づくものであって、下記の実施形態を包含するものである。
（Ｉ）次の一般式（１）
【００１４】
【化１】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）
で表わされる化合物、またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする制がん剤。
【００１５】
（I-1）Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが０で隣接するＳ原子が互いに結合して環を形成してなるものである（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-1-1）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−β−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−δ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸、及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸からなる群から選ばれるものである、（I-1）記載の制がん剤。
（I-1-2）Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸が、Ｎ−α−リポイルグリシン、Ｎ−α−リポイルアラニン、Ｎ−α−リポイルスレオニン、Ｎ−α−リポイルセリン、Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸、Ｎ−α−リポイルグルタミン酸、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン、Ｎ−α−リポイルバリン、Ｎ−α−リポイルメチオニン、Ｎ−α−リポイルノルロイシン、Ｎ−α−リポイルシステイン、Ｎ−α−リポイルハイドロキシプロリン、Ｎ−α−リポイルヒスチジン、Ｎ−α−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｎ−α−リポイルペニシラミン、及びＮ−α−リポイルリジンからなる群から選ばれるものである、（I-1-1）記載の制がん剤。
（I-1-3）Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸が、Ｎ−α−リポイル−３−アミノプロピオン酸、Ｎ−α−リポイル−４−アミノ酪酸、Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｎ−α−リポイル−４−トランスアミノメチル−１−シクロヘキサンカルボン酸、Ｎ−α−リポイル−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−α−リポイルスルファニル酸、及びＮ−α−リポイルアントラニル酸からなる群から選ばれるものである、（I-1-1）記載の制がん剤。
【００１６】
（I-2）Ｒ１がＯＨ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-3）Ｒ１がＯ−アルキル基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-4）Ｒ１がＮ−置換アミノ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
【００１７】
（I-5）Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-5-1）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイル−α−アミノ酸、Ｓ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−α−アミノ酸、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイル−ω−アミノ酸、Ｓ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−ω−アミノ酸、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイル特殊アミノ酸、及びＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル特殊アミノ酸からなる群から選ばれるものである、（I-5）記載の制がん剤。
（I-5-2）Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−α−アミノ酸が、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルグリシン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアラニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルスレオニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルセリン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアスパラギン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルグルタミン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルフェニルアラニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルバリン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルメチオニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルノルロイシン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルシステイン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルハイドロキシプロリン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルヒスチジン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルペニシラミン、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルリジンからなる群から選ばれるものである、（I-5-1）記載の制がん剤。
（I-5-3）Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−ω−アミノ酸、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル特殊アミノ酸が、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−３−アミノプロピオン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−４−アミノ酪酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−４−トランスアミノメチル−１−シクロヘキサンカルボン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−アミノエタンスルホン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルスルファニル酸、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアントラニル酸からなる群から選ばれるものである、（I-5-1）記載の制がん剤。
【００１８】
（I-6）Ｒ１がペプタイド残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-6-1）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルジペプタイド、及びＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルジペプタイドからなる群から選ばれるものである、（I-6）記載の制がん剤。
（I-6-2）Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルジペプタイドが、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアスパラチイルグリシン、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルスレオニルグリシンからなる群から選ばれるものである、（I-6-1）記載の制がん剤。
【００１９】
（II）次の一般式（２）
【００２０】
【化２】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。）
で表わされる化合物またはその薬理学的に許容される塩と、亜硫酸塩類またはその水和物とを含有することを特徴とする制がん剤。
【００２１】
（II-1）亜硫酸塩類が、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、及びメタ重亜硫酸塩からなる群から選択されるいずれかである、（II）に記載する制がん剤。
（II-1-1）亜硫酸塩類の塩が、亜硫酸、重亜硫酸、及びメタ重亜硫酸からなる群から選択される少なくとも一種の酸のアルカリ金属塩である、（II）に記載する制がん剤。
（II-2）一般式（２）で表わされる化合物が、Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−β−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−δ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸、及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸からなる群から選ばれるものである、（II）または（II-1）に記載する制がん剤。
（II-2-1）Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸が、Ｎ−α−リポイルグリシン、Ｎ−α−リポイルアラニン、Ｎ−α−リポイルスレオニン、Ｎ−α−リポイルセリン、Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸、Ｎ−α−リポイルグルタミン酸、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン、Ｎ−α−リポイルバリン、Ｎ−α−リポイルメチオニン、Ｎ−α−リポイルノルロイシン、Ｎ−α−リポイルシステイン、Ｎ−α−リポイルハイドロキシプロリン、Ｎ−α−リポイルヒスチジン、Ｎ−α−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｎ−α−リポイルペニシラミン、及びＮ−α−リポイルリジンからなる群から選ばれるものである、（II-2）記載の制がん剤。
（II-2-2）Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸が、Ｎ−α−リポイル−３−アミノプロピオン酸、Ｎ−α−リポイル−４−アミノ酪酸、Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｎ−α−リポイル−４−トランスアミノメチル−１−シクロヘキサンカルボン酸、Ｎ−α−リポイル−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−α−リポイルスルファニル酸、及びＮ−α−リポイルアントラニル酸からなる群から選ばれるものである、（II-2）記載の制がん剤。
【００２２】
（II-3）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｎ−リポイルジペプタイドからなる群から選ばれるものである、（II）または（II-1）記載の制がん剤。
（II-3-1）Ｎ−リポイルジペプタイドが、Ｎ−リポイルアスパラチイルグリシン及びＮ−リポイルスレオニルグリシンからなる群から選ばれるものである、（II-3）記載の制がん剤。
【発明の効果】
【００２３】
本発明が対象とするαリポ酸誘導体（１）およびその薬理学的に許容される塩は、がん細胞の増殖を有意に抑制する作用（制がん作用）を有している。このため、これらの化合物は、かかる作用に基づいてがん治療剤の有効成分として有用であり、制がん治療に優れた治療効果を発揮する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。図中、コントロールはＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウムを配合しない場合の大腸癌細胞の増殖能を示す（以下、同じ）。
【図２】Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）（0.1mM、0.5mM）と亜硫酸ナトリウム（0.1mM、0.5mM）を併用した場合の、大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図３】Ｎ−リポイルフェニルアラニン（製造例４）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図４】Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン（製造例４）（0.1mM、0.5mM）と亜硫酸ナトリウム（0.1mM、0.5mM）を併用した場合の、大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図５】Ｎ−リポイルバリン（製造例５）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図６】Ｎ−α−リポイルバリン（製造例５）（0.1mM、0.5mM）と亜硫酸ナトリウム（0.1mM、0.5mM）を併用した場合の、大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図７】Ｓ−スルホ−リポ酸ナトリウム（製造例１３）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明の制がん剤は、下記一般式（Ｉ）で示されるαリポ酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とするものである。
【００２６】
【化３】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）。
【００２７】
上記式中、Ｒ１で示すＯ−アルキル基としては、炭素数１〜６の直鎖状または分岐状の低級アルキル基を挙げることができる。具体的には、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、２，２−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、２−エチルブチル基などが挙げられる。好ましくはメチル基およびエチル基である。
【００２８】
上記式中、Ｒ１で示すＮ−置換アミノ基としては、第一級アミノ基の１または２の水素原子または第二級アミノ基の１の水素原子が、炭素数１〜５の脂肪族炭化水素基；炭素数１〜５の脂肪族アルコール残基；またはピリジン環、ピリミジン環もしくはインドール環などの窒素原子を含むヘテロ環で置換された基を挙げることができる。なお、ここで脂肪族炭化水素基、脂肪族アルコール残基、及び窒素原子を含むヘテロ環は、それぞれ置換基を有するものであってもよく、かかる置換基としては水酸基；ハロゲン原子（塩素原子、フッ素原子、ヨウ素元素等）；炭素数１〜６のＯ−低級アルキル基；炭素数１〜６のアルキル基；並びに修飾されていてもよいピリジン環、ピリミジン環もしくはインドール環などの窒素原子を含むヘテロ環基等を、特に制限なく挙げることができる。
【００２９】
炭素数１〜５の脂肪族炭化水素基としては、炭素数１〜５の直鎖状または分岐状の低級アルキル基、炭素数２〜５の直鎖状または分岐状の低級アルケニル基、及び炭素数２〜５の直鎖状または分岐状の低級アルキニル基を挙げることができる。好ましくは低級アルキル基である。かかる低級アルキル基としては、前述するように、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基などが挙げられる。好ましくはメチル基およびエチル基である。
【００３０】
また炭素数２〜５の低級アルケニル基としてはビニル基、プロペニル基、ブテニル基およびペンテニル基などを、炭素数２〜５の低級アルキニル基としてはエチニル基、プロピニル基、ブチニル基、ペンチニル基等が挙げられる。
【００３１】
炭素数１〜５の脂肪族アルコール残基としては、具体的にはメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、およびイソブタノール等の低級アルコールが挙げられる。
【００３２】
Ｒ１がＮ−置換アミノ基である本発明のαリポ酸誘導体（１）として、具体的には、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−アミノエタノール（Ｒ１＝−ＮＨ２の１つの水素原子がエタノール残基で置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−イソプロピルアミン（Ｒ＝−ＮＨ２の１つの水素原子がイソプロピル基で置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−アミノピリジン（Ｒ＝−ＮＨ２の１つの水素原子が２−ピリジル基で置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−５−Ｏ−メチルセロトニン（Ｒ＝５−Ｏ−メチルセロトニンの側鎖のＮＨ２基の水素原子の１つが置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）などを挙げることができる。
【００３３】
上記式中、Ｒ１で示すアミノ酸残基の「アミノ酸」としては、同一分子内にカルボキシル基とアミノ基を有する、α−アミノ酸；β−アミノ酸、γ−アミノ酸、δ−アミノ酸、及びε−アミノ酸（本明細書では、β−アミノ酸〜ε−アミノ酸を総称して「ω−アミノ酸」という）；アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸、アントラニル酸およびアントラニル酸エチル；及び同一分子内にスルホン酸基とアミノ基を有するアミノエタンスルホン酸（タウリン）やｐ−アミノベンゼンスルホン酸（スルファニル酸）などのアミノ酸（以上のアミノ酸を総称して「特殊アミノ酸」という）を挙げることができる。
【００３４】
α−アミノ酸としては、たとえばグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ノルロイシン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、メチオニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、トリプトファン及びペニシラミンなどが挙げられる。好ましくはグリシン、アラニン、スレオニン、セリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、バリン、メチオニン、システイン、リジン、ヒスチジン、及びペニシラミンである。なお、これらのα−アミノ酸は、置換基として水酸基を有するものであってもよい。水酸基を有するα−アミノ酸としては、制限されないが、例えばハイドロキシプロリンやハイドロキシトリプトファン等を挙げることができる。
【００３５】
β−アミノ酸としてはβ−アラニンが挙げられる。γ−アミノ酸としてはγ−アミノ−ｎ−酪酸（ＧＡＢＡ）やカルニチンが挙げられる。δ−アミノ酸としては５−アミノレブリン酸や５−アミノ吉草酸が、ε−アミノ酸としては６−アミノヘキサン酸が挙げられる（前述するように、これらのアミノ酸を総称して「ω−アミノ酸」という）。
【００３６】
これらのアミノ酸のうち、好ましくはメチオニン、ヒスチジン、リジン、フェニルアラニン、バリン等のα−アミノ酸；γ−アミノ−ｎ−酪酸や６−アミノヘキサン酸等のω−アミノ酸；及びアントラニル酸やアミノエタンスルホン酸等の特殊アミノ酸であり、より好ましくはフェニルアラニン、バリン、アミノエタンスルホン酸である。
【００３７】
上記式中、Ｒ１で示すペプタイド残基の「ペプタイド」としては、好ましくは同種または異種の２個のアミノ酸（前記と同義）が、互いに一方のカルボキシル基と他方のアミノ酸のアミノ基とが酸アミド結合したジペプチドを挙げることができる。かかるジペプチドとして、具体的にはアスパラチイルグリシンやスレオニイルグリシンなどを挙げることができる。
【００３８】
本発明のαリポ酸誘導体（１）の薬理学的に許容される塩としては、ナトリウム塩やカリウム塩などのアルカリ金属塩、およびカルシウム塩やマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩を挙げることができる。なお、これら以外の塩であっても薬理学的に許容できる塩であればいずれのものであっても本発明の目的のため適宜に用いることができる。また、本発明が対象とするαリポ酸誘導体（１）には、その水和物も含まれる。
【００３９】
本発明の制がん剤の有効成分として使用するαリポ酸誘導体（１）のうち、ｎが０であり、隣接する硫黄原子が互いに結合して環を形成してなるαルポ酸誘導体（１）は、制限されないが、例えば、Ｒ１がアミノ酸残基である化合物（1a）は下記に説明する混合酸無水物法（MA法）により、αリポ酸を原料として合成することができる。
【００４０】
【化４】
（式中、Ｒ１ａは、アミノ酸残基を意味する。）
【００４１】
具体的にはαリポ酸を有機溶媒（たとえばクロロホルム、テトラヒドロフラン、アセトニトリルなど）に溶かし、これに３級アミン（トリエチルアミン、トリブチルアミンやＮ−メチルモルホリン（NMM）など）の存在下−15℃〜−5℃でハロゲン化炭酸エステル（クロル炭酸エチル、クロル炭酸ブチルなど）、イソブチルオキシカルボニルクロリド、塩化ジエチルアセチルまたは塩化トリメチルアセチルなどの混合酸無水物化試薬を反応させてαリポ酸の混合酸無水物とする。反応時間は1〜2分から数10分程度である。さらにアミノ酸を塩基（水酸化ナトリウム、水酸化カリウムやトリエチルアミン、トリブチルアミンなどの３級アミン）存在下でアルコール、水またはそれらの混液などの溶媒に溶かしたものを加えて反応させた後、適当な溶媒、たとえば水またはアルコールから再結晶させると、所望のαリポイルアミノ酸（1a）を得ることができる。
【００４２】
また本発明の制がん剤の有効成分として使用するαリポ酸誘導体（１）のうち、ｎが１であり、Ｒ２及びＲ３が、同一または異なって水素原子またはスルホ基である化合物（1c）及び（1d）は、制限されないが、下記に説明する方法により、αリポ酸を原料として合成することができる。
【００４３】
【化５】
（式中、Ｒ２及びＲ3は前記と同義である。Ｒ１ｂは、前記のうち、ＯＨ基以外の基を意味する。）
【００４４】
具体的には、本発明が対象とするαリポ酸誘導体（1c）及び（1d）は、αリポ酸、またはこれを所望によりアルキルエステル、アミノ酸もしくはペプタイド（上記式中、「Ｒ１ｂ−ＯＨ」として示す）と反応させ、上記式（1b）で示すαリポ酸誘導体としたものに、亜硫酸塩類を付加させて製造することが出来る。
【００４５】
ここで亜硫酸塩類としては、亜硫酸ナトリウムや亜硫酸カリウムなどの亜硫酸のアルカリ金属塩等の亜硫酸塩；亜硫酸水素ナトリウムや亜硫酸水素カリウムなどの亜硫酸水素化物のアルカリ金属塩等の重亜硫酸塩；およびメタ重亜硫酸塩を挙げることができる。好ましくは亜硫酸ナトリウムや亜硫酸カリウムなどの亜硫酸塩である。
【００４６】
αリポ酸をアルキルエステルまたはアミド体とする反応は、混合酸無水物法（ＭＡ法）により実施することが出来る。すなわち、αリポ酸を有機溶媒（例えば、クロロホルム、ＴＨＦ，アセトニトリルなど）に溶かし、これに３級アミン（トリエチルアミン、トチブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンなど）の存在下、−15〜−5℃で、ハロゲン化炭酸エステル（例えば、クロル炭酸エチル、クロル炭酸ブチルなど）を加えて５〜10分後に、さらに、所望のアルコール、アミン、アミノ酸、ペプタイドを必要に応じた塩基（水酸化ナトリウム、トリエチルアミンやトリブチルアミンなどの３級アミンなど）の存在下、水またはアルコールまたはそれらの混液などの溶媒に溶かしたものを一挙に加えて反応させる。次に反応温度を徐々に室温に戻して反応を終結させ、反応液を処理して粗結晶を得た後、適当な溶媒、例えば、水またはアルコールから再結晶させて、αリポ酸のアルキルエステル、または対応したアミド体を得ることが出来る。
【００４７】
本発明が対象とするαリポ酸誘導体（1c）及び（1d）は、αリポ酸または上記方法で調製されるαリポ酸誘導体（1b）を水に溶かすか、またはサスペンドしておき、これに亜硫酸塩類を徐々に加えて攪拌することによって調製することができる。亜硫酸塩類の配合割合は、特に制限されないが、Ｓ−スルホ体を調製する場合は、αリポ酸またはαリポ酸誘導体１モルに対して亜硫酸塩類が等モル量になるように、Ｓ−ジスルホ体を調製する場合は、αリポ酸またはαリポ酸誘導体１モルに対して亜硫酸塩類が２倍モル量になるように調整することが好ましい。
【００４８】
斯くして得られる反応物（反応液）はこのまま本発明の制がん剤の有効成分として使用することも出来るが、通常はこの水溶液を減圧下、４０℃以下で濃縮した後、エタノールを加えて、上記式（1d）で示すＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポ酸またはその塩、または上記式（1c）で示すＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポ酸誘導体にそれぞれ対応した固形物を得ることが出来る。
【００４９】
本発明のαリポ誘導体（１）は構造上、ジヒドロリポ酸誘導体でその薬理学的に許容できる塩は、還元作用並びにラジカル抑制作用も強く、安定性もよく、組成からしても安全性の高い化合物で問題ない優れた化合物である。
【００５０】
上記αリポ酸誘導体（１）またはその薬理学上許容される塩は、制がん剤、並びにがん転移抑制剤の有効成分として有効である。
【００５１】
従って、上記αリポ酸誘導体（１）またはその薬理学上許容される塩を有効成分とする医薬品は、制がん剤（がん転移抑制剤を包含する）として、がん細胞の増殖を抑制し、がんの治療、及びがんの進展やがんの転移を抑制するために有効に使用することができる。なお、αリポ酸誘導体（１）またはその薬理学上許容される塩は、１種単独で使用してもよいが、目的と必要に応じて、２種以上を適宜組み合わせて用いることもできる。
【００５２】
本発明の制がん剤は、経口的にあるいは非経口的に用いることができ、投与形態に応じた製剤形態に調製することができる。製剤の形態としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固形製剤、または注射剤等の液剤などいずれの形にも公知の方法により調製することができる。これらの製剤には通常用いられる賦形剤、結合剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、緩衝材、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調整化剤等の各種添加剤を適宜使用しても良い。
【００５３】
本発明の制がん剤の投与量は、使用する本化合物の種類、患者の体重や年齢、対象とする疾患の種類やその状態および投与方法などによっても異なるが、例えば注射剤の場合、成人1日１回、約10ｍｇ〜100ｍｇ、内服剤の場合は、成人１日数回、10ｍｇ〜1000ｍｇ程度投与するのがよい。
【実施例】
【００５４】
次に製造例、実験例および実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
【００５５】
製造例１ Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（Ｎ−α−リポイルタウリンナトリウム）
αリポ酸6.2gをクロロホルム60mlに溶かし、トリエチルアミン3.2gを加えて−5℃に冷却した。これにクロル炭酸エチル3.3gを徐々に滴下し、滴下終了15分後に、これにアミノエタンスルホン酸4.5gおよび水酸化ナトリウム1.5gをメタノール60mlに溶かしたものを一挙に加えて、その温度（−5℃）で15分間、さらに室温に戻して1時間攪拌した。次に、これに水酸化ナトリウム1.5gをメタノール50mlに溶かした溶液を加えて、減圧下で溶媒を1/3程度になるまで濃縮した。次いで、これにエタノール60mlを加えて析出した結晶を濾取した。これを水−メタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶5.8gを得た。融点235〜237℃。
元素分析： C10H17NO4S3Na・H2Oとして理論値 C：34.08、 H：5.43、N：3.97、実測値 C：34.23、H：5.54、N：3.80。
【００５６】
製造例２ Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸カリウム（Ｎ−α−リポイルタウリンカリウム）
製造例１のＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウムの製造方法において、アミノエタンスルホン酸4.5gと混合する水酸化ナトリウム1.5gに代えて水酸化カリウム4.0gを用いる以外は、製造例１と同じ方法を実施して結晶を濾取した。これを水−メタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶6.5gを得た。融点240〜242℃。
【００５７】
製造例３ Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸のカルシウムまたはマグネシウム塩
製造例１で得られたＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウムを水に溶かし、スルホン酸樹脂で脱塩して遊離酸とした。これを炭酸カルシウムまたは塩基性炭酸マグネシウムで、それぞれ中和させて、Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸の水溶性のカルシウム塩またはマグネシウム塩を得た。それぞれ融点300℃以上。
【００５８】
製造例４ Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5gに代えてL−フェニルアラニン3.5gを用いる以外は、製造例１と同様に反応させた。得られた反応液を減圧下で40℃以下で溶媒を留去濃縮した後、塩酸で酸性として酢酸エチルで抽出し、水洗した後、酢酸エチルを留去した。残渣結晶をエタノール−水を用いて再結晶させて、掲題化合物の淡黄色結晶4.6gを得た。融点154℃〜156℃。
【００５９】
製造例５ Ｎ−α−リポイルバリン
原料としてαリポ酸4.2g、およびL−フェニルアラニン3.5g に代えてL−バリン2.4gを用いる以外は、製造例４と同様に反応処理して、掲題化合物の淡黄色板状4.1gを得た。
【００６０】
製造例６ Ｎ−α−リポイルグリシンナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5gに代えてグリシン1.9gを用いる以外は、製造例１と同様に反応処理して、掲題化合物4.5gを得た。融点218℃〜220℃。
【００６１】
製造例７ Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸ナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5gに代えてＬ−アスパラギン酸2.9gを用いる以外は、製造例１と同様に反応処理して、掲題化合物5.1gを得た。融点300℃以上。
【００６２】
製造例８ Ｎ−α−リポイルメチオニン
原料としてαリポ酸4.2g、およびL−フェニルアラニン3.5g に代えてL−メチオニン3.5gを用いる以外は、製造例４と同様に処理して、掲題化合物の淡黄色結晶4.0gを得た。融点108℃〜109℃。
【００６３】
製造例９ Ｎ−α−リポイルシステインナトリウム
原料としてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5g に代えてL−システイン2.6gを用いる以外は、製造例１と同様に処理して、掲題化合物の白色結晶4.5gを得た。融点150℃付近から徐々に分解。
【００６４】
製造例１０ Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸ナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5g に代えて６−アミノヘキサン酸3.0gを用いる以外は、製造例１と同様の方法で反応させて結晶を濾取した。これをエタノールを用いて再結晶させて、標題化合物の黄色がかった白色結晶5.5gを得た。融点200〜202℃（分解）。
【００６５】
製造例１１ Ｎ−α−リポイルアントラニル酸ナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5g に代えてアントラニル酸2.9gを用いる以外は、製造例１と同様に処理して、掲題化合物の白色結晶3.5gを得た。融点300℃以上。
【００６６】
製造例１２ Ｎ−α−リポイル−４−アミノ酪酸
原料としてαリポ酸4.2g、およびL−フェニルアラニン3.5g に代えて４−アミノ酪酸2.3gを用いる以外は、製造例４と同様に処理して、掲題化合物の淡黄色結晶4.3gを得た。融点235℃付近から分解。
【００６７】
製造例１３ Ｓ−スルホ−リポ酸ナトリウム
αリポ酸2.1ｇ（0.01 モル）を水50ｍｌに懸濁したものに、亜硫酸ナトリウム1.3ｇ（0.01モル）を加えて撹拌しながら溶解した。これを減圧下、40℃以下で濃縮した後、エタノールを加え、白色固形物2.3ｇを濾取した。これを水−エタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶を得た。
【００６８】
製造例１４ Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルフェニルアラニンナトリウム
製造例１３において、αリポ酸2.1gの代わりに製造例４で調製したＮ−リポイルフェニルアラニン3.5ｇを用いて、同様に反応処理した。具体的には、Ｎ−リポイルフェニルアラニン3.5ｇ（0.01 モル）を水50ｍｌに懸濁したものに、亜硫酸ナトリウム1.3ｇ（0.01モル）を加えて撹拌しながら溶解した。これを減圧下、40℃以下で濃縮した後、エタノールを加え、白色固形物2.3ｇを濾取した。これを水−エタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶を得た。
【００６９】
製造例１５ Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルバリンナトリウム溶液
製造例５で調製したＮ−リポイルバリン305ｍｇを水100ｍｌに懸濁しておき、これに無水亜硫酸ナトリウム150ｍｇを加えて溶解して濾過し、掲題化合物の水溶液を調製した。
【００７０】
製造例１６ Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルタウリンナトリウム溶液
製造例１で調製したＮ−リポイルタウリンナトリウム335ｍｇを、水100ｍｌに溶解し、これに無水亜硫酸ナトリウム150ｍｇを加えて溶解して濾過して、掲題化合物の水溶液を取得した。
【００７１】
実験例１ 癌細胞増殖能に対する抑制効果
上記で製造したリポ酸誘導体のうち、Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン（製造例４）、Ｎ−α−リポイルバリン（製造例５）、及びＳ−スルホ−リポ酸ナトリウム（製造例１３）を被験化合物とし、これらの化合物の癌細胞増殖能に対する抑制効果を評価した。なお、Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン（製造例４）、及びＮ−α−リポイルバリン（製造例５）については、それぞれ各化合物を単独で使用した場合と、亜硫酸ナトリウムを併用した場合との両方で実験を行った。
【００７２】
（１）被験化合物
１．Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）
２．Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム＋亜硫酸ナトリウム
３．Ｎ−リポイルフェニルアラニン（製造例４）
４．Ｎ−リポイルフェニルアラニン＋亜硫酸ナトリウム
５．Ｎ−リポイルバリン（製造例５）
６．Ｎ−リポイルバリン＋亜硫酸ナトリウム
７．Ｓ−スルホ−リポ酸ナトリウム（製造例１３）。
【００７３】
（２）試験方法
コントロール培地として、RPMI 1640に10％ウシ胎児血清と抗菌剤（100 IU/ml penicillin，0.1mg/ml streptomycin，2.5×10-4mg/ml amphotericin B) を加え調製したものを使用した。また試験培地として、上記コントロール培地に、上記各被験化合物をαリポ酸誘導体の最終濃度が0.1 mMまたは0.5mMに、被験化合物２、４及び６については、培地中の亜硫酸ナトリウムの最終濃度が0.1 mMまたは0.5mMになるように調整した。
【００７４】
かかる培地を用いて、大腸癌細胞（HT29）（5.0×105/wellまたは1.0×106well）を5％ CO2，37℃のもとで培養した。培養開始後24時間ごとに0.25％トリプシンを用いて細胞を剥離し,トリパンブルー排除法にて，Haemocytometerで生細胞数を測定した。
【００７５】
（３）試験結果
大腸癌細胞増殖能に対する被験化合物１〜７の効果（癌細胞増殖抑制効果）を図１〜７にそれぞれ示す。またその総合評価を表１に示す。
【００７６】
【表１】
【００７７】
図１〜７及び表１の結果から、Ｎ-α-リポイルフェニルアラニン、Ｎ-α-リポイルバリン、及びＮ-α-リポイルアミノエタンスルホン酸等のαリポイルアミノ酸、並びにＳ−スルホ−リポ酸ナトリウムは0.1mM以上の濃度、特に0.5mM以上の濃度で、大腸癌細胞HT29の増殖を顕著に抑制することが確認された。またαリポニルアミノ酸は、亜硫酸塩と併用することで、がん細胞発育の抑制効果が増強される傾向にあることが確認された。
【００７８】
これらの実験結果から、本願発明が対象とするαリポ酸誘導体は大腸がんなどのがん細胞の増殖を抑制する作用があり、かかる作用に基づいて制がん剤（抗がん剤）としての治療効果があると考えられる。
【００７９】
〔製剤実施例１〕 内服錠
製造例１〜１４のいずれかの化合物 ３０ｍｇ
乳糖 ８０ｍｇ
馬鈴薯澱粉 １７ｍｇ
ポリエチレングリコール6000 ３ｍｇ
以上の成分を1錠分の材料として常法により成型する。
【００８０】
〔製剤実施例２〕 注射剤
製造例１〜１４のいずれかの化合物 １．０ｇ
マニトール ４．０ｇ
注射用蒸留水 全量 １００ｍＬ
以上を常法により混合溶解させ注射剤とする。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、αリポ酸誘導体を有効成分とする制がん剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
がんは何らかのきっかけで生じるＤＮＡの突然変異による制御不能な細胞分裂によって生じ、条件を問わず転移と増殖を繰り返し、宿主を死に至らしめる。多くの制がん剤（抗がん剤）は細胞分裂をターゲットとして、その分裂を短時間に効果的に阻害することを標的にしている。
【０００３】
従来の制がん剤は、大きくアルキル化剤、代謝拮抗剤、抗がん性抗生物質剤、植物アルカロイド剤、ホルモン療法剤、白金錯体剤およびアスパラギナーゼ剤などに分類される。
【０００４】
このような制がん剤は、通常、細胞毒性を有し、またある種の薬剤はアポトーシス（細胞自殺）を引き起こすため、がん細胞のみならず、正常な細胞にも障害を与えてしまう。特に効果が強いとされる制がん剤は、制がん効果と副作用が隣合わせであるため、そのバランスを考えながら使うことが非常に重要になっている。
【０００５】
ところで、αリポ酸（チオクト酸）はミトコンドリア中に存在する補酵素で、生体内では一部還元されてジヒドロリポ酸になる。これは酸化型のグルタチオンやビタミンＣを還元型に再生させる作用が知られている。しかし、空気中では非常に不安定であり、酸化されて一部αリポ酸に戻ることが知られている。
【０００６】
かかるαリポ酸またはリポ酸誘導体の還元体は、金属でキレート化することで安定化させることができる。かかるαリポ酸またはリポ酸誘導体の金属キレート化物、具体的には６，８−ジメルカプトオクタン酸金属キレート化合物またはその誘導体には、抗酸化作用、フリーラジカル抑制作用、チロシナーゼ阻害作用、エラスターゼ阻害作用、メラニン産生抑制作用、頭皮脱毛治癒作用、抗がん作用があることが知られている（特許文献１〜３参照）。
【０００７】
αリポ酸の誘導体としては、αリポ酸にグリシン、メチオニン、グルタミン酸、またはバリンなどのアミノ酸残基が結合したαリポイルアミノ酸（特許文献４〜５）、αリポイルアミノエチルスルホン酸のイミダゾール塩（特許文献６）、リポイルエステル、及びジヒドロリポ酸及びジヒドロリポアミドの金属誘導体が知られている。
【０００８】
またリポ酸のＳ原子（２価）を酸化してスルホン酸（６価）に導いたリポ酸のスルホン酸誘導体も知られている。
【０００９】
αリポ酸は有機溶媒には溶けるが、水には殆んど溶けない難溶性の化合物である。水溶液のｐＨをアルカリ性にすることで溶解するものの安定性が悪くなるという問題がある。これを解決する方法として、αリポ酸またはαリポイルアミノ酸に亜硫酸塩やメタ重亜硫酸塩等の亜硫酸塩類を加える方法が提案されている（特許文献７及び８）。かかる方法によればｐＨ７以下の水溶液にも溶解し、経時的にも安定である。その構造は、αリポ酸のＳＳ結合が開環し、生じた少なくとも一方のＳ原子に亜硫酸が付加したもの（Ｓ−スルホ−リポ酸またはＳ−ジスルホ−リポ酸）であり、上記リポ酸のスルホン酸誘導体とは構造及び性状を異にするものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】国際公開第２００２／０７６９３５号
【特許文献２】国際公開第２００４／０２４１３９号
【特許文献３】特表２００２−５２８４４６号公報
【特許文献４】特公昭４２−１２８６号公報（対応米国特許第3238224号）
【特許文献５】特開２００３−２８６１６８号公報
【特許文献６】特開２０００−１６９３７１号公報
【特許文献７】特開２００５−２０９６号公報
【特許文献８】特開２００３−４８８３３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、リポ酸誘導体を有効成分とする新規な制がん剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねていたところ、下記一般式（１）で示されるαリポ酸の誘導体、特にジヒドロリポ酸（ジメルカプトオクタン酸）またはその誘導体の２つのＳＨ基のどちらか少なくとも一方の水素原子がスルホン酸又はその塩に置換された化合物、並びにαリポイルアミノ酸が、がん細胞に対して高い親和性を有しており、有意な制がん作用があることを見出した。
【００１３】
本願発明はかかる知見に基づくものであって、下記の実施形態を包含するものである。
（Ｉ）次の一般式（１）
【００１４】
【化１】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）
で表わされる化合物、またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする制がん剤。
【００１５】
（I-1）Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが０で隣接するＳ原子が互いに結合して環を形成してなるものである（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-1-1）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−β−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−δ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸、及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸からなる群から選ばれるものである、（I-1）記載の制がん剤。
（I-1-2）Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸が、Ｎ−α−リポイルグリシン、Ｎ−α−リポイルアラニン、Ｎ−α−リポイルスレオニン、Ｎ−α−リポイルセリン、Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸、Ｎ−α−リポイルグルタミン酸、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン、Ｎ−α−リポイルバリン、Ｎ−α−リポイルメチオニン、Ｎ−α−リポイルノルロイシン、Ｎ−α−リポイルシステイン、Ｎ−α−リポイルハイドロキシプロリン、Ｎ−α−リポイルヒスチジン、Ｎ−α−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｎ−α−リポイルペニシラミン、及びＮ−α−リポイルリジンからなる群から選ばれるものである、（I-1-1）記載の制がん剤。
（I-1-3）Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸が、Ｎ−α−リポイル−３−アミノプロピオン酸、Ｎ−α−リポイル−４−アミノ酪酸、Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｎ−α−リポイル−４−トランスアミノメチル−１−シクロヘキサンカルボン酸、Ｎ−α−リポイル−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−α−リポイルスルファニル酸、及びＮ−α−リポイルアントラニル酸からなる群から選ばれるものである、（I-1-1）記載の制がん剤。
【００１６】
（I-2）Ｒ１がＯＨ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-3）Ｒ１がＯ−アルキル基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-4）Ｒ１がＮ−置換アミノ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
【００１７】
（I-5）Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-5-1）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイル−α−アミノ酸、Ｓ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−α−アミノ酸、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイル−ω−アミノ酸、Ｓ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−ω−アミノ酸、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイル特殊アミノ酸、及びＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル特殊アミノ酸からなる群から選ばれるものである、（I-5）記載の制がん剤。
（I-5-2）Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−α−アミノ酸が、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルグリシン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアラニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルスレオニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルセリン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアスパラギン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルグルタミン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルフェニルアラニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルバリン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルメチオニン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルノルロイシン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルシステイン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルハイドロキシプロリン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルヒスチジン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルペニシラミン、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルリジンからなる群から選ばれるものである、（I-5-1）記載の制がん剤。
（I-5-3）Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−ω−アミノ酸、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル特殊アミノ酸が、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−３−アミノプロピオン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−４−アミノ酪酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−４−トランスアミノメチル−１−シクロヘキサンカルボン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−アミノエタンスルホン酸、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルスルファニル酸、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアントラニル酸からなる群から選ばれるものである、（I-5-1）記載の制がん剤。
【００１８】
（I-6）Ｒ１がペプタイド残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である（Ｉ）記載の制がん剤。
（I-6-1）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルジペプタイド、及びＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルジペプタイドからなる群から選ばれるものである、（I-6）記載の制がん剤。
（I-6-2）Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルジペプタイドが、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルアスパラチイルグリシン、及びＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイルスレオニルグリシンからなる群から選ばれるものである、（I-6-1）記載の制がん剤。
【００１９】
（II）次の一般式（２）
【００２０】
【化２】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。）
で表わされる化合物またはその薬理学的に許容される塩と、亜硫酸塩類またはその水和物とを含有することを特徴とする制がん剤。
【００２１】
（II-1）亜硫酸塩類が、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、及びメタ重亜硫酸塩からなる群から選択されるいずれかである、（II）に記載する制がん剤。
（II-1-1）亜硫酸塩類の塩が、亜硫酸、重亜硫酸、及びメタ重亜硫酸からなる群から選択される少なくとも一種の酸のアルカリ金属塩である、（II）に記載する制がん剤。
（II-2）一般式（２）で表わされる化合物が、Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−β−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−γ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−δ−アミノ酸、Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸、及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸からなる群から選ばれるものである、（II）または（II-1）に記載する制がん剤。
（II-2-1）Ｎ−α−リポイル−α−アミノ酸が、Ｎ−α−リポイルグリシン、Ｎ−α−リポイルアラニン、Ｎ−α−リポイルスレオニン、Ｎ−α−リポイルセリン、Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸、Ｎ−α−リポイルグルタミン酸、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン、Ｎ−α−リポイルバリン、Ｎ−α−リポイルメチオニン、Ｎ−α−リポイルノルロイシン、Ｎ−α−リポイルシステイン、Ｎ−α−リポイルハイドロキシプロリン、Ｎ−α−リポイルヒスチジン、Ｎ−α−リポイル−５−ハイドロキシトリプトファン、Ｎ−α−リポイルペニシラミン、及びＮ−α−リポイルリジンからなる群から選ばれるものである、（II-2）記載の制がん剤。
（II-2-2）Ｎ−α−リポイル−ω−アミノ酸及びＮ−α−リポイル特殊アミノ酸が、Ｎ−α−リポイル−３−アミノプロピオン酸、Ｎ−α−リポイル−４−アミノ酪酸、Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸、Ｎ−α−リポイル−４−トランスアミノメチル−１−シクロヘキサンカルボン酸、Ｎ−α−リポイル−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ−α−リポイルスルファニル酸、及びＮ−α−リポイルアントラニル酸からなる群から選ばれるものである、（II-2）記載の制がん剤。
【００２２】
（II-3）一般式（１）で表わされる化合物が、Ｎ−リポイルジペプタイドからなる群から選ばれるものである、（II）または（II-1）記載の制がん剤。
（II-3-1）Ｎ−リポイルジペプタイドが、Ｎ−リポイルアスパラチイルグリシン及びＮ−リポイルスレオニルグリシンからなる群から選ばれるものである、（II-3）記載の制がん剤。
【発明の効果】
【００２３】
本発明が対象とするαリポ酸誘導体（１）およびその薬理学的に許容される塩は、がん細胞の増殖を有意に抑制する作用（制がん作用）を有している。このため、これらの化合物は、かかる作用に基づいてがん治療剤の有効成分として有用であり、制がん治療に優れた治療効果を発揮する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。図中、コントロールはＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウムを配合しない場合の大腸癌細胞の増殖能を示す（以下、同じ）。
【図２】Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）（0.1mM、0.5mM）と亜硫酸ナトリウム（0.1mM、0.5mM）を併用した場合の、大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図３】Ｎ−リポイルフェニルアラニン（製造例４）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図４】Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン（製造例４）（0.1mM、0.5mM）と亜硫酸ナトリウム（0.1mM、0.5mM）を併用した場合の、大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図５】Ｎ−リポイルバリン（製造例５）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図６】Ｎ−α−リポイルバリン（製造例５）（0.1mM、0.5mM）と亜硫酸ナトリウム（0.1mM、0.5mM）を併用した場合の、大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【図７】Ｓ−スルホ−リポ酸ナトリウム（製造例１３）（0.1mM、0.5mM）の大腸癌細胞に対する増殖抑制効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明の制がん剤は、下記一般式（Ｉ）で示されるαリポ酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とするものである。
【００２６】
【化３】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）。
【００２７】
上記式中、Ｒ１で示すＯ−アルキル基としては、炭素数１〜６の直鎖状または分岐状の低級アルキル基を挙げることができる。具体的には、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、２，２−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、２−エチルブチル基などが挙げられる。好ましくはメチル基およびエチル基である。
【００２８】
上記式中、Ｒ１で示すＮ−置換アミノ基としては、第一級アミノ基の１または２の水素原子または第二級アミノ基の１の水素原子が、炭素数１〜５の脂肪族炭化水素基；炭素数１〜５の脂肪族アルコール残基；またはピリジン環、ピリミジン環もしくはインドール環などの窒素原子を含むヘテロ環で置換された基を挙げることができる。なお、ここで脂肪族炭化水素基、脂肪族アルコール残基、及び窒素原子を含むヘテロ環は、それぞれ置換基を有するものであってもよく、かかる置換基としては水酸基；ハロゲン原子（塩素原子、フッ素原子、ヨウ素元素等）；炭素数１〜６のＯ−低級アルキル基；炭素数１〜６のアルキル基；並びに修飾されていてもよいピリジン環、ピリミジン環もしくはインドール環などの窒素原子を含むヘテロ環基等を、特に制限なく挙げることができる。
【００２９】
炭素数１〜５の脂肪族炭化水素基としては、炭素数１〜５の直鎖状または分岐状の低級アルキル基、炭素数２〜５の直鎖状または分岐状の低級アルケニル基、及び炭素数２〜５の直鎖状または分岐状の低級アルキニル基を挙げることができる。好ましくは低級アルキル基である。かかる低級アルキル基としては、前述するように、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基などが挙げられる。好ましくはメチル基およびエチル基である。
【００３０】
また炭素数２〜５の低級アルケニル基としてはビニル基、プロペニル基、ブテニル基およびペンテニル基などを、炭素数２〜５の低級アルキニル基としてはエチニル基、プロピニル基、ブチニル基、ペンチニル基等が挙げられる。
【００３１】
炭素数１〜５の脂肪族アルコール残基としては、具体的にはメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、およびイソブタノール等の低級アルコールが挙げられる。
【００３２】
Ｒ１がＮ−置換アミノ基である本発明のαリポ酸誘導体（１）として、具体的には、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−アミノエタノール（Ｒ１＝−ＮＨ２の１つの水素原子がエタノール残基で置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−イソプロピルアミン（Ｒ＝−ＮＨ２の１つの水素原子がイソプロピル基で置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−２−アミノピリジン（Ｒ＝−ＮＨ２の１つの水素原子が２−ピリジル基で置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）、Ｓ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポイル−５−Ｏ−メチルセロトニン（Ｒ＝５−Ｏ−メチルセロトニンの側鎖のＮＨ２基の水素原子の１つが置換された基、ｎ＝１、Ｒ２及びＲ３のいずれか１方が水素原子で他方がスルホ基であるか、または両方がスルホ基である）などを挙げることができる。
【００３３】
上記式中、Ｒ１で示すアミノ酸残基の「アミノ酸」としては、同一分子内にカルボキシル基とアミノ基を有する、α−アミノ酸；β−アミノ酸、γ−アミノ酸、δ−アミノ酸、及びε−アミノ酸（本明細書では、β−アミノ酸〜ε−アミノ酸を総称して「ω−アミノ酸」という）；アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸、アントラニル酸およびアントラニル酸エチル；及び同一分子内にスルホン酸基とアミノ基を有するアミノエタンスルホン酸（タウリン）やｐ−アミノベンゼンスルホン酸（スルファニル酸）などのアミノ酸（以上のアミノ酸を総称して「特殊アミノ酸」という）を挙げることができる。
【００３４】
α−アミノ酸としては、たとえばグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ノルロイシン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、メチオニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、トリプトファン及びペニシラミンなどが挙げられる。好ましくはグリシン、アラニン、スレオニン、セリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、バリン、メチオニン、システイン、リジン、ヒスチジン、及びペニシラミンである。なお、これらのα−アミノ酸は、置換基として水酸基を有するものであってもよい。水酸基を有するα−アミノ酸としては、制限されないが、例えばハイドロキシプロリンやハイドロキシトリプトファン等を挙げることができる。
【００３５】
β−アミノ酸としてはβ−アラニンが挙げられる。γ−アミノ酸としてはγ−アミノ−ｎ−酪酸（ＧＡＢＡ）やカルニチンが挙げられる。δ−アミノ酸としては５−アミノレブリン酸や５−アミノ吉草酸が、ε−アミノ酸としては６−アミノヘキサン酸が挙げられる（前述するように、これらのアミノ酸を総称して「ω−アミノ酸」という）。
【００３６】
これらのアミノ酸のうち、好ましくはメチオニン、ヒスチジン、リジン、フェニルアラニン、バリン等のα−アミノ酸；γ−アミノ−ｎ−酪酸や６−アミノヘキサン酸等のω−アミノ酸；及びアントラニル酸やアミノエタンスルホン酸等の特殊アミノ酸であり、より好ましくはフェニルアラニン、バリン、アミノエタンスルホン酸である。
【００３７】
上記式中、Ｒ１で示すペプタイド残基の「ペプタイド」としては、好ましくは同種または異種の２個のアミノ酸（前記と同義）が、互いに一方のカルボキシル基と他方のアミノ酸のアミノ基とが酸アミド結合したジペプチドを挙げることができる。かかるジペプチドとして、具体的にはアスパラチイルグリシンやスレオニイルグリシンなどを挙げることができる。
【００３８】
本発明のαリポ酸誘導体（１）の薬理学的に許容される塩としては、ナトリウム塩やカリウム塩などのアルカリ金属塩、およびカルシウム塩やマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩を挙げることができる。なお、これら以外の塩であっても薬理学的に許容できる塩であればいずれのものであっても本発明の目的のため適宜に用いることができる。また、本発明が対象とするαリポ酸誘導体（１）には、その水和物も含まれる。
【００３９】
本発明の制がん剤の有効成分として使用するαリポ酸誘導体（１）のうち、ｎが０であり、隣接する硫黄原子が互いに結合して環を形成してなるαルポ酸誘導体（１）は、制限されないが、例えば、Ｒ１がアミノ酸残基である化合物（1a）は下記に説明する混合酸無水物法（MA法）により、αリポ酸を原料として合成することができる。
【００４０】
【化４】
（式中、Ｒ１ａは、アミノ酸残基を意味する。）
【００４１】
具体的にはαリポ酸を有機溶媒（たとえばクロロホルム、テトラヒドロフラン、アセトニトリルなど）に溶かし、これに３級アミン（トリエチルアミン、トリブチルアミンやＮ−メチルモルホリン（NMM）など）の存在下−15℃〜−5℃でハロゲン化炭酸エステル（クロル炭酸エチル、クロル炭酸ブチルなど）、イソブチルオキシカルボニルクロリド、塩化ジエチルアセチルまたは塩化トリメチルアセチルなどの混合酸無水物化試薬を反応させてαリポ酸の混合酸無水物とする。反応時間は1〜2分から数10分程度である。さらにアミノ酸を塩基（水酸化ナトリウム、水酸化カリウムやトリエチルアミン、トリブチルアミンなどの３級アミン）存在下でアルコール、水またはそれらの混液などの溶媒に溶かしたものを加えて反応させた後、適当な溶媒、たとえば水またはアルコールから再結晶させると、所望のαリポイルアミノ酸（1a）を得ることができる。
【００４２】
また本発明の制がん剤の有効成分として使用するαリポ酸誘導体（１）のうち、ｎが１であり、Ｒ２及びＲ３が、同一または異なって水素原子またはスルホ基である化合物（1c）及び（1d）は、制限されないが、下記に説明する方法により、αリポ酸を原料として合成することができる。
【００４３】
【化５】
（式中、Ｒ２及びＲ3は前記と同義である。Ｒ１ｂは、前記のうち、ＯＨ基以外の基を意味する。）
【００４４】
具体的には、本発明が対象とするαリポ酸誘導体（1c）及び（1d）は、αリポ酸、またはこれを所望によりアルキルエステル、アミノ酸もしくはペプタイド（上記式中、「Ｒ１ｂ−ＯＨ」として示す）と反応させ、上記式（1b）で示すαリポ酸誘導体としたものに、亜硫酸塩類を付加させて製造することが出来る。
【００４５】
ここで亜硫酸塩類としては、亜硫酸ナトリウムや亜硫酸カリウムなどの亜硫酸のアルカリ金属塩等の亜硫酸塩；亜硫酸水素ナトリウムや亜硫酸水素カリウムなどの亜硫酸水素化物のアルカリ金属塩等の重亜硫酸塩；およびメタ重亜硫酸塩を挙げることができる。好ましくは亜硫酸ナトリウムや亜硫酸カリウムなどの亜硫酸塩である。
【００４６】
αリポ酸をアルキルエステルまたはアミド体とする反応は、混合酸無水物法（ＭＡ法）により実施することが出来る。すなわち、αリポ酸を有機溶媒（例えば、クロロホルム、ＴＨＦ，アセトニトリルなど）に溶かし、これに３級アミン（トリエチルアミン、トチブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンなど）の存在下、−15〜−5℃で、ハロゲン化炭酸エステル（例えば、クロル炭酸エチル、クロル炭酸ブチルなど）を加えて５〜10分後に、さらに、所望のアルコール、アミン、アミノ酸、ペプタイドを必要に応じた塩基（水酸化ナトリウム、トリエチルアミンやトリブチルアミンなどの３級アミンなど）の存在下、水またはアルコールまたはそれらの混液などの溶媒に溶かしたものを一挙に加えて反応させる。次に反応温度を徐々に室温に戻して反応を終結させ、反応液を処理して粗結晶を得た後、適当な溶媒、例えば、水またはアルコールから再結晶させて、αリポ酸のアルキルエステル、または対応したアミド体を得ることが出来る。
【００４７】
本発明が対象とするαリポ酸誘導体（1c）及び（1d）は、αリポ酸または上記方法で調製されるαリポ酸誘導体（1b）を水に溶かすか、またはサスペンドしておき、これに亜硫酸塩類を徐々に加えて攪拌することによって調製することができる。亜硫酸塩類の配合割合は、特に制限されないが、Ｓ−スルホ体を調製する場合は、αリポ酸またはαリポ酸誘導体１モルに対して亜硫酸塩類が等モル量になるように、Ｓ−ジスルホ体を調製する場合は、αリポ酸またはαリポ酸誘導体１モルに対して亜硫酸塩類が２倍モル量になるように調整することが好ましい。
【００４８】
斯くして得られる反応物（反応液）はこのまま本発明の制がん剤の有効成分として使用することも出来るが、通常はこの水溶液を減圧下、４０℃以下で濃縮した後、エタノールを加えて、上記式（1d）で示すＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポ酸またはその塩、または上記式（1c）で示すＳ−スルホまたはＳ−ジスルホ−Ｎ−リポ酸誘導体にそれぞれ対応した固形物を得ることが出来る。
【００４９】
本発明のαリポ誘導体（１）は構造上、ジヒドロリポ酸誘導体でその薬理学的に許容できる塩は、還元作用並びにラジカル抑制作用も強く、安定性もよく、組成からしても安全性の高い化合物で問題ない優れた化合物である。
【００５０】
上記αリポ酸誘導体（１）またはその薬理学上許容される塩は、制がん剤、並びにがん転移抑制剤の有効成分として有効である。
【００５１】
従って、上記αリポ酸誘導体（１）またはその薬理学上許容される塩を有効成分とする医薬品は、制がん剤（がん転移抑制剤を包含する）として、がん細胞の増殖を抑制し、がんの治療、及びがんの進展やがんの転移を抑制するために有効に使用することができる。なお、αリポ酸誘導体（１）またはその薬理学上許容される塩は、１種単独で使用してもよいが、目的と必要に応じて、２種以上を適宜組み合わせて用いることもできる。
【００５２】
本発明の制がん剤は、経口的にあるいは非経口的に用いることができ、投与形態に応じた製剤形態に調製することができる。製剤の形態としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固形製剤、または注射剤等の液剤などいずれの形にも公知の方法により調製することができる。これらの製剤には通常用いられる賦形剤、結合剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、緩衝材、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調整化剤等の各種添加剤を適宜使用しても良い。
【００５３】
本発明の制がん剤の投与量は、使用する本化合物の種類、患者の体重や年齢、対象とする疾患の種類やその状態および投与方法などによっても異なるが、例えば注射剤の場合、成人1日１回、約10ｍｇ〜100ｍｇ、内服剤の場合は、成人１日数回、10ｍｇ〜1000ｍｇ程度投与するのがよい。
【実施例】
【００５４】
次に製造例、実験例および実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
【００５５】
製造例１ Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（Ｎ−α−リポイルタウリンナトリウム）
αリポ酸6.2gをクロロホルム60mlに溶かし、トリエチルアミン3.2gを加えて−5℃に冷却した。これにクロル炭酸エチル3.3gを徐々に滴下し、滴下終了15分後に、これにアミノエタンスルホン酸4.5gおよび水酸化ナトリウム1.5gをメタノール60mlに溶かしたものを一挙に加えて、その温度（−5℃）で15分間、さらに室温に戻して1時間攪拌した。次に、これに水酸化ナトリウム1.5gをメタノール50mlに溶かした溶液を加えて、減圧下で溶媒を1/3程度になるまで濃縮した。次いで、これにエタノール60mlを加えて析出した結晶を濾取した。これを水−メタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶5.8gを得た。融点235〜237℃。
元素分析： C10H17NO4S3Na・H2Oとして理論値 C：34.08、 H：5.43、N：3.97、実測値 C：34.23、H：5.54、N：3.80。
【００５６】
製造例２ Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸カリウム（Ｎ−α−リポイルタウリンカリウム）
製造例１のＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウムの製造方法において、アミノエタンスルホン酸4.5gと混合する水酸化ナトリウム1.5gに代えて水酸化カリウム4.0gを用いる以外は、製造例１と同じ方法を実施して結晶を濾取した。これを水−メタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶6.5gを得た。融点240〜242℃。
【００５７】
製造例３ Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸のカルシウムまたはマグネシウム塩
製造例１で得られたＮ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウムを水に溶かし、スルホン酸樹脂で脱塩して遊離酸とした。これを炭酸カルシウムまたは塩基性炭酸マグネシウムで、それぞれ中和させて、Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸の水溶性のカルシウム塩またはマグネシウム塩を得た。それぞれ融点300℃以上。
【００５８】
製造例４ Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5gに代えてL−フェニルアラニン3.5gを用いる以外は、製造例１と同様に反応させた。得られた反応液を減圧下で40℃以下で溶媒を留去濃縮した後、塩酸で酸性として酢酸エチルで抽出し、水洗した後、酢酸エチルを留去した。残渣結晶をエタノール−水を用いて再結晶させて、掲題化合物の淡黄色結晶4.6gを得た。融点154℃〜156℃。
【００５９】
製造例５ Ｎ−α−リポイルバリン
原料としてαリポ酸4.2g、およびL−フェニルアラニン3.5g に代えてL−バリン2.4gを用いる以外は、製造例４と同様に反応処理して、掲題化合物の淡黄色板状4.1gを得た。
【００６０】
製造例６ Ｎ−α−リポイルグリシンナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5gに代えてグリシン1.9gを用いる以外は、製造例１と同様に反応処理して、掲題化合物4.5gを得た。融点218℃〜220℃。
【００６１】
製造例７ Ｎ−α−リポイルアスパラギン酸ナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5gに代えてＬ−アスパラギン酸2.9gを用いる以外は、製造例１と同様に反応処理して、掲題化合物5.1gを得た。融点300℃以上。
【００６２】
製造例８ Ｎ−α−リポイルメチオニン
原料としてαリポ酸4.2g、およびL−フェニルアラニン3.5g に代えてL−メチオニン3.5gを用いる以外は、製造例４と同様に処理して、掲題化合物の淡黄色結晶4.0gを得た。融点108℃〜109℃。
【００６３】
製造例９ Ｎ−α−リポイルシステインナトリウム
原料としてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5g に代えてL−システイン2.6gを用いる以外は、製造例１と同様に処理して、掲題化合物の白色結晶4.5gを得た。融点150℃付近から徐々に分解。
【００６４】
製造例１０ Ｎ−α−リポイル−６−アミノヘキサン酸ナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5g に代えて６−アミノヘキサン酸3.0gを用いる以外は、製造例１と同様の方法で反応させて結晶を濾取した。これをエタノールを用いて再結晶させて、標題化合物の黄色がかった白色結晶5.5gを得た。融点200〜202℃（分解）。
【００６５】
製造例１１ Ｎ−α−リポイルアントラニル酸ナトリウム
原料としてαリポ酸6.2gに代えてαリポ酸4.2g、およびアミノエタンスルホン酸4.5g に代えてアントラニル酸2.9gを用いる以外は、製造例１と同様に処理して、掲題化合物の白色結晶3.5gを得た。融点300℃以上。
【００６６】
製造例１２ Ｎ−α−リポイル−４−アミノ酪酸
原料としてαリポ酸4.2g、およびL−フェニルアラニン3.5g に代えて４−アミノ酪酸2.3gを用いる以外は、製造例４と同様に処理して、掲題化合物の淡黄色結晶4.3gを得た。融点235℃付近から分解。
【００６７】
製造例１３ Ｓ−スルホ−リポ酸ナトリウム
αリポ酸2.1ｇ（0.01 モル）を水50ｍｌに懸濁したものに、亜硫酸ナトリウム1.3ｇ（0.01モル）を加えて撹拌しながら溶解した。これを減圧下、40℃以下で濃縮した後、エタノールを加え、白色固形物2.3ｇを濾取した。これを水−エタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶を得た。
【００６８】
製造例１４ Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルフェニルアラニンナトリウム
製造例１３において、αリポ酸2.1gの代わりに製造例４で調製したＮ−リポイルフェニルアラニン3.5ｇを用いて、同様に反応処理した。具体的には、Ｎ−リポイルフェニルアラニン3.5ｇ（0.01 モル）を水50ｍｌに懸濁したものに、亜硫酸ナトリウム1.3ｇ（0.01モル）を加えて撹拌しながら溶解した。これを減圧下、40℃以下で濃縮した後、エタノールを加え、白色固形物2.3ｇを濾取した。これを水−エタノールを用いて再結晶させて、掲題化合物の白色結晶を得た。
【００６９】
製造例１５ Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルバリンナトリウム溶液
製造例５で調製したＮ−リポイルバリン305ｍｇを水100ｍｌに懸濁しておき、これに無水亜硫酸ナトリウム150ｍｇを加えて溶解して濾過し、掲題化合物の水溶液を調製した。
【００７０】
製造例１６ Ｓ−スルホ−Ｎ−リポイルタウリンナトリウム溶液
製造例１で調製したＮ−リポイルタウリンナトリウム335ｍｇを、水100ｍｌに溶解し、これに無水亜硫酸ナトリウム150ｍｇを加えて溶解して濾過して、掲題化合物の水溶液を取得した。
【００７１】
実験例１ 癌細胞増殖能に対する抑制効果
上記で製造したリポ酸誘導体のうち、Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン（製造例４）、Ｎ−α−リポイルバリン（製造例５）、及びＳ−スルホ−リポ酸ナトリウム（製造例１３）を被験化合物とし、これらの化合物の癌細胞増殖能に対する抑制効果を評価した。なお、Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）、Ｎ−α−リポイルフェニルアラニン（製造例４）、及びＮ−α−リポイルバリン（製造例５）については、それぞれ各化合物を単独で使用した場合と、亜硫酸ナトリウムを併用した場合との両方で実験を行った。
【００７２】
（１）被験化合物
１．Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム（製造例１）
２．Ｎ−α−リポイルアミノエタンスルホン酸ナトリウム＋亜硫酸ナトリウム
３．Ｎ−リポイルフェニルアラニン（製造例４）
４．Ｎ−リポイルフェニルアラニン＋亜硫酸ナトリウム
５．Ｎ−リポイルバリン（製造例５）
６．Ｎ−リポイルバリン＋亜硫酸ナトリウム
７．Ｓ−スルホ−リポ酸ナトリウム（製造例１３）。
【００７３】
（２）試験方法
コントロール培地として、RPMI 1640に10％ウシ胎児血清と抗菌剤（100 IU/ml penicillin，0.1mg/ml streptomycin，2.5×10-4mg/ml amphotericin B) を加え調製したものを使用した。また試験培地として、上記コントロール培地に、上記各被験化合物をαリポ酸誘導体の最終濃度が0.1 mMまたは0.5mMに、被験化合物２、４及び６については、培地中の亜硫酸ナトリウムの最終濃度が0.1 mMまたは0.5mMになるように調整した。
【００７４】
かかる培地を用いて、大腸癌細胞（HT29）（5.0×105/wellまたは1.0×106well）を5％ CO2，37℃のもとで培養した。培養開始後24時間ごとに0.25％トリプシンを用いて細胞を剥離し,トリパンブルー排除法にて，Haemocytometerで生細胞数を測定した。
【００７５】
（３）試験結果
大腸癌細胞増殖能に対する被験化合物１〜７の効果（癌細胞増殖抑制効果）を図１〜７にそれぞれ示す。またその総合評価を表１に示す。
【００７６】
【表１】
【００７７】
図１〜７及び表１の結果から、Ｎ-α-リポイルフェニルアラニン、Ｎ-α-リポイルバリン、及びＮ-α-リポイルアミノエタンスルホン酸等のαリポイルアミノ酸、並びにＳ−スルホ−リポ酸ナトリウムは0.1mM以上の濃度、特に0.5mM以上の濃度で、大腸癌細胞HT29の増殖を顕著に抑制することが確認された。またαリポニルアミノ酸は、亜硫酸塩と併用することで、がん細胞発育の抑制効果が増強される傾向にあることが確認された。
【００７８】
これらの実験結果から、本願発明が対象とするαリポ酸誘導体は大腸がんなどのがん細胞の増殖を抑制する作用があり、かかる作用に基づいて制がん剤（抗がん剤）としての治療効果があると考えられる。
【００７９】
〔製剤実施例１〕 内服錠
製造例１〜１４のいずれかの化合物 ３０ｍｇ
乳糖 ８０ｍｇ
馬鈴薯澱粉 １７ｍｇ
ポリエチレングリコール6000 ３ｍｇ
以上の成分を1錠分の材料として常法により成型する。
【００８０】
〔製剤実施例２〕 注射剤
製造例１〜１４のいずれかの化合物 １．０ｇ
マニトール ４．０ｇ
注射用蒸留水 全量 １００ｍＬ
以上を常法により混合溶解させ注射剤とする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）
で表わされる化合物、またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする制がん剤。
【請求項２】
Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが０で隣接するＳ原子が互いに結合して環を形成してなるものである請求項１記載の制がん剤。
【請求項３】
Ｒ１がＯＨ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項４】
Ｒ１がＯ−アルキル基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項５】
Ｒ１がＮ−置換アミノ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項６】
Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項７】
Ｒ１がペプタイド残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項８】
次の一般式（１）
【化２】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。）
で表わされる化合物またはその薬理学的に許容される塩と、亜硫酸塩類またはその水和物とを含有することを特徴とする制がん剤。
【請求項９】
亜硫酸塩類が、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、及びメタ重亜硫酸塩からなる群から選択されるいずれかである、請求項８に記載する制がん剤。
【請求項１】
次の一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。ｎは０または１の整数であり、ｎが０のとき隣接するＳ原子は互いに結合して環を形成し、ｎが１のときＲ２及びＲ３は、同一または異なって、水素原子またはスルホ基を示す。但し、Ｒ１はＯＨ基であるとき、ｎは０ではない。）
で表わされる化合物、またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする制がん剤。
【請求項２】
Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが０で隣接するＳ原子が互いに結合して環を形成してなるものである請求項１記載の制がん剤。
【請求項３】
Ｒ１がＯＨ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項４】
Ｒ１がＯ−アルキル基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項５】
Ｒ１がＮ−置換アミノ基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項６】
Ｒ１がアミノ酸残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項７】
Ｒ１がペプタイド残基であり、ｎが１で、Ｒ２及びＲ３のいずれか一方が水素原子で他方がスルホ基であるか、またはＲ２及びＲ３の両方がスルホ基である請求項１記載の制がん剤。
【請求項８】
次の一般式（１）
【化２】
（式中、Ｒ１はＯＨ基、Ｏ−アルキル基、Ｎ−置換アミノ基、アミノ酸残基またはペプタイド残基を示す。）
で表わされる化合物またはその薬理学的に許容される塩と、亜硫酸塩類またはその水和物とを含有することを特徴とする制がん剤。
【請求項９】
亜硫酸塩類が、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、及びメタ重亜硫酸塩からなる群から選択されるいずれかである、請求項８に記載する制がん剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２０１１−１９５５１６（Ｐ２０１１−１９５５１６Ａ）
【公開日】平成２３年１０月６日（２０１１．１０．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−６４８５０（Ｐ２０１０−６４８５０）
【出願日】平成２２年３月１９日（２０１０．３．１９）
【出願人】（３０４０２８７２６）国立大学法人 大分大学 (181)
【出願人】（５０２３８４０６０）有限会社オガ リサーチ (14)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１０月６日（２０１１．１０．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年３月１９日（２０１０．３．１９）
【出願人】（３０４０２８７２６）国立大学法人 大分大学 (181)
【出願人】（５０２３８４０６０）有限会社オガ リサーチ (14)
【Ｆターム（参考）】
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