化粧料
【課題】美白作用と皮膚老化防止作用とを併せ持ち、それら両作用の複合に基づく相乗的効果により、シワやタルミ或いはシミ、ソバカスなど内的及び外的要因に基づく皮膚の老化或いは不健全化の症状に対して、多面的かつすぐれた予防或いは改善効果を発揮し、皮膚に総合的な美肌化効果を与えると共に、皮膚刺激性等が殆ど全くなく生体安全性にもすぐれた成分を配合してなる化粧料を提供すること。
【解決手段】スイレン科ハス属の植物を乳酸菌等の微生物で発酵して得られる発酵物を化粧料中に配合する。
【解決手段】スイレン科ハス属の植物を乳酸菌等の微生物で発酵して得られる発酵物を化粧料中に配合する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、すぐれた美白作用と皮膚老化防止作用とを併せ持ち、皮膚に対して総合的、多面的な美肌化効果を付与すると共に、生体安全性にもすぐれた化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
シワやたるみ或いはシミ、ソバカスの発生など皮膚の老化や不健全化の症状は、加齢に伴う細胞増殖・分化の不活性化、ホルモン分泌の低下などの内的要因と、日光（紫外線）暴露によって誘発される活性酸素に基づく細胞・組織の損傷、色素沈着の増加、さらには炎症発症などの外的要因が複雑に絡み合って生ずる現象である。
この皮膚の老化や不健全化を防止し或いは改善して、皮膚を健全かつ若々しい状態に保持するため、従来より種々の活性成分の使用が提案され、それら成分を配合した化粧料が上市されている。例えば、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン誘導体、コウジ酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体などの美白剤、α−ヒドロキシカルボン酸類、胎盤抽出物、ホルモン類などの細胞賦活成分、コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸などの真皮マトリックス成分、ビタミンＥ類などの抗酸化剤、グリチルレチン酸などの抗炎症剤、各種紫外線防御剤等がそれである。
しかしながら、それら従来の成分は一般に、上述した皮膚の老化乃至不健全化要因の一つを予防し或いは改善し得るに過ぎないため、それら成分を配合した化粧料によっては、真に満足し得る老化防止効果、美肌化効果を得ることは困難である。また、成分によっては、有効性を高めるため配合量を増すと皮膚刺激の問題を生ずるなど安全性の面に於いても改善を要するものがある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明者等は、上記の如き従来技術の問題点に鑑み、皮膚の老化や不健全化の諸要因に対して複合的に作用することにより、皮膚を真に健全で若々しい状態に保持し、改善し得る新たな活性成分を、しかも生体安全性の観点から天然物中に求めるべく鋭意研究・検討を重ねた結果、スイレン科ハス属の植物を乳酸菌などの微生物で発酵させて得られる発酵物が、メラニン生成抑制作用に基づく美白効果と線維芽細胞賦活作用に基づく皮膚老化防止効果とを併せ持っており、かかる成分を配合してなる化粧料は、皮膚に総合的、多面的な美肌化、健全化効果を付与し得ると共に、該成分が天然物由来であるが故に生体安全性にもすぐれたものとなることを見出し本発明を完成するに至った。
【０００４】
ハス属の植物、例えばハス（Nelumbo nucifera Gaertner）を化粧料配合原料として利用することについては、従来より種々の提案がなされている。
例えば、特開平３−１９０８０９号公報にはハスの抽出物を有効成分とする肌荒れ防止改善剤が、特開平４−２４７０１２号公報にはハスの葉の抽出物を配合した美白化粧料が、又特開平１１−２７９０６９号、特開２０００−２４７８２９号、特開２００１−１２２７５７号、特開２００１−１２２７５７号、特開２００２−２９９８０号、特開２００２−６８９９３号及び特開２００３−４８８４６号の各公報には、ハスの全草もしくは特定部位から抽出される成分が皮膚の老化防止に有効であることがそれぞれ開示されている。
さらに、特開平８−２０５２６号公報には、ハスを蒸煮した後酵素分解して得られるエキスからなる入浴剤が、肌荒れの改善効果やメラニン生成抑制作用に基づく美白効果を有することが示されている。
【０００５】
【特許文献１】特開平３−１９０８０９号
【特許文献２】特開平４−２４７０１２号
【特許文献３】特開平１１−２７９０６９号
【特許文献４】特開２０００−２４７８２９号
【特許文献５】特開２００１−１２２７５７号
【特許文献６】特開２００１−１２２７５７号
【特許文献７】特開２００２−２９９８０号
【特許文献８】特開２００２−６８９９３号
【特許文献９】特開２００３−４８８４６号
【特許文献１０】特開平８−２０５２６号
【０００６】
しかしながら、それら従来の技術の場合は、ハス属の植物に含まれる成分をそのままか、もしくはこれを単に加水分解して化粧料配合原料として利用するというに過ぎず、ハス属の植物を乳酸菌発酵の資化源として用い、ここに得られる発酵産生物を化粧料配合原料として利用する本発明とは明らかに技術思想を異にしており、従って当然ながら、それら従来技術中には、本発明の発酵物がB16メラノーマ細胞内のチロシナーゼ活性抑制に基づく美白効果と、ヒト皮膚線維芽細胞の増殖促進による皮膚老化防止効果の両効果を併せ持ち、皮膚に総合的、多面的な美肌化、健全化効果を付与し得ることについては、その事実の開示はもとよりこれを示唆するものすら見当たらない。
加えて、ハス属植物含有成分をそのままもしくは加水分解して利用する従来技術の場合にあっては、未だ十分満足し得る有効性が得られているとは言い難い面があり、皮膚に対する改善効果の点でも本発明には及ばないものである（後述の試験例参照）。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
即ち本発明は、スイレン科（Nympaeaceae)ハス属(Nelumbo)の植物を微生物で発酵させて得られる発酵物を配合したことを特徴とする化粧料である。
ここで、化粧料なる文言は、所謂化粧料のほかに医薬部外品までも含む広義で用いる。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の化粧料に於いて活性成分として用いるハス属植物の発酵物は、チロシナーゼ活性の抑制に基づくメラニン生成抑制作用とさらに真皮線維芽細胞に対する顕著な賦活作用とを併せ持っており、それら両作用の複合に基づく相乗的効果により、本発明の化粧料は、シワやタルミ或いはシミ、ソバカスなどの皮膚の老化や不健全化の症状の予防或いは改善に多面的かつすぐれた効果を発揮して、皮膚を真に健全で若々しい状態に維持し、改善する。
又、本発明化粧料の活性成分は、皮膚に対する刺激性が殆ど全くなく、このため本発明の化粧料は生体安全性にも大変すぐれている。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明で用いるスイレン科ハス属の植物としては、例えばハス（Nelumbo nucifera Gaertner)或いはアメリカキバス（Nelumbo Lutea Pers.)などが挙げられるが、それらのうちでも、発酵物のチロシナーゼ活性抑制作用及び線維芽細胞増殖促進作用の観点からハス（Nelumbo nucifera Gaertner）の使用が最も好ましい。
【００１０】
それらスイレン科ハス属植物を発酵させるに当って、該植物の発酵部位には特に限定はなく、全草、葉、花、雄しべ、雌しべ、茎、根茎、種子（子実）など適宜の部分を用いることができるが、得られる発酵物の有効性の点から種子の使用が好ましく、なかでもハス（Nelumbo nucifera Gaertner）の種子（子実）の使用が最も好ましい。
【００１１】
ハス属植物の発酵に用いる微生物としては、乳酸菌、麹菌、納豆菌、テンペ菌、酵母等が挙げられ、一般にはそれら各菌種のいずれかから選ばれた一種又は二種以上を用いるが、場合によっては、又相互に発酵の妨げとならない限り、別の菌種に属するもの同士を組み合せ用いるようにしてもよい。
上記の各菌種のうちでも、特に乳酸菌又は麹菌を用いた場合、得られる発酵物はとりわけ強いチロシナーゼ活性抑制作用と線維芽細胞賦活作用を示し、それら両作用の相乗的・複合的な働きによってすぐれた美肌化効果、皮膚健全化効果が奏し得られることから、本発明に於いては、乳酸菌及び／又は麹菌から選ばれる一種又は二種以上の菌を用いることが特に好ましい。
【００１２】
ここで乳酸菌としては、例えばラクトバシルス プランタラム（Lactobacillus plantarum)、ラクトバシルス ブレビス（L. brevis)、ラクトバシルス カゼイ（L. casei)等のラクトバシルス（Lactobacillus）属の乳酸菌；カルノバクテリウム ディバージェンス（Carnobacterium divergens)、カルノバクテリウム ピシコーラ(Carnobacterium piscicola)等のカルノバクテリウム（Carnobacterium）属の乳酸菌；ロイコノストック メセンテロイズ（Leuconostoc mesenteroides)、ロイコノストック シトレウム（Leuconostoc citreum)等のロイコノストック（Leuconostoc）属の乳酸菌； ストレプトコッカス フェーカリス（Streptococcus faecalis)、ストレプトコッカス ピオジェネス（Streptococcus pyogenes)等のストレプトコッカス属の乳酸菌；エンテロコッカス カゼリフラバス（Enterococcus caseliflavus)、エンテロコッカス サルフレウス（Enterococcus sulfreus)等のエンテロコッカス（ Enterococcus）属の乳酸菌；ラクトコッカス プランタラム（Lactococcus plantarum) ラクトコッカス ラフィノラクティス（Lactococcus rafinolactis)等のラクトコッカス属の乳酸菌；ヴェイセラ コンフューザ（Weissella confusa)、ヴェイセラ カンドウレリ（Weissella kandleri)等のヴェイセラ属の乳酸菌；アトポビウム ミニュタム（Atopobium minutum)、アトポビウム パービュラス（Atopobiumparvulus)等のアトポビウム（Atopobium）属の乳酸菌；バゴコッカス フルビアリス（Vagococcus fluvialis）、バゴコッカス サーモニナラム（Vagococcus salmoninarum)等のバゴコッカス（Vagococcus）属の乳酸菌；ペディオコッカス ダムノサス（Pediococcus damnosus)、ペディオコッカス ペントサセウス（Pediococcus pentosaceus)等のペディオコッカス（Pediococcus）属の乳酸菌等が挙げられる。それら乳酸菌のうちでも、得られる発酵物の皮膚生理活性の観点とさらに極端な嫌気性でなく取り扱い易いという点から、ラクトバシルス プランタラム（Lactobacillus plantarum)の使用が最も好ましい。
【００１３】
麹菌としては、例えばアスペルギルス オリゼー（Aspergillus oryzae）、アスペルギルス フラバス（Aspergillus flavus）、アスペルギルス ポリオキソジェネス（Aspergillus polyoxogenes）、アスペルギルス ソーヤ（Aspergillus sojae）等の黄麹菌、アスペルギルス アワモリ（Aspergillus awamori）、アスペルギルス カワウチ（Aspergillus kawauchii）、アスペルギルス ウサミ（Aspergillus usami）、
アスペルギルス ニガー（Aspergillus niger）等の黒麹菌、モナスカス アンカ（Monascus anka）、モナスカス ピロサス（Monascus pilosus）等の紅麹菌などが挙げられる。それらのうちでも、得られる発酵物の皮膚生理活性の観点とさらに発酵液の着色や発酵臭が比較的少ないことから、アスペルギルス オリゼー（Aspergillus oryzae）が最も好ましい。
【００１４】
納豆菌としては、例えばバシルス ナットー(Bacillus natto)、バシルス サブチルス(Bacillus subtilis)、バシルス サーキュランス(Bacillus circulans)等のバシルス属の細菌などが挙げられる。なかでも、食品に広く使用されており、安全性が高い点でバシルス ナットー(Bacillus natto)が最も好ましい。
【００１５】
テンペ菌としては、リゾプス アジゴスポラス(Rhizopus azygosporus)、リゾプス ミクロスポラス チネンシス(Rhizopus microsporus chinensis)、リゾプス ミクロスポラス オリゴスポラス(Rhizopus microsporus oligosporus)、リゾプス ニベウス(Rhizopus niveus)、リゾプス オリゼー(Rhizopus oryzae)等のリゾプス菌の真菌（カビ）が挙げられる。なかでも、インドネシアをはじめ東南アジア地域で発酵食品に広く使用されており、安全性が高い点で、リゾプス ミクロスポラス オリゴスポラス(Rhizopus microsporus oligosporus)やリゾプス オリゼー(Rhizopus oryzae)が最も好ましい。
【００１６】
酵母としては、例えばサッカロミセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)、サッカロミセス アワモリ(Saccharomyces awamori)、サッカロミセス チェバリエリ(Saccharomyces chevalieri)、サッカロミセス カールスバージェンシス(Saccharomyces carlsbergensis)、サッカロミセス バヨナス（Saccharomyces bayon us)等のサッカロミセス属の酵母、トルラスポラ デルブルエキ(Torulaspora delbruekii)、トルラスポラ ファーメンタチ(Torulaspora fermentati)、トルラスポラ ロゼイ(Torulaspora rosei)等のトルラスポラ属の酵母、ジゴサッカロミセス ローキシ(Zygosaccharomyces rouxii)、ジゴサッカロミセス ソーヤ(Zygosacchar
omyces soya)、ジゴサッカロミセス サケ(Zygosaccharomyces sake)、ジゴサッカロミセス ミソ(Zygosaccharomyces miso)、ジゴサッカロミセス ラクティス(Zygosaccharomyces lactis)等のジゴサッカロミセス属の酵母、カンディダ ベルサチリス(Candida versatilis)、カンディダ エチェリシイ(Candida etchellsii)、カンディダ ケフィール（Candida kefyr）、カンディダ サケ（Candida sake）、カンディダ スコッティ（Candida scottii）等のカンディダ属の酵母、オーレオバシディウム プルランス（Aureobasidium Pullulans）、オーレオバシディウム マンソニー（Aureobasidium mansonii）、オーレオバシディウム マイクロスティクタム（Aureobasideium microstictum）等のオーレオバシディウム属の酵母などが挙げられる。
それらのうちでも、食品に最も広く利用され、発酵力が強いという点からサッカロミセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)が最も好ましい。
【００１７】
上記の微生物を用いてハス属植物を発酵させる方法の好ましい具体例を挙げれば以下の通りである。
まず、発酵しようとするハス属植物（以下、発酵素材ということがある）を溶媒に浸漬乃至懸濁させて、発酵のための懸濁液を調製する。この場合、ハス属植物は生のまま用いても、又予め乾燥もしくは半乾燥した上用いてもよい。又、形状としては、採取したものをそのまま用いることもできるが、細断或いは粉砕して微細化すれば発酵効率を上げることができる。
発酵素材として例えばハスの種子（子実）を用いる場合について言えば、子実の最外層の渋皮は、発酵効率及び得られる発酵物の色相の点から、これを予め除去することが好ましく、又子実はそのまま用いるよりも、粉砕して粉末状として用いた方が、乳酸菌による栄養成分の利用がより行われ易くなって好ましい。
【００１８】
発酵素材を懸濁させるための溶媒としては、水或いは水と低級アルコール類（、メタノール、エタノール、プロパノールなど）もしくはグリコール類（エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリンなど）との混液等が用いられ、又それら溶媒中にはグルコース、フルクトース、シュークロースなどの糖類を添加してもよいが、微生物が最もその作用を発揮しやすい点とハス属植物の成分以外の資化成分の存在に基づく発酵副産物の生成を避けるという点から、水を単独で用いるのが最も好ましい。
発酵素材と溶媒との混合比は、発酵素材の乾燥重量換算で一般に１：１〜１：１０００、好ましくは１：５〜１：１００、より好ましくは１：１０〜１：５０の範囲である。
【００１９】
この発酵素材／溶媒懸濁液は、これを発酵工程に供する前に、殺菌を行って発酵の障害となる雑菌を除去することが必要であるが、この雑菌の殺菌除去方法としては、発酵素材を予め殺菌用エタノール等で洗浄した後無菌水等の無菌溶媒に懸濁する方法を用いてもよく、又発酵素材を溶媒に懸濁した後、懸濁液を加熱殺菌等により殺菌するようにしてもよい。
加熱殺菌処理としては、懸濁液を１２０〜１３０℃で１０〜２０分間加熱するオートクレーブ殺菌法や、８０〜９０℃に６０〜１２０分間保持することを１日１回２〜３日間繰り返す間断殺菌法といった加熱殺菌法が一般に用いられる。
【００２０】
次に、この無菌化した懸濁液を発酵タンクに入れ、これに微生物を植菌して発酵を行わしめる。
微生物の接種量は１０７〜１０８個／ｍＬが適量である。接種量が上記の範囲より多くなっても発酵の進行時間は殆ど変わらず、一方上記の範囲より少なくなると発酵完了までに長時間を要することとなって好ましくない。
【００２１】
発酵温度は一般に５〜５０℃の範囲、好ましくは各微生物の生育至適温度である３０〜４０℃（例えば、乳酸菌であれば３５℃〜４０℃）の範囲である。発酵日数は、至適温度に於いて一般に１〜１０日、好ましくは２〜５日の範囲である。発酵日数が上記の一般的範囲より短くなると発酵が十分に行われず発酵物の有効性が低下する傾向にあり、一方１０日を越えて長くしても有効性のそれ以上の上昇は認められないだけでなく、着色や発酵臭の増加が生ずることとなっていずれも好ましくない。
【００２２】
以上の発酵処理を行うに当たって、ハス属植物の成分が微生物によってより有効に利用されるようにするため、微生物の植菌前もしくは植菌と同時に、前記の懸濁液に酵素を添加して、ハス属植物に酵素による加水分解処理を施すことが好ましく、かかる酵素処理は、特にハス属植物の種子（例えばハスの子実）のように、外皮が緻密で発酵が進み難い素材を用いる場合にとりわけ有効である。
【００２３】
この場合、酵素としては、蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、ペクチン質分解酵素及び繊維素分解酵素から選ばれた少なくとも１種の酵素が用いられ、特にそれら４種の酵素群からそれぞれ選ばれた少なくとも１種の酵素を組み合わせ用いることによって好結果を得ることができる
【００２４】
ここで蛋白分解酵素としては、例えばアクチナーゼなどのアクチナーゼ類、ペプシンなどのペプシン類、トリプシン、キモトリプシンなどのトリプシン類、パパイン、キモパパインなどのパパイン類、グリシルグリシンペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼなどのペプチダーゼ類、ブロメラインなどを用いることができる。それら酵素のうちでも、アクチナーゼなどのアクチナーゼ類、パパイン、キモパパインなどのパパイン類或いはブロメラインが特に好ましい。
【００２５】
澱粉分解酵素としては、例えばα−アミラーゼ、β−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、β−ガラクトシダーゼなどを用いることができる。それらの酵素のうちでも、グルコアミラーゼが特に好ましい。
【００２６】
ペクチン質分解酵素としては、例えばペクチンデポリメラーゼ、ペクチンデメトキシラーゼ、ペクチンリアーゼ、ペクチンエステラーゼ、ポリガラクチュロナーゼなどを用いることができる。それらの酵素のうちでも、ペクチンエステラーゼとポリガラクチュロナーゼが特に好ましい。
【００２７】
繊維素分解酵素としては、例えばセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、アガラーゼ、マンナーゼ、キチナーゼ、キトサナーゼ、カラゲナーゼ、アルギナーゼ、フコイダナーゼ、イヌラーゼ、キシラナーゼ、リグニナーゼなどを用いることができる。それらの酵素のうちでも、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ及びリグニナーゼが特に好ましい。
【００２８】
酵素の使用量は、懸濁液中のハス属植物の固形分に対して、合計で０．０１〜１０重量％が好ましく、より好ましくは０．１〜１．０重量％である。
ｐＨ、温度、時間などの処理条件としては、酵素処理を発酵の前に行うのであれば、使用する酵素の至適ｐＨ及び至適温度付近で１〜24時間の処理を行うのがよく、一方発酵と同時に行うのであれば、当該発酵と同条件であって差し支えない。
【００２９】
以上の発酵処理が終ったならば、微生物の殺菌のため、又酵素処理を併用した場合であれば酵素の失活も兼ねて、発酵液に７０〜１００℃で１０〜１２０分程度の加熱殺菌処理を施した後、これをそのまま、或いは一般かつ好適にはろ過或いは遠心分離などの固液分離手段によって液相を分取し、必要ならばｐＨを通常の化粧料のｐＨ領域であるｐＨ６〜８に調整し、さらに必要ならば希釈もしくは濃縮によって適宜の濃度とした上、化粧料の配合原料として供する。又、場合によっては、固液分離後の液相をスプレードライ法、凍結乾燥法など常法に従って粉末状とした上化粧料に配合してもよい。
【００３０】
本発明のハス属植物の発酵物を配合してなる化粧料としては、例えば乳液、クリーム、ローション、エッセンス、パック、洗顔料などの基礎化粧料、口紅、ファンデーション、リキッドファンデーション、メイクアッププレスパウダーなどのメイクアップ化粧料、洗顔料、ボディーシャンプー、石けんなどの清浄用化粧料、さらには浴剤等が挙げられるが、勿論これらに限定されるものではない。
【００３１】
本発明の化粧料中に於けるハス属植物の発酵物の配合量は、発酵物の固形分として、基礎化粧料の場合は、一般に０．００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜１重量％の範囲、メイクアップ化粧料の場合は、一般に０．００１〜５重量％、好ましくは０．０１〜０．５重量％の範囲、清浄用化粧料の場合は、一般に０．００１〜５重量％、好ましくは０．０１〜０．５重量％の範囲、又浴剤の場合は、一般に０．００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜１重量％の範囲であるである。
【００３２】
本発明の化粧料には、上記の必須成分の他に、通常化粧料に用いられる配合成分、例えば油性成分、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、防腐・殺菌剤、粉体成分、紫外線吸収剤、色素、香料、抗酸化剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００３３】
ここで、油性成分としては、例えばオリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、大豆油、米油、米胚芽油、ヤシ油、パーム油、カカオ油、メドウフォーム油、シアーバター、ティーツリー油、アボガド油、マカデミアナッツ油、植物由来スクワランなどの植物由来の油脂類；ミンク油、タートル油などの動物由来の油脂類；ミツロウ、カルナウバロウ、ライスワックス、ラノリンなどのロウ類；流動パラフィン、ワセリン、パラフィンワックス、スクワランなどの炭化水素類；ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ｃｉｓ−１１−エイコセン酸などの脂肪酸類；ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコールなどの高級アルコール類；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、２−エチルヘキシルグリセライド、高級脂肪酸オクチルドデシル（ステアリン酸オクチルドデシル等）などの合成エステル類及び合成トリグリセライド類等が挙げられる。
【００３４】
界面活性剤としては，例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルなどの非イオン界面活性剤；脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレン脂肪酸アミン硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル燐酸塩、α−スルホン化脂肪酸アルキルエステル塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル燐酸塩などのアニオン界面活性剤；第四級アンモニウム塩、第一級〜第三級脂肪酸アミン塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、２−アルキル−１−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、Ｎ，Ｎ−ジアルキルモルフォルニウム塩、ポリエチレンポリアミン脂肪酸アミド塩などのカチオン界面活性剤；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニオベタイン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリアルキル−Ｎ−アルキレンアンモニオカルボキシベタイン、Ｎ−アシルアミドプロピル−Ｎ′，Ｎ′−ジメチル−Ｎ′−β−ヒドロキシプロピルアンモニオスルホベタインなどの両性界面活性剤等を使用することができる。
又、乳化剤乃至乳化助剤として、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀など）、ジュアゼイロ（Zizyphus juazeiro：Rhamnaceae)抽出物等を配合することもできる。
【００３５】
保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等があり、さらにトレハロース等の糖類、乳酸菌醗酵米、ムコ多糖類（例えば、ヒアルロン酸及びその誘導体、コンドロイチン及びその誘導体、ヘパリン及びその誘導体など）、エラスチン及びその誘導体、コラーゲン及びその誘導体、加水分解シルク蛋白質、ＮＭＦ関連物質、乳酸、尿素、高級脂肪酸オクチルドデシル、フィトステロール、大豆リン脂質、イソステアリン酸コレステリル、海藻抽出物、魚介類由来コラーゲン及びその誘導体、各種アミノ酸及びそれらの誘導体（例えばトリメチルグリシンなど）、ビャッキュウ抽出物、豆乳発酵液、納豆エキス、米由来抽出物及びその発酵物等が挙げられる。
【００３６】
増粘剤としては、例えばアルギン酸、寒天、カラギーナン、フコイダン等の褐藻、緑藻或いは紅藻由来成分、ビャッキュウ抽出物、ペクチン、ローカストビーンガム、アロエ多糖体等の多糖類、キサンタンガム、トラガントガム、グアーガム等のガム類、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸共重合体等の合成高分子類；ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリグルタミン酸及びその誘導体、グルコシルトレハロースと加水分解水添デンプンを主体とする糖化合物等が挙げられる。
【００３７】
防腐・殺菌剤としては、例えば尿素；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類；フェノキシエタノール、ジクロロフェン、ヘキサクロロフェン、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、サリチル酸、エタノール、ウンデシレン酸、フェノール類、ジャーマル（イミダゾデイニールウレア）、１，２−ペンタンジオール、各種精油類、樹皮乾留物、プロポリスエキス、メチルイソチアゾリノン等がある。
【００３８】
粉体成分としては、例えばセリサイト、酸化チタン、タルク、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、酸化ジルコニウム、硫酸バリウム、無水ケイ酸、雲母、６−又は12−ナイロンパウダー、ポリエチレンパウダー、シルクパウダー、セルロース系パウダー、穀類（米、麦、トウモロコシ、キビなど）のパウダー、豆類（大豆、小豆など）のパウダー等がある。
【００３９】
紫外線吸収剤としては、例えばパラアミノ安息香酸エチル、パラジメチルアミノ安息香酸エチルヘキシル、サリチル酸アミル及びその誘導体、パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル、桂皮酸オクチル、オキシベンゾン、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸塩、４−ターシャリーブチル−４−メトキシベンゾイルメタン、２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、アロエ抽出物等がある。
【００４０】
抗酸化剤としては、例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ビタミンＥ及びその誘導体、ユビデカキノン（ユビキノン）、ルチン、ルチングルコシド、白芥子抽出物、イネ抽出物、ムラサキシキブ抽出物、シラカバ抽出物、ハマメリス抽出物、ウーロン茶抽出物、黒豆加水分解抽出液、ハゴロモグサ抽出液等がある。
【００４１】
さらに必要ならば、本発明で用いる発酵物の作用効果及び特長を損なわない範囲で、他の活性成分（美白剤、皮膚老化防止・肌荒れ改善剤等）を配合してもよく、かかるものとしては、例えば美白剤であれば、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、コウジ酸及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン誘導体、エラグ酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体、ソウハクヒ抽出物、ユキノシタ抽出物、米糠抽出物、米糠抽出物加水分解物、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀類）、白芥子加水分解抽出物、ムラサキシキブ抽出物、ハスの実発酵物、党参抽出物、パンダヌス・アマリリフォリウス(Pandanus amaryllifolius Roxb.)抽出物、アルカンジェリシア・フラバ（Arcangelicia flava Merrilli）抽出物、カミツレ抽出物（商品名：カモミラET)、ジンコウ抽出物、ハマメリス抽出物、イタドリ抽出物、サワヒヨドリ抽出物、甘草抽出物、フキタンポポ抽出物、アルテア抽出物、ゲンノショウコ抽出物、ユキノシタ抽出物、ナツメ抽出物、シャクヤク抽出物、トウキ抽出物、モモ抽出物、緑藻類、紅藻類又は褐藻類の海藻の抽出物、アマモ等の海草の抽出物、リノール酸及びその誘導体もしくは加工物（例えばリポソーム化リノール酸など）、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体等が、又皮膚老化防止・肌荒れ改善成分であれば、動物又は魚由来のコラーゲン及びその誘導体、エラスチン及びその誘導体、セラミドなどの細胞間脂質、胎盤抽出物、ニコチン酸及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体（ジカリウム塩等）、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、アラントイン、α−ヒドロキシ酸類、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、コエンザイムＱ−１０、α−リポ酸、ピコリン、ゲンチアナエキス、甘草エキス、ハトムギエキス、カミツレエキス、ニンジンエキス、アロエエキスなどの生薬抽出エキス、米糠抽出物加水分解物、米抽出物加水分解物、低アレルゲン米抽出物加水分解物、米醗酵エキス、緑藻類、紅藻類又は褐藻類の海藻の抽出物、アマモ等の海草の抽出物、ソウハクヒエキス、ジュアゼイロ（Ｚｉｚｙｐｈｕｓ ｊｕａｚｅｉｒｏ）抽出物、ブナ抽出物、キダチアロエ抽出物、マンネンロウ抽出物、イチョウ抽出物、スギナ抽出物、ベニバナ抽出物、オタネニンジン抽出物、セイヨウニワトコ抽出物、ハゴロモグサ抽出物、レンゲ抽出物、マンゴー抽出物、チェリモヤ抽出物、マンゴスチン抽出物、タベブイア・インペチギノサ抽出物、酵母抽出物、卵殻膜抽出タンパク質、デオキシリボ核酸カリウム塩、ハス発酵液、紫蘭根抽出物、ムラサキシキブ抽出物、イネ抽出物、サンゴ草抽出物、花粉荷エキス等が挙げられる。
【００４２】
上記のコウジ酸誘導体としては、例えばコウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸ジブチレートなどのコウジ酸エステル類、コウジ酸エーテル類、コウジ酸グルコシドなどのコウジ酸糖誘導体等が、アスコルビン酸誘導体としては、例えばＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルマグネシウムなどのアスコルビン酸エステル塩類、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド（２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）、Ｌ−アスコルビン酸−５−グルコシド（５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）などのアスコルビン酸糖誘導体、それらアスコルビン酸糖誘導体の６位アシル化物（アシル基は、ヘキサノイル基、オクタノイル基、デカノイル基など）、Ｌ−アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸テトララウリン酸エステルなどのＬ−アスコルビン酸テトラ脂肪酸エステル類、３−Ｏ−エチルアスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸−６−Ｏ−パルミテートナトリウム等が、ハイドロキノン誘導体としては、アルブチン（ハイドロキノン−β−Ｄ−グルコピラノシド）、α−アルブチン（ハイドロキノン−α−Ｄ−グルコピラノシド）等が、レゾルシノール誘導体としては、例えば４−ｎ−ブチルレゾルシノール、４−イソアミルレゾルシノール等が、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体としては、例えば２，５−ジアセトキシ安息香酸、２−アセトキシ−５−ヒドロキシ安息香酸、２−ヒドロキシ−５−プロピオニルオキシ安息香酸等が、ニコチン酸誘導体としては、例えばニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等が、ビタミンＥ誘導体としては、例えばビタミンＥニコチネート、ビタミンＥリノレート、ビタミンＥリン酸エステルナトリウム塩等が、α−ヒドロキシ酸としては、例えば乳酸、リンゴ酸、コハク酸、クエン酸、α−ヒドロキシオクタン酸等がある。
【００４３】
次に、製造例、実施例（化粧料の処方例）及び試験例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。なお、以下に於いて、部はすべて重量部を、又％はすべて重量％を意味する。
【００４４】
製造例１．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、加熱殺菌した。この懸濁液にグルコアミラーゼ１ｇ、パパイン１ｇ及びセルラーゼ０．５ｇを加えた後、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）を１０８個／ｍＬ接種し、窒素気流下に３７℃で３日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４５０ｇ（固形分濃度２．８％）を得た。
【００４５】
製造例２．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてストレプトコッカス フェーカリスを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４２０ｇ（固形分濃度２．５％）を得た。
【００４６】
製造例３．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてカルノバクテリウム ディバージェンスを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１３８０ｇ（固形分濃度２．６％）を得た。
【００４７】
製造例４．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてロイコノストック メセンテロイズを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４４０ｇ（固形分濃度２．３％）を得た。
【００４８】
製造例５．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてラクトコッカス プランタラムを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度２．３％）を得た。
【００４９】
製造例６．
培養日数を５日間とする他は製造例１と同様にしてハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４４０ｇ（固形分濃度２．７％）を得た。。
【００５０】
製造例７．
発酵素材としてハスの種子の粉砕物に代えてハスの葉の細切物を用いる他は製造例１と同様にして、ハスの葉の乳酸菌発酵物溶液８５０ｇ（固形分濃度１．１％）を得た。
【００５１】
製造例８．
発酵素材としてハスの種子の粉砕物に代えてハスの根茎の細切物を用いる他は製造例１と同様にして、ハスの根茎の乳酸菌発酵物溶液１０５０ｇ（固形分濃度１．８％）を得た。
【００５２】
製造例９．
発酵素材としてハスの種子の粉砕物に代えてハスの全草の細切物を用いる他は製造例１と同様にして、ハスの全草の乳酸菌発酵物溶液１１５０ｇ（固形分濃度１．３％）を得た。
【００５３】
製造例１０．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、加熱殺菌した。この懸濁液に乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）を１０８個／ｍＬ接種し、窒素気流下に３７℃で３日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１２５０ｇ（固形分濃度１．２％）を得た。
【００５４】
製造例１１．
発酵素材として、ハスの種子の粉砕物に代えてアメリカキバスの種子の粉砕物を用いる他は製造例１と同様にして、アメリカキバスの種子の乳酸菌発酵物溶液１１５０ｇ（固形分濃度２．５％）を得た。
【００５５】
製造例１２．
製造例１と同様にして得たハス種子の乳酸菌発酵物溶液１０００ｇを凍結乾燥し、これを粉砕してハス種子の乳酸菌発酵物粉末２６ｇを得た。
【００５６】
製造例１３．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて麹菌であるアスペルギルス オリゼーを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の麹菌発酵物溶液１４００g（固形分濃度 ３．１％）を得た。
【００５７】
製造例１４．
麹菌として、アスペルギルス オリゼーに代えてアスペルギルス アワモリを用いる他は製造例１３と同様にして、ハス種子の麹菌発酵物溶液１４３０ｇ（固形分濃度３．０％）を得た。
【００５８】
製造例１５．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて納豆菌であるバシルス ナットーを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の納豆菌発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度３．２％）を得た。
【００５９】
製造例１６．
納豆菌として、 バシルス ナットーに代えてバシルス サブチルスを用いる他は製造例１５と同様にして、ハス種子の納豆菌発酵物溶液１４４０ｇ（固形分濃度３．０％）を得た。
【００６０】
製造例１７．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて酵母であるサッカロミセス セレビシエを用いる他は製造例１と同様にしてハス種子の酵母発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度２．２％）を得た。
【００６１】
製造例１８．
酵母として、サッカロミセス セレビシエに代えてカンディダ ケフィールを用いる他は製造例１７と同様にしてハス種子の酵母発酵物溶液１４００ｇ（固形分濃度２．４％）を得た。
【００６２】
製造例１９．
微生物として乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて麹菌のアスペルギルス オリゼーを、又発酵素材としてハスの種子に代えてアメリカキバスの種子を用いる他は製造例１と同様にして、アメリカキバスの種子の麹菌発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度３．１％）を得た。
【００６３】
製造例２０．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えてテンペ菌であるリゾプス ミクロポラス オリゴスポラスを用いる他は製造例１と同様にしてハス種子のテンペ菌発酵物溶液１４２０ｇ（固形分濃度３．２％）を得た。
【００６４】
製造例２１．
テンペ菌として、リゾプス ミクロポラス オリゴスポラスに代えてリゾプス オリゼーを用いる他は製造例２０と同様にしてハス種子のテンペ菌発酵物溶液１４５０ｇ（固形分濃度３．１％）を得
【００６５】
比較製造例１．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、８０℃で２時間加熱した。この液をろ過して、ハス種子抽出物溶液１３６０ｇ（固形分濃度０．７％）を得た。
【００６６】
比較製造例２．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、加熱殺菌した。この液にパパイン１．０ｇを加えた後、ｐＨを７．５に調整し、４５℃に１５時間保持した。この液をろ過して、ハス種子酵素分解物溶液１４１０ｇ（固形分濃度２．１％）を得た。
【００６７】
実施例１．クリーム
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ５．０
ヘキサラン （注１） ４．０
パラフィン ５．０
グリセリルモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（20）ソルビタンモノステアレート ６．０
ブチルパラベン ０．１
（注１）株式会社テクノーブル製 トリオクタン酸グリセリル
［Ｂ成分］
製造例１のハス種子発酵物溶液 １０．０
グリセリン ５．０
カルボキシメチルモノステアレート ０．１
モイストン・Ｃ （注２） １．０
精製水 全量が１００部となる量
（注２）株式会社テクノーブル製 ＮＭＦ成分
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合してクリームを得た。
【００６８】
実施例２．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例６のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００６９】
実施例３．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１３のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７０】
実施例４．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１５のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７１】
実施例５．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１７のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７２】
実施例６．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１９のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７３】
実施例７．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例２１のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７４】
実施例８．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例２のハス種子発酵物溶液 １０．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。こ
れを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００７５】
実施例９．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例３のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７６】
実施例１０．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例４のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７７】
実施例１１．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例５のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７８】
実施例１２．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例７のハスの葉の発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７９】
実施例１３．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例８のハスの根茎の発酵物溶液を用いるほかは実施例３と同様にして乳液を得た。
【００８０】
実施例１４．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１０のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８１】
実施例１５．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１４のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８２】
実施例１６．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１６のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８３】
実施例１７．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１８のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８４】
実施例１８．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例２０のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８５】
実施例１９．ローション
［成分］ 部
製造例９のハスの全草の発酵物溶液 １０．０
エタノール １０．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
メチルパラベン ０．２
クエン酸 ０．１
クエン酸ナトリウム ０．３
カルボキシビニルポリマー ０．１
香料 適量
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が１００部となる量
上記の成分を混合してローションを得た。
【００８６】
実施例２０．化粧水
［Ａ成分］ 部
オリーブ油 １．０
ポリオキシエチレン（５．５）セチルアルコール ５．０
ブチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例１１のハス種子発酵物溶液 １０．０
エタノール ５．０
グリセリン ５．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
メチルパラベン ０．１
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加温後、Ａ成分にＢ成分を加えて攪拌し、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。
これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えて攪拌混合し、さらに３０℃以下まで冷却して化粧水を得た。
【００８７】
実施例２１．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例１のハス種子発酵物溶液 １０．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
水酸化カリウム ０．５
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００８８】
実施例２２．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム２．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００８９】
実施例２３．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム２．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９０】
実施例２４．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてアルブチン２．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９１】
実施例２５．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて米糠抽出物加水分解物（株式会社テクノーブル製、商品名「グレイスノウ＊雪＊ＨＰ」、固形分濃度3.5％）５．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９２】
実施例２６．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて白芥子抽出物（株式会社テクノーブル製、商品名「シナブランカ−ＷＨ」、固形分濃度1.0％）５．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９３】
実施例２７．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてγ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸１．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９４】
実施例２８．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例２のハス種子発酵物溶液 １０．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
水酸化カリウム ０．５
コエンザイムＱ−１０ ０．１
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００９５】
実施例２９．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例３のハス種子発酵物溶液 １０．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
水酸化カリウム ０．５
豆乳乳酸菌発酵エキス １．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００９６】
実施例３０．プレストパウダー
［Ａ成分］ 部
ベンガラ ０．５
黄酸化鉄 １．５
黒酸化鉄 ０．１
酸化チタン １０．０
ナイロンパウダー ４．０
セリサイト 全量が１００部となる量
マイカ ２３．０
タルク ２５．０
製造例１２のハス種子発酵物粉末 ２．０
［Ｂ成分］
スクワラン １．０
メチルポリシロキサン ４．０
プロピルパラベン ０．１
デヒドロ酢酸 ０．１
流動パラフィン ２．０
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ混合攪拌し混合した後、２００メッシュのタイラーメッシュの篩にかけ、得られた混合粉末を金型に打型してプレストパウダーを得た。
【００９７】
実施例３１．リクイドファンデーション
［Ａ成分］ 部
ステアリン酸 ２．４
モノステアリン酸プロピレングリコール ２．０
セトステアリルアルコール ０．２
液状ラノリン ２．０
流動パラフィン ３．０
ミリスチン酸イソプロピル ８．５
プロピルパラベン ０．０５
［Ｂ成分］
製造例１のハス種子発酵物溶液 ５．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．２
ベントナイト ０．５
プロピレングリコール ４．０
トリエタノールアミン １．１
メチルパラベン ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン ８．０
タルク ４．０
着色顔料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ加温した後混合攪拌した。これを再加温し、上記のＣ成分を添加して型に流し込み、室温になるまで攪拌してリキッドファンデーションを得た。
【００９８】
実施例３２．クリームファンデーション
［Ａ成分］ 部
ステアリン酸 ５．０
セタノール ２．０
モノステアリン酸グリセリル ３．０
流動パラフィン ５．０
スクワラン ３．０
ミリスチン酸イソプロピル ８．０
ポリオキシエチレン（２０）モノステアリン酸グリセリル ２．０
プロピルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例２のハス種子発酵物溶液 ５．０
ソルビトール ３．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
トリエタノールアミン １．５
メチルパラベン ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン ８．０
タルク ２．０
カオリン ５．０
ベントナイト １．０
着色顔料 適 量
［Ｄ成分］
香料 ０．３
Ｃ成分を混合し、粉砕機で粉砕した。Ｂ成分を混合し、これに粉砕したＣ成分を加え、コロイドミルで均一分散させた。Ａ成分及び均一分散させたＢ、Ｃ成分をそれぞれ８０℃に加温後、Ｂ、Ｃ成分にＡ成分を攪拌しながら加え、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。これを５０℃まで冷却した後、Ｄ成分を加えて攪拌混合し、さらに攪拌しながら３０℃以下まで冷却してクリームファンデーションを得た。
【００９９】
実施例３３．ボディシャンプー
［Ａ成分］ 部
Ｎ−ラウロイルメチルアラニンナトリウム ２５．０
ヤシ油脂肪酸カリウム液（４０％） ２６．０
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド ３．０
メチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例４のハス種子発酵物溶液 １０．０
１，３−ブチレングリコール ２．０
精製水 全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してボディシャンプーを得た。
【０１００】
実施例３４．石けん
［Ａ成分］ 部
硬化ヒマシ油 ２６．０
ヤシ油 １０．０
オリーブ油 ４．０
［Ｂ成分］
水酸化ナトリウム ６．０
砂糖 １０．０
グリセリン ５．０
製造例５のハス種子発酵物溶液 ５．０
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
エタノール ２０．０
香料 適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加えてケン化した。これを攪拌しながら５０℃まで冷却し、Ｃ成分を加えた。これを型に流し込み冷却した後、室温下で数日間乾燥させ、充分に乾燥したものを型から取りだして石けんを得た。
【０１０１】
比較例１．クリーム
実施例１のＢ成分中、製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて比較製造例１のハス種子抽出物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【０１０２】
比較例２．クリーム
実施例１のＢ成分中、製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【０１０３】
試験例１．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（１）
製造例１、製造例２及び製造例３のハス種子発酵物溶液を試料として用い、乳酸菌の種類と得られる発酵物のチロシナーゼ抑制作用との関係を調べた。
【０１０４】
［試験方法］
培養Ｂ１６マウスメラノーマ細胞を、９６穴マイクロプレートに８×１０３個／穴播種し、１０％仔牛血清（FBS）含有イーグル最少必須培地（MEM）中、３７℃、５％ＣＯ２の条件下に１日間プレ培養した後、１０％FBS含有イーグルMEMで試料溶液を２．５又は５．０％の濃度（溶液として）となるように希釈した液に置換し、同条件で２日間培養した。
次に培養液を除去し、界面活性剤（Triton X-100）と５mMＬ−ドーパ溶液を添加して３７℃で反応を行った後、マイクロプレートリーダー（Model 450、バイオラッド社製）を用い、波長４９０nmでドーパ値を測定した。
試料無添加の場合（対照）についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたドーパ値に対する各試料添加時のドーパ値の相対値を求め、チロシナーゼ活性率（％）とした。
なお、比較のため、試料溶液の代わりに、３mMのアルブチンを添加した場合（陽性対照）についても同様の試験を行った。
【０１０５】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表１に示した。
【表１】
【０１０６】
表１に示す通り、いずれの乳酸菌で発酵させた発酵物溶液もチロシナーゼ活性を抑制したが、そのなかでもラクトバチルス プランタラムを用いて得られた発酵物溶液が、最も強いチロシナーゼ活性抑制作用を示した。
又、製造例４及び５で得られたハス種子発酵物溶液について、上記と同様の試験を実施したところ、いずれも製造例２及び３と略々同等のチロシナーゼ抑制作用を有することが判明した。
なお、本試験で陽性対照として用いたアルブチンも顕著にチロシナーゼ活性を阻害していることから、試験系が正常であったことが判る。
【０１０７】
試験例２．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（２）
製造例１（ハスの種子の発酵物溶液）、製造例７（ハスの葉の発酵物溶液）、製造例８（ハスの根茎の発酵物溶液）及び製造例１１（アメリカキバスの種子の発酵物溶液）の各発酵物溶液を試料として用い、試験例１と同様の方法により、ハス属植物の部位又は種類と得られる発酵物のチロシナーゼ抑制作用との関係を調べた。
なお、陽性対照としてはアルブチンを用いた。
【０１０８】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表２に示した。
【表２】
【０１０９】
表２に示す通り、発酵素材としてハスのいずれの部位を用いた場合も、又アメリカキバスの種子を用いた場合も、得られた発酵物溶液はいずれもチロシナーゼ活性を抑制したが、なかでもハスの種子を用いた発酵物溶液が最も強いチロシナーゼ活性抑制作用を示した。
【０１１０】
試験例３．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（３）
製造例１（ハスの種子の乳酸菌発酵物溶液）、製造例１３（ハスの種子の麹菌発酵物溶液）、製造例１５（ハスの種子の納豆菌発酵物溶液）、製造例１７（ハスの種子の酵母発酵物溶液）及び製造例２０（ハス種子のテンペ菌発酵物溶液）の各発酵物溶液を試料として用い、試験例１と同様の方法により、微生物の種類と得られる発酵物のチロシナーゼ活性抑制作用との関係を調べた。但し、試料溶液の濃度は５．０％とした。
なお、陽性対照としてはアルブチンを用いた。
【０１１１】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表３に示した。
【表３】
【０１１２】
表３の結果から、乳酸菌、麹菌、納豆菌、酵母及びテンペ菌のいずれの微生物を用いて得られるハス種子発酵物も、Ｂ１６細胞内チロシナーゼ活性を抑制する作用を有するが、それらの微生物のうちでも特に乳酸菌又は麹菌による発酵物がすぐれた抑制作用を示すことが判る。
【０１１３】
試験例４．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（４）
試験例１と同様の方法を用いて、製造例１のハス種子発酵物溶液（本発明例）のチロシナーゼ抑制作用と比較製造例１のハス種子抽出物溶液及び比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液のチロシナーゼ抑制作用とを比較した。なお、陽性対照としてはアルブチンを用いた。
【０１１４】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表４に示した。
【表４】
【０１１５】
表４に示す通り、製造例１のハス種子発酵物溶液（本発明例）は強いチロシナーゼ活性抑制作用を示したが、比較製造例１のハス種子抽出物溶液及び比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液は、殆どチロシナーゼ活性抑制作用を示さなかった。
【０１１６】
試験例５．線維芽細胞賦活試験（１）
試験例１と同様の試料について、乳酸菌の種類と得られる発酵物の線維芽細胞賦活作用との関係を調べた。
【０１１７】
［試験方法］
ヒト真皮由来線維芽細胞NB1RGB(000824）を、０．５％FCS含有最少必須培地を入れた９６穴マイクロプレートに１×１０４ 個／穴播種し、３７℃で１日間プレ培養した後、培地に試料溶液を２．５％又は５．０％の濃度となるように添加し、３７℃でさらに６日間培養した。次に、培地を除去し界面活性剤(TRITON X-100）を添加した細胞処理液に、０．２％のＭＴＴを添加して３７℃に保持した後、マイクロプレートリーダー(Model 1450、バイオラッド社製）を用い、波長370−630nmでＭＴＴ値を測定した。
試料無添加の場合（対照）についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたＭＴＴ値に対する各試料添加時のＭＴＴ値の相対値を求め、線維芽細胞ＭＴＴ活性率（％）とした。
なお比較のため、試料溶液の代わりにグルコースを５０ｍＭ添加した場合（陽性対照）についても、同様の試験を行った。
【０１１８】
［結果］
結果を表５に示す。
【表５】
【０１１９】
表５に示す通り、いずれの乳酸菌で発酵させた発酵物溶液も線維芽細胞賦活作用を示したが、そのなかでもラクトバチルス プランタラムを用いて得られた発酵物溶液が、最も強い線維芽細胞賦活作用を示した。
又、製造例４及び５で得られたハス種子発酵物溶液について、上記と同様の試験を実施したところ、いずれも製造例２及び３と略々同等の線維芽細胞賦活作用を有することが判明した。
【０１２０】
試験例６．線維芽細胞賦活試験（２）
試験例２と同様の試料を用い、試験例５と同様にしてハス科植物の部位又は種類と得られる発酵物の線維芽細胞賦活作用との関係を調べた。
【０１２１】
［結果］
結果を表６に示す。
【表６】
【０１２２】
表６に示す通り、発酵素材としてハスのいずれの部位を用いた場合も、又アメリカキバスの種子を用いた場合も、得られた発酵物溶液はいずれも線維芽細胞賦活作用を示したが、なかでもハスの種子を用いた発酵物溶液が最も強い線維芽細胞賦活作用を示した。
【０１２３】
試験例７．線維芽細胞賦活試験（３）
試験例３と同様の試料を用い、試験例５と同様の方法により、微生物の種類と得られる発酵物の線維芽細胞賦活作用との関係を調べた。
【０１２４】
［結果］
結果を表７に示す。
【表７】
【０１２５】
表７に示す通り、乳酸菌、麹菌、納豆菌、酵母及びテンペ菌のいずれの微生物を用いた場合も、得られるハス種子発酵物は線維芽細胞を賦活する作用を示すが、なかでも乳酸菌又は麹菌を用いた場合に該賦活作用は最も顕著となる。
【０１２６】
試験例８．線維芽細胞賦活試験（４）
試験例４と同様の試料を用い、試験例５と同様の方法により、本発明のハス科植物発酵物と従来公知のハス科植物由来成分の線維芽細胞賦活作用を対比した。
【０１２７】
［結果］
結果を表８に示す。
【表８】
【０１２８】
表８に示す通り、製造例１のハス種子発酵物溶液（本発明例）は強い線維芽細胞賦活作用を示したが、比較製造例１のハス種子抽出物溶液及び比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液は、殆ど線維芽細胞賦活作用を示さなかった。
【０１２９】
試験例９．皮膚一次刺激性試験
モルモットを用いて、本発明のハス属植物発酵物の皮膚一次刺激性を調べた。
［試験方法］
Hartley系モルモット（雄、４週齢）３匹(GA、GB及びGC）を用い、その背部をバリカン及び電気シェーバーで除毛した後、除毛部に、パッチテスト用絆創膏の布地部（直径２５mm）に製造例１もしくは製造例９の発酵物溶液、又対照として精製水０．５mLを湿潤させたものを貼付した。貼付開始から２４時間後に絆創膏を除去し、除去直後（貼付開始から２４時間後）、除去２４時間後（貼付開始から４８時間後） 及び除去４８時間後（貼付開始から７２時間後）に、絆創膏貼付部位の紅斑、痂皮及び浮腫形成の程度を観察し、下記のドレイズ（Draize）の判定基準に従って評価した。
【０１３０】
（紅斑）
スコア 皮膚の状態
０ ： 紅斑なし
１ ： 極く軽度の紅斑
２ ： 明らかな紅斑
３ ： 中程度から強い紅斑
４ ： 深紅色の強い紅斑に軽い痂皮形成
（浮腫）
スコア 皮膚の状態
０ ： 浮腫なし
１ ： 極く軽度の浮腫
２ ： 明らかな浮腫（周囲と明らかに区別可能）
３ ： 中程度の浮腫（１mm以上の盛り上がり）
４ ： 強い浮腫（さらに周囲にも広がり）
【０１３１】
［結果］
結果を表９に示す。
【表９】
【０１３２】
表９の結果から明らかな通り、本発明で化粧料配合成分として用いるハス発酵物は皮膚に対する一次刺激性がなく、生体安全性に極めてすぐれている。
【０１３３】
試験例１０．モニターテスト
実施例１のクリームと比較例１及び２のクリームについて、モニターテストにより皮膚に対する効果を調べた。
［試験方法］
無作為に抽出した年齢１８〜５０歳の女性４０名を被験者として２０名ずつ２つのグループ（Ａ、Ｂ）に分け、各グループに、実施例１と比較例１又は２のクリームの２種の組み合わせのいずれかを割り振り、それぞれ左右の頬部に、実施例又は比較例のクリームを１日２回（朝、晩）、1ヵ月間塗布してもらった後、シミ、ソバカスに対する改善効果、小ジワに対する改善効果及び肌のはり、艶に対する改善効果を、以下の評価基準に基づいて評価した。
【０１３４】
［評価基準］
（シミ、ソバカスに対する改善効果）
Ａ：非常に改善された
Ｂ：かなり改善された
Ｃ：僅かに改善された
Ｄ：変わらない
Ｅ：かえって目立つようになった
（小ジワに対する改善効果）
Ａ：殆ど目立たなくなった
Ｂ：かなり目立たなくなった
Ｃ：わずかに目立たなくなった
Ｄ：変わらない
Ｅ：かえって増えた
（肌のはり、艶に対する改善効果）
Ａ：明らかに改善された
Ｂ：かなり改善された
Ｃ：僅かに改善された
Ｄ：変わらない
Ｅ：かえって悪くなった
【０１３５】
［結果］
結果を表１０に示す。なお、表１０のＡ〜Ｅの各評価欄の数字は、被験者２０名中当該評価を行った被験者の数を示す。
【表１０】
【０１３６】
表１０に示す通り、ハス種子発酵物を活性成分として配合してなる本発明のクリームは、該成分の有するメラニン生成抑制作用と線維芽細胞賦活作用の複合に基づく相乗的効果により、皮膚の老化或いは不健全化の典型的な症状であるシミ、ソバカスやシワ、たるみ等のいずれに対してもすぐれた改善作用を示す。
これに対して、従来のハス種子抽出物又はハス種子酵素分解物を配合したクリームでは殆ど改善効果が見られず、明らかに有効性に違いがある結果となった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、すぐれた美白作用と皮膚老化防止作用とを併せ持ち、皮膚に対して総合的、多面的な美肌化効果を付与すると共に、生体安全性にもすぐれた化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
シワやたるみ或いはシミ、ソバカスの発生など皮膚の老化や不健全化の症状は、加齢に伴う細胞増殖・分化の不活性化、ホルモン分泌の低下などの内的要因と、日光（紫外線）暴露によって誘発される活性酸素に基づく細胞・組織の損傷、色素沈着の増加、さらには炎症発症などの外的要因が複雑に絡み合って生ずる現象である。
この皮膚の老化や不健全化を防止し或いは改善して、皮膚を健全かつ若々しい状態に保持するため、従来より種々の活性成分の使用が提案され、それら成分を配合した化粧料が上市されている。例えば、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン誘導体、コウジ酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体などの美白剤、α−ヒドロキシカルボン酸類、胎盤抽出物、ホルモン類などの細胞賦活成分、コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸などの真皮マトリックス成分、ビタミンＥ類などの抗酸化剤、グリチルレチン酸などの抗炎症剤、各種紫外線防御剤等がそれである。
しかしながら、それら従来の成分は一般に、上述した皮膚の老化乃至不健全化要因の一つを予防し或いは改善し得るに過ぎないため、それら成分を配合した化粧料によっては、真に満足し得る老化防止効果、美肌化効果を得ることは困難である。また、成分によっては、有効性を高めるため配合量を増すと皮膚刺激の問題を生ずるなど安全性の面に於いても改善を要するものがある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明者等は、上記の如き従来技術の問題点に鑑み、皮膚の老化や不健全化の諸要因に対して複合的に作用することにより、皮膚を真に健全で若々しい状態に保持し、改善し得る新たな活性成分を、しかも生体安全性の観点から天然物中に求めるべく鋭意研究・検討を重ねた結果、スイレン科ハス属の植物を乳酸菌などの微生物で発酵させて得られる発酵物が、メラニン生成抑制作用に基づく美白効果と線維芽細胞賦活作用に基づく皮膚老化防止効果とを併せ持っており、かかる成分を配合してなる化粧料は、皮膚に総合的、多面的な美肌化、健全化効果を付与し得ると共に、該成分が天然物由来であるが故に生体安全性にもすぐれたものとなることを見出し本発明を完成するに至った。
【０００４】
ハス属の植物、例えばハス（Nelumbo nucifera Gaertner）を化粧料配合原料として利用することについては、従来より種々の提案がなされている。
例えば、特開平３−１９０８０９号公報にはハスの抽出物を有効成分とする肌荒れ防止改善剤が、特開平４−２４７０１２号公報にはハスの葉の抽出物を配合した美白化粧料が、又特開平１１−２７９０６９号、特開２０００−２４７８２９号、特開２００１−１２２７５７号、特開２００１−１２２７５７号、特開２００２−２９９８０号、特開２００２−６８９９３号及び特開２００３−４８８４６号の各公報には、ハスの全草もしくは特定部位から抽出される成分が皮膚の老化防止に有効であることがそれぞれ開示されている。
さらに、特開平８−２０５２６号公報には、ハスを蒸煮した後酵素分解して得られるエキスからなる入浴剤が、肌荒れの改善効果やメラニン生成抑制作用に基づく美白効果を有することが示されている。
【０００５】
【特許文献１】特開平３−１９０８０９号
【特許文献２】特開平４−２４７０１２号
【特許文献３】特開平１１−２７９０６９号
【特許文献４】特開２０００−２４７８２９号
【特許文献５】特開２００１−１２２７５７号
【特許文献６】特開２００１−１２２７５７号
【特許文献７】特開２００２−２９９８０号
【特許文献８】特開２００２−６８９９３号
【特許文献９】特開２００３−４８８４６号
【特許文献１０】特開平８−２０５２６号
【０００６】
しかしながら、それら従来の技術の場合は、ハス属の植物に含まれる成分をそのままか、もしくはこれを単に加水分解して化粧料配合原料として利用するというに過ぎず、ハス属の植物を乳酸菌発酵の資化源として用い、ここに得られる発酵産生物を化粧料配合原料として利用する本発明とは明らかに技術思想を異にしており、従って当然ながら、それら従来技術中には、本発明の発酵物がB16メラノーマ細胞内のチロシナーゼ活性抑制に基づく美白効果と、ヒト皮膚線維芽細胞の増殖促進による皮膚老化防止効果の両効果を併せ持ち、皮膚に総合的、多面的な美肌化、健全化効果を付与し得ることについては、その事実の開示はもとよりこれを示唆するものすら見当たらない。
加えて、ハス属植物含有成分をそのままもしくは加水分解して利用する従来技術の場合にあっては、未だ十分満足し得る有効性が得られているとは言い難い面があり、皮膚に対する改善効果の点でも本発明には及ばないものである（後述の試験例参照）。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
即ち本発明は、スイレン科（Nympaeaceae)ハス属(Nelumbo)の植物を微生物で発酵させて得られる発酵物を配合したことを特徴とする化粧料である。
ここで、化粧料なる文言は、所謂化粧料のほかに医薬部外品までも含む広義で用いる。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の化粧料に於いて活性成分として用いるハス属植物の発酵物は、チロシナーゼ活性の抑制に基づくメラニン生成抑制作用とさらに真皮線維芽細胞に対する顕著な賦活作用とを併せ持っており、それら両作用の複合に基づく相乗的効果により、本発明の化粧料は、シワやタルミ或いはシミ、ソバカスなどの皮膚の老化や不健全化の症状の予防或いは改善に多面的かつすぐれた効果を発揮して、皮膚を真に健全で若々しい状態に維持し、改善する。
又、本発明化粧料の活性成分は、皮膚に対する刺激性が殆ど全くなく、このため本発明の化粧料は生体安全性にも大変すぐれている。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明で用いるスイレン科ハス属の植物としては、例えばハス（Nelumbo nucifera Gaertner)或いはアメリカキバス（Nelumbo Lutea Pers.)などが挙げられるが、それらのうちでも、発酵物のチロシナーゼ活性抑制作用及び線維芽細胞増殖促進作用の観点からハス（Nelumbo nucifera Gaertner）の使用が最も好ましい。
【００１０】
それらスイレン科ハス属植物を発酵させるに当って、該植物の発酵部位には特に限定はなく、全草、葉、花、雄しべ、雌しべ、茎、根茎、種子（子実）など適宜の部分を用いることができるが、得られる発酵物の有効性の点から種子の使用が好ましく、なかでもハス（Nelumbo nucifera Gaertner）の種子（子実）の使用が最も好ましい。
【００１１】
ハス属植物の発酵に用いる微生物としては、乳酸菌、麹菌、納豆菌、テンペ菌、酵母等が挙げられ、一般にはそれら各菌種のいずれかから選ばれた一種又は二種以上を用いるが、場合によっては、又相互に発酵の妨げとならない限り、別の菌種に属するもの同士を組み合せ用いるようにしてもよい。
上記の各菌種のうちでも、特に乳酸菌又は麹菌を用いた場合、得られる発酵物はとりわけ強いチロシナーゼ活性抑制作用と線維芽細胞賦活作用を示し、それら両作用の相乗的・複合的な働きによってすぐれた美肌化効果、皮膚健全化効果が奏し得られることから、本発明に於いては、乳酸菌及び／又は麹菌から選ばれる一種又は二種以上の菌を用いることが特に好ましい。
【００１２】
ここで乳酸菌としては、例えばラクトバシルス プランタラム（Lactobacillus plantarum)、ラクトバシルス ブレビス（L. brevis)、ラクトバシルス カゼイ（L. casei)等のラクトバシルス（Lactobacillus）属の乳酸菌；カルノバクテリウム ディバージェンス（Carnobacterium divergens)、カルノバクテリウム ピシコーラ(Carnobacterium piscicola)等のカルノバクテリウム（Carnobacterium）属の乳酸菌；ロイコノストック メセンテロイズ（Leuconostoc mesenteroides)、ロイコノストック シトレウム（Leuconostoc citreum)等のロイコノストック（Leuconostoc）属の乳酸菌； ストレプトコッカス フェーカリス（Streptococcus faecalis)、ストレプトコッカス ピオジェネス（Streptococcus pyogenes)等のストレプトコッカス属の乳酸菌；エンテロコッカス カゼリフラバス（Enterococcus caseliflavus)、エンテロコッカス サルフレウス（Enterococcus sulfreus)等のエンテロコッカス（ Enterococcus）属の乳酸菌；ラクトコッカス プランタラム（Lactococcus plantarum) ラクトコッカス ラフィノラクティス（Lactococcus rafinolactis)等のラクトコッカス属の乳酸菌；ヴェイセラ コンフューザ（Weissella confusa)、ヴェイセラ カンドウレリ（Weissella kandleri)等のヴェイセラ属の乳酸菌；アトポビウム ミニュタム（Atopobium minutum)、アトポビウム パービュラス（Atopobiumparvulus)等のアトポビウム（Atopobium）属の乳酸菌；バゴコッカス フルビアリス（Vagococcus fluvialis）、バゴコッカス サーモニナラム（Vagococcus salmoninarum)等のバゴコッカス（Vagococcus）属の乳酸菌；ペディオコッカス ダムノサス（Pediococcus damnosus)、ペディオコッカス ペントサセウス（Pediococcus pentosaceus)等のペディオコッカス（Pediococcus）属の乳酸菌等が挙げられる。それら乳酸菌のうちでも、得られる発酵物の皮膚生理活性の観点とさらに極端な嫌気性でなく取り扱い易いという点から、ラクトバシルス プランタラム（Lactobacillus plantarum)の使用が最も好ましい。
【００１３】
麹菌としては、例えばアスペルギルス オリゼー（Aspergillus oryzae）、アスペルギルス フラバス（Aspergillus flavus）、アスペルギルス ポリオキソジェネス（Aspergillus polyoxogenes）、アスペルギルス ソーヤ（Aspergillus sojae）等の黄麹菌、アスペルギルス アワモリ（Aspergillus awamori）、アスペルギルス カワウチ（Aspergillus kawauchii）、アスペルギルス ウサミ（Aspergillus usami）、
アスペルギルス ニガー（Aspergillus niger）等の黒麹菌、モナスカス アンカ（Monascus anka）、モナスカス ピロサス（Monascus pilosus）等の紅麹菌などが挙げられる。それらのうちでも、得られる発酵物の皮膚生理活性の観点とさらに発酵液の着色や発酵臭が比較的少ないことから、アスペルギルス オリゼー（Aspergillus oryzae）が最も好ましい。
【００１４】
納豆菌としては、例えばバシルス ナットー(Bacillus natto)、バシルス サブチルス(Bacillus subtilis)、バシルス サーキュランス(Bacillus circulans)等のバシルス属の細菌などが挙げられる。なかでも、食品に広く使用されており、安全性が高い点でバシルス ナットー(Bacillus natto)が最も好ましい。
【００１５】
テンペ菌としては、リゾプス アジゴスポラス(Rhizopus azygosporus)、リゾプス ミクロスポラス チネンシス(Rhizopus microsporus chinensis)、リゾプス ミクロスポラス オリゴスポラス(Rhizopus microsporus oligosporus)、リゾプス ニベウス(Rhizopus niveus)、リゾプス オリゼー(Rhizopus oryzae)等のリゾプス菌の真菌（カビ）が挙げられる。なかでも、インドネシアをはじめ東南アジア地域で発酵食品に広く使用されており、安全性が高い点で、リゾプス ミクロスポラス オリゴスポラス(Rhizopus microsporus oligosporus)やリゾプス オリゼー(Rhizopus oryzae)が最も好ましい。
【００１６】
酵母としては、例えばサッカロミセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)、サッカロミセス アワモリ(Saccharomyces awamori)、サッカロミセス チェバリエリ(Saccharomyces chevalieri)、サッカロミセス カールスバージェンシス(Saccharomyces carlsbergensis)、サッカロミセス バヨナス（Saccharomyces bayon us)等のサッカロミセス属の酵母、トルラスポラ デルブルエキ(Torulaspora delbruekii)、トルラスポラ ファーメンタチ(Torulaspora fermentati)、トルラスポラ ロゼイ(Torulaspora rosei)等のトルラスポラ属の酵母、ジゴサッカロミセス ローキシ(Zygosaccharomyces rouxii)、ジゴサッカロミセス ソーヤ(Zygosacchar
omyces soya)、ジゴサッカロミセス サケ(Zygosaccharomyces sake)、ジゴサッカロミセス ミソ(Zygosaccharomyces miso)、ジゴサッカロミセス ラクティス(Zygosaccharomyces lactis)等のジゴサッカロミセス属の酵母、カンディダ ベルサチリス(Candida versatilis)、カンディダ エチェリシイ(Candida etchellsii)、カンディダ ケフィール（Candida kefyr）、カンディダ サケ（Candida sake）、カンディダ スコッティ（Candida scottii）等のカンディダ属の酵母、オーレオバシディウム プルランス（Aureobasidium Pullulans）、オーレオバシディウム マンソニー（Aureobasidium mansonii）、オーレオバシディウム マイクロスティクタム（Aureobasideium microstictum）等のオーレオバシディウム属の酵母などが挙げられる。
それらのうちでも、食品に最も広く利用され、発酵力が強いという点からサッカロミセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)が最も好ましい。
【００１７】
上記の微生物を用いてハス属植物を発酵させる方法の好ましい具体例を挙げれば以下の通りである。
まず、発酵しようとするハス属植物（以下、発酵素材ということがある）を溶媒に浸漬乃至懸濁させて、発酵のための懸濁液を調製する。この場合、ハス属植物は生のまま用いても、又予め乾燥もしくは半乾燥した上用いてもよい。又、形状としては、採取したものをそのまま用いることもできるが、細断或いは粉砕して微細化すれば発酵効率を上げることができる。
発酵素材として例えばハスの種子（子実）を用いる場合について言えば、子実の最外層の渋皮は、発酵効率及び得られる発酵物の色相の点から、これを予め除去することが好ましく、又子実はそのまま用いるよりも、粉砕して粉末状として用いた方が、乳酸菌による栄養成分の利用がより行われ易くなって好ましい。
【００１８】
発酵素材を懸濁させるための溶媒としては、水或いは水と低級アルコール類（、メタノール、エタノール、プロパノールなど）もしくはグリコール類（エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリンなど）との混液等が用いられ、又それら溶媒中にはグルコース、フルクトース、シュークロースなどの糖類を添加してもよいが、微生物が最もその作用を発揮しやすい点とハス属植物の成分以外の資化成分の存在に基づく発酵副産物の生成を避けるという点から、水を単独で用いるのが最も好ましい。
発酵素材と溶媒との混合比は、発酵素材の乾燥重量換算で一般に１：１〜１：１０００、好ましくは１：５〜１：１００、より好ましくは１：１０〜１：５０の範囲である。
【００１９】
この発酵素材／溶媒懸濁液は、これを発酵工程に供する前に、殺菌を行って発酵の障害となる雑菌を除去することが必要であるが、この雑菌の殺菌除去方法としては、発酵素材を予め殺菌用エタノール等で洗浄した後無菌水等の無菌溶媒に懸濁する方法を用いてもよく、又発酵素材を溶媒に懸濁した後、懸濁液を加熱殺菌等により殺菌するようにしてもよい。
加熱殺菌処理としては、懸濁液を１２０〜１３０℃で１０〜２０分間加熱するオートクレーブ殺菌法や、８０〜９０℃に６０〜１２０分間保持することを１日１回２〜３日間繰り返す間断殺菌法といった加熱殺菌法が一般に用いられる。
【００２０】
次に、この無菌化した懸濁液を発酵タンクに入れ、これに微生物を植菌して発酵を行わしめる。
微生物の接種量は１０７〜１０８個／ｍＬが適量である。接種量が上記の範囲より多くなっても発酵の進行時間は殆ど変わらず、一方上記の範囲より少なくなると発酵完了までに長時間を要することとなって好ましくない。
【００２１】
発酵温度は一般に５〜５０℃の範囲、好ましくは各微生物の生育至適温度である３０〜４０℃（例えば、乳酸菌であれば３５℃〜４０℃）の範囲である。発酵日数は、至適温度に於いて一般に１〜１０日、好ましくは２〜５日の範囲である。発酵日数が上記の一般的範囲より短くなると発酵が十分に行われず発酵物の有効性が低下する傾向にあり、一方１０日を越えて長くしても有効性のそれ以上の上昇は認められないだけでなく、着色や発酵臭の増加が生ずることとなっていずれも好ましくない。
【００２２】
以上の発酵処理を行うに当たって、ハス属植物の成分が微生物によってより有効に利用されるようにするため、微生物の植菌前もしくは植菌と同時に、前記の懸濁液に酵素を添加して、ハス属植物に酵素による加水分解処理を施すことが好ましく、かかる酵素処理は、特にハス属植物の種子（例えばハスの子実）のように、外皮が緻密で発酵が進み難い素材を用いる場合にとりわけ有効である。
【００２３】
この場合、酵素としては、蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、ペクチン質分解酵素及び繊維素分解酵素から選ばれた少なくとも１種の酵素が用いられ、特にそれら４種の酵素群からそれぞれ選ばれた少なくとも１種の酵素を組み合わせ用いることによって好結果を得ることができる
【００２４】
ここで蛋白分解酵素としては、例えばアクチナーゼなどのアクチナーゼ類、ペプシンなどのペプシン類、トリプシン、キモトリプシンなどのトリプシン類、パパイン、キモパパインなどのパパイン類、グリシルグリシンペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼなどのペプチダーゼ類、ブロメラインなどを用いることができる。それら酵素のうちでも、アクチナーゼなどのアクチナーゼ類、パパイン、キモパパインなどのパパイン類或いはブロメラインが特に好ましい。
【００２５】
澱粉分解酵素としては、例えばα−アミラーゼ、β−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、β−ガラクトシダーゼなどを用いることができる。それらの酵素のうちでも、グルコアミラーゼが特に好ましい。
【００２６】
ペクチン質分解酵素としては、例えばペクチンデポリメラーゼ、ペクチンデメトキシラーゼ、ペクチンリアーゼ、ペクチンエステラーゼ、ポリガラクチュロナーゼなどを用いることができる。それらの酵素のうちでも、ペクチンエステラーゼとポリガラクチュロナーゼが特に好ましい。
【００２７】
繊維素分解酵素としては、例えばセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、アガラーゼ、マンナーゼ、キチナーゼ、キトサナーゼ、カラゲナーゼ、アルギナーゼ、フコイダナーゼ、イヌラーゼ、キシラナーゼ、リグニナーゼなどを用いることができる。それらの酵素のうちでも、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ及びリグニナーゼが特に好ましい。
【００２８】
酵素の使用量は、懸濁液中のハス属植物の固形分に対して、合計で０．０１〜１０重量％が好ましく、より好ましくは０．１〜１．０重量％である。
ｐＨ、温度、時間などの処理条件としては、酵素処理を発酵の前に行うのであれば、使用する酵素の至適ｐＨ及び至適温度付近で１〜24時間の処理を行うのがよく、一方発酵と同時に行うのであれば、当該発酵と同条件であって差し支えない。
【００２９】
以上の発酵処理が終ったならば、微生物の殺菌のため、又酵素処理を併用した場合であれば酵素の失活も兼ねて、発酵液に７０〜１００℃で１０〜１２０分程度の加熱殺菌処理を施した後、これをそのまま、或いは一般かつ好適にはろ過或いは遠心分離などの固液分離手段によって液相を分取し、必要ならばｐＨを通常の化粧料のｐＨ領域であるｐＨ６〜８に調整し、さらに必要ならば希釈もしくは濃縮によって適宜の濃度とした上、化粧料の配合原料として供する。又、場合によっては、固液分離後の液相をスプレードライ法、凍結乾燥法など常法に従って粉末状とした上化粧料に配合してもよい。
【００３０】
本発明のハス属植物の発酵物を配合してなる化粧料としては、例えば乳液、クリーム、ローション、エッセンス、パック、洗顔料などの基礎化粧料、口紅、ファンデーション、リキッドファンデーション、メイクアッププレスパウダーなどのメイクアップ化粧料、洗顔料、ボディーシャンプー、石けんなどの清浄用化粧料、さらには浴剤等が挙げられるが、勿論これらに限定されるものではない。
【００３１】
本発明の化粧料中に於けるハス属植物の発酵物の配合量は、発酵物の固形分として、基礎化粧料の場合は、一般に０．００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜１重量％の範囲、メイクアップ化粧料の場合は、一般に０．００１〜５重量％、好ましくは０．０１〜０．５重量％の範囲、清浄用化粧料の場合は、一般に０．００１〜５重量％、好ましくは０．０１〜０．５重量％の範囲、又浴剤の場合は、一般に０．００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜１重量％の範囲であるである。
【００３２】
本発明の化粧料には、上記の必須成分の他に、通常化粧料に用いられる配合成分、例えば油性成分、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、防腐・殺菌剤、粉体成分、紫外線吸収剤、色素、香料、抗酸化剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００３３】
ここで、油性成分としては、例えばオリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、大豆油、米油、米胚芽油、ヤシ油、パーム油、カカオ油、メドウフォーム油、シアーバター、ティーツリー油、アボガド油、マカデミアナッツ油、植物由来スクワランなどの植物由来の油脂類；ミンク油、タートル油などの動物由来の油脂類；ミツロウ、カルナウバロウ、ライスワックス、ラノリンなどのロウ類；流動パラフィン、ワセリン、パラフィンワックス、スクワランなどの炭化水素類；ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ｃｉｓ−１１−エイコセン酸などの脂肪酸類；ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコールなどの高級アルコール類；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、２−エチルヘキシルグリセライド、高級脂肪酸オクチルドデシル（ステアリン酸オクチルドデシル等）などの合成エステル類及び合成トリグリセライド類等が挙げられる。
【００３４】
界面活性剤としては，例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルなどの非イオン界面活性剤；脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレン脂肪酸アミン硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル燐酸塩、α−スルホン化脂肪酸アルキルエステル塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル燐酸塩などのアニオン界面活性剤；第四級アンモニウム塩、第一級〜第三級脂肪酸アミン塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、２−アルキル−１−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、Ｎ，Ｎ−ジアルキルモルフォルニウム塩、ポリエチレンポリアミン脂肪酸アミド塩などのカチオン界面活性剤；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニオベタイン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリアルキル−Ｎ−アルキレンアンモニオカルボキシベタイン、Ｎ−アシルアミドプロピル−Ｎ′，Ｎ′−ジメチル−Ｎ′−β−ヒドロキシプロピルアンモニオスルホベタインなどの両性界面活性剤等を使用することができる。
又、乳化剤乃至乳化助剤として、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀など）、ジュアゼイロ（Zizyphus juazeiro：Rhamnaceae)抽出物等を配合することもできる。
【００３５】
保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等があり、さらにトレハロース等の糖類、乳酸菌醗酵米、ムコ多糖類（例えば、ヒアルロン酸及びその誘導体、コンドロイチン及びその誘導体、ヘパリン及びその誘導体など）、エラスチン及びその誘導体、コラーゲン及びその誘導体、加水分解シルク蛋白質、ＮＭＦ関連物質、乳酸、尿素、高級脂肪酸オクチルドデシル、フィトステロール、大豆リン脂質、イソステアリン酸コレステリル、海藻抽出物、魚介類由来コラーゲン及びその誘導体、各種アミノ酸及びそれらの誘導体（例えばトリメチルグリシンなど）、ビャッキュウ抽出物、豆乳発酵液、納豆エキス、米由来抽出物及びその発酵物等が挙げられる。
【００３６】
増粘剤としては、例えばアルギン酸、寒天、カラギーナン、フコイダン等の褐藻、緑藻或いは紅藻由来成分、ビャッキュウ抽出物、ペクチン、ローカストビーンガム、アロエ多糖体等の多糖類、キサンタンガム、トラガントガム、グアーガム等のガム類、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸共重合体等の合成高分子類；ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリグルタミン酸及びその誘導体、グルコシルトレハロースと加水分解水添デンプンを主体とする糖化合物等が挙げられる。
【００３７】
防腐・殺菌剤としては、例えば尿素；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類；フェノキシエタノール、ジクロロフェン、ヘキサクロロフェン、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、サリチル酸、エタノール、ウンデシレン酸、フェノール類、ジャーマル（イミダゾデイニールウレア）、１，２−ペンタンジオール、各種精油類、樹皮乾留物、プロポリスエキス、メチルイソチアゾリノン等がある。
【００３８】
粉体成分としては、例えばセリサイト、酸化チタン、タルク、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、酸化ジルコニウム、硫酸バリウム、無水ケイ酸、雲母、６−又は12−ナイロンパウダー、ポリエチレンパウダー、シルクパウダー、セルロース系パウダー、穀類（米、麦、トウモロコシ、キビなど）のパウダー、豆類（大豆、小豆など）のパウダー等がある。
【００３９】
紫外線吸収剤としては、例えばパラアミノ安息香酸エチル、パラジメチルアミノ安息香酸エチルヘキシル、サリチル酸アミル及びその誘導体、パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル、桂皮酸オクチル、オキシベンゾン、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸塩、４−ターシャリーブチル−４−メトキシベンゾイルメタン、２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、アロエ抽出物等がある。
【００４０】
抗酸化剤としては、例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ビタミンＥ及びその誘導体、ユビデカキノン（ユビキノン）、ルチン、ルチングルコシド、白芥子抽出物、イネ抽出物、ムラサキシキブ抽出物、シラカバ抽出物、ハマメリス抽出物、ウーロン茶抽出物、黒豆加水分解抽出液、ハゴロモグサ抽出液等がある。
【００４１】
さらに必要ならば、本発明で用いる発酵物の作用効果及び特長を損なわない範囲で、他の活性成分（美白剤、皮膚老化防止・肌荒れ改善剤等）を配合してもよく、かかるものとしては、例えば美白剤であれば、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、コウジ酸及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン誘導体、エラグ酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体、ソウハクヒ抽出物、ユキノシタ抽出物、米糠抽出物、米糠抽出物加水分解物、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀類）、白芥子加水分解抽出物、ムラサキシキブ抽出物、ハスの実発酵物、党参抽出物、パンダヌス・アマリリフォリウス(Pandanus amaryllifolius Roxb.)抽出物、アルカンジェリシア・フラバ（Arcangelicia flava Merrilli）抽出物、カミツレ抽出物（商品名：カモミラET)、ジンコウ抽出物、ハマメリス抽出物、イタドリ抽出物、サワヒヨドリ抽出物、甘草抽出物、フキタンポポ抽出物、アルテア抽出物、ゲンノショウコ抽出物、ユキノシタ抽出物、ナツメ抽出物、シャクヤク抽出物、トウキ抽出物、モモ抽出物、緑藻類、紅藻類又は褐藻類の海藻の抽出物、アマモ等の海草の抽出物、リノール酸及びその誘導体もしくは加工物（例えばリポソーム化リノール酸など）、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体等が、又皮膚老化防止・肌荒れ改善成分であれば、動物又は魚由来のコラーゲン及びその誘導体、エラスチン及びその誘導体、セラミドなどの細胞間脂質、胎盤抽出物、ニコチン酸及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体（ジカリウム塩等）、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、アラントイン、α−ヒドロキシ酸類、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、コエンザイムＱ−１０、α−リポ酸、ピコリン、ゲンチアナエキス、甘草エキス、ハトムギエキス、カミツレエキス、ニンジンエキス、アロエエキスなどの生薬抽出エキス、米糠抽出物加水分解物、米抽出物加水分解物、低アレルゲン米抽出物加水分解物、米醗酵エキス、緑藻類、紅藻類又は褐藻類の海藻の抽出物、アマモ等の海草の抽出物、ソウハクヒエキス、ジュアゼイロ（Ｚｉｚｙｐｈｕｓ ｊｕａｚｅｉｒｏ）抽出物、ブナ抽出物、キダチアロエ抽出物、マンネンロウ抽出物、イチョウ抽出物、スギナ抽出物、ベニバナ抽出物、オタネニンジン抽出物、セイヨウニワトコ抽出物、ハゴロモグサ抽出物、レンゲ抽出物、マンゴー抽出物、チェリモヤ抽出物、マンゴスチン抽出物、タベブイア・インペチギノサ抽出物、酵母抽出物、卵殻膜抽出タンパク質、デオキシリボ核酸カリウム塩、ハス発酵液、紫蘭根抽出物、ムラサキシキブ抽出物、イネ抽出物、サンゴ草抽出物、花粉荷エキス等が挙げられる。
【００４２】
上記のコウジ酸誘導体としては、例えばコウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸ジブチレートなどのコウジ酸エステル類、コウジ酸エーテル類、コウジ酸グルコシドなどのコウジ酸糖誘導体等が、アスコルビン酸誘導体としては、例えばＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルマグネシウムなどのアスコルビン酸エステル塩類、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド（２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）、Ｌ−アスコルビン酸−５−グルコシド（５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）などのアスコルビン酸糖誘導体、それらアスコルビン酸糖誘導体の６位アシル化物（アシル基は、ヘキサノイル基、オクタノイル基、デカノイル基など）、Ｌ−アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸テトララウリン酸エステルなどのＬ−アスコルビン酸テトラ脂肪酸エステル類、３−Ｏ−エチルアスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸−６−Ｏ−パルミテートナトリウム等が、ハイドロキノン誘導体としては、アルブチン（ハイドロキノン−β−Ｄ−グルコピラノシド）、α−アルブチン（ハイドロキノン−α−Ｄ−グルコピラノシド）等が、レゾルシノール誘導体としては、例えば４−ｎ−ブチルレゾルシノール、４−イソアミルレゾルシノール等が、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体としては、例えば２，５−ジアセトキシ安息香酸、２−アセトキシ−５−ヒドロキシ安息香酸、２−ヒドロキシ−５−プロピオニルオキシ安息香酸等が、ニコチン酸誘導体としては、例えばニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等が、ビタミンＥ誘導体としては、例えばビタミンＥニコチネート、ビタミンＥリノレート、ビタミンＥリン酸エステルナトリウム塩等が、α−ヒドロキシ酸としては、例えば乳酸、リンゴ酸、コハク酸、クエン酸、α−ヒドロキシオクタン酸等がある。
【００４３】
次に、製造例、実施例（化粧料の処方例）及び試験例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。なお、以下に於いて、部はすべて重量部を、又％はすべて重量％を意味する。
【００４４】
製造例１．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、加熱殺菌した。この懸濁液にグルコアミラーゼ１ｇ、パパイン１ｇ及びセルラーゼ０．５ｇを加えた後、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）を１０８個／ｍＬ接種し、窒素気流下に３７℃で３日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４５０ｇ（固形分濃度２．８％）を得た。
【００４５】
製造例２．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてストレプトコッカス フェーカリスを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４２０ｇ（固形分濃度２．５％）を得た。
【００４６】
製造例３．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてカルノバクテリウム ディバージェンスを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１３８０ｇ（固形分濃度２．６％）を得た。
【００４７】
製造例４．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてロイコノストック メセンテロイズを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４４０ｇ（固形分濃度２．３％）を得た。
【００４８】
製造例５．
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてラクトコッカス プランタラムを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度２．３％）を得た。
【００４９】
製造例６．
培養日数を５日間とする他は製造例１と同様にしてハス種子の乳酸菌発酵物溶液１４４０ｇ（固形分濃度２．７％）を得た。。
【００５０】
製造例７．
発酵素材としてハスの種子の粉砕物に代えてハスの葉の細切物を用いる他は製造例１と同様にして、ハスの葉の乳酸菌発酵物溶液８５０ｇ（固形分濃度１．１％）を得た。
【００５１】
製造例８．
発酵素材としてハスの種子の粉砕物に代えてハスの根茎の細切物を用いる他は製造例１と同様にして、ハスの根茎の乳酸菌発酵物溶液１０５０ｇ（固形分濃度１．８％）を得た。
【００５２】
製造例９．
発酵素材としてハスの種子の粉砕物に代えてハスの全草の細切物を用いる他は製造例１と同様にして、ハスの全草の乳酸菌発酵物溶液１１５０ｇ（固形分濃度１．３％）を得た。
【００５３】
製造例１０．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、加熱殺菌した。この懸濁液に乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）を１０８個／ｍＬ接種し、窒素気流下に３７℃で３日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、ハス種子の乳酸菌発酵物溶液１２５０ｇ（固形分濃度１．２％）を得た。
【００５４】
製造例１１．
発酵素材として、ハスの種子の粉砕物に代えてアメリカキバスの種子の粉砕物を用いる他は製造例１と同様にして、アメリカキバスの種子の乳酸菌発酵物溶液１１５０ｇ（固形分濃度２．５％）を得た。
【００５５】
製造例１２．
製造例１と同様にして得たハス種子の乳酸菌発酵物溶液１０００ｇを凍結乾燥し、これを粉砕してハス種子の乳酸菌発酵物粉末２６ｇを得た。
【００５６】
製造例１３．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて麹菌であるアスペルギルス オリゼーを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の麹菌発酵物溶液１４００g（固形分濃度 ３．１％）を得た。
【００５７】
製造例１４．
麹菌として、アスペルギルス オリゼーに代えてアスペルギルス アワモリを用いる他は製造例１３と同様にして、ハス種子の麹菌発酵物溶液１４３０ｇ（固形分濃度３．０％）を得た。
【００５８】
製造例１５．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて納豆菌であるバシルス ナットーを用いる他は製造例１と同様にして、ハス種子の納豆菌発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度３．２％）を得た。
【００５９】
製造例１６．
納豆菌として、 バシルス ナットーに代えてバシルス サブチルスを用いる他は製造例１５と同様にして、ハス種子の納豆菌発酵物溶液１４４０ｇ（固形分濃度３．０％）を得た。
【００６０】
製造例１７．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて酵母であるサッカロミセス セレビシエを用いる他は製造例１と同様にしてハス種子の酵母発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度２．２％）を得た。
【００６１】
製造例１８．
酵母として、サッカロミセス セレビシエに代えてカンディダ ケフィールを用いる他は製造例１７と同様にしてハス種子の酵母発酵物溶液１４００ｇ（固形分濃度２．４％）を得た。
【００６２】
製造例１９．
微生物として乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えて麹菌のアスペルギルス オリゼーを、又発酵素材としてハスの種子に代えてアメリカキバスの種子を用いる他は製造例１と同様にして、アメリカキバスの種子の麹菌発酵物溶液１４１０ｇ（固形分濃度３．１％）を得た。
【００６３】
製造例２０．
微生物として、乳酸菌（ラクトバチルス プランタラム）に代えてテンペ菌であるリゾプス ミクロポラス オリゴスポラスを用いる他は製造例１と同様にしてハス種子のテンペ菌発酵物溶液１４２０ｇ（固形分濃度３．２％）を得た。
【００６４】
製造例２１．
テンペ菌として、リゾプス ミクロポラス オリゴスポラスに代えてリゾプス オリゼーを用いる他は製造例２０と同様にしてハス種子のテンペ菌発酵物溶液１４５０ｇ（固形分濃度３．１％）を得
【００６５】
比較製造例１．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、８０℃で２時間加熱した。この液をろ過して、ハス種子抽出物溶液１３６０ｇ（固形分濃度０．７％）を得た。
【００６６】
比較製造例２．
ハスの種子（渋皮を除去したもの）１００ｇを粉砕し、精製水１９００ｇを加えて懸濁液を調製し、加熱殺菌した。この液にパパイン１．０ｇを加えた後、ｐＨを７．５に調整し、４５℃に１５時間保持した。この液をろ過して、ハス種子酵素分解物溶液１４１０ｇ（固形分濃度２．１％）を得た。
【００６７】
実施例１．クリーム
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ５．０
ヘキサラン （注１） ４．０
パラフィン ５．０
グリセリルモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（20）ソルビタンモノステアレート ６．０
ブチルパラベン ０．１
（注１）株式会社テクノーブル製 トリオクタン酸グリセリル
［Ｂ成分］
製造例１のハス種子発酵物溶液 １０．０
グリセリン ５．０
カルボキシメチルモノステアレート ０．１
モイストン・Ｃ （注２） １．０
精製水 全量が１００部となる量
（注２）株式会社テクノーブル製 ＮＭＦ成分
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合してクリームを得た。
【００６８】
実施例２．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例６のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００６９】
実施例３．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１３のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７０】
実施例４．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１５のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７１】
実施例５．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１７のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７２】
実施例６．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１９のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７３】
実施例７．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて製造例２１のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００７４】
実施例８．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例２のハス種子発酵物溶液 １０．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。こ
れを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００７５】
実施例９．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例３のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７６】
実施例１０．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例４のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７７】
実施例１１．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例５のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７８】
実施例１２．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例７のハスの葉の発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００７９】
実施例１３．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例８のハスの根茎の発酵物溶液を用いるほかは実施例３と同様にして乳液を得た。
【００８０】
実施例１４．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１０のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８１】
実施例１５．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１４のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８２】
実施例１６．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１６のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８３】
実施例１７．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例１８のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８４】
実施例１８．乳液
実施例８のＢ成分中製造例２のハス種子発酵物溶液に代えて製造例２０のハス種子発酵物溶液を用いるほかは実施例８と同様にして乳液を得た。
【００８５】
実施例１９．ローション
［成分］ 部
製造例９のハスの全草の発酵物溶液 １０．０
エタノール １０．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
メチルパラベン ０．２
クエン酸 ０．１
クエン酸ナトリウム ０．３
カルボキシビニルポリマー ０．１
香料 適量
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が１００部となる量
上記の成分を混合してローションを得た。
【００８６】
実施例２０．化粧水
［Ａ成分］ 部
オリーブ油 １．０
ポリオキシエチレン（５．５）セチルアルコール ５．０
ブチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例１１のハス種子発酵物溶液 １０．０
エタノール ５．０
グリセリン ５．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
メチルパラベン ０．１
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加温後、Ａ成分にＢ成分を加えて攪拌し、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。
これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えて攪拌混合し、さらに３０℃以下まで冷却して化粧水を得た。
【００８７】
実施例２１．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例１のハス種子発酵物溶液 １０．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
水酸化カリウム ０．５
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００８８】
実施例２２．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム２．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００８９】
実施例２３．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム２．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９０】
実施例２４．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてアルブチン２．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９１】
実施例２５．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて米糠抽出物加水分解物（株式会社テクノーブル製、商品名「グレイスノウ＊雪＊ＨＰ」、固形分濃度3.5％）５．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９２】
実施例２６．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて白芥子抽出物（株式会社テクノーブル製、商品名「シナブランカ−ＷＨ」、固形分濃度1.0％）５．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９３】
実施例２７．乳液
実施例２１のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてγ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸１．０部を用いるほかは実施例２１と同様にして乳液を得た。
【００９４】
実施例２８．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例２のハス種子発酵物溶液 １０．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
水酸化カリウム ０．５
コエンザイムＱ−１０ ０．１
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００９５】
実施例２９．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ヘキサラン ４．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例３のハス種子発酵物溶液 １０．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
水酸化カリウム ０．５
豆乳乳酸菌発酵エキス １．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００９６】
実施例３０．プレストパウダー
［Ａ成分］ 部
ベンガラ ０．５
黄酸化鉄 １．５
黒酸化鉄 ０．１
酸化チタン １０．０
ナイロンパウダー ４．０
セリサイト 全量が１００部となる量
マイカ ２３．０
タルク ２５．０
製造例１２のハス種子発酵物粉末 ２．０
［Ｂ成分］
スクワラン １．０
メチルポリシロキサン ４．０
プロピルパラベン ０．１
デヒドロ酢酸 ０．１
流動パラフィン ２．０
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ混合攪拌し混合した後、２００メッシュのタイラーメッシュの篩にかけ、得られた混合粉末を金型に打型してプレストパウダーを得た。
【００９７】
実施例３１．リクイドファンデーション
［Ａ成分］ 部
ステアリン酸 ２．４
モノステアリン酸プロピレングリコール ２．０
セトステアリルアルコール ０．２
液状ラノリン ２．０
流動パラフィン ３．０
ミリスチン酸イソプロピル ８．５
プロピルパラベン ０．０５
［Ｂ成分］
製造例１のハス種子発酵物溶液 ５．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．２
ベントナイト ０．５
プロピレングリコール ４．０
トリエタノールアミン １．１
メチルパラベン ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン ８．０
タルク ４．０
着色顔料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ加温した後混合攪拌した。これを再加温し、上記のＣ成分を添加して型に流し込み、室温になるまで攪拌してリキッドファンデーションを得た。
【００９８】
実施例３２．クリームファンデーション
［Ａ成分］ 部
ステアリン酸 ５．０
セタノール ２．０
モノステアリン酸グリセリル ３．０
流動パラフィン ５．０
スクワラン ３．０
ミリスチン酸イソプロピル ８．０
ポリオキシエチレン（２０）モノステアリン酸グリセリル ２．０
プロピルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例２のハス種子発酵物溶液 ５．０
ソルビトール ３．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
トリエタノールアミン １．５
メチルパラベン ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン ８．０
タルク ２．０
カオリン ５．０
ベントナイト １．０
着色顔料 適 量
［Ｄ成分］
香料 ０．３
Ｃ成分を混合し、粉砕機で粉砕した。Ｂ成分を混合し、これに粉砕したＣ成分を加え、コロイドミルで均一分散させた。Ａ成分及び均一分散させたＢ、Ｃ成分をそれぞれ８０℃に加温後、Ｂ、Ｃ成分にＡ成分を攪拌しながら加え、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。これを５０℃まで冷却した後、Ｄ成分を加えて攪拌混合し、さらに攪拌しながら３０℃以下まで冷却してクリームファンデーションを得た。
【００９９】
実施例３３．ボディシャンプー
［Ａ成分］ 部
Ｎ−ラウロイルメチルアラニンナトリウム ２５．０
ヤシ油脂肪酸カリウム液（４０％） ２６．０
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド ３．０
メチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例４のハス種子発酵物溶液 １０．０
１，３−ブチレングリコール ２．０
精製水 全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してボディシャンプーを得た。
【０１００】
実施例３４．石けん
［Ａ成分］ 部
硬化ヒマシ油 ２６．０
ヤシ油 １０．０
オリーブ油 ４．０
［Ｂ成分］
水酸化ナトリウム ６．０
砂糖 １０．０
グリセリン ５．０
製造例５のハス種子発酵物溶液 ５．０
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
エタノール ２０．０
香料 適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加えてケン化した。これを攪拌しながら５０℃まで冷却し、Ｃ成分を加えた。これを型に流し込み冷却した後、室温下で数日間乾燥させ、充分に乾燥したものを型から取りだして石けんを得た。
【０１０１】
比較例１．クリーム
実施例１のＢ成分中、製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて比較製造例１のハス種子抽出物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【０１０２】
比較例２．クリーム
実施例１のＢ成分中、製造例１のハス種子発酵物溶液に代えて比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【０１０３】
試験例１．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（１）
製造例１、製造例２及び製造例３のハス種子発酵物溶液を試料として用い、乳酸菌の種類と得られる発酵物のチロシナーゼ抑制作用との関係を調べた。
【０１０４】
［試験方法］
培養Ｂ１６マウスメラノーマ細胞を、９６穴マイクロプレートに８×１０３個／穴播種し、１０％仔牛血清（FBS）含有イーグル最少必須培地（MEM）中、３７℃、５％ＣＯ２の条件下に１日間プレ培養した後、１０％FBS含有イーグルMEMで試料溶液を２．５又は５．０％の濃度（溶液として）となるように希釈した液に置換し、同条件で２日間培養した。
次に培養液を除去し、界面活性剤（Triton X-100）と５mMＬ−ドーパ溶液を添加して３７℃で反応を行った後、マイクロプレートリーダー（Model 450、バイオラッド社製）を用い、波長４９０nmでドーパ値を測定した。
試料無添加の場合（対照）についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたドーパ値に対する各試料添加時のドーパ値の相対値を求め、チロシナーゼ活性率（％）とした。
なお、比較のため、試料溶液の代わりに、３mMのアルブチンを添加した場合（陽性対照）についても同様の試験を行った。
【０１０５】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表１に示した。
【表１】
【０１０６】
表１に示す通り、いずれの乳酸菌で発酵させた発酵物溶液もチロシナーゼ活性を抑制したが、そのなかでもラクトバチルス プランタラムを用いて得られた発酵物溶液が、最も強いチロシナーゼ活性抑制作用を示した。
又、製造例４及び５で得られたハス種子発酵物溶液について、上記と同様の試験を実施したところ、いずれも製造例２及び３と略々同等のチロシナーゼ抑制作用を有することが判明した。
なお、本試験で陽性対照として用いたアルブチンも顕著にチロシナーゼ活性を阻害していることから、試験系が正常であったことが判る。
【０１０７】
試験例２．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（２）
製造例１（ハスの種子の発酵物溶液）、製造例７（ハスの葉の発酵物溶液）、製造例８（ハスの根茎の発酵物溶液）及び製造例１１（アメリカキバスの種子の発酵物溶液）の各発酵物溶液を試料として用い、試験例１と同様の方法により、ハス属植物の部位又は種類と得られる発酵物のチロシナーゼ抑制作用との関係を調べた。
なお、陽性対照としてはアルブチンを用いた。
【０１０８】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表２に示した。
【表２】
【０１０９】
表２に示す通り、発酵素材としてハスのいずれの部位を用いた場合も、又アメリカキバスの種子を用いた場合も、得られた発酵物溶液はいずれもチロシナーゼ活性を抑制したが、なかでもハスの種子を用いた発酵物溶液が最も強いチロシナーゼ活性抑制作用を示した。
【０１１０】
試験例３．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（３）
製造例１（ハスの種子の乳酸菌発酵物溶液）、製造例１３（ハスの種子の麹菌発酵物溶液）、製造例１５（ハスの種子の納豆菌発酵物溶液）、製造例１７（ハスの種子の酵母発酵物溶液）及び製造例２０（ハス種子のテンペ菌発酵物溶液）の各発酵物溶液を試料として用い、試験例１と同様の方法により、微生物の種類と得られる発酵物のチロシナーゼ活性抑制作用との関係を調べた。但し、試料溶液の濃度は５．０％とした。
なお、陽性対照としてはアルブチンを用いた。
【０１１１】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表３に示した。
【表３】
【０１１２】
表３の結果から、乳酸菌、麹菌、納豆菌、酵母及びテンペ菌のいずれの微生物を用いて得られるハス種子発酵物も、Ｂ１６細胞内チロシナーゼ活性を抑制する作用を有するが、それらの微生物のうちでも特に乳酸菌又は麹菌による発酵物がすぐれた抑制作用を示すことが判る。
【０１１３】
試験例４．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用（４）
試験例１と同様の方法を用いて、製造例１のハス種子発酵物溶液（本発明例）のチロシナーゼ抑制作用と比較製造例１のハス種子抽出物溶液及び比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液のチロシナーゼ抑制作用とを比較した。なお、陽性対照としてはアルブチンを用いた。
【０１１４】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表４に示した。
【表４】
【０１１５】
表４に示す通り、製造例１のハス種子発酵物溶液（本発明例）は強いチロシナーゼ活性抑制作用を示したが、比較製造例１のハス種子抽出物溶液及び比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液は、殆どチロシナーゼ活性抑制作用を示さなかった。
【０１１６】
試験例５．線維芽細胞賦活試験（１）
試験例１と同様の試料について、乳酸菌の種類と得られる発酵物の線維芽細胞賦活作用との関係を調べた。
【０１１７】
［試験方法］
ヒト真皮由来線維芽細胞NB1RGB(000824）を、０．５％FCS含有最少必須培地を入れた９６穴マイクロプレートに１×１０４ 個／穴播種し、３７℃で１日間プレ培養した後、培地に試料溶液を２．５％又は５．０％の濃度となるように添加し、３７℃でさらに６日間培養した。次に、培地を除去し界面活性剤(TRITON X-100）を添加した細胞処理液に、０．２％のＭＴＴを添加して３７℃に保持した後、マイクロプレートリーダー(Model 1450、バイオラッド社製）を用い、波長370−630nmでＭＴＴ値を測定した。
試料無添加の場合（対照）についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたＭＴＴ値に対する各試料添加時のＭＴＴ値の相対値を求め、線維芽細胞ＭＴＴ活性率（％）とした。
なお比較のため、試料溶液の代わりにグルコースを５０ｍＭ添加した場合（陽性対照）についても、同様の試験を行った。
【０１１８】
［結果］
結果を表５に示す。
【表５】
【０１１９】
表５に示す通り、いずれの乳酸菌で発酵させた発酵物溶液も線維芽細胞賦活作用を示したが、そのなかでもラクトバチルス プランタラムを用いて得られた発酵物溶液が、最も強い線維芽細胞賦活作用を示した。
又、製造例４及び５で得られたハス種子発酵物溶液について、上記と同様の試験を実施したところ、いずれも製造例２及び３と略々同等の線維芽細胞賦活作用を有することが判明した。
【０１２０】
試験例６．線維芽細胞賦活試験（２）
試験例２と同様の試料を用い、試験例５と同様にしてハス科植物の部位又は種類と得られる発酵物の線維芽細胞賦活作用との関係を調べた。
【０１２１】
［結果］
結果を表６に示す。
【表６】
【０１２２】
表６に示す通り、発酵素材としてハスのいずれの部位を用いた場合も、又アメリカキバスの種子を用いた場合も、得られた発酵物溶液はいずれも線維芽細胞賦活作用を示したが、なかでもハスの種子を用いた発酵物溶液が最も強い線維芽細胞賦活作用を示した。
【０１２３】
試験例７．線維芽細胞賦活試験（３）
試験例３と同様の試料を用い、試験例５と同様の方法により、微生物の種類と得られる発酵物の線維芽細胞賦活作用との関係を調べた。
【０１２４】
［結果］
結果を表７に示す。
【表７】
【０１２５】
表７に示す通り、乳酸菌、麹菌、納豆菌、酵母及びテンペ菌のいずれの微生物を用いた場合も、得られるハス種子発酵物は線維芽細胞を賦活する作用を示すが、なかでも乳酸菌又は麹菌を用いた場合に該賦活作用は最も顕著となる。
【０１２６】
試験例８．線維芽細胞賦活試験（４）
試験例４と同様の試料を用い、試験例５と同様の方法により、本発明のハス科植物発酵物と従来公知のハス科植物由来成分の線維芽細胞賦活作用を対比した。
【０１２７】
［結果］
結果を表８に示す。
【表８】
【０１２８】
表８に示す通り、製造例１のハス種子発酵物溶液（本発明例）は強い線維芽細胞賦活作用を示したが、比較製造例１のハス種子抽出物溶液及び比較製造例２のハス種子酵素分解物溶液は、殆ど線維芽細胞賦活作用を示さなかった。
【０１２９】
試験例９．皮膚一次刺激性試験
モルモットを用いて、本発明のハス属植物発酵物の皮膚一次刺激性を調べた。
［試験方法］
Hartley系モルモット（雄、４週齢）３匹(GA、GB及びGC）を用い、その背部をバリカン及び電気シェーバーで除毛した後、除毛部に、パッチテスト用絆創膏の布地部（直径２５mm）に製造例１もしくは製造例９の発酵物溶液、又対照として精製水０．５mLを湿潤させたものを貼付した。貼付開始から２４時間後に絆創膏を除去し、除去直後（貼付開始から２４時間後）、除去２４時間後（貼付開始から４８時間後） 及び除去４８時間後（貼付開始から７２時間後）に、絆創膏貼付部位の紅斑、痂皮及び浮腫形成の程度を観察し、下記のドレイズ（Draize）の判定基準に従って評価した。
【０１３０】
（紅斑）
スコア 皮膚の状態
０ ： 紅斑なし
１ ： 極く軽度の紅斑
２ ： 明らかな紅斑
３ ： 中程度から強い紅斑
４ ： 深紅色の強い紅斑に軽い痂皮形成
（浮腫）
スコア 皮膚の状態
０ ： 浮腫なし
１ ： 極く軽度の浮腫
２ ： 明らかな浮腫（周囲と明らかに区別可能）
３ ： 中程度の浮腫（１mm以上の盛り上がり）
４ ： 強い浮腫（さらに周囲にも広がり）
【０１３１】
［結果］
結果を表９に示す。
【表９】
【０１３２】
表９の結果から明らかな通り、本発明で化粧料配合成分として用いるハス発酵物は皮膚に対する一次刺激性がなく、生体安全性に極めてすぐれている。
【０１３３】
試験例１０．モニターテスト
実施例１のクリームと比較例１及び２のクリームについて、モニターテストにより皮膚に対する効果を調べた。
［試験方法］
無作為に抽出した年齢１８〜５０歳の女性４０名を被験者として２０名ずつ２つのグループ（Ａ、Ｂ）に分け、各グループに、実施例１と比較例１又は２のクリームの２種の組み合わせのいずれかを割り振り、それぞれ左右の頬部に、実施例又は比較例のクリームを１日２回（朝、晩）、1ヵ月間塗布してもらった後、シミ、ソバカスに対する改善効果、小ジワに対する改善効果及び肌のはり、艶に対する改善効果を、以下の評価基準に基づいて評価した。
【０１３４】
［評価基準］
（シミ、ソバカスに対する改善効果）
Ａ：非常に改善された
Ｂ：かなり改善された
Ｃ：僅かに改善された
Ｄ：変わらない
Ｅ：かえって目立つようになった
（小ジワに対する改善効果）
Ａ：殆ど目立たなくなった
Ｂ：かなり目立たなくなった
Ｃ：わずかに目立たなくなった
Ｄ：変わらない
Ｅ：かえって増えた
（肌のはり、艶に対する改善効果）
Ａ：明らかに改善された
Ｂ：かなり改善された
Ｃ：僅かに改善された
Ｄ：変わらない
Ｅ：かえって悪くなった
【０１３５】
［結果］
結果を表１０に示す。なお、表１０のＡ〜Ｅの各評価欄の数字は、被験者２０名中当該評価を行った被験者の数を示す。
【表１０】
【０１３６】
表１０に示す通り、ハス種子発酵物を活性成分として配合してなる本発明のクリームは、該成分の有するメラニン生成抑制作用と線維芽細胞賦活作用の複合に基づく相乗的効果により、皮膚の老化或いは不健全化の典型的な症状であるシミ、ソバカスやシワ、たるみ等のいずれに対してもすぐれた改善作用を示す。
これに対して、従来のハス種子抽出物又はハス種子酵素分解物を配合したクリームでは殆ど改善効果が見られず、明らかに有効性に違いがある結果となった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
スイレン科（Nympaeaceae)ハス属(Nelumbo)の植物を微生物で発酵させて得られる発酵物を配合したことを特徴とする化粧料。
【請求項２】
スイレン科ハス属の植物がハス（Nelumbo nucifera Gaertner)又はアメリカキバス（Nelumbo lutea pers)である請求項１に記載の化粧料。
【請求項３】
スイレン科ハス属植物の種子を用いる請求項１又は２に記載の化粧料。
【請求項４】
発酵に用いる微生物が、乳酸菌、麹菌、納豆菌、テンペ菌及び酵母から選ばれたものである請求項１に記載の化粧料。
【請求項５】
発酵に用いる微生物が、乳酸菌及び麹菌から選ばれたものである請求項４に記載の化粧料。
【請求項６】
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラム（Lactobacillus pl antarum）を用いる請求項４又は５に記載の化粧料。
【請求項７】
麹菌としてアスペルギルス オリゼー（Aspergillus oryzae）を用いる請求項４又は５に記載の化粧料。
【請求項８】
スイレン科ハス属植物を、その乳酸菌発酵前及び／又は発酵時に、蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、ペクチン質分解酵素及び繊維素分解酵素から選ばれる少なくとも１種の酵素で加水分解処理する請求項１に記載の化粧料。
【請求項９】
蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、ペクチン質分解酵素及び繊維素分解酵素の４種の酵素を組み合わせ用いる請求項８に記載の化粧料。
【請求項１】
スイレン科（Nympaeaceae)ハス属(Nelumbo)の植物を微生物で発酵させて得られる発酵物を配合したことを特徴とする化粧料。
【請求項２】
スイレン科ハス属の植物がハス（Nelumbo nucifera Gaertner)又はアメリカキバス（Nelumbo lutea pers)である請求項１に記載の化粧料。
【請求項３】
スイレン科ハス属植物の種子を用いる請求項１又は２に記載の化粧料。
【請求項４】
発酵に用いる微生物が、乳酸菌、麹菌、納豆菌、テンペ菌及び酵母から選ばれたものである請求項１に記載の化粧料。
【請求項５】
発酵に用いる微生物が、乳酸菌及び麹菌から選ばれたものである請求項４に記載の化粧料。
【請求項６】
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラム（Lactobacillus pl antarum）を用いる請求項４又は５に記載の化粧料。
【請求項７】
麹菌としてアスペルギルス オリゼー（Aspergillus oryzae）を用いる請求項４又は５に記載の化粧料。
【請求項８】
スイレン科ハス属植物を、その乳酸菌発酵前及び／又は発酵時に、蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、ペクチン質分解酵素及び繊維素分解酵素から選ばれる少なくとも１種の酵素で加水分解処理する請求項１に記載の化粧料。
【請求項９】
蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、ペクチン質分解酵素及び繊維素分解酵素の４種の酵素を組み合わせ用いる請求項８に記載の化粧料。
【公開番号】特開２０１０−４３０８８（Ｐ２０１０−４３０８８Ａ）
【公開日】平成２２年２月２５日（２０１０．２．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２１１３１４（Ｐ２００９−２１１３１４）
【出願日】平成２１年９月１４日（２００９．９．１４）
【分割の表示】特願２００５−７０５６６（Ｐ２００５−７０５６６）の分割
【原出願日】平成１７年３月１４日（２００５．３．１４）
【出願人】（０００１６２０２１）共栄化学工業株式会社 (42)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年２月２５日（２０１０．２．２５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月１４日（２００９．９．１４）
【分割の表示】特願２００５−７０５６６（Ｐ２００５−７０５６６）の分割
【原出願日】平成１７年３月１４日（２００５．３．１４）
【出願人】（０００１６２０２１）共栄化学工業株式会社 (42)
【Ｆターム（参考）】
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