本発明は、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の非対称性の接触境界領域に結合する部分であって、ＲＴＫのリガンド誘導性トランス自己リン酸化を阻害する部分を提供する。本発明はまた、ＲＴＫに関連する疾患を処置または予防するための方法およびＲＴＫの非対称性の接触境界領域に結合する部分を同定するための方法を提供する。本発明は、ＲＴＫ自己リン酸化、酵素活性化、および細胞シグナル伝達に必要とされるステップである非対称性のチロシンキナーゼ二量体形成の阻害による、病理学的に活性化されたＲＴＫ（ＦＧＦ受容体など）の薬理学的阻害のための新規なアプローチを提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の非対称性の接触境界領域に結合する部分であって、該ＲＴＫのリガンド誘導性トランス自己リン酸化を阻害する、部分。
【請求項２】
前記ＲＴＫの触媒ドメインのヌクレオチド結合部位に結合しない、請求項１に記載の部分。
【請求項３】
前記ＲＴＫの一方の単量体のＮローブ上の非対称性の接触境界領域に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項４】
前記ＲＴＫの一方の単量体のＣローブ上の非対称性の接触境界領域に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項５】
内因性キナーゼ活性の喪失を引き起こさない、請求項１に記載の部分。
【請求項６】
ＲＴＫ単量体間の立体的な制約を増加させる、請求項１に記載の部分。
【請求項７】
前記ＲＴＫの二量体化を妨げない、請求項１に記載の部分。
【請求項８】
前記ＲＴＫの細胞質ドメインの二量体化を妨げる、請求項１に記載の部分。
【請求項９】
前記ＲＴＫは、線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）である、請求項１に記載の部分。
【請求項１０】
前記線維芽細胞増殖因子受容体は、線維芽細胞増殖因子受容体１（ＦＧＦＲ１）である、請求項９に記載の部分。
【請求項１１】
前記線維芽細胞増殖因子受容体は、線維芽細胞増殖因子受容体２（ＦＧＦＲ２）である、請求項９に記載の部分。
【請求項１２】
前記線維芽細胞増殖因子受容体は、線維芽細胞増殖因子受容体３（ＦＧＦＲ３）である、請求項９に記載の部分。
【請求項１３】
前記線維芽細胞増殖因子受容体は、線維芽細胞増殖因子受容体４（ＦＧＦＲ４）である、請求項９に記載の部分。
【請求項１４】
ＦＧＦＲ１のアミノ酸残基Ａｒｇ５７７、ＦＧＦＲ２のアミノ酸残基Ａｒｇ５７９、またはＦＧＦＲ２のアミノ酸残基Ａｒｇ５８０に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項１５】
ＦＧＦＲ１のアミノ酸残基Ａｓｐ５１９に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項１６】
ＦＧＦＲ１のＣ４８８、Ｆ４８９、Ｓ５１８、Ｔ５２１、Ｅ５２２、Ｄ５５４、Ｇ５５５、Ｐ５５６、Ｑ５７４、Ｐ５８７、Ｐ５７９、Ｗ６９１、Ｔ６９５、Ｐ７０２、Ｇ７０３、およびＰ７０５からなる群より選択されるアミノ酸残基に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項１７】
ＦＧＦＲ１のＲ５７７、Ｄ５１９、Ｃ４８８、Ｆ４８９、Ｓ５１８、Ｔ５２１、Ｅ５２２、Ｄ５５４、Ｇ５５５、Ｐ５５６、Ｑ５７４、Ｐ５８７、Ｐ５７９、Ｗ６９１、Ｔ６９５、Ｐ７０２、Ｇ７０３、およびＰ７０５からなる群より選択される少なくとも２つのアミノ酸残基に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項１８】
ＦＧＦＲ２のＣ４９１、Ｆ４９２、Ｒ５７７、Ｐ５８２、Ｉ５９０、Ｐ７０５、Ｇ７０６、およびＰ７０８からなる群より選択されるアミノ酸残基に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項１９】
ＦＧＦＲ２のＣ４９１、Ｆ４９２、Ｒ５７７、Ｐ５８２、Ｉ５９０、Ｐ７０５、Ｇ７０６、およびＰ７０８からなる群より選択される少なくとも２つのアミノ酸残基に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項２０】
前記ＲＴＫの単量体のβ１−β２ループ、前記ＲＴＫの単量体のβ３−αＣループ、前記ＲＴＫの単量体のβ４−Ｂ５ループ、前記ＲＴＫの単量体のαＤ−αＥループ、前記ＲＴＫの単量体のαＦヘリックス、および前記ＲＴＫの単量体のαＦ−αＧループからなる群より選択されるＲＴＫの領域に結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項２１】
前記ＲＴＫ上のコンフォメーションエピトープに結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項２２】
前記コンフォメーションエピトープは、前記ＲＴＫの前記非対称性の接触境界領域における２つ以上の残基から構成される、請求項２１に記載の部分。
【請求項２３】
前記コンフォメーションエピトープは、Ｒ５７７、Ｄ５１９、Ｃ４８８、Ｆ４８９、Ｓ５１８、Ｔ５２１、Ｅ５２２、Ｄ５５４、Ｇ５５５、Ｐ５５６、Ｑ５７４、Ｐ５８７、Ｐ５７９、Ｗ６９１、Ｔ６９５、Ｐ７０２、Ｇ７０３、およびＰ７０５からなる群より選択されるアミノ酸残基を含む、請求項２１に記載の部分。
【請求項２４】
前記コンフォメーションエピトープは、ＦＧＦＲ２のＣ４９１、Ｆ４９２、Ｒ５７７、Ｐ５８２、Ｉ５９０、Ｐ７０５、Ｇ７０６、およびＰ７０８からなる群より選択されるアミノ酸残基を含む、請求項２１に記載の部分。
【請求項２５】
前記ＲＴＫ上の近接エピトープに結合する、請求項１に記載の部分。
【請求項２６】
前記近接エピトープは、前記ＲＴＫの前記非対称性の接触境界領域における２つ以上の残基から構成される、請求項２５に記載の部分。
【請求項２７】
小分子である、請求項１に記載の部分。
【請求項２８】
前記小分子は、ＦＧＦＲ１のアミノ酸残基Ｒ５７７、Ｄ５１９、Ｃ４８８、Ｆ４８９、Ｓ５１８、Ｔ５２１、Ｅ５２２、Ｄ５５４、Ｇ５５５、Ｐ５５６、Ｑ５７４、Ｐ５８７、Ｐ５７９、Ｗ６９１、Ｔ６９５、Ｐ７０２、Ｇ７０３、およびＰ７０５からなる群より選択される少なくとも１つのアミノ酸残基に結合する、請求項２７に記載の部分。
【請求項２９】
前記小分子は、前記ＲＴＫの単量体のβ１−β２ループ、前記ＲＴＫの単量体のβ３−αＣループ、前記ＲＴＫの単量体のβ４−Ｂ５ループ、前記ＲＴＫの単量体のαＤ−αＥループ、前記ＲＴＫの単量体のαＦヘリックス、および前記ＲＴＫの単量体のαＦ−αＧループからなる群より選択される領域に結合する、請求項２７に記載の部分。
【請求項３０】
前記小分子は、線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）の非対称性の接触境界領域に基づいて設計される、請求項２７に記載の部分。
【請求項３１】
ペプチド性分子である、請求項１に記載の部分。
【請求項３２】
前記ペプチド性分子は、線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）の非対称性の接触境界領域に基づいて設計される、請求項３１に記載の部分。
【請求項３３】
前記ペプチド性分子は、ＦＧＦＲ１のアミノ酸残基Ｒ５７７、Ｄ５１９、Ｃ４８８、Ｆ４８９、Ｓ５１８、Ｔ５２１、Ｅ５２２、Ｄ５５４、Ｇ５５５、Ｐ５５６、Ｑ５７４、Ｐ５８７、Ｐ５７９、Ｗ６９１、Ｔ６９５、Ｐ７０２、Ｇ７０３、およびＰ７０５からなる群より選択されるアミノ酸残基の少なくとも１つに結合する、請求項３２に記載の部分。
【請求項３４】
前記ペプチド性分子は、前記ＲＴＫの単量体のβ１−β２ループ、前記ＲＴＫの単量体のβ３−αＣループ、前記ＲＴＫの単量体のβ４−Ｂ５ループ、前記ＲＴＫの単量体のαＤ−αＥループ、前記ＲＴＫの単量体のαＦヘリックス、および前記ＲＴＫの単量体のαＦ−αＧループからなる群より選択される領域に結合する、請求項３２に記載の部分。
【請求項３５】
前記ペプチド性分子は、ＦＧＦＲ１のアミノ酸残基５７６〜５９４と少なくとも８０％同一の構造を含む、請求項３２に記載の部分。
【請求項３６】
前記ペプチド性分子は、ＦＧＦＲ２のアミノ酸残基５７９〜５９７と少なくとも８０％同一の構造を含む、請求項３２に記載の部分。
【請求項３７】
単離抗体またはその抗原結合性一部分である、請求項１に記載の部分。
【請求項３８】
前記単離抗体またはその抗原結合性一部分は、イントラボディである、請求項３７に記載の部分。
【請求項３９】
前記抗体またはその抗原結合性一部分は、ヒト抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、およびキメラ抗体からなる群より選択される、請求項３７に記載の部分。
【請求項４０】
前記抗体またはその抗原結合性一部分は、ＩｇＧ１定常領域、ＩｇＧ２定常領域、ＩｇＧ３定常領域、ＩｇＧ４定常領域、ＩｇＭ定常領域、ＩｇＡ定常領域、およびＩｇＥ定常領域からなる群より選択される重鎖定常領域を含む、請求項３９に記載の部分。
【請求項４１】
前記抗体重鎖定常領域は、ＩｇＧ１である、請求項４０に記載の部分。
【請求項４２】
前記抗体またはその抗原結合性一部分は、単鎖Ｆｖ断片、ＳＭＩＰ、アフィボディ、アビマー、ナノボディ、および単一ドメイン抗体である、請求項３７に記載の部分。
【請求項４３】
前記抗体またはその抗原結合性一部分は、１×１０^−７Ｍ以下、より好ましくは５×１０^−８Ｍ以下、より好ましくは１×１０^−８Ｍ以下、より好ましくは５×１０^−９Ｍ以下からなる群より選択されるＫＤで受容体チロシンキナーゼの非対称性の接触境界領域に結合する、請求項３７に記載の部分。
【請求項４４】
請求項３７から４３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性一部分を産生するハイブリドーマ。
【請求項４５】
線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）の非対称性の接触境界領域上のコンフォメーションエピトープに結合する部分であって、該ＦＧＦＲのリガンド誘導性トランス自己リン酸化を阻害する、部分。
【請求項４６】
ＦＧＦＲ１のＲ５７７、Ｄ５１９、Ｃ４８８、Ｆ４８９、Ｓ５１８、Ｔ５２１、Ｅ５２２、Ｄ５５４、Ｇ５５５、Ｐ５５６、Ｑ５７４、Ｐ５８７、Ｐ５７９、Ｗ６９１、Ｔ６９５、Ｐ７０２、Ｇ７０３、およびＰ７０５からなる群より選択されるアミノ酸残基または該残基から１〜５Å以内に結合して、ＦＧＦＲ１のリガンド誘導性トランス自己リン酸化を阻害する、部分。
【請求項４７】
ＦＧＦＲ２のＣ４９１、Ｆ４９２、Ｒ５７７、Ｐ５８２、Ｉ５９０、Ｐ７０５、Ｇ７０６、およびＰ７０８からなる群より選択されるアミノ酸残基に結合する、部分。
【請求項４８】
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の非対称性の接触境界領域に結合する部分であって、酵素として働くＲＴＫ単量体のＮローブと、基質として働くＲＴＫ単量体のＣローブとの間の境界領域を破壊する、部分。
【請求項４９】
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の非対称性の接触境界領域に結合する部分であって、該ＲＴＫの逆の脱リン酸化を阻害する、部分。
【請求項５０】
請求項１から４３および請求項４５から４９のいずれか一項に記載の部分ならびに薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項５１】
被験体におけるＲＴＫに関連する疾患を処置または予防するための薬の調製における、請求項１から４３および請求項４５から４９のいずれか一項に記載の部分の有効量の使用。
【請求項５２】
前記ＲＴＫに関連する疾患は、がんおよび重度の骨障害からなる群より選択される、請求項５１に記載の使用。
【請求項５３】
前記重度の骨障害は、軟骨無形成症、クルゾン症候群、およびシーザー−ショッツェン症候群からなる群より選択される障害である、請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
前記がんは、膠芽腫、多発性骨髄腫、前立腺がん、膵臓がん、膀胱がん、および乳がんからなる群より選択される、請求項５２に記載の使用。
【請求項５５】
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の非対称性の接触境界領域に結合して、該ＲＴＫのリガンド誘導性トランス自己リン酸化を阻害する部分を同定するための方法であって、
ＲＴＫを候補部分と接触させるステップ；
同時にまたは順次、該ＲＴＫを、該ＲＴＫに対するリガンドと接触させるステップ；
酵素として機能するＲＴＫ単量体のＮローブと、基質として機能するＲＴＫ単量体のＣローブとの間の配置、配向、および／または距離に該部分が影響するか否かを決定して、該ＲＴＫの非対称性の接触境界領域に結合して、該ＲＴＫのリガンド誘導性トランス自己リン酸化を阻害する部分を同定するステップ
を含む、方法。
【請求項５６】
前記部分は、前記ＲＴＫのリガンド誘導性トランス自己リン酸化を阻害する、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記部分は、内因性のＲＴＫキナーゼ活性の喪失を引き起こさない、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の非対称性の接触境界領域に結合する小分子であって、該ＲＴＫのトランス自己リン酸化を阻害する、小分子。
【請求項５９】
ＦＧＦＲ１のＲ５７７、Ｄ５１９、Ｃ４８８、Ｆ４８９、Ｓ５１８、Ｔ５２１、Ｅ５２２、Ｄ５５４、Ｇ５５５、Ｐ５５６、Ｑ５７４、Ｐ５８７、Ｐ５７９、Ｗ６９１、Ｔ６９５、Ｐ７０２、Ｇ７０３、およびＰ７０５からなる群より選択されるアミノ酸残基または該残基から１〜５Å以内に結合する、請求項５８に記載の小分子。
【請求項６０】
ＦＧＦＲ２のＣ４９１、Ｆ４９２、Ｒ５７７、Ｐ５８２、Ｉ５９０、Ｐ７０５、Ｇ７０６、およびＰ７０８からなる群より選択されるアミノ酸残基に結合する、請求項５８に記載の小分子。
【請求項６１】
前記ＲＴＫの単量体のβ１−β２ループ、前記ＲＴＫの単量体のβ３−αＣループ、前記ＲＴＫの単量体のβ４−Ｂ５ループ、前記ＲＴＫの単量体のαＤ−αＥループ、前記ＲＴＫの単量体のαＦヘリックス、および前記ＲＴＫの単量体のαＦ−αＧループからなる群より選択される領域に結合する、請求項５８に記載の小分子。

【図２Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図４Ｄ】

【図４Ｅ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図７】

【図９】

【図１２】

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図３】

【図４Ａ】

【図５】

【図８】

【図１０】

【図１１】

【公表番号】特表２０１３−５１７２８２（Ｐ２０１３−５１７２８２Ａ）
【公表日】平成２５年５月１６日（２０１３．５．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５４９０７０（Ｐ２０１２−５４９０７０）
【出願日】平成２３年１月１３日（２０１１．１．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２１１０９
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０８８１９６
【国際公開日】平成２３年７月２１日（２０１１．７．２１）
【出願人】（５９３１５２７２０）
【氏名又は名称原語表記】Ｙａｌｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
【Ｆターム（参考）】