固相及び溶液相の組み合わせ技術を使用したインシュリン分泌性ペプチド合成
本発明は、固相及び溶液相（「ハイブリッド」）アプローチを使用して合成されるインシュリン分泌性ペプチドの調製に関する。一般的に、アプローチは、固相化学を使用して３つの異なるペプチド中間体フラグメントを合成することを含む。溶液相化学を次に使用して、追加のアミノ酸材料を第３のフラグメントに加えて、それを次に第２のフラグメントに、そして次に第１のフラグメントに溶液中で結合させる。あるいは、異なる第２のフラグメントを、第１のフラグメントに固相中で結合させる。次に、溶液相化学を次に使用して、追加のアミノ酸材料を異なる第３のフラグメントに加える。後に、この異なる第３のフラグメントを、結合した第１の及び異なる第２のフラグメントに溶液相中で結合させる。フラグメントの１つにおける疑似プロリンの使用によって、そのフラグメントの固相合成が容易になり、また、このフラグメントの他のフラグメントへの後の溶液相結合が容易になる。本発明は、インシュリン分泌性ペプチド、例えばＧＬＰ−１（７−３６）並びにその天然及び非天然対応物などを形成するために非常に有用である。
Notice: Undefined index: DEJ in /mnt/www/gzt_disp.php on line 298
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１５０】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）（配列番号６）
【表１５１】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号６）
【表１５２】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号７）
【表１５３】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
ｅ）（配列番号８）
【表１５４】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号１４）
【表１５５】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１５６】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１５７】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項２】
請求項１記載のインシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１５８】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）（配列番号６）
【表１５９】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号６）
【表１６０】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号７）
【表１６１】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
ｅ）（配列番号８）
【表１６２】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１６３】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１６４】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１６５】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項３】
請求項１又は請求項２記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）インシュリン分泌性ペプチドのＮ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表１６６】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５ Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを与えること、
及び
ｊ）工程ｉ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させ、アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表１６７】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；そして
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項４】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表１６８】
を有する、請求項１〜３のいずれか一項記載の方法。
【請求項５】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１６９】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号５）
【表１７０】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを与えること、
ｃ）（配列番号７）
【表１７１】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを溶液中で提供すること、
ｄ）（配列番号１３）
【表１７２】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供するために、第３のペプチドフラグメントを溶液中で第２のペプチドフラグメントに結合させること、
ｅ）（配列番号８）
【表１７３】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを固相樹脂から除去して、第４のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１７４】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１７５】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１７６】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項６】
請求項５記載のインシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１７７】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号５）
【表１７８】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを与えること、
ｃ）（配列番号７）
【表１７９】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを溶液中で提供すること、
ｄ）（配列番号１３）
【表１８０】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供するために、第３のペプチドフラグメントを溶液中で固相中で第２のペプチドフラグメントに結合させること、
ｅ）（配列番号８）
【表１８１】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを固相樹脂から除去して、第４のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１８２】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１８３】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１８４】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項７】
請求項５又は請求項６記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）インシュリン分泌性ペプチドのＮ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表１８５】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５ Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを与えること、
及び
ｊ）工程ｉ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させ、アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表１８６】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；及び
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項８】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表１８７】
を有する、請求項５〜７のいずれか一項記載の方法。
【請求項９】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１３）
【表１８８】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基が、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメント又はその対応物を提供すること、
ｂ）（配列番号８）
【表１８９】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１９０】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号９）
【表１９１】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｅ）第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１９２】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項１０】
請求項９記載のインシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１３）
【表１９３】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基が、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメント又はその対応物を提供すること、
ｂ）（配列番号８）
【表１９４】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１９５】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号９）
【表１９６】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｅ）第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１９７】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項１１】
請求項９又は請求項１０記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）インシュリン分泌性ペプチドのＮ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表１９８】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５ Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを与えること、
及び
ｊ）工程ｉ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させ、アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表１９９】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；そして
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項１２】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表２００】
を有する、請求項９〜１１のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
アミノ酸配列（配列番号１４）
【表２０１】
のペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｈ−及びＦｍｏｃ−から選択され；
Ｂ’は、−ＯＨ又は固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項１４】
疑似プロリンのジペプチド残基が、疑似プロリンのＳｅｒ−Ｓｅｒ残基である、請求項１３記載のペプチド。
【請求項１５】
アミノ酸配列（配列番号１５）
【表２０２】
のペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｈ−及びＦｍｏｃ−から選択され；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項１６】
疑似プロリンのジペプチド残基が、疑似プロリンのＳｅｒ−Ｓｅｒ残基である、請求項１５記載のペプチド。
【請求項１７】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１６）
【表２０３】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）工程ａ）の第１のペプチドフラグメントを固相樹脂から切断して、第１のペプチドフラグメント（配列番号１６）
【表２０４】
式中、Ｂ’は、−ＯＨである；
を溶液中で産生させること、
ｃ）（配列番号１７）
【表２０５】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｄ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号１７）
【表２０６】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
を含む方法。
【請求項１８】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１８）
【表２０７】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｂ）工程ａ）のペプチドフラグメントを固相樹脂から切断して、ペプチドフラグメント（配列番号１８）
【表２０８】
式中、Ｂ’は、−ＯＨである
を溶液中で産生させること、
を含む方法。
【請求項１９】
請求項１７記載の方法であって、以下の工程：
ｅ）（配列番号１８）
【表２０９】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｆ）工程ｅ）の第４のペプチドフラグメントを固相樹脂から切断して、第４のペプチドフラグメント（配列番号１８）
【表２１０】
式中、Ｂ’は、−ＯＨである
を溶液中で産生させること、
をさらに含む方法。
【請求項２０】
請求項１９記載の方法であって、以下の工程：
ｇ）（配列番号１０）
【表２１１】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させること、
をさらに含む方法。
【請求項２１】
請求項２０記載の方法であって、以下の工程：
ｈ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表２１２】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項２２】
請求項２１記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表２１３】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；及び
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えるために、工程ｈ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させること、
をさらに含む方法。
【請求項２３】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表２１４】
を有する、請求項１７〜２２のいずれか一項記載の方法。
【請求項２４】
アミノ酸配列（配列番号１８）
【表２１５】
のペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｈ−及びＦｍｏｃ−から選択され；
Ｂ’は、−ＯＨ又は固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項２５】
疑似プロリンのジペプチド残基が、疑似プロリンのＳｅｒ−Ｓｅｒ残基である、請求項２４記載のペプチド。
【請求項２６】
アミノ酸配列（配列番号１７）
【表２１６】
を有するペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；そして
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項２７】
Ｘ３５が、Ａｉｂである、請求項２６記載のペプチド。
【請求項２８】
アミノ酸配列（配列番号１６）
【表２１７】
式中、
Ｂ’は、固相樹脂又は−ＯＨであり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；そして
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、
を有するペプチド。
【請求項２９】
Ｘ３５が、Ａｉｂである、請求項２８記載のペプチド。
【請求項３０】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法及び本明細書において先に定義されたペプチド。
【請求項１】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１５０】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）（配列番号６）
【表１５１】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号６）
【表１５２】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号７）
【表１５３】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
ｅ）（配列番号８）
【表１５４】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号１４）
【表１５５】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１５６】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１５７】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項２】
請求項１記載のインシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１５８】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）（配列番号６）
【表１５９】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号６）
【表１６０】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号７）
【表１６１】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
ｅ）（配列番号８）
【表１６２】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１６３】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１６４】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１６５】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項３】
請求項１又は請求項２記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）インシュリン分泌性ペプチドのＮ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表１６６】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５ Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを与えること、
及び
ｊ）工程ｉ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させ、アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表１６７】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；そして
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項４】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表１６８】
を有する、請求項１〜３のいずれか一項記載の方法。
【請求項５】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１６９】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号５）
【表１７０】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを与えること、
ｃ）（配列番号７）
【表１７１】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを溶液中で提供すること、
ｄ）（配列番号１３）
【表１７２】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供するために、第３のペプチドフラグメントを溶液中で第２のペプチドフラグメントに結合させること、
ｅ）（配列番号８）
【表１７３】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを固相樹脂から除去して、第４のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１７４】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１７５】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１７６】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項６】
請求項５記載のインシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号５）
【表１７７】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号５）
【表１７８】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを与えること、
ｃ）（配列番号７）
【表１７９】
式中、
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを溶液中で提供すること、
ｄ）（配列番号１３）
【表１８０】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供するために、第３のペプチドフラグメントを溶液中で固相中で第２のペプチドフラグメントに結合させること、
ｅ）（配列番号８）
【表１８１】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを固相樹脂から除去して、第４のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｆ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１８２】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
ｇ）（配列番号９）
【表１８３】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第７のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｈ）第７のペプチドフラグメントを第６のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１８４】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項７】
請求項５又は請求項６記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）インシュリン分泌性ペプチドのＮ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表１８５】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５ Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを与えること、
及び
ｊ）工程ｉ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させ、アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表１８６】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；及び
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項８】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表１８７】
を有する、請求項５〜７のいずれか一項記載の方法。
【請求項９】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１３）
【表１８８】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基が、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメント又はその対応物を提供すること、
ｂ）（配列番号８）
【表１８９】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１９０】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号９）
【表１９１】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｅ）第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１９２】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項１０】
請求項９記載のインシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１３）
【表１９３】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基が、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメント又はその対応物を提供すること、
ｂ）（配列番号８）
【表１９４】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｃ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号８）
【表１９５】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
ｄ）（配列番号９）
【表１９６】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、−ＯＨであり；そして
Ｈ及びＥの各々は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｅ）第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させて、（配列番号１０）
【表１９７】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを提供すること、
を含む方法。
【請求項１１】
請求項９又は請求項１０記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）インシュリン分泌性ペプチドのＮ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表１９８】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５ Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むインシュリン分泌性ペプチドを与えること、
及び
ｊ）工程ｉ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させ、アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表１９９】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；そして
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項１２】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表２００】
を有する、請求項９〜１１のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
アミノ酸配列（配列番号１４）
【表２０１】
のペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｈ−及びＦｍｏｃ−から選択され；
Ｂ’は、−ＯＨ又は固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項１４】
疑似プロリンのジペプチド残基が、疑似プロリンのＳｅｒ−Ｓｅｒ残基である、請求項１３記載のペプチド。
【請求項１５】
アミノ酸配列（配列番号１５）
【表２０２】
のペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｈ−及びＦｍｏｃ−から選択され；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項１６】
疑似プロリンのジペプチド残基が、疑似プロリンのＳｅｒ−Ｓｅｒ残基である、請求項１５記載のペプチド。
【請求項１７】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１６）
【表２０３】
式中、
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第１のペプチドフラグメントを提供すること、
ｂ）工程ａ）の第１のペプチドフラグメントを固相樹脂から切断して、第１のペプチドフラグメント（配列番号１６）
【表２０４】
式中、Ｂ’は、−ＯＨである；
を溶液中で産生させること、
ｃ）（配列番号１７）
【表２０５】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第２のペプチドフラグメントを提供するために、第１のペプチドフラグメントを溶液中でアルギニンアミドに結合させること、
ｄ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号１７）
【表２０６】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含む第３のペプチドフラグメントを与えること、
を含む方法。
【請求項１８】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法であって、以下の工程：
ａ）（配列番号１８）
【表２０７】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含むペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｂ）工程ａ）のペプチドフラグメントを固相樹脂から切断して、ペプチドフラグメント（配列番号１８）
【表２０８】
式中、Ｂ’は、−ＯＨである
を溶液中で産生させること、
を含む方法。
【請求項１９】
請求項１７記載の方法であって、以下の工程：
ｅ）（配列番号１８）
【表２０９】
式中、
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；
Ｂ’は、固相樹脂であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む；
のアミノ酸配列を含む第４のペプチドフラグメントを提供すること、
及び
ｆ）工程ｅ）の第４のペプチドフラグメントを固相樹脂から切断して、第４のペプチドフラグメント（配列番号１８）
【表２１０】
式中、Ｂ’は、−ＯＨである
を溶液中で産生させること、
をさらに含む方法。
【請求項２０】
請求項１９記載の方法であって、以下の工程：
ｇ）（配列番号１０）
【表２１１】
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基であり；
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含む第５のペプチドフラグメントを提供するために、第４のペプチドフラグメントを第３のペプチドフラグメントに溶液中で結合させること、
をさらに含む方法。
【請求項２１】
請求項２０記載の方法であって、以下の工程：
ｈ）Ｎ末端保護基を除去して、（配列番号１０）
【表２１２】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；
Ｘ８及びＸ１０は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む
のアミノ酸配列を含む第６のペプチドフラグメントを与えること、
をさらに含む方法。
【請求項２２】
請求項２１記載の方法であって、以下の工程：
ｉ）アミノ酸側鎖を脱保護させて、（配列番号１１）
【表２１３】
式中、
Ｚは、Ｈ−であり；及び
Ｘ８、Ｘ１０及びＸ３５は、各々が非依存的にアキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基である
のアミノ酸配列を含む脱保護インシュリン分泌性ペプチドを与えるために、工程ｈ）により得られるインシュリン分泌性ペプチドを酸と接触させること、
をさらに含む方法。
【請求項２３】
脱保護されたインシュリン分泌性ペプチドが、アミノ酸配列（配列番号１２）
【表２１４】
を有する、請求項１７〜２２のいずれか一項記載の方法。
【請求項２４】
アミノ酸配列（配列番号１８）
【表２１５】
のペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｈ−及びＦｍｏｃ−から選択され；
Ｂ’は、−ＯＨ又は固相樹脂であり；
Ｘ１７−１８は、疑似プロリンのジペプチド残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項２５】
疑似プロリンのジペプチド残基が、疑似プロリンのＳｅｒ−Ｓｅｒ残基である、請求項２４記載のペプチド。
【請求項２６】
アミノ酸配列（配列番号１７）
【表２１６】
を有するペプチドであって、
式中、
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；そして
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、ペプチド。
【請求項２７】
Ｘ３５が、Ａｉｂである、請求項２６記載のペプチド。
【請求項２８】
アミノ酸配列（配列番号１６）
【表２１７】
式中、
Ｂ’は、固相樹脂又は−ＯＨであり；
Ｚは、Ｎ末端保護基Ｆｍｏｃ−であり；そして
Ｘ３５は、アキラル、場合により、立体障害されたアミノ酸残基であり；そして
前記配列の１つ又は複数の残基は、場合により、側鎖保護を含む、
を有するペプチド。
【請求項２９】
Ｘ３５が、Ａｉｂである、請求項２８記載のペプチド。
【請求項３０】
インシュリン分泌性ペプチドを作る方法及び本明細書において先に定義されたペプチド。
【公表番号】特表２０１１−５０６３７６（Ｐ２０１１−５０６３７６Ａ）
【公表日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３７３７９（Ｐ２０１０−５３７３７９）
【出願日】平成２０年１２月２日（２００８．１２．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０６６５８５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７４４８３
【国際公開日】平成２１年６月１８日（２００９．６．１８）
【出願人】（５９１００３０１３）エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー (1,754)
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ−ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１２月２日（２００８．１２．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０６６５８５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７４４８３
【国際公開日】平成２１年６月１８日（２００９．６．１８）
【出願人】（５９１００３０１３）エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー (1,754)
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ−ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]