外部寄生生物撲滅の方法および製剤
本発明は、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を用いる、動物における外部寄生生物の寄生を全身制御するための新規方法および製剤を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を用いる、動物における外部寄生生物の寄生を全身制御するための新規方法および製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
外部寄生生物（例えば、ノミ、シラミ、クロバエ、マダニ類のダニ（ｔｉｃｋｓ）およびダニ（ｍｉｔｅｓ））は、ヒト、また動物にとっても問題になっている。このような害虫は、体重増加を減少させ、皮革、羊毛、および、食肉の品質を下げ、また、時には死をもたらすことにより、家畜産業における生産力に深刻な影響を与えている。外部寄生生物はまた、ペットにおける疾患および不快感をもたらしている。外部寄生生物は、ヒトに対して病原性の細菌およびウィルスを運ぶことが知られている。外部寄生生物がもたらす疾患としては、例えば、マラリア、リンパ管フィラリア症、トラコーマ、トリパノソーマ症、および、河川盲目症が挙げられる。
【０００３】
外部寄生生物を制御するための試みとしては、殺虫剤および農薬の使用が挙げられる。例えば、スピノシンは、天然由来の発酵産物であり、ペットにおける外部寄生生物撲滅薬として利用されている（Ｓｎｙｄｅｒ、特許文献１）。
【０００４】
スピノシンの誘導体は、農業用途において利用されている（ＤｅＡｍｉｃｉｓら、特許文献２）。スピネトラムは、２５〜９０％、好ましくは５０〜９０％の（２Ｒ，３ａＲ，５ａＲ，５ｂＳ，９Ｓ，１３Ｓ，１４Ｒ，１６ａＳ，１６ｂＲ）−２−（６−デオキシ−３−Ｏ−エチル−２，４−ジ−Ｏ−メチル−アルファ−Ｌ−マンノピラノシルオキシ）−１３−［（２Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（ジメチルアミノ）テトラヒドロ−６−メチルピラン−２−イルオキシ］−９−エチル−２，３，３ａ，４，５，５ａ，５ｂ，６，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ，１６ｂ−ヘキサデカヒドロ−１４−メチル−１Ｈ−ａｓ−インダセノ［３，２−ｄ］オキサシクロドデシン−７，１５−ジオン（「ジヒドロ−Ｅｔ−Ｊ」として称される、以下式Ｉ）と、１０〜７５％、好ましくは１０〜５０％の（２Ｒ，３ａＲ，５ａＳ，５ｂＳ，９Ｓ，１３Ｓ，１４Ｒ，１６ａＳ，１６ｂＳ）−２−（６−デオキシ−３−Ｏ−エチル−２，４−ジ−Ｏ−メチル−アルファ−Ｌ−マンノピラノシルオキシ）−１３−［（２Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（ジメチルアミノ）テトラヒドロ−６−メチルピラン−２−イルオキシ］−９−エチル−２，３，３ａ，５ａ，５ｂ，６，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ，１６ｂ−テトラデカヒドロ−４，１４−ジメチル−１Ｈ−ａｓ−インダセン［３，２−ｏ］オキサシクロドデシン−７，１５−ジオン（「Ｅｔ−Ｌ」として称される、以下式ＩＩ）との混合物の一般名称である（Ｐｏｄｈｏｒｅｚら、特許文献３）。
【０００５】
【化１】
【０００６】
【化２】
【０００７】
スピネトラムは、種々の作物において広範囲の害虫を長期的に制御するといわれている（非特許文献１）。スピネトラムは、ナシ状果の果物市場における殺虫剤としてニュージーランドで登録されていることが報告されている（非特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第６，６６４，２３７号
【特許文献２】米国特許第６，００１，９８１号
【特許文献３】米国特許出願公開第２００８／０１０８８００Ａ１号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｄｏｗ ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｓｐｉｎｅｔｏｒａｍ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，２００６年，１１月
【非特許文献２】「Ｄｏｗ ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｒｅｃｅｉｖｅｓ Ｆｉｒｓｔ Ｇｌｏｂａｌ Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｓｐｉｎｅｔｏｒａｍ Ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄｅ」，Ｄｏｗ ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｎｅｗｓｒｏｏｍ，Ｃｏｒｐｏｒａｔｅ Ｎｅｗｓ，２００７年，８月１０日
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
スピノシンならびに他の殺虫剤および農薬の使用が有益であったが、代替または改善された製剤および方法が必要とされている。望ましい製剤および方法は、代替療法を提供するだけでなく、現行の治療における制限を少なくともいくらかは克服するものである。このような制限としては、例えば、毒性、安全性、および、有効性（効果および持続性）、ならびに、抵抗性といった問題が挙げられる。また、殺虫剤および農薬の有効利用に影響を与えている要因は、投与の様式および反復を含む投与上の障害である。例えば、有効性を維持しながら投与の頻度を減らすことは望ましいものの、動物への投薬は、しばしば不便および／または困難である。本発明は、外部寄生生物の寄生に対処するための代替オプションを提供する、動物において使用するための外部寄生生物撲滅の方法および製剤を包含する。さらに、本発明は、現行の殺虫剤および農薬の使用における制限を、特に外部寄生生物の長期間有効で安全な全身制御を提供することにより、少なくともいくらかは克服する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、動物に対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を全身投与することにより、動物の外部寄生生物の寄生を制御する方法、ならびに、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩および医薬的に許容される担体を用いて外部寄生生物の寄生を全身制御するための医薬製剤を提供する。本発明はまた、イヌまたはネコに対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を経口的または非経口的に全身投与することにより、イヌまたはネコのノミの寄生を制御する方法、ならびに、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩と、錠剤、カプセル剤または液剤から選択される経口投与形態の医薬的に許容される担体とを、イヌまたは猫の体重１ｋｇにつきスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を１０〜６０ｍｇという用量で用いてイヌまたはネコにおける外部寄生生物の寄生を全身制御するための単回投与またはパルス投与の製剤を提供する。スピネトラムを用いる方法および製剤の別の態様は、外部寄生生物の寄生を長期にわたって全身制御することを提供する能力であるため、動物への投与の反復を（例えば、わずか１週間に１回もしくは２週間に１回、またはわずか１ヶ月に１回もしくは１ヶ月以上に１回まで）減らす。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
宿主動物は、哺乳動物または非哺乳動物（例えば、鳥類（シチメンチョウ、ニワトリ）もしくは魚類）であってもよい。宿主動物が動物の場合は、ヒトまたは非ヒトの哺乳動物であってもよい。非ヒト動物としては、家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃ ａｎｉｍａｌ）、例えば、農業用家畜（ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ ａｎｉｍａｌ）およびペットが挙げられる。農業用家畜としては、畜牛、ラクダ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、および、ウマが挙げられる。ペットとしては、イヌ、ウサギ、ネコ、および、他のヒトと動物との絆の一部としてヒトと近い関わりを持ってそれを維持している他のペットが挙げられる。
【００１３】
外部寄生生物としては、一般的に動物に寄生するまたは感染する昆虫およびダニ目の害虫が挙げられ、またそれらの卵期、幼生期、蛹の段階、幼虫の段階、および、成虫期を含む。このような害虫としては、ノミ、シラミ、蚊、ダニ（ｍｉｔｅｓ）、マダニ類のダニ（ｔｉｃｋｓ）、および、血を吸うか噛むか邪魔なハエ種が挙げられる。特に対象となるのは、ノミ、より具体的には、ネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）である。
【００１４】
「制御する」とは、宿主動物において、現状の寄生を改善するかまたは除去するか、あるいは、寄生を予防するかのいずれかを意味する。
【００１５】
「有効量」は、外部寄生生物を制御するのに十分なスピネトラムまたはその塩の量を意味し、外部寄生生物の寄生集団における測定可能な減少をもたらす量である。この制御は、スピネトラムまたはその複合体もしくはその塩を供給した場合にそれらが害虫の系に侵入する結果として生じ得るか、あるいはスピネトラムまたはその複合体もしくはその塩の全身における存在に起因した防虫剤またはインビボでの作用を介した結果として生じ得る。本発明の方法および製剤におけるスピネトラムまたはその塩の範囲は、動物の体重において０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、および、特に好ましくは１０〜６０ｍｇ／ｋｇの範囲である。
【００１６】
本願明細書において用いられる「医薬的に許容される」は、例えば、塩および製剤成分（例えば、担体）を意味し、「獣医学的に許容される」を含むため、ヒトおよび動物の両方の適用を独立して含む。
【００１７】
医薬的に許容される塩およびそれらを調製する一般的な手順は当該技術分野において公知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，ＨＡＮＤＢＯＯＫ ＯＦ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＳＡＬＴＳ：ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，ＳＥＬＥＣＴＩＯＮ ＡＮＤ ＵＳＥ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２），Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照のこと。塩の例としては、これに限定されないが、有機酸および無機酸の両方（例えば、硫酸、塩酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コール酸、パモン酸、粘液酸、グルタミン酸、ショウノウ酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ギ酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、桂皮酸および類似の酸）との標準的な反応によって形成される塩が挙げられる。
【００１８】
用語「担体」は、本願明細書において、製剤中の活性成分以外の任意成分を意味する。担体の選択は、例えば、特定の投与様式、溶解性および安定性への担体の影響、ならびに、投与形態の性質等の要因に大きく依存する。
【００１９】
スピネトラムまたはその塩の投与は、任意の適切な経路により全身投与され得る。適切な経路の例としては、経口投与、局所（経皮）投与、および、非経口投与が挙げられる。経路の選択は、宿主動物の種および外部寄生性の寄生の性質に依存する。投与は、宿主動物内の全身分布をもたらす。全身の有効性（寄生生物による血液の摂取、または、全身への防虫剤もしくはインビボでの作用を介する、いずれかの有効性）は、皮膚表面での寄生生物との接触が曝露の様式である、非全身に適用される外部寄生生物撲滅薬と比較して、異なる曝露の様式を提供する。非全身治療（例えば、非経皮局所治療）と比較して、寄生生物の全身治療および殺傷の利点としては、（ａ）動物の環境（例えば、床、絨毯、家具）におけるヒトの適用者（ａｐｐｌｉｃａｔｏｒ）および子供ならびに対象への曝露の減少、（ｂ）動物が水（湖、川、風呂等）に曝されることによる損失または摩擦による損失の心配がほとんどないこと、（ｃ）ＵＶ照射および劣化と無関係であること、（ｄ）皮膚上の油等による酸化の問題がないこと、および、（ｅ）全用量が投与されることの確実性（用量のいくらかが処置後直ぐに垂れるか、擦れて取れるか、および／または、分配チューブ内に残ることがあり得る、局所的非経皮適用と比較して）が挙げられる。
【００２０】
スピネトラムおよびその塩は、全身投与のための医薬組成物として製剤化され得る。このような医薬的組成物およびその製造プロセスは当該技術分野において公知である。例えば、「ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ ＳＣＩＥＮＣＥ ＡＮＤ ＰＲＡＣＴＩＣＥ ＯＦ ＰＨＡＲＭＡＣＹ，（Ａ． Ｇｅｎｎａｒｏら，ｅｄｓ．，１９ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，１９９５）」を参照のこと。スピネトラムまたはその塩は、製剤の重量に対して１％〜９０％、より特には、５％〜６０％の量で製剤中に存在し得る。
【００２１】
用語「単回投与医薬製剤」は、長期間にわたって外部寄生生物の寄生を効果的に制御する製剤の単回投与を意味する。用語「長期間」は、少なくとも７日間、好ましくは少なくとも２週間、より好ましくは少なくとも３０日間の期間を含む。用語「パルス投与製剤」は、目的とするスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩の全量を、分割した個別の用量で投与する（通常、１日間または２日間という短期間に投与される）のに適した製剤を意味する。パルス投与は、治療効果は同等または実質的に同等であるが、全投与量が短期間に１回以上投与される点において、単回投与とは対照的である。例えば、目的とする全投与量（通常、１日間または２日間の目的とする投与量を合計すると等しい量になる）は、２回、３回、または、４回以上に分けて投与されることでパルス投与され得る。あるいは、パルス投与は、その後徐々に放出される目的とする全投与量の単回投与により達成され得る。このパルス投与へのアプローチは、動態（例えば、２時間、３時間、４時間またはそれ以上の時間ごと）または消化官内の位置（例えば、胃内で５０％、その後小腸内で５０％）に基づいて、時間にわたって内部に放出される総投与量の特定部分を有することで生じ得る。
【００２２】
経口投与は、カプセル剤、ボーラス、錠剤、粉末、トローチ、チューズ、マルチおよびナノ粒子、ゲル、固溶体、フィルム、スプレー、または、液体製剤によるものであってもよい。液体形態としては、懸濁液、溶液、シロップ、ドレンチおよびエリキシルが挙げられる。このような製剤は、ソフトカプセルまたはハードカプセル内の充填剤として利用されてもよく、典型的に、担体、例えば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロース、または、適切な油、ならびに、１つ以上の乳化剤および／または懸濁化剤を含んでもよい。液体製剤はまた、例えば小袋から固体を再構成することにより調製されてもよい。経口ドレンチは、適切な媒体内で活性成分を溶解または懸濁することにより一般的に調製される。経口投与は、動物の食べ物と混合するかその上に乗せることにより達成されてもよい。
【００２３】
スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩は、全身投与をもたらすために皮膚、粘膜（ｍｕｃｏｓａ）、または、粘膜（ｍｕｃｏｕｓ ｍｅｍｂｒａｎｅ）に投与されてもよい。このような投与の１つの様式は、経皮投与である。典型的な担体としては、アルコール、水、ミネラルオイル、流動ワセリン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール、および、プロピレングリコールが挙げられる。浸透促進剤も組み込まれてもよい（例えば、ＦｉｎｎｉｎおよびＭｏｒｇａｎによるＪ．Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，８８（１０），９５５−９５８（１９９９年、１０月）を参照のこと）。
【００２４】
さらに、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩は、血流、筋肉内または内臓器官に非経口的または直接注入されることで投与されてもよい。非経口投与のための適切な経路としては、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、および、皮下が挙げられる。非経口投与のための適切な機器としては、針（マイクロ針を含む）注射器、無針注射器、および、点滴技術が挙げられる。注射可能な製剤は、他の物質（例えば、溶液を血液と等張させるのに十分な塩またはグルコース）を含み得る滅菌溶液の形態で調製され得る。受容可能な液体担体としては、植物油（例えば、ごま油）、グリセリド（例えば、トリアセチン）、エーテル（例えば、安息香酸ベンジル、ミリスチン酸イソプロピル、および、プロピレングリコールの脂肪酸誘導体）、ならびに、有機溶媒（例えば、ピロリジン−２−オンおよびグリセロールホルマール）が挙げられる。製剤は、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を液体内に溶解または懸濁することにより調製される。これらの製剤は、自己保存、自己滅菌であってもよいか、または、非滅菌であってもよく、それに防腐剤が任意に追加され得る。非経口製剤は、典型的に、賦形剤（例えば、塩、炭水化物、および、緩衝剤）を含み得る水性溶液（好ましくは、３〜９のｐＨ）であるが、いくつかの用途では、それらは、滅菌非水性溶液としてまたは適切なビヒクル（例えば、滅菌無ピロゲン水）とともに用いられる粉末形態または乾燥形態としてより適切に製剤化され得る。滅菌条件下の非経口製剤の調製は、例えば、当業者に周知の標準的な薬学的技術を用いて容易に達成され得る。非経口溶液の調製において用いられるスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩の溶解性は、適切な製剤技術を用いる（例えば、溶解促進剤と組み合わせる）ことで増加し得る。
【実施例】
【００２５】
全身作用を測定するために、スピネトラムをインビトロおよびインビボのバイオアッセイを用いて評価した。多くのアッセイにおいて、スピノサド（ｓｐｉｎｏｓａｄ）をコンパレータまたはヒストリカルポジティブコントロールとして使用したが、他の標準物質（フィプロニル、ペルメトリン、イミダクロプリド）も利用した。スピネトラムを技術上の活性として、および製剤内の両方において利用した。
【００２６】
成体安定バエまたはイエバエのアッセイ（ＡＳＦ、ＡｈｓＦ）
このアッセイは、Ｗｈｉｔｅ，Ｗ．Ｈ．，Ｓ．Ｍ．Ｂａｕｅｒ，Ｘ．Ｚｈａｏら，Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｃｔｏｐａｒａｓｉｔｉｃｉｄｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ−ｃａｒｂａｍａｔｅ ｗｉｔｈ ｐｅｒｍｅｔｈｒｉｎ ａｎｄ ａｍｉｔｒａｚ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｅｎｔｏｍｏｌ．４２，２０７−２１１（２００５）およびＷｈｉｔｅ，Ｗ．Ｈ．，Ｃ．Ｍ．ＭｃＣｏｙ，Ｊ．Ａ．Ｍｅｙｅｒら，Ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ａｍｏｎｇ ｓｐｉｎｏｓａｄ−，ｉｍｉｄａｃｌｏｐｒｉｄ−， ａｎｄ ｍｅｔｈｏｍｙｌ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｂａｉｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ Ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ（Ｄｉｐｔｅｒａ：Ｍｕｓｃｉｄａｅ）ｕｎｄｅｒ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，Ｊ．Ｅｃｏｎ．Ｅｎｔｏｍｏｌ．１００，１５５−１６３（２００７）に記載されるように実質的に行う。
【００２７】
検査物質を１０ｍＭにてＤＭＳＯ中で製剤化する。同様の溶媒内で２倍希釈して、１０個の試験レベルを用意する。物質を、ウシ血清（安定バエ）または５％グルコース溶液（イエバエ）のうちいずれかで希釈して、２００〜０．３９μＭの望ましい曝露濃度を得る。約３ｍｌの希釈された検査物質を、試験管内に入れ（試験レベルにつきｎ＝３）、デンタルウィック（ｄｅｎｔａｌ ｗｉｃｋ）を液体吸引に用いる。１つのデンタルウィックを１００ｍｍペトリ皿の中の低重量ボートに置く。約１０匹の混合性別の成体バエを二酸化炭素を用いて麻酔し、各皿で計数する。皿を２７℃および５０〜７０％の相対湿度にてインキュベートする。ハエを麻酔状態から戻し、化合物が染み込んだデンタルウィックを与える。２４時間後、生存ハエ／死亡ハエを数える。非線形回帰を、投与量と死亡率の関係をモデリングするために用いて、同時期のコントロール（溶媒のみまたはペルメトリン）と比較した相対力価（ＬＤ５０）データを得る。
【００２８】
以下の表１は、スピネトラム（技術上）対ハエに対する標準物質に関するインビトロ特性評価の概要を示す。
【００２９】
【表１】
【００３０】
スピネトラムは、スピノサドと比較して、成体イエバエに対して顕著に大きなインビトロ殺虫活性（５．５倍以上の効果）を示した。
【００３１】
イヌに対する口からの経口投与
上記データを前提として、イヌにおける経口効果の検証を始めた。この検証を、（１）成体ネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）、成体期のアメリカイヌダニ（Ｄｅｒｍａｃｅｎｔｏｒ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ）、および成体期の犬舎のダニ（Ｒｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓ ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓ）での実験的同時寄生に対する、３０ｍｇ／ｋｇの投与量点についての効果、（２）３０ｍｇ／ｋｇの血漿濃度で処置したイヌ、ならびに（３）成体期の犬舎のダニ（Ｒ．ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓ）での実験的同時寄生に対する、５０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇのいずれかの投与量点についての効果を評価するために行った。
【００３２】
１６匹のイヌを、１群ごとに８匹のイヌ（４匹の雄：４匹の雌）となるよう２つの群に選択した。一方の処置群にスピネトラムを与え、他方の群は未処置のままとした。イヌを、鎖で繋いだ状態でコンクリート床の犬舎に内部および外部の両方にて個別に収容した。検証の間、イヌに乾燥した犬用餌を、未乾燥の缶詰餌を与えた処置の日（０日目）以外は与えた。イヌに水を自由に飲めるようにした。
【００３３】
０日目は、第１の群に３０ｍｇ／ｋｇの量で口からスピネトラム粉末を含有する1またはそれ以上のゼラチンカプセルを与え、一方、未処置の群にプラシーボを与えた。Ｒ．ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓに対する効果についての高い投与量（５０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇ）の評価のために、３０ｍｇ／ｋｇの群からのイヌに対して、低い投与量で投与して一旦ノミの効果データを収集した後、約２．５ヶ月間は高いレベルで再度投与した。
【００３４】
試験日（−１、５、１２、１９、２８、３５、および４２日目）に、各イヌを、各種の約１００匹の成体ノミおよび５０匹のダニに実験的に寄生させ、４９日目および５６日目にさらなるノミを寄生させた。ダニおよびノミの両方に対するノックダウン評価を、投与の２４時間後に行った。それに続く全計数を、寄生の４８時間後に行った。高い投与量については、再投与の１日前にイヌを約５０匹のＲ．ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓダニに寄生させ、再投与の５日後にもう一度寄生させて、その後約２４時間後に櫛で梳いて計数した。ノックダウン活性（１日目）を、投与の２４時間後に櫛で梳いて計数して測定した。処置後の残余ダニの全計数について、寄生の４８時間後に櫛で梳いて計数した。１４、２１、２８および３５日目に血液サンプルを採取して、血漿中のスピネトラムの濃度を測定した。
【００３５】
表２は、３０ｍｇ／ｋｇにてイヌに経口投与した後の、スピネトラムのノミについての治療効果および残存効果（ノミ減少の幾何平均パーセント）を示す。
【００３６】
【表２】
【００３７】
イヌにおける３０ｍｇ／ｋｇの経口投与量の点において、スピネトラムは、成体ネコノミの寄生に対するスピノサドのヒストリカルデータと比較して同等のノックダウンおよび優れた残存効果を示した。残存制御（≧９７％）が８週間を超えて続いていることに注目されたい。スピネトラムは、検査された投与量にてダニ種のうちいずれかに対する統計的に有意な活性を示していなかった。一般的に、両方のダニ種に対する処置の効果を解釈することは、未処置のコントロール動物における寄生生物保持数が非常に低いため、困難であった。
【００３８】
イヌ／ネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）に対する口からのパルス投与対単回投与
以下の（１）〜（４）に示すノミの寄生に対する効果を評価するために、イヌの別の検証を行った。（１）６０ｍｇ／ｋｇの単回投与量点の経口投与、（２）１日の間、２時間ごとの２０ｍｇ／ｋｇのＴＩＤのパルス投与スキームの経口投与、（３）１日の間、４時間ごとの２０ｍｇ／ｋｇのＴＩＤのパルス投与スキームの経口投与、および（４）スピネトラムの処置後の血漿濃度。
【００３９】
各８匹のイヌ（４匹の雄、４匹の雌）という４つの処置群に、以下に示すようにスピネトラムを投与した。
処置群１：６０ｍｇ／ｋｇ、単回投与
処置群２：６０ｍｇ／ｋｇ、（２時間ごとに２０ｍｇ／ｋｇ、３回）
処置群３：６０ｍｇ／ｋｇ、（４時間ごとに２０ｍｇ／ｋｇ、３回）
処置群４：０ｍｇ／ｋｇ、（ネガティブコントロール）
【００４０】
イヌを、鎖で繋いだ状態でコンクリート床の犬舎に内部および外部の両方にて個別に収容した。検証の間、イヌに乾燥した犬用餌を、未乾燥の缶詰餌を与えた処置の日（０日目）およびその２日前以外は与えた。イヌに水を自由に飲めるようにした。
【００４１】
処置されたイヌに、技術上の活性のスピネトラム粉末を含有する1またはそれ以上のゼラチンカプセルを１ヶ月与え、処置群４にプラシーボを与えた。試験日（−１、５、１２、１９、２８、３５、４２、４９、および５６日目）に、各イヌを、約１００匹のノミに実験的に寄生させた。ノックダウン評価を投与の２４時間後に行い、次いで残存効果を各々のその後の寄生の４８時間後に評価した。６０ｍｇ／ｋｇ投与の約２４時間後または最初のパルス投与後の、１日目の櫛で梳く計数は、初期効果／ノックダウン効果を測定するのに役立った。血液サンプルを採取して血漿中のスピネトラムの濃度を測定した。
【００４２】
表３は、未処置コントロール群と比較した、生存成体ノミ計数の減少の幾何平均パーセントを示す。結果は、６０ｍｇ／ｋｇの単回投与または２０ｍｇ／ｋｇの複数回投与であろうとなかろうと、効果の結果において実質的に差異がないことを示す。
【００４３】
【表３】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を用いる、動物における外部寄生生物の寄生を全身制御するための新規方法および製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
外部寄生生物（例えば、ノミ、シラミ、クロバエ、マダニ類のダニ（ｔｉｃｋｓ）およびダニ（ｍｉｔｅｓ））は、ヒト、また動物にとっても問題になっている。このような害虫は、体重増加を減少させ、皮革、羊毛、および、食肉の品質を下げ、また、時には死をもたらすことにより、家畜産業における生産力に深刻な影響を与えている。外部寄生生物はまた、ペットにおける疾患および不快感をもたらしている。外部寄生生物は、ヒトに対して病原性の細菌およびウィルスを運ぶことが知られている。外部寄生生物がもたらす疾患としては、例えば、マラリア、リンパ管フィラリア症、トラコーマ、トリパノソーマ症、および、河川盲目症が挙げられる。
【０００３】
外部寄生生物を制御するための試みとしては、殺虫剤および農薬の使用が挙げられる。例えば、スピノシンは、天然由来の発酵産物であり、ペットにおける外部寄生生物撲滅薬として利用されている（Ｓｎｙｄｅｒ、特許文献１）。
【０００４】
スピノシンの誘導体は、農業用途において利用されている（ＤｅＡｍｉｃｉｓら、特許文献２）。スピネトラムは、２５〜９０％、好ましくは５０〜９０％の（２Ｒ，３ａＲ，５ａＲ，５ｂＳ，９Ｓ，１３Ｓ，１４Ｒ，１６ａＳ，１６ｂＲ）−２−（６−デオキシ−３−Ｏ−エチル−２，４−ジ−Ｏ−メチル−アルファ−Ｌ−マンノピラノシルオキシ）−１３−［（２Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（ジメチルアミノ）テトラヒドロ−６−メチルピラン−２−イルオキシ］−９−エチル−２，３，３ａ，４，５，５ａ，５ｂ，６，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ，１６ｂ−ヘキサデカヒドロ−１４−メチル−１Ｈ−ａｓ−インダセノ［３，２−ｄ］オキサシクロドデシン−７，１５−ジオン（「ジヒドロ−Ｅｔ−Ｊ」として称される、以下式Ｉ）と、１０〜７５％、好ましくは１０〜５０％の（２Ｒ，３ａＲ，５ａＳ，５ｂＳ，９Ｓ，１３Ｓ，１４Ｒ，１６ａＳ，１６ｂＳ）−２−（６−デオキシ−３−Ｏ−エチル−２，４−ジ−Ｏ−メチル−アルファ−Ｌ−マンノピラノシルオキシ）−１３−［（２Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−５−（ジメチルアミノ）テトラヒドロ−６−メチルピラン−２−イルオキシ］−９−エチル−２，３，３ａ，５ａ，５ｂ，６，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ，１６ｂ−テトラデカヒドロ−４，１４−ジメチル−１Ｈ−ａｓ−インダセン［３，２−ｏ］オキサシクロドデシン−７，１５−ジオン（「Ｅｔ−Ｌ」として称される、以下式ＩＩ）との混合物の一般名称である（Ｐｏｄｈｏｒｅｚら、特許文献３）。
【０００５】
【化１】
【０００６】
【化２】
【０００７】
スピネトラムは、種々の作物において広範囲の害虫を長期的に制御するといわれている（非特許文献１）。スピネトラムは、ナシ状果の果物市場における殺虫剤としてニュージーランドで登録されていることが報告されている（非特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第６，６６４，２３７号
【特許文献２】米国特許第６，００１，９８１号
【特許文献３】米国特許出願公開第２００８／０１０８８００Ａ１号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｄｏｗ ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｓｐｉｎｅｔｏｒａｍ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，２００６年，１１月
【非特許文献２】「Ｄｏｗ ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｒｅｃｅｉｖｅｓ Ｆｉｒｓｔ Ｇｌｏｂａｌ Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｓｐｉｎｅｔｏｒａｍ Ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄｅ」，Ｄｏｗ ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｎｅｗｓｒｏｏｍ，Ｃｏｒｐｏｒａｔｅ Ｎｅｗｓ，２００７年，８月１０日
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
スピノシンならびに他の殺虫剤および農薬の使用が有益であったが、代替または改善された製剤および方法が必要とされている。望ましい製剤および方法は、代替療法を提供するだけでなく、現行の治療における制限を少なくともいくらかは克服するものである。このような制限としては、例えば、毒性、安全性、および、有効性（効果および持続性）、ならびに、抵抗性といった問題が挙げられる。また、殺虫剤および農薬の有効利用に影響を与えている要因は、投与の様式および反復を含む投与上の障害である。例えば、有効性を維持しながら投与の頻度を減らすことは望ましいものの、動物への投薬は、しばしば不便および／または困難である。本発明は、外部寄生生物の寄生に対処するための代替オプションを提供する、動物において使用するための外部寄生生物撲滅の方法および製剤を包含する。さらに、本発明は、現行の殺虫剤および農薬の使用における制限を、特に外部寄生生物の長期間有効で安全な全身制御を提供することにより、少なくともいくらかは克服する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、動物に対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を全身投与することにより、動物の外部寄生生物の寄生を制御する方法、ならびに、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩および医薬的に許容される担体を用いて外部寄生生物の寄生を全身制御するための医薬製剤を提供する。本発明はまた、イヌまたはネコに対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を経口的または非経口的に全身投与することにより、イヌまたはネコのノミの寄生を制御する方法、ならびに、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩と、錠剤、カプセル剤または液剤から選択される経口投与形態の医薬的に許容される担体とを、イヌまたは猫の体重１ｋｇにつきスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を１０〜６０ｍｇという用量で用いてイヌまたはネコにおける外部寄生生物の寄生を全身制御するための単回投与またはパルス投与の製剤を提供する。スピネトラムを用いる方法および製剤の別の態様は、外部寄生生物の寄生を長期にわたって全身制御することを提供する能力であるため、動物への投与の反復を（例えば、わずか１週間に１回もしくは２週間に１回、またはわずか１ヶ月に１回もしくは１ヶ月以上に１回まで）減らす。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
宿主動物は、哺乳動物または非哺乳動物（例えば、鳥類（シチメンチョウ、ニワトリ）もしくは魚類）であってもよい。宿主動物が動物の場合は、ヒトまたは非ヒトの哺乳動物であってもよい。非ヒト動物としては、家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃ ａｎｉｍａｌ）、例えば、農業用家畜（ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ ａｎｉｍａｌ）およびペットが挙げられる。農業用家畜としては、畜牛、ラクダ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、および、ウマが挙げられる。ペットとしては、イヌ、ウサギ、ネコ、および、他のヒトと動物との絆の一部としてヒトと近い関わりを持ってそれを維持している他のペットが挙げられる。
【００１３】
外部寄生生物としては、一般的に動物に寄生するまたは感染する昆虫およびダニ目の害虫が挙げられ、またそれらの卵期、幼生期、蛹の段階、幼虫の段階、および、成虫期を含む。このような害虫としては、ノミ、シラミ、蚊、ダニ（ｍｉｔｅｓ）、マダニ類のダニ（ｔｉｃｋｓ）、および、血を吸うか噛むか邪魔なハエ種が挙げられる。特に対象となるのは、ノミ、より具体的には、ネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）である。
【００１４】
「制御する」とは、宿主動物において、現状の寄生を改善するかまたは除去するか、あるいは、寄生を予防するかのいずれかを意味する。
【００１５】
「有効量」は、外部寄生生物を制御するのに十分なスピネトラムまたはその塩の量を意味し、外部寄生生物の寄生集団における測定可能な減少をもたらす量である。この制御は、スピネトラムまたはその複合体もしくはその塩を供給した場合にそれらが害虫の系に侵入する結果として生じ得るか、あるいはスピネトラムまたはその複合体もしくはその塩の全身における存在に起因した防虫剤またはインビボでの作用を介した結果として生じ得る。本発明の方法および製剤におけるスピネトラムまたはその塩の範囲は、動物の体重において０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、および、特に好ましくは１０〜６０ｍｇ／ｋｇの範囲である。
【００１６】
本願明細書において用いられる「医薬的に許容される」は、例えば、塩および製剤成分（例えば、担体）を意味し、「獣医学的に許容される」を含むため、ヒトおよび動物の両方の適用を独立して含む。
【００１７】
医薬的に許容される塩およびそれらを調製する一般的な手順は当該技術分野において公知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，ＨＡＮＤＢＯＯＫ ＯＦ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＳＡＬＴＳ：ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，ＳＥＬＥＣＴＩＯＮ ＡＮＤ ＵＳＥ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２），Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照のこと。塩の例としては、これに限定されないが、有機酸および無機酸の両方（例えば、硫酸、塩酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コール酸、パモン酸、粘液酸、グルタミン酸、ショウノウ酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ギ酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、桂皮酸および類似の酸）との標準的な反応によって形成される塩が挙げられる。
【００１８】
用語「担体」は、本願明細書において、製剤中の活性成分以外の任意成分を意味する。担体の選択は、例えば、特定の投与様式、溶解性および安定性への担体の影響、ならびに、投与形態の性質等の要因に大きく依存する。
【００１９】
スピネトラムまたはその塩の投与は、任意の適切な経路により全身投与され得る。適切な経路の例としては、経口投与、局所（経皮）投与、および、非経口投与が挙げられる。経路の選択は、宿主動物の種および外部寄生性の寄生の性質に依存する。投与は、宿主動物内の全身分布をもたらす。全身の有効性（寄生生物による血液の摂取、または、全身への防虫剤もしくはインビボでの作用を介する、いずれかの有効性）は、皮膚表面での寄生生物との接触が曝露の様式である、非全身に適用される外部寄生生物撲滅薬と比較して、異なる曝露の様式を提供する。非全身治療（例えば、非経皮局所治療）と比較して、寄生生物の全身治療および殺傷の利点としては、（ａ）動物の環境（例えば、床、絨毯、家具）におけるヒトの適用者（ａｐｐｌｉｃａｔｏｒ）および子供ならびに対象への曝露の減少、（ｂ）動物が水（湖、川、風呂等）に曝されることによる損失または摩擦による損失の心配がほとんどないこと、（ｃ）ＵＶ照射および劣化と無関係であること、（ｄ）皮膚上の油等による酸化の問題がないこと、および、（ｅ）全用量が投与されることの確実性（用量のいくらかが処置後直ぐに垂れるか、擦れて取れるか、および／または、分配チューブ内に残ることがあり得る、局所的非経皮適用と比較して）が挙げられる。
【００２０】
スピネトラムおよびその塩は、全身投与のための医薬組成物として製剤化され得る。このような医薬的組成物およびその製造プロセスは当該技術分野において公知である。例えば、「ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ ＳＣＩＥＮＣＥ ＡＮＤ ＰＲＡＣＴＩＣＥ ＯＦ ＰＨＡＲＭＡＣＹ，（Ａ． Ｇｅｎｎａｒｏら，ｅｄｓ．，１９ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，１９９５）」を参照のこと。スピネトラムまたはその塩は、製剤の重量に対して１％〜９０％、より特には、５％〜６０％の量で製剤中に存在し得る。
【００２１】
用語「単回投与医薬製剤」は、長期間にわたって外部寄生生物の寄生を効果的に制御する製剤の単回投与を意味する。用語「長期間」は、少なくとも７日間、好ましくは少なくとも２週間、より好ましくは少なくとも３０日間の期間を含む。用語「パルス投与製剤」は、目的とするスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩の全量を、分割した個別の用量で投与する（通常、１日間または２日間という短期間に投与される）のに適した製剤を意味する。パルス投与は、治療効果は同等または実質的に同等であるが、全投与量が短期間に１回以上投与される点において、単回投与とは対照的である。例えば、目的とする全投与量（通常、１日間または２日間の目的とする投与量を合計すると等しい量になる）は、２回、３回、または、４回以上に分けて投与されることでパルス投与され得る。あるいは、パルス投与は、その後徐々に放出される目的とする全投与量の単回投与により達成され得る。このパルス投与へのアプローチは、動態（例えば、２時間、３時間、４時間またはそれ以上の時間ごと）または消化官内の位置（例えば、胃内で５０％、その後小腸内で５０％）に基づいて、時間にわたって内部に放出される総投与量の特定部分を有することで生じ得る。
【００２２】
経口投与は、カプセル剤、ボーラス、錠剤、粉末、トローチ、チューズ、マルチおよびナノ粒子、ゲル、固溶体、フィルム、スプレー、または、液体製剤によるものであってもよい。液体形態としては、懸濁液、溶液、シロップ、ドレンチおよびエリキシルが挙げられる。このような製剤は、ソフトカプセルまたはハードカプセル内の充填剤として利用されてもよく、典型的に、担体、例えば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロース、または、適切な油、ならびに、１つ以上の乳化剤および／または懸濁化剤を含んでもよい。液体製剤はまた、例えば小袋から固体を再構成することにより調製されてもよい。経口ドレンチは、適切な媒体内で活性成分を溶解または懸濁することにより一般的に調製される。経口投与は、動物の食べ物と混合するかその上に乗せることにより達成されてもよい。
【００２３】
スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩は、全身投与をもたらすために皮膚、粘膜（ｍｕｃｏｓａ）、または、粘膜（ｍｕｃｏｕｓ ｍｅｍｂｒａｎｅ）に投与されてもよい。このような投与の１つの様式は、経皮投与である。典型的な担体としては、アルコール、水、ミネラルオイル、流動ワセリン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール、および、プロピレングリコールが挙げられる。浸透促進剤も組み込まれてもよい（例えば、ＦｉｎｎｉｎおよびＭｏｒｇａｎによるＪ．Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，８８（１０），９５５−９５８（１９９９年、１０月）を参照のこと）。
【００２４】
さらに、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩は、血流、筋肉内または内臓器官に非経口的または直接注入されることで投与されてもよい。非経口投与のための適切な経路としては、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、および、皮下が挙げられる。非経口投与のための適切な機器としては、針（マイクロ針を含む）注射器、無針注射器、および、点滴技術が挙げられる。注射可能な製剤は、他の物質（例えば、溶液を血液と等張させるのに十分な塩またはグルコース）を含み得る滅菌溶液の形態で調製され得る。受容可能な液体担体としては、植物油（例えば、ごま油）、グリセリド（例えば、トリアセチン）、エーテル（例えば、安息香酸ベンジル、ミリスチン酸イソプロピル、および、プロピレングリコールの脂肪酸誘導体）、ならびに、有機溶媒（例えば、ピロリジン−２−オンおよびグリセロールホルマール）が挙げられる。製剤は、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を液体内に溶解または懸濁することにより調製される。これらの製剤は、自己保存、自己滅菌であってもよいか、または、非滅菌であってもよく、それに防腐剤が任意に追加され得る。非経口製剤は、典型的に、賦形剤（例えば、塩、炭水化物、および、緩衝剤）を含み得る水性溶液（好ましくは、３〜９のｐＨ）であるが、いくつかの用途では、それらは、滅菌非水性溶液としてまたは適切なビヒクル（例えば、滅菌無ピロゲン水）とともに用いられる粉末形態または乾燥形態としてより適切に製剤化され得る。滅菌条件下の非経口製剤の調製は、例えば、当業者に周知の標準的な薬学的技術を用いて容易に達成され得る。非経口溶液の調製において用いられるスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩の溶解性は、適切な製剤技術を用いる（例えば、溶解促進剤と組み合わせる）ことで増加し得る。
【実施例】
【００２５】
全身作用を測定するために、スピネトラムをインビトロおよびインビボのバイオアッセイを用いて評価した。多くのアッセイにおいて、スピノサド（ｓｐｉｎｏｓａｄ）をコンパレータまたはヒストリカルポジティブコントロールとして使用したが、他の標準物質（フィプロニル、ペルメトリン、イミダクロプリド）も利用した。スピネトラムを技術上の活性として、および製剤内の両方において利用した。
【００２６】
成体安定バエまたはイエバエのアッセイ（ＡＳＦ、ＡｈｓＦ）
このアッセイは、Ｗｈｉｔｅ，Ｗ．Ｈ．，Ｓ．Ｍ．Ｂａｕｅｒ，Ｘ．Ｚｈａｏら，Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｃｔｏｐａｒａｓｉｔｉｃｉｄｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ−ｃａｒｂａｍａｔｅ ｗｉｔｈ ｐｅｒｍｅｔｈｒｉｎ ａｎｄ ａｍｉｔｒａｚ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｅｎｔｏｍｏｌ．４２，２０７−２１１（２００５）およびＷｈｉｔｅ，Ｗ．Ｈ．，Ｃ．Ｍ．ＭｃＣｏｙ，Ｊ．Ａ．Ｍｅｙｅｒら，Ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ａｍｏｎｇ ｓｐｉｎｏｓａｄ−，ｉｍｉｄａｃｌｏｐｒｉｄ−， ａｎｄ ｍｅｔｈｏｍｙｌ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｂａｉｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ Ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ（Ｄｉｐｔｅｒａ：Ｍｕｓｃｉｄａｅ）ｕｎｄｅｒ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，Ｊ．Ｅｃｏｎ．Ｅｎｔｏｍｏｌ．１００，１５５−１６３（２００７）に記載されるように実質的に行う。
【００２７】
検査物質を１０ｍＭにてＤＭＳＯ中で製剤化する。同様の溶媒内で２倍希釈して、１０個の試験レベルを用意する。物質を、ウシ血清（安定バエ）または５％グルコース溶液（イエバエ）のうちいずれかで希釈して、２００〜０．３９μＭの望ましい曝露濃度を得る。約３ｍｌの希釈された検査物質を、試験管内に入れ（試験レベルにつきｎ＝３）、デンタルウィック（ｄｅｎｔａｌ ｗｉｃｋ）を液体吸引に用いる。１つのデンタルウィックを１００ｍｍペトリ皿の中の低重量ボートに置く。約１０匹の混合性別の成体バエを二酸化炭素を用いて麻酔し、各皿で計数する。皿を２７℃および５０〜７０％の相対湿度にてインキュベートする。ハエを麻酔状態から戻し、化合物が染み込んだデンタルウィックを与える。２４時間後、生存ハエ／死亡ハエを数える。非線形回帰を、投与量と死亡率の関係をモデリングするために用いて、同時期のコントロール（溶媒のみまたはペルメトリン）と比較した相対力価（ＬＤ５０）データを得る。
【００２８】
以下の表１は、スピネトラム（技術上）対ハエに対する標準物質に関するインビトロ特性評価の概要を示す。
【００２９】
【表１】
【００３０】
スピネトラムは、スピノサドと比較して、成体イエバエに対して顕著に大きなインビトロ殺虫活性（５．５倍以上の効果）を示した。
【００３１】
イヌに対する口からの経口投与
上記データを前提として、イヌにおける経口効果の検証を始めた。この検証を、（１）成体ネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）、成体期のアメリカイヌダニ（Ｄｅｒｍａｃｅｎｔｏｒ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ）、および成体期の犬舎のダニ（Ｒｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓ ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓ）での実験的同時寄生に対する、３０ｍｇ／ｋｇの投与量点についての効果、（２）３０ｍｇ／ｋｇの血漿濃度で処置したイヌ、ならびに（３）成体期の犬舎のダニ（Ｒ．ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓ）での実験的同時寄生に対する、５０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇのいずれかの投与量点についての効果を評価するために行った。
【００３２】
１６匹のイヌを、１群ごとに８匹のイヌ（４匹の雄：４匹の雌）となるよう２つの群に選択した。一方の処置群にスピネトラムを与え、他方の群は未処置のままとした。イヌを、鎖で繋いだ状態でコンクリート床の犬舎に内部および外部の両方にて個別に収容した。検証の間、イヌに乾燥した犬用餌を、未乾燥の缶詰餌を与えた処置の日（０日目）以外は与えた。イヌに水を自由に飲めるようにした。
【００３３】
０日目は、第１の群に３０ｍｇ／ｋｇの量で口からスピネトラム粉末を含有する1またはそれ以上のゼラチンカプセルを与え、一方、未処置の群にプラシーボを与えた。Ｒ．ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓに対する効果についての高い投与量（５０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇ）の評価のために、３０ｍｇ／ｋｇの群からのイヌに対して、低い投与量で投与して一旦ノミの効果データを収集した後、約２．５ヶ月間は高いレベルで再度投与した。
【００３４】
試験日（−１、５、１２、１９、２８、３５、および４２日目）に、各イヌを、各種の約１００匹の成体ノミおよび５０匹のダニに実験的に寄生させ、４９日目および５６日目にさらなるノミを寄生させた。ダニおよびノミの両方に対するノックダウン評価を、投与の２４時間後に行った。それに続く全計数を、寄生の４８時間後に行った。高い投与量については、再投与の１日前にイヌを約５０匹のＲ．ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓダニに寄生させ、再投与の５日後にもう一度寄生させて、その後約２４時間後に櫛で梳いて計数した。ノックダウン活性（１日目）を、投与の２４時間後に櫛で梳いて計数して測定した。処置後の残余ダニの全計数について、寄生の４８時間後に櫛で梳いて計数した。１４、２１、２８および３５日目に血液サンプルを採取して、血漿中のスピネトラムの濃度を測定した。
【００３５】
表２は、３０ｍｇ／ｋｇにてイヌに経口投与した後の、スピネトラムのノミについての治療効果および残存効果（ノミ減少の幾何平均パーセント）を示す。
【００３６】
【表２】
【００３７】
イヌにおける３０ｍｇ／ｋｇの経口投与量の点において、スピネトラムは、成体ネコノミの寄生に対するスピノサドのヒストリカルデータと比較して同等のノックダウンおよび優れた残存効果を示した。残存制御（≧９７％）が８週間を超えて続いていることに注目されたい。スピネトラムは、検査された投与量にてダニ種のうちいずれかに対する統計的に有意な活性を示していなかった。一般的に、両方のダニ種に対する処置の効果を解釈することは、未処置のコントロール動物における寄生生物保持数が非常に低いため、困難であった。
【００３８】
イヌ／ネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）に対する口からのパルス投与対単回投与
以下の（１）〜（４）に示すノミの寄生に対する効果を評価するために、イヌの別の検証を行った。（１）６０ｍｇ／ｋｇの単回投与量点の経口投与、（２）１日の間、２時間ごとの２０ｍｇ／ｋｇのＴＩＤのパルス投与スキームの経口投与、（３）１日の間、４時間ごとの２０ｍｇ／ｋｇのＴＩＤのパルス投与スキームの経口投与、および（４）スピネトラムの処置後の血漿濃度。
【００３９】
各８匹のイヌ（４匹の雄、４匹の雌）という４つの処置群に、以下に示すようにスピネトラムを投与した。
処置群１：６０ｍｇ／ｋｇ、単回投与
処置群２：６０ｍｇ／ｋｇ、（２時間ごとに２０ｍｇ／ｋｇ、３回）
処置群３：６０ｍｇ／ｋｇ、（４時間ごとに２０ｍｇ／ｋｇ、３回）
処置群４：０ｍｇ／ｋｇ、（ネガティブコントロール）
【００４０】
イヌを、鎖で繋いだ状態でコンクリート床の犬舎に内部および外部の両方にて個別に収容した。検証の間、イヌに乾燥した犬用餌を、未乾燥の缶詰餌を与えた処置の日（０日目）およびその２日前以外は与えた。イヌに水を自由に飲めるようにした。
【００４１】
処置されたイヌに、技術上の活性のスピネトラム粉末を含有する1またはそれ以上のゼラチンカプセルを１ヶ月与え、処置群４にプラシーボを与えた。試験日（−１、５、１２、１９、２８、３５、４２、４９、および５６日目）に、各イヌを、約１００匹のノミに実験的に寄生させた。ノックダウン評価を投与の２４時間後に行い、次いで残存効果を各々のその後の寄生の４８時間後に評価した。６０ｍｇ／ｋｇ投与の約２４時間後または最初のパルス投与後の、１日目の櫛で梳く計数は、初期効果／ノックダウン効果を測定するのに役立った。血液サンプルを採取して血漿中のスピネトラムの濃度を測定した。
【００４２】
表３は、未処置コントロール群と比較した、生存成体ノミ計数の減少の幾何平均パーセントを示す。結果は、６０ｍｇ／ｋｇの単回投与または２０ｍｇ／ｋｇの複数回投与であろうとなかろうと、効果の結果において実質的に差異がないことを示す。
【００４３】
【表３】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物の外部寄生生物の寄生を制御する方法であって、該動物に対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を全身投与する工程を含む方法。
【請求項２】
該動物が家畜である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
該家畜がペットである請求項２に記載の方法。
【請求項４】
該ペットがイヌまたはネコである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
該投与が局所経皮投与、経口投与、またが非経口投与によるものである請求項１に記載の方法。
【請求項６】
該投与が２週間に１回より多くなく単回投与またはパルス投与で行われる請求項５に記載の方法。
【請求項７】
該投与が１カ月に１回より多くなく行われる請求項６に記載の方法。
【請求項８】
該外部寄生生物が昆虫である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
該昆虫がノミである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
該有効量が該動物の体重の０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇである請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
該有効量が該動物の体重の１０ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
イヌまたはネコのノミの寄生を制御する方法であって、該イヌまたはネコに対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を経口的に全身投与する工程を含む方法。
【請求項１３】
該ノミがネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
該投与が２週間に１回より多くなく単回投与またはパルス投与で行われる請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
該投与が１カ月に１回より多くなく行われる請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
該有効量が該動物の体重の１０ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇである請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
外部寄生生物の寄生を全身制御する医薬製剤であって、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む医薬製剤。
【請求項１８】
該スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩が該医薬製剤の重量に対して１〜９０％の量で該医薬製剤中に存在する請求項１７に記載の医薬製剤。
【請求項１９】
該スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩が該医薬製剤の重量に対して５〜６０％の量で該医薬製剤中に存在する請求項１８に記載の医薬製剤。
【請求項２０】
経口投与、局所投与、または、非経口全身投与に適している請求項１７に記載の医薬製剤。
【請求項２１】
経口投与に適しており、錠剤またはカプセル剤である請求項２０に記載の医薬製剤。
【請求項２２】
該医薬製剤が２週間に１回より多くなく単回投与またはパルス投与で投与される請求項１７に記載の医薬製剤。
【請求項２３】
該医薬製剤が１カ月に１回より多くなく投与される請求項２２に記載の医薬製剤。
【請求項２４】
イヌまたはネコにおける外部寄生生物の寄生を全身制御するための単回投与またはパルス投与の医薬製剤であって、錠剤、カプセル剤、または液剤から選択される経口投与形態の、体重１ｋｇ当たり１０〜６０ｍｇの用量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む医薬製剤。
【請求項２５】
該投与形態が錠剤またはカプセル剤であり、該スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩の量が該錠剤またはカプセル剤の重量に対して５〜６０％である請求項２４に記載の医薬製剤。
【請求項２６】
該医薬製剤が２週間に１回より多くなく投与される請求項２４に記載の医薬製剤。
【請求項２７】
該医薬製剤が１カ月に１回より多くなく投与される請求項２６に記載の医薬製剤。
【請求項２８】
該医薬製剤が噛むことができる治療形態である請求項２４に記載の医薬製剤。
【請求項１】
動物の外部寄生生物の寄生を制御する方法であって、該動物に対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を全身投与する工程を含む方法。
【請求項２】
該動物が家畜である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
該家畜がペットである請求項２に記載の方法。
【請求項４】
該ペットがイヌまたはネコである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
該投与が局所経皮投与、経口投与、またが非経口投与によるものである請求項１に記載の方法。
【請求項６】
該投与が２週間に１回より多くなく単回投与またはパルス投与で行われる請求項５に記載の方法。
【請求項７】
該投与が１カ月に１回より多くなく行われる請求項６に記載の方法。
【請求項８】
該外部寄生生物が昆虫である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
該昆虫がノミである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
該有効量が該動物の体重の０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇである請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
該有効量が該動物の体重の１０ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
イヌまたはネコのノミの寄生を制御する方法であって、該イヌまたはネコに対して有効量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩を経口的に全身投与する工程を含む方法。
【請求項１３】
該ノミがネコノミ（Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
該投与が２週間に１回より多くなく単回投与またはパルス投与で行われる請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
該投与が１カ月に１回より多くなく行われる請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
該有効量が該動物の体重の１０ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇである請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
外部寄生生物の寄生を全身制御する医薬製剤であって、スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む医薬製剤。
【請求項１８】
該スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩が該医薬製剤の重量に対して１〜９０％の量で該医薬製剤中に存在する請求項１７に記載の医薬製剤。
【請求項１９】
該スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩が該医薬製剤の重量に対して５〜６０％の量で該医薬製剤中に存在する請求項１８に記載の医薬製剤。
【請求項２０】
経口投与、局所投与、または、非経口全身投与に適している請求項１７に記載の医薬製剤。
【請求項２１】
経口投与に適しており、錠剤またはカプセル剤である請求項２０に記載の医薬製剤。
【請求項２２】
該医薬製剤が２週間に１回より多くなく単回投与またはパルス投与で投与される請求項１７に記載の医薬製剤。
【請求項２３】
該医薬製剤が１カ月に１回より多くなく投与される請求項２２に記載の医薬製剤。
【請求項２４】
イヌまたはネコにおける外部寄生生物の寄生を全身制御するための単回投与またはパルス投与の医薬製剤であって、錠剤、カプセル剤、または液剤から選択される経口投与形態の、体重１ｋｇ当たり１０〜６０ｍｇの用量のスピネトラムまたはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む医薬製剤。
【請求項２５】
該投与形態が錠剤またはカプセル剤であり、該スピネトラムまたはその医薬的に許容される塩の量が該錠剤またはカプセル剤の重量に対して５〜６０％である請求項２４に記載の医薬製剤。
【請求項２６】
該医薬製剤が２週間に１回より多くなく投与される請求項２４に記載の医薬製剤。
【請求項２７】
該医薬製剤が１カ月に１回より多くなく投与される請求項２６に記載の医薬製剤。
【請求項２８】
該医薬製剤が噛むことができる治療形態である請求項２４に記載の医薬製剤。
【公表番号】特表２０１２−５２６１２２（Ｐ２０１２−５２６１２２Ａ）
【公表日】平成２４年１０月２５日（２０１２．１０．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５０９８８４（Ｐ２０１２−５０９８８４）
【出願日】平成２２年５月４日（２０１０．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３３４５８
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１２９４９１
【国際公開日】平成２２年１１月１１日（２０１０．１１．１１）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１０月２５日（２０１２．１０．２５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年５月４日（２０１０．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３３４５８
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１２９４９１
【国際公開日】平成２２年１１月１１日（２０１０．１１．１１）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]