天然抽出物含有組成物
有効成分として、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有する組成物が開示される。前記組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又は傷を抑制する効果があり、化粧品、食品又は医薬分野において多様に活用可能である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
有効成分として、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般的に、ニキビは、男性ホルモンの分泌と関連した皮脂過剰が原因で発生する。具体的には、男性ホルモンによって皮脂が発生し、毛孔の過角質化現状（ｈｙｐｅｒｋｅｒａｔｉｎｉｚａｔｉｏｎ）が誘発されつつ、毛孔の入口が狭くなり、ひどい場合には詰まるようになる。毛孔の入口が狭くなったり詰まったりすると、毛孔内の皮脂が外に排出されなくなり、微細面皰を形成するようになり、毛孔内に棲息する嫌気性バクテリアであるプロピオニバクテリウム・アクネス（ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）が増殖しつつ、炎症が誘発され得る。
【０００３】
誘発された炎症反応により、紅斑、ひりつき、又は膨潤現象が現れ、ひどい場合には過色素沈着（ｈｙｐｅｒｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ）が現れ得る。また、ニキビの部位を絞ったり押したりすると、面皰が潰れて炎症が悪化したり、組織の損傷を引き起こしてニキビ傷を残す危険が大きくなる。
【０００４】
こうしたニキビ性炎症は、多様な原因により誘発され得、例えば、化粧品内に含まれる各種添加剤が皮膚に残ることにより、ニキビ性炎症を誘発し得る。また、体内から排出される皮脂、汗又は紫外線等によっても、皮膚の炎症が誘発され得る。
多様な原因によって誘発されるニキビ性炎症に対し、炎症自体の治療のみについての研究開発が集中しているのが実情である。しかし、炎症が治療されても、それによる皮膚の紅斑や傷等が残ることになり、美容上好ましくない結果を生むことになる。したがって、本発明においては、ニキビ性炎症による色素沈着や傷を抑制ないし防止するための研究を実施した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、本発明は、前記のような従来技術の問題点と、従来から要請されてきた技術的課題を解決することを目的とする。
具体的に、本発明の一実施形態の目的は、ニキビ性色素沈着抑制用組成物を提供することにある。
【０００６】
本発明の他の一実施形態の目的は、ニキビ性傷抑制用組成物を提供することにある。
本発明の他の一実施形態の目的は、ニキビ後遺症に対するアフターケア用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一実施形態に係る組成物は、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の一実施形態に係る組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又は傷を抑制する効果がある。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図２】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図３】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図４】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図５】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図６】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図７】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図８】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図９】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図１０】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図１１】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図１２】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図１３】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図１４】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図１５】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図１６】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図１７】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図１８】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図１９】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図２０】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図２１】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図２２】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図２３】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図２４】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図２５】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図２６】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図２７】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図２８】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図２９】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３０】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３１】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３２】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３３】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３４】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３５】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３６】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図３７】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図３８】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図３９】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４０】本発明の一実施例に係る大黄抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４１】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４２】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４３】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４４】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４５】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４６】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４７】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４８】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４９】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図５０】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図５１】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明に係る組成物は、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を有効成分として含有する。黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有する組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又はニキビ性傷を防止ないし抑制する効果が認められる。一実施形態において、本発明に係る組成物は、有効成分として黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性色素沈着抑制用組成物である。他の一実施形態において、本発明に係る組成物は、有効成分として、黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性傷抑制用組成物である。
【００１１】
黄耆（Ａｓｔｒａｇｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）は、双子葉植物で、薔薇目マメ科の多年生草の一種である。主に山地の岩間に生息し、高さは４０〜７０ｃｍ程度であり、韓国、日本、中国東北部及びシベリア東部等に分布する。漢方においては、秋に採取して蘆頭とひげ根を除去し、日光で乾燥させたものを漢薬材の黄耆という。
【００１２】
三白草（Ｓａｕｒｕｒｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）は、双子葉植物で、胡椒目三白草科の多年生草の一種である。根茎は白色で、泥の中で横に伸びる。茎の高さは５０〜１００ｃｍで、６〜８月に白い花が咲く。主に湿地で育ち、根、葉及び花が白色であるため三白草という。脚気、黄疸、肝炎等に効果があることで知られており、韓国、日本、中国等に分布する。
【００１３】
甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｕｒａｌｅｎｓｉｓ）は、双子葉植物マメ科に属し、薬用植物として多く使用されている。韓国以外にも、中国東北部、シベリア、モンゴル等に分布する。茎は角ばっていて１ｍほどまっすぐに育ち、葉は互生し、奇数羽状複葉である。花は７〜８月頃に咲き、長さ１．４〜２．５ｃｍの紫色である。根は、赤褐色で地中深く入り、甘みがあり、甘味料（ｓｗｅｅｔｅｎｉｎｇ）又は漢方薬等に使用される。
【００１４】
薔薇（Ｒｏｓａ ｓｐｐ．）は、双子葉植物薔薇目薔薇科に属する植物を総称し、野生種と改良を加えた園芸種をすべて含む。薔薇は灌木性の花木で、美しい花と香りで観賞用や香料用として多く栽培されている。薔薇は、北半球の寒帯、亜寒帯、温帯、亜熱帯等の広い地域で多様な品種が栽培されている。
【００１５】
大黄（Ｒｈｅｕｍ ｕｎｄｕｌａｔｕｍ）は、離弁花群タデ目タデ科の多年生植物を総称する意味である。大黄は、主に谷の湿地に生息し、原産地は中国である。太い黄色の根があり、まっすぐに育つ主枝の高さは１ｍに達することもある。主に薬剤として用いられるのは大黄の主根である。主根の皮とひげ根を除去し、そのまま又は丸ごと切って乾燥させたものを薬用として使用する。消炎性の下剤として使用しており、様々な処方に配合して使用されている。
【００１６】
刺五加皮（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ ｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ）は、タラノキ科の落葉低木であって、その高さは２〜３ｍ程度である。木全体に細くて長い棘がびっしりと生え、手のひら状の複葉がずれるように生える。刺五加皮の属名であるアカントパナクス（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ）のうち、アカント（Ａｃａｎｔｈｏ）は「茨」を意味し、パナクス（ｐａｎａｘ）は「万病を治療する」という意味で、「万病を治す茨」という意味である。昔から、神経痛、関節炎、高血圧、神経衰弱、糖尿及び強壮剤として広く用いられている。
【００１７】
また、黄柏（Ｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｉ Ｃｏｒｔｅｘ）は、黄柏の木の皮を薬剤として呼ぶ言葉であって、黄柏の木は、ミカン科（ｒｕｔａｃｅａｅ）の落葉闊葉喬木で、１０ｍ程度の高さに育つが、皮にはコルクが発達し、内皮は黄色である。黄柏は、前後に木の幹の皮を剥いで粗皮を除去したり刻んだりして、太陽の下で乾燥させて製造する。黄柏は、血糖低下作用を有することが知られており、肺炎双球菌、ヒト型結核菌、ブドウ状球菌等に対して発育阻止作用を有すると同時に、腫瘍細胞の繁殖を阻止し、殺菌作用を有する。黄柏を服用する場合には、味覚反射の亢進によって胃液の分泌を促進させ、食欲の亢進効能があることが知られている。
【００１８】
前記の抽出物は、通常の多様な方法により、別途の制限なく抽出することができる。一実施形態において、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、蒸留水、Ｃ１〜Ｃ５の無水又は含水低級アルコール等の有機溶媒で抽出することができる。他の一実施形態において、前記抽出物は、熱水抽出物であってよい。熱水抽出物の場合、抽出過程において、真空及び高圧の条件をともに設定することにより、抽出効率を高めることができる。
【００１９】
他の一実施形態において、黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、ゼラチナーゼ（ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ）を抑制する効能が認められる。ゼラチナーゼは、多様な種類のカビや酵母等から発現される蛋白質加水分解酵素の一種であり、ゼラチンを液化させる機能がある。ゼラチナーゼの種類は特に制限されず、ヒトから発現されるゼラチナーゼ遺伝子としては、ＭＭＰ‐９（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐９）やＭＭＰ‐２（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐２）等がある。他の一実施形態において、前記黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、ＭＭＰ‐９及び／又はＭＭＰ‐２を抑制する効能が認められる。本発明に係る組成物は、ゼラチナーゼ、具体的には、ＭＭＰ‐９及び／又はＭＭＰ‐２を抑制することにより、ニキビ性傷を防止ないし抑制する。
【００２０】
本発明に係る組成物は、多様な分野において特別な制限なしに活用することができ、例えば、皮膚外用剤として剤形化することができ、具体的には、化粧料や医薬組成物の形態で剤形化することができる。
【００２１】
本発明に係る皮膚外用剤組成物は、油性又は水性媒質から溶液、懸濁液又は乳化液の形態となることができ、また、使用する前に、無菌、発熱物質が除去された水に溶かして使用する乾燥粉末の形態で剤形化することができる。油中水型乳剤は、オリーブ油等の植物油又は液状パラフィン等の鉱物性油を油相とし、大豆レシチン等の天然リン脂質、及びソルビタンモノオレエート等の無水ヘキシトールや脂肪酸のエステルに由来するもの、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート等の無水ヘキシトールと脂肪酸に由来する部分エステルをエチレンオキシドと縮合した化合物を乳化剤として、活性成分を乳化させたものである。
【００２２】
一実施形態において、本発明の皮膚外用剤組成物において、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物の含量は、組成物全体の重量を基準として０．１〜２０重量％、より具体的には０．５〜２０重量％とすることができる。抽出物の含量が過度に少ない場合には、皮膚状態の管理及び改善の効果が僅かであり、抽出物の含有量が増加すれば、抽出物添加による効率性が低下して、剤形の安定性等の問題が誘発され得る。
【００２３】
本発明は、前記組成物を含む化粧料組成物を提供する。前記組成物を化粧料の形態で剤形化する場合には、ニキビ性色素沈着を防止又は改善させる目的で使用することができる。また、ニキビ性傷が発生することを防止又は改善する目的で使用することができる。前記化粧料の剤形は、特に限定されず、例えば、柔軟化粧水、栄養化粧水、マッサージクリーム、栄養クリーム、パック、ゲル又は皮膚粘着タイプの化粧料の剤形を有する化粧料組成物であってよく、また、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、パッチ又はスプレー等の経皮投与型剤形であってよい。また各々の製剤において、他の成分は、その他化粧料組成物の種類又は使用目的等に応じて、当業者が困難なく適宜選定して配合することができる。
【００２４】
本発明はまた、前記組成物を含む医薬組成物を提供する。本発明の組成物を含む医薬組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又はニキビ性傷の改善ないし抑制用組成物であってよい。
【００２５】
本発明の組成物を医薬品に適用する場合には、前記組成物に有効成分として常用される無機又は有機の担体を加えて、固体、半固体又は液状の形態で、経口投与剤或いは非経口投与剤として剤形化することができる。
【００２６】
前記経口投与用の製剤としては、錠剤、丸剤、顆粒剤、軟・硬カプセル剤、散剤、細粒剤、粉剤、乳濁剤、シロップ剤、ペレット剤等を挙げることができる。また、前記非経口投与のための製剤としては、注射剤、点滴剤、軟膏、ローション、スプレー、懸濁剤、乳剤、坐剤等を挙げることができる。本発明の有効成分を剤形化するためには、常法に従って実施すれば容易に剤形化することができ、界面活性剤、賦形剤、着色料、香辛料、保存料、安定剤、緩衝剤、懸濁剤、その他常用される補助剤を適宜使用することができる。
【００２７】
本発明に係る前記医薬組成物は、経口、非経口、直腸、局所、経皮、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下等に投与することができる。
また、前記活性成分の投与量は、治療される対象の年齢、性別、体重と、治療する特定の疾患又は病理状態、疾患又は病理状態の深刻度、投与経路、及び処方者の判断によって変わり得るであろう。こうした因子に基づく投与量の決定は、当業者の水準内にある。一般的な投与量は、０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜２０００ｍｇ／ｋｇ／日、より具体的には、０．５ｍｇ／ｋｇ／日〜１５００ｍｇ／ｋｇ／日である。
【００２８】
本発明は、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有しているアフターケア（ａｆｔｅｒｃａｒｅ）用組成物を提供する。より具体的には、ニキビによる皮膚トラブルによる色素沈着及び／又は傷等の後遺症を総合的に管理し、皮膚状態を改善するためのアフターケア用組成物を提供する。
【００２９】
一実施形態において、本発明に係るアフターケア用組成物中の黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物の含量は、組成物全体の重量を基準として０．１〜２０重量％、より具体的には、０．５〜２０重量％であってよい。抽出物の含有量が過度に少ない場合には、皮膚状態の管理及び改善の効果が僅かであり、抽出物の含有量が増加すれば、抽出物添加による効率性が低下して、剤形の安定性等の問題が誘発され得る。
【００３０】
本発明において、「アフターケア（ａｆｔｅｒｃａｒｅ）」とは、皮膚状態を管理及び改善するための総合的な事後管理を意味する。例えば、休暇の季節に海、川や渓谷等で水遊びを楽しんだり、日焼けやタンニング等を長時間行ったりする場合には、皮膚が紫外線に過度に露出されて炎症が誘発され得る。また、皮膚に塗布されたサンクリーム又はオイル等に含まれた各種添加剤が皮膚に残ることにより、ニキビ性炎症を起こすこともあり得る。この他にも、日常生活の中で多様な原因によってニキビ性炎症等の皮膚トラブルが誘発され得る。アフターケアは、これらのニキビ性炎症を含む皮膚トラブルに対して、皮膚管理及び皮膚状態改善のための事後管理を総称する意味である。また、アフターケア用組成物は、アフターケアのために皮膚に粘着、沈着ないし塗布する組成物を包括する意味である。
【００３１】
一実施形態において、本発明は、前記組成物を含む食品添加物、機能性食品又は健康食品等を提供する。具体的には、前記組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又は傷の改善ないし抑制用組成物とすることができる。
【００３２】
本発明に係る組成物は、多様な種類の食品添加物又は機能性食品に含まれてもよい。前記組成物を含む発酵乳、チーズ、ヨーグルト、ジュース、生菌製剤及び健康補助食品等に加工することができ、その他多様な食品添加剤の形態で使用することができる。
【００３３】
一実施形態において、前記組成物は、本発明が目的とする主効果を損傷させない範囲内で、主効果の相乗効果を与え得る他の成分等を含有してもよい。例えば、物性改善のために、香料、色素、殺菌剤、酸化防止剤、防腐剤、保湿剤、増粘剤、無機塩類、乳化剤及び合成高分子物質等の添加剤をさらに含むことができる。その他にも、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖及び海藻エキス等の補助成分を含むこともできる。前記成分は、剤形や使用目的に応じて、当業者が困難なく適宜選定して配合することができ、その添加量は、本発明の目的及び効果を損傷させない範囲内で選択することができる。
【００３４】
本発明に係る組成物の剤形は、溶液、乳化物、粘性型混合物、タブレット、粉末等の多様な形態であってよく、これは、単純飲用、注射投与、スプレー方式や搾出方式等の多様な方法で投与することができる。
［実施例］
以下、下記実施例により本発明をさらに詳細に説明することにする。ただし、下記実施例は、本発明を例示するためのものであるに過ぎず、本発明の範囲がこれらのみに限定されるものではない。
［実施例１］黄耆抽出物の製造
８年根の黄耆を採取して洗浄した後、乾燥して粉砕した。黄耆と水を混ぜて、８０℃でセラミック真空高圧工法を通じて６〜８時間抽出した。抽出物を遠心分離し、濾過して不純物を除去した。抽出物の原液に、１，３‐ブチレングリコールを添加して黄耆抽出物を製造した。
［実施例２］三白草抽出物の製造
三白草の根をよく洗って乾燥させた後、１０倍のエタノール中、常温で７日間抽出した。抽出液を、２５０メッシュ（３μｍ）のフィルタで濾過した後、６０℃で濃縮した。濃縮液を水に溶かした後、エチルアセテート（ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ）を添加してエチルアセテート層を分離した後、再び６０℃の温度で濃縮した。濃縮物に、塩化メチレン（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）を添加した。その後、エチルアセテートとヘキサンの混合溶液に２回沈殿させて不純物を除去した後、カラムに分画した。カラム分画に対し、６０℃での濃縮と３０℃での減圧濃縮を繰り返して残留溶媒を完全に除去した後、ブチレングリコールに２％溶液となるように溶かした。得られた溶液に対し、更なる濾過や沈殿を行い、三白草抽出物を製造した。
［実施例３］甘草抽出物の製造
甘草の根をよく洗い、エタノールに浸して抽出した。抽出物は、濾過を経て、減圧濃縮した。濃縮された抽出物について、エチルアセテート（ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ）を利用して、エチルアセテートに溶ける分画を再抽出した。エチルアセテートの分画を、樹脂カラムを使用して分離した後、濾過、濃縮、乾燥して、甘草抽出物を製造した。
［実施例４］薔薇抽出物の製造
薔薇の花びらをよく洗って乾燥した後、熱水、プロピレングリコール又はこれらの混合液を利用して抽出した。抽出された抽出液に対し、減圧濃縮及び噴霧乾燥（ｓｐｒａｙ ｄｒｙｉｎｇ）を繰り返した。減圧濃縮及び噴霧乾燥は、残留溶媒が完全に除去されて粉末状となるまで繰り返し、薔薇抽出物を製造した。
［実施例５］大黄抽出物の製造
大黄１ｋｇに精製水２０ｋｇを入れ、２５℃で２４時間抽出した。抽出液は、０〜４℃で２４時間、沈殿物を沈めた後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルタで濾過した。活性炭素を利用して濾過液の色と臭いを除去した後、更なる反復濾過過程を経て、大黄抽出物を製造した。
［実施例６］刺五加皮抽出物の製造
刺五加皮１ｋｇに精製水２０ｋｇを入れ、２５℃で２４時間抽出した。抽出液は、０〜４℃で２４時間、沈殿物を沈めた後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルタで濾過した。活性炭素を利用して濾過液の色と臭いを除去した後、更なる反復濾過過程を経て、刺五加皮抽出物を製造した。
［実施例７］黄柏抽出物の製造
黄柏１ｋｇに精製水２０ｋｇを入れ、２５℃で２４時間抽出した。抽出液は、０〜４℃で２４時間、沈殿物を沈めた後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルタで濾過した。活性炭素を利用して濾過液の色と臭いを除去した後、更なる反復濾過過程を経て、黄柏抽出物を製造した。
［実験例１］細胞（Ｃｅｌｌ）培養条件
５週齢の雄のゴールデンハムスターの耳の皮脂腺からハムスター皮脂腺細胞（ｓｅｂｏｃｙｔｅ）を摘出した。具体的な抽出方法は、サト（Ｓａｔｏ）等の論文（Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ， ２００１， １１７： ９６５〜７０）を参考にした。摘出された皮脂腺細胞を培養フラスコで培養して、２．３５×１０４個／ｃｍ２となるようにした。
【００３５】
培養培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ；ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、０．６８ｍＭのＬ‐グルタミン（Ｌ‐ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））、１０ｎＭのｒｈＥＧＦ（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ；プロジェン バイオテクニック ゲーエムベーハー（Ｐｒｏｇｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｋ ＧｍｂＨ）、ドイツ ハイデルベルグ）を添加して製造した。
【００３６】
抗生物質は、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）をともに使用した。ハムスター皮脂腺細胞は、培養フラスコに完全に付着するのに２４時間が必要とされ、３７℃、５％ＣＯ２で培養した。
【００３７】
ヒト由来の角質細胞（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ）の細胞株であるＨａＣａＴは、ＤＭＥＭ培地（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）に、ウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加して、ペニシリン１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加した培地を使用して、３７℃、５％ＣＯ２の条件で培養して使用した。
【００３８】
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス由来のメラニン形成細胞（ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ）のメラン−ａ（ｍｅｌａｎ‐ａ）は、ＲＰＭＩ‐１６４０（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ＴＰＡ（ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌ ｐｈｏｒｂｏｌ ａｃｅｔａｔｅ）２００ｎＭ、ペニシリン１００ｍｇ／ｍｌ、及びストレプトマイシン１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加した培地を使用して、３７℃、１０％ＣＯ２の条件で培養して使用した。
［実験例２］ニキビ性炎症抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物のニキビ性炎症抑制効果を効率的に評価するために、皮脂腺細胞と角質細胞をともに使用してヒトのニキビ病変と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏ炎症モデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、ＨａＣａＴ角質細胞とゴールデンハムスターの皮脂腺細胞をそれぞれ３．７５×１０４個及び６．０×１０４個ずつ接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日待った。このとき、培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加したものを使用した。
【００３９】
１日経過した細胞に、ニキビ性炎症を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加した。同時に、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性炎症抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ニキビ治療専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）１００ｎＭを使用した。刺激源と抽出物を添加し、一日経過した後、培養液に溶け出てきた炎症性サイトカイン（ｐｏｓｔ‐ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅ）であるＧＭ‐ＣＳＦ（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ‐ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ）、ＩＬ‐１α（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ‐１ ａｌｐｈａ）、ＩＬ‐８（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ‐８）、ＴＮＦ‐α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ‐ａｌｐｈａ）の濃度をマルチプレックスビーズ‐ベースのサイトカイン分析（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ｂｅａｄ‐ｂａｓｅｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｓｓａｙ）を通じて、５０μｌの培地で測定した。
【００４０】
より具体的には、次の過程を実行した。予め洗浄バッファに浸しておいた９６‐ウェルフィルタプレート内の溶液を、真空ポンプですべて吸い出した。次に、細胞（ｃｅｌｌ）培養液を、３０分間、抗体結合ビーズ（ａｎｔｉｂｏｄｙ‐ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ｂｅａｄ）と反応させた。反応が終了すると、検出抗体（ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ）を添加して、３０分間さらに反応させた。その後、ストレプトアビジン‐フィコエリトリン（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ‐ＰＥ， ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ‐ｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎ）を各ウェル（ｗｅｌｌ）に入れ、３０分間待った。洗浄バッファを使用して、付着しなかったＳｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ‐ＰＥを除去した後、サイトカインに付着したビーズの量をバイオ‐プレックス（登録商標）２００（Ｂｉｏ‐ｐｌｅｘ（登録商標）２００）装置を利用して分析した。
【００４１】
黄耆抽出物に対する分析結果を、図１（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図２（ＩＬ‐１α）、図３（ＩＬ‐８）、及び図４（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図１〜４を参照すると、本発明に係る黄耆抽出物は、炎症性サイトカインを濃度依存的に抑制させることが分かる。特に、図１では、前記黄耆抽出物が専門医薬品であるイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）と同程度にＧＭ‐ＳＣＦを抑制することが確認された。
【００４２】
三白草抽出物に対する分析結果を、図５（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図６（ＩＬ‐１α）、図７（ＩＬ‐８）、及び図８（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図５〜８を参照すると、本発明に係る三白草抽出物は、炎症性サイトカインを濃度依存的に抑制させることが分かる。ただし、図６（ＩＬ‐１α）では、むしろ５０ｐｐｍ未満の濃度において効果が優れていることが示された。
【００４３】
甘草抽出物に対する分析結果を、図９（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図１０（ＩＬ‐１α）、図１１（ＩＬ‐８）、及び図１２（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図９〜１２を参照すると、甘草抽出物は、全体的に２５ｐｐｍの濃度において炎症性サイトカインの抑制効果が最も効果的であることが確認された。したがって、本発明に係る甘草抽出物は、相対的に低濃度でも炎症性サイトカインを効果的に抑制させることが分かる。
【００４４】
薔薇抽出物に対する分析結果は、図１３（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図１４（ＩＬ‐１α）、図１５（ＩＬ‐８）、及び図１６（ＴＮＦ‐α）に、順に示した。図１３〜１６を参照すると、本発明に係る薔薇抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
【００４５】
大黄抽出物に対する分析結果を、図１７（ＧＭ‐ＣＳＦ）、は１８（ＩＬ‐１α）、図１９（ＩＬ‐８）、及び図２０（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図１７〜２０を参照すると、本発明に係る大黄抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
【００４６】
刺五加皮抽出物に対する分析結果を、図２１（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図２２（ＩＬ‐１α）、図２３（ＩＬ‐８）、及び図２４（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図２１〜２４を参照すると、本発明に係る刺五加皮抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
【００４７】
また、黄柏抽出物に対する分析結果を、図２５（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図２６（ＩＬ‐１α）、図２７（ＩＬ‐８）、及び図２８（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図２５〜２８を参照すると、本発明に係る黄柏抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
［実験例３］ニキビ性皮脂生成抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物のニキビ性皮脂生成抑制効果を効率的に評価するために、皮脂腺細胞と角質細胞をともに使用してヒトのニキビ病変と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、ＨａＣａＴ角質細胞とゴールデンハムスターの皮脂腺細胞をそれぞれ３．７５×１０４個及び６．０×１０４個ずつ接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日待った。このとき、培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加したものを使用した。
【００４８】
１日経過した細胞に、ニキビ性炎症を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加した。同時に、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性炎症抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ニキビ治療専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）１００ｎＭを使用した。刺激源と抽出物を添加し、一日経過した後、細胞内に生成された中性脂肪の量を、オイルレッドＯ（Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ）染色法を使用して測定した。
【００４９】
より具体的には、次の過程を実行した。ＰＢＳで洗浄した細胞を、３０分間、３．７％ホルムアルデヒド（ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ）溶液で固定した。固定された細胞を、ＰＢＳで３回、７０％エタノールで１回洗浄し、０．４％オイルレッドＯ（Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ）溶液で３０分間染色した。染色された細胞を、７０％エタノールで１回、ＰＢＳで３回洗浄した。その後、染色されたオイルレッドＯ（Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ）溶液をイソプロパノールで再び溶出して、分光光度計（ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）を使用して５２０ｎｍでの吸光度を測定して定量した。
【００５０】
黄耆抽出物について定量した結果を、図２９に示す。図２９を参照すると、黄耆抽出物が皮脂抑制に効果的であることが分かる。特に、５ｐｐｍ以上の濃度において優れた皮脂抑制効果を発揮した。
【００５１】
三白草抽出物について定量した結果を、図３０に示す。図３０を参照すると、三白草抽出物は、濃度依存的に皮脂を抑制し、５０ｐｐｍ以上の濃度において有効な皮脂抑制効果を発揮した。
【００５２】
甘草抽出物について定量した結果を、図３１に示す。図３１を参照すると、甘草抽出物は、相対的に低濃度においても皮脂抑制効能を有することが分かる。
薔薇抽出物について定量した結果を、図３２に示す。図３２を参照すると、薔薇抽出物は、濃度依存的に皮脂抑制効能を有することが分かる。
【００５３】
大黄抽出物について定量した結果を、図３３に示す。図３３を参照すると、大黄抽出物は、濃度依存的に皮脂抑制効能を有することが分かる。
刺五加皮抽出物について定量した結果を、図３４に示す。図３４を参照すると、刺五加皮抽出物は、濃度依存的に皮脂抑制効能を有することが分かる。
【００５４】
また、黄柏抽出物について定量した結果を、図３５に示す。図３５を参照すると、黄柏抽出物は、全体的に濃度依存的に皮脂抑制効能を示す。特に、２５０ｐｐｍの濃度において有意な皮脂抑制効能を示した。
［実験例４］ニキビ性色素沈着抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物のニキビ性色素沈着抑制効果を効率的に評価するために、メラニン形成細胞を使用して、ヒトのニキビ性炎症により誘導された色素沈着と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、メラン‐ａ（ｍｅｌａｎ‐ａ）メラニン形成細胞を５．０×１０４個接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日間待った。このとき、培地は、ＲＰＭＩ‐１６４０（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ＴＰＡ（ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌ ｐｈｏｒｂｏｌ ａｃｅｔａｔｅ）２００ｎＭ、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加したものを使用した。
【００５５】
１日経過した細胞に、ニキビ性色素沈着を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加し、５日間培養した。その後、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性色素沈着に対する抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ヒドロキノン（ｈｙｄｒｏｑｕｉｎｏｎｅ；１ μＭ）とコウジ酸（ｋｏｊｉｃ ａｃｉｄ；２００ｐｐｍ）をそれぞれ使用した。ヒドロキノンは、メラミン阻害剤として使用される専門医薬品である。また、コウジ酸は、美白効能が認められ、化粧料組成物の原料物質の一つとして使用されることがある。しかし、コウジ酸は、皮膚に強い刺激を与えるおそれがあり、最近では、いくつかの癌を誘発する可能性があると報告されている。抽出物を処理し、５日経過した後、１Ｎ ＮａＯＨで処理してメラニン（ｍｅｌａｎｉｎ）を溶出した後、分光光度計（ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）を利用して４０５ｎｍでの吸光度を測定した。
【００５６】
黄耆抽出物に対する測定結果を、図３６に示す。図３６を参照すると、本発明に係る黄耆抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。５ｐｐｍの濃度では、専門医薬品として使用されるヒドロキノンで処理した群よりも色素沈着の程度が低いことが分かった。特に、２５ｐｐｍの濃度では刺激源を処理していない対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が低いことが示された。したがって、本発明に係る黄耆抽出物は、色素沈着抑制効能に優れ、さらに美白効能を有することも確認された。
【００５７】
三白草抽出物に対する測定結果を、図３７に示す。図３７を参照すると、本発明に係る三白草抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。特に、５ｐｐｍの濃度では、色素沈着抑制効果が非常に優れ、刺激源を処理しなかった対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が低いことが示された。したがって、本発明に係る三白草抽出物は、色素沈着抑制効能に優れ、さらに美白効能を有することも確認された。
【００５８】
甘草抽出物に対する測定結果を、図３８に示す。図３８を参照すると、本発明に係る甘草抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。特に、２５０ｐｐｍの濃度では、色素沈着抑制効果が非常に優れ、刺激源を処理しなかった対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が相当に低いことが示された。したがって、本発明の甘草抽出物は、色素沈着抑制効能が非常に優れ、さらに優れた美白効能を有することも確認された。
【００５９】
薔薇抽出物に対する測定結果を、図３９に示す。図３９を参照すると、本発明に係る薔薇抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。特に、２５０ｐｐｍの濃度では、色素沈着抑制効果が非常に優れ、刺激源を処理しなかった対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が相当に低いことが示された。したがって、本発明に係る薔薇抽出物は、色素沈着抑制効能が非常に優れ、さらに優れた美白効能を有することも確認された。
【００６０】
大黄抽出物の測定結果を、図４０に示す。図４０を参照すると、本発明に係る大黄抽出物は、概して濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があり、本実験では、５０ｐｐｍの濃度において色素沈着効果が最も優れていることが示された。したがって、本発明に係る大黄抽出物は、比較的低い濃度においても優れた色素沈着抑制効能が認められ、さらに優れた美白効能を発揮し得るものと予見される。
【００６１】
刺五加皮抽出物に対する測定結果を、図４１に示す。図４１を参照すると、本発明に係る刺五加皮抽出物は、概して濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があり、本実験では、２５０ｐｐｍの濃度において色素沈着抑制効能が最も優れていることが示された。したがって、本発明に係る刺五加皮抽出物は、優れた色素沈着抑制効能を示し、さらに、優れた美白効能が認められる。
【００６２】
また、黄柏抽出物に対する測定結果を、図４２に示す。図４２を参照すると、本発明に係る黄柏抽出物は、概して濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があり、本実験では、２５０ｐｐｍの濃度において色素沈着抑制効能が最も優れていることが示された。したがって、本発明に係る黄柏抽出物は、優れた色素沈着抑制効能を示し、さらに優れた美白効能を有することが認められる。
［実験例５］ニキビ性傷抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草及び甘草抽出物のニキビ性傷抑制効果を効率的に評価するために、皮脂腺細胞を使用してヒトのニキビ病変と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏニキビ傷モデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、ゴールデンハムスターの皮脂腺細胞を６．０×１０４個接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日待った。このとき、培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））に、ウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（ａｌｌ ｆｒｏｍ ＧＩＢＣＯ， Ｍｉｌａｎ，Ｉｔａｌｙ）を添加したものを使用した。
【００６３】
１日経過した細胞に、ニキビ性炎症を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加した。同時に、黄耆、三白草又は甘草抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性傷に対する抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ニキビ治療専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）を１００ｎＭ使用した。刺激源と抽出物を添加し、一日経過した後、培養液に溶け出てきたＭＭＰ（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ）のゼラチン（ｇｅｌａｔｉｎ）分解活性をゼラチンザイモグラフィー（ｇｅｌａｔｉｎ ｚｙｍｏｇｒａｐｈｙ）法を使用して測定した。
【００６４】
より具体的には、次の手順を実行した：細胞培養液５μｌとトリス‐グリシンサンプルバッファ（Ｔｒｉｓ‐Ｇｌｙｃｉｎｅ ｓａｍｐｌｅ ｂｕｆｆｅｒ；インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）５μｌとを混合し、２ｍｇ／ｍｌのゼラチンが含まれた１０％アクリルアミドゲルにおいて１５０Ｖで２時間電気泳動を行った。ゲルを枠から分離してリネーチャリングバッファ（ｒｅｎａｔｕｒｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）中で３０分間、ディベロッピングバッファ（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）中で３０分間、室温で反応させた後、再びディベロッピングバッファ（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）に入れて、３７℃で８時間反応させた。ディベロッピングバッファ（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）を除去し、ＰＢＳで３回洗浄した後、シンプリーブルー（ＳｉｍｐｌｙＢｌｕｅ；インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）で１時間染色した。染色されたゲルをバンド（ｂａｎｄ）と背景が十分に区別されるまで蒸留水で洗浄し、観察した。
【００６５】
黄耆抽出物に対する実験結果を、図４３〜４５に示す。図４３では、電気泳動を通じて分離されたＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２を確認することができる。図４４では、本発明の黄耆抽出物がＭＭＰ‐９抑制効果を有することが分かる。また、図４５では、前記黄耆抽出物が、ニキビ治療の専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）よりもＭＭＰ‐２抑制効果に優れていることが分かる。
【００６６】
三白草抽出物に対する実験結果を、図４６〜４８に示す。図４６では、電気泳動を通じて分離されたＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２を確認することができる。図４７と４８では、本発明に係る三白草抽出物がＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２抑制効果を有することが分かる。こうした抑制効果は、ニキビ治療の専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）を処理した場合の結果に匹敵する。
【００６７】
また、甘草抽出物に対する実験結果を、図４９〜５１に示す。図４９では、電気泳動を通じて分離されたＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２を確認することができる。図５０と５１は、甘草抽出物のＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２抑制効果を示したグラフである。本発明に係る甘草抽出物は、特にＭＭＰ‐２の抑制効能に優れることが分かる。
【００６８】
以下に、前記組成物の剤形例を説明するが、本発明を限定しようとするものではなく、単に具体的に説明しようとするものである。
［剤形例１］軟質カプセルの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、パーム油２ｍｇ、植物性硬化油８ｍｇ、黄蝋４ｍｇ及びレシチン９ｍｇを混合し、通常の方法に従い混合して、各々軟質カプセル充填液を製造した。１カプセル当たり４００ｍｇずつ充填して、軟質カプセルを製造した。そして、前記とは別途に、ゼラチン６６重量部、グリセリン２４重量部及びソルビトール液１０重量部の比率で軟質カプセルシートを製造し、前記充填液を充填させて、本発明に係る組成物４００ｍｇが含有された軟質カプセルを各々製造した。
［剤形例２］錠剤の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ガラクトオリゴ糖２００ｍｇ、乳糖６０ｍｇ及び麦芽糖１４０ｍｇを混合し、流動層乾燥機を利用して顆粒化した後、糖エステル（ｓｕｇａｒ ｅｓｔｅｒ）６ｍｇを添加した。これら組成物５０４ｍｇを通常の方法で打錠して錠剤を各々製造した。
［剤形例３］ドリンク剤の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸０．６ｇ、及び液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水３００ｍｌを加えて、各々瓶に２００ｍｌずつ充填した。瓶に充填した後、１３０℃で４〜５秒間殺菌してドリンク剤を各々製造した。
［剤形例４］顆粒の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、無水結晶ブドウ糖２５０ｍｇ及び澱粉５５０ｍｇを混合し、流動層造粒機を使用してそれぞれ顆粒に成形した後、包に充填して製造した。
［剤形例５］軟質カプセルの製造
黄耆抽出物４０ｍｇ、三白草抽出物４０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、パーム油２ｍｇ、植物性硬化油８ｍｇ、黄蝋４ｍｇ及びレシチン９ｍｇを混合し、通常の方法に従い混合して、軟質カプセル充填液を調製した。１カプセル当たり４００ｍｇずつ充填して、軟質カプセルを製造した。そして、前記とは別途に、ゼラチン６６重量部、グリセリン２４重量部及びソルビトール液１０重量部の比率で軟質カプセルシートを製造し、前記充填液を充填して、本発明に係る組成物４００ｍｇが含有された軟質カプセルを製造した。
［剤形例６］錠剤の製造
黄耆、三白草、甘草及び薔薇抽出物を２０ｍｇずつ混合し、これにビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ガラクトオリゴ糖２００ｍｇ、乳糖６０ｍｇ及び麦芽糖１４０ｍｇを混合した後、流動層乾燥機を利用して顆粒化し、糖エステル（ｓｕｇａｒ ｅｓｔｅｒ）６ｍｇを添加した。この組成物５０４ｍｇを通常の方法で打錠して錠剤を製造した。
［剤形例７］ドリンク剤の製造
黄耆、三白草、及び甘草抽出物を同一の重量で混合して、８０ｍｇの混合物を製造した。製造された混合物に、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸０．６ｇ、及び液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水３００ｍｌを加えて、瓶に２００ｍｌずつとなるように充填した。瓶に充填した後、１３０℃で４〜５秒間殺菌してドリンク剤を製造した。
［剤形例８］顆粒の製造
薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物を各２０ｍｇずつ混合して混合物を製造した。製造された混合物に、ビタミンＥ １０ｍｇ、ビタミンＣ １０ｍｇ、無水結晶ブドウ糖２５０ｍｇ及び澱粉５５０ｍｇを混合し、流動層造粒機を使用して顆粒に成形した後、包に充填して製造した。
［剤形例９］柔軟化粧水（スキンローション）の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．３ｍｇ、ブチレングリコール６．０ｍｇ、プロピレングリコール６．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．６ｍｇ、ポリソルベート８０ １．２ｍｇ 、エタノール３０．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、精製水２５５ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の柔軟化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする柔軟化粧水をそれぞれ製造した。
［剤形例１０］栄養化粧水（ミルクローション）の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．３ｍｇ、蜜蝋１２．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート４．５ｍｇ、流動パラフィン１．５ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１５ｍｇ、グリセリン９．０ｍｇ、ブチレングリコール９．０ｍｇ、プロピレングリコール９．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水２３４ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の栄養化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする栄養化粧水をそれぞれ製造した。
［剤形例１１］マッサージクリームの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．３ｍｇ、蜜蝋３０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油６．０ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート２．４ｍｇ、流動パラフィン１２０．０ｍｇ、スクアラン１５．０ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１２．０ｍｇ、グリセリン１５．０ｍｇ、ブチレングリコール１２．０ｍｇ、プロピレングリコール１２．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水７０ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常のマッサージクリームの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするマッサージクリームをそれぞれ製造した。
［剤形例１２］パックの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１．０ｍｇ、ポリビニルアルコール１３．０ｍｇ、カルボキシメチルセルロースナトリウム０．２ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、アラントイン０．１ｍｇ、エタノール６．０ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．３ｍｇ、ポリソルベート６０ ０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のパックの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパックをそれぞれ製造した。
［剤形例１３］ゲルの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．０５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン０．１ｍｇ、エチレンジアミン酢酸ナトリウム０．０５ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、エタノール５．０ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油０．５ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のゲルの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするゲルをそれぞれ製造した。
［剤形例１４］柔軟化粧水（スキンローション）の製造
黄耆、三白草及び甘草抽出物各０．１ｍｇ、ブチレングリコール６．０ｍｇ、プロピレングリコール６．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．６ｍｇ、ポリソルベート８０ １．２ｍｇ、エタノール３０．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、精製水２５５ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の柔軟化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする柔軟化粧水を製造した。
［剤形例１５］栄養化粧水（ミルクローション）の製造
黄耆及び三白草抽出物各０．１５ｍｇ、蜜蝋１２．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート４．５ｍｇ、流動パラフィン１．５ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１５ｍｇ、グリセリン９．０ｍｇ、ブチレングリコール９．０ｍｇ、プロピレングリコール９．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水２３４ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の栄養化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする栄養化粧水を製造した。
［剤形例１６］マッサージクリームの製造
薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物各０．０７５ｍｇ、蜜蝋３０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油６．０ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート２．４ｍｇ、流動パラフィン１２０．０ｍｇ、スクアラン１５．０ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１２．０ｍｇ、グリセリン１５．０ｍｇ、ブチレングリコール１２．０ｍｇ、プロピレングリコール１２．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水７０ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常のマッサージクリームの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするマッサージクリームを製造した。
［剤形例１７］パックの製造
刺五加皮及び黄柏抽出物各０．２５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１．０ｍｇ、ポリビニルアルコール１３．０ｍｇ、カルボキシメチルセルロースナトリウム０．２ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、アラントイン０．１ｍｇ、エタノール６．０ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．３ｍｇ、ポリソルベート６０ ０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のパックの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパックを製造した。
［剤形例１８］ゲルの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇及び大黄抽出物各０．０１ｍｇ、β‐１，３‐グルカン０．１ｍｇ、エチレンジアミン酢酸ナトリウム０．０５ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、エタノール５．０ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油０．５ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のゲルの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするするゲルを製造した。
［剤形例１９］皮膚外用剤のうち軟膏
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物２．０ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１０．０ｍｇ、蜜蝋１０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ５．０ｍｇ、ピイジ６０硬化ヒマシ油２．０ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート０．５ｍｇ、ワセリン５．０ｍｇ、流動パラフィン１０．０ｍｇ、スクアラン５．０ｍｇ、シアバター３．０ｍｇ、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル５．０ｍｇ、グリセリン１０ｍｇ、プロピレングリコール１０．２ｍｇ、トリエタノールアミン０．２ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常の軟膏剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする軟膏剤をそれぞれ製造した。
［剤形例２０］局所投与用薬剤（パッチ剤）の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物１．０ｍｇ、β‐１，３‐グルカン３．０ｍｇ、ヘキシレングリコール２０．０ｍｇ、ジエチルアミン０．７ｍｇ、ポリアクリル酸（カルボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））９３４Ｐ）１．０ｍｇ、亜硫酸ナトリウム０．１ｍｇ、ポリオキシエチレンラウリルエーテル（ＥＯ＝９）１．０ｍｇ、ポリヒドロキシエチレンセチルステアリルエーテル（セトマクロゴール（Ｃｅｔｏｍａｃｒｏｇｏｌ）１０００）１．０ｍｇ、粘性のパラフィンオイル２．５ｍｇ、カプリル酸エステル／カプリン酸エステル（セチオール（Ｃｅｔｉｏｌ（登録商標））ＬＣ）２．５ｍｇ、ポリエチレングリコール４００ ３．０ｍｇに対して、精製水を添加し、通常のパッチ剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパッチ剤をそれぞれ製造した。
［剤形例２１］皮膚外用剤のうち軟膏
黄耆及び三白草抽出物各１．０ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１０．０ｍｇ、蜜蝋１０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ５．０ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油２．０ｍｇ、セスキオレイン酸ソルビタン０．５ｍｇ、ワセリン５．０ｍｇ、流動パラフィン１０．０ｍｇ、スクアラン５．０ｍｇ、シアバター３．０ｍｇ、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル５．０ｍｇ、グリセリン１０ｍｇ、プロピレングリコール１０．２ｍｇ、トリエタノールアミン０．２ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常の軟膏剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする軟膏剤を製造した。
［剤形例２２］局所投与用薬剤（パッチ剤）の製造
薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物各０．２５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン３．０ｍｇ、ヘキシレングリコール２０．０ｍｇ、ジエチルアミン０．７ｍｇ、ポリアクリル酸（カルボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））９３４Ｐ）１．０ｍｇ、亜硫酸ナトリウム０．１ｍｇ、ポリオキシエチレンラウリルエーテル（Ｅ．Ｏ＝９）１．０ｍｇ、ポリヒドロキシエチレンセチルステアリルエーテル（セトマクロゴール（Ｃｅｔｏｍａｃｒｏｇｏｌ）１０００）１．０ｍｇ、粘性のパラフィンオイル２．５ｍｇ、カプリル酸エステル／カプリン酸エステル（セチオール（Ｃｅｔｉｏｌ（登録商標））ＬＣ）２．５ｍｇ、ポリエチレングリコール４００ ３．０ｍｇに対して、精製水を添加し、通常のパッチ剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパッチ剤を製造した。
【００６９】
本発明が属する分野における通常の知識を有する者であれば、前記の内容を土台に、本発明の範疇内で多様な応用及び変形を行うことが可能であろう。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明の一実施形態に係る組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又は傷を抑制する効果があり、化粧品、食品又は医薬の分野において多様に活用可能である。
【技術分野】
【０００１】
有効成分として、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般的に、ニキビは、男性ホルモンの分泌と関連した皮脂過剰が原因で発生する。具体的には、男性ホルモンによって皮脂が発生し、毛孔の過角質化現状（ｈｙｐｅｒｋｅｒａｔｉｎｉｚａｔｉｏｎ）が誘発されつつ、毛孔の入口が狭くなり、ひどい場合には詰まるようになる。毛孔の入口が狭くなったり詰まったりすると、毛孔内の皮脂が外に排出されなくなり、微細面皰を形成するようになり、毛孔内に棲息する嫌気性バクテリアであるプロピオニバクテリウム・アクネス（ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）が増殖しつつ、炎症が誘発され得る。
【０００３】
誘発された炎症反応により、紅斑、ひりつき、又は膨潤現象が現れ、ひどい場合には過色素沈着（ｈｙｐｅｒｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ）が現れ得る。また、ニキビの部位を絞ったり押したりすると、面皰が潰れて炎症が悪化したり、組織の損傷を引き起こしてニキビ傷を残す危険が大きくなる。
【０００４】
こうしたニキビ性炎症は、多様な原因により誘発され得、例えば、化粧品内に含まれる各種添加剤が皮膚に残ることにより、ニキビ性炎症を誘発し得る。また、体内から排出される皮脂、汗又は紫外線等によっても、皮膚の炎症が誘発され得る。
多様な原因によって誘発されるニキビ性炎症に対し、炎症自体の治療のみについての研究開発が集中しているのが実情である。しかし、炎症が治療されても、それによる皮膚の紅斑や傷等が残ることになり、美容上好ましくない結果を生むことになる。したがって、本発明においては、ニキビ性炎症による色素沈着や傷を抑制ないし防止するための研究を実施した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、本発明は、前記のような従来技術の問題点と、従来から要請されてきた技術的課題を解決することを目的とする。
具体的に、本発明の一実施形態の目的は、ニキビ性色素沈着抑制用組成物を提供することにある。
【０００６】
本発明の他の一実施形態の目的は、ニキビ性傷抑制用組成物を提供することにある。
本発明の他の一実施形態の目的は、ニキビ後遺症に対するアフターケア用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一実施形態に係る組成物は、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の一実施形態に係る組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又は傷を抑制する効果がある。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図２】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図３】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図４】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図５】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図６】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図７】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図８】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図９】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図１０】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図１１】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図１２】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図１３】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図１４】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図１５】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図１６】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図１７】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図１８】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図１９】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図２０】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図２１】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図２２】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図２３】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図２４】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図２５】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＧＭ‐ＣＳＦ）。
【図２６】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐１α）。
【図２７】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＩＬ‐８）。
【図２８】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の炎症性サイトカインの抑制効能を示したグラフである（ＴＮＦ‐α）。
【図２９】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３０】本発明の一実施例に係る三白草抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３１】本発明の一実施例に係る甘草抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３２】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３３】本発明の一実施例に係る大黄抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３４】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３５】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物の皮脂生成抑制効能を示したグラフである。
【図３６】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図３７】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図３８】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図３９】本発明の一実施例に係る薔薇抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４０】本発明の一実施例に係る大黄抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４１】本発明の一実施例に係る刺五加皮抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４２】本発明の一実施例に係る黄柏抽出物のニキビ性色素沈着抑制効能を示したグラフである。
【図４３】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４４】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４５】本発明の一実施例に係る黄耆抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４６】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４７】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４８】本発明の一実施例に係る三白草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図４９】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図５０】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【図５１】本発明の一実施例に係る甘草抽出物のニキビ性傷抑制効能を示したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明に係る組成物は、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を有効成分として含有する。黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有する組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又はニキビ性傷を防止ないし抑制する効果が認められる。一実施形態において、本発明に係る組成物は、有効成分として黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性色素沈着抑制用組成物である。他の一実施形態において、本発明に係る組成物は、有効成分として、黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性傷抑制用組成物である。
【００１１】
黄耆（Ａｓｔｒａｇｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）は、双子葉植物で、薔薇目マメ科の多年生草の一種である。主に山地の岩間に生息し、高さは４０〜７０ｃｍ程度であり、韓国、日本、中国東北部及びシベリア東部等に分布する。漢方においては、秋に採取して蘆頭とひげ根を除去し、日光で乾燥させたものを漢薬材の黄耆という。
【００１２】
三白草（Ｓａｕｒｕｒｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）は、双子葉植物で、胡椒目三白草科の多年生草の一種である。根茎は白色で、泥の中で横に伸びる。茎の高さは５０〜１００ｃｍで、６〜８月に白い花が咲く。主に湿地で育ち、根、葉及び花が白色であるため三白草という。脚気、黄疸、肝炎等に効果があることで知られており、韓国、日本、中国等に分布する。
【００１３】
甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｕｒａｌｅｎｓｉｓ）は、双子葉植物マメ科に属し、薬用植物として多く使用されている。韓国以外にも、中国東北部、シベリア、モンゴル等に分布する。茎は角ばっていて１ｍほどまっすぐに育ち、葉は互生し、奇数羽状複葉である。花は７〜８月頃に咲き、長さ１．４〜２．５ｃｍの紫色である。根は、赤褐色で地中深く入り、甘みがあり、甘味料（ｓｗｅｅｔｅｎｉｎｇ）又は漢方薬等に使用される。
【００１４】
薔薇（Ｒｏｓａ ｓｐｐ．）は、双子葉植物薔薇目薔薇科に属する植物を総称し、野生種と改良を加えた園芸種をすべて含む。薔薇は灌木性の花木で、美しい花と香りで観賞用や香料用として多く栽培されている。薔薇は、北半球の寒帯、亜寒帯、温帯、亜熱帯等の広い地域で多様な品種が栽培されている。
【００１５】
大黄（Ｒｈｅｕｍ ｕｎｄｕｌａｔｕｍ）は、離弁花群タデ目タデ科の多年生植物を総称する意味である。大黄は、主に谷の湿地に生息し、原産地は中国である。太い黄色の根があり、まっすぐに育つ主枝の高さは１ｍに達することもある。主に薬剤として用いられるのは大黄の主根である。主根の皮とひげ根を除去し、そのまま又は丸ごと切って乾燥させたものを薬用として使用する。消炎性の下剤として使用しており、様々な処方に配合して使用されている。
【００１６】
刺五加皮（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ ｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ）は、タラノキ科の落葉低木であって、その高さは２〜３ｍ程度である。木全体に細くて長い棘がびっしりと生え、手のひら状の複葉がずれるように生える。刺五加皮の属名であるアカントパナクス（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ）のうち、アカント（Ａｃａｎｔｈｏ）は「茨」を意味し、パナクス（ｐａｎａｘ）は「万病を治療する」という意味で、「万病を治す茨」という意味である。昔から、神経痛、関節炎、高血圧、神経衰弱、糖尿及び強壮剤として広く用いられている。
【００１７】
また、黄柏（Ｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｉ Ｃｏｒｔｅｘ）は、黄柏の木の皮を薬剤として呼ぶ言葉であって、黄柏の木は、ミカン科（ｒｕｔａｃｅａｅ）の落葉闊葉喬木で、１０ｍ程度の高さに育つが、皮にはコルクが発達し、内皮は黄色である。黄柏は、前後に木の幹の皮を剥いで粗皮を除去したり刻んだりして、太陽の下で乾燥させて製造する。黄柏は、血糖低下作用を有することが知られており、肺炎双球菌、ヒト型結核菌、ブドウ状球菌等に対して発育阻止作用を有すると同時に、腫瘍細胞の繁殖を阻止し、殺菌作用を有する。黄柏を服用する場合には、味覚反射の亢進によって胃液の分泌を促進させ、食欲の亢進効能があることが知られている。
【００１８】
前記の抽出物は、通常の多様な方法により、別途の制限なく抽出することができる。一実施形態において、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、蒸留水、Ｃ１〜Ｃ５の無水又は含水低級アルコール等の有機溶媒で抽出することができる。他の一実施形態において、前記抽出物は、熱水抽出物であってよい。熱水抽出物の場合、抽出過程において、真空及び高圧の条件をともに設定することにより、抽出効率を高めることができる。
【００１９】
他の一実施形態において、黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、ゼラチナーゼ（ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ）を抑制する効能が認められる。ゼラチナーゼは、多様な種類のカビや酵母等から発現される蛋白質加水分解酵素の一種であり、ゼラチンを液化させる機能がある。ゼラチナーゼの種類は特に制限されず、ヒトから発現されるゼラチナーゼ遺伝子としては、ＭＭＰ‐９（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐９）やＭＭＰ‐２（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐２）等がある。他の一実施形態において、前記黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、ＭＭＰ‐９及び／又はＭＭＰ‐２を抑制する効能が認められる。本発明に係る組成物は、ゼラチナーゼ、具体的には、ＭＭＰ‐９及び／又はＭＭＰ‐２を抑制することにより、ニキビ性傷を防止ないし抑制する。
【００２０】
本発明に係る組成物は、多様な分野において特別な制限なしに活用することができ、例えば、皮膚外用剤として剤形化することができ、具体的には、化粧料や医薬組成物の形態で剤形化することができる。
【００２１】
本発明に係る皮膚外用剤組成物は、油性又は水性媒質から溶液、懸濁液又は乳化液の形態となることができ、また、使用する前に、無菌、発熱物質が除去された水に溶かして使用する乾燥粉末の形態で剤形化することができる。油中水型乳剤は、オリーブ油等の植物油又は液状パラフィン等の鉱物性油を油相とし、大豆レシチン等の天然リン脂質、及びソルビタンモノオレエート等の無水ヘキシトールや脂肪酸のエステルに由来するもの、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート等の無水ヘキシトールと脂肪酸に由来する部分エステルをエチレンオキシドと縮合した化合物を乳化剤として、活性成分を乳化させたものである。
【００２２】
一実施形態において、本発明の皮膚外用剤組成物において、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物の含量は、組成物全体の重量を基準として０．１〜２０重量％、より具体的には０．５〜２０重量％とすることができる。抽出物の含量が過度に少ない場合には、皮膚状態の管理及び改善の効果が僅かであり、抽出物の含有量が増加すれば、抽出物添加による効率性が低下して、剤形の安定性等の問題が誘発され得る。
【００２３】
本発明は、前記組成物を含む化粧料組成物を提供する。前記組成物を化粧料の形態で剤形化する場合には、ニキビ性色素沈着を防止又は改善させる目的で使用することができる。また、ニキビ性傷が発生することを防止又は改善する目的で使用することができる。前記化粧料の剤形は、特に限定されず、例えば、柔軟化粧水、栄養化粧水、マッサージクリーム、栄養クリーム、パック、ゲル又は皮膚粘着タイプの化粧料の剤形を有する化粧料組成物であってよく、また、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、パッチ又はスプレー等の経皮投与型剤形であってよい。また各々の製剤において、他の成分は、その他化粧料組成物の種類又は使用目的等に応じて、当業者が困難なく適宜選定して配合することができる。
【００２４】
本発明はまた、前記組成物を含む医薬組成物を提供する。本発明の組成物を含む医薬組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又はニキビ性傷の改善ないし抑制用組成物であってよい。
【００２５】
本発明の組成物を医薬品に適用する場合には、前記組成物に有効成分として常用される無機又は有機の担体を加えて、固体、半固体又は液状の形態で、経口投与剤或いは非経口投与剤として剤形化することができる。
【００２６】
前記経口投与用の製剤としては、錠剤、丸剤、顆粒剤、軟・硬カプセル剤、散剤、細粒剤、粉剤、乳濁剤、シロップ剤、ペレット剤等を挙げることができる。また、前記非経口投与のための製剤としては、注射剤、点滴剤、軟膏、ローション、スプレー、懸濁剤、乳剤、坐剤等を挙げることができる。本発明の有効成分を剤形化するためには、常法に従って実施すれば容易に剤形化することができ、界面活性剤、賦形剤、着色料、香辛料、保存料、安定剤、緩衝剤、懸濁剤、その他常用される補助剤を適宜使用することができる。
【００２７】
本発明に係る前記医薬組成物は、経口、非経口、直腸、局所、経皮、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下等に投与することができる。
また、前記活性成分の投与量は、治療される対象の年齢、性別、体重と、治療する特定の疾患又は病理状態、疾患又は病理状態の深刻度、投与経路、及び処方者の判断によって変わり得るであろう。こうした因子に基づく投与量の決定は、当業者の水準内にある。一般的な投与量は、０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜２０００ｍｇ／ｋｇ／日、より具体的には、０．５ｍｇ／ｋｇ／日〜１５００ｍｇ／ｋｇ／日である。
【００２８】
本発明は、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有しているアフターケア（ａｆｔｅｒｃａｒｅ）用組成物を提供する。より具体的には、ニキビによる皮膚トラブルによる色素沈着及び／又は傷等の後遺症を総合的に管理し、皮膚状態を改善するためのアフターケア用組成物を提供する。
【００２９】
一実施形態において、本発明に係るアフターケア用組成物中の黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物の含量は、組成物全体の重量を基準として０．１〜２０重量％、より具体的には、０．５〜２０重量％であってよい。抽出物の含有量が過度に少ない場合には、皮膚状態の管理及び改善の効果が僅かであり、抽出物の含有量が増加すれば、抽出物添加による効率性が低下して、剤形の安定性等の問題が誘発され得る。
【００３０】
本発明において、「アフターケア（ａｆｔｅｒｃａｒｅ）」とは、皮膚状態を管理及び改善するための総合的な事後管理を意味する。例えば、休暇の季節に海、川や渓谷等で水遊びを楽しんだり、日焼けやタンニング等を長時間行ったりする場合には、皮膚が紫外線に過度に露出されて炎症が誘発され得る。また、皮膚に塗布されたサンクリーム又はオイル等に含まれた各種添加剤が皮膚に残ることにより、ニキビ性炎症を起こすこともあり得る。この他にも、日常生活の中で多様な原因によってニキビ性炎症等の皮膚トラブルが誘発され得る。アフターケアは、これらのニキビ性炎症を含む皮膚トラブルに対して、皮膚管理及び皮膚状態改善のための事後管理を総称する意味である。また、アフターケア用組成物は、アフターケアのために皮膚に粘着、沈着ないし塗布する組成物を包括する意味である。
【００３１】
一実施形態において、本発明は、前記組成物を含む食品添加物、機能性食品又は健康食品等を提供する。具体的には、前記組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又は傷の改善ないし抑制用組成物とすることができる。
【００３２】
本発明に係る組成物は、多様な種類の食品添加物又は機能性食品に含まれてもよい。前記組成物を含む発酵乳、チーズ、ヨーグルト、ジュース、生菌製剤及び健康補助食品等に加工することができ、その他多様な食品添加剤の形態で使用することができる。
【００３３】
一実施形態において、前記組成物は、本発明が目的とする主効果を損傷させない範囲内で、主効果の相乗効果を与え得る他の成分等を含有してもよい。例えば、物性改善のために、香料、色素、殺菌剤、酸化防止剤、防腐剤、保湿剤、増粘剤、無機塩類、乳化剤及び合成高分子物質等の添加剤をさらに含むことができる。その他にも、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖及び海藻エキス等の補助成分を含むこともできる。前記成分は、剤形や使用目的に応じて、当業者が困難なく適宜選定して配合することができ、その添加量は、本発明の目的及び効果を損傷させない範囲内で選択することができる。
【００３４】
本発明に係る組成物の剤形は、溶液、乳化物、粘性型混合物、タブレット、粉末等の多様な形態であってよく、これは、単純飲用、注射投与、スプレー方式や搾出方式等の多様な方法で投与することができる。
［実施例］
以下、下記実施例により本発明をさらに詳細に説明することにする。ただし、下記実施例は、本発明を例示するためのものであるに過ぎず、本発明の範囲がこれらのみに限定されるものではない。
［実施例１］黄耆抽出物の製造
８年根の黄耆を採取して洗浄した後、乾燥して粉砕した。黄耆と水を混ぜて、８０℃でセラミック真空高圧工法を通じて６〜８時間抽出した。抽出物を遠心分離し、濾過して不純物を除去した。抽出物の原液に、１，３‐ブチレングリコールを添加して黄耆抽出物を製造した。
［実施例２］三白草抽出物の製造
三白草の根をよく洗って乾燥させた後、１０倍のエタノール中、常温で７日間抽出した。抽出液を、２５０メッシュ（３μｍ）のフィルタで濾過した後、６０℃で濃縮した。濃縮液を水に溶かした後、エチルアセテート（ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ）を添加してエチルアセテート層を分離した後、再び６０℃の温度で濃縮した。濃縮物に、塩化メチレン（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）を添加した。その後、エチルアセテートとヘキサンの混合溶液に２回沈殿させて不純物を除去した後、カラムに分画した。カラム分画に対し、６０℃での濃縮と３０℃での減圧濃縮を繰り返して残留溶媒を完全に除去した後、ブチレングリコールに２％溶液となるように溶かした。得られた溶液に対し、更なる濾過や沈殿を行い、三白草抽出物を製造した。
［実施例３］甘草抽出物の製造
甘草の根をよく洗い、エタノールに浸して抽出した。抽出物は、濾過を経て、減圧濃縮した。濃縮された抽出物について、エチルアセテート（ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ）を利用して、エチルアセテートに溶ける分画を再抽出した。エチルアセテートの分画を、樹脂カラムを使用して分離した後、濾過、濃縮、乾燥して、甘草抽出物を製造した。
［実施例４］薔薇抽出物の製造
薔薇の花びらをよく洗って乾燥した後、熱水、プロピレングリコール又はこれらの混合液を利用して抽出した。抽出された抽出液に対し、減圧濃縮及び噴霧乾燥（ｓｐｒａｙ ｄｒｙｉｎｇ）を繰り返した。減圧濃縮及び噴霧乾燥は、残留溶媒が完全に除去されて粉末状となるまで繰り返し、薔薇抽出物を製造した。
［実施例５］大黄抽出物の製造
大黄１ｋｇに精製水２０ｋｇを入れ、２５℃で２４時間抽出した。抽出液は、０〜４℃で２４時間、沈殿物を沈めた後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルタで濾過した。活性炭素を利用して濾過液の色と臭いを除去した後、更なる反復濾過過程を経て、大黄抽出物を製造した。
［実施例６］刺五加皮抽出物の製造
刺五加皮１ｋｇに精製水２０ｋｇを入れ、２５℃で２４時間抽出した。抽出液は、０〜４℃で２４時間、沈殿物を沈めた後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルタで濾過した。活性炭素を利用して濾過液の色と臭いを除去した後、更なる反復濾過過程を経て、刺五加皮抽出物を製造した。
［実施例７］黄柏抽出物の製造
黄柏１ｋｇに精製水２０ｋｇを入れ、２５℃で２４時間抽出した。抽出液は、０〜４℃で２４時間、沈殿物を沈めた後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルタで濾過した。活性炭素を利用して濾過液の色と臭いを除去した後、更なる反復濾過過程を経て、黄柏抽出物を製造した。
［実験例１］細胞（Ｃｅｌｌ）培養条件
５週齢の雄のゴールデンハムスターの耳の皮脂腺からハムスター皮脂腺細胞（ｓｅｂｏｃｙｔｅ）を摘出した。具体的な抽出方法は、サト（Ｓａｔｏ）等の論文（Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ， ２００１， １１７： ９６５〜７０）を参考にした。摘出された皮脂腺細胞を培養フラスコで培養して、２．３５×１０４個／ｃｍ２となるようにした。
【００３５】
培養培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ；ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、０．６８ｍＭのＬ‐グルタミン（Ｌ‐ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））、１０ｎＭのｒｈＥＧＦ（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ；プロジェン バイオテクニック ゲーエムベーハー（Ｐｒｏｇｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｋ ＧｍｂＨ）、ドイツ ハイデルベルグ）を添加して製造した。
【００３６】
抗生物質は、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）をともに使用した。ハムスター皮脂腺細胞は、培養フラスコに完全に付着するのに２４時間が必要とされ、３７℃、５％ＣＯ２で培養した。
【００３７】
ヒト由来の角質細胞（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ）の細胞株であるＨａＣａＴは、ＤＭＥＭ培地（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）に、ウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加して、ペニシリン１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加した培地を使用して、３７℃、５％ＣＯ２の条件で培養して使用した。
【００３８】
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス由来のメラニン形成細胞（ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ）のメラン−ａ（ｍｅｌａｎ‐ａ）は、ＲＰＭＩ‐１６４０（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ＴＰＡ（ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌ ｐｈｏｒｂｏｌ ａｃｅｔａｔｅ）２００ｎＭ、ペニシリン１００ｍｇ／ｍｌ、及びストレプトマイシン１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加した培地を使用して、３７℃、１０％ＣＯ２の条件で培養して使用した。
［実験例２］ニキビ性炎症抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物のニキビ性炎症抑制効果を効率的に評価するために、皮脂腺細胞と角質細胞をともに使用してヒトのニキビ病変と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏ炎症モデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、ＨａＣａＴ角質細胞とゴールデンハムスターの皮脂腺細胞をそれぞれ３．７５×１０４個及び６．０×１０４個ずつ接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日待った。このとき、培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加したものを使用した。
【００３９】
１日経過した細胞に、ニキビ性炎症を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加した。同時に、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性炎症抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ニキビ治療専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）１００ｎＭを使用した。刺激源と抽出物を添加し、一日経過した後、培養液に溶け出てきた炎症性サイトカイン（ｐｏｓｔ‐ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅ）であるＧＭ‐ＣＳＦ（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ‐ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ）、ＩＬ‐１α（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ‐１ ａｌｐｈａ）、ＩＬ‐８（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ‐８）、ＴＮＦ‐α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ‐ａｌｐｈａ）の濃度をマルチプレックスビーズ‐ベースのサイトカイン分析（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ｂｅａｄ‐ｂａｓｅｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｓｓａｙ）を通じて、５０μｌの培地で測定した。
【００４０】
より具体的には、次の過程を実行した。予め洗浄バッファに浸しておいた９６‐ウェルフィルタプレート内の溶液を、真空ポンプですべて吸い出した。次に、細胞（ｃｅｌｌ）培養液を、３０分間、抗体結合ビーズ（ａｎｔｉｂｏｄｙ‐ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ｂｅａｄ）と反応させた。反応が終了すると、検出抗体（ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ）を添加して、３０分間さらに反応させた。その後、ストレプトアビジン‐フィコエリトリン（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ‐ＰＥ， ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ‐ｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎ）を各ウェル（ｗｅｌｌ）に入れ、３０分間待った。洗浄バッファを使用して、付着しなかったＳｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ‐ＰＥを除去した後、サイトカインに付着したビーズの量をバイオ‐プレックス（登録商標）２００（Ｂｉｏ‐ｐｌｅｘ（登録商標）２００）装置を利用して分析した。
【００４１】
黄耆抽出物に対する分析結果を、図１（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図２（ＩＬ‐１α）、図３（ＩＬ‐８）、及び図４（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図１〜４を参照すると、本発明に係る黄耆抽出物は、炎症性サイトカインを濃度依存的に抑制させることが分かる。特に、図１では、前記黄耆抽出物が専門医薬品であるイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）と同程度にＧＭ‐ＳＣＦを抑制することが確認された。
【００４２】
三白草抽出物に対する分析結果を、図５（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図６（ＩＬ‐１α）、図７（ＩＬ‐８）、及び図８（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図５〜８を参照すると、本発明に係る三白草抽出物は、炎症性サイトカインを濃度依存的に抑制させることが分かる。ただし、図６（ＩＬ‐１α）では、むしろ５０ｐｐｍ未満の濃度において効果が優れていることが示された。
【００４３】
甘草抽出物に対する分析結果を、図９（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図１０（ＩＬ‐１α）、図１１（ＩＬ‐８）、及び図１２（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図９〜１２を参照すると、甘草抽出物は、全体的に２５ｐｐｍの濃度において炎症性サイトカインの抑制効果が最も効果的であることが確認された。したがって、本発明に係る甘草抽出物は、相対的に低濃度でも炎症性サイトカインを効果的に抑制させることが分かる。
【００４４】
薔薇抽出物に対する分析結果は、図１３（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図１４（ＩＬ‐１α）、図１５（ＩＬ‐８）、及び図１６（ＴＮＦ‐α）に、順に示した。図１３〜１６を参照すると、本発明に係る薔薇抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
【００４５】
大黄抽出物に対する分析結果を、図１７（ＧＭ‐ＣＳＦ）、は１８（ＩＬ‐１α）、図１９（ＩＬ‐８）、及び図２０（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図１７〜２０を参照すると、本発明に係る大黄抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
【００４６】
刺五加皮抽出物に対する分析結果を、図２１（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図２２（ＩＬ‐１α）、図２３（ＩＬ‐８）、及び図２４（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図２１〜２４を参照すると、本発明に係る刺五加皮抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
【００４７】
また、黄柏抽出物に対する分析結果を、図２５（ＧＭ‐ＣＳＦ）、図２６（ＩＬ‐１α）、図２７（ＩＬ‐８）、及び図２８（ＴＮＦ‐α）に、順に示す。図２５〜２８を参照すると、本発明に係る黄柏抽出物は、濃度依存的に炎症性サイトカインを抑制する効能があることが確認された。
［実験例３］ニキビ性皮脂生成抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物のニキビ性皮脂生成抑制効果を効率的に評価するために、皮脂腺細胞と角質細胞をともに使用してヒトのニキビ病変と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、ＨａＣａＴ角質細胞とゴールデンハムスターの皮脂腺細胞をそれぞれ３．７５×１０４個及び６．０×１０４個ずつ接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日待った。このとき、培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加したものを使用した。
【００４８】
１日経過した細胞に、ニキビ性炎症を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加した。同時に、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性炎症抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ニキビ治療専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）１００ｎＭを使用した。刺激源と抽出物を添加し、一日経過した後、細胞内に生成された中性脂肪の量を、オイルレッドＯ（Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ）染色法を使用して測定した。
【００４９】
より具体的には、次の過程を実行した。ＰＢＳで洗浄した細胞を、３０分間、３．７％ホルムアルデヒド（ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ）溶液で固定した。固定された細胞を、ＰＢＳで３回、７０％エタノールで１回洗浄し、０．４％オイルレッドＯ（Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ）溶液で３０分間染色した。染色された細胞を、７０％エタノールで１回、ＰＢＳで３回洗浄した。その後、染色されたオイルレッドＯ（Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ）溶液をイソプロパノールで再び溶出して、分光光度計（ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）を使用して５２０ｎｍでの吸光度を測定して定量した。
【００５０】
黄耆抽出物について定量した結果を、図２９に示す。図２９を参照すると、黄耆抽出物が皮脂抑制に効果的であることが分かる。特に、５ｐｐｍ以上の濃度において優れた皮脂抑制効果を発揮した。
【００５１】
三白草抽出物について定量した結果を、図３０に示す。図３０を参照すると、三白草抽出物は、濃度依存的に皮脂を抑制し、５０ｐｐｍ以上の濃度において有効な皮脂抑制効果を発揮した。
【００５２】
甘草抽出物について定量した結果を、図３１に示す。図３１を参照すると、甘草抽出物は、相対的に低濃度においても皮脂抑制効能を有することが分かる。
薔薇抽出物について定量した結果を、図３２に示す。図３２を参照すると、薔薇抽出物は、濃度依存的に皮脂抑制効能を有することが分かる。
【００５３】
大黄抽出物について定量した結果を、図３３に示す。図３３を参照すると、大黄抽出物は、濃度依存的に皮脂抑制効能を有することが分かる。
刺五加皮抽出物について定量した結果を、図３４に示す。図３４を参照すると、刺五加皮抽出物は、濃度依存的に皮脂抑制効能を有することが分かる。
【００５４】
また、黄柏抽出物について定量した結果を、図３５に示す。図３５を参照すると、黄柏抽出物は、全体的に濃度依存的に皮脂抑制効能を示す。特に、２５０ｐｐｍの濃度において有意な皮脂抑制効能を示した。
［実験例４］ニキビ性色素沈着抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物のニキビ性色素沈着抑制効果を効率的に評価するために、メラニン形成細胞を使用して、ヒトのニキビ性炎症により誘導された色素沈着と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、メラン‐ａ（ｍｅｌａｎ‐ａ）メラニン形成細胞を５．０×１０４個接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日間待った。このとき、培地は、ＲＰＭＩ‐１６４０（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）にウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ＴＰＡ（ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌ ｐｈｏｒｂｏｌ ａｃｅｔａｔｅ）２００ｎＭ、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（いずれもギブコ（ＧＩＢＣＯ）、イタリア ミラノ）を添加したものを使用した。
【００５５】
１日経過した細胞に、ニキビ性色素沈着を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加し、５日間培養した。その後、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性色素沈着に対する抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ヒドロキノン（ｈｙｄｒｏｑｕｉｎｏｎｅ；１ μＭ）とコウジ酸（ｋｏｊｉｃ ａｃｉｄ；２００ｐｐｍ）をそれぞれ使用した。ヒドロキノンは、メラミン阻害剤として使用される専門医薬品である。また、コウジ酸は、美白効能が認められ、化粧料組成物の原料物質の一つとして使用されることがある。しかし、コウジ酸は、皮膚に強い刺激を与えるおそれがあり、最近では、いくつかの癌を誘発する可能性があると報告されている。抽出物を処理し、５日経過した後、１Ｎ ＮａＯＨで処理してメラニン（ｍｅｌａｎｉｎ）を溶出した後、分光光度計（ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）を利用して４０５ｎｍでの吸光度を測定した。
【００５６】
黄耆抽出物に対する測定結果を、図３６に示す。図３６を参照すると、本発明に係る黄耆抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。５ｐｐｍの濃度では、専門医薬品として使用されるヒドロキノンで処理した群よりも色素沈着の程度が低いことが分かった。特に、２５ｐｐｍの濃度では刺激源を処理していない対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が低いことが示された。したがって、本発明に係る黄耆抽出物は、色素沈着抑制効能に優れ、さらに美白効能を有することも確認された。
【００５７】
三白草抽出物に対する測定結果を、図３７に示す。図３７を参照すると、本発明に係る三白草抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。特に、５ｐｐｍの濃度では、色素沈着抑制効果が非常に優れ、刺激源を処理しなかった対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が低いことが示された。したがって、本発明に係る三白草抽出物は、色素沈着抑制効能に優れ、さらに美白効能を有することも確認された。
【００５８】
甘草抽出物に対する測定結果を、図３８に示す。図３８を参照すると、本発明に係る甘草抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。特に、２５０ｐｐｍの濃度では、色素沈着抑制効果が非常に優れ、刺激源を処理しなかった対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が相当に低いことが示された。したがって、本発明の甘草抽出物は、色素沈着抑制効能が非常に優れ、さらに優れた美白効能を有することも確認された。
【００５９】
薔薇抽出物に対する測定結果を、図３９に示す。図３９を参照すると、本発明に係る薔薇抽出物は、濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があることが確認された。特に、２５０ｐｐｍの濃度では、色素沈着抑制効果が非常に優れ、刺激源を処理しなかった対照群よりも、むしろ色素沈着の程度が相当に低いことが示された。したがって、本発明に係る薔薇抽出物は、色素沈着抑制効能が非常に優れ、さらに優れた美白効能を有することも確認された。
【００６０】
大黄抽出物の測定結果を、図４０に示す。図４０を参照すると、本発明に係る大黄抽出物は、概して濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があり、本実験では、５０ｐｐｍの濃度において色素沈着効果が最も優れていることが示された。したがって、本発明に係る大黄抽出物は、比較的低い濃度においても優れた色素沈着抑制効能が認められ、さらに優れた美白効能を発揮し得るものと予見される。
【００６１】
刺五加皮抽出物に対する測定結果を、図４１に示す。図４１を参照すると、本発明に係る刺五加皮抽出物は、概して濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があり、本実験では、２５０ｐｐｍの濃度において色素沈着抑制効能が最も優れていることが示された。したがって、本発明に係る刺五加皮抽出物は、優れた色素沈着抑制効能を示し、さらに、優れた美白効能が認められる。
【００６２】
また、黄柏抽出物に対する測定結果を、図４２に示す。図４２を参照すると、本発明に係る黄柏抽出物は、概して濃度依存的に色素沈着を抑制する効果があり、本実験では、２５０ｐｐｍの濃度において色素沈着抑制効能が最も優れていることが示された。したがって、本発明に係る黄柏抽出物は、優れた色素沈着抑制効能を示し、さらに優れた美白効能を有することが認められる。
［実験例５］ニキビ性傷抑制効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
黄耆、三白草及び甘草抽出物のニキビ性傷抑制効果を効率的に評価するために、皮脂腺細胞を使用してヒトのニキビ病変と類似した環境のｉｎ ｖｉｔｒｏニキビ傷モデルを使用した。２４ウェル（ｗｅｌｌ）の培養プレートに、ゴールデンハムスターの皮脂腺細胞を６．０×１０４個接種した。接種後、培養プレートの底に細胞が付着するまで一日待った。このとき、培地は、ＤＭＥＭ／ハムＦ１２培地（ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２ ｍｅｄｉｕｍ；（１：１）（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド））に、ウシ胎血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ； ＪＲＨバイオサイエンス（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、日本 東京）を１０％添加し、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００ｍｇ／ｍｌ（ａｌｌ ｆｒｏｍ ＧＩＢＣＯ， Ｍｉｌａｎ，Ｉｔａｌｙ）を添加したものを使用した。
【００６３】
１日経過した細胞に、ニキビ性炎症を引き起こすための刺激源として、リノール酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、アラキドン酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ）５０μＭ、ジヒドロテストステロン（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）１０ｎＭ、アクネ菌（Ｐ． ａｃｎｅｓ）０．５％を添加した。同時に、黄耆、三白草又は甘草抽出物をそれぞれ添加して、刺激源によるニキビ性傷に対する抑制効果を観察した。陰性対照群としては、ＤＭＳＯを使用し、陽性対照群としては、ニキビ治療専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）を１００ｎＭ使用した。刺激源と抽出物を添加し、一日経過した後、培養液に溶け出てきたＭＭＰ（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ）のゼラチン（ｇｅｌａｔｉｎ）分解活性をゼラチンザイモグラフィー（ｇｅｌａｔｉｎ ｚｙｍｏｇｒａｐｈｙ）法を使用して測定した。
【００６４】
より具体的には、次の手順を実行した：細胞培養液５μｌとトリス‐グリシンサンプルバッファ（Ｔｒｉｓ‐Ｇｌｙｃｉｎｅ ｓａｍｐｌｅ ｂｕｆｆｅｒ；インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）５μｌとを混合し、２ｍｇ／ｍｌのゼラチンが含まれた１０％アクリルアミドゲルにおいて１５０Ｖで２時間電気泳動を行った。ゲルを枠から分離してリネーチャリングバッファ（ｒｅｎａｔｕｒｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）中で３０分間、ディベロッピングバッファ（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）中で３０分間、室温で反応させた後、再びディベロッピングバッファ（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）に入れて、３７℃で８時間反応させた。ディベロッピングバッファ（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）を除去し、ＰＢＳで３回洗浄した後、シンプリーブルー（ＳｉｍｐｌｙＢｌｕｅ；インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールズバッド）で１時間染色した。染色されたゲルをバンド（ｂａｎｄ）と背景が十分に区別されるまで蒸留水で洗浄し、観察した。
【００６５】
黄耆抽出物に対する実験結果を、図４３〜４５に示す。図４３では、電気泳動を通じて分離されたＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２を確認することができる。図４４では、本発明の黄耆抽出物がＭＭＰ‐９抑制効果を有することが分かる。また、図４５では、前記黄耆抽出物が、ニキビ治療の専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）よりもＭＭＰ‐２抑制効果に優れていることが分かる。
【００６６】
三白草抽出物に対する実験結果を、図４６〜４８に示す。図４６では、電気泳動を通じて分離されたＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２を確認することができる。図４７と４８では、本発明に係る三白草抽出物がＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２抑制効果を有することが分かる。こうした抑制効果は、ニキビ治療の専門医薬品として広く使用されているイソトレチノイン（ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）を処理した場合の結果に匹敵する。
【００６７】
また、甘草抽出物に対する実験結果を、図４９〜５１に示す。図４９では、電気泳動を通じて分離されたＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２を確認することができる。図５０と５１は、甘草抽出物のＭＭＰ‐９及びＭＭＰ‐２抑制効果を示したグラフである。本発明に係る甘草抽出物は、特にＭＭＰ‐２の抑制効能に優れることが分かる。
【００６８】
以下に、前記組成物の剤形例を説明するが、本発明を限定しようとするものではなく、単に具体的に説明しようとするものである。
［剤形例１］軟質カプセルの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、パーム油２ｍｇ、植物性硬化油８ｍｇ、黄蝋４ｍｇ及びレシチン９ｍｇを混合し、通常の方法に従い混合して、各々軟質カプセル充填液を製造した。１カプセル当たり４００ｍｇずつ充填して、軟質カプセルを製造した。そして、前記とは別途に、ゼラチン６６重量部、グリセリン２４重量部及びソルビトール液１０重量部の比率で軟質カプセルシートを製造し、前記充填液を充填させて、本発明に係る組成物４００ｍｇが含有された軟質カプセルを各々製造した。
［剤形例２］錠剤の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ガラクトオリゴ糖２００ｍｇ、乳糖６０ｍｇ及び麦芽糖１４０ｍｇを混合し、流動層乾燥機を利用して顆粒化した後、糖エステル（ｓｕｇａｒ ｅｓｔｅｒ）６ｍｇを添加した。これら組成物５０４ｍｇを通常の方法で打錠して錠剤を各々製造した。
［剤形例３］ドリンク剤の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸０．６ｇ、及び液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水３００ｍｌを加えて、各々瓶に２００ｍｌずつ充填した。瓶に充填した後、１３０℃で４〜５秒間殺菌してドリンク剤を各々製造した。
［剤形例４］顆粒の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物８０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、無水結晶ブドウ糖２５０ｍｇ及び澱粉５５０ｍｇを混合し、流動層造粒機を使用してそれぞれ顆粒に成形した後、包に充填して製造した。
［剤形例５］軟質カプセルの製造
黄耆抽出物４０ｍｇ、三白草抽出物４０ｍｇ、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、パーム油２ｍｇ、植物性硬化油８ｍｇ、黄蝋４ｍｇ及びレシチン９ｍｇを混合し、通常の方法に従い混合して、軟質カプセル充填液を調製した。１カプセル当たり４００ｍｇずつ充填して、軟質カプセルを製造した。そして、前記とは別途に、ゼラチン６６重量部、グリセリン２４重量部及びソルビトール液１０重量部の比率で軟質カプセルシートを製造し、前記充填液を充填して、本発明に係る組成物４００ｍｇが含有された軟質カプセルを製造した。
［剤形例６］錠剤の製造
黄耆、三白草、甘草及び薔薇抽出物を２０ｍｇずつ混合し、これにビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ガラクトオリゴ糖２００ｍｇ、乳糖６０ｍｇ及び麦芽糖１４０ｍｇを混合した後、流動層乾燥機を利用して顆粒化し、糖エステル（ｓｕｇａｒ ｅｓｔｅｒ）６ｍｇを添加した。この組成物５０４ｍｇを通常の方法で打錠して錠剤を製造した。
［剤形例７］ドリンク剤の製造
黄耆、三白草、及び甘草抽出物を同一の重量で混合して、８０ｍｇの混合物を製造した。製造された混合物に、ビタミンＥ ９ｍｇ、ビタミンＣ ９ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸０．６ｇ、及び液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水３００ｍｌを加えて、瓶に２００ｍｌずつとなるように充填した。瓶に充填した後、１３０℃で４〜５秒間殺菌してドリンク剤を製造した。
［剤形例８］顆粒の製造
薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物を各２０ｍｇずつ混合して混合物を製造した。製造された混合物に、ビタミンＥ １０ｍｇ、ビタミンＣ １０ｍｇ、無水結晶ブドウ糖２５０ｍｇ及び澱粉５５０ｍｇを混合し、流動層造粒機を使用して顆粒に成形した後、包に充填して製造した。
［剤形例９］柔軟化粧水（スキンローション）の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．３ｍｇ、ブチレングリコール６．０ｍｇ、プロピレングリコール６．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．６ｍｇ、ポリソルベート８０ １．２ｍｇ 、エタノール３０．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、精製水２５５ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の柔軟化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする柔軟化粧水をそれぞれ製造した。
［剤形例１０］栄養化粧水（ミルクローション）の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．３ｍｇ、蜜蝋１２．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート４．５ｍｇ、流動パラフィン１．５ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１５ｍｇ、グリセリン９．０ｍｇ、ブチレングリコール９．０ｍｇ、プロピレングリコール９．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水２３４ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の栄養化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする栄養化粧水をそれぞれ製造した。
［剤形例１１］マッサージクリームの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．３ｍｇ、蜜蝋３０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油６．０ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート２．４ｍｇ、流動パラフィン１２０．０ｍｇ、スクアラン１５．０ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１２．０ｍｇ、グリセリン１５．０ｍｇ、ブチレングリコール１２．０ｍｇ、プロピレングリコール１２．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水７０ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常のマッサージクリームの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするマッサージクリームをそれぞれ製造した。
［剤形例１２］パックの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１．０ｍｇ、ポリビニルアルコール１３．０ｍｇ、カルボキシメチルセルロースナトリウム０．２ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、アラントイン０．１ｍｇ、エタノール６．０ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．３ｍｇ、ポリソルベート６０ ０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のパックの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパックをそれぞれ製造した。
［剤形例１３］ゲルの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物０．０５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン０．１ｍｇ、エチレンジアミン酢酸ナトリウム０．０５ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、エタノール５．０ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油０．５ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のゲルの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするゲルをそれぞれ製造した。
［剤形例１４］柔軟化粧水（スキンローション）の製造
黄耆、三白草及び甘草抽出物各０．１ｍｇ、ブチレングリコール６．０ｍｇ、プロピレングリコール６．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．６ｍｇ、ポリソルベート８０ １．２ｍｇ、エタノール３０．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、精製水２５５ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の柔軟化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする柔軟化粧水を製造した。
［剤形例１５］栄養化粧水（ミルクローション）の製造
黄耆及び三白草抽出物各０．１５ｍｇ、蜜蝋１２．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート４．５ｍｇ、流動パラフィン１．５ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１５ｍｇ、グリセリン９．０ｍｇ、ブチレングリコール９．０ｍｇ、プロピレングリコール９．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水２３４ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常の栄養化粧水の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする栄養化粧水を製造した。
［剤形例１６］マッサージクリームの製造
薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物各０．０７５ｍｇ、蜜蝋３０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ４．５ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油６．０ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート２．４ｍｇ、流動パラフィン１２０．０ｍｇ、スクアラン１５．０ｍｇ、Ｍｏｎｔａｎａ ２０２（製造社：セピック（Ｓｅｐｐｉｃ））１２．０ｍｇ、グリセリン１５．０ｍｇ、ブチレングリコール１２．０ｍｇ、プロピレングリコール１２．０ｍｇ、トリエタノールアミン０．６ｍｇ、精製水７０ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、通常のマッサージクリームの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするマッサージクリームを製造した。
［剤形例１７］パックの製造
刺五加皮及び黄柏抽出物各０．２５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１．０ｍｇ、ポリビニルアルコール１３．０ｍｇ、カルボキシメチルセルロースナトリウム０．２ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、アラントイン０．１ｍｇ、エタノール６．０ｍｇ、ＰＥＧ‐１２ノニルフェニルエーテル０．３ｍｇ、ポリソルベート６０ ０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のパックの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパックを製造した。
［剤形例１８］ゲルの製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇及び大黄抽出物各０．０１ｍｇ、β‐１，３‐グルカン０．１ｍｇ、エチレンジアミン酢酸ナトリウム０．０５ｍｇ、グリセリン５．０ｍｇ、カルボキシビニルポリマー０．３ｍｇ、エタノール５．０ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油０．５ｍｇ、トリエタノールアミン０．３ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常のゲルの製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするするゲルを製造した。
［剤形例１９］皮膚外用剤のうち軟膏
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物２．０ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１０．０ｍｇ、蜜蝋１０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ５．０ｍｇ、ピイジ６０硬化ヒマシ油２．０ｍｇ、ソルビタンセスキオレエート０．５ｍｇ、ワセリン５．０ｍｇ、流動パラフィン１０．０ｍｇ、スクアラン５．０ｍｇ、シアバター３．０ｍｇ、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル５．０ｍｇ、グリセリン１０ｍｇ、プロピレングリコール１０．２ｍｇ、トリエタノールアミン０．２ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常の軟膏剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする軟膏剤をそれぞれ製造した。
［剤形例２０］局所投与用薬剤（パッチ剤）の製造
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物１．０ｍｇ、β‐１，３‐グルカン３．０ｍｇ、ヘキシレングリコール２０．０ｍｇ、ジエチルアミン０．７ｍｇ、ポリアクリル酸（カルボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））９３４Ｐ）１．０ｍｇ、亜硫酸ナトリウム０．１ｍｇ、ポリオキシエチレンラウリルエーテル（ＥＯ＝９）１．０ｍｇ、ポリヒドロキシエチレンセチルステアリルエーテル（セトマクロゴール（Ｃｅｔｏｍａｃｒｏｇｏｌ）１０００）１．０ｍｇ、粘性のパラフィンオイル２．５ｍｇ、カプリル酸エステル／カプリン酸エステル（セチオール（Ｃｅｔｉｏｌ（登録商標））ＬＣ）２．５ｍｇ、ポリエチレングリコール４００ ３．０ｍｇに対して、精製水を添加し、通常のパッチ剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパッチ剤をそれぞれ製造した。
［剤形例２１］皮膚外用剤のうち軟膏
黄耆及び三白草抽出物各１．０ｍｇ、β‐１，３‐グルカン１０．０ｍｇ、蜜蝋１０．０ｍｇ、ポリソルベート６０ ５．０ｍｇ、ＰＥＧ‐６０硬化ヒマシ油２．０ｍｇ、セスキオレイン酸ソルビタン０．５ｍｇ、ワセリン５．０ｍｇ、流動パラフィン１０．０ｍｇ、スクアラン５．０ｍｇ、シアバター３．０ｍｇ、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル５．０ｍｇ、グリセリン１０ｍｇ、プロピレングリコール１０．２ｍｇ、トリエタノールアミン０．２ｍｇ、及び防腐剤、色素、香料各少量に対して、精製水を添加し、通常の軟膏剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とする軟膏剤を製造した。
［剤形例２２］局所投与用薬剤（パッチ剤）の製造
薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏抽出物各０．２５ｍｇ、β‐１，３‐グルカン３．０ｍｇ、ヘキシレングリコール２０．０ｍｇ、ジエチルアミン０．７ｍｇ、ポリアクリル酸（カルボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））９３４Ｐ）１．０ｍｇ、亜硫酸ナトリウム０．１ｍｇ、ポリオキシエチレンラウリルエーテル（Ｅ．Ｏ＝９）１．０ｍｇ、ポリヒドロキシエチレンセチルステアリルエーテル（セトマクロゴール（Ｃｅｔｏｍａｃｒｏｇｏｌ）１０００）１．０ｍｇ、粘性のパラフィンオイル２．５ｍｇ、カプリル酸エステル／カプリン酸エステル（セチオール（Ｃｅｔｉｏｌ（登録商標））ＬＣ）２．５ｍｇ、ポリエチレングリコール４００ ３．０ｍｇに対して、精製水を添加し、通常のパッチ剤の製造方法に従い、前記成分を提示された含量で添加して均一に混合した後、目的とするパッチ剤を製造した。
【００６９】
本発明が属する分野における通常の知識を有する者であれば、前記の内容を土台に、本発明の範疇内で多様な応用及び変形を行うことが可能であろう。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明の一実施形態に係る組成物は、ニキビ性色素沈着及び／又は傷を抑制する効果があり、化粧品、食品又は医薬の分野において多様に活用可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性色素沈着抑制用組成物。
【請求項２】
有効成分として、黄耆、三白草及び甘草からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性傷抑制用組成物。
【請求項３】
黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、ゼラチナーゼ（ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ）を抑制することを特徴とする、請求項２記載のニキビ性傷抑制用組成物。
【請求項４】
請求項１又は２に記載の組成物を含む皮膚外用剤組成物。
【請求項５】
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物の含量は、組成物全体の重量を基準として０．１〜２０重量％であることを特徴とする、請求項４記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項６】
請求項１又は２に記載の組成物を含む化粧料組成物。
【請求項７】
請求項１又は２に記載の組成物を含むニキビ性色素沈着抑制又はニキビ性傷抑制用医薬組成物。
【請求項８】
有効成分として、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ後遺症に対するアフターケア（ａｆｔｅｒｃａｒｅ）用組成物。
【請求項９】
請求項１、２及び８のいずれか一項に記載の組成物を含む食品添加物又は健康食品組成物。
【請求項１】
有効成分として、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性色素沈着抑制用組成物。
【請求項２】
有効成分として、黄耆、三白草及び甘草からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ性傷抑制用組成物。
【請求項３】
黄耆、三白草及び甘草からなる群から選択されるいずれか一つ以上の抽出物は、ゼラチナーゼ（ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ）を抑制することを特徴とする、請求項２記載のニキビ性傷抑制用組成物。
【請求項４】
請求項１又は２に記載の組成物を含む皮膚外用剤組成物。
【請求項５】
黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮又は黄柏抽出物の含量は、組成物全体の重量を基準として０．１〜２０重量％であることを特徴とする、請求項４記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項６】
請求項１又は２に記載の組成物を含む化粧料組成物。
【請求項７】
請求項１又は２に記載の組成物を含むニキビ性色素沈着抑制又はニキビ性傷抑制用医薬組成物。
【請求項８】
有効成分として、黄耆、三白草、甘草、薔薇、大黄、刺五加皮及び黄柏からなる群より選択されるいずれか一つ以上の抽出物を含有するニキビ後遺症に対するアフターケア（ａｆｔｅｒｃａｒｅ）用組成物。
【請求項９】
請求項１、２及び８のいずれか一項に記載の組成物を含む食品添加物又は健康食品組成物。
【図４３】
【図４６】
【図４９】
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４２】
【図４４】
【図４５】
【図４７】
【図４８】
【図５０】
【図５１】
【図４６】
【図４９】
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４２】
【図４４】
【図４５】
【図４７】
【図４８】
【図５０】
【図５１】
【公表番号】特表２０１３−５０１７７９（Ｐ２０１３−５０１７７９Ａ）
【公表日】平成２５年１月１７日（２０１３．１．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５２４６５２（Ｐ２０１２−５２４６５２）
【出願日】平成２２年８月１３日（２０１０．８．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２０１０／００５３４２
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０１９２３９
【国際公開日】平成２３年２月１７日（２０１１．２．１７）
【出願人】（５０６２１３６８１）株式会社アモーレパシフィック (24)
【氏名又は名称原語表記】ＡＭＯＲＥＰＡＣＩＦＩＣ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【住所又は居所原語表記】１８１，２−ｇａ，Ｈａｎｇａｎｇ−ｒｏ，Ｙｏｎｇｓａｎ−ｇｕ，Ｓｅｏｕｌ，Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年１月１７日（２０１３．１．１７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年８月１３日（２０１０．８．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２０１０／００５３４２
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０１９２３９
【国際公開日】平成２３年２月１７日（２０１１．２．１７）
【出願人】（５０６２１３６８１）株式会社アモーレパシフィック (24)
【氏名又は名称原語表記】ＡＭＯＲＥＰＡＣＩＦＩＣ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【住所又は居所原語表記】１８１，２−ｇａ，Ｈａｎｇａｎｇ−ｒｏ，Ｙｏｎｇｓａｎ−ｇｕ，Ｓｅｏｕｌ，Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
【Ｆターム（参考）】
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