安定化９９ｍＴｃ組成物
本発明は、抗菌保存剤の非存在下で、アスコルビン酸又はアスコルビン酸放射線防護剤を含む、リガンドであるテトロフォスミンの安定化９９ｍＴｃ放射性医薬組成物に関する。本発明はまた、複数回分の用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン金属錯体の大量調製に適した凍結乾燥キットをも提供する。９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの単位用量も、凍結乾燥バルクバイアルからかかる単位用量の調製方法とともに開示する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌保存剤の非存在下で、アスコルビン酸又はアスコルビン酸放射線防護剤を含む９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの安定化９９ｍＴｃ放射性医薬組成物に関する。複数回分の用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物の大量調製に適した凍結乾燥キットについても、凍結乾燥バルクバイアルからの単位用量の調製方法と併せて開示する。
【背景技術】
【０００２】
放射性同位体テクネチウム−９９ｍ（９９ｍＴｃ）に基づく画像診断用放射性医薬品は、機能試験（例えば腎）、及び灌流（特に心及び脳）を始めとする様々な臨床診断用に公知である。放射性同位体９９ｍＴｃは半減期６時間であり、そのためかかる９９ｍＴｃ放射性医薬品はいわゆる「キット」から調製されるのが通常である。
【０００３】
こうした９９ｍＴｃ放射性医薬品調製用キットによって、所要の反応体を収容した非放射性凍結乾燥バイアルのストックをユーザーが維持できるようになり、かかるバイアルは９９ｍＴｃ源からの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩（ＴｃＯ４−）で再構成すれば簡単に所望の滅菌９９ｍＴｃ放射性医薬品が得られるように設計されている。等張食塩水中の９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液は、当技術分野で公知の通り、テクネチウムジェネレータを滅菌食塩水で溶出することによって得られる。
【０００４】
９９ｍＴｃ放射性医薬品調製用のキットは通常以下の成分：
（ｉ）９９ｍＴｃと金属錯体を形成するリガンド、
（ｉｉ）過テクネチウム酸塩つまりＴｃ（ＶＩＩ）を、所望の９９ｍＴｃ金属錯体生成物の低い酸化状態へと還元することができる生体適合性還元剤
を含んでいる。９９ｍＴｃ過テクネチウム酸塩の生体適合性還元剤は通常第一スズイオンつまりＳｎ（ＩＩ）である。キットは、キット成分の取扱い及び凍結乾燥を容易にするため、追加の賦形剤、例えば弱キレート剤（グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、酒石酸塩、ホスホン酸塩、ＥＤＴＡなど）、安定剤、ｐＨ調節剤、緩衝剤、可溶化剤や充填剤（マンニトール、イノシトールや塩化ナトリウムなど）などを含んでいてもよい。保存及び流通を容易にするため、非放射性キットは、クロージャを備えた滅菌バイアル内の凍結乾燥品として供給されるのが通常である。凍結乾燥製剤は、ヒトに使用するための所望の注射可能な滅菌９９ｍＴｃ放射性医薬品を与えるように最終ユーザーが滅菌９９ｍＴｃ過テクネチウム酸塩生理食塩水で容易に再構成することができる。非放射性テクネチウムキットの保存寿命は数ヶ月にも及ぶことがある。
【０００５】
放射性医薬組成物は、特に溶媒（通常は水）の放射線分解を起こして反応性の高いフリーラジカルを精製し、再構成後のキット組成物の１種以上の成分を分解するおそれがある。かかる分解を抑制するため、放射線防護剤又はラジカルスカベンジャーを使用することが知られている。通例、ラジカルスカベンジャーは、酸化防止性化合物として知られる種類のものから得られる。米国特許第４３６４９２０号には、アスコルビン酸及びアスコルビン酸塩が、９９ｍＴｃ放射性医薬品調製用の第一スズ含有非放射性キットの安定剤として機能することが開示されており、それ以降９９ｍＴｃ放射性医薬品製剤に広く用いられている。米国特許第４２３３２８４号には、９９ｍＴｃ放射性医薬品用のゲンチシン酸安定剤が開示されている。米国特許第４４５１４５１号には、９９ｍＴｃ放射性医薬品製剤用のパラアミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）及び関連安定剤が開示されている。
【０００６】
Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）キットは、以下の凍結乾燥製剤を含むを含む１０ｍｌバイアルであり、
テトロフォスミン ０．２３ｍｇ
塩化第一スズ二水和物 ３０μｇ
スルホサリチル酸二ナトリウム ０．３２ｍｇ
Ｄ−グルコン酸ナトリウム １．０ｍｇ
重炭酸ナトリウム １．８ｍｇ
再構成後のｐＨ ８．３〜９．１
１０ｍｌガラスバイアル内に窒素ガスＵＳＰ／ＮＦ下で封止され、これを滅菌（９９ｍＴｃ）過テクネチウム酸ナトリウム注射液ＵＳＰ／Ｐｈ．Ｅｕｒで再構成すれば、心臓イメージング用の放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを含む溶液が得られる。このように、Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）キットは放射線防護剤を含んでいない。
【０００７】
日本では注射剤又は「コンジュゲート」としてのＭｙｏｖｉｅｗ（商標）が１９９７年から上市されている。この「コンジュゲート」型は、水溶液中で９９ｍＴｃ−テトロフォスミンテクネチウム錯体を予め形成しておいたものをシリンジ−バイアル（別個のプランジャー及び針を備えたバイアル）内に収容したもので、容易に組み立てて放射性医薬品を含むシリンジを与えるように設計されている。Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）の「コンジュゲート」溶液は、濃度１．３６ｍｇ／ｍｌ（７．７ｍＭ）のアスコルビン酸を含む。
【０００８】
Ｂａｓｔｉｅｎ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２０，４８０−Ａｂｓｔｒａｃｔ ８４（１９９９）］には、Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）キットへの食塩水及び過テクネチウム酸塩の添加順序が９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの放射化学純度（ＲＣＰ）に影響を与えることがあると記載されている。Ｍｕｒｒａｙ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２１，８４５−８４９（２０００）］には、再構成の際にＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルのヘッドスペースに窒素ガスが過剰に存在すると、不都合な放射化学不純物によってＲＣＰの結果にバラツキが生じかねないと記載されている。Ｍｕｒｒａｙ他の報文及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットのパッケージの説明書は、これらの問題を未然に防ぐために、再構成の際にバイアル内に空気を意図的に引き込むことを推奨している。これは、通気針を刺したときに２ｍｌのヘッドスペースガスを吸引することによって達成され、その結果２ｍｌの空気がバイアル内に引き込まれる。この問題の原因は還元的自動放射線分解であり、酸素の導入によって分解が阻害すると考えられる。
【０００９】
Ｐａｔｅｌ他［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．，２６（４），２６９−２７３（１９９８）］には、市販のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルの試験結果が記載されており、製造業者の放射能の上限（１８ＧＢｑ以下の９９ｍＴｃ）の２倍での再構成は成功するが、用いた９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩ジェネレータ溶出液に対して何か制限要因となっているかは明らかでないと結論付けられている。このような高い放射能レベルは、人の放射線曝露の低減（複数回の調製に代えて１回の調製）、ＱＣの結果のバラツキの低減という利益が得られると記載されている。実際、Ｍｕｒｒａｙ他（上掲）はＭｙｏｖｉｅｗ（商標）のパッケージの説明書の濃度を超える放射能濃度を使用すると、ＲＣＰの結果が劣ると報告している。
【００１０】
国際公開第０２／０５３１９２号には、以下の成分を含む安定化放射性医薬組成物が開示されている。
（ｉ）９９ｍＴｃ金属錯体、
（ｉｉ）アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸又はゲンチシン酸、或いはそれらの生体適合性陽イオンとの塩を含む放射線防護剤、
（ｉｉｉ）次の式（Ｉ）の１種以上の抗菌保存剤：
【００１１】
【化１】
式中、ＲはＣ１〜４アルキルであり、ＭはＨ又は生体適合性陽イオンである。
【００１２】
国際公開第０２／０５３１９２号の実施例では、従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットに放射線防護剤溶液と抗菌保存剤溶液とを添加することによって安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン錯体組成物を調製している。国際公開第０２／０５３１９２号には、テトロフォスミンと放射線防護剤を共に含む凍結乾燥キットの具体例は開示されていない。
【特許文献１】米国特許第４３６４９２０号明細書
【特許文献２】米国特許第４２３３２８４号明細書
【特許文献３】米国特許第４４５１４５１号明細書
【特許文献４】国際公開第０２／０５３１９２号パンフレット
【非特許文献１】Ｂａｓｔｉｅｎ ｅｔ ａｌ［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２０，４８０−Ａｂｓｔｒａｃｔ ８４（１９９９）］
【非特許文献２】Ｍｕｒｒａｙ ｅｔ ａｌ［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２１，８４５−８４９（２０００）］
【非特許文献３】Ｐａｔｅｌ ｅｔ ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．，２６（４），２６９−２７３（１９９８）］
【非特許文献４】Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ［Ｚｈｏｎｇ．Ｈｅｙｉｘ．Ｚａｚｈｉ，１７（１）１３−１５（１９９７）］
【非特許文献５】Ｒｅｉｄ ｅｔ ａｌ［Ｓｙｎｔｈ．Ａｐｐｌ．Ｉｓｏｔｏｐ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．，Ｖｏｌ ７，２５２−２５５（２０００）］
【非特許文献６】Ｌｏｇａｎ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ，２１（３），１６７−１７０（１９９３）］
【非特許文献７】Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ １４，１０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの調製方法並びに安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物調製用キットに関する。
【００１４】
９９ｍＴｃ放射性医薬品の再構成後の利用性を延ばすという問題を解決するには、再構成の際に、９９ｍＴｃの初期放射能レベルを高くしなければならないことを意味する。これは、９９ｍＴｃの半減期が６時間であるため、診断用画像を得るのに用いられる放射能の半分が放射性崩壊で６時間毎に失われ、１２時間経過後には元の放射能の１／４しか残らないことを意味するからである。かかる高レベルの放射能を長期間保つと、９９ｍＴｃ放射性医薬組成物の潜在的放射線分解という重大な問題がある。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
そこで、本発明は、組成物中に放射線防護剤を含む。９９ｍＴｃ−テトロフォスミン活性成分は、還元剤（９９ｍＴｃの標識作用を補助するために存在する）の還元作用による分解或いは放射線分解のいずれかを起こしやすい。本発明の安定化組成物を使用すると、９９ｍＴｃ放射能レベルを高めても、放射標識後の有用寿命を延ばすことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
第一の態様では、本発明は、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩溶液での再構成後に安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物を与える凍結乾燥非放射性キットであって、
（ｉ）テトロフォスミン、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される放射線防護剤、
（ｉｉｉ）生体適合性還元剤、
（ｉｖ）キットを食塩水で再構成したときに得られる溶液のｐＨを８．０〜９．２にするのに有効な量のｐＨ調節剤
を含む製剤を有するが、当該キットと９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物のいずれも抗菌保存剤を含まないキットを提供する。
【００１７】
「テトロフォスミン」という用語は、次式のエーテル置換ジホスフィンキレート剤１，２−ビス［ビス（２−エトキシエチル）ホスフィノ）］エタンを意味し、これは、９９ｍＴｃ−テトロフォスミン、すなわちＭｙｏｖｉｅｗ（商標）と呼ばれる９９ｍＴｃ（Ｏ）２（テトロフォスミン）２＋調製用の市販９９ｍＴｃキットに用いられている。
【００１８】
【化２】
「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生成する含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元過程のような分解反応を阻害する化合物をいう。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸及びその生体適合性陽イオンとの塩から選択される。
「生体適合性陽イオン」という用語は、イオン化して負に荷電した陰イオン基と塩を形成する正電荷を有する対イオンで、しかも所要の用量において無毒で哺乳類の身体、特に人体への投与に適したものをいう。適当な生体適合性陽イオンの例としては、アルカリ金属のナトリウム又はカリウム、アルカリ土類金属のカルシウム及びマグネシウム、さらにアンモニウムイオンが挙げられる。好ましい生体適合性陽イオンはナトリウム及びカリウムであり、最も好ましくはナトリウムである。
【００１９】
「生体適合性還元剤」という用語は、Ｔｃ（ＶＩＩ）過テクネチウム酸塩をテクネチウムの低い酸化状態へと還元するのに適した還元剤で、しかも所要の用量において無毒で哺乳類の身体、特に人体への投与に適したものをいう。適当な還元剤としては、亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）が挙げられる。生体適合性還元剤は、好ましくは塩化第一スズや酒石酸第一スズの様な第一スズ塩である。
【００２０】
「凍結乾燥」という用語は、通常の意味を有し、凍結乾燥組成物、好ましくは無菌状態で調製したものである。
【００２１】
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、濃度に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。抗菌保存剤は、再構成後の放射線医薬組成物（つまり、放射性診断薬自体）における微生物の増殖を阻害するために常用される。ただし、抗菌保存剤は、再構成前の非放射性キットの１以上の成分における有害微生物の増殖の防止するために使用されることもある。抗菌保存剤としては、パラベン類、即ちメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン又はこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールが挙げられる。ある種の抗菌保存剤は、揮発性が高すぎて凍結乾燥を乗り切ることができず（例えば、ベンジルアルコール又はフェノール）、水溶性が非常に低いものもある。そのため、水性溶媒で再構成して放射性医薬品溶液を与えるように設計された凍結乾燥キットにはかかる抗菌保存剤を導入するのは問題であった。
ある種の抗菌保存剤は９９ｍＴｃと金属錯体を形成することもあり、９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの放射化学純度（ＲＣＰ）、ひいてはその生体内分布に悪影響を与えかねない。製剤中に抗菌保存剤が存在すると、キット保存時の化学的不適合性の問題、例えばテトロフォスミンのホスフィンによる酸素又は硫黄原子の引き抜きに起因する問題のリスクも高まる。
【００２２】
かかるキットは、例えば血流への直接注射などによるヒトへの投与に適した滅菌放射性医薬品を与えるように設計される。凍結乾燥キットは、９９ｍＴｃ放射性同位体ジェネレータからの無菌９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸（ＴｃＯ４−）で再構成すればそれ以上操作しなくてもヒトへの投与に適した溶液が得られるように設計される。９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩溶液は、生体適合性担体中で供給される。「生体適合性担体」とは、放射性医薬品を懸濁又は溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるものである。生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、発熱物質を含まない注射用の滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性又は非低張性となるように調整するのに都合がよい）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。生体適合性担体は、エタノールのような生体適合性有機溶媒を含んでいてもよい。かかる有機溶媒は、親油性の高い化合物又は製剤の溶解に有用である。好ましくは、生体適合性担体は、発熱物質を含まない注射用水、等張食塩水又はエタノール水溶液である。上述の通り、静脈内注射用の生体適合性担体のｐＨは好適には４．０〜１０．５である。生体適合性担体は、好ましくは水性溶媒、最も好ましくは生理食塩水を含む。本発明の生体適合性担体は、抗菌保存剤の非存在下で用いられる。
【００２３】
本発明のキットは、第一の実施形態の組成物を適当な容器内に収容してなる。テトロフォスミンは、遊離塩基の形態でも、酸の塩の形態でもよいし、或いはテクネチウムの添加時にトランスメタレーション（金属交換）を起こして所望の生成物を与えるテトロフォスミン非放射性金属錯体の形態であってもよい。好ましくは、テトロフォスミンは遊離塩基の形態である。適当な容器は、無菌健全性及び／又は放射能の安全性、さらに適宜ヘッドスペースの不活性ガス（例えば窒素又はアルゴン）の維持できるようにしながら、シリンジでの溶液の添加及び吸引も可能となるように密封される。好ましい容器はセプタム封止バイアルであり、気密クロージャをオーバーシール（通常はアルミニウム製）と共にクリンプオンする。かかる容器は、例えばヘッドスペースガス又は脱気溶液の変更のため必要に応じて真空にクロージャが耐えるという追加の利点がある。
【００２４】
非放射性キットはさらに、トランスキレーター、ｐＨ調節剤又は充填剤のような追加成分を適宜含んでいてもよい。「トランスキレーター」とは、テクネチウムと迅速に反応して弱い錯体を形成し、次に配位子で置換される化合物である。これはテクネチウム錯形成反応と競合する過テクネチウム酸塩の迅速な還元に起因した還元型加水分解テクネチウム（ＲＨＴ）が形成するおそれを最小限に抑制する。かかる適当なトランスキレーターは、有機酸と生体適合性陽イオンとの塩、特にｐＫａが３〜７の「弱有機酸」の塩である。かかる適当な弱有機酸は、酢酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、フェノール又はホスホン酸である。従って、適当な塩は、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、フェノラート又はホスホン酸塩である。好ましい塩は、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、最も好ましくはホスホン酸塩、特にジホスホン酸塩である。好ましいトランスキレーターは、グルコン酸と生体適合性陽イオンとの塩、特にグルコン酸ナトリウムである。その他の好ましいトランスキレーターは、５−スルホサリチル酸又はその生体適合性陽イオンとの塩である。２種以上のトランスキレーターを併用してもよく、本発明のテトロフォスミンキットは、最も好ましくは５−スルホサリチル酸ナトリウムとグルコン酸ナトリウムの組合せを含む。
【００２５】
「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成したキットのｐＨが、ヒト又は哺乳類の投与に関する許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。かかる適当なｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）のような薬学的に許容される緩衝剤、並びに炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物のような薬学的に許容される塩基が挙げられる。本発明のテトロフォスミンキットに好ましいｐＨ調節剤は、重炭酸ナトリウムである。
【００２６】
「充填剤」という用語は、製造時及び凍結乾燥時の材料の取扱いを容易にする薬学的に許容される増量剤を意味する。適当な充填剤としては、塩化ナトリウムのような無機塩並びに水溶性糖類又は糖アルコール、例えばスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースが挙げられる。ある種のｐＨ調節剤は充填剤としても機能し得る。かかる二元機能充填剤として好ましいのは重炭酸ナトリウムである。本発明の好ましいキットは、凍結乾燥を容易にする充填剤を含む。本発明のテトロフォスミンキットの好ましい充填剤は、二元機能充填剤の重炭酸ナトリウムである。
【００２７】
本発明のキットに放射線防護剤を導入すると、従来技術及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）のパッケージの説明書で共に教示される空気導入段階を必要とせずに、良好なＲＣＰで、かつ調製後最大１２時間、再構成後の安定性が良好な状態で９９ｍＴｃ−テトロフォスミン錯体が調製されるという利点が付与されるという知見が得られた。このことにより方法の段階が除去され、それは操作が１つ少なくなることを意味し、従ってその結果オペレータにとって放射線量が減るとともに実施がより迅速かつ簡単になるので、それは有用な単純化である。空気導入段階はまた、放射性医薬調剤の実施では多少異例でもあり、従って、それが不注意で省略され、その結果ＲＣＰに悪影響を及ぼす可能性があるというリスクがある。
【００２８】
本発明のキットで用いる放射線防護剤の濃度は、好適には０．０００３〜０．７Ｍであり、好ましくは０．００１〜０．０７Ｍであり、最も好ましくは０．００２５〜０．０１Ｍである。アスコルビン酸では、これは、０．０５〜１００ｍｇ／ｃｍ３、好ましくは０．２〜１０ｍｇ／ｃｍ３、最も好ましくは０．４〜１．５ｍｇ／ｃｍ３の適当な濃度に対応する。
【００２９】
本発明の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品をヒトに投与する際に用いられる適当な量の放射能は、１８５〜１２２１ＭＢｑ（５〜３３ｍＣｉ）である。心臓のイメージングでは、休息及び負荷注射を同じ日に行うとき、第一の線量は１８５〜４４４ＭＢｑ（５〜１２ｍＣｉ）、その約１〜４時間後に投与する第二の線量は５５５〜１２２１ＭＢｑ（１５〜３３ｍＣｉ）であるべきである。従って、本発明の安定化９９ｍＴｃ放射性医薬組成物の最初の９９ｍＴｃ活性は０．２〜１００ＧＢｑであり、そのため９９ｍＴｃの放射性崩壊を考慮した後でも同じ製剤から複数回投与することができる。
【００３０】
本発明の凍結乾燥キットは、好ましくは、水又は食塩水で再構成後の溶液のｐＨが８．０〜９．２、最も好ましくは８．０〜８．６となるように製剤する。このことは、放射線防護剤がアスコルビン酸、すなわち酸であるとき、ｐＨ調節剤の量を調整することが必要であることを意味する。これは、テトロフォスミンの９９ｍＴｃ放射標識、再構成後の安定性及び患者投与の適合性についてキットの最適なｐＨを確実に維持するのに必要である。３０ｍｌバイアルの形で好ましいかかるキットの処方を実施例２に示し、この実施例では、重炭酸ナトリウムの量を、従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）の１０ｍｌバイアル製剤を超えて、割合に応じてかなり大きくしなければならないことを示す。本発明者らは、３０ｍｌバイアルキットで、アスコルビン酸の量を５．５ｍｇ／バイアルに増やし、又は重炭酸ナトリウムの量を１０ｍｇ／バイアルに減らすと、外観的に許容できない凍結乾燥塊が生じることを発見した。これは、アスコルビン酸のガラス転移温度が低く（−５４℃）、それによりおそらく製剤のガラス転移温度が低下することによるものと考えられる。従って、許容できる凍結乾燥キットを調製する場合、加えることができるアスコルビン酸の量には上限がある。かなり高レベルの重炭酸ナトリウムが、アスコルビン酸に適応し、依然として許容できる凍結乾燥プラグを得るのに必要であることが判明した。
【００３１】
本発明の放射線防護剤は、いくつかの供給業者から市販されている。テトロフォスミンは、Ｃｈｅｎ他［Ｚｈｏｎｇ．Ｈｅｙｉｘ．Ｚａｚｈｉ，１７（１）１３−１５（１９９７）］又はＲｅｉｄ他［Ｓｙｎｔｈ．Ａｐｐｌ．Ｉｓｏｔｏｐ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．，Ｖｏｌ ７，２５２−２５５（２０００）］に記載のように調製することができる。通常の合成では、まず１，２−ビス（ホスフィノ）エタン又はＨ２ＰＣＨ２ＣＨ２ＰＨ２を調製した後、実施例１に記載のようなラジカル開始剤を使用して過剰なエチルビニルエーテルのラジカル付加を行う。
【００３２】
第二の態様では、本発明は、第一の実施形態に係る凍結乾燥製剤を、無菌健全性を保ちながら溶液の添加及び吸引が可能なクロージャを備えた密封滅菌容器に収容してなる多用量キットであって、１個のキットから４〜３０回分の単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品を得ることができるように処方されたキットを提供する。
【００３３】
多用量キットは、従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットよりも格段に高レベルの放射能に、またより大きな体積の溶液に耐えるほど十分に強くなければならない。多用量バイアルの容器は、好適には体積が２０〜５０ｃｍ３であり、好ましくは２０〜４０ｃｍ３であり、最も好ましくは３０ｃｍ３である。容器は、複数回穿刺するのに適した気密シール（例えばクリンプオン式セプタムシール蓋）を備える。
【００３４】
多用量キットは、複数回の患者投与に十分な物質を含み（例えば、最大で１バイアル当たり９９ｍＴｃ１００ＧＢｑ）、従って、それにより単位用量を安定化製剤の存続する寿命中の様々な時間間隔で臨床グレードのシリンジ中に吸引して、臨床的状況に合わせることができる。或いは、９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品の単位用量は、上記に記載の密封容器に入れて提供してもよい。「単位用量」又は「単位用量」という用語は、１人の患者に投与した後にインビボイメージングに適した９９ｍＴｃ放射能含有量を有する９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物を意味する。かかる「単位用量」は、第五の実施形態（下記）でさらに説明する。本発明の多用量キットは、一連の９９ｍＴｃジェネレータ溶出液にとって再現可能な方法で、９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品のかかる４〜３０回分の単位用量、好ましくは６〜２４回分の単位用量を得るのに適するように処方される。しかし、多用量キットを使用して、かかる１〜４０回分の投与量を、またおそらく４０回分を超える単位用量も得ることができる。
【００３５】
第一の実施形態と同様に、第二の実施形態の多用量キットは、再構成プロトコルで空気導入段階を必要とせず、このことは重要な利点となる。本発明の多用量キットではまた、複数の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品の調製について格段に迅速な調製時間も可能となり、実質的にオペレータの放射線量が減る。従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットの保存寿命の安定性が３７週間以上である一方で、多用量キットはまた、７８週間以上と保存寿命の安定性の延長をも示す。多用量キットの追加の利点は、第三の実施形態（下記）の方法で説明する。
【００３６】
第三の態様では、本発明は、複数回分の用量の放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの調製方法であって、
（ｉ）第二の実施形態の多用量キットを、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成するか、或いは最初に生体適合性担体で次いで９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成し、
（ｉｉ）適宜、段階（ｉ）を抗菌保存剤の存在下で実施し、
（ｉｉｉ）９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体を形成させて、所望の９９ｍＴｃテトロフォスミン放射性医薬品のバルク供給原料を含む溶液を得、
（ｉｖ）適宜、９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体のバルク供給原料の放射化学純度を確認し、
（ｖ）段階（ｉｉｉ）のバルク供給原料から単位用量を適当なシリンジ又は容器内に吸引し、
（ｖｉ）後で追加の単位用量を得るために追加のシリンジ又は容器で段階（ｖ）を繰り返す
ことを含んでなる方法を提供する。
【００３７】
単位用量は、第一の実施形態（上記）で定義した通りであり、第四の実施形態（下記）でさらに十分に説明する。生体適合性担体及びその好ましい実施形態は、第一の実施形態（上記）で定義した通りである。この方法で好ましい生体適合性担体は、滅菌生理食塩水である。
【００３８】
本方法は、好ましくは、抗菌保存剤の非存在下で実施する。
【００３９】
好ましくは、テクネチウムジェネレータから９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液を得る。段階（ｉ）で用いる９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の放射能含有量は、好適には２〜１００ＧＢｑであり、好ましくは５〜７５ＧＢｑである。９９ｍＴｃの放射能濃度は、好ましくは１０ＧＢｑ／ｃｍ３以下であり、最も好ましくは２．５ＧＢｑ／ｃｍ３以下である。調製した後、所望の９９ｍＴｃテトロフォスミン放射性医薬品のバルク供給原料は、使用できる保存寿命が最大で１２時間である。
【００４０】
９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体の形成、すなわち段階（ｉｉｉ）は、通常室温で１５分以内に終了する。
【００４１】
本発明の方法は、
（ａ）放射能（９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩）が関与する操作の数が格段に減り、
（ｂ）空気導入段階を必要とせず、
（ｃ）投与量当たりのＱＣ決定と対照的に、単位用量のバッチ当たりに１回のＱＣ決定しか必要とされず、
（ｄ）製剤が一連の９９ｍＴｃジェネレータ溶出液の条件に耐えることができるような形でバルクバイアルが製剤され、
（ｅ）必要とされる段階が減るので、自動化が容易であり、
（ｆ）必要とされる非放射性キットバイアルが減るので、冷蔵庫の保存空間が節約される
という、複数のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）１０ｍｌバイアルを再構成する代替法を上回る利点を有する。重要な結果として、オペレータの処理時間が減り（すなわち効率）、オペレータの放射線量が減り、その程度が大きくなるほど、調製される単位用量の数も多くなる。
【００４２】
第四の態様では、本発明は、
（ｉ）生体適合性担体中のテトロフォスミンの９９ｍＴｃ錯体、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される濃度０．５〜６．０ｍＭの放射線防護剤
を含んでなる安定化放射性医薬組成物であって、抗菌保存剤を含まない安定化放射性医薬組成物を提供する。
【００４３】
「生体適合性担体」及びその好ましい実施形態は、上記で定義した通りである。
【００４４】
ミリモル濃度（ｍＭ）は、１．０ｍＭが０．００１Ｍに等しいというものである。放射線防護剤の濃度は、好ましくは０．６〜５．７ｍＭであり、最も好ましくは０．７〜５．５ｍＭである。これらは、第一の実施形態の好ましいキットを必要な体積範囲の９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の生理食塩水で再構成したときに得られる濃度の範囲に対応する。放射線防護剤のこれらの濃度はまた、日本で入手可能なＭｙｏｖｉｅｗ（商標）の「コンジュゲート」溶液製剤で使用されるものよりも低い。
【００４５】
安定化組成物に好ましい放射線防護剤は、第一の実施形態で定義した通りである。
【００４６】
好ましくは、安定化組成物のｐＨは７．５〜９．０であり、最も好ましくは８．０〜８．６である。
【００４７】
第五の態様では、本発明は、第四の実施形態の組成物を含み、１人の患者のイメージングに適した９９ｍＴｃ放射能含有量を有する放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの単位用量を提供する。
【００４８】
単位用量は第一の実施形態で定義した通りであり、適当な容器又はシリンジ中でヒト投与に適した滅菌した形で提供される。かかるシリンジは、好適には臨床使用のためのものであり、好ましくはシリンジが常に個々の患者にしか使用されないように使い捨てのものである。シリンジは、適宜、オペレータを放射線量から保護するシリンジシールドを装着して供給してもよい。かかる適当な放射性医薬品用シリンジシールドは市販されており、好ましくは、Ｌｏｇａｎ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ，２１（３），１６７−１７０（１９９３）］に記載のように鉛又はタングステンを含む。
【００４９】
或いは、単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品は、皮下注射針で一回又は複数回穿刺するのに適したシール（例えば、クリンプオン式セプタムシール蓋）を備えた容器に入れて供給してもよい。本発明の単位用量は、好ましくは、臨床グレードのシリンジに入れて供給され、最も好ましくはシリンジシールドを取り付けている。
【００５０】
単位用量の９９ｍＴｃ放射能含有量は、好適には１５０〜１５００ＭＢｑであり、好ましくは１８５〜１２５０ＭＢｑである。休息及び負荷注射を同じ日に行うとき、第一の線量は１８５〜４５０ＭＢｑ、その１〜４時間後の第二の線量は５５０〜１２５０ＭＢｑであるべきである。単位用量で用いる好ましい組成物は、第三の実施形態（上記）で記載した通りである。
【実施例】
【００５１】
下記に詳細に記載した非限定的な実施例によって、本発明を説明する。
【００５２】
実施例１では、テトロフォスミンの合成を示す。実施例２では、Ｍｙｏｖｉｅｗ３０と呼ばれる好ましい形で、本発明の凍結乾燥された多用量又は「大型」キットを示す。実施例３では、本発明の多用量又は「大型」キットを使用して、複数単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンをどのように調製することができるかを示す。実施例４では、放射線防護剤を含む凍結乾燥キットが９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩での再構成後長時間にわたって優れた放射化学純度を示すことを示す。
【００５３】
実施例５では、Ｍｙｏｖｉｅｗ３０キットで空気導入段階がなくても、再構成後のＭｙｏｖｉｅｗ３０キットの安定性が、放射能濃度（ＲＡＣ）の上昇においてＭｙｏｖｉｅｗ（商標）より優れていることを示す。実施例５では、９９ｍＴｃジェネレータの広範囲な溶出間隔でＭｙｏｖｉｅｗ３０キットをうまく使用できることも示す。放射能濃度（ＲＡＣ）と９９ｍＴｃジェネレータの溶出間隔両方の範囲は、複数の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン製剤を毎日調製する必要がある可能性がある場合に、本発明のキットが、特に放射性医薬操作について有用な柔軟性を有することを意味するものである。
【００５４】
実施例６では、本発明のＭｙｏｖｉｅｗ３０キットにより、複数の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品の調製について格段に迅速な調製時間が可能となり、実質的にオペレータの放射線量が減ることを示す。ＱＣ試料で用いる放射能の量はＭｙｏｖｉｅｗ３０及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）で同じであるが、Ｍｙｏｖｉｅｗ３０では時間が７０％短く放射能が７５％小さい。さらに、オペレータにとって放射線シールドの裏に４個のＱＣクロマトグラフィーストリップを置くほうが１６個置くより簡単である。
【００５５】
実施例７では、満足なＲＣＰを維持しつつ、バイアル内容物の無菌性を損なうことなく、本発明の多用量バイアルを使用して３０回分の単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを調製できることを示す。従って、再構成してから１２時間後、複数の栓の貫通の後でもＲＣＰは仕様を満たした。１２時間後、培地中に増殖物は見られず、その製品はＵＳＰ／Ｐｈ．Ｅｕｒ．無菌性試験の条件を満たしていた。製剤の希釈物について試験し、細菌性エンドトキシン含有量が３１３ＩＵ／バイアル未満であることが示された。このことは、生存する細菌又はその変性産物が検出されず、従って多用量バイアルが抗菌保存剤を必要とせずに有効に機能することを意味するものである。
【００５６】
実施例８では、本発明の多用量バイアルのクロージャが最大３５回針での穿刺に耐えることを示す。実施例９では、５℃（２℃〜８℃）で保存し光から保護したとき、本発明の多用量バイアルの使用できる非放射性物質の保存寿命が７８週（１８ヶ月）であることを示す。
【００５７】
実施例１：テトロフォスミンの合成
すべての反応及び操作は、真空で又は酸素を含まない窒素雰囲気下で行った。溶媒を乾燥させ、使用前に窒素パージにより脱気した。α−アゾ−イソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）及びエチルビニルエーテルはＢＤＨ及びＡｌｄｒｉｃｈからそれぞれ入手した。ビス（ジホスフィノ）エタンは、文献［Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ １４，１０］に従って調製した。
【００５８】
Ｔｅｆｌｏｎ（商標）撹拌棒を備えたＦｉｓｃｈｅｒ耐圧瓶にエチルビニルエーテル（５ｃｍ３、５２．３ｍｍｏｌ）、ビス（ジホスフィノ）エタン（１ｃｍ３、１０ｍｍｏｌ）及びα−アゾ−イソブチロニトリル（０．１ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を入れた。次いで反応混合物を撹拌し、７５℃で１６時間加熱した。冷却して室温に戻した後、粘性液体を５０ｃｍ３丸底フラスコに移した。真空下で加熱して揮発性物質の除去を行った。得られた非揮発性物質は、ＮＭＲにより純粋であった。収量：３．０ｇ、８０％。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．１２（１２Ｈ，ｄｔ Ｊ＝１．１６Ｈｚ，７．１５Ｈｚ；ＯＣＨ２ＣＨ３）１．５１（４Ｈ，ｂｒ ｍ；ＰＣ２Ｈ４Ｐ）、１．７（８Ｈ；ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ；ＰＣＨ２ＣＨ２ＯＥｔ）、３．４（８Ｈ，ｄｔ Ｊ＝１．１６Ｈｚ，７．１５Ｈｚ，ＯＣＨ２ＣＨ３）、３．４９（８Ｈ；ｂｒ ｍ；ＰＣＨ２ＣＨ２ＯＥｔ）ｐｐｍ。
３１Ｐ ＮＭＲ：δ−３３．１７ｐｐｍ。
【００５９】
エタノール中で２．３〜２．５モル当量の５−スルホサリチル酸と室温で反応させ、その後エタノール／エーテルから再結晶化して、テトロフォスミンをスルホサリチル酸テトロフォスミンに転換した。
【００６０】
実施例２：凍結乾燥バルクバイアルキットの処方及び調製
３０ｍｌのバルクバイアル製剤の最適な処方は下記の通りである：
テトロフォスミン ０．６９ｍｇ
塩化第一スズ二水和物 ９０μｇ
スルホサリチル酸二ナトリウム ０．９６ｍｇ
Ｄ−グルコン酸ナトリウム ３．０ｍｇ
アスコルビン酸 ５．０ｍｇ
重炭酸ナトリウム １１．０ｍｇ
食塩水で再構成後のｐＨ ８．３〜９．１。
このキットの処方を「Ｍｙｏｖｉｅｗ３０」と称する。
【００６１】
５００ｍｌのバッチを調製した。従って、注射用水（ＷＦＩ）の全体積の約９０％を調製容器に加えた。窒素でパージしてＷＦＩを脱酸素化した。スルホサリチル酸テトロフォスミン、塩化第一スズ二水和物、Ｄ−グルコン酸ナトリウム、アスコルビン酸及び重炭酸ナトリウムを、常に混合しながら連続した順番で分注し、添加し溶解した。分注用のビーカーを、脱酸素化ＷＦＩですすいだ。連続して混合する間、脱酸素化ＷＦＩで大量溶液を最終体積の１００％に調整した。窒素パージを中止した。ヘッドスペース中を覆う窒素を、製造工程の残りの間に適用した。
【００６２】
溶液を滅菌濾過し、濾過溶液３．０ｍｌを３０ｍｌバイアル中に分注した。バイアルは、部分的に栓をし、次いで凍結乾燥した。
【００６３】
実施例３：放射線防護剤を含む大型キットを再構成する手順
（実施例２の）Ｍｙｏｖｉｅｗ３０キットの３０ｍｌバイアルを適当な放射能遮蔽容器中に挿入し、ゴムの隔壁をイソプロピルアルコールスワブで消毒した。滅菌針（通気針）をゴムの隔壁を介して挿入した。遮蔽した滅菌シリンジを使用して、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩ジェネレータ溶出液［体積１０〜３０ｃｍ３；静菌剤を含まない塩化ナトリウム注射液、ＵＳＰで適宜希釈；放射能濃度最大１０ＧＢｑ／ｃｍ３、及び合計の９９ｍＴｃ放射能含有量最大１００ＧＢｑ（２．７Ｃｉ）］を加えた。次いで通気針を除去した。再構成したバイアルを１０秒間穏やかに混合して、確実に、凍結乾燥粉末が完全に溶解するようにし、次いで室温で１５分間インキュベートした。
【００６４】
再構成したＭｙｏｖｉｅｗ３０を２〜２５℃で保存し、調製してから１２時間以内に内容物を使用した。吸引したアリコートも２〜２５℃で保存し、再構成したＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルと同じ１２時間以内に使用した。
【００６５】
実施例４：放射線防護剤を含む凍結乾燥キットの経時的なＲＣＰの放射化学分析
再構成したＭｙｏｖｉｅｗ３０キット（実施例２）の放射化学純度［ＲＣＰ］を、２つのクロマトグラフィーの系を使用して測定した：
系１：固定相：ＩＴＬＣ−ＳＧ
移動相：アセトン／ジクロロメタン［３５：６５ ｖ／ｖ］
この系では、９９ｍＴｃ−親水物から、また親油性不純物［種Ｂ、Ｃ及びＸ］及び９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩から親油性９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを分離する。
【００６６】
系２：固定相：Ｗｈａｔｍａｎ ｎｏ．１紙
移動相：アセトニトリル／水［５０：５０ ｖ／ｖ］
この系では、移動する他のテクネチウム錯体から、ストリップの起点に残存する還元加水分解テクネチウム［ＲＨＴ］を分離する。
【００６７】
空気導入段階を使用せずにＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した。９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩（１７．５ｍｌ中３７．９ＧＢｑ；ＲＡＣ＝２．２ＧＢｑ／ｍｌ）でＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した結果を図１に示す。
【００６８】
実施例５：従来技術に対する放射線防護剤を含む凍結乾燥キットの経時的なＲＣＰの放射化学分析
Ａｍｅｒｓｈａｍ ｐｌｃ（現在ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅの一部）からＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットを入手した。放射能濃度（ＲＡＣ）の上昇に対する本発明のＭｙｏｖｉｅｗ３０キット製剤及び市販のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）１０ｍｌキット製剤の再構成後の安定性を比較した。Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）についてはパッケージの書き込みによる再構成する手順に従い、すなわち、空気導入段階に従った。
【００６９】
試験は、Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）の８個の製剤及びＭｙｏｖｉｅｗ３０の８９個の製剤に基づくものであった。最大４．５ＧＢｑ／ｍｌでＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルを、最大１１．０ＧＢｑ／ｍｌでＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した。８個の製剤すべてで、２４時間の溶出間隔内で溶出した９９ｍＴｃジェネレータからの溶出液でＭｙｏｖｉｅｗ（商標）を再構成した。空気導入段階を使用せずに、最大で９６時間の様々な溶出間隔の９９ｍＴｃジェネレータからの溶出液でＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した。その結果を図２に示す。
【００７０】
実施例６：Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）に対するＭｙｏｖｉｅｗ３０の調製時間及びオペレータの放射線量の比較
１単位用量１８．５ＧＢｑ（５００ｍＣｉ）である１６単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを下記のどちらかの方法で調製した：
方法１：４個の（実施例２の）Ｍｙｏｖｉｅｗ３０バイアルをそれぞれ７４ＧＢｑの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩で再構成する、
方法２：１６個のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルをそれぞれ１８．５ＧＢｑの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩で再構成する。
【００７１】
その結果を表１に示す：
【００７２】
【表１】
実施例７：多用量バイアルの無菌性の実証
実施例２に記載のように調製した３つ別々のバッチのＭｙｏｖｉｅｗ３０を試験した。再構成する直前に、３つのＭｙｏｖｉｅｗ３０ｍｌバッチからの２つのバイアルそれぞれの中に、０．２２μｍの滅菌され発熱物質を含まないＭｉｌｌｅｘ ＧＰフィルターと組み合わせた通気針ＢＤ Ｍｉｃｒｏｌａｎｃｅ ２１Ｇを挿入した。バイアルを滅菌生理食塩水２３ｍｌで再構成した。希釈した９９ｍＴｃ−溶出液（２ｍｌ）をその後直ちにバイアル中に注入し、その結果放射能含有量が約２ＧＢｑ／バイアルとなった。バイアルを２５℃で１２時間保存した。１５分後バイアルを表２に示すように処理した：
【００７３】
【表２】
従って、再構成してから１５分、６時間、及び保存寿命の終了時である１２時間後に３０回分の模擬投与量を吸引した。ＢＤ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）Ｍｉｃｒｏｌａｎｃｅ ２５Ｇ針と組み合わせた１ｍｌのＢＤシリンジを使用して投与量を吸引した。各吸引には新しいシリンジ／針を使用した。番号１及び２１の投与量をＲＣＰ分析に回した。最終「投与量」（番号３０）をＬＡＬ（カブトガニアメーバ様細胞溶解物による細菌性エンドトキシン）試験及び浸透圧の試験に回した。１２時間後のＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアル中に残っている体積約７．５ｍｌを、現在のＵＳＰ／Ｐｈ．Ｅｕｒ試験に従って無菌性について試験した。従って、残っている体積を２つに分割し、無菌性の試験を行い、２５℃及び３２℃のインキュベーターの中で、チオグリコレート培地（ＴＧＹ）及びトリプチックソイブロス（ＴＳＢ）中で１４日間インキュベートした。
【００７４】
ＬＡＬ試験
各バイアルの番号３０の投与量を細菌性エンドトキシンの試験に回した。バイアル中の内容物を最初に滅菌生理食塩水２５ｍｌで再構成した。この溶液の０．１ｍｌを取り注射用水（ＷＦＩ）９．９ｍｌに加えてさらに希釈した。チューブ法を使用してＬＡＬ試験を行った。この希釈での細菌性エンドトキシンの限界は３１３ＩＵ／バイアルであった。
【００７５】
結果
無菌性：その結果は、増殖物が培地中に見られない場合、その製品が無菌性試験の条件を満たす（合格＝Ｐ）ことを報告するものであった。
【００７６】
ＲＣＰ：すべての製剤は、９９ｍＴｃ−テトロフォスミンのＲＣＰが９６〜９７％であることを示した。
【００７７】
ｐＨ：各バイアルのｐＨは８．２と測定された。
【００７８】
ＬＡＬ：各バイアルの結果は、その製品が得られた限界を満たし、合格（Ｐ）していることを報告するものであった。
【００７９】
結果の概要を表３に示す：
【００８０】
【表３】
実施例８：多用量バイアルのクロージャの健全性の実証
使用したＭｙｏｖｉｅｗ３０クロージャは、ＰＨ ７０１／４５ ｒｅｄ ｂｒｏｗｎ（１１７８）であり、容器は３０ｍｌバイアル１型、Ｓｃｈｏｔｔである。Ｐｈ．Ｅｕｒでの１０回と比較して３５回の穴開けを実施した以外はＰｈ．Ｅｕｒ．３．２．９に従ってＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを試験した。これは、多用量バイアルの多用量回数の拡張を模擬実験するのに必要であった。各クロージャに新しい皮下注射針で外径０．８ｍｍの穴を３５回開けた。各穴は異なる部位に開けた。最後の穴開けでは、３０ｍｌである公称体積までの限外濾過水の注入も行った。１０回穴を開けた充填バイアルを、メチレンブルー溶液（１ｇ／ｌ）入りのビーカー中に直立に沈めた。外圧を２７０ｍｂａｒ〜７５０ｍｂａｒへと下げて１０分間置いた。その後大気圧を回復し、バイアルをさらに３０分間メチレンブルー溶液中に沈めたままにした。バイアルを完全にすすぎ、白い背景に対して変色があるかどうか視察した。試験の結果から、バイアル中に色素の侵入がないことが示された。
【００８１】
実施例９：多用量バイアルの安定性試験
実施例２の場合と同様に調製した３つ別々のバッチのＭｙｏｖｉｅｗ３０の複数バイアルを制御温度５℃で光から保護して保存した。最大で５２週間の保存の間隔を置いてバイアルを試験した。テトロフォスミン、アスコルビン酸、スズ、スルホサリチル酸二ナトリウム、酸素含量及び含水量についてアッセイを行った。テトロフォスミンの純度は、１Ｈ及び３１ＰのＮＭＲによってモニターした。保存したキットを使用して調製した９９ｍＴｃ−テトロフォスミンのＲＣＰも各時点で測定した。
【００８２】
得られた結果はすべて、５２週いっぱいにわたって５℃（２〜８℃）で光から保護して保存したときにその製品がすべての仕様を満たしたことを示した。結果をすべて評価し、統計分析を行った。定量的パラメーターに線形回帰分析を実施して、各パラメーターと保存時間との関係を調べた。Ｐｅａｒｓｏｎ検定を使用して、回帰分析から得られた相関係数を有意性があるかどうか試験した。個々のパラメーターの９５％信頼区間を計算した。パラメーターが経時的に低下（又は増大）することしかできないとき、片側の信頼区間を計算した。９５％信頼区間及び回帰線を、長期のデータによりカバーされる期間を６ヶ月超えている最大７８週（１８ヶ月）まで外挿した。これは、ＩＣＨ（医薬品規制調和国際会議）のガイドラインＱ１Ｅに従った入手可能な結果に基づく保存寿命の最大限の延長である。平均の９５％信頼限界が、提唱されている許容基準と交差する最も早い時期は、５℃で保存した試料の７８週を超えている。上記に記載のように７８週間保存したＭｙｏｖｉｅｗ３０のバッチは、５．５〜８９ＧＢｑの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩で再構成したとき、再構成してから１２時間後のＲＣＰの９０％を上回るＲＣＰを示した。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】本発明の放射線防護剤組成物が、再構成してから最大で１２時間後に９５％を上回る満足なＲＣＰ（すなわち製剤の有用な寿命）をもたらすことを示す図である。
【図２】Ｍｙｏｖｉｅｗ３０及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）（空気の添加を含む）の放射能濃度（ＲＡＣ）の関数として、経時的な９９ｍＴｃ−テトロフォスミンのＲＣＰ低下率を比較した結果を示す図である。本発明のＭｙｏｖｉｅｗ３０キットが格段に強いことが認められる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌保存剤の非存在下で、アスコルビン酸又はアスコルビン酸放射線防護剤を含む９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの安定化９９ｍＴｃ放射性医薬組成物に関する。複数回分の用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物の大量調製に適した凍結乾燥キットについても、凍結乾燥バルクバイアルからの単位用量の調製方法と併せて開示する。
【背景技術】
【０００２】
放射性同位体テクネチウム−９９ｍ（９９ｍＴｃ）に基づく画像診断用放射性医薬品は、機能試験（例えば腎）、及び灌流（特に心及び脳）を始めとする様々な臨床診断用に公知である。放射性同位体９９ｍＴｃは半減期６時間であり、そのためかかる９９ｍＴｃ放射性医薬品はいわゆる「キット」から調製されるのが通常である。
【０００３】
こうした９９ｍＴｃ放射性医薬品調製用キットによって、所要の反応体を収容した非放射性凍結乾燥バイアルのストックをユーザーが維持できるようになり、かかるバイアルは９９ｍＴｃ源からの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩（ＴｃＯ４−）で再構成すれば簡単に所望の滅菌９９ｍＴｃ放射性医薬品が得られるように設計されている。等張食塩水中の９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液は、当技術分野で公知の通り、テクネチウムジェネレータを滅菌食塩水で溶出することによって得られる。
【０００４】
９９ｍＴｃ放射性医薬品調製用のキットは通常以下の成分：
（ｉ）９９ｍＴｃと金属錯体を形成するリガンド、
（ｉｉ）過テクネチウム酸塩つまりＴｃ（ＶＩＩ）を、所望の９９ｍＴｃ金属錯体生成物の低い酸化状態へと還元することができる生体適合性還元剤
を含んでいる。９９ｍＴｃ過テクネチウム酸塩の生体適合性還元剤は通常第一スズイオンつまりＳｎ（ＩＩ）である。キットは、キット成分の取扱い及び凍結乾燥を容易にするため、追加の賦形剤、例えば弱キレート剤（グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、酒石酸塩、ホスホン酸塩、ＥＤＴＡなど）、安定剤、ｐＨ調節剤、緩衝剤、可溶化剤や充填剤（マンニトール、イノシトールや塩化ナトリウムなど）などを含んでいてもよい。保存及び流通を容易にするため、非放射性キットは、クロージャを備えた滅菌バイアル内の凍結乾燥品として供給されるのが通常である。凍結乾燥製剤は、ヒトに使用するための所望の注射可能な滅菌９９ｍＴｃ放射性医薬品を与えるように最終ユーザーが滅菌９９ｍＴｃ過テクネチウム酸塩生理食塩水で容易に再構成することができる。非放射性テクネチウムキットの保存寿命は数ヶ月にも及ぶことがある。
【０００５】
放射性医薬組成物は、特に溶媒（通常は水）の放射線分解を起こして反応性の高いフリーラジカルを精製し、再構成後のキット組成物の１種以上の成分を分解するおそれがある。かかる分解を抑制するため、放射線防護剤又はラジカルスカベンジャーを使用することが知られている。通例、ラジカルスカベンジャーは、酸化防止性化合物として知られる種類のものから得られる。米国特許第４３６４９２０号には、アスコルビン酸及びアスコルビン酸塩が、９９ｍＴｃ放射性医薬品調製用の第一スズ含有非放射性キットの安定剤として機能することが開示されており、それ以降９９ｍＴｃ放射性医薬品製剤に広く用いられている。米国特許第４２３３２８４号には、９９ｍＴｃ放射性医薬品用のゲンチシン酸安定剤が開示されている。米国特許第４４５１４５１号には、９９ｍＴｃ放射性医薬品製剤用のパラアミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）及び関連安定剤が開示されている。
【０００６】
Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）キットは、以下の凍結乾燥製剤を含むを含む１０ｍｌバイアルであり、
テトロフォスミン ０．２３ｍｇ
塩化第一スズ二水和物 ３０μｇ
スルホサリチル酸二ナトリウム ０．３２ｍｇ
Ｄ−グルコン酸ナトリウム １．０ｍｇ
重炭酸ナトリウム １．８ｍｇ
再構成後のｐＨ ８．３〜９．１
１０ｍｌガラスバイアル内に窒素ガスＵＳＰ／ＮＦ下で封止され、これを滅菌（９９ｍＴｃ）過テクネチウム酸ナトリウム注射液ＵＳＰ／Ｐｈ．Ｅｕｒで再構成すれば、心臓イメージング用の放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを含む溶液が得られる。このように、Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）キットは放射線防護剤を含んでいない。
【０００７】
日本では注射剤又は「コンジュゲート」としてのＭｙｏｖｉｅｗ（商標）が１９９７年から上市されている。この「コンジュゲート」型は、水溶液中で９９ｍＴｃ−テトロフォスミンテクネチウム錯体を予め形成しておいたものをシリンジ−バイアル（別個のプランジャー及び針を備えたバイアル）内に収容したもので、容易に組み立てて放射性医薬品を含むシリンジを与えるように設計されている。Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）の「コンジュゲート」溶液は、濃度１．３６ｍｇ／ｍｌ（７．７ｍＭ）のアスコルビン酸を含む。
【０００８】
Ｂａｓｔｉｅｎ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２０，４８０−Ａｂｓｔｒａｃｔ ８４（１９９９）］には、Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）キットへの食塩水及び過テクネチウム酸塩の添加順序が９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの放射化学純度（ＲＣＰ）に影響を与えることがあると記載されている。Ｍｕｒｒａｙ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２１，８４５−８４９（２０００）］には、再構成の際にＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルのヘッドスペースに窒素ガスが過剰に存在すると、不都合な放射化学不純物によってＲＣＰの結果にバラツキが生じかねないと記載されている。Ｍｕｒｒａｙ他の報文及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットのパッケージの説明書は、これらの問題を未然に防ぐために、再構成の際にバイアル内に空気を意図的に引き込むことを推奨している。これは、通気針を刺したときに２ｍｌのヘッドスペースガスを吸引することによって達成され、その結果２ｍｌの空気がバイアル内に引き込まれる。この問題の原因は還元的自動放射線分解であり、酸素の導入によって分解が阻害すると考えられる。
【０００９】
Ｐａｔｅｌ他［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．，２６（４），２６９−２７３（１９９８）］には、市販のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルの試験結果が記載されており、製造業者の放射能の上限（１８ＧＢｑ以下の９９ｍＴｃ）の２倍での再構成は成功するが、用いた９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩ジェネレータ溶出液に対して何か制限要因となっているかは明らかでないと結論付けられている。このような高い放射能レベルは、人の放射線曝露の低減（複数回の調製に代えて１回の調製）、ＱＣの結果のバラツキの低減という利益が得られると記載されている。実際、Ｍｕｒｒａｙ他（上掲）はＭｙｏｖｉｅｗ（商標）のパッケージの説明書の濃度を超える放射能濃度を使用すると、ＲＣＰの結果が劣ると報告している。
【００１０】
国際公開第０２／０５３１９２号には、以下の成分を含む安定化放射性医薬組成物が開示されている。
（ｉ）９９ｍＴｃ金属錯体、
（ｉｉ）アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸又はゲンチシン酸、或いはそれらの生体適合性陽イオンとの塩を含む放射線防護剤、
（ｉｉｉ）次の式（Ｉ）の１種以上の抗菌保存剤：
【００１１】
【化１】
式中、ＲはＣ１〜４アルキルであり、ＭはＨ又は生体適合性陽イオンである。
【００１２】
国際公開第０２／０５３１９２号の実施例では、従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットに放射線防護剤溶液と抗菌保存剤溶液とを添加することによって安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン錯体組成物を調製している。国際公開第０２／０５３１９２号には、テトロフォスミンと放射線防護剤を共に含む凍結乾燥キットの具体例は開示されていない。
【特許文献１】米国特許第４３６４９２０号明細書
【特許文献２】米国特許第４２３３２８４号明細書
【特許文献３】米国特許第４４５１４５１号明細書
【特許文献４】国際公開第０２／０５３１９２号パンフレット
【非特許文献１】Ｂａｓｔｉｅｎ ｅｔ ａｌ［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２０，４８０−Ａｂｓｔｒａｃｔ ８４（１９９９）］
【非特許文献２】Ｍｕｒｒａｙ ｅｔ ａｌ［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｃｏｍｍ．，２１，８４５−８４９（２０００）］
【非特許文献３】Ｐａｔｅｌ ｅｔ ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．，２６（４），２６９−２７３（１９９８）］
【非特許文献４】Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ［Ｚｈｏｎｇ．Ｈｅｙｉｘ．Ｚａｚｈｉ，１７（１）１３−１５（１９９７）］
【非特許文献５】Ｒｅｉｄ ｅｔ ａｌ［Ｓｙｎｔｈ．Ａｐｐｌ．Ｉｓｏｔｏｐ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．，Ｖｏｌ ７，２５２−２５５（２０００）］
【非特許文献６】Ｌｏｇａｎ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ，２１（３），１６７−１７０（１９９３）］
【非特許文献７】Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ １４，１０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの調製方法並びに安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物調製用キットに関する。
【００１４】
９９ｍＴｃ放射性医薬品の再構成後の利用性を延ばすという問題を解決するには、再構成の際に、９９ｍＴｃの初期放射能レベルを高くしなければならないことを意味する。これは、９９ｍＴｃの半減期が６時間であるため、診断用画像を得るのに用いられる放射能の半分が放射性崩壊で６時間毎に失われ、１２時間経過後には元の放射能の１／４しか残らないことを意味するからである。かかる高レベルの放射能を長期間保つと、９９ｍＴｃ放射性医薬組成物の潜在的放射線分解という重大な問題がある。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
そこで、本発明は、組成物中に放射線防護剤を含む。９９ｍＴｃ−テトロフォスミン活性成分は、還元剤（９９ｍＴｃの標識作用を補助するために存在する）の還元作用による分解或いは放射線分解のいずれかを起こしやすい。本発明の安定化組成物を使用すると、９９ｍＴｃ放射能レベルを高めても、放射標識後の有用寿命を延ばすことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
第一の態様では、本発明は、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩溶液での再構成後に安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物を与える凍結乾燥非放射性キットであって、
（ｉ）テトロフォスミン、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される放射線防護剤、
（ｉｉｉ）生体適合性還元剤、
（ｉｖ）キットを食塩水で再構成したときに得られる溶液のｐＨを８．０〜９．２にするのに有効な量のｐＨ調節剤
を含む製剤を有するが、当該キットと９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物のいずれも抗菌保存剤を含まないキットを提供する。
【００１７】
「テトロフォスミン」という用語は、次式のエーテル置換ジホスフィンキレート剤１，２−ビス［ビス（２−エトキシエチル）ホスフィノ）］エタンを意味し、これは、９９ｍＴｃ−テトロフォスミン、すなわちＭｙｏｖｉｅｗ（商標）と呼ばれる９９ｍＴｃ（Ｏ）２（テトロフォスミン）２＋調製用の市販９９ｍＴｃキットに用いられている。
【００１８】
【化２】
「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生成する含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元過程のような分解反応を阻害する化合物をいう。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸及びその生体適合性陽イオンとの塩から選択される。
「生体適合性陽イオン」という用語は、イオン化して負に荷電した陰イオン基と塩を形成する正電荷を有する対イオンで、しかも所要の用量において無毒で哺乳類の身体、特に人体への投与に適したものをいう。適当な生体適合性陽イオンの例としては、アルカリ金属のナトリウム又はカリウム、アルカリ土類金属のカルシウム及びマグネシウム、さらにアンモニウムイオンが挙げられる。好ましい生体適合性陽イオンはナトリウム及びカリウムであり、最も好ましくはナトリウムである。
【００１９】
「生体適合性還元剤」という用語は、Ｔｃ（ＶＩＩ）過テクネチウム酸塩をテクネチウムの低い酸化状態へと還元するのに適した還元剤で、しかも所要の用量において無毒で哺乳類の身体、特に人体への投与に適したものをいう。適当な還元剤としては、亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）が挙げられる。生体適合性還元剤は、好ましくは塩化第一スズや酒石酸第一スズの様な第一スズ塩である。
【００２０】
「凍結乾燥」という用語は、通常の意味を有し、凍結乾燥組成物、好ましくは無菌状態で調製したものである。
【００２１】
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、濃度に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。抗菌保存剤は、再構成後の放射線医薬組成物（つまり、放射性診断薬自体）における微生物の増殖を阻害するために常用される。ただし、抗菌保存剤は、再構成前の非放射性キットの１以上の成分における有害微生物の増殖の防止するために使用されることもある。抗菌保存剤としては、パラベン類、即ちメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン又はこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールが挙げられる。ある種の抗菌保存剤は、揮発性が高すぎて凍結乾燥を乗り切ることができず（例えば、ベンジルアルコール又はフェノール）、水溶性が非常に低いものもある。そのため、水性溶媒で再構成して放射性医薬品溶液を与えるように設計された凍結乾燥キットにはかかる抗菌保存剤を導入するのは問題であった。
ある種の抗菌保存剤は９９ｍＴｃと金属錯体を形成することもあり、９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの放射化学純度（ＲＣＰ）、ひいてはその生体内分布に悪影響を与えかねない。製剤中に抗菌保存剤が存在すると、キット保存時の化学的不適合性の問題、例えばテトロフォスミンのホスフィンによる酸素又は硫黄原子の引き抜きに起因する問題のリスクも高まる。
【００２２】
かかるキットは、例えば血流への直接注射などによるヒトへの投与に適した滅菌放射性医薬品を与えるように設計される。凍結乾燥キットは、９９ｍＴｃ放射性同位体ジェネレータからの無菌９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸（ＴｃＯ４−）で再構成すればそれ以上操作しなくてもヒトへの投与に適した溶液が得られるように設計される。９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩溶液は、生体適合性担体中で供給される。「生体適合性担体」とは、放射性医薬品を懸濁又は溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるものである。生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、発熱物質を含まない注射用の滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性又は非低張性となるように調整するのに都合がよい）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。生体適合性担体は、エタノールのような生体適合性有機溶媒を含んでいてもよい。かかる有機溶媒は、親油性の高い化合物又は製剤の溶解に有用である。好ましくは、生体適合性担体は、発熱物質を含まない注射用水、等張食塩水又はエタノール水溶液である。上述の通り、静脈内注射用の生体適合性担体のｐＨは好適には４．０〜１０．５である。生体適合性担体は、好ましくは水性溶媒、最も好ましくは生理食塩水を含む。本発明の生体適合性担体は、抗菌保存剤の非存在下で用いられる。
【００２３】
本発明のキットは、第一の実施形態の組成物を適当な容器内に収容してなる。テトロフォスミンは、遊離塩基の形態でも、酸の塩の形態でもよいし、或いはテクネチウムの添加時にトランスメタレーション（金属交換）を起こして所望の生成物を与えるテトロフォスミン非放射性金属錯体の形態であってもよい。好ましくは、テトロフォスミンは遊離塩基の形態である。適当な容器は、無菌健全性及び／又は放射能の安全性、さらに適宜ヘッドスペースの不活性ガス（例えば窒素又はアルゴン）の維持できるようにしながら、シリンジでの溶液の添加及び吸引も可能となるように密封される。好ましい容器はセプタム封止バイアルであり、気密クロージャをオーバーシール（通常はアルミニウム製）と共にクリンプオンする。かかる容器は、例えばヘッドスペースガス又は脱気溶液の変更のため必要に応じて真空にクロージャが耐えるという追加の利点がある。
【００２４】
非放射性キットはさらに、トランスキレーター、ｐＨ調節剤又は充填剤のような追加成分を適宜含んでいてもよい。「トランスキレーター」とは、テクネチウムと迅速に反応して弱い錯体を形成し、次に配位子で置換される化合物である。これはテクネチウム錯形成反応と競合する過テクネチウム酸塩の迅速な還元に起因した還元型加水分解テクネチウム（ＲＨＴ）が形成するおそれを最小限に抑制する。かかる適当なトランスキレーターは、有機酸と生体適合性陽イオンとの塩、特にｐＫａが３〜７の「弱有機酸」の塩である。かかる適当な弱有機酸は、酢酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、フェノール又はホスホン酸である。従って、適当な塩は、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、フェノラート又はホスホン酸塩である。好ましい塩は、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、最も好ましくはホスホン酸塩、特にジホスホン酸塩である。好ましいトランスキレーターは、グルコン酸と生体適合性陽イオンとの塩、特にグルコン酸ナトリウムである。その他の好ましいトランスキレーターは、５−スルホサリチル酸又はその生体適合性陽イオンとの塩である。２種以上のトランスキレーターを併用してもよく、本発明のテトロフォスミンキットは、最も好ましくは５−スルホサリチル酸ナトリウムとグルコン酸ナトリウムの組合せを含む。
【００２５】
「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成したキットのｐＨが、ヒト又は哺乳類の投与に関する許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。かかる適当なｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）のような薬学的に許容される緩衝剤、並びに炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物のような薬学的に許容される塩基が挙げられる。本発明のテトロフォスミンキットに好ましいｐＨ調節剤は、重炭酸ナトリウムである。
【００２６】
「充填剤」という用語は、製造時及び凍結乾燥時の材料の取扱いを容易にする薬学的に許容される増量剤を意味する。適当な充填剤としては、塩化ナトリウムのような無機塩並びに水溶性糖類又は糖アルコール、例えばスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースが挙げられる。ある種のｐＨ調節剤は充填剤としても機能し得る。かかる二元機能充填剤として好ましいのは重炭酸ナトリウムである。本発明の好ましいキットは、凍結乾燥を容易にする充填剤を含む。本発明のテトロフォスミンキットの好ましい充填剤は、二元機能充填剤の重炭酸ナトリウムである。
【００２７】
本発明のキットに放射線防護剤を導入すると、従来技術及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）のパッケージの説明書で共に教示される空気導入段階を必要とせずに、良好なＲＣＰで、かつ調製後最大１２時間、再構成後の安定性が良好な状態で９９ｍＴｃ−テトロフォスミン錯体が調製されるという利点が付与されるという知見が得られた。このことにより方法の段階が除去され、それは操作が１つ少なくなることを意味し、従ってその結果オペレータにとって放射線量が減るとともに実施がより迅速かつ簡単になるので、それは有用な単純化である。空気導入段階はまた、放射性医薬調剤の実施では多少異例でもあり、従って、それが不注意で省略され、その結果ＲＣＰに悪影響を及ぼす可能性があるというリスクがある。
【００２８】
本発明のキットで用いる放射線防護剤の濃度は、好適には０．０００３〜０．７Ｍであり、好ましくは０．００１〜０．０７Ｍであり、最も好ましくは０．００２５〜０．０１Ｍである。アスコルビン酸では、これは、０．０５〜１００ｍｇ／ｃｍ３、好ましくは０．２〜１０ｍｇ／ｃｍ３、最も好ましくは０．４〜１．５ｍｇ／ｃｍ３の適当な濃度に対応する。
【００２９】
本発明の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品をヒトに投与する際に用いられる適当な量の放射能は、１８５〜１２２１ＭＢｑ（５〜３３ｍＣｉ）である。心臓のイメージングでは、休息及び負荷注射を同じ日に行うとき、第一の線量は１８５〜４４４ＭＢｑ（５〜１２ｍＣｉ）、その約１〜４時間後に投与する第二の線量は５５５〜１２２１ＭＢｑ（１５〜３３ｍＣｉ）であるべきである。従って、本発明の安定化９９ｍＴｃ放射性医薬組成物の最初の９９ｍＴｃ活性は０．２〜１００ＧＢｑであり、そのため９９ｍＴｃの放射性崩壊を考慮した後でも同じ製剤から複数回投与することができる。
【００３０】
本発明の凍結乾燥キットは、好ましくは、水又は食塩水で再構成後の溶液のｐＨが８．０〜９．２、最も好ましくは８．０〜８．６となるように製剤する。このことは、放射線防護剤がアスコルビン酸、すなわち酸であるとき、ｐＨ調節剤の量を調整することが必要であることを意味する。これは、テトロフォスミンの９９ｍＴｃ放射標識、再構成後の安定性及び患者投与の適合性についてキットの最適なｐＨを確実に維持するのに必要である。３０ｍｌバイアルの形で好ましいかかるキットの処方を実施例２に示し、この実施例では、重炭酸ナトリウムの量を、従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）の１０ｍｌバイアル製剤を超えて、割合に応じてかなり大きくしなければならないことを示す。本発明者らは、３０ｍｌバイアルキットで、アスコルビン酸の量を５．５ｍｇ／バイアルに増やし、又は重炭酸ナトリウムの量を１０ｍｇ／バイアルに減らすと、外観的に許容できない凍結乾燥塊が生じることを発見した。これは、アスコルビン酸のガラス転移温度が低く（−５４℃）、それによりおそらく製剤のガラス転移温度が低下することによるものと考えられる。従って、許容できる凍結乾燥キットを調製する場合、加えることができるアスコルビン酸の量には上限がある。かなり高レベルの重炭酸ナトリウムが、アスコルビン酸に適応し、依然として許容できる凍結乾燥プラグを得るのに必要であることが判明した。
【００３１】
本発明の放射線防護剤は、いくつかの供給業者から市販されている。テトロフォスミンは、Ｃｈｅｎ他［Ｚｈｏｎｇ．Ｈｅｙｉｘ．Ｚａｚｈｉ，１７（１）１３−１５（１９９７）］又はＲｅｉｄ他［Ｓｙｎｔｈ．Ａｐｐｌ．Ｉｓｏｔｏｐ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．，Ｖｏｌ ７，２５２−２５５（２０００）］に記載のように調製することができる。通常の合成では、まず１，２−ビス（ホスフィノ）エタン又はＨ２ＰＣＨ２ＣＨ２ＰＨ２を調製した後、実施例１に記載のようなラジカル開始剤を使用して過剰なエチルビニルエーテルのラジカル付加を行う。
【００３２】
第二の態様では、本発明は、第一の実施形態に係る凍結乾燥製剤を、無菌健全性を保ちながら溶液の添加及び吸引が可能なクロージャを備えた密封滅菌容器に収容してなる多用量キットであって、１個のキットから４〜３０回分の単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品を得ることができるように処方されたキットを提供する。
【００３３】
多用量キットは、従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットよりも格段に高レベルの放射能に、またより大きな体積の溶液に耐えるほど十分に強くなければならない。多用量バイアルの容器は、好適には体積が２０〜５０ｃｍ３であり、好ましくは２０〜４０ｃｍ３であり、最も好ましくは３０ｃｍ３である。容器は、複数回穿刺するのに適した気密シール（例えばクリンプオン式セプタムシール蓋）を備える。
【００３４】
多用量キットは、複数回の患者投与に十分な物質を含み（例えば、最大で１バイアル当たり９９ｍＴｃ１００ＧＢｑ）、従って、それにより単位用量を安定化製剤の存続する寿命中の様々な時間間隔で臨床グレードのシリンジ中に吸引して、臨床的状況に合わせることができる。或いは、９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品の単位用量は、上記に記載の密封容器に入れて提供してもよい。「単位用量」又は「単位用量」という用語は、１人の患者に投与した後にインビボイメージングに適した９９ｍＴｃ放射能含有量を有する９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物を意味する。かかる「単位用量」は、第五の実施形態（下記）でさらに説明する。本発明の多用量キットは、一連の９９ｍＴｃジェネレータ溶出液にとって再現可能な方法で、９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品のかかる４〜３０回分の単位用量、好ましくは６〜２４回分の単位用量を得るのに適するように処方される。しかし、多用量キットを使用して、かかる１〜４０回分の投与量を、またおそらく４０回分を超える単位用量も得ることができる。
【００３５】
第一の実施形態と同様に、第二の実施形態の多用量キットは、再構成プロトコルで空気導入段階を必要とせず、このことは重要な利点となる。本発明の多用量キットではまた、複数の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品の調製について格段に迅速な調製時間も可能となり、実質的にオペレータの放射線量が減る。従来のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットの保存寿命の安定性が３７週間以上である一方で、多用量キットはまた、７８週間以上と保存寿命の安定性の延長をも示す。多用量キットの追加の利点は、第三の実施形態（下記）の方法で説明する。
【００３６】
第三の態様では、本発明は、複数回分の用量の放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの調製方法であって、
（ｉ）第二の実施形態の多用量キットを、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成するか、或いは最初に生体適合性担体で次いで９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成し、
（ｉｉ）適宜、段階（ｉ）を抗菌保存剤の存在下で実施し、
（ｉｉｉ）９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体を形成させて、所望の９９ｍＴｃテトロフォスミン放射性医薬品のバルク供給原料を含む溶液を得、
（ｉｖ）適宜、９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体のバルク供給原料の放射化学純度を確認し、
（ｖ）段階（ｉｉｉ）のバルク供給原料から単位用量を適当なシリンジ又は容器内に吸引し、
（ｖｉ）後で追加の単位用量を得るために追加のシリンジ又は容器で段階（ｖ）を繰り返す
ことを含んでなる方法を提供する。
【００３７】
単位用量は、第一の実施形態（上記）で定義した通りであり、第四の実施形態（下記）でさらに十分に説明する。生体適合性担体及びその好ましい実施形態は、第一の実施形態（上記）で定義した通りである。この方法で好ましい生体適合性担体は、滅菌生理食塩水である。
【００３８】
本方法は、好ましくは、抗菌保存剤の非存在下で実施する。
【００３９】
好ましくは、テクネチウムジェネレータから９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液を得る。段階（ｉ）で用いる９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の放射能含有量は、好適には２〜１００ＧＢｑであり、好ましくは５〜７５ＧＢｑである。９９ｍＴｃの放射能濃度は、好ましくは１０ＧＢｑ／ｃｍ３以下であり、最も好ましくは２．５ＧＢｑ／ｃｍ３以下である。調製した後、所望の９９ｍＴｃテトロフォスミン放射性医薬品のバルク供給原料は、使用できる保存寿命が最大で１２時間である。
【００４０】
９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体の形成、すなわち段階（ｉｉｉ）は、通常室温で１５分以内に終了する。
【００４１】
本発明の方法は、
（ａ）放射能（９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩）が関与する操作の数が格段に減り、
（ｂ）空気導入段階を必要とせず、
（ｃ）投与量当たりのＱＣ決定と対照的に、単位用量のバッチ当たりに１回のＱＣ決定しか必要とされず、
（ｄ）製剤が一連の９９ｍＴｃジェネレータ溶出液の条件に耐えることができるような形でバルクバイアルが製剤され、
（ｅ）必要とされる段階が減るので、自動化が容易であり、
（ｆ）必要とされる非放射性キットバイアルが減るので、冷蔵庫の保存空間が節約される
という、複数のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）１０ｍｌバイアルを再構成する代替法を上回る利点を有する。重要な結果として、オペレータの処理時間が減り（すなわち効率）、オペレータの放射線量が減り、その程度が大きくなるほど、調製される単位用量の数も多くなる。
【００４２】
第四の態様では、本発明は、
（ｉ）生体適合性担体中のテトロフォスミンの９９ｍＴｃ錯体、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される濃度０．５〜６．０ｍＭの放射線防護剤
を含んでなる安定化放射性医薬組成物であって、抗菌保存剤を含まない安定化放射性医薬組成物を提供する。
【００４３】
「生体適合性担体」及びその好ましい実施形態は、上記で定義した通りである。
【００４４】
ミリモル濃度（ｍＭ）は、１．０ｍＭが０．００１Ｍに等しいというものである。放射線防護剤の濃度は、好ましくは０．６〜５．７ｍＭであり、最も好ましくは０．７〜５．５ｍＭである。これらは、第一の実施形態の好ましいキットを必要な体積範囲の９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の生理食塩水で再構成したときに得られる濃度の範囲に対応する。放射線防護剤のこれらの濃度はまた、日本で入手可能なＭｙｏｖｉｅｗ（商標）の「コンジュゲート」溶液製剤で使用されるものよりも低い。
【００４５】
安定化組成物に好ましい放射線防護剤は、第一の実施形態で定義した通りである。
【００４６】
好ましくは、安定化組成物のｐＨは７．５〜９．０であり、最も好ましくは８．０〜８．６である。
【００４７】
第五の態様では、本発明は、第四の実施形態の組成物を含み、１人の患者のイメージングに適した９９ｍＴｃ放射能含有量を有する放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの単位用量を提供する。
【００４８】
単位用量は第一の実施形態で定義した通りであり、適当な容器又はシリンジ中でヒト投与に適した滅菌した形で提供される。かかるシリンジは、好適には臨床使用のためのものであり、好ましくはシリンジが常に個々の患者にしか使用されないように使い捨てのものである。シリンジは、適宜、オペレータを放射線量から保護するシリンジシールドを装着して供給してもよい。かかる適当な放射性医薬品用シリンジシールドは市販されており、好ましくは、Ｌｏｇａｎ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｔｅｃｈｎｏｌ，２１（３），１６７−１７０（１９９３）］に記載のように鉛又はタングステンを含む。
【００４９】
或いは、単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品は、皮下注射針で一回又は複数回穿刺するのに適したシール（例えば、クリンプオン式セプタムシール蓋）を備えた容器に入れて供給してもよい。本発明の単位用量は、好ましくは、臨床グレードのシリンジに入れて供給され、最も好ましくはシリンジシールドを取り付けている。
【００５０】
単位用量の９９ｍＴｃ放射能含有量は、好適には１５０〜１５００ＭＢｑであり、好ましくは１８５〜１２５０ＭＢｑである。休息及び負荷注射を同じ日に行うとき、第一の線量は１８５〜４５０ＭＢｑ、その１〜４時間後の第二の線量は５５０〜１２５０ＭＢｑであるべきである。単位用量で用いる好ましい組成物は、第三の実施形態（上記）で記載した通りである。
【実施例】
【００５１】
下記に詳細に記載した非限定的な実施例によって、本発明を説明する。
【００５２】
実施例１では、テトロフォスミンの合成を示す。実施例２では、Ｍｙｏｖｉｅｗ３０と呼ばれる好ましい形で、本発明の凍結乾燥された多用量又は「大型」キットを示す。実施例３では、本発明の多用量又は「大型」キットを使用して、複数単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンをどのように調製することができるかを示す。実施例４では、放射線防護剤を含む凍結乾燥キットが９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩での再構成後長時間にわたって優れた放射化学純度を示すことを示す。
【００５３】
実施例５では、Ｍｙｏｖｉｅｗ３０キットで空気導入段階がなくても、再構成後のＭｙｏｖｉｅｗ３０キットの安定性が、放射能濃度（ＲＡＣ）の上昇においてＭｙｏｖｉｅｗ（商標）より優れていることを示す。実施例５では、９９ｍＴｃジェネレータの広範囲な溶出間隔でＭｙｏｖｉｅｗ３０キットをうまく使用できることも示す。放射能濃度（ＲＡＣ）と９９ｍＴｃジェネレータの溶出間隔両方の範囲は、複数の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン製剤を毎日調製する必要がある可能性がある場合に、本発明のキットが、特に放射性医薬操作について有用な柔軟性を有することを意味するものである。
【００５４】
実施例６では、本発明のＭｙｏｖｉｅｗ３０キットにより、複数の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品の調製について格段に迅速な調製時間が可能となり、実質的にオペレータの放射線量が減ることを示す。ＱＣ試料で用いる放射能の量はＭｙｏｖｉｅｗ３０及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）で同じであるが、Ｍｙｏｖｉｅｗ３０では時間が７０％短く放射能が７５％小さい。さらに、オペレータにとって放射線シールドの裏に４個のＱＣクロマトグラフィーストリップを置くほうが１６個置くより簡単である。
【００５５】
実施例７では、満足なＲＣＰを維持しつつ、バイアル内容物の無菌性を損なうことなく、本発明の多用量バイアルを使用して３０回分の単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを調製できることを示す。従って、再構成してから１２時間後、複数の栓の貫通の後でもＲＣＰは仕様を満たした。１２時間後、培地中に増殖物は見られず、その製品はＵＳＰ／Ｐｈ．Ｅｕｒ．無菌性試験の条件を満たしていた。製剤の希釈物について試験し、細菌性エンドトキシン含有量が３１３ＩＵ／バイアル未満であることが示された。このことは、生存する細菌又はその変性産物が検出されず、従って多用量バイアルが抗菌保存剤を必要とせずに有効に機能することを意味するものである。
【００５６】
実施例８では、本発明の多用量バイアルのクロージャが最大３５回針での穿刺に耐えることを示す。実施例９では、５℃（２℃〜８℃）で保存し光から保護したとき、本発明の多用量バイアルの使用できる非放射性物質の保存寿命が７８週（１８ヶ月）であることを示す。
【００５７】
実施例１：テトロフォスミンの合成
すべての反応及び操作は、真空で又は酸素を含まない窒素雰囲気下で行った。溶媒を乾燥させ、使用前に窒素パージにより脱気した。α−アゾ−イソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）及びエチルビニルエーテルはＢＤＨ及びＡｌｄｒｉｃｈからそれぞれ入手した。ビス（ジホスフィノ）エタンは、文献［Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ １４，１０］に従って調製した。
【００５８】
Ｔｅｆｌｏｎ（商標）撹拌棒を備えたＦｉｓｃｈｅｒ耐圧瓶にエチルビニルエーテル（５ｃｍ３、５２．３ｍｍｏｌ）、ビス（ジホスフィノ）エタン（１ｃｍ３、１０ｍｍｏｌ）及びα−アゾ−イソブチロニトリル（０．１ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を入れた。次いで反応混合物を撹拌し、７５℃で１６時間加熱した。冷却して室温に戻した後、粘性液体を５０ｃｍ３丸底フラスコに移した。真空下で加熱して揮発性物質の除去を行った。得られた非揮発性物質は、ＮＭＲにより純粋であった。収量：３．０ｇ、８０％。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．１２（１２Ｈ，ｄｔ Ｊ＝１．１６Ｈｚ，７．１５Ｈｚ；ＯＣＨ２ＣＨ３）１．５１（４Ｈ，ｂｒ ｍ；ＰＣ２Ｈ４Ｐ）、１．７（８Ｈ；ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ；ＰＣＨ２ＣＨ２ＯＥｔ）、３．４（８Ｈ，ｄｔ Ｊ＝１．１６Ｈｚ，７．１５Ｈｚ，ＯＣＨ２ＣＨ３）、３．４９（８Ｈ；ｂｒ ｍ；ＰＣＨ２ＣＨ２ＯＥｔ）ｐｐｍ。
３１Ｐ ＮＭＲ：δ−３３．１７ｐｐｍ。
【００５９】
エタノール中で２．３〜２．５モル当量の５−スルホサリチル酸と室温で反応させ、その後エタノール／エーテルから再結晶化して、テトロフォスミンをスルホサリチル酸テトロフォスミンに転換した。
【００６０】
実施例２：凍結乾燥バルクバイアルキットの処方及び調製
３０ｍｌのバルクバイアル製剤の最適な処方は下記の通りである：
テトロフォスミン ０．６９ｍｇ
塩化第一スズ二水和物 ９０μｇ
スルホサリチル酸二ナトリウム ０．９６ｍｇ
Ｄ−グルコン酸ナトリウム ３．０ｍｇ
アスコルビン酸 ５．０ｍｇ
重炭酸ナトリウム １１．０ｍｇ
食塩水で再構成後のｐＨ ８．３〜９．１。
このキットの処方を「Ｍｙｏｖｉｅｗ３０」と称する。
【００６１】
５００ｍｌのバッチを調製した。従って、注射用水（ＷＦＩ）の全体積の約９０％を調製容器に加えた。窒素でパージしてＷＦＩを脱酸素化した。スルホサリチル酸テトロフォスミン、塩化第一スズ二水和物、Ｄ−グルコン酸ナトリウム、アスコルビン酸及び重炭酸ナトリウムを、常に混合しながら連続した順番で分注し、添加し溶解した。分注用のビーカーを、脱酸素化ＷＦＩですすいだ。連続して混合する間、脱酸素化ＷＦＩで大量溶液を最終体積の１００％に調整した。窒素パージを中止した。ヘッドスペース中を覆う窒素を、製造工程の残りの間に適用した。
【００６２】
溶液を滅菌濾過し、濾過溶液３．０ｍｌを３０ｍｌバイアル中に分注した。バイアルは、部分的に栓をし、次いで凍結乾燥した。
【００６３】
実施例３：放射線防護剤を含む大型キットを再構成する手順
（実施例２の）Ｍｙｏｖｉｅｗ３０キットの３０ｍｌバイアルを適当な放射能遮蔽容器中に挿入し、ゴムの隔壁をイソプロピルアルコールスワブで消毒した。滅菌針（通気針）をゴムの隔壁を介して挿入した。遮蔽した滅菌シリンジを使用して、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩ジェネレータ溶出液［体積１０〜３０ｃｍ３；静菌剤を含まない塩化ナトリウム注射液、ＵＳＰで適宜希釈；放射能濃度最大１０ＧＢｑ／ｃｍ３、及び合計の９９ｍＴｃ放射能含有量最大１００ＧＢｑ（２．７Ｃｉ）］を加えた。次いで通気針を除去した。再構成したバイアルを１０秒間穏やかに混合して、確実に、凍結乾燥粉末が完全に溶解するようにし、次いで室温で１５分間インキュベートした。
【００６４】
再構成したＭｙｏｖｉｅｗ３０を２〜２５℃で保存し、調製してから１２時間以内に内容物を使用した。吸引したアリコートも２〜２５℃で保存し、再構成したＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルと同じ１２時間以内に使用した。
【００６５】
実施例４：放射線防護剤を含む凍結乾燥キットの経時的なＲＣＰの放射化学分析
再構成したＭｙｏｖｉｅｗ３０キット（実施例２）の放射化学純度［ＲＣＰ］を、２つのクロマトグラフィーの系を使用して測定した：
系１：固定相：ＩＴＬＣ−ＳＧ
移動相：アセトン／ジクロロメタン［３５：６５ ｖ／ｖ］
この系では、９９ｍＴｃ−親水物から、また親油性不純物［種Ｂ、Ｃ及びＸ］及び９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩から親油性９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを分離する。
【００６６】
系２：固定相：Ｗｈａｔｍａｎ ｎｏ．１紙
移動相：アセトニトリル／水［５０：５０ ｖ／ｖ］
この系では、移動する他のテクネチウム錯体から、ストリップの起点に残存する還元加水分解テクネチウム［ＲＨＴ］を分離する。
【００６７】
空気導入段階を使用せずにＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した。９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩（１７．５ｍｌ中３７．９ＧＢｑ；ＲＡＣ＝２．２ＧＢｑ／ｍｌ）でＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した結果を図１に示す。
【００６８】
実施例５：従来技術に対する放射線防護剤を含む凍結乾燥キットの経時的なＲＣＰの放射化学分析
Ａｍｅｒｓｈａｍ ｐｌｃ（現在ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅの一部）からＭｙｏｖｉｅｗ（商標）キットを入手した。放射能濃度（ＲＡＣ）の上昇に対する本発明のＭｙｏｖｉｅｗ３０キット製剤及び市販のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）１０ｍｌキット製剤の再構成後の安定性を比較した。Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）についてはパッケージの書き込みによる再構成する手順に従い、すなわち、空気導入段階に従った。
【００６９】
試験は、Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）の８個の製剤及びＭｙｏｖｉｅｗ３０の８９個の製剤に基づくものであった。最大４．５ＧＢｑ／ｍｌでＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルを、最大１１．０ＧＢｑ／ｍｌでＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した。８個の製剤すべてで、２４時間の溶出間隔内で溶出した９９ｍＴｃジェネレータからの溶出液でＭｙｏｖｉｅｗ（商標）を再構成した。空気導入段階を使用せずに、最大で９６時間の様々な溶出間隔の９９ｍＴｃジェネレータからの溶出液でＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを再構成した。その結果を図２に示す。
【００７０】
実施例６：Ｍｙｏｖｉｅｗ（商標）に対するＭｙｏｖｉｅｗ３０の調製時間及びオペレータの放射線量の比較
１単位用量１８．５ＧＢｑ（５００ｍＣｉ）である１６単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミンを下記のどちらかの方法で調製した：
方法１：４個の（実施例２の）Ｍｙｏｖｉｅｗ３０バイアルをそれぞれ７４ＧＢｑの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩で再構成する、
方法２：１６個のＭｙｏｖｉｅｗ（商標）バイアルをそれぞれ１８．５ＧＢｑの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩で再構成する。
【００７１】
その結果を表１に示す：
【００７２】
【表１】
実施例７：多用量バイアルの無菌性の実証
実施例２に記載のように調製した３つ別々のバッチのＭｙｏｖｉｅｗ３０を試験した。再構成する直前に、３つのＭｙｏｖｉｅｗ３０ｍｌバッチからの２つのバイアルそれぞれの中に、０．２２μｍの滅菌され発熱物質を含まないＭｉｌｌｅｘ ＧＰフィルターと組み合わせた通気針ＢＤ Ｍｉｃｒｏｌａｎｃｅ ２１Ｇを挿入した。バイアルを滅菌生理食塩水２３ｍｌで再構成した。希釈した９９ｍＴｃ−溶出液（２ｍｌ）をその後直ちにバイアル中に注入し、その結果放射能含有量が約２ＧＢｑ／バイアルとなった。バイアルを２５℃で１２時間保存した。１５分後バイアルを表２に示すように処理した：
【００７３】
【表２】
従って、再構成してから１５分、６時間、及び保存寿命の終了時である１２時間後に３０回分の模擬投与量を吸引した。ＢＤ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）Ｍｉｃｒｏｌａｎｃｅ ２５Ｇ針と組み合わせた１ｍｌのＢＤシリンジを使用して投与量を吸引した。各吸引には新しいシリンジ／針を使用した。番号１及び２１の投与量をＲＣＰ分析に回した。最終「投与量」（番号３０）をＬＡＬ（カブトガニアメーバ様細胞溶解物による細菌性エンドトキシン）試験及び浸透圧の試験に回した。１２時間後のＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアル中に残っている体積約７．５ｍｌを、現在のＵＳＰ／Ｐｈ．Ｅｕｒ試験に従って無菌性について試験した。従って、残っている体積を２つに分割し、無菌性の試験を行い、２５℃及び３２℃のインキュベーターの中で、チオグリコレート培地（ＴＧＹ）及びトリプチックソイブロス（ＴＳＢ）中で１４日間インキュベートした。
【００７４】
ＬＡＬ試験
各バイアルの番号３０の投与量を細菌性エンドトキシンの試験に回した。バイアル中の内容物を最初に滅菌生理食塩水２５ｍｌで再構成した。この溶液の０．１ｍｌを取り注射用水（ＷＦＩ）９．９ｍｌに加えてさらに希釈した。チューブ法を使用してＬＡＬ試験を行った。この希釈での細菌性エンドトキシンの限界は３１３ＩＵ／バイアルであった。
【００７５】
結果
無菌性：その結果は、増殖物が培地中に見られない場合、その製品が無菌性試験の条件を満たす（合格＝Ｐ）ことを報告するものであった。
【００７６】
ＲＣＰ：すべての製剤は、９９ｍＴｃ−テトロフォスミンのＲＣＰが９６〜９７％であることを示した。
【００７７】
ｐＨ：各バイアルのｐＨは８．２と測定された。
【００７８】
ＬＡＬ：各バイアルの結果は、その製品が得られた限界を満たし、合格（Ｐ）していることを報告するものであった。
【００７９】
結果の概要を表３に示す：
【００８０】
【表３】
実施例８：多用量バイアルのクロージャの健全性の実証
使用したＭｙｏｖｉｅｗ３０クロージャは、ＰＨ ７０１／４５ ｒｅｄ ｂｒｏｗｎ（１１７８）であり、容器は３０ｍｌバイアル１型、Ｓｃｈｏｔｔである。Ｐｈ．Ｅｕｒでの１０回と比較して３５回の穴開けを実施した以外はＰｈ．Ｅｕｒ．３．２．９に従ってＭｙｏｖｉｅｗ３０バイアルを試験した。これは、多用量バイアルの多用量回数の拡張を模擬実験するのに必要であった。各クロージャに新しい皮下注射針で外径０．８ｍｍの穴を３５回開けた。各穴は異なる部位に開けた。最後の穴開けでは、３０ｍｌである公称体積までの限外濾過水の注入も行った。１０回穴を開けた充填バイアルを、メチレンブルー溶液（１ｇ／ｌ）入りのビーカー中に直立に沈めた。外圧を２７０ｍｂａｒ〜７５０ｍｂａｒへと下げて１０分間置いた。その後大気圧を回復し、バイアルをさらに３０分間メチレンブルー溶液中に沈めたままにした。バイアルを完全にすすぎ、白い背景に対して変色があるかどうか視察した。試験の結果から、バイアル中に色素の侵入がないことが示された。
【００８１】
実施例９：多用量バイアルの安定性試験
実施例２の場合と同様に調製した３つ別々のバッチのＭｙｏｖｉｅｗ３０の複数バイアルを制御温度５℃で光から保護して保存した。最大で５２週間の保存の間隔を置いてバイアルを試験した。テトロフォスミン、アスコルビン酸、スズ、スルホサリチル酸二ナトリウム、酸素含量及び含水量についてアッセイを行った。テトロフォスミンの純度は、１Ｈ及び３１ＰのＮＭＲによってモニターした。保存したキットを使用して調製した９９ｍＴｃ−テトロフォスミンのＲＣＰも各時点で測定した。
【００８２】
得られた結果はすべて、５２週いっぱいにわたって５℃（２〜８℃）で光から保護して保存したときにその製品がすべての仕様を満たしたことを示した。結果をすべて評価し、統計分析を行った。定量的パラメーターに線形回帰分析を実施して、各パラメーターと保存時間との関係を調べた。Ｐｅａｒｓｏｎ検定を使用して、回帰分析から得られた相関係数を有意性があるかどうか試験した。個々のパラメーターの９５％信頼区間を計算した。パラメーターが経時的に低下（又は増大）することしかできないとき、片側の信頼区間を計算した。９５％信頼区間及び回帰線を、長期のデータによりカバーされる期間を６ヶ月超えている最大７８週（１８ヶ月）まで外挿した。これは、ＩＣＨ（医薬品規制調和国際会議）のガイドラインＱ１Ｅに従った入手可能な結果に基づく保存寿命の最大限の延長である。平均の９５％信頼限界が、提唱されている許容基準と交差する最も早い時期は、５℃で保存した試料の７８週を超えている。上記に記載のように７８週間保存したＭｙｏｖｉｅｗ３０のバッチは、５．５〜８９ＧＢｑの９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩で再構成したとき、再構成してから１２時間後のＲＣＰの９０％を上回るＲＣＰを示した。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】本発明の放射線防護剤組成物が、再構成してから最大で１２時間後に９５％を上回る満足なＲＣＰ（すなわち製剤の有用な寿命）をもたらすことを示す図である。
【図２】Ｍｙｏｖｉｅｗ３０及びＭｙｏｖｉｅｗ（商標）（空気の添加を含む）の放射能濃度（ＲＡＣ）の関数として、経時的な９９ｍＴｃ−テトロフォスミンのＲＣＰ低下率を比較した結果を示す図である。本発明のＭｙｏｖｉｅｗ３０キットが格段に強いことが認められる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩溶液での再構成後に安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物を与える凍結乾燥非放射性キットであって、
（ｉ）テトロフォスミン、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される放射線防護剤、
（ｉｉｉ）生体適合性還元剤、
（ｉｖ）当該キットを食塩水で再構成したときに得られる溶液のｐＨを８．０〜９．２にするのに有効な量のｐＨ調節剤
を含む製剤を有するが、当該キットと９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物のいずれも抗菌保存剤を含まないキット。
【請求項２】
５−スルホサリチル酸及びグルコン酸又はそれらの生体適合性陽イオンとの塩から選択される１種以上のトランスキレーターをさらに含む、請求項１記載のキット。
【請求項３】
生体適合性還元剤が第一スズイオンを含む、請求項１又は請求項２記載のキット。
【請求項４】
ｐＨ調節剤が重炭酸ナトリウムを含む、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載のキット。
【請求項５】
請求項１乃至請求項４記載の凍結乾燥製剤を、無菌健全性を保ちながら溶液の添加及び吸引が可能なクロージャを備えた密封滅菌容器に収容してなる多用量キットであって、１個の多用量キットから４〜３０回分の単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品を得ることができるように処方されたキット。
【請求項６】
前記容器が２０〜４０ｃｍ３のセプタム封止バイアルである、請求項５記載の多用量キット。
【請求項７】
複数回分の用量の放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの調製方法であって、
（ｉ）請求項５又は請求項６記載の多用量キットを、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成するか、或いは最初に生体適合性担体で次いで９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成し、
（ｉｉ）適宜、段階（ｉ）を抗菌保存剤の存在下で実施し、
（ｉｉｉ）９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体を形成させて、所望の９９ｍＴｃテトロフォスミン放射性医薬品のバルク供給原料を含む溶液を得、
（ｉｖ）適宜、９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体のバルク供給原料の放射化学純度を確認し、
（ｖ）段階（ｉｉｉ）のバルク供給原料から単位用量を適当なシリンジ又は容器内に吸引し、
（ｖｉ）後で追加の単位用量を得るために追加のシリンジ又は容器で段階（ｖ）を繰り返す
ことを含んでなる方法。
【請求項８】
段階（ｉ）で用いる９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の放射能含有量が５〜１００ＧＢｑである、請求項７記載の方法。
【請求項９】
（ｉ）生体適合性担体中のテトロフォスミンの９９ｍＴｃ錯体、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される濃度０．５〜６．０ｍＭの放射線防護剤
を含んでなる安定化放射性医薬組成物であって、抗菌保存剤を含まない安定化放射性医薬組成物。
【請求項１０】
放射線防護剤の濃度が１．４〜５．５ｍＭである、請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
放射線防護剤がアスコルビン酸である、請求項９又は請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
放射線防護剤がアスコルビン酸ナトリウムである、請求項９又は請求項１０記載の組成物。
【請求項１３】
生体適合性担体が生理食塩水を含む、請求項９乃至請求項１２のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１４】
９９ｍＴｃの放射能含有量が１５０〜８５０ＭＢｑである、請求項９乃至請求項１３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１５】
請求項９乃至請求項１４記載の組成物を臨床グレードの容器又はシリンジ内に収容してなる単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品であって、当該医薬品の９９ｍＴｃ放射能含有量が１人の患者のイメージングに適したものである、放射性医薬品。
【請求項１６】
オペレータを放射線量から保護するためのシリンジシールドを有するシリンジに収容して供給される、請求項１５記載の放射性医薬品。
【請求項１】
９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩溶液での再構成後に安定化９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物を与える凍結乾燥非放射性キットであって、
（ｉ）テトロフォスミン、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される放射線防護剤、
（ｉｉｉ）生体適合性還元剤、
（ｉｖ）当該キットを食塩水で再構成したときに得られる溶液のｐＨを８．０〜９．２にするのに有効な量のｐＨ調節剤
を含む製剤を有するが、当該キットと９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬組成物のいずれも抗菌保存剤を含まないキット。
【請求項２】
５−スルホサリチル酸及びグルコン酸又はそれらの生体適合性陽イオンとの塩から選択される１種以上のトランスキレーターをさらに含む、請求項１記載のキット。
【請求項３】
生体適合性還元剤が第一スズイオンを含む、請求項１又は請求項２記載のキット。
【請求項４】
ｐＨ調節剤が重炭酸ナトリウムを含む、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載のキット。
【請求項５】
請求項１乃至請求項４記載の凍結乾燥製剤を、無菌健全性を保ちながら溶液の添加及び吸引が可能なクロージャを備えた密封滅菌容器に収容してなる多用量キットであって、１個の多用量キットから４〜３０回分の単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品を得ることができるように処方されたキット。
【請求項６】
前記容器が２０〜４０ｃｍ３のセプタム封止バイアルである、請求項５記載の多用量キット。
【請求項７】
複数回分の用量の放射性医薬品９９ｍＴｃ−テトロフォスミンの調製方法であって、
（ｉ）請求項５又は請求項６記載の多用量キットを、９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成するか、或いは最初に生体適合性担体で次いで９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の滅菌溶液で再構成し、
（ｉｉ）適宜、段階（ｉ）を抗菌保存剤の存在下で実施し、
（ｉｉｉ）９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体を形成させて、所望の９９ｍＴｃテトロフォスミン放射性医薬品のバルク供給原料を含む溶液を得、
（ｉｖ）適宜、９９ｍＴｃテトロフォスミン錯体のバルク供給原料の放射化学純度を確認し、
（ｖ）段階（ｉｉｉ）のバルク供給原料から単位用量を適当なシリンジ又は容器内に吸引し、
（ｖｉ）後で追加の単位用量を得るために追加のシリンジ又は容器で段階（ｖ）を繰り返す
ことを含んでなる方法。
【請求項８】
段階（ｉ）で用いる９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩の放射能含有量が５〜１００ＧＢｑである、請求項７記載の方法。
【請求項９】
（ｉ）生体適合性担体中のテトロフォスミンの９９ｍＴｃ錯体、
（ｉｉ）アスコルビン酸又はその生体適合性陽イオンとの塩から選択される濃度０．５〜６．０ｍＭの放射線防護剤
を含んでなる安定化放射性医薬組成物であって、抗菌保存剤を含まない安定化放射性医薬組成物。
【請求項１０】
放射線防護剤の濃度が１．４〜５．５ｍＭである、請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
放射線防護剤がアスコルビン酸である、請求項９又は請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
放射線防護剤がアスコルビン酸ナトリウムである、請求項９又は請求項１０記載の組成物。
【請求項１３】
生体適合性担体が生理食塩水を含む、請求項９乃至請求項１２のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１４】
９９ｍＴｃの放射能含有量が１５０〜８５０ＭＢｑである、請求項９乃至請求項１３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１５】
請求項９乃至請求項１４記載の組成物を臨床グレードの容器又はシリンジ内に収容してなる単位用量の９９ｍＴｃ−テトロフォスミン放射性医薬品であって、当該医薬品の９９ｍＴｃ放射能含有量が１人の患者のイメージングに適したものである、放射性医薬品。
【請求項１６】
オペレータを放射線量から保護するためのシリンジシールドを有するシリンジに収容して供給される、請求項１５記載の放射性医薬品。
【図１】
【図２】
【図２】
【公表番号】特表２００８−５２４１７８（Ｐ２００８−５２４１７８Ａ）
【公表日】平成２０年７月１０日（２００８．７．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５４６１５４（Ｐ２００７−５４６１５４）
【出願日】平成１７年１０月１４日（２００５．１０．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００５／００３９７５
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０６４１７５
【国際公開日】平成１８年６月２２日（２００６．６．２２）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年７月１０日（２００８．７．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１０月１４日（２００５．１０．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００５／００３９７５
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０６４１７５
【国際公開日】平成１８年６月２２日（２００６．６．２２）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
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